CZ291681B6

CZ291681B6 - Imidazopyridinový derivát, způsob jeho přípravy a použití a farmaceutický prostředek s jeho obsahem

Info

Publication number: CZ291681B6
Application number: CZ19993014A
Authority: CZ
Inventors: Kosrat Amin; Mikael Dahlström; Peter Nordberg; Ingemar Starke
Original assignee: Astra Aktiebolag
Priority date: 1997-02-25
Filing date: 1998-02-17
Publication date: 2003-04-16
Also published as: PT971920E; ID22218A; IS1901B; EE04016B1; ATE218569T1; WO1998037080A1; AU723389B2; PL335485A1; SK109999A3; RU2193036C2; DE69805787T2; HUP0000720A2; KR20000075622A; MY118822A; EP0971920A1; NZ336878A; US6265415B1; CN1100056C; PL190379B1; TR199902060T2

Abstract

eÜen se t²k imidazopyridinov²ch deriv t obecn ho vzorce I, ve kter²ch je fenylov² zbytek substituov n alkylovou skupinou v poloze 2, a jejich farmaceuticky p°ijateln²ch sol , jako i jejich pou it p°i prevenci a l b gastrointestin ln ch z n tliv²ch onemocn n . Deriv ty inhibuj exogenn a endogenn stimulovanou sekreci alude n kyseliny.\

Description

Imidazopyridinový derivát, způsob jeho přípravy a použití a farmaceutický prostředek s jeho obsahem

Oblast techniky

Tento vynález se týká imidazopyridinových derivátů a jejich farmaceuticky přijatelných solí a jejich použití při prevenci a léčbě gastrointestinálních zánětlivých onemocnění. V dalších aspektech se tento vynález týká způsobů přípravy těchto derivátů a farmaceutických prostředků obsahujících alespoň jeden derivát podle tohoto vynálezu nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl jako účinnou složku.

Dosavadní stav techniky

Substituované imidazo[l,2-a]pyridiny použitelné při léčení peptických vředových onemocnění jsou v oboru známy např. z EP-B-0 033 094 a US 4 450 164 (Schering Corporation), z EP-B-0 204 285 a US 4 725 601 (Fujisawa Pharmaceutical Co.), a z publikací J. J. Kaminski a kol. v Joumal of Medical Chemistry 28, 876 až 892 (1985), 30, 2031 až 2046 (1987), 30, 2047 až 2051 (1987),32, 1986 až 1700 (1989) a 34, 533 až 541 (1991).

Imidazopyridinový derivát substituovaný v poloze 8 skupinou 2,4,6-(CH3)3-C₆H2CH2O je uveřejněn v dokumentu EP-B-0 033 094 jako „sloučenina č. 49“ v publikaci Kaminski a kol., J. Med. Chem. 28, 876 až 892 (1985). Avšak podle této pozdější publikace uvedená sloučenina nevykazuje příznivé vlastnosti při testování inhibice sekrece žaludeční kyseliny.

Ohledné přehledu farmakologie pumpy žaludeční kyseliny (H\K⁺-ATPasa) viz Sachs a kol., Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 35, 277 až 305 (1995).

S překvapením bylo nyní nalezeno, že sloučenina dále uvedeného obecného vzorce I, která je substituovaným imidazopyridinovým derivátem, ve kterém je fenylový zbytek substituován nižší alkylovou skupinou v poloze 2 až 6, je zvláště účinná jako inhibitor gastrointestinální řTjK^ATPasy a tím jako inhibitor sekrece žaludeční kyseliny.

Podstata vynálezu

Předmětem tohoto vynálezu je imidazopyridinový derivát obecného vzorce I

R¹

(I),

- 1 CZ 291681 B6 ve kterém

R¹ je methylová skupina nebo skupina CH₂OH,

R² je alkylová skupina mající od 1 do 6 atomů uhlíku,

R³ je alkylová skupina mající od 1 do 6 atomů uhlíku,

R⁴ je atom vodíku nebo atom halogenu,

R⁵ je atom vodíku, atom halogenu nebo alkylová skupina mající od 1 do 6 atomů uhlíku, a

X je skupina NH nebo atom kyslíku, nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.

Předmětem tohoto vynálezu je dále imidazopyridinový derivát vymezený výše nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl pro použití k terapii.

Předmětem vynálezu jsou také způsoby přípravy tohoto výše vymezeného imidazopyridinového derivátu, které jsou podrobněji popsány v další části popisu a v příkladech provedení vynálezu.

Předmětem tohoto vynálezu také je farmaceutický prostředek, který jako účinnou složku obsahuje výše vymezený imidazopyridinový derivát a dále obsahuje farmaceuticky přijatelnou nosnou látku.

Předmětem tohoto vynálezu konečně je použití svrchu uvedeného imidazopyridinového derivátu pro přípravu léčiva pro léčení onemocnění a stavů upřesněných dále.

Dále se uvádějí podrobnější údaje o tomto vynálezu.

Pojem „alkylová skupina“ tak, jak se zde používá, označuje přímou či rozvětvenou alkylovou skupinu mající od 1 do 6 atomů uhlíku, přednostně od 1 do 4 atomů uhlíku. Příklady alkylových skupin s 1 až 6 atomy uhlíku zahrnují methylovou skupinu, ethylovou skupinu, n-propylovou skupinu, izopropylovou skupinu, n-butylovou skupinu, izobutylovou skupinu, sek-butylovou skupinu, terc-butylovou skupinu a pentylovou a hexylovou skupinu s přímým nebo rozvětveným řetězcem. „Alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku“ přednostně znamená methylovou skupinu, ethylovou skupinu, n-propylovou skupinu, izopropylovou skupinu, n-butylovou skupinu, izobutylovou skupinu, sek-butylovou skupinu, terc-butylovou skupinu a pentylovou a hexylovou skupinu s přímým nebo rozvětveným řetězcem. „Alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku“ přednostně znamená methylovou skupinu, ethylovou skupinu, n-propylovou skupinu, izopropylovou skupinu, n-butylovou skupinu, izobutylovou skupinu, sek-butylovou skupinu a terc-butylovou skupinu.

Pojem „atom halogenu“ zahrnuje atom fluoru, atom chloru, atom bromu a atom jodu.

Oba čisté enantiomery, racemické směsi a nerovné směsi obou enantiomerů spadají do rámce tohoto vynálezu. Je třeba chápat, že všechny možné diastereomemí formy (čisté enantiomery, racemické směsi a nerovné směsi dvou enantiomerů) jsou předmětem tohoto vynálezu. Vynález též zahrnuje deriváty sloučeniny obecného vzorce I, které mají biologickou funkci sloučeniny obecného vzorce I.

V závislosti na podmínkách způsobu přípravy se konečné produkty sloučeniny obecného vzorce I obdrží buď v neutrální formě nebo ve formě soli. Volná báze i soli konečných produktů spadají do rámce tohoto vynálezu.

-2CZ 291681 B6

Adiční soli této nové sloučeniny s kyselinou se mohou známým způsobem přeměňovat na volnou bázi s použitím bazických činidel, jako jsou alkálie nebo iontovou výměnou. Obdržená volná báze může též vytvářet soli s organickými nebo anorganickými kyselinami.

Při přípravě adičních solí s kyselinami (dále též „kyselé adiční soli“) se přednostně používají takové kyseliny, které tvoří vhodné farmaceuticky/terapeuticky přijatelné soli. Příklady těchto kyselin jsou halogenovodíkové kyseliny, jako je kyselina chlorovodíková, kyselina sírová, kyselina fosforečná, kyselina dusičná, alifatické, alicyklické, aromatické nebo heterocyklické karboxylové kyseliny nebo sulfokyseliny, jako je kyselina mravenčí, kyselina octová, kyselina propionová, kyselina jantarová, kyselina glykolová, kyselina mléčná, kyselina jablečná, kyselina vinná, kyselina citrónová, kyselina askorbová, kyselina maleinová, kyselina hydroxymáselná, kyselina pyrohroznová, kyselina p-hydroxybenzoová, kyselina embonová, kyselina methansulfonová, kyselina ethansulfonová, kyselina hydroxyethansulfonová, kyselina halogenbenzensulfonová, kyselina toluensulfonová nebo kyselina naftalensulfonová.

Preferovanými sloučeninami podle tohoto vynálezu jsou ty sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých R² je methylová skupina nebo ethylová skupina, R³ je methylová skupina nebo ethylová skupina, R⁴ je atom vodíku, atom bromu, atom chloru nebo atom fluoru a R⁵ je atom vodíku, methylová skupina, atom bromu, atom chloru nebo atom fluoru, nejlépe atom vodíku, methylová skupina nebo atom fluoru.

Zvláště preferovanými sloučeninami podle tohoto vynálezu jsou:

8-(2,6-dimethylbenzylamino)-2,3,6-trimethylimidazo[l,2-a]pyridin, 8-(2,6-dimethylbenzylamino)-3-hydroxymethyl-2-methylimidazo[l,2-a]pyridin,

2.3- dimethyl-8-(2,6-dimethyl-4—fluorbenzylamino)imidazo[l,2-a]pyridin,

2.6- dimethyl-8-(2,6-dimethylbenzylamino)-3-hydroxymethylimidazo[l,2-a]pyridin,

2.6- dimethyl-8-(2,6-dimethyM-fluorbenzylamino)-3-hydroxymethyl-imidazo[l,2-a]pyridin, 8-(2,6-dimethyl-4-fluorbenzylamino-2,3,6-trimethylimidazo[l,2-a]pyridin,

2.3- dimethyl-8-(2,6-dimethyl-4-chlorbenzylamino)imidazo[l,2-a]pyridin,

2.6- dimethyl-8-(2-ethyl-6-methylbenzylamino)-3-hydroxymethylimidazo[l,2-a]pyridin, 8-(2,6-diethylbenzylamino)-2,6-dimethyl-3-hydroxymethylimidazo[l,2-a]pyridin, 8-(2-ethy 1-6-methy 1 benzy lam ino)-2,3,6-trimethy 1 imidazo [ 1,2-a] pyridin, 8-(2,6-dimethyl-4-fluorbenzyIoxy)-3-hydroxymethyl-2-methylimidazo[l,2-a]pyridin,

2.6- dimethyl-8-(2,6-dimethylbenzyloxy)-3-hydroxymethylimidazo[l,2-a]pyridin, 8-(2-ethy!-4-fluor-6-methylbenzylamino)-2,3,6-trimethylimidazo[l,2-a]pyridin.

Způsob přípravy

Tento vynález též poskytuje následující způsoby A, B, C, D a E pro výrobu sloučenin obecného vzorce I.

Způsob A

Způsob A pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I zahrnuje následující kroky.

Sloučenina obecného vzorce II

-3 CZ 291681 B6

CH, (II), ve kterém

X¹ je aminoskupina nebo hydroxylová skupina a

R¹ a R⁵ jsou podle definice pro obecný vzorec I, se ponechá reagovat se sloučeninou obecného vzorce III,

R³ (III), ve kterém

R², R³ a R⁴ jsou podle definice pro obecný vzorec I a

Y je odstupující skupina, jako je halidová skupina, tosyloxyskupina nebo mesyloxyskupina s obdržením sloučenin obecného vzorce I.

Tuto reakci lze vhodně provést v inertním rozpouštědle, např. v acetonu, acetonitrilu, dimethoxyethanu, methanolu, ethanolu nebo dimethylformamidu, s bází nebo bez báze. Bází je např. hydroxid alkalického kovu, jako je hydroxid sodný a hydroxid draselný, uhličitan alkalického kovu, jako je uhličitan draselný a uhličitan sodný, nebo organický amin, jako je triethylamin.

Způsob B

Způsob B pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém

X je skupina NH, zahrnuje následující kroky.

-4CZ 291681 B6

Sloučenina obecného vzorce IV

(IV), ve kterém

R¹ a R⁵ jsou podle definice u obecného vzorce I, se ponechá reagovat se sloučeninou obecného vzorce V

(V) ve kterém

R², R³ a R⁴ jsou podle definice pro obecný vzorec I, za přítomnosti Lewisovy kyseliny, např.

chloridu zinečnatého, s obdržením sloučeniny obecného vzorce VI

-5CZ 291681 B6 ve kterém

R¹, R², R³, R⁴ a R⁵ jsou podle definice pro obecný vzorec I, a poté se sloučenina obecného vzorce VI redukuje např. s použitím natřium-borohydridu nebo natrium-kyanoborohydridu s obdržením sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém X je skupina NH. Reakce lze provést za standardních podmínek v inertním rozpouštědle, např. v methanolu či ethanolu.

Způsob C

Způsob C pro výrobu sloučeniny obecného vzorce I, ve které R¹ je skupina vzorce CH₂OH, zahrnuje následující kroky.

Sloučenina obecného vzorce VII

(VII), ve kterém

X¹ je aminoskupina nebo hydroxylová skupina a

R⁵ je podle definice pro obecný vzorec I, se ponechá reagovat se sloučeninou obecného vzorce III.

R³ (ΠΙ) , ve kterém

R², R³ a R⁴ jsou podle definice pro obecný vzorec I a

Y je odstupující skupina, jako je halidová skupina, tosyloxyskupina nebo mesyloxyskupina,

-6CZ 291681 B6 s obdržením sloučeniny obecného vzorce Vlil.

R* (VIII) , ve kterém

R², R³, R⁴, R⁵ a X jsou podle definice pro obecný vzorec I.

Tuto reakci lze výhodně provést v inertním rozpouštědle, např. v acetonu, acetonitrilu, dimethoxyethanu, methanolu, ethanolu nebo dimethylformamidu za přítomnosti nebo bez přítomnosti některé báze. Touto bází je např. hydroxid alkalického kovu, jako je hydroxid sodný a hydroxid draselný, uhličitan alkalického kovu, jako je uhličitan draselný a uhličitan sodný nebo některý organický amin, jako je triethylamin.

