JP3009465B2

JP3009465B2 - ６，９−ビス（置換アミノ）ベンゾ〔ｇ〕イソキノリン−５，１０−ジオン類

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Publication number: JP3009465B2
Application number: JP04508231A
Authority: JP
Inventors: ポールエークラプコ
Original assignee: バーモント大学
Priority date: 1991-03-08
Filing date: 1992-03-09
Publication date: 2000-02-14
Anticipated expiration: 2015-02-14
Also published as: FI933895A; IL102087A; EP0503537A1; SG66252A1; BR9205740A; DK0503537T3; HU215967B; DE69219646T2; WO1992015300A1; FI103575B1; ATE153018T1; CA2104582A1; DE69219646D1; IE920754A1; AU663494B2; KR100193593B1; RU2129546C1; NZ241868A; TW201735B; GR3024436T3

Description

【発明の詳細な説明】発明の背景発明の技術分野本発明は6,9−ビス（置換アミノ）ベンゾ［ｇ］イソ
キノリン−5,10−ジオン類に関し、さらに詳しくは、6,
9位の置換基が（アミノアルキル）アミノ置換基である
上記化合物に関する。これらの化合物は、生体外および
生体内で抗腫瘍活性を示す。

背景技術臨床試験で抗腫瘍活性を示す、ある種の1,4−ビス
［（アミノアルキル）アミノ］アントラセン−9,10−ジ
オン類はすでに報告されている。特に重要なのは、アメ
タントロン（ametantrone）、すなわち1,4−ビス｛［２
−（２−ヒドロキシエチルアミノ）エチル］アミノ｝ア
ントラセン−9,10−ジオン、およびミトザントロン（mi
toxantrone）、すなわち5,8−ジヒドロキシ−1,4−ビス
｛［２−（２−ヒドロキシエチルアミノ）エチル］アミ
ノ｝アントラセン−9,10−ジオンである（Zee−Cheng
ら,J.Med.Chem.,21巻、291〜４頁、1978年;Chengら，
“Progressin Medicinal Chemistry",Ellis,G.P.および
West,G.B.編集;Elsevier:Amsterdam,1983年;20,83頁お
よびその引用文献）。ミトザントロンは広いスペクトル
を有する腫瘍崩壊剤であり、その活性はアントラサイク
リン系抗生物質のドキソルビシンの活性に類似してい
る。臨床試験はミトザントロンが、病勢が進んだ乳癌、
急性の白血病とリンパ腫の治療に、特に有望な活性を有
することを示している（Legha,Drugs of Today,20巻629
頁1984年）。動物実験は、ドキソルビシンと比べて心臓
毒性が少ないことを示したが、ミトザントロンの場合で
も、すでにドキソルビシンで治療された大部分の患者
に、いくらかの臨床心臓毒性が観察されている（R.Stua
rt Harrisら,Lancet,219巻1984年およびその引用文
献）。

アメタントロンは、動物に用いた場合、ミトザントロ
ンより効力が10倍低くかつ心臓毒性であると報告されて
いる。抗腫瘍同等有効投与量で上記２種の医薬を、非腫
瘍ラットに腹腔内経路で投与した後、ミトザントロンだ
けに遅延毒性が観察されたので、ミトザントロン中に5,
8−ジヒドロキシ置換基が存在することが遅延死亡に関
与しているかもしれないことを示唆している（Corbett
ら,Cancer Chemother,Pharmacol.,６巻161頁1981年）。

その上、ミトザントロンとアメタントロンはともに顕
著なミエロデプレッシブ（myelodepressive）毒性を有
し、かつ両化合物は、糖タンパク質Ｐの過度発現（over
expression）によって仲介されるドキソルビシンに対す
る耐性を発生する細胞ヒストタイプ（cell histotype）
に対して交差耐性を示す。このような耐性は、多重医薬
耐性（multidrug resistance）と呼ばれているが、多数
の抗腫瘍抗生物質がもっており、このような抗生物質と
してはアムサクリン（amsacrine）とポドフィロトキシ
ンの誘導体がある。そしてこの耐性は前記抗生物質によ
り固形腫瘍（solid tumors）を治療する際に失敗する主
な理由の一つである。

それ故に、ミトザントロンより治療係数が高く、かつ
化学療法による治療に対して一層抵抗性が強い固形腫瘍
（例えば肺、乳房および結腸の腫瘍）の増殖を阻害もし
くは遅延させるのに有効であるとともに多重医薬耐性を
発生する腫瘍のヒストタイプに対して有効な、新規なア
ントラセンジオン抗腫瘍剤を得るための研究が要望され
ている。

アントラセンジオン類のより安全で活性の類似体を得
るための研究において、アントラセン−9,10−ジオン核
の各種の位置にヒドロキシ置換基および／または（アミ
ノアルキル）アミノ側鎖を有する化合物の研究がなされ
たが（Chengら,Drugs of the Future,８巻229頁1983
年）注目すべき改善はみられなかった。

アザ−およびジアザ−アントラセン−9,10−ジオン類
の、例えば6,9−ビス（エトキシカルボニルアミノ）ベ
ンゾ［ｇ］キノリン−5,10−ジオン（１）、6,9−ビス
（エトキシカルボニルアミノ）ベンゾ［ｇ］イソキノリ
ン−5,10−ジオン（２）、6,9−ビス（エトキシカルボ
ニルアミノ）ベンゾ［ｇ］キナゾリン−5,10−ジオン
（３）は、Pottsらが開示している（Synthesis,31,1983
年）。これらの化合物は、抗腫瘍剤の1,4−ビス［（ア
ミノアルキル）アミノ］アントラセン−9,10−ジオン類
と関連があると報告されていた。しかし、上記の化合物
類のいずれについても抗腫瘍活性は全く報告されていな
かった。ミトザントロンと近縁の、6,9−ジヒドロキシ
ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオンの１−［（ア
ミノアルキル）アミノ］誘導体（４）はDNA挿入剤とし
てすでに開示されているが“生体外”または“生体内”
の抗腫瘍活性は完全に欠除している（Croisy−Delcey
ら,Eur.J.Med.Chem.,23巻101〜106頁1988年）。

式5a−ｄの6,9−ビス［（アミノアルキル）アミノ］
ベンゾ［ｇ］キノリン−5,10−ジオン類（表Ｉ参照）
は、J.Med.Chem.,28巻1124〜26頁1985年に開示されてい
るが、この文献では、5,8−ビス［（アミノアルキル）
アミノ］−１−アザ−アントラセンジオン類と呼ばれて
いる。

本願において以下に記載している表IIに報告している
ように、従来技術の化合物５は、対応する炭素環式類似
化合物（６）より明らかに活性が低い。

実際に、表IIに報告されているように、化合物5aと5b
は類似体の6aと6bより細胞毒性（citotoxicity）が低
い。さらに化合物5aは、生体外では劣った細胞毒性を示
すが生体内では全く不活性であり、炭素環式類似体6aよ
りも活性と効力が低い。

