CZ294839B6 - Farmaceutický přípravek pro lokální, orální nebo parenterální podání, jeho použití a způsob přípravy jeho účinné látky - Google Patents

Abstract

Řešení se týká farmaceutického přípravku pro lokální, orální nebo parenterální podání obsahujícího oxidovaný oligosacharid mající průměrnou molekulovou hmotnost v rozmezí 1000 až 50 000, jakým je například oligosacharid oxidované regenerované celulózy (ORC) a způsobu přípravy tohoto oxidovaného oligosacharidu, při kterém se oxidovaná celulóza mající průměrnou molekulovou hmotnost alespoň 50 000 ošetří vodným alkalickým roztokem při teplotě a po dobu dostatečnou pro částečnou hydrolýzu uvedené oxidované celulózy, případně v přítomnosti farmakologicky aktivního činidla; a získaný oxidovaný oligosacharid se izoluje z roztoku. Rovněž se týká použití oxidovaných oligosacharidů pro přípravu prostředku pro krytí ran a v jiných lékařských a farmaceutických aplikacích.ŕ

Description

Oblast techniky

Vynález se týká farmaceutického přípravku pro lokální, orální nebo parenterální podání obsahujícího oxidovaný oligosacharid mající průměrnou molekulovou hmotnost v rozmezí 1000 až 50 000, jakým je například oligosacharid oxidované regenerované celulózy (ORC) a způsobu přípravy tohoto oxidovaného oligosacharidu. Vynález se také týká použití oxidovaných oligosacharidů pro přípravu prostředku pro krytí ran a v jiných lékařských a farmaceutických aplikacích.

Dosavadní stav techniky

ORC je dlouhou dobu vyráběna a používána v lékařství pro dosažení hemostázy a jako ochranný materiál proti vzniku adhesí po chirurgickém zákroku. Klíčovou vlastností ORC je, že je absorbovatelná po implantaci do těla, zatímco celulóza není. ORC je resorbována hydrolytickým štěpením polymeru za vzniku malých oligosacharidů, které jsou metabolizovány a eliminovány z těla. Oxidace celulózy za vzniku 10 % hmotn. až 21 % hmotn. karboxylových skupin, vztaženo ke hmotnosti celulózy, umožňuje v podstatě úplnou absorpci materiálu v průběhu dvou až tří týdnů po implantaci.

ORC se vyrábí tak, že se celulóza vystaví působení oxidačního činidla, jakým je například oxid dusičitý, jak je popsáno v US 3 122 479. Fyzikální forma celulózového materiálu není zásadní. Pří výrobě ORC lze například oxidovat celulózovou fólii, papír, tampon nebo tkaninu. Nicméně komerčně výhodným materiálem je tkaná nebo pletená tkanina. ORC ve formě pletené tkaniny je dostupná pod obchodní známkou SURGICEL pro použití jako absorbovatelné hemostatikum a ORC je také dostupná pod obchodní známkou INTERCEED pro použití jako adhesní bariéra.

Za vzniku hemostatických materiálů použitelných v lékařství lze oxidovat i jiné póly sacharidy než celulóza. Takové polysacharidy zahrnují mikrobiální polysacharidy jako je dextran, guma gellan a xantanová guma, rostlinné polysacharidy, například agar, škrob, konjac, karagén, guarová guma, inulin a pektin, a polysacharidové deriváty jako je karboxymethylcelulóza, methylhydroxypropylcelulóza, celulóza acetat, methylcelulóza a ethylcelulóza.

Pro použití jako materiál pro krytí ran byla navržena kombinace ORC s jinými materiály. Například US 2 517 772 (Doub et al.) popisuje krycí materiály vyrobené z ORC impregnované trombinem. Nicméně ORC je významně kyselá. Povrchové pH plně vodu nasyceného kousku ORC tkaniny může být nízké a může dosahovat až 1,7. Mnoho proteinových činidel, například trombin, je vysoce citlivých na kyselé prostředí a je ihned po kontaktu s takovou matricí inaktivováno. V souladu s tím Doub et al. uvádí, že ORC by měla být před impregnací trombinem neutralizována. Octan vápenatý, dihydrogenuhličitan sodný, amoniak a alkoholický ethylamin jsou uvedeny jako příklady vhodných neutralizačních činidel, ale Doub et al. upozorňuje, že ORC by neměla být neutralizována na takový stupeň, kdy po umístění do vody ztrácí z důvodů rozpouštění nebo tvorby gelu a rozpadu svůj vláknitý charakter.

