HU228461B1 - Peptide and method of obtaining it - Google Patents

Peptide and method of obtaining it Download PDF

Info

Publication number
HU228461B1
HU228461B1 HU9801990A HUP9801990A HU228461B1 HU 228461 B1 HU228461 B1 HU 228461B1 HU 9801990 A HU9801990 A HU 9801990A HU P9801990 A HUP9801990 A HU P9801990A HU 228461 B1 HU228461 B1 HU 228461B1
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
acid
trp
peptide
proline
tyrosine
Prior art date
Application number
HU9801990A
Other languages
English (en)
Inventor
Vladislav Isakovich Deigin
Andrei Marxovich Korotkov
Original Assignee
Immunotech Dev Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=20168146&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=HU228461(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Immunotech Dev Inc filed Critical Immunotech Dev Inc
Publication of HUP9801990A2 publication Critical patent/HUP9801990A2/hu
Publication of HUP9801990A3 publication Critical patent/HUP9801990A3/hu
Publication of HU228461B1 publication Critical patent/HU228461B1/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0821—Tripeptides with the first amino acid being heterocyclic, e.g. His, Pro, Trp
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/07—Tetrapeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0215—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing natural amino acids, forming a peptide bond via their side chain functional group, e.g. epsilon-Lys, gamma-Glu
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0806—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atoms, i.e. Gly, Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0808—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0812—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0819—Tripeptides with the first amino acid being acidic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0821—Tripeptides with the first amino acid being heterocyclic, e.g. His, Pro, Trp
    • C07K5/0823—Tripeptides with the first amino acid being heterocyclic, e.g. His, Pro, Trp and Pro-amino acid; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/1005—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/1008—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atoms, i.e. Gly, Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/1005—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/101—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/1016—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

