CZ390597A3 - Peptidy a způsob jeich přípravy - Google Patents

Peptidy a způsob jeich přípravy Download PDF

Info

Publication number
CZ390597A3
CZ390597A3 CZ973905A CZ390597A CZ390597A3 CZ 390597 A3 CZ390597 A3 CZ 390597A3 CZ 973905 A CZ973905 A CZ 973905A CZ 390597 A CZ390597 A CZ 390597A CZ 390597 A3 CZ390597 A3 CZ 390597A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
trp
glu
ala
val
ile
Prior art date
Application number
CZ973905A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ287816B6 (en
Inventor
Andrei Marxovich Korotkov
Vladislav Isakovich Deigin
Original Assignee
Immunotech Developments Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=20168146&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CZ390597(A3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Immunotech Developments Inc. filed Critical Immunotech Developments Inc.
Publication of CZ390597A3 publication Critical patent/CZ390597A3/cs
Publication of CZ287816B6 publication Critical patent/CZ287816B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0821—Tripeptides with the first amino acid being heterocyclic, e.g. His, Pro, Trp
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/07—Tetrapeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0215—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing natural amino acids, forming a peptide bond via their side chain functional group, e.g. epsilon-Lys, gamma-Glu
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0806—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atoms, i.e. Gly, Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0808—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0812—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0819—Tripeptides with the first amino acid being acidic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0821—Tripeptides with the first amino acid being heterocyclic, e.g. His, Pro, Trp
    • C07K5/0823—Tripeptides with the first amino acid being heterocyclic, e.g. His, Pro, Trp and Pro-amino acid; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/1005—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/1008—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atoms, i.e. Gly, Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/1005—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/101—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/1016—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

