DE3217547C2

DE3217547C2 -

Info

Publication number: DE3217547C2
Application number: DE3217547A
Authority: DE
Inventors: Hamao Umezawa; Tomio Tokio/Tokyo Jp Takeuchi; Shinichi Yokohama Jp Kondo; Hironobu Iinuma; Daishiro Tokio/Tokyo Jp Ikeda; Teruya Kusatsu Jp Nakamura; Akio Kamakura Jp Fujii
Original assignee: Microbial Chemistry Research Foundation
Current assignee: Microbial Chemistry Research Foundation
Priority date: 1981-05-11
Filing date: 1982-05-10
Publication date: 1992-07-09
Also published as: CH655499B; FR2505330A1; GB2101123B; CA1182836A; FR2505330B1; DE3217547A1; JPH0140823B2; IT1148169B; JPS57185254A; GB2101123A; US4430346A; IT8248385A0

Description

Die Erfindung betrifft N-[4-(3-Aminopropyl)aminobutyl]-2- [(S)-7-guanidino-3-hydroxyheptanamido]-2-hydroxyethanamid, seine 3-O-Acylderivate und ein Verfahren zu ihrer Herstellung gemäß den Patentansprüchen.

Vor kurzem haben Umezawa et al. gefunden, daß die antibio tische Verbindung BMG162-aF2 karzinostatische Aktivität auf weist und durch Züchtung eines Bakteriums des Genus Bacillus hergestellt werden kann (DE 31 34 353 A1). Die Anmelderin hat das Antibiotikum BMG162-aF2 und seine Derivate eingehend un tersucht und dabei die vorliegende Erfindung gemacht.

N-[4-(3-Aminopropyl)aminobutyl]-2-[(S)-7- guanidino-3-hydroxyheptanamido]-2-hydroxyethanamid wird kurz als GHA-GS bezeichnet.

Beispiele für Alkanoylgruppen mit 1 bis 14 Kohlenstoffato men, die durch R in der allgemeinen Formel (I) dargestellt werden, sind Acetylgruppen, Propionylgruppen, Butyrylgrup pen, Pentanoylgruppen, Hexanoylgruppen, Heptanoylgruppen, Octanoylgruppen, Nonanoylgruppen, Decanoylgruppen, Undeca noylgruppen, Lauroylgruppen und Tetradecanoylgruppen. Diese Gruppen können verzweigt sein.

Die physikalisch-chemischen und biologischen Eigenschaften von typischen erfindungsgemäßen Verbindungen werden im fol genden angegeben.

(I) Physikalisch-chemische Eigenschaften

(1) GHA-GS-Hydrochlorid ist ein farbloses hygroskopi sches Pulver mit keinem genau bestimmbaren Schmelzpunkt. Es zeigt eine optische Drehung von [α] = -1°±2° (C2, Was ser). Die Elementaranalyse stimmt mit der theoretisch be rechneten für C₁₇H₃₇N₇O₄ · 3HCl (C 39,81%, H 7,86%, N 19,12%, Cl 20,73%) überein. Das Proton-NMR, bestimmt in schwerem Wasser, zeigt charakteristische Signale bei δ=1,8-2,3 (CH₂×5), 2,57 (6′′-CH₂), 2,95 (2-CH₂), 3,5-3,8 (NCH₂ ×5), 4,55 (3-CH) und 5,98 (2′-CH). Obgleich die erfin dungsgemäße Verbindung und BMG162-aF2 in der zweidimensio nalen Strukturformel gleich sind, unterscheidet sich die erstere Verbindung offensichtlich hinsichtlich der optischen Drehung von der letzteren Verbindung ([α] = -11°±3°). Man nimmt daher an, daß die erstere ein epimeres Gemisch in der 2-Stellung ist.

(2) Das Hydrochlorid des 3-O-Acetylderivats von GHA-GS (kurz 3-O-Acetyl-GHA-GS) ist ein farbloses hygroskopisches Pulver mit keinem genau bestimmbaren Schmelzpunkt. Es zeigt eine optische Drehung von [α] = +2°±2° (C1, Wasser). Die Elementaranalyse stimmt mit der theoretisch berechne ten für C₁₉H₃₉N₇O₅ · 3HCl · 1,5H₂O (C 39,21%, H 7,79%, N 16,85%, Cl 18,28%) überein. Das Proton-NMR, bestimmt in Deuterome thanol, zeigt charakteristische Signale bei δ=1,4-1,9 (CH₂×5), 2,03 (COCH₃), 2,18 (CH₂), 2,59 (CH₂), 2,9-3,4 (NCH₂×5), 5,22 (CH), 5,51 (CH).

(3) Das Hydrochlorid des 3-O-Propionylderivats von GHA-GS (kurz 3-O-Propionyl-GHA-GS) ist ein farbloses hygro skopisches Pulver mit keinem genau bestimmbaren Schmelz punkt. Es zeigt eine optische Drehung von [α]=+2° ±2° (C1, Wasser). Die Elementaranalyse stimmt mit der theore tisch berechneten für C₂₀H₄₁N₇O₅ · 3HCl · H₂O (C 40,93%, H 7,90%, N 16,71%, Cl 18,21%) überein. Das Proton-NMR, bestimmt in Deuteromethanol, zeigt charakteristische Signale bei δ =1,10 (CH₃), 1,4-1,9 (CH₂×5), 2,21 (CH₂), 2,32 (COCH₂), 2,54 (CH₂), 2,9-3,4 (NCH₂×5), 5,21 (CH), 5,45 (CH).

(4) Das Hydrochlorid des 3-O-Butyrylderivats von GHA-GS (kurz 3-O-Butyryl-GHA-GS) ist ein farbloses Pulver mit kei nem genau bestimmbaren Schmelzpunkt. Es zeigt eine optische Drehung von [α]=+3°±2° (C1, Wasser). Die Elementar analyse stimmt mit der theoretisch berechneten für C₂₁H₄₃N₇O₅ · 3HCl · 1,5H₂O (C 41,34%, H 8,10%, N 16,07%, Cl 17,44%) über ein. Das Proton-NMR, bestimmt in Deuteromethanol, zeigt cha rakteristische Signale bei δ=0,99 (CH₃), 1,4-1,9 (CH₂ ×6), 2,14 (CH₂), 2,29 (CH₂), 2,54 (CH₂), 2,9-3,4 (NCH₂ ×5), 5,24 (CH), 5,48 (CH).

(5) Das Hydrochlorid des 3-O-Isobutyrylderivats von GHA- GS (kurz 3-O-Isobutyryl-GHA-GS) ist ein farbloses Pulver mit keinem genau bestimmbaren Schmelzpunkt. Es zeigt eine opti sche Drehung von [α]=+3°±2° (C1, Wasser). Die Elemen taranalysen stimmt mit der theoretisch berechneten für C₂₁H₄₃N₇O₅ · 3HCl · 1,5H₂O (C 41,35%, H 8,10%, N 16,07%, Cl 17,44%). Das Proton-NMR, bestimmt in Deuteromethanol, zeigt charakteristische Signale bei δ=1,13 (CH₃×2), 1,4- 1,9 (CH₂×5), 2,15 (CH₂), 2,56 (CH₂), 2,59 (CH₂), 2,60 (CH), 2,9-3,4 (NCH₂×5), 5,25 (CH), 5,48 (CH).

(6) Das Hydrochlorid des 3-O-Pentanoylderivats von GHA- GS (kurz 3-O-Pentanoyl-GHA-GS) ist ein farbloses Pulver mit keinem genau bestimmbaren Schmelzpunkt. Es zeigt eine opti sche Drehung von [α]=+1°±2° (C1, Wasser). Die Ele mentaranalyse stimmt mit der theoretisch berechneten für C₂₂H₄₅N₇O₅ · 3HCl · 1,5H₂O (C 42,34%, H 8,24%, N 15, 71%, Cl 17,04%) überein. Das Proton-NMR, bestimmt in Deuterometha nol, zeigt charakteristische Signale bei δ=0,91 (CH₃), 1,2-1,9 (CH₂×7), 2,33 (CH₂), 2,30 (CH₂), 2,55 (CH₂), 2,58 (CH₂) 2,9-3,4 (NCH₂×5), 5,20 (CH), 5,25 (CH), 5,47 (CH).

(7) Das Hydrochlorid des 3-O-Hexanoylderivats von GHA- GS (kurz 3-O-Hexanoyl-GHA-GS) ist ein farbloses Pulver mit keinem genau bestimmbaren Schmelzpunkt. Es zeigt eine opti sche Drehung von [α]=+4°±2° (C1, Wasser). Die Ele mentaranalyse stimmt mit der für C₂₃H₄₇N₇O₅ · 3HCl · 1,5H₂O (C 43,29%, H 8,37%, N 15,37%, Cl 16,67%) überein. Das Pro ton-NMR, bestimmt in Deuteromethanol, zeigt charakteristische Signale bei δ =0,91 (CH₃), 1,1-2,0 (CH₂×8), 2,26 (CH₂), 2,33 (CH₂), 2,58 (CH₂), 2,63 (CH₂), 2,9-3,4 (NCH₂ ×5), 5,20 (CH), 5,30 (CH).