Redukce sloučeniny obecného vzorce VIII, např. lithium-aluminiumhydridem v tetrahydrofuranu nebo etheru, poskytuje sloučeninu obecného vzorce I, ve které R¹ je skupina CH₂OH.

Způsob D

Způsob D pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém

R¹ je skupina CH₂OH a

X je skupina NH, zahrnuje následující kroky.

Sloučenina obecného vzorce IX

NHj (IX), ve kterém

R⁵ je podle definice pro obecný vzorec I, se ponechá reagovat se sloučeninou obecného vzorce V.

R^s (V), ve kterém

-8CZ 291681 B6

R², R³ a R⁴ jsou podle definice pro obecný vzorec I, za přítomnosti některé Lewisovy kyseliny, např. chloridu zinečnatého s obdržením sloučeniny obecného vzorce X.

(X), ve kterém

R², R³, R⁴ a R⁵ se definují u obecného vzorce I, a poté se sloučenina obecného vzorce X redukuje, např. natrium-borohydridem nebo natrium-kyanoborohydridem s obdržením sloučeniny obecného vzorce XI,

ve kterém

R², R³, R⁴ a R⁵ se definují u obecného vzorce I.

Tyto reakce lze provést za standardních podmínek v některém inertním rozpouštědle, např. v methanolu či ethanolu.

Redukce sloučeniny obecného vzorce XI, např. lithium-aluminiumhydridem v tetrahydrofuranu nebo v etheru poskytuje sloučeninu obecného vzorce I, ve kterém R‘ je skupina CH2OH a X je skupina NH.

-9CZ 291681 B6

Způsob E

Kondenzace sloučeniny obecného vzorce XII

R* ve kterém (XII),

R², R³, R⁴ a R⁵ jsou podle definice pro obecný vzorec I, s α-halokarbonylovými meziprodukty obecného vzorce CH₃COCH(Z)COOCH₂CH3, ve kterém Z je atom bromu nebo atom chloru, v inertním rozpouštědle, např. v ethanolu, vede ke vzniku sloučeniny obecného vzorce XIII

(XIII), ve kterém

R², R³, R⁴ a R⁵ jsou podle definice pro obecný vzorec I.

Redukce sloučeniny obecného vzorce XIII, např. lithium-aluminiumhydridem v tetrahydrofuranu nebo v etheru, poskytuje sloučeninu obecného vzorce I, ve které R¹ je skupina CH₂OH a X je 20 atom kyslíku.

-10CZ 291681 B6

Použití v lékařství

Ve svém dalším aspektu se tento vynález týká sloučeniny obecného vzorce I pro použití v terapii, zejména pro použití proti gastrointestinálním zánětlivým onemocněním. Tento vynález též poskytuje použití sloučeniny obecného vzorce I při přípravě léků pro inhibici sekrece žaludeční kyseliny nebo pro léčení gastrointestinálních zánětlivých onemocnění.

Sloučenina podle tohoto vynálezu se tedy může použít pro prevenci a léčení gastrointestinálních zánětlivých onemocnění a onemocnění souvisejících se žaludeční kyselinou u savců včetně člověka, jako je gastritida, žaludeční vřed, dvanáctémíkový vřed, refluxní esofagitida a Zollingerův-Ellisonův syndrom. Dále lze tuto sloučeninu použít pro léčení dalších gastrointestinálních poruch, kdy se požaduje účinek proti žaludeční sekreci, např. u nemocných s gastrinomem a u nemocných s akutním krvácením horní části gastrointestinálního traktu. Může se též použít u pacientů na intenzivní péči a před operací či po operaci, aby se zabránilo aspiraci kyseliny a stresové ulceraci.

Obvyklá denní dávka účinné látky se mění v širokém rozmezí a závisí na řadě faktorů, jako je např. individuální potřeba každého pacienta, cesta podávání a onemocnění. Obecně jsou perorální a parenterální dávky v rozmezí od 5 do 1000 mg účinné látky denně.

Farmaceutické prostředky

V dalším aspektu se tento vynálezu týká farmaceutických prostředků obsahujících alespoň jednu sloučeninu podle vynálezu nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl jako účinnou látku.

Sloučeninu podle tohoto vynálezu lze též použít v prostředcích spolu s dalšími účinnými látkami, jako jsou antibiotika, např. amoxicilin.

Pro klinické použití se sloučenina podle tohoto vynálezu formuluje do farmaceutických prostředků pro perorální, rektální, parenterální či jiný způsob podávání. Farmaceutický prostředek obsahuje sloučeninu podle tohoto vynálezu v kombinaci s alespoň jednou farmaceuticky přijatelnou složkou. Nosič může být ve formě tuhé látky, polotuhé látky nebo jako kapalný zřeďovací prostředek či tobolka. Tyto farmaceutické přípravky jsou dalším předmětem tohoto vynálezu. Obvykle je množství účinné látky mezi 0,1 a 95 %, přednostně mezi 0,1 a 20 % u přípravků pro parenterální užívání a přednostně mezi 0,1 a 50 % u přípravků pro perorální podávání.

Při přípravě farmaceutických prostředků obsahujících sloučeninu podle tohoto vynálezu ve formě dávkových jednotek pro perorální podávání lze zvolenou sloučeninu mísit s pevnými práškovanými složkami, jako je laktosa, sacharosa, sorbitol, mannitol, škrob, amylopektin, deriváty celulosy, želatina, či s další vhodnou složkou stejně tak jako s rozvolňovadly a mazivy, jako je stearát hořečnatý, stearát vápenatý, natrium-stearylfumarát a polyethylenglykolové vosky. Poté se směs zpracuje do granulí nebo se lisuje do tablet.

Měkké želatinové tobolky lze připravit jako tobolky obsahující směs účinné látky nebo látek podle tohoto vynálezu, rostlinného oleje, tuku nebo jiného vhodného vehikula pro měkké želatinové tobolky. Tvrdé želatinové tobolky mohou obsahovat granule účinné látky. Tvrdé želatinové tobolky mohou též obsahovat aktivní sloučeninu v kombinaci s tuhými práškovanými složkami, jako je laktosa, sacharosa, sorbitol, mannitol, bramborový škrob, kukuřičný škrob, amylopektin, deriváty celulosy či želatina.

Dávkové jednotky pro rektální podávání lze připravit (i) ve formě čípků obsahujících účinnou látku ve směsi s neutrální tukovou bází,

-11 CZ 291681 B6 (ii) ve formě želatinové rektální tobolky obsahující účinnou látku ve směsi s rostlinným olejem, parafinovým olejem či jiným vhodným vehikulem pro želatinové rektální tobolky.

(iii) ve formě připraveného mikronálevu nebo (iv) ve formě suché směsi pro mikronálev, která se rozpouští před podáním ve vhodném rozpouštěcím prostředku.

Kapalné přípravky pro perorální podávání se mohou připravit ve formě sirupů nebo suspenzí, např. roztoků nebo suspenzí obsahujících od 0,1 do 20 hmotnostních % účinné složky a zbytek obsahující cukr nebo cukerné alkoholy a směs ethanolu, vody, glycerolu, propylenglykolu a polyethylenglykolu. V případě požadavků mohou takové kapalné přípravky obsahovat barviva, příchutě, sacharin a karboxymethylcelulózu nebo jiný prostředek pro zahuštění. Kapalné přípravky pro perorální podávání lze též připravit ve formě suchého prášku, který se rozpouští ve vhodném rozpouštědle před použitím.

Roztoky pro parenterální podávání lze připravit jako roztoky sloučeniny podle tohoto vynálezu ve farmaceuticky přijatelném rozpouštědle, přednostně v koncentracích od 0,1 do 10 hmotnostních %. Tyto roztoky mohou též obsahovat stabilizační přísady a/nebo pufrovací přísady a rozdělují se do dávkových jednotek ve formě ampulí či lahviček. Roztoky pro parenterální podávání lze též připravit jako suchý přípravek, který se rozpustí ve vhodném rozpouštědle bezprostředně před použitím.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu lze též použít v prostředcích spolu s dalšími účinnými složkami, např. pro léčbu či prevenci stavů souvisejících s infekcí lidské žaludeční sliznice bakterií Helicobacter pylori. Těmito dalšími účinnými složkami mohou být antimikrobiální prostředky, zejména:

β-laktamová antibiotika, jako je amoxicilin, ampicilin, cefalotin, cefaklor nebo cefixim, makrolidová antibiotika, jako je erytromycin nebo klaritromycin, tetracyklinová antibiotika, jako je tetracyklin nebo doxycyklin, aminoglykosidy, jako je gentamycin, kanamycin nebo amikacin, chinolony, jako je norfloxacin, ciprofloxacin nebo enoxacin, ostatní prostředky, jako je metronidazol, nitrofurantoin nebo chloramfenikol nebo přípravky obsahující soli bismutu, jako je subcitrat bismutitý, subsalicylat bismutitý, subkarbonat bismutitý, subnitrat bismutitý nebo subgalat bismutitý.

Příklady provedení vynálezu

1. Příprava sloučenin podle tohoto vynálezu

Příklad 1.1

Příprava 8-(2,6-dimethylbenzylamino)-2,3,6-trimethylimidazo[l,2-a]pyridinhydrochloridu

-12CZ 291681 B6

Míchaná směs 8-amino-2,3,6-trimethylimidazo[l,2-a]pyridinu (0,9 g, 5,01 mmol), chloridu zinečnatého (0,84 g, 6,2 mmol) a 2,6-dimethylbenzaldehydu (0,83 g, 6,2 mmol) v methanolu (50 ml) se zpracuje natrium-kyanoborohydridem (0,39 g, 6,2 mmol) a vaří se pod zpětným chladičem po dobu 3h. Methanol se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se rozpustí v methylenchloridu a 2 M roztoku hydroxidu sodného (40 ml). Organická vrstva se oddělí, vysuší síranem sodným a odpaří za sníženého tlaku.

Zbytek se vyčistí dvakrát chromatografii na sloupci silikagelu s použitím a) směsi ethylacetát:methylenchlorid (1:2) a b) směsi methanol:methylenchlorid (1:20) jako elučního prostředku. Olejovitý produkt se rozpustí v diethyletheru, zpracuje směsí diethylether/kyselina chlorovodíková a vysrážená sůl se odfiltruje s obdržením 0,6 g (36 %) sloučeniny podle nadpisu.

'H-NMR (300 Hz, CDC1₃): δ 2,33 (s, 3H), 2,38 (s, 3H), 2,45 (s, 6H), 2,50 (s, 3H), 4,40 (d. 2H), 6,40 (široký s, 1H), 7,95 - 7,15 (m, 4 H).

Příklad 1.2

Příprava 2,3-dimethyl-8-(2,6-dimethylbenzylamino)-6-fluorimidazo[l,2-a]pyridinu

Míchaná směs 8-amino-2,3-dimethyl-6-fluorimidazo[l,2-a]pyridinu (0,16 g, 0,89 mmol), chloridu zinečnatého (0,14 g, 1,04 mmol) a 2,6-dimethylbenzaldehydu (0,14 g, 1,04 mmol) v methanolu (50 ml) se zpracuje natrium-kyanoborohydridem (0,065 g, 1,04 mmol) a vaří se pod zpětným chladičem po dobu Ί h. Ochlazená reakční směs se přidá do 0,5 M roztoku hydroxidu sodného (20 ml) a vysrážená tuhá látka se odfiltruje a vyčistí chromatografii na sloupci silikagelu s použitím směsi methanokmethylenchlorid (1:10) jako elučního prostředku. Krystalizace z petroletheru poskytuje 0,1 g (38 %) sloučeniny podle nadpisu.

'H-NMR (300 Hz, CDCI₃):6 2,30 (s, 3H), 2,34 (s, 3H), 2,40 (s, 6H), 4,35 (d,2H), 4,95 (široký s, 1H), 6,15 (dd, 1H), 7,0 - 7,20 (m, 4H).

- 13CZ 291681 B6

Příklad 1.3

Příprava 2,3-dimethyl-8-(2,6-diethylbenzylamino)-imidazo[ 1.2-a]pyridinu

8-amino-2,3-dimethyl-imidazo[l,2-a]pyridin (0,33 g, 2,0 mmol) a 2,6-diethylbenzaldehyd (0,36 g, 2,2 mmol) se rozpustí v methanolu (7 ml). Po malých částech se přidává chlorid zinečnatý a (0,30 g, 2,2 mmol) a poté natrium-kyanoborohydrid (0,14 g, 2,2 mmol) a směs se vaří pod zpětným chladičem pod atmosférou argonu po dobu 3 h, ochladí a poté se vylije do vodného 1M roztoku hydroxidu sodného (10 ml). Výsledná žlutá suspenze se extrahuje s DCM (3x25 ml) a spojené organické roztoky se promyjí roztokem chloridu sodného, vysuší síranem sodným a odpaří. Olejovitý zbytek (0,4 g) se vyčistí mžikovou chromatografií (DCM-ethylacetát, 0 % - 20 % ethylacetátu) s obdržením 0,34 g produktu. Zpracování tohoto olejovitého produktu hexanem (2 ml) poskytuje 0,14 g (23 %) bělavých krystalů.

'H-NMR (300 Hz, CDC1₃): 5 7,2 - 7,3 (2H, m), 7,1 (2H, d), 6,7 (1H, t), 6,2 (1H, d), 4,8 (1H, b), 4,4 (2H, d), 2,7 (4H, q), 2,3 (6H, 2 singlety), 1,2 (6H, t).