Peptidy a způsob jejich přípravy
Oblast techniky
Vynález se týká lékařství.
tot i ž způsobů pří pravý biologicky aktivních látek majících inunoregulační vlastnosti a lze jej použít v lékařství, veterinářství a experimentální b i ochem i i.
Dosavadní stav techniky
Důležitost vývoje nových neškodných i munoregulační ch peptidů, které by zastavily progresivní růst takových nemocí.
jako jsou maligní novotvary, sepce, chronické a latentní infekce, rozvíjející se na pozadí imunodeficitních stavů, prokazuje se velkým počtem studií v tomto oboru.
Nejobvyklejší metoda vývoje nových peptidů spočívá v izolaci aktivních peptidových frakcí z tkáňových extraktů, frakcionači a čištění včetně izolování j ednot1 i vých 1átek a jejich identifikaci (SU 1600047, SU 1638849, SU 1737798).
V praktické medicíně jsou dobře známy thymusové extrakty jakožto regulátory imunních procesů, zvláště thymosinová frakce 5 (Goldstein A.L., Guna A.,
Latz M.M., HardyH.A.,
White A.) a thyamalin (CH 6595 86).
Extrakty obsahuj í 1átky polypeptidové povahy, jejichž výroba z přírodních surovin je omezena složitostí postupu, malými výtěžky aktivních látek a značnou různost í jej ich fyzikálních a chem i ckých charakteristik jakož i biologických vlastností.
Kromě toho balastní s1ožky přítomné v př í rodn í ch t hymusových (brzlíkových) přípravcích způsobují někdy vedlejší účinky.
Posléze uvedená okolnost se stává syntetických peptidů. Doposud bylo stimulem k vytvoření syntetizováno značné množství imunoregulačních peptidů:
PCT/WO 089/06134, SU
1541821,
5013723.
SU 1518956, EP 230052, EP 406931, US 5021551, US
Každý ze syntetických peptidů má omezenou kombinaci nezbytných vlastností, je vysoce aktivní, nízkotoxický, nezpůsobuje žádné vedlejší účinky a lze je proto používat v lékařství .
Úkolem tohoto vynálezu bylo syntetizovat nové biologicky aktivní peptidy mající imunoregulační účinek.
Dalším úkolem vynálezu bylo vyvinout zcela novou technologii syntézy peptidů, která by měla minimum jednoduchých stupňů a vedla k velkým výtěžků výrobků níže uvedené struktury, což je rozhodující ve farmaceutickém průmyslu.
Podstata vynálezu
Předmětem vynálezu jsou polypeptidy obecného vzorce
X-A-D-Trp-Y v němž
A je D-Glu nebo iD-Glu,
X je H nebo Gly, Ala, Leu, Ile, Val, NVal, Pro, Tyr, Phe, Trp, D-Ala, D-Leu, D-Ile, D-Val, D-NVal, D-Pro, D-Tyr, D-Phe, D-Trp, j~-aminomáselná kyselina a -aminokapronová kyselina,
Y je Gly, Ala, Leu, Ile, Val, NVal, Pro, Tyr, Phe, Trp, D-Ala, D-Leu, D-Ile, D-Val, D-NVal, D-Pro, D-Tyr, D-Phe, D-Trp, γ- aminomáse1ná kyselina, Č,-aminokapronová kyselina, -OH nebo subst i tuovaný Ci -C3 am i d.
Předmětem tohoto vynálezu je rovněž způsob přípravy shora definovaných peptidů, jehož podstata spočívá v syntetizování glutamyl obsahujících peptidů v roztoku otevřením vnitřního anhydridu tributyloxykarbonylglutaminové (D nebo L) kyseliny použitím příslušného D-Trp-Y derivátu, s následným chromatograf ickým dělením a- a τ-isomerů. Další syntéza se provádí vybudováním peptidového řetězce použitím aktivovaných esterů tri buty1oxykarbony1am i nokyse1 i n.
V tabulce 1 jsou uvedeny hodnoty Rfi (ve směsi chloroform-methanol-32% kyselina octová 60=45=20) a Rf2 (ve směsi butanol-pyridin-voda-kysel ina octová 5:5 = 4=1) pro některé analogy nových peptidů.
-3Tabulka 1
Peptid Rfl R*
Abu-D-Glu-D-Trp-OH 0,32 0,53
Abu-iD-Glu-t)-Tip-OH 0,29 0,49 |
