CZ301376B6 - Steroidní deriváty s androgenním úcinkem - Google Patents

Abstract

Steroidy obecného vzorce I, ve kterém mají jednotlivé symboly specifický význam, charakterizované prítomností 14.beta.,15.beta.-cyklopropanového kruhu a 17.alfa.-hydroxymethylové skupiny. Temto steroidum je spolecná androgenní aktivita. Mohou být použity pro výrobu prostredku pro samcí antikoncepci a pro výrobu farmaceutického prostredku pro lécení nedostatku androgenu. Dále je popsán kit s obsahem slouceniny obecného vzorce I.

Description

Steroidní deriváty s androgenním účinkem

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká steroidních sloučenin obsahujících cyklopropanový knih, kde tento kruh zahrnuje atomy 14 a 15 steroidní kostry. Vynález se zvláště zabývá těmito steroidními sloučeninami jako látkami s androgenními účinky.

io

Dosavadní stav techniky

Steroidy obsahující výše uvedený cyklopropanový kruh byly popsány v EP 768 316, který se týká ženské antikoncepce a hormonální terapie proti endometrióze nebo obtížím při přechodu.

Popisuje se, že tyto steroidy mají progestagenní aktivitu a jako příklady se uvádějí 14α,15αinethy len-estra-4,9-dien-3-on-l 7a-ol a 3-oxo-14β, 15 β-methylenestra-4,9-dien-15 β-ν 1-(Nfenyl)karbamát. Z uvedeného popisu není možno odvodit ani účinnost, ani aktivity k žádným jiným receptorům těchto progestagenů.

V nepředu veřej něné patentové přihlášce PCT/DE99/01795 (zveřejněné 29. prosince 1999 jako

WO 99/67276) byla popsána skupina 14,15-cykIopropylsteroidů, mezi které patří sloučeniny substituované 17p-hydroxy.

Další nepreduverejněnou patentovou přihláškou je WO 00/53619, kde se popisuje skupina andro25 genních steroidů s konfigurací 14β,17α, viz (14β,17α)-17-(hydΓoxymethyl)steroidy.

Podstata vynálezu

Předkládaný vynález nyní poskytuje novou skupinu steroidů obecného typu uvedeného výše, které mají neočekávané androgenní účinky. Na rozdíl od progestagenů popsaných v oboru, uspokojují androgeny podle předkládaného vynálezu - včetně velmi účinných látek - mj. požadavky, že cyklopropanový kruh je β-orientovanv, a že na atomu uhlíku 17 je přítomna hydroxymethylová skupina, kteráje α-orientovaná. Důsledkem je, že steroidy podle vynálezu mají konfi35 guraci 14β na rozdíl od přírodních steroidních hormonů, jako je testosteron a estrádiol, které mají konfiguraci 14α, 17β.

Steroidy podle vynálezu mají strukturní vzorec I

kde

R, je O, (H,H), (H,OR), NOR, kde R je atom vodíku, (C,^)-alkyl, (C_r6)-acyl; R2 je atom vodíku, nebo alky 1;

Rj je atom vodíku; nebo R₃ je (C i_₆)-alkyl, (C^j-alkenyl, nebo (C₂^)-alkÍny 1, kde každá z těchto skupin je popřípadě substituovaná atomem halogenu;

R4 je atom vodíku, (C]_₆)-alkyl, nebo (C₂ -alkenvl;

R₅ je (C|^)~alkyl;

R„ je atom vodíku, halogen, nebo (C1-4)—alkyl;

R₇ je atom vodíku, nebo (C^^-alkyl;

Rg je atom vodíku, hydroxy, (Ci^)-alkoxy, halogen, nebo (C alkyl;

R₉ a R,_o jsou nezávisle atom vodíku; nebo R₉ a R,_o jsou nezávisle (Ci-6>—·alkyl, (C_{2 6})-alkenyL (C₃ ^,)-cykloalkyl, (C₅_₆)-cykloalkenyl, nebo (C_{2 6})-alkinyl, kde každá z těchto skupin je popřípadě substituovaná skupinou (C_M)-alkoxy, nebo halogen;

Rh je atom vodíku, SO₃H, (Ci-nj-acyl; a tečkované čáry znamenají případné vazby zvolené z Δ⁴, Δ^5(Κ1), nebo Δ¹¹ dvojné vazby nebo

Δ^4,9 nebo Δ^4,11 dienového systému.

Vynález se netýká pouze steroidů, které vyhovují strukturnímu vzorci l, ale také jejich farmaceuticky přijatelných solí nebo esterů a jejich prekurzorů,

Termín (C|.₆)-alkyl, jak se užívá v definici vzorce I, znamená rozvětvenou nebo nerozvětvenou alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, jako je methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, terciární butyl, pentyl a hexyl. Podobně termín (C_t 4)—alkyl znamená alkylovou skupinu s l až 4 atomy uhlíku. Výhodné alkylové skupiny mají 1 až 4 atomy uhlíku a nejvýhodnější alkylové skuw piny jsou methyl a ethyl.

Termín (C_{2 j6})-alkenyl znamená rozvětvenou nebo nerozvětvenou alkenylovou skupinu obsahující alespoň jednu dvojnou vazbu a 2 až 6 atomů uhlíku. Výhodné alkenylové skupiny mají 2 až 4 atomy uhlíku, jako je vinyl a propenyl.

Termín (C₂_₆)~alkinyl znamená rozvětvenou nebo nerozvětvenou alkinylovou skupinu obsahující alespoň jednu trojnou vazbu a 2 až 6 atomů uhlíku. Výhodné alkinylové skupiny mají 2 až 4 atomy uhlíku, jako je ethinyl a propinyl,

Termín (C_{3 6})-cykloalkyl znamená cykloalkanový kruh s 3 až 6 atomy uhlíku, jako je cyklopropan, cyklobutan, cyklopentan a cyklohexan.

Termín (C_}.₆)-cykloalkenyl znamená cykloalkenový kruh obsahující alespoň jednu dvojnou vazbu a 5 nebo 6 atomů uhlíku.

Termín (Ci__ó)-alkoxy znamená rozvětvenou nebo nerozvětvenou alkyloxylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, jako je methyloxy, ethyloxy, propyloxy, isopropyloxy, butyloxy, isobutyloxy, terciární butyloxy, pentyloxy a hexyloxy. Podobně termín (C_M)-alkoxy znamená rozvětvenou nebo nerozvětvenou skupinu alkyloxy s 1 až 4 atomy uhlíku. Výhodné skupiny alkyloxy mají

1 až 4 atomy uhlíku, a nej výhodnější je methyloxy.

Termín (C,_₆)-acyl znamená acylovou skupinu odvozenou od karboxylové kyseliny s 1 až 6 atomy uhlíku, jako formyl, acetyl, propanoyl, butyryl, 2methyl propanoyl, pentanoyl, pivaloyl a hexanoyl. Podobně termín (C_{( 15})—acy I znamená acylovou skupinu odvozenou od karboxylové kyseliny s 1 až 15 atomy uhlíku. Do definice skupin (€[_<,> acyl nebo (Ci__]5)-acyl jsou zahrnuty také acylové skupiny odvozené od dikarboxylových kyselin, jako hemimaloyl, hemisukcinoyl, hemiglutaroyl atd.

Termín halogen znamená fluor, chlor, brom nebo jod. Jestliže je halogen substituent na alkylové skupině jako v definici R₃, R^, Rg, R$ a R]₀, výhodné jsou Cl a F, přičemž nej výhodnější je F.

Steroidní deriváty 14p,15p-methylen-17a-methanolu podle předkládaného vynálezu mají přirozené konfigurace 5α,8β,9α,10β a 13β. Konfigurace na C-17 je 17a. Sloučeniny podle vynálezu mohou obsahovat také jeden nebo více dalších chirálntch atomů uhlíku. Mohou být proto získány io jako čistý diastereomer nebo jako směs diastereomerů. Způsoby získávání čistých díastereomerů jsou dobře známé v oboru, například krystalizace nebo chromatografie.

Pro terapeutické použití jsou vhodné takové soli sloučenin vzorce I, ve kterých je protiiont farmaceuticky přijatelný. Použity však mohou být také soli kyselin vzorce 1, například při výrobě nebo čištění farmaceuticky přijatelných sloučenin. Do rámce předkládaného vynálezu jsou zahrnuty všechny soli, ať už jsou farmaceuticky přijatelné nebo nejsou. Příklady solí kyselin podle vynálezu jsou minerální soli jako je sodná sůl, draselná sůl, a soli odvozené od organických bází jako amoniak, imidazol, ethylendiamin, triethylamin apod.

io Sloučeniny podle vynálezu popisované výše mají obecně neočekávaný androgenní účinek. Androgenní aktivita může být měřena různými způsoby. Účinnost androgenů může být tedy zjišťována in vitro použitím cytoplasmatického androgenního receptoru z lidských buněk tumoru mléčné žlázy (buněčná linie MCF-7); viz Bergink, E. W. a další, Comparison of the receptor binding properties of nandrolone and testosterone under in vitro and in vivo conditions,

J. Steroid Biochem, 22, 831 - 836 (1985). Je také možné používat buňky vaječníků čínského křečka (CHO) transfekované lidským androgenním receptorem (doba inkubace 16 hod., teplota 4 °C) a provádět porovnání s afinitou 5a-dihydrotestosteronu [způsobem popsaným v Berginkg, E. W. a další, J. Steroid Biochem, 19, 1563 - 1570 (1983)]. Je možno měřit transaktivační androgenní aktivitu sloučenin podle vynálezu, například v kombinaci s myším tumorovým virem prsní žlázy (MMTV) a genem pro lucíferázový receptor (doba inkubace 16 hod., teplota 37 ^QC) a provádět porovnání s aktivitou 5a-dihydrotestosteronu [způsobem popsaným v Schoonen, W. G. E. J. a další, Analyt. Biochem, 261, 222 - 224 (1998)]. Pro zjištění účinnosti androgenů in vivo je možno použít klasický Hershbergerův test. Při tomto testu se testují androgenní (přírůstek hmotnosti prostaty) a anabolické aktivity [zvýšení musculus levator ani (MLA)] sloučeniny u nedospě35 lých kastrovaných krys po denním podávání po dobu 7 dnů; víz Hershberger, L. G. a další, Myotrophic activity of 19-Nortestosterone and other steroids determined by modified levator ani muscle method, Proceedings of the society for experimental biology and medicíně 83, 175 - 180 (1953). Navíc může být testován účinek androgenní sloučeniny na potlačení LH u dospělých kastrovaných krys metodou podle Kumar, N. a další, The biological activity of 1--cilpha-methyl-40 19-nortestosterone is not amplified in male reproductive tract as is that of testosterone, Endrocrinology 130, 3677 - 3683 (1992).

Výhodné jsou takové sloučeniny podle vynálezu, které mají relativně vysokou androgenní aktivitu. Výhodné sloučeniny podle vynálezu jsou takové sloučeniny obecného vzorce 1 uvede45 ného výše, kde Ri je oxo, a tečkované čáry znamenají Δ⁴ dvojnou vazbu. Výhodnější jsou sloučeniny, kde R3 je 7a-methyl. Zvláště výhodná sloučenina podle vynálezu je (7α,14β,15β,17α)-17(hydroxymethyl)-7-methy 1-14,15-methylenestr—4-en-3-on.