EP-A-0437095 popisuje, že použití vodného roztoku dihydrogenuhličitanu sodného pro neutralizaci ORC tkaniny vede k tomu, že tkanina je částečně gelovaná, deformuje se její původní velikost a je velmi slabá s malou integritou. Je uvedeno, že pevnost tkaniny v tahu je pro praktické použití, například pro použití jako hemostatikum, příliš nízká. Podobné výsledky jsou získány při použití silně bazických vodných roztoků hydroxidu sodného a hydroxidu amonného. EP-A0437095 popisuje způsob přípravy výrobku z oxidované celulózy, který je stabilní při skladová

-1 CZ 294839 B6 ní, nedráždivý a terapeuticky použitelný, přičemž tento způsob zahrnuje kroky kontaktování kyselého materiálu z oxidované celulózy s alkoholem a vodným roztokem mírně zásadité soli slabé kyseliny bez chloridu pro zvýšení pH celulózy na 5 až 8, promytí celulózového materiálu se zvýšeným pH alkoholem za účelem odstranění nadbytku soli a vody, a sušení celulózového materiálu za účelem odstranění alkoholu.

Podstata vynálezu

Nyní se zjištěno, že ORC a jiné oxidované oligosacharidy lze částečně hydrolyzovat za mírně alkalických podmínek a získat tak oligosacharidy, které mají mnoho výhodných vlastností pro lékařské použití.

Vynález tedy poskytuje farmaceutický přípravek pro lokální, orální nebo parenterální podání, který obsahuje oxidovaný oligosacharid mající průměrnou molekulovou hmotnost v rozmezí 1000 až 50 000.

Vynález dále poskytuje použití výše uvedeného farmaceutického přípravku podle pro přípravu prostředku pro krytí ran.

Vynález rovněž poskytuje způsob přípravy oxidovaného oligosacharidu majícího průměrnou molekulovou hmotnost v rozmezí 1000 až 50 000, podle kterého se a) oxidovaná celulóza mající průměrnou molekulovou hmotnost alespoň 50 000 ošetří vodným alkalickým roztokem při teplotě a po dobu dostatečnou pro částečnou hydrolýzu uvedené oxidované celulózy, případně v přítomnosti farmakologicky aktivního činidla, a b) získaný oxidovaný oligosacharid se izoluje z roztoku.

Výhodně se jako alkalický roztok použije roztok hydroxidu nebo hydrogenuhličitanu alkalického kovu. Oxidovaný oligosacharid lze získat z roztoku úpravou pH na 7 nebo méně za použití kyseliny, přičemž kyselinou je výhodně koncentrovaná minerální kyselina.

Podle jednoho provedení vynálezu se v alkalickém roztoku oxidované celulózy rozpustí nebo suspenduje farmakologicky aktivní činidlo, a oxidovaný oligosacharid se vysráží redukcí pH roztoku nebo disperze.

Podle dalšího provedení vynálezu se v alkalickém roztoku oxidované celulózy rozpustí nebo suspenduje farmakologicky aktivní činidlo, a ze získaného roztoku nebo disperze se odstraní rozpouštědlo, výhodně vymrazováním.

Konkrétně přípravek oxidovaného oligosacharidu podle vynálezu váže terapeuticky použitelná činidla a taková navázaná činidla mohou být potom uvolňována ve vysokém výtěžku. Farmaceutický přípravek oxidovaného oligosacharidu podle vynálezu může být proto například použit při hojení ran nebo pro dopravu takových terapeuticky použitelných činidel do místa rány. Terapeuticky použitelná činidla, která jsou vázána oxidovanými oligosacharidy, zahrnují farmaceuticky aktivní peptidy a proteiny, výhodně růstové faktory, jakými jsou například PDGF AB, PDGF 88, TGF-Ιβ, ΤΟΡ-2β, ΤΟΡ-3β, bazický FGF, kyselý FGF a případně EGF aTGF-a.

