DE2546910A1

DE2546910A1 - Penicillansaeurederivate, verfahren zu ihrer herstellung, arzneimittel und desinfektionsmittel

Info

Publication number: DE2546910A1
Application number: DE19752546910
Authority: DE
Inventors: Cornelius Adrianus Bruynes; Johannes Karel Van Der Drift
Original assignee: Gist Brocades NV
Current assignee: Gist Brocades NV
Priority date: 1974-10-21
Filing date: 1975-10-20
Publication date: 1976-04-22
Also published as: DK471375A; IE42612L; BE834679A; PL103373B1; FI752924A; NO753519L; JPS5387393A; NL164039B; ATA794975A; DE2546910B2; SE7809050L; GB1523278A; ES444212A1; NL164039C; IT1047205B; PL108190B1; DE2546910C3; ES441922A1; AT349631B; US4067986A

Description

¹¹ Penicillansäurederivate, Verfahren zu ihrer Herstellung, Arzneimittel und Desinfektionsmittel "

Priorität: 21. Oktober 1974, Großbritannien, Nr. 45 480/74

In den letzten zwei Jahrzehnten wurden einige halbsynthetische Penicilline, wie Ampicillin, Amoxycillin, Sulbenicillin, Carbenicillin, Dicloxacillin und Nafcillin, entwickelt und in die Therapie eingeführt. Mit diesen halbsynthetischen Penicillinen lassen sich zahlreiche Infektionskrankheiten bekämpfen, die durch die verschiedensten Keime verursacht werden. Es besteht jedoch noch ein Bedarf an weiteren Antibiotics zur Bekämpfung aller spezieller Keime, wie Pseudomonas- und Proteus-Arten.

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, neue Derivate des Amoxycillins, nämlich der 6-/ä-Amino-(p-hydroxybenzyl)-carbonamidq/-penicillansäure, zu schaffen, die nicht nur die bekannt gute antibiotische Wirkung von Amoxycillin aufweisen, sondern auch interessante Wirkungen gegenüber bestimmten Mikroorganismen, wie Pseudomonas- und/oder Proteus-Arten entfalten. Diese Aufgabe wird durch die Erfindung gelöst.

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Die Erfindung betrifft somit den in den Ansprüchen gekennzeichneten Gegenstand.

Vorzugsweise sind die Substituenten, mit denen die Benzolkerne der Gruppen Z^ und Z₂ gegebenenfalls substituiert sind, Halogenatome, Nitro- oder Cyanogruppen oder Alkyl- oder Alkoxyreste mit bis zu β Kohlenstoffatomen.

Die Bezeichnung "nieder" bezieht sich auf Alkoxy-, Alkylthio- und Alkylreste mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen.

Als Estergruppen E, die die Absorptionseigenschaften der Verbindung der allgemeinen Formel I verbessern können, kommen beispielsweise Gruppen der allgemeinen Formel III

- CH₂ - 0 - CO - R oder -CH₂ - S - CO - R (III)

in Frage, in der R einen unverzweigten oder verzweigten Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen darstellt, der gegebenenfalls durch mindestens einen niedere Alkoxy-, Alkylthio- oder Halogenalkylrest substituiert ist.

Die salzbildenden Kationen E und M sind vorzugsweise pharmakologisch verträglich. Vorzugsweise sind die Salze die Natrium-, Kalium-, Calcium- oder Ammoniumsalze, wie die Tri-nieder-alkylamin-, Procain- und Benzylarainsalze, oder die Hydrate der Salze.

Spezielle Beispiele für die Gruppe der allgemeinen Formel II sind die Di-nieder-alkoxyphosphinylaminocarbonyl-, Diphenoxy-

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phosphinylaminocarbonyl-, Diphenylphosphinylaminocarbonyl-, Di-nieder-alkylphosphinylaminocarbonyl-, Hydroxy-benzylphosphinylaminocarbonyl-, Hydroxy-nieder-alkoxy-phosphinylaminocarbonyl-, Hydroxy-phenyl-phosphinylaminocarbonyl-,Hydroxynieder -alkyl-phosphinylaminocarbonyl-, Nieder-alkoxy-benzyloxy-phosphinylaminocarbonyl-, Phenyl-benzyloxyphosphinylaminocarbonyi-, Nieder-alkyl-benzyloxy-phosphinylaminocarbonyl-, Dibenzyloxy-phosphinylaminocarbonyl-, Dihydroxy-phosphinylaminocarbonyl-, Nieder-alkoxy-benzylphosphinylaminocarbonyl- und Nieder-alkoxy-phenyl-phosphinylaminocarbonylgruppe.

Spezielle Beispiele für erfindungsgemäße Verbindungen sind:

D-6-/α-/B- (Benzyloxy- (äthyl)-phosphinyl)-ureido7-p-hydroxy-

benzyl-carbonamide}-penicillansäure,

D-6-/a-ZB- (Benzyloxy- (äthoxy)-phosphinyl)-ureidq/-p-hydroxy-

benzylcarbonamido}-penicillansäure,

D- 6-{<x-/3- (Dibenzyloxyphosphinyl) -ur eidqZ-p-hydroxybenzylcar-

bonamido}-penicillansäure,

D-6-fa-ZB-(Hydroxy-(äthyl)-phosphinyl)-ureido7-p-hydroxyben-

zylcarbonamidoj-penicillansäure,

D-6-ία-ZB-(Hydroxy-(äthoxy)-phosphinyl)-ureido7-p-hydroxy-

benzylcarbonamido}—penicillansäure,

D-6-fa-/3~(Hydroxy-(benzyloxy)-phosphinyl)-ureido7-p-hydroxy-

benzylcarbonamidoj-penicillansäure,

D-6-/(X-ZB- (Benzyloxy- (methoxy)-phosphinyl)-ureido7-p-hydroxy-

benzylcarbonamido}-penicillansäure _t

Ώ-6-{α-/3- (Hydroxy- (methoxy )-phosphinyl )-ureido/-p-hydroxy-

benzylcarbonamidoj-penicillansäure,

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2 b 4 B 9 1 O

" -r —

D-6-fa-/3-(Dihydroxyphosphinyl)-ureidq/-p-hydroxybenzylcarbonamidoj-penicillansäure,

D-6-fa-/3-(Benzyloxy-(methyl)-phosphinyl)-ureidoZ-p-hydroxy-

benzylcarbonamido} -penicillansäure,

D-6- fct-/3-(Benzyloxy-(isopropyl)-phosphinyl)-ureidq/-p-hydroxy-

benzylcarbonamido}-penicillansäure,

Ώ-6-{α-/3-(Benzyloxy-(tert.-butyl)-phosphinyl)-ureidoy-p-hydro-

xy-benzylcarbonamido}-penicillansäure,

D-6-{a-/B-(Benzyloxy-(tert.-butoxy)-phosphinyl)-ureido7-p-hy-

droxy-benzy1carbonamido} -ρenicillansäure,

D-6-fa-/3-(Hydroxy-(methyl)-phosphinyl)-ureidoZ-p-hydroxyben-

zylcarbonamido}-penicillansäure,

D-6-fa-/B-(Hydroxy-(isopropyl)-phosphinyl)-ureidq/-p-hydroxy-

benzylcarbonamido}-penicillansäure,

D-6-fa-/B-(Hydroxy-(tert.-butoxy)-phosphinyl)-ureidoZ-p-hydroxy-

benzylcarbonamido}-penicillansäure,

D-6- fa-/3-(Hydroxy-(tert.-butyl)-phosphinyl)-ureidq7-p~hydroxy-

benzylcarbonamido}-penicillansäure,

D-6-fa-/3-(Benzyloxy-(phenoxy)-phosphinyl)-ureidg7-p-hydroxy-

benzylcarbonamido?-penicillansäure,

D-6-/a-/3-(Benzyloxy-(isopropoxy)-phosphinyl)-ureidqZ-p-hydroxy-

benzylcarbonamidoT -penicillansäure,

D-6-£a-/3- (Hydroxy- (phenoxy )-phosphinyl )-ureido/-p-hydroxyben-

zylcarbonamido} -penicillansäure,

D-6- {a-/3-(Diphenoxy)-phosphinyl)-ureidq7-p-hydroxybenzylcarbon-

amido}-penicillansäure,

D-6- {α-/3- (Diäthoxyphosphinyl) -ureidoy'-p-hydroxybenzylcarbon-

amidoj -penicillansäure,

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_ ₅ _ 2B46910

D-6-/α-/^- (Hydroxy- (isopropoxy)-phosphinyl)-ureidq7-p-hydroxybenzylcarbonamidq/-penicillansäure,

ihre Natrium-, Kalium- oder Ammoniumsalze (1-, 2- und 3-wertigen Salze), die pharmakologisch verträglichen Ester mit den Estergruppen der allgemeinen Formel III, und die Verbindung der allgemeinen Formel I, in der Z₁ und/oder Z^ vorzugsweise eine Hydroxylgruppe oder eine Gruppe der allgemeinen Formel OM bedeuten. Besonders die Verbindungen, in denen Z₁ eine Hydroxylgruppe oder eine Gruppe der allgemeinen Formel OM und Z^ eine Methoxy- oder Äthoxygruppe bedeuten, haben antibiotische Wirkung gegenüber Mikroorganismen. Wie üblich zeigt die D-Modifikation dieser Verbindungen die größte Wirkung gegenüber Mikroorganismen.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel I werden dadurch hergestellt, daß man in an sich bekannter Weise eine Verbindung der allgemeinen Formel IV

Q-O

C—NH—CH CH

(IV)

in der Q ein Wasserstoffatom darstellt oder ein Silicium- oder Phosphoratom bedeutet, das niedere Alkyl-, niedere Halogenalkyl-, Aryl-, Aralkyl-, niedere Alkoxy-, Halogenalkoxy-, niedere Alkylthio-, Aralkoxy-, Di-nieder-alkylamino-, niedere Alkoxyalkylreste, Alkylendioxygruppen oder Halogenatome trägt, vorzugsweise eine Tri-nieder-alkylsilylgruppe, insbesondere die

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Trimethylsilylgruppe ist und E¹ eine Garboxylschutzgruppe, vorzugsweise eine Gruppe ist, die gegebenenfalls nach der Umsetzung beispielsweise durch Hydrolyse, Hydrieren oder eine Substitutionsreaktion mit einem basischen oder nucleophilen Reagens leicht entfernt werden kann, wobei diese Gruppe die Umsetzung nicht störend beeinflußt, oder deren pharmakologisch verträglichen Ester mit einer Verbindung der allgemeinen Formel

O=C=N-P

■ l\ (V)

in der Z.J und Z£ die für Z₁ und Z^ angegebene Bedeutung haben oder Gruppen sind, die leicht in die Gruppen Z₁ und Z₂ umgewandelt werden können, in einem organischen Lösungsmittel bei Temperaturen von -30 bis +30⁰C, vorzugsweise -5 bis +5⁰C, vorzugsweise unter wasserfreien Bedingungen umsetzt und gegebenenfalls anschließend die Schutzgruppe E¹ und die Gruppe(n) Q entfernt, wenn Q eine silicium- oder phosphorhaltige Gruppe ist.

