LT4476B - Peptidas ir jo gavimo būdas - Google Patents

Peptidas ir jo gavimo būdas Download PDF

Info

Publication number
LT4476B
LT4476B LT98-004A LT98004A LT4476B LT 4476 B LT4476 B LT 4476B LT 98004 A LT98004 A LT 98004A LT 4476 B LT4476 B LT 4476B
Authority
LT
Lithuania
Prior art keywords
trp
glu
ala
phe
leu
Prior art date
Application number
LT98-004A
Other languages
English (en)
Other versions
LT98004A (lt
Inventor
Vladislav Isakovich Deigin
Andrei Marxovich Korotkov
Original Assignee
Vladislav Isakovich Deigin
Andrei Marxovich Korotkov
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=20168146&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=LT4476(B) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Vladislav Isakovich Deigin, Andrei Marxovich Korotkov filed Critical Vladislav Isakovich Deigin
Publication of LT98004A publication Critical patent/LT98004A/lt
Publication of LT4476B publication Critical patent/LT4476B/lt

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0821—Tripeptides with the first amino acid being heterocyclic, e.g. His, Pro, Trp
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/07—Tetrapeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0215—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing natural amino acids, forming a peptide bond via their side chain functional group, e.g. epsilon-Lys, gamma-Glu
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0806—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atoms, i.e. Gly, Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0808—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0812—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0819—Tripeptides with the first amino acid being acidic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0821—Tripeptides with the first amino acid being heterocyclic, e.g. His, Pro, Trp
    • C07K5/0823—Tripeptides with the first amino acid being heterocyclic, e.g. His, Pro, Trp and Pro-amino acid; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/1005—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/1008—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atoms, i.e. Gly, Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/1005—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/101—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/1016—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

