CZ293579B6 - Stereoselektivní mikrobiální redukce racemického tetralonu - Google Patents
Stereoselektivní mikrobiální redukce racemického tetralonu Download PDFInfo
- Publication number
- CZ293579B6 CZ293579B6 CZ19993790A CZ379099A CZ293579B6 CZ 293579 B6 CZ293579 B6 CZ 293579B6 CZ 19993790 A CZ19993790 A CZ 19993790A CZ 379099 A CZ379099 A CZ 379099A CZ 293579 B6 CZ293579 B6 CZ 293579B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- formula
- compound
- atcc
- microorganism
- enzyme
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 95
- 230000009467 reduction Effects 0.000 title claims abstract description 73
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 title claims abstract description 27
- 230000000707 stereoselective effect Effects 0.000 title claims abstract description 22
- XHLHPRDBBAGVEG-UHFFFAOYSA-N 1-tetralone Chemical compound C1=CC=C2C(=O)CCCC2=C1 XHLHPRDBBAGVEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 title abstract description 44
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract description 113
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 99
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 69
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 69
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 16
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 4
- 241000320412 Ogataea angusta Species 0.000 claims description 29
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 27
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 claims description 21
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 20
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N teixobactin Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H]1C(N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C[C@@H]2NC(=N)NC2)C(=O)N[C@H](C(=O)O[C@H]1C)[C@@H](C)CC)=O)NC)C1=CC=CC=C1 LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N 0.000 claims description 17
- 241000293029 Absidia caerulea Species 0.000 claims description 11
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 9
- 244000168141 Geotrichum candidum Species 0.000 claims description 7
- 235000017388 Geotrichum candidum Nutrition 0.000 claims description 7
- 241000306282 Umbelopsis isabellina Species 0.000 claims description 6
- 241000863486 Vinca minor Species 0.000 claims description 6
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 6
- 230000006340 racemization Effects 0.000 claims description 6
- 241000192237 [Candida] schatavii Species 0.000 claims description 5
- 241000223678 Aureobasidium pullulans Species 0.000 claims description 4
- 241000228150 Penicillium chrysogenum Species 0.000 claims description 4
- 241000187419 Streptomyces rimosus Species 0.000 claims description 4
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 claims description 4
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 claims description 4
- 241001539803 Magnusiomyces capitatus Species 0.000 claims description 3
- 241001123649 Schwanniomyces polymorphus Species 0.000 claims description 3
- 241000180122 Umbelopsis vinacea Species 0.000 claims description 3
- 241000235648 Pichia Species 0.000 claims description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 2
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 claims description 2
- 241000235389 Absidia Species 0.000 claims 1
- VGKDLMBJGBXTGI-SJCJKPOMSA-N sertraline Chemical compound C1([C@@H]2CC[C@@H](C3=CC=CC=C32)NC)=CC=C(Cl)C(Cl)=C1 VGKDLMBJGBXTGI-SJCJKPOMSA-N 0.000 abstract description 10
- 229960002073 sertraline Drugs 0.000 abstract description 10
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 abstract description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 abstract description 4
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 52
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 19
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 18
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 18
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 17
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 16
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 10
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 10
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 8
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 7
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 7
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 6
- 238000004296 chiral HPLC Methods 0.000 description 6
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 6
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 6
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 6
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 5
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 5
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 5
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 238000011916 stereoselective reduction Methods 0.000 description 5
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 4
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 4
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 4
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 4
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 2-Butanone Chemical compound CCC(C)=O ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 3
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 3
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 3
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 3
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 3
- AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 1,4-benzoquinone Chemical compound O=C1C=CC(=O)C=C1 AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000004189 3,4-dichlorophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(Cl)=C(Cl)C([H])=C1* 0.000 description 2
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001489166 Cyberlindnera fabianii Species 0.000 description 2
- 241000159512 Geotrichum Species 0.000 description 2
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N Sodium methoxide Chemical compound [Na+].[O-]C WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 150000002440 hydroxy compounds Chemical class 0.000 description 2
- -1 ketone compound Chemical class 0.000 description 2
- 125000000468 ketone group Chemical group 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 2
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 2
- LPNYRYFBWFDTMA-UHFFFAOYSA-N potassium tert-butoxide Chemical compound [K+].CC(C)(C)[O-] LPNYRYFBWFDTMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- AYQMNFRCBKOMIA-UHFFFAOYSA-N 1-benzazepin-2-one Chemical compound O=C1C=CC=C2C=CC=CC2=N1 AYQMNFRCBKOMIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RZPFVRFSYMUDJO-UHFFFAOYSA-N 2h-naphthalen-1-one Chemical compound C1=CC=C2C(=O)CC=CC2=C1 RZPFVRFSYMUDJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VGKDLMBJGBXTGI-UHFFFAOYSA-N 4-(3,4-dichlorophenyl)-n-methyl-1,2,3,4-tetrahydronaphthalen-1-amine Chemical compound C12=CC=CC=C2C(NC)CCC1C1=CC=C(Cl)C(Cl)=C1 VGKDLMBJGBXTGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004172 4-methoxyphenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(OC([H])([H])[H])=C([H])C([H])=C1* 0.000 description 1
- 241000208140 Acer Species 0.000 description 1
- 108010002945 Acetoin dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 241000186046 Actinomyces Species 0.000 description 1
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 1
- 208000019901 Anxiety disease Diseases 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 235000016068 Berberis vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 241000335053 Beta vulgaris Species 0.000 description 1
- 108090000492 Carbonyl Reductase (NADPH) Proteins 0.000 description 1
- 102000034565 Carbonyl Reductase (NADPH) Human genes 0.000 description 1
- 241000252867 Cupriavidus metallidurans Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 241001123635 Dipodascus Species 0.000 description 1
- YPZRHBJKEMOYQH-UYBVJOGSSA-N FADH2 Chemical compound C1=NC2=C(N)N=CN=C2N1[C@@H]([C@H](O)[C@@H]1O)O[C@@H]1COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C(NC(=O)NC2=O)=C2NC2=C1C=C(C)C(C)=C2 YPZRHBJKEMOYQH-UYBVJOGSSA-N 0.000 description 1
- YTNIXZGTHTVJBW-SCRDCRAPSA-N FMNH2 Chemical compound OP(=O)(O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2NC2=C1NC(=O)NC2=O YTNIXZGTHTVJBW-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 235000014663 Kluyveromyces fragilis Nutrition 0.000 description 1
- 244000285963 Kluyveromyces fragilis Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- NTIZESTWPVYFNL-UHFFFAOYSA-N Methyl isobutyl ketone Chemical compound CC(C)CC(C)=O NTIZESTWPVYFNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UIHCLUNTQKBZGK-UHFFFAOYSA-N Methyl isobutyl ketone Natural products CCC(C)C(C)=O UIHCLUNTQKBZGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000235575 Mortierella Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 241000866625 Polymorphus Species 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010009736 Protein Hydrolysates Proteins 0.000 description 1
- 241000235350 Schizosaccharomyces octosporus Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 241000222292 [Candida] magnoliae Species 0.000 description 1
- XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N [[(2r,3r,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3-hydroxy-4-phosphonooxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] [(2s,3r,4s,5s)-5-(3-carbamoylpyridin-1-ium-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl phosphate Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229940125709 anorectic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001430 anti-depressive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003529 anticholesteremic agent Substances 0.000 description 1
- 229940127226 anticholesterol agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000935 antidepressant agent Substances 0.000 description 1
- 229940005513 antidepressants Drugs 0.000 description 1
- 239000002830 appetite depressant Substances 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- RPZUBXWEQBPUJR-UHFFFAOYSA-N bicyclo[4.2.0]octane Chemical class C1CCCC2CCC21 RPZUBXWEQBPUJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036983 biotransformation Effects 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000000306 component Substances 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 150000003997 cyclic ketones Chemical class 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 206010013663 drug dependence Diseases 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 235000021321 essential mineral Nutrition 0.000 description 1
- LJQKCYFTNDAAPC-UHFFFAOYSA-N ethanol;ethyl acetate Chemical compound CCO.CCOC(C)=O LJQKCYFTNDAAPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OHLRLMWUFVDREV-UHFFFAOYSA-N ethyl 4-chloro-3-oxobutanoate Chemical compound CCOC(=O)CC(=O)CCl OHLRLMWUFVDREV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000001640 fractional crystallisation Methods 0.000 description 1
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 108010084715 isopropanol dehydrogenase (NADP) Proteins 0.000 description 1
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 1
- 239000008274 jelly Substances 0.000 description 1
- 150000002596 lactones Chemical class 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000003819 low-pressure liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000020429 malt syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 229940043265 methyl isobutyl ketone Drugs 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 1
- 150000002825 nitriles Chemical class 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010036596 premature ejaculation Diseases 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 150000003333 secondary alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 208000011117 substance-related disease Diseases 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 235000011149 sulphuric acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/24—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carbonyl group
- C12P7/26—Ketones
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
- C12P41/002—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by oxidation/reduction reactions
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Způsob stereoselektivní mikrobiální redukce racemického tetralonu vzorce I na (4R)-tetralol vzorce II za použití mikroorganismu nebo enzymového redukčního systému schopného provést tuto redukci obsahujícího enzym odvozený z uvedeného mikroorganismu a kofaktor pro uvedený enzym, přičemž výsledná směs se inkubuje za podmínek dostatečných pro získání (4R)-tetralolu vzorce II a ponechání v podstatě nezreagovaného (4S)-tetralonu vzorce V nebo "chirálního tetralonu". Chirální tetralon může být použit při syntéze sertralinu. Předmětný způsob dále případně zahrnuje separaci (4S)-tetralonu vzorce V od (4R)-tetralolu vzorce II. (4R)-Tetralol může být recyklován k vytvoření sloučeniny vzorce I a předmětný způsob opakován k získání ještě více požadovaného (4S)-tetralonu vzorce V.ŕ
Description
Stereoselektivní mikrobiální redukce racemického tetralonu
Oblast techniky
Předložený vynález se týká nových způsobů přípravy (45)-enantiomeru 4-(3,4-dichlorfenyl)3,4-dihydro-l(277)-naftalenonu (zde také označovaného jako „chirální tetralon“ nebo ,,(45)-tetralon“) a zejména se týká stereoselektivní mikrobiální redukce racemického 4(3,4-dichlorfenyl)-3,4—dihydro-l(277)naftalenonu (zde také označovaného jako „racemický 10 tetralon“) na chirální tetralon.
