DD140562A5

DD140562A5 - Verfahren zur herstellung von peptiden

Info

Publication number: DD140562A5
Application number: DD78209811A
Authority: DD
Inventors: Barry A Morgan
Original assignee: Reckitt & Colmann Prod Ltd
Priority date: 1977-12-15
Filing date: 1978-12-15
Publication date: 1980-03-12
Also published as: IL56181A; CH638177A5; AT363198B; IE47764B1; CA1145330A; FI783751A; US4178371A; JPS5490142A; ES475997A1; PL114981B1; NZ189047A; IE782475L; SE7812720L; IL56181A0; IT7869853A0; ATA899878A; DK540678A; AU523732B2; SU793386A3; CS210679B2

Abstract

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung neuartiger Peptide, die als Analgetika, narkotisch wirkende Antagonisten- oder Antidiarrhöemittel verwendet werden können. Die neuartigen Peptide haben die allgemeine Formel R,Tyr-B-Gly-D-N-R

Description

O]

Anwendungegebiet der Erfindung:

Die Erfindung betrifft ein Verfahren für die Herstellung von Peptiden.

Erfindungsgemäß werden Verbindungen der Formel:

R¹ Tyr - B - GIy - D - N - R^x I .

R⁸

worin

R¹ Wasserstoff, Methyl, Allyl, Dimethylallyl, Propargyl, Cyclopropylmethyl, Cyclobutylmethyl oder Phenäthyl ist; B die folgende Gruppe

- KH - CR³H - CO -

ist, in der R³ Alkyl-C,_₆ oder 0_H_2qYC_rH_2r+1 ist (worin q«i'1 bis 2, r = 0 bis 1 und Y = 0, S₉ SO oder SO₂ sind), wobei die Gruppe die D-Konfiguration hat;

D die folgende Gruppe

- HR⁵ - CR⁶H -CO-

ist, in der B? Wasserstoff oder Methyl ist» R- Ar~Alkyl-C-ο ist; wobei die Gruppe die L-Konfiguration hat;

R Wasserstoff, Alkyl-C.^,-, Ar oder Ar-AIkJl-C_1-2 ist; R^x eine Gruppe (CHg)₈ - X ist, worin s » 2 bis 4 ist und X = KHR⁹, IJ⁺ R¹¹R¹²R¹³, IJR⁹COR¹¹, ITR⁹COOR¹¹, KR⁹CONH₂, ·

HR⁹COIm¹⁰R¹¹, H(O),, R¹¹R¹², COOR⁹COKR⁹R¹⁰, oder OCOlTR⁹R¹⁰

q η

ist (in denen R Wasserstoff, Alkyl-C, o> Ar oder

ι ο ""·* 11

ist, R Wasserstoff oder AlKyI-C₁ - ist, R

Ar oder ArCH₂ ist, R¹² Alkyl-C^, ist, R¹³ Alkyl-C^ ~ ist und η =--0 oder 1 ist); oder die Gruppe

- N-R* ^CH₂CH₂

R⁸

ist, worin m =1 bis 3 ist und Q = SO, SO₂, CO, CHOH, F®MeR¹¹ oder H(O)R¹¹ ist;

Ar Phenyl oder durch Chlor, Methyl, Hydroxy oder Methoxy substituiertes Phenyl ist; und ihre Säureadditionssalze zur "Verfügung gestellte Beispiele für B umfassen D-Alanin, D -öl-Aminobuttersäure, D-VaIin, D-Horvalin, D-Leuc.in, D«lTorleucin, D-Serin, D-Threonin, D-Methionin und D~Methioninsulfoxid.

Beispiele für D umfassen !-Phenylalanin und U-Methy1-L- -phenylalanin.

· ·'. - 3

Gemäß einem erfindungsgemäßen Aspekt werden Verbindungen der Formel I, worin

R¹ Wasserstoff, Methyl, Allyl, Dimethylallyl, Propargyl, Cyclopropylmethyl, Cyclobutylmethyl oder Phenäthyl ist, B die folgende Gruppe

- BH - CR³H -CO-

ist, in der R³ Alkyl-O^g oder ^c _q ^H2q^Yc _r ^H2r+1 ^^{in der q =} bis 2,R=O bis 1 und Y= 0, S, SO oder SO₂ sind), wobei die Gruppe die D-Konfiguration hat; D die folgende Gruppe

- HR⁵ - CR⁶H -CO-ist, in der R³ Wasserstoff oder Methyl ist, R Ar-Alkyi- -CL 3 ist, wobei die Gruppe die L-Konfiguration hat;

R⁸ Wasserstoff oder-Alkyl-Cj ^ ist;

R^x eine Gruppe (CHg)₀ - X ist, in der s = 2 bis 4 und X

MHR⁹, 13R⁹COR¹¹, IiR⁹COlIH₂, HR⁹COHR¹⁰R¹¹, U(O)_nR¹¹R¹², COOR⁹,

CONR⁹R¹⁰, HR⁹COOR¹¹ oder OCOHR⁹R¹⁰ (worin R⁹ Wasserstoff oder Alkyl-Cj , ist, R Wasserstoff oder Alkyl-Cj ~ ^ist»

R¹¹ Alkyl-C.,_₃ ist, R¹² AIlTyI-C_1-3 ist und η = 0 oder 1

ist);

Ar Phenyl oder durch Chlor, Methyl, Hydroxy oder Methoxy substituiertes Phenyl iBt, und ihre Säureadditionssalze zur Verfügung gestellt.

Die hier für die Aminosäurederivate verwendeten Symbole sind diejenigen, die allgemein in der Peptidchemie Anwendung finden und wie sie in Biochem. J. 1_26, 773 (1972) dargelegt sind. Alle Aminosäurereste haben die natürliche oder L-Konfiguration, wenn es nicht ausdrücklich anders angegeben ist.

Durch die Erfindung werden auch therapeutische Zusammensetzungen, die eine Verbindung der Formel enthalten, oder ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz davon in Ver-

bindung mit einem pharmazeutisch annehmbaren Verdünnungsoder Trägermittel zur Verfügung gestellt. Geeignete Salze sind die Hydrochloride, Phosphate, Citrate und Acetate·

Charakteristik der bekannten technischen..Lösungen:.

.Die erfindungsgemäßen Verbindungen zeigen pharmakologische " Wirksamkeit. So wurde beispielsweise bei in vitro Tests festgestellt, daß sie eine Affinität für Opiatreceptorstellen haben und daher als Analgetika, narkotisch wirkende Antagonisten- oder Antidiarrhöemittel verwendet werden können. Bei dem für den Nachweis ihrer agonistischen Wirksamkeit an Opiatreceptorstellen angewendetem Test handelt es sich um denjenigen, bei dein bei Meerschweinchen transmorale Ileum-Stiinulanzpräparate verwendet werden, v/ie sie von Kost'erlitz, u.a. Brit. J. Pharmacol, and Chemotherapy, 33, 266 - 276 (1968) beschrieben werden. Es wurde auch nachgewiesen, daß sie analgetische Wirksamkeit in vivo besitzen, wie es beispielsweise bei dem Phenylchinon-Anti-Kxümmungstest bei Mäusen von Hendershot, u.a., J. Pharmac. Expe Ther., 125, 237 (1959) und den Schwanz-Zuckertest bei Ratten (intravenöse Verabreichung) von Jansen, u.a. Arzneim. Forsch. 13, 266 (1063) demonstriert wurde.

Darlegung des Wesens der Erfindung:

Die erfindungsgemäßen Verbindungen können nach in der Peptid-Chemie üblichen Verfahren hergestellt werden. So können sie durch aufeinanderfolgende Kopplung entsprechend geschützter und aktivierter Aminosäuren nach entweder klassischen Lösungsmethoden oder Pestphasenverfahren oder durch Koppeln von Fragmenten, die aus entsprechend geschützten Peptiden bestehen, hergestellt werden.

Einzelheiten hinsichtlich der Auswahl von Schutzgruppe!! und Methoden für ihren Einbau sowie geeigneter Reaktionsbedin-

209 811

gungen für die Bildung von Amido (Peptid)-Verknüpftingen Und Entfernung von Schutzgruppen sind in folgenden Literaturstellen zu finden: (a) Houben Weyl

Methoden der Organischen Chemie, Bd. 16, Teile I und II

Synthese von Peptiden (Thieme 1974) Cb) Schroder und Lubke "The Peptides" (Die Peptide) Academic Press (1965)

So können die-Verbindungen der Formel I durch Kondensieren einer Verbindung der Formel II

Y - M₁ - OH II

worin Y eine geeigenete !!-Schutzgruppe und M.. ein entsprechend geschützter Aminosäure- oder Peptidrest ist, mit einer Verbindung der Formel III

H-M₉-N-R* III

worin in Mp ein entsprechend geschützter Aminosäure- oder Peptidrest ist (wobei M^ und Mg zusammen -Tyr-B-Gly-D- oder ein geschütztes Derivat davon darstellen) und die anschließende Entfernung des Schutzes hergestellt werden. Das Koppeln von II und III kann mit Hilfe von Standardverfahren der Peptidsynthese entweder mit oder ohne Isolierung der Verbindung der Formel II entsprechenden aktivierten Komponente erfolgen. Gewöhnlich wird ein geschütztes N-terminales Dipeptid mit einem C-terminalen Dipeptidamid gekoppelt oder es wird ein geschütztes N-terminales Tripeptid" mit einem C-terminalen Aminosäureamid gekoppelt, worauf in jedem Fall die Entfernung des Schutzes folgt.

Eine nützliche NH-Schutzgruppe ist t-Butyloxycarbonyl und eine besonders nützliche OH-Schutzgruppe ist das t~Butylradikalj die beide durch Behandeln der geschützten Verbindung mit einem Hydrogenchlorid in einem Lösungsmittel wie Äthylacetat oder Essigsäure oder mit Trifluoressigsäure entfernt werden können.