Išradimas skirtas medicinai, o būtent - biologiškai aktyvių medžiagų, pasižyminčių imunoreguliavimo sąvybėmis, gavimo būdui, ir gali būti pritaikytas medicinoje, veretrinarijoje, o taip pat eksperimentinėje biochemijoje.
Naujų, nekenksmingų imunoreguliavimo peptidų, galinčių sustabdyti progresuojantį tokių susirgimų, kaip piktybiniai dariniai, sepsis, chroniškos ir ilgalaikės infekcijos, besivystančios imunodeficito būsenos fone, sukūrimo aktualumą patvirtina daugybė tyrinėjimų, atliktų šioje srityje.
Labiausiai paplitęs naujų peptidų sukūrimo būdas yra aktyvių peptido frakcijų išskyrimas iš apjungtų audinių ekstraktų, frakcionavimas ir valymas, gaunant individualią identifikuotą medžiagą (SU Nr. 1600047, SU Nr. 1638849, SU Nr. 1737798). Praktinėje medicinoje kaip imuninių procesų reguliatoriai gerai žinomi timuso ekstraktai, būtent, timozino 5 frakcija /Goldstein A.L., Guna A., Latz M.M., Hardy H.A., White A./, timalinas/CH, Nr.659586/. Šiuos ekstraktus sudaro polipeptidinės prigimties medžiagų kompleksas ir jų gavimą iš gamtinių šaltinių riboja gamybos sudėtingumas, maža aktyvių medžiagų išeiga ir didelis jų fizikinių-cheminių charakteristikų ir biologinių sąvybių kintamumas. Be to, timuso gamtinių praparatų sudėtyje yra balastinių komponentų, todėl, juos vartojant, ligoniai retkarčiais jaučia šalutinius poveikius. Pastaroji aplinkybė ir buvo stimulas sukurti sintetinius peptido preparatus. PCT WO 089/06134, SU 1541821, SU Nr. 1518956, EP Nr.230052, EP Nr.406931, US Nr.5021551, US Nr.5013723 išradimuose aprašyti peptidų, pasižyminčių imunoreguliavimo sąvybėmis, sintezės būdai. Kiekvienas gautas sintetinis peptidas, turintis ribotą būtinų sąvybių kompleksą, yra labai aktyvus, netoksiškas, nesukelia šalutinių poveikių, apsprendžiančių jų galimą pritaikomumą medicinoje.
Šio išradimo tikslas - sukurti naują sintetinį biologiškai aktyvų, pasižymintį imunorogeliavimo sąvybėmis, peptidą kurio formulė:
X-A-D-Trp-Y, kurioje
A - D-Glu, iD-Glu;
X - H arba Gly, Ala, Leu, Ile, Vai, NVal, Pro, Tyr, Phe, Trp, D-Ala, D-Leu, Dlle, D-Val, D-NVal, D-Pro, D-Tyr, D-Phe, D-Trp, γ-aminobutano rūgštis, ξaminokaprono rūgštis;
Y - Gly, Ala, Leu, Ile, Vai, NVal, Pro, Tyr, Phe, Trp, D-Ala, D-Leu, D-lle, DVal, D-NVal, D-Pro, D-Tyr, D-Phe, D-Trp, γ-aminobutano rūgštis, ξaminokaprono rūgštis, -OH arba pakeistasis amidas ¢(2^ - C3).
Taip pat šio išradimo tikslas yra sukurti naują technologinį peptido medžiagos gavimo procesą kuris leistų nesudėtingai kelių stadijų metu gauti aukščiau parašytos formulės produktą.
Šio išradimo esmę sudaro glutamilo peptidų sintezė tirpale, išskleidžiant tributiloksikarbonilglutamino (D arba L) rūgštį atitinkamu dariniu D-Trp-Y ir po to chromotografiškai atskiriant a- ir γ- izomerus. Tolesnė sintezė buvo atliekama, auginant peptido grandinę tributiloksikarbonilamino rūgščių aktyvuotųjų esterių pagalba.
lentelėje pateiktos peptido junginių analogų reikšmės Rf1 (chloroformasmetanolis-32 % acto rūgštis=60:45:20) ir (butanolis-piridinas-vanduo-acto rūgštis=5:5:4:1) sistemoje.
lentelė
Peptidas Rn RfZ
Abu-D-Glu-D-Trp-OH 0,32 0,53
Abu-iD-Glu-D-Trp-OH 0,29 0,49
Aca-D-Glu-D-Trp-OH 0,31 0,52
Aca-iD-Glu-D-Trp-OH 0,28 0,49
Ala-D-Glu-D-Trp-OH 0,34 0,61
Ala-iD-Glu-D-Trp-OH 0,32 0,55
D-Ala-D-Glu-D-Trp-D-Ala 0,22 0,41
D-Ala-D-Glu-D-Trp-OH 0,26 0,51
D-Ala-iD-Glu-D-T rp-D-Ala 0,25 0,50
D-Ala-D-Glu-D-Trp-OH ' ' 0,25 0,51
D-lle-D-Glu-D-Trp-D-Leu 0,35 0,53
