CZ288076B6

CZ288076B6 - Tricyklické aminy a meziprodukty pro jejich přípravu

Info

Publication number: CZ288076B6
Application number: CZ19992388A
Authority: CZ
Inventors: Gordon L. Bundy
Original assignee: Pharmacia & Upjohn Company
Priority date: 1997-01-08
Filing date: 1997-12-19
Publication date: 2001-04-11
Also published as: CN1239961A; CN1128798C; NO312463B1; AU8655498A; RU2200737C2; ES2193424T3; ATE233763T1; SK283378B6; NO993359L; PL334451A1; NO993359D0; DE69719563D1; WO1998042708A3; HUP0003692A2; KR20000069940A; PT964865E; EP0964865A2; JP2002511061A; CZ238899A3; SK90199A3

Abstract

Tricyklické aminy obecného vzorce IV a jejich soli použitelné při léčení astmatu a meziprodukty pro jejich přípravu.ŕ

Description

Oblast techniky

Farmaceuticky aktivní tricyklícké aminy podle vynálezu jsou užitečné jako farmaceutika k léčení mnoha nemocí a zranění.

Dosavadní stav techniky

Mezinárodní publikace W092/025000-A ukazuje, že 2-fenylindolové deriváty mohou být účinné při léčení astmatu, alergických onemocnění, trombóz a ischemií.

Časopis J. Heterocyclic. Chem., 24, 425 (1987) popisuje pyrrolopyrimidiny, kde amino skupiny na pyridinovém skeletu jsou volné a nesubstituované, zatímco sloučeniny podle vynálezu jsou substituované aminopyrrolopyrimidiny.

Mezinárodní publikace WO91/04254 ukazuje pyrrolo[2,3-d]pyrimidiny, kde skupiny substituované na pyrrolový kruh jsou jednoduché. Ve dvou z pozic je skupina -H, halogen nebo alkyl. Na třetí pozici je -H, alkyl nebo aralkyl.

Mezinárodní publikace W093/20078 vycházející z PCT/US93/02188 a mezinárodní publikace WO96/26941 vycházející z PCT7US96/02397 popisují různé pyrimido[4,5-b]indoly, které mají farmaceutické užití. Vynález vychází z mezinárodních publikací W093/20078 a WO96/26941.

Podstata vynálezu

Uvedeny jsou tricyklícké aminy obecného vzorce IV

kde Rm a Ri_₂ jsou spojeny s atomem dusíku, na který jsou navázány tak, aby tvořily heterocyklický kruh vybraný ze skupiny: 1-pyrrolidinyl, 1—piperidyl a 4-morfolinyl;

kde R₂_i a R₂_₂ jsou spojeny s atomem dusíku, na který jsou navázány tak, aby tvořily heterocyklický kruh vybraný ze skupiny: 1-pyrrolidinyl, 1-piperidyl a 4-morfolinyl s výhradou, že heterocyklický kruh R]_i/Ri_₂ je stejný jako R₂_i/R₂_₂;

-1 CZ 288076 B6 kdenijelaž3;

kde Rí_i je:

(1)-H (2) Ci-C₃ alkyl (3) -fenyl;

kdeR₃_₂je (1) -H (2) -CH₂-[2-pyridyl], (3) -CHz-P-pyridyl], (4) -CH₂-[4-pyridyl], (5) -CHHCH(OH)]4CH2-OH, (7) -CH2-COOH, (8) -OH, (9)-CHr-CHr-CHr-CHz-OH, (10) -CH₂-CH₂-CH₂-CO-OH, a kde R₃i a R_{3 2} jsou spojeny s atomem dusíku, na který jsou navázány tak, aby tvořily heterocyklický kruh vybraný ze skupiny:

(1) 1-pyrrolidinyl, (2) 1—piperidyl, (3) 4—morfolinyl, (4) 2-hydroxy-l-pyrrolidinyl, (5) 3-hydroxy-l-pyrrolidinyl, (6) 1-prolyl a jeho farmaceuticky přijatelné soli.

Také jsou uvedeny t-butylester kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9yl)octové, kyselina (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octová a její farma30 ceuticky přijatelné soli jako meziprodukty pro výrobu tricyklických aminů obecného vzorce IV podle vynálezu.

Tricyklické aminy IV a jejich farmaceuticky přijatelné soli V podle vynálezu jsou připravovány postupy známými odborníkům v této oblasti ze známých výchozích sloučenin. Vynálezem jsou 35 tricyklické aminy IV a jejich farmaceuticky přijatelné soli V, ne chemické reakce potřebné k jejich přípravě.

Tricyklické aminy IV podle vynálezu mohou být připraveny postupy uvedenými dříve v mezinárodních publikacích W093/20078 a WO92/26941 a postupy ve schématech A-C. Existují dva 40 výhodné postupy pro přípravu tricyklických aminů IV podle vynálezu. První postup využívá chemické reakce popsané ve schématech A a B. Druhý postup využívá chemické reakce popsané ve schématech A a C. Oba postupy využívají dva kroky popsané ve schématu A.