ヘテロ原子を導入することは、医薬の分野ではふつう
の方法であるが、その効果は事例毎に評価しなければな
らない。

アントラセンジオン類のアザ類似体のこの特別の場
合、従来技術は窒素原子をアントラセンジオンの骨格に
導入することは抗腫瘍活性に対して有害であることを明
確に示している。実際にアザ−置換アントラセンジオン
類は、対応するアントラセンジオン類より細胞毒性が低
くかつ“生体内”では不活性である。

したがって当該技術分野の当業者は、アントラセンジ
オン骨格にヘテロ原子を導入することが、より有効な抗
腫瘍剤を得ることができる方法であるとは考えないであ
ろう。

多数の類似体の中から抗腫瘍剤のミトザントロンを発
見したスクリーニング（J.Med.Chem.,21巻291〜４頁197
8年）は、マウス白血病P388の実験モデルを用いて行な
われたことはよく知られており、このモデルは、少なく
ともこのクラスの抗腫瘍抗生物質についてはヒトにおけ
る抗腫瘍活性を予測するのに役立っている。他の多くの
臨床上活性は抗腫瘍抗性物質は、例えばｍ−アムサクリ
ンおよびドキソルビシンのようにマウス白血病P388およ
び同L1210に対して活性である。

さらにミトザントロンは、マウスルイス肺癌とMX1ヒ
ト乳癌のような他の有意義な実験腫瘍で優れた活性を示
した。

本発明の発明者らは、本発明の化合物である6,9−ビ
ス［（アミノアルキル）アミノ］ベンゾ［ｇ］イソキノ
リン−5,10−ジオン類が抗腫瘍剤として活性であること
を発見した。すなわち、これらの化合物は、マウス白血
病L1210と同P388、およびルイス肺癌とMX1ヒト乳癌に対
して高度に有効である。

発明の簡単な要約本発明の化合物は遊離塩基としての下記式（Ｉ）の化
合物及びその薬学的に許容される酸との塩である。

ここでＲは OR₁及び−NR₂R₃から選ばれた置換基の１又は２を有す
る炭素数２〜10のアルキル；１又は２の酸素原子又は−NR₄−を有し、水酸基（O
H）又は−NR₂R₃の１又は２により置換されていてもよい
炭素数２〜10のアルキル； R₁は水素、炭素数１〜６のアルキル、−Ｓ（O₂）R₅、
又は−NR₂R₃により置換された炭素数２〜６のアルキ
ル； R₂及びR₃は同一又は異なつて水素、炭素数１〜10のア
ルキル、１又は２の水酸基（OH）により置換された炭素
数２〜10のアルキル、−COR₅、−COOR₅であり、R₂及びR
₃はその結合する窒素と共にエチレンイミン環又はアジ
リジン、モルホリン又はピロリジン環から選ばれた複素
環を示し、 R₄は水素、炭素数１〜10のアルキル、炭素数２〜10の
ヒドロキシアルキル、−NR₂R₃により置換された炭素数
２〜10のアルキル、炭素数７〜10のアラルキル、フエニ
ル、−COR₅、−COOR₅又は−Ｓ（O₂）R₅; R₅は炭素数１〜10のアルキルを示す。

本発明は又、式（Ｉ）の化合物の互変異性体、単一の
鏡像体（光学的対掌体）、ジアステレオアイソマー（偏
左右異性体）、混合物にも係わる。

本発明は又、式（Ｉ）の化合物の薬学的又は獣医学的
に許容される酸との非毒性塩にも係わる。例えば塩化水
素酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、ピロリン酸等の無機
酸との付加塩、酢酸、プロピオン酸、クエン酸、安息香
酸、乳酸、マレイン酸、フマール酸、コハク酸、酒石
酸、グルタミン酸、アスパルギン酸、グルコン酸、アス
コルビン酸等の有機酸との付加塩を挙げることができ
る。

発明の詳細な開示式（Ｉ）においてフエニルなる用語は必要により（炭
素数１〜４の）アルキル、CF₃、ハロゲン、ニトロ、ア
ミノ、アセチルアミノ、ホルミルアミノ、ジメチルアミ
ノ、ジエチルアミノ、ヒドロキシ、メトキシ及びエトキ
シ基のような置換基を有してもよいフエニルリングを意
味する。

好ましい炭素数１〜10のアルキルの例としては、メチ
ル、エチル、ｎ−プロピル、sec−プロピル、ｎ−ブチ
ル、sec−ブチル、tert−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−
ヘキシルを挙げることができる。

好ましい炭素数７〜10のアラルキルとしてはベンジ
ル、４−メトキシベンジルを挙げることができる。式
（Ｉ）の化合物においてＲが１又は２の酸素原子又は−
NR₄−、シス−CH＝CH−、トランス−CH＝CH−、−Ｃ≡
Ｃ−から選ばれた１つを有し、水酸基又は−NR₂R₃の１
又は２により置換されていてもよい炭素数２〜10のアル
キルである場合、上記酸素原子間及び／又は−NR₄−と
−NR₂R₃の間には少なくとも２個の炭素原子の存在する
のが好ましい。

式（Ｉ）の化合物において−NR₂R₃置換基が硫黄、酸
素、窒素等の他のヘテロ原子を有していてもよい５〜６
員環の芳香族又は非芳香族の複素環である場合、上記複
素環の好ましい例は１−イミダゾリル、１−ピロリル、
１−テトラハイドロピロリル、１−ピラゾリル、４−モ
ルホリニル、１−ピペリジニル、１−ピペラジニル、１
−（４−メチル）−ピペラジニル、１−（４−ベンジ
ル）−ピペラジニルである。

式（Ｉ）の化合物のうち、Ｒが下記から選ばれた炭素
数２〜10のアルキルである化合物が特に好ましい。

−（CH₂）ｐ−NH₂、ｐは２、３又は４である残基； −（CH₂）ｐ−NR₂R₃、ｐは上記の通り、R₂及びR₃は炭
素数１〜６のアルキル、又はその結合する窒素と共に１
−エチレンイミン、１−ピロリジン、４−モルホリン、
１−ピペラジン、４−メチル−１−ピペラジン、４−ベ
ンジル−１−ピペラジン、１−ピペリジンから選ばれた
複素環を形成する残基； −（CH₂）ｐ−NR₂R₃、ｐは上記の通り、R₂は水素、R₃
は炭素数１〜６のアルキルである残基； −（CH₂）ｐ−NH−Ｃ（＝NH）−NH₂、ｐは上記の通り
である残基； −（CH₂）ｐ−NH−（CH₂）ｑ−OH、ｐ及びｑはそれぞ
れ独立して２、３、４から選ばれる整数である残基； −（CH₂）ｐ−OH、ｐは上記の通りである残基； −（CH₂）ｐ−Ｏ−（CH₂）ｑ−OH、ｐ及びｑは上記の
通りである残基。

