CZ286180B6 - 6,9-bis(Substituované amino)benzo/g/isochinolin-5 10-diony - Google Patents

6,9-bis(Substituované amino)benzo/g/isochinolin-5 10-diony Download PDF

Info

Publication number
CZ286180B6
CZ286180B6 CZ19931847A CZ184793A CZ286180B6 CZ 286180 B6 CZ286180 B6 CZ 286180B6 CZ 19931847 A CZ19931847 A CZ 19931847A CZ 184793 A CZ184793 A CZ 184793A CZ 286180 B6 CZ286180 B6 CZ 286180B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
amino
benzo
bis
dione
isoquinoline
Prior art date
Application number
CZ19931847A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ184793A3 (en
Inventor
Paul A. Krapcho
Original Assignee
The University Of Vermont
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by The University Of Vermont filed Critical The University Of Vermont
Publication of CZ184793A3 publication Critical patent/CZ184793A3/cs
Publication of CZ286180B6 publication Critical patent/CZ286180B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D221/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom, not provided for by groups C07D211/00 - C07D219/00
    • C07D221/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom, not provided for by groups C07D211/00 - C07D219/00 condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D221/04—Ortho- or peri-condensed ring systems
    • C07D221/06—Ring systems of three rings
    • C07D221/08—Aza-anthracenes
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Abstract

Sloučeniny obecného vzorce I, v němž substituenty mají specifické významy. Farmaceutické prostředky, které jako účinnou látku obsahují uvedené substituované benzo-isochinilidiony mají antitumorovou aktivitu. Při syntéze těchto sloučenin se a) anhydrid pyridin-3,4-dikarboxylové kyseliny uvede v reakci s 1,4-difluorbenzenem v přítomnosti Lewisovy kyseliny za vzniku směsi sloučenin vzorce VIIa a VIIb, b) směs sloučenin VIIa a VIIb se cyklizuje v přítomnosti 30% dýmavé kyseliny sírové při teplotě 130 až 150 .degree.C za vzniku sloučeniny vzorce II, c) atomy fluoru ve sloučenině II se nahradí reakcí se stechiometrickým množstvím nebo slabým nadbytkem sloučeniny obecného vzorce R-NH.sub. 2.n., v němž skupiny -NH- a -OH v R jsou popřípadě chráněny vhodnými chránicími skupinami, při teplotě v rozsahu 0 .degree.C až teploty varu rozpouštědla, d) chránicí skupiny, jež mohou být přítomny v R, se popřípadě odstraní za vzniku sloučenin vzorce I a e) sloučeniny vzorce I se popřípadě převedou na soliŕ

