DE1545927A1 - Verfahren zur Herstellung von Cephemcarbonsaeuren - Google Patents

Description

PATENTANWÄLTE

DR. F. ZUM8TEIN - DR. E. A88M/ DR. R. KOENIQ8BERQER - DIPL-PHYe. R. Hi

TKLSPONi ·β·4 7β und M1911

TBLJKIRAMMC: ZUMPAT ΡΟ·Τ·ΟΗ«ΟΚΚΟΝΤΟι MONOHCN Oll »β

BANKKONTO! ■ANKHAU·

Expl.

■ MONOHBN ·, MWUHAUMTRA«

80/eö 79-208

GLAXO lABORATORIES LIMITED, Greenford, Middlesex,

Großbritannien

Verfahren sur Herstellung von Cephenoarbonsäuren.

Die vorliegende Erfindung betrifft Verlagerungen bei der Her stellung von su OephaloBporin C analogen Verbindungen und neue Verbindungen, dl» eum Cephalosporin O analog sind.

Dia Verbindungen der vorliegenden Beschreibung werden in allgemeinen unter Betugnahme auf Cephas benannt, den folgende Struktur Eukoamt (Journal of American Ohealoal Society, 1962, 04. 3400):

(I)

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Unter den In der vorliegenden Anmeldung verwendeten Auedruok "Oephemoarbonsäure" wird eine Verbindung der ellgemeinen fonwl

B₁IH

GOOH

verstanden, worin R- und Rp cerboxylieche Aoylgruppen bedeuten, die gleich oder verschieden sein können.

Oephemoerboneäuren, die eine 3- Aoyloxynethy!gruppe, jedooh nicht die 3-Aoetoxyaethylgruppe enthalten, oind la Bllgeneinen deswegen von Interesse, da sie la Vergleich alt den entsprechenden 3-Acetoxynethylverblndungen «ine modifizierte entibiotieoh· Aktivität btaitaen.

Die 3-Hydroxyeethy!derivate dtr Oepheeo«rbon*Äuren wurden la g·- wissen Fällen sohon vorgeschlagen und «in Verfahren mu ihrer Herstellung mvm den entsprechenden 3-Acetoxyxoe thy !verbindungen unter Verwendung einer von Orangeneohaien βtaBeenden Seter··· iat in der be1λlachen Patentaohrift 602 342 beschrieben.

Die vorliegend· Erfindung betrifft insbesonder· «in Verfahr·« sur Herstellung von Cephencarbonsäuren au· den entsprechenden

90988A/178i ^BAD original

3-Hy d r oxyn β thy lone loga. Dies« Umsetzung let la allgemeinen schwierig durchzuführen, da. das Moltkttl but Leοtonbildung uu4-eur Umlagerung In die Δ -Verbindung ntigt. Β« wurde mm daß die UuBotEimg der 3-Hydroxymethylgrupp· bot 3-AoYl«qreethylgruppe bequem durchgeführt werden kann, wenn 41· 4-4to während der üeeetsung geeoWitst wird· Iiwlt lmbestiaitr« gjf» fund en, daß dieser Bohut« erfolgreich dorob Arallqrlleruag M-wirkt werden kann.

Erfindungagenjäß wird deshalb ein Verfahren zur Herstellung von Cepheocarbonaäuren bus den entsprechenden 3-Hydroxyaethylenalöge geschaffen, wobei die i-Oarbcutygrupp· erelkyliert, Als methy!gruppe der geecbUtEten Verbindung ocyliert und anschlie-

Dend die Aralkylgruppe entfernt wird.

Aralkylgruppen« die beim erfindungegenäßen Verfahren günstig verwendet werden können, umfassen Eennyl-, Bsnehydryl- VBd phenylmethy]gruppen sowie ihre im Kern substituierten Derivate, wie beispielsweise die bis(4-Methoxyphenyl.)-methylgruppe. Die bevorzugten Aralkylgruppen sind jedoch Bensiyl- und substituierte Beneylgruppen.

2s ist natürlich erwünscht, daß das erfindungsgeuäfe Verfahre* unter solchen Bedingungen durchgeführt wird, dsB eine aiiiias.1· br—HA -Isonerieierung und/oder Lactonbildung stattfindet. Das

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••-■O OR

erfindungsgemäße Verfahren vlrd Im folgenden stufenweise beschrieben, es ist dabei selbstverständlich, daß die beachriebenen Reaktionebedingungen die vorliegende Erfindung nicht be-Bchränken sollen.

1. Herstellung von 3 -Hydroxyaethy!derivaten dar Oephemcarbonsäuren (AuBgangsaaterigl)

Die als Ausgangsaaterialien verwendeten 5~Hydroxy»ethyl~ (oder De BB ce ty 1-5 Cephemcarbonsäuren können aus irgendeiner geelgneten Quelle erhalten werden. Sie können beispielsweise aus Cephalosporin C oder einem 7-Acylemidoanelogon davon duroh ensymatische Hydrolyse unter Verwendung einer aus Orengenaohalen stammenden Bsterase hergestellt werden, wie vorstehend' bereits angegeben ist· dieser Verfahreneschritt ist lediflloh aus öründen der Vollständigkeit in der vorliegenden Anaeldtutg enthalten.

2. Vereetermm (Sohutg) der 4-Carboxygruppe

Ee ist erwttneoht, kt,ine Veresterungsmittel oder -verfahren, die su Lactonbildung fuhren, su verwenden. Demzufolge sind die be~ vorsugten Verceterungsaittel Aryldiaroalkene, insbesondere Aryldiazomethane. Der Beter kann wahlweise auch duroh ütosetaung eines Aralky!chloride oder -broalde alt eines All^llaetallsale, beinpipleweiee d«ie Katriumsalz, des Analogons der 3-Hydroxyaethylcephemoarboneäure hergestellt werden. Beispiele von neon diesen letsten Verfahren herstellbaren Estern sind die 4~Triphenyleethyloster, la Kern substituiert· Tr!phenyl«*thyleeter

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⁶^D ORigi_Näl

und 4-Benayleeter.

Die DiaKoverbindung muß im allgemeinen lediglich in der theoretischen Menge verwendet werden und wird zweckmäßig in Lösung in einem waeserfreien Lösungsmittel wie Diäthyläther oder BBsIg-Bäureäthyleater verwendet. Nachdem der 4-Eater auf diese Weise erhalten worden ist, wird in Hinblick auf die Vermeidung der Lactonbildung die eich ergebende Lösung vorzugsweise nioht eur Trockne gebracht. Der 4-Bensyleeter beispielsweise ist schwierig wieder aufzulösen oder «u trooknen und wird auch bei längere* Trocknen Über wasserfreiem Kalsiunchiorid leicht laotonieiert.

Es ist noraalerweise nioht notwendig oder 'zweckmäßig, den sich ergebenden Sater für die nachfolgende Acylierung isu reinigen. Br kann in Form tinea Pulvere verwendet werden, daa durch Ausfällung bei der Zugabe der EsterlöBung buh etwa 10-faohen seines Volumena eines Hiohtlöaunganaittels, wie beispielsweise Leichtpetroleua (K - 40 - 6O⁰C) erhalten wird. Se sollte jedoch zur Verhinderung der Lactonisierung des Pulvere dafür Sorge getragen werden, daß es nioht längere Zeit in trockenem Zustand bleibt.

3. Acylierung der 5~Hydroxymethylgruppe Die Acylierung kann nach irgendeinem geeigneten Verfahren durchgeführt werden» beispielsweise unter Verwendung eines Säurtohlorids, Säureanhydrida oder eines gemischten Säurtanhydrid· ala

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Acylierungsaittel , vorzugsweise in Gegenwart einer organischen Base wie beispielsweise Pyridin und unter Durchführung der Reaktion in Lösung in einem inerten wasserfreien Löstmgsaiittel wie beispielsweise Methylenchlorid * Das bevorzugte Acylierungsaittel ist das Säurechlorid, da Anhydride eine unerwünscht lange HeaktionoKeit erfordern und dazu neigen, veranlaßt wiadtim durob ' die Lactonbildung» eine niedrigere Ausbeute zu ergeben. Die Acylierung kann bequem auch in einer wässrigen Aceton/Fatriu«- bioarbonatlösung durchgeführt werden.

Die Aoylierungsreaktlon sollte so schnall alo nöglioh durchgeführt werden, da unter den Bedingungen dar Acylierung die UmIa gerurg in das Δ -Derivat vor sich gehen kann, insbesondere wenn eine Aryloxygruppe in die 3'-'Stellung eingeführt wird.