Výchozí alkohol ve schématu A je známý odborníkům v této oblasti nebo může být snadno 45 připraven ze známých látek postupy známými odborníkům. Například: J. Med. Chem., 38, 4161— (1995). Alkohol I je převeden na derivát s dobře odstupující skupinou postupem dobře známým odborníkům. Vhodné odstupující skupiny, -Xi, zahrnují metansulfonát, p-toluensulfonát a para -SO2-0-NO₂, kde 0 znamená fenyl. Výhodné je, když X₍ je metansulfonát. Alkohol s odstupující skupinou je pak převeden na odpovídající sekundární amin III působením kyanidu sodného

-2CZ 288076 B6 a stopami chráněného nenukleofilního terciálního aminu (v rozpouštědlech jako DMF, DMSO nebo acetonitril). Sekundární amin III je výchozí sloučenina pro dva další postupy. V prvním postupu, Schéma B, je sekundární amin alkylován molekulovým fragmentem, který obsahuje vedlejší alkylový řetězec a amid, -(CH₂)ni-CO-N(R3_i)(R3_2), kde n_t je 1 až 3 čímž přímo vznikne požadovaný tricyklický amin IV. Je výhodné, když ni je 1. Pyrimido[4,5-b] indol je aminová báze a jako taková tvoří pyrimido[4,5-b]indolové soli V běžným způsobem, viz příklady 2 až 6.

Neboje také možné, pokud ni je rovno 1, alkylovat sekundární amin III t-butylbromacetátem, čímž vznikne butylester VI. Butylester VI je pak hydrolyzován známým postupem na odpovídající kyselinu VII. Kyselina je pak známými postupy převedena na odpovídající tricyklické aminy IV a nebo jejich soli V.

Je výhodné pokud tricyklické aminy IV jsou ve formě farmaceuticky přijatelných solí, pyrimido[4,5-b]indolových solí V, a je výhodné, pokud sůl je vybrána ze skupiny složené z hydrochloridu, hydrobromidu, maleátu a metansulfonátu.

Tricyklické aminy IV jsou využitelné pro léčbu a prevenci astmatu (a redukci tvorby a sekrece hlenu v plicích); dermatitid atopického, zánětlivého, alergického nebo kontaktního charakteru (a redukci svědivosti, slzení, vylučování mazu a tloustnutí kůže, které doprovázejí dermatitidy); rhinitid atopického, zánětlivého nebo sezónně alergického charakteru (a redukci svědivosti, slzení, vylučování mazu a hlenového sekretu nosní sliznice, které doprovázejí rhinitidy); zánětu spojivek, zánětu očních víček, zánětu rohovky nebo jejich kombinaci atopického, alergického, sezónního nebo zánětlivého charakteru (a redukci svědivosti, slzení, vylučování mazu a hlenového sekretu očí a jejich částí, které doprovází zánět spojivek, zánět očních víček, zánět rohovky nebo jejich kombinaci).

Tricyklické aminy IV jsou užitečné při léčení a prevenci astmatu (a redukci tvorby a sekrece hlenu v plicích). Při léčení nadměrné sekrece hlenu a astmatu, jsou tricyklické aminy IV podávány orálně, s aktivní složkou IV a inhalací standardní dávky. Při léčení nadměrné sekrece hlenu je orální dávka tricyklických aminů IV z intervalu asi 0,05 až 20 mg/kg/den. Frekvence podávání jednou až čtyřikrát denně. Orální podávání tricyklických aminů IV k léčbě nadměrné sekrece hlenu trvá několik měsíců nebo dokonce roků. Postiženým jedincům může být lék podán několik hodin před očekávaným problémem. Dávka IV je v intervalu asi 0,05 až 20 mg/kg/den. Aerosolová forma léku obsahuje přibližně od 0,01 do 1 % tricyklických aminů IV a je podáván nebo využíván přibližně čtyřikrát denně, když je to nutné.

Tricyklické aminy IV jsou také užitečné při léčbě a prevenci dermatitid atopického, zánětlivého, alergického nebo kontaktního charakteru (a redukci svědivosti, slzení, vylučování mazu a tloustnutí kůže, které doprovázejí dermatitidy). Při léčbě dermatitid a provázejících příznaků a symptomů jsou tricyklické aminy IV podávány orálně ve standardní dávce a lokální aplikací různých forem k orálnímu podávání (roztoky, suspenze, krémy, masti, mléka, pudry, gely nebo další rozeznávané směsi) tricyklických aminů IV v koncentraci asi od 0,01% do 20% tricyklických aminů IV vzhledem k matrici léčiva. Frekvence podávání je jednou až čtyřikrát denně. Orální a lokální podávání tricyklických aminů IV k léčbě příznaků a nebo symptomů dermatitid může probíhat několik měsíců nebo dokonce roků. Vnímaví jedinci mohou léčivo aplikovat několik hodin před očekávaným problémem. Dávka látky IV je v rozmezí asi 0,05 až 20 mg/kg/den.

Tricyklické aminy IV jsou také užitečné při léčbě a prevenci rhinitid atopického, zánětlivého nebo sezónně alergického charakteru (a redukci svědivosti, slzení, vylučování mazu a hlenového sekretu nosní sliznice, které doprovázejí rhinitidy). Při léčbě rhinitid a provázejících příznaků a symptomů. Tricyklické aminy IV jsou podávány orálně ve standardním množství a lokální aplikací různých forem k lokálnímu podávání (roztoky, suspenze, krémy, masti, mléka, pudry, gely nebo další rozeznávané směsi) tricyklických aminů IV v koncentraci asi od 0,01% do 20% tricyklických aminů IV vzhledem k matrici léčiva. Frekvence podávání je jednou až čtyřikrát

-3CZ 288076 B6 denně. Orální a lokální podávání tricyklických aminů IV k léčbě příznaků a nebo symptomů rhinitid může probíhat několik měsíců nebo dokonce roků. Vnímaví jedinci mohou léčivo aplikovat několik hodin před očekávaných problémem. Dávka látky IV je v rozmezí asi 0,05 až 20 mg/kg/den.