D-lle-D-Glu-D-Trp-OH 0,36 0,54
D-lle-iD-Glu-D-Trp-D-Leu 0,34 0,53
D-lle-iD-Glu-D-Trp-OH 0,27 0,52
D-Leu-D-Glu-D-Trp-OH 0,36 0,53
D-Leu-iD-Glu-D-Trp-OH 0,35 0,52
D-NVal-D-Glu-D-Trp-OH 0,33 0,51
D-NVal-iD-Glu-D-Trp-OH 0,32 0,51
D-Phe-D-Glu-D-T rp-Ala 0,37 0,56
lentelės tęsinys
D-Phe-iD-Glu-D-T rp-Ala 0,36 0,55
D-Pro-D-Glu-D-Trp-OH 0,38 0,58
D-Pro-iD-Glu-D-Trp-OH 0,37 0,58
D-Trp-D-Glu-D-Trp-OH 0,41 0,59
D-Trp-iD-Glu-D-Trp-OH 0,40 0,59
D-Tyr-D-Glu-D-Trp-D-Tyr 0,39 0,58
D-T yr-ID-Glu-D-T rp-D-T yr 0,38 0,58
D-Val-D-Glu-D-Trp-OH 0,34 0,51
D-Val-iD-Glu-D-Trp-OH 0,33 0,50
Gly-D-Glu-D-Trp-NVal 0,29 0,51
Gly-D-Glu-D-Trp-OH 0,30 0,54
Gly-iD-Glu-D-Trp-NVal 0,32 0,53
Gly-iD-Glu-D-Trp-OH 0,29 0,53
H-D-Glu-D-Trp-Abu 0,33 0,52
H-D-Glu-D-T rp-Aca 0,30 0,53
H-D-Glu-D-Trp-D-lde 0,35 0,58
H-D-Glu-D-Trp-D-Pro 0,37 0,61
H-D-Glu-D-Trp-Gly 0,29 0,54
H-D-Glu-D-Trp-lle 0,36 0,58
H-D-Glu-D-Trp-Leu 0,36 0,59
H-D-Glu-D-Trp-Lys 0,28 0,47
H-D-Glu-D-Trp-OH 0,36 0,56
H-D-Glu-D-Trp-Phe 0,39 0,61
H-D-Glu-D-Trp-Pro 0,38 0,59
H-D-Glu-D-Trp-Tyr 0,37 0,58
H-D-Glu-D-Trp-Val 0,38 0,61
H-iD-Glu-D-Trp-Abu 0,34 0,51
H-iD-Glu-D-Trp-Aca 0,33 0,50
H-iD-Glu-D-Trp-D-lle 0,34 0,55
H-iD-Glu-D-Trp-D-Pro 0,36 0,58
H-iD-Glu-D-Trp-Gly 0,28 0,52
H-iD-Glu-D-Trp-lle. 0,34 0,57
H-iD-Glu-D-Trp-Leu 0,35 0,58
H-iD-Glu-D-Trp-Lys 0,27 0,45
H-iD-Glu-D-Trp-OH 0,30 0,52
H-iD-Glu-D-Trp-Phe . 0,38 0,61
H-iD-Glu-D-Trp-Pro 0,37 0,60
H-iD-Glu-D-Trp-Tyr 0,35 0,58
H-iD-Glu-D-Trp-Val 0,36 0,60
lle-D-Glu-D-Trp-D-Phe 0,42 0,68
lle-D-Glu-D-Trp-OH 0,38 0,56
lle-iD-Glu-D-Trp-D-Phe 0,40 0,67
lle-iD-Glu-D-Trp-OH 0,37 0,55
Leu-D-Glu-D-Trp-OH 0,35 0,62
Leu-iD-Glu-D-Trp-OH 0,27 0,57
lentelės tęsinys
NVal-D-Glu-D-Trp-OH 0,35 0,61
NVal-iD-Glu-D-Trp-OH 0,34 0,60
Phe-D-Glu-D-Trp-OH 0,41 0,63
Phe-iD-Glu-D-T rp-OH 0,40 0,62
Pro-D-Glu-D-Trp-OH 0,43 0,63
Pro-iD-Glu-D-Trp-OH 0,42 0,62
T rp-D-Glu-D-T rp-OH 0,45 0,68
Trp-iD-Glu-D-Trp-OH 0,44 0,67
Tyr-D-Glu-D-Trp-OH 0,42 0,64
Tyr-iD-Glu-D-Trp-OH 0,41 0,63
Val-D-Glu-D-Trp-D-Val 0,46 0,68
Val-D-Glu-D-Trp-OH 0,33 0,50
Val-iD-Glu-D-Trp-D-Val 0,44 . 0,66
Val-iD-Glu-D-Trp-OH 0,34 0,52
Išradimas iliustruojamas pateiktu pavyzdžiu.
Pavyzdys.
H-D-Glu-D-Trp-OH ir H-iD-Glu-D-Trp-OH
1. Boc-D-Glu-OH gavimas.
14.7 g (0,1 molio) H-D-Glu-OH buvo ištirpinta 200 ml distiliuoto vandens, vienmolio KOH tirpalo pagalba pH buvo nustatytas iki 10,2, intensyviai maišant buvo pridėta 33,0 g (0,3 molio) BOC2O tirpalo dioksane. Buvo stebimas pH dydis pH-metre. Pasibaigus reakcijai, mišinys buvo patalpintas į dalijamąjį piltuvą iš šarminės terpės ekstraguotas etilacetatu 3x150 ml, vandens fazė buvo iš lėto rūgštinama 0,2% sieros rūgšties tirpalu iki pH=3,0 ir Boc-D-Glu-OH ekstraguotas į organinę fazę (3x200 ml). Organinis sluoksnis buvo praplautas 3x200 ml sočiuoju Na2SO4 tirpalu, gaunant neutralią terpę, džiovintas Na2SO4, garintas vakuume iki aliejaus būvio. Išeiga: 16,7 g (68%).
2. Boc-D-Glu-D-Trp-OH irBoc-ID-Glu-D-Trp-OH mišinio gavimas.