Příklad 1.4

Příprava 8-(2,6-dimethylbenzyloxy)-3-hydroxymethyl-2-methylimidazo[l,2-a]pyridinu

Směs 8-hydroxy-3-hydroxymethyl-2-methylimidazo[l,2-a]pyridinu (0,89 g, 5,0 mmol), uhličitanu sodného (1,5 g), jodidu sodného (0,4 g), 2,6-dimethylbenzylchloridu (0,7 g, 4,5 mmol) a acetonu (60 ml) se míchá přes noc. Přidá se další uhličitan sodný (1,0 g). Reakční směs se vaří pod zpětným chladičem po dobu 2 h. Dále se reakční směs zfiltruje a rozpouštědlo se odstraní ve vakuu. Zbytek se suspenduje ve směsi dichlormethan/methanol (100:5) a zfiltruje. Vakuové odpaření rozpouštědla poskytuje zbytek, který se čistí mžikovou chromatografií elucí směsí dichlormethan-methanol (100:4), a odběr frakcí a rekrystalizace ze směsi dichlormethan/acetonitril poskytuje 0,37 g sloučeniny podle nadpisu.

- 14CZ 291681 B6 'H-NMR (300 Hz, CDCI₃): δ 7,87 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,15 - 7,08 (m, 1H), 7,0 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 6,73 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,63 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 5,23 (s, 2H), 4,83 (s, 2H), 2,4 (s, 6H), 2,28 (s, 3H).

Příklad 1.5

Příprava 2,3-dimethyl-8-(2,6-dimethylbenzylamino)imidazo[ 1,2-a]pyridinu

Směs 8-amino-2,3-dimethylimidazo[l,2-a]pyridinu (0,7 g, 4,34 mmol), uhličitanu sodného (2,0 g), jodidu sodného (0,3 g), 2,6-dimethylbenzylchloridu (0,671 g, 4,34 mmol) a acetonu (30 ml) se míchá přes noc. Reakční směs se zfiltruje a rozpouštědlo se odstraní ve vakuu. Zbytek se rozpustí v methylenchloridu a promyje vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva se oddělí a rozpouštědlo se odpaří.

Surový produkt se vyčistí mžikovou chromatografií elucí směsí dichlormethan/methanol s obdržením 0,7 g sloučeniny podle nadpisu.

'H-NMR (300 Hz, CDC1₃): δ 7,25 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,14 - 7,09 (m, 1H), 7,03 (d, J = Ί,Ί Hz, 2H), 6,73 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 6,21 (d = 7,7 Hz, 1H), 4,79 (široký „t“, 1H), 4,34 (d, J = 4,5 Hz, 2H), 2,38 (s, 6H), 2,34 (s, 6H).

Příklad 1.6

Příprava 2,3-dimethyl-8-(2,6-dimethylbenzyloxy)imidazo[l,2-a]pyridinu

Směs 8-hydroxy-2,3-dimethylimidazo[l,2-a]pyridinu (1,2 g, 7,41 mmol), 2,6-dimethylbenzylchloridu (1,145 g, 7,41 mmol), jodidu sodného (0,3 g), uhličitanu sodného (2,0 g) a acetonu (50 ml) se vaří pod zpětným chladičem po dobu 3 h. Po přídavku methylenchloridu se reakční směs zfiltruje. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu. Zbytek se rozpustí v dichlormethanu, promyje vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší síranem sodným a odpaří. Zbytek se

- 15CZ 291681 B6 vyčistí chromatografií na silikagelu elucí směsí dichlormethan-methanol (100:5) a obdrží se 0,70 g žádaného produktu (ze směsi ethylacetát-ether).

'H-NMR (300 Hz, CDC1₃): δ 7,56 (d, J= 6,6 Hz, 1H), 7,1 (t, J = 6,6 Hz, 1H), 6,94- 6,85 5 (m, 3H), 6,73 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,24 (s, 6H).

Příklad 1.7 i o Příprava 2,3-dimethyl-8-(2-ethyl-6-methylbenzylamino)imidazo[ 1,2-a]pyridinu

8-Amino-2,3-dimethylimidazo[l,2-a]pyridin (0,3 g, 1,86 mmol) a 2-ethyl-6-methylbenzylchlorid (0,31 g, 1,84 mmol) se rozpustí v 5 ml dimethoxyethanu. Přidá se jodid draselný (0,2 g, 1,2 mmol) a uhličitan sodný (0,3 g, 2,8 mmol) a směs se vaří pod zpětným chladičem po dobu 15 4 h. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se vyčistí sloupcovou chromatografií na silikagelu s použitím směsi methylenchloridu a ethylacetátu (60:40) jako eluentu. Obdrží se 230 mg sloučeniny podle nadpisu (42 %).

'H-NMR (300 Hz, CDC1₃): δ 1,22 (t, 3H), 2,35 (s, 6H), 2,39 (s, 3H), 2,70 (q, 2H), 4,35 (d, 2H), 20 4,81 (t, 1H), 6,21 (d, 1H), 6,73 (t, 1H), 7,01 - 7,10 (m, 2H), 7,13 - 7,19 (m, 1H), 7,24 (d, 1H).

Příklad 1.8

Příprava 6-brom-2,3-dimethyl-8-(2,6-dimethylbenzylamino)imidazo[ 1,2-a]pyridinu

Směs 8-amino-6-brom-2,3-dimethylimidazo[l,2-a]pyridinu (1,2 g, 5,0 mmol), 2,6-dimethylbenzylchloridu (0,772 g, 5,0 mmol), uhličitanu sodného (0,8 g), jodidu sodného (0,2 g) a acetonu (45 ml) se míchá přes noc. Přidá se další 2,3-dimethylbenzylchlorid (0,285 g) a reakční směs se 30 vaří pod zpětným chladičem po dobu 5 h. Po přídavku acetonu se reakční směs zfiltruje.

Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se rozpustí v dichlormethanu, promyje roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší síranem sodným a odpaří. Surový produkt se rozpustí

-16CZ 291681 B6 v ethylacetátu a přidá se petrolether. Filtrace a odpaření rozpouštědla poskytuje zbytek, který se rekrystaluje z ethylacetátu s obdržením 1,45 g sloučeniny podle nadpisu.

'H-NMR (300 Hz, CDC1₃): δ 7,37 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 7,15 - 7,09 (m, 1H), 7,04 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 6,28 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 4,88 („t“, 1H), 4,33 (d, J = 4,13 Hz, 2H), 2,38 (s, 6H), 2.3 (s, 3H), 2,29 (s, 3H).

Příklad 1.9

Příprava 8-(2,6-dimethylbenzylamino)-3-hydroxymethyl-2-methylimidazo[l,2-a]pyridinu

Roztok vitridu (40 ml, 136 mmol) v toluenu (25 ml) se přidává po kapkách k roztoku 3-karboethoxy-8-(dimethylbenzylamino)-2-methylimidazo[l,2-a]pyridinu (8,0 g, 23,71 mmol) v toluenu (100 m) promývanému proudem dusíku. Odstraní se ledová lázeň a reakční směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 105 min. Reakční směs se ochladí na 0°C přidá se voda 36 ml). Směs se zfiltruje a organická vrstva se promyje vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší se síranem sodným a odpaří. Přidá se acetonitril (20 ml) a produkt se obdrží filtrací. Krystalický produkt se promyje dvakrát acetonitrilem a vysuší ve vakuu. Výtěžek je 5,6 g.

'H-NMR (300 Hz, CDC1₃): δ 7,58 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 7,15 - 7,1 (m, 1H), 7,05 (d, J = 7,1 Hz, 2H), 6,74 (t, J = 7,1 Hz, 1H), 6,28 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 4,84 (široký t, J = 4,5 Hz, 1H), 4,8 (s, 2H),

4,35 (d, J = 4,5 Hz, 2H), 2,4 (s, 6H), 2,2 (s, 3H).

Příklad 1.10

Příprava 6-chlor-2,3-dimethyl-8-(2,6-dimethylbenzylamino)imidazo[ 1,2-a]pyridinu

- 17CZ 291681 B6

Směs 8-amino-6-chlor-2,3-dimethylimidazo[l,2-a]pyridinu (0,894 g, 4,5 mmol), 2,6-dimethylbenzaldehydu (0,77 g, 5,7 mmol), chloridu zinečnatého (1,08 g, 7,92 mmol), natriumkyanoborohydridu (0,36 g, 5,7 mmol) a methanolu (35 ml) se vaří pod zpětným chladičem po dobu 3,5 h. Přidá se další 2,6-dimethylbenzaldehyd (0,25 g ve 4 ml methanolu), chlorid zinečnatý (0,55 g) a natrium-kyanborohydrid (0,35 g). Reakční směs se vaří pod zpětným chladičem po dobu 4h. Další zpracování přídavkem 1 M roztoku hydroxidu sodného (150 ml) a vody (50 ml), s následnou extrakcí směsi dichlormethanem, sušení a odpaření rozpouštědla, poskytuje tuhý zbytek. Surový produkt se rozpustí v ethylacetátu a přidá se ether. Filtrace a odpaření rozpouštědla poskytuje zbytek, který se rekrystaluje z ethylacetátu s obdržením 0,52 g produktu.

'H-NMR (300 Hz, CDC1₃): δ 7,28 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 7,15- 7,1 (m, 1H), 7,04 (d, J = 12 Hz, 2H), 6,2 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 4,89 (široký „t“, 1H), 4,33 (d, J = 4 Hz, 2H), 2,37 (s, 6H), 2,33 (s, 3H), 2,32 (s, 3H).

Příklad 1.11

Příprava 2,3-dimethyl-8-(2,6-dimethyl-4-fluorbenzylamino)imidazo[ 1,2-a]pyridinu

8-Amino-2,3-dimethylimidazo[l,2-a]pyridin (0,5 g, 3,1 mmol) se rozpustí v acetonitrilu (6 ml). K roztoku se přidá 2,6-dimethyl-4-fluor-benzylbromid (0,67 g, 3,1 mmol) a uhličitan draselný (0,47 g, 3,4 mmol). Směs se vaří pod zpětným chladičem po dobu 16 h. Přidá se methylenchlorid (12 ml) a roztok chloridu sodného (20 ml). Organická vrstva se oddělí, vysuší síranem sodným a odpaří za sníženého tlaku. Surový produkt se vyčistí chromatografií (směsí ethylacetát:petrolether 1:1). Obdrží se 400 mg sloučeniny podle nadpisu ve formě tuhé látky.

'H-NMR (300 Hz, CDC1₃): δ 2,3 (s, 6H), 2,3 (s, 6H), 4,2 (d,2H), 4,65 (b, 1H), 6,15 (d, 1H), 6,65 - 6,75 (m, 3H), 7,2 (d, 1H).

Příklad 1.12

Příprava 2,6-dimethyl-8-(2,6-dimethylbenzylamino)-3-hydroxymethylimidazo[ 1,2-a]pyridinu

-18CZ 291681 B6

Roztok 3-karboethoxy-2,6-dimethyl-8-(2,6-dimethylbenzylamino)Ímidazo[ 1,2-a]pyridinu (0,4 g, 1,1 mmol) v 10 ml toluenu se ochladí ledovou vodou a přidává se 65% Red-Al v toluenu (2,1 g, 6,6 mmol) v průběhu 30 min. Roztok se míchá po dobu 2 h při teplotě místnosti. Po kapkách se přidává roztok Rochelleovy soli (tetrahydrát tartaratu sodnodraselného, 35 g ve 250 ml vody) a dále se přidá 10 ml toluenu, organická vrstva se oddělí, promyje vodou, vysuší síranem sodným a odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se vyčistí sloupcovou chromatografií na silikagelu, eluce směsí dichloromethantmethanol 9:1 s obdržením 0,21 g sloučeniny podle nadpisu (62 %).

’Η-NMR (300 Hz, CDC1₃): δ 1,65 (s, 1H), 2,30 (d, 6H), 2,38 (s, 6H), 4.37 (d, 2H), 4,75 (s, 1H), 4,85 (s, 2H), 6,15 (s, 1H), 7,0 - 7,15 (m, 3H), 7,40 (s, 1H).

Příklad 1.13

Příprava 2,6-dimethyl-8-(2,6-dimethyl-4-fluorbenzylamino)-3-hydroxymethylimidazo[ 1,2-a]pyridinu

Roztok 0,4 g (1,1 mmol) 3-karboethoxy-2,6-dimethyl-8-(2,6-dimethyl-4-fluorbenzylamino)imidazo[l,2-a]pyridinu v 10 ml toluenu se vychladí ledovou vodou (2,1 g, 6,6 mmol). Po 30 min se přidá 65% Red-Al v toluenu. Roztok se míchá po dobu 2 h při teplotě místnosti. Přidá se 10 ml roztoku Rochellovy soli (35 g tetrahydrátu tartratu sodnodraselného ve (250 ml vody) po kapkách, dále se přidá 10 ml toluenu a organická vrstva se oddělí, promyje vodou, vysuší síranem sodným a odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se vyčistí sloupcovou chromatografií na silikagelu, elucí směsí dichlormethan:methanol 95:5, s obdržením 0,3 g (83 %) sloučeniny podle nadpisu.

-19CZ 291681 B6 ’Η-NMR (300 Hz, CDCI3): δ 2,26 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,37 (s, 6H), 4,28 (d, 2H), 4,70 (s, 1H), 4,82 (s, 2H), 6,14 (s, 1H), 6,75 (d, 2H), 7,42 (s, 1H).

