DE3025804C2

DE3025804C2 - 1-S-Alkyl-2-0-acyl-3-phosphocholin-1-mercapto-2,3-propandiole, Verfahren zu deren Herstellung und diese enthaltende Arzneimittel

Info

Publication number: DE3025804C2
Application number: DE3025804A
Authority: DE
Inventors: Hans Dipl.-Chem. Dr. 5014 Kerpen Betzing; Gerit Dipl.-Chem. Dr. 5024 Pulheim Prop; Ferdinand Dipl.-Chem. Dr. 5000 Köln Wirtz-Peitz
Original assignee: A Nattermann & Cie 5000 Koeln De GmbH
Current assignee: A Nattermann & Cie 5000 Koeln De GmbH
Priority date: 1980-07-08
Filing date: 1980-07-08
Publication date: 1985-09-05
Also published as: EP0043472A1; DK149492B; DK299981A; DK149492C; IE811365L; JPS5753492A; EP0043472B1; ATE4216T1; IE51309B1; ZA814234B; CA1149406A; DE3025804A1

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft neue l-S-Alkyl-2-0-acyl-3-phosphocholin-l-mercäpto-2_rJ-propandiole gemäß Anspruch 1, die wertvolle biologische und pharmakologische Eigenschaften besitzen, Verfahren zur Herstellung dieser Verbindungen sowie diese enthaltende Arzneimittel. Bei den erfindungsgemäßen Verbindungen handelt es sich insbesondere um solche, bei denen Alkyl ein gesättigter geradkettiger oder verzweigter Kohlenwasserstoffrest mit 12-20 Kohlenstoffatomen oder ein solcher ungesättigter Kohlenwasserstoffrest ist, der ein oder zwei Doppelbindungen aufweist Da bei derartigen Glyceriden die sich von natürlichen Fetten ableitenden Derivate besondere Bedeutung haben, sind diejenigen Verbindungen der Formel! ganz besonders bevorzugt, worin Alkyl ein gesättigter geradkettiger Kohlenwasserstoffrest mit gerader Zahl vcn Kohlenstoffatom ist Es handelt sich hierbei um:

l-S-Hexadecyl^-O-acetyM-phosphocholm-l-mercapto^^-propandiol; l-S-Hexadecyl^-O-propionyM-phosphocholm-l-menapto^-propandiol;

l-S-Octadecyl^-O-acetyl-S-phosphochoün-l-mercapto-i^-propandiol; 1 -S-Octadecyl^-O-propionyl-S-phosphocholin-l-mercap.o^^-propandiol; l-S-Eicosyl^-O-acetyl-S-phosphocholin-l-mercapto^-prop&ndiol; l-S-TetΓadecyl-2-O-acetyl-3-phosρhochoün-l-meΓcapto-23-propandiol; l-S-Tetradecyl^-O-propionyl-S-phosphocholin-l-merrapto^-propandiol; l-S-Dodecyl-2-0-acetyl-3-phosphocholin-l-meicapto-2^-propandiol; 1 -S-Dodecy ^-O-propionyl-S-phosphocholm-l-mercapto^^-propandiol;

d. h. Verbindungen der Formel I, worin Alkyl ein gesättigter, geradkettiger Kohlenwasserstoffrest 12,14,16, 18 oder 20 Kohlenstoffatomen ist und der Acylrest ein Acetyl- oder Propionylrest ist.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen unterscheiden sich von den Glycerinetherphospholipiden, insbesondere den l-Allcoxy-2-acyi-glycerophosphocholinen dadurch, daß die Alkylgruppe in 1-Stellung des Glycerophosphocholins über eine Thioetherverbindung verknüpft ist. Die neuen Verbindungen zeigen interessante pharmakologische Eigenschaften, wie eine gute antihypertensive Wirkung und 'tine vorzügliche biologische Aktivität gegenüber Blutplättchen im Sinne einer Aggregationshemmung. Die erfindungsgemäßen Verbindungen werden daher insbesondere als Wirkstoff in Arzneimitteln zur Behandlung von erhöhtem Blutdruck und zur Bluttplättchen-Aktivierung verwendet

Die Herstellung der erfindungsgemäßen Phospholipid-Analoga erfolgt in an sich bekannter Weise gemäß Anspruch 4. Das Verfahren läßt sich schematisch wie folgt wiedergeben:

H₂C-S-Na

HC-OH

H₂C-S-Alkyl I

2. + Tritylchlorid I

H₂C-OH H₂C-O-C-(C₆Hj)₃

(ID) (IV)

H₂C-S-Alkyl Hi-O-CO-R

l.jS-Bromethylphosphorsäuredichlorid

2. Abspaltung der I

Tritylgruppe H₂C-OH

(V)

H₂C-S-Alkyl

HC-O —C —R
O

Il

H₂C-O-P-O-CH₂CH₂-Br
OH

(VII)

10

IS

20

25

30

35

40

45

+ Trim ethyl am in

H₂C-S—Alkyl O

Il

* HC-0 —C—R O

Il

H₂C-O-P-O-CH₂CH₂-N-(CH₃), O~

55

60

65

Zur Veresterung geeignete Derivate der Säuren R-CO-OH sind insbesondere die Säurehalogenide wie Säurechloride oder Säurebromide, oder die Säureanhydride.