(8) Das Hydrochlorid des 3-O-Octanoylderivates von GHA-GS (kurz 3-O-Octanoyl-GHA-GS) ist ein farbloses Pulver mit kei nem genau bestimmbaren Schmelzpunkt. Es zeigt eine optische Drehung von [α]=+3°±2° (C1, Wasser). Die Elementar analyse stimmt der theoretisch berchneten für C₂₅H₅₁N₇O₅ · 3HCl · 1,5H₂O (C 45,08%, H 8,63%, N 14,72%, Cl 15,97%) über ein. Das Proton-NMR, bestimmt in Deuteromethanol, zeigt cha rakteristische Signale bei δ=0,89 (CH₃), 1,1-2,0 (CH₂ ×10), 2,22 (CH₂), 2,32 (CH₂), 2,66 (CH₂), 2,9-3,4 (NCH₂ ×5), 5,23 (CH), 5,49 (CH).

(9) Das Hydrochlorid des 3-O-Decanoylderivats von GHA- GS (kurz 3-O-Decanoyl-GHA-GS) ist ein farbloses Pulver mit keinem genau bestimmbaren Schmelzpunkt. Es zeigt eine opti sche Drehung von [α]=+3°±2° (C1, Wasser). Die Ele mentaranalyse stimmt mit der theoretisch berechneten für C₂₇H₅₅N₇O₅ · 3HCl · 1,5H₂O (C 46,72%, H 8,86%, N 14,12%, Cl 15,32%) überein. Das Proton-NMR, bestimmt in Deuterometha nol, zeigt charakteristische Signale bei δ=0,89 (CH₃), 1,1 -2,0 (CH₂×12), 2,26 (CH₂), 2,31 (CH₂), 2,59 (CH₂), 2,9 -3,4 (NCH₂×5), 5,24 (CH), 5,50 (CH).

(10) Das Hydrochlorid des 3-O-Tetradecanoylderivats von GHA-GS (kurz 3-O-Tetradecanoyl-GHA-GS) ist ein farbloses Pulver mit keinem genau bestimmbaren Schmelzpunkt. Es zeigt eine optische Drehung von [α]=+4°±2° (C1, Wasser). Die Elementaranalyse stimmt mit der theoretisch berechneten für C₃₁H₆₃N₇O₅ · 3HCl · 1,5H₂O (C 49,63%, H 9,27%, N 13,07%, Cl 14,18%). Das Proton-NMR, bestimmt in Deuteromethanol, zeigt charakteristische Signale bei δ=0,89 (CH₃), 1,2-2,1 (CH₂×16), 2,1-2,4 (CH₂×2), 2,56 (CH₂), 2,9-3,4 (NCH₂ ×5), 5,25 (CH), 5,50 (CH).

(11) Das Hydrochlorid des 3-O-Benzoylderivats von GHA-GS (kurz 3-O-Benzoyl-GHA-GS) ist ein farbloses Pulver mit kei nem genau bestimmbaren Schmelzpunkt. Es zeigt eine optische Drehung von [α]=-5°±2° (C1, Wasser). Die Elementar analyse stimmt mit der theoretisch berechneten für C₂₄H₄₁N₇O₅ · 3HCl · 1,5H₂O (C 44,76%, H 7,36%, N 15,22%, Cl 16,51%) über ein. Das Proton-NMR zeigt charakteristische Signale bei δ =1,4-1,9 (CH₂×5), 2,16 (CH₂), 2,72 (CH₂), 2,9-3,4 (NCH₂×5), 5,37 (CH), 5,52 (CH), 7,3-8,2 (COC₆H₅).

(II) Biologische Eigenschaften

Die karzinostatischen bzw. krebshemmenden Aktivitäten von GHA-GS und seinen 3-O-Acylderivaten (alle in Form des Hydro chlorids) gegenüber Mäuseleukämie L1210 sind in der folgenden Tabelle aufgeführt. Die angegebenen Werte zeigen eine ausgeprägte Wirkung bei der Verlängerung der Überlebenszeit. Bei dem Versuch wurde eine Gruppe von fünf männlichen Mäu sen BDF-Stamm (6 Wochen alt) intraperitoneal mit 10⁵ L1210- Zellen inokuliert, und unmittelbar danach wurde jeder Maus intraperitoneal eine physiologische Salzlösung der Probe einmal täglich während 6 aufeinanderfolgenden Tagen verab reicht, um die Verlängerungsrate der Überlebenszeit ent sprechend den folgenden Gleichungen zu bestimmen:

Verlängerungsrate der Überlebenszeit = (T/C) × 100

T/C = (mittlere Überlebenszeit der behandelten Gruppe)/ (mittlere Überlebenszeit der nicht behandelten Gruppe).

Da die Toxizität von GHA-GA oder irgendeines seiner 3-O- Acylderivate vergleichsweise niedrig ist, können diese Ver bindungen als wirksame Antikrebsmittel verwendet werden. Insbesondere sind GHA-GS und 3-O-(C_2-4)Acylderivate davon hochwirksam. Die prozentuale Lebensverlängerung ist sehr hoch, und die Anzahl der Mäuse, die 30 Tage überlebte, ist sehr groß. Da das erfindungsgemäße GHA-GS und seine 3-O- Acylderivate in Form der freien Base instabil sind, ist es bevorzugt, sie in die Form irgendwelcher nicht toxischen Säureadditionssalze in an sich bekannter Weise zu überfüh ren, indem man eine pharmakologisch annehmbare Säure hinzu gibt. Die Säuren, die zugegeben werden können, sind anorga nische Säuren, wie Chlorwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure und Borsäure, und organische Säuren, wie Es sigsäure, Zitronensäure, Weinsäure und Glutarsäure. Von die sen Säuren sind Chlorwasserstoffsäure, Schwefelsäure und Weinsäure besonders bevorzugt.

Erfindungsgemäß werden GHA-GS oder seine 3-O-Acylderivate, die durch die allgemeine Formel (I)

dargestellt werden, worin R ein Wasserstoffatom, eine Alka noylgruppe mit 1 bis 14 Kohlenstoffatomen oder eine Benzoyl gruppe bedeutet, hergestellt, indem man eine Verbindung der allgemienen Formel (II)

worin R die oben angegebene Definition besitzt, oder eines ihrer Säureadditionssalze mit einer Verbindung der Formel (III)

oder einem ihrer Säureadditionssalze in Gegenwart von 0,5 bis 10 Mol einer anorganischen oder organischen Säure, be zogen auf die Verbindung der allgemeinen Formel (II), bei einer Temperatur von 30 bis 70°C kondensiert, und die er haltene Verbindung gegebenenfalls in deren Säureadditions salz überführt.

Die Kondensation der Verbindung der Formel (II) mit einer Verbindung der Formel (III) kann ablaufen, ohne daß die ak tiven Gruppen, die in den Reaktionsteilnehmern vorhanden sind (wie eine Guanidinogruppe, eine Aminogruppe und eine Hydroxylgruppe, mit spezifischen Schutzgruppen geschützt werden. Da die Kondensation eine Reaktion ist, bei der Was ser freigesetzt wird, ist es im allgemeinen bevorzugt, die Reaktion in einem wasserfreien Lösungsmittel ablaufen zu lassen. Wegen der Löslichkeit der Reaktionsteilnehmer, Ver bindungen der Formeln (II) und (III), ist es ebenfalls mög lich, die Reaktion in Anwesenheit einer geringen Mengen an Wasser zusätzlich zu dem sauren Katalysator ablaufen zu las sen. Geeignete anorganische Säuren sind Chlorwasserstoffsäure, Schwefelsäure und Borsäure, und geeignete organische Säuren sind Essigsäure, Zitronensäure, Weinsäure, Bernsteinsäure, Glutarsäure und Adipinsäure. Es ist bevor zugt, eine Dicarbonsäure, wie Glutarsäure, zu verwenden. Die Menge an Säure, die verwendet wird, beträgt vor zugsweise 0,5 bis 4,0 Mol pro Mol der Verbindung der For mel (II). Die Menge an Wasser, die zugegeben wird, sollte die geringstmögliche Menge sein, die ausreicht, die Verbin dungen der Formeln (II) und (III) und die Säure zu lösen und um das Reaktionsgemisch rühren zu können. Wasser wird im allgemeinen in einer Menge von 4 bis 40 Mol pro Mol der Ver bindungen der Formel (II) verwendet. Die Reaktionstemperatur beträgt bevorzugt 40 bis 60°C. Die Reaktions zeit hängt von der Reaktionstemperatur ab, beträgt jedoch be vorzugt 1 bis 2 Tage wegen der Ausbeute.

Bei der Synthese von 3-O-Acyl-GHA-GS wird eins der Ausgangs materialien (S)-7-Guanidino-3-acyloxyheptanamid, welches durch die allgemeine Formel (II′)

dargestellt ist, worin R′ eine Alkanoylgruppe mit 1 bis 14 Kohlenstoffatomen oder eine Benzoylgruppe bedeutet, durch direkte Acylierung der Hydroxylgruppe von (S)-7-Guani dino-3-hydroxyheptanamid der Formel (II), worin R ein Was serstoffatom bedeutet, hergestellt. Die Acylierung erfolgt in wasserfreiem Pyridin oder einem Gemisch aus wasserfreiem Pyridin und wasserfreiem Dimethylformamid unter Verwendung eines Säurechlorids oder eines Säureanhydrids bei einer Reaktionstemperatur von 0 bis 80°C.

Das (S)-7-Guanidino-3-hydroxyheptanamid der Formel (II′′)

welches gleich ist wie das der Formel (II), wenn R ein Was serstoffatom bedeutet, wird aus L-Lysin durch Umwandlung in (S)-3,7-Diaminoheptansäure nach einem Verfahren der Arndt- Eistert-Synthese [Journal of Organic Chemistry, Band 17, 347 (1952)], Abspaltung der β-Aminogruppe mit Salpetersäu re und Umwandlung der Carboxylgruppe in das Amid und Umwand lung der Aminogruppe in die Guanidinogruppe hergestellt. Das ganze Verfahren wird im folgenden näher erläutert.