Jako androgenní hormony mohou být steroidy podle předkládaného vynálezu použity mj. při mužské antikoncepci a mužské substituční hormonální terapii (HRT). Tak například mužská antikoncepce může zahrnovat režim podávání hormonu, ve kterém progestagen slouží pro dosažení antikoncepčního účinku a androgen doplňuje sníženou hladinu testosteronu. Další možností je, že mužská antikoncepce se provádí se samotným androgenním hormonem. Androgeny mohou být také použity pro doplnění androgenů při částečném deficitu androgenů u stárnoucích mužů.

-3CZ 301376 B6

Kromě použití u mužů mohou být androgeny podle vynálezu použity také u žen, například při substituční terapií androgenů u žen po menopauze nebo u dětí deficientních na androgeny.

Předkládaný vynález se také týká farmaceutického prostředku obsahujícího steroidní sloučeninu podle vynálezu ve směsi s farmaceuticky přijatelnou pomocnou látkou, jako se např. popisuje ve standardní referenční publikaci Gennaro a další, Remmington 's Pharmaceutical Sciences (18, ed., Mack Publishíng Company, 1990, viz zvláště část 8: Pharmaceutical Preparations and Their Manufacture). Směs steroidních sloučenin podle vynálezu a farmaceuticky přijatelné pomocné látky může být stlačena do pevných dávkových jednotek, jako jsou pilulky a tablety, nebo může io být zpracována do kapslí nebo Čípků. Pomocí farmaceuticky přijatelných kapalin mohou být sloučeniny aplikovány také jako injekční preparát ve formě roztoku, suspenze, emulze nebo ve formě spreje, například nosního spreje. Pro výrobu dávkových jednotek, například tablet, se předpokládá použití běžných aditiv, jako jsou plniva, barviva, polymemí pojivá apod. Obecně může být použito jakékoli farmaceuticky přijatelné aditivum, které neinterferuje s funkcí účinných sloučenin, Steroidní sloučeniny podle vynálezu mohou být také zahrnuty v implantátu, vaginálním kroužku, náplasti, gelu a jakémkoli jiném preparátu s prodlouženým uvolňováním.

Vhodné nosiče, se kterými mohou být prostředky podávány, zahrnují laktózu, škrob, deriváty celulózy apod., nebo jejich směsi použité ve vhodných množstvích.

Vynález se dále týká použití steroidní sloučeniny podle vynálezu pro výrobu farmaceutického prostředku pro léčení deficience androgenů, jako například při mužské (male) nebo ženské (female) hormonální substituční terapii (HRT). Vynález také zahrnuje způsob léčení v oboru mužské nebo ženské HRT, který zahrnuje podávání pacientovi nebo pacientce trpícím nedostat25 kem androgenů sloučeniny popsané výše (ve vhodné farmaceutické dávkové formě).

Vynález se dále týká použití steroidní sloučeniny podle vynálezu pro výrobu farmaceutického prostředku s antikoncepční účinností (který se také v oboru označuje jako „antikoncepční prostředek“). Vynález se tedy také týká lékařské indikace antikoncepce, tj. způsobu antikoncepce zahr30 nuj ícího podávání subjektu samčího pohlaví, s výhodou člověku mužského pohlaví, sloučeniny popsané výše (ve vhodné farmaceutické dávkové formě) v kombinační terapii s progestagenem nebo bez ní.

Androgeny podle vynálezu mohou být také použity v kitu pro samčí (mužskou, male) antíkon35 cepe i. Ačkoli tento kit může obsahovat pouze jeden nebo více androgenů, je výhodné, jestliže obsahuje prostředek pro podávání progestagenu a prostředek pro podávání androgenu.

Tímto naposledy uvedeným prostředkem je farmaceutický prostředek obsahující sloučeninu podle vynálezu jak se popisuje v této přihlášce a farmaceuticky přijatelný nosič.

Vynález se také týká způsobu léčení zahrnujícího podávání samčím nebo samičím subjektům (zvláště mužům nebo ženám) v případě potřeby doplnění androgenů terapeuticky účinného množství steroidního derivátu 14p,15p-methy1en-17ct-methanolu popisovaného výše. Tento způsob nezávisí na tom, zda potřeba doplnění androgenů je důsledkem mužské antikoncepce působením steří lizačního prostředku jako je progestagen.

Vynález se dále týká způsobu antikoncepce, který zahrnuje podávání steroidního derivátu 14p,15p-methy!en-17a-methanolu popisovaného výše plodnému samci, zvláště muži, v množství a režimu dostačujícím pro dosažení antikoncepčního účinku samotné uvedené sloučeniny.

Alternativně zahrnuje způsob antikoncepce podle předkládaného vynálezu podávání antikoncepčně účinné kombinace sterilizační látky jako je progestagen a steroidního derivátu 14β,15βmethylen-17a~methanolu popisovaného výše plodnému samci, zvláště muži.

Sloučeniny podle vynálezu mohou být vyráběny různými způsoby známými v oboru organické chemie obecně, a zvláště v oboru chemie steroidních sloučenin, viz například: Fried, J. a další,

-4CZ 301376 B6

Organic Reactions in Steroid Chemistry, díly I a II, Van Nostrand Reinhold Company, New York, 1972.

Nezbytné je zavedení, 14p,15p-methylenové skupiny a (substituované) 17a-(hydroxymethylo5 vé) skupiny do steroidního jádra. Vhodnou výchozí látkou pro přípravu sloučenin vzorce I, kde

Ri je oxo; R;, R7, R# a Rn jsou atom vodíku; R₃ a R4 jsou atom vodíku nebo (C₁₆)—alkyl; R_s je methyl; R«, R₉ a R10 mají výše uvedený význam; a tečkované čáry označují Δ⁴ dvojnou vazbu, je například sloučenina obecného vzorce II, kde R₃ a R4 jsou atom vodíku nebo (C^j-alkyl, jejichž syntéza je známá z literatury, nebo které mohou být připraveny použitím standardních metod [viz např, US 3407217 (1965; R₃ = H, R4 = H), FR 1434172 (1966; R₃ = CH₃, R4 = H), DE 2539300 (1976; R₃ = H, R4 - CH₃), WO 99/26962 (R₃ = CH₃, R4 = CH₃)].

Možná syntéza sloučenin podle vynálezu začíná převedením sloučenin vzorce II na Áⁱ⁴-sloučeniny vzorce III s použitím metod popsaných ve WO 00/53619. Adice vhodného karbenového meziproduktu na Δ¹⁴ dvojnou vazbu vede kderivátu (14p,15p,17p)-3-methoxy14,15-methylenestra-l ,3,5( 10)~trien-17-olu [Helquist, P., Comprehensive Organic Synthesis, díl 4, str. 951, Pergamon Press, Oxford, New York (1991); Nair, V., tamtéž, díl 4, str. 999 (1991); Larock, R, C. Cmprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, lne., 1989, str. 71]. Oxidace skupiny 17-hydroxy poskytne derivát (14p,15p)-3-methoxy-14,15-methylenestra20 1,3,5( 10)-trien-17-on (způsob provádění oxidací viz Hudlicky, M., Oxidations in Organic

Chemistry, ACS Monograph 186, Washington, DC, 1990), který slouží jako výchozí materiál pro zavedení 17-karbinolové části.

Konverze skupiny 17-oxo na I74CH2OH) může být provedena několika způsoby:

(a) 1: Wittigovou nebo Petersonovou reakcí na derivát 17-methylenestra-l,3,5(1 Oj-trien [Maercker, A., Org. Reactions 14, str. 270, Wiley, New York, 1965; Ager, D. J., Org. Reactions 38, str, 1, Wiley, New York, 1990]; 2: hydroborací, například použitím 9-BBN, disiamylboranu nebo thexylboranu [viz např. Zweifel, G. a další, Org. Reactionss _T3, str. 1, Wiley, New York,

1963], za vytvoření derivátu (17a)-estra-1,3,5(10)—trien—17—methanolu a/nebo odpovídajícího

17P-izomeru.

(b) 1: Převedením 17-ketonu na (17p)-spiroestra-l,3,5(10)-trien[17,2^ř]oxiran reakcí například s tnmethylsulfoniurnjodidem/w-BuLi [Corey, E. J. a další, J. Am. Chem. Soc., 87, 1353 (1965)];

2: Izomerací katalyzovanou Lewisovou kyselinou I7p-oxiranu na 17ct-formyl [Rickbom, B.,

Comprehensive Organic Synthesis, díl 3, str. 733, Pergamon Press, Oxford, New York (1991)]; 3; Redukcí skupiny Πα-formylu na 17a-(CH₂OH), (c) 1: Převedením 17-ketonu na 17-methylenovou sloučeninu; 2: Epoxidací například peroxy40 kyselinou jako je kyselina m-chlorperbenzoová, na (17 spiroestra— 1,3,5 (10)trien[ l7,2']oxiran;

3: Izomerací katalyzovanou Lewisovou kyselinou na 17a-formyl, jak bylo popsáno v části (b); 4: Redukcí skupiny 17a-formyl na 17a-(CH₂OH).

-5CZ 301376 Bó (d) 1: Převedením 17-ketonu na 15p-oxiran jak bylo popsáno v částí (b) a (c); 2; Redukcí katalyzovanou Lewisovou kyselinou na steroid 17-methanol (s použitím například NaBH_?CN/BF₃.Et₂O, viz: Tone, H. a další, Tetrahedron Lett., 28, 4569 (1987).

(e) 1: Reakcí 17-ketonu na 17-kyanosteroid s tosylmethy I-i soky ani dem [TosMIC, viz Bull, J. R., a další, Tetrahedron 31, 2151 (1975)]; 2: Redukcí kyanoskupiny na formyl diisobutylaluminium-hydridem; 3: Redukcí skupiny 17-formyl na 17-(CH₂OH).

ío (f) 1: Wittigovou kondenzací s (Ph)₃P=CHOMe; 2: Hydrolýzou získaného enoletheru; 3: Redukcí skupiny 17-formyl na 17~fCH₂OH).

(g) 1: Konverzí 17-ketonu na 17j3-oxiran, jak bylo popsáno v části (b) a (c); 2: Eliminací na derivát estra-l,3,5(10),16-tetraen-17-methanol; 3: Hydrogenací Δ¹⁶ dvojné vazby.

(h) 1: Konverzí 17-ketonu na odpovídající enoltriflát [viz např. Cacchi, S. a další, Tetrahedron Lett., 25, 4821 (1984)]; 2: Alkoxy karbony lácí naposledy uvedené sloučeniny katalizovanou paladiem na alkylestra-l,3,5( 10),16-tetraen-17-karboxylát [Cachi, S. a další, Tetrahedron Lett., 26, 1109 (1985)]; 3: Redukcí naposledy uvedené sloučeniny na odpovídající 17-methanolový derivát; 4: Hydrogenací Δ¹⁶ dvojné vazby.

(i) 1: Konverzí 17-ketonu na alky lestra-1,3,5( 10), 16-tetraen-17-karboxylát jako bylo popsáno v části (h); 2: 1,4-redukcí, například hydrogenací nebo lithiem nebo sodíkem v kapalném amoniaku na derivát alkylestra-l,3,5( 10)—tr i en-l 7-karboxylát; 3: Redukcí esteru na

17-(CH₂OH).

Některé z těchto metod (např. b, c) vedou k stereoselektivnímu vytvoření 17a-(CH₂OH) izomerů. Jiné (např. a) mohou poskytnout směsi, které je možno dělit chromatograficky nebo krystalizaci. Takto získané deriváty (14β, 15β, 17a)-3-methoxy-l 4,15 -methylenestra-1,3,5( 10)30 trien-17-methanolu se zpracují Birchovou redukcí a následnou hydrolýzou za poskytnutí derivátů (14p,15p,17a)-17-(hydroxymethyl)estr-^-en-3-onu podle vynálezu.

