DE1176134B

DE1176134B - Verfahren zur Herstellung von 1-Dehydro-16-methylen-17ª-acetoxy-progesteron-derivaten

Info

Publication number: DE1176134B
Application number: DEM51305A
Authority: DE
Inventors: Dipl-Chem Dr Fritz Von Werder; Dr Ulrich Jahn; Dr Harald Metz; Dipl-Chem Dr Karl-Heinz Bork; Dipl-Chem Dr Klaus Brueckner; Dipl-Chem Dr Heinz-J Mannhardt
Original assignee: E Merck AG
Current assignee: Merck KGaA
Priority date: 1960-01-30
Filing date: 1960-01-30
Publication date: 1964-08-20
Also published as: DE1174314B; DE1176133B; DE1176132B; FR881M; CH393316A; DK115180B; SE310675B; BR6125904D0; CH393317A; CH395081A; SE302123B; GB963427A; CH395082A; SE301800B

Description

BUNDESREPUBLIK DEUTSCHLAND

DEUTSCHES

PATENTAMT

AUSLEGESCHRIFT

Internat. Kl.: C 07 c

Deutsche Kl.: 12 ο-25/05

Nummer: 1 176 134

Aktenzeichen: M 51305IV b /12 ο

Anmeldetag: 30. Januar 1960

Auslegetag: 20. August 1964

Es wurde gefunden, daß l-Dehydro-16-methylennct-acetoxy-progesteron-derivate der allgemeinen Formel II

CH₃

CO /OCOCH₃

F=CH₂

II

(X = H, F, Cl oder CH₃,. Y = H und R = H,H bzw. Y = F und R == αΗ,/SOH) gegenüber den analogen Verbindungen, die in 16-Stellung keine Methylengruppe enthalten, eine verstärkte progestative Wirkung, insbesondere bei oraler Verabreichung, besitzen und außerdem deutlich entzündungshemmend wirken.

Gegenstand der Erfindung ist ein Verfahren zur Herstellung von neuen 1 -Dehydro- I6-methylen-17a-acetoxy-progesteron-derivaten der allgemeinen Formel II, das darin besteht, daß man ein 16-Methylen-na-acetoxy-progesteron-derivat der allgemeinen Formel I

Verfahren zur Herstellung von 1-Dehydro-16-methylen-17a-acetoxy-progesteron-derivaten

Anmelder:

E. Merck Aktiengesellschaft,

Darmstadt, Frankfurter Str. 250

Als Erfinder benannt:

Dipl.-Chem. Dr. Karl-Heinz Bork,

Griesheim bei Dannstadt,

Dipl.-Chem. Dr. Klaus Brückner,

Dr. Ulrich Jahn,

Dipl.-Chem. Dr. Heinz-Jürgen Mannhardt,

Dr. Harald Metz,

DipL-Chem. Dr. Fritz von Werder, Darmstadt

CH₃

CO /OCOCH₃

F=CH₂

(R, X und Y haben die angegebene Bedeutung) in an sich bekannter Weise mit 2,3-Dichlor-5,6-dicyan-p-benzochinon, Selendioxyd oder in 1 ^-Stellung dehydrierend wirkenden Mikroorganismen behandelt.

Die 1(2)-Dehydrienmg mit l^-Dicy
benzochinon wird zweckmäßig in Gegenwart eines inerten organischen Lösungsmittels durchgeführt. Als Lösungsmittel sind z. B. folgende geeignet: Alkohole, wie Äthanol, tertButanol, tert.Annylalkohol, sowie Essigsäuremethylester, Essigsäureäthylester, Dioxan, Eisessig, Benzol, Tetrahydrofuran oder Aceton. Ferner ist es vorteilhaft, dem Reaktionsgemisch geringe Mengen Nitrobenzol zuzusetzen. Die Reaktionszeiten liegen in der Größenordnung von etwa 5 bis 48 Stunden, je nach verwendetem Lösungsmittel und eingesetztem Ausgangsmaterial. Die Umsetzung führt man zweckmäßigerweise bei der Siedetemperatur des verwendeten Lösungsmittels durch.