Description

6.9- bis Aminosubstituované benzo[g]isochinolin-5,10-diony, farmaceutické prostředky je obsahující a způsob jejich syntézy
Oblast techniky
Vynález se týká 6,9-bis aminosubstituovaných benzo[g]isochinolin-5,10-dionů, zejména disubstituovaných a konkrétněji těch, v nichž 6,9-substituenty jsou aminoalkylaminové substituenty. Tyto sloučeniny mají protinádorovou aktivitu in vitro a in vivo. Vynález se rovněž týká farmaceutických prostředků, obsahujících tyto sloučeniny, jakož i způsobu syntézy těchto sloučenin.
Dosavadní stav techniky
O určitých l,4-bis/(aminoalkyl)amino/anthracen-9,10-dionech bylo uvedeno, že vykazují protinádorovou aktivitu v klinických pokusech. Zvláště zajímavý byl ametantron, l,4—bis{/2—(2— hydroxyethylamino)ethyl/amino}-anthracen-9,10-dion, a mitoxantron, 5,8-dihydroxy-l,4bis{/2-(2-hydroxyethylamino)ethyl/amino}anthracen-9,10-dion (Zee-Cheng a spol., J. Med. Chem. (1978), 21, 291-4; Cheng a spol., „Progress in Medicinal Chemistry“, Ellis G. P. a West G. B., vyd.; Elsevier: Amsterodam, 1983, str, 20, 83 a zde citované odkazy). Mitoxantron je onkolytické činidlo širokého spektra, jehož aktivita je podobná anthracyklinovému antibiotiku doxorubicinu. Klinické pokusy demonstrují, že mitoxantron má zvláště slibnou aktivitu při léčení rakoviny prsu, akutní leukemie a lymfomu (Degha, Drugs of Todey, (1984), 20, 629). I když studie na zvířatech ukázaly sníženou kardiotoxicitu ve srovnání s doxorubicinem, byla určitá klinická kardiotoxicita pozorována také s mitoxantronem, nejvíce u pacientů dříve ošetřovaných doxorubicinem (R. Stuart Harris a spol., Lancet, (1984), 219 a zde citované odkazy).
O ametantronu bylo uvedeno, že je u zvířat asi 10-krát méně účinný a kardiotoxický než mitoxantron. Protože pozdní toxicita je pozorována pouze u mitoxantronu po podání dvou léčiv i.p. cestou krysám, netrpícím tumorem, v účinných antitumorových dávkách, je předpoklad, že přítomnost 5,8-dihydroxy-substituce v mitoxantronu by mohla vést k opožděným úmrtím (Corbett a spol., Cancer Chemother. Pharmacol., (1981), 6,161).
Navíc jak mitoxantron, tak ametantron mají významnou myelodepresivní toxicitu a obě sloučeniny vykazují křížovou rezistenci k buněčným histotypům, vyvíjejícím rezistenci vůči doxorubicinu způsobenou nadměrnou expresí glykoproteinu P. Taková rezistence, která se nazývá multidrogová rezistence, zahrnuje mnoho antitumorových antibiotik, mezi jinými amsacrin a podophyllotoxinové deriváty a je jedním z hlavních důvodů terapeutických selhání při léčbě pevných tumorů uvedenými antibiotiky.
Proto je vyžadován výzkum nových anthracendionových antitumorových činidel, majících vyšší terapeutický index než mitoxantron a majících vyšší účinnost jak v inhibici tak zpomalení růstu takových pevných tumorů, které jsou více odolné k chemoterapeutickému léčení (jako jsou tumory plic, prsu a střeva) a vůči tumorovým histotypům, vyvíjejícím multidrogovou rezistenci.
Při výzkumu bezpečných, aktivních analogů anthracendionů, byly studovány sloučeniny nesoucí hydroxysubstituenty a/nebo (aminoalkyl)amino vedlejší řetězce v různých polohách anthracen-
9.10- dionového jádra (Cheng a spol., Drugs of the Future (1983), 8, 229) bez významného zlepšení.
Aza- a diaza-anthracen-9,10-diony jako je 6,9-bis(ethoxykarbonylamino)benzo/g/chinolin-
5.10- dion (1), 6,9-bis(ethoxykarbonylamino)benzo/g/isochinolin-5,10-dion (2), 6,9-bis(ethoxykarbonylamino)benzo/g/-chinazolin-5,10-dion (3), byly popsány Pottsem a spol. (Synthesis,
-1 CZ 286180 B6
1983, 31). Tyto sloučeniny jsou popisovány jako mající vztah k protinádorovým 1,4bis/(aminoalkyl)amino/anthracen-9,10-dionům; pro jakoukoliv z výše uvedených sloučenin však nejsou uvedeny žádné údaje o protinádorové aktivitě. l-/(Aminoalkyl)amino/deriváty (4) 6,9dihydroxybenzo/g/isochinolin-5,10-dionu příbuzné mitoxantronu byly popsány jako DNA interkalátory, ale byly úplně prosté jakékoliv „in vitro“ nebo „in vivo“ protinádorové aktivity (Croisy-Delcey a spol., Eur. J. Med. Chem., (1988), 23, 101-106).
6,9-bis/(Aminoalkyl)amino/benzo/g/chinolin-5,10-diony vzorce 5a-d (viz tabulka I) jsou popsány v J. Med. Chem. (1985), 28, 1124-26, kde jsou označovány jako 5,8-bis/(aminoalkyl)amino/-l -azaanthracendiony.
Jak je uvedeno v tabulce II dále, uváděné známé sloučeniny 5 jsou zřetelně méně aktivní než odpovídající karbocyklické analogy (6).
Ve skutečnosti, jak je uvedeno v tabulce Π, sloučeniny 5a a 5b jsou méně cytotoxické než analogy 6a a 6b. Navíc sloučenina 5a, která je málo cytotoxická in vitro, je inaktivní in vivo a jak méně aktivní tak méně účinná než karbocyklický analog 6a.
I když zavedení heteroatomu je obvyklým procesem v medicinální chemii, jeho účinek musí být hodnocena případ od případu.
V tomto konkrétním případě aza-analogů anthracendionů je ze známého stavu techniky zřejmé, že zavedení atomu dusíku do anthracendionového skeletu je škodlivé pro protinádorovou účinnost. Ve skutečnosti jsou aza-substituované anthracendiony méně cytotoxické než odpovídající anthracendiony a inaktivní „in vivo“.
Proto by odborníci v oboru neměli považovat zavedení heteroatomů do anthracendionového skeletu za možnou cestu pro získání účinnějších protinádorových činidel.
Je dobře známo, že screening při objevu protinádorového činidla mitoxantronu (J. Med. Chem., (1978), 21, 291-4) z mnoha analogů byl proveden za použití experimentálního modelu myší leukemie P388: tento model je pak předpovědí protinádorové aktivity u lidí alespoň pro tuto třídu protinádorových antibiotik. Mnohá jiná klinicky aktivní protinádorová antibiotika jsou aktivní na myší leukemie P388 a L1210 jako je m-amsacrin a doxorubicin.
Dále mitoxantron vykázal dobrou aktivitu u jiných signifikantních experimentálních tumorů jako je myší Lewisův plicní karcinom a MX1 lidský karcinom prsu.
Nyní bylo objeveno, že sloučeniny podle vynálezu - 6,9-bis/(aminoalkyl)amino/benzo/g/isochinolin-5,10-diony jsou aktivní jako protinádorová činidla: jsou vysoce účinné proti myší leukémii L1210 a P388 a proti Lewisovu plicnímu karcinomu a MX1 lidskému karcinomu prsu.
-2CZ 286180 B6
Tabulka I
Známé sloučeniny
0 NHCO2Et
2 0 NHCOjEt
OH 0
1 1 1
II
OH 0 NHR 4i R- CH2CH2n(CH3)2
4b R= CH2CH2CH2N(Et)2 4e R- CHjCHjNHCH^C
5i R® OIjCHjNfCHjij
5b R=CH2CH2N(Et)2
5e R5d R- CH2CH2NHCOCM3
6iR.CT12CH2N(ai3)2
Cb R- CH2CH 2N(EO2
Tabulka II
Protinádorová aktivita sloučenin podle známého stavu techniky, označených 5 a 6 proti myší L 1210 leukémii (z J. Med. Chem. (1985), 28,1124-1126) in vitro in vivo
ΙΡ5ο (pg/ml)dávka (mg/kg)T/C
5a 0,16 50 130
5b 2,4 100 toxický
5c 1,7
6a 0,08 30 150
6b 0,30
-3CZ 286180 B6
Podstata vynálezu
Předmětem vynálezu jsou 6,9-bis obecného vzorce I aminosubstituované benzofg] isochinol in-5,10-diony
(I) v němž
R je C]-Cioalkyl, fenyl nebo Cr-Cioaralkyl, Cr-Cioalkyl substituovaný jedním nebo dvěma substituenty vybranými ze skupiny zahrnující ORi a -NR2R3, C2-Cioalkyl přerušený jedním nebo dvěma atomy kyslíku nebo členem vybraným ze skupiny zahrnující -NR4, cis-CH=CH, trans-CH=CH a -C=C- a popřípadě substituovaný jednou nebo dvěma hydroxy- nebo -NR2R3 skupinami, přičemž
Ri je vybráno ze skupiny zahrnující vodík, Ci-Cealkyl, fenyl, benzyl, 4-methoxybenzyl, -CHO, -COR5, -COOR5, -S(O2)R5 a C2-C6alkyl popřípadě substituovaný -NR2R3,
R2 a R3 jsou stejné nebo rozdílné a vybrané ze skupiny zahrnující vodík, Cj-Cioalkyl, Cr-Cioaralkyl, fenyl, Cr-Cioalkyl substituovaný jednou nebo dvěma hydroxyskupinami, -CHO, -COR5, -COOR5 a -S(O2)R5, nebo R2 a R3 tvoří spolu s atomem dusíku, ke kterému jsou vázány, ethyleniminový kruh nebo 5 či óčlenný aromatický nebo nearomatický heterocyklický kruh, popřípadě obsahující další heteroatom vybraný ze skupiny zahrnující síru, kyslík a dusík, nebo R2 je vodík a R3 je skupina -C(=NH)NH2, nebo R2 je -C(=NH)NH2 a R3 je vodík,
R4 je vybráno ze skupiny zahrnující vodík, C]-CiOalkyl, Cr-Ciohydroxyalkyl, Cj-Cioalkyl substituovaný skupinou -NR2R3, Cr-Cioaralkyl, fenyl, -COR5, -COOR5 a -S(O2)R5,
R5 je vybráno ze skupiny zahrnující Ci-Cioalkyl, Cr-Cioaralkyl, α-, β-nebo γ-naftyl, fenyl nebo 0-, m- či p-tolyl, jako volné báze nebo jejich soli s farmaceuticky přijatelnými kyselinami.
Předložený vynález také zahrnuje tautomemí formy, jednotlivé enantiomery a diastereoizomerty sloučenin obecného vzorce I jakož i jejich směsi.
Předložený vynález také zahrnuje netoxické soli sloučenin obecného vzorce I s kyselinami přijatelnými při farmaceutickém a veterinárním použití, jako jsou ty, které jsou získány přídavkem anorganických kyselin jako jsou kyseliny, chlorovodíková, bromovodíková, sírová, fosforečná, pyrofosforečná kyselina a/nebo organických kyselin jako je octová, propionová, citrónová, benzoová, mléčná, maleinová, fumarová, jantarová, vinná, glutamová, aspartová, glukonová, askorbová kyselina a podobně.
Ve sloučeninách obecného vzorce I výraz „fenyl“ znamená fenylové kruhy, které mohou popřípadě obsahovat substituenty jako jsou (C]-C4)alkylové skupiny, CF3, atomy halogenu,
-4CZ 286180 B6 nitro, amino, acetylamino, formylamino, dimethylamino, diethylamino, hydroxy, methoxy a ethoxyskupiny.
Výhodnými příklady Ci-Ci0alkylových skupin jsou methyl, ethyl, n-propyl, sek.propyl, n-butyl, sek-butyl, terc.butyl, n-pentyl, n-hexyl.
Výhodné příklady C7-C10 aralkylu jsou benzyl a 4-methoxybenzyl. Jestliže ve sloučenině vzorce I je R C2~Cioalkyl přerušený jedním nebo dvěma kyslíkovými atomy nebo jedním členem vybraným ze skupiny, zahrnující -N-, cis-CH=CH~,
R4 trans-CH=CH-, -Cs- a popřípadě substituovaný jednou nebo dvěma hydroxy nebo -NR2R3 skupinami, jsou alespoň dva atomy uhlíku výhodně umístěny mezi uvedenými kyslíkovými atomy a/nebo -NR4- a -NR2R3 skupinami.
Jestliže ve sloučeninách vzorce I -NR2R3 substituent je 5-6členný aromatický nebo nearomatický heterocyklický kruh, který může obsahovat jiný heteroatom jako je síra, kyslík a dusík, jsou výhodnými příklady uvedených heterocyklických kruhů 1-imidazolyl, 1-pyrrolyl, 1tetrahydropyrrolyl, 1-pyrazolyl, 4-morfolinyl, 1-piperidinyl, 1-piperazinyl, l-(4-methyl)piperazinyl, l-(4-benzyl)-piperazinyl.
Zvláště výhodné jsou sloučeniny vzorce I, ve kterých je R C2-C]0alkyl vybraný ze skupiny, zahrnující:
- zbytek vzorce -(CH2)p-NH2, kde p je 2,3 nebo 4,
- zbytek vzorce -(CH2)P-NR2R3, kde p má výše definovaný význam a R2 a R3 jsou Ci-C6alkyl nebo tvoří spolu s atomem dusíku heterocyklický kruh vybraný ze skupiny, zahrnující 1ethylenimin, 1-pyrrolidin, 4-morfolin, 1-piperazin, 4—methyl-l-piperazin, 4-benzyl-lpiperazin, 1-piperidin,
- zbytek vzorce -(CH2)P-NR2R3, kde p je definován výše a R2 je vodík a R3 je Ci-C6alkyl,
NH
II
- zbytek vzorce -(CH2)p-NH-C-NH2, kde p má výše definovaný význam,
- zbytek vzorce -(CH2)p-NH-(CH2)q-OH, kde p a q jsou nezávisle na sobě celá čísla vybraná ze skupiny, zahrnující 2,3,4,
- zbytek vzorce -(CH2)P-OH, kde p má výše definovaný význam,
- zbytek vzorce -(CH2)p-O-(CH2)q-OH, kde p a q mají výše definovaný význam.
Specifické příklady výhodných sloučenin podle tohoto vynálezu jsou následující:
6.9- bis//(2-(amino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion,
6.9- bis//2-(4'-morfolino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,l 0-dion,
6.9- bis//2-(dimethylamino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion,
6.9- bis//2-(diethylamino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion,
6.9- bis//2-/di(sek.propy l)amino/ethyl/amino/benzo/ g/isochinolin-5,10-dion,
6.9- bis//2-( 1 '-pyrrolidino)ethyl/ammo/benzo/g/isochinolin-5,10-dion,
6,9-bis//2-( 1 '-aziridino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion,
-5CZ 286180 B6
6.9- bis//2-(methansulfonyloxy)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,l 0-dion,
6.9- bis//4-(amino)butyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion,
6.9- bis//3-(amino)propal)/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion,
6.9- bis//2-/(2-hydroxyethyl)amino/ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion,
6.9- bis//3-(dimethylamino)propyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,l 0-dion,
6.9- bis//(2-hydroxy)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion,
6.9- bis//(2-(2-hydroxyethoxy)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,l 0-dion,
6.9- bis//2-(methylamino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion,
6.9- bis//2-(ethylamino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion,
6.9- bis//2-(n-propylamino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,l 0-dion,
6.9- bis//2-(sek-propylamino)ethyl/amino/benzo/g/-isochinolin-5,l 0-dion,
6.9- bis//2-(guanidino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion,
6.9- bis//(2-amino-2,2-dimethyl)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,l 0-dion.
Předmětem tohoto vynálezu jsou rovněž farmaceutické prostředky s antitumorovou aktivitou, které jako účinnou látku obsahují substituované benzo-isochinolindiony podle vynálezu, obecného vzorce I, ve spojení s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo přísadou.
Zvlášť výhodné jsou farmaceutické prostředky definované dále podle nároků 15 až 26.
