DE1545763A1

DE1545763A1 - Verfahren zur Herstellung von Dihydrovinblastin und Dihydrodesmethylvinblastin

Info

Publication number: DE1545763A1
Application number: DE19651545763
Authority: DE
Inventors: Marvin Gorman; Norbert Neuss
Original assignee: Eli Lilly and Co
Current assignee: Eli Lilly and Co
Priority date: 1964-04-01
Filing date: 1965-03-31
Publication date: 1969-10-23
Also published as: BR6568453D0; BE661948A; US3352868A; GB1102224A; CH507264A; SE329630B; ES311042A1; FR5487M

Description

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Eli Lilly and Company, Indianapolis, Indiana, V.St.A.

Verfahren zur Herstellung von Dihydrovinblastin und Dihydrodesmethylvinblaetin

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von Dihydrovinblastin, Dihydrodesmethylvinblastin, oder den Säureadditionssalzen dieser Verbindungen.

Bei den Verbindungen, aus denen erfindungsgemäß Dihydrovinblastin und Dihydrodesmethylvinblastin hergestellt werden können, handelt es sich um das Vinblastin bzw. das Desmethylvinblastin. Diese letzteren Verbindungen können durch die Formel

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OH

0-COCH,

COOCH,

wiedergegeben werden, in der R einen Methylrest oder ein Wasserstoffatom bedeutet.

Wenn in der obigen Formel R einen Methylrest bedeutet, handelt es sich um Vinblastin und, wenn R Wasserstoff bedeutet, um Desmethylvinblastin.

Erfindungsgemäß wird ein Verfahren zur Herstellung von Dihydrovinblastin, Dihydrodesmethylvinblastin, oder den Säureadditionssalzen dieser Verbindungen vorgeschlagen, das dadurch gekennzeichnet ist, daß man Vinblastin, Desmethylvinblastin oder ein Säureadditionssalz dieser Verbindungen über einem Edelmetallkatalysator in Gegenwart eines angesäuerten Mediums hydriert und gegebenenfalls das erhaltene Produkt in ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz umwandelt. Die Erfindung schlägt weiterhin als neuartige Verbindung Dihydrodesmethylvinblastin vor.

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Eine der erfindungsgemäß hergestellten Verbindungen, das Dihydrovinblastin, hemmt das Wachstum von auf Mäuse transplanierten Tumoren, insbesondere der P-1534-Leukämie. Dihydrovinblastin ist in dieser Beziehung besonders hervorragend. Z.B. führt eine Dosis von 20 mg Dihydrovinblastin je Maus am 1., 6. und 10«Tag - also eine Gesamtdosis von 60 mg - zu einer 173$igen Verlängerung der Lebensdauer der Mäuse. Dieses Ergebnis ist genau mit demjenigen vergleichbar, das bei der Verabreichung von 1,5 mg Vinblastin selbst am 1., 6. und 10. Tag mit einer Gesamtdosis von 4,5 mg je Maus erzielt wird. Ganz unerwartet jedoch läuft die Toxizität von Dihydrovinblastin mit seinen Antitumoreigenschaften nicht parallel. Z.B. vertragen Mäuse leicht auf einmal eine Dosis von 90 mg/kg Dihydrovinblastin, während bei Verabreichung einer einzelnen Dosis von 5 mg/kg Vinblastin je Maus eine hohe Sterblichkeitsziffer festzustellen ist. Die Tatsache, daß diese

en
Verbindung' das Wachstum einer transplantierten Leukämie bei der Maus zu hemmen vermögen, ist bereits für sich äußerst interessant, da es bei den Vincaalkaloiden nur durch eine Untersuchung der MindestStrukturerfordernisse für die Hemmung von transplantierten Tumoren bei der Maus möglich ist, aktivere und weniger toxische Verbindungen herzustellen oder einen Einblick in den Mechanismus der Wirkung dieser Verbindungsgruppe gegenüber Tumorzellen zu erhalten.

Dihydrodesmethylvinblastin ist ein brauchbares Zwischenprodukt zur Herstellung von Dihydrovincristin. Die letztere Verbindung

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wird aus der ersteren durch Formylierung erhalten.