Případně je možno provést reakci (14β, 15β,17a)-3-methoxy-l 4,15-methylenestra-1,3,5( 10) trien-17-karboxaldehydu uvedeného výše s (organokovovou) sloučeninou vzorce R₉M, kde Rq má výše uvedený význam kromě atomu vodíku a M je Li, Na, K, MgX, ZnX, CeX₂, SiR₃ nebo SnR₃, za poskytnutí 17-(CHR₉OH) derivátu, který je obvykle směsí C-20 epimerů. Tato naposledy uvedená sloučenina může být po Birchově redukci oddělena a hydrolýza popsaná výše poskytne deriváty (14β,15p,17a)-l7-(CHR₉0H)-14,15-methy]enestr-4-en-3-onu podle vynálezu, kde skupina R₉ má výše uvedený význam kromě atomu vodíku.

Sloučenina (14β, 15 β, 17α)-17-(CHR₉OH)-3-methoxy-l 4,15-methylenestra-1,3,5( 10)-trien může být popřípadě oxidována za získání 20-ketonu, který potom může reagovat s (organokovovou) sloučeninou vzorce R₎₀M, kde R_t0 má výše uvedený význam kromě atomu vodíku a M má výše uvedený význam. V takovém případě poskytne Birchova redukce a hydrolýza 1745 (CRqRiqOH) deriváty podle vynálezu, kde R₉ a R_]0 mají výše uvedený význam kromě atomu vodíku.

20-keton může být popřípadě redukován reakcí s LíAIH₄, NaBH₄ nebo jinými redukčními činidly. V takovém případě se získají deriváty 17-(CHR₉OH) s převrácenou stereochemickou konfigurací na C-20. Epimerace na C-20 může být také provedena Mitsunobuovou reakcí [Dodge, J. A., a další, Bioorg. & Med. Chem. Lett,, 6, l (1996)], nebo působením methansulfonylchloridu nebo p-toluensulfonylchloridu s následnou reakcí skyslíkatým nukleoťílním činidlem [např. superoxidem draselným, viz Corey, E. J., a další, Tetrahedron Lett., 3183 (1975)].

-6CZ 301376 B6

Derivát (14β, 15β, 17a)-3-methoxy-14,15-methylenestra-2,5( 10)—dien— i 7-methanolu, tj. produkt získaný po Birchově redukci, může být popřípadě oxidován na odpovídající 17-karboxaldehyd. Reakce se sloučeninou vzorce R₉M jak bylo popsáno výše a hydrolýza poskytne

17-(CHR₉OH) deriváty podle vynálezu, jak bylo popsáno výše. Tato reakční sekvence umožní zavedení substituentů R₉, a analogicky R_w, které by nevydržely Birchovu redukci. Popřípadě by mohl být také 3-methoxy-2,5( 10)-dien převeden na stabilnější systém, např. 3,3-dimethoxyestr5(10)enový derivát nebo estr-4-en-3-on cyklický l,2-ethandiyl(dithio)acetalový derivát před oxidací a reakcí s R₉M, apod.

Sloučeniny vzorce I se substituenty v polohách C-3, C-4, C-7, C-l 1, C-13, C-T, C— 16 a C-l 7 jinými než substituenty popsanými v definici vzorce II, nebo sloučeniny se skupinou Rn odlišnou od atomu vodíku, nebo sloučeniny s dvojnou vazbou ve steroidním jádře nebo jinak nenasycenými než Δ⁴ dvojnou vazbou, mohou být připraveny následujícím způsobem.

Sloučeniny podle vynálezu, kde Ri je (H,H), (H,OR), NOR, a R je H, (C_t__ň)—alkyl, nebo (C|_6)-acyl, mohou být připraveny ze sloučenin vzorce I, ve kterých R] je oxo.

Sloučeniny, ve kterých R₂ je (C_l4j)-alkyl, se získají ze sloučenin vzorce I, kde R? je atom vodíku.

Sloučeniny se substituenty R₃ odlišnými od atomu vodíku mohou být připraveny např. z(7a,l5fí)-7-ethenyI-l7-hydroxyestr-4-en-3-onu, který může být připraven l,6-adicí vinyllithía nebo vinylmagnesiové sloučeniny katalyzovanou měďnými ionty, na například (Ι7β)-17(acety!oxy)estra-4,6-dien-3-on [Syntex, DE U43199 (1963)]. Převedení na (7a)-7-ethenyl-325 methoxyestra-l,3,5(l0)trien-l7-on a vytvoření funkcionalizovaného a/nebo nenasyceného vedlejšího řetězce v poloze C-7 ze skupiny 7-ethenyl se provedou standardními způsoby a zavedení skupiny I4p,l5p-methylen a vedlejšího řetězce v poloze C-17 se provedou podle popisu uvedeného výše. Přesné pořadí reakčních kroků nutných pro tyto operace a pro Birchovu redukci a hydrolýzu získaného estra-2,5(l0)-díenu je závislé na běžně používaných metodách při strategii syntézy.

Sloučeniny se substituenty R4 jinými než atom vodíku nebo (C_t^>-alkyl mohou být získány například zcyklického 1.2-ethandiylacetaIu (11β)-1 l-(hydroxymethyl)-3-methoxyestra-l,3,5(10)—trien—17-onu [van den Broek, A. J., a další, Steroids 30, 481 (1977)], nebo 17-(l,2-ethan35 diylacetalu) 3-methoxyestra-l,3,5(10)-trien-l 1,17-dionu [van den Broek, A. J,, a další, Reci. Trav. Chim. Pays-Bas 94. 35 (1975)].

Sloučeniny, kde R₅ je např. ethyl, mohou být vyrobeny např. z 13-ethylgon-4-en-3,17-dionu [Brito, M., a další, Synth. Comm., 26, 623 (1996)].

16-Substituované sloučeniny mohou být získány alkylací v poloze C-l 6 derivátu (14β, 15β)-3methoxy-14,15-methylenestra-l ,3,5( 10)-trien-l 7-onu.

17p-Alkylované sloučeniny vzorce I mohou např. být získány alkylací alkyl-(14β, 15β,17α)-345 methoxy-14,15-methylenestra-l,3,5( 10)-trien-17-karboxylátu. Sloučeniny vzorce I, kde R₈ je hydroxy, (C, ₆)-alkoxy. nebo halogen, mohou být vyrobeny z (17β)—spiroestra—1,3,5(10)-trien[17,2']oxiranu.

Sloučeniny podle vynálezu, kde R_)t je SO₃H nebo (Ci_j₅)—acyl, se získávají ze sloučenin vzorce I, kde Rn je atom vodíku.

Sloučeniny podle vynálezu, které jsou nenasycené ve steroidním jádře, se vyrábějí ze sloučenin Δ⁴, kde Ri je oxo.

-7CZ 301376 B6

Sloučeniny podle vynálezu s dvojnou vazbou Δ^5(Ι0) nebo Δ⁴’⁹ dienovým systémem, se vyrábějí ζΔ²'^(,0) díenů získaných po Birchově redukci. Sloučeniny s Δ^η dvojnou vazbou mohou byl připraveny např. zestra-4,1 l-dien-3,17-dionu [Broess, A. I. A., a další, Steroids 57, 514 (1992)].

Vynález bude dále vysvětlen na následujících příkladech.

Příklady provedeni vynálezu to

Příklad 1 (7α, 14β,15β, 17a)~l 7-(Hydroxymethyl)-7-methyl-14,15-methylenestr-4-en-3on

(i) Roztok (7a,17p)~3~methoxy-7-methylestra-l,3,5(10),14-tetraen-17-olu [Segaloff, A„ a další, Steroids 22, 99 (1973); 25,4 g] a dijodmethanu (27 ml) v suchém dichlormethanu (500 ml) byl ochlazen na 0°C. Byl přidán roztok diethylzinku v hexanu (15 % hmotnostních, 300 ml) v průběhu 1 hod a reakční směs byla míchána 21 hod. při teplotě laboratoře. Byl přidán led a směs byla vlita do nasyceného vodného roztoku chloridu amonného. Produkt byl extrahován do diethyletheru; spojené organické fáze byly promyty roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Chromatografie na koloně poskytla (7α, 14β, 15 β,17p)-3-methoxy~7-methyl-14,15-methylenestra-l ,3,5( 10)~trien-17~ol (6,50 g).

(ii) Roztok produktu získaného v předcházejícím kroku (6,50 g) v acetonu (325 ml), ochlazený na 5 °C, byl smísen s Jonesovým činidlem (8M, 11,9 ml). Po 15 min míchání při 5 až 10 °C byl přidán 2-propanol a směs byla zfiltrována. Filtrát byl zakoncentrován; byla přidána voda a produkt byl extrahován do ethylacetátu. Spojené organické fáze byly promyty roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku, za poskytnutí (7α,14β,15β)~ .w 3-methoxy-7-methyl-l 4,15-methylenestra-l ,3,5( 10>-trienl 7-onu (6,57 g). Produkt byl použit v následujícím kroku bez dalšího čištění.

(iii) Terc-butoxid draselný (6,1 g) byl po částech přidán k roztoku produktu získaného v předcházejícím kroku (3,81 g), ve směsi suchého tetrahydrofuranu (26 ml) a suchého dimethy 135 sulfoxidu (65 ml), obsahující trimethylsulfoniumjodid (8,4 g). Reakční směs byla míchána při teplotě laboratoře 3 hod. a potom byla vlita do vodného roztoku chloridu amonného. Produkt byl extrahován do ethylacetátu; spojené organické fáze byly promyty roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku, za získání (7α,14β,15β,17β)-3-ηΐ6ΐ1ιoxy-7-methyl-14,15-methylenspíroestra-l,3,5(10)-trien[17,2']oxiranu (3,76 g). Produkt byl použit v následujícím kroku bez dalšího Čištění.

(iv) Roztok produktu získaného v předcházejícím kroku (3,76 g) v 1.4-dioxanu (113 m!) byl smísen svodným roztokem kyseliny chloristé (70%, 1,80 ml). Reakční směs byla míchána při teplotě laboratoře 2 hod. a potom byla smíšena s další částí kyseliny chloristé (0,36 ml). Směs byla míchána další 2 hod. a potom byla vlita do nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Produkt byl extrahován do ethylacetátu; spojené organické fáze byly promyty roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku, za poskytnutí (7α,14β,-8CZ 301376 B6 β, 17a)-3-methoxy-7-methyl-l 4,15-methylenestra-1,3,5( 10)-trien-17-karboxaldehydu (4,11 g). Produkt byl použit v následujícím kroku bez dalšího čištění.

(v) Roztok produktu získaného v předcházejícím kroku (3,7 g) v suchém tetrahydrofuranu (24 ml) byl po kapkách přidán do ledem chlazené suspenze lithiumaluminiumhydridu (1,90 g) v tetrahydrofuranu (24 ml). Po 1 hod. míchání byla reakce ukončena přidáním nasyceného vodného roztoku stranu sodného. Byl přidán ethylacetát a směs byla zfiltrována přes dicalit. Organická fáze byla oddělena od vodné fáze a promyta roztokem soli, sušena nad síranem sodným a zakoncentrována za sníženého tlaku. Chromatografie na koloně poskytla (7α,14β,15β,io 17a)-3-methoxy-7-methyl-l 4,15-methylenestra-1,3,5( 10)-trien-17-methanol (1,30 g).