Die Verfahrensgemäß eingesetzten Verbindungen der allgemeinen Formel IV können nach bekannten Verfahren hergestellt werden. Beispielsweise kann die Verbindung, in der Q und E¹ Wasserstoffatome bedeuten, das heißt Amoxycillin, nach Verfahren hergestellt werden, die in den britischen Patentschriften 873 049, 959 853, 978 178, 1 339 605 und 1 347 970, den belgischen Patentschriften 676 594, 790 466, 737 848 und 751 106, der niederländischen Offenlegungsschrift 72.15 359, den Südafrikanischen Patentschriften 64/695,66 /1304,67 /5627 und 72/05231

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oder der DT-OS 2 240 422 beschrieben sind. Die Silylderivate und Ester von Amoxycillin, die der Formel IV entsprechen, können in an sich bekannter Weise hergestellt werden.

In einem alternativen Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der allgemeinen Formel I setzt man Phenylessigsäurederivate der allgemeinen Formel VI

Q __O - ξ Υ- CH COOK

in der Q die vorstehende Bedeutung hat und Y' entweder Y oder eine Gruppe ist, die nach der Umsetzung leicht in Y (Y kann unter den Umsetzungsbedingungen angegriffen oder beeinflußt werden) umgewandelt werden kann, mit 6-Aminopenicillansäure oder deren Derivat in Gegenwart eines Carbodiimide, wie Dicyclohexylcarbodiimid oder 1-Äthyl-3(3-dimethylaminopropyl)-carbodiimid, gegebenenfalls im Gemisch mit 1-Hydroxy-benzotriazol, oder 1-Cyclohexyl-3-j 2-(N-methylmorpholino)-äthylr-carbodiimid als Kondensationsmittel, umsetzt.

Als Derivate der 6-Aminopenicillansäure können Verbindungen der allgemeinen Formel VIII

N CH (VIII)

COOS"

609 817/12 4 2

2BÄ691-0

_ 3 —

verwendet werden, in der E" eine salzbildende Gruppe, eine Schutzgruppe, die leicht nach der Umsetzung abgespalten werden kann und sie nicht störend beeinflußt, oder eine zur Verbesserung der Absorptionseigenschaften dienende Gruppe, wie eine Estergruppe, darstellt. Spezielle Beispiele für leicht entfern-

bare Schutzgruppen E" sind gegebenenfalls substituierte Benzylgruppen, wie die p-Nitrobenzyl- oder p-Methoxybenzylgruppe, die Benzhydrylgruppe, gegebenenfalls substituierte Phenacylgruppen, wie p-halogensubstituierte Phenacylgruppen, die 2,2,2-Trichloräthyl-, Trityl-, tert.-Butyl- oder Isobornylgruppe, oder ein Silicium- oder Phosphoratom, die durch gegebenenfalls halogenierte niedere Alkyl ■?, Aryl-, Aralkyl-, gegebenenfalls halogenierte niedere-Alkoxy-, niedere-Alkylthio-, Aralkoxy-, Dinieder-alkylamino-, Nieder-alkoxyalkyl-, Alkylendioxygruppen oder Halogenatome substituiert sind.

Die D(-)-2-Amino-2-(p-hydroxyphenyl)~essigsäure als Ausgangsverbindung zur Herstellung der Säuren der allgemeinen Formel VII oder ihrer reaktionsfähigen Derivate sind aus der DT-OS 2355785 oder der NL-OS Patentveröffentlichung 73.11012 bekannt.

Die Säuren der allgemeinen Formel VI sind ebenfalls Gegenstand der Erfindung.

Zu ihrer Herstellung setzt man eine Verbindung der allgemeinen Formel - ■

(χ)

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in der Q und E¹ die vorstehende Bedeutung haben, mit einer Verbindung der allgemeinen Formel V in einem inerten organischen Lösungsmittel bei Temperaturen von -3O°C bis +30⁰C, vorzugsweise von -5°C bis +5⁰C, und bevorzugt unter wasserfreien Bedingungen um und entfernt anschließend gegebenenfalls die Schutzgruppe E^f und jede andere Schutzgruppe. Vorzugsweise kann die erhaltene Säure der allgemeinen Formel VI direkt in situ mit 6-Aminopenicillansäure oder deren Derivat in eine Verbindung der allgemeinen Formel I umgewandelt werden.

Die Herstellung der Ausgangsverbindungen der allgemeinen Formel V ist beispielsweise in folgenden Druckschriften beschrieben: G.I. Derkatsch, Angew. Chem., Bd. 81, (I969), Seiten 407 - 436, L.I. Samarai et al., Zh. Obshch. Khim, Bd. 39 (1969), S.1511, G.I. Derkach et al., Zh₀ Obshch. Khim, Bd. 38,(1968), Seiten 1784 - 1788, E.S. Gubnitskaya et al., Zh. Obshch. Khim, Bd. 40, (1970), Seiten 1205 - 1210, L.I. Samarai et al., Zh. Obshch. Khim_;Bd. 39, (1969), Seiten 1712 - 1715, A.V. Narbut et al., Zh. Obshch. Khim, Bd. 38, (1968), Seiten 1321 - 1324 und G. Tomaschewski et al., Arch. Pharm._; Bd. 301, (1968) S. 520.

Die Verbindungen der Erfindung werden für therapeutische Zwecke als Ester oder pharmakologisch verträgliche Salze, z.B. als Natrium-, Kalium-, Ammonium- oder Calciumsalze, oder als gut kristallisierbare Salze mit organischen Basen, z.B. Aminen, wie Trialkylaminen, Procain oder Dibenzylamin, eingesetzt.

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2bA69 1 O"

- ΊΟ -

Zur Behandlung bakterieller Infektionen können die erfindungsgemäßen Verbindungen auf die für Antibiotika übliche Weise, z.B. äußerlich, oral oder parenteral, angewandt werden. Sie werden in Dosierungseinheiten verabfolgt, die den Wirkstoff in Kombination mit üblichen Trägerstoffen und/oder Verdünnungsmitteln und/oder Hilfsmitteln enthalten. Als Dosierungseinheiten kommen flüssige Präparate, z.B. Lösungen, Suspensionen, Dispersionen oder Emulsionen, oder feste Präparate, z.B. Pulver, Tabletten oder Kapseln, in Frage.

Gegenstand der Erfindung sind daher ferner Arzneimittel, die gekennzeichnet sind durch einen Gehalt an einer Verbindung der · allgemeinen Formel I sowie üblichen Trägerstoffen und/oder Verdünnungsmitteln und/oder Hilfsstoffen. Die Arzneimittel der Erfindung können neben einer erfindungsgemäßen Verbindung einen oder mehrere andere Arzneistoffe enthalten. Die jeweils erforderliche Wirkstoffkonzentration läßt sich nach üblichen Standardmethoden ermitteln.

Als Trägerstoffe und Hilfsstoffe eignen sich physiologisch verträgliche Substanzen, die die Verabfolgung des Wirkstoffs erleichtern. Die Träger können auch eine Hilfsfunktion übernehmen, indem sie z.B. als Verdünnungsmittel, Aromastoffe, Bindemittel, Verzögerungsmittel oder Stabilisatoren wirken. Beispiele für geeignete Träger sind Wasser, das gegebenenfalls Gelatine enthält, Gummi-arabicum, Alginat, Dextran, Polyvinylpyrrolidon, Natrium-carboxymethylcellulose, wäßriges Äthanol, Sirup, isotonische Kochsalzlösung, isotonische Glucoselösung,

60981 7/ 1 2 Λ 2

Stärke, Lactose und andere üblicherweise in der Human- und Tiermedizin für antibakterielle Mittel eingesetzte Substanzen.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel I können auch als Wachstumsförderer für Wiederkäuer, z.B. Rinder, eingesetzt werden. Sie eignen sich ferner für in-vitro-Anwendungsbereiche, z.B. als Desinfektionsmittel, die etwa 0,1 bis 1 Gewichtsprozent der Verbindungen in einem geeigneten inerten Träger gelöst oder suspendiert enthalten und als Wasch- oder Sprühmittel dienen.

Die antibiotische Aktivität gegen gram-positive und gram-negative Mikroorganismen wird nach folgendem Agar-Reihenverdünnungstest bestimmt:

In einem geeigneten sterilen Träger v/erden Vorratslösungen der zu untersuchenden Verbindungen mit einer Konzentration von 2000 yxg/mL hergestellt. Man verdünnt mit sterilem 1/20 molarem Phosphatpuffer (pH 6,5; KH₂PO^-NaOH) auf das doppelte Volumen und bringt jeweils 1 ml der Lösungen in 19 ml Hirn-Herz-Infusionsagar ein, der sich in sterilen Petrischalen befindet. Die gehärtete Oberfläche wird dann mit den Testorganismen beimpft und 24 Stunden bei 37°C bebrütet. Die minimalen Hemmkonzentration wird in ug/ml ausgedrückt. Die in Klammern gesetzten Werte werden nach folgendem Mikro-Reihenverdünnungstest ermittelt:

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_ -,2 - 2 5 A 6 91 O

2 Tropfen einer Vorratslösung mit bekannter Konzentration werden mit einer sterilen Pasteur-Pipette in das erste Loch einer Testplatte mit 9 Löchern eingebracht. Nach dreimaligem Spülen der Pipette mit physiologischer Kochsalzlösung werden 2 Tropfen einer Vorratslösung der TestOrganismen in einem Kulturmedium in alle Löcher, mit Ausnahme des Lochs 8, pipettiert. Im ersten Loch ist nun die Lösung der Testverbindung auf die Hälfte verdünnt. Man rührt die im ersten Loch erhaltene Lösung, gibt 2 Tropfen des Gemisches in das zweite Loch - usw. bis Loch 8 so daß in geometrischer Progression Verdünnungen der Testverbindungslösung erhalten werden. Das Loch 9 enthält kein Antibiotikum und dient zur Prüfung des Testorganismus-Wachstums im reinen Medium. Die Testplatte wird etwa 18 Stunden bei 30 bzw. 37°C inkubiert.

Die nach dieser Mikromethode bestimmten minimalen Hemmkonzentrationen sind in den folgenden Tabellen in Klammern gesetzt. Die minimalen Hemmkonzentrationen der Verbindungen gemäß Beispiel 4, 5 und 7 wurden bestimmt. Die Ergebnisse sind in Tabelle I zusammengefaßt.