Die beiden Aminogruppen von L-Lysin der Formel (IV)

werden mit Aminoschutzgruppen unter Bildung eines Derivats, welches geschützte Aminogruppen aufweist, der Formel (V)

geschützt, worin A ein Wasserstoffatom und B eine einwerti ge Aminoschutzgruppe bedeuten oder alternativ A und B ge meinsam eine zweiwertige Aminoschutzgruppe bedeuten. Für den Schutz der Aminogruppe werden solche Aminoschutzgruppen, wie sie normalerweise in der Peptidsynthese verwendet werden, eingesetzt. Es ist jedoch bevorzugt, eine Phthaloylgruppe als zweiwertige Aminoschutzgruppe zu verwenden. Die Einfüh rung einer Phthaloylgruppe in die beiden Aminogruppen von L-Lysin erfolgt in üblicher Weise durch Umsetzung mit einem Überschuß an N-Ethoxycarbonylphthalimid in einer wäßrigen Lösung.

Die Carboxylgruppe des aminogeschützten Derivats (geschützt mit Phthaloylgruppen im vorliegenden Fall) wird in das Acyl chlorid unter Bildung einer Verbindung der Formel (VI)

worin R₁ -COCl bedeutet, umgewandelt. Diese Umwandlung er folgt in an sich bekannter Weise unter Verwendung von Thio nylchlorid oder Oxalylchlorid. Die obige Phthaloylverbin dung der Formel (VI) wird dann in Ether mit Diazomethan zur Einführung der Diazomethylgruppe behandelt, wobei man die Verbindung der Formel (VI) erhält, worin R₁ -COCHN₂ bedeu tet. Diese Verbindung wird dann in Methanol bei Zimmertem peratur mit Silberbenzoat als Katalysator unter Bildung eines nächsthöheren homologen Säurederivats behandelt, wobei das Derivat um eine Kohlenstoffkette verlängert ist [ein Ester der Formel (VI), worin R₁ -CO₂COOCH₃ bedeutet] (Arndt-Eistert-Synthese). Aus dieser Verbindung werden dann die Aminoschutzgruppe und die Carboxylschutzgruppe entfernt, wobei man (S)-3,7-Diaminoheptansäure der Formel (VII)

erhält.

Die Aminogruppe in der 7-Stellung der (S)-3,7-Diaminoheptan säure, die oben erhalten worden ist, wird dann mit einer Aminoschutzgruppe unter Bildung einer aminogeschützten Ver bindung der Formel (VIII)

geschützt, worin A ein Wasserstoffatom und B eine einwerti ge Aminoschutzgruppe oder alternativ A und B geminsam eine zweiwertige Aminoschutzgruppe bedeuten.

Für den Schutz der Aminogruppen werden solche Aminoschutz gruppen, die üblicherweise in der Peptidsynthese verwendet werden, wie oben beschrieben eingesetzt. Bei der vorliegen den Erfindung ist es zweckdienlich, eine Benzyloxycarbonyl gruppe oder tert.-Butoxycarbonylgruppe, die anschließend leicht entfernt werden können, zu verwenden. Da die Reakti vität der primären Aminogruppe in der 7-Stellung höher ist als die der sekundären Aminogruppe in der 3-Stellung , ist es möglich, bevorzugt eine Verbindung zu erhalten, deren Aminogruppe in der 7-Stellung geschützt ist, wenn die Menge an Acylierungsmittel, die für den Schutz verwendet wird, auf ein Äquivalent beschränkt wird. Bevorzugte Acylierungs mittel sind ein Säureazid und ein reaktiver Ester, die an sich bekannte Verbindungen sind.

Die Aminogruppe in der 3-Stellung wird dann deaminiert, wo bei ein 3-Hydroxylderivat der Formel (IX)

erhalten wird, worin A und B die oben angegebenen Definitio nen besitzen und R -OH bedeutet. Die Aminogruppenabspaltung oder Deaminierung erfolgt in an sich bekannter Weise in wäß riger Essigsäurelösung unter Verwendung eines Nitrils, wo bei man ein 3-Hydroxyderivat mit gleicher sterischer Anord nung erhält. Das 3-Hydroxyderivat wird dann in Ether mit Di azomethan behandelt, um es in seinen Methylester der Formel (IX), worin R -OCH₃ bedeutet, zu überführen. Der Methyl ester wird dann in ein Amid der Formel (IX) überführt, worin R -NH₂ bedeutet. Die Aminoschutzgruppe wird dann entfernt, wobei man (S)-7-Amino-3-hydroxyheptanamid der Formel (X)

erhält.

Die Aminogruppe in der 7-Stellung des obigen wird dann in eine Guanidinogruppe unter Herstellung von (S)-7-Guanidino hydroxyheptanamid der Formel (II′′)

überführt.

Die Umwandlung der Aminogruppe in der 7-Stellung in die Guanidinogruppe erfolgt durch Umsetzung mit einem Äquivalent 2-Methyl-1-nitroisoharnstoff oder S-Methylthioharnstoff in einer alkalischen wäßrigen Lösung. Wenn beispielsweise die erstere Verbindung verwendet wird, kann die Nitrogruppe, die die Guanidingruppe schützt, nach an sich bekannter Hydroge nolyse unter Verwendung eines Palladium- oder Platinkataly sators leicht abgespalten werde.

Ein weiteres Reagenz für die Synthese der erfindungsgemäßen karzinostatischen Verbindung, d. h. N-[4-(3-Aminopropyl)- aminobutyl]-2,2-dihydroxyethanamid der Formel (III)

wird aus dem Ausgangsmaterial der Formel (XI)

worin R₂ eine Aminoschutzgruppe bedeutet, durch Acylierung der freien Aminogruppe mit einem Dialkylacetal [Formel (XII)], welches Glyoxylsäure ist, die eine geschützte Alde hydgruppe aufweist,

worin R₃ eine Alkylgruppe mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen be deutet, oder einem seiner reaktiven Derivate und dann Ent fernung der Aminoschutzgruppe und der Aldehydschutzgruppe gebildet. Das ganze Verfahren wird im folgenden näher er läutert.

Die Ausgangsverbindung der Formel (XI) wird hergestellt durch Kondensation in an sich bekannter Weise eines mono aminogeschützten 1,4-Butandiamins der Formel (XIII)

R₄HN(CH₂)₄NH₂ (XIII)

worin R₄ eine Aminoschutzgruppe bedeutet, die sich von der oben genannten Gruppe R₂ unterscheidet, mit einem aminoge schützten 3-Halopropanamin der Formel (XIV)

X(CH₂)₃NHR₂ (XIV)

worin R₂ die gleiche Aminoschutzgruppe wie oben bedeutet und X ein Halogenatom bedeutet, wobei eine Verbindung der For mel (XV)

R₄HN(CH₂)₄NH(CH₂)₃NHR₂ (XV)

erhalten wird, worin R₂ und R₄ Aminoschutzgruppen bedeuten, die sich voneinander unterscheiden, dann Schützen der ver bleibenden Iminogruppe mit der gleichen Aminoschutzgruppe wie bei R₂ und selektivem Entfernen der anderen Aminoschutz gruppe R₄, wobei eine Verbindung der obigen Formel (XI) er halten wird.

Alternativ kann die Verbindung der Formel (XV) durch Kon densation eines monoaminogeschützten 1,3-Propandiamins der Formel (XVI)

R₂NH · (CH₂)₃NH₂ (XVI)

worin R₂ die oben angegebene Definition besitzt, mit einem aminogeschützten 4-Halobutanamin der Formel (XVII)

X(CH₂)₄NHR₄ (XVII)

worin R₄ und X die oben angegebenen Definitionen besitzen, auf ähnliche Weise, wie oben beschrieben, erhalten werden.

Bei den obigen Syntheseverfahren zum Schutz der Aminogrup pen können solche Aminoschutzgruppen, die normalerweise in der Peptidsynthese verwendet werden, eingesetzt werden. Je doch sollte die Aminoschutzgruppe von R₄ selektiv entfern bar sein, wobei die Aminoschutzgruppe von R₂ zurückbleibt. Dementsprechend ist die Kombination der Benzyloxycarbonyl gruppe, die durch Hydrogenolyse entfernbar ist, und einer tert.-Butoxycarbonylgruppe, die durch Behandlung mit schwa cher Säure entfernbar ist, ein besonders bevorzugtes Bei spiel. Eine Verbindung von diesem Paar kann R₂ oder R₄ sein.

Die Kondensation einer Verbindung der Formel (XIII) mit ei ner Verbindung der Formel (XIV) oder die Kondensation einer Verbindung der Formel (XVI) mit einer Verbindung der Formel (XVII) erfolgt leicht in einem wasserfreien Lösungsmittel, wie Dimethylformamid, bei Zinmmertemperatur in Anwesenheit von Triethylamin. Das Halogen in der Verbindung der Formeln (XIV) und (XVII) ist vorzugsweise Brom. Das Dialkylacetal der Glyoxylsäure der Formel (XII)

wird leicht durch Umsetzung von Glyoxylsäure mit einem Alkanol unter Verwendung eines sauren Katalysators in an sich bekannter Weise hergestellt. Es wird weiterhin auf geeignete Weise durch alkalische Hydrolyse von im Handel erhältlichen Ethyl- 2,2-diethoxyacetat hergestellt.

