DE2416339C3

DE2416339C3 - Argininpyroglutaniat, Verfahren zu seiner Herstellung und Arzneimittel

Info

Publication number: DE2416339C3
Application number: DE2416339A
Authority: DE
Inventors: Giovanni Prof. Orzalesi; Renato Prof. Selleri
Original assignee: Manetti & Roberts Italo Brit
Current assignee: Manetti & Roberts Italo Brit
Priority date: 1973-04-04
Filing date: 1974-04-04
Publication date: 1979-09-27
Also published as: DE2416339B2; FR2224154B1; AR203747A1; ZA742095B; GB1421089A; IT1019020B; ES424931A1; DE2416339A1; JPS5221572B2; CH592058A5; FR2224154A1; JPS5035317A

Description

und dessen Salze mit pharmazeutisch unbedenklichen Säuren und Basen.

Z Verfahren zur Herstellung der Verbindung der Formel gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Weise in konzentrierter wäßriger Lösung L-Arginin und Pyroglutaminsäure in der Hitze umsetzt anschließend die Lösung zur Trockne konzentriert, den Rückstand wiederholt

NH H NH₂

mit absolutem Äthanol aufnimmt und aus wäßrigen Äthanol umkristallisiert

3. Arzneimittel, dadurch gekennzeichnet daß es mindestens eine Verbindung nach Anspruch 1 als aktiven Bestandteil und übliche, pharmazeutisch verträgliche Zusatzstoffe und Trägermaterialien enthält

Die Erfindung betrifft den durch die Ansprüche gekennzeichneten Gegenstand. Glutaminsäure, Glutamin und Acetylglutamin werden für therapeutische Zwecke in weitem Umfang verwendet da einige klinische Untersuchungen, die mit Hilfe geeigneter psychologischer Tests durchgeführt wurden, ihre Wirksamkeit bei der Besserung einiger Formen von Mentalretardation bewiesen haben.

In Chemical Abstracts 68 (1968), Nr. 103 689q und 48 (1£54), Nr. 10 062e, sind Mischungen aus Pyrrolidoncarboxylat und Arginin bzw. Aminosäurelösungen, die durch Neutralisation der basischen Fraktion eines Proteinhydrolysates mit einer physiologisch verträglichen organischen Säure erhalten wurden, beschrieben. Diese Mischungen sind insbesondere in ihren pharmakologischen Eigenschaften von der erfindungsgemäßen Verbindung wesentlich verschieden. So wurde durch Versuche festgestellt daß Argininpyroglutamat sich in Lösung im Organismus so verhält als ob es die Zellwände als molekulare Additionsverbindung unverändert passiere, während dies bei einem Gemisch aus Arginin und Pyroglutaminsäure nicht der Fall ist

35

45

In der britischen Patentschrift 10 06 728 sind das Cholinpyroglutamat und das Betainpyroglutamat beschrieben. Die erfindungsgemäße Verbindung ist diesen Verbindungen des Standes der Technik ausweislich des nachfolgenden Versuchsberichts überraschend überlegen. Diese Überlegenheit besteht auch gegenüber dem N-Dimethylaminoäthanolsalz der Pyroglutaminsäure gemäß der französischen Patentschrift M 6761, bei der es sich im Gegensatz zur erfindungsgemäßen Verbindung um eine nicht-physiologische Substanz handelt

Es ist Aufgabe der Erfindung, eine neue, reine und strukturell wohl definierte chemische Substanz zu schaffen, die zu der Klasse von Verbindungen gehört die durch Zusammenfügen von «-Aminosäuren gebildet wird, ein Verfahren zu ihrer Synthese sowie ein Arzneimittel zu schaffen.

Diese Aufgabe wird durch die Lehre der Ansprüche gelöst

Die erfindungsgemäße Verbindung ist chemisch als Arginin-2-pyrroIidon-5-carboxyIat (Argininpyroglutamat) definiert und entspricht der Summenformel Ci t H₂I NsOs, der die folgende Struktur entspricht:

V V-COO

I...J

H,N — C — N — (CH₂)., — CH — COOH NH H NH₂

Ihr Molekulargewicht beträgt 303,31. Das Ergebnis ihrer Elementaranalyse, ausgedrückt in Prozent ist wie folgt:

Ben: C 43,56, H 638, N 23,09, Ο26.37; gef.: C 43,71, H 7,12, N 23,53, O durch

Differenz.