MEGADÁS ALAPJÁUL , .
nvobimféloáwy VÁ1<W»>::<:? X
PEPTIDEK ÉS El JÁRÁS ÉÉŐAEIJTÁSEKRA
A találmány gyógyhatású anyagokra, nevezetesen olyan biológiailag aktív anyagokra vonatkozik, amelyek immunsz&bályozó tslajdonságokkal rendelkeznek, így gyógyszerhatóanyagként alkalmazhatók a humán és állatgyógyászatban és biokémiai kísérletekben.
Annak fontosságát, hogy áj, veszélymentes Immunszahályozó peptideket fejlesszünk ki, amelyek megakadályozzák az olyan betegségek kifejlődését, mint a rosszindulatú seopiaxmák, szepszis, az immunhiáuyosságok miatt kifejlődő krónikus és lappangó fertőzések, az e területen folytatott nagyszámú kutatás igazolja.
Az új peptidek izolálásának legáltalánosabban, hasznait módszere- abban áll, hogy aktív peptíd-irakciókat Izolálnak szőveiienyészetekhől, majd ezeket tovább írakcionálják és tisztítják és végül azonosítják az egyes anyagokat (lásd pl. az Sö-i 737798 számú, 19.95. március 20-án engedélyezett szovjet feltalálói tanúsítvány leírását). A gyakorlati gyógyászatban a tínrasz-exiraktumokról ismert, hogy az ínnmmfolyamatokat szabályozzák, ilyen például a timosin S, frakció (Goldsteio AA.. Guna A., Latz M.M., Bardy HA, White A.) és a tsamalm (CH-659 586). Az extraktumok polipepiid természetű anyagokat tartalmaznak, ezek természetes nyersanyagokból történő előállítását korlátozza az eljárás bonyolultsága, az aktív anyag kapott alacsony hozama és a polipeptidek fizikai és kémiai jellemzőinek, valamint biológiai tulajdonságainak jelentős különbözősége. Emellett a természetes dmusz-készitményekben jelenlevő kísérő anyagok néha mellékhatásokat okoznak. Ez utóbbi körülmény ösztönözte a kutatókat arra, hogy szintetikus peptideket fejlesszenek ki. Számos ünmunszabáiyozó pepiidet szintetizáltak már, ilyeneket ismertet például a WO-89/G6134, EP-23Ö052, EP-4Ö6931, US-5Ö21551, US-5013723 számú dokumentum, A?, egyes szintetikus peptidek a szükséges tulajdonságok korlátozott kombinációjával rendelkeznek, miközben magas az aktivitásuk, alacsony a toxicitásuk, nem okoznak, mellékhatásokat, így a gyógyászatban alkalmazhatók,
A találmány olyas új, biológiailag aktív pepiidre vonatkozik, amely immunszabályozó Itatással rendelkeznek, és amelynek képlete
X-Á~{D-Trp)-Y (I);.
ahol
X jelentése hidrogénatom vagy gliois, aíaaín, lesein, izofeuem, valin, N-valin, prolin, tirozm, femlalama, triptofeu, D-sía-min, D-feucin, D-izolendn, D-valín, D-N-vslin, P-prolm, D-tírsztó, D-fenilalanin, D-íripíofán, γ-ainmo-vaj sav, ó-ammo-kaprilsav;
A jelentése D-giutamínsav, y-D-glutaminsav;
Y jelentése gllem, atenin, leaein, ízoleuein, valin, N-valin, prolin, tírozín, fenikdamn, triptofén,
D-alanín, D-leuem, Ddzolesem., D-valín, D-N-vaiín, D-profe, D-tirozin, D-fenilalamn, Díriptofán, y-amkto-vajsav, ξ-amino-kaprilsav, hidroxil- vagy 1 -3 szénatomos helyettesített amidöcsöporí.
Só9Í8-312ő-LTAn ♦ »»* φ »φ
A találmány tárgya továbbá alapvetően áj teelmelógís peptidek szbtetizálására, -amely minimális és egyszerű lépésekből áll, és a fent említett szerkezetű peptidek nagy hozammal történő előállítását teszi lehetővé, ami döntő fontosságú gyógyszerek előállitásánál.
A találmány szerinti áj eljárás lényege abban áll . hogy oldatban glatamíntartainsé pepiideket szintetizálunk oly módon, hogy terc~bual-oxi-kíaboöil-(10 vagy Lj-ghaaminsav belső anhidridjét a megfelelő D~Trp~Y származék alkalmazásával megbontjuk, majd az a- és γ-izomereket kromatográfiásan elválasztjuk. A szintézis folytatásaképpen a. peptíáíáacot a tere-butil~oxi-karbotül~aminosav aktivált éterének alkalmazásával építjük,
A találmány tárgya közelebbről eljárás