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Tabelle I

	Verbindung	0,4	MHK, v/ml	4	5B	Ampicillin	Carbeni cillin
Testorganismus	5A	6	von Beispiel
		0,75	7
Bacteria		0,5		0,75		. O_;75	0_r1
gram-positiv:	0,45 (1,2)		50	6	0_;8	25
Streotococcus haemolyticus A 1088	, · 0,4	9,75	25	6	0_f05	0.75
Streptococcus faecalis L 80	0.8	12,5	V	(0,06)
Diplococcus pneuir.oniae L 54	100	(12)	<:;?	(1,2)	0,15	0,8 (0,2)1
Sarcina lutea ATCC y341	3	(0,25)		(1,2)	0,15	3
	3	(0,9)	100	3	0,4	0.2
^ram-nesativ:	3	(0,9)	1,5 "	100	25	> 100
Haemophilus suis A 2096	50	12,5	25	6
Bruceila suis A 2126	3 3(6) ·	>100	6	6	3	' 6
	6	50	12,5
Pasteurella multocida A 723	25	6 . 3(15)	25	>100	*50 ■■"**
Klebsiella pneumoniae A 809	25		12,5 3(4)	50 50	O > 50 CO 37 c>
Salmonella dublin P 43	50
Salmonella typhimurium R 172	12,5 3(3,7)
Escherichia coli U 20

Pseudomonas aerucjinosa H 10
2396 A 1058

Tabelle I -

Fortsetzung

- 14 -

en ο co co

	• - MHK, y/ml	7	4	5B	Ampi cillin	Carbeni cillin
	Verbindung von Beispiel	0,5 V 50	0,25 0,5 0,5 1;5(045] >100	0,25 If» °'⁵ 50 .	co co co co	0,3 0,8 0,4
	5Ä
Proteus rettgeri A 821	O₇OS 0,5 O₇12 0,75 (0,3) 50
Proteus mirabilis H 3
L 93 A 1200 Proteus morganii 2241

Bei in vivo Untersuchungen wurden die in Tabelle II zusammengefaßten Ergebnisse erhalten:

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Tabelle II

σ> ο co

	Std.	Dosis: 10	p.o.	mg/kg	p.o.	Beispiel	p.o.	■Beispiel 5A	p.O.	Carbenicillin	p.o.
	1/4	Beispiel 7	<0,25	Beispiel •5B	0,3	i.m.	<2,5	i.m.	<O,57	i.m.	<0.25
		i.m.		i.m.		27,7		23,4		14,0
	1/2	81,3	<0,25	25_;3	0,3		<2 5		0.64		<O,25
Serumspiegel·,						20,4		19,7		6.1	/
	1	68,0	<O,25	18,3	0,3		<2 5		0_;64		<0.25
y/ml,						9_r2		13,0		. ^fI
	2	.38,3	<0_;25	10-3	<0,2		<2_/5		<0,54		<0.25
nach Std. ·. , \	4		<O_;25		«0_;05	<2_/5	<2,5	4)7	<0,5	<O_;25	<0.25
	6		3,3	* 3,3	13,4	<2_;5	27,0	0,6	<0_;62	<0,2₅	<1_;4*
	24	0,43	V	■ - ■	20,8	63_;5	<29_;9	45,8	<1_>22	76,6	<2_;6
im Urin ausge schiedene Ver		333	102		8O_;9		<63,O		77,9
bindung,' %	346	110

TsS cn *>»

■CD CO

Der in Tabelle III aufgeführte ABA-Test wird an Gruppen von 6 weiblichen Mäusen (Swiss SPF) mit einem Körpergewicht von ungefähr 20 g durchgeführt.

Nach intraperitonealer und oraler Veräbfolgung der Testverbindung in einer Dosis von 100 mg/kg in physiologischer Kochsalzlösung werden Blut- und Urinproben entnommen.

Der Gehalt der verabfolgten Verbindungen in diesen Proben wird qualitativ nach dem Test von Vincent bestimmt. Dabei wird der Durchmesser der Hemmzonen um Papierscheiben von 7 mm Durchmesser gemessen,die mit der Probe getränkt sind und sich auf einem Agar-Kulturmedium in einer Petrischale befinden, in der der Mikroorganismus gezüchtet wird. Die Mittelwerte von zwei oder drei unabhängigen Untersuchungen sind angegeben. Für die quantitative Bestimmung des Gehalts der Testverbindung in Blutproben werden die Durchmesser der Hemmzonen um die Papierscheiben, die mit der Probe und mit Proben einer Reihe von Standardlösungen der zu testenden Verbindung im Serum getränkt sind, gemessen und der unbekannte Gehalt mittels einer Standardlinie bestimmt.

Die Schutztests, die ebenfalls in den folgenden Tabellen angeführt sind, werden an Gruppen von 10 weiblichen Mäusen (Swiss SPF) durchgeführt. Die Mäuse jeder Gruppe werden intraperitoneal mit einem bestimmten Mikroorganismus infiziert. Anschließend wird eine Lösung der Testverbindung fünfmal pro Tag verabfolgt. Die Behandlung dauert 1 Tag, während die Beobachtung der ge-

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testeten Tiere 7 Tage dauert. Die ED^Q-Werte und das Wirkungsverhältnis hinsichtlich der aufgeführten Vergleichsverbindungen werden durch Probit-Analyse bestimmt.

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Tabelle III

Chemotherapeutische Wirkung von

O CO CX)

Il

CH-C-KH-CH-MH

C=O

HH

I ^. OCH,
Ο=ΡΓ ⁵

OKa

[-COOlTa

■Antibakteriell«- •Wirkung im Urin von ^Mäusen, Hemmzonen von ■ entzogenem.Urin nach 2.1/2 Std, ,in mm=ABA- gepcenüber	Dosis .100 mg/ kg ι	ABA	MHK /7«a	Schutztest an Mäusen —-■-	co ι A Ö O-H I -H £>U Φτ-f CDi	Wfrkungs verh'äl tni s	breic] S. Ot	■ MHK y/ml	-
Staphylococcus	i.p. p. ο.		-	Infektion i.p.		Vera art i.p·		5
Jt&pliylococcua aur» A 2001	i.p. p.ο.	52 26	12/5 (155	Staphyl.anr A 521
3tAphyloooocU3 aur. A 355	i.p· ρ.ο.	12 7	100 (60)	Staphyl«aur. A 2001
ßacberiohia coil U 20	i.p» p.ο.	22 10	12,5	Stf>.phvl.Gur ι A 555
Klebsiölla pneunw A 609	i'P. ρ ·. ο.	7 7	100	Eschar,ooli	•
Jftlinon. -tiTphiraur · R 172	i.p. P-O.	25 16	6	Klebs.pnewn« *
Sityphircur. R ·. IZ		bungs- p.o.



•

Tabelle III - Fortsetzung

CD CX)

Proteus nirabil. A 1200	a P	.p. .Ό.	28 14	0,5	Protsi A '	iäusen irc.lut. Verab reichung	Cai'b,	0/93	5;4	und Ui i.m.	0,75 (0/45)
?rote\is mirabil. H 3	i.p.	32 17 26 16	0,25.	is mirab. 1200	i.p. 23 p.o. 1,6				25,3
Proteus mirabil. L 91	i.p. p.o.	7 7	50	Proteus mirab.	i.p. 27 p..Q. 14			110
Proteiis rettgeri Λ 821	i.p. p.o.	19 7	3 (4)	Proteus niirab.	i.p. i i/2 Std. p.o. 1/2 Std.	Carb. Aajpi.	y 0,91
Proteus morganii 2241	i.p. p.p.	52 47		Proteus rettg. A 621
Pseudomonas aerug.: A 1030	i.p. p.o.		Proteus niorßan. 2241	Carb.	1/67
Sarcina lutea ATCC 9341	i.p. p.o		Pseud.aerug. A IO53
Blutspiegel bei 1 Testorganismus Si ATCC 9341 Dosis: 100 mg/kg	•		Bestimmung des Blut spiegels an Kaninchen Dosis: 10 mg/kg	'in- p.o.
max.Blutspiegel γ/ml		Max. Serumspiegel y/ml (i.m. = i/4Std/p.o. = i/4Std.	0,3
max. Hemmzone, mm		Ausscheidung nach 24 Std. %	20,8
erkennbare Hemm zonen

Tabelle III - Fortsetzung

Chemotherapeutische Wirkung von

O=H

CH-C-NH-CH- Ψ O=J

C₂H₅ 0-Na

CCH₃I

CH-COONa

Antibakterielle Wirkung im Urin von Mäusen, .. Hemmzonen von entzogenem Urin nach 2 1/2 Std. in mm=ABA gegenüber	Dosis: 100 mg/kg	ABA	MHK y/ml	ι Schutztest- an. Mäusen	CO I A Ö • O ·Η (CH OE	■ I	Wirkungsverhältnis	MHK y/ml
StaphylococoÜ3 aur.	i.p. p.o.			Infektion i.p·			Verat i.p.
St&phvlococcus oxer. A 2001	i.p. p.x>.	22 15	25 (11)	Staphyl.aur A 321
Staphylccoccua aur. Λ 555	i.p. PtO.	11 7	100 (30)	Staphyl.aur· A 2001
JSscherichia coli U 20	i.pe p.o.	24 10	5	Staphyl.aur. A 355	*
Klebsiella pneuin. A 809	i.p. p.. 0.	7 7	>100	Escher.ooli I
5 ölmon. tyiphinur. R 172 *	i.p. p.o.	26 11	6'	Klebs.pneun.
S.typhiruur. R V/2
»reich art 8.0·






ungs- p.o.

Tabelle III - Fortsetzung

Protems ntratoil. A .1200	i.p. p.Q. i.p. p.Q*	26 13	o_;5	Protouo mirab· A 1200	i.p. 37 p.o. 2	Oarb. A-TiOX.	2,?·	2_f62	Bestimmung des Blut- unc spiegeis an Kaninchen, Dosis: 10 mg/kg	o;i6	0,75 ί (0_y5)
: Proteus mirabil. ί H 3	i.p. p.o.	31 16	0_;12	Protons närab.	i.p. 23 p.o. 9				Max. Serumspiegel y/ml (i.m. = 1/2 Std/p.o. = 1/2 Std.
j Proteua rsirabil. : L ?5	i.p. p.Q.	31 13	C_;06	Proteus jnirab.	i.p. 1/2Std. p.o. i/2Std.			Ausscheidung nach 24 Std., %
: Proteus rcttgsri A 821	i.p. p.o.	7 7	50	Proteus rettff. A 921
Pi'ot.ou3 morg?_nii 2241	i.p. p.o.	19 8	(6)	Proteus inorgan 22/11		•
Pseu<3.o;nonas asrugt ^: .A 1058	i.p. p.o.	51 41		Pseud#aenig« A 1058	Carbi
S&rcina lutca __ ATCC 9341	lausen ire. lut Verab reichung
Blutspiegel bei J Testorganismus Se ATCC 9341 Dosis: 100 mg/kg			L Urin- i.m.	p.o.
max.Blutspiegel jy/ml			23,4	0,64
max.Hemmzone, mm		46-63	0.22
erkennbare Hemmzonen