下記の本発明化合物の好ましい具体例を示す。

6,9−ビス｛［（２−（アミノ）エチル］アミノ｝ベン
ゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−（４′−モルホリノ）エチル］アミ
ノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［（２−ジメチルアミノ）エチル］アミ
ノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−（ジエチルアミノ）エチル］アミ
ノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−［ジ（sec−プロピル）アミノ］エチ
ル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオ
ン； 6,9−ビス｛［２−（１′−ピロリジノ）エチル］アミ
ノ］｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−（１′−アジリジノ）エチル］アミ
ノ］｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−メタンスルホニロキシ）エチル］ア
ミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［４−（アミノ）ブチル］アミノ｝ベンゾ
［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［３−（アミノ）プロピル］アミノ｝ベン
ゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−［（２−ヒドロキシエチル）アミ
ノ］エチル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10
−ジオン； 6,9−ビス｛［３−（ジメチルアミノ）プロピル］アミ
ノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［（２−ヒドロキシ）エチル］アミノ｝ベ
ンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチ
ル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオ
ン； 6,9−ビス｛［２−（メチルアミノ）エチル］アミノ｝
ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−（エチルアミノ）エチル］アミノ｝
ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−（ｎ−プロピルアミノ）エチル］ア
ミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−（sec−プロピルアミノ）エチル］ア
ミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−（グアニジノ）エチル］アミノ｝ベ
ンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［（２−アミノ−2,2−ジメチル）エチル］
アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン；本発明の化合物は式（II）の6,9−ジフルオロベンゾ
［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオンと式（III）の化合
物を反応させることにより、式（I a）の化合物を得、
次いで必要により下記の工程の１又は２以上を行うこと
により得られる。

ここでＲ′は式（Ｉ）のＲと同じ意味を有するか、又
はＲに変換できる基である。

ａ）Ｒ′がＲ以外の場合、Ｒ′をＲに変換することによ
り式（Ｉ）の化合物を得る；ｂ）Ｒ′が式（Ｉ）の化合物のＲと同じ基の１つである
場合、式（I a）の化合物は式Ｉ）の化合物と同じであ
り、又、Ｒ′を必要により他のＲ基に変換することによ
り式（Ｉ）の他の化合物を得る；ｃ）必要により得られた式（Ｉ）の化合物をサリフイケ
イシヨン（salification）及び／又は溶媒和するか、又
はその異性体を分離する。

式（II）の化合物と式（III）の化合物の反応は通常
溶媒の存在下、式（III）の化合物の理論量又は小過剰
の存在で行われる。溶媒の例としてはメチレンクロライ
ド、クロロホルム、1,1,1−トリクロロエタン、ジメト
キシエタン、テトラハイドロフラン、ジメチルスルホキ
シド、ジメチルホルムアミド、ピリジン、ピコリン、こ
れらの混合物が挙げられる。化合物（III）を溶媒とし
ても良い。又、必要によりアルカリ金属もしくはアルカ
リ土類金属の炭酸塩、炭酸水素塩等の無機塩基、トリア
ルキルアミン等の有機塩基の存在下、０℃から溶媒の還
流温度で反応を行うことができる。

反応は好ましくは、ピリジン、クロロホルム、ジメチ
ルスルホキシドのような溶媒中、化合物（II）の１当量
に対して、化合物（III）を２〜10当量使用し、室温か
ら50℃の範囲の温度で行われる。

もしＲが式−（CH₂）ｐ−NH−（CH₂）ｑ−OH、ｐ及び
ｑは上記の通りのヒドロキシアルキルアミノアルキルで
ある式（Ｉ）の化合物を得る場合は、Ｒが式−（CH₂）
ｐ−OS（O₂）R₅である式（Ｉ）の化合物と式H₂N−（C
H₂）ｑ−Ｏ−Ｅ（IV）の化合物を反応させ、必要により
保護基Ｅを除去するのが良い。ここでＥはトリアルキル
シラン、（ジアルキル）アリールシラン、ホルミル、ア
セチルのような水酸基の保護基である。

もしＲが式−（CH₂）ｐ−NR₂R₃、R₂又はR₃の一方が水
素であり、他方が水素もしくは炭素数１〜６のアルキル
である式（Ｉ）の化合物を得る場合は、式（II）の化合
物と式H₂N−（CH₂）ｐ−Ｎ（COOR₅）R₃（Ｖ）の一方が
保護されたジアミンを反応させてＲ′が式−（CH₂）ｐ
−Ｎ（COOR₅）R₃である式（I a）の化合物を得、必要に
より保護基COOR₅を除去するのが良い。ここでR₃は水素
もしくは炭素数１〜６のアルキルであり、ｐ及びR₅は式
（Ｉ）と同様である。

上記の保護基の除去については、Green,T.W.,Wuts,P.
G.M.,“有機合成における保護基”、第２巻、John Wile
y and sons,（1991）に記載がある。

Ｒが式−（CH₂）ｐ−NH−Ｃ（＝NH）NH₂である式
（Ｉ）の化合物は、Ｒが式−（CH₂）ｐ−NH₂である式
（Ｉ）の化合物と式H₂N−Ｃ（＝NH）SO₃H（VI）の試薬
を、例えばTetra.Lett.（1988），29,3183−3186に記載
された方法に従って反応させることにより得られる。

式（II）の6,9−ジフルオロベンゾ［ｇ］イソキノリ
ン−5,10−ジオンは1,4−ジフルオロベンゼンのピリジ
ン−3,4−ジカルボン酸無水物との反応により式（VII
a）及び（VII b）で示される構造の化合物を生成するフ
リーデル−クラフトアシル化反応を含む複数工程により
製造される：式（VII a）及び（VII b）で示される化合物は次いで
30％発煙硫酸中、約140℃で環化反応を受けて式（II）
の化合物になる。

式（III）、（IV）、（Ｖ）の化合物は公知か、市販
されているか、又は公知の方法により製造される。

例えば式（Ｖ）の化合物はSynth.Comm.,（1990），2
0,2559及びJ.Med.Chem.,（1990），33,97に記載された
方法により製造される。

本発明の化合物の生物活性の評価は、米国国立癌研究
所（the U.S.National Cancer Institute）が開発した
プロトコルにしたがって“生体外”と“生体内”につい
て実施した。

本発明の化合物の“生体外”の細胞毒性活性の評価
は、転移性小結節から単離したヒト結腸腺癌細胞系（Lo
vo）、およびドキソルビシン、VP−16およびビンクリス
チンのようないくつかの抗腫瘍剤に対して後天的耐性を
有するサブラインを用いて行った。このサブライン（Lo
vo/DXと命名される）は、ドキソルビシンの蓄積とタン
パク質の過剰発現の減少を示す（Grandi,M.,Geroni,C.,
Giuliani,F.C.British,J.Cancer,54巻515頁1986年）。
本発明の化合物は、ミトザントロン、アメタントロンお
よびドキソルビシンと比較して、MTT検定法にしたがっ
て試験した（Mosman,T.,“Rapid Colorimetric assay f
or cellular growth and survival:application to pro
liferation and cytotoxicity assay",J.Immunol.Metho
ds,65巻55〜63頁1983年;Green,L.M.,“Rapid colorimet
ric assay for cell viability;application to the qu
antitation of cytotoxic and growth inhibitory lymp
hokines",J.Immunol.Methods,70巻257〜268頁1984
年）。データは表VIに報告してある。