4. Entfernung der Schutzgruppe in 4-Stellung Die Schutzgruppe kann nach einem beliebigen geeigneten Verfahren, wie beispielsweise saurer Hydrolyse oder Hydrogenolyse entfernt werden.

Das tatsächlich verwendete Verfahren zur Entfernung der Schutzgruppe ist von der Leichtigkeit, wo»it die Schutzgruppe entfernt werden kann, abhängig· So können esnohe Schutsgrtippen durch saure Hydrolyse leicht entfernt werden, bei anderen kann Hydrogenolyse notwendig aeln. Eine Bit Hydrogenolyse emtfernbajr· ist die Bensylgruppe, während die bl3-(Hledrig-aikoxyphenyl)~ netbylgruppe durch saure Hydrolyse entfernt werden kann, -ie

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schützende Estergruppe kann günstig sauer hydrolysiert werden, wobei eich ein relativ stabiles Carbonlumlon bildet. Die Hydrolyse kann bequem unter milden sauren Bedingungen, beiepieleweine unter Verwendung verdünnter nichtoxydierender Kitttyltin ren durchgeführt werten«

Sie Hydrolysebedlngungen sollen derartig sein, daß die schlitzende Estergruppe hydrolysiert wird und sich die 3-AcyloxyaethylTerbindung ergibt» während a) dit Hydrolyse der 3'~Acyloxygruppe, b) die Lactonbildung und c) die fydrolyse des 8-Lactamringes vermieden wird· fetcächlich werden fast immer in geringem Maß die Reaktionen s), b) und c) stattfinden, jedoch können ti« bei sorgfältiger Kontrolle der Bedingungen auf ein Minimum reduaiert werden·

Wenn die Schutzgruppe durch katalytisch« ^ydrogeiiolyee entfernt werden soll, kam als Katalysator beispielsweise Ballsdlum verwendet werden, ε*Β· auf «Ine» inerten frfiger, wobei die Reduktion Eweckaäflig in eines Lösungsmittel wie Eisessig oder Hethanol durchgeführt wird« Eis besonders geeigneter Eatalysetor für die Reduktion ist Holekohle mit 10)* P8lladlim₄

Die 3'-Acyloxygruppe kann gleiehfclle In die Reaktion eisibesogen werden, wenn zur Entfernung der Sohutsgrupp® die hydrogenolyse verwendet wird. Dies kann wiederum mit sorgfältiger Kontroll« der Bedingungen auf ein Minimum reduziert werden«

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BAD ORIGINAL

Die Anwesenheit von Schwefel in dem Cephalosporinkern und besonder β in der 7-Acylamidogruppe kann den verwendeten Katalysator vergiften und die Reduktion inhibieren. Dieee Schwierigkeit kann durch die Verwendung größerer KataIyaatormengen oder durch bee-Gcre Reinigung dee AusgangameterieIs vor der Hydrogenolyse überwunden werden.

Die in der Oe pheiac ar bonsäure vorliegende 7-Acylgruppe kann beiupiej.oweise eine der folgenden Gruppen sein, wobei, wenn diese reducierbare Punktionen enthalten, dieee der Reduktion unterworfen worden können:

T. R¹(CH₂J_nCO-, worin R¹ eine Aryl-, Cycloalkyl-, eubntituierte Aryl-, eubBtituierte Cyoloalkylgruppe oder heterocyclische Gruppe und η eine Zahl von 1-4 darstellen. Beispiele dieser Gruppe Uiifaeeen die Phenylocetyl-, Phenylpropionyl-, Oyolopentyl-, Cycl'jhexyl-, Thienyl-2-aoetyl- und Thienyl-3-aoetylgruppt.

II. ^_nH_2n+1CO-, worin η eint Zahl von 1 - 7 bedeutet. Die Alkylgruppe kann geradkettig oder versweigt eein und gegebenenfall« durch ein Sauerstoff- oder Schwefeleton unterbrochen oder mit einem oder mehreren Halogenatomen substituiert sein. Beispiele solcher Gruppen umfassen die Hexanoyl-, Heptanoyl-, Ootanoyl- und Outylthioacetylgruppe.

III. ^c _n ^H2n-1^C0"^{f worin n elne} 2a^{nl von 2}-7 darstellt. Die Al kenylgruppe kann geradkettig oder verzweigt und gegebcnenfalle

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durch ein iiauorskoff- oder ü'ihv,cjralr;tor.i im-fcerbro^hön »ein. Bsi- «ptelü noloher Gruppen uipfaoaen ülo Aorylyl-, Qrotönyl - und AI iyl th lctxc a tyi gruppe,

JV^ U¹WIl¹¹H¹¹¹OO^, worin IV dia oben angägsbene Bedeutung bo·» Bit:it und It*' und Il· · * gL^lch oder ferHchieden Bind unti Waseer·- afe-:ff oder eine Alkyl-*, Ax*jl« odor eine lioterooyolisohe Gruppe iJületitea, Ι'Λιι Belopiel einer derartigen Gruppe lot die Phono'tjraootylgruppo.

I^ H¹SCR¹-¹B^{1 M}00-# worin R·, E¹¹ und H" die oben angegebene Bedeutung beaitaen. Baiepiele eoloher Ihiogruppen iimfaeeen die S-Phenylthloarietyl-, ß-ChlorplieayXthioeootyl-, 8-B«»phe!53rlthloaootylgruppe»

H¹ (CH₂) S(CHg)_nOH¹¹H¹¹¹OO-, worin R¹, H* · uaß R··· angegebene Bedeutung beeitsen, a eine BaM von 1-4 and R 0 oder eine Zahl Ton 1-4 bedeuten. Beispiele derartiger Grugpea uejBi··- een die S-Ben&yltnioaoetyl", Beneylthiopraplonyl-s β-Ihenetylthlo· aoetylgruppe.

YII. H¹CO-, worin R^f die oben angegebene Bedeutung aufweist· B*iepiele derartiger Gruppen umfassen die Benaoyl-, subatituierte Beneoylgruppen wie die 2,6-3>inetho*ybensoylgruppe, uaä pentanoy!gruppe·

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Die Aoyioxy^ruppe» die in die 3'-Stellung eingeführt werden oolL, knrsri j (3d ο cnrboxylloche Acyloxygrupp^ oeln, dlo carboxyllaoh© Aeylfvuppe kmin die gleich« nein wie In der oben' für dio Aoylgruppy in 7-S teilung nn^ogebenen TjIb^!<e, Ba werden im allgemel-118η. höhere Aunbauten erhalten, wenn in der 3'-Stellung eine Aoy3.cxygruppe vorliegt, die durch dl'¹ Entfernung der Urtiutagruppe In 4-3teilung nicht woeentlloh beⁱ)iaflußt wird.

Weger ihrer antibiotiachen Aktivität oind Ton d*n o\»a bteokrltbeuen 3»AoyloiymethylTerbindungen -uiojenlgtn, di* in dia 3-Aoyl~ oxyme thylauba tituen fcsn oine eubetituierte -OHg-ßruppe beiachibert su der -CO-Gruppe enthalten, beeondere bevoreugt. Beispiele derartiger 3-Acyloxymethylgruppen umfao.;sn die 4*-Methylber.soyX- oxyme thyl -, Ieobutyryloxymethyl-₁ 2^s -HieriylpropionoxyÄe thyluna lenßoyloxymethylgruppö, Eine andere niitsllohe 3-Acyloxyeelot die 1 '«

üi'ii neue Yerbindungeu vaä iisgea dsslialfe im Eahoen der (i&nüen Έ-Tiinaimgi, wobei aie nütsllcfe« Ei^isohenprodukte dare tei len, die Jedoch i» allgsssinea kelms haha antlbiotische Aktivi tät eufweioen»

Diese Zviftyhenprodukte habeu. folgende

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O'

worin B₁ eine cisrboxyliache Acylpruppe und R, eine Aralkylgruppe bedeuton.

Cephemcorbonsäuren der allgemeinen Formel II, die neue Verbindungen darstellen, umfassen Verbindungen mit der allgemeinen Formeli

IV COOH

worin Rp die oben ungegebene Bedeutung besitzt und nioht Acetyl bedeutet und R- eine Aralkylgruppe, vorzugsweise eine Bensylgruppe darstellt, und ihre pharmazeutisch verträglichen niohttcxjsehen Balse. Die Salze können Metall-, Ammoniumode.T AmliisalEe, insbesondere Alkeliraetalloßlse wie beispielsweise Nßtriumsalse sein. Diese Verbindungen und Salze Bind als Antibiotika von besonderem Interesse.