Předmětem vynálezu je také způsob syntézy substituovaných benzo-isochinolindionů podle vynálezu, obecného vzorce I, v němž všechny substituenty mají významy uvedené shora, jako volných bází nebo jejich solí s farmaceuticky přijatelnými kyselinami. Podstata způsobu syntéze spočívá v tom, že se
a) anhydrid pyridin-3,4—dikarboxylové kyseliny uvede v reakci s 1,4—difluorbenzenem v přítomnosti Lewisovy kyseliny za vzniku směsi sloučenin vzorce Vila a Vllb
b) směs sloučenin Vila a Vllb se cyklizuje v přítomnosti 30%ní dýmavé kyseliny sírové při teplotě 130 až 150 °C za vzniku sloučeniny vzorce II
-6CZ 286180 B6
c) atomy fluoru ve sloučenině II se nahradí reakcí se stechiometrickým množstvím nebo slabým nadbytkem sloučeniny obecného vzorce ΠΙ
R-NH2 ( ΠΙ) v němž skupiny -NH- a -OH v R jsou popřípadě chráněny vhodnými chránícími skupinami, popřípadě v přítomnosti rozpouštědla a anorganické či organické báze, při teplotě v rozsahu 0 °C až teploty varu rozpouštědla,
d) chránící skupiny, jež mohou být přítomny v R, se popřípadě odstraní za vzniku sloučenin vzorce I a
e) sloučeniny vzorce I se popřípadě převedou na soli a/nebo solváty nebo se rozdělí na jejich izomerty.
Při jednom provedení způsobu syntézy substituovaných benzo-isochinolindionů podle vynálezu, obecného vzorce I, v němž R je skupina vzorce -(CH2)p-NH-(CH2)q-OH, v níž p a q jsou celá čísla 2, 3 nebo 4, se postupuje tak, že se sloučenina vzorce I, v němž R je skupina -(CH2)pOS(O2)R5, v níž R5 je vybráno ze skupiny zhmující Ci-CiOalkyl, Cp-Cioaralkyl, α-, β- nebo γnaftyl, fenyl nebo o-, m- nebo p-tolyl, uvede v reakci se sloučeninou vzorce H2N-(CH2)q-O-E, v němž E je vybráno ze skupiny zahrnující trialkylsilan, (dialkyl)arylsilan, formyl nebo acetyl, popřípadě s následným odstraněním chránící skupiny E.
Při jiném provedení způsobu syntézy substituovaných benzo-isochinolindionů podle vynálezu, shora uvedeného obecného vzorce I, v němž R je skupina -(CH2)P-NR2R3, v níž jeden ze substituentů R2 nebo R3 je vodík a druhý je vodík nebo Ci-C6alkyl, se postupuje tak, že se ve stupni c) nahradí atomy fluoru jednou chráněným diaminem obecného vzorce H2N-(CH2)PN(COOR3)R3, v němž p je celé číslo 2, 3 nebo 4 a R5 je vybráno ze skupiny Ci-CiOalkyl, C7Cioaralkyl, α-, β- nebo γ-naftyl, ο-, m- nebo p-tolyl, za vzniku meziproduktu obecného vzorce I, v němž Rje skupina -ÍCH2)P-N(COOR5)R3.
Při dalším provedení způsobu syntézy substituovaných benzo-isochinolindionů shora uvedeného obecného vzorce I, v němž R je skupina -{CH2)p-NH-C(=NH)NH2, v níž p je celé číslo 2, 3 nebo 4, je postup ten, že se sloučenina obecného vzorce I, v němž Rje skupina vzorce -(CH2)PNH2, uvede v reakci s reagentem vzorce H2N-C(=NH)SO3H.
Reakce sloučeniny vzorce II se sloučeninou vzorce ΠΙ se obecně provede za přítomnosti stechiometrického množství nebo slabého molámího přebytku sloučeniny vzorce III v rozpouštědle jako je methylenchlorid, chloroform, 1,1,1-trichlorethan, dimethoxyethan, tetrahydrofuran, dimethylsulfoxid, dimethylformamid, pyridin, pikolin, ajejich směsi, nebo, je-li to žádoucí použije se sloučenina vzorce ΠΙ sama jako rozpouštědlo, popřípadě za přítomnosti anorganické báze jako je uhličitan alkalického kovu nebo kovu alkalických zemin nebo takový hydrogenuhličitan, nebo organické báze jako je trialkylamin, při teplotě od 0 °C do teploty refluxu rozpouštědla.
Výhodně se reakce provede v rozpouštědle jako je pyridin, chloroform nebo dimethylsulfoxid, za použití 2 až 10 ekvivalentů sloučeniny vzorce ΙΠ na 1 ekvivalent sloučeniny vzorce Π a pracuje se při teplotě v rozmezí od teploty místnosti do 50 °C.
6,9-diFluorobenzo/g/isochinolin-5,10-dion vzorce Π může být připraven vícestupňovým postupem zahrnujícím Friedel-Crafitsovu acylaci 1,4-difluorbenzenu anhydridem kyseliny pyridin—3,4-dikarboxylové, což vede ke sloučeninám, majícím vzorce Vila a VHb
-7CZ 286180 B6
( Vila )
Sloučeniny vzorců Vila a Vllb mohou pak být podrobeny cyklizační reakci ve 30 % dýmavé kyseliny sírové při 130 až 150 °C za vzniku sloučeniny vzorce II.
Sloučeniny vzorce III, IV a V jsou známé, komerčně dostupné nebo mohou být připraveny známými postupy.
Hodnocení biologické aktivity sloučenin podle předloženého vynálezu bylo provedeno „in vitro“ a „in vivo“ postupy vyvinutými v U.S. National Cancer Institute.
Hodnocení „in vitro“ cytotoxické aktivity sloučenin podle vynálezu bylo provedeno za použití buněčné linie lidského adenokarcinomu kolonu (Lovo) izolovaného z metastatických bulek asublinie se získanou rezistencí k mnoha protinádorovým činidlům, zejména doxorubicinu, VP16 a vinkristinu. Tato sublinie (pojmenovaná Lovo/DX) ukazuje sníženou akumulaci doxorubicinu a nadměrnou expresi proteinu (Grandi M., Geroni C., Giuliani F. C., British J. Cancer (1986), 54, 515). Sloučeniny byly testovány MTT zkouškou (Mosman T., „Rapid Colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assy“, J. Immunol. Methods, (1983), 65, 55-63; Green L. M., „Rapid colorimetric assay for cell viability; application to the quantitation of cytotoxic and growth inhibitory lymphokines“, J. Immunol. Methods, (1984), 70, 257-268) ve srovnání s mitoxantronem, ametantronem a doxorubicinem. Údaje jsou uvedeny v tabulce VI.
Obecně byly reprezentativní sloučeniny podle vynálezu stejně cytotoxické jako ametantron a mitoxantron v Lovo buněčné linii, nejvyšší cytotoxicita (vynikající vzhledem k mitoxantronu) byla prokázána u sloučeniny 6,9-bis//2-(dimethylamino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10dionu 10a popsanému v příkladu 4 příkladové části popisu. Při testování ametantronu nebo mitoxantronu v Lovo/DX buněčné linii byl zjištěn index rezistence R. I. (definovaný jako poměr IC5o pro rezistentní buněčnou linii k IC50 pro citlivou buněčnou linii) jako vyšší než 101,2 a 29,0, což ukazuje že tato sublinie má rezistenci k mitoxantronu a ametantronu. Na druhé straně, jestliže je testovaná sloučenina podle vynálezu testována ve stejné rezistentní sublinii, neobjevuje se žádná křížová rezistence s mitoxantronem a ametantronem, jak bylo pozorováno pro sloučeniny 10a, 12c, 10b, lOe a lOd, popsaných v příkladech 4,22, 5, 8, a 7 příkladové části. Tyto sloučeniny obecně vykazují na této rezistentní sublinii stejnou IC50 jako ametantron na citlivé Lovo buněčné linii. Sloučenina 10a, byla aktivnější než mitoxantron v Lovo/DX buněčné linii.
Tato „in vitro“ data potvrzují, že reprezentativní sloučeniny podle vynálezu mohou být použity za účelem překonání multidrogové rezistence zprostředkující mechanismus nádorové rezistence.
„In vitro“ cytotoxické hodnocení bylo také provedeno na buňkách L 1210 myší leukemie za použití výše uvedených buněk udržovaných v suspenzní kultuře (McCoyovo 5A médium doplněné 10 % koňského séra, glutaminem, penicilinem a streptomycinem), kultivovaných ve
-8CZ 286180 B6 vlhkém prostředí s 10% oxidu uhličitého a 90 % vzduchu při 37 °C. Tyto sloučeniny byly rozpuštěny v dimethylsulfoxidu (DMSO) a přidány k suspendovaným buňkám ve vhodných koncentracích. Po 72 hodinách kontinuální expozice byla spočtena koncentrace buněk za použití zařízení Coulter Counter a inhibice růstu byla vypočtena za použití vzorce:
% inhibice růstu = 1 - /počet ošetřených buněk/počet buněk v samotném DMSO/ x 100.
IC50 byla vypočtena z hodnot inhibice růstu a pak jsou tyto koncentrace uvedeny v tabulce VII ve srovnání se sloučeninou podle známého stavu techniky 5a (viz tabulka I pro strukturu 5a).
Studie biologické aktivity „in vivo“ reprezentativních sloučenin podle vynálezu byly provedeny za použití P 388 a L 1210 modelu myší leukemie.
Buňky P 388 myší leukemie byly intraperitoneálně (ip) nebo intravenozně (iv) injektovány myším CD2F1. Ošetření započalo asi 24 hodin po transplantaci nádoru a dávky léčiva byly podávány ip (P388 ip/ip) nebo iv (P388 iv/iv) podle stanoveného protokolu, obvykle 3-den(P388 iv/iv) nebo 4-denních(P388 ip/ip) intervalech. Studie byly prováděny po 60 dnů a údaje o úmrtí každého zvířete byly zaznamenávány. % T/C byla stanovena za použití průměrné doby přežití (MST) pro každou skupinu podle vzorce % T/C = /(MST ošetřených)/(MST kontrolních)/ x 100
Například dvě reprezentativní sloučeniny podle předloženého vynálezu, jmenovitě 6,9—bis//2— (amino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion lOi a dimaleátová sůl lOi maleát popsaný v příkladu 12 a 6,9-bis//(2-dimethylamino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion 10a popsaný v příkladu 4 vykazuje aktivitu mnohem lepší než mitoxantron v P 388 iv/iv modelu. Sloučenina lOi podle předloženého vynálezu, jak jako hydrochlorid lOi.HCl tak dimaleátová sůl lOi.maleát, popsaná v příkladul2, byla vynikající vůči mitoxantronu také v P 388 ip/ip modelu. Navíc výše uvedené reprezentativní sloučeniny podle vynálezu vykazují antileukemickou aktivitu v širokém rozsahu dobře tolerovaných dávek a zejména jsou aktivní v dávkách, které jsou nižší než maximální tolerovaná dávka, což poskytuje indikaci mnohem lepšího terapeutického indexu ve srovnání s mitoxantronem. Výsledky jsou uvedeny v tabulce VII a tabulce IX.
Protinádorová aktivita reprezentativních sloučenin podle vynálezu byla také hodnocena na L 1210 modelu myší leukemie.
Buňky L 1210 myší leukemie byly intraperitoneálně (ip) injektovány CDF1 myší a ošetření započalo přibližně 24 hodin po transplantaci tumoru. Dávky léčiva byly podávány ip podle předtím stanoveného postupu, obvykle ve čtyřdenních intervalech. Studie byla prováděna po 60 dnů a údaje o smrti každého zvířete byly zaznamenávány. % T/C byla stanovena za použití průměrné doby přežití (MST) pro každou skupinu podle vzorce % T/C = /(MST ošetřených)/(MST kontrolních)/ x 100
Výsledky jsou uvedeny v tabulce X a XI.
Z tabulky X je zřejmá překvapující vynikající antileukemická aktivita reprezentativních sloučenin podle vynálezu (jmenovitě sloučeniny 10a z příkladu 4, sloučeniny lOi.HCl z příkladu 12 a 6,9-bis//2-(2-hydroxyethylamino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dionu 101 připraveného v příkladu 17 (dimaleátová sůl) ve srovnání se sloučeninou 5a.
Z tabulky XI je zřejmá vynikající antileukemická aktivita sloučeniny lOi.HCl podle vynálezu a mitoxantronu.
-9CZ 286180 B6
Aktivita vůči pevným tumorům u sloučenin podle vynálezu byla demonstrována za použití myšího Lewisova plicního karcinomu a lidského karcinomu prsu MX-1 jako modelů. Tyto nádorové modely jsou zahrnuty v panelu osmi transplantovaných tumorů použitých U.S.-NC1 jako screen-panel pro výběr klinicky vhodných protinádorových činidel (R.K..Y. Zee Cheng a C. C. Cheng, „Screening and evaluation of anticancer agents“, Meth. and Find. Expl. Clin. Pharmacol., (1988), 10(2), 67-101). Například tabulka XII ukazuje údaje aktivity vůči těmto dvěma pevným tumorům jedné z reprezentativních sloučenin podle vynálezu, 6,9—bis//(2— amino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion-maleátu (lOi.maleát, příklad 12).
Protože reprezentativní sloučeniny podle vynálezu vykazují dobré výsledky vůči „in vivo“ modelům myší P 388 a L 1210 leukémií, myšího Lewisova plicního karcinomu a lidského karcinomu prsu MX-1, jak bylo uvedeno výše, což je předurčuje i pro dobré výsledky u lidí. Očekává se, že sloučeniny, které jsou zde popsány, budou operativní vůči lidským leukémiím a pevným tumorům.
Sloučeniny podle předloženého vynálezu tak mohou být použity jako aktivní složky terapeutických přípravků pro vyvolání regrese a/nebo zmírnění rakoviny u savců, při podání v množstvích od asi 1 mg do asi 0,4 g na kilogram tělesné hmotnosti. Výhodný dávkový režim by měl být od asi 1 mg do asi 50 mg na kilogram tělesné hmotnosti na den. Mohou být použity jednotlivé dávky od asi 70 mg do asi 3,5 g aktivní sloučeniny pro subjekt o tělesné hmotnosti asi 70 kg, které se podávají ve 24hodinovém období. Dávky mohou být upraveny tak, že budou kompatibilní s jinými léčebnými režimy, jako je léčba ozařováním.
Farmaceutický přípravek může být ve formě tablet, kapslí, gelových kapslí, čípků, lyofilizovaných prášků a roztoků pro intravenózní podání.
Vynález je ilustrován následujícími neomezujícími příklady a variacemi, které jsou zřejmé odborníkům v oboru. Případné vzorce jsou uvedeny v tabulkách I, ΠΙ, IV a V.
Tabulka III o
o 7
- 10CZ 286180 B6
Tabulka IV
O
NH-CH2CH2-NRjP nh-ch2ch2-nr,r2
10a,R = R, = CH3 b, R = RI=CH2CH3 c, R = R!=CH(CH3)2 d, R = Ri = -CH2CH2CH2CH2- e, R = R] = -CH2CH2OCH2CH2-
CR = Ri=-CH2CHr g, R = H, Ri = CO2tBu h, R = CH3, Ri = CO2tBu i R = Rj = H j, R = H, Ri = COCH3 k, R = H, Ri=CH3 l, R = H, R] = CH2CH2OH m, R = H, Ri = CH2CH2OCH3 n, R = H, Ri = CH2CH3 o, R = H, Ri = CH2CH2CH3 p, R = H; R,=CH(CH3)2
Tabulka V
NH-CH2CH2-OR
NH-CH2CH2-OR
Ha, R = H b, R = SO2CH3 c, R = CH2CH2OH
NH- (CHj) „ -NRjR2
NH- (CH2)„-NRjR2
12a,n = 3,R = R! = H b, n = 4, R = R! = H c, n = 3, R = R1 = CH3
-11 CZ 286180 B6
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Anhydrid kyseliny pyridin-3,4~dikarboxylové (7)
Směs kyseliny pyridin-3,4-dikarboxylové (15,0 g, 0,09 mol) a acetanhydridu (30 ml) se refluxuje 2 hodiny. Přebytek acetanhydridu se odstraní destilací a anhydrid se shromáždí a čistí sublimací (123 °C při 3 mm Hg), získá se sloučenina 7 jako bílá pevná látka (10,1 g, 76 %), t.t. 74 až 76 °C. ’H NMR (CDC13) 9,39 (s, 1H), 9,24 (d, 1H), 7,94 (d, 1H).