(vi) Produkt získaný v přecházejícím kroku (1,30 g), v suchém tetrahydrofuranu (27 ml), byl přidán k roztoku lithia (0,82 g) v kapalném amoniaku (54 ml). Reakční směs byla míchána za varu pod zpětným chladičem 45 min. Byl přidán terc-butanol (2,7 ml) a směs byla míchána

30 min. Byl přidán ethanol a amoniak byl ponechán odpařit. Byla přidána voda a produkt byl extrahován do ethylacetátu. Spojené organické fáze byly promyty nasyceným vodným roztokem chloridu amonného a roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku, za poskytnutí (7α, 14β, 15β, 17a)-3-methoxy-7-methyl-l 4,15-methylenestra-2,5( 10)—dlen—1 7-methanolu (1,17 g). Produkt byl použit v následujícím kroku bez dalšího čištění.

(vii) Roztok produktu získaného v předcházejícím kroku (1,17 g) v acetonu (23 ml) byl smísen s kyselinou chlorovodíkovou (6M, 2 ml). Po 1,5 hod. míchání při teplotě laboratoře byl přidán nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného a produkt byl extrahován do ethylacetátu. Spojené organické fáze byly promyty roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentro25 vány za sníženého tlaku. Chromatografie na koloně poskytla (7α,Ι4β,15β,17α)-17-(Η>'άΓθχνmethyl)-7-methyl-14,15-methylenestr-4-en-3-on (0,40 g).

Teplota tání 137 až 140 °C, [a]_D ²⁰ = +73,0° (c = 1,00, dioxan), *H NMR (CDC1₃) S 5,80 (bs, 1H), 3,69 (m, IH), 3,50 (m, IH), 1,09 (s, 3H), 0,62 (d, 3H, J - 7,1 Hz), 0,47 (dd, IH, J = 8,3 a 5,1 Hz),

0,28 (dd, IH, J = 5,1 a3,5 Hz).

Příklad 2 (7α, 14β,15β,17a)-l 7-(Hydroxymethyl}_7-methyl-14,15-methylenestr-5( 10}-en-3-on

Roztok (7a, 14β, 15β, 17a)-3-methoxy-7-methyl-14,15-methylenestra-2,5( 10)-dien-17-methanolu (příklad 1, krok vi; 7,38 g) ve směsi methanolu (68 ml) a tetrahydrofuranu (48 ml) byl smísen s roztokem kyseliny šťavelové (2,38 g) ve vodě (40 ml). Po 1 hod. míchání při teplotě laboratoře byla reakční směs vlita do nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a produkt byl extrahován do ethylacetátu. Spojené organické fáze byly promyty roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Chromatografie na koloně poskytla (7α, 14β, 15β, 17a)-17-(hydroxymethyl)-7-methyl-14,15-methylenestr-5( 10)-en-3-on (4,27 g). 'HNMR (CDC1₃) δ 3,69 (m, IH), 3,51 (t, IH, J- 9,0 Hz), 2,72 (bs, 2H), 2,46 (bs, 2H), 1,04 (s, 3H), 0,69 (d, 3H, J - 7,1 Hz), 0,48 (dd, IH, J - 8,3 a 5,1 Hz), 0,27 (dd, IH, J - 5,1 a 3,1 Hz).

-9CZ 301376 B6

Příklad 3 (7α, 14β,15 β, 17cc>— 17-(Hydroxymethyl)-7-methyl-14,15-methylenestra^í.9dien-3-on

Fenyltrimethylamoniumtribromid (1,01 g) byl přidán k roztoku (7a,14p,15p,I7a)-17-(hydroxymethyl)-7~methyl“14,l 5-methylenestr-5(10)-en-3-onu (příklad 2, 0,85 g) v suchém pyridinu (25 ml). Po 1,5 hod míchání pří teplotě laboratoře byla směs vlita do ledové vody a produkt byl extrahován do ethylacetátu. Spojené organické fáze byly promyty nasyceným vodným roztokem thiosíranu sodného a roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého io tlaku, Chromatografie na koloně poskytla (7a,14p,15p,l7a)-17“(hydroxymethyÍ)-7-methyl14,15-methylenestra-4,9^dien-3^)n (0,18 g). 'HNMR (CDC1₃) δ 5,68 (s, IH), 3,72 (m, IH), 3,60 (m, IH), 3,01 (bs, IH), 1,11 (s, 3H), 0,69 (d, 3H, J= 7,1 Hz), 0,52 (dd, IH, J= 8,3 a 5,5 Hz), 0,38 (dd, IH, J - 5,5 a 3,9 Hz).

Příklad 4 (7α, 14β, 15 β, 17a)-17-(Hydroxymethy lpt,7-dimethy 1-14,15-methy lenestr~4~en-3-on

(i) Roztok (7a,14p,15p,17a)-174hydroxymethyl)-7-methyl-14,15-methylenestr-4-en-3onu (příklad 1, 0,40 g) ve směsi formaldehydu (37 % hmotnostních roztoku ve vodě, 0,24 ml), triethylaminu (0,288 ml), thiofenolu (0,276 ml) a ethanolu (0,721 ml) byl míchán při teplotě laboratoře přes noc. Reakční směs byla vlita do vodného roztoku hydroxidu draselného (0,5M) a produkt byl extrahován do ethylacetátu. Spojené organické fáze byly promyty vodným rozto25 kem hydroxidu draselného (0,5M) a roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Chromatografie na koloně poskytla (7a,14p,15p,17a)-17-(hydroxymethvl)- 7 -methyl-4-[(fenylthio)methyl]-l 4,15-methylenestr-4-en-3-on (0,13 g).

(ii) Roztok produktu získaného v předcházejícím kroku (0,13 g) v acetonu (4,8 ml) byl smísen s Raneyovým niklem (suspenze v ethanolu, 0,5 ml) a směs byla zahřívána pod zpětným chladičem 45 min. Směs byla zfiltrována a filtrát byl zakoncentrován za sníženého tlaku. Chromatografie na koloně poskytla (7α,14β, 15β, 17a)-17-(hydroxymethyl>4,7-dimethyl-14,15-methylenestr-4-en-3-on (0,050 g). 'HNMR (CDC1₃) δ 3,69 (dt, část A systému AB, IH, J=10,6 a 5,1 Hz), 3,50 (ddd, část B systému AB, IH, J = 10,6, 8,3 a 4,7 Hz), 2,76 (dd, IH, J = 13,4 a 3,1 Hz), 1,78 (t, 3H, J= 1,2 Hz), 1,08 (s, 3H), 0,61 (d, 3H, J=7,l Hz), 0,47 (dd, IH, J = 8,3 a 5,1 Hz), 0,27 (dd, 1H,J = 5,1 a 3,5 Hz).

Příklad 5 (7α, 14β, 15β, 17a}~ 17-Ethy 1-17-( hydroxymethy lý-14,15-methy lenestr-4-en-3-on

-10CZ 301376 B6

(i) Chlortrimethylsilan (19 ml) byl přidán v průběhu 5 min k suspenzi (17a)_l7-hydroxy-19norpregna-4,6-dien-20-in-3-onu [Syntex S. A., GB 935116 (1958); 18,0 g] ve směsi dichlormethanu (300 ml) a pyridinu (25 ml), ochlazené na 0 °C. Po dvou hodinách míchání při 0 °C byla reakční směs vlita do nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Produkt byl extrahován do dichlormethanu; spojené organické fáze byly promyty vodou a roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku, za poskytnutí(l7a)-17-[(trÍmethylsilyl)oxyj-19-norpregna-4,6-dien-20-on-3-onu (22,3 g). Produkt byl použit v následujícím kroku bez dalšího čištění.

io (ii) Směs lithia (5,0 g) a suchého diethyletheru (200 ml) byla ochlazena na -30 °C. Po kapkách byl přidán bromethan (26,9 ml) a potom byl získaný roztok ethyl lithia převeden k suspenzi jodidu měďného (30,6 g) v suchém tetrahydrofuranu (140 ml), ochlazen na -30 °C. Získaný kuprátový roztok byl míchán 45 min, při této teplotě a po kapkách byl přidán produkt získaný v předcházejícím kroku (20,0 g), v suchém tetrahydrofuranu (160 ml). Po 45 min. míchání při -25 °C byl přidán chlortrimethylsilan (20 ml) a míchání pokračovalo dalších 30 min. Reakční směs byla vlita do nasyceného roztoku chloridu amonného a produkt byl extrahován do ethylacetátu. Spojené organické fáze byly promyty nasyceným vodným roztokem chloridu amonného a roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku, za poskyt20 nutí (7a,17a)-7-ethyl-3,17-bis[(trimethylsilyI)oxy]-19-norpregna-3,5-dien-20-inu (29,5 g). Produkt byl použit v následujícím kroku bez dalšího Čištění.

(iii) Roztok produktu získaného v předcházejícím kroku (29,5 g) v acetonu (400 ml) byl smísen s kyselinou chlorovodíkovou (2,3M, 20 ml). Po 1,5 hod. míchání při teplotě laboratoře byla reakční směs neutralizována nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Aceton byl odstraněn za sníženého tlaku a produkt byl extrahován do ethylacetátu. Spojené organické fáze byly promyty roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku, za poskytnutí (7a,17a)-7-ethyl-17-hydroxy-19-norpregn-4-en-20-in-3-onu (19,5 g). Produkt byl použit v následujícím kroku bez dalšího čištění.

(iv) Kyselina chlorovodíková (6M, 240 ml) byla po kapkách přidána do suspenze dicalitu (240 g) v methanolu (1200 ml). Po 20 min míchání při teplotě laboratoře byl dicalit oddělen filtrací a promýván vodou až do neutrality. Potom byl suspendován ve vodě (960 ml). Za důkladného míchání byl přidán trihydrát dusičnanu měďnatého (145 g), a opatrně byl přidán roztok uhličitanu sodného (72,2 g) ve vodě (360 ml). Po 30 min. míchání byl produkt oddělen filtrací a promýván vodou až do dosažení neutrální reakce. Produkt byl sušen při 80 °C za sníženého tlaku, za poskytnutí uhličitanu měďnatého na dicalitu (310 g). Směs produktu získaného postupem (iii) (19,5 g) a uhličitan měďnatý na dicalitu (70 g) v toluenu (330 ml) byla zahřívána pod zpětným chladičem 9 hod za odstraňování vody použitím Dean-Starkova nástavce. Reakční směs byla zfiltrována a zbytek byl důkladně promyt ethylacetátem, a filtrát byl zakoncentrován za sníženého tlaku. Chromatografie na koloně poskytla (7a)-7-ethylestM-en-3,17-dion (9,14 g).

(v) Roztok produktu získaného v předcházejícím kroku (9,14 g), bromidu měďnatého (13,6 g), a bromidu lithného (2,64 g) v acetonítrilu (285 ml) byl míchán při teplotě laboratoře 4 hod.

Reakční směs byla vlita do vody a produkt byl extrahován do ethylacetátu. Spojené organické fáze byly promyty nasyceným vodným roztokem chloridu amonného a roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Chromatografie na koloně poskytla (7a)-7-ethyl-3-hydroxyestra-l ,3,5( 10)—trien— 17-on (6,54 g).

-11 CZ 301376 B6 (vi) Směs produktu získaného v předcházejícím kroku (6,54 g), suchého uhličitanu draselného (18,6 g), jodmethanu (5,6 ml), a suchého dimethylformamidu (22 ml) byla míchána při teplotě laboratoře 3,5 hod. Reakční směs byla vlita do vody a produkt byl extrahován do ethylacetátu. Spojené organické fáze byly promyty vodou a nasyceným vodným roztokem chloridu amonného a roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku, za poskytnutí (7a)-7-ethyl-3-methoxyestra-l,3,5(lO)-trien-l 7-onu (6,77 g). Produkt byl použit v následujícím kroku bez dalšího čištění.