16.7 g (0,068 molio) Boc-D-Glu-OH buvo ištirpinta 200 ml dimetilformamide, tirpalas buvo atšaldytas iki 0°C ir maišant pridėta 20,6 g (0,1 molio) Ν,Ν’-dicikloheksilkarbodiimido, ištirpinto 100 ml dimetilformamido, tirpalo. Mišinys buvo maišomas 4 vai. +4°C temperatūroje, ir paliktas 8 vai. nusistovėti kambario temperatūroje. Iškritusios dicikloheksilkarbamido nuosėdos buvo nufiltruotos, praplautos 2x50 ml dimetilformamidu, filtratas buvo garintas vakuume, sumažinant jo tūrį perpus, ir, šaldant iki +4°C temperatūros bei intensyviai maišant, buvo pridėta 24,3 g (0,1 molio) H-D-Trp-OK. Mišinys buvo paliktas palaipsniui įšilti iki kambario temperatūros. Apie reakcijos pabaigą spręsta pagal plonasluoksnės chromotografijos duomenis sistemoje (chloroformas:etilacetatas:metanolis 6:3:1) iki išnykstant rūgšties vidinio anhidrido Boc-D-Glu dėmei. Dicikloheksilkarbamido liekanos buvo nufiltruotos, dimetilformamidas garintas vakuume. Į aliejaus pavidalo liekaną buvo pridėta 200 ml etilacetato ir 200 ml 0,2% sieros rūgšties tirpalo. Organinis sluoksnis buvo atskirtas, praplautas, neutralizuojant jį sočiuoju Na2SO4 tirpalu, džiovintas Na2SO4, etilacetato tirpalas garintas vakuume. Taip buvo gautos aliejaus pavidalo nuosėdos, kurias sudarė Boc-D-Glu-D-Trp-OH ir Boc-iD-Glu-D-Trp-OH mišinys. Bendra masės išeiga sudarė 25,4 g (70%).
3. H-D-Glu-D-Trp-OH ir H-iD-Glu-D-Trp-OH gavimas.
25,4 g (0,048 molio) mišinio buvo ištirpinta 200 ml skruzdžių rūgšties, maišyta 1 vai 40°C temperatūroje ir garinta vakuume iki aliejaus būvio. Peptidų atskyrimas ir valymas jonų mainų chromotografijos pagalba buvo atliktas kolonėlėje su Sefadeksu piridinacetatinio buferio gradiente 0,01-0,2 M. Išeiga:
5,7 g (35%) H-D-Glu-D-Trp-OH ir 5,7 g (35%) H-iD-Glu-D-Trp-OH.
Ištyrus fizikines-chemines peptido savybes, gautos sekančios jo charakteristikos:
Pirminė struktūra - H-D-Glu-D-Trp-OH ir H-iD-Glu-D-Trp-OH
Bruto formulė - Ci6H2oN305
Molekulinis svoris - 334,35
Išvaizda - balti su gelsvu atspalviu arba pilki milteliai.
Tirpumas - lengvai tirpstantis vandenyje, ribotai - spirite, netirpus chloroforme.
Ultravioletinis spektras yra 250-300 nm srityje, maksimumas - 280±2 nm, petys - 287±2 nm.
Biologinis naujojo peptido aktyvumas buvo išbandytas ant Balb/c linijos pelių. Pelių blužnies ląstelės buvo suspenduotos RPMI 1640 terpėje su 2 ml glutamino ir 5% neaktyvuoto fetalinio serumo ir 100 μϊ buvo įvesta į plokščiadugnes planšetes po 200000 ląstelių į kiekvieną duobutę atitinkamai. Tiriamasis preparatas buvo įvestas kultivavimo pradžioje. Kaip mitogenas buvo panaudotas konkanavalinas A, kurio galutinė koncentracija sudarė 2 ųg į kiekvieną duobutę. Planšetės buvo inkubuotos 48 vai, esant 37°C temperatūrai ir 5% CO2. Ląstelių proliferacija buvo įvertinta pagal 3H-timidino, kurio 5 mkg/ml dozė buvo įvesta, likus 24 vai iki kultivavimo pabaigos, įsisavinimą apskaičiuotą scintiliacinio skaitiklio pagalba, ir išreikšta skilimų kiekiu per minutę (CPM). Gauti rezultatai pateikti 2 lentelėje.
lentelė
Pelių blužnies ląstelių proliferacija
Preparatas CPMI*
Preparato dozė (mkg/ml)
1 5 10 20
iD-Glu-D-Trp 68594 63428 20043 13222
Ciklosporinas A 67649 2698 574 569
Kontrolinis 61467
* - trijų reikšmių vidurkis
Nustatyta, kad naujasis peptidas pasižymi savybe slopinti blužnies ląstelių proliferaciją.
Siekiant išsiaiškinti ar naujasis peptidas yra nekenksmingas, buvo atliktas jo ūmaus toksiškumo įvertinimas. Šis įvertinimas buvo atliktas pagal Rusijos Federacijos farmakologijos komiteto metodines rekomendacijas “Naujų farmakologinių medžiagų bendro toksinio poveikio priešklinikinio tyrinėjimo reikalavimai”, M., 1985.
Tyrimų rezultatai parodė, kad, įvedus 1000 peptido dozių į pilvaplėvę, jis nesukėlė aštraus toksinio poveikė ir, esant tokioms dozėms, buvo neįmanoma pasiekti jų LD5oBiologiškai aktyvus peptidas gali būti plačiai pritaikytas medicinoje ir veterinarijoje.