Die Acylierung der Aminogruppe der Verbindung der Formel (XI) mit einer Verbindung der Formel (XII) erfolgt gemäß dem Verfahren, welches man zur Herstellung einer üblichen Amid bindung verwendet, indem man beispielsweise ein Acylhaloge nid, Säureazid, einen aktiven Ester oder ein Säureanhydrid einsetzt. Die Entfernung der Aminoschutzgruppe und Aldehyd schutzgruppe des Kondensats erfolgt im allgemeinen durch Hydrolyse mit einer schwachen Säure. Wenn beispielsweise die Aminoschutzgruppe eine tert.-Butoxycarbonylgruppe und die Aldehydschutzgruppe Diethylacetal ist, wird das Konden sat in einer wäßrigen Dioxanlösung durch Zugabe von 2 bis 3 Äquivalenten verdünnter Chlorwasserstoffsäure und Erhitzen bei 100°C während 2 bis 5 Stunden unter Bildung des Hydro chlorids von N-[4-(3-Aminopropyl)aminobutyl]-2,2-dihydro xyethanamid der Formel (III) hydrolysiert. Wenn die Amino schutzgruppe eine Benzyloxycarbonylgruppe ist, wird vor zugsweise die Hydrogenolyse mit Palladium- oder Platinoxid angewendet.

Die folgenden Beispiele und Bezugsbeispiele erläutern die Erfindung.

Bezugsbeispiel 1 Synthese von (S)-7-Guanidino-3-hydroxyheptanamid a) Synthese von (S)-3,7-Diaminoheptansäure

In 150 ml Wasser löst man 15 g (82,15 mMol) L-Lysinhydrochlo rid und gibt anschließend 8,7 g (82,15 mMol) Natriumcarbonat und 43,2 g (200 mMol) N-Ethoxycarbonylphthalimid zu. Das Ge misch wird 20 Stunden bei Zimmertemperatur gerührt, und das Reaktionsgemisch wird mit 50 ml Ethylacetat gewaschen. Der pH-Wert der wäßrigen Schicht wird mit 6N-Chlorwasserstoff säure auf 3,0 eingestellt, und es wird dreimal mit 100 ml Toluol extrahiert. Der Extrakt wird zweimal mit 100 ml Was ser, dessen pH-Wert auf 2,0 eingestellt ist, gewaschen. Über wasserfreiem Natriumsulfat wird getrocknet und bei verringertem Druck zur Trockene eingedampft. Man erhält 27,95 g (84% Ausbeute) eines weißen Pulvers aus di-N-Phtha loyl-L-lysin. Zersetzungspunkt 71-72°C; [α]-32° (C1, Methanol).

Zu 27,0 g (66,4 mMol) di-N-Phthaloyl-L-lysin werden 40 ml Oxalylchlorid zugegeben. Zu dem in einem Ölbad bei 90°C er hitzten Gemisch gibt man 40 ml 1,2-Dimethoxyethan zu. Das Gemisch wird 2 Stunden am Rückfluß weiter erhitzt. Das Re aktionsgemisch wird zur Trockene eingedampft, erneut in 20 ml 1,2-Dimethoxyethan gelöst und tropfenweise zu 500 ml ei ner Etherlösung aus Diazomethan (330 mMol) unter Eiskühlung gegeben. Das Gemisch wird eine weitere Stunde gerührt. Das Reaktionsgemisch wird zur Trockene eingedampft, in 250 ml wasserfreiem Methanol gelöst, mit einer Lösung aus 3,4 g (14,8 mMol) Silberbenzoat in 50 ml Triethylamin vermischt und 15 Stunden bei Zimmertemperatur gerührt. Der Nieder schlag wird abfiltriert, in 100 ml Chloroform gelöst, das unlösliche Material wird abfiltriert, und das Filtrat wird zur Trockene eingedampft. Man erhält 15,3 g (53% Ausbeute) Methyl-(S)-3,7-diphthaloylaminoheptanoat. Zersetzungspunkt 118-119°C; [α]-3° (C2, Chloroform).

Zu 15,0 g (34,5 mMol) Methyl-(S)-3,7-diphthaloylaminohepta noat gibt man 100 ml eines 1M-Alkoholhydrazinhydrats und 100 ml 95%iges Ethanol. Das Gemisch wird eine Stunde am Rückfluß erhitzt (bei einer Ölbadtemperatur von 90°C). Das Reaktionsgemisch wird zur Trockene eingedampft, in 250 ml 5%iger Chlorwasserstoffsäure gelöst, während einer Stunde bei 80° erhitzt, der pH-Wert wird mit 17%igem wäßrigem Ammoniak auf 7,1 eingestellt, und das Reaktionsgemisch wird durch eine Säule (27 mm innerer Durchmesser), die mit 300 ml Amberlite ®CG-50 (70% NH₄-Typ) gefüllt ist, gelei tet. Die Säule wird mit je 900 ml Wasser und 0,2 M wäßrigem Ammoniak gewaschen und mit 0,5 M wäßrigem Ammoniak eluiert. Die Fraktionen, die gegenüber dem Ninhydrintest positiv sind, werden gesammelt und zur Trockene eingedampft. Man erhält 3,15 g (57% Ausbeute) (S)-3,7-Diaminoheptansäure (C₇H₁₆N₂O₂ · 1/4 H₂CO₃). [α]+29° (C1, Wasser).

b) Synthese von (S)-7-Guanidino-3-hydroxyheptanamid

In 30 ml eines Pyridin-Wasser-Triethylamin-Gemisches (10 : 10 : 1, ausgedrückt durch das Volumen) löst man 3,1 g (19,3 mMol) (S)-3,7-Diaminoheptansäure, die man gemäß (a) oben erhalten hat. Zu der entstehenden Lösung gibt man allmählich 4,81 g (19,3 mMol) N-Benzyloxycarbonyloxysuccinimid. Das Gemisch wird bei Zimmertemperatur während 5 Stunden ge rührt. Das Reaktionsgemisch wird zur Trockene eingedampft, in 30 ml Wasser gelöst. Der pH-Wert wird mit 6N Chlorwasser stoffsäure auf 6,4 eingestellt. Dann wird das Reaktionsge misch durch eine Säule (16 mm innerer Durchmesser), die mit 100 ml Amberlite ®CG-50 (80% NH₄-Typ) gepackt ist, gelei tet und mit 300 ml Wasser entwickelt. Das abströmende Mate rial wird gesammelt und durch eine Säule (16 mm innerer Durchmesser), die mit 100 ml Dowex ®50W-X4 (H-Typ) gepackt ist, geleitet. Die Säule wird mit je 300 ml Wasser und 0,2M wäßrigem Ammoniak gewaschen und mit 0,5M wäßrigem Ammoniak (10-ml-Fraktionen) eluiert. Die Fraktionen Nr. 16 bis 33 werden gesammelt und vereinigt und zur Trockene eingedampft, und man erhält 2,73 g (48% Ausbeute) eines weißen Pulvers aus (S)-3-Amino-7-benzyloxycarbonylaminoheptansäure (C₁₅H₂₂ N₂O₄ · H₂O). Zersetzungspunkt 143-147°C; [α]+14° (C1, Methanol). Die obige Säule aus Amberlite ®CG-50 wird mit 0,5M wäßrigem Ammoniak eluiiert, und man erhält 746 mg (24% Ausbeute) (S)-3,7-Diaminoheptansäure.

In 50 ml einer 33%igen wäßrigen Essigsäurelösung löst man 2,7 g (9,17 mMol) (S)-3-Amino-7-benzyloxycarbonylaminohep tansäure. Zu der Lösung gibt man unter Eiskühlung langsam im Verlauf von einer Stunde eine Lösung aus 1,9 g (27,51 mMol) Natriumnitrit in 10 ml Wasser. Das Gemisch wird eine Stunde gerührt und 24 Stunden bei 5°C stehengelassen. Das Reaktionsgemisch wird mit 50 ml Wasser verdünnt und zweimal mit 50 ml Ethylacetat extrahiert. Der Extrakt wird über was serfreiem Natriumsulfat getrocknet und zur Trockene einge dampft. Man erhält 2,16 g eines rohen Pulvers. Das rohe Pul ver wird der Säulenchromatographie unter Verwendung einer Säule (28 mm innerer Durchmesser), die mit 200 g Silicagel (Wako-gel®C-200) gepackt ist, unterworfen, und ein Chloro form-Methanol-konz.Ammonaik-Gemisch (30 : 10 : 1, ausgedrückt durch das Volumen) wird als Entwicklungslösungsmittel ver wendet. Die Fraktionen Nr. 51 bis 60 (je 20 ml im Volumen) werden vereinigt und zur Trockene eingedampft. Man erhält 460 mg (17% Ausbeute) eines weißen Pulvers aus (S)-7-Benzyl- oxycarbonylamino-3-hydroxyheptansäure. Zersetzungspunkt 115- 117°C; [α]+3° (C2, Methanol).

In 4 ml 1,2-Dimethoxyethan löst man 450 mg (1,52 mMol) (S)- 7-Benzyloxycarbonylamino-3-hydroxyheptansäure. Zu der Lösung gibt man unter Eiskühlung tropfenweise 7 ml (4,56 mMol) einer Etherlösung von Diazomethan. Das Gemisch wird 30 Minuten gerührt und dann zur Trockene eingedampft, und man erhält 461 mg (98% Ausbeute) Methyl-(S)-7-benzyloxycarbonylamino- 3-hydroxyheptanoat. [α]+1° (C5, Methanol).