一般に本発明の代表的化合物は、Lovo細胞系内で、ア
メタントロンとミトザントロンと同等に細胞毒性であっ
たが、本発明の実験部分の実施例４に記載された化合物
の6,9−ビス｛［２−（ジメチルアミノ）エチル］アミ
ノ｝−ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン（10
a）が最高の細胞毒性を示した（その細胞毒性はミトザ
ントロンより優れている）。アメタントロンまたはミト
ザントロンをLovo/DX細胞系内で試験したとき、それぞ
れ耐性係数R.I.（耐性細胞系のIC₅₀:感受性細胞系のIC
₅₀の比率と定義する）が101.2と29.0の高さであること
が見いだされたが、このことはこのサブラインがミトザ
ントロンとアメタントロンに対して後天的耐性をもって
いたことを示している。一方、本発明の代表的化合物を
同じ耐性サブライン内で試験したとき、本発明の実験部
分の実施例４、22、５、８および７にそれぞれ記載され
ている化合物10a、12c、10b、10eおよび10dについて観
察できるように、ミトザントロンとアメタントロンに対
する交差耐性は全く起こらなかった。これらの化合物
は、一般に、アメタントロンが感受性のLovo細胞系に示
したのと同じIC₅₀値を上記耐性サブラインに対して示し
た。化合物10aは特に、Lovo/DX細胞系内でミトザントロ
ンより活性が大であった。

これらの“生体外”のデータは、本発明の代表的化合
物が、多重医薬耐性で媒介される腫瘍耐性を克服するた
めに有用であるということを示唆している。

また、“生体外”細胞毒性の評価は、L1210マウス白
血病細胞に対して行ったが、この細胞は、10％二酸化炭
素と90％空気の湿潤環境中37℃で増殖させた懸濁培養物
〔10％ウマ血清、グルタミン、ペニシリンおよびストレ
プトマイシンを補充したマッコイ5A培地（McCoy's 5A m
edium）〕に保持したものを用いた。本発明の化合物
は、ジメチルスルホキシド（DMSO）に溶解し、適切な濃
度で上記の懸濁細胞に添加した。72時間連続して暴露し
た後、細胞濃度をコールターカウンター（Coulter Coun
ter）を用いてカウントし、下記式を用いて、増殖阻害
率を計算した。

増殖阻害率％＝１−［治療された場合の細胞の数 /DMSOのみの場合の細胞の数］×100 IC₅₀は増殖阻害データから計算し、従来技術の化合物
5aと比較して表IIに報告してある（5aの構造については
表Ｉを参照）。

本発明の代表的化合物の“生体内”での生物活性の試
験は、P388とL1210のマウス白血病モデルを用いて実施
した。

P388マウス白血病細胞はCD2F1マウスに、腹腔内（i
p）または静脈内（iv）に注射した。治療は、腫瘍を移
植してから約24時間後に開始し、医薬の投与量が、予め
決められたプロトコルにしたがって、ip（P388ip/ip）
またはiv（P388iv/iv）で、通常３日間隔（P388iv/iv）
または４日間隔（P388ip/ip）で投与された。この試験
は60日間にわたって行い、各マウスの死亡日を記録し
た。T/C％値は下記式にしたがい、各グループについて
平均生存時間（MST）を用いて決定した。

T/C％＝［（治療されたグループのMST）／（対照グループのMST］）×100 例えば、本発明の二種の代表的な化合物、すなわち、
実施例12に記載された、ジマレイン酸塩としての6,9−
ビス｛［２−（アミノ）エチル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］
イソキノリン−5,10−ジオン10i（10iマレイン酸塩）、
および実施例４に記載された6,9−ビス｛［（２−ジメ
チルアミノ）エチル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリ
ン−5,10−ジオン10aは、P388iv/ivモデルでメトザント
ロンより優れた活性を示した。本発明の化合物10iは、
実施例12に記載された塩酸塩（10i・HCl）およびジマレ
イン酸塩（10iマレイン酸塩）として、p388ip/ipモデル
でもミトザントロンより優れていた。その上、本発明の
上記の代表的化合物は、充分許容される広範囲の投与量
にわたって抗白血病活性を示し、特に、最大許容投与量
より低い投与量で活性であった。このことはミトザント
ロンと比べてより有利な治療係数が得られることを示し
ている。その試験結果は表VIIIと表IXに示してある。

また本発明の代表的化合物の抗腫瘍活性をL1210マウ
ス白血病モデルで評価した。

L1210白血病細胞はCDF1マウスに腹腔内（ip）注射
し、治療は腫瘍を移植してから約24時間後に開始した。
医薬投与量を、予め決められたプロトコルにしたがい、
通常４日間隔で投与した。試験は60日間にわたって行
い、各マウスの死亡日を記録した。T/C％は、下記式に
したがって、各グループの平均生存時間（MST）を使っ
て決定した。

T/C％＝［（治療されたグループのMST）／対照グループのMST）］×100 その試験結果は表Ｘと表XIに示す。

表Ｘから、本発明の代表的化合物［すなわち実施例４
の化合物10a、実施例12の化合物10i・HCl、および実施
例17で製造された6,9−ビス｛［２−（２−ヒドロキシ
エチルアミノ）エチル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノ
リン−5,10−ジオン10l（ジマレイン酸塩）］は、従来
技術の化合物5aと比べて驚くべき優れた抗白血病活性を
有することは明かである。

表XIからは、本発明の化合物10i・HClの優れた高白血
病活性とミトザントロン間に、明らかに有利な比較結果
がやはり認められる。

本発明の化合物の固形腫瘍に対する活性は、マウスル
イス肺癌とヒト乳癌MX−１のモデルを用いて示した。こ
れらの腫瘍モデルは、臨床上有用な抗腫瘍剤を選択する
のに用いるスクリーンパネルとして米国国立癌研究所
（U.S.NCI）が使用している８種の移植腫瘍のパネルに
含まれている（R.K.Y.Zee ChengおよびC.C.Cheng.“Scr
eening and evaluation of anticancer agents",Meth.a
nd Find.Expl.Clin.Pharmacol.,10（２）巻67〜101頁19
88年）。一例として、表XIIに、本発明の代表的化合物
の6,9−ビス｛［（２−アミノ）エチル］アミノ｝ベン
ゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン・ジマレイン酸塩
（10i・マレイン酸塩；実施例12）のこれら２種の固形
腫瘍に対する活性のデータを示してある。

本発明の代表的な化合物は、上記のようにマウスP388
とL1210の白血病、マウスルイス肺癌およびヒト乳癌MX
−１の“生体内”モデルに対して優れた試験結果を示
し、このことから、ヒトにも優れた結果が得られると予
想されるので、本発明に開示された化合物は、ヒト白血
病と固形腫瘍に対して効力があると考えられる。