.Die erfindungsgemäß erhaltenen freien Basen sind amophe, niedrigschmelzende Festsubstanzen, die sich leicht in weiße, kristalline Säureadditionssalze umwandeln lassen, wenn sie mit geeigneten Säuren zusammengebracht werden. Diese Säureadditionssalze stellen im allgemeinen hochsohmelzende Pestsubstanzen dar. Unter den Säuren, die zur Herstellung von Salzen mit * den erfindungsgemäßen Aminbasen dienen können, befinden sich die folgenden: Salzsäure, Schwefelsäure, Bromwasserstoffsäure, Maleinsäure, Weinsäure, Äpfelsäure, Phosphorsäure, Bernsteinsäure, 2,4-Dinitrobenzoesäure und dgl..

Die erfindungsgemäßen Dihydroverbindungen können von ihren Ausgangsverbindungen sowohl mit Hilfe der DünnschichtChromatographie als auch durch die Daten der magnetischen Kernresonanz unterschieden werden. Die Unterscheidung einer Dihydroverbindung von der Stammverbindung durch DünnschichtChromatographie ' sei im folgenden an Hand des Paares Vinblastin-Dihydrovinblastin erläutert. Die Dünnschiehtchromatographie dieser Verbindungen läßt sich mit Hilfe von Kieselsäure als Adsorptionsmittel und 100#igem Methanol als Lösungs- bzw. Laufmittel durchführen. Es wurde gefunden, daß unter diesen experimentellen Bedingungen das Vinblastin einen R_f-Wert von 0,43 aufweist, während das Dihydrovinblastin, das etwas weniger polar ist, einen etwas größeren R_f-¥ert von 0,48 besitzt. I¹Ur dieses Dünnschiehtchromatographie verfahr en werden die Substanzen in Form eines

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Säureadditionssalzes auf die Chromatographieplatte aufgebracht. Auf jeden Fleck wird dann ein Tropfen von mit Ammoniumhydroxyd gesättigtem Hexan gegeben, um die freie Base freizusetzen) die sich sodann in Gegenwart des als Laufmittel verwendeten Methanols auf der Plattenoberflache nach oben bewegt.

Die erfindungsgemäßen Verfahren lassen sich leicht durch Niederdruckhydrierung der Stammverbindung mit Hilfe eines Edelmetallkatalysators in einem inerten Lösungsmittel herstellen. Ale Katalysatoren sind von besonderem Wert feinverteiltes Palladium und Platin, doch sind andere Edelmetalle ebenso brauchbar, und zwar entweder in feinverteiltem Zustand oder in Pore von Trägerkatalysatoren. Unter den zur Verfügung stehenden inerten Lösungsmitteln werden die niederen aliphatischen Alkohole, wit z.B. Äthanol, bevorzugt.

Die Erfindung wird durch die folgenden Beispiele erläutert. Beispiel 1 *

5 g Vinblaetinsulfat und 3 co* 12 η Salzsäure wurden zu 200 ecu 95#ige* Äthanol gegeben. Das Gemisch wurde in eine Niederdruok-Hydrierungsvorrichtung gebracht und bei einem Wasserstoffdruck von 2,1 kg/cm unter Verwendung von 2 g PaI-ladiumoxyd als Katalysator 1,25 Stunden bei Raumtemperatur hydriert. Das Hydrierungsgemiach wurde zur Entfernung des Katalysators filtriert. Das Piltrat wurde durch Eindampfen im Vakuum eingeengt und sodann abgekühlt. Aus de» Reaktionsgeeieoh kristallisiert· bei« Stehen Dlhydrovtnblaetindihydror-

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Chlorid aus· Nach TJmkristallisation aus einem Gemisch von Methylendichlorid, Äthanol und Äther schmolz die Verbindung unter Zersetzung im Bereich von 236-242⁰Cf [oc]^ » 32° (Wasserι c » 1,0).

