CZ290098B6 - Derivát peptidu, způsob jeho přípravy, jeho použití a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje - Google Patents

Derivát peptidu, způsob jeho přípravy, jeho použití a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje Download PDF

Info

Publication number
CZ290098B6
CZ290098B6 CZ19981358A CZ135898A CZ290098B6 CZ 290098 B6 CZ290098 B6 CZ 290098B6 CZ 19981358 A CZ19981358 A CZ 19981358A CZ 135898 A CZ135898 A CZ 135898A CZ 290098 B6 CZ290098 B6 CZ 290098B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
amino
acid
peptide derivative
derivative according
pharmaceutically acceptable
Prior art date
Application number
CZ19981358A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ135898A3 (cs
Inventor
Bernhard Kutscher
Michael Bernd
Thomas Beckers
Thomas Klenner
Peter-Paul Emig
Patricia-Marie Charpentier
Original Assignee
Zentaris Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zentaris Ag filed Critical Zentaris Ag
Publication of CZ135898A3 publication Critical patent/CZ135898A3/cs
Publication of CZ290098B6 publication Critical patent/CZ290098B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/23—Luteinising hormone-releasing hormone [LHRH]; Related peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/02—Drugs for disorders of the endocrine system of the hypothalamic hormones, e.g. TRH, GnRH, CRH, GRH, somatostatin
    • A61P5/04—Drugs for disorders of the endocrine system of the hypothalamic hormones, e.g. TRH, GnRH, CRH, GRH, somatostatin for decreasing, blocking or antagonising the activity of the hypothalamic hormones
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C257/00—Compounds containing carboxyl groups, the doubly-bound oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a doubly-bound nitrogen atom, this nitrogen atom not being further bound to an oxygen atom, e.g. imino-ethers, amidines
    • C07C257/10—Compounds containing carboxyl groups, the doubly-bound oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a doubly-bound nitrogen atom, this nitrogen atom not being further bound to an oxygen atom, e.g. imino-ethers, amidines with replacement of the other oxygen atom of the carboxyl group by nitrogen atoms, e.g. amidines
    • C07C257/18—Compounds containing carboxyl groups, the doubly-bound oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a doubly-bound nitrogen atom, this nitrogen atom not being further bound to an oxygen atom, e.g. imino-ethers, amidines with replacement of the other oxygen atom of the carboxyl group by nitrogen atoms, e.g. amidines having carbon atoms of amidino groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D207/22—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/24—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D207/26—2-Pyrrolidones
    • C07D207/263—2-Pyrrolidones with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms directly attached to other ring carbon atoms
    • C07D207/27—2-Pyrrolidones with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms directly attached to other ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals directly attached to the ring nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/08—Indoles; Hydrogenated indoles with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/61—Halogen atoms or nitro radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D213/63—One oxygen atom
    • C07D213/64—One oxygen atom attached in position 2 or 6
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/75—Amino or imino radicals, acylated by carboxylic or carbonic acids, or by sulfur or nitrogen analogues thereof, e.g. carbamates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/78—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/79—Acids; Esters
    • C07D213/80—Acids; Esters in position 3
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/78—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/84—Nitriles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D215/00—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems
    • C07D215/02—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D215/16—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D215/20—Oxygen atoms
    • C07D215/22—Oxygen atoms attached in position 2 or 4
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
    • C07D231/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D231/12—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/54—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D231/56—Benzopyrazoles; Hydrogenated benzopyrazoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/04—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D233/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D233/26—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/04—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D233/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D233/30—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D233/32—One oxygen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/54—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D233/56—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms, attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
    • C07D235/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D235/04—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles
    • C07D235/06—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 2
    • C07D235/14—Radicals substituted by nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/32—One oxygen, sulfur or nitrogen atom
    • C07D239/42—One nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D249/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D249/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D249/08—1,2,4-Triazoles; Hydrogenated 1,2,4-triazoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D257/00—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D257/02—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D257/04—Five-membered rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D307/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D307/38—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D307/52—Radicals substituted by nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Furan Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Indole Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Quinoline Compounds (AREA)

Abstract

Deriv ty peptidu, zvl t peptidomimetika a v bo n m °et zci modifikovan peptidy s vysokou antagonistickou potenc a prost vedlej ch · ink a jejich soli s farmaceuticky p°ijateln²mi kyselinami. Zp sob jejich p° pravy, jejich pou it a farmaceutick prost°edky, kter je obsahuj a jsou vhodn k o et°ov n n dor z visl²ch na hormonech, zvl t karcinomu prostaty nebo prsu a pro o et°ov n nezhoubn²ch indikac , jejich o et°en vy aduje potla en hormonu LH-RH.\

