DE1245384B - Verfahren zur Herstellung des cancerostatisch wirksamen 5-Azacytidins - Google Patents

Description

BUNDESREPUBLIK DEUTSCHLAND Int. Cl.:

C07d

DEUTSCHES

PATENTAMT

AUSLEGESCHRIFT

Deutsche KL: 12 ρ-10/05

Nummer: 1245 384

Aktenzeichen: C 34587IV d/12 ρ

Anmeldetag: 8. Dezember 1964

Auslegetag: 27. Juli 1967

Es wurde gefunden, daß l-Glykosyl-5-azacytosine, die bisher in der Literatur nicht erwähnt wurden, eine besonders starke cancerostatische und virostatische Wirksamkeit aufweisen. Vor allem 5-Azacytidin greift sehr wirksam in den Metabolismus der Nukleinsäuren von schnell wachsenden biologischen Systemen ein (vgl. die inzwischen in Neoplasma, 11 [1964], Nr. 2, S. 123 bis 130, und in Experientia, 20 [1964], S. 202, veröffentlichten Testergebnisse).

Bei dem erfindungsgemäßen Verfahren werden Reaktionen verwendet, die im Zusammenhang mit anderen Verbindungen, die von den beim erfindungsgemäßen Verfahren auftretenden Verbindungen jedoch verschieden sind, bekannt sind.

Das erfindungsgemäße Verfahren zur Herstellung des cancerostatisch wirksamen 5-Azacytidins der Formel I

NH₂

HOCH₂

Verfahren zur Herstellung des cancerostatisch wirksamen 5-Azacytidins

Anmelder:

Ceskoslovenskä akademie ved, Prag

Vertreter:

Dipl.-Ing. K. Siebert, Patentanwalt, Starnberg bei München, Almeidaweg 12

Als Erfinder benannt:
Frantisek Sorm,
Alois Piskala, Prag

Beanspruchte Priorität:

Tschechoslowakei vom 22. Dezember 1963 (7093)

HO OH

(D l-(2,3,5-Tri-O-acyl-^-D-ribofuranosyl)-4-alkylisothiobiuretderivat der allgemeinen Formel IV

SR¹

Acyl —CH₂ NH-C-N = C-

ist dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Weise ein 2,3,5-Tri-O-acyl-ß-D-ribofuranosylisocyanat der allgemeinen Formel II

Acyl — O O — Acyl

(IV)

Acyl — O — CH₂ N = C = O

V-r

Acyl — O O — Acyl

(H) unter Durchleiten eines schwachen, trockenen Inertgasstroms mit überschüssigem Orthoameisensäuremethylester oder -äthylester erhitzt, wobei die Temperatur jedoch niedriger als der Siedepunkt des verwendeten Orthoesters sein soll, und das so entstandene s-Triazinderivat der allgemeinen Formel V

SR¹

bei niedriger Temperatur in Gegenwart eines inerten Lösungsmittels, vorzugsweise Chloroform oder A ⁿeton, unter Ausschluß von Feuchtigkeit mit äquimolaren Mengen eines S-Alkylisothioharnstoffs der allgemeinen Formel III

Acyl —Ο —CH₂

N N

HN = C(SRi) _

(III)

worin R¹ einen Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen bedeutet, umsetzt, das so entstandene Acyl — O O — Acyl

(V)

709 618/545

einige Stunden mit einer gesättigten Lösung von Ammoniak in einem Alkohol behandelt.

Die Konfiguration des glykosidischen Zentrums ändert sich während der Synthese nicht.

Im folgenden werden zwei Beispiele angeführt, die das erfindungsgemäße Verfahren erläutern, ohne daß das Verfahren auf die Beispiele beschränkt ist:

Beispiel 1

Man versetzt unter Kühlung, Rühren und Ausschluß der Luftfeuchtigkeit eine Lösung von 3,35 g rohem 2,3,5 - Tri - O - acetyl -β-D- ribofuranosylisocyanat in 50 ml trockenem Aceton mit einer Lösung von 0,90 g S-Methylisothioharnstoff in 30 ml trokkenem Aceton, läßt 20 Minuten bei Zimmertemperatur stehen, dampft in Vakuum zu einem dicken Sirup ein, verdünnt mit 10 ml trockenem Aceton und fällt mit 50 ml trockenem Petroläther. Man läßt die Mischung 30 Minuten bei Zimmertemperatur stehen, gießt die obere farblose Lösung ab und läßt sie in einem offenen Gefäß 3 bis 4 Stunden stehen. Im Laufe dieser Zeit scheidet sich das Produkt als farblose Nadeln (0,40 g) aus. Die untere sirupartige Schicht wird mit 10 ml Aceton verdünnt, mit Petroläther unter Rühren bis zu der ersten Trübung gefallt und angeimpft. Die beim Stehenlassen entstandene Kristallmasse wird abgesaugt, und die Mutterlaugen werden eingeengt. Man erhält insgesamt 3,31 g (85%) !-(^,S-Tri-O-acetyl-jS-D-ribofuranosyl)-4-S-methylisothiobiuret, Schmp. 138 bis 139°C (Äthanol).