Příklad 1.14

Příprava 8-(2,6-dimethyl-4-fluorbenzylamino)-2,3,6-trimethylimidazo[ 1,2-a]pyridinhydrochloridu

F

Míchaná směs 8-amino-2,3,6-trimethylimidazo[l,2-a]pyridinu (0,5 g, 2,85 mmol), 2,6-dimethyl-4-fluorbenzylbromidu (0,7 g, 3,4 mmol), uhličitanu draselného (0,6 g, 4,6 mmol), jodidu sodného (0,1 g) a 15 ml acetonitrilu se vaří pod zpětným chladičem přes noc. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se rozpustí v dichlormethanu a promyje vodou. Organická vrstva se vysuší síranem sodným a odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se vyčistí sloupcovou chromatografií na silikagelu, elucí směsí hexan:ethylacetát2:l. Olejovitý produkt se rozpustí v diethyletheru, zpracuje směsí diethylether/kyselina chlorovodíková a vysrážená sůl se odfiltruje s obdržením 0,55 g sloučeniny podle nadpisu (56 %).

'H-NMR (300 Hz, CDC1₃): δ 2,22 (s, 3H), 2,30 (d, 12H), 4,23 (d, 2H), 4,68 (s, 1H), 6,05 (s, 1H), 6,70 (d, 2H), 7,00 (s, 1H).

Příklad 1.15

Příprava 2,3-dimethyl-8-(2,6-dimethyl-4-chlorbenzylamino)imidazo[ 1,2-a]pyridinu.

Směs 4-chlor-2,6-dimethylbenzylbromidu a 2-chlor-4,6-dimethylbenzylbromidu (1,1 g, 4,68 mmol) a 8-amino-2,3-dimethylimidazo[l,2-a]pyridinu (4,65 mmol) se rozpustí v 15 ml dimethoxyethanu. Přidá se jodid sodný (0,5 g, 3,0 mmol) a uhličitan sodný (1 g, 9,4 mmol). Směs

-20CZ 291681 B6 se vaří pod zpětným chladičem po dobu 4 h. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se vyčistí sloupcovou chromatografii na silikagelu. Produkt se eluuje směsí methylenchloridu a ethylacetátu (70:30). Obdrží se 70 mg sloučeniny podle nadpisu.

'H-NMR (300 Hz, CDC1₃): δ 2,35 (s, 6H), 4,29 (d, 2H), 4,74 (t, 1H), 6,19 (d, 1H), 6,72 (t, 1H), 7,04 (s, 2H), 7,25 (d, 1H).

Příklad 1.16

Příprava 2,6-dimethyl-8-(2-ethyl-6-methylbenzylamino)-3-hydroxymethylimidazo[ 1,2-a]pyridinu

3-Karboethoxy-2,6-dimethyl-8-(2-ethyl-6-methylbenzylamino)imidazo[l,2-a]pyridin (1,0 g, 2,8 mmol) se přidá k tetrahydrofuranu (25 ml) a míchá se při teplotě +5 ’C. Po částech se přidává lithium-aluminiumhydrid (0,5 g, 13 mmol) v průběhu 1,5 h tak, aby teplota zůstávala pod +10 °C. Po míchání směsi při teplotě místnosti po dobu 1 h se po kapkách přidá 0,5 ml vody, poté 0,5 ml 15% roztoku hydroxidu sodného a dále 1,5 ml vody. Tuhé látky se odstraní filtrací a důkladně promyjí tetrahydrofuranem a methylenchloridem. Filtrát a promývací podíly se spojí a vysuší a rozpouštědla se odstraní za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí v methylenchloridu a promyje vodou. Organická vrstva se oddělí, vysuší síranem sodným, odpaří za sníženého tlaku a zbytek se vyčistí sloupcovou chromatografii na silikagelu s použitím směsi ethylacetát.methylenchlorid (1:1) jako eluentu. Krystalizace ze směsi petrolether:diethylether (1:1) poskytuje 0,37 g sloučeniny podle nadpisu (41 %).

'H-NMR (300 Hz, CDCI₃): δ 1,25 (t, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,40 (s, 3H), 2,70 (s, 2H),

4,35 (d, 2H), 4,75 (široký s, 1H), 4,80 (s, 2H), 6,15 (s, 1H), 7,05 - 7,25 (m, 3H), 7,40 (s, 1H).

Příklad 1.17

Příprava 8-(2,6-diethylbenzylamino)-2,6-dimethyl-3-hydroxymethylimidazo[ 1,2-a]pyridinu

-21 CZ 291681 B6

Roztok 3-karboethoxy-2,6-dimethyl-8-(2,6-diethylbenzylamino)imidazo[l,2-a]pyridinu (1,75 g, 4,6 mmol) ve 30 ml tetrahydrofuranu se zpracuje lithium-aluminiumhydridem (0,7 g, 18,5 mmol) při teplotě místnosti v průběhu 3,5 h. Reakce je dokončena po 4 h a přeruší se opatrným přídavkem vody po kapkách (0,7 ml), vodného roztoku hydroxidu sodného (0,7 ml, 15%) a opět vody (2 ml). Směs se extrahuje chloroformem a organická vrstva se odpaří. Zbytek se překrystaluje v ethanolu a bílý krystalický produkt se zfíltruje, promyje diethyletherem a vysuší ve vaku s obdržením výtěžku 1,5 g (96 %).

'H-NMR (300 Hz, CDC1₃): δ 1,23 (t, 6H), 1,99 (s, 1H), 2,25 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,73 (q, 4H), 4,34 (d, 2H), 4,80 (s, 3H), 6,13 (s, 1H), 7,09 (d, 2H), 7,22 (t, 1H), 7,40 (s, 1H).

Příklad 1.18

Příprava 8-(2,6-diethylbenzylamino)-2,3,6-trimethylimidazo[l,2-a]pyridinu

Míchaná směs 8-amino-2,3,6-trimethylimidazo[l,2-a]pyridinu (0,5 g, 2,8mmol), 2,6-diethylbenzaldehydu (0,7 g, 4,3 mmol) a chloridu zinečnatého (0,44 g, 3 mmol) v 50 ml methanolu se zpracuje natrium-kyanoborohydridem (0,19 g, 3 mmol) a poté se vaří pod zpětným chladičem po dobu 20 h. Methanol se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se rozpustí v dichlormethylenu a vodě. Organická vrstva se oddělí, vysuší síranem sodným a odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se čistí chromatografií na silikagelu, nejprve dichlormethylenem a poté směsí dichíormethylen:ethylacetát (1:1) s obdržením 0,42 g sloučeniny podle nadpisu.

'H-NMR (300 Hz, CDC1₃): δ 1,25 (t, 6H), 2,28 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,71 (q, 4H),

4,36 (d, 2H), 4,84 (s, 1H), 6,10 (s, 1H), 7,04 - 7,23 (m, 4H).

-22CZ 291681 B6

Příklad 1.19

Příprava S-ÍŽ-ethyl-ó-methylbenzylaminoj-ž^ó-trimethylimidazot 1,2-a]pyridinu

Míchaná směs 8-amino-2,3,6-trimethylimidazo[l,2-a]pyridinu (0,5 g, 2,8 mmol), 2-ethyl-6methylbenzaldehydu (0,45 g, 3 mmol) a chloridu zinečnatého (0,4 g, 3 mmol) v 50 ml methanolu se zpracuje natrium-kyanoborohydridem (0,19 g, 3 mmol) a vaří pod zpětným chladičem po dobu 20 h. Methanol se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se rozpustí v dichlormethylenu a vodě. Organická vrstva se oddělí, vysuší síranem sodným a odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se oddělí chromatografií na silikagelu směsí dichlormethylen:methanol (10:1) s obdržením 0,28 g sloučeniny podle nadpisu (33 %).

’Η-NMR (300 Hz, CDCI₃): δ 1,22 (t, 3H), 2,32 (s, 6H), 2,34 (s, 3H), 2,38 (s, 3H), 2,72 (q, 2H), 4,33 (d, 2H), 4,77 (s, 1H), 6,08 (s, 1H), 7,03 - 7,19 (m, 4H).

Příklad 1.20

Příprava 8-(2,6-dimethyl-4-fluorbenzyloxy)-3-hydroxymethyl-2-methylimidazo[ 1,2-a]pyridinu

F

Lithium-aluminiumhydrid (0,31 g, 8,4 mmol) se přidá k tetrahydrofuranu (30 ml) a po kapkách se přidává 3-karboethoxy-8-(2,6-dimethyl-4-fluorbenzyloxy)-2-methylimidazo[l ,2-a]pyridin (1,5 g, 4,2 mmol) rozpuštěný v tetrahydrofuranu (30 ml) v průběhu 30 min. Po kapkách se přidá 0,31 ml vody a poté 0,31 ml 15% roztoku hydroxidu sodného a opět 0,93 ml vody. Tuhé látky se odstraní filtrací a promyjí důkladně směsí methanol‘.methylenchlorid (1:1). Filtrát a promývací podíly se spojí a rozpouštědla se odstraní za sníženého tlaku. Zbytek se vyčistí sloupcovou

-23CZ 291681 B6 chromatografií na silikagelu směsí methylenchlorid:methanol (9:1). Zpracování zbytku acetonitrilem poskytuje 0,9 g sloučeniny podle nadpisu (69 %).

’H-NMR (300 Hz, CDC1₃): δ 2,25 (s, 3H), 2,35 (s, 6H), 4,85 (d, 2H), 5,1 (t, 1H), 5,2 (s, 2H), 6,8-7,05 (m, 4H), 7,95 (d, 1H).

Příklad 1.21

Příprava 6-brom-8-(2,6-dimethyl-4-fluorbenzylamino)-3-hydroxymethyl-2-methylimidazo[l,2-a]pyridinu

Lithium-borohydrid (70 mg) se přidává po dílech v průběhu 4 h k roztoku 6-broni-3-karboethoxy-8-(2,6-dimethyl-4-fluorbenzylamino)-2-methylimidazo[ 1,2-a]pyridinu (100 mg,

0,23 mmol) v tetrahydrofuranu, který se vaří pod zpětným chladičem. Reakce se ukončí přídavkem zředěné kyseliny chlorovodíkové a přidá se methylenchlorid. Organická vrstva se oddělí, vysuší a odpaří ve vakuu, zbytek se vyčistí sloupcovou chromatografií na silikagelu směsí methylenchlorid:ethylacetát (100:10) s obdržením 40 mg sloučeniny podle nadpisu (44 %).

’H-NMR (300 Hz, CDClj): δ 7,72 (s, 1H), 6,75 (d, 2H), 6,35 (s, H), 4,9 (t, 1H), 4,8 (s, 2H), 4,3 (d, 2H), 2,35 (s, 6H), 2,25 (s, 3H).

Příklad 1.22

Příprava 2,6-dimethyl-8-(2,6-dimethylbenzyloxy)-3-hydroxy-methylimidazo[l,2-a]pyridinu

-24CZ 291681 B6

Směs vitridu (3 ml, 10,2 mmol) v toluenu (3 ml se přidává po kapkách k roztoku 3-karboethoxy2,6-dimethyl-8-(2,6-dimethylbenzyloxy)imidazo[l,2-a]pyridinu (0,68 g, 1,93 mmol) v toluenu (15 ml) promývanému proudem dusíku. Odstraní se ledová lázeň a reakční směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 2 h a 15 min. Reakční směs se ochladí na 0 °C a přidá se voda (6 ml). Dále se přidá směs methylenchlorid/methanol a reakční směs se zfiltruje. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a zbytek se vyčistí sloupcovou chromatografií na silikagelu směsí methylenchlorid:methanol (100:5) s obdržením 0,35 g sloučeniny podle nadpisu (58 %).

'H-NMR (300 Hz, CDC1₃): δ 7.65 (s, 1H), 7,10 (t, 1H), 7,0 (d, 2H), 6,50 (s, 1H), 5,2 (s, 2H), 4,8 (s, 2H), 2,4 (s, 6H), 2,35 (s, 3H), 2,25 (s, 3H).

Příklad 1.23

Příprava 8-(2,6-dimethyl-4-fluorbenzylamino)-3-hydroxymethyl-2-methylimidazo[ 1,2-a]pyridinu

Roztok 0,6 g (1,7 mmol) 3-karboethoxy-8-(2,6-dimethyl-4-fluorbenzylamino)-2-methylimidazo[l,2-a]pyridinu ve 30 ml toluenu se ochladí ledovou vodou. V průběhu 30 min se přidá 2,1 g 65% Red-Al (6,6 mmol) v toluenu. Roztok se míchá po dobu 1 h při teplotě místnosti a přidá se 25 ml Rochellovy soli (35 g tetrahydrátu tartaratu sodnodraselného ve 250 ml vody) po kapkách a organická vrstva se oddělí. Vodná vrstva se promyje methylenchloridem, který se oddělí. Spojené organické fáze se vysuší síranem sodným a odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se vyčistí chromatografií na sloupci silikagelu eluční směsí dichlormethan:methanol 95:5 s obdržením 0,42 g sloučeniny podle nadpisu (79 %).

'H-NMR (300 Hz, CDC1₃): δ 2,15 (s, 3H), 2,35 (s, 6H), 4,30 (d, 2H), 4,75 (s, 2H), 4,85 (t, 1H), 6,25 (d, 1H), 6,70 - 6,80 (m, 3H), 7,55 (d, 1H).

Příklad 1.24

Příprava 2,6-dimethyl-8-(2-ethyl-4-fluor-6-methylbenzylamino)-3-hydroxymethylimidazo[l,2-a]pyridinu

-25CZ 291681 B6

Ke směsi lithium-aluminiumborohydridu (0,08 g, 2,1 mmol) v tetrahydrofuranu (15 ml) se přidá 3-karboethoxy-2,6-dimethyl-8-(2-ethyl-4-fluor-6-methylbenzylamino)imidazo[l,2-a]pyridin (0,4 g, 1,0 mmol) v tetrahydrofuranu (15 ml). Po míchání směsi při teplotě místnosti po dobu 4 h se přidává po kapkách 0,1 ml vody a poté 0,1 ml 15% roztoku hydroxidu sodného a dále 0,3 ml vody. Tuhé látky se odstraní filtrací a promyjí důkladně tetrahydrofuranem. Filtrát a promývací podíly se spojí a vysuší a rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku. Zbytek se vyčistí chromatografií na sloupci silikagelu směsí methylenchlorid:methanol (9:1). Krystalizace z acetonitrilu poskytuje 0,32 g sloučeniny podle nadpisu (89 %).