In 50 ml wasserfreiem Methanol löst man 450 mg (1,45 mMol) Methyl-(S)-7-benzyloxycarbonylamino-3-hydroxyheptanoat. Die Lösung wird unter Kühlen auf -10°C mit gasförmigem Ammoniak gesättigt und in einem versiegelten Rohr 3 Tage bei Zimmer temperatur stehen gelassen. Das Reaktionsgemisch wird zur Trockene eingedampft und der Chromatographie unter Verwen dung einer Säule (20 mm innerer Durchmesser), die mit 50 g Silicagel (Wako Gel ®C-200) gepackt ist, geleitet. Ein Chloroform-Methanol-Gemisch (100 : 1, ausgedrückt durch das Volumen) wird als Entwicklungslösungsmittel verwendet. Die Fraktionen 82 bis 106 (je 10 ml im Volumen) werden verei nigt und zur Trockene eingedampft. Man erhält 371 mg (87% Ausbeute) eines weißen Pulvers aus (S)-7-Benzyloxycarbo nylamino-3-hydroxyheptanamid. Zersetzungspunkt 126-127°C; [α]-3° (C5, Methanol).

In einem Gemisch aus 10 ml 90%igem wäßrigen Methanol und 0,01 ml Essigsäure löst man 350 mg (1,19 mMol) (S)-7-Benzyl oxycarbonylamino-3-hydroxyheptanamid. Nach der Zugabe von 50 mg 5%igem Palladiumkohlenstoffs wird das Gemisch unter einem Wasserstoffstrom während 3 Stunden bei Zimmertemperatur gerührt. Nach Entfernung des Katalysators durch Filtra tion wird das Filtrat zur Trockene eingedampft und dann er neut in einem geringen Wasservolumen gelöst und durch eine Säule (12 mm innerer Durchmesser), die mit 30 ml Dowex® 50W-X4 (H-Typ) gepackt ist, geleitet. Die Säule wird dann mit 90 ml Wasser gewaschen und mit 0,5 M wäßrigem Ammoniak eluiert. Die Fraktionen Nr. 28 bis 34 (je 3 ml im Volumen) werden vereinigt und zur Trockene eingedampft, und man er hält 201 mg (96% Ausbeute) von (S)-7-Amino-hydroxyheptan amid. [α]-2° (C2, Wasser).

In 3 ml Wasser löst man 190 mg (1,08 mMol) (S)-7-Amino-3- hydroxyheptanamid, und anschließend gibt man 0,54 ml 2N wäßrige Natriumhydroxidlösung zu. Zu der Lösung gibt man unter Eiskühlung im Verlauf von 30 Minuten tropfenweise 1 ml Methanollösung, die 129 mg (1,08 mMol) 2-Methyl-1-nitro harnstoff enthält. Das Gemisch wird weitere 5 Stunden ge rührt. Der pH-Wert des Reaktionsgemisches wird auf 6,0 mit 6N Chlorwasserstoffsäure eingestellt, und dann wird zur Trockene eingedampft und chromatographisch unter Verwendung einer Säule (15 mm innerer Durchmesser), die mit 30 g Sili cagel (Wako Gel ®C-200) gepackt ist, gereinigt. Als Ent wicklungslösungsmittel wird ein Gemisch aus Chloroform-Me thanol-konz.-wäßr.-Ammoniak (60 : 10 : 1, ausgedrückt durch das Volumen) verwendet. Die Fraktionen Nr. 67 bis 90 (je 6 ml im Volumen) werden vereinigt und zur Trockene eingedampft. Man erhält 187 mg (70% Ausbeute) eines weißen Pulvers aus (S)-7-Nitroguanidino-3-hydroxyheptanamid. Zersetzungspunkt 148-149°C; [α]-2° (C2, Methanol).

In einem Gemisch aus 15 ml Wasser, 15 ml Methanol und 7,5 ml Essigsäure löst man 170 mg (0,69 mMol) (S)-7-Nitroguani dino-3-hydroxyheptanamid. Nach Zugabe von 50 mg 5%igem Palladiumkohlenstoff wird das Gemisch unter einem Wasser stoffstrom während einer Stunde bei Zimmertemperatur ge rührt. Nach Entfernung des Katalysators durch Filtration wird das Filtrat zur Trockene eingedampft, und man erhält 165 mg eines rohen Pulvers. Dieses Pulver wird in 10 ml Was ser gelöst, durch eine Säule (12 mm innerer Durchmesser), die mit 20 ml CM-Sephadex ®C-25 (Na-Typ) gepackt ist, ge leitet, und dann wird 0,5M Natriumchloridlösung eluiert. Die Fraktionen Nr. 18 bis 25 (je 2 ml im Volumen) werden vereinigt und zur Trockene eingedampft. Die getrocknete Sub stanz wird dreimal mit 10 ml Methanol extrahiert. Die Metha nolextrakte werden vereinigt, durch eine Säule (20 mm inne rer Durchmesser), die mit 100 ml Sephadex ®LH-20 gepackt ist, geleitet und mit Methanol entwickelt. Die Fraktionen Nr. 28 bis 46 (je 1 ml im Volumen) werden vereinigt und zur Trockene eingedampft. Man erhält 149 mg (91% Ausbeute) eines weißen Pulvers von (S)-7-Guanidino-3-hydroxyheptanamidhydro chlorid (C₈H₁₈N₄O₂ · HCl). [α]-2° (C2, Wasser).

Bezugsbeispiel 2 Synthese von N-[4-(3-Aminopropyl)aminobutyl]-2,2-dihydroxy ethanamid a) Synthese von Mono-N-benzyloxycarbonyl-1,4-butandiamin

In 30 ml 50%igem wäßrigen Methanol löst man 1,76 g (20 mMol) 1,4-Butandiamin, und anschließend gibt man 5,48 g (20 mMol) Benzyl-S-4,6-dimethylpyrimido-2-yl-thiocarbonat (hergestellt von Kokusan Kagaku Co.) hinzu. Nach dem Rühren während 3 Stunden wird das Reaktionsgemisch zur Entfernung des Niederschlags filtriert [2,08 g (28%) di-N-Benzyloxy carbonyl-Verbindung werden abgetrennt]. Das Filtrat wird zur Trockene eingedampft, in 250 ml Chloroform gelöst und 5mal mit 100 ml Wasser gewaschen. Die Chloroformschicht wird über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zur Troc kene eingedampft. Man erhält 1,0 g (23% Ausbeute) Mono-N- benzyloxycarbonyl-1,4-butandiamin als farblosen Sirup.

b) Synthese von o-Tosyl-3-tert-butoxycarbonylamino-1-propanol

In 30 ml Methanol löst man 1,5 g (20 mMol) 3-Amino-1-propa nol und gibt anschließend 4,8 g (20 mMol) tert-S-tert-Buto xycarbonyl-4,6-dimethyl-2-mercaptopyridin (ein Produkt von Kokusan Kagaku Co.) hinzu. Nach dem Rühren während 6 Stunden wird das Reaktionsgemisch zur Trockene eingedampft, in 200 ml Chloroform gelöst und mit 200 ml Wasser gewaschen. Die Chloroformschicht wird konzentriert und der Säulenchro matographie unter Verwendung von 300 g Silicagel (Wako Gel ®C-200) unterworfen, wobei ein Toluol-Ethyl-Acetat (1 : 1, aus gedrückt durch das Volumen)-Gemisch als Entwicklungslösungs mittel verwendet wird. Die Fraktionen Nr. 82 bis 151 (je 15 ml im Volumen) werden vereinigt und zur Trockene eingedampft. Man erhält 2,95 g (84% Ausbeute) 3-tert-Butoxycarbonylamino- 1-propanol in Form eines farblosen Öls.

In 50 ml Pyridin löst man 2,95 g (16,9 mMol) 3-tert-Butoxy carbonylamino-1-propanol. Zu der Lösung gibt man unter Eis kühlung unter Argonatmosphäre tropfenweise im Verlauf von 40 Minuten eine Pyridinlösung, die 3,36 g (17,7 mMol) p-To luolsulfonylchlorid enthält. Das Gemisch wird über Nacht bei 7°C stehengelassen, mit einer geringen Menge an Wasser ver mischt und zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wird in 200 ml Chloroform gelöst, nacheinander mit 5%igem wäßrigen Kaliumhydrogensulfatlösung, gesättigter wäßriger Natriumhy drogencarbonatlösung und Wasser gewaschen und dann über was serfreiem Natriumsulfat getrocknet, zur Trockene eingedampft und der Säulenchromatographie unter Verwendung von 120 g Silicagel (Wako Gel ®C-200) und einem Toluol-Ethylacetat (8 : 1, ausgedrückt durch das Volumen)-Gemisch als Entwick lungslösungsmittel unterworfen. Die Fraktionen Nr. 35 bis 68 (je 15 ml im Volumen) werden vereinigt und zur Trockene eingedampft. Man erhält 3,06 g (55% Ausbeute) O-Tosyl-3- tert.-butoxycarbonylamino-1-propanol in Form eines farblosen Öls.

c) Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-N-(tert-butoxycarbo nylaminopropyl)-1,4-butandiamin

In 15 ml Dimethylformamid, löst man 800 mg (2,43 mMol) des gemäß b) oben erhaltenen o-Tosyl-3-tert-butoxycarbonylamino- 1-propanols. Nach Zugabe von 510 mg (4,8 mMol) Lithiumbro mid (LiBr · H₂O) wird das Gemisch bei Zimmertemperatur 24 Stunden lang gerührt. Zu dem Reaktionsgemisch, das das Bromderivat enthält, gibt man 540 mg (2,43 mMol) des in a) oben erhaltenen mono-N-Benzyloxycarbonyl-1,4-butandiamins und 0,34 ml Triethylamin. Das entstehende Gemisch wird bei Zimmertemperatur während 48 Stunden gerührt. Zu dem Reak tionsgemisch gibt man 699 mg (2,9 mMol) S-tert-Butoxycarbo nyl-4,6-dimethyl-2-mercaptopyrimidin. Das Gemisch wird 13 Stunden bei Zimmertemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wird zur Trockene eingedampft, in 100 ml Chloroform gelöst, mit 50 ml Wasser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet, zur Trockene eingedampft und der Säulenchromato graphie unter Verwendung von 200 g Silicagel (Wako Gel ®C-200) und eines Toluol-Ethylacetat-Gemisches (4 : 1, ausge drückt durch das Volumen) als Entwicklungslösungsmittel un terworfen. Die Fraktionen Nr. 134 bis 165 (je 12 ml im Vo lumen) vereinigt und zur Trockene eingedampft, und man er hält 608 mg (52% Ausbeute) N-Benzyloxycarbonyl-N′-tert-bu toxycarbonyl-N′-(tert-butoxycarbonylaminopropyl)-1,4-butan diamin in Form eines farblosen Sirups.

