CZ302136B6

CZ302136B6 - Krystalické soli 7-{4-(4-fluorfenyl)-6-isopropyl-2-[methyl(methylsulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl}-(3R,5S)-3,5-dihydroxyhept-6-enové kyseliny

Info

Publication number: CZ302136B6
Application number: CZ20022754A
Authority: CZ
Inventors: Philip Taylor@Nigel; Okada@Tetsuo
Original assignee: Astrazeneca Ab; Shionogi & Co., Ltd.
Priority date: 2000-02-15
Filing date: 2001-02-12
Publication date: 2010-11-10
Also published as: DK1873148T3; AU3208401A; NO323770B1; SK287144B6; CA2397450C; HK1051532A1; CO5280213A1; ATE449079T1; SI1873148T1; MY129018A; EE200200445A; ATE382610T1; CN1210266C; BG106969A; CA2397450A1; DE60132178D1; SK11742002A3; RU2265599C2; PT1873148E; RU2002124621A

Abstract

Popisují se krystalické soli (E)-7-{4-(4-fluorfenyl)-6-isopropyl-2-[methyl(methylsulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl}- (3R,5S)-3,5-dihydroxyhept-6-enové kyseliny vzorce I a také zpusoby jejich výroby, farmaceutické kompozice, které je obsahují, a jejich použití.

Description

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká pyrimidinových derivátů, obzvláště nových krystalických solí (£)7- {4-(4-fluorfenyl)-6-isopropyl-2-[methyl(methylsulfonyl)amino]pyriinidm-5-yl} -(3R,5S)3,5-dihydroxyhept-6-enové kyseliny jako inhibitorů enzymu 3-hydroxy-3-methylglutarylio koenzym A reduktázy (HMG CoA reduktáza).

Dosavadní stav techniky

Předkládaný vynález se týká pyrimidinových derivátů, obzvláště nových krystalických solí (£)7_{4~(4-flu₀rfenyl)-6-isopropyl-2-[methyl(methylsulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl}-(3_JR_í55)3,5-dihydroxyhept—6-enové kyseliny obecného vzorce,

které jsou užitečné jako inhibitory enzymu 3-hydroxy-3-methylglutaryl-koenzym A reduktázy (HMG CoA reduktáza) a jako meziprodukty při výrobě, například nekrystalické vápenaté solí (£)-7-{4-(4-fluorfenyl)-6-isopropyl-2-[methyl(methylsulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl}(3J?,55)-3,5-dihydroxyhept-6-enové kyseliny obecného vzorce

Vynález se také týká farmaceutických kompozic obsahujících krystalické soli a také způsobů výroby krystalických solí. Vynález se dále týká způsobů léčení zdravotních potíží, na kterých se

HMG CoA reduktáza podílí za použití krystalických solí, například hyperlipidemie, hypercholesterolemie a aterosklerózy, a použití krystalických solí při výrobě léčiva. Vynález se dále týká použití krystalických solí ve výrobě nekrystalické vápenaté soli (£)-7-{4—(4-fluorfenyl)-6-iso- 1 CZ 302136 B6 propy l-2-[methyl(methylsulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl}-(3/č55)-3,5-dihydroxyhept-6-enové kyseliny.

Dokument Watanabe M. a kol.: Bioorganic and Medicinal Chemistry, 1997, díl 5, č. 2, str. 437444 se týká syntézy a biologické aktivity některých 3,5-dihydroxy-6-heptenoátů substituovaných methansulfonamid pyrimidinem, včetně vápenaté soli (£)-7-[4-(4—fluorfenyl)-6-isopropyl-2-[methyl(methylsulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl]-(3/č 55)-3,5-dÍhydroxyhept-6-enové kyseliny.

Evropský patentový spis 521 471 (dále jen EPA 521 471) popisuje amorfní (práškovou) formu vápenaté soli (£)-7-{4-(4-fluorfenyl)-6~fsopropyI~2~[methyl(methylsulfonyl)amÍno]pyrimidin—5-yl}-(3/ř,55)-3,5-dihydroxyhept-6-enové kyseliny, kde se prášková sodná sůl získává jako „práškové krystaly“. Tyto soli jsou inhibitory HMG CoA reduktázy a vápenatá sůl prochází klinickými experimenty.

Prášková nebo amorfní forma sloučeniny určené pro farmaceutické použití může způsobovat výrobní problémy a je tedy potřeba nalézat alternativní krystalické soli (£)-7-{4-(4-fluorfenyl)~ 6-isopropyl-2~[methyl(methylsulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl}-(3/ř, 55)-3,5-d i hydroxy hept-6enové kyseliny. Takové krystalické soli se mohou obecně mnohem snáze čistit než amorfní forma a mohou mít další výhodné vlastnosti, například vzhledem k jejich specifické krystalické formě a nebo jejich rozpouštěcím charakteristikám a/nebo jejich nedostatku hygroskopičnosti a/nebo jejich stabilitním charakteristikám včetně jejich teplotní stálosti a/nebo jejich schopnosti podléhat oxidativní degradaci. Při použití postupu popsaného v EPA 521 471 byly také zjištěny problémy v získávání čisté amorfní soli v důsledku obtíží při čištění sodné solí jako prekurzorů, vyplývající z její fyzikální formy. Dalším znakem krystalických solí je, že je lze také výhodně použít jako intermediáty ve výrobě nekiystalické vápenaté soli, pro umožnění isolace nekrystalické vápenaté soli se stupněm čistoty a uniformitu vhodnou pro formulaci, která splní náročné farmaceutické požadavky a specifikace.

Nyní byly nalezeny nové krystalické soli (£)-7-(4-(4-fluorfenyI)-6-Ísopropyl-2-[methyl(methylsulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl}-(3/č 55)-3,5-d i hydroxy hept-6-enové kyseliny, které představují podstatu předkládaného vynálezu.