X-A-D-Trp-Y (I) általános képietü peptidek elöállitására, a képletben X. A és Y jelentése a. fenti, oly módon, hogy a pepiidet oldatban szintetizáljuk a tere-butoxi-karhouii-(B vagy IJ-glutammsav belső anhidridjének DTíp-Y káltumsója segítségével végzett megbontásával majd a további láncéphést. aktivált éterek és vegyes- adúdrrdek alkalmazásával végezzük, a ierc-buioxi-karhonn-csopori előzetes, hangyasavvai történő -eltávolítása utam és végül az a- és γ-izomereket kromatográSásan elválasztjuk.
Az 1. táblázatban az új peptid-analógok Rs (kforofornumetanol/32 térf%-os eeeísav 60:45:20 térfogatarányá elegye) és (butmokpridiirZví^ecetsav 5:5:4:1 térfogatarányú elegye) értékeit adjuk meg.
Pepiid Rn Ró
Abu-D-Glu-D-Trp-OH 0,32 0,53
Abu-y-D-öhrtD-'Trp-Oll 0,29 0.49
Aca-D~Glu~D-Trp~öH 0,31 0.52
Aca-y-D-Glu-D-Trp-GH 0,28 0.49
Ala-D-Glu-D-Trp-ÖH 0,34 0,61
Ála-y-B-Giu-D-Trp-OH 0,32 0,55
D-Ala-D-Glu-D-Ttp-D-Ala 0,22 0,41
D-Ala-D-Gla-D-Ttp-GH 0,26 0,51
D-Ala-y-D-Gl«.-D-Tip~D~Ala 0,25 0,50
D-Ala-y-D-Gto-D-TrpOH 0,25 0,51
D-fie-D-Glu-D-Trp-D-Len 0,35 0,53
D-íle-D-Glu-D-Trp-OH 0,36 0,54
D-lle-y-D-Gln-D-Típ-D-Leu 0,34 0,53
Pepiid R« Rn
D-Ile-Y-D-Glu-D-Trp-GH 0,27 0,52
* « ♦ ♦ ·* X
V A ♦ ♦ ·
Φ>Χ< «♦ ** ·♦*
Peptkl Re R«
D-Be-D-GluJXIrp-OH 0,36 0,53
D~I,e«-y-D~Gfe-D-'rtp~Ofí 0,35 0,52
D-NVa1.-D-OM-D-Txp~ÖH 0,33 0,51
D-NVal-y-D-Glu-D-Tip-OH 0,32 0,51
D'Phe-D-Ghi-D-Trp-AU 0.37 0,56
D -Phe-yD-Glu-D-Típ-Alá 0,36 0,55
D-Pro-D-Glu-D-Τφ-ΟΗ 0,38 0,58
Ο-Ρτο-γ-β-ΟΙα-ΓΧΓφ-ΟΗ 0,37 0,58
DGkp-D-GhíD-lYp-OH 0,41 0,59
D~Trp“7-D~Glu--DTrp-OH 0,40 0,59
D-Tyr-D-Glu~D~Trp-D~Tyr 0,39 0,58
D-Tyr-y-D-Gb-D-Trp-D-Tyr 0.38 0,58
D-Val-D~G&-D-Trp-OH 0,34 0,51
D-Vakf-D-Gta-D-Τφ-ΟΗ 0,33 0,50
Giv-D-Gíu-D-Tip-NYal 0,29 0,51
Gly-D'-Gfa-D-Tip-ÖH 0,30 0,54
GG-yJYGG-D-Trp-NVai 0,32 0,53
Gly-y-D-GM-Trp-OH. 0,29 0,53
H-D-GIa-D-Trp-Abu 0,33 0,52
H-D-Glu-D-Trp-Aea 0,30 0,53
H-D-Gtu-D~Tjp-D-fíe: 0,35 0,58
H-D-Gíu-D~Trp-D-Pro 0,37 0,61
H-D-GIu-D-Típ-Gly 0,29 0,54
H-D-Glu-D-Tip-íle 0,36 0,58
Peptkl Re Ra
H-D-Ghi-D-Ttp-Leu 0,36 0,59
H-D-Ghi-D-Trp-Lys 0,28 0,47
II-D-Glu-D-Τφ-ΟΗ 0,36 0,56
H-D-G1u~D~Trp-Phe 0,39 0,61
H-D-Gtu-D-Trp-Pro 0,38 0,59
H-D-GG-D-Trp-Tyr 0,37 0,58
H-D-Gto-D-Típ-Val 0,38 0,61
IÍ-y»D-Glu-D-Trp-Abu 0,34 0,51
H-y-D-Glu-D-Txp-.Aca 0,33 0,50
H-y-D-Giu-D-Tip-D-öe 0,34 0,55
Pepiid R« Rű
Η-γ-D-Gíti-D-Trp-D-Pro 0,36 0,58
Η-γ-D-Gld-D-Trp-GIy 0,28 0,52
H-y-D -G!a-D-Trp-.le 0,34 0,5?
H-y-D-Gla-D-Ttp-Lön 0,35 0,58
H-y-D-Gki-D-Trp-Lys 0.2? 0,45
H-y-D-Gln-D-TrpOH 0,30 0,52
H-Y-D-Gln-IATsp-Phe 0,38 0,61
H-y-D-Gln-D-Tip-Pro 0,37 0,60
H-y4>Giu~D-Típ--Tyr 0,35 0,58
H-y-D-Gb-D-Trp-Val 0,36 0,60
He-D-Glu-D-Trp-D-Phe 0,42 0,68
íle-D-öm-D-Trp-OH 0,38 0,56
íle-y-D-Gkí-D-Ttp-D-Phe 0,40 0,6?
Ile-y-D-Glu-D-Tfp-OO 0,3? 0,55
Lee-D-Glu-D-Txp-OH 0,35 0,62
Pepiid Rn Rn
Leu^-D-Gto-D-Τφ-ΟΗ 0,2? 0,5?
NVal-D-Glu-D-Tip-OH 0,35 0,61
NVal-y-D~Gip-D-Txp-OH 0,34 0,60
Phe-D-Gln-D-Τφ-ΟΗ 0,41 0,63
Phe-y-D-Gdu-D-Trp-OH 0,40 0,62
Pro-D-Glu-D-Τφ-ΟΗ 0,43 0,63
Pro-y-D~Glu-D-T tp-OH 0,42 0,62
'rrp-D-Gla-D-Txp-OH 0,45 0,68
I'rp-y-D-Gb-D-Trp~OH 0,44 0,67
Tyr-D-Gín-ΙΧΓφ-ΟΙ I 0,42 0,64
Tyr-y-D-öto-D-Trp-OH 0,41 0,63
Vai-D-Gln-D-Trp-D-Val 0,46 0,68
Vai-D-Gln-D-Trp-OH 0,33 0,50
Vaky-D-Glu-D-Típ-D-Val 0,44 0,66
Val-y-D-Gla-D-Ttp-GH 0,34 0,52
A találmány szerinti megoldási a következő példával szemléltetjük a korlátozás szándéka xiélkü * * ffff*
/. előállítása
14.7 g (0,1 -mól) H-D-Glu-Gfí-t tékíldunk 200 ml desztillált vízben, pH-ját 1 mol/l-es KO.Hval 10,2 értékre állítjuk. és intenzív keverés közben hozzáadjuk 33,0 g (0,3 mol): BOC4O dioxános oldatát. A pH-t egy p.O-mérövel folyamatosam ellenőrizzük, A reakció befejezése után az elegyet átvisszük egy elválasztó tölcsérbe, és az aíkálikus oldatot 3x150 ml etil-acetáttal extrabáljuk. A vizes fázis pH-át 0,2 terfíé-os kénsav lassú adagolásával 3,0 értékre állítjuk, majd a Boe-D-Glu-OH-t a szerves fázisba (3x200 ml) extraháljuk, A szerves fázist 3x200 mi telített nátriius-szulfáí-oláattal semleges pH-ig mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk, így .16,7 g (68%) olajat kapunk,