Description

Oblast techniky
Vynález se týká nových antagonistů LH-RH, obzvláště peptidomimetik a peptidů modifikovaných ve svém bočním řetězci, jejich solí s farmakologicky přijatelnými kyselinami a způsobu přípravy antagonistů LH-RH a jejich solí. Peptidy podle vynálezu představují analogy luteinizujícího hormonu uvolňujícího hormon (LH-RH), který má následující strukturu: p-GluHis-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2, [LH-RH, gonadorelin].
Dosavadní stav techniky
Po více než 20 let hledali badatelé selektivně působící antagonisty LH-RH-dekapeptidu [M. Karten a J. E. Rivier, Endocrine Reviews 7, str. 44 až 66 (1986)]. Důvodem velkého zájmu o takové antagonisty je jejich užitečnost v oboru endokrinologie, gynekologie, ochrany proti početí a proti rakovině. Bylo připraveno velké množství sloučenin jako potenciálních antagonistů LH-RH. Zajímavé sloučeniny, které byly dosud objeveny, jsou sloučeninami, jejichž struktura představuje modifikaci struktury LH-RH.
První série schopných antagonistů byla získána zavedením aromatických zbytků aminokyselin do poloh 1,2,3 a 6 nebo 2, 3 a 6. Obvyklý zápis sloučenin vypadá takto: napřed se udají aminokyseliny, které vstoupily v peptidovém řetězci LH-RH na místo původně existujících aminokyselin, přičemž polohy, kde došlo k výměně, se značí nahoře umístěnými číslicemi. Dále se následujícím označením „LH-RH“ vyjádří, že jde o analogy LH-RH na kterých došlo k výměně.
Známými antagonisty jsou:
[Ac-D-Phe(4-Cl)1,2, D-Trp3,6]LH-RH (D. H. Coy a kol., publikace Gross, E. a Meienhofer J. (vydavatelé) Peptides; Procedings of the 6,h Američan Peptid Symposium, str. 775 až 779, Pierce Chem. Co., Rockville III. (1979):
[Ac-Pro1, D-Phe 4—Cl)2, D-Nal(2)3,6]LH-RH (americký patentový spis 4 419 347) a [Ac-Pro1, D-Phe(4-Cl)2, D-Trp3’6]LH-RH (J. L. Pineda a kol., J. Clin. Endocrinol. Metab. 56, str. 420,1983).
Ke zvýšení rozpustnosti antagonistů ve vodě byly později zavedeny bazické aminokyseliny, například D-Arg v 6. poloze.
Například:
[Ac-D-Phe(4-Cl)1·2, D-Trp3, D-Arg6, D-Ala’°]LH-RH (ORG-30276) (D. H. Coy a kol., Endocrinology 100, str. 1445, 1982) a [Ac-D-Nal(2)’, D-Phe(4-F)2, D-Trp3, D-Arg6]LH-RH (ORF 18260) (J. E. Rivier a kol., Vickeiy B. H. Nestor, Jr., J. J. Hafez, R. S. E (vydavatelé). LHRH a jejich analogy, str. 11 až 22 MTP Press. Lancaster, UK 1984).
Takové analogy vykazovaly nejenom očekávanou zlepšenou rozpustnost ve vodě, ale měly také zlepšenou antagonistickou účinnost. Přesto však způsobují tyto nanejvýš mocné, hydrofilní
-1 CZ 290098 B6 analogy s D-Arg6 a s jinými bazickými bočními řetězci v 6. poloze přechodné edémy na obličeji a na končetinách při subkutánním podání krysám v dávkách 1,25 nebo 1,5 mg/kg (F. Schnidt a kol. Contraception 29, str. 283, 1984: J. E. Morgan a kol. Int. Archs. Allergy Appl. Immun. 80 str. 70 (1986). Další schopné antagonisty LH-RH jsou popsány v patentových spisech WO 92/19 651, WO 94/19 370, WO 92/17 025, WO 94/14 841, WO 94/13 313, US-A5 300 492, US-A 5 300 492, US-A 5 140 009, a EP 0 413 209 Al.
Výskyt endematogenních účinků po podání některých z těchto antagonistů u krys vyvolaly pochybnosti o bezpečnosti při jejich použití na lidech, a tak se zavádění těchto léčiv do klinického použití opozdilo. Proto existuje velká poptávka po antagonistických peptidech prostých vedlejších účinků.
Podstata vynálezu
Podstatou vynálezu je derivát peptidu obecného vzorce I
R2
Ri - CO - NH - CH - CO - N - R3 <CH2)n <*>,
NH
CO-R4 kde znamená:
n číslo 3 nebo 4,
R1 skupinu fenylalkylovou s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, naftylalkylovou s 1 až 4atomy uhlíku valkylovém podílu, fenantrylkarbonylalkylovou s 1 až 4atomy uhlíku v alkylovém podílu, fenylalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu nebo naftylalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, přičemž všechny tyto skupiny jsou popřípadě substituovány atomem halogenu, alkoxyskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, cinnolinylovou skupinou nebo fenylovou skupinou,
R2 a R3 na sobě nezávisle atom vodíku, skupinu alkylovou s 1 až 4 atomy uhlíku, fenylalkylovou s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu nebo pyridylalkylovou s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, přičemž všechny tyto skupiny jsou popřípadě substituovány alkoxyskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, aminoskupinou nebo karbymoylovou skupinou,
R4 skupinu obecného vzorce II
--- CCH2)p --- CO --- NR6
H
Cil),
-2CZ 290098 B6 kde znamená:
p celé číslo 1 až 4 a
R6 skupinu fenylovou popřípadě substituovanou skupinou amidinoskupinou, kyanskupinou, atomem halogenu, benzyloxyskupinou, alkoxyskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku nebo alkylovou skupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo znamená
R4 kruh obecného vzorce III
H /
kde znamená q číslo 1 nebo 2, a chirální uhlíkové atomy mohou být v konfiguraci D nebo L a jeho soli s farmaceuticky přijatelnými kyselinami.
Dále se vynález týká také sloučenin obecného vzorce V
Ac-D-Nal(2)’-D(pCl)Phe2-D-Pal(3)3-Ser4-Tyr5-D-Xxx6-Leu7-Arg8-Pro9-D-Ala,0-NH2 (V), kde znamená:
Ac D-Nal(2) D-Pal(3) D-Xxx acetyl 3-(2-naftyl)-D-alanin 3-(3-pyridyl)-D-alanin a skupinu aminokyseliny obecného vzorce VI
- HN - CH - CO - O (CHz)n
NH
CO - R4 cvn, kde n, p, q, R4, R5, R6, R7, R8 a X mají shora uvedený význam a jejich solí s farmaceuticky přijatelnými kyselinami.
Sloučeniny podle vynálezu vykazují vysokou antagonickou potenci a jsou prosté nežádoucích vedlejších účinků, zejména jsou prosté edematogenních účinků. Pokud nejsou ve formě solí
-3CZ 290098 B6 obtížně ve vodě rozpustných farmaceuticky vhodných kyselin, vykazují kromě toho zlepšenou rozpustnost ve vodě. Dále mají sloučeniny vysokou afinitu k lidskému receptoru LH-RH, jsou tedy vysoce účinné při brzdění uvolňování gonadotropinů žlázy mozkového přívěšku u savců včetně lidí, vykazují dlouhodobě působící potlačení testosteronu v krysách a způsobují minimální uvolňování histaminu in vitro.
Vhodnými sloučeninami obecného vzorce (I) jsou: alfa-N-Z-[epsilon-N'-4-(4-amidinofenyl)amino-l,4-dioxo-butyl]lysinamid, alfa-N-Z-[epsilon-N'-(imidazolidin-2-on-4-yl)formyljlysinamid. Výhodnými peptidy obecného vzorce (V) jsou peptidy, kde Xxx znamená skupinu [epsilon-N'-(4-amidinifenyl)amino-l,4-dioxo-butyl]-lysylovou nebo [epsilon-N'(imidazolidin-2-on-4-yl)formyl]lysylovou. Soli s farmaceuticky vhodnými kyselinami jsou s výhodou obtížně vodou rozpustné. Obzvláště výhodné jsou soli 4,4'-methylen-bis(3-hydroxy2-naftoové kyseliny, známé také jako kyselina embonová nebo pamoaová.
Názvosloví používané k definování peptidů souhlasí s názvoslovím vysvětleným komisí IUPACRJB-Komission uber Biochemische Nomenklatur (European J. Biochem. 138 str.9 až 37, 1984), přičemž v souladu s dosavadním znázorňováním jsou aminoskupiny u N-zakončení vlevo a karboxylové skupiny u C-zakončení vpravo. Antagonisty LH-RH jako peptidy a peptidomimetika podle vynálezu zahrnují aminokyseliny vyskytující se v přírodě i synteticky připravené, přičemž přírodní zahrnují Ala, Val, Leu, Ile, Ser, Thr, Lys, Arg, Asp, Asn, Glu, Gin, Cys, Met, Phe, Tyr, Pro, Trp a His. Zkratky jednotlivých aminokyselin jsou založeny na triviálních jménech aminokyselin a znamenají Ala alanin, Arg arginin, Gly glycin, Leu leucin, Lys lysin, Pal(3)—3— (3-pyridyl)alanin, Nal(2)3-(2-naftyl)alanin, Phe fenylalanin, (pCl)Phe 4-chlorfenylalanin, Pro prolin, Ser serin, Thr threonin, Trp tryptofan a Tyr tyrosin. Pokud není uvedeno jinak, jsou popisované aminokyseliny řady L. Například D-Nal(2) je zkratkou pro 3-(2-naftyl)-D-alanin a Ser je zkratkou pro L-serin. Další používané zkratky mají tento význam:
Ac acetyl
D-Nal(2) 3-(2-naftyl)-D-alanin
D-Pal(3) 3-(3-pyridyl)-D-alanin
Boc terč -buty loxykabonyl
Bop benzotriazol-l-yloxy-tris-(dimethylamino)-fosfoniumhexafluorofosfát
BSA hovězí sérový albumin
DCC dicyklohexylkarbodiimid
DCM dichlormethan
Ddz dimethoxyfenyldimethylmethylenoxykarbonyl(dimethoxydimethyl-Z)
DIC diizopropylkarbodiimid
DIPEA N,N-diizopropylethylamin
DMF dimethylformamid
DMSO dimethylsulfoxid
EDC1 l-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimid
EDTA ethylendiamintetraoctová kyselina
Et ethyl
Fmoc fluorenylmethyloxykarbonyl
HF tekutá bezvodá kyselina fluorovodíková
HOBt 1 -hydroxybenzotriazol
HPLC vysokotlaká kapalinová chromatografie
mBHA methylbenzhydrylamin
Me N-methylmorfolin
NMM N-methylmorfolin
PBS fosfátem pufrovaná solanka
PyBop benzotriazol-l-yloxy-tris-pyrrolidinofosfoniumhexafluorofosfát
SBTI trypsinový inhibitor sojových bobů
TFA trifluoroctová kyselina
Z benzyloxykarbonyl
-4CZ 290098 B6
Způsob přípravy sloučenin obecného vzorce I spočívá podle vynálezu vtom, že se napřed funkční skupiny (alfa-aminoskupina, epsilon-aminoskupina a skupina alfa-karboxylové kyseliny) opatří chránící skupinou a pak se volná třetí funkční skupina vhodným způsobem nechává reagovat. Popřípadě je možno také v případech, kdy se dosahuje lepších výsledků, zavést v první operaci přechodně chránící skupiny, které se po druhé operaci zamění za požadovanou funkční skupinu. Vhodné chránící skupiny a způsoby jejich vnášení jsou v oboru dobře známé. Příklady vhodných chránících skupin jsou popsány v knize „Principles of Peptide Synthesis“ nakladatelství Spinger Verlag 1984, v knize „Solid Phase Peptide Synthesis“ J. M. Stewart a J. D. Young, Pierce Chem. Company, Rpckford, III, 1984 a G. Barady a R. B. Merrifíeld „The Peptides“, sv. 1, str. 1 až 285, 1979, Academie Press lne.
Příprava sloučenin obecného vzorce IV může probíhat buď klasickým způsobem kondenzací fragmentů nebo syntézou pevných fází podle Merrifielda postupným nastavováním za použití Dlysinu okyseleného již karboxylovou kyselinou obecného vzorce VII v bočním řetězci stejně jako reakcí dekaptidového stavebního kamene s odpovídajícími karboxylovými kyselinami amidových spojením v bočních řetězci D-lysinu6. K tomuto postupu jsou k přípravě sloučeniny obecného vzorce V podle vynálezu k dispozici tři alternativy.
Podle první možnosti přípravy sloučeniny obecného vzorce V:
(a) se zavádí do alfa-aminoskupiny a do skupiny karboxylové kyseliny D-lysinu nebo Domithinu vhodné chránící skupiny, (b) nechává se reagovat D-lysin nebo D-omithin schráněnými skupinami skarboxylovou kyselinou obecného vzorce VII
R4-COOH (VII), kde R4 má shora uvedený význam, (c) odštěpují se chránící skupiny ze skupiny alfa-karboxylové kyseliny sloučeniny získané ve stupni b) k začlenění do polohy 6 operací (h), (d) kopuluje se D-alanin s chráněnou aminoskupinou na pevný nosič v podobě pryskyřice (Merrifieldova syntéza), (e) odštěpují se chránící skupiny z aminoskupiny alaninu, (f) nechává se reagovat alanin vázaný na pevném nosiči s prolinem, s chráněným atomem dusíku, (g) odštěpuje se chránící skupina z atomu dusíku prolinu, (h) opakuje se operace f) a g) s aminoskupinami 1 až 8 obecného vzorce V v pořadí od 8 k 1 za použití modifikovaného D-lysinu nebo D-omithinu popsaného v operaci (c) pro polohu 6, (i) odštěpuje se sloučenina, získaná v operaci (h), od nosiče a případně se čistí, zvláště chromatografíí HPLC, (j) případně se sloučenina nechává reagovat s farmaceuticky vhodnou kyselinou, s výhodou s kyselinou embonovou.