Das Dihydrovinblastindihydrochlorid wurde in das entsprechende Sulfat umgewandelt, indem das Hydrochlorid in Äthanol gelöst und die Lösung mit 1#iger äthanolischer Schwefelsäure versetzt wurde. Das Dihydrovinblastineulfat kristallisierte aus dem Reaktionsgemisch naoh Einengen und Abkühlen aus. Nach Umkristallisation aus Äthanol schmolz das Sulfat unter Zersetzung bei etwa 255⁰C\ [a]^⁶ - +29,2° (Wassert c - 1,0).

Andere Säureadditionssalze lassen sich herstellen, indem Dihydrovinblastindihydrochlorid oder -sulfat in die freie Base umgewandelt und sodann eine Lösung der freien Base, vorzugsweise in Äther, mit einer äquivalenten Menge der gewünschten Säure, vorzugsweise ebenfalls in Äther, zusammengebracht wird. Das erhaltene Säureadditionssalz des Dihydrovinblastins kann entweder als unlöslicher Niederschlag oder aber - wenn es löslich ist - durch Eindampfen der Lösung im Vakuum bis zur Trockne isoliert werden*

Balepi«! 2

Aus 0,25 g Platinoxyd, 12 ecm 95^igern Äthanol, 3 ecm Eisessig und «iner Lösung von 0,45 g der amorphen freien Base Vinblastin in 10 OCM ÄthanoliEieessig « 4$1 wurde ein Reaktionsgemisch her*

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gestellt. 5 Tropfen 12 η Salzsäure wurden zugegeben und das Gemisch in einer Niederdruck-Hydrierungsvorrichtung wie in Beispiel 1 hydriert. Nachdem die theoretische Wasserstoffmenge aufgenommen war, wurde der Katalysator abfiltriert und der Filterkuchen gründlich** mit einem Gemisch aus Methanol und Eisessig gewaschen. Das erhaltene Filtrat und die Waschflüssigkeiten wurden vereinigt und durch Eindampfen im Vakuum eingeengt. Das Konzentrat wurde mit Wasser verdünnt und das Gemisch durch Zugabe von lO^iger wäßriger Natronlauge alkalisch gemacht. Die freie Base Dihydrovinblastin, die in dem alkalisehen Medium unlöslich ist, schied sich ab und wurde mit Hilfe von Methylendichlorid aufgenommen und extrahiert. Die Methylendichloridphase wurde abgetrennt und getrocknet und das Methylendichlorid durch Eindampfen im Vakuum entfernt. Der das Dihydrovinblastin enthaltende Rückstand wurde aus Äther umkristallisiert und schmolz bei etwa 198-202⁰C.

Beispiel 3

5 g Vinblastinsulfat wurden in 50 ecm Wasser gelöst. 150 ecm Äthanol, die 3 ecm 12 η Salzsäure enthielten, wurden zugegeben, gefolgt von 3 g Platinoxyd. Das Gemisch wurde in eine Niedertemperatur-Hydrierungsvorrichtung gebracht und in einer Wasserstoffatomosphäre 1,25 Stunden geschüttelt. Der Katalysator wurde dann abfiltriert und das Piltrat im Vakuum bis auf ein Restvolumen von etwa 50 ecm eingeengt. Zu dem Konzentrat wurde Äther bis zum Trübungspunkt zugegeben und die erhaltene Lösung mit authentischen Dihydrovinblastindihydrochlorid-Kristallen angeimpft und gekühlt. Auf diese Weise wurde eine

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erste Fraktion von 3,2 g Dihydrovinblastindihydrochlorid erhalten.

Claims

Patentansprüche:

1. Verfahren zur Herstellung von Dihydrovinblastin, Dihydrodesmethylvinblastin, oder den Säureadditionssalzen dieser Verbindungen, dadurch gekennzeichnet, daß man Vinblastin, Desmethylvinblastin oder ein Säureadditionssalz dieser

fc Verbindungen über einem Edelmetallkatalysator in Gegenwart eines angesäuerten Mediums hydriert und gegebenenfalls das erhaltene Produkt in ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalze umwandelt.

2. Dihydrodesmethylvinblastin.

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