Bei Verwendung von Selendioxyd ist ebenfalls ein inertes organisches Lösungsmittel, insbesondere tert. ButanoL Essigsäureäthylester oder tert.Amylalkohol, zweckmäßig. Ferner kann die Reaktion durch Zugabe von geringen Mengen Eisessig beschleunigt werden. Auch diese Umsetzung wird zweckmäßigerweise bei Siedetemperatur des verwendeten Lösungsmittels durchgeführt. Die Umsetzung ist nach etwa 12 bis 48 Stunden beendet.

Für die mikrobiologische 1(2) - Dehydrierung können Mikroorganismen verwendet werden, die z. B. den folgenden Gattungen angehören: Alternaria, Calonectria, Colletotrichum, Cylindrocarpon, Didymella, Fusarium, Ophiobolus, Septomyxa, Vermicularia; Micromonospora, Nocardia, Streptomyces; Alcaligenes, Bacillus, Corynebacterium, Mycobac-

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terium, Protaminobacter, Pseudomonas. Besonders geeignet sind Bacillus sphaericus var. fusiformis, Corynebacterium simplex und Fusarium solani.

Zur Dehydrierung wird das Ausgangsmaterial einer Submerskultur des betreffenden Mikroorganismus zugesetzt, die in einer geeigneten Nährlösung bei optimaler Temperatur und starker Belüftung nach den üblichen Methoden der Fermentationstechnik wächst. Statt wachsender Kulturen sind bei sonst gleicher Technik auch Aufschwemmungen der Mikroorganismen in Pufferlösung brauchbar. Die Umsetzung wird chromatographisch verfolgt und die Fermentationslösung nach restloser Umsetzung des Ausgangsmaterials ζ. Β. mit Chloroform extrahiert.

Im einzelnen können nach dem Verfahren der Erfindung z. B. die folgenden Progesteronderivate hergestellt werden: 1-Dehydro-16-methylen-17a-acetoxy-progesteron, 1 -Dehydro-oa-methyl-17a-acetoxyprogesteron, 1 - Dehydro - 9a - fluor -1 Iß - hydroxy-16-methylen-Ha-acetoxy-progesteron, 1-Dehydro-6a - chlor -16 - methylen - 17a - acetoxy - progesteron, l-Dehydro-oa-methyl^a-fluor-ll/i-hydroxy-lo-methylen-17a-acetoxy-progesteron, 1 -Dehydro-6a9a~Difluor - 11/? - hydroxy - 16 - methylen - 17« - acetoxyprogesteron (?._max = 237 πΐμ, E}?_m = 339), 1-Denydro-oa-Chlor^a-fluor-lIjtf-hydroxy-lo-methylen-17a-acetoxy-progesteron(/_max = 238 ηΐμ,ΕΊϋ = 372).

Die neuen, verfahrensgemäß herstellbaren Verbindungen können in der Humanmedizin als progesteronwirksame Therapeutica eingesetzt werden. Sie eignen sich z. B. als Mittel zur Bekämpfung eines drohenden Abortus oder zur Restitution der Uterusschleimhäute und sind insbesondere oral gut wirksam. Ferner können diese neuen 16-Methylen-17a-acetoxy-progesteron-derivate zu allen pharmazeutisch üblichen Anwendungsformen verarbeitet werden. Sie können z. B. unter Verwendung der üblichen Hilfs- und Füllstoffe zu Pillen, Tabletten, Dragees, Suppositorien usw. und unter Zuhilfenahme üblicher Lösungsmittel oder Lösungsvermittler zu Emulsionen, Suspensionen oder Injektionslösungen verarbeitet werden.

Pharmakologische Vergleichsversuche über die gestagene Wirksamkeit von

1. 1 -Dehydro-oa-methyl-16-methylen-17a-acetoxyprogesteron (Beispiel Ä, 2),

2. l-Dehydro-9a-fluor-l l/J-hydroxy-16-methylen-17a-acetoxy-progesteron (Beispiel A, 3 bzw.

B, 2),

3.6- Chlor - 6 - dehydro -17a - acetoxy - progesteron als Vergleichssubstanz.