2, Soe-A-G/u-D- Tty-ÖB és Söe-}?-D-GÍ«-D~T?p-öH dUí»
16.7 g (0,068 mól) Boc-D-öto-OH-t feloldunk. 200 ml dimetll-formamklban, 0 A5-ra hntlük, és 'keverés közben hozzáadjuk 20,6 g (0,1 mól) NjN’~dielkl:ohexíl-kari?odilmid 100 ml dhnetdformamlddal készült oldatai. Az elegyet 4 °C-on 4 óra hosszat keverjük, majd szobahőmérsékleten óra hosszat állni hagyjuk. A kicsapódott dtclklohexll-karbodüuddet leszűrjük és 2x50 ml dimeiilformamiddal -mossuk. Á szürietet vákuumban felére bepároljuk, és 4 °C~on, erős keverés közben hozzáadunk 24,3 g (0,1 mól) H-D-Trp-OM-t, majd az -oldatot hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni, A reakció végbemenetelét TLC útján ellenőrizzük, kloroform/etil-acetáV metanol 6:3:1 férfogatarányú elegyével eluálva, a Ifoe-D-Gla-sav belső anhidridje által képzett folt eltűnését ügyeljük. A maradék dicikfohexii-karhodihnidet lesxütjük, és a dimeül-formamidot vákuumban .(«desztilláljuk. Az olajos maradékhoz hozzáadunk 200 ml etil-acetátot és 200 mi 0,2 tért%~os kénsavoldatót A szerves: fázist elválasztjuk telheti nátríum-szulfot-oldattal semleges pH-ig mossuk, és nátnum-szulfáton szárítjuk. Az eril-aeetátos oldatot vákuumban bepároijuk. Á kapott olajos maradék (összesen 25,4 g; 70%) a fíoc-D-GIn-D-Trp-OIl és a Boc-y-D-Gln~D-Trp-Oí-l elegye.
A ^-Μ/ϊί-^-Γφ-ό// ás «4sr
24,5 g (0,048 mól) fenti elegyet íéloldunk 200 ml hangyasavban és 40 *C-on 1 óra hosszat keverjük. Ezután az oldószert vákuumban ledeszhlláljuk, igv sűrű olajat kapunk. A peprtdeket elválasztjuk, és Sephadex oszlopon ioncserélő kromatográfiával tisztítjuk, 0,01-0,2 mohi pirídingradíensn acetáí-pnffer segítségével. így 5,7 g (35%) H-D-Glu-D-Trp-OH-t és 5,7 g (35%) Η-γ-DGl u-D-Trp-OH-t kapunk.
A kapott pepiid fizikai és kémiai jellemzői a következők:
Primer szerkezet: H-D-Glo-D-Trp-OB és H-y-D-Glu~D~Trp~OH
Empirikus képlet: Ο^ηΜίθί
Moltómeg: 334,35
Megjelenés:: sárgásfehér vagy szürke por ♦·χ * φφ
Oldhatóság: vízben jó, alkoholban közepes, klorofónnban .oldhatatlan.
Az KV-spektrum a 250-300 sm tartományban 28ö±2 nm-nél egy maximumot, míg 28712 nm-nél egy vállat unhat,
A peptsd biológiai aktivitását Balbró egereken vizsgáltuk. Az egerek lépseisjeit 2 ml glbtamint és 5 térf% irsakíiváh. embriószérammal kiegészített R'PMI 1640 íápközegben szuszpendáltuk, majd. 100 plhnéiyedés (20ÖGÖ0 sejt) mennyiségben íaposfenekö lemezekre vittük. A vizsgák készítményt a tenyésztés kezdetekor hozzáadtuk. Mitogéoként koakavalnt A-ΐ alkalmaztunk 2 pg/mélyedés stogkoneentráeiőbsn. A lemezeket 37 öC-on 5 térf% szén-dioxidot tartalmazó légtérben 48 óra hosszat iakubáltuk. A sejtszaporodást ’fí-tánídin bevitelével mértük, amelyet 5 pg/ml mennyiségben adagoltunk 24 órával a tenyésztés befejezése előtt. A mérést szemtillácíós- -számlálóval végeztük, és az eredményt beatés/perc <CFM) értékben adtuk meg. Az eredményeket a 2. táblázatban foglaltuk össze.
Készítmény CPMI (három mérés átlaga)
Készítmény dózisa (pg/ml)
5 5 10 20
γ-D-Glu-D-I'rp 68594 63428 20043 13222
Cíklosporín A 67649 2698 574 569
Kontroll 61467
A táblázatból látható, hogy a találmány szerinti új pepiid gátolja a lépsejtek szaporodását.
A pepiid biztonságosságának ellenőrzésére akut toxicitási vizsgálatot végeztünk az Orosz
Föderáció Farmakológia! Bizottságának módszertan! ajánlása szerint (,JJj gyógyhatású anyagok általános toxikus hatása prekhnika! vizsgálatának kívánalmai”: 1985),
A kapott eredmények szerint a pepiid 1000-szeres iatraperitoneális dózisa nem. okozott akut toxikus hatást, és ion tndtuk elérni az Wjo értéket.
A találmány szerinti biológiailag aktív poptidek lehat széles körben használhatók a humán és állatgyógyászatban.