-5CZ 290098 B6
Podle druhé možnosti přípravy sloučeniny obecného vzorce V:
(a) se váže D-alanin s chráněnou aminoskupinou na nosič vhodný k syntéze v pevné fázi, (b) odštěpí se chránící skupiny z aminoskupiny alaninu, (c) nechává se reagovat alanin vázaný na pryskyřici s prolinem s chráněným atomem dusíku, (d) odštěpí se chránící skupina z atomu dusíku prolinu, (e) opakuje se operace c) a d) s aminokyselinami 1 až 8 obecného vzorce V v pořadí od 8 k 1, (f) odštěpuje se ve stupni e) získaná sloučenina od nosiče, (g) nechává se reagovat s karboxylovou kyselinou obecného vzorce VII
R4-COOH (Vn), kde R4 má shora uvedený význam, (h) popřípadě se sloučenina nechává reagovat s farmaceuticky vhodnou kyselinou, s výhodou s kyselinou embonovou.
Podle třetí možnosti přípravy sloučeniny obecného vzorce V:
(a) se váže D-alanin s chráněnou aminoskupinou na nosič vhodný k syntéze v pevné fázi, (b) odštěpí se chránící skupina z aminoskupiny alaninu, (c) nechává se reagovat alanin vázaný na pryskyřici s prolinem s chráněným atomem dusíku, (d) odštěpí se chránící skupina z atomu dusíku prolinu, (e) opakuje se operace c) a d) s aminokyselinami 6 až 8 obecného vzorce V v pořadí od 8 k 6, (f) odštěpuje se skupina chránící epsilon-aminoskupinu D-lysinu nebo D-omithinu v poloze 6 a provádí se reakce s karboxylovou kyselinou obecného vzorce (VII)
R4-COOH (vn), kde R4 má shora uvedený význam, (g) odštěpuje se chránící skupina z alfa-aminoskupiny D-lysinu nebo D-omithinu, (h) opakuje se operace c) a d) s aminokyselinami 1 až 5 obecného vzorce IV v pořadí od 5 k 1, (i) odštěpí se sloučenina získaná v operaci (h) od pryskyřice a čistí se zvláště chromatografií HPLC, (j) popřípadě se sloučenina nechává reagovat s farmaceuticky vhodnou kyselinou, s výhodou s kyselinou embonovou.
Výhodnými karboxylovými kyselinami obecného vzorce VII jsou imidazolin-2-on-4karboxylová kyselina a N-(4-amidinofenyl)amino-4-oxo-máselná kyselina.
-6CZ 290098 B6
Sloučeniny obecného vzorce V se připravují o sobě známými způsoby, například technikou pevných fází, technikou částečně pevných fází nebo klasickými roztokovými kopulacemi (viz M. Bodanszky „Principles of Peptide Synthesis“ Springer Verlag 1984). Způsoby syntézy pevných fází jsou popsány v učebnici „Solid Phase Peptide Synthesis“ J. M. Stewart a J. D. Young, Pierce Chem. Company, Rockford, III, 1984 a vG. Barany a R. B. Merrifield „The Peptides“, sv. 1, str. 1 až 285, 1979, Academie Press lne. Klasické roztokové syntézy jsou podrobně popsány v publikaci „Methoden der Organischen Chemie“ (HoubenWeyl), „Synthese von Peptiden“ vydavatel E. Wůnsch 1974, Georg Thieme Verlag, Stuttgart, BRD.
Postupná stavba probíhá například tak, že se napřed kovalentně váže na obvyklý nerozpustný nosič karboxylová koncová aminokyselina, jejíž aminoskupina v poloze alfa je chráněna, chránící skupina alfa-aminoskupiny této aminokyseliny se odštěpí a takto vzniklá volná aminoskupina váže nejbližší chráněnou aminoskupinu prostřednictvím její karboxylové skupiny a takto krok za krokem se spojí ostatní aminokyseliny syntetizovaného peptidu ve správném pořadí a po pospojování všech aminokyselin se odštěpí hotový peptid od nosiče a popřípadě se odštěpí další existující chránící skupiny bočních skupin. K postupné kondenzaci dochází syntézou z odpovídajících obvyklým způsobem chráněných aminokyselin o sobě známým způsobem. Rovněž je možné použití automatických syntetizátorů peptidů, například typu Labortec SP 650 od fy. Bachem, Švýcarsko s použitím obchodně dostupných chráněných aminokyselin.
Spojování jednotlivých aminokyselin navzájem probíhá obvyklými metodami, zejména přicházejí v úvahu
- metoda symetrických anhydridů v přítomnosti dicyklohexylkarbodiimidu nebo diizopropylkarbodiimidu (DCC, DIC)
- metoda karbodiimidu všeobecně
- metoda karbodiimidhydroxybenzotriazolová (The Peptides, sv. 2, vydavatel R. Gross a J. Meienhofer). Ke spojování argininu se používá s výhodou metody karbodiimidové. Pro ostatní aminokyseliny se všeobecně používá metody symetrických nebo smíšených anhydridů.
Při kopulaci fragmentů se používá s výhodou azidové kopulace probíhající bez racemizace nebo metody DCC-l-hydroxybenzotriazolové, případně DCC-3-hydroxy-4-oxo-3,4-dihydro-l,2,3benzotriazinové. Použít lze též aktivovaných esterů fragmentů.
K postupné kondenzaci aminokyselin se obzvlášť dobře hodí aktivované estery N-chráněných aminokyselin, jako je například N-hydroxysukcinimidester nebo 2,4,5-trichlorfenylester. Amynolýza se může dobře katalyzovat N-hydroxysloučeninami, které mají přibližně kyselost kyseliny octové, jako například 1-hydroxybenzotriazol.
Jako skupiny chránící přechodně aminoskupiny připadají v úvahu skupiny odstranitelné hydrogenací jako například skupina benzyloxykarbonylová (Z= zbytek) nebo skupiny odštěpitelná slabými kyselinami. Jako chránící skupiny pro aminoskupiny v poloze alfa přicházejí v úvahu například:
terciární butyloxykarbonylové skupiny, karbobenzoxyskupiny, případně karbobenzothioskupiny (případně vždy s atomem bromu nebo s nitrobenzylovou skupinou vp-poloze), skupina trifluoracetylová, ftalylová, skupina o-nitrofenoxyacetalová, tritylová, p-toluolsulfonylová, benzylová, substituované benzylové skupiny v benzolovém jádru (atomem bromu nebo nitrobenzylovou skupinou v p-poloze) a alfa-fenylethylová skupina (Jasse P. Greenstein a Milton Winitz, Chemistry of Amino Acids, New York 1961, John Wiley and sons, lne. Sv. 2, případně str. 883 a dále i The Peptides, sv. 2, vydavatel E. Gross a J. Meienhofer, Academie
-7CZ 290098 B6
Press, New York). Tyto chránící skupiny přicházejí v úvahu v zásadě také k ochraně dalších funkčních vedlejších skupin (hydroxylové skupiny, aminoskupiny) příslušných aminokyselin.
Obsažené hydroxylové skupiny (serin, theorin) se chrání s výhodou benzylovými nebo podobnými skupinami. Další aminoskupiny, které nejsou v alfa-poloze, (například aminoskupiny v poloze omega, guanidinová skupina argininu) se chrání s výhodou otrogonálně.
Reakce ke spojení aminokyselin nastává vunertním roztokovém nebo suspenzním prostředí, obvyklém pro tyto reakce (například v dichlormethanu), přičemž se může ke zlepšení rozpustnosti přidávat dimethylformamid.
K začlenění skupiny R4-CO reakcí aminoskupiny lysinu s karboxylovou kyselinou, přicházejí v úvahu v zásadě stejné postupy jako jsou popsány shora pro spojování aminokyselin. Obzvlášť výhodná je však kondenzace za použití karbodiimidu, například l-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimidu a l-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimidu a 1-hydroxybenzotriazolu.
Jako nerozpustný nosičový materiál přicházejí v úvahu nerozpustné polymery například polystyrolová pryskyřice ve tvaru perel, bobtnající v organických rozpouštědlech (například kopolymer polystyrolu a 1 % divinylbenzolu). Vytváření chráněného dekapeptidamidu na methylbenzhydrylamidové pryskyřici (pryskyřici MBHA, totiž polystyrolové pryskyřici opatřené methylbenzhydíylovými skupinami), která dává požadovanou C-koncovou amidovou skupinu peptidu po HF-odštěpení od nosiče, může být provedeno podle následujícího postupového digramu:
Postupový diagram
Protokol syntézy peptidu
Stupeň Funkce Rozpouštědlo/reakční činidlo v/v Čas
1 praní methanol 2x2 min
2 praní DCM 3x3 min
3 odštěpení DCM/TFA (1 : 1) 1x30 min
4 praní izopropanol 2x2 min
5 praní methanol 2x2 min
6 praní DCM 2x3 min
7 neutralizace DCM/DIPEA (9:1) 3x5 min
8 praní methanol 2x2 min
9 praní DCM 3x3 min
10 STOP přísada Boc-AS v DCM+DIC+HOBt
11 kopulace — přibl. 90 min
12 praní methanol 3x2 min
13 praní DCM 3x2 min
Aminokyseliny chráněné N-alfa-Boc se kopulují v trojnásobném molámím přebytku v přítomnosti diizopropylkarbodiimidu (DIC) a 1-hydroxybenzotriazolu (HOBt) v systému dichlormethan/dimethyíformamid během 90 minut a chránící skupina Boc se odštěpí půlhodinovým působením kyseliny trifluoroctové (TFA) v dichlormethanu. Ke kontrole úplného proběhnutí reakce může sloužit chloranilový test podle Christensena a ninhydrinový test podle Kaisera. Zbytky volné aminoskupiny se blokují acetylací v pětinásobném přebytku acetylimidazolu v dichlormethanu.
Následnost reakčních operací vytváření peptidů na pryskyřici vychází z postupového diagramu. K odštěpení peptidů, vázaných na pryskyřici, se vždy konečný produkt syntézy v pevném stavu
-8CZ 290098 B6 vysuší oxidem fosforečným ve vakuu a zpracovává se v 500 násobném přebytku systému fluorovodík/anisol 10:1 (objemově) 60 minut při teplotě 0 °C.
Po oddestilování fluorovodíku a anisolu se vysrážejí peptidové amidy vymícháním s bezvodým ethyletherem v podobě bílých pevných látek, oddělení od vysráženého polymemího nosiče probíhá promýváním 50 % vodnou kyselinou octovou. Šetrným zahuštěním roztoků okyselených kyselinou octovou ve vakuu mohou být získány příslušné peptidy v podobě vysoce viskózních olejů, které se v chladu přemění na bílé pevné látky přísadou absolutního etheru.
Další čištění probíhá rutinními způsoby preparativní vysokotlaké kapalinové chromatografie (HPLC).
Převod peptidů na jejich adiční soli s kyselinami se může provádět jejich reakcí s kyselinami o sobě známým způsobem. Naopak je možno získat volné peptidy reakcí jejich solí s adičními kyselinami se zásadami. Peptidembonáty lze získat reakcí solí kyseliny trifluoroctové (solí TFA) peptidů s volnou kyselinou embonovou. Za tímto účelem se nechává reagovat peptidová sůl TFA ve vodném roztoku s roztokem dinatriumembonátu v dipolámím aprotickém prostředí, s výhodou v dimethylacetamidu a vytvořená světležlutá sraženina se izoluje.
Vynález objasňují, nijak však neomezují následující příklady praktického provedení. Procenta a díly jsou míněny hmotnostně, pokud není uvedeno jinak.
Seznam obrázků
Na obr. 1 je vazba zkoušených sloučenin na lidský receptor ve vztahu ke koncentraci kompetitoru;
na ose x je koncentrace kompetitoru, na ose y procento specifické vazby křivka s kolečky platí pro sloučeninu podle příkladu 56, se čtverečky pro cetrorelix (BS 75), s trojúhelníčky pro sloučeninu podle příkladu 1 a s kosočtverečky pro sloučeninu podle příkladu 2
Na obr. 2 je brzdění tvory IP3 v závislosti na koncentraci zkoušené látky podle příkladu 2; na ose x je množství sloučeniny podle příkladu 2 v nM, na ose y IP3 v pmol/4xl06 buněk
Na obr. 3 je totéž jako na obr. 2 pro sloučeninu podle příkladu 56;
Na obr. 4 je závislost potlačení testosteronu v ng/ml zkoušenou sloučeninou podle příkladu 1 v množství 1,5 mg/kg s na čase v hodinách;
na ose x je čas v hodinách, na ose y testosteron v ng/ml křivka s prázdnými kolečky platí pro zvíře 1, s prázdnými čtverečky pro zvíře 2, s čárkami pro zvíře 3 s plnými kolečky pro zvíře 4 a s plnými čtverečky pro zvíře 5