Man erhitzt 4 Stunden auf 135°C (Ölbadtemperatur) in einem Destillationsapparat unter Durchleiten von trockenem Stickstoff eine Lösung von 3,91 g 1 -(2,3,5 -Tri -O -acetyl -β-Ό- ribofuranosyl)-4-S-methylisothiobiuret in 50 ml Orthoameisensäureäthylester. Nach dem Erkalten versetzt man die Lösung mit 250 ml trockenem Petroläther, löst den ausgefallenen Sirup in 10 ml trockenem Benzol und fällt die erhaltene Lösung wieder mit 50 ml trockenem Petroläther. Diese Reinigung wird noch einmal wiederholt, und die Substanz wird im Vakuum getrocknet. Man erhält das glasige l-(2,3,5-Tri-O-acetyl-/J-D-ribofuranosyli-^-methylmercapto^-oxo-l^-dihydro-l,3,5-triazin in einer Ausbeute von 3,05 g (75%), ?.™f^N = 275τη_μ (log _f4,10).

Man löst 4,01g l-(2,3,5-Tri-O-acetyl-/i-D-ribofuranosyl) - 4 - methylmercapto - 2 - oxo -1,2 - dihydro-1,3,5-triazin in 30 ml getrocknetem, mit Ammoniak bei 0⁰C gesättigtem Methanol, läßt 48 Stunden in einem zugeschmolzenen Rohr bei 0⁰C stehen, saugt das ausgefallene Produkt ab, wäscht mit Methanol nach und trocknet im Vakuum. Man erhält 0,80 g (33%) 5-Azacytidin, Schmp. 230 bis 231⁰C (Zersetzung).

Beispiel 2

Zu einer auf 0⁰C gekühlten Lösung von 5,5 g rohem 2,3,5 - Tri - O - benzoyl -β-Ό- ribofuranosylisocyanat in 100 ml Äther wird unter Rühren und Ausschluß von Luftfeuchtigkeit eine Lösung von 0,90 g S-Methylisothioharnstoff in 30 ml Aceton gegeben. Nach Abdampfen der Lösungsmittel im Vakuum (Badtemperatur 35 ⁰C) wird der Rückstand in 10 ml Äther aufgelöst. Man läßt das Gemisch über Nacht im Kühlschrank und saugt das Produkt ab, wäscht es mit Äther und erhält nach dem Trocknen 4,60 g (80%, gerechnet auf S-Methylisothio-S-harnstoff) 1 - (2,3,5 - Tri - O - benzoyl -β-Ό- ribofuranosyl)-4-S-methylisothiobiuret mit einem Schmelzpunkt von 159 bis 162°C.

Durch eine Lösung von 5,78 g l-(2,3,5-Tri-O-benzoyl-/S-D-ribofuranosyl)-4-methylisothiobiuret in 60 ml Orthoameisensäureäthylester in einer Destillationsapparatur wird 3 Stunden bei 130 bis 135°C (Ölbadtemperatur) getrockneter Stickstoff geleitet. Man läßt langsam erkalten und saugt das Produkt ab, wäscht es mit Äther und erhält nach dem Trocknen 4,50 g (77%) l-(2,3,5-Tri-O-benzoyl-/3-D-ribofuranosyl)-4-methylmercapto-2-öxo-l ,2-dihydro-l ,3,5-triazin mit einem Schmelzpunkt von 190 bis 192°C.

Eine Suspension von 5,88 g l-(2,3,5-Tri-O-benzoyI-/9-D-ribofuranosyl)-4-methyImercapto-2-oxo-l,2-dihydro-1,3,5-triazin und 60 ml wasserfreier Lösung von Ammoniak in Methanol (gesättigt bei 20⁰C) wird im geschlossenen Kolben bei Raumtemperatur 1 Stunde geschüttelt. Die geimpfte Lösung läßt man 2 Tage bei 0⁰C stehen. Man saugt das Produkt ab, wäscht es mit Methanol und erhält nach dem Trocknen 0,59 g (24%) 5-Azacytidin mit einem Schmelzpunkt von 231 bis 232°C (Zersetzung).

Claims (1)

1. Patentanspruch:

   Verfahren zur Herstellung des cancerostatisch wirksamen 5-Azacytidins der Formel I

   NH₂

   N N

   HOCH₂

   HO OH

   dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Weise ein 2,3,5-Tri-O-acyl- ß-o- ribofuranosylisocyanat der allgemeinen Formel II

   Acyl —O-CH₂ N = C =

   (Π)

   Acyl — O Ο— Acyl

   bei niedriger Temperatur in Gegenwart eines inerten Lösungsmittels unter Ausschluß von Feuchtigkeit mit äquimolaren Mengen eines S - Alkylisothioharnstoffes der allgemeinen Formel III

   HN = C(SR¹J-NH₂

   (HI)

   worin R¹ einen Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen bedeutet, umsetzt, das so entstandene

   l-(2,3,5-Tri-0-acyl-/S-D-ribofuranosyl)-4-alkylisothiobiuretderivat der allgemeinen Formel IV

   Acyl —O-

   SR¹

   NH-C-N = C-NH₂

   Il ο

   ίο

   Acyl — O O — Acyl

   (IV)

   unter Durchleiten eines schwachen, trockenen Inertgasstromes mit überschüssigem Orthoameisensäuremethylester oder -äthylester erhitzt, wobei die Temperatur jedoch niedriger als der Siedepunkt des verwendeten Orthoesters sein soll, und das so entstandene S-Triazinderivat der allgemeinen Formel V

   SR¹

   Acyl — O — CH₂

   O-

   Acyl —O Ο —Acyl

   (V)

   einige Stunden mit einer gesättigten Lösung von Ammoniak in einem Alkohol behandelt.