Aca-D-Glu-D-Trp-OH 0,31 0.52
AcaiD-Glu-D-Trp-OH 0,28 0,49
Ala-D-Glu-D-Trp-OH 0,34 0,61
Ala-iD-Glu-D-Trp-OH 0,32 0,55
D-Ala-D-Glu-D-Tip-D-Ala 0,22 0,41
D-Ala-D-Glu-D-Trp-OH 0,26 0,51
D-Ala-iD-Glu~D-Txp-D-Ala 0,25 0,50
D-Ala-iDGlu-DTrp-OH 0,25 0,51
D-Ile-D-GIu-D-Tip-D-Leu 0,35 0,53
D-Ile-Ddu-D-Trp-OH 0,36 0,54
D-He-iD-Glu-D-Trp-D-Leu 0,34 0,53
D-ne-iD-Glu-D-Tro-OH 0.27 0.S7-- .. ....
D-Leu-D-Glu-D-Tip-OH 0,36 0,53
DLeuiD-Glu-DTrpOH 0,35 0,52
D-NVal-D-Glu-D-Trp-OH 0,33 0,51
D-NVal-iD-Glu-D-Trp-OH 0,32 0,51
DPhe-D-Glu-DTrp-Ala 0,37 0,56
D-Phe-iD-Glu-D-Trp-Ala 0,36 0,55
DProD-Glu-D-TrpOH 0,38 0,58
D-Pro-íD-Glu-D-Trp-OII 0,37 0,58
D-Trp-D-Glu-D-TrpOH 0,41 0,59
D-Trp-iD-Glu-D-Trp-OH 0,40 0,59
D-Tyr-D-GIu-D-Trp-D-Tyr 0,39 0,58
D-Tyr-iD-Glu-D-Trp-D-Tyr 0,38 0,58
D-Val-D-Glu-D-Trp-OH 0,34 0,51
D-Val-iD-Glu-D-Trp-OH 0,33 0,50
Gly-D-Glu-D-Trp-NVal 0,29 0,51
Gly-D-Glu-D-Trp-OH 0,30 0,54
Gly-iD-Glu-D-Trp-NVal 0,32 0,53 |
Gly-iD-Glu-D-Trp-OH 0,29 0,53 |
····
Peptid Rfl Rfz
H-D-GIu-D-Tip~Abu 0,33 032
H-D-GluD-Trp-Aca 0,30 0,53
H-D-Glu-D-Trp-D-Ile 0,35 0,58
H-D-Glu-D-Tip-D-Pro 0,37 »«
H-D-Glu-D Trv-Glv . . C,’29 J 0/54 |
u-D-Trp-He 0.36 0,58
H-D-Glu-D-Trp-Leu 0,36 039
H-D-GJuDTrp-Lye 0,28 0,47 |
H-D-Glu-DTrp-OH 0,36 0,56
H-D-Ghi-D-Trp-Phe 0,39 0,61
HD-GIu-DTrp-Pro 0,38 039
H-D-Glu-D-Trp-Tyr 0,37 038
H-D-Glu-D-Trp-Val 0,38 0,61
H-iDGlu-DTrp-Abu 0,34 031
H-iDGlu-DTrp-Aca 0,33 030
H-íD-GIu-D-Trp-D-Ile 0,34 035
H-iD-Glu-D-Trp-D-Pro 0,36 038
H-iD-GluD-Trp~Gly 0,28 0,52
H-iD-GluD-Trp-Ue 0,34 0,57
H-iD-Glu-D-Trp-Leu 0,35 038
H-iD-GIu-D-Trp-Lys 0,27 0,45
H-xD-Glu-D-Trp-OH 0,30 032
HiDGlu-D-Txp-Fhe 0,38 0,61
H-iD-Glu-D-Trp-Pro 0,37 0,60 1
H-iD-Glu-D-Trp-Tyr 0,35 0,58
H-iD-Glu-DTrp'Val 0,36 0,60
Ile-D-Glu-DTrp-D-Phe 0,42 0,68
Ile-D-GluD-Trp-OH 0,38 0,56
Ile-iDGlu-D-Trp-D-Phe 0,40 0,67
Ile-iD-GluDTrp-OH 0,37 035
Leu-D-Glu-DTrp-OH 0,35 0,62
LeuiDGlu-DTrp-OH 0,27 0,57
NVal-D-Glu-D-Trp-OH 0,35 0,61
NVal-iD-Glu-D-Trp-OH 0,34 0,60
Fepticl· Rfl
Phe-D-Glu-D-Trp-OH 0,41 0,63
Phc-iD-Glu-D-ΤϊρΌΗ 0,40 0,62
Pro-D-Glu-D-Trp-OH 0,43 0,63
Pro-iD-Glu-D-Trp-OH 0,42 0,62
Trp-D-Glu-DTrp-OH 0,45 0,68
Trp-iD-Glu-D-Trp-OH 0,44 0,67
Tyr-D-Glu-D-Trp-OH 0,42 0,64
Tyr-íD-Glu-D-Trp-OH 0,41 0,63
Val-D-Glu-D-Trp-D-Val 0,46 0,68
Val-D-Glu-D-Trp-OH 0,33 0,50
Val-iD-Glu-D-Trp-D-Val 0,44 0,66
Val-iD-Glu-D-TrpOH 0,34 0,52
• · • · · ·
Následující příklad blíže objasňuje vynález.
Příklad provedení vynálezu
H-D-Glu-D-Trp-OH a HiD-Glu-D-Trp-OH
1. Příprava Boc-D-Glu-OH
14.7 g (0,1 M) H-D-Glu-OH se rozpustí ve 200 ml destilované vody. Hodnota pH se upraví na 10,2 použitím 1M KOH a přidá se roztok 33,0 g (0,3 M) BOC2O v dioxanu za intenzivního míchání. Použitím pH-státu se kontroluje pH. Po ukončení reakce se směs přemístí do dělicí nálevky, extrahuje z alkalického prostředí 3x 150 ml ethylacetátu, k vodné fázi se přidá pomalu 0,2%ní roztok kyseliny sírové až k dosažení pH rovnému 3, načež se Boc-D-Glu-0H extrahuje do vodné fáze (3x 200 ml). Organická vrstva se promyje 3x 200 ml nasyceného roztoku až do neutrálního pH, vysuSí nad Na2S04 a potom se odpaří za sníženého tlaku do olejovítého stavu. Výtěžek je
16,7 g (68 %).
2. Příprava směsi Boc-D-Glu-Trp-OH a Boc-iD-Glu-D-Trp-OH