Die Verbindungen der Formel I, in denen B eine Gruppe

-KH-CR-⁵H-CO ist, worin R^{3 c}<l^H2q^YCr^H2r+1 ^ist* ^{und in denen} Y =s SO oder SOgist, können aus den analogen Verbindungen, in denen Y = S ist, durch Oxydation mit beispielsweise Wasserstoffperoxid in einem Lösungsmittel wie Essigsäure oder Methanol hergestellt werden. Sie können auch so hergestellt werden, daß die Oxydation mit einer geschützten Verbindung der Formel I ausgeführt und der Schutz dann entfernt wird·

Die Verbindungen der Formel I, in denen R^x = (CH₀) -x ist

1112

und X - W(O)R R ist, können gleichfalls aus den analogen

1112

Verbindungen, in denen X = UR R ist, durch Oxydation mit beispielsweise Wasserstoffperoxid in einem Lösungsmittel wie Essigsäure oder Methanol oder durch die Oxydation mit Metachlorperbenzoesäure hergestellt werden« Diese Oxydations· methode läßt sich auch für die Herstellung von Aminosäure-

amid- oder Dipeptidamidenzv/ischenverbindungen, die die Grup-1112

pe N(O)R R enthalten, anwenden.

Die Verbindungen der Formel I, in denen die Gruppe

_R8 N^ >Q ist

11 und worin Q = N(O)R , SO oder SO₀ ist, können aus den ana-

11

logen Verbindungen, in denen Q = NR bzw. S ist, durch ähnliche Oxyddationsmethoden hergestellt werden. Aminosäureamid- oder Dipeptidamidzwischenverbindungen, die diese Gruppen enthalten, können in einer analogen Weise hergestellt werden.

_7- 209 811

AusführuriKsbeispiele:

Die Erfindung wird durch die. folgenden, nichteinschränkenden Beispiele erläutert, in denen Temperaturen in Grad Celsius angegeben sind. Es werden durchweg die -folgenden Abkürzungen verwendet: .

BOC t-Butyloxycarbonyl

Bu⁺ t-Butyl

IBCP Isobutylchloroformiat

Z Benzyloxycarbonyl

DCCI Dicyclohexylcarbodiimid

DCU . Dicyclohexylharnstoff

HONSu H-Hydroxysuccinimid

NMM . N-Methylmorpholin

DMF _t Dimethylformamid

DME 1,2-Dimethoxyäthan

THP - Tetrahydrofuran

Die verschiedenen Verbindungen und Zwischenprodukte wurden mit Hilfe der Dünnschichtchromatografie (TLC) auf Silicagelplatten (Kieselgel ^GF254^ ¹^⁶¹" Anwendung folgender Systeme untersucht:

1E Methanol, Chloroform _f 1:2

1P Methanol, Chloroform 1:19

2B Chloroform, Methanol, Essigsäure 19:9:1

3A Chloroform, Methanol, Essigsäure, Wasser 60:18:2:3

3B Chloroform, Methanol, Essigsäure,· V/asser 30:18:4:6

3C Chloroform, Methanol, Essigsäure, Wasser 90:27:2:3

3D Chloroform, Methanol, Essigsäure, Wasser 30:20:2:3.

4A Isobutanolj Äthylacetat, Essigsäure, Wasser 1:1:1:1

5B Isobutanol, Essigsäure, Wasser 3ί1ϊ1

7B Äthylac.etatj. Pyridin, Essigsäure, Wasser 60:20:6:11

7C Äthylacetat, Pjnridin, Essigsäure, Wasser 120:20:6:11

7D Äthylacetat, Pyridin, Essigsäure, Wasser 240:20:6:11

73? Äthylacetat, Pyridin, Essigsäure, Wasser 8A Chloroform, Isopropanol 8B Chloroform, Isopropanol

Beispiel 1

480:20:6:11

l·~Tyrogyl-D>·alanyl^lycyl^-l·~phenylalanin-2~acetoamidäth.ylaInid Diese Verbindung wurde nach der folgenden Methode hergestellt:

Tyr

D-AIa

Bu"

Bu¹ /

GIy

Phe

BOC BOC

OH

OH EH₂CH₂CH₂IiHCOCH₃ ITHCH₂CH₂ImCOOCH₃

(1) B0C-Phe-NH-CH₂CH₂NHCOCH₃

BOC-Phe-OH (2,65 g) wurde in CH₂Cl₂ (20 ml) gelöst, und die Lösung wurde auf -20°C gekühlt und anschließend wurden NMM (1,01 g) und IBCF (1,37 g) zugesetzt und danach 2 Minuten . später H₂NCH₂CH₂NH.COCH₃(I,2 g). Das Reaktionsgemisch wurde zum Erwärmen auf Raumtemperatur 21 Stunden lang gerührt, worauf das Lösungsmittel verdampft und der Gummi in Chloroform gelöst wurde. Die Lösung wurde mit gesättigter NaHCO₃-Lösung, 10 %iger wäßriger Zitronensäure und V/asser bis zur Neutralität und schließlich mit einer gesättigten Salzlauge gewaschen. Die organische Phase vmrde getrocknet (NapSO^) und zu einem Peststoff eingedampft, der nach dem Auskristallisieren aus Äthylacetat das Amid 1 (3,0 g) ergab. Rf7? 0,35. .

209 811

(2) Cl~H⁺Phe-NHCH₂CH₂liHC0CH,

B0C-Phe-imCH₂CH₂]fflC0CH₃ (3 g) wurde in 5M HCl in Äthylacetat (20 ml) und 2,6M HCl in Essigsäure (5 ml) gelöst und bei Umgebungstemperatur 30 Minuten lang gerührt. Das Lösungsmittel wurde verdampft und der Rückstand mehrere Male mit trockenem Diäthyläther trituriert. Das Hydrochlorid wurde in Form eines hygroskopischen Peststoffes (0,45 g) gewonnen, Rf3B 0,5.

(4) BOC-Gly-Phe-MHCHgCHgMHCOCH-

Diese Verbindung wurde nach einer der folgenden Methoden hergestellt:

(a) BOC-Gly-Phe-OH (-1,0 g) und H₂IiCH₂CH₂IIHCOCH₃ (0,4 g) wurden in DMP gelöst und in einem Eis/Salz-Bad gekühlt, wobei HOHSu (0,78 g) und DCCI (0,668 g) zugesetzt wurden. Das Reaktionsgemißch wurde über Nacht zum Erwärmen auf Raumtemperatur gerührt, worauf der DCU durch Filtration entfernt und das Lösungsmittel verdampft wurde. Der Rückstand wurde in CHClgelöst, mit gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung (2 χ 50 ml), 10 /£iger wäßriger Zitronensäure (2 χ 50 ml) und Wasser bis zur Neutralität und abschließend mit einer gesättigten Salzlösung gewaschen. Die organische Phase wurde getrocknet (IiA₂SO.) und eingedampft. Der Rückstand wurde auf einer Silicagelsäule (45 cm χ 2,4 cm) chromatografiert. Die Säule wurde zuerst mit CHC1~/Isopropanol (19:1) und anschließend mit CHCL^/Isopropanol (4:1) eluiert. Die Titelverbindung wurde in Form von Gummi (0,60 g) gewonnen. Rf 8B 0,4, Rf7F 0,2.

(b) BOC-GIy-OH (1,072 g) wurde in CH₂Cl₂ gelöst und in einem Bad von festem COg/CCl, gekühlt, worauf NMM (0,618 g)'und IBCF (0,836 g) zugesetzt wurden. Nach 2 Minuten bei dieser Temperatur wurden Cl^.Phe-MCHgCHgiracoCELCi ,75 g) und MM (0,618 g) zugesetzt, wobei die Temperatur auf Räumtem-

- 10 -

peratur ansteigen konnte« Die Reaktion wurde nach Rühren über Nacht wie in (1) oben beschrieben weiter geführt. Der Rückstand wurde nach (a) oben gereinigt. Bei dem gewonnenen Produkt handelte es sich um einen Gummi (0,65 g) Rf8B 0,4, 0,2.

( 5 ) BOC-Tyr(Bu*) -D-Ala-Gly-Phe-UHOHgUHCOCH^

(i) BOC-Gly-Phe-NHCHg CH₂NHCOCH₃ (0,64 g) wurde mit 5,5M HCl in Äthylacetat (5 ml) und 2,6M HCl in Essigsäure (5 ml) bei Umgebungstemperatur behandelt. Nach 45 Minuten wurde das Lösungsmittel verdampft und der Rückstand mit Diäthyläther trituriert. Das Dipeptidhydrochlorid wurde als hygroskopischer Peststoff (0,54 g) gewonnen, Rf 3D 0,45. (ii) BOC-OJyT(Bu¹¹)-D-AIa-OH (0,6) und Cl~H⁺Gly-?he-NHCH₂CH₂-HHCOCH₃(O,5 g) wurden in DMP (3 ml) gelöst und in einem Eis/Salz-Bad gekühlt, worauf HONSu (0,355 g) und DCCI (0,303 g) und danach NMM (1,48 g in DMP, 1,5 ml) zugegeben wurden. Das Reaktionsgemisch wurde zum Erwärmen auf Raumtemperatur Über Nacht gerührt. Danach wurde DCU abfiltriert, das Lösungsmittel verdampft und der Rückstand auf Äthylacetat und Wasser aufgeteilt. Die organische Schicht wurde mit einer gesättigten wäßrigen Hatriumhydrogencarbonatlösung (2 χ 50 ml), 10 %iger wäßriger Zitronensäure (2 χ 50 ml), Wasser bis zur Neutralität und abschließend noch mit gesättigter Salzlösung gewaschen. Die organische Phase wurde getrocknet (Na₂SO^) getrocknet und eingedampft. Das Tetrapeptid wurde in Porm eines Gummi (O»65 g) gewonnen, Rf7C 0,65, Rf3D 0,8.