'H-NMR (300 Hz, CDC1₃): δ 1,2 (t, 3H), 2,2 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,4 (s, 3H), 2,75 (q, 2H), 4,3 (d, 2H), 4,75 (Široký s, 3H), 6,15 (s, 1H), 6,75 - 6,85 (m, 2H), 7,45 (s, 1H).

Příklad 1.25

Příprava 8-(2-ethyl-4-fluor-6-methylbenzylamino)-2,3,6-trimethylimidazo[l,2-a]pyridinu

8-Amino-2,3,6-trimethylimidazo[l,2-a]pyridin (0,38 g, 2,16 mmol) a 2-ethyl-4-fluor-6methylbenzylbromid (0,50 g, 2,16 mmol) se rozpustí v 10 ml dimethoxyethanu. Přidá se jodid draselný (0,2 g, 1,2 mmol) a uhličitan sodný (0,4 g, 3,8 mmol) a směs se vaří pod zpětným chladičem po dobu 6 h. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se vyčistí sloupcovou chromatografií na silikagelu směsí methylenchloridu a ethylacetátu (60:40). Obdrží se 203 mg sloučeniny podle nadpisu (29 %).

'H-NMR (300 Hz, CDC1₃): δ 1,21 (t, 3H), 2,32 (s, 6H), 2,33 (s, 3H), 2,37 (s, 3H), 2,71 (q, 2H), 4,28 (d, 2H), 4,68 (t, 1H), 6,06 (s, 1H), 6,73 - 6,80 (m, 2H), 7,05 (s, 1H).

-26CZ 291681 B6

Příklad 1.26

Příprava 2,3-dimethyl-8-(2,6-dimethyM-fluorbenzyloxy)imidazo[l,2-a]pyridinu

2,3-Dimethyl-8-hydroxyimidazo[l,2-a]pyridin (1,7 g, 10 mmol), 2,6-dimethyl-4-fluorbenzylbromid (2,3 g, 10 mmol), jodid sodný (0,5 g, 0,3 mmol) a uhličitan sodný (2,6 g, 28 mmol) se přidají do acetonu (75 ml) a směs se vaří pod zpětným chladičem po dobu 6 h. Přidá se methylenchlorid a směs se zfiltruje a rozpouštědla se odpaří za sníženého tlaku. Čištění chromatografií na sloupci silikagelu směsí methylenchlorid:ethylacetát (1:2) poskytne sloučeninu podle nadpisu ve formě bílého prášku (0,85 g, 28 %).

'H-NMR (300 Hz, CDCI₃): δ 2,36 (s, 3H), 2,38 (s, 9H), 5,15 (s, 2H), 6,57 (d, 1H), 6,68 - 6,75 (m, 3H), 7,46 (d, 1H).

Příklad 1.27

Příprava 2,3-dimethyI-8-(2-ethyl-6-methylben2yloxy)imidazo[l,2-a]pyridinu

2,3-Dimethyl-8-hydroxyimidazo[l,2-a]pyridin (0,8 g, 5 mmol), 2-ethyl-6-methylbenzylchlorid, jodid sodný (0,25 g, 1,7 mmol) a uhličitan sodný (1,2 g, 11 mmol) se přidají do acetonu (40 ml) a směs se vaří pod zpětným chladičem po dobu 5 h. Aceton se odpaří a zbytek se rozpustí v methylenchloridu a promyje vodou. Organické rozpouštědlo se odpaří a promyje za sníženého tlaku. Zbytek se vyčistí dvakrát chromatografií na sloupci silikagelu (a) směsí methylenchlorid:ethylacetát(l:2), (b) směsí methylenchlorid:ethylacetát (2:1) s obdržením sloučeniny podle nadpisu (0,02 g, 1,4 %).

-27CZ 291681 B6 'H-NMR (300 Hz, CDC1₃): δ 1.2 (t, 3H), 2,36 (s, 3H), 2,38 (s, 3H), 2,40 (s, 3H), 2,74 (q, 2H), 5,21 (s, 2H), 6,59 (d, 1H), 6,7 (t, 1H), 7,04 (m, 2H), 7,17 (t, 1H), 7,45 (d, 1H).

Příklad 1.28

Příprava 8-(2-ethyl-6-methylbenzyloxy)-3-hydroxymethyl-2-methylimidazo[ 1,2-a]pyridinu

Ke směsi lithium-aluminiumborohydridu (0,08 g, 2,1 mmol) v tetrahydrofuranu (25 ml) se přidá 3-karboethoxy-8-(2-ethyl-6-methylbenzyloxy)-2-methylimidazo[ 1,2-a]pyridin (1,0 g,

2,8 mmol) v tetrahydrofuranu (25 ml). Po míchání směsi při teplotě místnosti po dobu 2 h se po kapkách přidají 0,2 ml vody, poté 0,2 ml 15% roztoku hydroxidu sodného a dále 0,6 ml vody. Tuhé látky se odstraní filtrací a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se vyčistí chromatografíí na sloupci silikagelu směsí methylenchlorid:methanol (9:1). Krystalizace z diethyletheru poskytuje 0,52 g sloučeniny podle nadpisu (60 %).

'H-NMR (300 Hz, CDC1₃): δ 1,2 (t, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,4 (s, 3H), 2,75 (q, 2H), 4,75 (s, 2H), 5,2 (s, 2H), 6,65 - 6,75 (m, 2H), 7,0 - 7,2 (m, 3H), 7,85 (d, 1H).

Tabulka 1

Souhrn sloučenin podle příkladů 1.1 až 1.28

Příklad	R¹	R²	R³	R⁴	R⁵	X
1.1	CH₃	ch₃	ch₃	Η	CH₃	NH
1.2	ch₃	ch₃	ch₃	H	F	NH
1.3	ch₃	ch₂ch₃	ch₂ch₃	H	H	NH
1.4	ch₂oh	ch₃	ch₃	H	H	O
1.5	ch₃	ch₃	ch₃	H	H	NH
1.6	ch₃	ch₃	ch₃	H	H	O
1.7	ch₃	ch₃	ch₂ch₃	H	H	NH
1.8	ch₃	ch₃	ch₃	H	Br	NH
1.9	ch₂oh	ch₃	ch₃	H	H	NH
1.10	ch₃	ch₃	ch₃	H	Cl	NH
1.11	ch₃	ch₃	ch₃	F	H	NH
1.12	ch₂oh	ch₃	ch₃	H	ch₃	NH
1.13	ch₂oh	ch₃	ch₃	F	ch₃	NH
1.14	ch₃	ch₃	ch₃	F	ch₃	NH
1.15	ch₃	ch₃	ch₃	Cl	Η	NH
1.16	ch₂oh	ch₃	ch₂ch₃	H	ch₃	NH

-28CZ 291681 B6

Tabulka 1 - pokračování

Příklad	R¹	R²	R³	R⁴	R⁵	X
1.17	CH₂OH	ch₂ch₃	ch₂ch₃	H	ch₃	NH
1.18	ch₃	ch₂ch₃	ch₂ch₃	H	ch₃	NH
1.19	ch₃	ch₃	ch₂ch₃	H	ch₃	NH
1.20	ch₂oh	ch₃	ch₃	F	H	O
1.21	ch₂oh	ch₃	ch₃	F	Br	NH
1.22	ch₂oh	ch₃	ch₃	H	ch₃	O
1.23	ch₂oh	ch₃	ch₃	F	H	NH
1.24	ch₂oh	ch₃	ch₂ch₃	F	ch₃	NH
1.25	ch₃	ch₃	ch₂ch₃	F	ch₃	NH
1.26	ch₃	ch₃	ch₃	F	H	O
1.27	ch₃	ch₃	ch₂ch₃	H	H	O
1.28	ch₂oh	ch₃	ch₂ch₃	H	H	O

Příprava meziproduktů

Příklad 2.1

Příprava 2,6-dimethyl-4-fluorbenzylbromidu

Směs 3,5-dimethyl-fluorbenzenu (5 g, 0,04 mol), paraformaldehydu (15 g), kyseliny bromovodíkové (70 ml) (30% roztok v kyselině octové) a kyseliny octové (25 ml) se míchá při teplotě okolí po dobu 4,5 h. Ke směsi se přidá voda a petrolether a organická vrstva se oddělí, vysuší bezvodým síranem sodným a opatrně odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se vyčistí sloupcovou chromatografíí na silikagelu petroletherem s obdržením žádaného produktu (3,7 g, 43 %).

'H-NMR (300 MHz, CDCI₃): δ 2,5 (s, 6H), 4,55 (s, 2H), 6,75 (d, 2H).

Příklad 2.2

Příprava 2-ethyl-6-methylbenzylchlorid

2-Ethyl-6-methylbenzylalkohol (1,0 g, 6,67 mmol) se rozpustí v 10 ml methylenchloridu. Přidá se thionylchlorid (1,0 g, 8,5 mmol). Směs se míchá přes noc při teplotě okolí. Reakční směs se odpaří. Zbytek se rozpustí v methylenchloridu a filtruje se 5 g silikagelu. Filtrát se odpaří a obdrží se 1,0 g sloučeniny podle nadpisu ve formě olejovité kapaliny (89 %).

‘H-NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 1,29 (t, 3H), 2,46 (s, 3H), 2,76 (q, 2H), 4,71 (s, 2H), 7,0-7,2 (m, 3H).

Příklad 2.3

Příprava 8-amino-2,3,6-trimethylimidazo[l ,2-a]pyridinu

K roztoku 2,3-diamino-5-methylpyridinu (2,0 g, 16 mmol) v ethanolu (100 ml) se přidá

3-brom-2-butanon (2,4 g, 16 mmol). Reakční směs se vaří pod zpětným chladičem po dobu 16 h. Přidá se další 3-brom-2-butanon (1,0 g, 6,7 mmol) a triethylamin (1,0 g, 9,9 mmol) a směs se vaří pod zpětným chladičem po dobu 2 h. Ethanol se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se zpracuje methylenchloridem a roztokem hydrogenuhličitanu. Organická vrstva se oddělí, vysuší

-29CZ 291681 B6 síranem sodným a odpaří za sníženého tlaku. Olejovitý zbytek se vyčistí chromatografií na sloupci silikagelu směsí methanokmethylenchlorid (1:20) s obdržením žádaného produktu (1,05 g, 37%).

'H-NMR (300 MHz, DMSO-d₆): δ 2,15 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,3 (s, 3H), 5,45 (široký s, 2H), 6,05 (s, lH),7,20(s, 1H).

Příklad 2.4

Příprava 2-amino-5-fluor-3-nitropyridinu

K roztoku 2-amino-5-fluorpyridinu (8,6 g, 77 mmol) v koncentrované kyselině sírové (40 ml) se po kapkách přidává dýmavá kyselina dusičná (3,25 ml, 77 mmol) po dobu 30 min při teplotě +3 °C. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 1 h a při teplotě +55 °C po dobu 1 h. Směs se vylije na led a neutralizuje 10 M roztokem hydroxidu sodného a extrahuje methylenchloridem. Organická vrstva se oddělí, vysuší síranem sodným a odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se vyčistí dvakrát chromatografií na sloupci silikagelu, směsí (i) methanol:methylenchlorid (1:20) a (ii) diethylether:petrolether (1:1) s obdržením sloučeniny podle nadpisu (0,44 g, 3,6 %).

'H-NMR (300 MHz, CDClj): δ 6,65 (široký s, 2H), 8,20 (dd, 1H), 8,35 (d, 1H).

Příklad 2.5

Příprava 2,3-diamino-5-fluorpyridinu

Ke směsi 2-amino-5-fluor-3-nitropyridinu (0,42 g, 2,3 mmol) a práškového železa (1,6 g, 28 mmol) v ethanolu (10 ml) se přidá voda (0,5 ml, 28 mmol) a kyselina chlorovodíková (27 μΐ, 0,32 mmol). Směs se vaří pod zpětným chladičem po dobu 1 h. Přidá se další práškové železo (0,2 g, 3,6 mmol) a směs se vaří pod zpětným chladičem po dobu 30 min. Reakční směs se zfiltruje celitem a odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku poskytne 0,3 g (100 %) požadovaného produktu.

'H-NMR (300 MHz, CDClj): δ 3,55 (široký s, 2H), 4,1 (široký s, 2H), 6,7 (dd, 1H), 7,5 (d, 1H).

Příklad 2.6

Příprava 8-amino-2,3-dimethyl-6-fluorimidazo[l,2-a]pyridinu

Směs 2,3-diamino-5-fluorpyridinu (0,3 g, 2,4 mmol) a 3-brom-2-butanonu (0,36 g, 2,4 mmol) v ethanolu (20 ml) se vaří pod zpětným chladičem po dobu 10 h. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí v methylenchloridu a zpracuje roztokem hydrogenuhličitanu. Organická vrstva se oddělí, vysuší síranem sodným a odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se vyčistí chromatografií na sloupci silikagelu směsí methanokmethylenchlorid (1:20) s obdržením 0,16 g (37 %) sloučeniny podle nadpisu.

'H-NMR (300 MHz, CDC1₃):6 2,3 (s, 3H), 2,4 (s, 3H), 4,6 (široký s, 2H), 6,2 (dd, 1H), 7,2 (dd, 1H).