Příklad 2
Kyselina 4-(2',5'-difluorbenzoyl)nikotinová 8a a kyselina 3-(2',5'-difluorbenzoyl)isonikotmová 8b
Směs sloučeniny 7 (5,0 g, 0,033 mol) a chloridu hlinitého (17,5 g, 0,131 mol) v 1,4-difluorbenzenu se zahřívá na olejové lázni na 110 °C 22 hodin. Přebytek 1,4-difluorbenzenu se odstraní destilací. Zbytek se ochladí na ledové lázni a rozloží ledovou vodou (75 ml) a koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou (6,3 ml). Vysrážená pevná látka se odfiltruje a sušením poskytne bílý prášek (7,7 g, 87%). Tento materiál se krystaluje z acetonitrilu a vody, t.t. 214 až 217 °C, ’HNMR (DMSO-d6), 9,15(s), 8,90 (d), 8,80 (d), 7,90 (d), 7,5(m), 7,4(m).
Elementární analýza pro Ci3H7F2NO3 vypočteno: 59,32 % C, 2,69 %H, 5,32 %N nalezeno: 59,03 % C, 2,55 %H, 5,18 %N.
Příklad 3
6,9-Difluorobenzo/g/isochinolin-5,10-dion 9
Směs ketokyseliny 8a a 8b (3,0 g, 0,011 mol) v dýmavé kyselině sírové (7,5 ml, 30% SO3) se zahřívá na olejové lázni na 135 až 140 °C po 3 hodiny. Po ochlazení na teplotu místnosti se směs nalije na led (200 ml) a neutralizuje hydrogenuhličitanem sodným. Extrakcí methylenchloridem se získá sloučenina 9 jako žlutá pevná látka (2,0 g, 72 %), t.t. 199 až 200 °C, ]HNMR (CDC13) 9,54 (s, 1H), 9,12 (d, 1H), 8,03 (d, 1H), 7,57 (m, 2H),
Elementární analýza pro Ci3H5F2NO3 vypočteno: 63,67 %C, 2,04 %H, 5,71 %N nalezeno: 63,86 %C, 1,66 % H, 5,39 %N.
Příklad 4
6,9-Bis//2-(dimethylamino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion 10a
Směs 6,9-difluorbenzo/g/isochinolin-5,10-dionu 9 (20 mg, 0,08 mmol) a N,N-dimethylethylendiaminu (0,8 mmol, 0,8 ml 1M roztok v pyridinu) se míchá při teplotě místnosti 48 hodin. Většina pyridinu se odpaří, přidá se ether a produkt 10a se získá filtrací (24 mg, 79 %), t.t. 167 až 168 °C, *H NMR (CDC13) 11,06 (š.t, 1H), 10,97 (š t, 1H), 9,63 (s, 1H), 8,92 (d, 1H), 8,13 (d, 1H), 7,32 (m, 2H), 3,54 (q, 4H), 2,7 (t, 4H), 2,38 (s, 12H); hmotové spektrum m/z (relativní
-12CZ 286180 B6 intenzita) 381 (2,0, M+), 59 (5,4), 59 (100), UV λ max (2-methoxyethanol) 580 (sh, 6200), 614 (10 600), 661 (12 700).
Elementární analýza pro C21H27N5O2 vypočteno: 66,12 % C, 7,13 % H, 18,36 %N nalezeno: 66,22 % C, 7,10 % H, 18,20%N.
Příklad 5
6,9-Bis//2-(diethylamino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion
Roztok N,N-diethylethylendiaminu (684 mg, 5,9 mmol) v pyridinu (2 ml) se přidá ke sloučenině 9 (202 mg, 0,82 mmol) v pyridinu (2 ml). Červená směs se míchá při teplotě místnosti 48 hodin (TLC analýza po této době ukazuje jednu modrou složku: silikagel, 5% MeOH/CHCl3). Přebytek báze a pyridinu se odstraní odpařením pomalým proudem plynného dusíku. Surový materiál se pak umístí přes noc pod vakuum. Po přídavku ledu-vody ke zbytku se pevná látka oddělí filtrací a suší (330 mg, 84 %), t.t. 142 až 144 °C. *H NMR (CDC13) 11,10 (t, 1H), 11,00 (t, 1H), 9,60 (s, 1H), 8,92 (d, 1H), 8,10 (d, 1H), 7,25 (m, 3H), 3,50 (m, 1H), 2,82 (m, 1H), 2,35 (m, 3H), 1,10 (m, 12H).
Elementární analýza pro C25H35N5O2 vypočteno: 68,62 % C, 16,00 % H, 7,31 % N nalezeno: 67,95 %C, 16,05 % H, 7,28 %N.
Příklad 6
6.9- Bis//2-/di(sek.propyl)amino/ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion 10c
N, N-Diisopropylethylendiamin (588 mg, 4,1 mmol) se přidá ke sloučenině 9 (100 mg,
O, 41 mmol) v methanolu (1 ml) a vodě (1 ml). Směs se nechá míchat při teplotě místnosti 88 hodin a pak se nalije do ledové vody. Modrá sraženina se odstraní filtrací. Pevná látka se čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu. Počátečním elučním činidlem byl chloroform, pak 2% a 20% methanol v chloroformu. Koncentrace druhých eluantů poskytla 163 mg (81 %) produktu 10c, t.t. 134 až 136 °C, ’HNMR (CDC13): 10,95-11,20 (m, 2H), 9,63 (s, 1H), 8,92 (d, 1H), 8,13 (d, 1H), 7,33 (m, 2H), 3,45 (2q, 4H), 3,10 (h, 4H), 2,82 (t, 4H), 1,08 (d, 24H).
Elementární analýza pro C^HnNsCfy vypočteno: 70,55 %C, 8,78 % H, 14,19 %N nalezeno: 69,23 % C, 8,71 % H, 13,43 % N.
Příklad 7
6.9- Bis//2-( 1 '-pyrrolidino)ethyl/amino/benzo/q/isochinolin-5,10 dion 1 Od
Roztok l-(2-aminoethyl)pyrrolidinu (690 mg, 6,0 mmol) v pyridinu (2 ml) se přidá k 9 (202 mg, 0,82 mmol) v pyridinu (2 ml). Směs se míchá při teplotě místnosti 49 hodin. Přebytek báze a pyridinu se odstraní za použití mírného proudu dusíku. Zbytek se přes noc umístí pod vakuum. Ke zbytku se přidá studená voda a oddělí se lepivá pevná látka. Produkt se extrahuje chloroformem (3 x 35 ml), extrakty se suší nad síranem sodným a chloroform se odstraní na rotační odparce, získá se titulní sloučenina (260 mg, 73 %), TLC, silikagel, 5% MeOH/CHCl3, jedna modrá skvrna, t.t. 141 až 142 °C. 'HNMR (CDC13) 11,15 (t, 1H), 11,00 (ζ 1H), 9,65 (s, 1H), 8,90 (d, 1H), 8,05 (d, 1H), 7,35 (m, 2H), 3,65 (m, 4H), 2,90 (m, 4H), 2,70 (m, 8H), 1,85 (m, 8H).
-13CZ 286180 B6
Elementární analýza pro C25H31N5O2 vypočteno: 69,26 % C, 7,21 % Η, 16,15 % N nalezeno: 69,02 % C, 7,25 % H, 16,00%N.
Maleátová sůl: Pod atmosférou dusíku se přidá roztok kyseliny maleinové (271 mg, 2,34 mmol) v ethanolu (5 ml) k míchané suspenzi sloučeniny lOd (450 mg, 1,04 mmol) v ethanolu (20 ml). Po dvou hodinách míchání se pomalu přidá diethylether (25 ml) a sraženina se odfiltruje a suší pod vakuem při 40 °C. Získá se hygroskopická dimaleátová sůl lOg (580 mg), t.t. 164 až 166 °C. Elementární analýza pro C33H39N5O10.H2O vypočteno: 57,96 % C, 6,04 % H, 10,24%N nalezeno: 57,85 % C, 5,99 % H, 10,14 %N.
Příklad 8
6,9-Bis//2-(4'-morfolino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion 1 Oe
Roztok 4-(2-aminoethyl)morfolinu (220 mg, 1,7 mmol) v pyridinu (2 ml) se přidá ke sloučenině 9 (102 mg, 0,42 mmol) v pyridinu (1 ml). Červená směs se míchá při teplotě místnosti 120 hodin. Přebytek aminu a pyridinu se odpaří za použití pomalého proudu dusíku a zbytek se umístí přes noc pod vakuum. Směs se vyjme do chloroformu a pak se filtruje. Odstraněním chloroformu se získá modrá pevná látka, která na TLC (silikagel, 25% MeOH/75 % CHCl3/několik kapek vod. hydroxidu amonného) vykazuje jednu modrou skvrnu (140 mg, 72 %), 'HNMR (CDC13) 11,015 (m, 1H), 10,90 (m, 1H), 9,62 (d, 1H), 8,90 (d, 1H), 8,10 (d, 1H), 7,25 (m, 2H), 3,80 (m, 8H), 3,55 (m, 4H), 2,75 (t, 4H), 2,50 (m, 8H).
Elementární analýza pro C25H31N5O4 vypočteno: 64,22 % C, 6,68 % H, 11,98%N nalezeno: 63,95 %C, 6,78 % H, 11,89%N.
Příklad 9
6,9-Bis//2-( 1 '-aziridino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolino-5,10-dion 1 Of
Postup z příkladu 4 se opakuje a reaguje sloučenina 9 s N-(2-aminoethyl)aziridinem a zbytek získaný po odpaření pyridinu se čistí sloupcovou chromatografii na silikagelu.
Hlavní modrý pruh eluovaný pomocí 10% CH3OH v CHC13 byl oddělen. Krystalizaci ze směsi methylenchloridu a ligroinu poskytl tmavě modrou pevnou látku, t.t. 100 až 103 °C, *HNMR (CDCI3) 11,23 (š, 1H), 11,15 (š, 1H), 9,73 (s, 1H), 8,91 (d, 1H), 8,12 (d, 1H), 7,40 (d, 1H), 7,38 (d, 1H), 3,69 (q, 4H), 2,60 (t, 4H), 1,85 (m, 4H), 1,24 (m, 4H), hmotové spektrum m/z (relativní intenzita) 377 (100, Tvf), 278 (72,7), 56 (12,6).
Elementární analýza pro C21H23N5O2 vypočteno: 66,82 % C, 6,14 % H, 18,55 %N nalezeno: 66,50 %C, 6,00 % H, 18,20%N.
Příklad 10
6,9-Bis//2-/N-(terc.butoxykarbonyl)amino/ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion 1 Og
Roztok 9 (0,10 g, 0,41 mmol) a N-(terc.butoxykarbonyl)ethylendiaminu (Synth.Comm., (1990), 20, 2559; 0,65 g, 4,10 mmol) v pyridinu (4,0 ml) se míchá při teplotě místnosti 24 hodin.
-14CZ 286180 B6
Přídavkem vody (20 ml) se vyloučí lOg a suší (0,17 g, 80 %), t.t. 213 až 216 °C. Krystalizací se směsi CHC13:CC14 se získá tmavě modrá pevná látka, t.t. 215 až 216 °C, *HNMR (CDC13) 11,07 (š, 1H), 10,96 (š, 1H), 9,49 (s, 1H), 8,90 (d, 1H), 7,99 (d, 1H), 7,32 (s, 2H), 5,30 (š, 2H), 3,58 (m, 4H), 3,47 (m, 4H), 1,56 (s, 18H), hmotové spektrum m/z (relativní intenzita) 525 (100, M+)
339(51,9), 57(87,7).
Elementární analýza pro C27H35N5O6 vypočteno: 61,70 % C, 6,73 % H, 13,32 % N nalezeno: 61,18 % C, 6,29 % H, 12,88 %N.
Příklad 11
6.9- Bis//2-(N-terc.butoxykarbonyl-N-methylamino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10dion lOh
6.9- Difluorbenzo/g/isochinolin-5,10-dion (0,29 g, 1,18 mmol) se přidá k míchanému roztoku N-(terc.butoxykarbonyl)-N-methylethylendiaminu (0,824 g, 4,73 mmol) (J. Med. Chem. 1990, 33, 97) v suchém pyridinu (5 ml). Reakční směs se míchá pod atmosférou dusíku 24 hodin při teplotě místnosti a pak dalších 8 hodin při 50 °C. Rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku a získaný modrý zbytek se vyjme do CH2C12 (50 ml), promyje se 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2 x 30 ml) a vodou (30 ml). Spojené organické fáze se suší nad síranem sodným a rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku.
Modrý zbytek se čistí sloupcovou chromatografií (silikagel, 230-400 mesh, 50 g, eluční činidlo CH2Cl2:AcOEt:MeOH 93:5:2), získá se 400 mg (61 %) modrých krystalů, t.t. 161,5 až 162,5 °C po rekrystalizaci ze směsi CH2C12: hexan.
'HNMR (CDC13) 1,49 (s, 18H), 2,94 (s, 6H), 3,45-3,75 (m, 8H), 7,25-7,55 (m, 2H), 8,12 (d, 1H), 8,95 (d, 1H), 9,62 (s, 1H), 10,95-11,23 (m, 2H, vyměnitelný s D2O).
Příklad 12
6,9-Bis//2-(ámino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion 1 Oi
Zdifluoridu 9: Pod atmosférou dusíku se přidá 1,2-diaminoethan (8,72 ml, 130,5 mmol) k míchanému roztoku sloučeniny 9 (4,00 g, 16,3 mmol) v pyridinu (80 ml). Vyvinutá slabě exotermní reakce byla zpomalována chlazením na vodní lázni o teplotě 20 °C. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti 34 hodin, pak byla ochlazena na -5 °C na 30 minut, pevná látka byla oddělena odsátím pod proudem dusíku a sušena přes noc pod vakuem při 30 °C. Získaný surový materiál (6,07 g) se rekrystaluje rozpuštěním v methanolu (20 ml) při 40 °C a znovu se vysráží methylenchloridem (100 ml) a n-hexanem (300 ml), získá se 5,12 g lOi jako modré pevné látky.
'HNMR (CDC13): 11,10-11,30 (2m, 2H), 9,53 (s, 1H), 8,93 (d, 1H), 8,13 (d, 1H), 7,35 (m, 2H), 3,55 (q, 4H),3,10(t,4H).
HPLC Lichrospher 100 RP18, 5 pm, eluant: heptansulfonát sodný 2 g/1 ve vodě:CH3CN:dioxanu 75:25:5, pH 3 s H3PO4, = 245 nm, průtok 1 ml/min, RT = 8,80 minut.
Maleátová sůl: pod atmosférou dusíku se volná báze (3,50 g, 10,8 mmol) rozpustí ve směsi ethanolu (170 ml) a methanolu (30 ml) zahříváním na 50 °C po 10 minut, potom se přidá roztok kyseliny maleové (2,87 g, 24,7 mmol) v ethanolu (30 ml). Po pětiminutovém zahřívání na 50 °C se směs nechá vychladnout na teplotu místnosti a pak při 4 °C po 2 hodiny. Sraženina se oddělí odsátím pod proudem dusíku a suší při 40 °C pod vakuem, získá se 5,75 g surového dimaleátu.
-15CZ 286180 B6
K míchané suspenzi tohoto surového materiálu (5,71 g) ve vodě (90 ml) při 50 °C se přidá ethanol po kapkách až do získání úplného roztoku (asi 300 ml), potom se přidá více ethanolu (400 ml) a směs se nechá vychladnout na teplotu místnosti. Po 12 hodinách se sraženina oddělí sáním, promyje se ethanolem (15 ml) a diethyletherem (10 ml) a pak se suší pod vakuem při 30 °C 5 hodin. Získá se 4,22 g dimaleátové soli lOi, t.t. 176 až 178 °C, svrašťování, netaje až do 245 °C.
Elementární analýza pro Ci7H19N5O2.2C4H4O4.1,5 H2O vypočteno: 51,37%C, 5,17 % H, 11,98%N nalezeno: 51,31 % C, 4,99 %H, 11,93%N.
*H NMR (DMSO-de) 10,92 (š, 1H), 10,87 (š, 1H), 9,45 (s, 1H), 9,01 (m, 1H), 8,08 (m, 1H), 7,59 (s, 2H), 6,03 (s, 4H), 3,76 (š, 4H), 3,08 (m, 4H). UV, 1,528 mg ve vodě (50 ml), nm (E 1%): 641 (271), 597 (245), 313 (98), 273 (257), 246 (479).
Hydrochloridová sůl:
a) Z aminu lOi: Chlorovodík se probublává roztokem surového aminu v chloroformu až již roztok nemodrá. Pevná látka se odfiltruje a sušením poskytne tmavě morou hygroskopickou pevnou látku (0,174 g, 26 %), t.t. 209 až 212 °C, ’HNMR (DMSO-d6) 10,91 (š, 2H), 9,44 (s, 1H), 9,01 (d, 1H), 8,23 (š, 4H), 8,09 (d, 1H), 7,74 (s, 2H), 3,84 (m, 4H), 3,02 (m, 4H). Elementární analýza pro C]7Hi9N5O2.2HC1.4H2O vypočteno: 44,94 % C, 6,43 %H, 15,41 %N nalezeno: 44,52 % C, 5,29 %H, 14,53 %N.
Volný amin může být regenerován přídavkem pevného uhličitanu draselného ke vzorku pro NMR. ’H NMR analýza indikuje přítomnost volného aminu.
b) Odstraněním chránící skupiny t-Boc z analogu lOq: Plynný chlorovodík se probublává roztokem 10 g (0,160 g, 0,30 mmol) v suchém chloroformu (10 ml) po 30 minut. Tmavě modrá pevná látka se filtruje a suší (0,115 g, 95 %), t.t. 213 až 215 °C, struktura byla potvrzena jako hydrochloridová sůl 1 Oi *H NMR analýzou.
Příklad 13
6,9-Bis//2-(acetylamino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10 dion 1 Oj
Opakuje se postup z příkladu 12 za použití sloučeniny 9 a 1,2-diaminoethanu a surová reakční směs se nanese na sloupec silikagelu. Na sloupec se vloží acetanhydrid (30 ml) a nechá se stát 15 minut. Hlavní modrá frakce lOj se eluuje 1:4 CH3OH:CHC13 a po krystalizaci ze směsi CHC13:CH3OH poskytla modrou pevnou látku (0,240 g 35%) t.t. 155 až 156 °C, ’HNMR (DMSO-d6) 11,12 (t, 1H), 11,02 (t, 1H), 9,42 (s, 1H), 8,95 (d, 1H), 8,15 (š, 2H), 8,03 (d, 1H), 7,62 (s, 2H), 3,57 (m, 8H), 1,83 (s, 6H), hmotové spektrum m/z (relativní intenzita) 409 (2,5, M*), 337 (6,4), 86(100).