Tricyklické aminy IV jsou také užitečné při léčbě a prevenci zánětu spojivek, zánětu očních víček, zánětu rohovky nebo jejich kombinaci atopického, alergického, sezónního nebo zánětlivého charakteru (a redukci svědivosti, slzení, vylučování mazu a hlenového sekretu očí a jejich částí, které doprovází zánět spojivek, zánět očních víček, zánět rohovky nebo jejich kombinaci). Při léčbě zánětu spojivek, zánětu očních víček, zánětu rohovky nebo jejich kombinaci a provázejících příznaků a symptomů. Tricyklické aminy TV jsou podávány orálně ve standardním množství a lokální aplikací různých forem k lokálnímu podávání (roztoky, suspenze, krémy, masti, mléka, pudry, gely nebo další rozeznávané směsi) tricyklických aminů IV v koncentraci od asi 0,001% do 20% tricyklických aminů IV vzhledem k matrici léčiva. Frekvence podávání je jednou až čtyřikrát denně. Orální a lokální podávání tricyklických aminů IV k léčbě příznaků a nebo symptomů zánětu spojivek, zánětu očních víček, zánětu rohovky nebo jejich kombinací může probíhat několik měsíců nebo dokonce roků. Vnímaví jedinci mohou léčivo aplikovat několik hodin před očekávaným problémem. Dávka látky IV je v rozmezí asi 0,05 až 20 mg/kg/den.

Termín léčba a prevence zde užívaný je široce využívaný a zahrnuje obojí, jak léčbu už existujících stavů, tak prevenci výskytu těchto stejných stavů, kde je to možné, jak je odborníkům v této oblasti známo. Například, tricyklické aminy IV mohou být použity k léčbě existujících astmatických stavů a k prevenci vzniku budoucích astmatických stavů; existujících dermatitid a k prevenci jejich vzniku v budoucnosti; existujících rhinitid a k prevenci jejich vzniku v budoucnosti; existujících zánětů spojivek, zánětů očních víček, zánětů rohovky nebo jejich kombinaci a k prevenci jejich vzniku v budoucnosti.

Přesná velikost dávky a frekvence podávání záleží na jednotlivých použitých tricyklických aminů IV, na jednotlivých typech stavů, které jsou léčeny, na stupni pokročilosti stavů, které jsou léčeny, na věku, hmotnosti, obecné fyzické kondici jednotlivého pacienta, další medikaci individua jak je odborníkům v této oblasti známo a dávkování může být přesněji stanoveno měřením koncentrace tricyklických amidů IV v krvi pacienta a nebo podle odezvy pacienta mírou zlepšení individuálních stavů, které jsou léčeny.

Definice a vysvětlení uvedená níže, jsou pro termíny používané v tomto celém dokumentu, popisu a nároků.

I. Konvence vzorců a definice proměnných

Počet atomů uhlíku různých substituentů může být stanoven dvěma postupy. První metoda využívá prefixu celého názvu proměnné, jako „C1-C4“, kde „1“, a „4“ jsou hranice představující minimum a maximum počtu atomů uhlíku v proměnné. Prefix je oddělen od proměnné pomlčkou. Například, „C1-C4 alkyl“ představuje alkyl s jedním až čtyřmi atomy uhlíku, (zahrnuje jeho izomemí formy bez zvláštního označení na rozdíl od dané formy). Kdykoliv je tento jednotlivý prefix použit, prefix určuje celkový počet atomů uhlíku proměnné, která je definována. Tak C₂C₄ alkoxykarbonyl popisuje skupinu CH₃-(CH2)n-O-CO-, kde n je rovno nula, jedna nebo dva. Pomocí druhé metody pouze počet atomů uhlíku každé části proměnné je určen zvlášť uzavřením označení „Cj-Cj“ do závorek a umístěním bezprostředně před (bez vložené mezery) před část proměnné, která je definována. Podle této zvolené konvence má označení (Ci-C₃)alkoxykarbonyl stejný význam jako C2-C4 alkoxykarbonyl, protože „Ci-C₃“ dává informaci pouze o počtu uhlíkových atomů v alkoxy skupině. Podobně, i když oba vzorce C2-C6 alkoxyalkyl a (CiC₃)alkoxy(C|-C₃)alkyl definují alkoxyalkylovou skupinu obsahující 2 až 6 atomů uhlíku, tyto proměnné se liší, jelikož první definice dovoluje jak alkoxy skupině tak alkylové části zvlášť obsahovat 4 nebo 5 atomů, zatímco druhá definice limituje počet atomů v těchto skupinách na tři.

-4CZ 288076 B6

Všechny teploty jsou ve stupních Celsia.

TLC znamená tenkovrstevnou chromatografii.

THF znamená tetrahydrofuran.

DMF znamená dimetylformamid.

DMSO znamená dimetylsulfoxid.

Solanka znamená nasycený roztok chloridem sodným.