(6) H-TyT-D-AIa-GIy-PhS-NHCH₂IiHCOCH₃

BOC-TyT(Bu^)-D-AIa-GIy-PhO-NHCH₂CH₂NHCOCH₃ (0,65 g) wurde mit einem Überschuß von 2,6M HCl in Essigsäure 45 Minuten lang bei. Umgebungstemperatür behandelt. Das Lösungsmittel wurde verdampft, und der Rückstand wurde auf einer Silica-

, ' - 11 -

gelsäule (50 cm χ 2,5 cm) mit Lösungsmittelsystem 3A chromatografiert. Der entstandene Gummi wurde lyophilisiert und ergab die Titelverbindung (0,45 g) Rf3A0,3, £ÖCJ ψ -6,95°

(c = 1, MP);.

Beispiel 2

L-Tyrosyl-D-alanylglycyl-U-metb-yl-Ii-phenylalanin-B-dimethyl· aminopropylamid

BOC BOC

Tyr

C1*"H₂ ⁺-

Bu¹

D-AIa

GIy

BOC-BOC-

MePhe

BOC--OH BOC- %H

OH C1"H₂ ⁺

ϊίΉ (CH₂) -Me₂HCl

. HCl

Diese Verbindung wurde nach der dem obigen Schema entsprechenden Methode hergestellt:

(1) BOC-MePhe-NHCHgCH₂CH₂IiMe₂

IT-t-Butyloxycarbonyl-li-methylphenylalanin (2,79 g) und NMM (1,01 g) wurden in Dichlormethan (20 ml) gelöst, und die gerührte Lösung wurde auf -20⁰C gekühlt. Danach wurde IBCP (1,37 g) zugegeben, und das Gemisch wurde 5 Minuten lang vor der Zugabe von NH₂CH₂CH₂CH₂NMe₂ (1,02 g) gerührt. Die

- 12 -

Lösung wurde 1 Stunde lang bei -20 ⁰C gerührt und anschlieseend 12 Stunden lang bei Raumtemperatur. Das Gemisch wurde eingedampft und der Rückstand in Äthylacetat (50 ml) und einer wäßrigen Lösung von ITatriumhydrogencarbonat (gesättigt, 50 ml) gelöst. Die Äthylacetatschicht wurde mit wäßrigem Natriumhydrogencarbonat (gesättigt, 50 ml), Wasser (2 χ 50 ml) und 10 %iger wäßriger Zitronensäure (2 χ 50 ml) gewaschen. Die Zitronensäureestrakte wurden zusammengenommen, mit gesättigter Natriimhydrogencarbonatlösung basisch gemacht und mit Äthylacetat (3 x 50 ml) extrahiert. Die Äthylacetatextrakte wurden zusammengenommen, getrocknet (Na₂SO.) und eingedampft, um die Titelverbindung in Form eines Öls zu gewinnen, RfIE 0,24, Rf3A 0,37.

(2) H-MePhe-KHGH₂CH₂CH₂IIMe₂.2HCl

Das Öl von (1) oben wurde in Äthylacetat (10 ml) gelöst, und HCl in Essigsäure (2,63 M, 6 ml) und HCl in Äthylacetat (5, 7M, 6 ml) wurden zugegeben. Die Lösung wurde 2 Stunden lang gerührt und eingedampft und ergab das vorgesehene Dihydrochloridsalz (2,2 g) in Form eines Feststoffes, Rf1E 0,02, Rf3A 0,03.

(3) B0C-Gly-MePhe-NHCH₂CH₂CH₂HMe₂

·

t-Butyloxycabonylglycin (1,05 g) und EMM (Ο,6θ6 g) wurden in Dichlormethan (12 ml) gelöst, und die gerührte Lösung wurde auf -20 ⁰C abgekühlt. IBCF (0,819 g, 6 ral/I) wurde zugesetzt und das Gemisch 5 Minuten lang vor der Zugabe von (2) oben (2,02 g) in DMF (5 ml) gerührt. Die Lösung wurde 1 Stunde lang bei -20 ⁰C und 12 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt und danach eingedampft. Der Rückstand wurde in Äthylacetat (50 ml) und einer wäßrigen Natriumhydrogencarbonatlösung (10 %ig, 50 Eil) gelöst. Die organische Phase wurde abgetrennt, mit wäßrigem Natriumhydrogencarbonat (10 %ig, 3 x 50 ml) und Wasser ( 3 x 50 ml) gewaschen. Die Äthylacetatlösung wurde getrocknet (Ea₂SO^) und eingedampft

- 13 - 20 9 811

und ergab die Titelverbindung in Form eines Öls, RfIE 0,21; Ef3A 0,37.

(4) H-GIy-MePiIe-ImCH₂CH₂CH₂KMe₂.2HCl

Las geschützte Dipeptid (3) wurde nach der Verfahrensweise von (2) oben behandelt und ergab das vorgesehene Dihydrochloridsalz (4) (2,0 g) in Form eines weißen Feststoffes, RfIE 0,03; Rf3A 0,03.

(5) BOC-Tyr (Bu*)-D-Ala-Gly-MePhe-MCHgC^ CH₂NMe₂

BOC-Tyr(Bu*)-D-AIa-OH (1,22 g), H-Gly-MePhe-NHCHgCHgCHg-KMe₂.2HCl (1,18 g), HOlTSu (0,345 g) und MM (0,30 g) wurden in trockenem DMF (20 ml) gelöst und die Lösung wurde auf 0 ⁰C abgekühlt. Es wurde DCCI (0,680 g) zugesetzt und das Gemisch 18 Stunden lang vor dem Eindampfen gerührt. Der Rückstand wurde in Äthylacetat (50 ml) gelöst und mit wäßrigem Natriumhydrogencarbonat (10 folg, 2 χ 50 ml), Wasser (2 χ 50 ml)· gewaschen, getrocknet (Ua₂SO.) und zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wurde in Methanol gelöst, auf eine Säule von Silicagel (35 x 2 cm) gegeben und mit Löeungsmittelsystem 1F eluiert. Die die vorgesehene Verbindung enthaltenden Fraktionen wurden zusammengenommen, eingedampft, und der Rückstand wurde in Äthylacetat (100 ml) gelöst. Die Äthylacetatextrakte wurde mit wäßrigem Natriumhydrogencarbonat (10 folg, 3 x 100 ml) gewaschen, getrocknet und eingedampft und ergaben die Titelverbindung Tetrapeptid

(5) in Form eines weißen Feststoffes, Rf1E 0,18, Rf3A 0,39.

(6) H-TyT-D-AIa-GIy-MePhO-IiHCH₂CH₂CH₂MIe₂

Das geschützte Tetrapeptid (5) (500 mg) wurde in Äthylacetat (5 ml) gelöst, und eine Lösung von Chlorwasserstoff in Äthylacetat.(5,7 M, 2.5 ml) wurde zu der gerührten Lösung gegeben. Nach 1 Stunde wurde das Reaktionsgemisch filtriert, und der Rückstand wurde mit Petroläther gewaschen, getrpck-

-H-

net und aus Wasser lyophilisiert und ergab das Produkt (380 mg) in Porm eines weißen Feststoffes. Rf4A 0,27, Rf3B 0,47 BJ 573 + 23,6 (c = 13; 0,1M HCl)_e

Beispiel 3

Ij-Tyrosyl-D-alanylglycyl-N-methyi-L-ph.en.Ylalanin-^-dimethylaminopropylamid-N-oxid

(1) BOC-TyTCb^)-D-AIa-GIy-MePiIe-KHCH₂CH₂CH₂Ii(O)Me₂

Boc-Tyr(Bu^t)-D-Ala-Gly-MePhe-MCH₂CH₂CH₂Me₂ (500 mg) wurde in Methanol (10 ml) gelöst, und eine wäßrige Lösung von Wasserstoffperoxid (30 %ig, 0,16 ml) wurde zugesetzt. Die Lösung wurde 48 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt, filtriert und eingedampft, um das vorgesehene geschützte IT-Oxid in Form von Gummi zu erhalten. Rf1E.0,08; Rf3A 0,41.

(2) H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-imCH₂CH₂CH₂li(0)Me₂

Der Gummi von (1) oben wurde in Äthylacetat (5 ml) gelöst, und eine Lösung von HCl in Äthylacetat (2,63M, 1 ml) wurde zugesetzt. Die Lösung wurde 1 Stunde lang gerührt, filtriert, der Feststoff getrocknet und aus Wasser lyophilisiert, um das vorgesehene Produkt (240 mg) in Form eines weißen Feststoffes zu gewinnen. Rf4A 0,56; Rf3B 0,52, /pCj SSq = +18,8° (o = 1 0,1M HCl).

Beispiel 4

L-Tyrosyl-D-alanylglycyl-K-methyl-L-phenylalanin-2-dimethylaminoäthylamid

Diese Verbindung wurde nach der folgenden Methode hergestellt:

- 15

Tyr D-AIa

,Bu'

,Bu¹

GIy

MePhe

BOC-

OH H-

OH NH

-MHCH₂CH₂MMe₂-HCl -MHCH₂CH₂MMe₂

2. HCl

(1) BOC-MeHIe-MHCH₂CH₂MMe₂

BOC-MePhe-OH und W,N-Dimethyläthylendiamin wurden nach der Verfahrensweise von Beispiel 1 (1) gekoppelt, um das vorgesehene Amid in Form eines Öls zu gewinnen.