Bez vazby na určitou teorii se soudí, že aniontové karboxylátové skupiny přítomné na oxidovaných oligosacharidech tvoří komplexy s kationtovými aminovými skupinami na peptidech a proteinech. Tvorby komplexů s terapeuticky aktivními činidly majícími aniontové skupiny lze rovněž snadno dosáhnout například použitím vícevazných kovových iontů, například Ca²⁺ nebo Zn²⁺, jako iontových síťovacích činidel.

-2CZ 294839 B6

Další výhodou farmaceutických přípravků podle vynálezu je to, že mohou být bezprostředně kombinovány s jinými materiály, jakými jsou například proteiny a jiné polysacharidy (s nebo bez chemického zesítění), za vzniku přípravků, které mají nové vlastnosti. Oxidované oligosacharidy mohou být například kombinovány s kyselinou hyaluronovou, chitosanem, nebo alginatem (zejména alginatem sodným, alginatem vápenatým nebo směsí alginatu sodného/vápenatého) za vzniku nových hemostatických prostředků. Alternativně lze přípravky zahrnující kombinaci oxidovaných oligosacharidů s jinými oligosacharidy, polysacharidy nebo proteiny použít jako matrici s kontrolovaným uvolňováním pro různá terapeutická činidla, jakými jsou například antiseptika, antibiotika, proteinové růstové faktory, protizánětlivá činidla, analgetika, inhibitory proteinas, jakými jsou například aprotinin nebo hydroxamové kyseliny. Oxidované oligosacharidy přípravků podle vynálezu lze kombinovat s požadovaným terapeutickým činidlem v roztoku (kdy terapeutické činidlo je v roztoku nebo v suspenzi) a oligosacharid lze následně vhodnými prostředky izolovat z roztoku za vzniku materiálu, ve kterém je terapeutické činidlo v podstatě rovnoměrně rozloženo. Alternativně lze rozpouštědlo odstranit například sublimací ze zmraženého stavu.

Oxidované oligosacharidy lze rovněž síťovat a umožnit tak vytvoření trojrozměrné struktury. Oxidované oligosacharidy lze například rozpustit ve vodě, do které se přidá velmi nízká koncentrace pepsinem solubilizovaného kolagenu. V případě následného přidání karbodiimidu jako síťovacího činidla působí kolagen jako přemosťující skupina mezi oligosacharidy, takže lze při sublimaci ze zmraženého stavu získat trojrozměrnou strukturu.

Oxidované oligosacharidy přípravků podle vynálezu mají výhodně molekulovou hmotnost alespoň 1000, a zpravidla méně než 100 000. Nejčastěji bude molekulová hmotnost menší než 5000 až 30 000. (Je zřejmé, že oxidované oligosacharidy podle vynálezu budou zpravidla tvořit smíšenou populaci molekul různé velikosti. Pokud je zde tedy uvedeno, že oxidované oligosacharidy mají průměrnou molekulovou hmotnost v určitém rozmezí, potom to znamená, že alespoň 90 % hmotnosti molekul spadá do uvedeného rozmezí.)

V jednom provedení jsou oligosacharidy pro použití v přípravcích podle vynálezu odvozeny z nerozpustných oxidovaných polysacharidů a mají molekulovou hmotnost, při které jsou rozpustné při neutrálním a alkalickém pH ale nerozpustné při kyselém pH. Takové oligosacharidy lze z roztoku snadno získány pouhým snížením pH, které způsobí vysrážení oligosacharidů. Nicméně alternativně mohou být oxidované oligosacharidy získány z roztoku jeho přenesením do roztoku, který neobsahuje žádné jiné netěkavé sloučeniny a potom odpařením rozpouštědla. Oxidované oligosacharidy lze například izolovat za použití extrakční kolony s iontoměničovou pevnou fází (jako je kolona s kyselinou fenylboritou jako pevnou fází předem aktivovaná methanolem a uvedená do rovnováhy ředěnou kyselinou octovou) a následně eluovat ředěným (například 0,lM) roztokem hydroxidu amonného.