Elementární analýza pro C12H23N5O4 vypočteno: 61,60 % C, 5,67 %H, 17,10 %N nalezeno: 61,37%C, 5,42 %H, 16,89 %N.
Příklad 14
6,9-Bis//2-(methylamino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion-trihydrochlorid 1 Ok
-16CZ 286180 B6
Ethanolická HC1 se přidá (6,7N, 2,0 ml) k roztoku 6,9-bis//2-(N-terc.butoxykarbonyl-Nmethylamino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dionu lOh (440 mg, 0,795 mmol) vCHC13 (40 ml). Reakční směs se míchá při teplotě místnosti pod atmosférou dusíku 24 hodin, potom se vzniklé tmavě zelené krystaly oddělí filtrací, promyjí se absolutním ethanolem a suší při 40 °C ve vakuu, získá se 945 mg (94% výtěžek) čistého produktu, t.t. 188 °C rozkl. (DSC hodnocení). Elementární analýza pro Ci9H26C13N5O2.2H2O vypočteno: 46,51 % C, 6,03 % H, 14,14 % N, 23,60 % Cl nalezeno: 45,75 % C, 6,06 % H, 14,04 %N, 21,32% Cl.
HPLC (Lichrosper 100 RP18, 5 pm, eluent K2HPO4 25 mM, n-C7H15SO3Na 2 mg/ml v H2O:CH3CN:dioxan 80:15:5, pH 2,7 s HC1O4, λ 275 nm, průtok 1 ml/min, RT 20,11 min.
UV 1,07 mg ve 20,0 ml vody: nm (E 1%): 641 (290), 597 (267), 313 (106), 273 (278), 247 (486).
'HNMR (D2O) 2,75 (s, 6H), 3,30-3,45 (m, 4H), 3,80-3,95 (m, 4H), 7,38 (a, 2H), 8,17 (d, 1H), 8,85 (d, 1H), 9,27 (s, 1H).
Příklad 15
6,9-Bis/(2-hydroxyethyl)amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion 11a
Difluorid 9 (1,0 g, 4,1 mmol) a 2-aminoethanol (2,5 g, 40,8 mmol) v pyridinu (7 ml) se míchá při teplotě místnosti 18 hodin. Směs se nalije do vody (50 ml) a produkt 1 la se odfiltruje a suší (1,26 g, 94 %), t.t. 236 až 239 °C. Rekrystalizací z methanolu se získá tmavomodrá pevná látka ve formě jehliček, t.t. 237 až 239 °C.
‘HNMR (DMSO-d6) 11,28 (t, 1H), 11,19 (t, 1H), 9,43 (s, 1H), 8,94 (d, 1H), 8,03 (d, 1H), 7,56 (s, 2H), 5,01 (t, 2H), 3,69 (m, 4H), 3,54 (m, 4H).
Elementární analýza pro C17H17N3O4 vypočteno: 62,38 % C, 5,25 % H, 12,83 %N nalezeno: 62,21 % C, 5,12 % H, 12,50 % N.
Příklad 16
6,9-Bis/(2-methansulfonyloxyethyl)amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion 1 lb
Roztok 11a (0,30 g, 0,92 mmol) v suchém pyridinu (4 ml) se míchá při teplotě místnosti pod dusíkem 10 minut. Přidá se methansulfonylchlorid (0,24 g, 2,07 mmol) a směs se míchá 20 minut. Směs se nalije do ledu-vody (20 ml) a pevná látka se odfiltruje. Krystalizací ze směsi chloroform-ligroin se získá modrá pevná látka (0,294g, 66%), t.t. 116 až 118°C, ‘HNMR (CDCI3) 10,98 (š, 2H), 9,59 (s, 1H), 8,97 (d, 1H), 8,09 (d, 1H) 7,38 (d, 1H), 7,34 (d, 1H), 4,50 (t, 4H), 3,83 (q, 4H), 3,09 (s, 6H).
Elementární analýza pro Ci9H2)N30gS2 vypočteno: 47,20 % C, 4,39 %H, 8,69 %N nalezeno: 46,80 % C, 4,31 %H, 8,48 %N.
Příklad 17
6,9-Bis//2-/(2-hydroxyethyl)amino/ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion 101
- 17CZ 286180 B6
a) Z mesylátu 11b
Roztok sloučeniny 11b (0,40 g, 0,83 mmol) a 2-(triniethyldisilyloxy)ethylaminu (2,21 g, 16,5 mmol) v pyridinu (5,0 ml) se míchá při teplotě místnosti pod atmosférou dusíku 48 hodin. Pyridin se odstraní pod proudem dusíku a zbytek se vyjme do methylenchloridu. Tento roztok se promyje nasyceným hydrogenuhličitanem sodným a suší se nad síranem sodným. Po odstranění rozpouštědla zbude modrý olej, který se suší pod vakuem přes noc. Chromatografií na sloupci silikagelu dojde k rozštěpení Si-O vazby, získá se 101. Tento produkt se eluuje směsí 1:5:5 Et3N:CH3OH:CHCl3. Zahuštěním se získá 101 jako olej.
*H NMR (CDC13) 11,19 (š, 1H), 11,06 (š, 1H), 9,46 (s, 1H), 8,83 (d, 1H), 7,98 (d, 1H), 6,98 (s, 2H), 3,82 (m, 4H), 3,52 (m, 4H), 3,07 (m, 4H), 2,96 (m, 4H); UV (2-methoxyethanol): 570 (sh, ε = 7200), 612 (ε = 13200), 658 (ε = 14000).
b) Z difluoridu 9
Pod atmosférou dusíku se přidá 2-/(2-hydroxyethyl)amino/ethylamin (6,19 ml, 61,2 mmol) k míchané suspenzi sloučeniny 9 (1,00 g, 4,08 mmol) v pyridinu (30 ml) při 0 °C.
Po jedné hodině se teplota reakční směsi nechá stoupnout na teplotu místnosti a ponechá při této teplotě tři hodiny. Reakční směs se nanese na silikagelovou (100 g) chromatografickou kolonu a eluuje se nejprve CHC13:CH3OH 90:10, potom CHC13:CH3OH 85:15 a nakonec s CHC13:CH3OH:NH4OH 85:15:1. Frakce, obsahující produkt se spojí, rozpouštědlo se odstraní a zbytek se podrobí druhému čištění na silikagelu (95g) za eluce CHCI3:CH3OH:NH4OH konc. 95:5:0 až 80:20:2. Finální čištění přes zásaditý oxid hlinitý stupně I (25 g) za eluce CH2Cl2:EtOH 96:4 poskytne zbytek 500 mg, který se krystaluje ze směsi ethanolu (0,5 ml) a methylenchloridu (10 ml), získá se 101 (142 mg).
Maleátová sůl: Volný amin 101 (138 mg, 0,334 mmol) se rozpustí v ethanolu (6 ml) pod dusíkovou atmosférou a při teplotě místnosti se přidá roztok kyseliny maleinové (87 mg, 0,75 mmol) v ethanolu (3 ml). Po chlazení na 4 °C po 3 hodiny se získané modré krystaly odsají pod proudem dusíku, promyjí ethanolem (1 ml) a diethyletherem (2 ml) a suší pod vakuem při 40 °C, získá se dimaleátová sůl 101 (160 mg), t.t. 132 až 133 °C, *HNMR (DMSO-d6) 10,94 (š, 1H), 10,88 (š, 1H), 9,47 (s, 1H), 9,02 (d, 1H), 8,60 (š, 2H), 8,09 (d, 1H), 7,63 (s, 2H), 6,01 (s, 4H), 5,32 (š, 2H), 3,89 (m, 4H), 3,71 (m, 4H), 3,26 (m, 4H), 3,12 (m, 4H), UV 1,355 mg ve vodě (25 ml): nM (E 1%): 641 (220), 598 (208), 312 (85), 272 (221), 246 (406).
Elementární analýza pro C21H27N5O4.2C4H4O4.H2O vypočteno: 52,52 % C, 5,57 % H, 10,64 % N nalezeno: 52,49 % C, 5,56 %H, 10,61 %N.
Příklad 18
6,9-Bis//2-(2-methoxyethylamino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion 1 Om
Roztok sloučeniny 11b (0,15 g, 0,21 mmol) a 2-methoxyethylaminu (0,47 g, 6,20 mmol) v pyridinu (2,0 ml) se míchá při teplotě místnosti pod dusíkem 48 hodin. Pyridin a přebytek aminu se odstraní pod vakuem. Zbytek se rozpustí v methylenchloridu, promyje se nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a suší se nad síranem sodným. Po odstranění rozpouštědla se zbytek čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu za eluce 1:1 CH3OH:CHC13. Krystalizaci ze směsi pentanu a ethanolu se získá lOm (0,091 g 66 %), t.t. 174 až 175 °C, 'H NMR (CDC13) 11,08 (š, 1H), 10,97 (š, 1H), 9,56 (s, 1H), 8,90 (d, 1H), 8,05 (d, 1H), 7,31 (s, 2H), 3,62 (m, 8H),
-18CZ 286180 B6
3,43 (s, 6H), 3,08 (t, 4H), 2,94 (t, 4H), 2,66 (š s, 2H), hmotové spektrum m/z (relativní intenzita)
441 (100, M+), 354 (57,4), 266 (50,5).
Elementární analýza pro vypočteno: 62,57 %C, 7,09 % H, 15,86%N nalezeno: 62,51 % C, 6,92 % H, 15,47 % N.
Příklad 19
6.9- Bis//2-(2-hydroxyethoxy)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion 11c
Roztok 2-(2-aminoethoxy)ethanolu (446 mg, 4,25 mmol) v pyridinu (1 ml) se přidá ke sloučenině 9 (100 mg, 0,41 mmol) v pyridinu (1 ml). Směs se míchá při teplotě místnosti 45 hodin. Odstraní se přebytek aminu a pyridinu pomalým proudem dusíku a zbylá pevná látka se umístí přes noc pod vakuum. K pevné látce se přidá studený nasycený roztok NaCl a produkt se extrahuje chloroformem (6 x 25 ml). Extrakty se suší nad síranem hořečnatým a zahustí se na rotační odparce. Získá se 140 mg (82%) produktu 11c, t.t. 97 až 99 °C. ’HNMR (CDC13): 11,15-11,35 (2m, 2H), 9,60 (s, 1H), 8,85 (d, 1H), 8,08 (d, 1H), 7,30 (m, 2H), 3,85 (m, 8H), 3,573,75 (2m, 9H), 2,75-3,25 (š s, 1H).
Příklad 20
6.9- Bis//3-(amino)propyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion 12a
1) Volný amin: Roztok 1,3-diaminopropanu (870 mg, 11,76 mmol) v chloroformu (3 ml) ke sloučenině 9 (300 mg, 1,22 mmol) v chloroformu (6 ml). Purpurová směs se míchá 166 hodin při teplotě místnosti. Směs se odfiltruje a soli se promyjí chloroformem. Rozpouštědlo se odstraní rotační odparkou a zbytek se umístí pod vakuem přes noc. Získá se 290 mg (93 %) 12a, TLC (silikagel, 25 % MeOH/75 % chloroform/několik kapek vod. hydroxidu amonného) ukazuje jednu modrou skvrnu, t.t. 105 °C (měknutí) 112ažll5°C.
lH NMR (DMSO-dé) 11,15 (m, 1H), 11,05 (m, 1H), 9,45 (s, 1H), 8,90 (d, 1H), 8,0 (d, 1H), 7,55 (š s, 2H), 3,55 (š m, 4H), 4,65 (t, 4H), 3,75 (t, 4H), 1,75 (t, 4H),
Elementární analýza pro C19H23N5O2 vypočteno: 64,57 % C, 6,56 %H, 19,81 %N nalezeno: 65,00 %C, 6,50 %H, 19,78%N.
2) Maleátová sůl: roztok kyseliny maleinové (11 mg, 0,86 mmol) v methanolu se přidá ke 12a (100 mg, 0,28 mmol) rozpuštěné v methanolu (2 ml) a ethylacetátu (2 ml). Přídavkem většího množství ethylacetátu se získá modrá sraženina, která se odfiltruje a suší se pod vakuem (120 mg, 79 %).
'HNMR (DMSO-dé) 11,10 (t, 1H), 11,00 (t, 1H), 9,45 (s, 1H), 8,95 (d, 1H), 8,05 (d, 1H), 7,75 (š, 4H), 7,60 (s, 2H), 6,0 (s, 4H), 3,60 (m, 4H), 2,95 (t, 4H), 1,95 (m, 4H).
Elementární analýza pro C23H27N5O6 vypočteno: 58,84 % C, 5,80 % H, 14,92 %N nalezeno: 58,75 %C, 5,70 % H, 14,85 %N.
Příklad 21
6,9-Bis//4-(ammo)butyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,l 0-dion 12b
1) Volný amin: Roztok 1,4-diaminobutanu (960 mg, 10,9 mmol) v chloroformu (3 ml) se přidá k (319 mg, 1,3 mmol) v chloroformu (6 ml). Purpurová reakční směs se míchá při teplotě
-19CZ 286180 B6 místnosti 217 hodin (9 dnů). Vysrážené soli se odstraní filtrací a filtrát se zahustí pod slabým proudem dusíku. Získá se volný amin 12b (400 mg, 80 %), TLC (silikagel, 25 % MeOH/75 %
CHCI3/ několik kapek vod. hydroxidu amonného), t.t. 80 °C (měknutí) 90 až 92 °C, 'H NMR (DMSO-d6) 11,15 (m, 1H), 11,05 (m, 1H), 9,42 (s, 1H), 8,90 (d, 1H), 8,0 (d, 1H), 7,5 (š s, 2H),
3,45 (m, 4H), 2,60 (m, 4H), 1,70 (m, 4H), 1,45 (m, 4H).
Elementární analýza pro C21H27N5O2 vypočteno: 66,12 % C, 7,13 %H, 18,36 %N nalezeno: 64,26 % C, 6,95 %H, 17,42%N.
2) Maleátová sůl: Roztok kyseliny maleinové (116 mg, 1 mmol) v ethylacetátu (4 ml) se přidá ke 12b (124 mg, 0,40 mmol) v methanolu (6 ml) a ethylacetátu (8 ml). Modrý olej se oddělí a směs se umístí přes noc do mrazničky. Rozpouštědla se oddekantují a zbývající pevná látka se pečlivě promyje ethylacetátem, získá se modrá, velmi hygroskopická látka, 125 mg (63%). ‘HNMR (DMSO-d6) 11,20 (m, 1H), 11,10 (m, 1H), 9,45 (s, 1H), 8,95 (d, 1H), 8,05 (d, 1H), 7,70 (š s, 4H), 6,00 (s, 4H), 3,55 (m, 4H), 2,85 (m, 4H), 1,70 (m, 8H).
Elementární analýza pro C29H35N5O10 vypočteno: 56,76 % C, 5,75 %H, 11,41%N nalezeno: 53,65 % C, 6,10 % H, 10,05 %N.
Příklad 22
6.9- Bis//3-(dimethylamino)propyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion 12c
Roztok 3-dimethylaminopropylaminu (700 mg, 6,9 mmol) v pyridinu (2 ml) se přidá ke sloučenině 9 (100 mg, 0,41 mmol) v pyridinu (2 ml). Směs se míchá při teplotě místnosti 120 hodin. Přebytek diaminu a pyridinu se odstraní pod slabým proudem plynného dusíku a zbytek se umístí pod vakuum přes noc. Zbytek se přidá ke studené vodě a extrahuje se chloroformem (4 x 20 ml). Extrakt se suší nad síranem sodným a zahustí se na rotační odparce. Modrá pevná látka se čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu. Počátečním elučním činidlem je 10 % methanolu/90 % chloroformu a potom 25 % methanolu/75 % chloroformu. Produkt se eluuje za přídavku malých množství hydroxidu amonného ke směsi 25 % methanolu/75 % chloroformu. Zahuštěním těchto elučních činidel se získá 92 mg (55 %) požadovaného produktu 12c, t.t. 107 až 109 °C. *HNMR (CDC13) 11,00-11,20 (2M, 2H), 9,63 (s, 1H), 8,93 (d, 1H), 8,12 (d, 1H), 7,37 (s, 2H), 3,55 (q, 4H), 2,55 (m, 4H), 2,35 (s, 12H), 2,00 (m, 4H).
Příklad 23
6.9- Bis//2-(ethylamino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion 10η
Roztok N-ethylethylendiaminu (400 mg, 4,5 mmol) v pyridinu (1 ml) se přidá ke sloučenině 9 (98 mg, 0,40 mmol) v pyridinu (1 ml). Směs se míchá při teplotě místnosti 66 hodin. Pyridin a přebytek diaminu se odstraní pod slabým proudem dusíku a zbylý materiál se umístí přes noc pod vakuum. Potom se přidá chloroform a chloroform se promyje dvakrát studenou vodou. Chloroformový extrakt se suší nad síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odstraní na rotační odparce. Výsledná modrá pevná látka se čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu za použití 5 % methanolu/95 % chloroformu jako počátečního činidla (elučního). Eluční činidlo se postupně nahradí 5%, 10% a pak 50% methanolem v chloroformu. Požadovaný produkt se eluuje za použití 50 % methanolu/48 % chloroformu/2 % hydroxidu amonného. Po odstranění rozpouštědla se získá 32 mg (21 %) produktu 10η, t.t. 101 až 102 °C.
'HNMR (CDCI3) 11,10 (m, 1H), 11,00 (m, 1H), 9,6 (s, 1H), 8,9 (d, 1H), 8,05 (d, 1H), 7,3 (m, 2H), 3,55 (m, 4H), 3,0 (t, 4H), 2,8 (q, 4H), 1,15 (t, 6H).
-20CZ 286180 B6
Příklad 24
6.9- Bis//2-(propylamino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion 1 Oo
Roztok N-propylethylendiaminu (403 mg, 4,0 mmol) v pyridinu (1 ml) se přidá ke sloučenině 9 (98 mg, 0,40 mmol) v pyridinu (1 ml). Reakční směs se míchá při teplotě místnosti 24 hodin a zahustí pod slabým proudem dusíku. Zbylý materiál se umístí přes noc pod vakuum. Ke zbytku se přidá ledová voda a vodná vrstva se extrahuje chloroformem (5 x 40 ml). Extrakty se suší nad síranem hořečnatým a chloroform se odstraní na rotační odparce. Modrá pevná látka se čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu. Počáteční eluční činidlo bylo 5 % methanolu/95 % chloroformu a postupně se zvyšoval obsah methanolu na 10%, 20%, 30%, 40 % a 50%. Požadovaná sloučenina se eluuje použitím 60 % methanolu/40 % chloroformu s malým množstvím hydroxidu amonného. Odstraněním rozpouštědla se získá 50 mg (30 %) produktu 10ο. t.t. 105 až 106 °C.