Die Substanz tritt in Form von Kristallen oder farblosen oder weißen kristallinen Massen auf. Sie ist löslich in Wasser, weniger löslich in den niedrigeren aliphatischen Alkoholen, unlöslich in den üblichen organischen Lösungsmitteln. Sie kristallisiert wie im folgenden ausgeführt wird, aus wäßrigem Äthanol und schmilzt in diesem Fall bei 216 bis 217°C (auf der Kofier-Bank).

55

f)5

Die erfindungsgemäße Verbindung wird hergestellt indem man in einer konzentrierten wäßrigen Lösung in der Hitze, vorzugsweise bei der Siedetemperatur der Mischung, L-Arginin und Pyroglutaminsäure,, vorzugsweise in äquimoiarem Verhältnis, reagieren läßt Die Mischung wird zur Trockne eingeengt worauf der Rückstand mehrfach mit absolutem Äthanol aufgenommen und aus wäßrigem Äthanol umkristallisiert wird.

Das folgende Beispiel erläutert die Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindung.

Beispiel

Man löst 17,4 g (0,1 Mol) L-Arginin in der kleinstmöglichen Menge warmem Wasser und gibt eine wäßrige und konzentrierte wärme Lösung von 123 g (0,1 Mol)

Pyroglutaminsäure, auch bekannt als 2-Pyrrolidon-5-carbonsäure, zu. Man kocht die Mischung einige Minuten und gibt sie danach in eine Verdampfungsvorrichtung, die unter Vakuum rotiert und engt sie im Wasserbad der Vorrichtung bis zur Trockne ejn. Der Rückstand wird dreimal mit absolutem Äthanol aufgenommen und wird auf die bereits genannte Weise jedesmal zur Trockne eingeengt

Der zum Schluß erhaltene Rückstand wird gesammelt und aus einer Mischung von 95%igem Äthanol/Wasser ι ο im Verhältnis 7 :3 kristallisiert, wobei man ungefähr 25 g des Endproduktes erhält, das das oben beschriebene kristalline Aussehen besitzt und einen Schmelzpunkt von 216 bis 217°C auf der Kofler-Bank aufweist

Die therapeutische Wirksamkeit der erfindungsgemäßen Verbindung wurde nach dem folgenden Testprogramm untersucht:

a) Kontrolle des Einflusses, der durch die Verbindung auf die Geschwindigkeit des Labyrinth-Lernens ausgeübt wird;

b) Kontrolle des Einflusses, der durch die Verbindung auf die spontane Mobilität und auf die durch depressive Mittel bewirkte Verringerung der spontanen Mobilität ausgeübt wird;

c) antagonistische Wirkung der Verbindung bei einer ²³ Gruppe III durch Arzneimittel bewirkten Depressioa

Einfluß der Behandlung mit der erfindungsgemäßen Verbindung auf die spontane oder durch Behandlung

mit Pentobarbital-Natrium reduzierte Mobilität

Zur Ausführung dieser Tests wurde eine Vorrichtung verwendet, die mit einem mechanischen Bewegungszähler versehen war, der eine Zählgeschwindigkeit bis zu 10 Impulsen/Sek. besaß. Die Vorrichtung wurde ir» eine Ruhekammer gestellt und die Zählung wurde nach einer lOminütigen Anpassungsperiode konstant durchgeführt Der Test wurde mit einer Gruppe von 50 erwachsenen männlichen Wistar-Ratten durchgeführt, die in Gruppen zu je 10 Tieren aufgeteilt wurden und die Testbedingungen wurden wie folgt gewählt:

Gruppe I

20

Gruppe II Kontrolltiere; 4 ml/kg einer 10%igen Gummi-arabicum-Lösung wurde den Tieren endoperitoneal verabreicht Nach 1 Std. wurde die spontane Mobilität 15 Min. lang gemessen;

wie in Gruppe 1, jedoch wurden zusammen mit dem Träger 100 mg/kg der erfindungsgemäßen Verbindung verabreicht;

Experimentelle Ergebnisse

Einfluß der Behandlung mit der erfindungsgemäßen ^J0 Verbindung auf das Labyrinth-Lernen

Zur Durchführung dieser Untersuchung wurde ein 1,20 m langes Labyrinth verweist, in dem 12 Möglichkeiten eines Irrtums vorgesehen waren. Die y, Wirkung der Verbindung wurde bestimmt, indem man ihren Einfluß auf die zur Durchquerung des Labyrinths erforderliche Zeit und auf die Anzahl Fehler in Rechnung stellte, die während des Durchgangs zu der Kammer erfolgten, in die das Futter gegeben worden