Výhodně oxidované oligosacharidy použité v přípravcích podle vynálezu obsahují 5 % hmotn. až 25 % hmotn., a výhodněji 8 % hmotn. až 14 % hmotn. karboxylových skupin. Obsah karboxylové skupiny v oligosacharidů je určen následujícím způsobem:

Vzorek oxidovaného oligosacharidů (přibližně 0,2 g) se rozpustí v 0,5M roztoku hydroxidu sodného (5 ml) a přidá se pár kapek 0,1 % fenolftaleinového indikátorového roztoku. Nadbytek hydroxidu sodného se zpětně titruje 0,lM HC1 do odbarvení fenolftaleinu (červená na čirou barvu). Nulová hodnota je určena titrací 5 ml 0,lM roztoku hydroxidu sodného 0,lM roztokem HC1. Hodnota pro obsah karboxylové skupiny je vypočítána za použití rovnice:

4, 5 x (B-S) x M

C = ---------------W kde

C - procentický obsah karboxylu

B = objem standardu HC1 pro titraci prázdného vzorku (ml)

S = objem standardu HC1 pro titraci vzorku (ml)

M = molarita standardu HC1

W = suchá hmotnost vzorku (g) (4,5 = hmotnost karboxylu v miliekvivalentech x 100)

Jak již bylo uvedeno vynález rovněž poskytuje způsob přípravy oxidovaného oligosacharidu majícího průměrnou molekulovou hmotnost 1000 až 50 000, při kterém se oxidovaná celulóza mající průměrnou molekulovou hmotnost alespoň 50 000 (lépe alespoň 100 000, například více než 30 000) ošetří vodným alkalickým roztokem při teplotě a po dobu dostatečnou pro částečnou hydrolýzu uvedené oxidované celulózy, případně v přítomnosti farmakologicky aktivního činidla, a vzniklý oxidovaný oligosacharid se izoluje z roztoku, například pomocí úpravy pH na 7 nebo méně. Alkalickým roztokem je výhodně hydroxid alkalického kovu nebo hydrogenuhličitan, například hydroxid sodný nebo hydrogenuhličitan sodný, ačkoliv jiná alkalická činidla (například vodný hydroxid amonný) mohou být také použita. Je jasné, že podmínky reakce (a zejména pH) jsou závislé na požadovaném rozmezí molekulové hmotnosti pro vzniklý produkt. Nicméně, vhodné podmínky mohou být snadno určeny v jakémkoliv jednotlivém případě rutinním experimentováním. Oxidovanou regenerovanou celulózu lze hydrolyzovat v 1M až 8M roztoku hydroxidu sodného při teplotě od 0 °C do 50 °C a po dobu 5 min až 120 min za vzniku oligosacharidu s molekulovou hmotností v rozmezí 1000 až 20 000, nebo 0,01M až 1M roztokem hydrogenuhličitanu sodného při 0 °C až 50 °C a po dobu 10 h až 10 dnů za vzniku oligosacharidů s molekulovou hmotností v rozmezí 7000 až 50 000.

Hydrolytickou reakci lze ukončit přidáváním kyseliny, například minerální kyseliny, až do dosažení přibližně neutrálního pH roztoku. Pro tyto účely lze výhodně použít koncentrovanou kyselinu chlorovodíkovou.

Vynález je dále popsán pomocí následujících příkladů.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Roztok ORC byl připraven rozpuštěním Surgicel tkaniny v koncentraci 20 mg/ml v 6M hydroxidu sodném.

Roztok se inkuboval při 37 °C po dobu 45 minut, po kterých byla reakce ukončena přidáním 6M HCL, dokud neproběhlo vysrážení a pH bylo změněno z alkalického na pH 7 nebo méně. Sraženina se nechala usadit přes noc a potom se odstranil nadbytek kapaliny. Sraženina se dialyzovala proti vodě v trubicích s hranicí molekulové hmotnosti 1000 a potom byla sušena sublimací ze zmraženého stavu za zisku prášku.

Molekulová velikost oligosacharidu, určená gelovou elektroforesou a kapalinovou chromatografií s vysokou rozlišovací schopností, vykazovala rozmezí od přibližně 1000 do přibližně 15 000.

-4CZ 294839 B6

Příklad 2

Roztok ORC byl připraven rozpuštěním Surgicel tkaniny v koncentraci 10 mg/ml v 0,lM hydrogenuhličitanu sodném. Roztok se inkuboval při 37 °C po dobu několika dní (2 - 3), dokud nebyla rozpuštěna veškerá ORC. Reakce byla ukončena přidáním 6M HC1, dokud neproběhlo vy srážení a pH bylo změněno z alkalického na pH 7 nebo méně. Sraženina se nechala usadit přes noc a potom se odstranil nadbytek kapaliny. Sraženina se dialyzovala proti vodě v trubicích s hranicí molekulové hmotnosti 1000 a potom byla sušena sublimací ze zmraženého stavu za zisku prášku.