*HNMR (CDC13) 11,15 (m, 1H), 11,05 (m, 1H), 9,6 (s, 1H), 8,9 (d, 1H), 8,10 (d, 1H), 7,3 (m, 2H), 3,6 (m, m, 4H), 3,0 (t, 4H), 2,75 (t, 4H), 1,6 (m, 4H, H2O pík kryjící), 0,95 (t, 6H).
Příklad 25
6.9- Bis//2-(isopropylamino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion 1 Op
Roztok N-isopropylethylendiaminu (450 mg, 4,5 mmol) v pyridinu (2 ml) se přidá ke sloučenině 9(110 mg, 0,45 mmol) v pyridinu (1 ml). Vznikne stálé zabarvení podobné manganistanu. Směs se míchá při teplotě místnosti 40 h. Pyridin a přebytek diaminu se odstraní pod slabým proudem dusíku a zbytek se umístí přes noc pod vakuum. Přidá se chloroform (20 ml) a pak ledová voda. Protože se modrá zabarvení objevují ve vodné vrstvě, extrahuje se tato chloroformem (4 x 25 ml). Spojené extrakty se suší nad síranem hořečnatým a chloroform se odstraní na rotační odparce. Výsledná modrá pevná látka se čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu za použití chloroformu jako počátečního elučního činidla s postupnými změnami na 2 %, 5 %, 10 %, 20 %, 40 % a 50 % methanolu v chloroformu. Požadovaný produkt se eluuje ze sloupce 50 % methanolu/ 49% chloroformu/ 1% hydroxidu amonného. Odstraněním elučních činidel se získá 56 mg (30 %) požadovaného produktu lOp, t.t. 136 až 137 °C.
‘HNMR (CDC13) 11,1 (t, 1H), 11,0 (t, 1H), 9,6 (s, 1H), 8,9 (d, 1H), 8,1 (d, 1H), 7,30 (m, 2H), 3,6 (m, 4H), 3,0 (ζ 4H), 2,9 (m, 2H), 1,05 (d, 6H).
Příklad 26
In vitro biologické hodnocení
MTT metoda na buňkách LoVo lidského adenokarcinomu kolonu.
MTT metoda byla provedena podle Mosmanna T., J. Immunol. Methods, (1983), 65, 55-63 a Greena L. M., J. Immunol. Methods, (1984), 70,257-268.
Bezprostředně před použitím se sloučeniny a referenční standardy rozpustí ve vhodném rozpouštědle a potom se dále ředí v kompletním kultivačním médiu. LoVo buňky lidského adenokarcinomu kolonu a sublinie rezistentní k doxorubicinu (LoVo/DX) (2,5.104 buněk/ml) se umístí na 96-jamkovou destičku a předinkubují po 24 hodin v kultivačním médiu. Po této době se buňky vystaví léčivu na 144 hodin, potom se přidá roztok thiazolylmodř-tetrazolin bromidu (MTT roztok) a buňky se reinkubují po 4 hodiny. Supematant se odstraní a přidá se 150 μΐ
-21 CZ 286180 B6 dimethylsulfoxidu pro rozpuštění formazanových krystalů. Deska se odečte při 570 nm se čtečkou mikrodesky a vypočte se koncentrace inhibující 50 % buněčného růstu (IC50, pg/ml).
Výsledky jsou uvedeny v tabulce VI.
Tabulka VI
In vitro cytotoxická aktivita reprezentativních sloučenin podle vynálezu na L0V0 a L0V0/DX 10 buňkách pomocí MTT zkoušky
O XHJt
O HH-R
Slouč. př. R = IC50 pg/allS.D. a) B.I.b)
L0V0 L0V0/D1
10> 4 t H'CH3 0,045 0,085 1,9
12s 22 ---^3 0,1510,07 0,36+0,04 2J
10b 5 0,29+0,05 0,69+0,1 2,4
8 5,3211,55 2,29+0,67 0,4
lOd 7 0,2010,03 0,52+0,15 2,6
10Í (ealest) 12 ^COOH 0,21£0,08 6,70+1,8 31,8
12a 20 -------- I»64±O,O2. 20,910,72 12J
Hitoxantron 0,01^0,009 0,29+0,1 29,0
Anetantron 0,33+0,1 33,4 + 13,9 101,2
Doxorubicin 0,03+0,009 4,2B+1,B 142,7
*) b) MTT zkouá.Hi h vystavení léčivu R.J. - (1C50 LoVo/Dx)/(!C50 LoVo).
-22CZ 286180 B6
Příklad 27
In vitro biologické hodnocení: L1210 myší leukemie
Buňky L1210 myší leukemie byly rutinně udržovány v suspenzní kultuře vMcCoy-ově 5A médiu doplněném 10 % koňského sérového glutaminu, penicilinu a streptomycinu a rostly ve vlhkém prostředí 10% oxidu uhličitého a 90 % vzduchu při 37 °C.
Pro sledování in vitro toxicity byla každá ze sloučenin rozpuštěna v dimethylsulfoxidu a přidána k 1 ml L1210 buněk (105 buňky/zkumavka) pro dosažení finálních koncentrací 0,01, 0,1 a 1 pg léčiva/ml kultury. P 72 hodinách vystavování léčivu byla stanovena koncentrace buněk pomocí Coulter Counter. Inhibice růstu byla vypočtena pro každé léčivo za použití vzorce:
% inhibice růstu = 1- /počet ošetřených buněk/počet buněk v samotném DMSC/ x 100.
Inhibice růstu pak byla použita pro výpočet IC50 hodnoty (vypočtená koncentrace léčiva vyžadovaná pro inhibici růstu buněk jako 50 % kontroly).
Výsledky jsou uvedeny v tabulce VII.
Tabulka VII
In vitro aktivity reprezentativních sloučenin podle vynálezu vůči LI210 leukémii ve srovnání se známou sloučeninou 5a
Sloučenina
TOa
ÍOf
10ia
101b
5ac
Příklad /
IC5Q / pg/ml/
0,006
0,002
0,05
0,06
0,155 “hydrochloridová sůl: lOi.HCl bdimaleátová sůl: lOl.maleát “známá sloučenina, 6,9-bis//2-(dimethylamino)ethyl/amino/benzo/g/chinolin-5,10-dion: A. P.
Krapcho a spol., J. Med. Chem. (1985), 28, 1124-1126.
Příklad 28
In vivo biologické studie: P388 myší leukemie (iv/iv, d 1, 4,7)
P388 buňky myší leukemie byly udržovány in vivo postupnými intraperitoneálními (ip.) injekcemi 106 buněk v DBA2 myši. Pro účely testu byly CDF1 myši inokulovány intravenozně (i.v.) ΙΟ6 P388 buňkami a ošetření bylo provedeno o 24 hodin později. I.V. dávka léčiva byla podána L, 4. a 7 den. Myši byly denně pozorovány a hodnoceny znaky toxicity a přežití. Datum smrti bylo zaznamenáno u každého zvířete, které uhynulo nebo bylo usmrceno během 60denní studie. Střední doba přežití (MST) u každé ošetřené skupiny byla vypočtena a % T/C byla stanovena za použití následujícího vzorce:
% T/C = /(MST ošetřených)/(MST kontrolních)/ x 100.
-23 CZ 286180 B6
Výsledky antileukemické aktivity 6,9-bis//2-(dimethylamino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin5,10-dionu 10a z příkladu 4 a 6,9-bis//2-(amino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dionudimaleátu lOi.maleát z příkladu 12 v porovnání s mitoxantronem jsou uvedeny v tabulce VIII.
Tabulka VIII
Protinádorová aktivita sloučenin 10a, lOl.maleátu a mitoxantronu (MITOX) vůči P388 myší leukémii (iv/iv 1,4,7)')
Sloučenina2) dávka (mg/kg/den) % T/C3) (rozmezí) TOX4) lts5)
kontroly - 100 0/73 0/73
lOi.maleát 18 200,188 0/16 0/16
27 203(181-227) 2/32 0/32
10a 18 172,156 0/14 0/14
27 188,167 3/17 0/17
40 183,156 1/16 0/16
MITOX 2 162(154-167) 0/42 0/42
3 185(167-217) 4/78 0/78
4 118(89-133) 20/24 0/24
'ÚDFl samci myší byli transplantováni iv. 106 buňkami/myš. Ošetření bylo provedeno iv. 1., 4., 7 den po transplantaci tumoru (den 0).
2) lOi.maleát a MITOX byly rozpuštěny ve sterilní vodě, 10a v citrónové kyselině 1%.
3) Střední doba přežití ošetřené myši/střední doba přežití kontroly x 100 4) Počet toxických úmrtí/celkový počet myší.
5) Délka doby přežitíizvířata bez tumoru na konci pokusu (60 dnů).
Příklad 29
In vivo biologické studie: P388 myší leukemie (ip/ip, d 1, 5, 9)
Buňky myší leukemie P388 byly udržovány in vivo postupnými intraperitoneálními (ip) injekcemi 106 buněk v DBA2 myši. Pro účely testu byly CDF1 myši inokulovány i.p. s ΙΟ6 P388 buňkami a ošetření započalo o 24 hodin později. I.p. dávka léčiva byla podána 1., 5. a 9. den. Myši byly pozorovány denně na příznaky toxicity a přežití. Údaje o smrti každého zvířete byly zaznamenány pro každé uhynulé nebo usmrcené zvíře během 60-denní studie. Střední doba přežití (MST) pro každou léčenou skupinu byla vypočtena a % byla stanovena za použití následujícího vzorce:
%T/C=/(MST ošetřených)/(MST kontrolních)/x 100
Výsledky antileukemické aktivity 6,9-bis//2-(amino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10dionu lOi jako dihydrochloridu lOi.HCl a dimaleátu lOi.maleát (příklad 12) ve srovnání s mitoxantronem jsou uvedeny v tabulce IX.
-24CZ 286180 B6
Tabulka IX
Protinádorová aktivita lOi.HCl, lOi.maleátu a mitoxantronu (M1TOX) vůči ascitické P388 myši leukémii (ip/ip 1, 5, 9)
Sloučeniny2) dávka % T/C3) TOX4) LTS5) (mg/kg/den)(rozmezí)(den 60)
lOi.HCl 3,1 144 0/8 0/8
6,25 196 1/8 0/8
12,5 239 0/8 0/8
25 367 0/8 2/8
lOi.maleát 25 185 0/8 0/8
37,5 260 1/8 1/8
MITOX 1,5 186(160-225) 6/26 1/26
3 173(142-205) 21/42 1/42
''CDFl myši byly injektovány ip 106 buněk/myš, ošetření bylo provedeno 1., 5. A 9. den
transplantaci nádoru (den 0) 2) lOi.HCl a lOi.maleát byly rozpuštěny ve sterilní vodě a MITOX v salinickém roztoku.
3) Střední doba přežití u ošetřených myší/střední doba přežití u kontroly x 100 4) Počet toxických úmrtí/celkový počet úmrtí myší 5) Počet přežívajících na konci pokusu (60 dnů).
Příklad 30
In vivo biologické studie: L1210 myší leukemie (ip/ip, d 1, 5, 9)
a) Buňky myší leukemie LI210 byly udržovány in vivo týdenními intraperitoneálními (ip) injekcemi 106 buněk v BDFi myši. Pro účely testu byla myš inokulována i.p. 106 L1210 buňkami a ošetření započalo o 24 hodin později. Požadovaná dávka léčiva byla podána 1., 5. a 9. den. Myši byly pozorovány denně pro zaznamenání příznaků toxicity a přežití. Údaje o uhynutí jsou u každého zvířete zaznamenávány nebo zvířata byla usmrcena během 60-denního pokusu. Střední doba přežití (MST) pro každou ošetřovanou skupinu byla vypočtena a % T/C byla stanovena pomocí následujícího vzorce:
% T/C = /(MST ošetřených)/(MST kontrolních)/ x 100.
Výsledky jsou uvedeny v tabulce X.
b) Buňky myší leukemie L1210 byly udržovány in vivo týdenními intraperitoneálními (ip) injekcemi 10* 2 3 4 5 buněk v DBA2 myši. Pro účely testu byly CDF1 myši inokulovány ip 105 L1210 buňkami a ošetření započalo o 24 hodin později. Požadovaná dávka léčiva byla podána 1., 5. a 9. den. Myši byly denně pozorovány pro zaznamenání příznaků toxicity a přežití. Údaje o uhynutí jsou zaznamenávány pro každé zvíře nebo byla zvířata během 60-denní studie usmrcena. Střední doba přežití (MST) pro každou ošetřovanou skupinu byla vypočtena a % T/C byla stanovena použitím následujícího vzorce:
% T/C = /(MST ošetřených)/(MST kontrolních)/ x 100
Výsledky jsou uvedeny v tabulce XI.
-25CZ 286180 B6
Tabulka X
In vivo protinádorové aktivity sloučenin 10a, lOi.HCl a 101 vůči L1210 leukémii (ip/ip, d 1, 5, 9) ve srovnání se známou sloučeninou 5a
Sloučenina příklad dávka3 % T/C LTSf
10ab 4 50 151 —
lOi.HCl' 12 25 265 5/6
12,5 265 4/6
lOl.maleáť* 17 25 415 1/6
12,5 313 2/6
5ae,b / 50 129
a mg/kg, den 1,5 a 9 bsloučenina 10a a 5a byly rozpuštěny v DMSO (<35 %) a vodě c hydrochloridová sůl rozpuštěná ve vodě d dimaleátová sůl rozpuštěná ve vodě e známá sloučenina, 6,9-bis//2-(dimethylamino)ethyl/amino/benzo/g/chinolin-5,l0-dion: A. P. Krapcho a spol., J. Med. Chem., (1985), 28, 1124-1126 f dlouhodobě přežívající: zvířata prostá tumoru na konci pokusu (60 dnů)
Tabulka XI
Protinádorová aktivita sloučeniny lOi.HCl a mitoxantronu (MITOX) vůči ascitické myší leukémii L1210 (ip/ip d 1, 5, 9)1
Sloučeniy2 dávka (mg/kg/den) % T/C3 TOX4 LTS5
lOi.HCl 6,25 156 0/8 0/8
12,5 175 0/8 1/8
25 250x 1/7 4/7
MITOX 1,5 188 0/8 1/8
3 194 1/8 1/8
1 CDF1 myši byly injektovány ip 105 buněk/myš, ošetření bylo provedeno ip v 1., 5. A 9. dni po transplantaci nádoru (den 0) 2 lOi.HCl byl rozpuštěn ve sterilní vodě a MITOX v salinickém roztoku 3 Střední doba přežití ošetřených myší/střední doba přežití kontroly x 100 4 počet toxických uhynutí/celkový počet myší na konci pokusu (60 dnů) 5 Dlouhodobě přežívající: zvířata bez nádoru na konci pokusu (60 dnů) x tato hodnota byla počítána na uhynuté myši.
Příklad 31
In vivo biologické studie: protinádorová aktivita vůči myšímu Lewisovu plicnímu karcinomu a lidskému MX-1 karcinomu prsu
a) Myší Lewisův plícní karcinom
C57bl/6 samicím myší bylo transplantováno im (intralumbámě) 105 buněk. Ošetření bylo provedeno iv (intravenozně) 1., 7. 15. den po transplantaci nádoru (den 0). Střední hmotnost
-26CZ 286180 B6 tumoru pro každou ošetřenou skupinu byla vypočtena podle Gerana R. I. a spol., Cancer
Chemother. Rep., (1972), 3, 51-61 a TWI% byly vypočten 7 dní po posledním ošetření léčivem za použití vzorce:
TWI% = 100-/(střední hmotnost tumoru ošetřených myší/(střední hmotnost tumoru kontroly)/ x 100
Výsledky jsou uvedeny v tabulce XII pro reprezentativní sloučeninu podle vynálezu, 6,9-bis//2(amino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,10-dion ÍOi jako dimaleátovou sůl lOi.maleát z příkladu 12.
b) Lidský MX-1 karcinom prsu
CD1 nu/nu samice myší byly transplantovány sc (subkutánně) fragmenty nádoru (asi 1 mm x 1 mm x 1 mm). Ošetření bylo podáváno jednou týdně po tři týdny, kdy nádor dosáhl hmotnosti v průměru 150 mg. Pro všechny individuální tumory byly změny hmotnosti (relativní hmotnost nádoru) od počátku ošetření (Vo) vyjádřena jako Vt/V0 každý den měření (Vt). TWI% byla vypočtena Ί dnů po posledním ošetření léčivem za použití vzorce:
TWI% = 100-/(střední relativní hmotnost tumoru ošetřených myší)/(střední relativní hmotnost tumoru kontrolních myší)/ x 100.
Výsledky jsou uvedeny v tabulce ΧΠ pro reprezentativní sloučeninu vynálezu, 6,9—bis//2— (amino)ethyl/amino/benzo/g/isochinolin-5,l0-dion ÍOi jako dimaleátovou sůl lOi.maleát z příkladu 12.
Tabulka XII
Aktivita lOi.maleátu na pevných tumorech
Model tumoru a schéma ošetření sloučenina optimální dávka (mg/kg/den) T/C %a TWI %b TOXC
LEWIS plicní im/iv 1,8,15 lOi.maleát 40 158 80 0/10
myší karcinom plic 60 182 95 1/10
MX-1 sc/iv q 7d x 3 lOi.maleát 17 65 0/7
lidský karcinom prsu 26,6 — 58 0/7
40 — 64 1/5
a střední doba přežití ošetřených myší/střední doba přežití kontrolních x 100 b procenta inhibice hmotnosti tumoru c počet toxických uhynutí/celkový počet myší