Tabelle III - Fortsetzung

Chemotherapeutische Wirkung von

COOLTa

Antibakterielle Wirkung im Urin von Mäusen, Hemmzonen von entzoge nem Urin nach 2 1/2 Std.- in mm=ABA gegenüber	Dosis: j 100 mg/kg	AJBA	MHK y/ml	Schutztest an Mäusen	«1 I ÄÖ O-H u out	■	Wirkungsverhältnis
- - "— ■"■' ^u', " Staphylococcus aur.	i.p. p.o.			Infektion i.p»		•	jVeral art i»P«
Staphylococcus aur. A 2001	i.p. p.o.	15 8	50 (25)	3-tapliyl.aur A 521
Staphylococcus aur. A 355	i.p. p.o.	12 7	50 (50)	Staphyl.eiur« A 2001	•
ßscberichift ooli Ü 20	i.p· p.o.	25 10	6	Stapliyl.awr« A 555
'Klebsiclla. pnoura« A 60p	i«P» p.o.	$ 7	100	Ks eher.ooli *
5 ftlrcon. typhiwar. · R V/2	i»T)* p.o.	26 12	25	Klobo.pneunii
Sttyphisiur« R 172
Drei et 0.0·






lungs- MHK P.O. \|r/riL






6

	i.p. p.O.	Tabelle III - Fortsetzung	50 15	Verab reichung	J	0.5	Proteus nir&b. A 1200 .	19 4	Carb.	ad Uri] i.m.	- 24
Pj .'teu3 mirabil. A 1200	i.p. p.o.		55 16	i.p p.o		0,5	Proteua mirab.	22 12		27,7
Proteus mirubil. H 5	i.p. p.o.	26 14	i.p p.o	0.25	Pi'otsus Jnirab.	L 1/2Std. i/2Std.
j Protoun mirabil. h 95	i.])t p.o.	7 7	i.p p.o	>100	Protouo rettg. A 021		80,9
Proteus rottgeri A 621 ·	i.p. p.o.	19 7		5 (15)	Pro Io us r.iorGan 224I
Proteus iuorganii 2241	i.p. p.o.	55 44			Pseud.aerus· Λ 1038	Carb·
Püiudomonas aerug. A 1053	i.p. p.o.	Blutspiegel bei Mäusen Tes torgani smus Sarc.lut. ATCC 9341
Saroina lutoa ^ATCC 9541	Dosis: 100 mg/kg
				P.O.
	max.Blutspiegel y/ml		<2,5
max. Hemmzone, mm-
erkennbare Hemm zonen		i>27-<3C











Bestimmung des Blut- u] spiegeis an Kaninchen, Dosis: 10 mg;/k£
Max. Serumspiegel y/ml (i.m. = 1/2 Std/p.o. - 1/2 Std.
Ausscheidung nach
24 Std. %

K3! CP

Tabelle III - Fortsetzung

Chemotherapeutische Wirkung von

CD CZ CO OC

I-COOHa

'GWa

Antibakterielle Wirkung im Urin von Mäusen, Hemmzonen von entzoge	Dosis 100 mi	A3A	MHK <v/ml·	Schutztest an	ω ι	Mäusen	breicl t 0.0«	" MHK y/nü	•
nem Urin nach 2 1/2 Std in mm=A3A gegenüber	i.p» ρ.·ο.		,1 ■ I	Infektion	■ ϋ·Η I -H₁QtI₁ φηφ:	Wirkungsverhältnis		6
	i.p. p.0.			i»p.		Vera ar i.p.
	i«P· p.0.		50 (15)	Staphyl.aiir A 321
	i.p. p.0.	15 7	100 (60)	Siaphyl.aur. A 2001
Staphylococcus aur.	i.p. P · 0.	28 7	25	Str-phyl.&vsr. A 555
Staphylococcus aur- A- 2001	i.p» p.o.	7 7	>100	Bschor.ooli	•
Stnphj'3 ococcua nur . A 355	55 16	25 ¹ -'	iClebSipjisurn« *			lungs- p.o.
JBsnhorichin, coil U 20	5. typliirr.ur * R 172
Klebsieila pnetun· ^: A eO9
S alrnoTi. typhiirw»' il 172


•

Tabelle III - Fortsetzung

Proteus jnirabil,
I A 1200

i .p.
p.o

52
7

1.5

P-
O.

Proteus r.iir&b.
A 1200

134

Carb,

1

10,o

- und
en,
i.m.

346

(1,2)

Proteus jnirabil. .
H 3

i »p.
p-.o.

36
8

1,5

P-
O.

Proteua ndrab.

38
7

81 3

Proteus iairabil.

i.p.
p.o

24
8

0.25

P-
O.

Proteus r,drab.

2 1/2Std.

(i.m. = 1/2 Std./p.o.
- 1/2 Std.)

Proteus rett&ari
A 021

i.p.
p.o

7
7

50

Proteus rettg.
A 821

Ausscheidung nach

Proteus morcanii
2241

i.p»
p.o.

20
7

3
(3.7)

Protüus morgan
2241

24 Std. %

Pceu&ononas aoru£.
Λ 1053

i.p.
p.o.

60
34

Poeud.aerug.
Λ 1053

Carb,

1/27

Sf.roina lutaa
„_.ATCO 9341

i.p.
pva.!

Mäusen
Sarc.lut.

Blutspiegel bei
Testorganismus
ATCC 9341

Dosis: 100 mg/kg

Verab
reichung

Bestimmung, des Blut
spiegeis an Kaninch
Dosis: 10 mg/kff

Urin-
■p.o.

max.Blutspiegel
γ /ml

1.
P.

Max. Serumspiegel
v /ml

<0,25

max.Hemmzone,
mm

i.
P-

erkennbare Hemm
zonen

1.
P-

f.

O

Die Beispiele erläutern die Erfindung.

Beispiel 1

Natriumsalz der D-6- /a-ZB- (Benzyloxy- (äthyl) -phosphinyl) ureidoZ-p-hydroxybenzylcarbonamidoZ-penicillansaure

ÄthanphosphonsäurediChlorid (C₂H₅POCl₂) vom Kp. 78°C/30 Torr wird in 66,6prozentiger Ausbeute aus Ithylbromid und Aluminiumchlorid-Phosphortrichlorid nach Houben-Weyl Bd. 12/1, S. 397, hergestellt. Nach einer Standardmethode durch Umsetzen mit Benzylalkohol/Pyridin und anschließend mit flüssigem Ammoniak in Diäthyläther wird das Dichlorid in 43,7prozentiger Ausbeute in das Ä'thanphosphonsäurebenzylesteramid /CoHcP(O)(OCH₂CgHc)NH₂/ umgewandelt. Das stark hygroskopische Phosphonsäureamid wird isoliert und nach einer weiteren Standardmethode mit Phosgen/Pyridin in Toluol in das Äthyl-(benzyloxy)-phosphonylisocyanat /C₂H₅P(O)(OCH₂C₆H₅)NCOy umgewandelt. 1 Mol Phosphonsäureamid wird dabei mit einem Gemisch von 1 Mol Phosgen und 2,5 Mol Pyridin bei einer Temperatur von -60⁰C versetzt. Anschließend wird die Temperatur langsam auf -10°C angehoben. Danach wird zusätzlich etwa 90 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Das erhaltene

6U98 17/1242

Gemisch wird unter wasserfreien Bedingungen filtriert. Das FiI-trat wird unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft. Die Menge des Isocyanats im Rohprodukt wird durch IR-Spektroskopie bestimmt.

Unter wasserfreien Bedingungen werden 6,5 ml (etwa 26 mMol) Ν,Ο-Bis-trimethylsilyl-acetamid (BSA) bei Raumtemperatur rasch mit einer Suspension von 4,75 g (etwa 13 mMol) reiner, aber nicht wasserfreier D(-)-(6-a-Amino-p-hydroxybenzyl-carbonamido)-penicillansäure (Amoxycillin), die wahrscheinlich etwa 1,0 bis 1,5 Mol Wasser pro Mol Penicillin enthält, in 25 ml Methylenchlorid versetzt. Das erhaltene Gemisch wird nach 10 Minuten klar und wird 90 Minuten bei Raumtemperatur weiter gerührt. Die klare Lösung wird im Eisbad auf +5⁰C abgekühlt und mit einer Lösung der etwa äquimolekularen Menge des vorstehenden Isocyanats, das in roher Form aus 30 mMol Äthanphosphonsäurebenzylesterisocyanat hergestellt wurde, in 30 ml Methylenchlorid tropfenweise bei einer Temperatur von 0° bis 5°C versetzt. Der Fortgang der Umwandlung des Amoxycillins wird dünnschichtchromatographisch (Kieselgel; 5:4:1 Gemisch von Athylacetat, Aceton und Essigsäure; Doppelflecken bei einem R^-Wert von ungefähr 0,7) verfolgt. Das Gemisch wird bei einer Temperatur von etwa 5⁰C gerührt. Nach ungefähr 30minütigem Rühren wird eine mäßige Umwandlung zum entsprechenden Penicillin erreicht. Da das Ergebnis nach 60-minütigem Rühren nicht besser ist, wird das Reaktionsgemisch in üblicher Weise aufgearbeitet. Nach einem Zusatz von etwas Äthylacetat wird das Reaktionsgemisch unter vermindertem Druck auf ein kleines Volumen eingeengt und anschließend in ein 1 : 1-Gemisch von Diäthyläther und Eiswasser mit einem pH-Wert

6U9Ö17/12A2

I b U b 9 1 Ü

von 7,0 gegossen. Die Schichten werden getrennt. Die organische Schicht wird verworfen, während die wäßrige Schicht mehrmals mit einem 1 : 1-Gemisch von Äthylacetat und Diäthyläther gewaschen wird. Die verbleibende wäßrige Lösung wird auf einen pH-Wert von 3,8 angesäuert und 10-mal mit dem gleichen Volumen von Äthylacetat extrahiert. Die Extrakte werden vereinigt, viermal mit 20 ml mit Kochsalz gesättigtem Eiswasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und unter vermindertem Druck auf ein Volumen von etwa 500 ml eingeengt. Eine kleine Menge eines Niederschlags wird abfiltriert. Anschließend wird eine Lösung von Natrium-oc-äthyl-hexanoat in Äthylacetat zugegeben. Der erhaltene Niederschlag wird abfiltriert, mit wasserfreiem Äthylacetat und Diäthyläther gewaschen und unter vermindertem Druck getrocknet. Ausbeute der Titelverbindung 3,3 g (ungefähr 40 °/a d. Th., bezogen auf Amoxycillin; ungefähr 18 % d. Th., bezogen auf das Phosphonamid). Die Reinheit des Endprodukts liegt nach der Dünnschichtchromatographie, den IR- und PMR-Spektren über 90 %.

Die asymmetrische substituierte phosphorhaltige Gruppe im Produkt bildet ein chirales Zentrum. Deshalb kann die Verbindung in zwei Formen vorkommen. Mit diesem speziellen Penicillin zeigt sich dieses Phänomen in Dünnschichtehromatogrammen (zwei angrenzende Flecken) und in den PMR-Spektren. IR-Spektrum in KBr: +_ 3100-3500 (breite und intensive Bande), Schultern bei etwa 3080, 3000, 2930 und 2900, 1765, etwa I69O (Schulter), 1665, 1600-1620, 1520, 1460, +. 1400, 1325, etwa 1260-1180, + 1020, 915, 850 und 745 cm"¹.

6 ü 9 Ö *l 7 / 1 2 Λ 2

' ³⁰ " 2b4691 O

PMR-Spektrum (d^-DMSO, 60 MHz, 2,2-Dimethylsilapentan-5-sulfonat (DSS) als Standard, δ-Werte in ppm): ein sehr komplizierter HH-Absorptionsbereich von etwa 0,7 bis 2,2 einschließlich der Singuletts bei 1,45 und 1,57; 3,98 (s, 1H), 4,95 (Zentrum von zwei Dubletts, δ vat 0,7, J ~ 7,6 Hz, 2H), ungefähr 5,3 bis 5,5 (m, 3H), 6,65 bis 7,25 (q) und etwa 7,3 (2 Signale, zusammen 9H); 7,7 (d, J^ 7,5 Hz, 0,8H), etwa 8,4 (breit, ungefähr 0,6H), 8,85 (d, J« 8,5 Hz, 0,8H).