Na obr. 5 je totéž jako na obr. 4 pro sloučeninu podle příkladu 2;
Na obr. 6 je totéž jako na obr. 4 pro sloučeninu podle příkladu 56, používanou však v množství 10 mg/kg s.
-9CZ 290098 B6
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Ac-D-Nal(2)-D(pCl)Phe-D-Pal(3)-Ser-Tyr-D-[epsilon-N'-(imidazolidin-2-on-4-yl)formyl]-Lys-Leu-Arg-Pro-D-Ala-NH2
Syntéza probíhá podle postupného diagramu na pryskyřici 5 g mBHA (hustota 1,08 mmol/g). to Lysin se kopuluje jako Fmoc-D-Lys(Boc)-OH a po odštěpení Boc-skupiny se acyluje v bočním řetězci imidazolidin-2-on—4-karboxylovou kyselinou ve 3-násobném přebytku. Po odštěpení chránící skupiny Fmoc systémem 20 % piperidin/DMF se společný postupový diagram prodlouží k N-zakončení. Po odštěpení polymemího nosiče se vysráží 5,2 g surového peptidu, který se čistí standardním způsobem preparativní HPLC. Po návazném vysušení vymrazením se získá 2,1 g 15 HPLC-jednotného produktu sumárního vzorce C74H97N18O15C1 se správným FAB-MS 1514 (M+H*) (vypočteno 1512,7) a odpovídajícího spektra 'H-NMR.
'H-NMRÍSOO Mhz, DMSO-d6, delta v ppm):
8,56, m, 2H, arom.H; 8,08, m, 1H, arom.H; 7,81, m, H, arom.H; 7,73, m, 2H, arom.H; 7,66, m, 20 1H, arom.H; 7,60, s, arom.H; 7,44, m, 2H, arom.H; 7,30, d, 1H, arom.H; 7,25 a 7,18, 2d, 2 x 2H, arom.H p-Cl-Phe; 6,97 a 6,60,2d, 2 x 2H, arom.H tyr; 9,2-6,3 četné signály, amid-NH; 4,84,0 četné m, C-alfa-H a alifatH; 2,1-1,1 četné m, zbylé alifat.H; 1,70, s, 2H, acetyl; 1,22, d, 3H, Cbeta H Ala; 0,85,; dd; 6H; Cdelta-H Leu.
Příklad 2
Ac-D-Nal(2)-D(pCl)Phe-D-Pal(3)-Ser-Tyr-D-[epsilon-N'-4-(4-amidinofenyl)amino-l,4dioxo-butyl]-Lys-Leu-Arg-Pro-D-Ala-NH2
Nechá se reagovat 0,7 mmol (1,03 g) dekapetidu Ac-D-Nal-D-(pCl)Phe-D-Pal-Ser-Tyr-DLys-Leu-Arg-Pro-D-Ala-NH2 s 1,0 mmol (0,27 g) (4-amidinofenyl)amino-4-Oxo-máselné kyseliny v přítomnosti 1,0 mmol (0,16 g) l-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimidu a 1,0 mmol (0,16 g) 1-hydroxybenzotriazolu v čerstvě destilovaném DMF. Rozpouštědlo se po 35 24 hodinách odstraní ve vakuu, vysrážený zbytek se rozpustí ve vodě a vysuší se vymrazením.
Vysrážený surový produkt (1,63 g) se vyčistí preparativní reverzní fázovou chromatografií
HPLC. Celkem se vysráží 0,61 g jednotného produktu vyčištěného HPLC sumárního vzorce C81H104N19Oi5C1 s korektním FAB MS: 1618,7 (M+H*) (vypočteno 1617,7) a s odpovídajícím spektrem 'H-NMR.
’H-NMR(500 Mhz, DMSO-d6delta v ppm):
10,4, s, 1H a 9,15 s, 2H a 8,8, s, ΙΗ,ΝΗ 4-amidinoanilinu; 8,60, m, 2H, aromH; 8,20, m, 1H, arom.H; 7,80, m, 1H, arom.H; 7,73, m, arom.H; 7,61, s, 1H, arom.H; 7,44, m, 2H, arom.H; 7,30, d, 1H, arom.H; 7,25 a 7,20,2d, 4H, arom.H (pCl)-Phe; 7,00 a 6,60,2d, 4H, arom.H Tyr; 8,3-7,2 45 četné signály, amid-NH; 4,73-4,2 četné multiplety, C-alfa-H, Ala; 3,78-2,4 četné multiplety,
C-beta H a alifat.H; 1,72, 3, 3H, acetyl; 1,22; d; 3H, C-beta Ala; 0,85, dd, 6H, C-delta Leu.
Příklad 3
Nechá se reagovat 0,5 g (0,3 mmol) peptidického antagonisty LH-RH podle příkladu 1, rozpouštěného v 50 ml vody reakcí s 0,130 g (0,3 mmol) dinatriové soli kyseliny embonové ve 2 ml vodného roztoku za získání peptidového embonátu, který se rychle vyloučí z roztoku v podobě žlutého precipitátu. Získá se 0,281 g jemně krystalického žlutozeleného prášku s 33 % 55 obsahem kyseliny embonové.
-10CZ 290098 B6
Příklad 4
Nechá se reagovat 0,3 g (0,17 mmol) peptidického antagonisty LH-RH podle příkladu 2, rozpouštěného v 5 ml dimethylacetamidu s 0,195 g (0,45 mmol) dinaturiové soli kyseliny embonové ve 2 ml vodného roztoku za získání peptidového embonátu, který se vysráží po přidání 50 ml vody v podobě žluté sraženiny. Získá se 0,330 g jemně krystalického žlutého produktu s 20 % obsahem kyseliny embonové.
Sloučeniny obecného vzorce I lze získat podle následujících schémat 1,3,4 a 5, přičemž se systematicky mění významy tří symbolů R1, R3 a R4. Schéma 1 ukazuje výstavbu sloučeniny podle příkladu 1:
Schéma 1
1> benzctriazol-1-ylaxy-trist dimethyl amino)fosfoniumhexafluorfosfAt ťBOPl
2) N-methylmorfolin
3) 2n NaOH *4) CF3COOH
Obecný přepis přípravy sloučenin obecného vzorce I podle schéma 1
Rozpustí se, popřípadě se suspenduje, karboxylová kyselina obecného vzorce R4-COOH substituovaná skupinou symbolu R4, která je základem sloučeniny obecného vzorce I a způsobu podle schéma 1, která s případě zásaditého zbytku R4 může existovat jako sůl, například jako hydrochlorid, hydrosulfát nebo acetát, s vyloučením vlhkosti za míchání v nepolárním nebo v dipolámím aprotickém organickém rozpouštědle, jako je například tetrahydrofuran, dioxan,
-11 CZ 290098 B6 methyl-terc.-butylether, toluen, dimethylformamid, dimethylacetamid, N-methylpyrrolidon, dimethylsulfoxid nebo methylenchlorid a nechá se reagovat za míchání se zásadou sloužící k vázání kyseliny, jako je například diizopropylamin, triethylamin, N-methylmorfolin, dimethylaminopyridin nebo pyridin. Přidá se směs Z-(L)-lysinamidhydrochloridu v ředidle, přičemž jako ředidlo přicházejí v úvahu rozpouštědla použitá k rozpouštění karboxylové kyseliny obecného vzorce R4-COOH substituovaná skupinou symbolem R4. Hodnota pH reakční směsi se nastaví zásadou vážící kyselinu, například na 6,5 až 9,0, s výhodou na 7,0 až 8,5, obzvláště na 7,0 až 7,5. Nakonec se přidá do míchané reakční směsi roztok kopulačního reakčního činidla, například benzotriazol-l-yl-oxytris-(dimethylamino)fosfoniumhexafluorfosfátu (BOP), nebo benzotriazol-l-yloxy-trispyrrolidinofosfoniumhexafluorofosfátu (PyBOP) nebo dicyklohexylkarbodiimidu (DCC) a po krátké době se hodnota pH roztoku nastaví na shora uvedený rozsah. Suspenze se míchá například 1 až 15 hodin při teplotě 0 až 80 °C s výhodou při teplotě 10 až 50 °C, obzvláště 20 až 30 °C, odsaje se, pevná látka se promyje a filtrát se zahustí ve vakuu k suchu. Zbytek se nechá vykrystalovat třením s organickým rozpouštědlem, jako je například toluen, tetrahydrofuran, aceton, methylethylketon, popřípadě s izopropylalkoholem, nebo se vyčistí překrystalováním, destilací nebo sloupcovou nebo bleskovou chromatografíí na silikagelu nebo oxidu hlinitém. Jako eluční činidlo se používá například směs methylenchloridu, methanolu, amoniaku (25 %) (v objemovém poměru 85:15:1) nebo směs methylenchloridu, methanolu, amoniaku (25 %) v objemovém poměru 80:25:5.
Syntéza trifluoracetátu
Vyčištěná sloučenina, získaná shora uvedeným způsobem se rozpustí v protickém nebo aprotickém rozpouštědle, například v alkoholu, jako je methanol, ethanol, izopropanol nebo v cyklických etherech, jako je například tetrahydrofuran nebo dioxan a 2n roztokem hydroxidu sodného se nastaví hodnota pH na 10 až 11. Vysrážená pevná látka se odsaje, promyje, vysuší se ve vakuu a v ethanolovém roztoku při teplotě 10 až 80 °C, s výhodou 20 až 40 °C a nechá se reagovat s molámím ekvivalentem nebo s 2- až 4—násobným přebytkem trifluoroctové kyseliny. Po 24-hodinovém stání roztoku při teplotě 0 až 4 °C vykrystaluje žádaný trifluoracetát, kteiý se odsaje a ve vakuu se vysuší.
Podle tohoto obecného předpisu, který je základem pro schéma 1, se syntetizují sloučeniny, které objasňuje příklad 5 a navazující tabulka I.
Příklad 5 alfa-N-[Benzyloxykarbonyl]-epsilon-N-[5-[(4-amidinofenyl)-amino]-5-oxo-pentanoyl]-Llysinamidtrifluoracetát
Za míchání a s vyloučením vlhkosti se ve 200 ml dimethylformamidu suspenduje 5 g (17,5 mmol) hydrochloridu 5-[[4-(aminoiminomethyl)fenyl]amino]-5-oxopentanové kyseliny a nechá se reagovat se 3,85 ml (35,0 mmol) N-methylmorfolinu. Přidá se směs 5,53 g (17,5 mmol) Z-(L)-lysinamidhydrochloridu ve 100 ml dimethylformamidu a hodnota pH se nastaví N-methylmorfolinem na 7,0 až 7,5. Nakonec se přidá roztok 9,73 g (21,9 mmol) benzotriazol-l-yloxy-tris-(dimethylamino)fosfoniumhexafluorfosfátu (BOP) a po 10 až 15 minutách se znovu nastaví hodnota pH na 7,0 až 7,5. Žlutě zbarvená suspenze se míchá 3 až 4 hodiny za stálého sledování hodnoty pH, která má být 7,0 až 7,5, při teplotě místnosti, bezbarvá sraženina se odsaje, promyje se dvakrát dimethylformamidem a žlutě zbarvený filtrát se odpaří k suchu. Olejnatý zbytek se digeruje celkem 5x40 ml methylenketonu tak, že se po každém z pěti zpracování rozpouštědlem methylketonová fáze odlije a vyhodí. Zbylý surový produkt v krystalickém stavu se odsaje, promyje se 30 ml methylketonu a vysuší se ve vakuu při teplotě místnosti.
-12CZ 290098 B6
Pevná látka se pak rozpustí v přibližně 50 ml ethanolu a hodnota pH se nastaví louhem sodným na 10 až 11. Vysrážená zásada se odsaje, promyje se vodou a ethanolem a vysuší se ve vakuu při teplotě 35 °C. Výtěžek: 5,5 g (62 % teorie).
Trifluoracetát:
Nachává se reagovat 5,5 g zásady v ethanolové suspenzi s pětinásobným množstvím trifluoroctové kyseliny při teplotě 60 °C. Roztok se udržuje na teplotě 4°C přes noc, získaný trifluoracetát se odsaje a vysuší se ve vakuu při teplotě 35 °C. Výtěžek: 5,9 g (87,7 % teorie). io Teplota tání je 185 °C.
Analýza:
vypočteno C 53,84 H5,65 N 13,45 nalezeno C 54,11 H5,74 N 13,33
Shora popsaným způsobem se připraví další sloučeniny obecného vzorce I uvedené v tabulce I, přičemž n je 4.
-13CZ 290098 B6
Tabulka I alfa, epsilon-N-substituované deriváty L-lysinamidu podle schématu přípravy 1 a obecného vzorce I (ve všech příkladech je n=4)
-14CZ 290098 B6
12 o
13 OBzl=Benzytaxy o “-«A»-0
14 o <***
'v OCM,
15 .......... oe
16 Ογ H O H/H o JL /r~\ ch, ^kh—r 'ý—<*i
17 CH. Í _
18 O
19 ^Y“-0 o
20 O
21 ^Jj.coocn, ««i γ ^‘♦r o
22 ✓«<· ,ΚΗ-Ι’ J “i Y O
-15CZ 290098 B6
23 Cv. H o H/H o
24
25 O
26 b N—'
27 o
28 O <* A. /\ “ D <ΧΧΆ
29
30 o ---Π Cř\ JÍs X^jX 3 CH, ^NH
31 -X^<;-j] H
32 -7θΟ
33
34 '-«Α-θ-ΤΤί
- 16CZ 290098 B6
Teploty tání sloučenin podle uvedeného příkladu jsou uvedeny v tabulce II
Tabulka II
Teploty tání sloučenin podle příkladů 5 až 34
Příklad t. tání [°C] Příklad t. tání [°C] Příklad t. tání [°C]
5 185 15 225 25 syrup. zbytek
6 185 16 211-214 26 205-210
7 216-220 17 183-186 27 172-177
8 225 18 (olej) 28 227-230
9 217-220 19 syrup. zbytek 29 225-229
10 218-222 20 (olej) 30 233-235
11 208-212 21 (olej) 31 215-218
12 (olej) 22 (olej) 32 155
13 232-236 23 syrup. zbytek 33 (olej)
14 194-198 24 (olej) 34 (olej)
Výchozí stupně sloučenin obecného vzorce I, připravených podle schématu 1, vyplývající z tabulky I.
Lysinamid Z-(L), použitý jako výchozí sloučenina pro konečné stupně přípravy podle příkladů 5 až 34, je obchodně dostupný. Substituovaní „aryl“-případně „heteroarylaminooxoalkanové kyseliny“, použité jako edukty podle schématu 1, je možno připravit obdobně jako podle schématu 2 způsoby známými z literatury (P. R. Boy, J. Organ. Chem. 58, str. 7 948, 1993).
Schéma 2
O
O
A=Aryl p=2-5
Heteroarvi
O * HOOC
A= Aiyl, Heteroaryi p=2-5
Aromatické, případně heteroaromatické aminy A-NH2 přicházející v úvahu při způsobu podle schématu 2, jsou obchodně dostupné; aminoimidazol[l,2-alpyridin který je základem pro sloučeninu podle příkladu 28, lze připravit způsoby známými z literatury (R. Westwood, J. Med. Chen. 31, str. 1098 (1988)).