Dosavadní stav techniky
Chirální tetralon připravený způsoby předloženého vynález může být dále reagován k přípravě čistého cw-(15)(45)-?/-methyl-4-(3,4-dichlorfenyl)-l,2,3,4-tetrahydro-l-naftalenaminu, běžně označovaného jako sertralin. Sertralin je dobře znám jako užitečný například jako antidepresant a anorektický prostředek a při léčení chemických závislostí, poruch spojených s úzkostí, předčasně ejakulace, rakoviny a postmyokardiálního infarktu.
V dosavadním stavu techniky jsou známy metody přípravy sertralinu jako jsou například ty, které jsou popsán v US patentech 4 536 518, 4 777 288, 4 839 104, 4 855 500, 4 940 731, 4 962 128, 5 082 970, 5 130 338, 5 196 607, 5 248 699, 5 442 116, 5 463 126, 5 466 880, 5 597 826, a 5 750 794 a v článku W.M. Welcha, jr., aj., kteiý se objevil v Joumal of Medicinal Chemistiy, 25 sv. 27, č. 11, str. 1 508, (1984).
Některé zvýše zmíněných patentů se týkají syntézy směsi cis- a trans-izomerů racemického 7V-methyl-4-(3,4-dichlorfenyl)-l,2,3,4-tetrahydro-l-naftalenaminu. Jak je tam popsáno, cisa /rans-izomery, stejně jako jejich (5) a (R) enantiomery mohou být odděleny způsoby známými 30 odborníkům v oboru včetně například frakční krystalizace nebo chromatografie.
Je také známo vybrat pro konečně požadovanou chiralitu dřívější postupy při syntéze sertralinu. Například výše zmíněný US patent 5 740 794 zveřejňuje způsob přípravy chirálního tetralonu reakcí racemického tetralonu a symetrickým ketonovým redukčním prostředkem, čímž se získají 35 cis- nebo trans-alkoholy v závislosti na chiralitě a symetrického použitého reagentu a pak se rozdělí alkoholy a oxidují se (15,45) a/nebo (17?,45) alkoholy na (45)-tetralon.
Je také známo v dosavadním stavu techniky, že chirální sloučeniny mohou být syntetizovány pomocí mikroorganizmů, jak jsou houby, například kvasinky. Například použití kvasinek 40 k redukci ketonu na chirální alkoholy je dobře známo. Avšak jak ocení odborníci v příslušném oboru, chemické a optické výtěžky, například příslušné enantiomery a jejich množství z takovýchto mikrobiálních redukcí obecně kolísají značně v závislosti například na příslušném zvoleném mikroorganizmu, stejně jako na substituentech výchozí látky.
US patent 5 049 497 zveřejňuje způsob rozložení racemického derivátu bicyklo[4,2,0]oktanu stykem tohoto derivátu s Bakerovými kvasinkami za podmínek dostatečných k poskytnutí směsi ketonu a alkoholu vysoké enantiomemí čistoty. Jak je tam popsáno, jenom jeden enantiomemí čistoty. Jak je tam popsáno, jenom jeden enantiomer příslušného racemického ketonu se redukuje, aby poskytl alkohol.
US patent 5 580 764 zveřejňuje asymetrický redukční způsob, který používá intaktního mikroorganizmu nebo přípravku z jeho rozrušených buněk k převedení cyklického ketonu na odpovídající chirální alkohol.
US patent 5 618 707 zveřejňuje způsob stereoselektivní redukce ketonových substrátů přídavkem těchto substrátů do kultivačního bujónu buď Zigosaccharomyces bailii, ATCC, (Americká sbírka typových kultur) č. 38 924 nebo Schizosaccharomyces octosporus ATCC č. 2 479, inkubací výsledné směsi a izolací hydroxysloučeniny konvenčními prostředky jako je například extrakce organickými rozpouštědly, adsorpce na pryskyřice nebo chromatografie, pro následující použití jako meziproduktu při přípravě prostředku snižujícího sérový cholesterol.
Izolovaná hydroxysloučenina, která je zde popsána, byla analyzována chirální vysokovýkonnostní kapalinovou chromatografií (HPLC), HPLC s reverzními fázemi nebo oběma. Konzistentně s tím by odbornými v relevantním oboru měli porozumět, jak je zde popsáno, mnoho z velkého počtu mikroorganizmů, které byly zkoumány pro jejich schopnost redukovat ketonovou skupinu vybraného substrátu, selhalo při redukci ketonové skupiny s požadovanou specifitou nebo produktivitou.
Nyní bylo neočekávaně zjištěno, že oblast mikroorganizmů, včetně hub, například kvasinek a aktinomycet, podstatně stereoselektivně redukuje racemický tetralon. Specifičtěji předmětná stereoselektivní mikrobiální redukce selektivně redukuje (47?)-tetralon zracemické směsi, přičemž ponechává (4S)-tetralon v podstatě nezreagovaný. Navíc nežádoucí (4Á)-tetralon vytvořený předmětným způsobem může být oxidován a pak racemizován na racemický tetralon a předmětný způsob opakován k dosažení dokonce více (4S)-tetralonu.
(4S)-Tetralon vytvořený předmětným způsobem může být použít při syntéze sertralinu.
Všechny zde citované dokumenty, včetně předcházejících, jsou zde začleněny jejich odkazem v jejich celistvostech.
Podstata vynálezu
Předložený vynález se týká mikrobiální redukce karbonylových skupin, které zahrnuje styk ketonové sloučeniny, racemického tetralonu vzorce I s mikroorganizmem nebo enzymovým redukčním systémem, schopným provést předmětnou redukci, zahrnujícím enzym odvozený z uvedeného mikroorganizmu a kofaktor pro uvedený enzym, a inkubaci výsledné směsi za vhodných podmínek takových, že sloučenina mající hydroxyskupinu, specificky (47?)-tetralon vzorce II může být vytvořen a akumulována v médiu a sloučenina mající požadovanou stereochemii, (4S)-tetralon vzorce V uvedený dále, zůstává v podstatě nezreagovaná.
(4S)-Tetralon vzorce V uvedeného dále, to je chirální tetralon, pak může být izolován jakýmkoli vhodným způsobem, například chromatografií nebo krystalizaci. Navíc (47?)-tetralon vzorce II může být separován od sloučenin vzorců III až V, oxidován a racemizován na racemický tetralon a předmětná stereoselektivní mikrobiální redukce může být opakována, čímž se získá ještě více požadovaného chirálního ketonu.
V souhlase s tím předložený vynález vytváří způsoby provádění následující stereospecifícké mikrobiální redukce:
-2CZ 293579 B6
(47?), (4S) (47?) (4S)
(47?) (45) který zahrnuje styk sloučeniny vzorce I s mikroorganizmem nebo enzymovým redukčním systémem schopným provést předmětnou redukci, zahrnujícím enzym odvozený z uvedeného mikroorganizmu a kofaktor pro uvedený enzym, a inkubaci výsledné směsi za podmínek dostatečných k získání většího množství sloučeniny vzorce II než sloučeniny vzorce III, čímž se nechá větší množství sloučeniny vzorce V nezreagované než nezreagované sloučeniny vzorce IV.
Předmětná stereospecifická redukce může být také představena způsobem (I) (II) <V)
(4Λ), (4S) (4Λ) (4$) který zahrnuje styk sloučeniny vzorce I s mikroorganizmem nebo enzymovým redukčním systémem schopným dosáhnout předmětné redukce, obsahujícím enzym odvozený z uvedeného mikroorganizmu a kofaktor pro uvedený enzym, a inkubaci výsledné směsi za podmínek dostatečných k získání (47?)-tetralonu vzorce II a ponechání v podstatě nezreagovaného (45)-tetralonu vzorce V.
Stereoselektivní redukce dále případně zahrnuje separaci (4S)-tetralonu vzorce V od (41?)— tetralonu vzorce II. (47?)-Tetralol může pak být oxidován k vytvoření (47?)-tetralonu, který se pak nechá reagovat například s bází, čímž se vytvoří racemický tetralon vzorce I a předmětná stereoselektivní mikrobiální redukce může být opakována, aby se získalo ještě více požadovaného (45)-tetralonu vzorce V, to je (45)-enantiomeru racemického tetralonu vzorce I.
Předložený vynález vyváří způsoby, které zahrnují stereoselektivní mikrobiální redukci sloučeniny vzorce I na sloučeninu vzorce II stykem sloučeniny vzorce I s mikroorganizmem nebo enzymovým redukčním systémem schopným dosáhnout předmětné redukce, zahrnující enzym odvozený z uvedeného mikroorganizmu a kofaktor pro uvedený enzym, a inkubaci výsledné směsi za podmínek dostatečných k získání sloučeniny vzorce II, čímž zůstává podstatně více sloučeniny vzorce V nezreagováno než sloučeniny vzorce IV a podstatně více sloučeniny vzorce II se vytvoří oproti sloučenině vzorce III.
-3CZ 293579 B6
Ve výhodném provedení se provede styk sloučeniny vzorce II s enzymovým redukčním systémem.
V dalším výhodném provedení styku sloučeniny vzorce I se provede tento styk s enzymovým redukčním systémem, kde je enzym imobilizován.
Ve zvlášť výhodném provedení styku sloučeniny vzorce I je enzymový’ redukční redukční systém odvozen z Hansenula polymorpha ATCC č. 26 012.
V dalším výhodném provedení mikroorganizmu je přípravek z jeho rozrušených buněk. V ještě dalším výhodném provedení mikroorganizmu je jeho acetonový práškový enzymatický přípravek.
Ve zvlášť výhodném provedení předloženého vynálezu se použije intaktní mikroorganizmus. Ve výhodném provedení, kde je mikroorganizmem intaktní mikroorganizmus, se sloučenina vzorce I uvede do styku s fermentačním médiem, kultivační bujónem nebo rozpouštědlem obsahujícím mikroorganizmus.
V dalším výhodném provedení, kde je mikroorganizmus intaktním mikroorganizmem, se sloučenina vzorce I uvede do styku s promytým intaktním mikroorganizmem. V ještě dalším výhodném provedení, kde je mikroorganizmus intaktní, se sloučenina obecného vzorce I uvede do styku s imobilizovaným intaktním mikroorganizmem.
Ve zvlášť výhodném provedení předloženého vynálezu je mikroorganizmus intaktní mikroorganizmus, který je vypěstován ve fermentačním médiu a styk se uskuteční přídavkem sloučeniny vzorce I do tohoto fermentačního média.