IR znamená infračervenou spektroskopii.

NMR znamená nukleární magnetickou rezonanci, chemický posun je uváděn v ppm (δ) vzhledem k tetrametylsilanu.

TMS znamená tetrametylsilan.

-0 znamená fenyl (C₆H₅).

MS znamená hmotnostní spektrometrii vyjádřenou v jednotkách m/z nebo-li hmotnost/náboj. [M+H]⁺ znamená kation původní látky plus vodíkový atom. El znamená ionizaci nárazem elektronu. Cl znamená chemickou ionizaci. FAB znamená ionizaci urychlovanými atomy.

HRMS znamená vysokoúčinná hmotnostní spektrometrie.

Ether znamená dietyleter.

Farmaceuticky přijatelná znamená takové vlastnosti a nebo látky, které jsou akceptovatelné pro pacienta z hlediska farmakologicky-toxikologického a pro farmaceutické chemiky ve výrobě z hlediska fyzikálně-chemického jako kompozice, formulace, stabilita, přijímání pacientem a biodostupnost.

Farmaceuticky přijatelné soli zahrnují soli následujících kyselin: chlorovodíková, bromovodíková, sírová, fosforečná, dusičná, citrónová, metansulfonová, CH₃-(CH2)_ni-COOH, kde ni je nula až 4, HOOC-(CH2)ni-COOH, kde ni je stejné jako definované výše, HOOC-CH=CH-COOH, 0-COOH.

Pokud je použita směs dvou rozpouštědel, poměr rozpouštědel je vyjádřen jako poměr objemů objem/objem (v/v).

Pokud je použita rozpustnost pevné látky, je udána poměrem hmotnost/objem (m/v).

Příklady provedení vynálezu

Bez dalšího rozvádění se věří, že odborník ve své oblasti může využít podaného popisu a využít vynález v jeho plném rozsahu. Následující podrobné příklady popisují, jak připravit různé sloučeniny a nebo provést různé postupy podle vynálezu a jsou uváděny jako ilustrativní a ne vyčerpávající pro vynález jakýmkoliv způsobem. Odborník ve své oblasti snadno rozezná vhodné obměny jak reaktantů tak reakčních podmínek a technik.

-5CZ 288076 B6

Příklad 1

9-[2-(Metansulfonyloxy)etyl]-2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol II

9-[2-(Hydroxy)etyl]-2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b] indol (I, J. Med. Chem., 38, 4161-3 (1995) reaguje s metansulfonylchloridem postupem známým odborníkům ve své oblasti za vzniku požadované sloučeniny.

Příklad 2 l-[(2,4-Di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)acetyl]pyrrolidin monohydrochlorid, také znám jako monohydrochlorid pyrrolidinamidu kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9Hpyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové IV/V

Míchaná směs 9-[2-(metansulfonyloxy)etyl]-2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indolu (II, příklad 1 a WO/9626941-A1, 165 g), kyanidu sodného (180 g), vody (360 ml) a DMSO (3000 ml) se zahřívá na teplotu 100 °C po dobu 18 hodin. Je důležité, aby vstupní metansulfonát obsahoval stopy trietylaminu buď jako zbytek po jeho přípravě, nebo přidán úmyslně. Směs je chlazena na teplotu 20 °C až 25 °C, rozpuštěna ve vodě (přibližně v 6000 ml) a filtrována. Pevný zbytek je promyt vodou, aby se odstranil přebytek kyanidů, potom se tře s acetonem. Filtrací a sušením získáme 2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol III, teplota tání 209 až 211 °C; NMR (CDCI₃) 7.88, 7.22, 7.09, 3.95,3.67, a 1.98 δ; MS (m/z, FAB, M+H) 308.

Směs získáme 2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indolu (III, 93,1 g) v THF (2150 ml) se ochladí na -40 °C a nechá se reagovat přes 30 minut s n-butyllithiem/hexanem (1,6 M, 246 ml). Po 30 minutách se přidá při teplotě -40 °C směs bromoacetylpyrrolidinu [J. Med. Chem., 30, 20-24 (1987), 93,1 g] v THF (750 ml) a nechá se reagovat 15 minut. Reakční směs se poté zahřeje na 20 až 25 °C po dobu dvě hodiny a pak je znovu ochlazena na teplotu —40 °C a zfiltrována. Pevný zbytek je extrahován mezi dichlormetan a vodu, organická vrstva se vysuší a zakoncentruje, tak získáme volnou bázi požadované látky, sloučeninu IV, teplota tání = 201 až 204 °C; NMR (CDC1₃) 7,87, 7,38, 7,21-7,08,5,05, 3,92, 3,62,3,48, 3,33, 1,96 a 1,85 δ.

Reakcí směsi volné báze požadované látky v metanolu s jedním ekvivalentem metanolické kyseliny chlorovodíkové vznikne požadovaná titulní sloučenina V, teplota tání = 250 až 255 °C; MS (m/z, M+je pozorováno) = 418,2476, vypočítáno pro C24H₃₀N₆O = 418,2481. (Komponenta soli, v tomto případě hydrochlorid, se v MS neprojevila, což je normální.)

Příklad 3

Síran pyrrolidinamidu kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové V

Použije se základní postup podle posledního odstavce příkladu 2 s obměnami, které nemají nezásadní význam, ale jako vstupní látka se použije pyrrolidinamid kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové (IV, příklad 2.) a kyselina sírová. Získáme tak požadovanou látku, teplota tání = 175 až 180 °C.