Beispiel 2

Natriumsalz der D-6-/a-/3-(Benzyloxy-(äthoxy)-phosphinyl)-ureidoZ-p-hydroxybenzylcarbonamido^-penicillansaure

CH-COONa

Ausgehend von dem Phosphorsäureäthylesterdichlorid (CpHt-OP(O)CIp) wird rohes Benzyloxy-(äthoxy)-phosphinylamid /(C₆H₅CH₂O)(C₂H₅O)P(O)NH₂/ nach einer Standardmethode durch Umsetzung mit Benzylalkohol/Pyridin und anschließend mit Überschuß flüssigem Ammoniak in Diäthyläther hergestellt. Das rohe Amid (ungefähr 30 mMol) wird gemäß Beispiel 1 in das rohe Benzyloxy-(äthoxy-)-phosphonylisocyanat /"(CgH₅CH₂O) (C₂H₅O)P(O)-NCOy umgewandelt, das nach der IR-Spektroskopie etwa 15 mMol des Isocyanats enthält.

609817/1242

Gemäß Beispiel 1 wird eine Suspension von 5,5 g (etwa 15 mMol) Amoxycillin in 25 ml Methylenchlorid bei Raumtemperatur mit 7,5 ml (etwa 30 mMol) BSA behandelt. Es wird weitere 60 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Anschließend wird die klare Lösung auf O⁰C abgekühlt. Die Lösung wird mit einer Lösung des vorstehenden Phosphonylisocyanat in 25 ml Methylenchlorid innerhalb von etwa 5 Minuten bei Temperaturen von 0° bis 5°C versetzt. Wenige Minuten nach beendeter Zugabe wird ein Dünnschichtchromatogramm aufgenommen. Es zeigt eine zufriedenstellende Umwandlung des Amoxycillins in das entsprechende Penicillin (R~-Wert bei etwa 0,65 auf Kieselgel mit einem 5 ί 4 : 1 -Gemisch von Athylacetat, Aceton und Essigsäure). Das Reaktionsgemisch wird mit Eiswasser vom pH-Wert 7,0 und etwas Äthylacetat vermischt. Anschließend wird das Methylenchlorid unter vermindertem Druck abdestilliert und die wäßrige Lösung bei einem pH-Wert von 7,0 dreimal mit einem 1 : 1-Gemisch von Äthylacetat und Diäthyläther gewaschen. Mit dem gleichen Gemisch wird das Penicillin aus der wäßrigen Lösung bei einem pH-Wert von 3,5 bis 4,0 extrahiert. Die vereinigten sauren Extrakte werden wiederholt mit etwas mit Kochsalz gesättigtem Eiswasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und unter vermindertem Druck eingeengt. Die Endlösung in Äthylacetat wird mit einer Lösung von Natrium-α-äthylhexanoat in Äthylacetat versetzt und gemäß Beispiel 1 aufgearbeitet. Ausbeute der Titelverbindung 8,0 g (etwa 80 % d.Th., bezogen auf das Amoxycillin, etwa 40 % d.Th., bezogen auf das rohe Benzyloxy-(äthoxy)-phosphinylamid). Die Dünnschichtchromatogramme und die PMR-Spektren zeigen eine Reinheit von mindestens 95 % an.

609817/1242

IR-Spektrum in KBr: ungefähr 3200-3600 (breite und intensive Bande), Schultern bei ungefähr 3060 und 2935, 2980, 1768, ungefähr 1690 (Schulter), 1670, 1610, 1535 (Schulter), 1515, 1480, 1400, 1375 (Schulter), ungefähr 1220-1260, 1180, 1138, 1040 und 1020, 920, 840, 745, 700cm"¹.

PMR-Spektrum (ein etwa 4 : 1-Gemisch von dg-DMSO und DCO₂D, 60 MHz, DSS, δ-Werte in ppm): 1,26 (Zentrum von zwei benachbarten Tripletts, J<^7,5 Hz), 1,46 (s) und 1,58 (s) (zusammen 9H); ungefähr 3,85 bis 4,35 (m) und 4,27 (s) (zusammen 3H); 5,35 bis 3,6 (AB-q , Ji^ 4,1 Hz) und 5,46 (s) (zusammen 3H); 6,7 bis 7,3 (q-ähnlich, J^8,5 Hz) und ungefähr 7,4 (Doppelsignal) (zusammen 9H).

Das Spektrum der Verbindung in DMSO weist üblich drei NH-Absorptionen, zwei Dubletts bei ungefähr 7,7 und 8,9 und eine breite Absorption bei ungefähr 8,7 auf.

In analoger Weise wird das Natriumsalz der D-6-/a-/3-(Benzyloxy-(methoxy)-phosphinyl)-ureido/-p-hydroxybenzylcarbonamidoJ-penicillansäure hergestellt.

IR-Spektrum in KBr: + 3300-3500 (breit und intensive Bande), + 3050 (Schulter), + 2950 (Schulter), 1765, ungefähr I69O (Schulter), 1660, 1590-1610, 1550 (Schulter), 1515, 1460, 1400, 1325, ungefähr 1220-1280, 1180 (Schulter), 1135, 1045 (intensive Bande) mit Schultern, 930, 850, 790, 745, 700 cm"¹. PMR-Spektrum (Dg-DMSO, 60 MHz, DSS, δ-Werte in ppm): 1,46 und 1,56 (6H), 3,69 (Zentrum zwei benachbarter Dubletts, 6V^ 1,3 Hz, Jar 11,7 Hz, 3H), 3,98 (s, 1H), 5,05 (Zentrum zwei benachbarter Dubletts, δ ν«« 0,5 Hz, J« 7,5 Hz, 2H) ungefähr 5,25 bis 5,6

6 Ü 9 8 1 7/1 2 4 2

2b4691Ü

(m, 3H), 6,65 bis 7,3 (q) und ungefähr 7,35 (2 Signale) (zusammen 9H), 7,8 (d, J^ 8 Hz, 0,8 H), ungefähr 8,4 (sehr breite Bande, <1H), 8,9 (J» 8 Hz, 0,8H).

Beispiel 3

Natriumsalz der D-6-/a-/3-(Dibenzyloxyphosphinyl)-ureido/-p-hydroxybenzylcarbonamidoj-penicillansäure

⁰ V^S

/^cH-C-NH-CH CH C(CH^ ) _o

¹ ' CH-CCONa

O=Pi

Nach der Methode von O.H. Friedman und Mitarb., J. Am. Chem. Soc, Bd. 76 (1954), S. 916, wird Phosphortrichlorid in Gegenwart von Pyridin mit drei Äquivalenten Benzylalkohol in wasserfreiem Benzol umgesetzt. Es wird der Phosphonsäuredibenzylester /(C₆H₅CH₂O)₂P(O)H/ in 78,6prozentiger Ausbeute erhalten. Diese Verbindung wird in wasserfreiem Tetrachlorkohlenstoff gelöst. Anschließend wird in die Lösung Ammoniakgas eingeleitet, wobei die maximale Umsetzungstemperatür bei 38 C liegt. Einschließlich des Umkristallisierens aus Tetrachlorkohlenstoff wird das Phosphonsäuredibenzylesteramid /(CgH₅CH₂O)pP(0)NHp7 mit einem F. von 104 bis 105⁰C in 84,4proζentiger Ausbeute erhalten. Diese Verbindung wird gemäß Beispiel 1 zu rohem (Dibenzyloxy-phosphoryl)-isocyanat /(CgH₅CH₂O)₂P(O)NCO/ umgewandelte

60981 7/ 1 242

Gemäß Beispiel 1 wird eine Suspension von 2,2 g (etwa 6 mMol) Amoxycillin in 10 ml Methylenchlorid bei Raumtemperatur mit 3 ml (etwa 12 mMol) BSA versetzt und 60 Minuten gerührt. Anschließend wird die erhaltene klare Lösung auf 0⁰C abgekühlt und mit einer Lösung von etwa 6 mMol des Phosphorylisocyanats in 15 ml Methylenchlorid tropfenweise versetzt. Die Umsetzungstemperatur wird auf 0 bis+5 C eingestellt. Nach wenigen Minuten wird ein Dünnschichtchromatogramm aufgenommen. Es zeigt eine zufriedenstellende Umwandlung in das entsprechende Penicillin (R^-Wert bei ungefähr 0,6 auf Kieselgel mit einem 5 ! 4 ! 1-Gemisch von Äthylacetat, Aceton und Essigsäure). Das Umsetzungsgemisch wird bei einem pH-Wert von 7,0 in ein Gemisch von 100 ml Eiswasser und 100 ml Diäthyläther gegossen. Um ein klares Zweischichtensystem zu erhalten, werden 300 ml Eiswasser und etwas Kochsalz zugegeben. Die Schichten werden getrennt. Die organische Schicht wird verworfen, während die wäßrige Schicht mehrmals mit Diäthyläther bei einem pH-Wert von 7,0 gewaschen wird. Die zurückbleibende wäßrige Schicht wird mit verdünnter Salzsäure angesäuert und mit Äthylacetat bei einem pH-Wert von 3,5 bis 4,0 extrahiert. Aus diesen Extrakten werden gemäß Beispiel 1 und 2 3,9 g (Ausbeute ungefähr 90 % d.Th., bezogen auf Amoxycillin, und ungefähr 55 % d.Th.■ bezogen auf das Phosphorsäureamid) der im wesentlichen reinen Titelverbindung erhalten.

IR-Spektrum in KBr: etwa 3200-3500 (breite und intensive Bande), Schulter bei 3050 und 2980, 1780, 1680, 1620, 1560 (Schulter), 1520, 1465, + 1400, 1330, 1230-1270, 1190 (Schulter), 1140 (Schulter), 1030 mit Schultern bei 1050 und 1015, 935, 750, 710 cm"¹.

60981 7/ 1242

■ ³⁵ " ■ 2S4691Q

PMR-Spektrum (dg-DMSO, 60 MHz, DSS, δ-Werte in ppm): 1,45 und 1,56 (6H), 4,05 (s, 1H), 5,05 (d, J* 7,5 Hz, 4H), ungefähr 5,2 bis 5,6 (m, 3H), 6,65 bis 7,3 (q-ähnlich, J^ 8 Hz) und 7,35 (zusammen 14H); 7,7 (d,^ 8 Hz, ungefähr 0,8 H), ungefähr 8,9 (d und breites s, ungefähr 1,4 H).