V dalším zvlášť výhodném provedení tohoto vynálezu je mikroorganizmus intaktní organizmus, který je vypěstován v růstovém médiu po dobu asi 48 hodin a styk se uskuteční v tomto růstovém médiu přídavkem sloučeniny vzorce I do něho a inkubace probíhá asi po dobu 5 dnů.
V ještě dalším výhodném provedení tohoto vynálezu je mikroorganizmem buď houba, například kvasinka nebo aktinomyceta nebo jejich mutant, který je schopen provedení stereoselektivní redukce.
V ještě dalším výhodném provedení tohoto vynálezu je mikroorganizmem houba. V ještě dalším výhodném provedení, kde mikroorganizmem je houba, je houbou Absidia coerulea ATCC č. 20 137.
Ve zvlášť výhodném provedení tohoto vynálezu je mikroorganizmem kvasinka. Ve zvlášť výhodném provedení tohoto vynálezu, kde je mikroorganizmem kvasinka, je kvasinkou Hansenula polymerpha ATCC č. 26 012, také uložená jako ATCC č. 74 449.
Kde Hansenula polymorpha ATCC č. 26 012, také uložená jako ATCC č. 74 449, je použita jako mikroorganizmus, předmětná stereoselektivní mikrobiální redukce ocenitelně redukuje jen jeden enantiomer sloučeniny vzorce I, čímž se získá odpovídající alkohol, to je sloučenina vzorce II, přičemž se ponechává další enantiomer sloučeniny vzorce Π, to je sloučenina vzorce V v podstatě nezreagována.
Jak bylo diskutováno dříve, způsoby předloženého vynálezu dále případně zahrnují separaci, například provedenou použitím krystalizace nebo chromatografíe, sloučeniny vzorce V od sloučenin vzorců II až IV a použití takovéto separované sloučeniny vzorce V při syntéze sertralinu za použití jakýchkoli známých způsobů.
-4CZ 293579 B6
Jak bylo také diskutováno dříve, je výhodné oxidovat izolovaný (47?)-tetralon vzorce II na (4J?)-tetralon vzorce II na (4J?)-tetralon vzorce IV. Pak je dále výhodné racemizovat, výhodně reakcí (4Á)-tetralonu s bází, (4J?)-tetralon vzorce IV na racemický tetralon vzorce I. Oxidace a racemizace recykluje nežádaný (47?)-tetralon pro další kolo stereoselektivní mikrobiální redukce podle způsobů předloženého vynálezu.
Recyklace nežádaného (47?)-tetralonu zvyšuje množství požadovaného (4S)-tetralonu a snižuje množství nežádoucího vypouštěného (47Q-tetralolu. Oxidace a racemizace oxidovaného produktu se může provádět pomocí jakékoli vhodné známé metody k tomu určené.
Detailní popis vynálezu
Odborníci v oboru plně rozumějí výrazům zde použitým k popsání předloženého vynálezu, nicméně následující zde použité výrazy jsou zde dále popsány.
„Kofaktor“ znamená jakýkoli vhodný kofaktor, zahrnující enzymový redukční systém, jako je například NADH, NADPH, FADH, FMNH a/nebo PQQ, nebo jakýkoli vhodný kofaktor, který se vyskytuje s enzymem v mikroorganizmu.
„Enzymový redukční systém“ znamená vhodný mikrobiální oxidoreduktázový enzym a redukovanou formu kofraktoru pro oxidoreduktázový enzym, kde tento kofraktor může být buď odvozen z vybraného mikroorganizmu nebo může být z jakéhokoli vhodného zdroje. Enzym zahrnující enzymový redukční systém může být buď ve volném nebo imobilizované formě, například v koloně nebo vázaný do zrn.
„Mikrobiální redukce“ znamená stereoselektivní redukci předloženého vynálezu, jak se provádí enzymovým redukčním systémem, přičemž mikrobiální reduktáza zahrnuje enzymový redukční systém, intaktní mikroorganizmus nebo jakýkoli jeho přípravek a podobně.
„Mikroorganizmus“ zahrnuje jakýkoli intaktní mikroorganizmus nebo přípravek z něj, včetně například přípravku z rozrušených buněk mikroorganizmu, dehydratovaný přípravek z mikroorganizmu, například acetonový práškový enzymatický přípravek, mikroorganizmus promytý volný z například fermentačního média, kultivačního bujónu a podobně, mikroorganizmus imobilizovaný, například v koloně, vázaný do zrn a podobně.
Způsoby vytvořené předloženým vynálezem zahrnují stereoselektivní mikrobiální redukci sloučeniny vzorce I na sloučeninu vzorce II (i) (II) (lil)
(4/?),(4S) (47?) (4S)
(47?) (4$) stykem sloučeniny vzorce I s mikroorganizmem nebo enzymovým redukčním systémem schopným uskutečnit předmětnou redukci, zahrnujícím enzymem odvozený z uvedeného mikroorganizmu a kofaktor pro uvedený enzym, a inkubací výsledné směsi za podmínek dostatečných
-5CZ 293579 B6 pro získání sloučeniny vzorce II, přičemž podstatně více sloučeniny vzorce V zůstává nezreagováno, než sloučeniny vzorce IV a podstatně více sloučeniny vzorce II se vytvoří oproti sloučenině vzorce III.
Jak je známo odborníkům v oboru, sloučenina vzorce I, racemický tetralon, je směs (45)tetralonu a (47?}-tetralonu jak je uvedeno níže:
(47?) tetralon.
Sloučeniny, nebo specifičtěji tetraloly, vzorce II jsou:
(trans) (1S, 47?)
(cis) (17?, 47?).
Sloučeniny, nebo specifičtěji, tetraloly vzorce III jsou:
Sloučeniny vzorců II a III jsou zveřejněny a nárokovány v dříve zmíněném US patentu 5 750 794.
Požadovaná sloučenina vzorce V může být izolována jak je popsáno dále, od nežádoucích sloučenin vzorce II, a jakýchkoli sloučenin vzorců III nebo IV, které mohou být buď produkovány nebo zůstal nezreagovaný v závislosti na, například, vybraném mikroorganizmu a podmínkách inkubace.
-6CZ 293579 B6
Sloučeniny vzorce II mohou být převedeny na sloučeninu vzorce I například oxidací a racemizací a proběhnout předmětnou stereoselektivní mikrobiální redukcí, čímž se získá ještě další množství (4>S)-tetralonu vzorce V.
Způsob předložený vynálezu se snadno provádí. Tak je mikroorganizmus buď fermentován (intaktní mikroorganizmus) nebo inkubován (přípravek z rozrušených buněk, dehydratovaný přípravek nebo jakýkoli vhodný přípravek z mikroorganizmu) v přítomnosti racemického tetralonu představeného vzorcem I, k modifikaci racemického tetralonu a zejména k redukci nežádaného (4R)-enantiomeru racemického ketonu na jeho odpovídající alkohol představený vzorcem II, přičemž se nechává požadovaný (4S)-enantiomer představený vzorcem V v podstatě nezreagovaný, čímž v jednom stupni se získá opticky obohacený (4S)-enantiomer.
(45)-enantiomer může pak být dále reagován způsoby dobře známými odborníků v odpovídajícím oboru, jak je popsán na příklad v dříve uvedených US patentech 4 536 518, 4 777 288,
839 104, 4 855 500, 4 940 731, 2 962 128, 5 028 970, 5 130 338, 5 196 607, 5 248 699,
442 116, 5 463 126, 5 466 880, 5 597 826 a 5 750 794 a ve výše uvedeném článku W. M. Welchajr. aj. ke konečnému získání sertralinu.
Aktivita, způsoby pro testování aktivit, dávky, dávkovači formy, způsoby podávání a základní informace týkající se sertralinu jsou uvedeny například ve výše uvedených US patentech č. 4 536 518,4 777 288 a 4 839 104 a ve výše zmíněném článku W. M. Welchajr. aj.
Jakýkoli vhodný mikroorganizmus může být použit ve způsobu předloženého vynálezu. Jak je popsáno dříve, použitý mikroorganizmus v předmětném způsobu může být intaktní, jakýkoliv jeho vhodný přípravek, například jeho přípravek z rozrušených buněk, jeho dehydratovaný přípravek a buď volný nebo imobilizovaný. Avšak kde se použije neintaktní mikroorganizmus v předloženém vynálezu jako je například přípravek z rozrušených buněk, například buněčný extrakt, acetonový práškový enzymatický přípravek nebo enzym z něj odvozený, odborníci v oboru by měli vědět, že je také zahrnut vhodný kofaktor pro tento enzym.
Odborníci v oboru rozumějí ze zde uvedeného popisu a z jejich odpovídajících znalostí, jak připravit vhodný přípravek z rozrušených buněk, jak je popsáno například R. N. Patelem a j. v článku „Oxidace sekundárních alkoholů na methylketony kvasinkami“, publikovaném v Applied and Environmental Microbiology, 38 (2):219-223 (1979).
Odborníci v oboru porozumějí z popisu zde uvedeného a jejich odpovídajících vlastností jak připravit vhodný acetonový práškový enzymatický přípravek, jak je popsáno například K. Nakamurou a j. v článku „Asymetrická redukce ketonů acetonovým práškem Geotrichum candidum“, publikovaném v Tetrahedron Letters, 37(10):1629-1632 (1996).
Navíc enzym (např. oxidoreduktáza) jakéhokoli vhodného mikroorganizmu může být také použit v předmětném způsobu a tento enzym může být izolován z mikroorganizmu jakoukoli vhodnou metodou známou odborníkům v oboru a pokud jde o intaktní mikroorganizmus, může být použit v předmětném způsobu v buď volné nebo imobilizované formě.