Claims (2)

  1. IŠRADIMO APIBRĖŽTIS
    1. Peptidas, kurio formulė
    X-A-D-Trp-Y, kurioje
    A-D-Glu, iD-Glu;
    X - H arba Gly, Ala, Leu, Ile, Vai, NVal, Pro, Tyr, Phe, Trp, D-Ala, D-Leu, D-lle, D-Val, D-NVal, D-Pro, D-Tyr, D-Phe, D-Trp, γ-aminobutano rūgštis, ξ-aminokaprono rūgštis;
    Y - Gly, Ala, Leu, Ile, Vai, NVal, Pro, Tyr, Phe, Trp, D-Ala, D-Leu, D-lle, D-Val,
    D-NVal, D-Pro, D-Tyr, D-Phe, D-Trp, γ-aminobutano rūgštis, ξ-aminokaprono rūgštis, -OH arba pakeistasis amidas (Ci - C3).
  2. 2. Peptido, kurio formulė
    X-A-D-Trp-Y, kurioje
    A - D-Glu, iD-Glu;
    X - H arba Gly, Ala, Leu, Ile, Vai, NVal, Pro, Tyr, Phe, Trp, D-Ala, D-Leu, D-lle, D-Val, D-NVal, D-Pro, D-Tyr, D-Phe, D-Trp, γ-aminobutano rūgštis, ξ-aminokaprono rūgštis;
    Y - Gly, Ala, Leu, Ile, Vai, NVal, Pro, Tyr, Phe, Trp, D-Ala, D-Leu, D-lle, D-Val,
    D-NVal, D-Pro, D-Tyr, D-Phe, D-Trp, γ-aminobutano rūgštis, ξ-aminokaprono rūgštis, -OH arba pakeistasis amidas (Ci - C3), gavimo būdas, besiskiriantis tuo, kad peptido sintezę' vykdo tirpale, atidarant tributiloksikarbonilglutamino (D ar L) rūgšties vidinį anhidridą D-Trp-Y K-druskos pagalba, po to augina peptido grandinę aktyvuotųjų esterių ir mišriųjų anhidridą būdais, prieš tai atskėlus tributiloksikarbonilo grupę skruzdžių rūgštimi, ir chromotografiškai atskiriant a- ir γ- izomerus.
LT98-004A 1995-06-07 1998-01-07 Peptidas ir jo gavimo būdas LT4476B (lt)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU95108559A RU2107692C1 (ru) 1995-06-07 1995-06-07 Пептид и способ его получения