Podstata vynálezu

Vynález se týká krystalické soli sloučeniny (£)~7-(4-(4-fluorfenyl)—6-isopropyI-2-[methyl(methylsulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl}-(3A,55)-3,5-dÍhydroxyhept-6-enové kyseliny, kde sůl je amoniová (NH₄ ⁺), methylamoniová (CH3NH3⁺), ethylamoniová (CH3CH₂NH/), diethanolamoniová [(HOCH^CILTNH?], tris(hydroxymethyl)methylamoniová [(HOCH₂)₃CNH/], benzy lamon iová (C_ÓH₅CHNH₃ ⁺], 4-methoxybenzylamoniová (4—CH,O-C₆H₄CH₂NH3⁺), lithná (Li⁺) nebo horečnatá (Mg²⁺) sůl.

Krystalické soli podle předkládaného vynálezu jsou popsány níže v příkladech. Nezávislé aspekty podle předkládaného vynálezu zahrnují:

(1) krystalickou amoniovou sůl (£)-7-(4-(4-fluorfenyl)-6-isopropyI-2-[methyl(methylsulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl}-(3/?.55)-3,5-dihydroxyhept-6-enové kyseliny s rentgenovým práškovým difrakčním záznamem se specifickými píky pri 2-theta - 12,9, 15,2, 18,0, 18,2, 18,5, 20,2, 22,4, 23,0, 24,0 a 27,2°, (2) krystalickou methylamoniovou sůl (£)-7-(4-(4-fluorfenyl)-6~isopropyI-2-[methyl(methylsulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl}-(3/?,55)-3,5-dihydroxyhept-6-enové kyseliny s rentgenovým práškovým difrakčním záznamem se specifickými píky pri 2-theta = 8,2, 12,3, 15,7, 16,5, 17,6, 18,7, 19,9,21,0, 24,3 a 25,9°, _ 9 .

(3) krystalickou ethylamoniovou sůl (£)-7-{4-(4-fluorfenyl)-6-isopropyl-2-[methyl( methy 1sulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl}-(3/?, 55)-3,5-dihydroxyhept-6-enové kyseliny s rentgenovým práškovým difřakčním záznamem se specifickými píky při 2-theta = 8,6, 15,9, 16,9, 18,4, 18,7, 19,7,20,8, 23,3, 23,8 a 25,8°, (4) krystalickou diethanolamoniovou sůl (£)-7-{4-(4-fluorfenyl)-6-isopropyl-2-[methyl· (methy lsulfonyl)am ino] pyrimidin-5-yl}-{37?, 55)-3,5-dihydroxyhept-6-enové kyseliny s rentgenovým práškovým difřakčním záznamem se specifickými píky při 2-theta = 9,9, 11,4, 16,1, 18,0, 18,7, 19,0,20,6, 22,9, 24,3 a 25,0°, (5) krystalickou tris(hydroxymethyl)methylamoniovou sůl (£)-7-(4-(4-ťluorfenylý-6-isopropyl-2-[methyl(methylsulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl}-(3/?, 55)-3,5-dihydroxyhept-6-enové kyseliny s rentgenovým práškovým difřakčním záznamem se specifickými píky při 2-theta = 7,9,

8.5, 10,2, 16,7, 18,4, 19,3, 19,8, 20,2,21,5 a 24,9°, (6) krystalickou benzylamoniovou sůl (£)-7-{4-(4-fluorfenyl>-6-isopropyl-2-[methyl(methyIsulfonyI)amino]pyrimidin-5-yl}_(37?,55)-3,5-dihydroxyhept-6-enové kyseliny s rentgenovým práškovým difřakčním záznamem se specifickými píky při 2-theta = 6,1, 6,7, 16,8, 17,6,

18.1, 19,3,21,1,21,9, 23,0 a 26,8°, (7) krystalickou 4-methoxybenzylamoniovou sůl (£)-7-{4-(4-fluorfenyl)-6-Ísopropyl-2[methyl(methylsulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl}-(37?₎5.S)-3,5-dihydroxyhept-6-enové kyseliny s rentgenovým práškovým difřakčním záznamem se specifickými píky při 2-theta = 14,2, 15,1,

17.5, 18,8, 19,7,20,1, 20,7,21,5, 23,7 a 24,5°, (8) krystalickou lithnou sůl (£)-7-(4-(4-fluorfenyl)-6-isopropyl-2-[ methy 1( methy Isulfony l)amino]pyrimidin-5-yl}-(3/?,55)-3,5-dihydroxyhept-6-enové kyseliny s rentgenovým práškovým difřakčním záznamem se specifickými píky pri 2-theta - 10,2, 11,0, 16,4, 17,0, 19,3, 19,8, 20,4, 20,9, 21,5 a 28,0°, a (9) krystalickou hořečnatou sůl (£)-7-{4—(4—fluorfenyl)-6-isopropyl-2-[methyl(methylsulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl)-(37?, 55)-3,5-dihydroxyhept-6-enové kyseliny s rentgenovým práškovým difřakčním záznamem se specifickými píky při 2-theta = 11,5, 14,5, 16,3, 16,8, 18,0,

19.1, 19,8,21,8, 22,6 a 23,0°.

Výše popsaná krystalická tris(hydroxymethyl)methyíamoniová sůl je zvláště výhodná krystalická sůl se zvláště výhodnými fyzikálními charakteristikami, například sůl má výhodné teplotní vlastnosti, je nehygroskopická a má výhodný rozpustnostní profil.

Rentgenová prášková difrakční spektra se měří po upevnění vzorku krystalické soli na Siemensův silikonový monokrystal i cký kruhový přípravek a vzorek se rozprostře pomocí mikroskopického sklíčka do tenké vrstvy. Vzorek se otáčí pri 30 otáčkách za minutu (pro zlepšení početní statistiky) a ozařuje se rentgenovým zářením generovaným měděnou rentgenovou lampou pracující pri 40 kV a 40 mA s vlnovou délkou 0,15406 nm. Kol i mo váný rentgenový zdroj prochází automatickými variabilními divergentními clonami pri V20 a odražené záření se orientuje 2 mm protirozptylovou clonou a 0,2 mm detektorovou clonou. Vzorek se vystavuje záření 4 vteřiny na 0,02 stupně 2-theta přírůstek (kontinuální skenovací modus) v rozsahu 2 stupně až 40 stupňů 2theta v theta-theta módu. Doba měření je 2 hodiny 6 minut a 40 vteřin. Přístroj byl vybaven scintilačním detektorem. Řízení a sběr dat se provádí pomocí Dell Optiplex 686 NT 4.0 Workstation pracujícím s Diffract + softwarem.