-30CZ 291681 B6

Příklad 2.7

Příprava 8-amino-6-brom-2,3-dimethylimidazo[ 1,2-a]pyridinu

Roztok 2,3-diamino-5-brompyridinu (4,0 g, 21,29 mmol) a 3-brom-2-butanonu (3,7 g, 24,48 mmol) v ethanolu (40 ml) se vaří pod zpětným chladičem přes noc. Po ochlazení na teplotu místnosti se krystalický produkt zfiltruje a promyje ethanolem a etherem. Krystaly se rozpustí v methylenchloridu a neutralizují vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva se oddělí, vysuší síranem sodným a odpaří ve vakuu. Výtěžek je 2,3 g.

’Η-NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,39 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,36 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 4,5 (široký s, 2H), 2,35 (s, 3H), 2,3 (s, 3H).

Příklad 2.8

Příprava 3-karboethoxy-8-(dimethylbenzylamino)-2-methylimidazo[ 1,2-a]pyridinu

Směs 8-amino-3-karboethoxy-2-methylimidazo[l,2-a]pyridinu (6,08 g, 27,74 mmol), 2,6-dimethylbenzylchloridu (4,5 g, 29,13 mmol), uhličitanu sodného (4,32 g, 43,7 mmol), jodidu sodného (0,7 g) a acetonu (120 ml) se míchá po dobu 30 h a krystalický produkt se odfiltruje. Získaná látka se rozpustí v dichlormethanu, zfiltruje a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku s obdržením produktu podle nadpisu (7,0 g).

'H-NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 8,66 (d, J = 11 Hz, 1H), 7,16 - 7,1 (m, 1H), 7,05 (d, J = 11 Hz, 2H), 6,87 (t, J = 11 Hz, 1H), 6,45 (d, J = 11 Hz, 1H), 4,86 („t“, 1H), 4,4 (q, J = 7 Hz, 2H), 4,35 (d, J = 3,6 Hz, 2H), 2,65 (s, 3H), 2,35 (s, 6H), 1,4 (t, J = 7 Hz, 3H).

Příklad 2.9

Příprava 8-amino-6-chlor-2,3-dimethylimidazo[ 1,2-a]pyridinu

Směs 2,3-diamino-5-chlorpyridinu (5,26 g, 36,64 mmol) a 3-brom-2-butanonu (6,2 g, 41,06 mmol) v ethanolu (60 ml) se vaří pod zpětným chladičem přes noc. Po ochlazení na teplotu místnosti se krystalický produkt zfiltruje, promyje ethanolem a etherem. Krystaly se rozpustí v methylenchloridu a neutralizují vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva se oddělí, vysuší síranem sodným a odpaří ve vakuu. Výtěžek je 3,0 g.

'H-NMR (300 MHz, CDC1₃):8 7,29 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 6,26 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 4,55 (široký s, 2H), 2,4 (s, 3H), 2,3 (s, 3H).

Příklad 2.10

Příprava 8-amino-3-karboethoxy-2,6-dimethylimidazo[ 1,2-a]pyridinu

Míchaná směs 2,3-diamino-5-methyl-pyridinu (4,0 g, 32,5 mmol) a (5,9 g, 36,0 mmol) ethyl-chloracetoacetátu v 75 ml absolutního ethanolu se vaří pod zpětným chladičem přes noc. Ethanol se odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí ve 2M roztoku kyseliny chlorovodíkové a promyje třikrát diethyletherem, pH se upraví na 9 a směs se extrahuje třikrát dichlormethanem. Organická vrstva se vysuší bezvodým síranem sodným a odpaří. Zbytek se vyčistí sloupcovou

-31 CZ 291681 B6 chromatografií na silikagelu směsí dichlormethanimethanol 95:5 s obdržením sloučeniny 2,0 g produktu podle nadpisu (28 %).

'H-NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 1,42 (t, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,65 (s, 3H), 4,40 (q, 2H), 4,47 (s, 2H), 6,40 (s, 1H), 8,55 (s, 1H).

Příklad 2.11

Příprava 3-karboethoxy-2,6-dimethyl-8-(2,6-dimethylbenzylamino)imidazo[ 1,2-a]pyridinu

Míchaná směs 8-amino-2,6-dimethylimidazo[l,2-a]pyridinu (1,2 g, 5,1 mmol), chloridu zinečnatého (0,84 g, 6,2 mmol) a 2,6-dimethylbenzylaldehydu (0,84 g, 6,2 mmol) v 50 ml methanolu se zpracuje natrium-kyanoborohydridem (0,39 g, 6,2 mmol) a vaří se pod zpětným chladičem po dobu 5 h. Methanol se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se rozpustí v dichlormethanu a v 40 ml 2M roztoku hydroxidu sodného. Organická vrstva se oddělí, vysuší síranem sodným a odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se vyčistí chromatografií na sloupci silikagelu směsí petrolether (40-60): izopropylether 8:2 s obdržením sloučeniny podle nadpisu s výtěžkem 0,8 g (44 %).

‘H-NMR (300 MHz, CDC1₃):6 1,44 (t, 3H), 2,35 (d, 9H), 2,60 (s, 3H), 4,33 (d, 2H), 4,40 (q, 2H), 4,6 (s, 1H), 6,60 (s, 1H), 7,10 (d, 2H), 7,25 (m, 1H), 8,50 (s, 1H).

Příklad 2.12

Míchaná směs 8-amino-2,6-dimethylimídazo[l,2-a]pyridinu (1,2 g, 5,1 mmol), chloridu zinečnatého (0,84 g 6,2 mmol) a 2,6-dimethylbenzaldehydu (0,84 g, 6,2 mmol) v 50 ml methanolu se zpracuje natrium-kyanoborohydridem (0,39 g, 6,2 mmol) a vaří se pod zpětným chladičem po dobu 5 h. Methanol se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se rozpustí v dichlormethanu a 40 ml 2M roztoku hydroxidu sodného. Organická vrstva se oddělí, vysuší síranem sodným a odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se vyčistí chromatografií na sloupci silikagelu směsí petrolether (40-60):izopropylether 8:2 s obdržením sloučeniny podle nadpisu s výtěžkem 0,8 g (44 %).

'H-NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 1,44 (t, 3H), 2,35 (d, 9H), 2,60 (s, 3H), 4,33 (d, 2H), 4,40 (q, 2H), 4,6 (s, 1H), 6,60 (s, 1H), 7,10 (d, 2H), 7,25 (m, 1H), 8,50 (s, 1H).

Příklad 2.13

Příprava 3-karboethoxy-2,6-dimethyl-8-(2,6-dimethyl-4-fluorbenzylamino)imidazo[l,2-a]pyridinu

Míchaná směs 1,1 g (4,7 mmol) 8-amino-3-karboethoxy-2,6-dimethylimidazo[l,2-a]pyridinu,

1,2 g, (5,7 mmol) 2,6-dimethyl-4-fluorbenzylbromidu, 1,0 g, (7,5 mmol) uhličitanu draselného a (0,1 g) jodidu sodného v 15 ml acetonitrilu se vaří pod zpětným chladičem přes noc. Po odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku se zbytek rozpustí v dichlormethanu a promyje vodou, organická vrstva se oddělí, vysuší síranem sodným a odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se vyčistí chromatografií na sloupci silikagelu, směsí petrolether (40-60):izopropylether 7:3 s obdržením 0,8 g sloučeniny podle nadpisu (47 %).

-32CZ 291681 B6 ’Η-NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 1,42 (t, 3H), 2,36 (s, 9H). 2,62 (2,3H), 4,45 (d, 2H), 4,48 (q, 2H), 4,54 (s, 1H), 6,30 (s, 1H), 6,75 (d, 2H), 8,55 (s, 1H).

Příklad 2.14

Příprava 4-chlor-2,6-dimethylbenzylbromidu

4-Chlor-3,5-dimethylbenzen (1,42 g, 0,01 mol) a paraformaldehyd (0,31 g, 0,01 mol) se přidá ke 2 ml bromovodíku (33%) v kyselině octové. Směs se míchá přes noc při teplotě +70 °C. Reakční směs se vylije do 25 ml vody a produkt se extrahuje diethyletherem. Organická vrstva se promyje vodou. Dále se organická vrstva vysuší síranem sodným a odpaří s obdržením 1,1 g olejovitého produktu. Spektrum ’Η-NMR ukazuje, že tato látka je směsí sloučeniny podle nadpisu a 2-chlor-4,6-dimethylbenzylbromidu. Tento produkt se používá jako takový bez dalšího čištění v dalším syntetickém kroku (Příklad 1.15).

‘H-NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 2,28 (s, 6H), 4,51 (s, 2H), 7,04 (s, 2H).

Příklad 2.15

Příprava 3-karboethoxy-2,6-dimethyl-8-(2-ethyl-6-methylbenzylamino)-imidazo[ 1,2-a]pyridinu

Směs 8-amino-3-karboethoxy-2,6-dimethylimidazo[l,2-a]pyridinu (1,4 g, 6 mmol), 2-ethyl-6-methylbenzaldehydu (0,9 g, 6,5 mmol), chloridu zinečnatého (1,0 g, 7,4 mmol), natrium-kyanoborohydridu (0,41 g, 6,5 mmol) a methanolu (30 ml) se vaří pod zpětným chladičem po dobu 5 h. Přidá se další chlorid zinečnatý (0,2 g) a natrium-kyanoborohydrid (0,1 g). Reakční směs se vaří pod zpětným chladičem po dobu dalších 2 h. Přidá se triethylamin (2 ml) a směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 10 min. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se vyčistí chromatografii na sloupci silikagelu s methylenchloridem jako elučním prostředkem a obdrží se 1,1 g sloučeniny podle nadpisu (50 %).

‘H-NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 1,25 (t, 3H), 1,45 (t, 3H), 2,30 (s, 6H), 2,6 (s, 3H), 2,75 (q, 2H), 4,35 (d, 2H), 4,45 (q, 2H), 4,85 (široký s, 1H), 6,35 (s, 1H), 7,0 - 7,25 (m, 3H), 8,5 (s, 1H).

Příklad 2.16

Příprava 3-karboethoxy-2,6-dimethyl-8-(2,6-diethylbenzylamino)imidazo[ 1,2-a]pyridinu

Míchaná směs 8-amino-3-karboethoxy-2,6-dimethylimidazo[l,2-a]pyridinu (2,02 g, 8,6 mmol), chloridu zinečnatého (1,48 g, 10,8 mmol) a 2,6-diethylbenzaldehydu (2,17 g, 13,4 mmol) v 50 ml methanolu se zpracuje natrium-kyanoborohydridem (0,65 g, 10,3 mmol) a vaří se pod zpětným chladičem přes noc. Tato směs se ponechá ochladit a poté se vylije do 80 ml 1M roztoku hydroxidu sodného. Vytvořená sraženina se odfiltruje a promyje vodou a poté se vyčistí chromatografii na sloupci silikagelu směsí dichlormethan:methanol (95:5). Výtěžek je 2,1 g (64 %) sloučeniny podle nadpisu.

‘H-NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 1,23 (t, 6H), 1,42 (t, 3H), 2,38 (s, 3H), 2,61 (s, 3H), 2,72 (q, 4H), 4,34 (d, 2H), 4,40 (q, 2H), 4,83 (t, 1H), 6,32 (s, 1H), 7,11 (d, 2H), 7,24 (t, 1H), 8,51 (s, 1H).

-33CZ 291681 B6

Příklad 2.17

Příprava 3-karboethoxy-8-(2,6-dimethyl-4-fluorbenzyloxy)-2-methylimidazo[l,2-a]pyridinu

Směs 3-karboethoxy-8-hydroxy-2-methylimidazo[l,2-a]pyridinu (1,5 g, 6,8 mmol), 2,6—dimethyl-4-fluorbenzylbromidu (1,6 g, 7,5 mmol), jodidu sodného (0,1 g), uhličitanu draselného (1,9 g, 13,6 mmol) a acetonitrilu (50 ml) se vaří pod zpětným chladičem přes noc. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu. Zbytek se rozpustí v dichlormethanu, promyje vodou, vysuší síranem sodným a odpaří. Zbytek se vyčistí chromatografií na sloupci silikagelu, elucí směsí heptan:izopropylether (1:2) s obdržením 2,0 g žádaného produktu (83 %).

‘H-NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 1,45 (t, 3H), 2,4 (s, 6H), 2,7 (s, 3H), 4,45 (q, 2H), 5,2 (s, 2H), 6,7-6,9 (m, 4H), 9,0 (d, 2H).

Příklad 2.18

Příprava 8-amino-6-brom-3-karboethoxy-2-methylimidazo[ 1,2-a]pyridinu

Směs 2,3-diamino-5-brompyridinu (2,5 g, 13,31 mmol) a ethyl-2-chloracetoacetátu (2,41 g, 14,64 mmol) ve 35 ml absolutního ethanolu se vaří pod zpětným chladičem po dobu 14 h. Ethanol se odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí v methylenchloridu a neutralizuje se vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva se oddělí, vysuší a odpaří ve vakuu. Zbytek se vyčistí sloupcovou chromatografií na silikagelu směsí methylenchlorid.methanol (100:3,5) s obdržením 1,55 g sloučeniny podle nadpisu (39 %).

‘H-NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 8,9 (s, 1H), 6,65 (s, 1H), 4,6 (široký s, 2H), 4,4 (q, 2H), 2,65 (s,3H), 1,4 (t, 3H).