Claims (5)

1. Pepiid, amelynek fi) általános képlete
X-A-D^Trp-Y (D, ahol
X jelentése hidrogénatom vagy gitoin, alatóa, leneln, tzeleueta, vaiin, N-valsa, prolin, tírozin, feadalania, triptofán, D-aíaam, Dúsáéin, D-ízolenein. D-vabn, D-N-valía, D-prolin, D-tirezin, D-íemi&lamn, D-öáptofán, y-anhno-vaisav, ξ-aaassoúsaprílsav;
A jelentése D-glutammsav, y-D-gtomiasav;
Y jelentése gliein. olanin, leaern, izoleticxo, valin. N-valin, prolin, íirozin, íénilaianír·, triptofán, D-sáanin, Diencin, D-szo!eucrn, D-valrn, D-N-vslm, D-prolin,: D-tirozio, D-fenilalaam, D-íriptoíán, γ-ammo-vajsav, ξsmíno-kaprilsav, hidroxi!· vagy 1-3 szénatomos Irelyettesiteir axaidoesopert
2. Pepiid, amelynek képlete: Η-γ-D-Gln-D-Trp-ÖH.
3. Gyógyszerkészítmény, amely legalább egy, az 1. és 2 igénypontok bármelyike szerinti (1) általános képletö pepiidet és gyógyszerészetiieg elfogadható segédanyagot tartalmaz.
4. Az 1, és 2. igénypontok bármelyike szerisó pepiid, lépsejtsk szaporodásának gátlására fónénő alkalmazásra.
5. Az 1. és 2, igénypontok bármelyike szerinti peptid, mmranszabályozó hatásának alkalmazására, ó. Ellátás az 1. igénypont szerinti
X-A-D-Trp-Y (1) általános képletö peptid előállítására, a képletbe»
X jelentése hidrogénatom vagy gltosn, alaara, tettein, izoiencm, valló, N-valin, prolin, tirozín, feailalasín, triptofán, D-al&oiír, D-lendn, D-izolsuein, D-vahn, D-N-vakn, D-prolin, D-tírozín, D-íesüalanm, D-tripiofán, γ-amino-vajsav, ξ-amirto-kaprílsav;
A jelentése D-giutaminsav, y-D-glstammsav;
Y jelentése gliern, alnnin, lesein, ízolencín, válla, N-valm, prolin, tirozín, fenilalanin, íriptofiio, D-slanín, Dlenein, D-izoíencin, D-valln, D-N-vaks, D-prebn, D-tirozin, Dúésilatenns, D-íriptolan, y-mino-vajsav, ξ~ amino-kaprilsav, hidroxíi- vagy 1-5 szésatomos helyettesített amidocsoport, ίίζ::ίϊ/.ή·:/ίθΗ!ίΐ»'η, hogy a pepiidet oldatban szintetizáljak a íerc-b«i.o>;i-karbonil-íD vagy L)-glatammsav belső anhídridjének D-Trp-Y káliumsója segítségévei végzett megbontásával, majd a további lánc-építést aktívák éterek és vegyes aahídridek alkalmazásával végezzük, a iero-hotoxs-karbonii-csoporí előzetes, hangya-savval történő eltávolítása után, és végöl az és ^-izomereket kromatográfiásan elválasztjuk.
HU9801990A 1995-06-07 1996-05-06 Peptide and method of obtaining it HU228461B1 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU95108559A RU2107692C1 (ru) 1995-06-07 1995-06-07 Пептид и способ его получения
PCT/RU1996/000116 WO1996040740A1 (en) 1995-06-07 1996-05-06 Peptide and method of obtaining it