16.7 g (0,068 M) Boc-D-Glu-OH se rozpustí ve 200 ml dimethylformamidu, ochladl na 0 °C a za míchání se přidá roztok 20,6 g (0.1 Μ) N,N -dicyklohexylkarbodiimidu ve 1OO ml dimethylformamidu. Směs se míchá 4 hodiny při +4 °C a nechá se pak stát 8 hodin při teplotě místnosti. Vysrážený dicyklohexylkarbamid se oddělí filtrací a promyje 2x 50 ml dimethylformamidu. Filtrát se zahustí odpařením za sníženého tlaku na 1/2 objemu a přidá se k němu 24,3 g (0,1 M) H-D-Trp-0H za chlazení na +4 °C a intenzivního míchání. Pak se roztok nechá zahřát na teplotu místnosti. Ukončení reakce se kontroluje tenkovrstvou chromatografií (TLC) v systému chloroform ·’e thy láce tátmethanol 6 = 3:1 vymizením skvrny
vnitřního anhydridu Boc-D-Glu-kyseliny. Zbytek dihexylkarb-
am i du se oddělí filtrací, dimethyl formámid se odpaří za
sníženého tlaku a k olejovítému zbytku se přidá 200 ml
ethylacetátu a 200 ml 0,2% roztoku kyseliny sírové. Organická vsrtva se oddělí, promyje do neutrálního pH nasyceným rozto• · • · · · • · · · · · · ·· ··· ··· ···· ·· ·
kem NazS04 a vysuší nad NaaSO-e Ethyl acetátový roztok se
odpaří za sníženého tlaku. Výsledné olejovitá sraženina je směs Boc-D-Glu-D-Trp-OH a Boc-iD-Glu-D-Trp-OH. Celkový výtěžek Siní 25,4 g (70 X) .
3. Příprava H-D-Glu-D-Trp-OH a H-iD-Glu-D-Trp-OH
25,4 g směsi (0,048 M) se rozpustí ve 200 ml mravenčí
kyše1 iny a míchá 1 h při 40 °C. Rozpouštědlo se odpaří za
sníženého tlaku a získá se hustý olej obsahující peptidy, které se oddělí a vyčistí iontovýměnnou chromatografií ve sloupci naplněném Sephadexem v gradientu 0,01 až 0, 2M pyridin-acetátového tlumiče (pufru). Výtěžek činí 5,7 g (35 %) H-D-Glu-D-Trp-OH a 5,7 g (35 %) H-iD-Glu-D-Trp-OH.
Zjistí se následující fyzikální a chemické charakteristiky peptidu-'
Pr i márn í struktura H-D-Glu-D-Trp--OH a H-iD-Glu-D-Trp-OH
Empirický vzorec C16H20N3O5
Molekulová hmotnost 334,35
Vzhled žlutobílý nebo šedý prášek
Rozpustnost snadno rozpustný ve vodě, mírně v alkoholu, nerozpustný v chloroformu
UF spektrum v rozsahu 250 až 300 nm vykazuje minimum při 280 ± 2 nm a rameno při 287 + 2 nm.
Biologická aktivita nového peptidu se testuje na myších
Balb/c. Buňky sleziny myší se suspendují v prostředí RPMI
1640 se 2 ml glutaminu a 5 % inaktivovaného fatálního séra a
potom se vnesou do mělkých misek v množství 100 mel (200 000 buněk) na 1 misku. Zkoumaný preparát se vnese na začátku kultivace. Jako mitogen se použije konkanavalin A v konečné koncentraci 2 meg na 1 misku. Misky se inkubují při 37 °C v 5% CO2 po dobu 48 hodin. Proliferace (chorbné bujení) buněk se hodnotí po vnesení 3H-thymidinu, který se přidá v dávce 5 mcg/ml 24 hodin před ukončením kultivace, pomocí scintilačního počítače a vyjádří se množstvím rozpadů za minutu (CPM). Výsledky jsou uvedeny v tabulce 2.
Tabulka 2
Přípravek C P Μ I
Dávka prepátu, mcg/ml
1 5 10 20
iD-Glu-D-Trp 68594 63428 20043 13222
Cyklosporin A 67649 2698 574 569
Kontrola 61467
x> střední hodnota tří měření
U nového peptidů bylo ziStěno, že inhibuje proliferaci slezinných buněk.
Ke zjištění bezpečnosti peptidů byla provedena studie na akutní toxicitu podle metodických doporučení Farmakologického výboru ruské federace na požadavky předklinických studií celkového toxického účinku nových farmakologických látek.
Podle získaných výsledků bylo zjištěno, že při lOOOnásobné intraperitoneální dávce peptidů nenastává žádný akutní toxický efekt a s těmito dávkami nelze dosáhnout LD50.
Využitelnost vynálezu
Biologicky aktivní peptidy se mohou široce používat v lékařství a veterinářství.