-6CZ 288076 B6

Příklad 4

Metansulfonová sůl pyrrolidinamidu kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol9-yl)octové V

Použije se základní postup podle posledního odstavce příklad 2 s obměnami, které nemají nezásadní význam, ale jako vstupní látka se použije (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5b]indol-9-yl)octová kyselina, pyrrolidinamid (IV, příklad 2.) a kyselina metansulfonová. Tím získáme titulní sloučeninu příkladu, teplota tání = 199 až 200 °C.

Příklad 5

Fosfátová sůl pyrrolidinamidu kyseliny (2,4—di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9yl)octové V

Použije se základní postup podle posledního odstavce příklad 2 s obměnami, které nemají nezásadní význam, ale jako vstupní látka se použije (2,4-di— l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5b]indol-9-yl)octová kyselina, pyrrolidinamid (IV, příklad 2) a kyselina fosforečná. Tím získáme titulní sloučeninu příkladu, teplota tání = 200 až 201 °C.

Příklad 7 t-Butylester kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové IV

N-Butyllithium (4,26 ml; 1,6 M v hexanu) se přidá do směsi 2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indolu (III, příklad 2, 2,0 g) v THF (50 ml) při -15 °C. Po jedné hodině se přidá tbutylbromacetát (1,27 g) v THF (20 ml) a směs se míchá po dvě hodiny při teplotě 20 až 25 °C. Směs se poté podrobí frakcionaci mezi vodný roztok uhličitanu sodného a dichlormetan, organická vrstva je vysušena a zakoncentrována. Chromatografií hrubého produktu (silikagel; hexan/dimetylchlorid/etylacetát (70/25/5)) získáme titulní sloučeninu, teplota tání = 131 až 133 °C; NMR (CDClj) 7,87, 7,15,4,92, 3,92, 3,61,1,96 a 1,43 δ; MS (m/z) = 421 (M+).

Příklad 8

Hydrochlorid kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové VII

Směs t-butylesteru (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové kyseliny, tbutylesteru (VI, příklad 7, 2,5 g) ve vodné kyselině chlorovodíkové (1,0 M) je zahřívána k refluxu po dobu dvě hodiny. Směs je potom ochlazena a zakoncentrována přibližně na jednu třetinu původního objemu. Odfiltrováním vznikající pevné látky získáme požadovanou titulní sloučeninu, teplota tání 250 až 253 °C; NMR (CDClj) 8,07, 7,35, 5,21, 4,10, 3,73 a 2,11 δ; IR (čistý) 2925, 1736,1627, 1608, 1568, 1445 a 1193 cm’¹.

Příklad 9

Morfolinamid kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové IV a jeho monohydrochlorid V

Směs (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové kyseliny, hydrochloridu (VII, příklad 8, 1,41 g) v dichlormetanu (20 ml) se nechá reagovat s trietylaminem (1,08 ml) při chlazení na -5 °C, poté reaguje s isobutylchlorformiátem (0,5 ml). Směs se míchá po dobu

-7CZ 288076 B6 minut, potom se nechá reagovat s morfolinem (0,83 ml). Směs se míchá dvě hodiny a potom se podrobí frakcionaci mezi dichlormetan a vodný roztok uhličitanu sodného. Vrstvy jsou odděleny a organická vrstva je po vysušení zakoncentrována, koncentrační zbytek se purifikuje chromatografícky (silikagel; aceton/dichlormetan, 10/90), tak získáme volnou bázi titulního produktu, teplota tání 220 až 222 °C.

Směs volné báze IV titulní sloučeniny (1,3 g) v metanolu (50 ml) reaguje s ekvivalentem metanolické kyseliny chlorovodíkové. Rekrystalizací vznikající pevné látky z metanolu/etylacetátu získáme titulní sloučeninu, teplota tání = 238 až 240 °C; NMR (CH3OD) 8,0, 7,42, 7,35, 7,27, 5,31,3,98,3,80,3,69, 3,59 a 2,06 δ.

Příklad 10

2-Aminometylpyridinamid kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové, IV a jeho dihydrochlorid V

Použije se základní podle příkladu 9 s obměnami, které nemají nezásadní význam, ale použije se 2-(aminometyl)pyridin místo morfolinu a dva ekvivalenty kyseliny chlorovodíkové pro tvorbu soli, získáme tak volnou bázi IV titulní sloučeniny, kterou převedeme na požadovanou titulní sloučeninu, teplota tání = 162 až 165 °C; NMR (CH3OD) 8,77, 8,58, 8,00, 7,47, 7,30, 5,33, 4,81, 4,10,3,74, a 2,12.

Příklad 11

Amid kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové IV a jeho hydrochlorid V

Použije se základní postup podle příklad 9 s obměnami, které nemají nezásadní význam, ale použije se amoniak místo morfolinu, získáme tak volnou bázi IV titulní sloučeniny, kterou převedeme na titulní požadovanou sloučeninu, teplota tání = 260 až 264 °C; NMR (CH3OD) 8,06, 7,36, 5,12,4,05, 3,67 a 2,08 δ.