Zmíněné „aiyl-“ případně „heteroarylaminooxoalkanové kyseliny“, jako výchozí látky, je dále možno připravit tak, že se nechává reagovat alkanmonomethylester kyseliny dikarboxylové, například monomethylester kyseliny suberové a monomethylester kyseliny azelainové jako výchozí látka s aromatickým nebo s heteroaromatickým aminem aminolyzovou reakcí ve vroucím alkoholu, například ve vroucím ethanolu nebo butanolu, nebo popřípadě v aromatickém rozpouštědle, jako je toluen nebo xylen při teplotě varu, případně v autoklávu při teplotě varu rozpouštědla za použití tlaku 5 MPa, reakční roztok se zahustí ve vakuu a zbytek se vyčistí krystalizaci z methanolu nebo z ethanolu, nebo pomocí chromatografie. Jako eluční činidlo slouží
- 17CZ 290098 B6 například směs methylenchloridu, methanolu, amoniaku (25 %) v objemovém poměru 85:15:1, nebo směs methylenchloridu, methanolu, amoniaku (25 %) v objemovém poměru 80:25:5.
Alternativní provádění způsobu přípravy sloučenin obecného vzorce (I), kde znamená R1 benzyloxykarbonylovou skupinu a R2 a R3 atom vodíku, je následující:
1. amiduje se skupina alfa-karboxylové kyseliny,
2. chrání se epsilon-aminová skupina Z-skupinou,
3. alfa-aminoskupina se chrání Boc-skupinou, takže vzniká selektivita vůči pozdějšímu odštěpení skupin chránících aminoskupinu,
4. odštěpí se Z-skupina z epsilon-aminoskupiny,
5. na epsilon-aminoskupinu se zavede žádaná skupina R4-CO,
6. odštěpí se Boc-skupina z alfa-aminoskupiny,
7. do alfa-aminoskupiny se zavede Z-skupina.
Získat lze další sloučeniny obecného vzorce I podle následujícího schématu 3, objasněného na způsobu přípravy sloučeniny podle příkladu 35:
Schéma 3
Stupeň 1
-18CZ 290098 B6
o
Obecný způsob přípravy sloučenin obecného vzorce I podle schématu 3.
Stupeň 1
Do aprotického nebo nepolárního organického rozpouštědla, jako je například tetrahydrofuran, dimethylsulfoxid, dimethylformamid, acetonitril, ethylacetát, dimethylacetamid, N-methylpyrrolidon, dioxan, toluen, ether, methylenchlorid nebo chloroform se přidá při teplotě -30 až 30 °C, s výhodou -20 až 20 °C a obzvláště -15 až 5 °C Z-Lys(BOC)-OH a zásada, například triethylamin, diizopropylamin, N-methylmorfolin, N-ethylpiperidin a chlorid alifatické nebo aromatické kyseliny karboxylové, například acetylchlorid, izobutyroylchlorid, izovaleroylchlorid, pivaloylchlorid, benzoylchlorid nebo 4-methoxybenzyolchlorid. Po určité době, například po 30 minutách až 3 hodinách, se přidá za intenzivního míchání roztok, případně suspenze aminu ochlazená na teplotu -10 °C v dipolámím aprotickém nebo nepolárním organickém rozpouštědle, jako je například tetrahydrofuran, dimethylsulfoxid, dimethylformamid, acetonitril, ethylacetát, dimethylacetamid, N-methylpyrrolidon, dioxan, toluen, ether, methylenchlorid nebo chloroform. Suspenze se míchá 1 až 2 hodiny při teplotě -30 až 30 °C, s výhodou -20 až 20 °C, obzvláště -15 až 5 °C. Po ukončení reakce se zásada v podobě hydrochloridu odsaje a rozpouštědlo se zahustí. Olejovitý zbytek se smíchá s aprotickým nebo s polárním organickým rozpouštědlem, jako je například ether, diizopropylether, methyl-terc.-butylether, petrolether, toluen, xylen, pentan, hexan. Roztok se míchá po určitou dobu, například 30 minut až 3 hodiny až do vysrážení bílého prášku. Sraženina se odsaje a usuší.
Stupeň 2
Z-Lys(BOC)-amid, získaný ve stupni 1, se při teplotě -20 až 30 °C, s výhodou -20 až 20 °C a obzvláště -15 až 5 °C rozpustí v trifluoroctové kyselině a míchá se po dobu 15 minut až 1 hodiny. Přebytečná kyselina trifluoroctová se odpaří a olejovitý zbytek se smíchá s dipolámím aprotickým nebo s nepolárním organickým rozpouštědlem, jako je například dimethylformamid, methylenchlorid, tetrahydrofuran, acetonitril, N-methylpyrrolidon a ethylacetát. Pak se přidá žádaná kyselina, zásada, jako například diizopropylamin, N-methylmorfolin a vhodné kopulační činidlo, jako například BOP, PyBOP, DCC v dipolámím aprotickém nebo nepolárním organickém rozpouštědle, jako je například dimethylformamid, methylenchlorid, tetrahydrofuran, acetonitril, N-methylpyrrolidon a ethylacetát. Reakce se provádí při teplotě -10 až 100 °C, s výhodou 0 až 80 °C a obzvláště 10 až 35 °C. Po 1 až 5-hodinové reakční době a po 24hodinovém stání při teplotě místnosti se reakční směs zahustí. Zbytek se vysráží organickým rozpouštědlem, jako je například izopropanol, methylenchlorid nebo ether. Surový produkt se čistí chromatografii na silikagelu.
Obecným způsobem podle stupně 1 a 2 se na základě způsobu podle schématu 3 syntetizují sloučeniny, objasněné v následující tabulce III, kde n znamená 4.
-19CZ 290098 B6
Tabulka III alfa, epsilon N-Substituované deriváty L-lysinamidu podle schématu 3 a obecného vzorce I (n znamená vždy 4)
-20CZ 290098 B6
-21 CZ 290098 B6
49 Ou. il o H U chAVí NH,
50 O
51 O.
52
53 CH,
54 Xa NH,
55 o
Příklad 35
N-[alfa-N-[Benzyloxykarbonyl]-epsilon-N-[4-[4-amidinofenyl)-amino]-4-oxobutynoyl]-Llysin-N-(3-pyridylmethyl)]ainid
Stupeň 1
N-[alfa-N-[Benzyloxykarbonyl]-epsilon-N-[terc.-butyloxykarbonyl]-L-lysin-N-(3-pyridylmethyl)]-amid
Do 60 ml tetrahydrofuranu se při teplotě -15 °C přidají 4 g (10 mmol) obchodně dostupného ZLys(Boc)-OH, lg (10 mmol) triethylaminu a 1,26 g (10 mmol) pivaloylchloridu. Po 30 minutách se za intenzivního míchání přidá na -10 °C předchlazený roztok 1,08 g (10 mmol) 3-(aminomethyl)pyridinu ve 20 ml tetrahydrofuranu. Suspenze se pak míchá 1 až 2 hodiny při teplotě -10 °C. Za nízké teploty se triethylaminhydrochlorid odsaje a návazně se odpaří tetrahydrofuran. Olejovitý zbytek se smíchá se 100 ml diethyletheru. Roztok se dále míchá až do vysrážení bílého prášku. Sraženina se odsaje a vysuší. Výtěžek je 4 g (85 % teorie).
-22CZ 290098 B6
Stupeň 2
N-[alfa-N-[BenzyIoxykarbonyl]-epsilon-N-[4-amidinofenyl)-amino]^4-oxobutynoyl]-Llysin-N-(3-pyridylmethyl)]amid
Při teplotě 0 °C se ve 20 ml trifluoroctové kyseliny (TFA) rozpustí 2 g (4,25 mmol) N-[alfa-N[benzyloxykarbonyl]-epsilon-N-[terc.-butyloxykarbonyl]-L-lysin-N-(3-pyridylmethyl)]amidu a 20 minut se míchá. Přebytečná trifluoroctová kyselina se odpaří a olejovitý zbytek se smíchá s 10 ml dimethylformamidu. Přidá se 4,6 ml (42,5 mmol) N-methylmorfolinu, 1,15 g (4,25 mmol) hydrochloridu 4-[[4-aminoiminomethyl)fenyl]amino]^l—oxomáselné kyseliny, 2,35 g (5,3 mmol) BOP a 20 ml dimethylformamidu. Reakční směs se míchá 24 hodin při teplotě místnosti. Dimethylformamid se odpaří, zbytek se digeruje dvakrát se 40 ml vody, pak se odsaje a vysuší. Surový produkt se vyčistí chromatografii na silikagelu za použití elučního činidla 89b (70% HCC13, 40% MeOH, 10% CH3COCFNa+ v 1 molu na litr NH4OH 25%). Výtěžek je 340 mg (14 % teorie).
Obdobně jako podle příkladu 35 se získají sloučeniny podle příkladu 36 až 55.
Tabulka IV
Teploty tání sloučenin podle příkladů 35 až 55
Příklad t. tání [°C] Příklad t. tání [°C] Příklad t. tání [°C]
35 190-198 42 190 49 189
36 218-220 43 198 50 197
37 209 44 213 51
38 195 45 52
39 189-191 46 175 53
40 215-220 47 196 54 194
41 183 48 217 55
12 (olej) 22 (olej) 32 155
13 232-236 23 syrup. zbytek 33 (olej)
14 194-198 24 (olej) 34 (olej)
Podle následujícího schématu 4 a 5 se připraví další sloučeniny obecného vzorce I
-23CZ 290098 B6
Schéma 4: Reakce s karboxylovými kyselinami
OH
karbodiimki nebo BOP S i í (HPLC)
Schéma 5: Reakce s estery chlormravenčí kyseliny
Schotten*Bauaumpodm f nky
kartxxiiniid nebo BOP « i Stttn í l(HPl€)
ίο 1. Acylace karboxylovými kyselinami nebo estery chlormravenčí kyseliny podle schématu 4 a 5
Na výsledný amid se nechá reagovat H-Lys(Boc)-NH2 při teplotě místnosti v dipolámím rozpouštědle (dimethylformamid, dimethylsulfoxid) v přítomnosti zásady (DIPEA, NMM) a kopulačního reakčního činidla (DCC, DIC, EDCI) s karboxylovou kyselinou. Po odstranění rozpouštědla se zbytek smísí s vodou a obtížně rozpustný surový produkt se odsaje. Produkt se může čistit krystalizací z alkoholu (například z methanolu, ethanolu nebo izopropanolu) nebo esteru (například ethylacetátu) nebo ketonu (například methylethylketonu).
-24CZ 290098 B6
Reakce H-Lys(Boc)-NH2 s chloridy karboxylové kyseliny vede ve vodném alkalickém roztoku (podmínky Schotten-Baumann) s 90 až 95% výtěžky k žádaným derivátům. Surový produkt se izoluje odsáním a vyčistí se překrystalováním z alkoholu (methanol/ethanol), případně z ethylacetátu nebo z methylethylketonu.
2. Odštěpení chránící Boc-skupiny TFA:
Odštěpení chránící Boc-skupiny při teplotě místnosti ve směsi dichlormethanu a trifluoroctové kyseliny (2:1) je po přibližně 60 minutách kvantitativní. Izolovaný surový produkt R-Lys-NH2 rychle dále reaguje bez dalšího čištění.
3. Acylace hydrochloridu 4-((4-(aminoiminomethyl)fenyl)amino)-4-oxomáselné kyseliny:
Reakce s další karboxylovou kyselinou (R4) se provádí v dipolámích aprotických rozpouštědlech (dimethylformamid, dimethylsulfoxid) v přítomnosti zásady (NMM, DIPEA) skopulačními reakčními činidly, jako EDCI, Bop nebo PyBop. Po odstranění rozpouštědla se za přidání vody produkt vysráží. Čištění se provádí preparativní HPLC na čistém sloupci RPig- za použití jako elučního činidla směsí vody, acetonitrilu a trifluoroctové kyseliny. Produkt se vysráží jako sůl TFA.
Podle tohoto obecného předpisu, jehož základem je schéma 4 a 5, se syntetizují sloučeniny, které objasňují příklad 56 a navazující tabulka V.
Příklad 56
Do . 120 ml vysušeného, odplyněného Ν,Ν-dimethylformamidu (DMF) se přidá při teplotě místnosti 32 mmol Z-lysinamidhydrochloridu a 32 mmol hydrochloridu 4-((4-(aminomethyl)fenyl)amino-4-oxomáselné kyseliny. Edukty se za mícháni rychle rozpustí; po přidání 104 mmol diizopropylethylamidu a 40 mmol BOP se směs míchá 16 hodin při teplotě místnosti.
Na rotační odparce se odtáhne rozpouštědlo a přebytečná DIPEA při teplotě lázně 50 až 55 °C a za tlaku 1 MPa. Olejovitý zbytek se smísí s 250 ml vody, homogenizuje se v ultrazvukové lázni a ochladí se. Vysrážený konečný produkt se odsaje v nuči se promyje vodou.
Po vysušení chloridem vápenatým ve vakuu se získá přibližně 16 g béžového prášku o čistotě přibližně 90 % (HPLC) v podobě hydrochloridové soli.
K přípravě odpovídajícího trifluoracetátu se produkt suspenduje ve 100 ml vody a smísí se s 32 mmol (2,45 ml) kyseliny trifluoroctové (99 %). K odstranění přebytečné kyseliny se směs evakuje na rotační odparce a nato se vodná suspenze lyofilizuje. Po překrystalování z alkoholu (EtOH/MeOH) může být získaný produkt k lepší rozpustnosti znovu lyofllizován. Výtěžek je 5,26 g. Teplota tání 210 až 213 °C.
‘H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, delta v ppm):
10,47, s, 1H anilid, 9,14 a 8,82 s, NHamidin, 7,82 m, 1H, Lys-epsilon-NH, 7,79 a 7,46,2s, arom.H, 7,27 a 6,93 2s,2H, CONH2, 7,20 d, 1H, urethanNH, 5,0, s, 2H, benzyl.H, 3,89, m, 1H, Calfa-H, 3,0 a 2,58 a 2,40, 3m, celkem 6H, alifat.H, 1,60-1,20,4m, celkem 6H, zbytek alifat.H.
-25CZ 290098 B6