Die folgenden Beiopiele oollen dazu dienen, die vorliegende Erfindung weiter zu veranschaulichen, ohne sie jedoch zu begrenzen. Die Ultraviolettabaorption bezieht sich auf Lösungen in Wasser oder wässrigem Phosphatpuffer bei pH 6,0. Die Papier-Chromatographie wird gewöhnlich entweder auf Phosphatpufferpapier oder auf Natriumacetatpufferpapier durchgeführt, wobei

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·■ 12 ■■
dna Chrcnn oogrorara--irimer tbvflrto laufen ^elafjcen wurde,

D.3D Phonphatpufferpnpler wird durch Eintauchen von Whatman Ιίο,1-Papier (30 χ 50 cm) in eine Löaung von 7,05 g waaoerfreiem Dinetriumhydrogenphoophnt in 2,5 1 Wasner (0,03 Mol), die nlt Phosphorsäure auf einen pH 6 elngeatellt ist, und Trocknen bei 37°<^! über Nacht hergeotelli«Pie Papierchromntogramme werden dann unter Verwendung einen n-Butnnol/Äthnnol/WasGerlüaungealtte] 19 (4:1:1) in Volunteilen) laufen golaoeen, In den Beiopielen wird nuf dieaeo Syatea unter der Bezeichnung BAW Bezug genommen.

Das lTatriumacntatpuff erpapier wird durch Eintauchen Λ^τοη '»/hatman No, 1 »Papier (30 χ 30 cm) in pine LU sung von 13,6 g hydmti-BiertejE Natrlumacetat in 1 1 Waaser (0,1 MoI)₁ dae mit Kcoj.ggäure auf einen pH 5 eingeetellt iat, und Trooknen hergeatellt. Die Papierchroinatograime werden Unter Verwendung einee Ennlfiaäureäthyleoter/NGtriumoceta-OlöeungBnittelsyatemB mit einem pH von 5,0 laufen gelnsnen. In den Beispielen wird auf dieoea Sys kein mit der Bezeichnung ÄtOAo Bezug genommen.

Sau res AlurainiuHOxyd (Woelm) wird nach INWiiktiTicrunfi euf die in den Beispielen angegebene Brockmann-Ötufe verwendet. In manchen Fällen wird ein ungepufferten Whatman Ho. 1-Pöpier mit Ben-Eol/Cyclohexun/MethanolA'^Q3G^er (5«5ί6t4 in Volumteilen) ale Lösungsmittel verwendet. Auf diecer System wird in den Beispi·-

Ιί'ϋ unter tier Bezeichnung BLiW itassug genommen, MIj üvai t /i'ephiijohen öyflterie verwunden die obere Phone ο. αν Lommgmalilmne nie mobile Phaoa,

DuH Jn tlüü Beispielen verwundet« X»8iohtp&i;rolüu<u hat, wann nicht *ui<lerfl angegeben, öinan X 40 - 6O⁰O,

Dia i'yflrierung»in den Beiapieien werden bei Raumtemperafeur und -druck ausgeführt, Die theoretische kuiiwhme an Waaeorntoff bezieht ο loh auf die Aufnahme bei dtr liydrogtnolyae toh ltdlglioh der Äralkylestergruppe. Der Kurse halber wird im folgenden die 3-Acc toxymethyl-7-phenylace taoldooetth-5-eai~4-oarbonfläuro ale 7 PACA beüeichneto

Belariel 1 a) 3-

Eine stark gerührte Miechung von 5 g 7-phenylacei;emldoceph^3~emoat (Reinheit 79#), 100 ml 100 ml Esaigeäureäthyleßter wird alt verdünnter eäure langsam biß pH2 angesäuert·

Der liseigsäureäthylester wird abgetrennt und die wftserige Löeung nit 2 χ 200 Dl Eeeigsäureäthylester extrahiert. Biese Löeung wird mit 2 χ 50 al Vaseer gewaschen, getrocknet und »it 1,20 g Phenyldiazomethan in 150 ml Äther behandelt. Nach 30 Mi

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nuten wKv d Le Lösung mit 4· χ 15 nil n-lInHCO--LÖr;ung und '"'." ml Waafif r extrahiert. I)Io UltrnvJolettnbßorptlon der vereinigten WiBül.nUiJoigkci ten se Ujt die Anwesenheit von 33)4 dea Aungangüirateri'.ilf, I)H₁- ge U-C--'cnotfc Enri{rötiur.-3iU.h;/le£3tor y/irl auf ein Volumen von 50 ml konzentriert, /a- *»00 π L ljeichtpotroleiui gegeben und eier Fet; hüfcof f wLrd nbgetrennt. .Der unter wird bei iumntumpe· ruUii und druck niehrer Stunden getrocknet und v/fciöt einen i\ 121 - 127⁰C, ein) max. 250 ημ und ein E « 176 auf. Bei an-

1 cm deren Yerauchen hat der Eatereohmelzpunkt den Bereioh von \^rd0 <- H5°, was wahrscheinlich abhängt von der Reinheit und der in dem Material eingeschlossenen Lößungemittelmenge. Der stoff ergibt im Infrarotopektrun (CiIBr,) folgende Peakwi '■ (U-IfACtQm)C=O) !705 (-G-O-OH₂-Ji ) i68Q und 1500 (-CONH) und 1250 cm*¹ (--C₄-O-CH₂-J* ).

b) Ä 0 e ty 1 i er UiIg₁₁ el te ,!^E^droafyae Wgl-7-piMjpplß a 11 ssdd ooe ph-3 -emerrbonaäürebenaylestere»

200 mg dee aus Beiepiel la) erhalten«!! BtDjyltetere werden alt einer Mischung von 5 ml !»sigsäur«anhydrit und 5 »1 Fyridin bei Re us tempere tür iseiirere Stunden behandelt, 3ie Miechang wird dann auf F.ia gegossen und ee wird ein farbloser Feststoff abgetrennt. Umkristallisieren aus Methanol ergibt farblose Hadeln, F* 151,5 - 153⁰C₁, Miecßsohnelispunkt Kit 7-IACA-Benßyleeter 150 *- 152°0. Das Infrerötepektrua (CHBr₅) iat mit dem des 7-PA-CA-Btneyleetera in Beispiel 1 (c) identisch.

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bad

ester (7"PACA^Peρzylcoter\.

Eine ;-j{iaunß von 1,0 β 3Aeetoxyiaethyl~7~phenylecetamidoaei;h-3-emcarbon«äure in 50 ml EooJgaäureäthylester wird mit 0,30 g Phenyldinzcinethan in 20 ml Äther behandelt. Nach 30 Minuten wird die LU-nung mit n-HnHCO,-Lb'eung extrahiert, mit Wasser gewaschen und gotrocknet, wobei nich 1,0 g eined gelben FeBtatoffeo ergibt. Urikrl:3ta 11 leieren hub Hethnnol ergibt den Eenzylcater in Form blao-R*?r gelber Nadeln Kit einem P. 151 - 153⁰O. Dae Infrarotopektrura (CHBr₅) hnt Peako bei 1Θ00 (ß"lactom( C«0), 1745 (0-CO-CH^), 1690 (-C-O-CH₂ -0, -COHH) 1510 (-CONH-) und 1230 .b:*elt) ck" (Estergruppen).

Beiaptel 2

Eine Lösung von 2,0 g 3-HydΓOxyaethyl-7-phenylβoetaaidooeph-3-ciinnrbonnäurebenEylester in 30 ml trockenem Methylenchlorid und 5 ml Pyridin wird langsam mit 1,0 ml Phonylacetylohlorid in 5 ml Methylenchlorid behandelt und anschließend bei Raumtempera tür 4 1/2 Stunden-gerührt. Die Lösung wird mit 10 ml n-NaHCO» fünf Minuten lang geschüttelt und dann mit 2 χ 15 ml 2n-HCl, 2 χ 15 ml η HoHCO, imd 30 ml Wasser gewaschen. Die getrocknete Methylenchlorid lösung wird eingedampft, wobei eich 2,66 g eines Schäumen ergeben, öer durch Chromatographie an Aluminium

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BAD

ir, -

ojtyd ί ίϊΐυί c V) (jcri Λι\ρ\ wird yiui erv:r.fl EU 50 al Benzol er· fibt Γ,?4 β clrion ff Jl.cn üohnunien, wormm der ph'inyluoetyl J erts reter iilr. f.¹ in frr.1; irb'oner Peutatoff (0,30 g) bei der Behandlung nit 40 i.l Kdh.'inol crhaJti-n w.lrJ. Der Feetntoff weint oinen

P. IV) - 1:'4°C, cin^pia>. 25Θ rau und ein E =110 auf.

' 1cn»