Publications (2)

Publication Number Publication Date
LT98004A LT98004A (lt) 1998-10-26
LT4476B true LT4476B (lt) 1999-03-25

Family

ID=20168146

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
LT98-004A LT4476B (lt) 1995-06-07 1998-01-07 Peptidas ir jo gavimo būdas

Country Status (20)

Country Link
US (1) US5736519A (lt)
EP (1) EP0832900B1 (lt)
JP (1) JP4082522B2 (lt)
CN (1) CN1154653C (lt)
AT (1) ATE260933T1 (lt)
AU (1) AU724781B2 (lt)
BR (1) BRPI9609235B8 (lt)
CA (1) CA2222296C (lt)
CZ (1) CZ287816B6 (lt)
DE (1) DE69631762T2 (lt)
DK (1) DK0832900T3 (lt)
ES (1) ES2217311T3 (lt)
HU (1) HU228461B1 (lt)
LT (1) LT4476B (lt)
LV (1) LV12074B (lt)
PT (1) PT832900E (lt)
RU (1) RU2107692C1 (lt)
SK (1) SK281825B6 (lt)
UA (1) UA48974C2 (lt)
WO (1) WO1996040740A1 (lt)

Families Citing this family (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2107691C1 (ru) * 1995-03-02 1998-03-27 Дейгин Владислав Исакович Пептид и способ его получения
US5916878A (en) * 1995-11-28 1999-06-29 Edward T. Wei γ-glutamyl and β-aspartyl containing immunomodulator compounds and methods therewith
US6159940A (en) * 1996-02-28 2000-12-12 Immunotech Developments Inc. Method for modulating hemopoiesis
DE19712633A1 (de) * 1997-03-26 1998-10-08 Laves Arzneimittel Verwendung von gamma-Aminobuttersäure als Interleukinbildungsstimulans
IL145926A0 (en) 2001-10-15 2002-07-25 Mor Research Applic Ltd Peptide epitopes of mimotopes useful in immunomodulation
US20060233863A1 (en) 2003-02-10 2006-10-19 Enzymotec Ltd. Oils enriched with diacylglycerols and phytosterol esters and unit dosage forms thereof for use in therapy
IL155136A0 (en) 2003-02-10 2003-10-31 Enzymotec Ltd A composition for reducing blood cholesterol and triglycerides
UA80870C2 (en) * 2003-03-28 2007-11-12 Sciclone Pharmaceuticals Inc Method for treatment or prevention of aspergillus infections with thymosin alpha 1
WO2006016357A1 (en) * 2004-08-09 2006-02-16 Enzymotec Ltd. Food products for diabetics
BRPI0513461A2 (pt) 2004-08-10 2011-05-10 Enzymotec Ltd mÉtodos de tratamento requerendo fito-ingredientes
JP5185808B2 (ja) * 2005-03-18 2013-04-17 サントル・ナショナル・ドゥ・ラ・ルシェルシュ・シャンティフィク 新たなハイブリッドオリゴマー、それらの製造方法およびそれらを含有する医薬組成物
US7919468B2 (en) 2005-04-07 2011-04-05 Centre National De La Recherche Scientifique (C.N.R.S.) Compounds useful as modulators of the proteasome activity
US20100129288A1 (en) * 2005-06-28 2010-05-27 Elior Peles Gliomedin, Fragments Thereof and Methods of Using Same
RU2320364C1 (ru) * 2006-08-21 2008-03-27 Закрытое Акционерное Общество "Центр "Пептос" Способ лечения злокачественных новообразований
CA2569204A1 (en) * 2006-11-28 2008-05-28 Apotex Technologies Inc. Crystalline d-isoglutamyl-d-tryptophan and the mono ammonium salt of d-isoglutamyl-d-tryptophan
CA2571645A1 (en) 2006-12-19 2008-06-19 Apotex Technologies Inc. Pharmaceutically acceptable salts of thymodepressin and processes for their manufacture
KR20090119897A (ko) 2007-02-13 2009-11-20 사이클론 파아머슈티컬 인코오퍼레이티드 점막의 질환으로 인한 조직 악화, 상처 또는 손상을 치료 또는 예방하는 방법
CA2579119C (en) 2007-02-16 2013-03-05 Apotex Technologies Inc. Crystalline forms of the mono-sodium salt of d-isoglutamyl-d-tryptophan
US20100150924A1 (en) * 2007-05-22 2010-06-17 Elior Peles Regulation of myelination by nectin-like (necl) molecules
RU2410391C1 (ru) * 2009-06-03 2011-01-27 Общество с ограниченной ответственностью "Пептос Фарма" Пептиды, влияющие на регенерацию кроветворной системы, и фармацевтическая композиция на их основе
EA201391421A1 (ru) * 2011-03-31 2014-02-28 Апотекс Текнолоджиз Инк. Пролекарства d-гамма-глутамил-d-триптофана и d-гамма-глутамил-l-триптофана
US20140343050A1 (en) * 2011-03-31 2014-11-20 Aptoex Technologies, Inc. Prodrugs of d-isoglutamyl-[d/l]-tryptophan
CN102417474B (zh) * 2011-09-26 2014-07-02 深圳翰宇药业股份有限公司 D-异谷氨酰基-d-色氨酸制备的新方法
RU2634258C1 (ru) * 2016-11-08 2017-10-24 федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Российский университет дружбы народов" (РУДН) Наполнитель для капсульного ингалятора