(2) MMe-HIe-HHCH₂CH₂NMe₂^HCl

Das IT-geschützte Amid von (1) oben wurde nach der Methode von Beispiel 1 (2) vom Schutz befreit und ergab das vorgesehene Hydrochloridsalz in Form eines Öls.

(3)-BOC-Tyr(Bu*)-D-AIa-GIy-MeHIe-NHCH₂CH₂MMe₂

BOC-Tyr-(Bu*)-I)-Ala-Gly-OH (700 mg, 1,5 mM) wurde in trockenem DMP (7,5 ml) gelöst, und NIVIM (152 mg, 1,5mM) wurde zugesetzt. Die gerührte Lösung wurde auf -15 ⁰C abgekühlt, und 1BCF (205 mg, 1,5mM) wurde zugegeben. Nach 5 Minuten wurde eine Lösung von 2HCl.H-MePhe-NHCH₂CH₂NMe₂ (568 mg, 1,5mM) zugesetzt, worauf NMM (303 mg, 3 mM) folgte. Nach 18 Stunden wurde das Reaktionsgemisch eingedampft, und der Rückstand wurde auf ÄtOAc (50 ml) und gesättigte wäßrige Natriumhydrogencarbonatlösung (50 ml) aufgeteilt.>Die Äthylacetatschicht wurde abgetrennt, mit gesättigter wäßriger Natriumhydrogen-

- 16 «

209 81t

carbonatlösung (50 ml), Wasser (2 χ 50 ml) und Salzlösung (50 ml) gewaschen, getrocknet (Na₂SO.) und eingedampft. Der Rückstand wurde auf Silicagel unter Anwendung von Lösungsmittelsystem 7B chromatografiert. Passende Fraktionen wurden zusammengenommen und eingedampft, um das vorgesehene Tetrapeptidamid (700 mg) in Form eines glasartigen Feststoffes zu gewinnen· ·

(4) 2HCl.H-Tyr-D~Ala-Gly-MePhe-iraCH₂CH₂me₂

Das geschützte Peptid von (3) wurde mit Hilfe der Methode von Beispiel 2 (6) vom Schutz befreit, um das vorgesehene Produkt zu gewinnen. Nach der Lyophilisierung wurde das Tetrapeptidamid (200 mg) in Form eines weißen Feststoffes gewonnen. Rf7B 0,04, Rf 3A 0,07, Rf4A 0,23,^:/p£7 ß° = -24,2° (c =-0,50, -DMF).

Beispiel 5

Ii-Tyrosyl-D-Alan.Ylglycyl-L-phenyJ.alanin-thiomorpholinamid-S-oxid

(1)BOC-Phe?-N ^

BOC-Phe-OH (1,32 g) und I8CF (680 mg) in DME (10 ml) wurden auf -20 ⁰G abgekühlt, und au der gekühlten und gerührten Lösung wurde KMM (520 mg) zugegeben. Nach 2 Minuten wurde eine kalte Suspension von ThiamorpholinhydroChlorid (690 mg) und NMM (520 mg) in BMP (8 ml) zugesetzt. Das Rühren wurde 30 Minuten lang bei -20 ⁰C und anschließend bei Raumtemperatur über Nacht fortgesetzt. Nach dem Verdampfen des Lösungsmittels wurde das entstandene Material auf Äthylacetat und gesättigte wäßrige Natriumhydrogencarbonatlösung aufgeteilt. Die Äthylacetatschicht wurde dreimal mit gesättigter Natriumhydrogencarbonatlö sung, zweimal mit 10 %iger Zitronensäurelösung in Wasser und anschließend mit V/asser und abschließend mit gesättigter ITatriunichloridlösung extrahiert.

209 811

Die Äthylacetatlösung' wurde getrocknet (Na₂SO^) ¹^ eingedampft und ergab das Thiamorpholonamid in Form eines Gummis (1,56 g). -

(2) H-Phe-l( fe HCl

Eine gerührte Lösung von. BOC-Phe-l{ js (1,05 g) in Essigsäure (3 ml) wurde bei Raumtemperatur mit einer Lösung von Hydrogenchlorid in Essigsäure (2,6M, 3 ml) und in Intervallen von 2 Stunden mit zwei v/eiteren 3-ml-Portionen behandelt« Nach dem Verdampfen des Lösungsmittels und von Hydrogenchlorid wurde der Rückstand mit trockenem Diäthyläther zerrieben, der Äther dekantiert und der Rückstand mit frischem trockenem Äther zerriben, um Phenylalaninthiamorpholinamid als Feststoff zu gewinnen (738 mg).

(3) BOC-Gly-Phe-l^ ^

Nach der oben für BOC-Phe-i^ S angewandten Methode wurde

BOC-GIy-OH (384 mg) an Phe-I( "is.NCl unter Verwendung von XBCF (258 mg) und KMM (424 mg, insgesamt) gekoppelt. Es wurden 774 mg Dipeptidamid gewonnen.

(4) BOC-Tyr-iBu*) -D-Ala-Gly-Phe-I^ ^

BOC-GIy-Phe-1\[ S (697 mg) wurde mit wäßriger Trifluores-

sigsäure (H₂OrCF₃CO₂H=I:9,9 ml) 11/2 Stunden lang gerührt. Die Säure wurde eingedampft, und der Rückstand wurde mit Diäthyläther trituriert, um ein Pulver zu gewinnen, das in trockenem DMF 6 5 ml) aufgelöst und mit ITMM auf einen pH-Wert von 8 (feuchtes Indikatorpapier) eingestellt wurde. Es wurden BOC-Tyr-(Bu"⁵)-D-AIa-OH )680 mg) und HONSu (211 mg) in DMF (3 ml) zugesetzt, worauf DCCJ (377 mg) folgte, und das. Gemisch wurde über Efacht bei Raumtemperatur gerührt. Der Feststoff wurde durch Filtration entfernt und das Filtrat zu einem Gummi eingedampft, der zwischen Äthylacetat und gesät-

- 18 -

j · - ie - 209 811

tigter wäßriger Natriunihydrogencarbonatlösung aufgeteilt wurde. Die A'thylacetatschicht wurde zweimal mit gesättigter wäßriger Natriumhydrogencarbonatlösung und danach dreimal mit 10 %iger Zitronensäure in Wasser und dann mit Wasser und gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen." Durch Trocknen (HapSO.) und Eindampfen wurde das geschützte Tetrapeptidthiamorpholinamid (1,09 g) gewonnen.

(5) Tyr-D-Ala-Gly-Phe-l{ }

Das geschützte Tetrapeptidthiomorpholinamid (1,0 g) wurde 11/2 Stunden lang in wäßriger Trifluoressigsäure (HgO: CP-CO₂H=I:9,9ral) gerührt. Durch Eindampfen und Triturieren mit Diäthyläther wurde ein Peststoff gewonnen, der mit Hilfe der Chromatografie auf Silicagel (CHCl₃:CH-,0H:Ac0H:H₂0=60:18: 1:1,5). und danach durch Aonenaustauschchromatografie (Sephadex SP-Harz, in Porm von Pyridinium, unter Anwendung eines Gradienten von 2 % Pyridin in Wasser bis 5 % Pyridin, 1 % Essigsäure in Wasser) gereinigt. Das Produkt wurde lyophilisiert und ergab Tetrapeptidthiamorpholinamid (495 mg).

(6) Tyr-D-Ala-Gly-Phe -IJ^ ^

Tyr-D-Ala-Gly-Phe-l^ 'S (100 mg) in Äthanol (50 ml) wurde mitdrei aufeinanderfolgenden Portionen von 20 Volumina Wasserstoffperoxid (je 0,3 ml) in Abständen von 45 Minuten unter Rühren bei Raumtemperatur behandelt. Hach weiteren 1-stündigem Rühren wurde die Lösung zur Trockne eingedampft, in Wasser (20 ml) gelöst und lyophilisiert, um einen weißen Peststoff (98 mg) zu gewinnen. Rf3A 0,25; Rf7C 0,06; Rf5B 0,38, JoCJ ^⁵ = +53,1° (c = 0,47 in 0,1N HCl).

Beispiel 6

L-Tyrosyl-D-alanylp;lycyl-l·T-meth,γl-L-phenylalanin-2-amino.-äthylainid

Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-KHCHgGHgliHZ (hergestellt nach der Met-

-19-

hode von Beispiel 4) (350 mg) wurde in MeOH (20 ml) gelöst und zu einer Suspension von 10 % Palladium auf Holzkohle (100 mg) in V/asser (10 ml) gegeben. Bei 22 ⁰C wurde 4 Stunden lang Wasserstoff durchgeblasen. Der Katalysator wurde anschließend abfiltriert, und die Lösungsmittel wurden unter reduzierten Druck entfernt. Der Rückstand wurde in einer geringen Menge von 1 % fyridin in Wasser gelöst und auf eine Säule von Sephadex Harz SP (unter Eluierung mit

einem Gradienten von 1 %igem wäßrigen Pyridin s»-1 %igem

wäßrigen Pyridinacetat *-5 %igem wäßrigem Pyridinacetat)

aufgegeben. Relevante Fraktionen wurden gesammelt, und das Lösungsmittel wurde durch Verdampfen im Vakuum entfernt. Das Produkt (220 mg) wurde aus Wasser gefriergetrocknet. Rf3B 0,45, Rf4A 0,56 £p(J ^₉ = +22,22° (c =0,98; 0,1M . RCl).