In 5 ml Methanol löst man 144 mg (0,3 mMol) der siruparti gen Substanz, die oben erhalten worden ist. Zu der Lösung gibt man 100 mg 5%iges Palladium-Bariumcarbonat. Das Ge misch wird unter einem Wasserstoffstrom bei Zimmertempera tur 5 Stunden lang gerührt. Der Katalysator wird abfiltriert, und das Filtrat wird zur Trockene eingedampft, und man er hält 103 mg (100% Ausbeute) N-tert-Butoxycarbonyl-N-(tert- butoxycarbonylaminopropyl)-1,4-butandiamin.

d) Synthese von N-[4-(3-Aminopropyl)aminobutyl]-2,2-di hydroxyethanamid

In 2 ml Ethylacetat löst man 100 mg (0,29 mMol) des in c) oben erhaltenen N-tert-Butoxycarbonyl-N-(tert-butoxycarbonyl aminopropyl)-1,4-butandiamins und 148 mg (1 mMol) 2,2-Di- ethoxyessigsäure und gibt anschließend 135 mg (1 mMol) 1- Hydroxybenztriazol und 206 mg (1 mMol) Dicyclohexylcarbodi imid hinzu. Das Gemisch wird 15 Stunden lang bei Zimmertemperatur gerührt. Der Niederschlag wird abfiltriert und mit kaltem Ethylacetat gewaschen. Das Filtrat und die Waschlö sung werden vereinigt und nacheinander mit 1M wäßrigen Am moniak und Wasser gewaschen. Die Ethylacetatschicht wird über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet, zur Trockene eingedampft und der Säulenchromatographie unter Verwendung von 20 g Silicagel (Wako-Gel ®C-200) und Toluol-Ethylacetat (1 : 2, ausgedrückt durch das Volumen)-Gemisch als Entwick lungslösungsmittel unterworfen. Die Fraktion Nr. 14 bis 21 (je 3 ml im Volumen) werden vereinigt und zur Trockene eingedampft. Man erhält 109 mg (79% Ausbeute) N-[4-(3-tert- butoxycarbonylaminopropyl)-4-tert-butoxycarbonylaminobutyl]- 2,2-diethoxyethanamid in Form eines farblosen Sirups.

In 1 ml Dioxan werden 44 mg (0,13 mMol) des obigen Amids gelöst. Nach der Zugabe von 2,5 ml 0,1N Chlorwasserstoff säure wird das Gemisch 4 Stunden lang in einem Ölbad bei 100°C gerührt. Der pH-Wert des Reaktionsgemisches wird durch Neutralisation mit 0,2N Natriumhydroxidlösung auf 6 eingestellt. Dann wird zur Trockene eingedampft und mit 1,5 ml Methanol extrahiert. Der Methanolextrakt wird durch eine Säule (16,5 mm innerer Durchmesser), die mit 100 ml Sepha dex ®LH-20 gepackt ist, geleitet, und dann wird mit Metha nol entwickelt. Die Fraktionen Nr. 22 bis 25 (je 2 ml im Volumen), die gegenüber dem Ninhydrintest positiv sind, wer den vereinigt und zur Trockene eingedampft. Man erhält 13 mg (46% Ausbeute) N-[4-(3-Aminopropyl)aminobutyl]-2,2-dihy droxyethanamiddihydrochlorid als farblosen Sirup.

Beispiel 1 Synthese von GHA-GS

Ein Gemisch aus 51 mg (0,214 mMol) (S)-7-Guanidino-3-hydroxy heptanamidhydrochlorid, 112 mg (0,385 mMol) N-[4-(3-Amino propyl)aminobutyl]-2,2-dihydroxyethanamiddihydrochlorid, 70 mg (0,53 mMol) Glutarsäure und 0,07 ml (3,9 mMol) Wasser wird 43 Stunden lang bei 60°C gerührt. Das Reaktionsgemisch wird mit 20 ml 0,4M Natriumchloridlösung vermischt, der pH- Wert wird mit 10%igem wäßrigen Ammoniak auf 6,1 eingestellt, und dann wird das Gemisch durch eine Säule (12 mm Innendurch messer), die mit 20 ml CM Sephadex ®C-25 gepackt ist und mit 0,4M Natriumchloridlösung equilibriert ist, geleitet. Die Säule wird dann der Gradientenelution unter Verwendung von je 80 ml 0,4M und 1,0M Natriumchloridlösungen unterwor fen. Die Fraktionen Nr. 41 bis 50 (je 2 ml im Volumen) wer den vereinigt, zur Trockene eingedampft und dreimal mit 10 ml Methanol extrahiert. Der Methanolextrakt wird durch eine Säule (20 mm Innendurchmesser), die mit 100 ml Sephadex ® LH-20 gepackt ist, geleitet und mit Methanol entwickelt.

Die Fraktionen Nr. 30 bis 42 (je 1 ml im Volumen) werden vereinigt und zur Trockene eingedampft. Man erhält 38,4 mg (35% Ausbeute) eines weißen Pulvers aus N-[4-(3-Aminopro pyl)aminobutyl]-2-[(S)-7-guanidino-3-hydroxyheptanamido]- 2-hydroxyethanamid (GHA-GS)-trihydrochlorid.

Beispiel 2 Synthese von 3-O-Acetyl-GHA-GS

Zu 813 mg (S)-7-Guanidino-3-hydroxyheptanamidhydrochlorid gibt man 7 ml Pyridin und 7 ml Essigsäureanhydrid. Das Ge misch wird über Nacht bei Zimmertemperatur gerührt. Das Re aktionsgemisch wird 100 ml Eiswasser vermischt, unter ver ringertem Druck konzentriert und durch eine Säule (2,5 cm Innendurchmesser), die mit 450 ml CM-Sephadex®C-25 (Na-Typ) gepackt ist, geleitet. Fraktionen, die durch Eluierung mit Natriumchloiridlösungen von 0,16 bis 0,2M erhalten werden, werden vereinigt, zur Trockene bei verringertem Druck ein gedampft und mit Methanol extrahiert. Der Methanolextrakt wird durch eine Säule (5,6 cm Innendurchmesser), die mit 1,5 l Sephadex®LH-20 gepackt ist, das mit Methanol ange quollen wurde, geleitet. Die Säule wird mit Methanol ent wickelt und entsalzen. Die aktiven Fraktionen werden ver einigt und bei verringertem Druck zur Trockene eingedampft. Man erhält 753 mg (78,8% Ausbeute) eines weißen Pulvers aus (S)-7-Guanidino-3-acetoxyheptanamidhydrochlorid. Das Proton- NMR dieses Hydrochlorids, bestimmt in Deuteromethanol unter Verwendung von TMS als Standard bei 60 MHz (im folgenden kurz als NMR bezeichnet), zeigt die folgenden charakteristi schen Signale: 1,4-1,9 (CH₂×3), 2,00 (COCH₂), 2,49 (CH₂), 3,18 (NCH₃) und 5,19 (CH).

Ein Gemisch aus 354 mg (S)-7-Guanidino-3-acetoxyheptanamid hydrochlorid, erhalten wie oben beschrieben, 429 mg N-[4- (3-aminopropyl)aminobutyl]-2,2-dihydroxyethanamidhydrochlo rid und 33 mg Glutarsäure wird in 0,5 ml Wasser gelöst und über Nacht bei 60°C erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird mit Wasser verdünnt und durch eine Säule aus CM-Sephadex® gelei tet. Die Fraktionen, die mit Natriumchloridlösungen von 0,52 bis 0,56M eluiert werden, werden gesammelt und weiter gereinigt und mittels Sephadex®LH-20 entsalzt. Man erhält 146 mg (21,6% Ausbeute) 3-O-Acetyl-GHA-GS-trihydrochlorid.

Beispiel 3 Synthese von 3-O-Propionyl-GHA-GS

Ein Gemisch aus 1,3 g (S)-7-Guanidino-3-hydroxyheptanamid hydrochlorid, 5 ml Pyridin und 5 ml Propionsäureanhydrid wird 2 Stunden bei 60°C gerührt. Das Reaktionsgemisch wird mit Eiswasser verdünnt, bei verringertem Druck konzentriert und in 10 ml 0,5M wäßriger Natriumchloridlösung gelöst. Die entstehende Lösung wird durch eine Säule, die mit Diaion® HP-20 gepackt ist und mit 0,5M wäßriger Natriumchloridlösung equilibriert wurde, geleitet und nacheinander mit 0,5M und 0,2M wäßriger Natriumchloridlösung gewaschen. Die Fraktio nen, die mit Wasser und 30%igem wäßrigem Methanol eluiert werden, werden gesammelt und bei verringertem Druck konzen triert, und man erhält 1,26 g (78,5% Ausbeuten) (S)-7-Guani diono-3-propionyloxyheptanamidhydrochlorid in öliger Form. NMR: 1,10 (CH₃), 1,4 bis 1,9 (CH₂×3), 2,32 (COCH₂), 2,51 (CH₂), 3,21 (NCH₂), 5,22 (CH).

