CZ388097A3

CZ388097A3 - Použití sloučenin 2-aryl-3-aroylbenzo[b]thiofenu pro přípravu léčiva určeného k způsobu modulace kalciových kanálů ve vaskulární a kardiální tkáni

Info

Publication number: CZ388097A3
Application number: CZ973880A
Authority: CZ
Inventors: Nancy Louise Bowling
Original assignee: Eli Lilly And Company
Priority date: 1995-06-07
Filing date: 1996-06-04
Publication date: 1998-06-17
Also published as: WO1996039833A1; HUP9900860A3; CZ288547B6; ATE272315T1; NO975738L; IL122282A; AU6091896A; EP0873051A1; NO975738D0; KR19990022365A; AU692400B2; EA000873B1; IL122282A0; DE69633070D1; NZ310177A; RO117892B1; EP0873051A4; US5532254A; EA199800019A1; CA2222739A1

Description

Použití sloučenin 2-aryl-3-aroylbenzo[b]thiofenu pro přípravu léčiva určeného k způsobu modulace kalciových kanálů ve vaskulárni a kardíální tkáni.

Oblast techniky

Vynález se týká aroylbenzo[b]thiofenu pro způsobu modulace kalciových tkáni.

použití přípravu kanálů ve sloučenin léčiva vaskulárni se

2-aryl-3určeného k a kardiálni

Týká se objevu, aroylbenzo[b]thiofenů je kanálů tím, že zvyšuje skupina > účinná pro modulaci hustotu kalciových že

2-aryl-3kalciových kanálů ve vaskulárni (cévní) a kardiálni (srdeční) tkáni beze změn inotropní nebo tlakové odezvě.

Dosavadní stav techniky

Je obecně známo, že náhradní terapie estrogenem má příznivé účinky na kardiovaskulární systém u žen v menopauze.

Viz Knopt,

OBSTET. Gynecol., 72, str. 23s-30s (1988). U žen v menopauze, které přijímají estrogen, je poměr kardiovaskulární mortality redukován o asi 30 % až asi 50 % a poměr cerebrovaskulární mortality je redukován o asi

%.

Stampfer a kol., N. Engl. J. Med.,

325, 756-762 zahrnovat domněnku, vaskulárni

Gisclard když tyto příznivé změny lipidového že estrogen může kardiovaskulární účinky mohou profilu, mít také odezvu atherosklerotických

J.

Pharmacol.

nová data nabízí příznivý účinek na věnčitých tepen. Viz and

Experimenta 1 • ·

Therapeutics, 244, 19-22 (1988); Williams a kol., Circulation, 81, 1680-1687 (1990), Gangar a kol., Lancet, 388, 839-842 (1991); a Williams a kol., JACC, 20, 452-457 (1992). Byly popsány jak endotheliálně nezávislé tak i endotheliálně závislé účinky estrogenu na vaskulárni tkáň. Viz Jiang a kol., Br. J. Pharmacol., 104, 1033-1037 (1991); Jiang a kol., Američan Journal of Physiology, 32, H271-H275 (1992); Cheng a Gruetter, European Journal of Pharmacol., 215, 171-176 (1992); Mugge a kol., Cardiovas. Res., 27, 1939-1942 (1993); Salaš a kol., European Journal of Pharmacol., 258, 47-55 (1994); Williams a kol., Circulation, 81, 1680-1687 (1990); Cheng a kol., Life Sciences, 10, 187191 (1994); Gilligan a kol., Circulation, 89, 2545-2551 (1994); a Reisa kol., Circulation, 89, 52-60 (1994). Několik zpráv také neznačilo, že vasodilatačni účinky estradiolu a/nebo jeho schopnost zeslabit kontraktilni odezvy může být zprostředkována inhibici kalciového přítoku prostřednictvím napěťově závislých kalciových kanálů. Viz Jiang a kol., Br. J. Pharmacol., 104, 1033-1037 (1991); Jiang a kol., Američan Journal of Physiology, 32, H271-H275 (1992); Collins a kol., Lancet, 341, 1264 (1993); Muck a kol., Med. Sci. Res., 22, 19 (1994); a Salaš a kol., European Journal of Pharmacol., 258, 47-55 (1994). Další autoři postulovali, že estradiol může zvýšit obsah cyklického AMP nebo cyklického GMP, nebo zvýšit ATP-senzitivní draslíkové kanály. Viz Mugge a kol., Cardiovas. Res., 27, 1939-1942 (1993); Sudhir a kol., Am. Heart J. , 129, 726-732.