それ故に、本発明の化合物は、体重1kg当たり約1mg〜
約0.4gの範囲の量で投与すると、哺乳類の癌の退行およ
び／または緩和を誘発する治療用組成物の活性成分とし
て使用することができる。好ましい投与計画は、約1mg
〜約50mg/kg体重／日であろう。単位投与量として、約7
0kgの体重の患者に対して、約70mg〜約3.5gの活性化合
物が24時間内に投与されるように採用することができ
る。この投与量は、他の治療計画、例えば放射線治療法
に適合するように調節することができる。

本発明の医薬組成物は、錠剤、カプセル剤、ゲルカプ
セル剤、座剤、凍結乾燥された粉剤および静脈投与用の
液剤の形態であってよい。

本発明を以下の実施例で示すが本発明を限定するもの
ではない。またその変形は当該技術分野の当業者にとっ
て容易に分かるであろう。関連する式は表Ｉ、III、IV
およびＶに示してある。

実施例１ピリジン−3,4−ジカルボン酸無水物（７）ピリジン−3,4−ジカルボン酸（15.0g,0.09mol）と無
水酢酸（30ml）を混合して２時間還流した。過剰の無水
酢酸を蒸留により除去し、無水物を昇華（123℃、3mmH
g）により集め、白色固体として化合物７（10.1g,76
％）を得た。

m.p.74−76℃.¹H NMR（CDCl₃） 9.39（s,1H）,9.24（d,1H）,7.94（d,1H）．実施例２４−（２′,5′−ジフルオロベンゾイル）ニコチン酸
（8a）及び３−（２′,5′−ジフルオロベンゾイル）イ
ソニコチン酸（8b）化合物７（5.0g,0.033mol）と塩化アルミニウム（17.
5g,0.131mol）の混合物を1,4−ジフルオロベンゼンに溶
解し、オイルバスで110℃で22時間加熱した。過剰の1,4
−ジフルオロベンゼンを蒸留により回収した。残渣を氷
浴で冷却し、氷水（75ml）及び濃塩酸（6.3ml）でクエ
ンチした。沈殿した固体を濾過、乾燥して白色粉末（7.
7g,87％）を得た。このものをアセトニトリル及び水か
ら再結晶した;m.p.214−217℃.¹H NMR（DMSO−d₆）,9.
15（ｓ）,8.90（ｄ）,8.80（ｄ）,7.90（ｄ）,7.5
（ｍ）,7.4（ｍ）。

Anal.Calcd for C₁₃H₇F₂NO₃:C,59.32;H,2.69;N,5.32. Found:C,59.03;H,2.55;N,5.18。

実施例３ 6,9−ジフルオロベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジ
オン（９）化合物8a及び8bのケト酸混合物（3.0g,0.011mol）を
発煙硫酸（7.5ml,30％SO₃）に溶かしオイルバスで135〜
140℃で３時間加熱した。室温まで冷却した後、混合物
を氷（200ml）の中に投入し重炭酸ナトリウムで中和し
た。メチレンクロライドで抽出すると黄色固体の化合物
９（2.0g,72％）を得た;m.p.199−200℃.¹H NMR（CDCl
₃）9.54（s,1H）,9.12（d,1H）,8.03（d,1H）,7.57（m,
2H）。

Anal.Calcd for C₁₃H₅F₂NO₂:C,63.67;H,2.04;N,5.71. Found:C,63.86;H,1.66;N,5.39. 実施例４ 6,9−ビス｛［２−（ジメチルアミノ）エチル］アミ
ノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン（10a） 6,9−ジフルオロベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−
ジオン,9（20mg,0.08mmol）及びN,N−ジメチルエチレン
ジアミン（ピリジン中1M溶液の0.8ml,0.8mmol）の混合
物を室温で48時間撹拌した。大部分のピリジンを蒸発さ
せ、エーテルを加え濾過により生成物10aを得た（24mg,
70％）,m.p.167−168℃;¹H NMR（CDCl₃）11.06（br t,
1H）,10.97（br t,1H）,9.63（s,1H）,8.92（d,1H）,8.
13（d,1H）,7.32（m,2H）,3.54（q,4H）,2.7（t,4H）,
2.38（s,12H）;mass spectrum m/z（relative intensit
y）381（2.0,M⁺）,59（5.4）,59（100）;U.V.λmax（２
−メトキシエタノール）580（sh,6200）,614（10,60
0）,661（12,700）。

Anal.Calcd for C₂₁H₂₇N₅O₂:C,66.12;H,7.13;N,18.36. Found:C,66.22;H,7.10;N,18.20. 実施例５ 6,9−ビス｛［２−（ジエチルアミノ）エチル］アミ
ノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン（10b）ピリジン（2ml）中N,N−ジエチルエチレンジアミン
（684mg,5.9mmol）の溶液をピリジン（2ml）中の化合物
９（202mg,0.82mmol）に加えた。紫色の混合物を室温で
48時間撹拌した（この時点ではTLC分析で一つの青色成
分を示した：シリカゲル５％MeOH/CHCl₃）。過剰の塩基
及びピリジンを窒素ガスの緩やかな気流により蒸発させ
た。粗生成物を一晩減圧下に置いた。残渣に氷水を加え
て濾過乾燥により固体を集めた（330mg,84％）;m.p.142
−144℃。¹H NMR（CDCl₃）11.10（t,1H）,11.00（t,1
H）,9.60（s,1H）,8.92（d,1H）,8.10（d,1H）,7.25
（m,3H）,3.50（m,1H）,2.82（m,1H）,2.35（m,3H）,1.
10（m,12H）． Anal.Calcd for C₂₅H₃₅N₅O₂:C,68.62;H,16.00;N,7.31. Found:C,67.95;H,16.05;N,7.28. 実施例６ 6,9−ビス｛［２−［ジ（sec−プロピル）アミノ］エチ
ル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン
（10c）メタノール（1ml）及び水（1ml）中の化合物９（100m
g,0.41mmol）にN,N−ジイソプロピルエチレンジアミン
（588mg,4.1mmol）を加えた。混合物を室温で88時間撹
拌し、次いで氷水に注いだ。濾過により青色の沈殿が得
られた。固体をカラムクロマトグラフイーによりシリカ
ゲルで精製した。最初の展開溶媒はクロロホルムで、次
いでクロロホルム中２％及び20％のメタノールを用い
た。後者の展開溶媒を濃縮して目的物10cを163mg（81
％）得た。