Příklad 12

1-Amino-l-deoxysorbitolamid kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9yl)octové IV a jeho hydrochlorid V

Použije se základní postup podle příkladu 9 s obměnami, které nemají nezásadní význam, ale použije se 1-amino-l-deoxysorbitol místo morfolinu, získáme tak volnou bázi (IV) titulní sloučeniny, kterou převedeme na požadovanou titulní sloučeninu, teplota tání= 122 až 126 °C; MS (m/z) vypočítané = 529,2774, pozorované 529,2779.

Příklad 13

Prolylamid kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové IV a jeho hydrochlorid V

Použije se základní podle příkladu 9 s obměnami, které nemají nezásadní význam, ale použije se prolin místo morfolinu, získáme tak volnou bázi IV titulní sloučeniny, která se převede na požadovanou titulní sloučeninu, teplota tání = 118 až 120 °C; MS (m/z) vypočítané = 462,2379, pozorované 462,2371.

-8CZ 288076 B6

Příklad 14

Glycinamid kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové, IV a jeho hydrochlorid V

Použije se základní postup podle příkladu 9 s obměnami, které nemají zásadní významu, ale použije se glycin místo morfolinu, získáme tak volnou bázi IV titulní sloučeniny, kterou převedeme na požadovanou titulní sloučeninu, teplota tání = 155 až 160°C; NMR (CH₃OD) 8,04, 7,47, 7,37, 7,29, 5,17,4,00, 3,66, 3,30 a 2,08 δ.

Příklad 15

Hydroxylaminamid kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové, IV a jeho hydrochlorid V

Použije se základní postup z příkladu 9 s obměnami, které nemají zásadní význam, ale použije se O-benzylhydroxylamin místo morfolinu, získáme tak volnou bázi IV titulní sloučeniny, kterou převedeme na O-benzylderivát požadované titulní sloučeniny, teplota tání = 184 až 186 °C. Tento materiál (523 mg) je debenzylován hydrogenaci v přítomnosti paladia na uhlíku (10%, 504 mg), DMF (50 ml), vodík (310 kPa po dobu 5,5. hodin). Filtrací a zakoncentrováním filtrátu obdržíme volnou bázi IV titulní sloučeniny, teplota tání = 147 až 150 °C. Vytvoření hydrochloridu provedeme podle postupu uvedeného v příkladu 9, získáme tak titulní sloučeninu, teplota tání = 210 až 212 °C; MS (m/z) vypočítané 381,2039, naměřeno 381,2028.

Příklad 16

3- hydroxypyrrolidinamid kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové, IV a jeho sůl V

Použije se základní postup z příkladu 9 s obměnami, které nemají nezásadní význam, ale použije se 3-hydroxvpyrrolidin místo morfolinu, získáme tak volnou bázi IV titulní sloučeniny, kterou převedeme na požadovanou titulní sloučeninu, teplota tání - 224 až 226 °C; MS (m/z) = 431,1 (M+), stejně jako pro jeho hydrochlorid, teplota tání = 145 až 150 °C.

Příklad 17

4- Amino-l-butanolamid kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové IV a jeho hydrochlorid V

Použije se základní postup podle příkladu 9 s obměnami, které nemají nezásadní význam, ale použije se 4-amino-l-butanol místo morfolinu, získáme tak volnou bázi (IV) titulní sloučeniny, teplota tání= 199 až 201 °C, kterou převedeme na sůl požadované titulní sloučeniny, teplota tání = 108 až 110 °C; MS (m/z) = vypočítané 436,2587, naměřeno 436,2574.

Příklad 18

4-aminobutanamid kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové, IV

Použije se základní postup z příkladu 9 s obměnami, které nemají nezásadní význam, ale použije se 4-aminobutanová kyselina místo morfolinu, získáme tak požadovanou titulní sloučeninu, teplota tání = 215 až 220 °C, MS (m/z) = vypočítané 450,2379, naměřeno 450,2379.

-9CZ 288076 B6

Příklad 19

2-hydroxypyrrolidinamid kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5~b]indol-9-yl)octové, IV

Použije se základní postup z příkladu 9 s obměnami, které nemají zásadní význam, ale použije se dietylacetál 4-aminobutanolu místo morfolinu, získáme tak acetálový meziprodukt, teplota tání= 153 až 156 °C. Acetál je následně hydrolyzován postupem v J. Org. Chem., 48, 3667 (1983). Směs acetálového intermediátu (103 mg), jodidu sodného (80 mg) a trichlormethylsilan (0,05 ml) v acetonitrilu (2 ml) se míchá při teplotě 20 až 25 °C po dobu 30 minut. Reakční směs se potom podrobí frakcionaci mezi vodný roztok uhličitanu sodného, thiosíranu sodného a dichlormetan, vrstvy jsou odděleny a organická vrstva se po vysušení zakoncentruje. Chromatografií koncentračního zbytku (silikagel; aceton/dichlormetan, 10/90) získáme požadovanou titulní sloučeninu (její volnou bázi), teplota tání= 185 až 190 °C; MS (m/z) = vypočítané 434.2430; naměřeno 434.2421. NMR (CDC1₃) 7,87, 7,65, 7,26, 7,16, 5,47, 5,28, 4,88, 4,84, 4,79, 3,93, 3,66-3,61 a 1,99-1,91 5.