Die mcthnnoliiichc Löv.unc, die 1.'J4 β ijubotrot enthält, wirrt eu 4,0 c Hol (.kohle wit 10^= ?nl Indium gegeben, wobei ßie Torhrr in 1!) ml Methanol 3f Kinuten mit Waoceretoff geschüttelt wird, und die Mischung v/irci 15 Minuton ßi?schllttelt_f wobei in diener Lei I Of) ml Yr'nonerntoJf (9(^ der tJjporetiechen Aufnahme) ebfiorbierl werden. Der Katfilynntor wird abgetrennt, mit Methanol gowaschen und die vereinigte Methönollöoung wird oingedfimpft<

Ultraviolettuboorptionetioouungen eei.^en, daß 999* A·· rurtU kgewonnen worden sind. Bas Produkt wird in 60 ml Eeeigsäu·- reäthylester geltiot und mit η-NeHCO- extrahiert. Eindampfen der getrockneten Eseinoaurefithylesterlöeung ergibt 316 mg eines gelben GummiB (16?C). Die n-flnHCO,· Lösung wird imgeeäuert und mit EaBifiBäuieäthyleeter extrahiert. Eindampfen der getrockneten Eealgeäureäthylcoterlöflung ergibt 810 rag eines farblonen Schäumen <4 2#), der eich alo Miochung deo 3 -Phenylacetoxyme thy Ideriva -tea und des 3-Methy Ideriva tee erweirjt, wie durch Pnpierchromato -graphie (ÄtOAc) gezeigt wird. Die Mischung wird durch Gegenotroiaverteilung zwischen Essigeaureöthylester und 0*1 molarem Phosphat puffer (pH «■ 5,0), wobei 50 ml jeder Phaoe verwendet werden, teilweise getrennt, wobei die "5 diamond" -Methode von Bush and

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lM-rujtJii (Af¹Ii L .Uht:m. \^rJ<\H, <0. I c I ) i/y vwtjnd, t wL>M. Dnu 5 I'hunyi ■ nutH.oxyinti Lh/ld«r Lva t Llegf ia don hiikUont'ii ! ηηΊ ? (A¹K)An) /or, iln π Η»· ( hy 1 ^;Url VM t In fill an Ή) Fraktionen, ttin« -/ol J. nt anilin*-' l'runutUic wilt) <irreicht, wtmrt tilt; ^llr> dlHiinnd" Ver tr; 11111^; rilt dtm nuu ili-n [\Γ·; t lrtiien I und if gev/onnenon liicortrl ^:5\)'> 'Ii.) v.'lf.MJ-.'rhol t virü, /:ibii L iim) Protiukt nun don Prnlctlon-n I und Γ dlojor r.*vei-Leu '/tu tr i lung durch Hohnn 11 un₍·; do« oiuh ßr(jebt)ndoti P/Ujiuln mit Ätiir l.:.!üllort v/Lrcl. Dan 3-Fht'iiylucö to cyrce thylderlTü t v/trd til.a ι',ίγΜ iifi;-τ· !Λ-'ctj! tof f Sn i?J.fn;r Mnnge /on 194 mg '»rhnlton und einen ?, Wf ■■ 149°ίί (Zernotcunrt). eln)jm&x. ?59 tau und ein

If·
E * ,'06 Hut, Dafj Infrarotopektruai (G¹KDr,) hü fc Peakß bei

1cm ,

176?» (0 iacfcBm <C*0), 1730 (-0-C-CH₉-JZl), 1695 (-COOH) Ι6Θ0 und

150Π cm"'¹ (-CO-HH).

^R?-PACA

Beiitpiel

Eine EssigBäureäthjleoterlbaung von
acetamidoceph-3"emoarboncäureben»yleator wird au?; :, tritifflsalres (Beinhelf. 60^5) und 1,0Sg
Beispiel 1 beechrle'bea, hergestellt» Dieee 50 al

BAD ORIGINAL

geben und die Mlöchnng v/ird bin auf otwn 50 ml eingoäampf t; 30 ni! Methyl enchlorid, 5 ml Py r J din und 2 ml 4 Kethylfcen.-soylchlc rid worden hinsmgegeben und die Lößung wird bei RouQitemperntur drei Stunden lang gertihrt, Die Reaktionümlechung wie wie in Beiapie"? 1 beschrieben aufgearbeitet, wobei sich 5*3 g eineo braunen C'UreaJs ergebsn_f der in 30 rat ϊ!·ιυ i.goäureäth,yl*iteie gslöftt wird und donn zu 400 ml Leichfepetroleum gegeben Viird. Fach 15-slUncllgem Stehen v/ird der Bensylenter alo farblooer Peststoff in einer Menge von 3,14 g ('74/έ) erhalten-, Das Infrarotspekirum seigt einen starken Peak bei 1730 cir"

Der Feststoff wird wie in Beiopiel 1 beachrieben unter Verwendung von 100 ml Methanol mit 10,0 g Holzkohle mit 10$ Palladium und Wasserotoff v@ävL%ieTt_o 100 ml Wasserstoff (70?» der theoretischen Aufnehme) werdta Ie ?ö Minuten e'saaorMei^t_o Βίε SuTaetrat-

n des» leeiiaEtloß betflgo aac& Utrairiclettabeorp- rd» WIg jsethenolißsfec SÖsi^Eg &±v& eingedampft

. ^c. * "es

v^'Ov. ß2,(sSä 1) $3$ ag "·

m& «inta

blauten braunen Fest β toff eo, einer Mischung den > (^ .aoylostynotry¹ )-derivaten und dee 3·-Me t-l:y !derivaten und einer dritten Substanz, und'3) 150 mg einen braunen Feetotoffea, in der Hauptnache dna 3- (4''Methylbenzoyloxymeihyl)-deriViii mit einer Spur der dritten Sübotans, ergeben. Die ursprüngliche EoBigoäureiithyi eaterlöinin^ ergibt beim Eindtirapfen 756 Wg einea guioiniortigt-n braunen Pestutoffeo-·' Zurückßevronnen werden 43 Gew.-^. Die bei V) und. 2) -orhnltencn Stoffe werden vereinißt und durch elno "^r; fljovnonä"-ßeß'->r>.et'2"0iaverteilun£i zwischen EDeigeäureäthyler.lcr \:"(V0,¹ iaolare_;u-PhoEphntpuffer ''pli 5,5) fraktioniert, wobei 50 ill ,if der Phaoe veTV/endet werden. En ergeben ο ich 190 rag einer Ki&chun/j dos 5-"(4«iIe-thylbenzoyloxyinethyl)~deriv«tßü-'(H,,. = 0,63) urd dfr dritten Substanz (R₁,■ *= 0,95 in EeaigsaureathyleBter).

* 6

Die Mi ßclmng weiat einen \ max. 235 ^U und ein E » 500

1cm Der ous 3) erhaltene Feststoff weiat ein Kmax. 245 rau und ein

1$ ^r

E fe 38? nuf. Doö Iiifx'orotapektrum (OIJBr.,) >iat t.eoö ß-lacteiQ/C=O)_s 1715 (-O-GO-^—CH,); 1690 {-COOH und -CO-NH) und 1505 cm"*¹ ( CO-NH-). Bei djeoer Beweislage wird der Feststoff eis 3-(4-Methylbenaoyloxymethyl)'-7-phenylecetoinidoceph->3-emoarbonBäure formuliert. Es ist wahrscheinlich, daß da schneller bewegliche Produkt die C.eph-2-emoax·bonsäure darstellt.

ÄtOAc =4,8 ^H7-PACA

BAW » 1,2

Beispiel 4

Eine kbsung von 2,3 g 3~I|ydroxymethyl-7-phenylacetamiäo-ceph~3-' emcarbonsäurebenzylester in 20 ml trockenem Methylenchlorid und 5 ml Pyridin wird mit 5 ml Propionsäureanhydrid 4 Stunden bei Raumtemperatur behandelt. Die Eeaktionamischung wird in üblicher Weise bearbeitet, wobei sich ein braunes Ul ergibt, des eich beim Waschen mit Äther verfestigt. Sine geringe Menge des sich ergebenden Feststoffes wird aufbewahrt und der Heat (1,5 g) wird in 125 ml Methanol mit 4 g Holzkohle mit 10$ Palladium als Katalysator hydriert. In 130 Minuten werden 67«5 al Wasserstoff (95# der theoretischen Menge) absorbiert und die Lösung wird wie in Beispiel 1 beschrieben aufgearbeitet (Rückgewinnung 5S£)· Das hydrierte Produkt wird ait n~5aS0CU~Lüaung fraktioniert, wobei sich 1) 572 mg einer BeBDO^-onlöallchen Fraktion, ein farbloser Schaum, von dem durch fepie^alääfdiaatogmpliie c->a^igt wird, daß er Ausgangematerial enthält,- und 2) 352 mg einer HaHCO* löslichen Fraktion, die eine Mischung des Propionate und des 3-Methylderivates darstellt, ergeben. ."