Beispiel 7

L-Tyrosyl-D-AlanyJ.^lycyl-I^-methyl-L-pherylalaJiin-ß-trimethylammoniumpropylamida,cetat , ·

(1) BOC -Tyr-(Bu*)-AIa-GIy-MePhB-NHCH₂CH₂CH₂N⁺Me₃OAc"

B0C-Tyr(Bu*)-D-AIa-GIy-MePhO-NHCH₂CH₂CH₂NMe₂ (640 mg) wurde in Äthanol (5 ml) gelöst. Methyljodid (572 mg) wurde in Äthanol (5 ml) gelöst. Methyljodid (572 mg) wurde zugegeben und die Lösung 48 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Die Lösung wurde eingedampft, der Rückstand in Äthylacetat gelöst und auf eine Säule von Silicagel (40 χ 2 cm) gegeben und mit Äthylacetat:Pyridin-Essigsäure:Wasser 90:20:6:11 eluiert. Die die vorgesehene Verbindung enthaltenden Fraktionen wurden zusammengenommen und eingedampft, um einen Feststoff (320 mg) zu gewinnen. Rf3A 0,17; Rf3B 0,74; Rf4A 0,47.

- 20 -

• - 20 -

(2) H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NHCH₂CH₂CH₂N*Me₃acetat~

Das obige geschützte Tetrapeptid (300 mg) wurde in Äthylacetat (10 ml) gelöst, und zu der gerührten Lösung wurde eine Lösung von HCl in Äthylacetat (3»9M, 4 ml) gegeben· Nach 1 Stunde wurde die Lösung eingedampft und der Rückstand wurde in Wasser gelöst und auf eine Säule von CM-52-Cellulose (35 x 3 cur) gegeben und mit einem linearen- Konzentrationsgradienten von 0,05 %igem wäßrigen Pyridin zu 1 %igem wäßrigen Pyridinacet'at eluiert. Die die vorgesehene Verbindung enthaltenden Fraktionen wurden zusammengenommen, eingedampft, und der Rückstand wurde aus Wasser lyophilisiert, um das vorgesehene Produkt (110 mg) in Form eines weißen Feststoffes zu gewinnen. Rf3B 0,17; Rf4A 0,13; Rf5B 0,05 /pj 589 = -37,75°. (c- * 0,5 DMF).

Beispiel 8

L-Tyrosyl-D-methionylglycyl-N-methyl-L-phenylalanin^.-dimethylaminoäthylamid-IT-oxid

(1) BOC-Gly-MePhe-liH(CHg)

BOC-GIy-MePhO-NH(CH₂)₂NMe (2,64 g) wurde in Methanol (200 ml) gelöst, und es wurde Metachlorperbenzosäure (1,23 g) zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 2 Stunden lang bei 22 ⁰C gerührt und anschließend 18 Stunden lang bei 5 ⁰C stehen gelassen.

Das Lösungsmittel wurde unter reduziertem Druck entfernt, und der Rückstand wurde in Äthylacetat (150 ml) gelöst und die Lösung wurde mit gesättigter wäßriger Natriumhydrogencarbonatlösung (2'x 30 ml) gewaschen, getrocknet (Na₂SO.) und eingedampft, um das N-Oxid (1,9 g) zu gewinnen, Rf 3A 0,76; Rf4A 0,64.

- 21 -

(2) HCl*-H-Gly-MePhe-IIH(CH₂)₂n(0)Me₂

Das obige geschützte U-Oxid (1,8 g) v/urde in Äthylacetat (10 ml) gelöst, und au der Lösung wurde Essigsäure (10 ml) gegeben. Eine Xosung von Hydrogenchlorid in Athylacetat (3,9M, 12 ml) wurde zugesetzt, und das Gemisch wurde 30 Minuten lang bei 21 ⁰C gerührt. Das Lösungsmittel wurde unter Vakuum entfernt, und der entstandene Peststoff wurde mit wasserfreiem Diäthyläther (2 χ 40 ml) trituriert. Das N-Oxidhydrocnlorid (1,5 g) wurde durch Filtration gesammelt, Rf4A 0,40.

(3) BOC-Tyr(Bu¹¹ )-D-Met-Gly-MePhe-ira(CH₂)₂U(0)Me₂

BOC-Tyr(Bu^t)-D-Met-OH (1,8 g) wurde in trockenem DMF (10 ml) gelöst, und HOHSu (0,87 g) wurde zu der Lösung gegeben. HCL.H-Gly-MePhe-ira(C!H₂)₂N(O)ME₂ (1,5 g) und MMM (0,84 ml) wurden in trockenem DMP (20 ml) gelöst.

Die beiden Lösungen wurden gemischt, auf -10 ⁰C abgekühlt, und DCCI (0_s87 g) wurde zugesetzt. Das Gemisch wurde 2 Stunden lang bei -10 ⁰C und anschließend 18 Stunden lang bei 20 ⁰C gerührt.

Das Reaktionsgemisch wurde filtriert, und die klare Lösung wurde unter Vakuum eingedampft. Der entstandene Gummi wurde auf Athylacetat (60 ml) und Wasser (10 ml) aufgeteilt, und die organische Phase wurde mit 10 %iger wäßriger liatriumhydrogencarbonatlösung (1x10 ml) gewaschen und dann mit 10 &Lger wäßriger Zitronensäurelösung (5x15 ml) extrahiert. Der pH-Wert der wäßrigen Phase wurde anschließend unter Verwendung von festem latriumhydrogencarbonat auf 7 eingestellt, und es wurde in Athylacetat (3 x 40 ml) extrahiert. Die organische Phase wurde getrocknet (Na₂SO.) und eingedampft und ergab einen Gummi (1,35 g). Rf3A 0,48.

- 22 -

. .22- 209 811

(4) HCl.H-0?yr-D-Met-Gly-MePlie-liH(CH₂)₂IT(O)ME₂ .

B0C-Tyr(Bu^t)-D-Met-Gly-MePhe-lIH(CH₂)₂(0)Me₂ (i,11 g) wurde in einem Gemisch von !Trifluoressigsäure (36 ml) und Wasser (4 ml) mit einem Gehalt von Anisol (0,2 ml) gelöst. Das Gemisch wurde 30 Minuten lang vor dem Eindampfen unter Vakuum bei 22 ⁰C gerührt. Das Produkt wurde mit Hilfe, der SiIicagel Chromatografie unter Anwendung eines Gradienten-Systems ( Lösungsmittelsysteme 3A ^2B) als Eluierungsmittel

gereinigt. Das von der Silicagelsäule stammende Material wurde auf eine Carboxymethylcellulose-Säule gegeben und mit einem Gradienten von 0,1 %igem wäßrigen Pyridin bis 1,5 %igem wäßrigen Pyridinacetat eluiert.

In Präge kommende Fraktionen wurden gesammelt, eingedampft und der Rückstand "wiederholt aus verdünnter HCl gefriergetrocknet, um das vorgesehene Hydrochlorid (341 mg) zu gewinnen. Rf3B 0,31; Rf4A 0,44; Rf5B 0,19 ßÜ ^₉ = + 29,30 (c = 0,99, 0,12T HCl).

Beispiel 9

L-Tyrosyl-D-methionyl (sulfoxid) glycyl-IT-methyl-L-phenylalanin-2-dimethylamino-äthylamid-I^;r-oxid

HCl.H-Tyr-D-Met-Gly-MePhe-KH(CH₂)₂lT(O)ME₂ (418 mg) wurde in Äthanol (150 ml) gelöst, und es wurden 100 Volumina Wasserstoffperoxid (1j46 ml) zugesetzt. Die Lösung wurde 24 Stunden lang bei 21 ⁰C gerührt, worauf das Lösungsmittel unter reduziertem Druck entfernt und das entstandene Material mit Hilfe der Chromatografie auf CM-Cellulose unter Anwendung von Gradienteneluierung von 0,1 tigern wäßrigen Pyridin bis 1»5 %igem wäßrigen Pyridinacetat gereinigt wurde. ·

Das von der Säule stammende Material wurde wiederholt aus HCl gefriergetrocknet, um das vorgesehene Hydrochlorid

-23- 209 S 1 1

(354mg) zu erhalten. Rf3B O,32;'Rf4A 0,43; Rf5.B. 0,32 Z5L7 d° = +9,16° (c = 1,05, 0,11THCl).

Die Tabelle enthält Einzelheiten weiterer Verbindungen der Formel I, die nach den Methoden in den obigen Beispielen hergestellt wurden.

20 9

P₁ CQ FP

ο ο

CM

I Φ

CVJ

ιη

O

ιη

O

t-.cn

Τ

in

τ—

CM

cn

τ—

CM

cn

VD

τ-

CMP

τ-ιη

Ο

co

«*

VD

CM

cn

ο

O

Ο

OO

O

ο

<

P₄

pq

<

W

«J

W

τ-

<η<Φ

τ-

cn

•k

H

O

H O

^.

H

co

ο

VD

O

W

in

O

W

cn

CM

cn

*

cn

jXj

CM

«,

CM

J;»

in

CM

ιη +

cn

Il

is;

+

Τ

CM

τ-

!ξ;

Il

ι

^>>

Il

Ο*

⁺

Ο

.11

Γ"

ιη

O

in

O

Il

O

*

Il

tn

in

•k

in

CTv

P

CTH

«

VD

·« '

τ— β

τ-Ρ

O

σ\

CO

Q

σ\

O

I O

τ~ Ρ

τ— Ρ

CM Φ

O O

CM

O O O

CM

& β

φ φ

CM

	W	O
CM	CM	O
O	O	cn
O	O
	cn

Ph Φ

Bsp. . Verbindung 0J Rf Methode

16 H-TyT-D-AIa-GIy-MePUe-NH(CH₂)₃NHCOCH₃ /RJ ^⁰ = +4,3 . 3B 0,76

(c = 1, .DMP) 4A 0,64

" 7B 0,24

17 H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-liH(CHg)₃CONHMe /pj $ = +17,4 4A 0,60

(c = 0,52, .0,1N HC1)7B 0,22

18 H-Tyrr-D-Ala-Gly-Phe-N^ h >0 /öj Jj⁸»⁵ = +59,1 3A 0,17

. (c = 0,44, 0,1N HCD5B 0,36

. 70 0,05

19 H-Tyr-D-Ala-Gly-ffiePhe-NH(CHg)₃CONMePh /pj p⁴ = +16,2 3A 0,36

(c = 0,54, 0,1N HC1)4A 0,69

20 H-O^rr-D-Ala-Gly-Me'Phe-NH(CHg).COMIe₂ /oj ρ = +17,3 3A 0,60

(c= 0,52, 0,1N HCD7B 0,11

ω CVi

in OJ

CV «V

ο ο

-Φ O

CVJpLTl

CVI

φ.