Claims (2)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Pept i dy obecného vzorce
    X-A-D-Trp-Y v němž
    A je D-Glu nebo iD-Glu,
    X je H nebo Gly, Ala, Leu, Ile, Val, NVal, Pro, Tyr, Phe, Trp, D-Ala, D-Leu, D-Ile, D-Val, D-NVal, D-Pro, D-Tyr, D-Phe, D-Trp, γ-aminonáse1ná kyselina a -aninokapronová kyselina,
    Y je Gly, Ala, Leu, Ile, Val, NVal, Pro, Tyr, Phe, Trp, D-Ala, D-Leu, D-Ile, D-Val, D-NVal, D-Pro, D-Tyr, D-Phe, D-Trp, am i nomáse 1 ná kyselina, -aminokapronová kyselina, -OH nebo substituovaný C1-C3 amid.
  2. 2. Způsob přípravy peptidů obecného vzorce
    X-A-D-Trp-Y v němž
    A je D-Glu nebo iD-Glu,
    X je H nebo Gly, Ala, Leu, Ile, Val, NVal, Pro, Tyr, Phe, Trp, D-Ala, D-Leu, D-Ile, D-Val, D-NVal, D-Pro, D-Tyr, D-Phe, D-Trp, aminomáse1ná kyselina a -aminokapronová kyselina,
    Y je Gly, Ala, Leu, Ile, Val, NVal, Pro, Tyr, Phe, Trp, D-Ala, D-Leu, D-Ile, D-Val, D-NVal, D-Pro, D-Tyr, D-Phe,
    D-Trp, -g1· am i nomáse 1 ná kyselina, - am i nokapronová kyselina, -OH nebo substituovaný C1-C3 amid, vyznačující se tím, že zahrnuje stupně syntézy peptidu v roztoku za otevření vnitřního anhydridu tributyloxykarbony1g1utaminové (D nebo L) kyseliny použitím K-soli D-Trp-Y, dále vybudování řetězce použitím aktivovaných esterů a směsných anhydridů, s předchozím odštěpením tributyloxykarbonylskupiny působením kyseliny mravenčí a s následným chromatografickým dělením a- a ť-isonerů.
CZ19973905A 1995-06-07 1996-05-06 Peptide, process of its preparation, pharmaceutical preparation in which it is comprised and use thereof CZ287816B6 (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU95108559A RU2107692C1 (ru) 1995-06-07 1995-06-07 Пептид и способ его получения