Versuchsbedingungen

Der Versuch wurde mit einer Gruppe von 18 erwachsenen männlichen Wistar-Ratten durchgeführt, die in zwei Gruppen zu je 8 Tieren aufgeteilt wurden. Vor Beginn des Tests ließ man die Tiere 72 Std. hungern. Eine Stunde, bevor die Tiere in das Labyrinth geschickt wurden, wurde der einen Gruppe 4 ml/kg einer Lösung von 10% Gummi arabicum injiziert Der anderen Gruppe wurden 100 mg/kg der Verbindung injiziert, wobei dasselbe Trägervolumen verwendet wurde. Anschließend führte man die erste Bestimmung durch. Nachdem die Tiere den Durchgang beendet hatten, erhielten sie 5 g ausgewogene Nahrung, die ihnen 30 Min. zur Verfügung stand. Danach ließ man sie wieder hungern. Unter Konstanthaltung dieser Testbedingung wurde der Test sechsmal wiederholt, und zwar mit 24stündigen Unterbrechungen.

Die Testergebnisse sind in Tabelle I dargestellt Es ist w zu bemerken, daß die von den Kontrolltieren benötigten Zeiten und begangenen Irrtümer merklich höher als die sind, die bei den erfindungsgemäß behandelten Tieren gemessen wurden, und obgleich die Unterschiede im allgemeinen nicht in der Nähe der statistischen Signifikanz liegen, muß dies der beträchtlichen individuellen Schwankung beim Ansprechen zugeschrieben werden.

wie Gruppe I, jedoch wurden zusammen irat dem Träger 10 mg/kg Pentobarbital-Natrium verabreicht Nach den Ergebnissen früherer Untersuchungen verringert die Dosis des verwendeten Barbiturate merklich die spontane Mobilität der Tiere;

Gruppen IV

und V = wie bei den vorhergehenden Gruppen,

jedoch wurde zusammen mit 10 mg/kg Pentobarbital-Natrium an Gruppe IV 50 mg und an Gruppe V 100 mg/kg erfindungsgemäße Verbindung verabreicht

Die Ergebnisse dieser Tests sind in Tabelle II gezeigt Die folgenden Ergebnisse sind bemerkenswert: Bei einer Dosis von 100 mg/kg bewirkt die erfindungsgemäße Verbindung keine Änderungen der spontanen Mobilität der Tiere; bei einer Dosis von 10 mg/kg verringert Pentobarbital-Natrium merklich die spontane Mobilität; die erfindungsgemäße Verbindung wirkt dem Barbiturat eindeutig entgegen und die antagonistische Wirkung steigt mit der Zunahme der Dosis an Argininpyroglu tamat

Einfluß der erfindungsgemäßen Verbindung auf die durch Arzneimittel induzierte Depression

Das Verhalten der erfindungsgemäßen Verbindung bezüglich der Verminderung der negativen Wirkung, die durch Pentobarbital-Natrium auf die spontane Mobilität ausgeübt wird, war Anlaß zur Untersuchung, ob dieselbe Verbindung die durch Pharmazeutika hervorgerufenen depressiven Phänomene erfolgreich verhindern kann.

Um die antagonistische Wirkung zu messen, wurden die Zeitintervalle zwischen der Injektion des Depressivums und dem Verschwinden des Stellreflexes (Induktionszeit) bestimmt und die Dauer der Anästhesie wurde festgelegt, indem man das Zeitintervall zwischen dem Verlust und dem Auftreten der Stellreflexe maß.

Die Tests wurden mit 24 erwachsenen männlichen Wistar-Ratten durchgeführt, die in vier Gruppen zu je sechs Tieren aufgeteilt wurden. Die Testbedingungen waren wie folgt:

Gruppe I = 25 mg/kg Pentobarbital-Natrium wurden endoperitoneal verabreicht;

Gruppe II <= 100 mg/kg erfindungsgemäße Verbindung und 10 Min, später 25 mg/kg Pentobarbital-Natrium wurden endoperitoneal verabreicht;

Gruppe Iü = 5 mg/kg Medazepam und 30 Min. später 25 mg/kg Pentobarbital-Natrium wurden per os verabreicht;