Die NsHCOa-unlösiiehe Fraktion aus der ersten Reduktion wird erneut mit 1,5 g Holskohle mit 10$ Palladium in Methanol redueiert. Eb werden in 30 Minuten 17 al Wasserstoff (69Ji der Theorie) absorbiert und die Mischung wird wie zvewov fraktioniert, wobei sich 3) 255 ag eines NaEOO^-imlÖslishen Öuaais tind 4) 139 ag eines IlaBCO.-löeliohen Festetoffee ergeben, von dea geseigt

809884/1764

■■- 21 -

wird, daß er eine Mischung des Propionate imd des 3~We"thylderi~ votes darstellt· Jedoch erscheint im Gegensatz zu dem Produkt unter 2) die Hauptkomponente der Mischung das 3~Methy!derivat zu sein.

Sie Fraktionen 2) lind 4) werden vereinigt und durch Gegenetromverteilung (H5 Übertragungen) zwischen Beeigaäureäthylester und 0,1 molarem Phosphatpuffer (pH * 5,0) in einem 50-Rohrapparat, der mit einem automatischen Fraktionenoammler gekuppelt ist, getrennt. Die Fraktionen werden durch Papierehromatogrephie geprüft und die 175 mg Propionat werden als brauner 3uaai au« den Fraktionen 30— 70 erhalten. See 3-Metbylderiret in den Fraktionen 80 ~ 120 vor. Der teeofie Qmmi vita am thanol kristalliaisrt, wobei da t g^wSasoht*: ?TOyl*m% al· loser Featatoff in einer Meng® Ten SS se«, aufÄllt*

■· 1£
257 mji, B ■ 217.

ÄtOÄc - 2,2

^H7-PACA

BiLW . -. 1,1

Beispiel3_

2,0 g ^-

«yleeter wird mit Oaproylchlorld unter YerveiaSims öe* 1»'

80988471784 —

' "■ BAU

spiel 1 bsschriebenen Verfahrens acyliert_T wobei sich nach Garo™ jcatograpliie an Aluminiumoxid 1,935 g eines blassen braunen Feststoffes ergeben. Das Infrarotspektruia (CHBr*) des Feststoffes weist Beako bei 1800 (0-.£aotam) C«0)_t 1745 (O~fj_?(OBV)₄-Cn₅V und 1680 ein**¹ (-C-O-CH₂-^I vmä -CONH-) auf, Der Feststoff wirä in 100 ml Methanol Bit 6 g Holzkohle mit 10# Palladium- als Katalysator reduziert. In 15 Minuten werden 96 ml Wasserstoff (105$ der theoretischen Absorption) absorbiert und 61$ des Substrate» werden aus der Reaktionsmischung zurückgewonnen« Das Produkt wird in der üblichen Weise fraktioniert^ wobei sich 1) 734 ag eines HaH00,«unlöaliohen Schaiuaea und 2) 468 log eiaes Hai^CI*- luslichen Gucmio erg«b@n. Si® letEtere Iraktioi^ 2) erw@ist sieh als Minchung des 3-Oegroyloa^Betl^läeriirateB lind des 3'Met%löeri vatöß. Sie Papiörabroüistiigrepbie soifit auch« daß einiges an Produkt in Fraktion 1) »iirüokg*bli«ben ist» Me Fraktion 2) wird durch 9egenetr®BV@?teil«i!g (10 tll»«rtragungen) zwischen 5® x 50 ml Eeeigsäur*Stbyl«at®r und 10 % 50 ml 0,1 molarem PhosphaJpiffer (pH 5,5) fraktioniert und urne Txouäkt wird aus üen Fraktionen

• . ·* · ·-<·■ 3-9 (ÄtOAc) wä 6 - 10 (Puffer) al« brauner Guaasi in eiser Menge von 249 Bg Isoliert· Bes Cspro*t wird öcblieSlioii aIc farbloser feststoff in »iaar Waage won^ 162 mg arbeiten.

Λ max. 266 a>i, B * S2*

1 '

1*Ολο - 4,0

4,15 g Bensyl-3-hydroxyEiethyl-7-piienylBcetaiaMooepi2-3-emcar!30iiöäiire wurden rait I-Haphtfaylaoetylchlorid unter TerwenduBg deo in Beispiel 1 beschriebenen Verfahrene scyliert, wobei sioh der rohe Ecier als brauner Feststoff in einer Menge yöb 6,1 g ergibt. Kacn der Beinigung durch Kristallisation aus Benzol und Chromatographie der Mutterlaugen an AluminiuaDxyd, werden die 4»3 g öi!3 tdch ergebenden farblosen Feststoffes in äer üblichen Weise in ,150 al Methanol und tO ml lioxan alt 12,5 g loXekohle mit 1(>/i PalIööi?Jiff als Katalysator reduziert, Ia 30 Miauten werden 100 Ml Wasserstoff {%T$ €er thsoretiöchen AufnaJaae) absorbiert und die Bsaktloneisiaeirasi t^^d in dtr übllshen Weise auigesrbeit€t, wobei sielä :^: 1_t469 g slüeii ^mPj^;mWxllvtem Solsausee und 2) 449 «g eizie© lsflCO«-lVeli<di«& .'

plil· seigt, .4«ß eine

* derivate« Busamaen xit öea vorliegt.' 3) werden 300 mg eine» in a/100 XaOH-ltSsliohen braunen Öuiamie erhalten. Biese Fraktion enthält star das 3-(1-Haphthylaοetoxymetfcyl)^deriTat· Der restliche gitamiarti^e Stoff aua dieser fraktionierung wird wiederum sit 3 ι HolaBkefele alt 1C$ Palis alma, hydriert-.und ee werden 120 asg Produkt durch n/100-SöOH erhalte»· Bei beiäea Sednktionen wsidtn etwa 45^ su-

ORIGINAL

- 2k -

Die verschiedenen, fraktionell, die 440 mg Produkt enthalten, werden vereinigt und in n-Butanol mit Ifetriuaäthylhexanoat behandelt» wobei sich 168 mg

phenyleoetaaidoeeph-3~emoat ale farbloser Feetetoff ergeben.

aax. 263 (Biegung) 270, 278 (Biegung) und ?91 (Biegung) »μ,

E - 243, 255, 218 und 100. 1cm

ÄtOAe - 3,6

^S7-PACA

BiW - 1,2

Beispiel 7

Der aue 8,0 g reiser 3~%dr©25raetli3l~7-phenylaeetaaiaoeeph-3-«M-earbonaäure (telnBfit 45$) hergestellte Beneyltsttr wird Bit 2 leobutyrylchlorid itater ferwenä^ftf t®3 -ia -Seiiplt?- 1 Hteehrieb«- η·η Terfahrene aeyllertf wsJmi sieh ßaoh dea Verreiben Mit trockene» Leie)rlpet?9leuM 3,24 g.eimee gelben feetetoffea ergeben Bas Infrarot»p-tktrua (GEBr,) wtiet Peaks bei 1790, 1740 und 1680 ca* auf, wee beatätigt, SaS die Aoylieru&g stattgefunden bat. Aue der Bessylieru&g werden 15^ AuegangSMaterial surtolcgewoanea.

Ber later wird is 100 Ml Essigsäure Mit Belske&l* Mit

in ala Katalysator t^driert, in §8 Miauten werden 142 Ml Was ••rstoff (93t der fheorie) absorbiert. Ans

. S09884/1184

tionsmessungen wird die Substratrückgewinnung aue der Hydrierung auf 90$ geschätst und das Produkt wird fraktioniert, wobei sich d 1) 113 mg eines n/100-Na OH-lö suchen Pee te toffee, 2) 0,846 g eines HaBDO*-lb*slichen Feststoffes und 3) 1,5 g eines n/100-laOH-unlusliohen Qumls ergeben·

Die Fepierehroaatographle zeigt, deS die Fraktionen 1) und 2) eine Hischung des 3-l8ObutyrylO3tymethylderivatea und dee 3-MethyIderivatea darstellen und diese Mischung wird durch eine "5 diamond "^egenstroiaverteilting awischen 300 ml BsBigaäureäthylester pro Phase und 75 ml 0,1 molarea Phosphatpuffer (pH 5#5) pro Phase getrenntw In Fraktion 1) liegen nur 358 mg 3-lBObutyryloxyraethylderiTot vor und das wird mit 175 mg Natriumäthylhexanoat in 5 ml Butanol behandelt· Bas Natriumsals scheidet sich nicht ab und die Wswig %rird eingedampft« Sie Zugabe von Äther zu dem surückbleibenden Quasi ergibt einest farblosen Feststoff, der 180 ag 3-Ieobutyrylojcyaethy!derivat enthält. >, max. 258

1^
B » 100.