Podstata vynálezu

2-aryl-3-aroylbenzo[b]thiofenové sloučeniny, které jsou užívány způsobem podle předkládaného vynálezu, byly poprvé vyvinuty Jonesem a Suarezem jako anti-fertilitní látky. Viz • · · · · » e · »

U.S. Patent č. 4,133,814 (vydán 9. ledna 1979). Tyto sloučeniny jsou obecně užívány pro potlačení růstu nádorů prsních žláz. Janoš později objevil, že skupina těchto sloučenin je obzvláště užitečná pro antiestrogenní a antiandrogenní terapii, obzvláště při léčení nádorů prsních žláz a prostaty. Viz U.S. Patent č. 4,418,068 (vydán 29. listopadu 1983). Jedna z těchto sloučenin, 6-hydroxy-2-(4hydroxy-fenyl)-3-[4- (2piperidinoethoxy)benzoyl]benzo[b]thiofen, byl klinicky zkoumán jako lék pro rakovinu prsu. Tato sloučenina se nazývá raloxifen, dříve keoxifen.

Podstatou předloženého vynálezu je použití sloučenin 2aryl-3-aroylbenzo[b]thiofenu pro přípravu léčiva určeného k způsobu modulace kalciových kanálů ve vaskulární ..a kardiální tkáni.

Tento způsob modulace kalciových kanálů, zvyšuje hustotu kalciových kanálů v cévní (vaskulární) a srdeční (kardiální) tkáni beze změn v inotropní nebo tlakové odezvě (změně tlaku), zahrnuje podávání účinného množství látky následujícího obecného vzorce(I) teplokrevným živočichům, kteří vykazují její potřebu:

(I) • · · • · · · · · • · · · · * « * · · · · · t * • · · · · * · • t · · · ·· «·

- 4 kde skupiny R¹ a R³ představuji nezávisle na sobě atom vodíku, alkylovou skupinu s jedním až čtyřmi atomy uhlíku, skupinu CO-Alk, kde Alk je alkylová skupina obsahující jeden až šest atomů uhlíku, skupinu -CH₂Ar nebo skupinu -CO-Ar, kde Ar představuje fenyl nebo substituovaný fenyl;

skupina R² je zvolena ze souboru zahrnujícího pyrrolidino, hexamethylenimino a piperidino;

nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí. Předkládaný vynález se také týká použití sloučenin obecného vzorce I a nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí k výrobě léků pro modulaci kalciových kanálů ve vaskulární a kardiální tkáni.

• ·

Předložený vynález se týká aryl-3-aroylbenzo[b]thiofenů obecného vzorce I, je a zvyšuje hustotu kardiální tkáni beze účinná objevu, že vybraná skupina 2(benzo[b]thiofenů) , sloučenin při modulaci kalciových kanálů kalciových kanálů změn v inotropní proto poskytuje vaskulární a kardiální tkáni.

Předkládaný vynález kalciových kanálů předmětů vynálezu ale neomezujících angíny, nestabilní myokardu a arytmie. cerebrovaskulárních ve je se ve vaskulární a a tlakové odezvě.

způsob modulace

Jedním z léčba kardiálních poruch, zahrnujících, póze na varianty angíny, exertionalní angíny, ischemia-reperfušního zranění Jiný předmět vynálezu je způsob léčby onemocnění, zahrnujících, ale na cerebrální (mozkový) vasospasmus, artérie, mrtvici a migrénové bolesti léčby ledvinových způsobené zpomaleni léčby ale vynálezu je ledvinové neomezujících se způsobený prasknutím hlavy. Jiný předmět onemocnění zvýšením zvýšením průtoku krve poruchy ledvin. Další gastrointestinálních neomezujících se na ledvinami, jako způsob průchodnosti použitelný pro předmět vynálezu je způsob onemocnění, zahrnujících, onemocnění související s průjmem, *· · · ···· ·· · «

• i «·

jsou IBS a IBD, převažujicně průjmové.

Terapeutické působení podle předloženého vynálezu, je dosahováno podáváním terapeuticky účinného množství sloučeniny obecného vzorce I a nebo její farmaceuticky přijatelné soli teplokrevným živočichům, kteří ji potřebují.

Ve výše uvedeném vzorci výraz „alkylová skupina s jedním až šesti atomy uhlíku” představuje přímý, cyklický nebo rozvětvený alkylový řetězec s jedním až šesti atomy uhlíku. Typické alkylové skupiny s jedním až šesti atomy uhlíku zahrnují methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, sec.-butyl, t-butyl, n-pentyl, isopentyl, n-hexyl, cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl a podobně. Výraz „alkylová skupina s jedním až čtyřmi atomy uhlíku představuje přímý nebo rozvětvený alkyloyý řetězec, obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku. Alkylová skupina s jedním až čtyřmi atomy uhlíku zahrnuje methyl, ethyl, npropyl, isopropyl, n-butyl, sec.-butyl, isobutyl a t-butyl.