Molekulová velikost oligosacharidu, určená způsobem popsaným výše, vykazovala rozmezí od přibližně 1000 do přibližně 30 000.

Příklad 3

Tampon z oxidované karboxymethylcelulózy byl připraven následujícím způsobem:

Do 500 g vody se přidá za míchání 7,5 g karboxymethylcelulózy (CMC) od Aqualon Corporation. Po rozpuštění polymeru se roztok nechá přes noc odvzdušnit pro odstranění zachycených vzduchových bublin. Roztok se nalije do misky 3x4xl/4 palce a suší se sublimací ze zmraženého stavu v lyofílizačním přístroji. Měkké, bílé, ve vodě rozpustné tampony z ORC jsou získány tímto postupem.

Oxidace CMC tamponů je provedena umístěním 5,8 g suchých tamponů do nádoby ze syntetické pryskyřice, na kterou je připojena malá nádobka obsahující 8 g oxidu dusičitého. Oxid dusičitý se nechá odpařit z malé nádobky do nádoby ze syntetické pryskyřice a obalí CMC tampony v atmosféře plynu. Tampony jsou ponechány v nádobě ze syntetické pryskyřice po dobu 48 hodin a potom se plyn odsaje do lapače s hydroxidem sodným a tampony se odeberou a umístí se v 500 ml vody. Oxidované CMC tampony nejsou rozpustné ve vodě. Jsou promyty vodou po dobu 15 minut a potom se umístí do čerstvé vody pro další promytí. Toto promývání oxidovaných tamponů se opakuje, dokud není pH vyplachovací vody vyšší než 3. Bílé tampony z oxidované karboxymethylcelulózy jsou sušeny za pomoci umístění ve 100 % isopropylalkoholu na dobu 15 minut. Toto se opakuje celkem dvakrát a potom se tampony nechají uschnout na vzduchu. Tampony z oxidované CMC jsou měkké a tvárné a budou absorbovat 14násobek své hmotnosti izotonického roztoku. Jsou rozpustné v 0,5 N hydroxidu sodném a jsou charakterizovány svým obsahem karboxylových kyselin, který je podle titrace 26,3 %.

Roztok oxidované karboxymethylcelulózy se připraví rozpuštěním tampónového materiálu v koncentraci 10 mg/ml v 0,lM hydroxidu amonném. Roztok se inkubuje při 37 °C po dobu 2 hodin a reakce se ukončí přidáním 6M HC1, dokud neproběhne vysrážení. Sraženina se odebere a dialyzuje se důkladně proti vodě v trubicích s hranicí molekulové hmotnosti 1000 a potom se suší sublimací ze zmraženého stavu za zisku prášku.

Molekulová velikost oligosacharidu byla určena gelovou elektroforesou a bylo zjištěno, že je 1000 a 30 000.

Příklad 4

Methylcelulóza byla oxidována postupem analogickým s postupem popsaným v příkladu 3 a roztok byl připraven rozpuštěním oxidovaného materiálu v koncentraci 20 mg/ml v 6M hydroxidu sodném a inkubací při 37 °C po dobu 45 minut.

-5CZ 294839 B6

Roztok se centrifugoval pro odstranění jakéhokoliv nerozpuštěného materiálu a oligosacharidy byly vysráženy z roztoku přidáním 6M HC1. Sraženina byla odebrána a důkladně dialyzována proti vodě v trubicích s hranicí molekulové hmotnosti 1000.

Molekulová velikost oligosacharidu byla určena gelovou elektroforesou a bylo zjištěno, že je mezi 1000 a 5000.

Příklad 5

Extrakční kolona s kyselinou fenylboritou (PBA) jako pevnou fází (Bond Elut. Varian Associates), obsahující 100 mg sorbentního materiálu s 10 ml zásobníkem, byla aktivována za použití 10 ml methanolu pro navlhčení kolony a potom 10 ml 0,1 M kyseliny octové pro uvedení kolony do rovnováhy při správném pH.