1θβ

* 3,2 BäW * 1,2

Bel«piel S

Brat glimm der 3-3?iphenylacetoxyiiethyl»7'"Phen₁vlaceta«idoceph»

3»tMcerbon«äure♦

^ 8,0 g rohe 3-Hydroxyαei;l3yl-7-phβrlylac(^ta<liäoceρh-3-βscarbonator·

σι (Beiaheü 45%) wird bensyllert und alt 2,8 g

BAD ORIGINAL

fid vie In Beispiel 1 beschrieben, acyllert« wobei sieb dem Ysrreiben «it leichtpttrolsu» (r 60 - 80°) 4,81 g eines braunen feststoffe« ergeben. Das Infrarotspektrua (OBBr.) weist Peeks bei 1790 (fl-Ieota«) C-O), 1755 (-CMSO-C^₂) und 1690 cm~¹ (-00ΙΒ-) auf, vaa anselgt, daß di« Acylierung stattgefunden hat«

4,81 g des sich ergebenden 3-MpheHjlaoetoxjHetfayl-7-pheny:Ucetamideoeph-3~ew>arbon8äurebensyleeters werden in 100 öl Essigsäure alt 12.5 g Holekohle nit $o£ Pelladiu» als Katalysator hydriert. 160 öl Wa es erst oft (87£t der Üieorie) werden in 60 Hinuten absorbiert« Die Mischung wird filtriert, eingedampft und der Rückstand in EeeigeättreäthylesteE· (A) gelöst. Me Extraktion mit n-HaBCO^ und h/100-IbOB entfernt nur ein« geringe Menge des Produktes Eusaauaen sit der geaaaiten 5-Metl^l-7-phenylaoetoiaidooepn-3-eaearboasäure_f die wJBircai der Hydrierung gebildet worden ist» Die swei Löeuagen trgeb«n_? w*nn ate rtreinigt und alt Bseigsäure-Äthylester «xtraMsTt werden, 162 »β «ine« brau&«n üuaaia. Dua^h Papierchroetatoerephi· (itO&o) wird gtseigt, daß die bei der basischen Bxtraktioa von4 ««rüelcblelbende l*eigsiur«Ithyl*sterlÖ8Utti den fisuptteil der

3-e»oarboneäur· enthllt, 41· duroh wiederholt« Extraktion mit n/100 IaOB (6 χ 100 el) entfernt wird. B£· Ter«inigten wäasrigen Lösungen werden angeslUiert uai mit 3 ζ 200 »1 laaigaüiirsäthylaat·? tztra&iert. Xiadsapfen am getrockneten !ssigsäureäthyleettrlösung ergibt naolt d«a Vaaebas »4^ Ither 250 ag «los« farblosen

Feststoffes. A*>x, 258 au, $^%* - 212«

^ lee

^o_RiGl^

S09I84/1784

- 2Ψ -

1 jig ».$»24'Jig'7-EACA bei» Sctoalenversueli (1O£ wässriges DM?)

Belapl«! 9

der ^-(g-

Bise Lösung dee J

eäurebensyleeterss der vie in Beispiel 1 hergestellt worden 1st, (aus 8,6 g latrtwa-J-iiyaroxyHiethy

(Reinheit K5$) Ie TO al trocksnaa
chlorld (lsi) tmd 5 al P^rrifJin vird ait 4 «PL 2-Baenylpropioiiylchlo« :-.ld 3 Stunden bei Ha£»te^$@r£it!ii' «egfUvrt· BIe Beaktloxunieehoag wird wie in Beispiel ί }μΛοοβΔ%1% wtiksi. &$Μ> m®h fiMwMmm äuroh AlumiiiiUBtoxjrd (Stti^ V) in Bensol 4t9 E -βϋ&5-& ^3isauä ©l©fe ^a^alieia· Bae Ißfrarotep:äi .3-10« {ßatürlioher HIa) weist leaks bei %Os ^:.<:,',. toa) 1790 Ca-Ss^te^l©«©)» 1735 ^O-CO-aHCCHj)^ aa« 1690 ob"¹ euf und öle BapierchrGaatograpliie (BCICf) selgt, öeß das dl eine Mieeitung tee 3"{2-Fher^lpropioao3Tpat)

und des

darstellt· Sie letctere Verbindung

let für den Peak bei 1810 esf'¹ fljsotoii/ 0«0) im

909884/1764 . bad

Dae öl wird in 100 ml Essigsäure mit 16 g Holzkohle mit 10$ Palladium hydriert und ee v/erden in 15 Minuten 230 ml Wasserstoff (115$ der Theorie) absorbiert. Die Reaktionsmisehung wird in Üblicher Weise aufgearbeitet und es werden 507 öifi 5-(2-Phenylpropionoxymethyl)-7-phenylacetamidooeph~3-'eacörbon8äure als brauner Gummi aus den Fraktionen 1 und 2 (ÄtOAo) einer "5 diamond"-Oegenatroiavertellung »wischen Essigaäureäthyjl ester und 0, 5 molarem Phosphat puff er {pH =» 5,0) bei den n~HBCH0 j-und n/1 QO-IaOH-Bxtrakten ieolitrt. 650 mg ^-Hethyl-7-phenylaoetaaiidooeph-^-enoerboneäure werden eis klebrige braune Prismen sub den Traktionen 6 bie einschlieSlioh 10 isoliert. Das gewünschte konnte nicht kristallisiert werden. Bine 7O#~ige wird mti n/iOO~3fötriui£ahj-droxyd bis su einen pH ^= 7,1 tltritrt. Bas Äthanol wird lia Tesuaa eingedeaipft tuid die £urüo|bleiberide

Löeun« gefriergetrocknet, wobei sich 520 mg eine» sajgroekopiocbim Puirers ergebene ^ mx; 258 mn, Ja w 172.

0,8 fig, 7-PÄGA beia Ssba.lesvswsnch. · ' <··,,

JUOAe

10

7,8 g roh« ^-

(Beißbtii 45#* erhalten aus dsm

§00884/1784

-23-

und eoyliert wie In Beispiel 1 beschrieben, wobei aich nach Ohrematogrephle an Aluminiumoxyd ein öliger Feetetoff ergibt. Bas Infrarotspektrua (OHBr«) weist leaks bei 1800 (S-Laetam^ OQ)₉ 1740 (C-OO-CH(At)-CaKg)₂-OH₅) und 1690 enf¹ auf und die Papltr ehromatograpoie (BCMIf) geigt, de θ auch etwas 5-Hydroxyaetnyl~7-phei^lacetamidoceph^^esoarboneäurelaoton vorliegt·

Der rohe !»-(a-J

esiearhQne&urefesneylester wird la der üblichen Weise mit Ie alt 1<# Palladium und Wasserstoff hydriert, wobei 64 sO. Wasserstoff (46jt der Theorie; in 40 Miauten absorbiert verdea« Die Misohting wird in der üblichen Weie« eufgearbeitet_t wqIm£ ein· 28aigsäur«ätharle*terlBaung «rbelten wird, die extrsMert •itt ' .-'·■ '

1) 3 ζ 50 el Ä-SfcH8@«* mm m&h €®m'AMintni «M Ixtrahitr»» ■it EBsigefitjreäthylefttis? 21ö feig vim* ferausen öl#* »rgibt»

2) 6 χ 50 al s/100-BsOB» «■· oeofe des Aniftutrie und »actraaierest .«it BBBiiiifeoreÄthyleeter 161 «5 eine« Musen Glee

3) 2 χ 25 »2 !«itriiBipSsosphatjjaffer_s fS ■ 11,8.