Zu der obigen öligen Substanz gibt man 2,24 g N-[4-(3-Ami nopropyl)aminobutyl]-2,2-dihydroxyethanamidhydrochlorid, 1,4 g Glutarsäure und 1,5 ml Wasser. Das Gemisch wird bei 60°C über Nacht erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird mit Was ser verdünnt und durch eine Säule von CM-Sephadex®C-25 (Na-Typ) geleitet. Fraktionen, die mit 0,58M bis 0,65M wäß rigen Natriumchloridlösungen wurden, werden gesammelt und durch eine Säule aus Diaion®HP-20, welche mit 1M wäßriger Natriumchlorid lösung equilibriert wurde, geleitet. Die Säule wird nacheinander mit 1M und O, 1M wäßrigen Natriumchloridlösungen gewaschen. Die Fraktionen, die durch Elution mit Wasser und 30%igem wäßrigem Methanol erhalten werden, werden gesammelt, zur Trockene bei verringertem Druck eingedampft und mit Metha nol extrahiert. Der Methanolextrakt wird mit Sephadex®LH-20 auf ähnliche Weise wie in Beispiel 2 beschrieben behandelt, wobei man 658 mg eines weißen Pulvers aus 3-O-Propionyl-GH- GS-trihydrochlorid enthält.

Beispiel 4 Synthese von 3-O-Butyryl-GHA-GS

In 6,5 ml Dimethylformamid löst mn 676 mg (S)-7-Guanidino- 3-hydroxyheptanamidhydrochlorid und gibt anschließend 1,9 ml Pyridin und 3,7 ml n-Buttersäureanhydrid hinzu. Das Ge misch wird bei 50°C während 24 Stunden erhitzt. Das Reak tionsgemisch wird mit 20 ml Eiswasser vermischt, die abge trennte Ölschicht wird daraus entfernt, und die wäßrige Schicht wird der Chromatographie, ähnlich wie in Beispiel 2, unterworfen, wobei nacheinander CM-Sephadex®C-25 und Se phadex®LH-20 verwendet werden. Man erhält 603 mg (S)-7- Guanidino-3-butyryloxyheptanamidhydrochlorid.
NMR: 0,92 (CH₃), 1,2-2,0 (CH₂×4), 2,28 (COCH₂), 2,50 (CH₂), 3,18 (CH₂), 5,24 (CH).

In 0,5 ml Wasser löst man 513 mg der obigen Verbindung, 592 mg N-[4-(3-Aminopropyl)aminobutyl]-2,2-dihydroxyethanamid hydrochlorid und 220 mg Glutarsäure. Die Lösung wird auf 60°C während 24 Stunden erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird mit Wasser verdünnt und der Chromatographie ähnlich wie in Beispiel 2 unterworfen, wobei man CM-Sephadex®C-25, Diaion® HP-20 und Sephadex®LH-20 verwendet und 314 mg eines weißen Pulvers aus 3-O-Butyryl-GHA-GS-trihydrochlorid erhält.

Beispiel 5 Synthese von 3-O-Isobutyryl-GHA-GS

In 4,5 ml Dimethylformamid löst man 645 g (S)-7-Guanidino- 3-hydroxyheptanamidhydrochlorid und gibt anschließend 0,9 ml Pyridin und 3,6 ml Isobuttersäureanhydrid hinzu. Das Ge misch wird bei 50°C während 24 Stunden erhitzt. Das Reak tionsgemisch wird mit 20 ml Eiswasser vermischt. Die abge trennte Ölschicht wird daraus entfernt und die wäßrige Schicht wird auf ähnliche Weise wie in Beispiel 2 mit CM- Sephadex®C-25 und Sephadex®LH-20 behandelt. Man erhält 729 mg (S)-7-Guanidino-3-isobutyryloxyheptanamidhydrochlo rid in öliger Form.
NMR: 1,13 (CH₃×2), 1,4-1,9 (CH₃×3), 2,50 (CH₂), 2,65 (COCH), 3,18 (CH₂), 5,24 (CH).

In 0,5 ml Wasser löst man 693 mg der obigen öligen Substanz, 821 mg N-[4-(3-Aminopropyl)aminobutyl]-2,2-dihydroxyethan amid und 297 mg Glutarsäure. Die Lösung wird auf 60°C wäh rend 28 Stunden erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird wie in Beispiel 2 mit CM Sephadex®C-25, Diaion® HP-20 und Se phadex®LH-20 behandelt, und man erhält 389 mg eines wei ßen Pulvers aus 3-O-Isobutyryl-GHA-GS-trihydrochlorid.

Beispiel 6 Synthese von 3-O-Pentanoyl-GHA-GS

In 4,5 ml Dimethylformamid löst man 624 g (S)-7-Guanidino- 3-hydroxyheptanamidhydrochlorid und gibt anschließend 0,9 ml Pyridin und 4 ml n-Valeriansäureanhydrid hinzu. Die Lö sung wird 24 Stunden lang bei 50°C erhitzt. Das Reaktions gemisch wird mit 20 ml Eiswasser vermischt. Die abgetrennte Ölschicht wird daraus entfernt, und die wäßrige Schicht wird wie in Beispiel 2 mit CM Sephadex®C-25 und Sephadex® LH-20 behandelt, und man erhält 582 mg gereinigtes (S)-7- Guanidino-3-pentanoyloxyheptanamidhydrochlorid in öliger Form.
NMR: 0,91 (CH₃), 1,2-1,9 (CH₂×5), 2,28 (COCH₂), 2,47 (CH₂), 3,14 (CH₂), 5,21 (CH).

In 0,5 ml Wasser löst man 551 mg der obigen öligen Substanz, 602 mg N-[4-(3-Aminopropyl)aminobutyl]-2,2-dihydroxyethan amidhydrochlorid und 226 mg Glutarsäure. Die Lösung wird während 28 Stunden bei 60°C erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird mit Wasser verdünnt und wie in Beispiel 2 mit CM Sepha dex®C-25, Diaion®HP-20 und Sephadex®LH-20 behandelt. Man erhält 282 mg eines weißen Pulvers aus gereinigtem 3-O- Pentanoyl-GHA-GS-trihydrochlorid.

Beispiel 7 Synthese von 3-O-Hexanoyl-GHA-GS

In 4,5 ml Dimethylformamid löst man 596 mg (S)-7-Guanidino- 3-hydroxyheptanamidhydrochlorid und gibt anschließend 1,2 ml Pyridin und 3,9 ml n-Hexansäureanhydrid zu. Die Lösung wird unter Erhitzen während 24 Stunden gerührt. Das Reaktionsge misch wird 29 ml Eiswasser vermischt, 30 Minuten stehen ge lassen, mit 20 ml Ethylacetat vermischt und stehen gelassen, bis eine Phasentrennung eintritt. Die Ethylacetatschicht wird 4mal mit 30 ml 0,5N Chlorwasserstoffsäure extrahiert. Die wäßrigen Schichten werden vereinigt, mit 2N wäßriger Natriumhydroxidlösung neutralisiert, bei verringertem Druck konzentriert, durch Behandlung mit Methanol entsalzt und wie in Beispiel 2 mit CM Sephadex®C-25 und Sephadex®LH-20 behandelt. Man erhält 653 mg gereinigtes (S)-7-Guanidino-3- hexanoylheptanamidhydrochlorid in öliger Form.
NMR: 0,89 (CH₃), 1,1-1,9 (CH₂×6), 2,36 (COCH₂), 2,45 (CH₂), 3,14 (CH₂), 5,17 (CH).

In 0,5 ml Wasser löst man 506 mg der obigen öligen Substanz, 525 mg N-[4-(3-Aminopropyl)aminobutyl]-2,2-dihydroxy ethanamidhydrochlorid und 198 mg Glutarsäure. Die Lösung wird bei 60°C während 24 Stunden erhitzt. Das Reaktionsge misch wird mit Wasser verdünnt und wie in Beispiel 2 mit CM Sephadex®, Diaion®HP-20 und Sephadex®LH-20 behan delt, und man erhält 197,4 mg eines weißen Pulvers aus ge reinigtem 3-O-Hexanoyl-GHA-GS-trihydrochlorid.

Beispiel 8 Synthese von 3-O-Octanoyl-GHA-GS

In 4,5 ml Dimethylformamid löst man 610 mg (S)-7-Guanidino- 3-hydroxyheptanamidhydrochlorid und gibt anschließend 1,2 ml Pyridin und 4,6 ml n-Octansäureanhydrid hinzu. Die Lösung wird unter Rühren bei 60°C während 24 Stunden erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird mit 20 ml Eiswasser vermischt, während 30 Minuten stehen gelassen und dann mit 20 ml Ethylacetat vermischt und zur Phasentrennung stehen gelassen. Die Ethyl acetatschicht wird 4mal mit 30 ml 0,5N Chlorwasserstoffsäure extrahiert. Die wäßrigen Schichten werden vereinigt, mit 2N wäßriger Natriumhydroxidlösung neutralisiert, dann bei ver ringertem Druck konzentriert und wie in Beispiel 2 mit CM Sephadex® und Sephadex®LH-20 behandelt. Man erhält 630 mg gereinigtes (S)-7-Guanidino-3-octanoyloxyheptanamidhydro chlorid in öliger Form.
NMR: 0,92 (CH₃), 1,1-1,9 (CH₂×8), 2,30 (COCH₂), 2,50 (CH₂), 3,20 (CH₂), 5,18 (CH).