Výraz „Ar” v obecném vzorci I zahrnuje skupiny jako jsou fenyl a substituovaný fenyl. Výraz „substituovaný fenyl, jak je zde používán, představuje fenylovou skupinu, substituovanou jendním nebo více substituenty, zvolenými ze souboru, sestávajícího z atomu halogenu, hydroxy skupiny, kyano skupiny, nitro skupiny, alkylové skupiny obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku, alkoxylové skupiny obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku, acetylu, formylu, trichlormethylu nebo trifluoromethylu. Příklady substituované fenylové skupiny zahrnuji 4-chlorofenyl, 2,6dichlorofenyl, 2,5-dichlorofenyl, 3,4-dichlorofenyl, 3chlorofenyl, 3-bromofenyl, 4-bromofenyl, 3,4-dibromofenyl, 3-chloro-4-fluorofenyl, 2-fluorofenyl, 4-hydroxyfenyl, 3hydroxyfenyl, 2,4-dihydroxyfenyl, 3-nitrofenyl, 4nitrofenyl, 4-kyanofenyl, 4-methylfenyl, 4-ethylfenyl, 4methoxyfenyl, 4-propylfenyl, 4-n-butylfenyl, 4-t-butylfenyl,

3-fluoro-2-methylfeny1,

2,3-difluorofenyl,

2,6difluorofenyl, 2,6-dimethylfenyl, 2-fluoro-5-methylfenyl, 2,4,6-trifluorofenyl, 2-trifluoromethylfenyl, 2-chloro-5trifluoromethylfenyl, 3,5-bis(trifluoromethyl)fenyl, 2methoxyfenyl, 3-methoxyfenyl, 3,5-dimethoxyfenyl, 4-hydroxy3-methylfenyl, 3,5-dimethyl-4-hydroxyfenyl, 2-methyl-4nitrofenyl, 4-methoxy-2-nitrofenyl, 2,4-dinitrofenyl a podobně. Výraz „alkoxyskupina s jedním až čtyřmi atomy uhlíku představuje skupiny jako jsou methoxy, ethoxy, npropoxy, isopropoxy, n-butoxy, t-butoxy a podobně. Výraz „halogen představuje skupiny fluoro, chloro, bromo a jodo.

Výraz „farmaceuticky účinné množství je zde používán, aby představoval množství sloučeniny obecného vzorce I, které je schopné zvýšení hustoty kalciových kanálů ve yaskulární a kardiální tkáni. Konkrétní dávky sloučeniny obecného vzorce I budou pochopitelně určeny konkrétními okolnostmi daného případu, které zahrnují podávanou sloučeninu, způsob podáváni sloučeniny, konkrétní léčený stav a podobné další podmínky.

Výraz „modulace, tak jak je používán v tomto popisu, představuje zvýšení hustoty kalciových kanálů ve vaskulární a kardiální tkáni beze změn v inotropní a tlakové odezvě.

Výraz „teplokrevný živočich, jak je používán v tomto popisu, zahrnuje člověka; doprovázeící zvířata jako jsou psi a kočky; a domácí zvířata, jako jsou koně, hovězí dobytek, ovce, prasata, kozy a drůbež. Výhodně je teplokrevným živočichem člověk a doprovázející zvířata. Nejvýhodněji je teplokrevným živočichem člověk.

I když jsou všechny sloučeniny obecného vzorce I užitečné pro modulaci kalciových kanálů ve vaskulární a kardiální tkáni, jisté sloučeniny jsou výhodné. Skupiny R¹ a R² jsou • · · výhodně nezávisle atom vodíku, alkylová skupina s jedním až čtyřmi atomy uhlíku, -CO-Alk, kde Alk je alkylová skupina s jedním až šesti atomy uhlíku nebo benzyl a skupina R² představuje výhodně skupinu piperidino nebo pyrrolidino.

Představitelé výhodných sloučenin z této skupiny jsou

6-hydroxy-2-(4-hydroxyfenyl)-3-[4-(2pyrrolidinoethoxy)benzoyl]benzo[b]thiofen, methoxyfenyl)-3- [4- (2piperidinoethoxy)benzoyl]benzo[b]thiofen, acetoxyfenyl)-3-[4-(2 pyrrolidinoethoxy)benzoyl]benzo[b]thiofen a

6-methoxy-2-(46-acetoxy-2-(46-benzyloxy-2(4-benzyloxyfenyl)-3-[4-(2 piperidinoethoxy)benzoyl]benzo[b]thiofen.