-26CZ 290098 B6
Tabulka V alfa. epsilon-N-Substituované deriváty L-lysinamidu podle schématu 4 a 5 a obecného vzorce I (n znamená vždy 4)
-27CZ 290098 B6
-28CZ 290098 B6
74
75
76
77 o o
78 -^0^0
79
80
81
82
H/H /CH2A<vf CH2 \=_/ YíHj
Tabulka VI
Teploty tání sloučenin podle příkladů 56 až 82
Příklad t. tání [°C] Příklad t. tání [°C] Příklad t. tání [°C]
56 210-213 65 218-222 74 191-193
57 220-223 66 216-219 75 186-188
58 213-215 67 235-238 76 220-222
59 223-226 68 až218 77 210-215
60 až 233 69 205-208 78 až 223
61 až 237 70 168-170 79 až 226
62 až 221 71 197-202 80 194-197
63 až 220 72 221-226 81 215-222
64 230-236 73 225-228 82 219-222
Poznámka: Údaj „až“ naznačuje, že substance po vysušení vymražením tvoří amorfní pěnu s odpovídajícími fyzikálními vlastnostmi. Teplota tání přísně vzato neexistuje, spíše pomalé slinování až do ztekucení.
-29CZ 290098 B6
Soli sloučenin obecného vzorce I
Sloučeniny podle vynálezu mohou být ve formě adiční soli s kyselinou, například jako soli minerálních kyselin, jako například kyseliny chlorovodíkové, sírové, fosforečné, soli organických kyselin, jako například kyseliny octové, trifluoroctové, mléčné, malonové, maleinové, filmařové, glukonové, glukuronové, citrónové, embonové, methansulfonové, hydroxyethansulfonové, pyrohroznové a jantarové.
Jak sloučeniny obecného vzorce I, tak jejich soli jsou biologicky aktivní. Sloučeniny obecného vzorce I se mohou podávat ve volné formě nebo jako soli s fyziologicky vhodnými kyselinami. Aplikace může být perorální, parenterální, intravenózní, transdermální nebo inhalační.
Vynález se dále týká farmaceutických prostředků s obsahem alespoň jedné sloučeniny obecného vzorce I nebo její soli s fyziologicky vhodnými anorganickými nebo organickými kyselinami a případně s farmaceuticky použitelnými nosiči a/nebo ředidly, případně s pomocnými látkami.
Příklad 83
Vazební afinity cetrorelixu, příklad 1, příklad 2, příklad 5, příklad 35 a příklad 56 na lidském receptoru LH-RH (Cetrorelix: Ac-D-Na(2)-D-p-Cl-Phe-D-Pal(3)-Ser-Tyr-D-Cit-Leu-Arg-Pro-D-Ala-NH2)
Způsob stanovení vazební afinity (disociační konstanty Kd):
Vazební afinita se určuje kompetičně vazebním testem („displacement binding experiment“, Becker a kol. Eur. J. Biochem. 231, str. 535 až 543,1995). Jako radiaktivně značeného ligandu se používá [125J] Cetrorelix (specifická aktivita 5-10xl05 dpm/pmol; rozpuštěný v objemově 20 % acetonitrilu, 0,2% hm./obj. albuminu, 0,1% hm./obj. TFA, objemově přibližně 80% vody) Vazební schopnost jodovaného peptidu je 60 až 85 %. Jako neznačených testovacích sloučenin se použije sloučenina podle příkladu 1, příkladu 2 a příkladu 56 v roztoku. Látky se nasazují v koncentracích 0,01 nM až 1000 nM (Cetrorelix, příklad 1, příklad 2) případně 0,01 μΜ až 10 μΜ (příklad 5, příklad 35, příklad 56).
Buňky jednobuněčného klonu L3,5/78 vytěsňujícího lidský receptor LH-RH, použité pro vazební test, se oddělí pomocí PBS/EDTA (PBS bez Ca2+/Mg2+/lmM EDTA) od nekonfluentní obrostlé slupky buněčné kultury, určí se počet buněk v odpovídající hustotě buněk, resuspendují se v inkubačním médiu (modifikovaném Eagle Medium Dulbecco s 4,5 g/1 glukózy, lOmM Hepes, pH7,5, 0,5% hmotn./obj. BSA, lg/1 Bacitracinu, 0,1 g/1 SBTI, 0,1 % hmotn./obj. NaN3). Do speciálních 400 μΐ reakčních nádob (Fa. Renner typ Beckman) se předloží 200 μΐ směsi silikon/parafínový olej (84/16 obj. %) a na to se pipetuje 50 μΐ buněčné suspenze (2,5x105 buněk). K buněčné suspenzi na vrstvě silikon/parafínový olej se pak okamžitě přidá 50 μΐ vazebního média s [125J] Cetrorelix a testované sloučeniny v odpovídající koncentraci. Nyní se za otáčení ve vytápěné skříni při teplotě 35 °C 60 minut inkubuje. Po této operaci následuje odstředění v Heraeus Biofuge 15 v rotoru HTA 13,8 2 minuty při 9000 otáčkách za minutu (při teplotě místnosti). Vlivem vrstvy silikon/parafínový olej přitom buňky peletují a tak se od vazebního média oddělí. Po odstředění se reakční nádoby náhle zmrazí v tekutém dusíku a špička reakční nádoby (buněčná peleta) se kleštěmi odstřihne a špička s buněčnými peletami (vázaný ligand [125J] Cetrorelix) a také přebytek buněčné pelety (vázaný ligand [125J] Cetrorelix) i přebytek buněčné pelety (nevázaný, volný ligand [125J] Cetrorelix) se převedou do čítači trubičky. Ke stanovení nespecifické vazby (Bo) se kompetitor nepřidává. Ke stanovení nespecifické vazby se přidá 1 μΜ neznačeného Cetrorelixu ke konkurenci. Nespecifická vazba je rovna nebo je menší než 10 % celkově vytvořené Bo a je tedy nízká. Ke kvantifikaci slouží
-30CZ 290098 B6 gama-čítač, vyhodnocení s programem EBDA/Ligand V3.0 (McPherson, J. Pharmacol. Methods 14, str. 213 až 228, 1985). Vynesení do grafu účinku dávky umožňuje posouzení koncentrace IC5o (koncentrace, která způsobí 50 % inhibici reakce na receptoru) a program EBDA/Ligand z toho vypočte disociační konstantu Kd [nMJ.
Výsledek: Z konkurenčních křivek (viz obr. 1) je patrno, že všechny testované sloučeniny s radioaktivně značeným ligandem [125J] Cetrorelix) konkurují vazbou na lidský receptor LHRH. Vynesena je vždy vazba (v % celkové vazby Bo) vůči koncentraci kompetitoru. Pro sloučeniny vyznačené na obr. 1 bylo možno vypočítat následující vazební afinity vypočtené jako disociační konstanta Kd[nM]: Cetrorelix (SB-75): 0,214 nM, příklad 1: 0,305 nM, příklad 2: 0,104 nM, příklad 5: 108 nM, příklad 35: 300 nM a příklad 56: 1082 nM. Vazební afinity jako střední hodnota různých stanovení jsou udány v tabulce VIL
Příklad 84
Antagonistické působení sloučeniny podle příkladu 2 a podle příkladu 56 ve funkční zkoušce na lidském receptoru LH-RH
Způsob stanovení IP3(D-myo-l,3,5-trifosfát)u: Subkonfluentní kultura lidského receptoru LHRH exprimovaného buněčného klonu /L 3,5/78) se promyje jednou PBS, buňky se uvolní PBS/EDTA a buněčná suspenze se peletuje. Buňky se resuspendují v inkubačním médiu (modifikované eagle médium Dulbeco se 4,5 g/1 glukózy, 10 mM Hepes, pH 7,5,0,5 % hmotn./obj. BSA, 5 mM LiCl, 1 g/1 bacitracinu, 0,1 g/1 SBTI), rozdělí se na podíly v 1,5 ml reakčních nádobách a 30 minut se předinkubují při teplotě 37 °C. Potřebuje se 4xl06 buněk v objemu 500 μΐ na měřicí bod. Po předinkubační operaci následuje přísada LH-RH (zásobní roztok 0,5 mM v 10 nM Tris, pH7,5, lmM dithiotreitholu, 0,1 hmotn./obj. BSA/Bachem Art#H4005) k suspenzi buněk v konečné koncentraci 10 nM. Účinek antagonistů se testuje současným pořidáváním odpovídající koncentrace (například 0,0316, 0,1,0,316 atd. až 100 mM pro příklad 2). Jako negativní kontrola se inkubují buňky bez přidaného LH-RH. Po 15 minutové inkubaci při teplotě 37 °C se vytvořený IP3 izoluje z buněk extrakcí kyselinou trifluoroctovou (TCA). Přidá se 500 μΐ ledově studeného 15% (hmotn./obj.) roztoku TCA do buněčné suspenze. Vznikající sraženina se peletuje 15-minutovým odstředěním při teplotě 4 °C, při 2000xg v bioodstředivce Heraeus 15R. Nadbytek 950 μΐ se extrahuje třikrát 10 objemy studeného vodou nasyceného diethyletheru v 15 ml nádobě stáním na ledu. Po poslední extrakční operaci se hodnota pH roztoku nastaví na 7,5 0,5M roztokem hydrogenuhličitanu sodného.
Stanovení koncentrace IP3 v buněčných extraktech se provádí pomocí senzitivního kompetitivního vazebního testu s vazebním proteinem IP3, značeným [3H]-IP3 a neznačeným IP3. K tomu se používá zkušebního kitu Amersham (TRK 1000), s provedením podle popsaného testovacího protokolu. Po provedení příslušných operací se nakonec přidá 2 ml scintilátoru pro vodné vzorky (Rotiszint Ecoplus), suspendovaná peleta s vázaným [3H]-IP3 se s ním opatrně smísí a měří se beta-scintilačním čítačem. Množství buněčných IP3 se vypočte pomocí standardní křivky a sestaví se křivka účinnosti dávky. Hodnotu IP3 lze odhadnout z inflexního bodu křivky.
Výsledek: Na obr. 1 jsou znázorněny odpovídající křivky účinnosti dávky pro peptidické antagonisty příklad 2 (obr. 2) i peptidomimetikum příklad 56 (obr. 3). Simuluje se lOnM LH-RH a určí se brzdění tvorby IP3 v závislosti na koncentraci substance. Pro příklad 2 a příklad 56 nemohla být určena žádná agonistická aktivita, tedy látky samotné nevedou k simulaci syntézy IP3. Ve zde neuváděných kontrolních pokusech se ukázalo, že netransfektované buňky nemohou být simulovány LH-RH k syntéze IP3. Ještě měřitelné nejvyšší koncentrace IP3 odpovídají koncentracím nestimulovaných buněk. Jde tedy u příkladu 2 a příkladu 56 o funkční antagonisty LH-RH. Látky se však liší v potenci. Za zvolených zkušebních podmínek je IC50 podle příkladu 2 přibližně 0,4 nM, IC50 podle příkladu 56 je naproti tomu přibližně 4 pm. Tyto aktivity jsou ve
-31 CZ 290098 B6 velmi dobrém vztahu s vazebními aktivitami Kd = 0,109 mM v případě příkladu 2 a Kd=l,08 μΜ v případě příkladu 56 zjištěnými konkurenčním vazebním testem [’25J] Cetrorelix.
Příklad 85
Hormony potlačují účinek sloučenin podle příkladu 1, příkladu 2 a příkladu 56 u zdravých krysích samců
Ke stanovení potlačení testosteronu v krvi zdravých krysích samců se injektuje látka subkutánně do pravé chlopně. Dávkování je v případě sloučeniny podle příkladu 1 a 2 1,5 mg/kg, v případě sloučeniny podle příkladu 56 10 mg/kg. Ke kontrole hodnot testosteronu se zvířatům odebírá 300 μΐ krve z žíly véna sublingualis v časových úsecích 0,2,4, 8 (pouze v případě příkladu 56), 24,48,72 a 96 hodin a pak každý 3. den až do konce potlačení. Potlačení pod 1 ng/ml testosteronu vydrželo po dávce sloučeniny podle příkladu 1 u jednoho zvířete až 264 hodin, u dvou zvířat až 336 hodin a u jednoho zvířete 384 hodin (obr. 4). Po dávce sloučeniny podle příkladu 2 byla hladina testosteronu potlačena u jednoho zvířete 408 hodin, u 4 zvířat až 648 hodin (obr. 5). Příklad 56 (10 mg/kg s.c.) potlačil hladinu testosteronu u všech 5 zvířat již po 2 hodinách a tento účinek si podržel až 8 hodin. Při následujícím zkušebním okamžiku (24 hodin) hodnoty testosteronu opět vzrůstaly (obr. 6).
Tabulka VII
Biologické hodnoty
Vazební afinita na lidském receptoru LH-RH (vyjádřená jako disociační konstanta Kd[nM]); vyhodnocení analýzou EBDA/ligand analytickým programem. Udány jsou střední hodnoty z různých pokusů (počet pokusů v závorkách) i potlačení testosteronu in vivo, uvolňování histaminu in vivo a rozpustnost ve vodě v porovnání s SB-75:
Látka Afinita lidský LH-RHrecept. [nmotl] (l,5mg/kg jedna dávka) potlačení testosteronu u krys [h] (ICm) uvolnžní histaminu [pg/ml] HjO rozpustnost [mg/ml]
Cetrorelix SB-75 0,202 (10) 144 9,7 9
Příklad 1 0,306 (2) 336 31,9 27
Příklad 2 0,109 (2) 648 17,1 23
Příklad 3 0,170(2) 864 n.b.x n.b.
Přiklad 4 0,206(2) 696 n.b. n.b.
Příklad 5 108(2) - - -
Příklad 35 300 (2) - - -
Příklad 56 1082 (2) - - -
x pro obtížnou rozpustnost nestanovitelné
Průmyslová využitelnost
Sloučenina pro výrobu farmaceutických prostředků k ošetřování nádorů závislých na hormonech, zvláště karcinomu prostaty nebo prsu a pro ošetřování nezhoubných indikací, jejichž ošetření vyžaduje potlačení hormonu LH-RH.