Test užitečnosti sloučenin podle vynálezu při léčbě astmatu

V současnosti je astma u člověka známé jako chronické eosinofílní zánětlivé onemocnění dýchacích cest. Provedla se zkouška užitečnosti sloučenin podle vynálezu. Test byl uveřejněn, viz AM. J. Physiol 273 (Lung Cell. Mol. Pjysiol. 17) L513-L523(1997). U zvířecích modelů (myší) byl rozvinut simulovaný astmatický eosinofílní plicní zánět. Methylprednisolon je v této zkoušce velmi aktivní a je brán jako standard. Sloučeniny podle vynálezu se ukázaly být orálně účinnými inhibitoiy antigenem způsobeného nahromadění eosinofílů u vnímavých hlodavců, jak je patrné z Tabulky 1.

Tabulka 1

-10CZ 288076 B6

PNU-170199A 6105-9 CH, 9 ·Ηα 0	3,0	28
PNU-170480E 6105-10 I \ · 2HCI	3,0 1.0 3,0 10,0	54 -7 2 7
l jl JL I) O
PNU-170481A 6105-11 /X · H« ^N ii— 0 k_c.o 1 NHj	3,0	30

-11CZ 288076 B6

PNU-170482A 6105-12 / \ · Ha >H OH OH OH	3,0 1.0 3,0 10,0	85 29 44 47
PNU-170483A 6105-13 I \ 7Γ · HCI ^N<il--- k JOLO O y ““Y)	3.0 1.0 3.0 10,0	83 54 54 81
PNU-170484A 6105-14 / \ Sr · HCI ^N ιΊ------ aJL jo o° 1 ^^COOH	3.0 3,0	1 -32

-12CZ 288076 B6

PNU-170578A 6105-15 cr	Q ά	• HCI X A° 1 H ^XOH	3,0 3,0	49 41
PNU-171519			1,0	77
6105-16	o N		3,0 10,0	82 91
		X) ^c<° Q


		OH
PNU-171586A			3,0	23
«105-17 / \ \r	• HCI
? il	—
	A°	)
	N
	z H

-13CZ 288076 B6

PNU-172185 6105-18 f~~\ X X n O i O N II ^H ΌΗ	1.0 3.0 10,0	28 -9 29
PNU-172231 6105-19 / \ ^N<il---í^il Al JU 0 P HO	1.0 3.0 10,0	41 5 37

Srovnání užitečnosti a toxicity některých sloučenin stavu techniky a sloučenin podle vynálezu

Z výsledků uvedených níže v Tabulce 2 je zřejmé, že sloučeniny podle vynálezu nevykazují in vitro toxicitu, stanovenou měřením aktivity laktátdehydrogenázy v kultivačním médiu epiteliálních buněk žlučníku a krysích hepatocytů. Naproti tomu sloučeniny stavu techniky AYER-194 z W093/20078, BUNDY-5, BUNDY-8, BUNDY-10, BUNDY-26 z WO96/26941 jsou toxické, tudíž nepoužitelné při léčbě astmatu navzdory své užitečnosti při této léčbě. Sloučeniny 10 zWO96/26941 obsahující cyklický amin vykazují toxicitu. Překvapující a neočekávaný je fakt, že sloučeniny z W093/20078 a WO96/26941 vykazují toxicitu jater, žlučovodu a/nebo žlučníku, přičemž sloučeniny podle vynálezu toxicitu nevykazují.

-14CZ 288076 B6

Tabulka 2

sloučenina	aromatická	r₇	Užitečnost při léčbě astma	toxicita
AYER-12	ne	-ch₃	+	žádná
AYER-138	ano	-ch₃	+	žádná
AYER-194	ne	-CH₂-CH₂-morfolinyl	+	toxická
BUNDY-3	ano	-CH₂-CH₂-OH	—	žádná
BUNDY-5	ano	-CHr-CHr-piperidinyl	+	toxická
BUNDY-8	ano	-CH₂-CH₂-imidazolyl	+	toxická
BUNDY-10	ano	-CH₂-CH₂-morfolinyl	+	toxická
BUNDY-26	ano	-H	+	toxická
6105-2	ano	-CHr-CO-pyrrolidinyl	+++	žádná
6105-9	ano	-CHr-CO-morfolinyl	+	žádná
6105-10	ano	-CHr-CO-NH-CHr-pyridin-2-yl	+	žádná
6105-11	ano	-CHr-CO-NH₂	+	žádná
6105-12	ano	-CH₂CO-NH-CHr-(CH(OH)4)- CH₂OH	+	žádná
6105-13	ano	-CH₂-CO-prol in	+	žádná
6105-14	ano	-CHr-CO-glycin	+	žádná
6105-15	ano	-CH₂-CO-NH-OH	+	žádná
6105-16	ano	-CH₂-CO-(3-hydroxypynOlidin)	metabolit	žádná
6105-17	ano	-CH₂-CO-(4-amino-1 -butanol)	metabolit	žádná
6105-18	ano	-CH2-CO-(4-aminobutanová kyselina	metabolit	žádná
6105-19	ano	-CHr-CO-(2-hydroxypyrrolidon)	metabolit	žádná

+ znamená užitečný při léčbě astma

- znamená neužitečný pro léčbu astma

-15CZ 288076 B6

Schéma A

(ΠΙ)

-16CZ 288076 B6

(ΙΠ)

-17CZ 288076 B6

Schéma C

(IH)

(VI)

(VII)