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CH659586A5 (de) 1985-07-02 1987-02-13 Le G Ped I Arzneimittel aus dem thymus und verfahren zu dessen herstellung.
EP0230052A2 (en) 1985-12-26 1987-07-29 Arthur A. Gottlieb Immunoamplifiers and related Compositions
WO1989006134A1 (fr) 1987-12-30 1989-07-13 Vsesojuzny Kardiologichesky Nauchny Tsentr Akademi Preparation pharmaceutique pour traiter des etats immunodeficitaires
EP0406931A2 (en) 1989-06-30 1991-01-09 SCLAVO S.p.A. New analogues of all-bond retroinverted thymopentin, the method for the synthesis of the same and their employment for the preparation of pharmaceutical compositions
US5013723A (en) 1987-03-19 1991-05-07 Eniricerche S.P.A. New thymopentin retro-inverso analogs and fragments thereof, a process of preparation of the new compounds and the intermediates obtained therein
US5021551A (en) 1989-01-18 1991-06-04 Washington University Method of enhancing peptide immunogenicity

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3832337A (en) * 1970-07-28 1974-08-27 Squibb & Sons Inc Peptide enzyme inhibitors
GB1526367A (en) * 1976-10-12 1978-09-27 Ici Ltd Polypeptide
HU184481B (en) * 1981-10-02 1984-08-28 Richter Gedeon Vegyeszet Process for producing tripeptides for diminishing appetite
JPS5921656A (ja) * 1982-07-28 1984-02-03 Takeda Chem Ind Ltd ポリペプチド誘導体
SU1737798A1 (ru) * 1989-04-11 1995-03-20 Институт клинической иммунологии СО АМН СССР Способ получения иммуностимулирующих тимусных полипептидов
IT1263042B (it) * 1993-01-15 1996-07-24 Enichem Polimeri Composizione da stampaggio a base di polifenilenetere
WO1995003067A1 (en) * 1993-07-21 1995-02-02 Khavinson Vladimir Khatskelevi Pharmaceutical with immunomodulating activity

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CH659586A5 (de) 1985-07-02 1987-02-13 Le G Ped I Arzneimittel aus dem thymus und verfahren zu dessen herstellung.
EP0230052A2 (en) 1985-12-26 1987-07-29 Arthur A. Gottlieb Immunoamplifiers and related Compositions
US5013723A (en) 1987-03-19 1991-05-07 Eniricerche S.P.A. New thymopentin retro-inverso analogs and fragments thereof, a process of preparation of the new compounds and the intermediates obtained therein
WO1989006134A1 (fr) 1987-12-30 1989-07-13 Vsesojuzny Kardiologichesky Nauchny Tsentr Akademi Preparation pharmaceutique pour traiter des etats immunodeficitaires
US5021551A (en) 1989-01-18 1991-06-04 Washington University Method of enhancing peptide immunogenicity
EP0406931A2 (en) 1989-06-30 1991-01-09 SCLAVO S.p.A. New analogues of all-bond retroinverted thymopentin, the method for the synthesis of the same and their employment for the preparation of pharmaceutical compositions