mp134−136℃;¹H NMR（CDCl₃）10.95−11.20（m,2H）,
9.63（s,1H）,8.92（d,1H）,8.13（d,1H）,7.33（m,2
H）,3.45（2q,4H）,3.10（h,4H）,2.82（t,4H）,1.08
（d,24H）． Anal.Calcd for C₂₉H₄₃N₅O₂:C,70.55;H,8.78;N,14.19. Found:C,69.23;H,8.71;N,13.43. 実施例７ 6,9−ビス｛［２−（１′−ピロリジノ）エチル］アミ
ノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン（10d）ピリジン（2ml）中１−（２−アミノエチル）ピロリ
ジン（690mg,6.0mmol）をピリジン（2ml）中の化合物９
（202mg,0.82mmol）に加えた。混合物を室温で49時間撹
拌した。過剰の塩基及びピリジンを窒素の緩やかな気流
により除去した。残渣を一晩減圧下に置いた。氷水を残
渣に加えて粘稠な固体を分離した。生成物をクロロホル
ム（３×35ml）で抽出し、抽出液を硫酸ナトリウムで乾
燥し、クロロホルムをロータリーエバポレーターで除去
して標記の化合物（260mg,73％）を得た;TLC,シリカゲ
ル,5％MeOH/CHCl₃,一つの青色スポツト;m.p.141−142
℃。¹H NMR（CDCl₃）11.15（t,1H）,11.00（t,1H）,9.
65（s,1H）,8.90（d,1H）,8.05（d,1H）,7.35（m,2H）,
3.65（m,4H）,2.90（m,4H）,2.70（m,8H）,1.85（m,8
H）． Anal.Calcd for C₂₅H₃₁N₅O₂:C,69.26;H,7.21;N,16.15. Found:C,69.02;H,7.25;N,16.00. マレイン酸塩窒素雰囲気下、エタノール（5ml）中のマレイン酸（2
71mg;2.34mmol）の溶液をエタノール（20ml）中の化合
物10d（450mg;1.04mmol）の撹拌懸濁液に加えた。２時
間撹拌した後、ジエチルエーテル（25ml）をゆつくりと
加え、沈殿を濾過し、減圧下40℃で乾燥して10dの吸湿
性ジマレエート（580mg）を得た;m.p.164−166℃。

Anal.Calcd for C₃₃H₃₉N₅O₁₀・H₂O:C,57.96;H,6.04;N,1
0.24. Found:C,57.85;H,5.99;N,10.14. 実施例８ 6,9−ビス｛［２−（４′−モルホリノ）エチル］アミ
ノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン（10e）ピリジン（2ml）中４−（２−アミノエチル）モルホ
リン（220mg,1.7mmol）の溶液をピリジン（1ml）中の化
合物９（102mg,0.42mmol）に加えた。紫色の混合物を室
温で120時間撹拌した。過剰のアミン及びピリジンを窒
素の緩やかな気流により蒸発し、残渣を一晩減圧下に置
いた。混合物をクロロホルム中に入れ濾過した。クロロ
ホルムを除去すると青色固体が得られTLC（シリカゲル,
25％MeOH/75％CHCl₃/水酸化アンモニウム水溶液数滴）
により一つの青色スポツトを示した（140mg,72％）;¹H
NMR（CDCl₃）11.015（m,1H）,10.90（m,1H）,9.62
（d,1H）,8.90（d,1H）,8.10（d,1H）,7.25（m,2H）,3.
80（m,8H）,3.55（m,4H）,2.75（t,4H）,2.50（m,8
H）。

Anal.Calcd for C₂₅H₃₁N₅O₄:C,64.22;H,6.68;N,11.98. Found:C,63.95;H,6.78;N,11.89. 実施例９ 6,9−ビス｛［２−（１′−アジリジノ）エチル］アミ
ノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン（10f）実施例４の操作を繰り返して化合物９とＮ−（２−ア
ミノエチル）アジリジンを反応させ、ピリジンを蒸発さ
せて得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフイ
ーにより精製した。CHCl₃中10％CH₃OHにより展開した大
きな青色バンドを集め、メチレンクロライドとリグロイ
ンの混合物から再結晶したところ、濃青色の固体が得ら
れた。m.p.100−103℃;¹H NMR（CDCl₃）11.23（br,1
H）,11.15（br,1H）,9.73（s,1H）,8.91（d,1H）,8.12
（d,1H）,7.40（d,1H）,7.38（d,1H）,3.69（q,4H）,2.
60（t,4H）,1.85（m,4H）,1.24（m,4H）;mass spectrum
m/z（relativeintensity）377（100,M⁺）,278（72.
7）,56（12.6）． Anal.Calcd for C₂₁H₂₃N₅O₂:C,66.82;H,6.14;N,18.55. Found:C,66.50;H,6.00;N,18.20. 実施例10 6,9−ビス｛［２−［Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）
アミノ］エチル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−
5,10−ジオン（10g）ピリジン（4.0ml）中化合物９（0.10g,0.41mmol）及
びＮ−（ｔ−ブトキシカルボニル）エチレンジアミン
（Synth.Comm.,20,2559,1990;0.65g,4.10mmol）の溶液
を室温で24時間撹拌した。水（20ml）を添加して、濾
過、水洗、乾燥して10g（0.17g,80％）を得た。m.p.213
−216℃;CHCl₃:CCl₄の混合物から再結晶によりm.p.215
−216℃の濃青色の固体を得た。¹ H NMR（CDCl₃）11.07（br,1H）,10.96（br,1H）,9.49
（s,1H）,8.90（d,1H）,7.99（d,1H）,7.32（s,2H）,5.
30（br,2H）,3.58（m,4H）,3.47（m,4H）,1.56（s,18
H）;mass spectrum m/z（relative intensity）525（10
0,M⁺）,339（51.9）,57（87.7）． Anal.Calcd for C₂₇H₃₅N₅O₆:C,61.70;H,6.73;N,13.32. Found:C,61.18;H,6.29;N,12.88. 実施例11 6,9−ビス｛［２−（Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ
−メチルアミノ）エチル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキ
ノリン−5,10−ジオン（10h）乾燥ピリジン（5ml）中Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニ
ル）−Ｎ−メチルエチレンジアミン（0.824g,4.73mmo
l）（J.Med.Chem.,33,97,1990）の撹拌溶液中に6,9−ジ
フルオロベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン（0.
29g,1.18mmol）を加えた。反応混合物を窒素雰囲気下室
温で24時間撹拌し、次いで更に50℃で８時間撹拌した。
溶媒を減圧下に除去して得られた青色残渣をCH₂Cl₂（50
ml）中に入れ、５％NaHCO₃溶液（２×30ml）及び水（30
ml）で洗浄した有機層を合わせてNa₂SO₄で乾燥し減圧下
で溶媒を蒸発させた。