(vii) Roztok diisopropylaminu (6,15 ml) v suchém tetrahydrofuranu (70 ml) byl ochlazen na io 30 °C. Po kapkách bylo přidáno n-BuLi (1,6M roztok v hexanech, 27,5 ml) a míchání pokračovalo 30 min. Reakční směs byla ochlazena na -50 °C a po kapkách byl přidán produkt získaný v předcházejícím kroku (6,95 g) v suchém tetrahydrofuranu (100 ml). Míchání pokračovalo hod, Po ochlazení na -60 °C byl přidán chlortrimethylsilan (11,1 ml). Směs byla míchána 20 min potom byla smísena s roztokem feny Itri methylamon i um-tri bromidu (10,0 g) v suchém pyridinu (31 ml). Po 1 hod. míchání při -60 °C byla směs vlita do vody a produkt byl extrahován do ethylacetátu. Spojené organické fáze byly promyty nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Chromatografie na koloně poskytla (7a,16a)-l6-brom-7~ethyl-3-methoxyestral,3,5(10)-trien-17-on (8,75 g).

(viÍi)Směs produktu získaného v předcházejícím kroku (8,75 g), bromidu lithného (12,7 g) a uhličitanu lithného (10,9 g) v suchém dimethylformamidu (77 ml) byla vařena pod zpětným chladičem 3,25 h. Po ochlazení byla reakční směs vlita do vody a produkt byl extrahován do ethylacetátu. Spojené organické fáze byly promyty vodou a roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Chromatografie na koloně poskytla (7a)-7ethyl-3-methoxyestra-l,3,5(10),14-tetraen-17-on (4,31 g) a (7a,14p)-7-ethyl~3-methoxyestra-1,3,5( 10), 15-tetraen-l 7-on (1,0 g).

(ix) Roztok borohydrídu sodného (0,21 g) a hydroxidu sodného (0,44 g) v methanolu (50 ml) byla přikapána k roztoku (7a)-7-ethy 1-3-methoxyestra-1,3,5( 10), 14-tetraen-17-onu (4,31 g) v dichlormethanu (12 ml) a methanolu (20 ml), ochlazenému na 0°C, Reakční směs byla míchána 1,5 hod., reakce byla ukončena acetonem (4 ml), a potom byla vlita do nasyceného vodného roztoku chloridu amonného. Produkt byl extrahován do ethylacetátu; spojené organické fáze byly promyty roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku, za poskytnutí (7a)-7-ethy 1-3-methoxyestra-1,3,5(10),14-tetraen-17-olu (4,28 g). Produkt byl použit v následujícím kroku bez dalšího čištění.

(x) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části i) příkladu 1, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (24,27 g) převeden na (7a,14p,15p,17P)-7-ethyl-3-methoxy-14,1540 methylenestra-l,3,5(10)-trien-17-ol (12,82 g).

(xi) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části i i) příkladu 1, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (14,03 g) převeden na (7α, 14p, 15p, 17P)-7-ethyl-3-methoxy-l 4,15methylenestra-l,3,5(10)-trien-17-on (7,34 g).

(xii) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části iii) příkladu 1, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (6,80 g) převeden na (7a,14p,15p,17p)-7-ethyl-3-methoxy-14,15methylenspiroestra-1.3,5(l0)-trien[17,2']oxiran (7,24 g).

(xiii) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části i v) příkladu 1, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (7,24 g) převeden na (7a,14p,15p,17a)-7-ethyl-3-methoxy-14,15methylenestra-l,3,5(10)-trien-17-karboxaldehyd (8,48 g).

- 12CZ 301376 B6 (xiv) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části v) příkladu 1, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (8,48 g) převeden na (7a,14p,15p,17a)~7-ethyl-3-methoxy-14,15methylenestra-l,3,5(10)-trien-17-methanol (1,23 g).

(xv) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části ví) příkladu 1, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (1,23 g) převeden na (7α, 14β, 15β, 17a)-7-ethyl-3-methoxy-l4,15methylenestra-2,5(10)-dien-17-methanol (1,19 g).

(xvi) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části vii) příkladu 1, byl produkt io získaný v předcházej ícím kroku (1,19 g) převeden na (7α, 14β, 15β, 17a>-7-ethyl-l 7-(hydroxymethyl)-!4,15-methylenestr-4-en-3-on (0,40g). ‘H NMR (CDClj) 8 5,82(m, IH), 3,69 (dt, část A systému AB, IH, J = 10,6 a 5,5 Hz), 3,51 (ddd, část B systému AB, 1Η, J - 10,6, 7,9 a4,7 Hz), 1,09 (s, 3H), 0,79 (t, 3Η, J = 7,5 Hz), 0,45 (dd, IH, J = 8,3 a 5,5 Hz), 0,27 (dd, 1Η, J = 5,5 a 3,5 Hz).

Příklad 6 (7α, 14β, 15 β, 17a)-13—Ethyl— 17-(hydroxymethyl)-7-methyl-l 4,15-methy lengonM-en-3-on

(i) Tetrapropylamoniumperruthenát (1,3 g) byl přidán k roztoku (7α, 17p)-13-ethyl-3methoxy-7-methylgona-l,3,5(10ý-trien-17~olu [FRAD 87961 (1966); 19,5 g] a 4-methylmorfolin-.V-oxidu (21,5 g) v acetonu (513 ml). Po 30 min. míchání při teplotě laboratoře byla reakční směs zfdtrována pres dicalit a oxid křemičitý. Filtrát byl zakoncentrován za sníženého tlaku. Chromatografie na koloně poskytla surový produkt (7a)-13-ethyl-3-methoxy-7-methylgona-l,3,5(10)-trien-l7-on (11,0 g).

(ii) Kyselina p-toluensulfonová (0,41 g) byl přidána k roztoku produktu získaného v předcházejícím kroku (9,9 g), ve směsi ethylenglykolu (13,3 ml) a triethylorthoformiátu (23,9 ml). Reakční směs byla míchána při teplotě laboratoře 3 hod. Další kyselina p-toluensulfonová (0,41 g) byla přidána a míchání pokračovalo 2 h. Byla přidána voda a míchání pokračovalo další 1 h. Produkt byl extrahován do ethylacetátu; spojené organické fáze byly promyty nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a roztokem solí, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku, za poskytnutí cyklického 1,2-ethandiylacetalu (7cc)—13—ethyl—3— methoxy-7-methylgona-l,3,5(10)-trien-17-onu a výchozího materiálu (10,5 g, poměr 1:1). Postup byl opakován s cílem dosáhnout úplné přeměny výchozího materiálu. Produkt (9,8 g) byl použit v následujícím kroku bez dalšího čištění.

(iii) Fenyltrimethylamoniumtribromid (8,25 g) byl přidán k roztoku produktu získaného v předcházejícím kroku (9,80 g) v suchém tetrahydrofuranu (55 ml). Po 1 h míchání byl přidán další fenyltrimethylamoniumtribromid (4,12 g) a míchání pokračovalo další 1 hod, Reakční směs byla vlita do nasyceného roztoku thiosíranu sodného. Produkt byl extrahován do ethylacetátu; spojené organické fáze byly promyty vodou a roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku, za poskytnutí cyklického 1,2-ethandiylacetalu (7a, 16a)45 16-brom-13-ethyl-3-methoxy-7-methylgona-l ,3,5( 10)—trien— 17-onu (14,5 g). Produkt byl použit v následujícím kroku bez dalšího čištění.

-13CZ 301376 B6 (iv) Roztok produktu získaného v předcházejícím kroku (14,5 g) v suchém dimethylsulfoxidu (55 ml) byl smísen s /erc-butoxidem draselným (12,4 g) a Reakční směs byla míchána při teplotě laboratoře 1,5 h. Byl přidán další /erc-butoxid draselný (12,4 g) a reakční směs byla míchána další 3 h při 40 °C. Směs byla vlita do nasyceného vodného roztoku chloridu amonného a pro5 dukt byl extrahován do ethylacetátu. Spojené organické fáze byly promyty vodou a roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Chromatografie na koloně poskytla cyklický 1,2-ethandiylacetal (7a)-13-ethyk3-inethoxy-7-rnethylgona4J,5(10),15-tetraen-!7-on (6,30 g).

io (v) Roztok produktu získaného v předcházejícím kroku (6,3 g) v suchém toluenu (162 ml) byl smísen s pyridinium-p-toluensulfonátem (4,21 g) a zahříván pod zpětným chladičem 1 h. Po ochlazení byla reakční směs vlita do nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a produkt byl extrahován do ethylacetátu. Spojené organické fáze byly promyty roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku, za poskytnutí cyklického 1.2 cthandiyl15 acetalu (7α)-13-ethyl-3-methoxy-7-methylgona-l ,3,5( 10), 14-tetraen-l 7-onu (6,5 g). Produkt byl použit v následujícím kroku bez dalšího čištění, (vi) Roztok produktu získaného v předcházejícím kroku (6,5 g) v suchém toluenu (251 ml) byl smísen s kyselinou p-toluensulfonovou (3,5 g) a zahříván pod zpětným chladičem 45 min. Po ochlazení byla reakční směs vlita do nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a produkt byl extrahován do ethylacetátu. Spojené organické fáze byly promyty vodou a roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku, za poskytnutí (7ct)— 13—ethy 1— 3-methoxy-7-methylgona-1,3,5(10), 14-tetraen-l 7-onu (5,9 g). Produkt byl použit v následujícím kroku bez dalšího čištění.

(vii) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části v) příkladu 1, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (5,9 g) převeden na (7a,17P)-13-ethyl-3-methoxy-7-methylgona-l,3,5(10),14-tetraen-17-ol (4,4 g).

(viii) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části i) příkladu 1, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (2,9 g) převeden na (7a,14P,15p,17p)-13-ethyl-3-methoxy-7-methyl14.15- methylengona-l, 3,5(10)—trien— 17-o 1 (1,4 g).

(ix) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části ii) příkladu 1, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (1,4 g) převeden na (7a,14p,15p)-13-ethyl-3-methoxy-7-methyl·14.15- methylengona-l ,3,5( 10)-trien-17-on (1,4 g).

(x) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části iii) příkladu 1, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (1,3 g) převeden na (7a,14p,15p,17p>13-ethyI-3-methoxy-7-methyl40 14,15-methylenspirogona-l,3,5(10)-trien[17,2']oxÍran (1,36 g).

(xi) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části iv) příkladu 1, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (1,36 g) převeden na (7a,14p,15p,17a)-l3-ethyl-3-methoxy-7methyl-14,15-methylengona-l,3,5( 10)—trien— 17-karboxaldehyd (1,35 g).

(xii) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části v) příkladu 1, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (1,35 g) převeden na (7ct,14p,15p,17a)-13-ethyl-3-methoxy-7methyl-14,15-methylengona-l,3,5(10>-trien-l7-methanol (0,80 g).

(xiii) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části vi) příkladu 1, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (0,60 g) převeden na (7a,14p,15p,17a)-13-ethyl-3-methoxy-7methyl-14,15-methylengona-2,5(10)-dien-17“methanol (0,60 g).