Geeignete Schutzgruppen für die Blockierung der primären Hydroxylgruppe in 3-Stellung der 1-S-ALkyI-l-mercapto-2^-propandiole geeignet sind, sind dem Fachmann bekannt (vgl. z. B. H. M. Verheij, Fundamentals of Lipid Chemistry, Bl-Science Publications Division, Webster Groves, Missouri (USA) (1974), S. 225-249, insbesondere S. 234).

Die Umsetzungen werden in inerten, organischen Lösungsmitteln, wie Chloroform, Tetrahydrofuran oder Toluol, vorzugsweise in Anwesenheit geeigneter Säurefänger wie insbesondere von Triethylamin, Pyridin oder Chinolin als organische Base durchgeführt. Die Reaktionskomponenten werden zweckmäßigerweise in ίο äquimoiaren Mengen eingesetzt Zur Erhöhung der Ausbeute kann die eine der Reaktionskomponenten auch im Überschuß eingesetzt werden. Alle Reaktionen werden möglichst unter Feuchtigkeitsausschluß, vorzugsweise in einem Temperaturbereich von 10 bis 60⁰C durchgeführt, jedoch kann in einigen Fällen auch bei erhöhter oder niedriger Temperatur, d.h. insgesamt im Temperaturbereich von etwa 0-100°C gearbeitet werden.

Bei den erfindungsgemäßen Verbindungen handelt es sich um amorphe, halbfeste, farblose Verbindungen ohne definierte Schmelzpunkte, deren Charakterisierung durch Dünnschichtchromatographie, Bestimmung des Phosphorgehalts und durch Elementaranalyse erfolgen kann.

Beispiel 1

a) 13 g (0,1 Mol) l-Natriummercapto-2_r?-propandioi in 2ÖÖ mi Methanoi werden mit 3 i g- (0,1 Mol) 1-Brornhexadecan 10-15 Stunden bei Raumtemperatur unter Feuchtigkeitsausschluß gerührt. Der entstandene Niederschlag wird abgetrennt und wiederholt mit Methanol ausgewaschen. Es resultieren 30 g (90% d.Th.) l-S-Hexadecyl-l-mercapto^^-propandiol.

b) 20 g (64 mMol) l-S-Hexadecyl-l-mercapto^-propan^iol werden in 400 ml absolutem Tetrahydrofuran gelöst und nach Zugabe von 10 g Pyridin mit 22,3 g (80 mMol) Triphenylchlormethan ca. 30 Stunden auf 70⁰C erhitzt. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird das ausgefallene Pyridin-Hydrochlorid abgetrennt und das Tetrahydrofuran im Vakuum abdestilliert. Nach dem Aufnehmen des Rückstandes in Petrolether, Abkühlen der Petrolelrier-Lösung und Abtrennen des gebildeten Niederschlages, werden nach Abdestillieren des Petrolethers 30 g (85% d.Th.) rohes l-S-HexadecylO-O-trityl-l-mercapto^-propandiol erhalten.

c) Die unter b) erhaltene Substanz (52 mMol) wird in 200 ml absolutem Chloroform gelöst, mit 8,0 ml Triethylamin versetzt, der Lösung unter Eisbadkühlung langsam 5,1 ml Acetylchlorid zugetropft und das Reaktionsgemisch über Nacht bei Zimmertemperatur weiter gerührt. Nach Beendigung der Reaktion (DC-Prüfung) wird die Chloroformlösung wiederholt mit Wasser gewaschen, mit Natriumsulfat getrocknet und das Lösungsmittel im Vakuum abdestilüert. Das so erhaltene l-S-HexadecyW-O-acetyl-S-Q-trityll-mercapto-2,3-propandiol hat einen Rf-Wert von 0,73 im Laufmittel: n-Hexan/Ether (85 :15).
25 g (40 mMol) dieser Substanz werden mit 200 ml 75% Essigsäure ca. 20 Stunden untei Rückfluß zum Sieden erhitzt. Sodann wird das Reaktionsgemisch in Wasser gegossen, mit Ether extrahiert und das erhaltene l-S-Hexadecyi^-O-acetyl-l-mercapto-^-propandiol säulenchromatographisch über Kieselsäure gereinigt.
Ausbeute: 9,5 g (66% d.Th.), Rf-Wert: 0,71 m Laufmittel Chloroform/Methanol (98:2).