Gruppe IV = 5 mg/kg Medazepam per os und 10 Min. später 100 mg/kg erfindungsgemäße Verbindung und 20 Min. später 25 mg/kg Pentobarbital-Natrium wurden oral verabreicht

Die Arzneimittel wurden verabreicht, indem man geeignete Volumina einer 10%igen Gummi-arabicum-Lösung als Träger verwendete. Die Testergebnisse sind in Tabelle III dargestellt Die folgenden Ergebnisse sind bemerkenswert:

In dem Fall, in dem die Tests unter Verwendung von Pentobarbital-Natrium aileine durchgeführt wurden, wurden alle Tiere anästhesiert; die Anästhesie dauerte im Mittel 17,6 Min, während die mittlere Induktionszeit 83 Mia betrug.

Die erfindungsgemäße Verbindung wirkte dem anästhetischen Effekt von Pentobarbital-Natrium eindeutig entgegen: Bei der Gruppe, die mit Argininpyroglutamat vorbehandelt war, wurden nur zwei von sechs Tieren in eine allgemeine Anästhesie gebracht die im Mittel erheblich kurzer war, während die Induktionszeit verlängert war; bei zwei weiteren Tieren trat Somno-

TabeIIe I

lenz, gefolgt von Schlaf, auf, während bei den zwei anderen Tieren nur eine Sedierung bemerkt wurde.

Die Vorbehandlung mit Medazepam verkürzt die Induktionsperiode und protrahiert die Anästhesie-Periode, die durch Pentobarbital-Natrium hervorgerufen ist

Trotz der Zunahme des depressiven Zustands, der durch das Zusammengeben von Medazepam mit Pentobarbital-Natrium erhalten wird, bewirkt die erfindungsgemäße Verbindung dennoch einen eindeutigen antagonistischen Effekt der durch eine Vermindc rung der Zahl der Tiere, die anästhesiert werden, und durch eine beträchtliche Verkürzung der Dauer der Anästhesie gekennzeichnet ist

Die obigen Tests zeigen, daß Argininpyroglutamat pharmakodynamische Eigenschaften besitzt die es zur Verbesserung des Funktionszustands des Zentralnervensystems geeignet macht

Bei der Verabreichung an F„wten verbessert diese neue Verbindung ihre Lernkapazitäi, wenn sie sich in normalem Zustand befinden und wirkt eindeutig den durch zentrale Depressiva ausgeübten Wirkungen entgegen.

Da darüber hinaus Argininpyroglutamat bei den Dosen, die die oben zusammengestellten Wirkungen hervorrufen, keine Zunahme der spontanen Mobilität bewirkt, ist es berechtigt anzunehmen, daß die vorteilhaften Wirkungen auf die cerebrale Aktivität nicht einem Zustand unspezifischer Excititation zugeschrieben werden können.

Für pharmazeutische Zwecke sind auch die Salze der erfindungsgemäßen Verbindung mit pharmazeutisch verträglichen Säuren und Basen geeignet

Kör	Erfin-	100	Mittel	P	Läufe	249	in Sekunden	III	IV	V	VI	VII	Irrtümer bei	II	den Tests	IV	V	VI	VII
perge	dungsgem.				97		115	133	173	123	112		19		16	11	10	9
wicht	Verb.			>250		56	37	78	60	39		18		4	9	3	2
g	mg/kg		I	242	II	122	76	55	72	47	I	15	III	II	4	3	1
204			172	148	109	88	83	65	50	20	15	10	18	15	11	10
207			137	60	73	63	50	25	41	11	15	6	13	9	8	4
210			204	171	96	58	56	49	56	20	17	7	II	8	3	2
213			>250	131	116	96	98	101	114	17	14	10	7	9	4	3
219		>200	112	131	102	77	64	57	14	■!8	5	8	4	6	4
221			141	102	82	83	69	64	15	16,3	9	11,0	8,6	6,0	4,3
227		246	156	±25	±30	±40	±10	±31	15	±1,8	8	±4,7	±3,7	±2,9	±3,4
236		130	197	131	66	36	60	53	20	7	10	9	5	9	6
217	Mittel	12	139	109	19	14	23	24	16	4	8,1	4	4	4	3
±11		23	±41	13	10	8	4	II		7	±2,0	6	5	6	4
201	66	20	15	22	21	15	8	9	10	14	U	8	5	5
211	119	17	73	29	31	20	9	7	10	11	5	5	2	2
216	96	32	101	42	27	16	8	3	4	6	4	5	4	2
219	58	22	41	18	22	11	13	12	9	8	5	4	3	3
224	93	106	72	19	25	14	9	Il	8	13	8	4	5	2
229	±74	73	70	28	23	20	16	4	7,3	6	6,5	4,8	4,7	3,3
232		27	±41	±18	±9	±17	±16	Il	±2,4	4	±2,7	±1,3	±2,1	±1,5
235	49	n.s.	>0,l	>0,l	n.s.	n.s.	9	<0,01	7	n.s.	n.s.	n.s.	n.s.
220	43					8,2	8,7
±12	±31					±3,2	±3,6
	>0,l						n.s.