^Rs-2 (IV)

-18CZ 288076 B6

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Tricyklické aminy obecného vzorce IV kde Ri_i a R1-2 jsou spojeny s atomem dusíku, na který jsou navázány tak, že tvoří heterocyklický kruh vybraný ze skupiny sestávající z 1-pyrrolidinylu, 1-piperidylu a 4-morfolinylu;

R₂_i a R₂_2 jsou spojeny s atomem dusíku, na který jsou navázány tak, že tvoří heterocyklický kruh vybraný ze skupiny sestávající z 1-pyrrolidinylu, 1-piperidylu a 4-morfolinylu, přičemž heterocyklický kruh Rj^/R]^ je stejný jako R₂_!/R₂_₂;

nj je 1 až 3;

R3-1 je:

(1) -H (2) C!-C₃ alkyl (3) -fenyl;

R3-2je (1) -H (2) -CH₂-[2-pyridyl], (3) -CH₂-[3-pyridyl], (4) -CH₂-[4-pyridyl], (5) -CH₂-[CH(OH)]₄CH₂-OH, (7) -CH₂-COOH, (8) -OH, (9) -CHi-CHa-CHr-CHrOH, (10) -CH₂-CH₂-CH₂-CO-OH, nebo R3-1 a R₃_₂ jsou spojeny s atomem dusíku, na který jsou navázány tak, že tvoří heterocyklický kruh vybraný ze skupiny sestávající z (1) 1-pyrrolidinylu, (2) 1-piperidylu, (3) 4-morfolinylu,

-19CZ 288076 B6 (4) 2-hydroxy-l-pyrrolidinylu, (5) 3-hydroxy-l-pyrrolidinylu, (6) 1-prolylu a jejich farmaceuticky přijatelné soli.
2. Tricyklické aminy obecného vzorce IV podle nároku 1, kde Ri_i/Rj_₂, a R₂_i/R₂_₂ jsou spojeny s atomem dusíku, na který jsou navázány tak, že tvoří 1-pyrrolidinyl.
3. Tricyklické aminy obecného vzorce IV podle nároku 1, kde nj je 1.
4. Tricyklické aminy obecného vzorce IV podle nároku 1, kde

R₃_i je -H a

R₃-2 je vybráno ze skupiny sestávající z (1) -H, (2) -CH₂-[2-pyridyl], (5) -CH₂-[CH(OH)]4CH2-OH, (7) -CHr-COOH, (8) -OH, (9) -CHr-CHr-CHr-CHr-OH, (10) -CHr-CHr-CHz-CO-OH, a kde R₃_i a R₃_₂ jsou spojeny s atomem dusíku, na který jsou navázány tak, že tvoří heterocyklický kruh vybraný ze skupiny sestávající z (1) 1-pyrrolidinylu, (2) 1-piperidylu, (3) 4-morfolinylu, (4) 2-hydroxy-l-pyrrolidinylu, (5) 3-hydroxy-l-pyrrolidinylu, (6) 1-prolylu a jejich farmaceuticky přijatelné soli.
5. Tricyklické aminy obecného vzorce IV podle nároku 4, kde R₃_i a R₃_₂ jsou spojeny s atomem dusíku, na který jsou navázány tak, že tvoří 1-pyrrolidinyl.
6. Tricyklické aminy obecného vzorce IV podle nároku 4, kde farmaceuticky přijatelné soli jsou vybrány ze skupiny sestávající z hydrochloridu, síranu, metansulfonátu, maleátu a fosfátu.
7. Tricyklické aminy podle nároku 1, které jsou vybrány ze skupiny sestávající z pyrrolidinamidu kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové, morfolinamidu kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimÍdo[4,5-b]indol-9-yl)octové,

2-aminometylpyridinamidu kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidiny!-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové, amidu kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové, 1-amino-l-deoxysorbitolamidu kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9yl)octové,

-20CZ 288076 B6 prolylamidu kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové, glycinamidu kyseliny (2,4-di-l-pyaolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové, hydroxylaminamidu kyseliny (2,4-di-I-pyrrolidinyI-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové,

3- hydroxypyrrolidinamidu kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové,

4- amino-l-butanolamidu kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové,

4-aminobutanamid kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové,

2-hydroxypyrrolidinamid kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové.
8. Tricyklický amin podle nároku 7, kterým je pyrrolidinamid kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové.
9. Tricyklícké aminy podle nároku 7, které jsou vybrány z monohydrochloridu pyrrolidinamidu kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol9-yl)octové, síranu pyrrolidinamidu kyseliny (2,4~di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové, metansulfonové soli pyrrolidinamidu kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové, maleinové soli pyrrolidinamidu kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9yl)octové, a fosfátové soli pyrrolidinamidu kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9yl)octové.
10. t-Butyl ester kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové jako meziprodukt pro výrobu tricyklických aminů obecného vzorce IV podle nároku 1.
11. (2,4-Di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octová kyselina a její farmaceuticky přijatelné soli jako meziprodukty pro výrobu tricyklických aminů obecného vzorce IV podle nároku 1.
12. Hydrochlorid kyseliny (2,4-di-l-pyrrolidinyl-9H-pyrimido[4,5-b]indol-9-yl)octové podle nároku 11 jako meziprodukt pro výrobu tricyklických aminů obecného vzorce IV podle nároku 1.