Claims (30)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. 6,9 bis Aminosubstituované benzo[g]isochinolin-5,10-diony obecného vzorce I (I) v němž
    R je C]-CiOalkyl, fenyl nebo C-r-Cioaralkyl, Cr-Cioalkyl substituovaný jedním nebo dvěma substituenty vybranými ze skupiny zahrnující ORi a -NR2R3, C2-Cioalkyl přerušený jedním nebo dvěma atomy kyslíku nebo členem vybraným ze skupiny zahrnující -NR4, cis-CH=CH, transCH=CH a —C=C— a popřípadě substituovaný jednou nebo dvěma hydroxy- nebo -NR2R3 skupinami, přičemž
    Ri je vybráno ze skupiny zahrnující vodík, Ci-C6alkyl, fenyl, benzyl, 4-methoxybenzyl, -CHO, -COR5, -COOR5, —S O2 R5 a C2-C6alkyl popřípadě substituovaný -NR2R3,
    R2 a R3 jsou stejné nebo rozdílné a vybrané ze skupiny zahrnující vodík, Ci-CiOalkyl, C7Cioaralkyl, fenyl, C2-C10alkyl substituovaný jednou nebo dvěma hydroxyskupinami,-CHO, -COR5, -COOR5 a -S(O2)R5, nebo R2 a R3 tvoří spolu s atomem dusíku, ke kterému jsou vázány, ethyleniminový kruh nebo 5 či óčlenný aromatický nebo nearomatický heterocyklický kruh, popřípadě obsahující další heteroatom vybraný ze skupiny zahrnující síru, kyslík a dusík, nebo R2 je vodík a R3 je skupina -C(=NH)NH2, nebo R2 je -C(=NH)NH2 a R3 je vodík,
    R4 je vybráno ze skupiny zahrnující vodík, Ci-CiOalkyl, C2-C]ohydroxyalkyl, Ci-Cioalkyl substituovaný skupinou -NR2R3, C7-Ci0aralkyl, fenyl, -COR5, -COOR5 a -S(O2)R5,
    R5 je vybráno ze skupiny zahrnující Cj-Cioalkyl, Cr-Cioaralkyl, α-, β- nebo γ-naftyl, fenyl nebo 0-, m- či p-tolyl, jako volné báze nebo jejich soli s farmaceuticky přijatelnými kyselinami nebo solváty, případně ve formě jednotlivých izomerů.
  2. 2. Substituované benzo-isochinolindiony podle nároku 1, obecného vzorce I, v němž R je skupina -(CH2)P-NH2, v níž p je 2, 3 nebo 4 a ostatní substituenty mají shora uvedené významy.
  3. 3. Substituované benzo-isochinolindiony podle nároku 1, obecného vzorce I, v němž R je skupina -(CH2)p-NR2R3, v níž p je 2, 3 nebo 4, a R2 a R3 značí Ci-C6alkyl nebo tvoří spolu s atomem dusíku heterocyklický kruh, vybraný ze skupiny zahrnující 1-ethylenimin, 1-pyrrolidin, 4-morfolin, 1-piperazin, 4-methyl-l-piperazin, 4-benzyl-l-piperazin a 1-piperidin, a ostatní substituenty mají shora uvedené významy.
    -28CZ 286180 B6
  4. 4. Substituované benzo-isochinolindiony podle nároku 1, obecného vzorce I, v němž Rje skupina -(CH2)P-NR2R3, v níž p je 2, 3 nebo 4, R2 je vodík a R3 je Ci-C6alkyl, a ostatní substituenty mají shora uvedené významy.
  5. 5. Substituované benzo-isochinolindiony podle nároku 1, obecného vzorce I, v němž Rje skupina
    NH
    II
    -(CH2)P-NH-C-NH2, v níž p je 2, 3 nebo 4, a ostatní substituenty mají shora uvedené významy.
  6. 6. Substituované benzo-isochinolindiony podle nároku 1, obecného vzorce I, v němž Rje skupina -(CH2)p-NH-(CH2)q-OH, v níž p a q nezávisle na sobě jsou 2, 3 nebo 4, a ostatní substituenty mají shora uvedené významy.
  7. 7. Substituované benzo-isochinolindiony podle nároku 1, obecného vzorce I, v němž Rje skupina -(CH2)P-OH, v níž p je 2, 3 nebo 4, a ostatní substituenty mají shora uvedené významy.
  8. 8. Substituované benzo-isochinolindiony podle nároku 1, obecného vzorce I, v němž Rje skupina -(CH2)p-O-(CH2)q-OH, v níž p a q jsou nezávisle na sobě 2, 3 nebo 4, a ostatní substituenty mají shora uvedené významy.
  9. 9. Substituované benzo-isochinolindiony podle nároku 1 až 8, jimiž jsou konkrétně
    6.9- bis[[2-(amino)ethyl]amino]benzo][g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[2-(4'-morfolino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,l 0-dion,
    6.9- bis[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,l 0-dion,
    6.9- bis[[2-(diethylamino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,l 0-dion,
    6.9- bis[[2-[di(sek.propyl)amino]ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis [ [2-(1 '-pyrrolidino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[ [2-(1 -aziridino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,l 0-dion,
    6.9- bis[[2-(methansulfonyloxy)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,l 0-dion,
    6.9- bis[[4-(amino)butyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[3-(amino)propyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[2-[(2-hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[3-(dimethylamino)propyl]amino]benzo[g]isochmolm-5,10-dion,
    6.9- bis[[(2-hydroxy)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[2-(2-hydroxyethoxy)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,l 0-dion,
    6.9- bis[[2-(methylamino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[2-(ethylamino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[2-(n-propylamino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[2-(sek.propylamino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[2-(guanidino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[(2-amino-2,2-dimethyl)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,l 0-dion.
  10. 10. Substituované benzo-isochinolindiony podle nároku 1, j imiž jsou konkrétně
    6.9- bis[[2-(amino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[2—(1 '-pyrrolidino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[4-(amino)butyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[3-(amino)propyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[2-[(2-hydroxyethyl)aminoethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion ajejich soli.
    -29CZ 286180 B6
  11. 11. Substituovaný benzo-isochinolindion podle nároku 1, kterým je konkrétně 6,9-bis[[2(amino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion nebo jeho sůl.
  12. 12. Substituovaný benzo-isochinolindion podle nároku 11, jehož uvedenou solí je maleát.
  13. 13. Substituovaný benzo-isochinolindion podle nároku 11, jehož uvedenou solí je hydrochlorid.
  14. 14. Farmaceutické prostředky s antitumorovou aktivitou, vyznačující se tím, že jako účinnou látku obsahují substituované benzo-isochinolindiony podle nároků 1 až 13, vzorce I, ve spojené s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo přísadou.
  15. 15. Farmaceutické prostředky podle nároku 14, vyznačující se tím, že obsahují substituované benzo-isochinolindiony podle nároku 2 ve spojení s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo přísadou.
  16. 16. Farmaceutické prostředky podle nároku 14, vyznačující se tím, že obsahují substituované benzo-isochinolindinony podle nároku 3 ve spojení s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo přísadou.
  17. 17. Farmaceutické prostředky podle nároku 14, vyznačující se tím, že obsahují substituované benzo-isochinolindiony podle nároku 4 ve spojení s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo přísadou.
  18. 18. Farmaceutické prostředky podle nároku 14, vyznačující se tím, že obsahují substituované benzo-isochinolindiony podle nároku 5 ve spojení s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo přísadou.
  19. 19. Farmaceutické prostředky podle nároku 14, vyznačující se tím, že obsahují substituované benzo-isochinolindiony podle nároku 6 ve spojení s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo přísadou.
  20. 20. Farmaceutické prostředky podle nároku 14, vyznačující se tím, že obsahují substituované benzo-isochinolindiony podle nároku 7 ve spojení s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo přísadou.
  21. 21. Farmaceutické prostředky podle nároku 14, vyznačující se tím, že obsahují substituované benzo-isochinolindiony podle nároku 8 ve spojení s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo přísadou.
  22. 22. Farmaceutické prostředky podle nároku 14, vyznačující se tím, že obsahují substituovaný benzo-isochinolindion vybraný ze skupiny zahrnující
    6.9- bis[[2-(amino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,l 0-dion,
    6.9- bis[[2-(4'-morfolino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,l 0-dion,
    6.9- bis[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[2-(diethylamino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[2-[di(sek.propyl)amino]ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[2—(1 '-pyrrolidino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[2-(l'-aziridino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[2-(methansulfonyloxy)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[4-(amino)butyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[3-(amino)propyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[2-[(2-hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,l 0-dion,
    -30CZ 286180 B6
    6.9- bis[[3-(dimethylamino)propyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[(2-hydroxy)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,l 0-dion,
    6.9- bis[[(2-(2-hydroxyethoxy)ethyl]amino]benzo[g]isochinoIin-5,10-dion,
    6.9- bis[[2-(methylamino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[2-(ethylamino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,l 0-dion,
    6.9- bis[[2-(n-propylamino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[2-(sek.propylamino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[2-(guanidino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,l 0-dion,
    6.9- bis[[(2-amino-2,2-dimethyl)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion a farmaceuticky přijatelné ředidlo nebo přísadu.
  23. 23. Farmaceutické prostředky podle nároku 14, vyznačující se tím, že obsahují substituované benzo-isochinolindiony vybrané ze skupiny zahrnující
    6.9- bis[[2-(amino)ethyl]amino]benzo[g] isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[2-(l'-pynolidino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[4-(amino)butyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[3-(amino)propyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion,
    6.9- bis[[2-[(2-hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,l 0-dion a jejich soli a farmaceuticky přijatelné ředidlo nebo přísadu.
  24. 24. Farmaceutický prostředek podle nároku 14, vyznačující se tím, že obsahuje 6,9-bis[[2-(amino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dion nebo jeho sůl a farmaceuticky přijatelné ředidlo nebo přísadu.
  25. 25. Farmaceutický prostředek podle nároku 24, vyznačující se tím, že obsahuje maleát 6,9-bis[[2-(amino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dionu.
  26. 26. Farmaceutický prostředek podle nároku 24, vyznačující se tím, že obsahuje hydrochlorid 6,9-bis[[2-(amino)ethyl]amino]benzo[g]isochinolin-5,10-dionu.
  27. 27. Způsob syntézy substituovaných benzo-isochinolindionů podle nároku 1, obecného vzorce I, v němž všechny substituenty mají významy uvedené v nároku 1, jako volných bází nebo jejich solí s farmaceuticky přijatelnými kyselinami, vyznačující se tím, že se
    a) anhydrid pyridin-3,4-dikarboxylové kyseliny uvede v reakci s 1,4-difluorbenzenem v přítomnosti Lewisovy kyseliny za vzniku směsi sloučenin vzorce Vila a VHb
    b) směs sloučenin Vila a VHb se cyklizuje v přítomnosti 30% dýmavé kyseliny sírové při teplotě 130 až 150 °C za vzniku sloučeniny vzorce Π
    -31 CZ 286180 B6 (I)
    c) atomy fluoru ve sloučenině II se nahradí reakcí se stechiometrickým množstvím nebo slabým nadbytkem sloučeniny obecného vzorce III
    R-NH2 (ΙΠ ) kde R má výše uvedený význam, v němž skupiny -NH- a -OH jsou popřípadě chráněny vhodnými chránícími skupinami, popřípadě v přítomnosti rozpouštědla a anorganické či organické báze, při teplotě v rozsahu 0 °C až teploty varu rozpouštědla,
    d) chránící skupiny, jež mohou být přítomny v R, se popřípadě odstraní za vzniku sloučenin vzorce I a
    e) sloučeniny vzorce I se popřípadě převedou na soli a/nebo solváty nebo se rozdělí na jejich izomerty.
  28. 28. Způsob syntézy substituovaných benzo-isochinolindionů podle nároku 1 obecného vzorce I, v němž R je skupina vzorce -(CH2)p-NH-(CH2)q-OH, v níž p a q jsou celá čísla 2, 3 nebo 4, vyznačující se tím, že se sloučenina vzorce I, v němž R je skupina -(CH2)POS(O2)R5, v níž R5 je vybráno ze skupiny zahrnující C]-CiOalkyl, Cr-Cioaralkyl, α-, β- nebo γnaftyl, fenyl nebo o-, m- nebo p-tolyl, uvede v reakci se sloučeninou vzorce H2N-(CH2)q-O-E, v němž E je vybráno ze skupiny zahrnující trialkylsilan, (dialkyl)arylsilan, formyl nebo acetyl, s následným odstraněním chránící skupiny E.
  29. 29. Způsob syntézy substituovaných benzo-isochinolindionů podle nároku 27, shora uvedeného obecného vzorce I, v němž R je skupina -(CH2)P-NR2R3, v níž jeden ze substituentů R2 nebo R3 je vodík a druhý je vodík nebo Cj-Céalkyl, vyznačující se tím, že se ve stupni c) nahradí atomy fluoru jednou chráněným diaminem obecného vzorce H2N-(CH2)pN(COOR5)R3, v němž p je celé číslo 2, 3 nebo 4 a R5 je vybráno ze skupiny Ci-CiOalkyl, Cr-Cioaralkyl, α-, β- nebo γ-naftyl, ο-, m- nebo p-tolyl, za vzniku meziproduktu obecného vzorce I, v němž R je skupina -(CH2)P-N(COOR5)R3.
  30. 30. Způsob syntézy substituovaných benzo-isochinolindionů shora uvedeného obecného vzorce I, v němž R je skupina -(CH2)P-NH-C(=NH)NH2, v níž p je celé číslo 2, 3 nebo 4, vyznačující se tím, že se sloučenina obecného vzorce I, v němž R je skupina vzorce -(CH2)P-NH2, uvede v reakci se sloučeninou vzorce H2N-C(=NH)SO3H.
CZ19931847A 1991-03-08 1992-03-09 6,9-bis(Substituované amino)benzo/g/isochinolin-5 10-diony CZ286180B6 (cs)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US66595491A 1991-03-08 1991-03-08
US82730292A 1992-01-29 1992-01-29
PCT/US1992/001606 WO1992015300A1 (en) 1991-03-08 1992-03-09 6,9 BIS(SUBSTITUTED-AMINO)BENZO[g]ISOQUINOLINE-5,10-DIONES