d) 9 g (25 mMol) l-S-HexadecyW-O-acetyl-l-mercapto^· propandiol werden in 20 mi absolutem Chloroform gelöst und in eine Lösung von 18,1 g (75 mMol)^e-BromethyIphosphorsäuredichlorid und 15,3 g (150 mMol) wasserfreies Triethylamin in 40 ml absolutem Choroform unter Eiskühlung und Rühren langsam eingetropft. Nach 4stündigem Rühren bei Zimmertemperatur und nach 15 Stunden bei 37°C kühlt man das Reaktionsgemisch auf 0⁰C ab und hydrolysiert das entstandene Phosphorsäureesterchlorid durch Zugabe von 50 ml 0,1 η Salzlösung. Anschließend wird die Lösung 2 Stunden bei 0⁰C gerührt.

Nach Zugabe von 30 ml Methanol wird mit HCl angesäuert, die organische Phase abgetrennt, erneut mit Wasser ausgeschüttelt und dann über MgSO₄ getrocknet. Nach dem Abdestillieren des Lösungsmittels wird der Rückstand über Phosphorpentoxid im Vakuum getrocknet. Die Rohausbeute an l-S-Hexadecyl^-O-acetyiO-phosphorsäure^-bromethyiester-l-mercapto^S-propandiol beträgt 10,5 g (75% d.Th.), Rf-Wert: 0,55 im Laufmittel Chlorofor^/Methanol/Wasser (65 :75 :4).

e) 10 g (?8 mMol) des gemäß d) erhaltenen^-Bromethylphosphorsäureesters werden ohne weitere Reinigung in 50 ml Toluol aufgenommen und bei 0⁰C mit 15 ml Trinuihylamin versetzt und das Reaktionsgemisch in einem Autoklav gut verschlossen bei 55°C 15 Stunden erwärmt. Anschließend wird das Lösungsmittel im Vakuum abgedampft, der Rückstand in 100 ,nl Methanol gelöst, mit 6 g Silbernitrat versetzt und 30 Minuten bsi 50⁰C unter gelegentlichem Umsohütteln stehen gelassen. Das Silbersalz wird abfiltriert, das Filtrat im Vakuum eingedampft, der Rückstand über Phosphorpentoxid getrocknet und säulenchromatographisch über Kjeselgel gereinigt,

Ausbeute: 9,6 g (64% d.Th.) l-S-Hexadecyl^-O-acetylO-phosphocholin-l-mercapto^J-pronandiol in Form einer farblosen, wachsartigen Substanz vom Rf-Wert: 0,28 im Laufmittel Chloroibrm/Methanol/ Wasser (65:25:4).

Eleir.SiVaranalyse

C₂₆Hs₄O₆PNS ber. C 57,90 H 10,01 N 2,60 P 5,74 S 5,94

(MG:539,3i) gef. C57.69 H 10,11 N 2,45 P 5,52 S 5,82.

Beispiel 2

Die Verbindungen der Tabelle 1 werden analog den im Beispiel 1 beschriebenen Verfahrensschritten hergestellt:

Summenformel	Ber. Gef.	Analysenwerte	II	N	P
Mol. Gew.	Ber. Gef.	C	9,52 9,47	2,90 2,84	6,41 6,23
C₂₂H₄₆NO₆PS 483,27	Ber. Gef.	54,67 54,55	9,65 9,57	2,82 2,92	6,23 6,08
C₂₃H₄₈NO₆PS 497,28	Ber.	55,55 55,48	10,12 10,26	2,53 2,45	5,60 5,71
C₂₇H₅₆NO₆PS 553,32	Ber. Gef.	58,60 58,45	10,22 ino?	2,45 7. S3	5,46 5.42
C₂₈H₅₈NO₆PS 567 33	Ber. Gef.	59,27 so. ns	10,32 10,17	2,41 2,31	5,33 5,40
C₂₉H₆₀NO₆PS 581,34	Ber. Gef.	59,92 59,71	10,41 10,30	2,35 2,33	5,20 5,22
C₃₀H₆₂I¹IO₆PS 595,35		60,52 60,43	10,50 10,42	2,30 2,32	5,08 5,02
C„H_MNO_ÄPS 609,36	61,10 61,01
Versuchsbericht

l-S-Dodecyl^-O-acetylO-phosphocholin-1 -mercapto-2,3-propandio!