Odborníkům v oboru bude zřejmé z popisu zde uvedeného a jejich odpovídajících znalostí jak izolovat a čistit enzym vhodného mikroorganizmu, jak je obecně popsáno například v článcích od M. Wady aj. „Čištění a charakterizace NADPH-závislé karbonyíreduktázy zahrnuté v stereoselektivní redukci ethyl-4-chlor-3-oxobutanoátu, z Candida magnoliae“, publikovaném vBiosci. Biotechnol. Biochem., 62(2):280-285 (1998), P. Trošty aj., „Čištění a vlastnosti NAP(P)H: (chinonakceptorové)oxidoreduktázy řepných buněk“, publikovaném v Eur. J. Biochem., 234:452-458 (1995), K.M.Madyasthy a T.L. Gururaji, „Čištění a některé z vlastností nové sekundární alkoholové dehydrogenázy zAlcaligenes Eutrophus“, publikovaném vBiochemical and Biophysical Reserch Communications, 211(2):540-546 (1995), O. Bortoliniho aj., „Kinetické štěpení vic-diolů pomocí Bacillus stearothermophylus diacetylreduktázy“,
-7CZ 293579 B6 publikovaném v Tetrahedron:Asymmetry, 9:647-651 (1998), R. N. Patela a j. „Stereospecifická mikrobiální redukce 4,5-dihydro-4-(4-methoxyfenyl)-6-(trifluormethyl-177-l)benzazepin-2onu“, publikovaném v Enzyme Microb. Technol., 3:906-912 (1991) a R. N. Patela aj., „Stereoselektivní mikrobiální/enzymatická oxidace (exo,exo)-7-oxabicyklo[2,2,l]heptan-2,3dimethanolu na odpovídající chirální laktol a lakton“, publikovaném v Enzyme Microb. Technol., 14:778-784 (1992) a v US patentech 5 523 223 a výše zmíněném 5 580 764.
Vhodné mikroorganizmy zahrnují Hansenula polymorpha ATCC č. 26 012, Hansenula polymorpha ATCC č. 74 449, Absidia coerulea ATCC č. 20 137, Geotrichum candidum ATCC č. 34 614, Geotrichum candidum ATCC č. 62 401, Mortierella isabellina ATCC č. 42 613, Mortierella isabellina ATCC č. 38 063, Mortieralla vinacea ATCC č. 09 515, Penicillium notatum ATCC č. 36 740, Blastoschizomyces capitatus ATCC č. 28 575, Monosporium olivaceum v. major ATCC č. 36 300, Aureobasidium pullulans ATCC č. 16 623, Debaryomyces polymorphus ATCC č. 20 280, Saccharomyces cerevisiae ATCC č. 16 755 a Streptomyces rimosus ss. rimosus ATCC č. 10 970, a jejich mutanty, které jsou známy nebo jinak získatelné odborníky v odpovídajícím oboru a jsou schopné, navzdory takovéto mutace, uskutečnit stereoselektivní mikrobiální redukci zde uvedenou.
Výhodné intaktní mikroorganizmy budou ty, které podstatně redukují (47?)-tetralon, přičemž nechávají (4S)-tetralon v podstatě nezreagovaný, kde zreagovaný zahrnuje redukci nebo jakoukoli jinou vlastní aktivitu, která by mohla degradovat nebo jinak negativně ovlivnit požadovaný (4S)-tetralon v jakémkoli stadiu předmětného způsobu.
Jak bude oceněno odborníky v oboru, z uvedeného popisu takováto nežádaná reakce (4S)tetralonu může být v podstatě zabráněna například použití enzymu odvozeného z vybraného mikroorganizmu oproti intaktnímu mikroorganizmu.
Mikroorganizmy vhodné pro použití při předmětné sterospecifické mikrobiální redukci mohou být připraveny jakýmkoli vhodným způsobem známým odborníkům v odpovídajícím oboru.
Například vhodným způsobem pro přípravu mikroorganizmu z komerčně dostupného původu je uveden dále.
Způsob vytvořený dále může být použit pro jakýkoli mikroorganizmus vhodný pro použití při předloženém způsobu tohoto vynálezu a odborníci v oboru by měli ze zde uvedeného popisu vědět, jak modifikovat jakoukoli část postupu, například metody přípravy mikroorganizmu, intaktního nebo přípravku, například rozrušených buněk nebo dehydratovaného, volného nebo mobilizovaného, způsobu přípravy vhodného enzymu odvozeného z takovéhoto mikroorganizmu, způsobu kontaktu racemického tetralonu s mikroorganizmem nebo enzymem obsahujícím enzymový redukční systém z něj odvozený, komponenty růstového média a podmínky, například teplotu, pH a podobně, nebo inkubační podmínky, aby se dosáhlo požadovaného výsledku v kterémkoli příslušném postupu.
Odborníci v oboru budou vědět z popisu, který je zde uveden a z jejich odpovídajících znalostí, jak připravit vhodný imobilizovaný intaktní mikroorganizmus, jak je popsán například A. Bauerem aj. v článku „Polyvinylalkoholem imobilizované celobuněčné přípravky pro biotransformaci nitrilů“ publikovaném v Biotechnology Letters, 18(3): 343-348 (březen 1996).
Jakákoli vhodná metoda styku sloučeniny I s mikroorganizmem nebo enzymovým redukčním systémem může být použita v tomto vynálezu. Sloučenina vzorce I může být kontaktována s mikroorganizmem nebo enzymovým redukčním systémem v jakémkoli vhodném pořádku.
Například sloučenina vzorce I může být přidána do média jako je kultivační bujón obsahující mikroorganizmus volný nebo imobilizovaný nebo určitou jeho kombinaci, nebo médium může obsahovat sloučeninu vzorce I a mikroorganizmus může pak být přidán do tohoto média, nebo
-8CZ 293579 B6 sloučenina vzorce I a mikroorganizmus mohou být přidány společně do takovéhoto média, nebo sloučenina vzorce I může být přidána do přípravku z jeho rozrušených buněk, nebo sloučenina vzorce I může být přidána do dehydratovaného přípravku mikroorganizmu, nebo buď sloučenina vzorce I nebo mikroorganizmus nebo enzymový redukční systém mohou být přidány do vhodného rozpouštědla obsahující ty druhé a podobně. Odborníkům v oboru bude jasné ze zde uvedeného popisu, jak modifikovat jakoukoli část předmětného způsobu, pokud je to třeba.
Je zvlášť výhodné podle předloženého vynálezu, že mikroorganizmus nebo enzymový redukční systém je odvozen zHansenula polymorpha ATCC č. 26 012. Lyofilizovaný vzorek Hansenula polymorpha ATCC č. 26 012 (původně přispěním od D. W. Levina) byl uložen sATCC lokalizovaný jako 10801 v University Boulevard Manassas, Virginia, 20110-2209, USA za podmínek Budapešťské smlouvy 26. června 1998. Této nově uložené kultuře bylo dále nové depozitní číslo ATCC 4. 74 449.
Tudíž je zvlášť výhodné v předloženém vynálezu, že mikroorganizmem je Hansenula polymorpha ATCC č. 74 449. Všechny restrikce na dostupnost veřejnosti této kultury mikroorganizmu takto uložené budou neodvolatelně odstraněny po vydání patentu na přihlášku tohoto vynálezu.
Kultury Hansenula polymorpha ATCC č. 26 012 mohou být získány z ATCC a příklad vhodného způsobu pro jejich přípravu z komerčně nabytého výrobku je uveden bezprostředně dále. Kultura takto získaná se přidá do vhodného růstového média a inkubuje se za třepání až nastane růst, kteréžto dva stupně jsou oceněny odborníky v oboru. Kultura takto připravená může být použita i inokulaci šikmin s částmi těchto šikmin zmrazenými jako základní zásoby. Alternativně kapalné zásobní kultury mohou být připraveny přidáním glycerolu na asi 10 % až asi 20 %, které jsou pak zmrazený na asi -80 °C, výhodně v malých kryozkumavkách.
Jak vědí odborníci v oboru, jakýkoli vybraný organizmus a jak je zde vytvořeno dále v příkladech pro Absidia coerulea ATCC č. 20 137 a zejména výhodný Hansenula polymorpha ATCC č. 26 012 nebo ATCC č. 74 449, vhodná metoda pro přípravu mikroorganizmu je následující: mikroorganizmus se inokuluje ze zmrazené zásobní kultury, jak je popsáno výše (asi 17% glycerolová zásoba) do buňky nebo skleněné zkumavky nebo s kovovým uzávěrem, obsahující růstové médium (obsahující alikvot ze sterilního roztoku, který zahrnuje Tween 80, glycerol a destilovanou vodu), kterážto kompozice je popsána dále detailněji.
Fermentace se provádí při teplotách v rozmezí asi 22 °C až asi 32 °C a výhodně při asi 29 °C za vhodného třepání, výhodně od asi 200 otáček za minutu do asi 220 otáček za minutu a nejvýhodněji při asi 210 otáčkách za minutu. Kde je to žádáno, pH růstového média může být udržováno použitím vhodných pufrů začleněných do fermentačního média a/nebo periodicky nastavováno přídavkem buď báze nebo kyseliny jak je třeba.
Jakékoli vhodné trvání růstu mikroorganizmu, styk mikroorganizmu se sloučeninou vzorce I a inkubace sloučeniny vzorce I s mikroorganizmem mohou být použity v předloženém vynálezu. Vhodný růst mikroorganizmů se může dosáhnout například během 24 hodin, v kteréžto době vhodný alikvot roztoku racemického tetralonu ve vhodném rozpouštědle, výhodně ethanolu, může být přidán do kultury.
Fermentace pak může pokračovat například od asi 2 do asi 6 dnů a výhodně například po dobu asi 5 dnů, v kteréžto době může být fermentační bujón extrahován pomocí vhodné extrakční metody při níž vhodné rozpouštědlo, jako je například ethylacetát, methylizobutylketon, methylethylketon, methylenchlorid a podobně, výhodně ethylacetát, odstraní organické sloučeniny z fermentačního bujónu. Po extrakci fermentačního bujónu a separaci organické a vodné fáze mohou být sloučeniny obsahující organický zbytek určeny pomocí vhodné metody jako je například chromatografíe, výhodně chirální HPLC.
-9CZ 293579 B6
Ve způsobu tohoto vynálezu může být použito jakékoli vhodné růstové médium a vhodné růstové médium bude obsahovat zdroj nebo zdroje asimilovatelného uhlíku, asimilovatelného dusíku a anorganické soli obsahující esenciální minerály.
Obecně mnoho cukrů jako je například glukóza, maltóza, mannóza, sacharóza, škrob, glycerid, prosté želé, melasy, sójové oříšky a podobně, může být použito jako zdroje similovatelného uhlíku.
Zdroje asimilovatelného dusíku zahrnují například látky, jako jsou kvasnice a kaseinové hydrolyzáty, primární kvasnice, kvasnicové extrakty, mouka z bavlníkových semen, tuhé látky ze sójových oříšků, pšeničné klíčky, masové extrakty, pepton, kukuřičný výluh a amonné soli.