Rentgenová prášková difrakční spektra pro typické vzorky výše uvedených solí (1) až (9) jsou znázorněna v níže uvedených obrázcích. Je zřejmé, že hodnoty 2-theta práškových rentgenových

-3CZ 302136 B6 záznamů se mohou v závislosti na použitém přístroji nebo vzorku mírně lišit a tedy uvedené hodnoty se nemohou chápat jako absolutní.

Další aspekt předkládaného vynálezu se týká způsobu přípravy krystalických solí. Je možno empiricky určit přesné podmínky, za kterých se tvoří krystalické soli. Soli se mohou získat krystalizací za řízených podmínek. Vhodné nalezené postupy jsou popsány v níže uvedených příkladech a ty tvoří další nezávislé aspekty podle vynálezu. Například, způsob přípravy výše uvedené methy lamoniové soli (2) zahrnuje přidání methylaminu ve vhodném rozpouštědle, jako ve vodě nebo methanolu, ke studenému, s výhodou čerstvě připravenému roztoku (£)—7—{4—(4—fluorio feny l)-6-isopropyl-2-f methy l(methylsulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl}-(3R, 55)-3,5-díhydroxyhept-6-enové kyseliny ve vhodném rozpouštědle, jako rozpouštědle obsahujícím acetonitril. Pro další krystalické soli se používají studené, s výhodou čerstvě připravené roztoky heptenové kyseliny v rozpouštědle obsahujícím, například, acetonitril nebo ethylacetát a přidá se příslušný amin nebo báze v závislosti na povaze příslušného aminu nebo báze v přítomnosti nebo nepří15 tomnosti rozpouštědla. Typicky se směs po přidání aminu nebo báze míchá pri teplotě mezi teplotou místnosti a asi 30 °C a krystalický produkt se izoluje filtrací (podle potřeby po zahuštění a/nebo chlazení). Roztok výchozí heptenové kyseliny ve vhodném rozpouštědle se získá způsobem popsaným v níže uvedených příkladech. Další aspekt předkládaného vynálezu zahrnuje krystalickou sůl sloučeniny (4-(4-lluorfcnyl)-6-isopropyl 2-[methyl(methyl$uIfonyI)2o amÍno]pyrimidin-5-yl}-(3R, 55)-3,5-dihydroxyhept-6-enové kyseliny, která se získává způsobem popsaným v příkladu I, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 nebo 9.

Účinnost solí podle vynálezu jako inhibitorů HMG Co A reduktázy se prokazuje standardními testy a klinickými studiemi zahrnující ty, které jsou popsány v EPA 521 471. Krystalické soli podle vynálezu typicky poskytují hodnoty IC_So pro inhibici aktivity HMG CoA reduktázy v krysím jaterním mikrosomu 9 až 16 nM.

Podle dalšího aspektu se předkládaný vynález týká způsobu léčení chorobných potíží, pri kterých je využitelná inhibice HMG CoA reduktázy, kdy způsob zahrnuje podávání účinného množství so výše popsané krystalické soli teplokrevným savcům. Vynález se také týká použití výše popsaných krystalických solí pri přípravě léčiva používaného při chorobných potížích.

Sloučenina podle vynálezu se může podávat teplokrevným živočichům, obzvláště člověku, ve formě běžné farmaceutické kompozice. Proto se v dalším aspektu předkládaný vynález týká farmaceutické kompozice obsahující výše popsanou krystalickou sůl ve směsi s farmaceuticky přijatelným zřeďovadlem nebo nosičem.

Takové kompozice se mohou podávat standardním způsobem při onemocnění, které se má léčit, například perorálním, topickým, parenterálním, bukálním, nasálním, vaginálním nebo rektálním podáváním nebo inhalaci. Pro tyto účely se krystalická sůl formuluje běžně známým způsobem do formy například tablet, kapsulí, vodných nebo olejových roztoků, suspenzí, emulzí, krémů, mastí, gelů, nasálních sprejů, čípků, jemných prášků nebo aerosolů pro inhalace a pro parenterální použití (včetně intravenosní, intramuskulámí nebo infúze) jako sterilní vodný nebo olejový roztok nebo suspenze nebo sterilní emulze. Výhodný způsob podávání je perorální. Krystalická sůl se člověku podává v denní dávce v rozmezí uvedeném, například, v EPA 521 471. Denní dávky se podle potřeby podávají v rozdělených dávkách, přesné množství podávané krystalické soli a způsob podávání závisí na hmotnosti, věku a pohlaví léčeného pacienta a specifických podmínkách léčeného onemocnění podle běžně známých principů.

Podle dalšího aspektu se předkládaný vynález týká způsobu výroby farmaceutické kompozice obsahující výše popsanou krystalickou sůl jako aktivní složku, který zahrnuje smíchání krystalické soli s farmaceuticky přijatelným zřeďovadlem nebo nosičem.

Podle dalšího aspektu se předkládaný vynález týká použití výše popsané krystalické soli v přípass dě amorfní vápenaté soli (£)-7-{4_(4-fluorfenyl)-6-isopropyl-2-[methyl(methylsulfonyl)-4CZ 302136 B6 amino]pyrimidin-5-yl}-(3/2_t55)-3,5-dihydroxyhept-á-enové kyseliny. Pro tento účel je obzvláště vhodná kiystalická methylamoniová sůl. Další aspekt předkládaného vynálezu zahrnuje způsob výroby amorfní vápenaté soli (£)-7-{4-{4-fluorfeny1)-6-isopropyl-2-{methyl(methylsulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl )-(3/2,55)-3,5-dihydroxyhept-6-enové kyseliny, který se skládá z následné reakce krystalické methylamoniové soli s hydroxidem sodným následované reakcí s vápenatou solí rozpustnou ve vodě, jako chloridem vápenatým, ve vodných poměrech.