O O

CV)

φ φ

OJ

in «φ in

O in m

O O

(Λ

CVJ

O

CVi ρ» in

Il O

CVJ

O CVJ

.1

Pl

-γ- CVI

ιη «3-

O O

«3 PQ

H O

CVJ

CVJ ^ + O

OJ ρ in

CVJ

O O

cm

Pl

co o ο" ο

CT»

Ο CVI

cvjpin

VD in O O

OJ «« Il

=* ο ojpin

»S P

cvj © cvj^ Φ

CV! CVJ

tu t^i

O O

CVJ OJ

W. W

O O

iS

J₅

CVJ CVJ

CVl

in

CVJ

Bsp. Verbindung /pj Rf Methode

CH₉CH₉CHMe₉ _ _0A '

26 H-Tyr-D-Ala-Giy-MePhe-H ^ά * ^ά IPJ j) ^s ~°»⁸ 3A 0,22 3

(c=Ö,50, 0,1ΪΓ HCl) 4A 0,35

27 H.-Tyr-D-Ala-Gly-.MePhe3m(CH₂)₃NH₂ /BJ ξ⁴ - -42 3B 0,44 6

(c=1, DICP.) 4A 0,48

28 H-O?yr-D-Ala-Gly-Phe if \^ / jpJ ρ = -68,2 3A "0,19 1 u. 3 ' ^

(c=1, DMP) 3B 0,69 «

4A- 0,58

29 H-Tyr-D^Ala-Gly-MePheMH(CHg)₂MMgPh /BJ ψ = -46,8 3A 0,35 4 C

(c=1, DHCP) 4A 0,70 ^

7B 0,39 ' ^

- 28 -

Bsp. Verbindung f&J Rf Methode

30' H-Tyr-B-Ala-Gl7-MePhe3m(CH₂)₂IT(0)MePh ßj §^υ = -40,2 3B 0,63

(c=1, DMP) 4A 0,53

7A 0,12 ' ___

31 MeTyr-D-Ala-Gly-MePiieUHCCHgJgMIeg , Z5L7§°*+21,1 3B 0,33

(c=1, 0,11 HCl) 4A 0,25

5B 0,12 I

32 MeTyr-D-Ala-Gly-MePheNH(CH₂)₂I(O)Me₂ /BJ ψ = +25,5 3B 0,36

(c=0,94, 0,1H HCl) 4A 0,35

• 5B 0,15

33 H-Tyr-D-Hva-Gly-MePheM(CHg)₂Me₂ /ÖCJ ψ = +28,5 3B 0,39 .

(C=O,91, 0,1UHCl) 4A 0,38

5B 0,18

- 29 -

M -ρ φ

CM

φ φ

«Λ

CM

OT

VO

CM

CM CM

τ—

O

ro

LTv

CM

τ—

CM

ο

Τ

O

CM

VD

WP

CM

¹ ν-

CM

Α

PQ

V»

τ—

b

O

Vk

et

ψ.

O

•

O

°

O

PQ

°

O

ο

PQ

<Α

O

PQ

c\

PQ

(Λ

ιη

O

H

W

O

CM

W

H

J2J

·>

Vk

CM

O

·{·

τ—

VD

J2J

Jt]

CM

^-·

ν-

Il

O

·)·

W

CTv

O

Il

O

ν-Ρ.

Il

cr>"

Il

*

Ι\

<Λ

ν- P

σ\

CT»

σ\

ν-Ρ

O Il

ο Il

τ— Il

O

ο

O

Bsp«, Verbindung . £pj Rf Methode

38 H-.Tyr~D-Ala-Gly-MePheHH(CH₂)₂NHCO₂C₂H₅ _o_7 ^⁰ = +25,3 3A 0,35

(c=0,91, 0,1HHCi) 4B 0,72

7B 0,34

41 H-Tyr-D~Ala-Gly-MePheKH(CH₂)₂NHC0NMe₂ fdj ψ = +24,8 3A 0,15

(c=O,96, 0,1NHCl) 7A 0,33

39 H~Tyr-D-Ala-Gly-MePlieM(CH₂J₂ITHCONH₂ /oC_7 ^f = +23,5 3A 0,12 4 «

(c=O,97, 0,1NHCl) 4A 0,62

• 7A 0,50

40 H-0?yr-D-Ala-Gly-MePheNH(CH₂)₂OCONH₂ /RJ J⁹ = +25,7 3A 0,13

• (c=0,97, 0,1N HCl) 3B 0,54

7A 0,49

· - -3T - '

Bsp. Verbindimg JoCJ Rf Methode

CH CH PH 42 H-Tyr-D-Ala-Gly-MePheN'"' ^{2 2} /<λ7 £² « -5,4 3A 0,85

^(CH)HM " ^D

(c=0,58, 0,1NHCl) 7B 0,46 CH₂CH₂PH

^(CH₂N(O)Me₂ /aj ²² -5,0 3A 0,17

(c=0,58, 0,1N HCl) 3B 0,67

CH₂CH(0H,)_{2 iq}

44 H-Tyr-D-Ala-Gly-MePheHHCiT - - H ^p Z^/ -ή ⁼ -53»3 3B 0,47

(c=1,25, DMP) 4A 0,55

5B 0,41

45 H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NHC^ - ^H ^d

' " 3B 0,48

4A 0,56

5B 0,46

-,3g·- ·

Bsp· Verbindung ZpL7 Rf Methode

46 E-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-MCH₂CH₂liMeCH₂CH₂CHMe /pLj^ +23,8 3B 0.52

(c=O,93, 0,1U HCD4A 0,57

5B 0,36

47 H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-UHCHgCH₂N(O)MeCH₂CH₂CHMe₂ 3A- 0,40

3B 0,60 4A 0,54

48 H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-MCHg CH₂NHCO₂CH₂Ph Z^/J⁹'⁵= +18,3 3D 0,76

(c=0,51, 0,1ITHCl) 4A 0,76

7B 0,33

49 H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-HHCH₂CH₂CH₂lTHC0₂CH₂Ph ^jJ⁹'⁵= -38,0 3A 0,32

. , (c=1, DIvIP) 4A 0,73

• . 7B 0,45

a = Hydrolyse von Bsp· 11 . b = Anmonalyse von Bsp. 11

Die folgenden Verbindtaigen sind andere typische erfindungsgemäße Verbindungen:

H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe(p-Cl)-NHCHgCHgN(0)Me₂. H-Tyr-D~Ala-Gly~Phe(p-Cl)-NHCH₂CHglK 0)Me₂.

^ CH₀CH₀CH, H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-N-; ^{d d J}

\ CHgCHgN(O)Me₂

H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-N

\ CHgCHgN(O)Me₂

H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-N ^d

Λ CHgCHgN(O)Me₂

H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-N ^fe

\ Me CH₂CH₂N(O)Me₂

^p₀/ \ -Cl

H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-N^ ^{d d}

CH₂CHgN(O)Me

H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-N. * ^c

^ CHgCH₂N(O)Me₂

H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-Ff ^Cl

^ CH₂CH₂N(O)Me₂

H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe~N H-Tyr-D-Ala-Gly^MePhe-IT.

CH₂CH₂ ¹-H-.Tyr~D~Ala-Gly-MePhe-N OH

^ CH₂CH₂N(O)Me₂

CH₂CH₂- f\- OMe H-Tyr~D-Ala-Gly-MePlie-N

^ CH₂CH₂N(O)Me₂

H-Tyr-D~Ala~Gly-MePhe-N

H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-N \

\ OMe

^N CHCHN(O)Me

H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-l\THCH₂CH₂N( 0) MeCH₂CH₂Ph

CH₂CH₃

-lT^/~^Vo

H-Q?yr-D-Ala-Gly-MePhe

H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-HS— OH

H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-H H%cT^M® CH~C00^e

N—( Me *

CH₂CH₂Ph Cpm-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-N

H-Tyr-D-Abu-Gly-MePhe-lTHCHg CH₂IT(O)Me₂ H-TyT-D-VaI-GIy-MePiIe-ITHCH₂CH₂H(O)Me₂ H-TyT-D-LeU-GIy-MePiIe-ImCH₂CHpIT(O)Me₂ H-TyT-D^TIe-GIy-MePiIe-MICH₂CH₂H(O)Me₂ ' H-TyT-D-ThT-GIy-MePiIe-FHCH₂CH₂H(O)Me₂ H-TyT-D-Ala-Gly-MePhe-ITHCHgCHgHHIfe H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-HHCHgCHgH(0)MeEt H-TyT-D-AIa-GIy-MePhC-HHCH₂CH₂H(O)Et₂ H-Tyr-D-Ala-Gly-Me-Phe-HhCH₂CH₂HMeEt H-TyT-D-Ala-Gly-MePhe-HHCHgCH₂HEt₂.