In 0,5 ml Wasser löst man 514 mg der obigen öligen Substanz, 493 mg N-[4-(3-Aminopropyl)aminobutyl]-2,2-dihydroxyethan amidhydrochlorid und 186 mg Glutarsäure. Die Lösung wird bei 60°C während 24 Stunden erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird mit Wasser verdünnt und wie in Beispiel 2 mit CM Sepha dex®, Diaion®HP-20 und Sephadex®LH-20 behandelt. Man er hält 187,6 mg eines weißen Pulvers aus gereinigtem 3-O-Oc tanoyl-GHA-GS-trihydrochlorid.

Beispiel 9 Synthese von 3-O-Decanoyl-GHA-GS

In 6,5 ml Dimethylformamid löst man 603 mg (S)-7-Guanidino- 3-hydroxyheptanamidhydrochlorid und gibt anschließend 0,82 ml Pyridin und 9,9 g n-Decansäureanhydrid hinzu. Die Lösung wird unter Erhitzen bei 60°C während 48 Stunden gerührt. Das Reaktionsgemisch wird mit 20 ml Eiswasser verdünnt, 30 Minuten stehen gelassen und wie in Beispiel 8 behandelt. Man erhält 312 mg (S)-7-Guanidino-3-decanoyloxyheptanamid hydrochlorid in öliger Form.
NMR: 6,88 (CH₃), 1,1-1,9 (CH₂×10), 2,28 (COCH₂), 2,46 (CH₂), 3,16 (CH₂), 5,22 (CH).

In 0,45 ml Wasser löst man 275 mg der obigen öligen Sub stanz, 244 mg N-[4-(3-Aminopropyl)aminobutyl]-2,2-dihy droxyethanamidhydrochlorid und 93 mg Glutarsäure. Die Lö sung wird bei 60°C 24 Stunden lang erhitzt. Das Reaktionsge misch wird mit Wasser verdünnt und wie in Beispiel 2 unter Verwendung von CM Sephadex®, Diaion®HP-20 und Sephadex® LH-20 gereinigt. Man erhält 87 mg eines weißen Pulvers aus 3-O-Octanoyl-GHA-GS-trihydrochlorid.

Beispiel 10 Synthese von 3-O-Tetradecanoyl-GHA-GS

In 7 ml Dimethylformamid löst man 500 mg (S)-7-Guanidino-3- hydroxyheptanamidhydrochlorid und gibt anschließend 0,85 ml Pyridin und 4,6 g n-Tetradecansäureanhydrid. Die Lösung wird unter Rühren bei 80°C 20 Stunden lang erhitzt. Das Re aktionsgemisch wird mit 50 ml Methanol vermischt, das ausge fallene überschüssige n-Tetradecansäureanhydrid wird durch Filtration entfernt, und das Filtrat wird bei verringertem Druck konzentriert. Der Rückstand wird in 10 ml 1N Natrium hydroxidlösung gelöst und dreimal mit 10 ml n-Butanol ex trahiert. Die Butanolschicht wird nacheinander mit 1N Chlorwasserstoffsäure, 1N wäßriger Natriumhydroxidlösung und Wasser gewaschen. Die Butanolschicht wird dann mit Me thanol extrahiert, und die Methanolschicht wird bei verrin gertem Druck konzentriert. Man erhält 242 mg eines weißen Rückstands, der weiter gereinigt wird, indem man eine Diaion®HP-20-Säule verwendet. Man erhält 145 mg (S)-7- Guanidino-3-tetradecanoyloxyheptanamidhydrochlorid.
NMR: 0,89 (CH₃), 1,1-1,9 (CH₂×14), 2,28 (COCH₂), 2,48 (CH₂), 3,16 (CH₂), 5,20 (CH).

In einem geringen Volumen an Wasser werden der obige weiße Rückstand, 141 mg N-[4-(3-Aminopropyl)aminobutyl]-2,2- dihydroxyethanamidhydrochlorid und 42 mg Glutarsäure gelöst. Die Lösung wird bei 60°C während 24 Stunden erhitzt. Das Re aktionsgemisch wird in wäßrigem Methanol gelöst, durch eine Säule aus Diaion®HP-20, die mit 0,5M wäßriger Natriumchlo ridlösung equilibriert worden ist, geleitet, und dann wird mit 90%igem wäßrigem Methanol eluiert. Das abströmende Ma terial wird bei verringertem Druck konzentriert, und man er hält 23,9 mg eines weißen Pulvers aus 3-O-Tetradecanoyl-GHA- GS-trihydrochlorid.

Beispiel 11 Synthese von 3-O-Benzoyl-GHA-GS

In 2,5 ml Dimethylformamid löst man 2,0 g (S)-7-Guanidino-3- hydroxyheptanamidhydrochlorid, und anschließend gibt man 1,7 ml Pyridin zu. Zu der Lösung gibt man unter Eiskühlung lang sam und tropfenweise 2,6 ml Benzoylchlorid zu. Das Gemisch wird 30 Minuten lang unter Eiskühlung und dann weitere zwei Stunden bei Zimmertemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wird mit 20 ml Eiswasser verdünnt, die sich abtrennende öli ge Schicht wird abgetrennt, und die wäßrige Schicht wird mit 600 mg Natriumchlorid vermischt. Die wäßrige Schicht wird durch eine Säule aus Diaion®HP-20, die mit 0,5M wäßriger Natriumchloridlösung equilibriert worden ist, ge leitet. Die Säule wird nacheinander mit 0,5M, 0,2M und 0,1M wäßriger Natriumchloridlösung und mit Wasser gewaschen. Die Fraktionen, die mit 20 bis 40% (Volumen/Volumen) wäßrigem Methanol eluiert werden, werden gesammelt und bei verringer tem Druck konzentriert. Man erhält 820 mg (S)-7-Guanidino- 3-benzoyloxyheptanamidhydrochlorid in öliger Form.
NMR: 1,4-2,0 (CH₂×3), 2,65 (CH₂), 317 (CH₂), 5,50 (CH), 7,2-8,1 (COC₆H₅).

In 0,6 ml Wasser löst man 384 mg der obigen öligen Verbin dung, 460 mg N-[4-(3-Aminopropyl)aminobutyl]-2,2-dihydro xyethanamidhydrochlorid und 148 mg Glutarsäure. Die Lösung wird bei 50°C während 2 Tagen erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird mit Wasser verdünnt und durch eine Säule aus CM-Sepha dex®C-25 (Na-Typ) geleitet. Die Fraktionen, die mit 0,52 bis 0,56M wäßriger Natriumchloridlösung eluiert wurden, wer den gesammelt, bei verringertem Druck konzentriert, durch eine Säule aus Diaion®HP-20, die mit 1M wäßriger Natrium chloridlösung equilibriert worden ist, geleitet und dann mit 0,1M wäßriger Natriumchloridlösung gewaschen. Die Fraktionen, die mit Wasser und 30%igem wäßrigen Methanol eluiert wurden, werden gesammelt, bei verringertem Druck konzentriert und weiter durch Behandlung mit einer Säule aus Sephadex®LH-20 entsalzt. Man erhält 40 mg eines weißen Pulvers aus 3-O-Ben zoyl-GHA-GS-trihydrochlorid.

Claims

1. N-[4-(3-Aminopropyl)aminobutyl]-2-[(S)-7-guanidino- 3-hydroxyheptanamido]-2-hydroxyethanamid und seine 3-O-Acyl derivate der allgemeinen Formel (I) worin R eine Alkanoylgruppe mit 1 bis 14 Kohlenstoffatomen oder eine Benzoylgruppe bedeutet, und deren Säureadditions salze, ausgenommen die Verbindung BMG162-aF2 der Formel

2. N-[4-(3-Aminopropyl)aminobutyl]-2-[(S)-7-guanidino- 3-acetoxyheptanamido]-2-hydroxyethanamid und dessen Hydro chlorid.

3. N-[4-(3-Aminopropyl)aminobutyl]-2-[(S)-7-guanidino- 3-propionyloxyheptanamido]-2-hydroxyethanamid und dessen Hy drochlorid.

4. N-[4-(3-Aminopropyl)aminobutyl]-2-[(S)-7-guanidino- 3-butyryloxyheptanamido]-2-hydroxyethanamid und dessen Hydro chorid

5. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung der allgemeinen Formel (II) worin R Waserstoff oder die oben angegebene Definition be sitzt, oder eines ihrer Säureadditionssalze mit einer Verbin dung der Formel (III) oder einem ihrer Säureadditionssalze in Gegenwart von 0,5 bis 10 Mol einer anorganischen oder organischen Säure, bezogen auf die Verbindung der allgemeinen Formel (II), bei einer Temperatur von 30 bis 70°C kondensiert, und die erhaltene Verbindung gegebenenfalls in deren Säureadditionssalz über führt.

6. Verfahren nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß man in Gegenwart einer Dicarbonsäure kondensiert.

7. Verfahren nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, daß man in Gegenwart von Glutarsäure kon densiert.

8. Verfahren nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß man in Anwesenheit von 4 bis 40 Mol Wasser pro Mol der Verbindung der allgemeinen Formel (II] kondensiert.