Claims (17)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Derivát peptidu obecného vzorce I
    R2
    R1 - CO - NH - CH - CO - N - R3
    CCHain
    NH
    CO-R4 kde znamená:
    n číslo 3 nebo 4,
    R1 skupinu fenylalkylovou s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, naftylalkylovou s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, fenantrylkarbonylalkylovou s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, fenylalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu nebo naftylalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, přičemž všechny tyto skupiny jsou popřípadě substituovány atomem halogenu, alkoxyskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, cinnolinylovou skupinou nebo fenylovou skupinou,
    R2 a R3 na sobě nezávisle atom vodíku, skupinu alkylovou s 1 až 4 atomy uhlíku, fenylalkylovou s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu nebo pyridylalkylovou s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, přičemž všechny tyto skupiny jsou popřípadě substituovány alkoxyskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, aminoskupinou nebo karbamoylovou skupinou,
    R4 skupinu obecného vzorce Π
    --- (CH2)p --- CO --- NR6
    Η (II>, kde znamená:
    p celé číslo 1 až 4 a
    R6 skupinu fenylovou popřípadě substituovanou amidinoskupinou, kyanskupinou, atomem halogenu, benzyloxyskupinou, alkoxyskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku nebo alkylovou skupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo znamená
    -33CZ 290098 B6 (1»),
    R4 kruh obecného vzorce III
    H kde znamená:
    q číslo 1 nebo 2, a chirální uhlíkové atomy mohou být v konfiguraci D nebo L a jeho soli s farmaceuticky přijatelnými kyselinami.
  2. 2; Derivát peptidu podle nároku 1, kterým je alfa-N-[benzyloxykarbonyl]-epsilon-N-[5-[(4amidinofenyl)amino]-5-oxo-pentanoyl]-L-lysinamidtrifluoracetát.
  3. 3. Derivát peptidu podle nároku 1, kterým je alfa-N-[benzyloxykarbonyl]-epsilon-N-[5-[(4amidinofenyl)amino]-4-oxo-butanoyl]-L-lysinamidtrifluoracetát.
  4. 4. Derivát peptidu podle nároku 1, kterým je alfa-N-[benzyloxýkarbonyl]-epsilon-N-[5-[(4amidinofenyl)amino]-4-oxo-butanoyl]-L-lysin-N-(3-pyridylmethyl)amidtrifluoracetát.
  5. 5. Derivát peptidu podle nároků 1 až 4 obecného vzorce I v podobě embonátové soli.
  6. 6. Derivát peptidu podle nároku 1 obecného vzorce V
    Ac-D-Nal(2)1-D(pCl)Phe2-D-Pal(3)3-Ser4-Tyr5-D-Xxx6-Leu7-Arg8-Pro9-D-Ala10-NH2 (V), kde znamená:
    Ac acetyl
    D-Nal(2) 3-(2-naftyl)-D-alanin
    D-Pal(3) 3-(3-pyridyl)-D-alanin
    D-Xxx skupinu aminokyseliny obecného vzorce VI
    -34CZ 290098 B6
    - HN - CH - CO - O CCH2)n
    NH
    CO - R4
    CVI), kde n a R4 mají význam uvedený v nároku 1 a jeho soli s farmaceuticky přijatelnými kyselinami.
  7. 7. Derivát peptidu podle nároku 6 obecného vzorce V, kde znamená Xxx [epsilon-N-4-(4amidinofenyl)amino-l ,4-dioxobutyl]lysylovou skupinu.
  8. 8. Derivát peptidu podle nároku 6 obecného vzorce V, kde znamená Xxx [epsilon-N(imidazolidin-2-on-4-yl)formyl] lysylovou skupinu.
  9. 9. Derivát peptidu podle nároků 6 až 8 obecného vzorce V v podobě embonátové soli.
  10. 10. Způsob přípravy derivátu peptidu podle nároku 6 obecného vzorce V, kde jednotlivé symboly mají v nároku 6 uvedený význam a jeho farmaceuticky přijatelných solí, vyznačujícísetím,že:
    (a) se zavádí do alfa-aminoskupiny a do skupiny karboxylové kyseliny D-lysinu nebo Domithinu vhodné chránící skupiny, (b) nechává se reagovat D-lysin nebo D-omithin schráněnými skupinami skarboxylovou kyselinou obecného vzorce VII
    R4-COOH (VII), kde R4 má shora uvedený význam, (c) odštěpují se chránící skupiny ze skupiny alfa-karboxylové kyseliny sloučeniny získané ve stupni b) k začlenění do polohy 6 operací (h), (d) váže se D-alanin s chráněnou aminoskupinou na pevný nosič v podobě pryskyřice, (e) odštěpují se chránící skupiny z aminoskupiny alaninu, (f) nechává se reagovat alanin vázaný na pevném nosiči s prolinem, s chráněným atomem dusíku, (g) odštěpuje se chránící skupina z atomu dusíku prolinu, (h) opakuje se operace f) a g) s aminokyselinami 1 až 8 obecného vzorce V v pořadí od 8 k 1 za použití modifikovaného D-lysinu nebo D-omithinu popsaného v operaci (c) pro polohu 6,
    -35CZ 290098 B6 (i) odštěpuje se sloučenina, získaná v operaci (h), od nosiče a případně se čistí, zvláště vysokotlakou chromatografii, (j) popřípadě se sloučenina nechává reagovat s farmaceuticky vhodnou kyselinou, s výhodou s kyselinou embonovou.
  11. 11. Způsob přípravy derivátu peptidu podle nároku 6 obecného vzorce V, kde jednotlivé symboly mají v nároku 6 uvedený význam a jeho farmaceuticky přijatelných solí, vyznačující se tím, že:
    (a) se váže D-alanin s chráněnou aminoskupinou na nosič vhodný k syntéze v pevné fázi, (b) odštěpí se chránící skupina z aminoskupiny alaninu, (c) nechává se reagovat alanin vázaný na pryskyřici s prolinem s chráněným atomem dusíku, (d) odštěpí se chránící skupina z atomu dusíku prolinu, (e) opakuje se operace c) a d) s aminokyselinami 1 až 8 obecného vzorce V v pořadí od 8 k 1, (f) odštěpuje se ve stupni e) získaná sloučenina od nosiče, (g) nechává se reagovat s karboxylovou kyselinou obecného vzorce VII
    R4-COOH (VII), kde R4 má shora uvedený význam, (h) popřípadě se sloučenina nechává reagovat s farmaceuticky vhodnou kyselinou, s výhodou s kyselinou embonovou.
  12. 12. Způsob přípravy derivátu peptidu podle nároku 6 obecného vzorce V, kde jednotlivé symboly mají v nároku 6 uvedený význam a jeho farmaceuticky přijatelných solí, vyznačující se tím, že:
    (a) se váže D-alanin s chráněnou aminoskupinou na nosič vhodný k syntéze v pevné fázi, (b) odštěpí se chránící skupina z aminokyseliny alaninu, (c) nechává se reagovat alanin vázaný na pryskyřici s prolinem s chráněným atomem dusíku, (d) odštěpí se chránící skupina z atomu dusíku prolinu, (e) opakuje se operace c) a d) s aminokyselinami 6 až 8 obecného vzorce V v pořadí od 8 k 6, (f) odštěpuje se skupina chránící epsilon-aminoskupinu D-lysinu nebo D-omithinu v poloze 6 a provádí se reakce s karboxylovou kyselinou obecného vzorce VII
    R4-COOH (VU), kde R4 má shora uvedený význam, (g) odštěpuje se chránící skupina z alfa-aminoskupiny D-lysinu nebo D-omithinu,
    -36CZ 290098 B6 (h) opakuje se operace c) a d) s aminokyselinami 1 až 5 obecného vzorce IV v pořadí od 5 k 1, (i) odštěpí se sloučenina získaná v operaci (h) od pryskyřice a čistí se zvláště vysokotlakou chromatografii, (j) popřípadě se sloučenina nechává reagovat s farmaceuticky vhodnou kyselinou, s výhodou kyselinou embonovou.
  13. 13. Způsob podle nároků 10ažl2, vyznačující se tím, že se jakožto karboxylové kyseliny obecného vzorce VII používá N-(4-amidinofenyl)amino-4-oxomáselné kyseliny.
  14. 14. Způsob podle nároků 10ažl2, vyznačující se tím, že se jakožto karboxylové kyseliny obecného vzorce VII používá imidazolidin-2-on-4-karboxylové kyseliny.
  15. 15. Způsob podle nároků 10ažl4, vyznačující se tím, že se pro přípravu farmaceuticky vhodné soli používá embonové kyseliny.
  16. 16. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje jako účinnou látku derivát peptidu podle nároků 1 až 9.
  17. 17. Použití derivátu peptidu podle nároků 1 až 9 pro výrobu farmaceutických prostředků k ošetřování nádorů závislých na hormonech, zvláště karcinomu prostaty nebo prsu a pro ošetřování nezhoubných indikací, jejichž ošetření vyžaduje potlačení hormonu LH-RH.
CZ19981358A 1995-11-28 1996-11-14 Derivát peptidu, způsob jeho přípravy, jeho použití a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje CZ290098B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19544212A DE19544212A1 (de) 1995-11-28 1995-11-28 Neue LH-RH-Antagonisten mit verbesserter Wirkung