Příklad 2.19

Příprava 6-brom-3-karboethoxy-8-(2,6-dimethyl-4-fluorbenzylamino)-2-methylimidazo[ 1,2ajpyridinu

Směs 8-amino-6-brom-3-karboethoxy-2-methylimidazo[l,2-a]pyridinu (2,06 g, 6,91 mmol), 2,6-dimethyl-4-fluorbenzylbromidu (1,05 g, 4,48 mmol), jodidu sodného (0,45 g), uhličitanu sodného (2,2 g) a acetonu (40 ml) se vaří pod zpětným chladičem po dobu 22 h. Reakční směs se zfiltruje. Filtrovaný materiál se promyje dichlormethanem. Dichlormethanový roztok se promyje vodou, vysuší a odpaří ve vakuu. Zbytek se suspenduje ve směsi ethanol/ether a zfiltruje s obdržením 1,15 g sloučeniny podle nadpisu (56 %).

'H-NMR (300 MHz, CDCh): δ 8,85 (s, 1H), 6,8 (d, 2H), 6,55 (s, 1H), 4,9 (t, 1H), 4,4 (q, 2H),

4,3 (d, 2H), 2,6 (s, 3H), 2,4 (s, 6H), 1,45 (t, 3H).

Příklad 2.20

Příprava 3-(2,6-dimethylbenzyloxy)-5-methyl-2-nitropyridinu

K 0,52 g (8,02 mmol) 87% roztoku hydroxidu draselného a 0,15 g q-jodidu v 6 ml 95% ethanolu se přidá roztok 3-hydroxy-5-methyl-2-nitropyridinu (1,2 g, 7,79 mmol) ve 25 ml ethanolu. K výsledné suspenzi draselné soli se po kapkách přidává roztok 2,6-dimethylbenzylchloridu (1,24 g, 8,02 mmol) ve 13 ml ethanolu. Reakční směs se vaří pod zpětným chladičem po dobu

-34CZ 291681 B6

h. Přidá se další 87% roztok hydroxidu draselného (0,16 g) a 2,6-dimethylbenzylchlorid (0,38 g). Reakční směs se vaří pod zpětným chladičem po dobu dalších 70 min. Směs se zfiltruje a anorganické soli se promyjí ethanolem a methylenchloridem. Organická vrstva se odpaří ve vakuu. Zbytek se rozpustí v methylenchloridu, promyje vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší a odpaří ve vakuu. Zbytek se suspenduje ve směsi ether/izopropanol a zfiltruje s obdržením 1,72 g (81 %) sloučeniny podle nadpisu.

*H-NMR (500 MHz, CDC1₃): δ 7,94 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,19 (t, 1H), 7,08 (d, 2H), 5,18 (s, 2H), 2,47 (s, 3H), 2,4 (s, 6H).

Příklad 2.21

Příprava 2-amino-3-(2,6-dimethylbenzyloxy)-5-methylpyridinu

Směs 3-(2,6-dimethylbenzyloxy)-5-methyl-2-nitropyridinu (1,9 g, 6,99 mmol), práškového železa (6,4 g), koncentrované kyseliny chlorovodíkové (0,15 ml), vody (1,5 ml) a 95% ethanolu (35 ml) se vaří pod zpětným chladičem po dobu 1,0 h. Reakční směs se zfiltruje celitem a rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku. Zbytek se vyčistí chromatografii na sloupci silikagelu směsí methylenchlorid:methanol (100:4) s obdržením 1,56 g sloučeniny podle nadpisu (92 %).

’H-NMR (300 MHz, CDClj): δ 7,57 (s, 1H), 7,2 (t, 1H), 7,09 (d, 2H), 6,95 (s, 1H), 5,02 (s, 2H), 4,45 (široký s, 2H), 2,4 (s, 6H), 2,25 (s, 3H).

Příklad 2.22

Příprava 3-karboethoxy-2,6-dimethyl-8-(2,6-dimethylbenzyloxy)imidazo[ 1,2-a]pyridinu

Směs 2-amino-3-(2,6-dimethylbenzyloxy)-5-methylpyridinu (1,0 g, 4,13 mmol) a ethyl-2-chloracetoacetátu (0,79 g, 4,55 mmol) ve 20 ml absolutního ethanolu se vaří pod zpětným chladičem po dobu 19 h. Přidá se další ethyl-2-chloracetoacetát (0,25 g). Reakční směs se vaří pod zpětným chladičem po dobu dalších 23 h. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a zbytek se rozpustí v methylenchloridu a promyje vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva se vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Surový produkt se vyčistí sloupcovou chromatografii na silikagelu, směsí methylenchlorid:ethylacetát (100:10) s obdržením 0,68 g sloučeniny podle nadpisu (47 %).

’Η-NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 8,8 (s, 1H), 7,15 (t, 1H), 7,04 (d, 2H), 6,71 (s, 1H), 5,22 (s, 2H), 4,41 (q, 2H), 2,67 (s, 3H), 2,41 (s, 6H), 2,39 (s, 3H), 1,42 (t, 3H).

Příklad 2.23

Příprava 3-karboethoxy-8-(2,6-dimethyl-4-fluorbenzylamino)-2-methylimidazo[ 1,2-a]pyridinu

Míchaná směs 8-amino-3-karboethoxy-2-methylimidazo[l,2-a]pyridinu (1,0 g, 4,7 mmol), 2,6-dimethyl-4-fluorbenzylbromidu (1,2 g, 5,7 mmol), uhličitanu draselného (1,0 g, 7,5 mmol) ajodidu sodného (0,1 g) v 15 ml acetonitrilu se vaří pod zpětným chladičem přes noc. Po odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku se zbytek rozpustí v dichlormethanu a promyje vodou, organická vrstva se oddělí, vysuší síranem sodným a odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se vyčistí sloupcovou chromatografii na silikagelu, směsí petrolether (40-60):izopropylether 7:3 s obdržením 1,2 g sloučeniny podle nadpisu (75 %).

-35CZ 291681 B6 ‘H-NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 1,45 (t, 3H), 2,35 (s, 6H), 2,65 (s, 3H), 4,40 (d, 2H), 4,40 (q, 2H), 4,85 (t, 1H), 6,40 (d, 1H), 6,75 (d, 2H), 6,85 (t, 1H), 8,70 (d, 1H).

Příklad 2.24

Příprava 2-ethyl—4-fluor-6-methylbenzylbromidu

Směs 3-ethyl-l-fluor-5-methylbenzenu (1,1 g, 0,008 mol) paraformaldehydu (1,5 g, 0,05 mol), kyseliny bromovodíkové (4,1 ml, 0,017 mol) (4,1 M roztok v kyselině octové) a kyseliny octové (2,5 ml) se míchá při teplotě okolí po dobu 40 h. Ke směsi se přidá voda a petrolether (40-60) a organická vrstva se oddělí, promyje vodou, vysuší bezvodým síranem sodným a opatrně odpaří za sníženého tlaku. Požadovaný produkt se obdrží jako žlutá olejovitá kapalina (1,3 g, 72 %).

‘H-NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 1,2 (t, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,7 (q, 2H), 4,50 (s, 2H), 6,7-6,85 (m, 2H).

Příklad 2.25

Příprava 3-karboethoxy-2,6-dimethyl-8-(2-ethyl-4-fluor-6-methylbenzylamino)imidazo[ 1,2ajpyridinu.

Míchaná směs 8-amino-3-karboethoxy-2,6-dimethylimidazo[l,2-a]pyridinu (0,7 g, 3,0 mmol), 2-ethyl-4-fluor-6-methylbenzylbromidu (0,8 g, 3,5 mmol), uhličitanu draselného (0,7 g, 4,8 mmol) a jodidu sodného (0,1 g) v 15 ml acetonitrilu se vaří pod zpětným chladičem přes noc. Po odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku se zbytek rozpustí v dichlormethanu a promyje vodou, organická vrstva se oddělí, vysuší síranem sodným a odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se vyčistí chromatografií na sloupci silikagelu směsí petrolether(40-60):izopropylether 7:3 s obdržením 0,4 g sloučeniny podle nadpisu (35 %).

'H-NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 1,25 (t, 3H), 1,45 (t, 3H), 2,4 (s, 6H), 2,65 (s, 3H), 2,75 (q, 2H),

4,3 (d, 2H), 4,4 (q, 2H), 4,75 (široký s, 1H), 6,3 (s, 1H), 6,75 - 6,85 (m, 2H), 8,5 (s, 1H).

Příklad 2.26

Příprava 3-karboethoxy-8-(2-ethyl-6-methylbenzyloxy)-2-methylimidazo[ 1,2-a]pyridinu

Míchaná směs 3-karboethoxy-8-hydroxy-2-methylimidazo[l,2-a]pyridinu (0,92 g, 4,2 mmol), 2-ethyl-6-methylbenzylchloridu (0,7 g, 4,2 mmol), uhličitanu sodného (1,0 g, 9,4 mmol) a katalytického množství jodidu draselného v acetonitrilu (40 ml) se vaří pod zpětným chladičem po dobu 4 h. Po filtraci a odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku se zbytek vyčistí sloupcovou chromatografií na silikagelu směsí methylenchlorid:ethylacetát s obdržením 1,0 g sloučeniny podle nadpisu (68 %).

‘H-NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 1,2 (t, 3H), 1,4 (t, 3H), 2,4 (s, 3H), 2,65 (s, 3H), 2,75 (q, 2H), 4,4 (q, 2H), 5,25 (s, 2H), 6,85 - 6,9 (m, 2H), 7,05 - 7,25 (m, 3H), 8,95 (dd, 1H).

Příklad 2.27

Příprava 3-ethyl-l-fluor-5-methylbenzenu

-36CZ 291681 B6

Methyllithium (40 ml, 64 mmol) se přidává po kapkách při teplotě 0 °C do suspenze jodidu měďného (6,42 g, 33,6 mmol) v diethyletheru (20 ml). Po míchání po dobu 30 min při teplotě 0 °c se čirý bezbarvý homogenní roztok ochladí na teplotu -78 °C a přidá se 3-brommethyl-lfluor-5-methylbenzen 5,15 g, 25,4 mmol) v 10 ml diethyletheru. Teplota se ponechá pomalu vstoupat. Reakce se ukončí při teplotě -50 °C přídavkem pufru, chlorid amonný/hydroxid amonný (50 ml). Provede se extrakce diethyletherem (3 x 50 ml) a roztokem chloridu sodného (1 x 100 ml). Organická vrstva se vysuší síranem hořečnatým, zfiltruje a rozpouštědlo se odpaří s obdržením 3,3 g sloučeniny podle nadpisu (94 %).

’Η-NMR (500 MHz, CDC1₃):51,22 (t,3H), 2,32 (s, 3H), 2,60 (q, 2H), 6,69 (d, 2H), 6,78 (s, 1H).

Biologické zkoušky

1. Pokusy in vitro

Inhibice sekrece kyseliny na izolovaných králičích žaludečních žlázách

Inhibiční účinek na sekreci kyseliny in vitro na izolovaných králičích žaludečních žlázách se měří podle popisu Berglindha a kol. Acta Physiol. Scand. 97, 401-414 (1970).

Stanovení aktivity ΡΓ, K’-ATPasy

Příprava měchýřků žaludeční sliznice. Měchýřky žaludeční sliznice obsahující ΡΓ, K⁺-ATPasu se připraví z vepřových žaludků, jak popisuje Saccomani a kol. Biochim. Biophys. Acta 465, 311-330(1977).

Permeabilní měchýřky. Membránová frakce se zředí 1 mM roztokem PIPES/Tris, pH 7,4 pro obdržení koncentrace sacharosy 1 %, zhomogenizuje a centrifuguje při 100 000 g po dobu 2 h. Výsledná peleta se suspenduje ve vodě a dvakrát se lyofilizuje.

Stanovení aktivity ΡΓ, K*-ATPasy. Permeabilní membránové měchýřky (2,5-5 pg) se inkubují po dobu 15 min při 37 °C v 18 mM pufru PIPES/Tris, pH 7,4, který obsahuje chlorid hořečnatý 2 mM, chlorid draselný 10 mM a adenosintrifosfát 2 mM. Aktivita ATPasy se určí jako uvolňování anorganického fosfátu z adenosintrifosfátu, jak popisuje LeBel a kol. Anal. Biochem. 85, 86-89 (1978).

2. Pokusy in vivo

Inhibiční účinek na sekreci kyseliny u krysích samic

Použijí se krysí samice kmene Sprague-Dawley. Jsou vybaveny kanylovanou pištěli v žaludku (průchodem) a v horní části dvanáctemíku pro odběr žaludečních sekrecí, respektive podávání testovaných látek. Před zahájením zkoušky se ponechává období 14 dní na zotavení po chirurgickém zákroku.

Před sekrečními zkouškami je zvířatům odebrána potrava, avšak nikoliv voda, na dobu 20 h. Žaludek se opakovaně promývá žaludeční kanylou vodou (+37 °C) a podává se podkožně 6 ml Ringerova glukosového roztoku. Sekrece kyseliny se stimuluje infuzí pentagastrinu a karbacholu v průběhu 2,5 až 4 h (podkožně 1,2 ml/h, 20 a 110 nmol/kg.h). V průběhu této doby se vzorky sbírají ve 30-min frakcích. Testované roztoky nebo vehikulum se podávají buď 60 min po zahájení stimulace (intravenózní a intraduodenální podávání, 1 ml/kg), nebo 2 h před zahájením stimulace (perorální dávkování, 5 ml/kg, žaludeční kanyla uzavřena). Časový interval mezi podáváním a stimulací se může prodloužit pro studium trvání působení. Vzorky žaludeční šťávy

-37CZ 291681 B6 se titrují na pH 7,0 0,1 M roztokem hydroxidu sodného a výstup kyseliny se počítá jako součet objemu titračního činidla a koncentrace.