- 14CZ 301376 B6 (xiv) S použitím analogického postupu jako byl popsán v částí vti) příkladu 1, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (0,60 g) převeden na (7α, 14β, 15β, 17ot)—13—ethyl—17—(hydroxymethyl)-7-methyl-14,15-methylengon-4-en-3-on (0,17 g). ‘H NMR (CDCI₃) δ 5,79 (bs, 1H), 3,73 (m, IH), 3,47 (m, IH), 0,92 (t, 3H, J = 7,5 Hz), 0,59 (d, 3H, J = 7,1 Hz), 0,57 (dd, IH,

J = 7,9 a 5,1 Hz), 0,41 (dd, IH, J = 5,1 a3,5 Hz).

Příklad 7 (7α, 14 β, 15β, 16β, 17a)-17-(Hydroxymethy 1)-7,16-dimethyl-l 4,15-methy lenestr-4-en-3-on

(i) Roztok líthium-bis(trirnethylsilyl)amidu (20,2 mmol) v tetrahydrofuranu (35 ml) byl ochlazen na -40 °C. Byl přidán roztok (7α,14β, 153)-3-methoxy-7-methyl-14,15-methylenestral,3,5(10)-trien-17“Onu (příklad 1, krok ii); 5,60 g) v suchém tetrahydrofuranu (24 ml) po kapkách a reakční směs byla míchána 30 min. Potom při -30 °C byt přidán jodmethan (2,4 ml) a míchání pokračovalo 45 min. Směs byla vlita do nasyceného vodného chloridu amonného a produkt byl extrahován do ethylacetátu. Spojené organické fáze byly promyty roztokem solí, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku, za poskytnutí (7α,14β,15β,16a)-3-methoxy-7,16-dimethyl-l 4,15-methylenestra-1,3,5( 10)—trien— 17-onu (5,99 g). Pro20 dukt byl použit v následujícím kroku bez dalšího čištění.

(ít) Směs methyltrifenylfosfoniumbromidu (17 g), íerc-butoxidu draselného (4,4 g) a suchého toluenu (173 ml) byla zahřívána pod zpětným chladičem 1 hod. Roztok ketonu získaného v předcházejícím kroku (5,04 g) v suchém toluenu (40 ml) byl přidán po kapkách a zahřívání pokračovalo 3 hod. Po ochlazení byla reakční směs vlita do nasyceného roztoku chloridu amonného. Produkt byl extrahován do ethylacetátu; spojené organické fáze byly promyty roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Chromatografie na koloně poskytla (7α, 14β, 15β, 163)-3-methoxy-7,16-dimethyl-l7-methylen-14,15-methylenestra-l,3,5(10)-trien (3,61 g).

(iii) m-Chlorperbenzoová kyselina (70 až 75 %, 2,3 g) byla přidána k roztoku produktu získaného v předcházejícím kroku (3,0 g) v suchém dichlormethanu (51 ml), obsahujícího pevný hydrogenuhličitan sodný (3 g). Reakční směs byla míchána při teplotě laboratoře 3 h; byla přidána další část m-chlorperbenzoové kyseliny (70 až 75 %, 0,77 g) po 1 hod. a 2 hod. Reakční směs byla vlita do nasyceného vodného roztoku siřičitanu sodného a produkt byl extrahován do dichlormethanu. Spojené organické fáze byly promyty vodným roztokem hydroxidu sodného (10 %) a roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku, za poskytnutí (7α, 14β, 15β, 16β, 17β)-3-methoxy-7, l6-dimethyl-14,15-methylenspiroestra-l ,3,5(10)-trien[17,2']oxiranu (2,85 g). Produkt byl použit v následujícím kroku bez dalšího čištění.

(iv) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části iv) příkladu 1, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (2,85 g) převeden na (7α,ΐ4β, 15β, 16β, 17β)-3-methoxy-7,16-dimethyl14.15- methylenestra-l ,3,5( 10)—trien— 17-karboxaldehyd (2,99 g).

(v) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části v) příkladu 1, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (2,99 g) převeden na (7α, 14β,15β,16β, 17a)--3-methoxy-7,16-dimethyl14.15- methylenestra-l,3,5(10)-trien-17-methanol (0,30 g).

-15CZ 301376 B6 (vi) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části vi) příkladu 1, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (0,30 g) převeden na (7a,14p,15p,16p,17a)-3-iTiethoxy-7,16-dimethyl14,15-methy lenestra-2,5( 10)-dien-l 7-methanol (0,31 g).

(vii) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části vii) příkladu 1, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (0,31 g) převeden na (7a,14p,15p,16p,17a)-17-{hydroxymethyl)-7,16dimethyl-14,15-methy lenesúM-en-3-on (0,053 g), 'HNMR (CDCh) δ 5,80 (m, IH), 3,64 (m, 2H), 1,09 (s, 3H), 1,01 (d, 3H, J = 6,7 Hz), 0,62 (d, 3H, J = 7,1 Hz), 0,38 (dd, IH, J 7,9 a 5,1 Hz), 0,25 (dd, tH,J-5,l a 3,5 Hz).

Příklad 8 (7α, 14β,15β,17β)-17-Hydroxy-l 7-(Hydroxymethyl)-7-methyl-l 4,15-methy lenestr—4-en-315 on

(i) Hydroxid draselný (3,28 g) byl přidán k roztoku (7ct,143,15p,17|3)—3—methoxy—7—methyl—

14,15-methylenspiroestra-l,3,5(10)-trien[17,2']oxÍranu (příklad 1, krok ίίί); 5,00 g) ve směsi dimethylsulfoxidu (147 ml) a vody (25,3 ml). Reakční směs byla míchána při 100 °C přes noc a potom byla vlita do roztoku chloridu amonného. Produkt byl extrahován do ethylacetátu; spojené organické fáze byly promyty roztokem soli, sušeny nad síranem sodným, a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Chromatografíe na koloně poskytla (7α, 14β, 15β, 17β)~ 17-(hydroxymethyl)3-methoxy-7-methyl-l 4,15-methy lenestra-1,3,5( 10)-trien-l 7-ol (1,02 g).

(ii) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části vi) příkladu 1, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (1,02 g) převeden na (7a,14p,15p,17p)-17-(hydroxymethyl)-3methoxy-7-methyl-14,15-methylenestra-2,5(10}-dien--l 7-ol (1,05 g).

(iii) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části vii) příkladu 1, byl produkt získaný v předcházej ícím kroku (1,05 g) převeden na (7α, 14β, 15 β, 17β)-17-hydroxy-174hydroxymethyl)-7-methyl-14,15-methy lenestr-4-en-3-on (0,12 g). “HNMR (CDCG) δ 5,80(bs, IH), 3,63 (dd, část A systému AB, IH, J = 10,6 a 4,7 Hz), 3,46 (dd, část B systému AB, 1H, J = 10,6 a5,1 Hz), 1,11 (s, 3H), 1,10 (dd, IH, J = 4,7 a 3,9 Hz), 0,61 (d, 3H, J = 7,l Hz), 0,54 (dd, IH, J = 8,3 a 4,7 Hz).

Příklad 9 (7α, 14β, 15β, 17β)-17-[(Acetyloxy)methyl]-l 7-fluor-7-methyl-l 4,15-methy lenestr-^-en-3-on io (a) a (7α,14β,15β, 17β)—17-fíuor-17-(hydroxymethyl-7-methyl-14,15-methy !enestr-4-en3-on (b)

(i) Roztok (7α, 14β,15β, 17P)-3-methoxy-7-methyl-14,15-methylenspiroestra-l ,3,5( 1O)-tríen[17,2']oxiranu (příklad 1, krok iii); 1,75 g) v suchém diethyletheru (43,7), ochlazený na -10 °C, byl smísen s diethyletherátem fluoridu boritého (1,75 ml). Reakční směs byla míchána 15 min. a potom byla reakce ukončena nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Produkt byl extrahován do ethylacetátu; spojené organické fáze byly promyty nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Chromatografie na koloně poskytla (7α,14β,15β,17β)17-fluor-3-methoxy-7-methyl-l 4,15-methylenestra-l ,3,5(10)trien— 17-methanol (0,36 g).

io (ii) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části vi) příkladu 1, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (0,36 g) převeden na směs (7α,14β,15β,17β)-17_ί1υοΓ“3-πιβύκ^~7methyl-l 4,15-methylenestra-2,5( 10)-dien-l 7-methanolu a (7α, 14β, 15 β, 17a)-3-methoxy-7methyl-14,15-methylenestra-2,5(10)-dien-17-methanolu (0,36 g, poměr 1 : 3).

i5 (iii) S použitím analogického postupu jako byl popsán v Části vii) příkladu 1 byla směs produktů získaných v předcházejícím kroku (0,36 g) převedena na (7α,14β,15β,17β)-17-ΠυθΓ-17(hydroxymethyl)-7~methyl-l 4,15-methylenestr-4-en-3-on a (7α, 14β, 15 β, 17β)— 17-(hydroxymethyl)-7-methyl-14,15-methylenestr-4-en-3-on (0,32 g, poměr 1 : 3).

(iv) Roztok směsi získané v předcházejícím kroku (0,32 g) ve směsi suchého pyridinu (1,50 ml) a suchého tetrahydrofuranu (5 ml), obsahující 4-(dimethylamino)pyridin (0,005 g) byl smísen s acetanhydridem (0,90 ml). Směs byla míchána při teplotě laboratoře 1,5 hod. a potom byla reakce ukončena ledovou vodou a potom byl přidán nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Produkt byl extrahován do ethylacetátu; spojené organické fáze byly promyty vodou, vodnou kyselinou sírovou (2M) a roztokem soli, sušeny nad síranem sodným, a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Chromatografie na koloně poskytla (7α,14β,15β,17β}-17-[(acetyloxy)methyl]-17-fluor-7-methyl-14,15-methylenestr-4-en-3-on (0,050 g). ’H NMR (CDCh) δ 5,81 (bs, IH), 4,22 (dd, část A systému AB, IH, J= 22,8 a 12,2 Hz), 4,12 (dd, část B systému AB, IH, J = 22,4 a 12,2 Hz), 2,10 (s, 3H), 1,17 (d, 3H, J = 2,8 Hz), 0,62 (d, 3H, J = 7,1 Hz).

(v) Roztok produktu získaného v části iv) (0,030 g) v methanolu (1 ml) byl smísen s roztokem hydroxidu sodného (0,009 g) ve směsi methanolu (0,3 ml) a vody (0,03 ml). Reakční směs byla míchána při teplotě laboratoře 30 min. byla vlita do ledové vody. Produkt byl extrahován do ethylacetátu; spojené organické fáze byly promyty roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku, za poskytnutí (7α, 14β, 15β, 17β)-17-ί1υοΓ-17-(Ηγ0Γθχγmethyl)-7-methyl-14,15-methylenest_r-4-en-3-onu (0,030 g). ‘H NMR (CDCh) δ 5,81 (bs, IH), 3,74 (δ, část A systému AB, IH, J = 20,4, 12,2 a 6,6 Hz), 3,60 (ddd, Část B systému AB, 1H, J = 22,8, 12,2 a 6,7 Hz), 1,15 (d, 3H, J = 2,8 Hz), 0,62 (d, 3H, J= 7,1 Hz); ^l9FNMR (CDCh) β- 156,08 (s).