Beispiel 4

Dinatriumsalz der Ώ-β-{α-/3-(Hydroxy-(äthyl)-phosphinyl)-ureido/-p-hydroxybenzylcarbonamidq/-penicillansäure

3,06 g (4,8 mMol) des gemäß Beispiel 1 hergestellten Natriumsalzes der D-6-/cc-/3- (Benzyloxy- (äthyl)-phosphinyl)-ureidqZ-phydroxybenzylcarbonamidoj-penicillansäure werden in einem eiskalten Gemisch von 35 ml Äthanol und 5 ml Wasser gelöst. Die mit einem Magnetrührer gerührte Lösung wird mit 1,5g 10prozentigem Palladium-auf-Kohlenstoff versetzt und unter kontinuierlichem Kühlen mit Eis wird Wasserstoff bei Atmosphärendruck über die Oberfläche der Lösung geleitet. Während der Reduktion werden 410 mg (4,9 mMol) Natriumbicarbonat in kleinen Anteilen zugegeben. Da die Reduktion nach 4 Stunden noch nicht beendet ist, wird das Hydriergefäß noch 16 bis 18 Stunden bei O⁰C stehengelassen. Anschließend werden weitere 1 g Katalysator und 10 ml Äthanol zugegeben, und es wird solange Wasserstoff

6 0 98 177-1 2 42

eingeleitet, bis die Reduktion nach einigen Stunden vollständig abgelaufen ist. Das Gemisch wird durch eine Filterhilfe mittels einer Saugpumpe abfiltriert. Das Filtrat wird unter vermindertem Druck eingedampft. Der Rückstand wird mit wasserfreiem Äthanol und Benzol versetzt. Dieses Gemisch wird unter vermindertem Druck eingedampft. Anschließend wird der Rückstand in wenig Wasser gelöst. Das Volumen der Lösung wird durch Zugabe von Äthanol verdoppelt. Danach wird Aceton zugegeben, bis eine leichte Trübung erscheint. Unter gleichzeitigem Rühren wird eine Filterhilfe zugegeben und das Gemisch filtriert. Das Filtrat wird mit wasserfreiem Aceton versetzt. Der erhaltene Niederschlag wird abfiltriert, mit Aceton gewaschen und unter vermindertem Druck getrocknet. Ausbeute der Titelverbindung 2,6 g (ungefähr 90 % d.Th.XDie Reinheit des Endproduktes beträgt mindestens 90 %. Nach dem Dünnschichtchromatogramm mit Kieselgel und einem 4:1:1 Gemisch von n-Butanol, Essigsäure und Wasser hat die Verbindung einen R^-Wert von ungefähr 0,1. IR-Spektrum in KBr: 3100-3600 (breite und intensive Bande), ungefähr 3050 (Schulter), 2980, 1765, 1640-1660, 1600-1615, ungefähr 1560 (Schulter);1515, 1460, 1400, 1370, + 1325, + 1275, 1240, 1180, 1135 (Schulter), 1060, 900, 850, ungefähr 730 cm"¹.

PMR-Spektrum (ein ungefähr 4 : 1-Gemisch von dg-DMSO und 60 MHz, DSS, δ-Werte in ppm): ein sehr komplizierter 11H-Absorptionsbereich von ungefähr 0,7 bis 2,2 einschließlich der Singuletts bei 1,46 und 1,59; 4,24 (s, 1H), von ungefähr 5,3 bis 5,6 (AB-q mit J» 4 Hz und s, 3H), 6,7 bis 7,3 (q-ähnlich, J^ 8,0 Hz, 4H).

6U98 1 7/ 1 2

2B4691Q

Beispiel 5

Dinatriumsalz der D-6-£a-/3-(Hydroxyäthoxy)-phosphinyl)-ureidq/-p-hydroxybenzylcarbonamido3~penicillansäure

Wasserstoff wird gemäß Beispiel 4 "bei O⁰C über die Oberfläche eines mit einem Magnetrührer gerührten Gemisches geleitet, das aus 3 g lOprozentigem Palladium-auf-Kohlenstoff und einer Lösung von 6,3 g (9j 7 iriMol) gemäß Beispiel 2 hergestelltem Natriumsalz der D-6-/α-/3-(Benzyloxy-(äthoxy)-phosphinyl)-ureido/-p-hydroxybenzylcarbonamido3--penicillansäure in einem Gemisch von 60 ml Äthanol und 10 ml Wasser besteht. Während der katalytischen Hydrierung wird eine Lösung von 0,82 g (9,7 inMol) Natriumbicarbonat in 3 ml Wasser anteilsweise zugegeben. Die Reduktion ist nach 5 1/2 Stunden vollständig abgelaufen. Das Umsetzungsgemisch wird durch eine Filterhilfe mittels einer Saugpumpe filtriert. Das Piltrat wird unter vermindertem Druck eingedampft. Zur Abtrennung von restlichem Wasser v/ird der Rückstand mit Toluol versetzt und das Gemisch unter vermindertem Druck eingedampft. Der Rückstand wird unter Rühren mit 150 ml reinem wasserfreiem Aceton versetzt. Der erhaltene farblose Feststoff wird abfiltriert, mit wasserfreiem Aceton gev/aschen und unter vermindertem Druck getrocknet. Ausbeute der Titelverbindung 5,54 g (93 % d. Th.). Das End-

60981 7/ 1 242

produkt ist rein.

IR-Spektrum in KBr: ungefähr 3200-3600 (breite und intensive Bande), 2975, 2930 (Schulter), 1765, + 1650-1670, + 1610, 1550 (Schulter), 1515, 1460, 1400, 1375 (Schulter) + 1325, ungefähr 1240 (breit), 1180, 1135, 1085, 1050, 955, 900, 770 cm"¹.

PMR-Spektrum (ein ungefähr 5 : 1-Gemisch von d^-DMSO und DCOgD, DSS, δ-Werte in ppm): 1,25 (Zentrum von zwei benachbarten Tripletts, Ja 7,5 Hz), 1,46 (s) und 1,59 (s) (zusammen 9H); ungefähr 3,75 bis 4,1 (m, 2H), 4,22 (s, 1H), 5,42 (s) und 5,3 bis 5,6 (verbreitertes Ab-q) (zusammen 3H); 6,65 bis 7,35 (q-ähnlich, J^ 8,5 Hz, 4H).

In analoger V/eise wird das Dinatriumsalz der D-6-/«-/^-(Hydroxy-(methoxy)-phosphinyl)-ureidqZ-p-hydroxybenzylcarbonaraidojpenicillansäure hergestellt.

IR-Spektrum in KBr: ungefähr 3280-3600 (breite und intensive Bande) + 2950 (Schulter) I76O, 1680 (Schulter), ungefähr 1645 bis 1665, + 1600, + 1540, 1500, 1455, 1395, 1370 (Schulter), 1345 (Schulter), 1310-1330, 1215-1245, 1180 (Schulter), 1125, 1080 (intensiv). 1045, 895, + 770 cm"¹.

PMR-Spektrum (ein ungefähr 5 : 1-Gemisch von dg-DMSO und DCO₂D, 60 MHz, DSS, δ-Werte in ppm): 1,47 und 1,59 (6H), 3,50 (d, J^ 11,6 Hz, 3H), 4,27 (s, 1H), 5,44 (s) und ungefähr 5,35 bis 5,6 (verbreitertes AB-q) (zusammen 3H), 6,7 bis 7,35 (q-ähnlich," 4H).

609817/1242

Beispiel 6

Dinatriumsalz der D-6-ia-/3-(Hydroxy-(benzyloxy)-phosphinyl) ureidoZ-p-hydroxybenzylcarbonamidoJ-penicillansaure

CH- C-UH- CH

O=C Ιί CH-COOHa

345 mg (0,47 mMol) gemäß Beispiel 3 hergestelltes Natriumsalz der D-6-/a-/3-(Dibenzyloxyphosphinyl)-ureidoy-p-hydroxybenzylcarbonamidoP-penicillansäure und 80 mg (0,95 mMol) Natriumbicarbonat werden in 10 ml Wasser gelöst und mit 0,1 g lOprozentigem Palladium-auf-Kohlenstoff versetzt. Anschließend wird Wasserstoff bei 0⁰C eingeleitet. Nach 5-stündigem Rühren zeigt die DünnschichtChromatographie, daß der eingesetze Dibenzylester völlig aus dem Umsetzungsgemisch verschwunden ist, während sich die Kohlendioxidentwicklung beträchtlich verringert. Der pH-Wert des Umsetzungsgemischs liegt dabei etwa bei 8,0. Das Gemisch wird anschließend durch eine Filterhilfe mittels einer Saugpumpe filtriert. Das Filtrat wird unter vermindertem Druck eingedampft. Der Rückstand wird mit wasserfreiem Aceton digeriert und der erhaltene Feststoff abfiltriert. Es wird, abgesehen von dem anwesenden anorganischen Salz, durch Dünnschichtchromatogramme und PMR-Spektren geschätzt, daß das Endprodukt die Titelverbindung in einer Menge von 85 bis 90 % d.Th. enthält. Als Verunreinigungen liegen relativ geringe Men-

6 ü 9 8 1 7 / 1 2 U 2

2646910

gen von Abbauprodukt(en), das zweifach reduzierte Penicillin (das di~debenzylierte Penicillin) und Aceton vor. Da zwei Äquivalente Natriumbicarbonat eingesetzt wurden, sollte das Endprodukt etwas weniger als 1 Mol Natriumbicarbonat pro Mol Penicillin enthalten. Auf dem Dünnschientchromatogramm (Kieselgel 95 J 5 : 5 Gemisch von Methanol, Essigsäure und Wasser) erscheint die Titelverbindung bei einem R^-Wert von ungefähr 0,9 (UV-positiv), während das di-debenzylierte Penicillin bei einem R^-Wert von ungefähr 0,25 erscheint. IR-Spektrum in KBr: ungefähr 3100-3600, Schultern bei + 3050, 2970 und 2935, 1765, 1690 (Schulter), 1640-1660, 1595-1615, + 1550 (Schulter), 1515, 1455, 1400, 1380 (Schulter), 1320-1340, 1220-1260, 1180, 1135, 1090 (intensiv), 1010-1035, 985, 900, 870, 845, 750, 710 cm"¹.

PMR-Spektrum (ein ungefähr 4 : 1-Gemisch von dg-DMSO und DCO₂D, 60 MHz, DSS, δ-Werte in ppm): 1,48 und 1,60 (6H), 4,26 (s, 1H), 4,86 (d, J «r 7,0 Hz, 2H), 5,45 (s) und 5,35 bis 5,60 (AB-q, J if 4,0 Hz) (zusammen 3H); 6,65 bis 7,3 (q-ähnlich, J^ 8,2 Hz) und ungefähr 7,35 (zusammen

Das vorstehende Beispiel zeigt, daß man ein monodebenzyliertes Reduktionsprodukt in reinem Zustand erhalten kann, weil der zweite Reduktionsschritt mit einer beträchtlich langsameren Geschwindigkeit abläuft. Um das monodebenzylierte Produkt zu erhalten, soll nur ein Äquivalent Natriumbicarbonat verwendet werden, wobei die konkurrierende Bildung des Produkts der zweifachen Reduktion entweder durch Einsetzen eines teilweise vergifteten Katalysators und/oder durch Unterbrechen der Reduktion

609817/1242

" ⁴¹ " 2B46910

unmittelbar vor der völligen Umwandlung der Ausgangsverbindung weiter vermindert werden kann, die leicht aus dem Endprodukt durch Waschen mit Äthanol entfernt wird.