Ještě výhodněji skupiny R¹ a R³ představují nezávisle na sobě atom vodíku nebo alkylovou skupinu s jedním až čtyřmi atomy uhlíku a skupina R² je skupina piperidino nebo pyrrolidino.

Představiteli této ještě výhodnější skupiny

2-(4-hydroxyfenyl)-3-[4-(2 pyrrolidinoethoxy)benzoyl]benzo[b]thiofen, hydroxyfenyl)-3-[4-(2piperidinoethoxy)benzoyl]benzo[b]thiofen, methoxyfenyl)-3-[4-(2 pyrrolidinoethoxy)benzoyl]benzo[b]thiofen a jsou 6-hydroxy6-hydroxy-2-(46-methoxy-2-(46-methoxy-2-(4methoxyfenyl)-3-[4-(2piperidinoethoxy)benzoyl]benzo[b]thiofen. Nejvýhodněji jsou skupiny R¹ a R³ představovány atomem vodíku a skupina R² je skupina piperidino. Nejvýhodnější sloučenina je 6-hydroxy-2 (4-hydroxyfenyl)-3-[4-(2piperidinoethoxy)benzoyl]benzo[b]thiofen.

Sloučeniny obecného vzorce I, použité ve způsobu podle předloženého vynálezu, mohou být vyrobeny použitím známých procedur, jako jsou způsoby popsané v U.S. patentech č. 4,133,814, 4,418,068 a 4,380,635, které jsou všechny zde • * · · · · · · · « · · fc ··· ·· ♦ ··· • · · · · · · · · · ·· · · · · · « ···<

• · ♦ ···· · · ····· · · «· · » ·· citovány jako reference. Obecně způsob výroby vychází z 6 hydroxy-2-(4-hydroxyfenyl)benzo[b]thiofenu. Tato výchozí sloučenina je chráněna, acylována v poloze C-3 skupinou 4(2-aminoethoxy)benzoyl a popřípadě zbavena ochrany, čímž se získá sloučenina obecného vzorce I. Příklady výroby takových sloučenin jsou podány v U.S. patentech uvedených výše.

Sloučeniny, použité ve způsobu podle předloženého vynálezu tvoří farmaceuticky přijatelné sole a v případě, že skupina R¹ a/nebo skupina R³ je atom vodíku, bázické adiční sole, s množstvím organických a anorganických kyselin a bází, v to počítaje fyziologicky přijatelné sole, které jsou často používány ve farmaceutickém průmyslu. Typické příklady anorganických kyselin, užívaných k vytvoření takovýchto solí jsou kyselina chlorovodíková, bromovodíková, jodovodíková, dusičná, sírová, fosforečná, fosforičitá a podobně. Mohou být používány i sole odvozené od organických kyselin, jako jsou alifatické mono- a dikarboxylové kyseliny, fenylem substituované alkanové kyseliny, hydroxyalkanové kyseliny, aromatické kyseliny, alifatické a aromatické sulfonové kyseliny.

Takovéto farmaceuticky přijatelné sole tedy zahrnují acetáty (octany), fenylacetáty, trifluoroacetáty, akryláty, askorbáty, benzoáty, chlorobenzoáty, dinitrobenzoáty, hydroxybenzoáty, methoxybenzoáty, methylbenzoáty, o-acetoxybenzoáty, naftalen-2-benzoáty, bromidy, isobutyráty, fenylbutyráty a β-hydroxybutyráty, butin-1,4-dioáty, hexin-1,6-dioáty, kapriany, kaprylany, chloridy, cinnamáty (s kořicany), citronany, formiáty (mravenčany) , fumarany, glykoáty, heptanoáty, dekanoáty, hippurany, laktáty (mléčnany) , maláty ( jablečnany) , maleinany, hydroxymaleinany, malonany, mandlany, mesylany, nikotinany, isonikotinany, dusičnany, oxaláty (šťavelany), ftalany, tereftalany, fosforečnany, monohydrogenfosforečnany, dihydrogenfosforečnany, metafosforečnany, pyrofosforečnany (dvoj fosforečnany) , • · • · · t • ·

- 9 propiolany, propionany, fenylpropionany, salicylany, sebakany, jantarany, korkany, sírany, kyselé sírany, pyrosírany, siřičitany, benzensulfonáty, chlorobenzensulfonáty, hydroxyethansulfonáty, kyselé siřičitany, sulfonáty, p-bromofenylsulfonáty, ethansulfonáty, 2methansulfonáty, naftalen-1 sulfonáty, naftalen-2-sulfonáty, p-toluensulfonáty, xylensulfonáty, vínany a podobně. Nejvýhodnější sole jsou sole kyseliny chlorovodíkové.