Einfluß der Behandlung mit der erfindungsgemäßen Verbindung auf die Geschwindigkeit des Labyrinth-Lernens. P = berechnet auf der Grundlage der Kontrollwerte und nur für Werte angegeben, die statistische Signifikanz oder annähernd statistische Signifikanz besitzen.

	24 16 339	7	Mittel	8

Tabelle II	Arzneimittel mg/kg	erfindungsgemäße Verbindung 100	Anzahl Bewegungen in
Körper			.10 Minuten
gewicht, g	-		761
251			542
256			427
264			631
275			566
277			647
281			521
284			586
286		Mittel	702
291			436
294	P	582
276	Pentobarbital-Natrium 10	±109
±15		596
248		658
2M		802
263		536
268		482
275		621
279		574
286		698
287		502
289	Mittel	581
296		605 (+3.9)
275	P	±94
±15	Pentobarbital-Natrium 10	n. s.
	erfindungsgemäße Verbindung 50	231
257		198
263		»y
264		241
270		156
275		173
279		202
282		209
289		125
291		184
304	181 (-69,0)
277	±47
±15	0,01
	521
263	371
269	421
270	365
276	281
277	527
281	324
284	261
285	456
289	321
294

(Fortsetzung)

10

Körpergewicht, g

Arzneimittel

mg/kg

Anzahl Bewegungen in 30 Minuten

279	Mittel	381 (-34,6)
±10		±92
	P	n. s.
243	Pentobarbital-Natrium 10	431
256	erfindungsgemiißc Verbindung \|qq	624
264		327
269		516
271		408
276		604
277		325
28!		409
288		531
295		376
272	Mittel	455 (-11,9)
±15		±109
	P	n. s.

Einfluß der erfindungsgemäßen Verbindung und Pentobarbital-Natrium, alleine oder assoziiert, auf die spontane Mobilität von Ratten.

P = berechnet auf der Grundlage der Kontrollwerte und nur für Werte angegeben, die statistische Signifikanz oder annähernd statistische Signifikanz besitzen.

Tabelle III

Körpergewicht

Arzneimittel

mg/kg

Induktions^

zeit

in Minuten

Anästhesiezeit in Minuten

248	Pentobarbital-Natrium (i. p.)	25	8	12
256			9	32
260			7	10
2U3			7	17
267			IU	14
271			9	21
260		Mittel	8,3	17,6
±8				±7,9
251 254 263	erfindungsgemäße Verbindung (i. p.) nach 10 Min. Pento- barbital-Nsiriurn (:.p.)	100 25	5 17 5	I 15 I
267			0	0
273			19	13
275			0	0
263		Mittel	(X) 18,0	(X) 4,0
±10
239 246	Medazepam os nach 30 Min. Pentobarbital-Natrium (i. p.)	5	4 6	76 28
251		25	7	74
258			5	39
274			6	58
281			3	31
258		Mine!	5,1	51,0
±16				±20,6

Fortsetzung

Körpergewicht

Arzneimittel

mg/kg Induktions- Anästhesie/eil

zeit in Minuten

in Minuten

244
247
251
258
262
279

Medazepam os nach 10 Min. erfindungsgemäße Verbindung (i.p.) nach 20 Min. Pentobarbital-Natrium

5	8	2
	7	16
100	9	28
	S	I
25	S	1
	8	10

Mittel

(X) 8,0

(X) 14,0

Einfluß der Behandlung mit der ernndungsgemäßen Verbindung auf die Depression durch Pento-

barbiiai-Nairium oder Medazepam-Pentobarbitai-Nairium.

S = Torpor oder reduzierte Reaktivität auf Stimuli.

I = Schlaf, aus dem das 'Her durch starke Stimuli aufgeweckt wurde.