Příklad 10 (7α, 14β, 15 β, 17 β)— 17-[(Acetyloxy)methyl]-l 7-fluor-7-methyl-l 4,15-methylenestr-5( 10)-en45 3-on

OAc

- 17CZ 301376 B6 (i) S použitím analogického postupu jako byl popsán v příkladu 2 byla směs (7α, 14β, 15β, 17β)17f1uor-3-methoxy-7-methyl-14,15-methylenestr-2,5( 10)-dien-17-methanolu a (7α, 14 β,15β, 17p)-3-methoxy-7-methyl-l 4,15-methylenestra-2,5( 10)—dien— 17-methanolu (0,076 g, poměr 1 : 3) (příklad 9, krok ii) převedena na směs (7α, 14β, 15β, 17β>·17-fluor-17( hydroxy5 methyl)-7-methyl-14,l 5-methylenestr-5( 10)-en-3-onu a (7α,14β,15β,17β)-17-<1^όπ^methyl)-7-methyl-14,15-methylenestr-5(10)-en-3-onu (0,060 g, poměr 1 : 3).

(i i) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části i v) příkladu 9 byla směs produktů získaných v části i) (0,060 g) acetylována a oddělena chromatografii na koloně, za poskytnutí io (7α,14β,15β,17β)-17-[(acetyloxy)methy!]-l 7-fluor-7-methyI-14,15-methylenestr-5( 10)-en3-onu (0,008 g). ^lH NMR (CDCh) δ 4,25 (dd, část A systému AB, IH, J = 23,6 a 12,2 Hz), 4,12 (dd, část B systému AB, IH, J= 22,4 a 12,2 Hz), 2,73 (bs, 2H), 2,09 (s, 3H), 1,12 (d, 3H, J - 2,8 Hz), 0,69 (d, 3H, J = 7,1 Hz).

Příklad 11 (7a,14p,^,17a,20S)-20~Hydroxy-7-methyl-14,l 5-methylen-19-norpregn^l-en-3-on (a) a (7α, 14β, 15β, 17a,20R)-20-Hydroxy-7-methyl-14,15-methylen-19-norpregn-4-en-3-on (b)

(i) Roztok (7a, 14β,15β, 17a)-3-methoxy-7-methyl-l 4,15-methylenestra-l ,3,5( 10)—trien— 17karboxaldehydu (příklad 1, krok iv); 2,50 g) v suchém tetrahydrofuranu (15,4 ml), ochlazený na 0°C, byl smísen s methylmagnesíumchloridem (1,5M roztok v tetrahydrofuranu, 62 ml). Po 15 min. míchání byla reakce ukončena přidáním nasyceného vodného roztoku chloridu amon25 ného. Produkt byl extrahován do ethylacetátu; spojené organické fáze byly promyty roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku, Chromatografie na koloně poskytla (7α, 14β, 15 β, 17a,20S}-3-methoxy-7-methyl-14,15-methylen-19-norpregna1,3,5( 10)—trien—20—ol (0,84 g) α(7α,14β,15β,17α,20Ρ)-3-Γηεί1ιοχγ~7-ΠΊ€ίΙ^1-14,15-πΐ6ϋψ1βη19-norpregna~l,3,5(10)-trien-20-ol (0,23 g).

JO (iia) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části vi) příkladu 1, (7α,14β,15β, 17a,20S)-3-methoxy~7-methyl-14,15-methylen-l 9-norpregna-1,3,5( 10)-trien-20-ol (0,48 g) byl převeden na (7α, 14β, 15β, 17a,20S)-3-methoxy- 7-methy I-14,15-methylen-19-norpregna-2,5(10)-dien-20-ol (0,59 g).

(iib) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části vi) příkladu 1, (7α,14β,15β,17α,20R)-3-methoxy-7-methy 1-14,15-methylen-l 9-norpregna-1,3,5(10)-trien-20-ol (0,23 g) byl převeden na (7α, 14β, 15β, 17a,20R)-3~methoxy-7-methyl-l 4,15-methylen-l 9-norpregna-2,5(10)-dien-20-ol (0,11 g), (iiia) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části vii) příkladu 1, (7α,14β,Ι5β,17a,20S)-3-methoxy-7-methyl-l 4,15-methylen-l 9-norpregna-2,5( 10)-dien~20-ol (0,59 g) byl převeden na (7a, 14β, 15β, 17a,20S)-20-hydroxy-7-methy 1-14,15-methylen- 19-norpregn4-en-3-on (0,33 g). ^lH NMR (CDClJ δ 5,80 (m, IH), 3,73 (m, IH), 1,20 (s, 3H), 1,12 (d, 3H, J = 6,3 Hz), 0,62 (d, 3H, J = 7,1 Hz), 0,44 (dd, IH, J = 7,9 a 5,1 Hz), 0,26 (dd, IH, J = 5,1 a 3,1

Hz).

- 18CZ 301376 B6 (iiib) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části vii) příkladu I, (7α,14β,15 β, l7a,20R)-3-methoxy-7-methyl-l 3,15-methylen-l 9-norpregna-2,5( 10)-dien-20-ol (0,11 g) byl převeden na (7α, 14β, 15 β, 17a,20R)-20-hydroxy-7-methyl-l 4,15-methylen-l 9norpregn-4-en-3-on (0,060 g). 'H NMR (CDCb) δ 5,80 (m, IH), 3,77 (m, IH), 1,22 (d, 3H,

J = 6,7 Hz), 1,16 (s, 3H), 0,63 (d, 3H, J = 7,1 Hz), 0,45 (dd, IH, J = 8,3 a 5,1 Hz), 0,23 (dd, IH, J = 5,1 a 3,5 Hz).

Příklad 12 (7α, 14β, 15β, 17a)-20-Hydroxy-7,20-dimethyl-l4,15-methylen-l 9-norpregn-4-en-3-on

(i) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části ii) příkladu 1, směs (7α,14β,15β,17α,20S)-3-methoxy-7~methy 1-14,15-methylen-19-norpregna-1,3,5(10)-trien-20-olu a (7a,15 14β,15 β,17a,20R)-3-methoxy-7-methyl-l 4,15-methylen-l 9-norpregna-l ,3,5( 10)—trien—20— olu (příklad 11, krok i); 0,45 g, poměr 1 : 1) byla převedena na (7α,14β,15β,17α)-3-ιηβί1κ^-7methyl-14,15-methylen-l9-norpregna-l,3,5(10)-trien-20-on (0,55 g).

(ii) S použitím analogického postupu jako byl popsán v částí i) příkladu 11, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (0,55 g) převede na (7a,143,153,17a)-3-methoxy-7,20-dimethyl14,15-methylen-19-norpregna-I,3,5(10)-trien-20-ol (0,26 g).

(iii) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části ví) příkladu 1, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (0,14 g) převede na (7α, 14β, 15β, 17a)-3-methoxy-7,20-dimethyl25 14,15-methylen-19-norpregna-2,5(10)-trien-20“Ol (0,14 g).

(iv) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části vii) příkladu 11, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (0,14 g) převeden na (7a,14p,15p,17a)-20-hydroxy-7,2(Tdimethyl-14,15-methylen-19-norpregna-4~en-3-on (0,050 g). ’H NMR (CDCb) δ 5,80 (m, IH),

1,32 (s,3H,) 1,21 (s, 3H), 1,20 (s, 3H), 0,64 (d, 3H, J - 7,1 Hz), 0,42 (dd, IH, J = 7,9 a 5,1 Hz),

0,25 (dd, 1 H, J-5,1 a 3,5 Hz).

Příklad 13 35 (7α, 14β, 15 β, 17a,20S)-l 7-( 1 -Hydroxy propyl )-7-methy 1-14,15-methylenestr-4-en-3-on

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena z (7a, 14β, 15p,17a)-3-methoxy-7-methy 1-14,15methy lenestra-1,3,5( 10)-trien“17-karboxaldehydu (příklad 1, krok iv) s použitím postupů

-19CZ 301376 B6 popsaných vpříkladu 11. Ή NMR (CDCb) δ 5,80 (m, IH), 3,75 (m, IH), 1,21 (s, 3H), 0,93 (t, 3H, J = 7,9 Hz), 0,62 (d, 3H, J = 7,1 Hz), 0,43 (m, IH), 0,24 (m, 1H).

Příklad 14 (7α, 14β, 15β, 17a)-l 7-[(Acetyloxy)methyl]-7-methyl-l 4,15-methylenestr-4-en-3-on

Roztok (7aJ 4β, 15β, 17a)-17-(hydroxymethyl)-7-methyl-l 4,15-methy lenestr=l--en-3-onu io (příklad 1, 0,20 g) ve směsi suchého pyridinu (1,76 ml) a suchého tetrahydrofuranu (8,8 ml) byl smísen s acetanhydridem (1,06 ml). Směs byla míchána při teplotě laboratoře přes noc a potom byla reakce ukončena vodou. Po 1 hod. mícháni byl produkt extrahován do ethylacetátu. Spojené organické fáze byly promyty roztokem soli, sušeny nad síranem sodným, a zakoncentrovány za sníženého tlaku za poskytnutí (7a,14p,15p,17a)-17-[(acetyloxy)methyl)]-7-methyl-14,1515 methylenestr-4-en-3-onu (0,22 g). Ή NMR (CDCb) δ 5,80 (t, IH, J = 2,8 Hz), 4,05 (dd, část A systému AB, IH. J = 11,0 a 6,3 Hz), 3,95 (dd, část B systému AB, IH, J = 11,0 a 7,1 Hz), 2,03 (s, 3H), 1,08 (s, 3H), 0,62 (d, 3H, J = 7,1 Hz), 0,48 (dd, IH, J = 8,3 a 5,1 Hz), 0,27 (dd, IH, J = 5,1 a 3,5 Hz).

Příklad 15

S použitím analogického postupu jako byl popsán v části v) příkladu l, a s použitím sloučenin z příkladů 1,2 a 8 jako výchozího materiálu, byly připraveny následující produkty: a) (3 β,7α, 14β, 15β, 17a)-3-Hydroxy-7-methyl-l 4,15-methy leneshM-en-17-methanol

'H NMR (CDCb) δ 5,33 (bs, IH), 4,21 (m, IH), 3,67 (m, IH), 3,48 (m, IH), 1,05 (s, 3H), 0,58 (d, 3H, J = 7,1 Hz), 0,45 (dd, IH, J = 7,9 a 5,1 Hz), 0,22 (dd, IH, J = 5,1 a 3,1 Hz).

bl) (3β,7α, 14β, 15 β, 17a)-3-Hydroxy-7-methy I-14,15-methylenestr-5( 10)-en-17-methanol

'H NMR (CDCb) 8 4,09 (m, IH), 3,69 (m, IH), 3,50 (m, IH), 1,03 (s, 3H), 0,63 (d, 3H, J = 7,1 Hz), 0,46 (dd, 1H, J = 8,3 a 5,1 Hz), 0,24 (dd, 1H, J = 5,1 a 3,5 Hz).

-20CZ 301376 B6 b2) (3β,7α,14β, 15β, 17a)-3-Hydroxy-7-methyl-l 4,15-methylenestr-5( 10)-en-l 7-methanol

'HNMR (CDClj) δ 3,82 (m, IH), 3,69 (m, IH), 3,50 (m, IH), 1,03 (s, 3H), 0,63 (d, 3H, J = 7,1 Hz), 0,46 (dd, IH, J = 8,3 a 5,1 Hz), 0,24 (dd, IH, J = 5,1 a 3,5 Hz).

c 1) (3β,7α, 14β, 15β, 17β)-3,17-Dihydroxy-7-methyl-l 4,15-methylenestr-^k-en-l 7-methanol

'H NMR (CDCI₃) δ 5,53 (m, IH), 4,21 (m, IH), 3,61 (dd, část A systému AB, IH, J = 10,6 a4,7 Hz), 3,45 (dd, část B systému AB, IH, J = 10,6 a 5,9 Hz), 1,09 (s, 3H), 1,02 (dd, IH, ío J = 4,7 a 3,5 Hz), 0,56 (d, 3H, J = 7,1 Hz), 0,54 (dd, 1H, J - 8,3 a 4,7 Hz).

c2) (3β,7α, 14β,15β, 17β)™3,17-Dihydroxy-7-methyl-14,15-methylenestr-4-en-l 7-methanol

'HNMR (CDCI₃) δ 5,51 (m, IH), 4,12 (m, IH), 3,62 (dd, část A systému AB, IH, J = 10,6 15 a 4,7 Hz), 3,46 (dd, část B systému AB, IH, J = 10,6 a 5,9 Hz), 1,09 (s, 3H), 1,03 (dd, IH,

J = 4,7 a 3,9 Hz), 0,59 (d, 3H, J = 7,1 Hz), 0,54 (dd, 1H, J - 8,6 a 4,7 Hz).