Der swelte Ixtrakt hat einen 9E * 10»$ und di· Yer#iiiif ten Extrakt« ergeben .13.1 m$ eines teraunen 03.es»

S09884/1764

Durch SapieroliroBatographle {itQAc) wird gezeigt, dsS äse vünsohte Produkt in allen drei Extrakten vorliegt und wird in einer Mtnge von 314 ag als braunes 01 atze dem Iraktionen 1-3 (XtOAo), ei&sei&ieSlloli einer "5 die»oaS—ö«g*netToanrtrt*il«B« iwieofcta Ssslgs&ireiithyleeter (jede Stiase 1CHI all «ad 0,5 rea fhoepbatpttffer (pH * 6*5, |«d· Heu SG Sl)₉ 1mU*v&

dta fvaktioaaa 8-10 «ä&sohlieeiie^ CltO4c) isoliert«

Bine USsung des Öl·» in 70?t-lg wäeertgeai Xtlienol {50 al) Bit n/100« IfcOH bi« pH * 7,1 titriert» See Itäenol wird deitpft und die suraok^eiliende wiearige l^etasg wobei. 250 ng einte fereuaee l^groekopiaofeea leetetoff·»

bleiben, λ ικα« (^·§«ζι§> 260 as_t B¹^ » 145» t }ig * 0,43 Pi

' leubeia

1t

Heretellung dey

Der bus 2,5 §

(Beinbei« 65^} iMVgeetellt«

sa4dQoeplt»5*e*)6axtooseSarebe]uqrle*ter wir£ asofe' AeB in Beispiel 1 besottriebensA Tsrfstesn Bit 1 al Beaseylefelcrid aeyliert» wobei sieb nseb des Tsxveibea Bit Leishtpetroleox ClL ot> - &QP) 2,45 β

OB .

oo eines brennen festetoffes srgeben. Bss Infrsvotspektnaa

^ weist Teste bei 1790 {»-leete») 0-0}, 1750 CGrOMJ mA 1685 ob*

Jj g«f und die IsoieroliroBBtoirepliie (BCSW) seigt« ds8 auch stans

Der rolle 3-

eäuxeliitnsjleBter wird in aer Üblichen Weise eit 9 & Holekohle ait 1036 Palladium ia 50 ml Essigsäure hydriert« trolttl 95 al Was eerstoff {81$ der S3i«©yi») ift 15 Minuten absorbiert werden. Die Reektlonsuiachung wirä in der

im Verlauf der FraktiOBieruag der

wird des Produkt susosnaen *it der

oeph^-emoörbotieäiir« iasgcasat durcli JS-IaBBO* eEtrallitrl· 593 Sg iestarteff wurden du^oh *ina ^tt$ Äi«»ad^e-fsrt«ilu2ig ßöfaea fi*ic!ien foltalt!» (100 al) Sseig»^i«p«ät33tyi#«t»r und 0_t5 malert« Biosphetpuffer {$H 5) fwiSitiöaitrl* Hl# 3-BeIiBOj-IoXyeeth7l-?-pbsnylec«tfiei4G;>-.^»>«se«ri!«öelby^ wird βΰβ den 9rak-

%itmm 1-4 lÄ)

•oheti «it 5 al Atb«y ids^i öl· in .Soge «Siawi In einer Mtag©.^©a 29δ ag erhal**Ku aus» Üf_s ^fe«i^ ff teau) 3ψ* M

fapierohroaetogrepM» itigt it· ÄcweewüstSt «ififtr Sp*a?

^OA-D

Beispiel 12 Herstellung der 3^{2

3-eaearboneäure

Der aus 5 g latrltaa^-hydroÄyiaetbyl-T-piaenylacetaaidooeph-ü-eaioat (Heinbait 65?*) hergestellte 3~HydroJcymethyl~7-phenylacetaaidQceph-3-emoErbonaäurebensyleater wird mit 1,6 g 2-MaphthoylChlorid acyliert wie in Beispiel 1 heeehrieben, wobei sich nach Verreiben alt Leichtpetroleum (K 60 - 80®) 2,25 g 3~(2-Haphthoyloxymethyl)-7-phenylaoetamldoceph~3~emcarbone&ux'ebensyleeter ale leicht brauner Feesetoff ergeben» Sas Infrarotepektrum (Cteür*) weist ?eaka bei 1795 (fl~üaetaa) 0*0), 1730 (0-OH-C₁₀H₇) und 1690 om"¹ auf.

Der ?eetetoff wird Bit 7 g Holskobl* mit 10* Palladium in 50 ml Beeigeäur· hydriert maA e« werden 36 ml Vasseratoff (42* der ffheorie) in 20 {flauten ebaorblert. Dl· Heaktionamiechung wird in der üblichen Veiae aufgearbeitet und balm Fraktionieren der Eeaigafcureäthyleaterlöaung wir« dia 3*-(2-Iaphthoylozymathyl)-7-phenylaoatanidoceph-3-eaoarbonaaere, etwas 5-«eth3rl-7-ias*nylaotta«idocei)h-3-emcarbonaäure und ein« geringe Hange 2-8»ffathoeefture mit n-IaBOO-extrahiert. Die eioh ergebeaaen 554 mg Teätatoff werden durch eine "5 diamond--Terteilung awiaehan Seaigeäiirelthylaeter (Jede Phaee 150 nl) und 0,5 molarem Fhoaphatpuffer (pB 5,6, jede Phase 100 ml) fraktioniert und die 5-(2^f-Iaphthoyloxymathyl)-7-phenylaoetemidoceph-3-emcarbonaäure wird asusammen mit etwa· laphthoteäure aua den

Fraktionen-1 - 3 einschließlich (ItOAo) isoliert.!'Die 255 mg leicht brauner Feststoff worden mit Äther gewaschen, wobei sich 124 mg 3- (2' -Naphthoyloxymethyl)-T-phenylacetaiaidooeph-J-emcarbonsäure ergeben.λ max. 235, 250-60 (Plateau)»μ, Β 722, 178.

ton = 1»05 üg 7-PACA beim Schaienversuoh.

¹^-PAGA ^{Xt0Ao 4}'⁶

Beiapiel 13

a) Herstellung de« Bie~(i-»8thoxyph«Qyl)-Hi5l»cojitc1;bJ>aiao

Bi8-(4-fflethox3^benEDpbeiionhydraxon wird nach dea Verfahren von BaltEly et al, (3,Qt&* Ohee. 1961,26, 3669) htrgeiteilt.

17 g Bydrasüon (75 aÄol), 45 « Eeliuahydroiyd (82 »Mol) and 25 f Queckeilberoxy$ (115 Äol} in 750 al Äthtr, 400 ml Mtthenol vaaä 30 al Wesft>r werden 2 1/2 Stundtη stark ferOhrt. Iaoh «iaer halben Stunde wird ein grauar Schleae in der purpurnen Lösung siohtbar. Di« üb«rat«heiid· ?lU«eigk«it nad Sie V«6ohflüeslck«iten des Schlssmes (Itlasr) wtrd*E Ttrtlnigt vault alt 2&~Btetritmhyä?oxyd (1 χ 200' B'l s ■'■:·; 50 al) gtwasohdfö. Bi* »iufc erg «te« als ätaerlsfsb· Lösung wird auf 200 al konzentriert .-unÄ.-bei -»10° über laoht ete-

hen gelassen, wobei sieh 10*.1 g' der krietalllaaa*. jnirptirferbeaan oben bezeichnet®a Verbinduag itlt eiaea. f» 111 - 113° (Isrsetsuag) , Die Hotter lauge ergibt elae weitere Ätssteut© |5_f9 g) alt

I0SSS4/1TS4 "" \ - - ■■-'*

BADORiGlNAL

elnea P. 109 - 112° (2ereetzung). Die Geaamtnuabeutβ beträgt 16 a (95#)· Infrarotabaorptlon (in JTujol) 2030 cm*"¹, liltravio lettabaorption (In Äthanol)), max. 232, 283 mu, B 800, 660.

1cm

b) Heratellung defl 3-Bbrdroxymethyl -»7-»phenylacetaBldooeph-3~esi-

Sin· getrocknete Lösung von 3-Hydroxyaethyl-7-phenjlacetamidoaeph-O-eaoarboneSure in 1000 ml Eesigaäureäthyleater wird aua seinen Hatritmeale (Reinheit 6OjC₉ 12,3 g » 20 aMol reine» SeIs) hergestellt und alt 4,8 g BiB-(4-meth027phenyl)-diaeoeiethan (18,7 aMol) in Anteilen Ib Verlauf von 45 Minuten behandelt un4 bei Bausteaperatür weitere 15 Minuten unter gelegentlich·» U»~ •ohtttteln atehen gelaieen«

Die löeung wird alt 2 π 50 ml n/2 HeHCO^ extrahiert, alt 2 ι 50 al Waaeer gevaechen, getrocknet, bis auf otva 400 al eingedaapft und In 600 ml Äther gegoeeen. Die 8,75 g Hiedereohlag (76Jt) der _ in der Überaohrift genannten Verbindung j enthalt« eine geringe Henge T-PAClALeoton (Beplerohrgeatographle» Bdef-Syatem). Der rohe Hydroxyeeter seigt «ine Icfrarotabaorption (OHBr₅) bei 17Θ0 (e-Ia©tam>, 1715 (OO-0-e*jl),1670, i600_t 1530 (Bh), 1505, 1242 oaf¹.