Farmaceuticky přijatelné kyselé adiční sole jsou tpicky vytvářeny reakcí sloučeniny obecného vzorce I s ekvimolárním nebo přebytečným množstvím kyseliny. Reakční složky jsou obecně spojovány v organickém rozpouštědle, jako je methanol, diethylether nebo benzen. Sůl normálně, precipituje z roztoku v průběhu doby od asi jedné hodiny do deseti dní a může být isolována filtrací a nebo může být rozpouštědlo odstraněno obvyklými prostředky.

Báze obvykle používané pro tvorbu soli zahrnují hydroxid amonný, karbonáty a hydroxidy alkalických kovů, prvků alkalických zemin, uhličitany, stejně tak jako alifatické primární, sekundární a terciální aminy a alifatické diaminy. Báze obvzláště užitečné pro přípravu adičních solí zahrnují hydroxid amonný, uhličitan draselný, methylamin, diethylamin, ethylendiamin a cyklohexylamin. Tyto sole jsou obecně připraveny reakcí sloučeniny obecného vzorce I, ve které skupina R¹ a/nebo skupina R³ představují atom vodíku, s jednou z výše jmenovaných bází v organickém rozpouštědle jako je methanol, diethylether nebo benzen. Soli se isolují způsoby popsanými v předchozím odstavci.

Tyto farmaceuticky přijatelné sole mají obecně zvýšenou rozpustnost ve srovnání se sloučeninou, ze které byly odvozeny a jsou tedy často vhodnější pro přípravu ve formě • · • · · · • · • · · · · · * · β · · • · ·«· · · « ···· · ♦ ·· · · · · ··« • ·· · · «· a· ·» «» jako jsou tekutiny nebo emulze.

Sloučeniny obecného vzorce I jsou před podáváním výhodně zpracovány do farmaceutické formy obsahující sloučeninu obecného vzorce I a farmaceuticky přijatelný nosič, ředidlo nebo excipient. Tyto farmaceuticky přijatelné formy se připraví známými způsoby z dobře známých a dostupných složek. Při vytváření těchto kompozic se aktivní složka obvykle smíchá s nosičem, zředí se ředidlem a nebo se obklopí nosičem, který může být ve formě kapsle, sáčku, papíru nebo nasič jiného druhu. Pokud nosič slouží jako ředidlo, může být představován pevným, polopevným a nebo tekutým materiálem, který slouží jako vehikulum, excipient nebo médium pro aktivní složku. Kompozice mohou být ve tvaru tablet, pilulek, prášků, pastilek, sáčků, oplatkpk, elixírů, suspensí, emulsí, roztoků, syrupů, aerosolů, olejových přípravků obsahujících například až do 10 % hmotnostních aktivní látky, měkkých nebo tvrdých želatinových kapslí, kožních náplastí, čípků, sterilních injektovatelných roztoků a sterilně balených pudrů.

Příklady vhodných nosičů, excipientů a ředidel zahrnují laktózu, dextrózu, sacharózu, sorbit, mannit, škroby, gumu, klovatinu, fosforečnan vápenný, algináty, tragakanthu, želatinu, křemičitan vápenný, mikrokrystalickou celulózu, polyvinylpyrrolidon, zesíťovaný polyvinylpyrrolidon, celulózu nebo jejich deriváty, vodní syrup, methylcelulózu, methyl a propyl hydroxybenzoáty, talek, stearát hořečnatý a minerální oleje. Tyto formy mohou navíc obsahovat lubrifikační činidla, smáčecí činidla (například povrchově aktivní činidla), emulsifikační a suspensní činidla, desintegrační činidla, ochranná činidla, sladidla a ochucovací činidla. Kompozice podle vynálezu mohou být formulovány tak, aby poskytovaly rychlé, trvalé nebo zpožděné uvolňování aktivní složky po podání pacientovi,

• · · · · · ·· ·· • · · · · * · • · · · »- · · • · · · ···· · • · · · · · · • · · · · · ·· užívajíce při tom způsoby známé ze stavu techniky.