Beispiel 7

Trinatriumsalz der D-6-{a-/3-(Dihydroxyphosphinyl)-ureido/-phydroxybenzyl-carbonamidcj-penicillansäure

69O mg (0,94 mMol) gemäß Beispiel 3 hergestelltes Natriumsalz der D-6-/a-/3-(Dibenzyloxyphosphinyl)-ureidoT-p-hydroxybenzylcarbonamido^-penicillansäure und 168 mg (2 mMol) Natriumbicarbonat werden in 15 ml Wasser gelöst. Die Lösung wird mit 0,1 g lOprozentigem Palladium-auf-Kohlenstoff versetzt. Anschließend wird Viasserstoff eingeleitet. Nach 5-stündigem Rühren bei Raumtemperatur werden weitere 0,2 g lOprozentiges Palladium-auf-Kohlenstoff zugegeben, und die Reduktion wird fortgeführt. Nach insgesamt 6-stündigem Rühren zeigt das Dünnschichtchromatogramm eine völlige Umwandlung des Ausgangsmaterials zu einem Gemisch des Produkts gemäß Beispiel 6 und der Titelverbindung. Die Reduktion wird 16 bis 18 Stunden fortgeführt. Anschließend werden 5 ml Wasser und weitere 0,5 g lOprozentiges Palladiumauf-Kohlenstoff zugegeben, und die Reduktion wird 2 1/2 Stunden weitergeführt. Die Kohlendioxidentwicklung klingt ab. Das Dünnschi ehtchromatogramm zeigt, daß die Verbindung gemäß Beispiel 6 vollständig verschwunden ist. Nach der Zugabe von Aceton wird das Gemisch durch eine Filterhilfe filtriert. Das Filtrat wird unter vermindertem Druck eingedampft. Der Rückstand wird mit wasserfreiem Äthanol digeriert. Der erhaltene Feststoff wird ab-

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filtriert, mit Äthanol und wasserfreiem Aceton gewaschen und unter vermindertem Druck getrocknet. Ausbeute der Titelver-Mndung 0,5 g (ungefähr 80 % d. Th.), Nach dem Dünnschichtchromatogramm und dem PMR-Spektrum ist das Endprodukt ungefähr zu 90 % rein.

IR-Spektrum in KBR: ungefähr 3100-3600, 2970 (Schulter) 1760, 1640-1660 (sehr intensiv) 1600, 1540-1560, 1510, 1450, 1400, 1370 (Schulter), 1320, ungefähr 1250 mit Schultern, 1180, 1135 (Schulter), 1110 (intensiv), 985 (intensiv), 890, 840, 790 cm PMR-Spektrum (D₂O, 60 MHz, DSS, δ-Werte in ppm): 1,46 und 1,53 (6H), 4,20 (s, 1H), 5,2 (wenig breites s, 1H), 5,44 (s, 2H), 6,8 bis 7,45 (q-ähnlich, 4H).

Beispiel 8

Natriumsalz der D-6-/a-/3-(Diphenoxyphosphinyl)-ureidq/-phydroxybenzylcarbonamidoj-penicillansäure

C-C-BI-CH-«

COOiIa

Eine Suspension von 2,65 g (6,0 mMol) α-/3-(Diphenoxyphosphinyl )-ureidq/-4-hydroxyphenylessigsäure (F. 160 bis 170⁰C (Zers.); IR-Spektrum: 990; ungefähr 1200, 1650 und 1710 cm"¹;

6 0 9 8 17/1242

PMR-Spektrum (d^-DMSO, 60 MHz, TWS, δ-Werte in ppm): 5,15 (d, CH), 6,6 - 7,4 (aromatisches H)). und 1,40 g (7,3 mMol) 1-Äthyl-3-(j-dimethylaminopropylj-carbodiimid-hydrochlorid in 25 ml Tetrahydrofuran wird mit 70 ml Methylenchlorid versetzt. Die Lösung wird nach 7-minütigem Rühren mit 1,45 g (6,6 mMol) 6-Aminopenicillansäure versetzt, die vorher mit 0,97 ml (6,6 mMpl) TEA und 0,84 ml (6,6 mMol) TMCS in 15 ml Methylenchlorid silyliert wurde.

Nach 2 Stunden beträgt die Umsetzung gemäß der Dünnschichtchromatographie etwa hO % (R_f-Wert von 0,7, 1 : 5 : 4-Gemisch von Essigsäure, Äthylacetat und Aceton). Es wird ein gelbes Öl gebildet, das abgetrennt und verworfen wird. Das zurückbleibende Umsetzungsgemisch wird in Wasser bei einem pH-Wert von 7 gegossen; anschließend wird das Gemisch mit Äthylacetat extrahiert. Der pH-Wert wird auf 4,7 eingestellt; anschließend wird mit Äthylacetat extrahiert. Die Extrakte werden über Magnesiumsulfat getrocknet. Nach dem Filtrieren und Eindampfen der Äthylacetatextrakte werden ungefähr 2 mMol Natriumhexanoat zum Rückstand zugegeben. Das Produkt, dessen Struktur durch die PMR-Spektroskopie bestätigt wird, wird in einer Ausbeute von 1,23 g (32 % d. Th.) isoliert. Nach der Dünnschichtchromatographie scheint das erhaltene Produkt ziemlich rein zu sein, und als D-L-Gemisch vorzuliegen.

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Beispie. 1 9

Natriumsalz der D-6-/a/3- (Benzyloxy-(äthoxy)-phosphinyl)-AJireido/-p-hydroxybenzylcarbonamidoJ-penicillansäure

Eine Suspension von 1,0 mMol a-/3- (Benzyloxy- (äthoxy)-phosphi** nyl)-ureidq7-4-hydroxyphenylessigsäure (F. 122 - 127°C (Zers.); IR-Spektrum: 1020, 1220, 1670 und 1720 cm"¹, PMR-Spektrum (dg-DMSO, 60 MHz, TMS, δ-Werte in ppm): 1,2 (t,.CH₃)j 4,1 (m, -C-CH₂O); 5,1 (m, C₆H₅CH₂O); 7,0 und 7,4 (aromatisches H)) und 0,25 g (1,2 mMol) 1-Äthyl-3-(3-dimethylaminopropyl)-carbodiimid-hydrochlorid in 4 ml Tetrahydrofuran wird mit 15 ml Methylenchlorid versetzt. Die Lösung wird nach etwa 7-minütigem Rühren mit 0,25 g (1,1 mMol) 6-Aminopenicillansäure versetzt, die zuvor mit 0,16 ml (1,1 mMol) TEA und 0,14 ml (1,1 mMol) TMCS in 2,5 ml Methylenchlorid silyliert wurde.

Nach 2 Stunden beträgt die Umsetzung nach der Dünnschichtchromatographie (R^-Wert von 0,7 in einem 1 : 5 i 4-Gemisch von Essigsäure, Äthylacetat und Aceton) etwa 50 %. Das Umsetzungsgemisch wird in Wasser mit einem pH-Wert von 7 gegossen. Nach dem Abtrennen eines öligen Niederschlags wird das Gemisch mit Äthylacetat extrahiert. Der pH-Wert wird auf 4,7 eingestellt. Anschließend wird das Gemisch mit Äthylacetat extrahiert. Der Extrakt wird Über Magnesiumsulfat getrocknet. Nach dem Filtrieren und teilweise Eindampfen des Äthylacetats sowie der Zugabe von Natriumhexanoat wird das Produkt, dessen Struktur durch PMR-Spektroskopie bestätigt wird, in einer Ausbeute von 46,6 g isoliert und ist auf Grund der DünnschichtChromatographie ziemlich rein.

60 98 1 7/ 1 24 2

Anstelle von α-/3-(Benzyloxy-(äthoxy)-phosphinyl)-ureidq7-4-hydroxyphenylessigsäure kann auch a-/3-(Diäthoxyphosphinyl)-ureido_7-4-hydroxyphenylessigsäure (F. 166 bis 169 C Zers.) verwendet werden.

Beispiel 10

Gemäß Beispiel 1 Ms 9 werden folgende Verbindungen der allgemeinen Formel I hergestellt, in der Z₁ und Z₂ nachstehende Bedeutung haben:

Z₁ Z₂

Phenoxy 'Benzyloxy

Methyl Benzyloxy

tert.-Butyl B enzyloxy

isopropyl Benzyloxy

isopropoxy Benzyloxy

Phenoxy Hydroxy

Methyl Hydroxy

tert.-Butyl Hydroxy

isopropyl Hydroxy

isopropoxy Hydroxy

-Beispiel 11

Unter Verwendung eines in den Beispielen 1 bis 9 hergestellten Penicillinderivats werden auf übliche Weise Kapseln der folgenden Zusammensetzung hergestellt:

Wirkstoff 500 mg 250 mg

Magnesiumstearat 5 - 25 mg 2 - 15 mg

Lactose q.s. für eine q.s. für eine

Kapsel Kapsel

Die Kapseln eignen sich zur oralen Verabfolgung.

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Beispiel 12

Unter Verwendung eines in den Beispielen 1 bis 9 hergestellten Penicillinderivats werden Tabletten der folgenden Zusammensetzung hergestellt:

Wirkstoff 500 - 750 mg

Polyvinylpyrrolidon 15 - 25 mg

Maisstärke 100 - 200 mg

Magnesiumstearat 5 - 100 mg

Lactose q.s. für 1 Tablette

(ungefähr 100-200 mg)

Die Tabletten eignen sich zur oralen Verabfolgung.

Beispiel 13

Unter Verwendung eines in den Beispielen 1 bis 9 hergestellten Penicillinderivats werden auf übliche Weise Injektionstrockenpräparate hergestellt. Hierzu werden 2 g und 5 g des sterilen Natriumsalzes der betreffenden Verbindung vermischt mit Hilfsstoffen unter aseptischen Bedingungen und unter Stickstoff in ein für Injektionspräparate geeignetes Fläschchen gefüllt, das Fläschchen mit einer Gummidichtung verschlossen, die mit einem Aluminium-Dichtungsring festgehalten wird, so daß ein Gasaustausch bzw. das Eindringen von Mikroorganismen ausgeschlossen sind. Übliche Hilfsstoffe sind Glucose (üblich in einer Menge, um eine isotonische Lösung zu erhalten), Puffersalze, Stabilisatoren, wie das Dinatriumsalz der Äthylendiamintetraessigsäure, Konservierungsmittel, Netzmittel und Schaumbrecher. Zur Verwendung löst man das Pulver in einer geeigneten Menge sterilem pyrogenfreiem Wasser.

6098 17/1242

" 2b46910

Beispiel 14

Aus den in den Beispielen 1 Ms 9 hergestellten Penicillinderivaten werden Sirupe der folgenden Zusammensetzung hergestellt:

Wirkstoff	10	- 15	g
Natrium-carboxymethylcellulose	100	- 500	mg
Natriumsaccharinat	o,	10 - 1	g
p-Hydroxybenzoesäuremethylester		0,1	S
Aromastoffe	100	- 500	mg
Färbemittel	25	- 10	mg
Saccharose		50	g
Wasser bis zu		100	ml

Die Sirupe eignen sich zur oralen Verabfolgung.

6 U 9 8 1 7 / 1 2 U 2

Claims

Patentansprüche

in der E ein Wasserstoffatom, ein salzbildendes Kation oder einen Esterrest und Y eine Gruppe der allgemeinen Formel II

C-JJH ρ _(II)

Il 1*1

0 0

bedeutet, wobei Z,, und Zp gleiche oder verschiedene Alkoxyreste mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, gegebenenfalls substituierte Phenoxygruppen, gegebenenfalls substituierte Benzyl- oder Benzyloxygruppen, gegebenenfalls substituierte Alkylreste mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, gegebenenfalls substituierte Phenylgruppen, Hydroxylgruppen oder Reste der allgemeinen Formel -OM darstellen und M ein salzbildendes Kation ist, und ihre Salzhydrate.
2. Penicillansäurederivate nach Anspruchs, dadurch gekennzeichnet, daß die Substituenten, mit denen die Benzolkerne der Gruppen Z^ und Zp gegebenenfalls substituiert sind, Halogenatome, Nitro- oder Cyanogruppen oder Alkyl- oder Alkoxyreste mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen sind.