Přehled obrázků na výkresech

Obr. 1: Rentgenový práškový difrakční záznam krystalické amoniové soli

Obr. 2: Rentgenový práškový difrakční záznam krystalické methy lamoniové soli

Obr. 3: Rentgenový práškový difrakční záznam krystalické ethy lamoniové soli

Obr. 4: Rentgenový práškový difrakční záznam krystalické diethanolamoniové soli

Obr. 5: Rentgenový práškový difrakční záznam krystalické tris(hydroxymethyl)methy 1amoniové soli

Obr. 6: Rentgenový práškový difrakční záznam krystalické benzy lamoniové soli

Obr. 7: Rentgenový práškový difrakční záznam krystalické 4-methy lbenzy lamoniové soli

Obr. 8: Rentgenový práškový difrakční záznam krystalické líthné soli

Obr. 9: Rentgenový práškový difrakční záznam krystalické hořečnaté soli Vynález je dále ilustrován následujícími neomezujícími příklady.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Roztok 1,4 ml 40% roztoku methylaminu v methanolu se za míchání přidá k roztoku (£)-7-(4(4-fluorfenyl)-6-Ísopropyl-2-[methyl(methylsu lfony l)amino]pyrimidin-5-y 1)-(3/^55)-3,5d i hydroxy hept-6-enové kyseliny (získanému podle níže uvedeného popisu) při -5 °C. Směs se míchá 90 minut při 30 °C pak se ochladí na 3 °C. Krystalický produkt se oddělí filtrací, promyje acetonitrilem a vysuší pri 40 °C za vakua a poskytne 3,85 g (87,9% výtěžek) methylamonium35 (£)-7-(4-(4-fluorfenyl)-6-isopropyl-2-[methyl(nnethylsulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl}(3/2,55)-3,5-dihydroxyhept-6-enoátu jako bílé krystaly. (Stejná krystalická sůl se získá pri použití 1,1 ml 40% roztoku methylaminu ve vodě). Práškové rentgenové difrakční spektrum (XRD) typického vzorku krystalické methy lamoniové soli je uveden na obrázku 2 dále. Deset nejdůležitějších píků v XRD se vyskytuje pri asi 2-theta = 8,2, 12,3, 15,7, 16,5, 17,6, 18,7, 19,9,

21,0,24,3 a 25,9°.

Roztok (£)-7-( 4-(4-fluorfenyl)-6-isopropyl-2-[methyl(methylsulfonyl)amÍno]pyrimidin-5yI)-(3/2,55)-3,5-dihydroxyhept-6-enové kyseliny v acetonitrilu použitý v příkladu 1 se získá následovně:

(1) Směs 19,0 g methyl-2-amino-4-(4-f1uorfenyl)-6-isopropylpyrimidin-5-karboxylátu (popsaného v japonském patentovém spisu 06-256,318), 22,95 g zerc-pentoxidu sodného a 190 ml dimethoxyethanu se míchá 30 minut při 25 °C. Míchaný roztok se ochladí na -10°C a po kapkách se přidá 8,4 ml methansulfonylchloridu, teplota směsi se udržuje pri -5 °C. Po dvaceti minutách se přidá 8,1 ml dimethylsulfátu a směs se ponechá ohřát na 25 °C. Směs se míchá jednu hodinu pri 25 °C a přidá se roztok 1,91 g řcrc-pentoxidu sodného v 10 mí dimethoxyethanu.

-5CZ 302136 B6

Směs se míchá jednu hodinu při 25 ^QC. Přidá se roztok 13,3 g chloridu sodného ve 133 ml vody a směs se míchá 10 minut při 25 °C. Směs se nechá 15 minut rozdělit a spodní vodná vrstva se oddělí a vyhodí. Ke zbývající směsi se přidá 38 ml vody a směs se míchá 30 minut při 25 °C. Pro dosažení úplného roztoku se pak směs zahřeje. Směs se pak během jedné hodiny pomalu ochladí na 25 °C. Směs se ochladí na 0 °C, míchá jednu hodinu a suspendovaná tuhá látka se odfiltruje. Tuhá látka se promyje 20 ml studeného (0 °C) roztoku voda:dimethoxy ethan 50:50 (objemově). Pevná látka se vysuší při 60 °C za vakua a získá se 19,35 g methyí-4-(4_fluorfenyl) 6-isopropy 1-2 [methy((methyIsultonyl)amino]pyrimidin-5-karboxylátu (sloučenina A). Ή NMR (270 MHz, CDCb): 7,69 (m, 2 H), 7,14 (m, 2 H), 3,71,3,60, 3,51 (3 x s, 9 H), 3,20 (m,

H), 1,32 (d, 6 H).

(2) Míchaná směs 12,0 g sloučeniny A v 55 ml toluenu se ochladí na — tO°C a během dvou hodin se přidá 50 ml 1M roztoku diisobutylaluminiumhydridu v toluenu, teplota se udržuje pod 0 °C. Po přidání se směs míchá 30 minut při 0 °C. Ke směsi se přidá 0,64 ml methanolu, teplota se udržuje na 0 °C. Směs se pak přidává během dvou hodin k míchanému roztoku 23,3 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové, 40,5 ml vody a 24 ml acetonitrilu při 40 °C, teplota směsi se udržuje na 40 °C. Po přidání se směs míchá dalších 30 minut při 40 °C a pak se propláchne dusíkem (pro odstranění zbytků isobutanu). Směs se ochladí na 20 °C a nechá se 20 minut stát. Organická fáze se oddělí a promyje směsí 0,7 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové a 30 ml vody. K organické fázi se přidá 24 ml acetonitrilu a směs se promyje roztokem 0,038 g hydrogenuhličitanu sodného ve 120 mi vody.