Konkrétní dávkování sloučeniny obecného vzorce I, potřebné pro dosaženi modulace kalciových kanálů ve vaskulární a kardiální tkáni podle předloženého vynálezu bude záviset na naléhavosti podmínek, způsobu podávání a souvisejících faktorech, které budou určeny ošetřujícím lékařem. Obecně jsou účinné dávky v rozmezí od asi 0,1 do asi 1000 mg/den a obvykleji od asi 10 do asi 100 mg/den. Takovéto dávky budou subjektu, majícímu jejich potřebu, podávány od jednou do asi třikrát za den nebo častěji, jak je tomu třeba k účinnému ošetření stavu nebo symptomu.

Obvykle je výhodné podávat látku obecného vzorce I v podobě její kyselé adiční sole, jak je obvyklé p_tři podávání farmaceutických látek nesoucích bázickou skupinu, jako je piperidino skupina. Pro takové účely jsou použitelné níže uvedené orální dávky popsané v příkladové části.

Příklady provedeni vynálezu

V dávkování popsaném níže výraz „účinná složka znamená sloučeninu obecného vzorce I.

Dávkováni 1: Želatinové kapsle

Byly připraveny tvrdé želatinové kapsle následujícího složení:

Složka

Množství (mg/kapsle) • · • ·

	··· ·· · ··· • · · · · · · · -· ·« • · · to · · · · ···· ··· · · · « ··
- 12 -	• to ♦ · to · · · · ·· · t
Účinná složka	0,1 - 1000
Škrob, NF Škrobový tekutý prášek	0 - 650 0 - 650
Silikonová tekutina 350 centistokes	0-15

Ingredienty byly smíchány, protlačeny sítem s mřížkou č. 45 U.S. a plněny do želatinových kapslí.

Příklady specifických kapslových dávkování raloxifenu, které

byly provedeny zahrnují následující

příklady:

Dávkování 2: Raloxifenové kapsle

Složka	Množství (mg/kapsle)
Raloxifen	1
Škrob, NF Škrobový tekutý prášek	112 225, 3
Silikonová tekutina 350 centistokes	1,7

Dávkování 3: Raloxifenové kapsle

Složka	Množství (mg/kapsle)
Raloxifen	5
Škrob, NF	108
Škrobový tekutý prášek Silikonová tekutina 350 centistokes	225,3 1,7

Dávkování 4: Raloxifenové kapsle

Složka	Množství (mg/kapsle)
Raloxifen	10
Škrob, NF Škrobový tekutý prášek	103 225,3
Silikonová tekutina 350 centistokes	1,7

• · • ·

Dávkování 5: Raloxifenové kapsle

Složka	Množství	(mg/kapsle)
Raloxifen	50
Škrob, NF	150
Škrobový tekutý prášek	397
Silikonová tekutina 350 centistokes	3,0
Specifické formy dávkováni popsané výše mohou	být změněny v
souladu s nutností úměrných změn.
Byly připraveny tablety následujícího	složení:

Dávkování 6: Tablety
Složka	Množství (mg/kapsle)
Účinná složka	0,1 - 1000
Mikrokrystalická celulóza	0 - 650
kysličník křemičitý, („fumed)	0 - 650
kyselý stearan	0-15

Složky byly smíchány a lisovány do tvaru tablet.

Alternativně byly připraveny tablety obsahující každá 0,1 1000 mg účinné složky následujícím způsobem:

Dávkování 7: Tablety

Složka

Účinná složka

Škrob

Mikrokrystalická celulóza

Polyvinylpyrrolidon (10% roztok ve vodě)

Množství (mg/kapsle)

0,1.......- 1000..................................................................

Sodná karboxymethyl celulóza

Stearan horečnatý

Talek

4,5

0,5

Účinná složka, škrob a celulóza byly protlačeny sítem s mřížkou č. 45 U.S. a pečlivě míchány. Roztok polyvinylpyrrolidonu se míchal s výsledným práškem a protlačoval se sítem s mřížkou č. 14 U.S. Výsledné granule byly sušeny při 50 - 60°C a protlačeny sítem s mřížkou č. 18 U.S. Sodný karboxymethyl škrob, stearan hořečnatý a talek, které byly předtím protlačeny sítem s mřížkou č. 60 U.S. byly přidány ke granulím, které byly po míšení lisovány na tabletovacím stroji, čímž byly získány tablety.