6 U 9 8 17/124?
3. Penicillansäurederivate nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß Y eine Di-nieder-alkoxyphosphinylarainocarbonyl-, Diphenoxyphosphinylaminocarbonyl-, Diphenylphosphinylaminocarbonyl-, Di-nieder-alkylphosphinylaminocarbonyl-, Hydroxybenzylphosphinylaminocarbonyl-, Hydroxy-nieder-alkoxyphosphinyl-aminocarbonyl-, Hydroxy-phenyl-phosphinylaminocarbonyl-, Hydroxy-nieder-alkyl-phosphinylamino-carbonyl-, nieder-Alkoxy-benzyloxy-phosphinylamino-carbonyl-, Phenyl-benzyloxyphosphinylaminocarbonyl-, nieder-Alkyl-benzyloxy-phosphinylaminocarbonyl-, Dibenzyloxy-phosphinylaminocarbonyl-, Dihydroxyphosphinylaminocarbonyl-, nieder-Alkoxybenzyl-phosphinylaminocarbonyl- oder nieder-Alkoxyphenyl-phosphinylaminocarbonylgruppe ist.
4. Penicillansäurederivate nach Anspruch 3 der folgenden Formeln:

D-6-fa-A3-(Benzyloxy-(äthyl)-phosphinyl)-ureidoZ-p-hydroxy-

benzylcarbonamidoj-penicillansäure,

D-6-fa-A3-(Benzyloxy-(äthoxy)-phosphinyl)-ureidqZ-p-hydroxy-

benzylcarbonamidoj-penicillansäure,

D-6- {(X.-A3- (Dibenzyloxyphosphinyl)-ureidq7-p-hydroxybenzyl-

carbonamido^-penicillansäure,

D-6-\a-f3-(Hydroxy-(äthyl)-phosphinyl)-ureidoj-p-hydroxybenzyl-

carbonamido}-penicillansäure,

D-6- la.-A3- (Hydroxy- (äthoxy) -phosphinyl) -ureidoZ-p-hydroxy-

benzylcarbonamidoj-penicillansäure,

D-6-fa-/3- (Hydroxy- (benzyloxy)-phosphinyl )-urei do_7-p-hydroxy-

benzylcarbonamidoj-penicillansäure,

609817/12^2

■ - 50 -

D-6- fa-ZB- (Benzyloxy- (methoxy)-phosphinyl)-ureidqZ-p-hydroxybenzylcarbonamido}-penicillansäure,

D-6- /a-/B- (Hydroxy- (methoxy) -phosphinyl )-ureido/-p-hydroxybenzylcarbonamido^-penicillansäure,

D-6-fa-/3-(Dihydroxyphosphinyi)-ureido7-p-hydroxybenzylcarbonamido}-penicillansäure,

D-6-fa-/B-Phenoxy-(hydroxy)-phosphinyl)-ureidqZ-p-hydroxybenzylcarbonamidoT-penicillansäure,

D-6-/a-/B- (Hydroxy- (methyl) -phosphinyl) -ureidoZ-p-hydroxybenzylcarbonamido}-penicillansäure,

D-6- fa-/B- (Hydroxy- (isopropyl)-phosphinyl)-ureidoZ-p-hydroxybenzylcarbonamidoj-penicillansäure,

D-6-/a-/B- (Hydroxy- (tert.-butyl)-phosphinyl)-ureido/-p-hydroxybenzylcarbonamidoj-penicillansäure,

D-6-^a-/B- (Hydroxy- (isopropoxy) -phosphinyl) -ureidoZ-p-hydroxybenzylcarbonamidol -penicillansäure,

D-6-fa-/B-(Hydroxy-(tert.-butoxy)-phosphinyl)-ureidoZ-p-hydroxybenzylcarbonamidoj-penicillansäure,

D-6-fa-/B-(Diphenoxyphosphinyl)-ureidoZ-p-hydroxybenzylcarbonamidoj-penicillansäure,

sowie ihre ein-, zwei- und dreiwertigen Natrium-, Kalium- oder Ammoniumsalze und pharmakologisch verträglichen Ester.
5. D-6- {oL-f3- (Hydroxy- (methoxy)-phosphinyl )-ureidq/-p-hydroxybenzylcarbonamidoj-penicillansäure sowie ihre Salze und Ester.
6. D-6- &C-/B- (Dihydroxyphosphinyl)-ureidqZ-p-hydroxybenzylcarbonamidoj-penicillansäure sov/ie ihre Salze und Ester.

6U.9 8-1-77 1 242 ■
7. D-6-fa-/3-(Hydroxy-(äthoxy)-phosphinyl)-ureidq/-p-hydroxybenzylcarbonamidoj-penicillansäure sowie ihre Salze und Ester.
8. D-6-[a-/3-(Hydroxy-(äthyl)-phosphinyl)-ureidqZ-p-hydroxybenzylcarbonamidqj-penicillansäure sowie ihre Salze und Ester.
9. Verfahren zur Herstellung der Penicillansäurederivate nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dam man in an sich bekannter Weise

(a) eine Verbindung der allgemeinen Formel IV

Q-O

Q-NH

C MH — CH CH

in der Q ein Wasserstoffatorn darstellt oder ein Silicium- oder Phosphoratom bedeutet, das niedere Alkyl-, niedere Halogenalkyl-, Aryl-, Aralkyl-, niedere Alkoxy-, Halogenalkoxy-, niedere Alkylthio-, Aralkoxy-, Di-nieder-alkylamino-, niedere Alkoxyalkylreste, Alkylendioxygruppen oder Halogenatome trägt, vorzugsweise eine Tri-nieder-alkylsilylgruppe, insbesondere die Trimethylsilylgruppe ist, und E¹ eine Carboxylschutzgruppe ist, mit einer Verbindung der allgemeinen Formel V

6U9817/1242

in der ZJj und Z£ die für Z₁ und Z^ angegebene Bedeutung haben oder Gruppen sind, die leicht in die Gruppen Z^ oder Zp umgewandelt werden können, in einem organischen Lösungsmittel bei Temperaturen von -3O⁰C bis +30⁰C, vorzugsweise von -5⁰C bis +5⁰C, vorzugsweise unter wasserfreien Bedingungen umsetzt und gegebenenfalls anschließend die Schutzgruppe E¹ und die Gruppe(n) Q entfernt, wenn Q eine siliciumhaltige oder phosphorhaltige Gruppe ist, oder (b) eine Verbindung der allgemeinen Formel VI

./ \ CH COOH

^=/ NH

Y¹

in der Q die vorstehende Bedeutung hat und Y¹ entweder Y oder eine Gruppe ist, die nach der Umsetzung leicht in eine Gruppe mit der Bedeutung von Y umgewandelt werden kann, mit 6-Aminopenicillansäure oder deren Derivat in Gegenwart eines Carbodiimids als Kondensationsmittel umsetzt, gegebenenfalls anschließend die Schutzgruppen entfernt und gegebenenfalls die erhaltene Säure durch Umsetzen mit einer Base in ein Salz überführt.

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10. Phenylessigsäurederivate der allgemeinen Formel VI, in ier Q und Y¹ die in Anspruch 9 angegebene Bedeutung haben.
11. Phenylsäurederivate nach Anspruch 10 der folgenden Formeln:

a-£3-(Benzyloxy-(äthyl)-phosphinyl)-ureidoZ-p-hydroxyphenyl-

essigsäure,

α-/3-(Benzyloxy-(äthoxy)-phosphinyl)-ureidq/-p-hydroxyphenyl-

essigsäure,

a-£3-(Dibenzyloxyphosphinyl)-ureidoZ-p-hydroxyphenylessigsaure, α-/B-(Hydroxy-(äthyl)-phosphinyl)-ureidoZ-p-hydroxyphenyl-

essigsäure,

ct-/3-(Hydroxy-(äthoxy)-phosphinyl)-ureido7-p-hydroxyphenyl-

essigsäure,

α-/Β-(Dihydroxy)-phosphinyl)-ureido7-p-hydroxyphenylessigsäure, α-/B- (Hydroxy- (benzyloxy) -phosphinyl) -ureido_7-p-hydroxyphenyl-

essigsäure,

ix-£5- (Benzyloxy- (methoxy) -phosphinyl) -ureidoZ-p-hydroxyphenyl-

essigsäure,

α-£b- (Benzyloxy- (methyl) -phosphinyl) -ureido_/-p-hydroxyphenyl-

essigsäure,

a-£3-(Benzyloxy-(isopropyl)-phosphinyl)-ureidoZ-p-hydroxy-

phenylessigsäure,

0C-/3-(Hydroxy-(methoxy)-phosphinyl)-ureidoZ-p-hydroxyphenyl-

essigsäure,

a-/5-(Benzyloxy-(tert.-butyl)-phosphinyl)-ureidoZ-p-hydroxy-

phenylessigsäure,

oc-£3- (Hydroxy- (methyl) -phosphinyl) -ureidoZ-p-hydroxyphenyl-

essigsäure,

6098 17/1242

CC-/3- (Benzyloxy- (tert. -butoxy) -phosphinyl) -ureidoZ-p-hydroxyphenylessigsäure,

oc-/3- (Hydroxy- (propoxy) -phosphinyl )-ureido_/-p-hydroxyphenylessigsäure,

0.-/3- (Benzyloxy- (propoxy) -phosphinyl )-ureidq7-p-hydroxyphenylessigsäiire,

ol-£3- (Hydroxy- (isopropyl) -phosphinyl )-ureidq/-p-hydroxyphenylessigsäure,

a-/3- (Hydroxy- (tert. -butyl) -phosphinyl) -ureidqZ-p-hydroxyphenylessigsäure,

O.-/3- (Hydroxy- (tert. -butoxy)-phosphinyl)-ureidq/-p-hydroxyphenylessigsäure,

α- /B- (Hydroxy- (phenoxy) -phosphinyl )-ureido7-p-hydroxyphenylessigsäure und

O.-/3- (Benzyloxy- (phenoxy) -phosphinyl) -ureidoZ-p-hydroxyphenylessigsäure.
12. Verfahren zur Herstellung der Phenylessigsäurederivate nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter V/eise eine Verbindung der allgemeinen Formel X

O-/ V ^CH

^C ^0E'

Q-NH

in der Q und E¹ die vorstehende Bedeutung haben, mit einer Verbindung der allgemeinen Formel XI

O =r C= N P ²

609817/1 242

, m einem

in der Z^ und Zp die vorstehende Bedeutung haben inerten organischen Lösungsmittel bei Temperaturen von -30⁰C bis +30⁰C, vorzugsweise von -5⁰C bis +5⁰C und vorzugsweise unter wasserfreien Bedingungen umsetzt und anschließend die Schutzgruppe E¹ und gegebenenfalls jede andere Schutzgruppe entfernt.
13· Arzneimittel, bestehend aus einer Verbindung nach Anspruch 1 bis 8 und üblichen Trägerstoffen und/oder Verdünnungsmitteln und/oder Hilfsstoffen.
14. Verwendung der Verbindungen nach Anspruch 1 bis 8 als Desinfektionsmittel .

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