Vhodné nutriční látky z anorganických solí pro použití kultivačním médiu tohoto vynálezu zahrnují například běžné soli obsahující sodík, železo, hořčík, draslík, kobalt, fosforečnan a podobně.
Zejména růstová média vhodná pro použití v předloženém vynálezu zahrnují například (a) dextrózu (asi 20 g), kvasnicový extrakt (asi 5 g), sójovou mouku (asi 5 g), NaCl (asi 5 g), K2HPO4 (asi 5 g) a destilovanou vodu (asi 1 1), pH se nastaví na asi 7,0 pomocí vodného roztoku H2SO4 (b) dextrin (asi 10 g), hovězí extrakt (asi 3 g), ardamin pH (asi 5 g), NZ amin typ E (asi 5 g), MgSO4.7H2O (asi 0,5 g), KH2PO4 (asi 0,37 g), CaCO3 (asi 0,5 g) a destilovanou vodu (asi 1 litr), pH se nastaví na asi pH 7,1 pomocí vodného roztoku HCI, načež následuje druhé stadium z glukózy (asi 10 g), Hy-Case SF (asi 2 g), hovězího extraktu (asi 1 g), výluh z kukuřičných stvolů (asi 3 g), a destilované vody (asi 1 litr), pH se nastaví na asi pH 7,0, (c) glukózu (asi 10 g), kukuřičný výluh (asi 6 g), KH2PO4 (3 g), CaCO3 (3,5 g), sójový olej (surový, asi 2,2 ml), kvasnicový extrakt (asi 2,5 g) a destilovanou vodu (asi 1 1), pH se nastaví od asi 7,0 do asi 7,3 pomocí vodného roztoku HCI, (d) sladový sirup (asi 20 g), sójovou mouku (asi 5 g), kasein (asi 1 g), sušené kvasnice (asi 1 g), NaCl (asi 5 g) a destilovanou vodu (asi 1 1), (e) laktózu (asi 75 g), Pharmamedia (nahrazuje kvasnicový extrakt (asi 40 g), CaCO3 (asi 10 g), Na2SO4 (asi 4 g) a destilovanou vodu (asi 1 1), (f) ISP č. 2 (viz například strana 460 Handbook of Microbial Media od R. M. Atlase, vydaná L. C. Parksem, CRC Press, lne., 1993 (Handbook)), (g) ISP č. 3 (viz str. 460 Handbook), (h) ISP č. 4 (viz str. 461 Handbook), (i) ISP č. 5 (viz str. 461-462 Handbook) a podobně.
Zvlášť výhodné růstové médium je 2krát (a) uvedené výše.
Odkaz na jednotlivé pufry, média, reagenty, styk nebo podmínky kultivace a podobně není určen k omezení, ale je třeba ho číst tak, že zahrnuje všechny takovéto příslušné látky, které odborníci v oboru znají jako zajímavé nebo hodnotné v příslušném kontextu, ve kterém se zde provádí diskuze. Například je možné substituovat jeden pufrový systém nebo kultivační médium za jiné, takže rozdílné, ale známé způsoby se použijí k dosažení stejných cílů jako jsou ty, ke kterým se
-10CZ 293579 B6 používá navrhované metody, materiálu nebo složení. Navíc by mělo být zřejmé, že předložený vynález zahrnuje zvětšení předmětného postupu pro komerční účely.
Tudíž jak vědí odborníci v oboru, růstové médiu, podmínky fermentace a/nebo množství racemického tetralonu, mohou být měněny k řízení výtěžku výsledných sloučenin a jejich relativních rychlostí produkce.
Obecně použité technologie v předloženém vynálezu budou zvoleny s ohledem na průmyslovou účinnost. Růstová média, podmínky fermentace a relativní množství mikroorganizmu nebo enzymového redukčního systému a racemického tetralonu, které jsou zde popsány, jsou pouze ilustrativní ze široké palety médií, fermentačních podmínek a množství výchozích látek, které mohou být vhodně využity v předloženém vynálezu, jak je zřejmé odborníkům v obor, a nejsou určeny jakýmkoli způsobem k omezení.
Jakékoli vhodné metody izolace a/nebo čištění kterýchkoli produktů předloženého způsobu mohou být použity v předloženém vynálezu včetně filtrace, extrakce, krystalizace, sloupcové chromatografie, tenkovrstvé chromatografie, preparativní nízkotlaké kapalinové chromatografie nebo HPLC, nebo jakékoli vhodné kombinace těchto metod.
Dále odborníkovi z oboru je zřejmé, že nežádaný odpovídající alkohol z (4R)-tetralonu, sloučenina vzorce II, produkovaný zde uvedenými postupy, může být recyklován, například oxidován a racemizován jak bylo dříve diskutováno, jakoukoli známou vhodnou metodou na racemický tetralon vzorce I a postupy předloženého vynálezu mohou být opakovány, aby vedly znovu k požadovanému (4S)-tetralonu vzorce V. Oxidace (47?)-tetralolu na (47?)-keton může být provedena způsoby známými odborníkům v oboru.
Racemizační reakce se může provádět jakýmkoli vhodným způsobem, ale obecně se provádí při teplotě od asi 0 °C do asi 100 °C, výhodně od asi 25 °C do asi 65 °C. (47?)-Tetralon se nechá reagovat s bází při teplotě od asi 25 °C do asi 85 °C, výhodně od asi 50 °C do asi 65 °C. Vhodné báze pro racemizační reakci zahrnují /erc-butoxid draselný, hydroxid sodný, methoxid sodný a hydroxid draselný. Výhodná báze je /erc-butoxid draselný.
Detailní příklady uvedené dále ukazují, že řada mikroorganizmů zahrnující houby, například kvasinky a aktinomycety, stereoselektivně redukuje racemický tetralon, čímž se získá požadovaný (4S)-tetralon vzorce V, to je chirální tetralon, který pak může být separován z nežádoucích sloučenin a dále reagován postupy dobře známými v dosavadním stavu techniky pro získání sertralinu.
Příklady provedení vynálezu
Předložený vynález je ilustrován následujícími příklady provedení. Předcházející a následující popis předloženého vynálezu a různá provedení nejsou určeny k omezení vynálezu, ale pouze jsou jeho ilustrací. Tudíž je třeba rozumět, že vynález není omezen na specifické detaily těchto příkladů.
Příklad I
Redukce racemického tetralonu pomocí Hansenula polymorpha ATCC č. 26 012
A. Fermentace kvasinek Hansenula polymorpha ATCC č. 26012
Jedna „kontrolní kultura (Cl) a jedna „zkušební kultura (TI) byly připraveny následovně: asi 2,5 ml sterilního růstového média (asi 40 g/1 dextrózy, asi 10 g/1 nutrisójové mouky, asi 10 g/1
-11 CZ 293579 B6 kvasnicového extraktu, asi 10 g/1 NaCl a asi 10 g/1 K2HPO4, s pH nastaveným na asi 7,0 pomocí H2SO4) bylo přidáno do každé ze dvou 16 x 125 m skleněných zkumavek, z nichž každá měla kovový uzávěr (Cl, TI), načež následoval přídavek asi 0,2 ml roztoku A (asi 25 g Tween 80, asi 100 g glycerolu a asi 250 ml destilované vody, filtračně sterilizované) do každé ze dvou kultur.
Asi 25 mikrolitrů asi 17% zmrazené glycerolové zásoby Hansenula polymorpha ATCC č. 26 012 bylo inokulováno do TI. Tyto dvě zkumavkové kultury byly inkubovány při asi 29 °C za třepání při asi 210 otáčkách za minutu. Po 24 hodinách asi 50 mikrolitrů zásobního roztoku (asi 5 mg/ml v asi 100% ethanolu, finální koncentrace asi 100 mikrogramů/ml) racemického tetralonu (sloučenina vzorce I obsahující sloučeniny vzorců IV a V, v asi 5 mg/ml v ethanolu) bylo přidáno do Cl a TI.
Po asi 5 dnech byl 1 ml nasyceného roztoku NaCl přidán do každé ze dvou zkumavkových kultur. Fermentační bujón z každé zkumavkové kultury (asi 3,6 ml) byl extrahován stejným objemem ethylacetátu (nezředěného): ethylacetát byl přidán, zkumavková kultura byla rozvířena a pak odstředěna při asi 2000 otáčkách za minutu (IEC Centriguge, 300 Second Avenue, Needham Heights, Massachusets, 02194). Ethylacetátová vrstva byla odstraněna a vodná vrstva extrahována po druhé. Sloučené organické extrakty byly vysušeny pod atmosférou dusíku ve vodní lázni při asi 50 °C.
B. Konfigurace zbytkového ketonu: sloučeniny vzorů IV a V
Každý z extraktů připravených jak je výše popsáno, byl resuspendován v asi 1 ml ethanolu a asi 20 mikrolitrů každého resuspendovaného extraktu bylo analyzováno injekcí na HPLC sloupec Chiralcel OK ochranná kolona (4,6 x 50 mm, Diacel Chemical Industries, Ltd., 730, Springdale, Drive, PO box 564, Exton, Pennsylvania 19341) připojená k Chiralcel OK koloně (4,6 x 250 mm, Diacel). Sloučeniny obsažené v každém injektovaném resuspendovaném extraktu byly odděleny izokraticky v asi 0,8 ml za minutu v mobilní fázi (ethanol-.ethylacetát 85:15) a sloučeniny zahrnující extrakty byly detekovány pomocí 996 PDA detektoru (Waters, 34 Maple Stree, Milford, Massachusets, 01757) seřízeného při 254 nm.
Jak je znázorněno údaji pro Cl a TI v následující tabulce I, chirální HPLC analýza ukazuje, že začlenění mikroorganizmu, to je Hansenula polymorpha ATCC č. 26 012 vede k poměru 16:1 ((45}-tetralon vzorce V nezreagovaný oproti (47?)-tetralon vzorce IV nezreagovaný), což dále ilustruje stereospecifitu předmětného mikrobiálního redukčního postupu. Dále uvedené výsledky jsou založeny na známém množství každého přidaného enantiomeru (asi 50 mikrogramů/ml každé ze sloučenin vzorců IV a V). Jak je zmíněno výše, výchozí racemický tetralon vzorce I má koncentraci asi 100 mikrogramů/ml.