Organická fáze se zahřeje na 40 °C a pak v proudu dusíku se zahřeje za 40 °C na 80 °C. Směs se zahustí destilací za atmosférického tlaku, jímá se 54 ml destilátu. K zahuštěnému roztoku se přidá 24 ml acetonitrilu a za míchání se přidá 1,2 ml bromidu fosforitého, teplota směsi se udržuje na 20 °C. Po přidání se směs míchá 30 minut při 20 °C. Ke směsi se přidá 36 ml vody během 30 minut, teplota se udržuje na 20 °C. Směs se míchá 5 minut a organická fáze se oddělí. Organická fáze se promyje roztokem 0,027 g hydrogenuhličitanu sodného v 36 ml vody, pak 36 ml vody. Organická fáze se destiluje za sníženého tlaku, dokud se nezachytí 29 ml destilátu. Směs se ochladí na 60 °C a přidá se 7,47 ml ethyl-difenylfosfínitu. Směs se míchá 3 hodiny při 60 °C, pak se zahřeje k refluxu. Přidá se 40 ml toluenu a směs se během 2 hodin ochladí na 0 °C. Produkt se odfiltruje, promyje 10 ml studeného (0 °C) toluenu a suší při 50 °C za vakua a získá se 14,66 g difenyl-[4-(4-fluorfenyl)-6-isopropyl-2-[methyl(methylsulfonyl)amino]pyrimidin-5ylmethyl]fosfinoxidu (sloučenina B). 'HNMR (270 MHz, CDCI₃): 7,42 [m, 10 H, P(C₆H₅)₂], 7,12 [m, 2 H, Ar-H], 6,92 [m, 2 H, Ar-H], 3,92 [d, 2 H, QT-P], 3,51, 3,46 [2 x s, 6 H, NCH₃SO₂CH₃], 3,43 [hept., 1 H, CH(CH_S)₂], 1,25 [d, 6 H, CH(CH₃)₂].

(3) Směs 19,17 g sloučeniny B a 227 ml tetrahydrofuranu (THF) se krátce zahřeje na 40 °C do vyjasnění roztoku, pak se převede do inertní atmosféry postupnou aplikací vakua a dusíku (5 cyklů). Směs se ponoří do chladicí lázně aceton/C0₂ a obsah se ochladí na -75 °C. K reakční směsi se přikapávací nálevkou s vyrovnávačem tlaku přidá 37,4 ml l,0M roztoku bis(trimethylsilyl)amidu sodného v THF během 10 minut, teplota se udržuje pod -74 °C, a vytvoří se červený roztok aniontu. 10 ml THF se opláchne přikapávací nálevka a přidá se ke směsi a směs se míchá 1 hodinu při -76 °C za vzniku červené suspenze. V několika dávkách se k suspenzi přikapávací nálevkou s vyrovnávačem tlaku přidá 80 ml -13,5% (objemově) toluenového roztoku /erc-butyl2-[(4/ř, 65)-6-formy 1-2,2-dimethyl-l,3-dioxan-4-yl]acetátu (který se získá podle popisu v evropském patentovém spisu EP 0 319 847) během 20 minut, teplota se udržuje pod -73 °C. 20 ml toluenu se opláchne přikapávací nálevka a přidá se ke směsi a směs se míchá dalších 15 minut při -76 °C. Chladicí lázeň se odstraní a suspenze se ponechá ohřát během 1,5 hodiny na 10 °C. V jedné dávce se přidá 3,21 g ledové kyseliny octové v 15 g vody, teplota se zvýší na 18 °C a veškeré tuhé látky se rozpustí a směs se míchá dalších 5 minut.

Směs se zahustí destilací za atmosférického tlaku (plášť 110°C) na teplotu 94 °C, přitom se celkově jímá 274 ml destilátů. Koncentrovaná směs se ochladí na 40 °C, přidá se 40 ml vody a směs se míchá 5 minut a ponechá se 15 rozdělit. Spodní vodná fáze se vyhodí. Přidá se 30 ml

-6CZ 302136 B6 vody a směs se míchá 5 minut a pak se 15 minut ponechá rozdělit. Spodní vodná vrstva se vyhodí.

Organická fáze se převede do destilační aparatury s 20 ml toluenu a koncentruje destilací za atmosférického tlaku (plášť 125 až 130 °C) na teplotu 116 °C, jímá se 85 ml destilátů. Připojí se vakuum (40 až 50 kPa) a jímá se dalších 16,5 ml destilátů do teploty 111 °C. Vakuum se uvolní a zahuštěná směs se nechá ochladit na 80 °C, Za rychlého míchání se přidá 140 ml teplého (50 °C) methanolu a obsah se nechá samovolně ochladit během 30 minut na 20 °C, během této doby se vyloučí tuhá látka. Suspenze se dále chladí 30 minut na 2 °C, pak se tuhá látka odfiltruje přes fritu a odsáváním se co nejvíce vysuší. Tuhá látka se promyje 60 ml studeného (2 °C) methanolu a opět odsaje co nejvíce do sucha, pak se převede do vakuové sušárny a suší přes noc (50 °C, 20 kPa) a získá se sloučenina C. 5,0 g sloučeniny C v 70 ml acetonitrilu se zahřívá při 40 °C a přidá se 19 ml 0,01M kyseliny chlorovodíkové. Reakční směs zahřívá 5 hodin na 40 °C. Přidá se 9,5 ml l,0M hydroxidu sodného při 25 °C a směs se míchá jednu hodinu. Přidá se chlorid sodný a směs se ochladí na -5 °C. Přidá se l,0M kyselina chlorovodíková a pH směsi se adjustuje na 3,4 až 4,0. Vodná fáze se oddělí a organická fáze se zředí 15 ml acetonitrilu, pak se vysuší bezvodým síranem hořečnatým. Přidá se 20 ml acetonitrilu za vzniku roztoku (£)-7-(4(4-fluorfenyl)-6-isopropyl-2-[inethyl(methylsulfonyl)ainino]pyrimidin-5-yl}-(3 £,55)-3,5dihydroxyhept-6-enové kyseliny v acetonitrilu.