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ135898A3 CZ135898A3 (cs) 1998-09-16
CZ290098B6 true CZ290098B6 (cs) 2002-05-15

Family

ID=7778552

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ19981358A CZ290098B6 (cs) 1995-11-28 1996-11-14 Derivát peptidu, způsob jeho přípravy, jeho použití a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje

Country Status (29)

Country Link
EP (1) EP0876337B1 (cs)
JP (1) JP2000501083A (cs)
KR (1) KR100460165B1 (cs)
CN (1) CN1087283C (cs)
AR (1) AR004354A1 (cs)
AT (1) ATE289588T1 (cs)
AU (1) AU706546B2 (cs)
BG (1) BG64386B1 (cs)
BR (1) BR9611760A (cs)
CA (1) CA2238570A1 (cs)
CZ (1) CZ290098B6 (cs)
DE (2) DE19544212A1 (cs)
DK (1) DK0876337T3 (cs)
EE (1) EE04318B1 (cs)
ES (1) ES2238704T3 (cs)
HU (1) HUP9901656A3 (cs)
IL (1) IL119703A (cs)
IS (1) IS1914B (cs)
MX (1) MX9804120A (cs)
NO (1) NO311023B1 (cs)
NZ (1) NZ330521A (cs)
PL (1) PL186872B1 (cs)
PT (1) PT876337E (cs)
RU (1) RU2163910C2 (cs)
SI (1) SI0876337T1 (cs)
SK (1) SK282760B6 (cs)
UA (1) UA65531C2 (cs)
WO (1) WO1997019953A2 (cs)
ZA (1) ZA969987B (cs)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE19911771B4 (de) * 1999-03-17 2006-03-30 Zentaris Gmbh LHRH-Antagonist, Verfahren zu seiner Herstellung und seiner Verwendung
US7005418B1 (en) 1999-09-23 2006-02-28 Zentaris Gmbh Method for the therapeutic management of extrauterine proliferation of endometrial tissue, chronic pelvic pain and fallopian tube obstruction
PT1268522E (pt) 2000-03-14 2008-12-22 Aeterna Zentaris Gmbh Antagonistas da lhrh, a sua preparação e utilização como medicamento
SE0100567D0 (sv) * 2001-02-20 2001-02-20 Astrazeneca Ab Compounds
SE0104462D0 (sv) * 2001-12-29 2001-12-29 Carlbiotech Ltd As Peptide purifcation (Peptidrening)
CN104086632A (zh) * 2014-08-05 2014-10-08 杭州诺泰制药技术有限公司 一种制备西曲瑞克的方法

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5300492A (en) * 1988-02-10 1994-04-05 Tap Pharmaceuticals LHRH analogs
US5110904A (en) * 1989-08-07 1992-05-05 Abbott Laboratories Lhrh analogs
US5140009A (en) * 1988-02-10 1992-08-18 Tap Pharmaceuticals, Inc. Octapeptide LHRH antagonists
CN1036343C (zh) * 1990-11-10 1997-11-05 天津市计划生育研究所 新促黄体生成素释放激素拮抗类似物的制备方法
IL101074A (en) * 1991-03-14 1997-09-30 Salk Inst For Biological Studi GnRH ANALOGS AND THEIR PREPARATION
DK0593491T3 (da) * 1991-04-25 1997-03-17 Romano Deghenghi Luteiniseringshormonfrigørende hormonantagonistpeptider
US5480969A (en) * 1992-09-15 1996-01-02 The Administrators Of The Tulane Educational Fund Antagonists of LHRH
WO1994013313A1 (en) * 1992-12-04 1994-06-23 Abbott Laboratories 6-position modified decapeptide lhrh antagonists
PT683792E (pt) * 1992-12-18 2002-03-28 Abbott Lab Antagonistas de lhrh possuindo residuos aminoacilo modificados nas posicoes 5 e 6
IL108509A0 (en) * 1993-02-22 1994-05-30 Salk Inst For Biological Studi GnRH antagonist peptides
US5413990A (en) * 1993-08-06 1995-05-09 Tap Pharmaceuticals Inc. N-terminus modified analogs of LHRH
CA2167834A1 (en) * 1993-08-06 1995-02-16 Fortuna Haviv N-terminus modified analogs of lhrh
RU2074191C1 (ru) * 1994-06-08 1997-02-27 Российско-германское совместное предприятие "Константа" Способ синтеза дез-гли 10, /d-лей 6/ lh-rh-этиламида

Also Published As

Publication number Publication date
IL119703A (en) 2001-04-30
NO982366L (no) 1998-05-25
CN1202882A (zh) 1998-12-23
DK0876337T3 (da) 2005-05-09
EE04318B1 (et) 2004-06-15
ATE289588T1 (de) 2005-03-15
IS4733A (is) 1998-05-05
MX9804120A (es) 1998-09-30
KR19990071864A (ko) 1999-09-27
BG64386B1 (bg) 2004-12-30
BG102514A (en) 1999-04-30
DE59611201D1 (de) 2005-03-31
EP0876337B1 (de) 2005-02-23
ZA969987B (en) 1997-06-17
SI0876337T1 (en) 2005-06-30
NZ330521A (en) 1999-01-28
ES2238704T3 (es) 2005-09-01
UA65531C2 (en) 2004-04-15
IL119703A0 (en) 1997-02-18
PT876337E (pt) 2005-06-30
BR9611760A (pt) 1999-10-05
NO311023B1 (no) 2001-10-01
NO982366D0 (no) 1998-05-25
PL326977A1 (en) 1998-11-09
SK282760B6 (sk) 2002-12-03
DE19544212A1 (de) 1997-06-05
SK62998A3 (en) 1999-07-12
PL186872B1 (pl) 2004-03-31
RU2163910C2 (ru) 2001-03-10
WO1997019953A3 (de) 1997-08-28
HUP9901656A3 (en) 2001-10-29
AU706546B2 (en) 1999-06-17
JP2000501083A (ja) 2000-02-02
EP0876337A2 (de) 1998-11-11
HUP9901656A2 (hu) 1999-08-30
HK1016999A1 (en) 1999-11-22
WO1997019953A8 (de) 2002-09-26
AU1867097A (en) 1997-06-19
CN1087283C (zh) 2002-07-10
EE9800165A (et) 1998-12-15
CA2238570A1 (en) 1997-06-05
CZ135898A3 (cs) 1998-09-16
IS1914B (is) 2004-02-03
WO1997019953A2 (de) 1997-06-05
AR004354A1 (es) 1998-11-04
KR100460165B1 (ko) 2005-06-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU618118B2 (en) Neuropeptide agonists
US20060281685A1 (en) Methods of treatment using novel lhrh antagonists having improved solubility properties
US5942493A (en) LH-RH antagonists having improved action
CZ290098B6 (cs) Derivát peptidu, způsob jeho přípravy, jeho použití a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje
SK14332002A3 (sk) Antagonisty LHRH, ich výroba a použitie ako liečiv
TW379216B (en) Novel LH-RH antagonists having improved action, harmaceutical composition comprising the same and process for preparing the same
JP3040166B2 (ja) ノナペプチドのボンベシン拮抗薬
HK1016999B (en) Novel lh-rh antagonists having improved action

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20051114