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ184793A3 CZ184793A3 (en) 1994-06-15
CZ286180B6 true CZ286180B6 (cs) 2000-02-16

Family

ID=27099336

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ19931847A CZ286180B6 (cs) 1991-03-08 1992-03-09 6,9-bis(Substituované amino)benzo/g/isochinolin-5 10-diony

Country Status (22)

Country Link
EP (2) EP0503537B1 (cs)
JP (1) JP3009465B2 (cs)
KR (1) KR100193593B1 (cs)
AT (1) ATE153018T1 (cs)
AU (1) AU663494B2 (cs)
BR (1) BR9205740A (cs)
CA (1) CA2104582A1 (cs)
CZ (1) CZ286180B6 (cs)
DE (1) DE69219646T2 (cs)
DK (1) DK0503537T3 (cs)
ES (1) ES2104753T3 (cs)
FI (1) FI103575B (cs)
GR (1) GR3024436T3 (cs)
HU (1) HU215967B (cs)
IE (1) IE920754A1 (cs)
IL (1) IL102087A (cs)
MX (1) MX9201020A (cs)
NZ (1) NZ241868A (cs)
RU (1) RU2129546C1 (cs)
SG (1) SG66252A1 (cs)
TW (1) TW201735B (cs)
WO (1) WO1992015300A1 (cs)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5519029A (en) * 1992-09-08 1996-05-21 Boehringer Mannheim Italia, S.P.A. 2-aminoalkyl-5-aminoalkylamino substituted-isoquinoindazole-6(2H)-ones
ZA936396B (en) * 1992-09-08 1994-06-13 Univ Vermont 4-Substituted 6,9-bis(substituted-amino)benzo[g] isoquinoline-5,10,diones
US5506232A (en) * 1994-03-28 1996-04-09 Boehringer Mannheim Italia S.P.A. 6,9-bis[(2-aminoethyl)amino]benzo[g]isoquinoline-5,10-dione and its dimaleate salt
US5587382A (en) * 1994-03-28 1996-12-24 Boehringer Mannheim Italia, Spa 6,9-bis[(2-aminoethyl) amino]benzo [g]isoquinoline-5,10- dione dimaleate; an aza-anthracenedione with reduced cardiotoxicity
US6747039B2 (en) 2002-03-12 2004-06-08 Albany Molecular Research, Inc. Aza-benzothiopyranoindazoles with antitumor activity
ITMI20021040A1 (it) 2002-05-16 2003-11-17 Novuspharma Spa Composizioni farmaceutiche iniettabili di un derivato antracenedionico ad attivita' antitumorale
US20050222190A1 (en) * 2004-03-30 2005-10-06 Curd John G 1,4-bis-N-oxide azaanthracenediones and the use thereof
WO2008103320A1 (en) * 2007-02-16 2008-08-28 Novacea, Inc. Methods of treating ophthalmic disorders with anthraquinones
US8173621B2 (en) 2008-06-11 2012-05-08 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside cyclicphosphates
BRPI0922508A8 (pt) 2008-12-23 2016-01-19 Pharmasset Inc Análogos de nucleosídeo
CA2748057C (en) 2008-12-23 2018-07-03 Pharmasset, Inc. Nucleoside phosphoramidates
JP5793084B2 (ja) 2008-12-23 2015-10-14 ギリアド ファーマセット エルエルシー プリンヌクレオシドの合成
CN102858790A (zh) 2010-03-31 2013-01-02 吉利德制药有限责任公司 核苷氨基磷酸酯
CN104513201B (zh) * 2013-09-28 2017-12-26 正大天晴药业集团股份有限公司 马来酸匹杉琼的结晶
CN104557704B (zh) * 2013-10-28 2017-05-10 北京凯莱天成医药科技有限公司 一种匹杉琼马来酸盐的制备方法
CN103787970A (zh) * 2014-01-14 2014-05-14 北京万全德众医药生物技术有限公司 一锅煮法制备6，9-二氟苯并异喹啉-5，10-二酮的工艺

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2051005A (en) * 1933-09-19 1936-08-11 Gen Aniline Works Inc Process of producing n-substitution products of 1, 4-diaminoanthraquinones
US2552263A (en) * 1947-09-27 1951-05-08 Eastman Kodak Co alpha-anthrapyridinequinone compounds
ZA774443B (en) * 1977-07-22 1978-06-28 Allied Chem Anthrquinone compounds as anti-cancer agents
US4197249A (en) * 1977-08-15 1980-04-08 American Cyanamid Company 1,4-Bis(substituted-amino)-5,8-dihydroxyanthraquinones and leuco bases thereof
EP0270306B1 (en) * 1986-12-01 1991-03-27 Sumitomo Chemical Company, Limited Anthrapyridone compounds, their production process and their use

Also Published As

Publication number Publication date
BR9205740A (pt) 1994-09-27
KR100193593B1 (ko) 1999-06-15
NZ241868A (en) 1995-05-26
EP0503537A1 (en) 1992-09-16
CZ184793A3 (en) 1994-06-15
HU215967B (hu) 1999-03-29
RU2129546C1 (ru) 1999-04-27
EP0503537B1 (en) 1997-05-14
IE920754A1 (en) 1992-09-09
MX9201020A (es) 1993-11-01
CA2104582A1 (en) 1992-09-17
IL102087A (en) 1996-09-12
TW201735B (cs) 1993-03-11
DK0503537T3 (da) 1997-12-15
FI103575B1 (fi) 1999-07-30
GR3024436T3 (en) 1997-11-28
FI103575B (fi) 1999-07-30
DE69219646D1 (de) 1997-06-19
WO1992015300A1 (en) 1992-09-17
AU1580392A (en) 1992-10-06
EP0575526A1 (en) 1993-12-29
FI933895A (fi) 1993-09-07
DE69219646T2 (de) 1997-10-02
HUT68649A (en) 1995-07-28
AU663494B2 (en) 1995-10-12
ES2104753T3 (es) 1997-10-16
ATE153018T1 (de) 1997-05-15
EP0575526A4 (cs) 1994-03-30
JP3009465B2 (ja) 2000-02-14
FI933895A0 (fi) 1993-09-07
JPH06511230A (ja) 1994-12-15
SG66252A1 (en) 1999-07-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0747368B1 (en) Derivatives of monocyclic polyamines, their preparation, and their use as antiviral agents
CZ286180B6 (cs) 6,9-bis(Substituované amino)benzo/g/isochinolin-5 10-diony
WO2018086547A1 (zh) 2-取代芳环-嘧啶类衍生物及制备和应用
CZ34296A3 (en) Derivative of bis-naphthalimide, process of its preparation and pharmaceutical composition containing thereof
KR20010013164A (ko) 세포 증식 억제제로서의 시아노구아니딘
KR101208956B1 (ko) 엘로티닙 다이클로로아세트산염 및 이를 포함하는 항암제 조성물
EP0536208B1 (en) 1,2-dihydro-3h-dibenzisoquinoline-1,3-dione anticancer agents
FI109538B (fi) Menetelmä antituumorisen aktiivisuuden omaavien 2-aminoalkyyli-5-aminoalkyyliamino-substituoitujen isokino[8,7,6-cd] ja [5,6,7-cd]indatsoli-6(2H)-onien valmistamiseksi
KR100269832B1 (ko) 종양치료 활성을 지닌 2-아미노알킬-5-아미노알킬아미노 치환된 이소퀴노인다졸-6-(2h)-온 이를 포함하는 약제학적 조성물 및 이의 제조방법
WO2004026846A1 (en) Dna-targeted benzotriazine 1,4-dioxides and their use in cancer therapy
PT750619E (pt) Compostos heteroindazois anelados
US5604246A (en) 2-aminoalkyl-5-aminoalkylamino substituted-isoquinoindazole-6(2H)-ones
NO180302B (no) 6,9-bis(substituerte-amino)benzo[gÅisokinolin-5,10-dioner
CZ286654B6 (cs) 2-/2-/(2-hydroxyethyl) amino/ethyl/-5-//(2-methylamino)ethyl/amino/indazol/4,3-gh/isochinolin-6(2H) on, způsob jeho výroby a farmaceutický prostředek s jeho obsahem
CZ20022083A3 (cs) Nové indenoindolonové sloučeniny, způsob jejich přípravy a farmaceutické kompozice, jež je obsahují
US20200087263A1 (en) 5-carboxamide-2-thiobarbituric acids and use thereof as medicaments
WO1994005641A1 (en) 4-SUBSTITUTED 6,9,-BIS (SUBSTITUTED-AMINO) BENZO [g] ISOQUINOLINE-5,10,DIONES
PL169396B1 (pl) Sposób wytwarzania nowych pochodnych akrydyny
WO1992015307A1 (en) 6,9-BIS(AMINO SUBSTITUTED)BENZO[g]PHTHALAZINE-5,10-DIONES AS ANTITUMOR AGENTS
CZ9904238A3 (cs) Kyanoguanidiny jako inhibitory buněčné proliferace

Legal Events

Date Code Title Description
IF00 In force as of 2000-06-30 in czech republic
MK4A Patent expired

Effective date: 20120309