Die fÜT die Herstellung in den obigen Beispielen verwendeten

8 χ

Ausgangs-Amine der Formel HHR R können, wenn sie im Handel nicht zu haben sind, mit Hilfe an sich bekannter Verfahren oder im Falle bestimmter Amine folgendermaßen hergestellt werden:

I - 36 -

Beispiel A

N~Isoamyl-N' ^H^! -dimethyläthylendiamin (I)Me₀CHGH₀COMCH₀CH₀HIT₀ ·

Isovaleroylchlorid (5 g» 38 mMol) in Dichlormethan wurde tropfenweise zu einer gerührten Lösung von ΙΤ,ϊΤ-Dimethyl- " äthylendiamin (3*38 g, 38mMol) und MMM (7,75 g 76,7 mMol) in CHpCIo bei O⁰C gegeben. Das Reaktionsgemisch wurde 4 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt und anschließend wurde das Lösungsmittel verdampft. Der Rückstand wurde in 5M χ NaOH (50 ml) aufgenommen und mit Äthylacetat (2 χ 100 ml) extrahiert. Das Äthylacetat wurde mit einer gesättigten wäßrigen Lösung von Natriumchlorid gewaschen, getrocknet (Nap SO«) und eingedampft. Der Rückstand wurde in Diäthyläther gelöst, -und 5M HCl in Äthylacetat (10 ml) wurde zugesetzt. Der entstandene Peststoff wurde filtriert, mit Diäthyläther (5 x 10 ml) gewaschen und unter Hochvakuum getrocknet.

Ausbeute = 5,43 g, Rf 3A 0,40.

Eine Lösung aus dem obigen Amid (5g) in trockenem THP (50 ml) wurde tropfenweise'zu einer gerührten Suspension von LiAlH^ (2 g) in trockenem THP (20 ml) bei Raumtemperatur gegeben. Das Reaktionsgemisch wurde anschließend 4 Stunden lang.am Rückfluß gekocht, worauf Dünnschichtchromatografie das Pehlen von Ausgangsmaterial ergab. Eine gesättigte wäßrige Lösung von Natriumsulfat wurde zum Abschrecken von überschüssigem LiAlH. zugegeben.. Die entstandene . Suspension wurde filtriert, und das Piltrat wurde mit 4M HCl (10 ml) angesäuert. Das Lösungsmittel wurde verdampft, wodurch ein weißer Peststoff zurückblieb, der mit Diäthyläther trituriert, filtriert und getrocknet wurde.

Ausbeute = 5,51 g» r'- - - 37 -

ι

Beispiel B

H-Phenäthyl-N', Ν'-dimethyläthylendiamin (1) PhCH₂COWHCH₂CH₂IIH₂. HCl

Diese Verbindung wurde in ähnlicher Weise wie in Beispiel A (1) beschrieben durch Koppeln von Phenacethylchlorid (1,0 s, 6,47 mMol) mit Ν,Ν-Bimethyläthylendiamin (0,42 g, 6-, 47 mMol) iii Gegenwart von KMM hergestellt* Ausbeute = 1,38 g, Rf3A = 0,30.

(2) PhCH₂CH₂KHCH₂CH₂ITH₂.HCl

Diese Verbindung wurde durch LiAlH.-Reduktion des obigen Amids (10 g) wie für. Beispiel A (2) beschrieben hergestellt. Es wurde e.in unreines Produkt (12 g) gewonnen, das mit Hilfe der Silicagel-Säulenchromatografie unter Eluierung mit dem Lösungsmittelsystem 3A gewonnen wurde. Ausbeute =4,5 g, Rf3B = 0,31.

Beispiel C

K-(2-Aminoäthyl)-K',K'-dimethylharnstoff (1) PhCH₂OCOMCH₂CH₂HHCOOTvIe₂

Eine Lösung von Dirnethylcarbamoylchlorid (1,39 g) in Diäthyläther (15 ml) wurde tropfenweise zu einer gerührten Lösung· von NMM' (1,57 g) und 2-Benzyloxycarbonylaminoäthylamin (3,02 g) in Diäthyläther (110 ml) gegeben. Das Gemisch wurde vier Stunden lang gerührt und dann zwei Tage lang stehen gelassen. Kach dem Verdampfen des Äthers vmrde der zurückgebliebene Peststoff auf 10 %ige wäßrige Zitronensäure und Äthylacetat aufgeteilt. Die Äthylacetatextrakte wurden mit .10 %iger wäßriger Zitronensäure, gesättigter Ka~ triumhydrogencarbonatlösung und gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen, anschließend getrocknet (IJa₂SO^) und zur

Gewinnung eines Peststoffes (1,7 g) eingedampft. Eine Pro be wurde aus Äthylacetat/Petroläther (S„P.,60-80°) auskriskristallisiert, Schmelzpunkt 81 bis 82 ⁰C.

Die obige N-Benzyloxycarbonyl-Verbindung (1,06 g) wurde über 10 tigern Pd/C (100 mg) in Äthanol (30 ml), mit einem Gehalt von 2U wäßriger Schlorwasserstoffsäure (2,1 ml) 1 1/2 Stunden lang hydrogenolysiert. Durch Filtration und Eindampfen des Piltrats wurde die vorgesehene Verbindung in Porm des Hydrochlorids gewonnen, das ohne Reinigung verwendet wurde. ·

Beispiel D

H-Isoamyl-H-methylathylendiamin

(1) BOC-GIy-U(Me)CH₂CH₂CmTe₂ .

BOC-GIy-OH (17,5 g 0,1 Mol) wurde in trockenem CH₂Cl₂ (100 ml) 'gelöst, worauf HMM (10,1 g, 0,1 Mol) und IBCP (13,7 g, 0,1 Mol) bei -15 °C zugesetzt wurden. Nach 2 Minuten wurden li-Methylisoamylaminhydrochlorid (13,7 g» 0,1 Mol) und MMM (10,1 g) zugegeben. Das Reaktionsgemisch wurde 1 1/2 Stunden lang bei -15⁰C und bei Räumt emper-atur über Nacht gerührt. Das Lösungsmittel wurde verdampft und das öl in Äthylacetat gelöst, mit gesättigtem Natriumhydrogencarbonat (2 χ 100 ml), 10 %ig<?r wäßriger Zitronensäure (2 χ 100 ml) extrahiert, mit Wasser bis zur Neutralität gewaschen, getrocknet (Na₂SO.) und eingedampft. Bs wurde ein Öl gewonnen. Ausbeute = 27 g (quantitativ), Rf7D = 0,79..

(2) H₂NCH₂CH₂I(Me(CH₂CIMe₂ . -.

BOC-GIy-H(Me)CH₂CH₂CHMe₂ (12 g) wurde in 90 %iger TPA (wäßriger TrifluoressigBäure) (HgO:CF^COOH, 1:9, 35 ml gelöst.

20 9 81

Fach zv/ei Minuten wurde das Lösungsmittel zur Gewinnung eines Öls verdampft. Das Öl wurde in .50 ml frisch getrocknetem THP gelöst und unter einer Stickstoffatmosphäre bei -20 ⁰C zu Diboran in THi¹ (1M 150 ml) gegeben. Die Temperatur ließ man auf Raumtemperatur ansteigen, und das Reaktionsgemisch wurde über Nacht gerührt. Um den Diboranüberschuß zu zerstören, wurde vorsichtig Methanol (100 ml) zugesetzt und das Lösungsmittel zur Gewinnung eines Öls verdampft. Das Öl wurde anschließend mit 6M HCl (50 ml) behandelt. Das Reaktionsgemisch wurde 3 Stunden lang am Rückfluß gekocht und zu einem Öl eingedampft. Das Öl wurde des weiteren mit 2M HaOH 1 Stunde lang behandelt, angesäuert und dann eingedampft. Das auf diese Weise gewonnene Öl wurde mit Hilfe der Silicagelsäulenchromatografie (2,5 cm χ 80 cm) mit Lösungsmittelsyß.tem 3A gereinigt und ergab das vorgesehene Diamin

Ausbeute 4* 4,4 g, Rf3A = 0,20.

Beispiel E

Dimethyl ( 2-sjn±np_r _m 4_rme±hy3.pentyl ) amin

(1) B0C-Leu-NTie_o

BOC-Leu-OH (4,62 g 20 mM) wurde in CH₂Cl₂ gelöst und die Lösung auf -20 ⁰C abgekühlt» NMM (2,25 ml, 20 mM) und Chlordiphenylphosphatoxid (6,0 g 20 mM) wurden zugesetzt, worauf 15 Minuten später Dimethylamin (5,6 g, 125 mM) folgte. Nach 3 Stunden bei 20 ⁰C wurde die Lösung eingedampft und der Rückstand auf Äthylacetat und Wasser 50 ml) aufgeteilt. Die organische Phase wurde mit 10 %iger wäßriger Zitronensäure, wäßrigem Natriumhydrogencarbonat und gesättigter Salzlösung gewaschen, getrocknet (Na₂SO,) und eingedampft, um das vorgesehene Amid (5,15 g) zu gewinnen.

- 40 (2)

BOC-LeU-NMe₂ (1,3 g, 5mM) wurde in wäßriger Trifluoressigsäure (HgOrCF-COOH = 9:1» 20 ml) gelöst, und die Lösung wurde 1 Stunde lang gerührt. Daa Lösungsmittel wurde dann verdampft und der Rückstand in trockenem THP gelöst. Die gerührte Lösung wurde auf -20 ⁰C unter Stickstoff, gekühlt, und eine Lösung von Diboran in THP (1M, 30 ml) wurde zugesetzt. Nach 5 Stunden bei Raumtemperatur wurde Methanol (10 ml) zugegeben, und die Lösung wurde 12 Stunden lang vor dem Eindampfen gerührt. Der Rückstand wurde in wäßriger HCl (2M, 15 ml) gelöst und weitere 12 Stunden lang vor dem Eindampfen gerührt. Der Rückstand wurde mit Hilfe der Chror-

matografie auf Silicagel (System 7C 7B) gereinigt. In

Frage kommende Fraktionen wurden zusammengenommen und eingedampft, um das vorgesehene Diamin in Form eines Öls (800 mp) zu gewinnen, das beim Stehen auskristallisierte.

