DE3138493A1 - Ein verfahren zur gewinnung lipophiler stoffwechselprodukte aus suspensionskulturen lebender pflanzenzellen - Google Patents

Ein verfahren zur gewinnung lipophiler stoffwechselprodukte aus suspensionskulturen lebender pflanzenzellen

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Walter 6903 Neckargemünd Bisson
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    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/0018—Culture media for cell or tissue culture
    • C12N5/0025—Culture media for plant cell or plant tissue culture
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes

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Description

  • Patentbeschreibung
  • Titel: Ein Verfahren zur Gewinnung Lipophiler Stoffwechselprodukte aus Suspensionskulturen lebender Pflanzenzellen.
  • Anwendung: Die Erfindung betrifft ein Verfahren der Kultur von Suspensionen pflanzlicher Zellen zur Anreicherung und Gewinnung lipophiler Stoffwechselprodukte der Pflanzenzellen.
  • Zweck: Bei einem derartigen Verfahren ist es nötig, daß die Ausbeute lipophiler Stoffwechselprodukte gegenüber konventionellen Suspensionskultur-Verfahren wesentlich erhöht ist.
  • Stand der Technik: Sehr verschiedene Pflanzenarten produzieren und akkumulieren lipophile Substanzen, die von erheblicher medizinischer Bedeutung sind. Diese Substanzen kommen -in den Pflanzen in der Regel nur in geringer Menge vor, und ihre Ausbeute ist abhängig von genetischen Faktoren und Außenfaktoren. Versuche, die gewünschten lipophilen Stoffwechselprodukte aus wässrigen Suspensionskulturen der entsprechenden Pflanzenarten zu gewinnen, sind vielfach unternommen worden. Solche Versuche endeten entweder ohne Erfolg oder es war - von seltenen Spezialfällen abgesehen - die Ausbeute verschwindend gering.
  • Literatur z.B.
  • W.Barz: Pflanzliche Zellkulturen und ihre Bedeutung für Forschung und Anwendung. Bundesministerium f.
  • Forschung u.Technologie, Bonn, 1980 E.Teuscher: Probleme der Produktion sekundärer Pflanzenstoffe mit Hilfe von Zellkulturen. Pharmacie 28, 1973, 6 J.Reichling: Physiologische und phytochemische Untersuchungen an Matricaria chamomilla L., Habilitationsschrift d. Fakultät f. Pharmacie, Heidelberg, 1981.
  • Kritik: In allen berichteten Untersuchungen wurde es versäumt, den wässrigen Zellsuspensionen, die prinzipiell genetische Information zur Produktion lipophiler Substanzen besaßen, einen Akkumulationsort für diese Substanzen anzubieten, sodaß Endprodukthemmungen einerseits und Verluste über den Gasraum andererseits nicht ausgeschlossen werden können.
  • Aufgabe: er Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, eine Methode der Suspensionskultur vorzustellen, die eine Akkumulation lipophiler Stoffwechselprodukte der kultivierten Zellen zuläßt.
  • Lösung: Diese Aufgabe wird erfindungsgemäß dadurch gelöst, daß der wässrigen Zellsuspension für einen Teil oder die gesamte Dauer der Kultur eine zweite, nichttoxische lipophile Phase zugemischt wird, die als Akkumulationsort dienen kann.
  • Vorteile: Die mit der Erfindung erzielten Vorteile bestehen darin, daß 1. die kultivierten Zellen in der zweiphasischen Kultur einen Ort für die Akkumulation lipophiler Stoffwechselprodukte finden; 2. aus der lipophilen Phase des Zweiphasengemisches die von den Zellen produzierten lipophilen Stoffwechselprodukte leicht isoliert werden können, Ausführungsbeispiel: Eine Suspensionskultur eines Kamille Tumors enthält weder im verbrauchten Nährmedium noch in den darin gewachsenen Zellen das medizinisch interessante Terpen cL-3isabolol in nachweisbarer Menge. Zusatz von 10% (Vol.) eines Triglyceridgemisches zur Zellsuspension während der gesamten Kulturdauer erlaubt nach Phasentrennung die Isolierung dieses Terpen aus der Triglyceridphase (Nachweis mit Dünnschichtchromatographie und Gaschroamtographie).

Claims (1)

  1. Patentanspruch Oberbegriff: Ein Verfahren der Kultur von Suspensionen pflanzlicher Zellen zur Anreicherung und Gewinnung lipophiler Stoffwechselprodukte der Pflanzenzellen, Kennzeichnung: dadurch gekennzeichnet, daß ein zweiphasisches Kulturmedium verwendet wird, das aus einer wässrigen Nährlösung und einer nichttoxischen lipophilen Phase besteht, in der sich die lipophilen Stoffwechselprodukte der Pflanzenzellen während der Kultur anreichern.
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