カラムクロマトグラフイー（シリカゲル230〜400メツ
シユ,50g,展開溶媒CH₂Cl₂:酢酸エチル:MeOH93:5:2）よ
り青色残渣を精製したところ、青色結晶400mg（61％）
を得た。m.p.161.5−162.5℃（CH₂Cl₂:ヘキサンから再
結晶）。¹H NMR（CDCl₃）1.49（s,18H）;2.94（s,6
H）;3.45−3.75（m,8H）;7.25−7.55（m,2H）;8.12（d,
1H）;8.95（d,1H）;9.62（s,1H）;10.95−11.23（m,2H,
D₂Oで交換可能）実施例12 6,9−ビス｛［２−（アミノ）エチル］アミノ｝ベンゾ
［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン（10i）ジフルオライド９から：窒素雰囲気下、ピリジン（80m
l）中化合物９（4.00g,16.3mmol）の撹拌溶液に1,2−ジ
アミノエタン（8.72ml;130.5mmol）を加えた。わずかに
発熱反応が起こり水浴で20℃に冷却した。反応混合物を
室温で34時間撹拌し、次いで−５℃に30分間冷却して、
固体を窒素気流下吸引分離し、減圧下30℃で一晩乾燥し
た。得られた粗生成物（6.07g）を40℃でメタノール（2
0ml）中に溶解して再結晶し次いでメチレンクロライド
（100ml）及びｎ−ヘキサン（300ml）により再沈殿して
青色固体10iを5.12g得た。¹H NMR（CDCl₃）11.10−11.3
0（2m,2H）,9.53（s,1H）,8.93（d,1H）,8.13（d,1H）,
7.35（m,2H）,3.55（g,4H）,3.10（t,4H）.HPLCリクロ
スファー（Lichrospher）100RP18,5μm;展開溶媒：ナト
リウムヘプタンスルホネート2g/l in H₂O:CH₃CN:ジオキ
サン75:20:5,pH3 with H₃PO₄:λ＝245nm;flow 1ml/min;R_T＝8.80分マレイン酸塩：窒素雰囲気下、エタノール（170ml）及
びメタノール（30ml）の混合物中に遊離塩基10i（3.50
g;10.8mmol）を50℃で10分間加熱して溶解し、次いでエ
タノール（30ml）中マレイン酸（2.87g,24.7mmol）の溶
液を加えた。更に50℃で５分間加熱した後、混合物を室
温まで冷却し、次いで４℃に２時間放置した。窒素気流
下吸引により分離した沈殿を減圧下40℃で乾燥して粗ジ
マレエート5.75gを得た。

水（90ml）中この粗物質（5.71g）の撹拌懸濁液に50
℃でエタノールを完全な溶液が得られるまで（約300m
l）を滴下し、次いで更にエタノール（400ml）を加え混
合物を室温まで冷却した。12時間後沈殿を吸引分離し、
エタノール（15ml）及びジエチルエーテル（10ml）で洗
浄し、次いで減圧下30℃で５時間乾燥して10iのジマレ
エート4.22gを得た;m.p.176−178℃収縮（shrinking）,
245℃以下で溶融せず;Anal.Calcd for C₁₇H₁₉N₅O₂・2C₄
H₄O₄・1.5H₂O:C,51.37;H,5.17;N,11.98.Found:C,51,31;
H,4.99;N,11.93.¹ H NMR（DMSO−d₆）10.92（br,1H）,10.87（br,1H）,9.
45（s,1H）,9.01（m,1H）,8.08（m,1H）,7.59（s,2H）,
6.03（s,4H）,3.76（br,4H）,3.08（m,4H）.U.V.,1.528
mg in water（50ml）,nm（E1％）:641（271）,597（24
5）,313（98）,273（257）,246（479）．塩酸塩：ａ）アミン10iから：塩化水素ガスを溶液が青色でなく
なるまで粗アミンのクロロホルム溶液中にバブルさせ
た。固体を濾過、乾燥して濃青色の吸湿性の固体を得た
（0.174g,26％）,m.p.209−212℃;¹H NMR（DMSO−d₆）
10.91（br,2H）,9.44（s,1H）,9.01（d,1H）,8.23（br,
4H）,8.09（d,1H）,7.74（s,2H）,3.84（m,4H）,3.02
（m,4H）． Anal.Calcd for C₁₇H₁₉N₅O₂・2HCl・4H₂O;C,44.94;H,6.
43;N,15.41. Found:C,44.52;H,5.29;N,14.53. 遊離のアミンはNMRサンプルに固体の炭酸カリウムを
加えることにより再生された。¹H NMR分析により遊離ア
ミンの存在が確認された。

ｂ）ｔ−Boc類縁体10gの脱保護基から：塩化水素ガスを
乾燥クロロホルム（10ml）中の10g（0.160g,0.30mmol）
の溶液中に30分間バブルさせた。濃青色の固体を濾過、
乾燥した（0.115g,95％）;m.p.213−215℃。¹H NMR分析
により10iの塩酸塩と確認された。

実施例13 6,9−ビス｛［２−（アセチルアミノ）エチル］アミ
ノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン（10j）化合物９と1,2−ジアミノエタンを用いて実施例12の
操作を繰り返し、粗反応混合物をシリカゲルカラムに通
した。カラムに無水酢酸（30ml）を加え、15分間放置し
た。1:4 CH₃OH:CHCl₃により展開した大きな青色留分10j
をCHCl₃:CH₃OHの混合物から再結晶して青色固体（0.240
g,35％）を得た。m.p.155−156℃;¹H NMR（DMSO−d₆）
11.12（t,1H）,11.02（t,1H）,9.42（s,1H）,8.95（d,1
H）,8.15（br,2H）,8.03（d,1H）,7.62（s,2H）,3.57
（m,8H）,1.83（s,6H）;mass spectrum m/z（relative
intensity）409（2.5,M⁺）,337（6.4）,86（100）． Anal.Calcd for C₁₂H₂₃N₅O₄:C,61.60;H,5.67;N,17.10. Found:C,61.37;H,5.42;N,16.89. 実施例14 6,9−ビス｛［２−（メチルアミノ）エチル］アミノ｝
ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオントリハイド
ロクロライド（10k） CHCl₃（40ml）中の6,9−ビス｛［２−（Ｎ−ｔ−ブト
キシカルボニル−Ｎ−メチルアミノ）エチル］アミノ｝
ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン（10h）（440
mg,0.795mmol）の溶液にエタノール性HCl（6.7N,2.0m
l）を加えた。反応混合物を窒素雰囲気下室温で24時間
撹拌し、次いで得られた濃緑色の結晶を濾過により集
め、無水エタノールで洗浄し減圧下40℃で乾燥して純粋
な生成物945mg（94％収率）を得た。m.p.188℃分解（DS
C evaluation）。