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HUP9801990A2 HUP9801990A2 (hu) 1999-02-01
HUP9801990A3 HUP9801990A3 (en) 1999-06-28
HU228461B1 true HU228461B1 (en) 2013-03-28

Family

ID=20168146

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9801990A HU228461B1 (en) 1995-06-07 1996-05-06 Peptide and method of obtaining it

Country Status (21)

Country Link
US (1) US5736519A (hu)
EP (1) EP0832900B1 (hu)
JP (1) JP4082522B2 (hu)
CN (1) CN1154653C (hu)
AT (1) ATE260933T1 (hu)
AU (1) AU724781B2 (hu)
BR (1) BRPI9609235B8 (hu)
CA (1) CA2222296C (hu)
CZ (1) CZ287816B6 (hu)
DE (1) DE69631762T2 (hu)
DK (1) DK0832900T3 (hu)
ES (1) ES2217311T3 (hu)
HK (1) HK1014965A1 (hu)
HU (1) HU228461B1 (hu)
LT (1) LT4476B (hu)
LV (1) LV12074B (hu)
PT (1) PT832900E (hu)
RU (1) RU2107692C1 (hu)
SK (1) SK281825B6 (hu)
UA (1) UA48974C2 (hu)
WO (1) WO1996040740A1 (hu)