Suspenze obsahující každá 0,1

100 mg účinné sl-pžky na 5 ml dávky byly připraveny následujícím způsobem:

Dávkování 8: Suspense

Složka	Množství (mg/5 ml)
Účinná složka	0,1 - 1000 mg
Sodná karboxymethyl celulóza	50 mg
Sirup	1,25 mg
Roztok kyseliny benzoové	0,10 ml
Chuťové činidlo	q. v.
Kolorant	q. v.
Purifikovaná voda do	5 ml

Účinná složka byla protlačena sítem s mřížkou č. 45 U.S. a smíchána se sodnou karboxymethyl cellulózou a sirupem, čímž se vytvořila jemná pasta. Roztok kyseliny benzoové, chuťové činidlo a kolorant byly zředěny trochou vody a za mícháni přidány ke směsi. Poté bylo přidáno množství vody dostatečné k získáni požadovaného objemu.

• ·

Následující tabulka 1 pro ilustraci podává sloučeniny, které mohou být použity ve způsobu podle vynálezu:

Tabulka 1

Sloučenina č.	R¹ a R^J	R²	Druh
1	-C (0)—F	piperidino	báze
2	-C (0)—F	piperidino	HC1
3	-C(O)—	piperidino	báze
4	-C(O)—	piperidino	HC1
5	-C (0) CH2CH2CH3	piperidino	báze
6	-C (0) CH2CH2CH3	piperidino	HC1
7	-C(O)C(CH₃)₃	piperidino	báze
8	-C(O)C(CH₃)3	piperidino	HC1
9	-C(O)CH₂C(CH₃)₃	piperidino	báze
10	-C(O)CH₂C(CH₃)₃	piperidino	HC1
11	-c (0)—©-CH3	piperidino	HC1
12	-C(0)-@	piperidino	báze
13	H	piperidino	báze
14	H	piperidino	HC1
15	H	piperidino	báze
16	H	piperidino	HC1
17	H	hexamethyienimino	HC1
18	ch₃	piperidino	HC1

Užitečnost sloučenin obecného vzorce I je ilustrována positivním působením, které vykazují v alespoň jednom z níže popsaných experimentů.

• · • · · ·

Materiály a metody

Selekce krys jsou popsali a podávané dávky jsou v

Sáto a kol. Sáto a kol., zásadě takové, jaké

Bone and Minerál

J.

Research,

9,

715-724 (1994) .

Stručně shrnuto, ovariektomované krysí samičky (6

6, rozdělených mg/kg/den p.o.)

p.o.). Čtvrtá (s vyjmutým měsíců staré) takto: ovex, a raloxifene vaječníkem) (ovex) byly rozděleny do 3 ethinyl estradiol (sloučenina 14, 1,0 panenské skupin po (EE2, 0,1 mg/kg/den skupina předstíraně operovaných samic („sham) sloužila jako kontrolní skupina. D^vky EE2 a sloučeniny 14 byly zvoleny tak, aby bylo dosaženo srovnatelných účinků na hustotu kostí (Sáto a kol.); shodou okolností dávaly stejně významné (P.O. 05 vs ovex) účinky na snižování celkového cholesterolu (36±2 a 38±4 mg/dl, EE2 a sloučenina 14, ve srovnání s 85±7 a 87±7 mg/dl pro ovex a kontrolní skupinu) . Kontrolní skupině a ovex krysám bylo podáváno vehikulum (100 pg/g tělesné hmotnosti 20 % hydroxypropyl-S-cyklodextrinu). Zvířata byla dávkována po 35 dní a zabita přebytkem CO₂ Byla provedena pečlivá disekce srdcí a aort, které byly rychle zmraženy a uchovávány při teplotě -70°C, pokud membrány nebyly preparovány okamžitě. Z 3-4 g rozsekaných srdcí a aort z každé skupiny byly izolovány mikrosomální membránové vesikuly, způsobem, který popsal Jones a kol., J. Biol. Chem., 254, 530-535 (1979). Preparace byly uchovávány v 0,25 M sacharose/ 30 mM histidinu při -70°C. Byly provedeny studie vazeb, používající rostoucích koncentraci ligandu kalciových kanálů [³H] PN200-110 (0,01 - 4,0 nM) ve

skleněných trubicích 12x75 mm (celkový objem 500 μΐ) při 23°C po dobu 2 hodin s použitím 100 (srdce) nebo 200 (aorty) μς proteinu na jednu trubici. Pokusy byly ukončeny rychlou filtrací na filtračním papíru Whatman GF/C. Pufr použitý při pokusech a při promývání 50 mM Tris/HCl (pH 7,3), 1 mM EDTA a 12 mM MgC12Nespecifická vazba byla definována jako vazba přetrvávající v přítomnosti 1 μΜ nifedipinu.