Tabulka I
| Kultura | (4S)-tetralon (Mg/ml) | (47?)-tetralon (pg/ml) | 45:47? |
| Cl | 42,63 | 43,04 | 1 |
| TI | 37,92 | 2,37 | 16 |
Výsledky z chirální analýzy ukazují, že Hansenula polymorpha ATCC č. 26 012 kultura (TI) podstatně snižuje (47?)-tetralon, přičemž ponechává v podstatě nezreagovaný (45)-tetralon (asi 4,7 % (4J?)-tetralonu zůstává oproti asi 76 % (4S)-tetralonu). (45)-Tetralon byl určen, že je přítomen v asi 88% ee („procentní množství enantiomemího přebytku“) touto chirální HPLC. Jak je také znázorněno údaji v tabulce I, specificky poměrem (4S):(4Á), to je 16, podstatně více (45}-tetralonu zůstává nezreagováno oproti (4/?)-tetralonu.
V souhlase s tím začlenění intaktního mikroorganizmu, to je Hansenula polymorpha ATCC č. 26 012, vede ke stereospecifické redukci podstatně více výchozího (47?)-tetraolon vzorce IV
-12CZ 293579 B6 než výchozího (45)-tetralonu vzorce V ((45):(47?) a získá se většinou (47?)-tewtralol vzorce II Oproti (45)-tetralonu vzorce III (údaje nejsou uvedeny)). Většina (47?)-tetralonu, který byl získán, byl (15,47?)-tetralol a většina malého množství (45)-tetralonu, který byl získán, byla (15,45)-tetralol.
Příklad II
Redukce racemického tetralonu za použití Absidia coerulea ATCC č. 20 137
A. Fermentace houby Absidia coerulea ATCC č. 20 137
Jedna „kontrolní“ kultura (C2) a jedna „zkušební kultura“ (T2) byly připraveny následovně: asi 2,5 ml sterilního růstového média (asi 2 g/1 dextrózy, asi 5 g/1 nutrisóhjové mouky, asi 5 g/1 kvasinicového extraktu, asi 5 g/1 NaCl a asi 5 g/1 K2HPO4, s pH nastaveným na asi 7,0 pomocí H2SO4) byly přidány do každé ze dvou 16 x 125 ml skleněných zkumavek, přičemž každá měla kovový uzávěr (C2, T2).
Asi 25 mikrolitrů asi 17% zmrazené glycerolové zásoby Absidia Coerulea ATCC č. 20 137 bylo inokulováno do T2. Tyto dvě zkumavkové kultury byly inkubovány při asi 29 °C za třepání při asi 210 otáčkách za minutu. Po asi 48 hodinách asi 50 mikrolitrů (asi 5 mg/ml v ethanolu, finální koncentrace asi 100 mikrog/ml) racemického tetralonu (jak je popsáno v příkladu I), při asi 5 mg/ml v asi 100% ethanolu bylo přidáno do C2 a T2.
Po asi 5 dnech byl přidán 1 ml nasyceného roztoku NaCl do každé z těchto dvou zkumavkových kultur.
Fermentační bujón každé zkumavky kultury (asi 3,6 ml) byl extrahován asi 3 ml ethylacetátu (nezředěného): byl přidán ethylacetát, zkumavková kultura byla rozvířena a pak odsžředěna při asi 2000 otáčkách za minutu (IEC Centrifuge). Ethylacetátová vrstva byla odstraněna a vodná vrstva byla extrahována podruhé. Sloučené organické extrakty byly vysušeny pod atmosférou dusíku ve vodní lázni při asi 50 °C.
B. Konfigurace zbylého ketonu: sloučeniny vzorce IV a V
Každý z extraktů, připravených jak je výše popsáno, byl resuspendován v asi 1 ml ethanolu a asi 20 mikrolitrů každého resuspendovaného extraktu bylo analyzováno vstříknutím na HPLC sloupe: Chiralcel OK ochranná kolona (4,6 x 50 mm, spojená s Chiracel OK kolonou (4,6 x 250 mm). Sloučeniny obsažené v každém vstříknutém resuspendovaném extraktu byly separovány izokraticky při asi 0,8 ml za minutu v mobilní fázi (ethanokethylacetát, 85:15) a tyto sloučeniny obsahující extrakty byly detekovány pomocí 996 PDA detektoru (Waters) seřízenéh přo 254 nm.
Jak je znázorněno HPLC údaji pro C2 a T2 uvedenými níže, začlenění mikroorganizmu, to je Absidia coerulea ATCC č. 20 137, vedlo ke stereospecifické redukci více výchozího (47?)tetralonu vzorce IV než výchozího (45)-tetralonu vzorce V.
Specifičtěji výsledky z chirální analýzy ukazují, že Absidia coerulea ATCC č. 20 137 kultura snižjje (47?)-tetralon přičemž nechává v pdostatě nezreagovaný (45)-tetralon (asi 13,6 % (47?)tetralonu zůstává oproti asi 40,5 % (45)-tetralonu). (45)-tetralon byl určen, že je přítomen v asi 50% ee touto chirální HPLC.
Jak je znázorněno údaji pro C2 a T2 z tabulky II, která následuje, chirální HPLC analýza ukazuje, že začlenění mikroorganizmu, to je Absidia coerulea ATCC č. 20 137 (T2), vede k poměru alespoň dvojnásobnému pokud jde o (45)-tetralon ponechaný nezreagovaný oproti nezreago
-13CZ 293579 B6 vánému (4J?)-tetralonu, přičemž je dále zřejmá stereospecifíta předmětného mikrobiálního redukčního posutpu.
Dále uvedené výsledky jsou založeny na známém množství každého přidaného enantiomeru (asi 50 mikrogramů/ml každého jak je popsáno zde v příkladu I). Jak je výše zmíněno, výchozí racemický tetralon měl koncentrasi asi 100 mikrogramů/ml.
Tabulka II
| Kultura | (4S)-tetralon (pg/ml) | (47ř)-tetralon (pg/ml) | 4S:4R |
| C2 | 39,53 | 39,47 | 1 |
| T2 | 20,24 | 6,81 | 3 |
Příklad III
Redukce racemického tetralonu za použití hub, kvasinek a aktinomycet
Jak je zřejmé odborníkům v odpovídajícím oboru, mikroorganizmy uvedené v tabulce III, které byly použity v předmětné redukci, Geotrichum candidum ATCC č. 62 401, Mortierella isabellina ATCC č. 38 063, Mortierella vinacea ATCC č. 09 515, Penicillium notatum ATCC 36 740, Blastoschizomyce capitatus ATCC č. 28575, Monosporium olivacaeum v. major ATCC č. 36 300, Aureobasidium pullulans ATCC č. 16 623, Pichia fabianii ATCC č. 16 755 a Streptomyces rimosus ss. rimosus ATCC č. 10 970 byly připraveny, jak je popsáno v příkladu II, Geotrichum candidum ATCC č. 34 614, Mortierella isabellina ATCC č. 42 613, Debaryomyces polymorphus ATCC č. 20 280 a Saccharomyces cerevisiae ATCC č. 15 248 byly připraveny jak je popsáno v příkladu II s výjimkou toho, že extrakce byly opakována a Candida schatavii ATCC 24 409 byly připraveny jak je uvedeno dále.
Candida schatavii ATCC č. 24 409 byla připravena a použita podle tohoto vynálezu následovně: asi 2,5 ml sterilního růstového média (asi 20 g/1 dextrózy, asi 5 g/1 nutrisójové mouky, asi 5 g/1 kvasnicového extraktu, asi 5 g/1 NaCl a asi 5 g/1 K2HPO4, s pH nastaveným na asi 7,0 pomocí H2SO4) bylo přidáno do 16 x 125 mm skleněné zkumavky mající kovový uzávěr, načež následoval přídavek asi 0,1 ml filtračně sterilizovaného roztoku asi 25 g Tween 80, asi 100 g glycerolu a asi 250 ml destilované vody do kultury.
Dále asi 25 mikrolitrů asi 17% zmrazené glycerolové zásoby Candida schatavii ATCC č. 24 409 bylo inokulováno do kultury. Kultura byla pěstována při asi 29 °C za třepání při asi 210 otáčkách za minutu. Po asi 48 hodin asi 50 mikrolitrů zásobního roztoku (asi 5 mg/ml v asi 100% ethanolu, finální koncentrace asi 100 mikrogramů/ml) racemického tetralonu (sloučenina vzorce I obsahující sloučeniny vzorců IV a V, v asi 5 ng/ml v asi 100% ethanolu) bylo přidáno do kultury.
Po dalších 4 dnech byl fermentační bujón kultury (asi 2,6 ml) extrahován stejným objemem ethylacetátu (nezředěného), kultuře byla rozvířena a pak odstředěna při asi 2000 otáčkách za minutu (IEC Centrifuge).
Extrakce byla opakována. Extrakty byly vysušeny pod dusíkem ve vodní lázni při asi 50 °C. Extrakty pak byly resuspendovány v asi 1 ml ethanolu a asi 5 mikrol resuspendovaného extraktu bylo analyzováno vstřikem na HPLDC sloupec: Chiralcel OD ochranná kolona (4,6 x 50 mm, Diacel Chemica! Industries, Ltd.) připojená na Chiralcel OD kolonu (4,6 x 250 mm, Diacel). Obsažené sloučeniny v injektovaném resuspendovaném extraktu byly odděleny izokraticky při asi 0,9 ml za minutu v mobilní fázi (hexa:izopropanol, 95:5) a sloučeniny obsahující extrakt byly dokázány pomocí 996 PDA detektoru (Waters) seřízeném při 210 nm.
-14CZ 293579 B6
Jak se ukázalo při chirální HPLC (prováděné jako v příkladu I á II), viz údaje uvedené v tabulce III, každý z uvedených mikroorganizmů v tabulce III stereospecificky redukoval více (47?)tetralonu než (45)-tetralonu a to vedlo obecně k poměru alespoň dvojnásobnému, pokud jde o (4<S)-tetralon ponechaný nezreagovaný oproti nezreagovanému (47?)-tetralonu.