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ390597A3 true CZ390597A3 (cs) 1998-08-12
CZ287816B6 CZ287816B6 (en) 2001-02-14

Family

ID=20168146

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ19973905A CZ287816B6 (en) 1995-06-07 1996-05-06 Peptide, process of its preparation, pharmaceutical preparation in which it is comprised and use thereof

Country Status (20)

Country Link
US (1) US5736519A (cs)
EP (1) EP0832900B1 (cs)
JP (1) JP4082522B2 (cs)
CN (1) CN1154653C (cs)
AT (1) ATE260933T1 (cs)
AU (1) AU724781B2 (cs)
BR (1) BRPI9609235B8 (cs)
CA (1) CA2222296C (cs)
CZ (1) CZ287816B6 (cs)
DE (1) DE69631762T2 (cs)
DK (1) DK0832900T3 (cs)
ES (1) ES2217311T3 (cs)
HU (1) HU228461B1 (cs)
LT (1) LT4476B (cs)
LV (1) LV12074B (cs)
PT (1) PT832900E (cs)
RU (1) RU2107692C1 (cs)
SK (1) SK281825B6 (cs)
UA (1) UA48974C2 (cs)
WO (1) WO1996040740A1 (cs)

Families Citing this family (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2107691C1 (ru) * 1995-03-02 1998-03-27 Дейгин Владислав Исакович Пептид и способ его получения
US5916878A (en) * 1995-11-28 1999-06-29 Edward T. Wei γ-glutamyl and β-aspartyl containing immunomodulator compounds and methods therewith
US6159940A (en) * 1996-02-28 2000-12-12 Immunotech Developments Inc. Method for modulating hemopoiesis
DE19712633A1 (de) * 1997-03-26 1998-10-08 Laves Arzneimittel Verwendung von gamma-Aminobuttersäure als Interleukinbildungsstimulans
IL145926A0 (en) 2001-10-15 2002-07-25 Mor Research Applic Ltd Peptide epitopes of mimotopes useful in immunomodulation
US20060233863A1 (en) 2003-02-10 2006-10-19 Enzymotec Ltd. Oils enriched with diacylglycerols and phytosterol esters and unit dosage forms thereof for use in therapy
IL155136A0 (en) * 2003-02-10 2003-10-31 Enzymotec Ltd A composition for reducing blood cholesterol and triglycerides
UA80870C2 (en) * 2003-03-28 2007-11-12 Sciclone Pharmaceuticals Inc Method for treatment or prevention of aspergillus infections with thymosin alpha 1
BRPI0514244A (pt) * 2004-08-09 2008-06-03 Enzymotec Ltd produtos alimentìcios para diabéticos
RU2394576C2 (ru) 2004-08-10 2010-07-20 Энзимотек Лтд. Способы лечения, требующие фитокомпонентов
WO2006131833A2 (en) * 2005-03-18 2006-12-14 Centre National De La Recherche Scientifique New hybrid oligomers. their preparation process and pharmaceutical compositions containing them
CA2604133C (en) * 2005-04-07 2015-12-01 Centre National De La Recherche Scientifique Compounds useful as modulators of the proteasome activity
US20100129288A1 (en) * 2005-06-28 2010-05-27 Elior Peles Gliomedin, Fragments Thereof and Methods of Using Same
RU2320364C1 (ru) * 2006-08-21 2008-03-27 Закрытое Акционерное Общество "Центр "Пептос" Способ лечения злокачественных новообразований
CA2569204A1 (en) 2006-11-28 2008-05-28 Apotex Technologies Inc. Crystalline d-isoglutamyl-d-tryptophan and the mono ammonium salt of d-isoglutamyl-d-tryptophan
CA2571645A1 (en) * 2006-12-19 2008-06-19 Apotex Technologies Inc. Pharmaceutically acceptable salts of thymodepressin and processes for their manufacture
MX2009008641A (es) 2007-02-13 2009-09-14 Sciclone Pharmaceuticals Inc Composiciones para el tratamiento o prevencion del deterioro, lesion o daño a tejido debido a enfermedad de las mucosas.
CA2579119C (en) 2007-02-16 2013-03-05 Apotex Technologies Inc. Crystalline forms of the mono-sodium salt of d-isoglutamyl-d-tryptophan
US20100150924A1 (en) * 2007-05-22 2010-06-17 Elior Peles Regulation of myelination by nectin-like (necl) molecules
RU2410391C1 (ru) * 2009-06-03 2011-01-27 Общество с ограниченной ответственностью "Пептос Фарма" Пептиды, влияющие на регенерацию кроветворной системы, и фармацевтическая композиция на их основе
AU2012234680A1 (en) * 2011-03-31 2013-10-17 Apotex Technologies Inc. Prodrugs of D-isoglutamyl-[D/L]-tryptophan
CN103502215A (zh) * 2011-03-31 2014-01-08 阿普泰克斯科技公司 D-γ-谷氨酰基-D-色氨酸和D-γ-谷氨酰基-L-色氨酸的前药
CN102417474B (zh) * 2011-09-26 2014-07-02 深圳翰宇药业股份有限公司 D-异谷氨酰基-d-色氨酸制备的新方法
RU2634258C1 (ru) * 2016-11-08 2017-10-24 федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Российский университет дружбы народов" (РУДН) Наполнитель для капсульного ингалятора