ο) Ofrwanfllttnjt uff ^-Hydroajaothyl-T-phenyls0etaMlflooeph-3-giB» oarbonattnrt^blB-(4-methoaarphenyl) »methyleatera in den 3-Aoet-

909884/1764

aaurp Hydrolyse gum 7"PACA ♦

1»25 € ifydroxyester (2,1 aMol) in 30 ml trockenem Methylenchlorid und 1 al Pyridin wird mit 0,4 ml Acetylohlorid behandelt und die Lösung wird bei Raumtemperatur 1 1/2 Stunden gesöhüttelt* Nach dem Verdünnen mit 200 ml BaBigaäureäthyleeter wird die iöeung mit n/2 HeHOO₅ ( 3 χ 50 ml) extrahiert* Bit 4 χ 50 al Wasser gevjasehen und getrocknet. BIe Chromatographie aeigt die Anwesenheit τοη Auegangematerial, Acylierungaprodukt und von etwas 7-PACA-Laoton.

Eindampfen der Sselgeaureathyle^terlosung Mb auf etwa 30 führt ßum Auefallen von 570 lag Laoton, P. 217 - 220⁰O (Zereetr.ung). Dae Flltrat wird in Lelchtpetroleum gegossen und bei 5° über Hacht stehen gelassen, wobei sich weitere 246 »U I*aeton ergeben, Ϊ. 205 - 211° (Zerseteung). Eindampfen der Mutterlauge und anschließendes Waschen des Produkte mit Leiohtpetroleua ergibt 310 lag rohen 7-PACA-4-eeter nit einer Xnfrarotabaorp· tioa, die la wesentlichen der vorher beschriebenen gleicht« Die Ohroeatogrsphie «eigt, daß der rohe Beter eine geringe Menge an 7-PAOA enthält.

Der rohe 7-PAOA-eeter (300 ng) wird in 10 al Siseteig gelöst and 18 Stunden bei RauBtenperatur gehalten· Das Produkt, Haβ wie in dem früheren Beispiel beschrieben isoliert wird, ist ein brauner

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ner Schaum (125 mg). Umkristallisieren «üb Aceton ergibt 64 mg

< 1?S

unreine β ¹Z-PAGA, ^rnax. 258 - 260 mu_t E = H6, die Infrarot-

1cm

absorption ist im wesentlichen mit der einer Originalprcbe identisch. Die Papierchromatographie eelgt Verunreinigungen zur in Spuren*

d) ?-Ben8oyl03ymethyl~7"Phenylaoetaaldooeph-3"emoarbonpäurebi β-(4-methoxyphenyl)-me thylester.

1,2 g 3-HydroxylBGthyl-7-phenylaoetamidoceph-3-elncarbonsäurebis-(-r-aethoxyphenyl)»methyleoter (2,1 aMol) werden mit 1 ml Ben-· Eoylohlorid unter Verwendung des unter ο) beschriebenen Verfahrens aoyllert. Die Chromatographie zeigt die Anwesenheit ron Ausgangematerial, Aoylierungsprodukt und 7-PACA-Laoton.

Die wie Üblich durchgeführte Isolierung ergibt 786 mg 7-PACA-Laoton, F· 200 - 205°. Eindampfen der Mutterlauge und nachfolgendes Waschen des Produktes mit Leichtpetroleum ergibt 286 mg der in der Überschrift angegebenen Verbindung als einen braunen Schaum mit einem Sohaelspunkt über 60° bei langsamer Zersetzung*

Infrarotabsorptlon (OHBr-) liegt vor bei 1780 (B-Leotam), 1735 (OOOPh), 1710 (σθ-0-aryl), 1660, 1590, 1500, 1240 om"¹. Die Chroaatogrephi« eelgt die Anwesenheit einer geringen Menge 3-BenEoyloxyaethyl-7-phenylaceteinidooeph-3-enoarboneäure·

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e) Saure Hydrolyse de3 3_i"'_iBeng;pyloxyigethyl~7-phenylacgtamidoceph

-(^Eethoayphenyl^methyleatera zur ff-

Eoyioxymethyl~7"Phenylacetami_[äpceph"?-emcarboneäure,

275 mg nach d) erhaltener roher Beter werden in 10 ml Eisessig gelöst und 18 Stunden bei Raumtemperatur gehalten. Die wie üblich durchgeführte Isolierung ergibt aus der BaHOO^-löslichen Traktion 96 mg eines leicht braunen Feststoffes» der bei» Kristallisieren aus iceton 74 mg der in der Überschrift angegebenen Substans liefert; )nax, 227, 258 -260 mu (Plateau), E 440» 162»

lon das Infrarotspektrum 1st im wesentlichen mit dem in Beispiel 11

beschriebenen identisch.(\ warn. 227, 258 - 260 mu (Plateau), 1$

B 537» 275).

Die biologischen Eigenschaften der in den Beispielen hergestellten Verbindungen werden in der folgenden Tabelle gezeigt« Si« Steph. eureus -Stämme A und C sind penicllllnreslstent, während der Stamm B peniαillimempfindlieh ist.

BAD OHJGiNAL

Beiepiel Ιο.	Rolirv crd taming β te st (γ/ral)	1 99 OQCO	m β a "ο fi era 03	Gram-negativ	rl O ' O •	S ί ! ι CQ	-94 U I έ	Schi (EDe cub* reic	itz der Haua Yj/og/kg/DoBie
2	Oram-poaitiv	0,62	2	4	I ■ j	125	*! can	Sutane Vareb- »huag
3	3 L «j W CO	0,08	<Ό,5	16	62,5	250	>50	Ή O * M
♦ ·	0,16	0,16	1	16	250	125	1	>50
5	0,31	0,62	8	31	62,5	250	>50	>50
6	0,62	0,16	<0,5	16	250	125	>50
7	2,5	0,31	4	31	62,5	>250	10	>50
8	0,31	1,25	2,0	250	250	>25Ο	2,5	>50
9.	1,25	0,3	1,0	►250	125	)25Ο	50
10	2,5	0,62	2,0	£50	>250	>25Ο	5	>50
11	1,25	0,8	2,0	125	>25Ο	250	10	>50
12	2,5	0,62	4	£50	125	250	2,5	>50
0,31	250	15	>50
0,31	> 50

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Claims (1)

1. Verfahren zur Herstellung einer Cephemcorbonsäure der allgemeinen Formel

   CHoOR,

   C. t

   COOH

   worin H₁ und H_g carboxyl!sehe Aoyigruppen bedeuten« die gleieh oder verschieden eein können, und Ihrer Salse, dadurch gekeim~ Belohnet» daß mn die entsprechende 3-HydroxynethylTerbindtäsg, worin in der allgemeinen Yorael II BL Waeaeratoff bedeutet, -Hit einem Aralkyllerungemittel unaetst, um ale Schutzgruppe eine Aralkylgruppe in die 4-Carboxygruppe einzuführen, anschlleSend die geochlltste Verbindung nit einen Aoyllerungsalttel umaetet, um die 3-Hydroxyeethylgruppe der feeohUteten Verbindung zu acylieren, und aneohließenö die Aralkylgruppe aus der oxygruppc entfernt·

   2, Verfahren nach Anspruch 1, daduroh gekennaelchnet, daß bub Schute der 4-Oarboxygruppe eingeführte Aralkylgruppe eine Bensyl-, Benxhydryl- oder Trlphenylnethylgruppe oder ein Im Kern

   909884/1764 bad c-fugjnal

   iubetltuiertea Derivat davon darstellt*

   3· Terfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, defl ale Aralkylierungaaittel ein Aryldiaeo&lkan verwendet wird.

   4· Terfahren nach Anspruch 3» dadurch gekennseiohnet, dai dta Aryldiessoalkan in Löeucg in einem wasserfreien Lösungsaitt«! wie Biäthyläther oder EDoigsäureäthyleete: verwendet wird*

   Terfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch sie AralkylierungsBittel ein AralJcylolilorld oder -broaiü

   wird und ein Alkaliaetallsals der ontepreohwnden 5-Hydroxymethylverbiiidune «mlkyliert wird.

   6* TstrfaSar««, mc%. «i&«« der vorhergehenden-Ansprtljhe, gtkennstioim·^* &uI ~ ftsohUtite TerModunf iwischan der Ar« 1 kylierun« und der Auflim-'m^ ,-loht m&:· f^e^k^t gtiMrsaht

   909884/178A