Bei der oben erwähnten Testmethode vom Kosterlitz u.a. werden männliche und weibliche Meerschweinchen (Gattung Duncan Hartley) durch einen Schlag auf den Kopf getötet, und ein Teil des Ileums wurde entfernt und in ein isoliertes Organbad mit einem Volumen von 50 ml gebracht. Eine "Zwick"-Reaktion wird durch Niederfrequenz-Stimulation (0,1 Hz) mit Gleichstromimpulsen von 0,5 ms erzeugt. Eine Ogstverbindung wird in destilliertem Wasser gelöst, um eine Vorratslösung mit einer Konzentration von 1 mg/ml herzustellen. Es werden Serienverdünnungen unter Verwendung von Krebs-Lösung zur Erzielung von Konzentrationen von 10 /Ug, 1 /Ug und 0,1 /Ug/ml vorgenommen. Die Verbindung wird durch Zugabe von 0,1 bis 0,3 ml der.,Lösungen zu dem Organbad getestet. Es wird dann eine Dosisansprechkurve gezeichnet und mit der für Met-Enkephalin verglichen.

Beim Schwanzzucktest bei Ratten wird heißes Wasser (auf 55 C + i ⁰C gehalten) als der schmerzerzeugende Stimulus verwendet. ··. .·

Anschließend Bind Werte aufgeführt, die von erfindungsgemäßen Verbindungen bei Meerschv/einchenileumtests (G.P.Ie Aktivität im Vergleich mit Met-Enkephalin), Hendershot u.a. (H & F) und Drucktests des Rattenschwanzes (R.T.P.) erzielt wurden. ··

Beispiel	G.P.I. Potenz	H & P ED₅₀ mg/kg i.v.	R.T.P. ED₅₀ mg/kg i.v.
	(χ Met-Enke phalin)	0,01
1	2,6	0,28	2,0
CVi	7,2	0,00003	1,8
3	4,1	0,003	1,4
4	8,5	0,08 ng/Kg	0,-32
22	6,5	0,028	0,37
6	13*0	0,24
19	23,2	0,07	2,2
Morphine	1,0

Die pharmazeutischen Zusammensetzungen können zum Beispiel in einer für die parenterale Verabreichung geeigneten Form vorliegen, z.B, als sterile injizierbare wäßrige oder ölige Lösungen oder Suspensionen. Die für intravenöse, intramuskuläre oder subkutane Verabreichung geeigneten parenteralen DesiBformen enthalten 0,1 bis 50 mg/ml einer erfindungsgemäßen Verbindung (oder eine äquivalente Menge eines pharma-. zeutisch annehmbaren Salzes). Die Dosismengen werden im allgemeinen zur Schmerzlinderung im Bereich von 0,1 bis 100 mg je nach dem Insektionsweg liegen_e

Claims

Erfindungsanspruch:

1." Verfahren für die Herstellung einer neuartigen Peptidverbindung der Formel:

R¹Tyr- B - GIy - D - H - R^x I

worin R¹ Wasserstoff, Methyl, Allyl, Dimethylallyl, Propargyl, Cyclopropy!methyl, Cyclobuty!methyl oder Phenäthyl ist;

t: B die folgende Gruppe

-HH - CR³H - CO

ist, in der R³ Alkyl-C, /· oder C H₀ YC„H_o ·., ist (worin ⁷ " 1-o q 2q r ^r+ι

q = 1 bis 2, r = 0 bis 1 und Y= 0, S, SO oder SO₂ ist), wobei die Gruppe die D-Konfiguration hat:

D die folgende Gruppe

-HR⁵ - CR⁶H -CO-

ist, in der R*^ Y/asserstoff oder Methyl ist; R Ar-Alkyl- -C₁ ο ist; v/obei die Gruppe die !-Konfiguration hat;

R Wasserstoff, AHSyI-C₁^t-J Ar oder Alkyl-C₁ « ist,

R^x eine Gruppe (CHg)₈ - X ist, worin s = 2 bis 4 und X = ^91112139119 ¹⁹

pp g₈ ,
UHR⁹, H⁺ R¹¹R¹²R¹³, NR⁹COR¹¹, HR⁹ COOR¹¹, ₂

NR⁹COHR¹⁰R¹¹,H(O) R¹¹R¹², COOR⁹ COHR⁹R¹⁰ oder OCOHR⁹ R¹ ist (worin R^ V/asserstoff, Alkyl-C, -,'Ar oder ArCH₅ ist; R^1U Wasserstoff oder Alkyl-C^; ist, R^M Alkyl-C_1><>3

Ar oder ArCH₂ ist, R¹² Alkyl-C_1-3 ist; R¹³ ist, und η = 0 oder 1 ist;
oder die Gruppe

-N-R*

R⁸

ist, worin ra = 1 bis 3 ist rind Q = SO, SO₂, CO, CHOIi, N⁺MeR¹¹ oder N(O)R¹¹ ist;

Ar Phenyl oder durch. Chlor, Methyl, Hydroxy oder Methoxy substituiertes Phenyl ist, wobei das Yerfahren gekennzeichnet ist dadurch, daß eine Verbindung der Formel:

Y - M₁- OH (EI

worin Y eine geeignete N-Schutzgruppe ist und KL ein geeignet geschlitzter Aminosäure- oder Peptidrest ist, mit einer 'Verbindung der Formel:

H - M5 - N - R^x III '

χ 8
worin R und R der obigen Definition entsprechen und Mp ein geeignet geschützter Aminosäure- oder Peptidrest ist (worin M₁ und Mp zusammen -Tyr-B-Gly-D oder ein.geschütztes Derivat davon darstellen und B und D der obigen Definition entsprechen) gekoppelt wird, worauf die Entfernung des Schutzes folgt.

2. Verfahren für die Herstellung einer neuartigen Peptidverbindung der Formel:

R¹D^r-B-GIy-D-H-R* I

worin R¹ Y/asserstoff, Methyl, Allyl, Dimethylallyl, Propargyl, Cyclopropy!methyl, Cyclobutylmethyl oder Phenäthyl ist,

B die folgende Gruppe

HH- CR³H - CO

ist, in der R³ Alkyl-C^g oder C H_g YC_T.H_2r+1 ist (in der q = 1 bis 2, r = 0 bis 1 und Y = Ό, S, SO oder S₂ ist), wobei die Gruppe die D-Konfiguration hat;

D die folgende Gruppe

- UR⁵ - CR⁶H - CO -

is-fej in der R^ Wasserstoff oder Methyl ist, R Ar-Alkyl-C. ο ist, wobei die Gruppe die L-Konfiguration hat;

R⁸Wasserstoff oder Alkyl-C_{1 π} ist;

ι *~p

R^x eine Gruppe (^CH ₂)_S " ^{X ist}* ⁱⁿ ^^{er s ώ 2 tis} ^ ^¹¹⁰' X = UHR⁹, ER⁹COR¹¹J^IR⁹CONh₅, IiR⁹CONR¹⁰R¹¹ N(O) R¹¹R¹², COOK⁹, CONR⁹R¹⁰, MR OCX)]*¹¹ ^ά oder OCOliR^RiO _istn (_worin

R⁹ Wasserstoff oder AIlSyI-C₁-; R¹⁰ Wasserstoff oder Al-IEyI-C₁-; R¹¹ AIlCyI-C_1-3; R12 AIlCyI-C₁ ^- ist und η = oder .1 ist);

Ar Phenyl oder durch Chlor, Methyl, Hydroxy oder Methoxy substituiertes Phenyl ist; wobei das Verfahren gekennzeichnet ist dadurch, daß eine Verbindung der Formel:

Y-M₁-OH II

worin Y eine geeignete !-Schutzgruppe ist und M₁ ein geeignet geschützter Aminosäure- oder Peptidrest ist,, mit einer Verbindung der Formel:

H - M₂ - N - R^xx III

R⁸

χ 8
worin R und R der obigen Definition entsprechen und

Mp ein geeignet geschützter Aminosäure- oder Peptidrest ist (wobei M₁ und M₂ zusammen -Tyr-B-Gly-D- oder ein geschütztes Derivat davon darstellen und B und D der

-*«- 209 811 . '

obigen Definition entsprechen) gekoppelt wird und anschließend der Schutz entfernt wird.

3. Verfahren für die Herstellung einer neuartigen Peptidverbindung, gekennzeichnet dadurch, daß eine Verbindung der Formel I nach der Definition in Punkt 1, worin R^x = -(CH₂)_s - X und X - ER¹¹R¹² (worin s, R¹¹ und R¹² der Definition in Punkt 1 entsprechen), mit -Wasserstoffperoxid oder Metachlorperbenzoesäure oxydiert wird, um eine Verbindung der Formel I nach der Definition in Punkt 1, worin R^x = (CHg)₀ - X ist und X = N(O)R¹¹R¹² ißt, zu erzeugen·

4· Verfahren für die Herstellung einer neuartigen Peptidverbindung, gekennzeichnet dadurch, daß eine Verbindung der Formel I nach der Definition in Punkt 2, worin

R^x = ~ (CH₀)₀ - X ist und X = IiR¹¹R¹² (worin s, R¹¹ und

R der Definition in Punkt 2 entsprechen) ist,, mit Wasserstoffperoxid oder Metachlorperbenzoesäure zur Erzeugung einer Verbindung der Formel I nach der Definition

in Punkt 2, worin R^x = (CH₀) - X ist und X = H(O)R¹¹

R ist, oxydiert wird.