Příklad 2 g methylamonium-(£)-7-{4—(4-fluorfenyl )-6-isopropyl-2-[ methyl (methy Isulfony l)am i no] pyrimidin-5-yl}-<3£,55)-3,5-dihydroxyhept-6-enoátu se přidá do 125 ml acetonitrilu a 5 ml vody. Směs se ochladí na 5 °C a pH se 19 ml ÍM kyseliny chlorovodíkové v nasycené solance adjustuje na 3,7. Vodná fáze se oddělí a výsledný roztok se vysuší bezvodým síranem horečnatým. Přidá se 2,48 g tris(hydroxymethyl)methylaminu a roztok se ponechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se 2 hodiny. Krystalický produkt se odfiltruje při teplotě místnosti a vysuší se při 30 °C za vakua a získá se krystalický tris(hydroxymethyl)methylamonium-(£)-7-(4—(4-fluorfenyl)-6-isopropyl-2-[ methyl (methyl sul fonyl)amino]pyrimidin-5-yl }-<3£,5S)-3,5-dihydroxyhept-6-enoát v podobě bílých krystalů. Práškové rentgenové difrakční spektrum typického vzorku krystalického tris(hydroxymethyl)methylamoniové soli je uvedeno na obrázku 5 dále. Deset nejhlavnějších píků v XRD se vyskytuje pri asi 2-theta = 7,9, 8,5, 10,2, 16,7, 18,4, 19,3, 19,8, 20,2, 21,5 a 24,9°.

Příklad 3 g methylamonium-(£)-7-{4-(4-fluorfenyl)-6-isopropyl-2-[methyl(methylsulfonyl)amÍno]pyrimidin-5-yl}-(3£,55)-3,5-dihydroxyhept-6-enoátu se přidá do 125 ml ethylacetátu a 30 ml vody. Směs se ochladí na 5 °C a přidá se 9,5 ml 2M kyseliny chlorovodíkové za vzniku dvoufázového roztoku. Vodná fáze se oddělí a organická fáze se promyje 30 ml vody a vysuší bezvodým síranem hořečnatým. Přidá se roztok diethano laminu (3,1 ml) v ethylacetátu (5 ml) a roztok se ponechá ohřát na pokojovou teplotu. Produkt se izoluje pomocí filtrace pri 0 až 5 °C a suší při 30 °C za vakua a získá se 8,0 g diethanolamonium-(£)-7-(4~(4-fluorfenyl)-6-isopropyl-2[methyl(methylsulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl}-(3£, 55)-3,5-d i hydroxy hept-6-enoátu v podobě bílých krystalů. Práškové rentgenové difrakční spektrum typického vzorku krystalické diethano 1amoniové soli je uveden na obrázku 4 dále. Deset nejhlavnějších píků v XRD se vyskytuje při asi 2-theta = 9,9, 11,4, 16,1, 18,0, 18,7, 19,0, 20,6, 22,9,24,3 a 25,0°.

-7 C7. 302136 B6

Příklad 4 g methy larnoriium-< Aj-7- {4{4-tlLtorfěnyl)-6-isopropyl-2-[methyl(inethy Isulfony IjaminoJ5 pyrimidin-5 yl} (3/?.5Aj-3.5—dihvdroxyhept6-enoátu se přidá do 125 ml ethylacetátu. Směs se ochladí na 5 °C a přidá se 20 ml IM kyseliny chlorovodíkové v nasycené solance, načež se přidá ml vody, aby vznikl dvoufázový roztok. Vodná fáze se oddělí a organická fáze se promyje 30 ml vody a vysuší bezvodým síranem hořečnatým. Přidá se 1,7 ml vodného amoniaku, pak se přidá 80 ml ethylacetátu a roztok se zahustí za vakua a zředí 60 ml ethylacetátu. Směs se míchá io 90 minut při 0 až 5 °C a produkt se odfiltruje a suší při 30 °C za vakua a získá se 6,33 g amon i um-ý£7-7-í 4-(4-fl uorfeny l)-6-i sopropy l-2-[methy l( methyl sul fonyl)amino] pyri midin-5yl}-(3/ř,55)-3,5-dihydroxyhept~6-enoátu v podobě bílých krystalů. Práškové rentgenové difrakční spektrum typického vzorku krystalické amoniové soli je uveden na obrázku 1 dále. Deset nejhlavnějších píku v XRD se vyskytuje při asi 2-theta = 12,9, 15,2, 18,0, 18,2, 18,5, 20,2, 22,4,

23,0, 24,0 a 27,2°.

Příklad 5

2o 10 g methylamonium-(£)-7-{4-(4-fluorfenyl)-6-isopropyl-2-[methy](methyIsulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl}-(3/?,5_lV)-3,5-dihydroxyhept-6-enoátu se přidá do 125 ml ethylacetátu a 30 ml vody. Směs se ochladí na 5 °C a přidá se 9,5 ml 2M kyseliny chlorovodíkové, aby vznikl dvoufázový roztok. Vodná fáze se oddělí a organická fáze se promyje 30 ml vody a vysuší bezvodým síranem hořečnatým. Přidá se 0,9 g monohydrátu hydroxidu lithného a 3 ml vody a roztok se zahustí za vakua, pak se zředí 100 ml ethylacetátu. Produkt se izoluje filtrací při 0 až 5 °C a suší při 30 °C za vakua a získá se 8,23 g lithium-{£)-7-{4-(4-fluorfenyl)-6-isopropyl-2-[methyl(methylsulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl}-(3/ř,55)-3,5-dihydroxyhept-6-enoátu v podobě bílých krystalů. Práškové rentgenové difrakční spektrum typického vzorku kiystalické amoniové soli je uveden na obrázku 8 dále. Deset nej hlavnějších píku v XRD se vyskytuje při asi 2-theta - 10,2, .w 11,0, 16,4, 17,0, 19,3, 19,8,20,4, 20,9, 21,5 a 28,0°.