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2107691C1 (ru) * 1995-03-02 1998-03-27 Дейгин Владислав Исакович Пептид и способ его получения
US5916878A (en) * 1995-11-28 1999-06-29 Edward T. Wei γ-glutamyl and β-aspartyl containing immunomodulator compounds and methods therewith
US6159940A (en) * 1996-02-28 2000-12-12 Immunotech Developments Inc. Method for modulating hemopoiesis
DE19712633A1 (de) * 1997-03-26 1998-10-08 Laves Arzneimittel Verwendung von gamma-Aminobuttersäure als Interleukinbildungsstimulans
IL145926A0 (en) 2001-10-15 2002-07-25 Mor Research Applic Ltd Peptide epitopes of mimotopes useful in immunomodulation
US20060233863A1 (en) 2003-02-10 2006-10-19 Enzymotec Ltd. Oils enriched with diacylglycerols and phytosterol esters and unit dosage forms thereof for use in therapy
IL155136A0 (en) * 2003-02-10 2003-10-31 Enzymotec Ltd A composition for reducing blood cholesterol and triglycerides
ATE467422T1 (de) * 2003-03-28 2010-05-15 Sciclone Pharmaceuticals Inc Behandlung von aspergillus-infektionen mit thymosin alpha 1
EP1776159A1 (en) * 2004-08-09 2007-04-25 Enzymotec Ltd. Food products for diabetics
KR101323513B1 (ko) 2004-08-10 2013-10-29 엔지모테크 리미티드 의학적 증상의 치료에서의 사용을 위한 피토스테롤에스테르(들) 및 1,3-디글리세라이드(들)의 혼합물
JP5185808B2 (ja) * 2005-03-18 2013-04-17 サントル・ナショナル・ドゥ・ラ・ルシェルシュ・シャンティフィク 新たなハイブリッドオリゴマー、それらの製造方法およびそれらを含有する医薬組成物
WO2006105811A1 (en) * 2005-04-07 2006-10-12 Centre National De La Recherche Scientifique Compounds useful as modulators of the proteasome activity
US20100129288A1 (en) * 2005-06-28 2010-05-27 Elior Peles Gliomedin, Fragments Thereof and Methods of Using Same
CA2569204A1 (en) * 2006-11-28 2008-05-28 Apotex Technologies Inc. Crystalline d-isoglutamyl-d-tryptophan and the mono ammonium salt of d-isoglutamyl-d-tryptophan
CA2571645A1 (en) * 2006-12-19 2008-06-19 Apotex Technologies Inc. Pharmaceutically acceptable salts of thymodepressin and processes for their manufacture
EP2120986A4 (en) 2007-02-13 2010-04-07 Sciclone Pharmaceuticals Inc METHOD FOR THE TREATMENT OR PREVENTION OF TISSUE WEAR, INJURY OR DAMAGE CAUSED BY SLEWER DISEASES
CA2579119C (en) 2007-02-16 2013-03-05 Apotex Technologies Inc. Crystalline forms of the mono-sodium salt of d-isoglutamyl-d-tryptophan
WO2008142693A2 (en) * 2007-05-22 2008-11-27 Yeda Research And Development Co. Ltd. Regulation of myelination by nectin-like (necl) molecules
JP2014509613A (ja) * 2011-03-31 2014-04-21 アポテックス テクノロジーズ インコーポレイテッド Ｄ−イソグルタミル−［ｄ／ｌ］−トリプトファンのプロドラッグ
EP2691370A4 (en) * 2011-03-31 2014-08-20 Apotex Technologies Inc PROGRUGS OF D-GAMMA-GLUTAMYL-D-TRYPTOPHANE AND D-GAMMA-GLUTAMYL-L-TRYPTOPHANE
CN102417474B (zh) * 2011-09-26 2014-07-02 深圳翰宇药业股份有限公司 D-异谷氨酰基-d-色氨酸制备的新方法
RU2634258C1 (ru) * 2016-11-08 2017-10-24 федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Российский университет дружбы народов" (РУДН) Наполнитель для капсульного ингалятора

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3832337A (en) * 1970-07-28 1974-08-27 Squibb & Sons Inc Peptide enzyme inhibitors
GB1526367A (en) * 1976-10-12 1978-09-27 Ici Ltd Polypeptide
HU184481B (en) * 1981-10-02 1984-08-28 Richter Gedeon Vegyeszet Process for producing tripeptides for diminishing appetite
JPS5921656A (ja) * 1982-07-28 1984-02-03 Takeda Chem Ind Ltd ポリペプチド誘導体
CH659586A5 (de) 1985-07-02 1987-02-13 Le G Ped I Arzneimittel aus dem thymus und verfahren zu dessen herstellung.
CA1286989C (en) 1985-12-26 1991-07-30 A. Arthur Gottlieb Immunoamplifiers and related compositions
IT1216908B (it) 1987-03-19 1990-03-14 Eniricerche Spa Analoghi retro-inversi della timopentina e dei suoi frammenti, il metodo per la loro sintesi ed il loro impiego per la preparazionedi composizioni farmaceutiche.
AU616236B2 (en) * 1987-12-30 1991-10-24 Cytran Ltd. Pharmaceutical preparation for treating immunodeficiency conditions
US5021551A (en) 1989-01-18 1991-06-04 Washington University Method of enhancing peptide immunogenicity
IT1230733B (it) 1989-06-30 1991-10-29 Eniricerche Spa Analoghi della timopentina retro invertita a tutti i legami, il metodo per la loro sintesi ed il loro impiego per la preparazione di composizioni farmaceutiche.
AU7392294A (en) * 1993-07-21 1995-02-20 Vladimir Khatskelevich Khavinson Pharmaceutical with immunomodulating activity