ORC roztok byl připraven rozpuštěním 1 g Interceed materiálu ve 100 ml 6M roztoku hydroxidu sodného. Po úplném rozpuštění Interceed materiálu byl roztok okyselen na pH 3,0 a jakákoliv sraženina byla odstraněna centrifugách Odebral se supematant a 2 ml se nechaly projít přes aktivovanou PBA kolonu. Kolona byla potom promyta 2 ml 0,lM kyseliny octové a 4 x 2 ml objemy destilované vody pro odstranění jakékoliv soli nebo jiného endogenního materiálu. ORC oligosacharidy byly eluovány z kolony za použití 2 x 2 ml objemů 0,lM hydroxidu amonného. Díly byly shromážděny, zmrazený a lyofilizovány za vzniku prášku. Po separaci oxidovaných oligosacharidu iontoměničovou chromatografíí ukázala analýza hmotnostní spektrometrií, že mají molekulovou hmotnost v rozmezí 600 až 1200.

Příklad 6

Kolagenový/ORC oligosacharidový tampon byl připraven následujícím způsobem. Vápnem zpracovaná kolagenní vlákna (0, 8 g) byla zpracována na kaši ve 160 ml 0, 01HCL (pH 3, 0) a do ní bylo přidáno 0,16 g ORC oligosacharidu, připraveného podle příkladu 2. Směs byla homogenizována po dobu 15 sekund, byl přidán HMDI (10 % hmot./hmot. kolagenu) a kaše byla homogenizována po dalších 2 x 15 sekund. Kaše byla zbavena plynu, byla nalita do dvou Petriho misek o průměru 9 cm, byla zmrazená a sušena sublimací ze zmraženého stavu za použití teplot rostoucích od -30 °C do 70 C v průběhu 72 hodin.

Kolagenní/ORC oligosacharidový tampon byl potom testován na svou schopnost vázat růstový faktor odvozený od destiček (PDGF). Pro účely srovnání bylo také testováno Interceed vlákno a prostý kolagenový tampon (připravený způsobem pospaným výše, ale bez přidání ORC oligosacharidu). V každém případě byla malá část testovaného materiálu (čtverce přibližně 1 cm² vlákna Interceed a řezy přibližně 1 cm x 0,5 cm x 0,4 cm tamponu) zvážena a ponořena do 100 mM dibazického pufru fosforečnanu sodného obsahujícího 150 mM chloridu sodného (celkový objem 1 ml) po dobu alespoň jedné hodiny při pokojové teplotě. Vzorky byly potom inkubovány s 2 % hovězím sérovým albuminem (BSA) ve fosfátem pufrovaném salinickém roztoku (PBS) po dobu 2 hodin při pokojové teplotě. 25 ng PDGF bylo potom přidáno do každého vzorku ve 250 TI PBS obsahujícím 2 % BSA a vzorky byly potom inkubovány další hodinu při 37 °C.

Každý vzorek byl potom promyt třikrát 250 TI PBS a potom zvyšujícími se koncentracemi chloridu sodného.

Nakonec byl každý vzorek promyt 4,0 M močovinou. Při ELISA analýze původních PDGF přípravků a různých výplachů ze vzorků byly získány následující výsledky:

-6CZ 294839 B6

Tabulka 1 - Vazba PDGF-AB

Vzorek	Kolagen	Kolagen/ORC	Interceed
Původní	100%	100%	100%
Nenávazný	20,6%	22,9%	15,4%
PBS výplach	1,8%	11,1%	7,5%
0,3M NaCl	4,5%	12,3%	1,9%
0,5MNaCl	22,0%	22,2%	7,7%
l,0MNaCl	11,9%	15,2%	11,2%
2,0MNaCl	3,0%	5,1%	7,8%
3,0M NaCl	0%	4,3%	3,4%
4,0M NaCl	0%	4,0%	9,7%
Zpětně získáno	63,8%	97,1%	64,6%

Výsledky ukazují, že všechny tři testované materiály vázaly podobná množství PDGF, ale nejvyšší zpětný zisk PDGF umožňoval tampon vyrobený z kolagenu/ORC oligosacharidu.