Radioligační vazebná afinita a receptorová hustota byly určeny ze saturačních isotermických dat použitím nelineární regresní analýzy programem LUNDON-1. Lundeen a Gordon, v Receptor Binding in Drug Research, 31-49, 1986.

Kardiovaskulární hemodynamické parametry v závislosti na BAY k 8644 byly určeny pro krysy zabité propíchnutím míchy z každé ze čtyř skupin (kontrolní, ovex, EE2 a sloučenina 14), jak bylo posáno Hayesem a Bowlingem s následujícícmi modifikacemi: Látka byla podávána femorální (stehenní) žílou; a přímé měření levého ventrikulárního (komorového) systolického krevního tlaku bylo dosaženo vsunutím malé sekce trubice PE 90, připojené k tlakovému převaděči, přímo do levé komory. Hayes a Bowling, J. Pharmacol. and. Exp. Ther.., 241, 861-869 (1987). Byla získána měření středního, systolického a diastolického krevního tlaku, tepu, levého ventrikulárního systolického tlaku a levého ventrikulárního dP/dt.

Výsledky

Působení EE2 a sloučeniny 14 na Ca²⁺ kanálové vazby ( [³H] PN200-110) v srdeční a aortové tkáni a na in vivo hemodynamické odezvy k BAY k 8644 byly určeny a porovnány se skupinou ovex a kontrolní skupinou. Zatímco velká afinita dihydropyridinových vazebných míst (B_max) v srdeční a aortové tkáni byla významně zesílena u krys ošetřených EE2 a sloučeninou 14 ve srovnání s ovex krysami, vazebná afinita (K_d) nebyla významně odlišná mezi skupinami vzhledem k srdeční a aortové tkáni.

Skupina	chol	srdeční	[^JH]	aortové	*p<0,05
ošetření	mg/dl	Bmax	PN200-100	Bmax	proti ovex
		(fmol/mg)	K_d (pM)	(fmol/mg)	Kd (nM)

ovex	(n=5-7)	8517	296151	200119	61115	1,0+0,3
kontrolní	(n=4-6)	8717	385176	188132	46+14	2,510,6
EE2	(n=5-7)	3612*	525165*	204+21	133126*	2,510,6
Ralox	(n=4-5	38+4*	535180*	171118	124+18*	2,3+0,6

I přes vzrůst Ca²⁺ kanálového B_max nebyly in vivo kontraktilní odezvy srdečního tepu a změny tlaku k BAZ k 8644 u krys ošetřených EE2 zvýšeny ve srovnání s hodnotami u ovex nebo kontrolních krys. Vzrůst Ca²⁺ kanálové hustoty tedy nevede k citlivější odezvě agonistů kalciových kanálů.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Použití sloučenin obecného vzorce (I) (I) ve kterém skupiny R¹ a R³ představují nezávisle na sobě atom vodíku, alkylovou skupinu s jedním až čtyřmi atomy uhlíku, CO-Alk, kde Alk je alkylová skupina obsahující jeden až šest atomů uhlíku, -CH₂Ar nebo -CO-Ar, kde Ar představuje fenyl nebo substituovaný fenyl;

skupina R² je zvolena ze souboru zahrnujícího pyrrolidin, hexamethylenimino a piperidino;

nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí pro přípravu léčiva určeného k způsobu modulace kalciových kanálů ve vaskulární a kardiální tkáni.
2. Použití podle nároku 1, ve kterém skupiny R¹ a R³představují nezávisle na sobě atom vodíku, alkylovou skupinu s jedním až čtyřmi atomy uhlíku, skupinu -CO-Alk, kde Alk představuje alkylovou skupinu s jedním až šesti atomy uhlíku ·· · · »· • · nebo benzyl a skupina R² představuje skupiny piperidino nebo pyrrolidino.
3. Použiti podle nároku 2 ve kterém skupiny R¹ a R³ ! představuji nezávisle na sobě atom vodíku nebo alkylovou skupinu s jedním až čtyřmi atomy uhlíku a skupina R²představuje skupiny piperidino nebo pyrrolidino.
4. Použití podle nároku 3 ve kterém skupiny R¹ a R³představují vodík a skupina R² představuje skupiny piperidino nebo pyrrolidino.
5. Použití podle nároku 4 ve kterém skupina R²představuje skupinu piperidino.
6. Použití podle nároku 5 ve kterém farmaceuticky přijatelná sůl je sůl hydrochloridu.
7. Použití podle nároku 4 ve kterém skupina R²představuje skupinu pyrrolidino.
8. Použiti podle nároku 7 ve kterém farmaceuticky přijatelná sůl je sůl hydrochloridu.