Tabulka III
| Kultura ATCC č., typ organizmu | 45-tetralon (pg/ml) | 47?-tetralon (pg/ml) | 4S:47? |
| Geotrichum candidum-1 34 614, houba | 18,23 | 7,85 | 2,32 |
| Geotrichum candidum-2 62 401, houba | 12,16 | 6,17 | 1,97 |
| Mortierella isabellina-1 42 613, houba | 3,33 | 1,36 | 2,45 |
| Mortierrella isabelina-2 38 063, houba | 2,74 | 0,95 | 2,88 |
| Mortierella vinacea 09 515, houba | 6,01 | 1,45 | 4,14 |
| Penicillium notatum 36 740, houba | 10,39 | 5,50 | 1,89 |
| Blastoschizomyces capitatus 28 575, houba | 9,47 | 4,5 | 2,10 |
| Monosporium olivaceum v. major 36 300, houba | 10,39 | 0,71 | 14,6 |
| Aureobasidium pullulans 16 623, houba | 11,76 | 3,65 | 3,22 |
| Dabaryomyces polymorphus 20 280, kvasinka | 7,18 | 3,67 | 1,96 |
| Saccharomyces cerevisiae | 24,33 | 14,42 | 1,69 |
| Candida schatavii 24 409, kvasinka | 7,18 | 1,03 | 6,97 |
| Pichia fabianii 16 755, kvasinka | 17,89 | 8,97 | 1,99 |
| Streptomyces rimosus ss. rimosus, 16 755, aktinomyceta | 3,21 | 1,68 | 1,91 |
| Je třeba poznamenat, že zatímco intaktní Monosporium olivaceum v. | major ATCC č | i. 36 300, jak |
je znázorněno údaji v tabulce III, redukoval podstatně více (47?)-tetralonu oproti (45)-tetralonu a tak by mohl být preferovaným organizmem pro použití v předmětném postupu, nicméně nežádoucí degradace jak (47?)-tetralonu, tak (4S)-tetralonu byla také zaznamenána pro tuto kulturu. Nežádoucí degradace může být vlivem například jiných enzymů a podobně obsažených 15 v intaktním mikroorganizmu. Tudíž odborníci v oboru ze zde uvedeného popisu vědí, že je výhodné použít enzymu izolovaného z Monosporium olivaceum v. major ATCC č. 36 300 oproti intaktnímu Monosporium olivaceu v. major ATCC č. 36 300.
Claims (35)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Způsob stereoselektivní mikrobiální redukce sloučeniny vzorce I na sloučeniny vzorců II a III (II) vyznačující se tím, že se sloučenina vzorce I uvede do styku smikroorganizmem nebo enzymovým redukčním systémem, schopným uskutečnit tuto redukci, obsahujícím enzym odvozený od uvedeného mikroorganizmu a kofaktor pro tento enzym a výsledná směs sloučenin II, III, IV a V se inkubuje za podmínek dostatečných pro získání většího množství sloučeniny vzorce II než sloučeniny vzorce III, čímž se ponechá nezreagované větší množství sloučeniny vzorce V než sloučeniny vzorce IV, (IV) (V) / přičemž uvedený mikroorganizmus se vybere ze skupiny zahrnující Hansenula polymorpha ATCC č. 26 012, Hansenula polymorpha ATCC č. 74 449, Absidia coerulea ATCC č. 20 137, Geotrichum candidum ATCC č. 34 614, Geotrichum candidum ATCC č. 62 401, Mortierella isabellina ATCC č. 42 613, Mortierella isabellina ATCC č. 38 063, Mortierella vinacea ATCC č. 09 515, Penicillium notatum ATCC č. 36 740, Blastoschizomyces capitatus ATCC č. 28 575, Monosporium olivaceum v. major ATCC č. 36 300, Aureobasidium pullulans ATCC č. 16 623, Debaryomyces polymorphus ATCC č. 20 280, Saccharomyces cerevisiae ATCC č. 15 248, Candida schatavii ÁTCC č. 24 409, Pichia fabiania ATCC č. 16 755 a Streptomyces rimosus ss. rimosus ATCC č. 10 970, a jejich mutanty, schopné provést uvedenou redukci.
- 2. Způsob podle nároku 1, vyznačený tím, že sloučenina vzorce V se oddělí od sloučenin vzorců II, III a IV.
- 3. Způsob podle nároku 2, vyznačený tím, že uvedené oddělení se provede pomocí chromatografíe.
- 4. Způsob podle nároku 2, vyznačený tím, že oddělení se provede pomocí krystalizace.-16CZ 293579 B6
- 5. Způsob podle nároku 2, vyznačený tím, že sloučenina vzorce II se oddělí od sloučenin vzorců III a IV.
- 6. Způsob podle nároku 5, vyznačený tím, že oddělená sloučenina vzorce II se recykluje na sloučeninu vzorce I oxidací této oddělené sloučeniny vzorce II a racemizací oxidované sloučeniny na sloučeninu vzorce I.
- 7. Způsob podle nároku 6, vyznačený tím, že uvedená racemizace zahrnuje reakci oxidované sloučeniny s bází.
- 8. Způsob podle nároku 1, vyznačený tím, že se použije sloučenina vzorce I připravená způsobem uvedeným v nároku 6.
- 9. Způsob podle nároku 1,vyznačený tím, že uvedený styk se provede s uvedeným mikroorganizmem.
- 10. Způsob podle nároku 1,vyznačený tím, že uvedený styk se provede s enzymovým redukčním systémem.
- 11. Způsob podle nároku 9, vyznačený tím, že uvedený mikroorganizmus je intaktní mikroorganizmus.
- 12. Způsob podle nároku 9, vyznačený tím, že uvedeným mikroorganizmem je přípravek z jeho rozrušených buněk.
- 13. Způsob podle nároku 9, vyznačený tím, že mikroorganizmus je jeho dehydratovaný přípravek.
- 14. Způsob podle nároku 11, vyznačený tím, že uvedený intaktní mikroorganizmus zahrnuje promyté buňky uvedeného intaktního mikroorganizmu.
- 15. Způsob podle nároku 14, vyznačený tím, že uvedené promyté buňky jsou imobilizovány.
- 16. Způsob podle nároku 10, vyznačený tím, že enzym uvedeného enzymového redukčního systému je imobilizován.
- 17. Způsob podle nároku 13,vyznačený tím, že dehydratovaný přípravek je acetonový práškový enzymatický přípravek.
- 18. Způsob podle nároku 9, vyznačený tím, že uvedený mikroorganizmus je v kultivačním bujónu.
- 19. Způsob podle nároku 18, vyznačený tím, že uvedený styk se provede přidáním sloučeniny vzorce I do kultivačního bujónu.
- 20. Způsob podle nároku 10, vyznačený tím, že enzymový redukční systém je v rozpouštědle.
- 21. Způsob podle nároku 20, vyznačený tím, že uvedené rozpouštědlo je organické rozpouštědlo.
- 22. Způsob podle nároku 20, vyznačený tím, že uvedený styk se provede přidáním sloučeniny vzorce I do tohoto rozpouštědla.-17CZ 293579 B6
- 23. Způsob podle nároku 9, vyznačený tím, že mikroorganizmem je Hansenula polymorpha ATCC č. 26 012 nebo Hansenula polymorpha ATCC č. 74 449 nebo jejich mutanty.
- 24. Způsob podle nároku 10, vyznačený tím, že enzym zahrnující uvedený enzymový redukční systém je odvozen z Hansenula polymorpha ATCC č. 26012 nebo Hansenula polymorpha ATCC č. 74 449, nebo jejich mutantů.
- 25. Způsob podle nároku 18, vyznačený tím, že mikroorganizmem je Hansenula polymorpha ATCC č. 26 012 nebo Hansenula polymorpha ATCC č. 74 449 nebo jejich mutanty.
- 26. Způsob podle nároku 19, vyznačený tím, že mikroorganizmem je Hansenula polymorpha ATCC č. 26 012 nebo Hansenula polymorpha ATCC č. 74 449, nebo jejich mutanty.
- 27. Způsob podle nároku 9, vyznačený tím, že mikroorganizmem se Absidia coerulea ATCC č. 20 137 nebo jeho mutanty.
- 28. Způsob podle nároku 10, vyznačený tím, že enzym zahrnující enzymový redukční systém je odvozen z Absidia courulea ATCC č. 20 137 nebo jeho mutantů.
- 29. Způsob podle nároku 10, vyznačený tím, že enzym zahrnující uvedený enzymový redukční systém je odvozen z Monosporium olivaceum v. major ATCC č. 36 300 nebo jeho mutantů.
- 30. Způsob stereoselektivní mikrobiální redukce sloučeniny vzorce I na sloučeniny vzorců II a III podle nároku 1,ClCl (4Λ), (4S) (I) (47?) (II) (4S) (III) , vyznačující se tím, že se sloučenina vzorce I uvede do styku s mikroorganizmem a výsledná směs se inkubuje za podmínek dostatečných pro získání většího množství sloučeniny vzorce II než sloučeniny vzorce III, čímž se ponechá nezreagované větší množství sloučeniny vzorce V než sloučeniny vzorce IV, (IV) (V) ,-18CZ 293579 B6 přičemž uvedený mikroorganizmus se vybere ze skupiny, zahrnující Hansenula polymorpha ATCC č. 26 012, Hansenula polymorpha ATCC č. 74 449 a jejich mutanty, schopné provést uvedenou redukci.
- 31. Způsob podle nároku 30, vyznačený tím, že mikroorganizmus je v kultivačním bujónu.
- 32. Způsob podle nároku 31, vyznačený tím, že uvedený styk se provede přidáním sloučeniny vzorce I do kultivačního bujónu.
- 33. Způsob stereoselektivní mikrobiální redukce sloučeniny vzorce I na sloučeniny vzorců II a III podle nároku 1, (II)OHCl (45) (III) t vyznačující se tím, že se sloučenina vzorce I uvede do styku smikroorganizmem nebo enzymovým redukčním systémem schopným uskutečnit tuto redukci obsahujícím enzym odvozený do uvedeného mikroorganizmu a kofaktor pro tento enzym a výsledná směs se inkubuje za podmínek dostatečných pro získání většího množství sloučeniny vzorce II než sloučeniny vzorce III, čímž se ponechá nezreagované větší množství sloučeniny vzorce V než sloučeniny vzorce IV, (IV) přičemž uvedený mikroorganizmus se vybere ze skupiny zahrnující Hansenula Polymorpha ATCC č. 26 012, Hansenula polymorpha ATCC č. 74 449 a jejich mutanty, schopné provést uvedenou redukci.
- 34. Způsob podle nároku 33, vyznačený tím, že enzymový redukční systém je v rozpouštědle.