Příklad 6

Rozto k n atri u m-( £)-7- {4—(4—fl u orfeny 1)—6—i sopropy l-2-[methy l(methy I sulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl}-(3£,55)-3,5-dihydroxyhept-6-enoátu v 11 ml vodného acetonitrilu obsahujícího 1,4 g chloridu sodného se ochladí na -5 °C a pH se adjustuje na 3,4 až 4 přidáním 1M kyseliny chlorovodíkové. Vodná fáze se oddělí a organická fáze se filtruje bezvodým síranem hořečnatým. K organické fázi se přidá 14 ml acetonitrilu a přidá se 0,21 ml vodného ethylaminu. Roz4» tok sc zahřeje na 30 °C a při této teplotě se udržuje 90 minut. Produkt se izoluje filtrací při 0 °C a suší při 35 °C za vakua a získá se 0,7 g ethylamonium-(£)-7-{4-(4-fluorfenyl)-6-isopropyl2-[methyl(methylsulfonyl)aminolpyrimidin-5-yl}-(3/?,55)-3,5-dihydroxyhept-6-enoátu v podobě bílých krystalů. Práškové rentgenové difrakční spektrum typického vzorku krystalické amoniové soli je uveden na obrázku 3 dále. Deset nej hlavnějších píků v XRD se vyskytuje při asi

2-theta =8,6, 15,9, 16,9, 18,4, 18,7, 19,7, 20,8, 23,3, 23,8 a 25,8°.

Příklad 7

Roztok natři um-(£)-7-{4-(4-f]uorfenyl)-6-isopropyl-2-[methyl(methy Isulfony l)amino]pyrimidin-5-yl}~(3/?,55)-3,5~dihydroxyhept-6-enoátu v 40 ml vodného acetonitrilu se ochladí na-5 °C a přidáním 9,5 ml IM kyseliny chlorovodíkové obsahující 7,1 g chloridu sodného se pH adjustuje na 3,8. Vodná fáze se oddělí a k organické fázi se přidá 70 ml acetonitrilu. Přidá se

1,4 ml benzy lam inu a roztok se zahřeje na 30 °C a při této teplotě se udržuje 90 minut. Produkt se izoluje filtrací při 0 °C a suší při 35 °C za vakua a získá se 4,4 g benzylamonium-(£)-7-{ 4-(4-8CZ 302136 B6 fluorfenyl)-6-isopropyl-2-[methyI(methyIsulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl}-(3/?, 55)-3,5dihydroxyhept-6-enoátu v podobě bílých krystalů. Práškové rentgenové difrakční spektrum typického vzorku krystalické amoniové soli je uveden na obrázku 3 dále. Deset nej hlavnějších píku v XRD se vyskytuje při asi 2-theta - 6,1, 6,7, 16,8, 17,6, 18,1, 19,3, 21,1, 21,9, 23,0 a 26,8°.

Příklad 8 i o Roztok natrium-(£)-7-{4-(4-fluorfenyl)-6-isopropy l-2-[methyl(methylsulfonyl)amino]pyrimidm-5-yl}-(3/?,55)-3,5-dihydroxyhept-6-enoátu ve vodném acetonitrilu obsahujícího

1.4 g chloridu sodného se ochladí na -5 °CapHse IM kyselinou chlorovodíkovou adjustuje na

3.4 až 4. Vodná fáze se oddělí a organická fáze se filtruje bezvodým síranem horečnatým, K organické fázi se přidá 14 ml acetonitrilu a přidá se 0,34 ml 4—methoxybenzylaminu. Roztok se zahřeje na 30 °C a udržuje se při této teplotě 60 minut. Produkt se izoluje filtrací při 0 °C a suší při teplotě místnosti za vakua a získá se 0,65 g 4-methoxybenzylamonium-(£)-7-{4-(4fluorfenyl)-^6-isopropyl-2-[methyl(methylsulfonyl)amino]pyrimidin-5-y 1)-(3^,55)-3,5dihydroxyhept-6-enoátu v podobě bílých krystalů. Práškové rentgenové difrakční spektrum typického vzorku krystalické amoniové soli je uveden na obrázku 7 dále. Deset nej hlavnějších píků v XRD se vyskytuje při asi 2-theta = 14,2, 15,1, 17,5, 18,8, 19,7, 20,1, 20,7, 21,5, 23,7 a 24,5°.

Roztok natrium-(£)-7-{4-(4-fluorfenyl)-6-isopropyI-2-[methyl(methylsulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl}-(3/?,55)-3,5-dihydroxyhept-6-enoátu ve vodném acetonitrilu, používaný v pří25 kladech 6, 7 a 8 se získá následujícím způsobem;

5,0 g sloučeniny C (získané v příkladu 1, část (3)) v 35 ml acetonitrilu se zahřeje na 40 °C a přidá se 9,5 ml 0,02M kyseliny chlorovodíkové. Reakční směs se zahřívá 4 h na 40 °C. Přidá se 9,5 ml l,0M hydroxidu sodného pri 25 °C a směs se míchá 60 minut za vzniku roztoku sodné soli ve vodném acetonitrilu.

Příklad 9

26,3 ml 1,9M roztoku hydroxidu sodného se přidá k míchanému roztoku 15 g methylamonium(£)-7-{4—(4-fluorfenyl)-6-isopropyl-2-[methyl(methylsulfonyl)ammo]pyrimidin-5-yI}(3A,55)-3,5-dihydroxyhept-6-enoátu v 106 ml vody při teplotě místnosti. Během 20 minut se přidá roztok 4,3 g síranu hořečnatého v 26 ml vody a vysráží se tuhá fáze. Tuhá látka se oddělí filtrací, promyje 20 ml vody a suší při 40 °C za vakua (7,7 g). Směs 5,8 g tuhé látky a 50 ml vody se zahřeje na 38 °C a zředí 35 ml vody. Směs se míchá 4 hodiny při teplotě místnosti a pak se ponechá stát 66 hodin. Tuhá látka se po zředění 30 ml vody odfiltruje. Produkt se suší při 35 °C za vakua a získá se 4,68 g magnesium-(£)-7-{4-(4-fluorfenyl)-6-isopropyl-2-[methyI(methylsulfonyl)amino]pyrimidÍn-5-yl}-(3Á₎ 55)-3,5-d i hydroxy hept-6-enoátu v podobě bílých krystalů. Práškové rentgenové difrakční spektrum typického vzorku krystalické amoniové soli je uve45 den na obrázku 9 dále. Deset nej hlavnějších píků v XRD se vyskytuje pri asi 2-theta = 11,5, 14,5, 16,3, 16,8, 18,0, 19,1, 19,8, 21,8, 22,6 a 23,0°.