Die Zeiten von I und S wurden aufgrund der Schwierigkeit, ihre Dauer zu messen, nicht bestimmt.

Gruppe I:

Es wurde zwischen der erfindungsgemäßen Verbindung Argininpyroghitamat und den Verbindungen der britischen Patentschrift 10 06 728, nämlich dem Cholinpyroglutamat und dem Betainpyroglutamat ein Vergleichsversuch durchgeführt Bei diesem Vergleichsversuch wurde die antidepressive Wirksamkeit der genannten Verbindungen nach der Verabreichung eines m Gruppe II: Barbiturate, nämlich Pentobarbital-Natrium, untersucht

Bei der Bestimmung der Aktivität wurden die folgenden Faktoren berücksichtigt:

männlichen Wistar-Ratten, die 2> aufgeteilt waren, durchgeführt

Die Versuchsbedingungen waren wie folgt:

in vier Gruppen

25 mg/kg Pentobarbital-Natrium intraperitoneal verabreicht;

150 mg/kg Argininpyroglutamat und 30 Min. später 25 mg/kg Pentobarbital-Natrium subcutan verabreicht;

1) die zwischen der Injektion eines depressiven Mittels bis zum Verschwinden des Stellreflexes verstrichene Zeitspanne (Induktionszeit);

2) die Narkosedauer; diese wird durch Messen des Zeitraums zwischen dem Verschwinden des Stellreflexes bis zu «einem Wiederauftreten definiert

Die Untersuchungen wurden bei erwachsenen, Tabelle IV

Gruppe III: 150 mg/kg Cholinpyroglutamat und 30 Min. später 25 mg/kg Pentobarbital-Natrium subcutan verabreicht;

Gruppe IV: 150 mg/kg Betainpyroglutamat und 30 Min. später 25 mg/kg Pentobarbital-Natrium subcutan verabreicht

Die erhaltenen Ergebnisse sind in der nachfolgenden Tabelle IV zusammengestellt

Korpergewicht

(g)

Arzneimittel

Dosis mg/kg Induktionszeit

(Min.)

Narkosedauer

(Min.)

230	Pentobarbital-Natrium (i. p.)	25	7	19
235			C)O	!6
230			8	13
240			10	14
240			9	21
230			7	28
		Mine!	8,16	18,5
235	Argininpyroglutamat (s. c.)	150	16	15
235	Pentobarbital-Natrium (i.p.)		11	8
245		25	15	12
230			17	11
230			19	16
240			15	14
		Mittel	15,5	12,6

Fortsetzung

Körpergewicht

(g)

Arzneimittel Dosis
mg/kg

Induktionszeit

(Min.)

Narkosedauer

(Min.)

Cholinpyroglutamat (s.c.) Pentobarbital-Natrium (i.p.)

Betainpyroglutamat (s.c.) Pentobarbital-Natrium (i.p.)

240 240 240 235 230 230

235 230 230 245 240 240

s.c. = subcutan.

i. p. = intraperitoneal.

Aus den vorstehenden Daten ist ersichtlich, daß Argininpyroglutamat im Vergleich zu den Verbindungen des Standes der Technik sowohl hinsichtlich der Induktionszeit als auch der Narkosedauer, eine höhere Aktivität aufweist. Setzt man die Wirkung der erfindungsgemäßen Verbindung hinsichtlich der Narkosedauer mit 100 an, so erhält man bei den Vergleichsverbindungen wesentlich niedrigere Werte. Cholinpyroglutamat besitzt dann eine Wirksamkeit von nur 62,7% und Betainpyroglutamat besitzt eine Wirksamkeit von 71,1%.

150	14	18
	11	14
25	13	21
	9	12
	14	Il
	12	13
Mittel	12,16	14,8
150	18	13
	8	22
25	13	Il
	9	18
	15	12
	16	10
Mittel	13,1	14,3

Die akute Toxizität der erfmdungsgemäßen Verbindung beträgt bei:

Maus: bis 6000 mg/kg per os bis 4000 mg/kg intraperitoneal

Ratte: bis 8000 mg/kg per os

bis 3000 mg/kg intraperitoneal

Meerschweinchen: bis 5000 mg/kg per os

bb 3000 mg/kg intraperitoneal.

Claims

Palentansprüche:

1. Argininpyrogliiiamat der Formel

η ^Η

V ^N Y V-COO H₃N-C-N-(CH,),-CH-COOH

I 1 μ ι ι