Also Published As

Publication number Publication date
RU2107692C1 (ru) 1998-03-27
HUP9801990A2 (hu) 1999-02-01
DE69631762D1 (de) 2004-04-08
DK0832900T3 (da) 2004-06-21
CA2222296C (en) 2001-10-09
AU724781B2 (en) 2000-09-28
LV12074A (lv) 1998-06-20
DE69631762T2 (de) 2005-03-10
SK281825B6 (sk) 2001-08-06
BR9609235B1 (pt) 2009-01-13
CA2222296A1 (en) 1996-12-19
HU228461B1 (en) 2013-03-28
EP0832900A1 (en) 1998-04-01
EP0832900B1 (en) 2004-03-03
JPH11513016A (ja) 1999-11-09
CN1154653C (zh) 2004-06-23
US5736519A (en) 1998-04-07
EP0832900A4 (en) 1999-10-06
BRPI9609235B8 (pt) 2016-09-27
LT98004A (lt) 1998-10-26
CZ287816B6 (en) 2001-02-14
HUP9801990A3 (en) 1999-06-28
WO1996040740A1 (fr) 1996-12-19
ATE260933T1 (de) 2004-03-15
ES2217311T3 (es) 2004-11-01
CN1189837A (zh) 1998-08-05
HK1014965A1 (en) 1999-10-08
CZ390597A3 (cs) 1998-08-12
UA48974C2 (uk) 2002-09-16
JP4082522B2 (ja) 2008-04-30
SK166997A3 (en) 1998-04-08
BR9609235A (pt) 1999-12-21
LV12074B (lv) 1998-08-20
AU5707696A (en) 1996-12-30
PT832900E (pt) 2004-07-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
LT4476B (lt) Peptidas ir jo gavimo būdas
RU2107691C1 (ru) Пептид и способ его получения
US4472305A (en) Hexapeptide amides
EP0109418A1 (en) Gonadoliberin derivatives, process for the preparation and pharmaceutical and veterinary compositions thereof
DE69024230T2 (de) An fette gebundene aminosäuren, peptide oder deren derivate
RU2067000C1 (ru) Пептид и способ его получения
CS204011B2 (en) Process for preparing substituted pentapeptides
EP0253190A2 (en) Partially retro-inverted tuftsin analogues, method for the preparation thereof and pharmaceutical compositions containing them
US6034058A (en) Semi-synthetic alanyl dilemnin analogs
US5013723A (en) New thymopentin retro-inverso analogs and fragments thereof, a process of preparation of the new compounds and the intermediates obtained therein
US3472832A (en) Peptides related to caerulein
US3757003A (en) Process for preparing l pyroglutamyl l histidyl l prolinamide
VARGA‐DEFTERDAROVIĆ et al. Glycoconjugates of opioid peptides: synthesis and biological activity of [Leu5] enkephalin related glycoconjugates with amide type of linkage
RU1124544C (ru) Гептапептид, обладающий свойствами психостимулятора пролонгированного действия с иммунотропной активность
US4111923A (en) Octapeptides and methods for their production
US4018754A (en) Novel polypeptides having ACTH-like action
KR0133850B1 (ko) Sdk 펩디드, 그의 제조 방법 및 그를 함유하는 치료 조성물
GB2109796A (en) Anorexigenic tripeptides, process for the preparation thereof and pharmaceutical compositions containing them
DE68913936T2 (de) Retro-Inverso-Thrymopentin-Analoge, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung für die Zubereitung von pharmazeutischen Zusammensetzungen.
Lee et al. CYCLIC PEPTIDES: II. Synthesis of a Cyclodepsipeptide, Protodestruxin
Matsuura et al. Studies of Peptide Antibiotics. XVI. Analogs of Gramicidin S Containing β-Alanine in Place of L-Proline
US4271152A (en) Psycho-pharmacological peptides
SU1116698A1 (ru) Аналоги энкефалина, обладающие анальгетической активностью
Dzierzbicka Synthesis of new conjugates of MDP and nor-MDP with retro-tuftsin derivatives as potential immunomodulators
CA1336738C (en) Intermediates produced during the preparation of new thymopentin retroinverso analogs

Legal Events

Date Code Title Description
PC9A Transfer of patents

Free format text: IMMUNOTECH DEVELOPMENTS INC.,222 ISLINGTON AVENUE, TORONTO, ONTARIO, CANADA M8V 3W7,CA,990510

MM9A Lapsed patents

Effective date: 20150506