Příklad 10

5,44 ml 8% vodného roztoku hydroxidu sodného se přidá k míchanému roztoku 6,0 g methylamoniové soli získané v příkladu 1 v 30 odplyněné vody při 20 °C a směs se míchá 1 hodinu. Směs se zfiltruje a zahustí za sníženého tlaku pri 40 °C do získání 24 ml destilátu. Přidá se 24 ml vody a směs se znovu zahustí za sníženého tlaku při 40 °C do získání 24 ml destilátu. Přidá se

30 ml vody a prikapá se roztok 1,03 g dihydrátu chloridu vápenatého v 6 ml vody při 20 °C.

-9CZ 302136 B6

Směs se míchá 45 minut a výsledná tuhá látka se odfiltruje. Tuhá látka se promyje 36 ml vody a suší se při 40 °C za vakua a získá se nekrystalická vápenatá sůl (£)-7-{4-(4-fluorfenyl)-6isopropyl-2-[ methy l(methylsulfonyl)amÍnoJpyrÍmidin-5-yl}-(3/ř,5_tV)-3.5-dihydroxyhept-6enové kyseliny.

Claims

t. Krystalická amoniová sůl (/<)-7-{4(4-!luorťenyl)—6-isopropyl-2-[ methy l(methylsulfbnyl)amino]pyrimidin-5-yl}-(3/?,5£}-3,5-dihydroxyhept-6-enové kyseliny s rentgenovým práškovým difrakčním záznamem měřeným pri vlnové délce 0,15406 nm se specifickými píky rs při 2 theta = 12,9, 15,2, 18,0, 18,2, 18,5, 20,2, 22,4, 23,0, 24,0 a 27,2°.
2. Krystalická methylamoniová sůl (£)-7-{4-(4-ťlu0rfenyl)-6-isopropyl-2-[methyl(methylsulfonyl)amino]pyrirnidin-5~yl}-(3/ř,55)-3,5-dihydroxyhept-6—enové kyseliny s rentgenovým práškovým difrakčním záznamem měřeným při vlnové délce 0,15406 nm se specifickými píky zo při 2-theta = 8,2, 12,3, 15,7, 16,5, 17,6, 18,7, 19,9, 21,0, 24,3 a 25,9°.
3. Krystalická ethylamoniová sůl (£}-7-{4-(4-fluorfenyl )-6-isopropyl-2-[ methy [(methylsiilfonyl)aminolpyrimidin-5-yl}-(3/ř,5_lS)-3,5-dihydroxyhept-6-enové kyseliny s rentgenovým práškovým difrakčním záznamem měřeným při vlnové délce 0,15406 nm se specifickými píky

25 při 2-theta = 8,6, 15,9, 16,9, 18,4, 18,7, 19,7, 20,8, 23,3, 23,8 a 25,8°.
4. Krystalická tris(hydroxymethyl)methylamoniová sůl (£)-7-{4-(4—fluorfenyl)-6-isopropyl2-[methyl(methylsulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl}-(3/ř,5.S)-3,5-dihydroxyhept-6-enové kyseliny s rentgenovým práškovým difrakčním záznamem měřeným při vlnové délce 0,15406 nm se

30 specifickými píky pri 2-theta = 7,9, 8,5, 10,2, 16,7, 18,4, 19,3, 19,8,20,2, 21,5 a 24,9°.
5. Krystalická benzylamoniová sůl (£)-7-{4-(4-fluorfenyl)-6-isopropyl-2-[methyl(methyl· sul fonyl )aminoJpyrimÍdin-5-yl} -(3 R, 55)-3,5-d i hy droxy hept-6-enové kyseliny s rentgenovým práškovým difrakčním záznamem měřeným pri vlnové délce 0,15406 nm se specifickými píky

35 při 2-theta = 6,1,6,7, 16,8, 17,6, 18,1, 19,3, 21,1,21,9, 23,0 a 26,8°.
6. Krystalická 4-methoxybenzylamoniová sůl (£)-7-{4-(4-fluúrfenyl)-6-isopropyl-2[methyl(methylsulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl}-(3/ř, 55)-3,5-d i hydroxyhept-6-enové kyseliny s rentgenovým práškovým difrakčním záznamem měřeným při vlnové délce 0,15406 nm se

40 specifickými píky při 2-theta = 14,2, 15,1, 17,5, 18,8, 19,7, 20,1,20,7, 21,5,23,7 a 24,5°.
7. Způsob výroby krystalické soli podle kteréhokoliv z nároků 1 až 6, vyznačující se tím, že se přidá vhodný amin nebo báze k roztoku (£)-7-{4-{4_flt»orfenyl)-6-Ísopropyl-2[methyl(methylsulfonyl)amino]pyrimidin-5-yl}-(3/č55)-3,5-dihydroxyhept-6-enové kyseliny

45 v acetonitrilu nebo ethylacetátu.
8. Farmaceutická kompozice, vyznačující se tím, že obsahuje krystalickou sůl sloučeniny (£)-7-{4_(4-fluorfenyl)-6-isopropy[-2-[methyl(methylsulfonyí)amino]pyrimidin5—yl}—(3/ř, 55)-3,5-d i hydroxy hept-6-cnové kyseliny, která je nárokovaná v kterémkoli z nároků

50 1 až 6, ve směsi s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo nosičem.