I. Versuchsbeschreibung

Die Versuche wurden durchgeführt nach der Methode von C 1 a u b e r g (Klinische Wochenschrift, 1930, S. 2004), modifiziert nach M cP h a i I (Journal of Physiology, Bd. 83 [1935], S. 145). juvenile weibliche Kaninchen, also solche, die noch ^⁰ keine eigene Gelbkörperhormonproduktion haben, werden in diesem Test durch Verabreichung von Follikelhormon zur Ausbildung der Proliferationsphase im Uterus gebracht. Anschließend werden sie 5 Tage lang mit der zu testenden Substanz auf oralem Wege behandelt. Zur Auswertung der Gelbkörperhormonwirkung werden am folgenden Tage die Uteri herauspräpariert und histologisch auf Stärke und Zahl der Uterindrüsen untersucht. Die Bewertung erfolgt nach dem Schema von M c P h a i 1 . Aus den von mehreren Schnitten der Drüsen und an mehreren Tieren erhaltenen Werten werden jeweils die Mittelwerte gebildet.

II. Versuchsergebnisse

Beispiel A, 2

Beispiel A, 3 bzw. B. 2

o-Chlor-o-dehydro-17-acetoxyprogesteron

Gestagene

Wirksamkeit

(bezogen auf

Progesteron = 1)

13 100 4 850

4 500

Aus den Versuchsergebnissen ist ersichtlich, daß die verfahrensgemäß erhaltenen Verbindungen der Vergleichssubstanz in ihrer gestagenen Wirksamkeit deutlich überlegen sind.

Beispiele A. Mikrobiologische 1(2)-Dehydrierung

1. 151 einer Nährlösung aus 1% Hefeextrakt, Ph 6,8, werden mit 750 ml einer Schüttelkultur von Bacillus sphaericus (Sammlung E. Merck Nr. 1001) beimpft. Unter Rühren und starker Belüftung (Temperatur 28 ⁰C) wächst die Kultur und erhält nach etwa 12 Stunden einen Zusatz von 7,5 g 16-Methylen-17a-acetoxy-progesteron, gelöst in 250 ml Methanol. Die 1(2)-Dehydrierung wird papierchromatographisch verfolgt und ist normalerweise nach 10 bis 15 Minuten beendet. Die Fermentationslösung wird mehrfach mit Chloroform extrahiert, die vereinigten Chloroformlösungen werden eingedampft, und der aus 1-Dehydro-16-methylen-17a-acetoxyprogesteron bestehende Rückstand wird aus Äther umkristallisiert. F. 216 bis 217⁰C; [_a]_D = -114,6° (Dioxan); X_max = 242 m^ Eil = 449.

2. Analog Beispiel A, 1 wird 6a-Methyl-l 6-methylen - 17a - acetoxy - progesteron zu 1 - Dehydrooa-methyl -16 - methylen -17a - acetoxy - progesteron dehydriert. X_max = 244 m^ Ei* = 385; F. 235 bis 237°C; [a]_D = 124° (CHCl₃).

3. 151 einer Nährlösung aus 0,1% Hefeextrakt, Ph 6,8, werden mit 1,51 einer Schüttelkultur von Corynebacterium simplex (Sammlung E. Merck Nr. 1002) beimpft. Unter Rühren und intensiver Belüftung wächst die Kultur bei 28⁰C. Nach etwa 10 Stunden erfolgt ein Zusatz von 7,5 g 9a-Fluor-11/S-hydroxy-16-methylen-17a-acetoxy-progesteron, Die Dehydrierung in 1(2)-Stellung wird papierchromatographisch verfolgt und ist im allgemeinen nach

10 bis 12 Stunden beendet. Die Aufarbeitung erfolgt wie im Beispiel A, 1 angegeben. Durch Umkristallisation aus Essigester wird das gebildete 1-Dehydro-9a - fluor - 11 β - hydroxy -16 - methylen - 17a - acetoxyprogesteron rein erhalten. F. 240 bis 241⁰C; [a]₀ = -114,6° (Dioxan); Wr = 240 ηΐμ, El*« = 310.

4. Analog Beispiel A, 3 wird ou-Chlor-lo-methylen-17a-acetoxy-progesteron zu 1-Dehydro-6a-chlor-16 - methylen -17a - acetoxy - progesteron dehydriert.

!■max = 238 Πΐμ.

5. Analog Beispiel A, 3 wird 6a-Methyl-9a-fluor-

11 β - hydroxy -16 - methylen -17 α - acetoxyprogesteron

zu 1 - Dehydro - 6 a - methyl -9α- fluor -Π β- hydroxy-16 - methylen -17 a - acetoxy - progesteron dehydriert.

hnax = 242 ταμ, E}?„ = 320.