Příklad 16 (7α, 14β, 15β, 17β)-17-Hydroxy-7-(methoxymethyl)“7-methyl-l 4,15-methylenestr~4-en-3~on (referenční sloučenina 3)

(i) Roztok (7α, 14β, 15β, 17β)-3-Γηεί1κ^-7-ηΊ6ΐΙ^1-14,15-methylenspiroestra-l ,3,5( 10)trien[I7,2']oxiranu (příklad 1, krok iii); 2,0 g) v suchém methanolu (106 ml) byl smísen s methoxidem sodným (6,91 g) a vařen pod zpětným chladičem přes noc. Reakční směs byla vlita do ledové vody a neutralizována. Produkt byl extrahován do diethyletheru; spojené organické fáze byly promyty nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a roztokem soli, sušeny nad síranem sodným, a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Chromatografíe na koloně poskytla (7α, 14β, 15 β, 17β)-3-ηΐ6θιοχχ-17-(methoxymethyl)-7-methyl-14,15-methylenestra-l ,3,5( 10)trien-17-ol (0,50 g).

-21 CZ 301376 B6 (ii) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části vi) příkladu 1, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (0,50 g) převeden na (7a,14p,15p,17p)-3-methoxy-17-(methoxymethyl)-7-methyl-14,15-methylenestra-2,5( l0)-dien-l 7-ol (0,69 g).

(iii) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části vii) příkladu 1, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (0,69 g) převeden na (7a, 14β, 15β, 17p)-17-hydroxy-l7-(methoxymethyl )-7-methy 1-14,15-methyl enestr-4-en-3-on (0,15 g). ^lHNMR (CDC1₃) δ 5,80 (m, IH), 3,42 (d, část A systému AB, IH, J = 8,3 Hz), 3,33 (s, 3H), 3,16 (d, část B systému AB, IH, J = 8,3 Hz), 1,11 (dd, IH, J = 4,7 a 3,5 Hz), 1,09 (s, 3H), 0,60 (d, 3H, J = 7,1 Hz), 0,50 (dd, IH, io J = 8,3 a 4,7 Hz).

Příklad 17 (7α, 14β,15β, 17 β)— 17-(Chlormethyl)-l 7-hydroxy-7-methyl-l 4,15-methylenestr-4-en-3 -on (referenční sloučenina 4)

Cl (i) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části vi příkladu 1, byl (7α, 14β, 15β)-3methoxy-7~methyl-14,15-methylenestra-l,3,5(10)“trien-17-on (příklad 1, krok ii); 8,0 g) převeden na (7α, 14β,15β,17a)-3-methoxy-7-methyl-l 4,15-methylenestra-2,5( 10)-dien-l 7—ol (8,0 g).

(ii) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části vii příkladu 1, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (8,0 g) převeden na (7aJ43J5p,17a)-]7--hydroxy-7''rnethyl-14,15methylenestr-4-en-3~on (2,51 g).

(iii) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části ii) příkladu 1, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (2,51 g) převeden na (7α,14β.15β)-7-methy 1-14,15-methylenestr^4en-3,17-dion (2,23 g).

(iv) Diethyletherát fluoridu boritého (0,27 ml) byl přidán ke směsi produktu získaného v předcházejícím kroku (2,23 g), 1,2-ethandithiolu (0,67 ml), suchého tetrahydrofuranu (10 ml), a suchého methanolu (20 ml), ochlazen na 0 °C. Po dvou hodinách míchání při teplotě laboratoře, byla reakční směs vlita do vody. Produkt byl extrahován do ethylacetátu; spojené organické fáze byly promyty vodným hydroxidem sodným (10 %) a roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Chromatografie na koloně poskytla cyklický 3-(1,2ethandiyldithioacetal) (7a,^,^)-7-methyl-14,15-methylenestr-4-en~3,17-dionu (2,68 g).

Produkt byl použit v následujícím kroku bez dalšího čištění.

(v) S použitím analogického postupu jako byl popsán v části iii) příkladu 1, byl produkt získaný v předcházejícím kroku (2,68 g) převeden na (7a,^,^,^)-3-[(2-merkaptoethyl)thio]-7methyl-14,15-methylenspiroestra-3,5-dien[17,2^ř]oxÍran (2,81 g).

(vi) Roztok produktu získaného v předcházejícím kroku (0,50 g) v dimethyIformamidu (7,3 ml) byl smísen s koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou (0,73 ml). Po 1 hod, míchání při teplotě laboratoře, byla reakční směs vlita do nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a produkt byl extrahován do ethylacetátu. Spojené organické fáze byly promyty roztokem soli, sušeny nad síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Chromatografie na koloně poskytla (7α,14β,15β,17β)-17~(chlormethyl)-17-hydroxy-7-methyl-14,15-methylenestr-4-en-3-on

-22CZ 301376 B6 (0,035 g). 'H NMR (CDC1,) δ 5,81 (m, IH), 3,67 (d, část A systému AB, IH, J = 11,0 Hz), 3,58 (d, část B systému AB, IH, J = 11,0 Hz), 1,17- (dd, IH, J = 5,1 a 3,5 Hz), 1,15 (s, 3H), 0,60 (d, 3H, J = 6,7 Hz), 0,54 (dd, IH, J = 8,3 a 5,1 Hz).

Příklad 18

Biologické výsledky

Sloučeniny podle vynálezu a čtyři referenční sloučeniny byly testovány na androgenní aktivitu (výše popsanými způsoby) a vyhodnoceny podle následujícího schématu:

(-) nebyla nalezena androgenní aktivita;

io (+) nalezena androgenní aktivita;

(++) vysoká androgenní aktivita;

(+++) vynikající androgenní aktivita;

(n. d.) údaje nejsou k dispozici (pro) prekurzor

I. Sloučeniny podle vynálezu

pr.

R,

r2

Rj

Rx

Rs

Re

Rt

Re

Re

R10

Rn

Ne- nas.

Výsl.

1

0X0

H

Me

H

Me

H

H

H

H

H

H

Δ4

+++

2

0X0

H

Me

H

Me

H

H

H

H

H

H

+

3

0X0

H

Me

H

Me

H

H

H

H

H

H

Δ4'9

++

4

Me

H

Me

H

Me

H

H

H

H

H

H

Δ4

++

5

0X0

H

Et

H

Me

H

H

H

H

H

H

Δ4

++

6

0X0

H

Me

H

Et

H

H

H

H

H

H

Λ4

+++

7

0X0

H

Me

H

Me

H

tep- Me

H

H

H

H

Δ4

τ-

8

0X0

H

Me

H

Me

H

H

OH

H

H

H

Δ4

ι

9a

0X0

H

Me

H

Me

H

H

F

H

H

Ac

Δ4

++

9b

0X0

H

Me

H

Me

H

H

F

H

H

H

Δ4

++

10

0X0

H

Me

H

Me

H

H

F

H

H

Ac

δ5(10)

+

1 la

0X0

H

Me

H

Me

H

H

H

2QS- Me

H

H

Δ4

++

11b

0X0

H

Me

H

Me

H

H

H

H

20R- Me

H

Δ4

+

12

0X0

H

Me

H

Me

H

H

H

Me

Me

H

Δ4

+

13

0X0

H

Me

H

Me

H

H

H

20S- Et

H

H

Δ4

+

14

0X0

H

Me

H

Me

H

H

H

H

H

Ac

Δ4

-23Q1 301376 B6

IL Referenční sloučeniny

Sloučenina	Výsledek
(14β, 15 β T17 β)-17-hyd roxy-17-(methoxymethyl)-14, 15-methylenestr-4-en-3-on (referenční sloučenina 1, WO 99/67276, J 1222)	-
(14β,15β, 17β)-17-(chlormethyl)-l 7-hydroxy-14,15-methylenestr-4-en-3-on (referenční sloučenina 2, WO 99/67276, J 1364)	-
(7a, 14β, 15β, 17β)-17-hydroxy-17-{rnethoxymethyl)-7-methyl-14,15-methy(enestr-4-en-3-on (referenční sloučenina 3, příklad 16)	-
(7a,143(15p,173)-17-(chíormethyl)-17-hydroxy-7-methyl-14,15- -methylenestr-4-en-3-on (referenční sloučenina 4, příklad 17)	-

Claims (8)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   L Sloučenina obecného vzorce I kde ío Ri je O, (H,H), (H,OR), NOR, kde R je atom vodíku, (C,_₆)-alkyl, (C_ró)acyl;

   R₂ je atom vodíku, nebo (C^jalkyl;

   R₃ je atom vodíku; nebo R₃ je (Ci^)alkyl, (C₂_6)alkenyl, nebo (C₂-ó)alkiny 1, kde každá z těchto 15 skupin je popřípadě substituovaná atomem halogenu;

   R4 je atom vodíku, (Cj ^alkyl, nebo (C_{2 6})alkenyl;

   R₅ je (C_M)aIkyl;

   Ré je atom vodíku, halogen, nebo (Ci ₄)alkyl;

   R? je atom vodíku, nebo (Ci_6)alkyl;

   25 Rg je atom vodíku, hydroxy, (Ci^)alkoxy, halogen, nebo (C u)-alkyl;

   R₉ a R10 jsou nezávisle atom vodíku; nebo Rq a Riq jsou nezávisle (Ci_^)alkyl, (C₂-$)alkenyl, (C₃^)cykloalkyl, (C₅_6)cykloalkenyl, nebo (C₂_6)alkinyl, kde každá z těchto skupin je popřípadě substituovaná skupinou (C| ₄)alkoxy, nebo halogen;

   Ri i je atom vodíku, SO₃H, (Ci ^jacyl; a tečkované čáry znamenají případné vazby zvolené z Δ⁴, Δ⁵⁽¹⁰⁾, nebo Δ¹¹ dvojné vazby nebo Δ^4,9 nebo Δ⁴¹¹ dienového systému.
2. 2. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1, kde substituent R| je O.
3. 3. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1 nebo 2, kde tečkované čáry znamenají Δ⁴ dvojnou vazbu.
4. 4. Sloučenina obecného vzorce I podle některého z předcházejících nároků, kde R4 je 7a-methyl.
5. 5. Sloučenina, kterou je (7a, 14 β, 15 β, 17a)-17-( hydroxy methy l)-7-methy 1-14,15-methylen45 estr-4-en-3-on.

   -25CZ 301376 B6
6. 6. Sloučenina podle kteréhokoli z předcházejících nároků pro použití v lékařství.
7. 7. Použití sloučeniny podle některého z nároků 1 až 6 pro výrobu farmaceutického prostředku 5 s androgenním účinkem.
8. 8. Kit pro hormonální samčí antikoncepci, obsahující steřílizační látku a androgen, vyznačující se tím, že androgenem je sloučenina podle některého z nároků 1 až 6.