Další výpočty vycházejí z průměrných odpovědí u skupiny 4-6 krys. V případě podávání během stimulace se výstup kyseliny během období po podání zkoušené látky nebo vehikula vyjadřuje jako frakční odpověď, takže se výstup kyseliny v době 30-min před podáním považuje za 1,0. Procentická inhibice se vypočítá z frakčních odpovědí na testovanou látku a vehikulum. V případě podávání před stimulací se procentická inhibice vypočítá přímo z výstupu kyseliny zaznamenaného po podání zkoušené látky a vehikula.

Biologická dostupnost u krys

Používají se dospělé krysy kmene Sprague-Dawley. Jeden až tři dny před pokusy se všechny krysy připraví zavedením kanyly do levé karotidy pod narkózou. Krysy pro intravenózní pokusy se opatří kanylou vjugulámí véně [Popovic J. Appl. Physiol. 15, 727-728, (1960)]. Kanyly se vyvedou na zadní straně krku.

Vzorky krve (0,1-0,4 g) se odebírají opakovaně z karotidy v intervalech do 5,5 h po podání. Vzorky se zamrazí do provedení rozboru zkoušené látky.

Biologická dostupnost se určí výpočtem podílu mezi plochou pod křivkou koncentrace v krvi/krevní plazmě (AUP) po (i) intraduodenálním (i.d.) nebo perorálním (p.o.) podání a (ii) intravenózním (i.v.) podání u krysy respektive psa.

Plocha pod křivkou koncentrace v krvi vynesené proti času, se určí logaritmicko-lineámím lichoběžníkovým’pravidlem a extrapoluje k nekonečnu dělením poslední určené koncentrace v krvi konstantou rychlosti eliminace v terminální fázi. Systémová biologická dostupnost (F %) po intraduodenálním či perorálním podání se vypočítá jako F (%) = [AUC (p.o. nebo i.d.) /AUC (i.v.)] x 100.

Inhibice sekrece žaludeční kyseliny a biologické dostupnosti u psů při vědomí.

Použijí se psi Labrador retriever nebo Harrier obojího pohlaví. Vybaví se duodenální pištěli pro podání zkoušených látek nebo vehikula a zavede se kanyla do žaludeční píštěle nebo Heidenhaimova prostoru pro odběr žaludeční sekrece.

Před sekrečními zkouškami se zvířata ponechají hladovět po dobu zhruba 18 h svolným přísunem vody. Sekrece žaludeční kyseliny se stimuluje po dobu až 6,5 h infuze histamindihydrochloridu (12 ml/h) při dávce poskytující okolo 80 % individuální maximální sekreční odpovědi a žaludeční šťáva se odebírá v po sobě následujících 30-min frakcích. Látka nebo vehikulum se podává perorálně, intraduodenálně 1 nebo 1,5 h po zahájení infuze histaminu v objemu 0,5 ml/kg tělesné hmotnosti. V případě perorálního podávání je třeba poznamenat, že se zkoušená látka podává do hlavní části Heidenhaimova prostoru psa vylučující kyselinu.

Kyselost vzorků žaludeční šťávy se určí titrací na pH 7,0 a vypočítá se výstup kyseliny. Výstup kyseliny v obdobích odběru po podání zkoušené látky či vehikula se vyjádří jako frakční odpověď s položením výstupu kyseliny frakce před podání rovným 1,0. Procentická inhibice se vypočítá z frakčních odpovědí vyvolaných zkoušenou látkou a vehikulem.

Vzorky krve pro analýzu koncentrace zkoušené látky v krevní plazmě se odebírají v intervalech do 4 h po podání. Krevní plazma se oddělí a zmrazí během 30 min po podání a analyzuje se později. Systémová biologická dostupnost (F %) po perorálním nebo intraduodenálním podávání se vypočítá podle popisu výše u krysího modelu.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Imidazopyridinový derivát obecného vzorce I

R¹ (I), nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl, ve kterém

R¹ je methylová skupina nebo skupina CH₂OH,

R² je alkylová skupina mající od 1 do 6 atomů uhlíku,

R³ je alkylová skupina mající od 1 do 6 atomů uhlíku,

R⁴ je atom vodíku nebo atom halogenu,

R⁵ je atom vodíku, atom halogenu nebo alkylová skupina mající od 1 do 6 atomů uhlíku, a

X je skupina NH nebo atom kyslíku.
2. Imidazopyridinový derivát podle nároku 1, obecného vzorce I, ve kterém

R² je alkylová skupina mající od 1 do 4 atomů uhlíku,

R³ je alkylová skupina mající od 1 do 4 atomů uhlíku,

R⁵ je atom vodíku, atom halogenu, nebo alkylová skupina mající od 1 do 4 atomů uhlíku, a

R¹, R⁴ a X jsou uvedeny v nároku 1.
3. Imidazopyridinový derivát podle nároku 1 nebo 2, obecného vzorce I, ve kterém

R² je methylová skupina nebo ethylová skupina,

R³ je methylová skupina nebo ethylová skupina,

R⁴ je atom vodíku, atom bromu, atom chloru nebo atom fluoru,

-39CZ 291681 B6

R' je atom vodíku, methylová skupina, atom bromu, atom chloru nebo atom fluoru, a

R¹ a X jsou uvedeny v nároku 1.
4. Imidazopyridinový derivát podle nároku 3, obecného vzorce I, ve kterém

R' je atom vodíku, methylová skupina nebo atom fluoru, a

R¹, R², R³, R⁴ a X jsou uvedeny v nároku 3.
5. Imidazopyridinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, kterým je 8-(2,6-dimethylbenzylamino)-2,3,6-trimethylimidazo[l,2-a]pyridin nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
6. Imidazopyridinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, kterým je 8-(2,6-dimethylbenzylaminoý-3-hydroxymethyl-2-methylimidazo[l,2-a]pyridin nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
7. Imidazopyridinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, kterým je 2,3-dimethyl-8(2,6-dimethyl-4-fluorbenzylamino)imidazo[l,2-a]pyridin nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
8. Imidazopyridinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, kterým je 2,6-dimethyl-8(2,6-dimethylbenzylamino)-3-hydroxymethylimidazo[l,2-a]pyridin nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
9. Imidazopyridinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, kterým je 2,6-dimethyl-8(2,6-dimethyl-4-fluorbenzylamino)-3-hydroxymethylimidazo[l,2-a]pyridin nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
10. Imidazopyridinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, kterým je 8-(2,6-dimethyl4-fluorbenzylamino)-2,3,6-trimethylimidazo[l,2-a]pyridin nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
11. Imidazopyridinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, kterým je 2,3-dimethyl-8(2,6-dimethyl-4-chlorbenzylaminoimidazo[l,2-a]pyridin nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
12. Imidazopyridinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, kterým je 2,6-dimethyl-8(2-ethyl-6-methylbenzylamino)-3-hydroxymethylimidazo[l,2-a]pyridin nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
13. Imidazopyridinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, kterým je 8-(2,6-diethylbenzylamino)-2,6-dimethyl-3-hydroxymethylimidazo[l,2-a]pyridin nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
14. Imidazopyridinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, kterým je 8-(2-ethyl-6methylbenzylamino)-2,3,6-trimethylimidazo[l,2-a]pyridin nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
15. Imidazopyridinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, kterým je 8-(2,6-dimethyl4-fluorbenzyloxy)-3-hydroxymethyl-2-methylimidazo[l,2-a]pyridin nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
16. Imidazopyridinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, kterým je 2,6-dimethyl-8(2,6-dimethylbenzyloxy)-3-hydroxymethylimidazo[l,2-a]pyridin nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.

-40CZ 291681 B6
17. Imidazopyridinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, kterým je 2.6-dimethyl-8(2-ethyl-4-fluor-6-methylbenzylamino)-3-hydroxymethylimidazo[ 1,2-a]pyridin nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
18. Imidazopyridinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, kterým je 8—(2—ethyl—4— fluor-6-methylbenzylamino)-2,3,6-trimethylimidazo[l,2-a]pyridin nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
19. Hydrochlorid imidazopyridinového derivátu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 18.
20. Imidazopyridinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 18 nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl pro terapii.
21. Způsob přípravy imidazopyridinového derivátu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 18, vyznačující se tím, že zahrnuje reakci sloučeniny obecného vzorce II

R- ve kterém

X¹ je skupina NH₂ nebo hydroxylová skupina a

R¹ a R⁵ jsou uvedeny v nároku 1, se sloučeninou obecného vzorce III

R* (III), ve kterém

R², R³ a R⁴ jsou uvedeny v nároku 1 a

Y je odstupující skupina, v inertním rozpouštědle popřípadě za přítomnosti báze za vzniku imidazopyridinového derivátu podle nároku 1 až 18, obecného vzorce I.

-41 CZ 291681 B6
22. Způsob přípravy imidazopyridinového derivátu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 18, obecného vzorce I, kde X je skupina NH, vyznačující se t í m , že zahrnuje (a) reakci sloučeniny obecného vzorce IV ve kterém

R¹ a R⁵ jsou uvedeny v nároku 1, se sloučeninou obecného vzorce V (IV), (V), ve kterém

R², R³ a R⁴ jsou uvedeny v nároku 1, přednostně za přítomnosti Lewisovy kyseliny v inertním rozpouštědle, za vzniku sloučeniny obecného vzorce VI (VI), ve kterém

-42CZ 291681 B6

R¹, R², R³, R⁴, R⁵ jsou uvedeny v nároku 1, (b) redukci sloučeniny obecného vzorce VI v inertním rozpouštědle za vzniku imidazopyridinového derivátu obecného vzorce I, kde X je skupina NH.
23. Způsob přípravy imidazopyridinového derivátu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 18, obecného vzorce I, ve kterém R^T je skupina CH₂OH, vyznačující se tím, že zahrnuje (a) reakci sloučeniny obecného vzorce VII (VII), ve kterém

X* je skupina NH₂ nebo hydroxylová skupina a

R⁵ je uveden v nároku 1, se sloučeninou obecného vzorce III (III), ve kterém

R², R³ a R⁴ jsou uvedeny v nároku 1 a

Y je odstupující skupina,

-43CZ 291681 B6 v inertním rozpouštědle popřípadě za přítomnosti báze za vzniku sloučeniny obecného vzorce VIII

R* ve kterém

R², R³, R⁴, R⁵ a X jsou uvedeny v nároku 1, (b) redukci sloučeniny obecného vzorce VIII v inertním rozpouštědle za vzniku sloučeniny obecného vzorce 1, ve kterém R¹ je skupina CH₂OH.
24. Způsob přípravy imidazopyridinového derivátu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 18, obecného vzorce I, ve kterém X je skupina NH a R¹ je skupina CH₂OH, vyznačující se t í m , že zahrnuje

NH, (ix), ve kterém

R⁵ je uveden v nároku 1,

-44CZ 291681 B6 se sloučeninou obecného vzorce V (V), ve kterém

5 R², R³ a R⁴ jsou uvedeny v nároku 1, přednostně za přítomnosti Lewisovy kyseliny v inertním rozpouštědle za vzniku sloučeniny obecného vzorce X (X), io ve kterém

R², R³, R⁴ a R⁵ jsou uvedeny v nároku 1,

-45 CZ 291681 B6 (b) redukci sloučeniny obecného vzorce X v inertním rozpouštědle za vzniku sloučeniny obecného vzorce XI (XI) , ve kterém

R², R³, R⁴ a R⁵ jsou uvedeny v nároku 1, (c) redukci sloučeniny obecného vzorce XI v inertním rozpouštědle za vzniku imidazopyridinového derivátu obecného vzorce I, ve kterém X je skupina NH a R¹ je skupina CH₂OH.
25. Způsob přípravy imidazopyridinového derivátu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 18, obecného vzorce I, ve kterém X je atom kyslíku a R¹ je skupina CH₂OH, vyznačující se t í m , že (a) zahrnuje reakci sloučeniny obecného vzorce XII (xii), ve kterém

R², R³, R⁴ a R⁵ jsou uvedeny v nároku 1,

-46CZ 291681 B6 se sloučeninou obecného vzorce

CH₃COCH(Z)COOCH₂CHj, ve kterém

Z je atom bromu nebo atom chloru, v inertním rozpouštědle za vzniku sloučeniny obecného vzorce XIH (XIII), ve kterém

R², R³, R⁴ a R⁵ jsou uvedeny v nároku 1, (b) redukci sloučeniny obecného vzorce XIII v inertním rozpouštědle za vzniku sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R¹ je skupina CH₂OH a X je atom kyslíku.
26. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje imidazopyridinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 18 a farmaceuticky přijatelnou nosnou látku.
27. Použití imidazopyridinového derivátu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 18 pro přípravu léčiva pro inhibici sekrece žaludeční kyseliny.
28. Použití imidazopyridinového derivátu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 18 pro přípravu léčiva pro léčení gastrointestinálních zánětlivých onemocnění.
29. Použití imidazopyridinového derivátu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 18 pro přípravu léčiva pro léčení či profylaxi stavů zahrnujících infekci lidské žaludeční sliznice mikroorganismem Helicobacter pylori, v kombinaci s alespoň jedním antimikrobiálním prostředkem.
30. Farmaceutický prostředek pro použití při inhibici sekrece žaludeční kyseliny, vyznačující se tím, že účinnou složkou je imidazopyridinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 18.
31. Farmaceutický prostředek pro použití při léčení gastrointestinálního zánětlivého onemocnění, vyznačující se tím, že aktivní účinnou složkou je imidazopyridinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 18.

-47CZ 291681 B6
32. Farmaceutický prostředek pro léčení nebo profylaxi stavů zahrnujících infekci lidské žaludeční sliznice mikroorganismem Helicobacter pylori, vyznačující se tím, že účinnou složkou je imidazopyridinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 18 v kombinaci 5 s alespoň jedním antimikrobiálním prostředkem.