6. Analog Beispiel A, 3 wird 6a-Fluor-16-methylen-1 la - acetoxy - progesteron zu 1 - Dehydro -6a - fluor-16 - methylen -1 la - acetoxy - progesteron dehydriert. Durch Umkristallisation aus Methanol erhält man das reine Produkt. F. 241 bis 242°C; [_a]_D = -124° (Chloroform); X_max = 242 ηΐμ, E{?„ = 445.

B. Chemische 1(2)-Dehydrierung

IO

1. 3,5 g 16 - Methylen - 17a - acetoxy - progesteron werden in 70 ml Dioxan gelöst und nach Zugabe von 3,5 g 2,3-Dichlor-5,6-dicyan-benzochinon 6 Stunden unter Rückfluß gekocht. Die Lösung wird mit Chloroform verdünnt und nacheinander mit Wasser, 30 ml 1 η-Natronlauge und wieder mit Wasser ausgeschüttelt, getrocknet und eingedampft. Der aus 1 - Dehydro -16 - methylen -17a - acetoxy - progesteron bestehende Rückstand wird aus Äther umkristallisiert. F. 216 bis 217°C; [a]_D = -114,6° (Dioxan); Wr = 242 mti, Ei* =449.

2. Analog Beispiel B, 1 werden 3,1 g 9a-Fluor-16 - methylen - 4 - pregnen - 3,20 - dion -11 ß, 17 a - diol-17-acetat mit 2,5 g 2,3-Dichlor-5,6-dioxan-p-benzochinon in 60 ml Dioxan durch 15stündiges Kochen zu 9a-Fluor-16-methylen-l',4-pregnadien-3,20-dionlljS,17a-diol-17-acetat umgesetzt. F. 240 bis 241 °C; [aj₀ =-114,6°(Dioxan);;W_u. = 240n^,E!*_I,= 310.

3. 6 g 6a-Fluor-16-methylen-17a-acetoxy-progesteron werden in 300 ml tert.Butanol gelöst. Das Gemisch wird nach Zugabe von 3 ml Eisessig und 2 g feingepulvertem Selendioxyd 48 Stunden unter Rückfluß gekocht, wobei nach Ablauf von 24 Stunden nochmals eine Zugabe von 2 g Selendioxyd erfolgt. Nach Filtration der Lösung wird das Lösungsmittel unter vermindertem Druck abgezogen, der hinterbleibende Rückstand in Essigester aufgenommen und die Lösung nacheinander mit Natriumhydrogencarbonatlösung, Ammoniumsulfidlösung, verdünnter Ammoniaklösung, verdünnter Schwefelsäure- und Natriumhydrogencarbonatlösung ausgeschüttelt. Die so behandelte Lösung wird getrocknet und eingedampft und der aus l-Dehydro-oa-fluor-lo-methylen-17a-acetoxy-progesteron bestehende Rückstand aus Methanol kristallisiert. F. 241 bis 242⁰C; [a]„ = -124° (Chloroform);λ_max = 242 πΐμ, El* = 445.

Claims

Patentanspruch:

Verfahren zur Herstellung von 1-Dehydro-16 - methylen -17a - acetoxy - progesteron - derivaten der allgemeinen Formel

CH₃

(X = H, F, Cl oder CH₃, Y = H und R = H,H bzw. Y = F und R = αΗ,^ΟΗ) dadurch gekennzeichnet, daß man das entsprechende in 1(2)-Stellung gesättigte Steroid in an sich bekannter Weise mit 2,3-Dichlor-5,6 - dicyan - ρ - benzochinon oder Selendioxyd, zweckmäßig in einem inerten organischen Lösungsmittel, oder mit in 1(2)-Stellung dehydrierend wirkenden Mikroorganismen behandelt.

In Betracht gezogene Druckschriften:
Proc. Chem. Soc, 1960, S. 14;
HeIv. Chim. Acta, Bd. 39 (1956), S. 734;
Journ. Am. Chem. Soc, Bd. 77 (1955), S. 4184; Arch. Biochem. Biophys., Bd. 59 (1955), S. 304.