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3832337A (en) * 1970-07-28 1974-08-27 Squibb & Sons Inc Peptide enzyme inhibitors
GB1526367A (en) * 1976-10-12 1978-09-27 Ici Ltd Polypeptide
HU184481B (en) * 1981-10-02 1984-08-28 Richter Gedeon Vegyeszet Process for producing tripeptides for diminishing appetite
JPS5921656A (ja) * 1982-07-28 1984-02-03 Takeda Chem Ind Ltd ポリペプチド誘導体
CH659586A5 (de) * 1985-07-02 1987-02-13 Le G Ped I Arzneimittel aus dem thymus und verfahren zu dessen herstellung.
CA1286989C (en) * 1985-12-26 1991-07-30 A. Arthur Gottlieb Immunoamplifiers and related compositions
IT1216908B (it) * 1987-03-19 1990-03-14 Eniricerche Spa Analoghi retro-inversi della timopentina e dei suoi frammenti, il metodo per la loro sintesi ed il loro impiego per la preparazionedi composizioni farmaceutiche.
DE3873327D1 (de) * 1987-12-30 1992-09-03 Vsesojuznyj Kardiologitsches Arzneimittelzubereitung zur behandlung des immunmangels.
US5021551A (en) * 1989-01-18 1991-06-04 Washington University Method of enhancing peptide immunogenicity
SU1737798A1 (ru) * 1989-04-11 1995-03-20 Институт клинической иммунологии СО АМН СССР Способ получения иммуностимулирующих тимусных полипептидов
IT1230733B (it) 1989-06-30 1991-10-29 Eniricerche Spa Analoghi della timopentina retro invertita a tutti i legami, il metodo per la loro sintesi ed il loro impiego per la preparazione di composizioni farmaceutiche.
IT1263042B (it) * 1993-01-15 1996-07-24 Enichem Polimeri Composizione da stampaggio a base di polifenilenetere
AU7392294A (en) * 1993-07-21 1995-02-20 Vladimir Khatskelevich Khavinson Pharmaceutical with immunomodulating activity

Also Published As

Publication number Publication date
EP0832900A1 (en) 1998-04-01
LT4476B (lt) 1999-03-25
CA2222296A1 (en) 1996-12-19
LV12074B (lv) 1998-08-20
DK0832900T3 (da) 2004-06-21
JPH11513016A (ja) 1999-11-09
EP0832900B1 (en) 2004-03-03
HUP9801990A2 (hu) 1999-02-01
WO1996040740A1 (en) 1996-12-19
DE69631762T2 (de) 2005-03-10
ATE260933T1 (de) 2004-03-15
RU2107692C1 (ru) 1998-03-27
HUP9801990A3 (en) 1999-06-28
SK166997A3 (en) 1998-04-08
BR9609235A (pt) 1999-12-21
AU724781B2 (en) 2000-09-28
LV12074A (lv) 1998-06-20
CN1189837A (zh) 1998-08-05
EP0832900A4 (en) 1999-10-06
BR9609235B1 (pt) 2009-01-13
AU5707696A (en) 1996-12-30
PT832900E (pt) 2004-07-30
CZ287816B6 (en) 2001-02-14
CN1154653C (zh) 2004-06-23
DE69631762D1 (de) 2004-04-08
JP4082522B2 (ja) 2008-04-30
LT98004A (en) 1998-10-26
CA2222296C (en) 2001-10-09
SK281825B6 (sk) 2001-08-06
BRPI9609235B8 (pt) 2016-09-27
ES2217311T3 (es) 2004-11-01
UA48974C2 (uk) 2002-09-16
HU228461B1 (en) 2013-03-28
US5736519A (en) 1998-04-07
HK1014965A1 (en) 1999-10-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ390597A3 (cs) Peptidy a způsob jeich přípravy
JP2919965B2 (ja) デヒドロジデムニンｂ
DE69024230T2 (de) An fette gebundene aminosäuren, peptide oder deren derivate
RU2107691C1 (ru) Пептид и способ его получения
JPH03504013A (ja) Ｔ細胞ヘルパー活性を有するペプチド
US5869606A (en) Amino acids peptides or derivatives thereof coupled to fats
RU2067000C1 (ru) Пептид и способ его получения
US5114926A (en) Tetrapeptide inhibiting the entry into cycle of hemopoietic stem cells processes for its preparation, and its uses
EP0033384B1 (de) Thymosin-alpha-1-Fragmente enthaltende Arzneimittel mit immunstimulierender Wirkung, und Thymosin-alpha-1-Fragmente
KR0133850B1 (ko) Sdk 펩디드, 그의 제조 방법 및 그를 함유하는 치료 조성물
CN117357426A (zh) 五肽的新用途
HK1014965B (en) Peptide and method of obtaining it
HK1012859B (en) Peptide and method of obtaining it
PL159763B1 (pl) Sposób wytwarzania nowych cyklicznych peptolidów PL

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20140506