Vazebné charakteristiky jsou také jedinečně odlišné pro materiály z kolagenu/ORC oligosacharidu ve srovnání s jednotlivými srovnávacími materiály. Tato pozorování naznačují, že komplex má jedinečnou vazbu PDGF, která může být využita jak pro exogenní vazbu, tak pro endogenní vazbu a uvolňování růstového faktoru.

Claims (16)

1. Farmaceutický přípravek pro lokální, orální nebo parenterální podání, vyznačující se t í m , že obsahuje oxidovaný oligosacharid mající průměrnou molekulovou hmotnost v rozmezí 1000 až 50 000.

2. Farmaceutický přípravek podle nároku 1,vyznačující se tím, že obsahuje oxidovaný oligosacharid odvozený od oxidovaného bakteriálního nebo rostlinného polysacharidu.

3. Farmaceutický přípravek podle nároku 1,vyznačující se tím, že obsahuje oxidovaný oligosacharid odvozený od oxidovaného živočišného polysacharidu nebo oxidovaného syntetického polysacharidu.

4. Farmaceutický přípravek podle nároku 1, vyznačující se tím, že obsahuje oxidovaný oligosacharid odvozený od oxidované celulózy nebo oxidovaného derivátu celulózy.

5. Farmaceutický přípravek podle nároku 1,vyznačující se tím, že obsahuje oxidovaný oligosacharid odvozený od oxidovaného derivátu dextranu, gellan gumy, xanthanové gumy, agaru, škrobu, konjac, karagénu, guarové gumy, pětinu, karboxymethylcelulózy, methylhydroxypropylcelulózy, acetatu celulózy, methylcelulózy, fosfátu celulózy, ethylcelulózy nebo inulinu.

6. Farmaceutický přípravek podle jakéhokoliv z předcházejících nároků, vyznačující se t í m , že obsahuje oxidovaný oligosacharid mající průměrnou molekulovou hmotnost v rozmezí 5000 až 25 000.

-7CZ 294839 B6

7. Farmaceutický přípravek podle jakéhokoliv z předcházejících nároků, vyznačující se t í m, že oxidovaný oligosacharid je navázán na farmakologicky aktivní činidlo zahrnující antibiotikum, antiseptikum, peptid nebo protein.

8. Farmaceutický přípravek podle nároku 7, vyznačující se tím, že peptidem nebo proteinem je růstový faktor.

9. Použití farmaceutické přípravku podle jakéhokoliv z nároků 1 až 8 pro výrobu prostředku pro krytí ran.

10. Způsob přípravy oxidovaného oligosacharidu majícího průměrnou molekulovou hmotnost uvedenou v nároku lvyznačující se tím, že:

a) se oxidovaná celulóza mající průměrnou molekulovou hmotnost alespoň 50 000 ošetří vodným alkalickým roztokem při teplotě a po dobu dostatečnou pro částečnou hydrolýzu uvedené oxidované celulózy, případně v přítomnosti farmakologicky aktivního činidla, a

b) vzniklý oxidovaný oligosacharid se izoluje z roztoku.

11. Způsob podle nároku 10, vyznačující se tím, že alkalickým roztokem je roztok hydroxidu nebo hydrogenuhličitanu alkalického kovu.

12. Způsob podle nároku 10 nebo 11, vyznačující se tím, že se oxidovaný oligosacharid získá z roztoku úpravou pH na 7 nebo méně za použití kyseliny.

13. Způsob podle nároku 12, vyznačující se tím, že kyselina je koncentrovaná minerální kyselina.

14. Způsob podle jakéhokoliv z nároků 10 až 13, vy z n a č uj í c í se tím, že:

a) v alkalickém roztoku oxidované celulózy se rozpustí nebo suspenduje farmakologicky aktivní činidlo, a

b) oxidovaný oligosacharid se vysráží redukcí pH roztoku nebo disperze.

15. Způsob podle jakéhokoliv z nároků 10 až 13, vy z n a č u j í c í se tím, že:

a) v alkalickém roztoku oxidované celulózy se rozpustí nebo suspenduje farmakologicky aktivní činidlo, a

b) ze získaného roztoku nebo disperze se odstraní rozpouštědlo.

16. Způsob podle nároku 15, vyznačující se tím, že se rozpouštědlo v kroku b) odstraní sublimací ze zmraženého stavu.