Also Published As

Publication number Publication date
HUP9801990A2 (hu) 1999-02-01
BRPI9609235B8 (pt) 2016-09-27
SK166997A3 (en) 1998-04-08
JPH11513016A (ja) 1999-11-09
EP0832900B1 (en) 2004-03-03
CN1154653C (zh) 2004-06-23
LV12074A (lv) 1998-06-20
CZ287816B6 (en) 2001-02-14
LV12074B (lv) 1998-08-20
DK0832900T3 (da) 2004-06-21
LT4476B (lt) 1999-03-25
SK281825B6 (sk) 2001-08-06
WO1996040740A1 (en) 1996-12-19
DE69631762D1 (de) 2004-04-08
UA48974C2 (uk) 2002-09-16
ES2217311T3 (es) 2004-11-01
EP0832900A4 (en) 1999-10-06
CA2222296C (en) 2001-10-09
BR9609235B1 (pt) 2009-01-13
CZ390597A3 (cs) 1998-08-12
AU724781B2 (en) 2000-09-28
AU5707696A (en) 1996-12-30
DE69631762T2 (de) 2005-03-10
EP0832900A1 (en) 1998-04-01
PT832900E (pt) 2004-07-30
CN1189837A (zh) 1998-08-05
JP4082522B2 (ja) 2008-04-30
ATE260933T1 (de) 2004-03-15
LT98004A (en) 1998-10-26
RU2107692C1 (ru) 1998-03-27
BR9609235A (pt) 1999-12-21
CA2222296A1 (en) 1996-12-19
HUP9801990A3 (en) 1999-06-28
US5736519A (en) 1998-04-07
HK1014965A1 (en) 1999-10-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU228461B1 (en) Peptide and method of obtaining it
CN105308063B (zh) Wt1抗原肽缀合物疫苗
DK172760B1 (da) Lineære og cycliske analoge til alfa-MSH-fragmenter med ekstraordinær styrke, lægemiddel eller kosmetisk præparat indeholde
US5916878A (en) γ-glutamyl and β-aspartyl containing immunomodulator compounds and methods therewith
HU185263B (en) Process for producing peptides effective on the immuncontroll analogous with the tp5
PT2213680E (pt) Péptidos que possuem uma atividade farmacológica para o tratamento de distúrbios associados à migração de células alteradas, tais como o cancro
JP2010235608A (ja) アルファ−ｍｓｈの拮抗複合ジペプチドを含む組成物
Tsuda et al. Hymenamides C~ E, new cyclic heptapeptides with two proline residues from the okinawan marine sponge hymeniacidon sp.
US6051683A (en) Immune regulating peptides and method of obtaining them
Kobayashi et al. Hymenamide F, new cyclic heptapeptide from marine sponge Hymeniacidon sp
US6479460B1 (en) Synthetic peptides and pseudopeptides having osteogenic activity and pharmaceutical compositions containing the same
Tsuda et al. Hymenamides G, H, J, and K, four new cyclic octapeptides from the Okinawan marine sponge Hymeniacidon sp.
US5114926A (en) Tetrapeptide inhibiting the entry into cycle of hemopoietic stem cells processes for its preparation, and its uses
RU2141337C1 (ru) Соединения на основе реакции амадори, их применение, способ получения и составы на их основе
US3757003A (en) Process for preparing l pyroglutamyl l histidyl l prolinamide
Poulos et al. Structure activity studies on the C-terminal hexapeptide of substance P with modifications at the glutaminyl and methioninyl residues
Thierry et al. Synthesis and activity of NAcSerAspLysPro analogs on cellular interactions between T-cell and erythrocytes in rosette formation
Pettit et al. Structural biochemistry. 25. Antineoplastic agents. 110. Synthesis of the dolastatin 3 isomer cyclo [L-Pro-L-Leu-L-Val-(R, S)-(gln) Thz-(gly) Thz]
AU615968B2 (en) Hypoglycaemic peptides
EP0503044A1 (en) PEPTIDE COMPOUNDS OF AMINO ACIDS AND LEVOGYRE CYCLIC MOLECULES AND THERAPEUTIC APPLICATIONS THEREOF.
GB2228937A (en) SDK (Ser-Asp-Lys) peptides
PT1042286E (pt) Compostos imunomoduladores contendo grupos gama-glutamilo e beta-aspartilo e métodos para os preparar
Wieland et al. Non-Toxic Peptides from Amanita phalloides
Garg et al. Amino sugars. CI. Synthesis of substituted glycopeptides containing a 2-acetamido-2-deoxy-. beta.-D-glucopyranosyl residue and the amino acid sequence 18-22 of bovine pancreatic deoxyribonuclease A
IL141468A (en) Cyclic synthetic pseudopeptides having osteogenic activity and pharmaceutical compositions containing the same

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of definitive patent protection due to non-payment of fees