l-S-Dodecyl^-O-propionylO-phosphocholin-l-mercapto-2,3-propandiol l-S-Hexadecyl^-O-propionylO-phosphocholin-l-mercapto-2,3-propandiol l-S-Octadecyl^-O-acetalO-phospho-

Ciiönii- i-rncrCSpiG-A^-prOpSIiotGi

l-S-Octadecyl^-O-propionylO-phosphocholin-l-mercapto-2,3-propandiol l-S-Eicosayl^-O-acetyW-phosphocholinl-mercapto-2_T3-propandiol l-S-Eicosayl^-O-propionylO-phosphocholin-l-mercapto-2,3-propandiol

Blutdrucksenkende Wirksamkeit von l-S-Hexadiscyl-2-O-acstyl-3-phosphocholin-l-mercapio-2^-propandiol = Substanz A im Vergleich mit dem bekannten Blutdrucksenker 2-[a-(2,6-Dichlorphenoxy)-ethyl]-^l²-imidazotin ((±)-Lofexidin) = Substanz B (DE-PS 17 95 843).

Als Versuchsmodell wurde die mit Pentobarbital narkotisierte normotensive Ratte gewählt. (Versuchsmodell von Timmermans und van Zwieten, Eur. J. Med. Chem. (1980), 15, 323-329.) Die Substanz wurde in 0,9%iger Natriumchloridlösung gelöst und intravenös verabreicht. Gemessen wurde die maximale Senkung des mittleren arteriellen Blutdrucks (MAP). Im gleichen Testmodell wurde die blutdrucksenkende Wirkung von (±>Lofexidin gemessen, ebenfalls nach intravenöser Applikation.

Die Versuchsergebnisse sind den nachfolgenden Tabellen zu entnehmen:

Tabelle 1
Substanz A

Dosierung (ug/lcg) 1,0

1000,0

Δ MAP (mmHG)
Substanz B

-2,5 ±2,0

-24,2±4,1

-80,0±5,2

-96,2 ±4,8

Dosierung (fig/kg)

1,0 3,16

5,61

10,0

Δ MAP (mmHG)

-13,8±1,9

-29,8 ±4,2

-41,6±8,6

-53,0+4,3

Claims

Patentansprüche:

H₂C-O-P-O-CH₂-CH₂-N-(CH₃)J
O"

worin Alkyl ein gesättigter oder ein- oder zweifach olefinisch ungesättigter, geradkettiger oder vs-zweigter Kohlenwasserstoffrest mit 6-20 Kohlenstoffatomen ist und R für eine Methyl- oder Ethylgruppe steht
2. Verfahren zur Herstellung der l-S-Alkyl-2-0-acyl-3-phosphocholin-l-mercapto-2^-propandiole gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Weise l-Mercapto-propandiol-(2,3) mit einem Alkyl-Hal, worin Alkyl die gleiche Bedeutung wie in Formel 1 hat und Hai ein Haiogenatom, insbesondere ein Brom- oder Chloratom ist, gegebenenfalls in Anwesenheit eines alkalischen Kondensationsmittels umsetzt, in dem erhaltenen l-S-Alkyl-l-mercapto-propandiol-(2,3) die priämere Alkoholgruppe in 3-Stellung mit einer geeigneten Schutzgruppe blockiert, die so geschützte Verbindung mit einem zur Veresterung geeigneten Derivat der organischen Säure R-CO-OH, worin R die gleiche Bedeutung wie in Formel I hat, umsetzt, die Schutzgruppe in der 3-Stellung abspaltet und das erhaltene l-S-Alkyl-2-O-acyl-l-mercapto-2,3-propan-diol der allgemeinen Formel V

HjC—S—Alkyl

HC-Ο —C —R H_:C —OH

(V)

worin Alkyl und R die gleiche Bedeutung wie in Formel I haben, mit^-Brom-ethyl-phosphorsäuredichlorid der Formel VI

Cl

Br— CH₂CH₃- Ο—Ρ (VO

Il \ ο ei

umsetzt, und den erhaltenen l-S-Alkyl^-O-acylO-phosphorsäure-jß-brom-ethylester des l-Mercapto-2,3-propandiols der Formel VII

H₂C-S-Alkyl O

Il

HC-Ο —C —R (VII)

Il

H₂C-O-P-O-CH₂CH₂-Br
OH

worin Alkyl und R die gleiche Bedeutung wie in Formel I haben, mit Trimethylamin umsetzt und so in den entsprechenden Cholinestcr der Formel I überführt.
3. Arzneimittel, dadurch gekennzeichnet, daß sie neben üblichen physiologisch verträglichen Trägerstoffen und/oder Verdünnungsmitteln eine oder mehrere der Verbindungen gemäß Anspruch 1 als Wirkstoff enthalten.