- 35. Způsob podle nároku 34, vyznačený tím, že styk se provede přidáním sloučeniny vzorce I do tohoto rozpouštědla.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US10623398P | 1998-10-29 | 1998-10-29 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ379099A3 CZ379099A3 (cs) | 2000-05-17 |
| CZ293579B6 true CZ293579B6 (cs) | 2004-06-16 |
Family
ID=22310267
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ19993790A CZ293579B6 (cs) | 1998-10-29 | 1999-10-25 | Stereoselektivní mikrobiální redukce racemického tetralonu |
Country Status (26)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6589777B1 (cs) |
| EP (1) | EP0997535B1 (cs) |
| JP (2) | JP3106135B2 (cs) |
| KR (2) | KR100432309B1 (cs) |
| CN (1) | CN1252277C (cs) |
| AR (1) | AR018967A1 (cs) |
| AT (1) | ATE328107T1 (cs) |
| AU (1) | AU751282B2 (cs) |
| BR (1) | BR9904964A (cs) |
| CA (1) | CA2287560C (cs) |
| CY (1) | CY1105148T1 (cs) |
| CZ (1) | CZ293579B6 (cs) |
| DE (1) | DE69931574T2 (cs) |
| DK (1) | DK0997535T3 (cs) |
| ES (1) | ES2264244T3 (cs) |
| HU (1) | HUP9903941A3 (cs) |
| ID (1) | ID23591A (cs) |
| IL (1) | IL132500A0 (cs) |
| IN (1) | IN191494B (cs) |
| PL (1) | PL336331A1 (cs) |
| PT (1) | PT997535E (cs) |
| RS (1) | RS49702B (cs) |
| RU (1) | RU2235784C2 (cs) |
| TR (1) | TR199902668A2 (cs) |
| TW (1) | TWI224141B (cs) |
| ZA (1) | ZA996786B (cs) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IN187170B (cs) * | 2000-01-04 | 2002-02-23 | Sun Pharmaceutical Ind Ltd | |
| AU2002355044A1 (en) * | 2001-11-28 | 2003-06-10 | Kaneka Corporation | Process for preparation of 2-aminotetralin derivatives and intermediates thereof |
| WO2015071861A2 (en) * | 2013-11-14 | 2015-05-21 | Biocon Limited | Fungus mediated stereo-selective bioreduction of keto intermediates of pharmaceutically active compounds to their corresponding hydroxy compounds |
| CN104293856A (zh) * | 2014-10-30 | 2015-01-21 | 青岛科技大学 | 一种细胞催化生产氟吡啶乙酮的方法 |
| CN107418981B (zh) * | 2017-06-27 | 2020-04-07 | 中山大学 | 白地霉菌株不对称催化还原卤代芳香酮的方法 |
| CN107746861B (zh) * | 2017-11-20 | 2020-06-23 | 浙江工业大学 | 一种(r)-1-(2-三氟甲基苯基)乙醇的生物制备方法 |
Family Cites Families (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4536518A (en) | 1979-11-01 | 1985-08-20 | Pfizer Inc. | Antidepressant derivatives of cis-4-phenyl-1,2,3,4-tetrahydro-1-naphthalenamine |
| US4857468A (en) * | 1985-04-13 | 1989-08-15 | Kanegafuchi Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Process for preparing optically active 2-halo-1-phenyl ethanol |
| US5049497A (en) | 1986-08-25 | 1991-09-17 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Novel process for the synthesis of the enantiomers of bicyclo(4.2.0)oct-2-en-7-one and derivatives |
| US4839104A (en) | 1987-06-11 | 1989-06-13 | Pfizer, Inc. | Process for preparing sertraline intermediates |
| US4777288A (en) | 1987-06-11 | 1988-10-11 | Pfizer Inc. | Process for preparing a 4,4-diphenylbutanoic acid derivative |
| US4855500A (en) | 1988-05-04 | 1989-08-08 | Pfizer Inc. | Process for preparing a ketimine |
| US4940731A (en) | 1989-08-30 | 1990-07-10 | Pfizer Inc. | Method of treating premature ejaculation using sertraline |
| US5130338A (en) | 1989-08-30 | 1992-07-14 | Pfizer Inc. | Method of treating chemical dependencies using sertraline |
| US4962128A (en) | 1989-11-02 | 1990-10-09 | Pfizer Inc. | Method of treating anxiety-related disorders using sertraline |
| US5082970A (en) | 1991-03-06 | 1992-01-21 | Pfizer Inc. | Process for recycling amine isomer |
| GB9114948D0 (en) | 1991-07-11 | 1991-08-28 | Pfizer Ltd | Process for preparing sertraline intermediates |
| GB9114947D0 (en) | 1991-07-11 | 1991-08-28 | Pfizer Ltd | Process for preparing sertraline |
| US5196607A (en) | 1992-02-14 | 1993-03-23 | Pfizer Inc. | Process for preparing ketone enantiomer |
| CA2117482C (en) | 1992-03-13 | 2005-02-15 | Maria-Regina Kula | New ketonic ester reductases, its preparation and use for enzymatic redox reactions |
| US5248699A (en) | 1992-08-13 | 1993-09-28 | Pfizer Inc. | Sertraline polymorph |
| ES2093980T3 (es) | 1992-08-28 | 1997-01-01 | Zeneca Ltd | Proceso de reduccion asimetrica, enzimatica, para producir derivados de 4h-tieno(2,3-6)tiopirano. |
| US5466880A (en) | 1992-09-15 | 1995-11-14 | Pfizer Inc. | Process for preparing ketone enantiomer |
| ATE159706T1 (de) * | 1993-11-30 | 1997-11-15 | Pfizer | Verfahren zur herstellung von chiralen tetralonen |
| US5597826A (en) | 1994-09-14 | 1997-01-28 | Pfizer Inc. | Compositions containing sertraline and a 5-HT1D receptor agonist or antagonist |
| US5618707A (en) | 1996-01-04 | 1997-04-08 | Schering Corporation | Stereoselective microbial reduction of 5-fluorophenyl-5-oxo-pentanoic acid and a phenyloxazolidinone condensation product thereof |
-
1999
- 1999-10-21 IL IL13250099A patent/IL132500A0/xx not_active IP Right Cessation
- 1999-10-22 IN IN1409DE1999 patent/IN191494B/en unknown
- 1999-10-25 DK DK99308422T patent/DK0997535T3/da active
- 1999-10-25 EP EP99308422A patent/EP0997535B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-10-25 PT PT99308422T patent/PT997535E/pt unknown
- 1999-10-25 TW TW088118421A patent/TWI224141B/zh not_active IP Right Cessation
- 1999-10-25 AT AT99308422T patent/ATE328107T1/de not_active IP Right Cessation
- 1999-10-25 DE DE69931574T patent/DE69931574T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1999-10-25 ES ES99308422T patent/ES2264244T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-10-25 CZ CZ19993790A patent/CZ293579B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1999-10-26 TR TR1999/02668A patent/TR199902668A2/xx unknown
- 1999-10-26 US US09/427,424 patent/US6589777B1/en not_active Expired - Fee Related
- 1999-10-27 CA CA002287560A patent/CA2287560C/en not_active Expired - Fee Related
- 1999-10-27 ID IDP990987D patent/ID23591A/id unknown
- 1999-10-27 AR ARP990105423A patent/AR018967A1/es active IP Right Grant
- 1999-10-27 RS YUP-551/99A patent/RS49702B/sr unknown
- 1999-10-28 ZA ZA9906786A patent/ZA996786B/xx unknown
- 1999-10-28 CN CNB991233883A patent/CN1252277C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1999-10-28 KR KR10-1999-0047145A patent/KR100432309B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 1999-10-28 BR BR9904964-3A patent/BR9904964A/pt not_active Application Discontinuation
- 1999-10-28 HU HU9903941A patent/HUP9903941A3/hu unknown
- 1999-10-28 PL PL99336331A patent/PL336331A1/xx not_active IP Right Cessation
- 1999-10-28 AU AU57097/99A patent/AU751282B2/en not_active Ceased
- 1999-10-28 JP JP11307272A patent/JP3106135B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1999-10-28 RU RU99122704/13A patent/RU2235784C2/ru not_active IP Right Cessation
-
2000
- 2000-06-30 JP JP2000198150A patent/JP3359905B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
2003
- 2003-08-20 KR KR10-2003-0057440A patent/KR100432306B1/ko not_active Expired - Fee Related
-
2006
- 2006-08-10 CY CY20061101126T patent/CY1105148T1/el unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US6001615A (en) | Enzymatic reduction of ketone groups in 6-cyano-3,5-dihydroxy-hexanoic alkyl ester | |
| US6589777B1 (en) | Stereoselective microbial reduction of a racemic tetralone | |
| US5888804A (en) | Processes for production of optically active quinuclidinol | |
| US6271008B1 (en) | Yeast-based process for production of l-pac | |
| CA2585411A1 (en) | Method of producing chiral alcohols | |
| Nanduri et al. | Biochemical approaches to the synthesis of ethyl 5-(S)-hydroxyhexanoate and 5-(S)-hydroxyhexanenitrile | |
| US6451587B1 (en) | Microbial asymmetric reduction of 2-chloro-1-[-6-(2,5-dimethyl-pyrrol-1-yl)-pyridin-3-yl]-ethanone | |
| Goswami et al. | Microbial reduction of α-chloroketone to α-chlorohydrin | |
| MXPA99009970A (en) | Microbial reduction stereoselectiva of a tetralone racém | |
| AU2001270612A1 (en) | Microbial production of r-phenylacetylcarbinol by biotransformation of benzaldehyde by filamentous fungi | |
| WO2002002791A1 (en) | Microbial production of r-phenylacetylcarbinol by biotransformation of benzaldehyde by filamentous fungi | |
| Yoshizako et al. | Identification of algal transformation products from alicyclic ketones | |
| JP4475407B2 (ja) | 微生物を利用した光学活性３−クロロ−２−メチル−１，２−プロパンジオールの製造方法 | |
| EP1055732A1 (en) | Process for producing (r)-2-hydroxy-1-phenoxypropane derivative | |
| HK1027596B (en) | Stereoselective microbial reduction of a racemic tetralone | |
| JP3843692B2 (ja) | 光学活性ｅｎｄｏ−ノルボルネオールの製造法 | |
| CN1271209C (zh) | 微生物生物转化法 | |
| HK1068373B (en) | Microbial biotransformation | |
| HK1028068B (en) | Microbial biotransformation | |
| WO2005083102A1 (ja) | 光学活性1,4-ベンゾジオキシン-2-カルボン酸誘導体の製造方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20081025 |