元素分析Calcd for C₁₉H₂₆Cl₃N₅O₂・2H₂O:C,46.51;H,
6.03;N,14.14;Cl 23.60. Found:C,45.75;H,6.06;N,14.04,Cl 21.32. HPLC リクロスファー100 RP18.5μm;展開溶媒:K₂HPO₄
25mM,n−C₇H₁₅SO₃Na 2mg/ml in H₂O:CH₃CN:ジオキサ
ン80:15:5,pH2.7with HClO₄:λ＝275nm,flow 1ml/min.,
R_T20.11分 U.V.,1.07mg in 20.0ml of water:nm（Ｅ１％）:641
（290）;597（267）;313（106）;273（278）;247（48
6）．¹ H NMR（D₂O）2.75（s,6H）,3.30−3.45（m,4H）,3.80
−3.95（m,4H）,7.38（a,2H）;8.17（d,1H）,8.85（d,1
H）,9.27（s,1H）．実施例15 6,9−ビス｛（２−ヒドロキシエチル）アミノ｝ベンゾ
［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン（11a）ジフルオライド９（1.0g,4.1mmol）及び２−アミノエ
タノール（2.5g,40.8mmol）をピリジン（7ml）中に入
れ、室温で18時間撹拌した。混合物を水（50ml）に注
ぎ、濾過、乾燥して生成物11a（1.26g,94％）を得た。
m.p.236−239℃。メタノールより再結晶して暗青色針状
結晶を得た。m.p.237−239℃;¹H NMR（DMSO−d₆）11.2
8（t,1H）,11.19（t,1H）,9.43（s,1H）,8.94（d,1H）,
8.03（d,1H）,7.56（s,2H）,5.01（t,2H）,3.69（m,4
H）,3.54（m,4H）． Anal.Calcd for C₁₇H₁₇N₃O₄;C,62.38;H,5.25;N,12.83. Found:C,62.21;H,5.12;N,12.50. 実施例16 6,9−ビス［（２−メタンスルホニロキシエチル）アミ
ノ］ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン（11b）窒素雰囲気下、化合物11a（0.30g,0.92mmol）の乾燥
ピリジン（4ml）溶液を室温で10分間撹拌した。メタン
スルホニルクロライド（0.24g,2.07mmol）を加え、混合
物を20分間撹拌した。混合物を氷水（20ml）中にクエン
チし、固体を濾過した。クロロホルム−リグロインの混
合物より再結晶して青色固体（0.294g,66％）を得た。
m.p.116−118℃;¹H NMR（CDCl₃）10.98（br,2H）,9.59
（s,1H）,8.97（d,1H）,8.09（d,1H）,7.38（d,1H）,7.
34（d,1H）,4.50（t,4H）,3.83（q,4H）,3.09（s,6
H）． Anal.Calcd for C₁₉H₂₁N₃O₈S₂;C,47.20:H,4.39;N,8.69. Found:C,46.80;H,4.31;N,8.48. 実施例17 6,9−ビス｛［２−［（２−ヒドロキシエチル）アミ
ノ］エチル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］−イソキノリン−5,
10−ジオン（10l）ａ）メシレート（11b）から窒素雰囲気下、化合物11b（0.40g,0.83mmol）及び２
−（トリメチルシリルオキシ）エチルアミン（2.21g,1
6.5mmol）のピリジン（5.0mmol）溶液を室温で48時間撹
拌した。窒素気流下でピリジンを除去し、残渣をメチレ
ンクロライドで捕集した。溶液を飽和重炭酸ナトリウム
で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を除去し、
青色油状物質を減圧下一晩乾燥した。シリカゲルカラム
クロマトグラフイーによりSi−Ｏ結合の切断が判明し、
化合物10lが得られた。この生成物は1:5:5 Et₃N:CH₃:CH
Cl₃混合物により展開し、濃縮にして化合物10lを油状物
質として得た。¹H NMR（CDCl₃）11.19（br,1H）,11.06
（br,1H）,9.46（s,1H）,8.83（d,1H）,7.98（d,1H）,
6.98（s,2H）,3.82（m,4H）,3.52（m,4H）,3.07（m,4
H）,2.96（m,4H）;U.V.（２−メトキシエタノール）:57
0（sh,ε＝7200）,612（ε＝13,200）,658（ε＝14,00
0）．ｂ）ジフルオライド（９）より窒素雰囲気下、０℃で化合物９（1.00g;4.08mmol）の
ピリジン（30ml）撹拌懸濁液に２−［（２−ヒドロキシ
エチル）アミノ］エチルアミン（6.19ml;61.2mmol）を
加えた。

１時間後、反応混合物を室温にし、この温度で３時間
放置した。反応混合物をシリカゲル（100g）カラムクロ
マトグラフイーにより、先ずCHCl₃:CH₃OH 90:10によ
り、次いでCHCl₃:CH₃OH 85:15、最後にCHCl₃:CH₃OH:NH₄
OH 85:15:1により展開した。目的物を含む留分を集め、
溶媒を除去して、更に残渣をシリカゲル（95g）カラム
クロマトグラフイーで精製し、CHCl₃:CH₃OH:NH₄OH 95:
5:0〜80:20:2の濃度で展開した。最後に等級Ｉの塩基性
アルミナ（25g）を用いてCH₂Cl₂:EtOH 96:4で展開精製
し、エタノール（0.5ml）及びメチレンクロライド（10m
l）の混合物より再結晶して、化合物10l（142mg）を得
た。

マレエート塩：遊離のアミン10l（138mg;0.334mmol）を
エタノール（6ml）中に窒素雰囲気下溶解し、マレイン
酸（87mg;0.75mmol）のエタノール（3ml）溶液を室温で
加えた。４℃で３時間冷却後、得られた青色結晶を窒素
気流下、吸引分離し、エタノール（1ml）及びジエチル
エーテル（2ml）で洗浄し、減圧下40℃で乾燥してジマ
レエート塩10l（160mg）を得た。m.p.132−133℃;¹H N
MR（DMSO−d₆）10.94（br,1H）,10.88（br,1H）,9.47
（s,1H）,9.02（d,1H）,8.60（br,2H）,8.09（d,1H）,
7.63（s,2H）,6.01（s,4H）,5.32（br,2H）,3.89（m,4
H）,3.71（m,4H）,3.26（m,4H）,3.12（m,4H）,U.V.1.3
55mg in H₂O（25ml）:nm（Ｅ１％）:641（220）,598
（208）,312（85）,272（221）,246（406）． Anal.Calcd for C₂₁H₂₇N₅O₄・2C₄H₄O₄・H₂O;C,52.52:H,
5.57;N,10.64. Found:C,52.49;H,5.56;N,10.61. 実施例18 6,9−ビス｛［２−（２−メトキシエチルアミノ）エチ
ル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］−イソキノリン−5,10−ジオ
ン（10m）化合物11b（0.15g,0.21mmol）及び２−メトキシエチ
ルアミン（0.47g,6.20mmol）のピリジン（2.0ml）溶液
を窒素下室温で48時間撹拌した。ピリジン及び過剰のア
ミンを減圧下除去した。残渣をメチレンクロライドに溶
解し、飽和重炭酸ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリ
ウムで乾燥した。溶媒を除去し残渣をシリカゲルカラム
クロマトグラフイーにより1:1 CH₃OH:CHCl₃により展開
精製した。エタノール及びペンタンの混合物から再結晶
し、化合物10m（0.091g,66％）を得た。m.p.174−175
℃;¹H NMR（CDCl₃）11.08（br,1H）,10.97（br,1H）,
9.56（s,1H）,8.90（d,1H）,8.05（d,1H）,7.31（s,2
H）,3.62（m,8H）,3.43（s,6H）,3.08（t,4H）,2.94
（t,4H）,2.66（br s,2H）;mass spectrum m/z（relati
ve intensity）441（100,M⁺）,354（57.4）,266（50.
5）． Anal.Calcd for C₂₃H₃₁N₅O₄;C,62.57;H,7.09;N,15.86. Found:C,62.51;H,6.92;N,15.47. 実施例19 6,9−ビス｛［２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチ
ル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］−イソキノリン−5,10−ジオ
ン（11c）２−（２−アミノエトキシ）エタノール（446mg,4.25
mmol）のピリジン（1ml）溶液を化合物９（100mg,0.41m
mol）のピリジン（1ml）溶液に加えた。混合物を室温で
45時間撹拌した。過剰のアミン及びピリジンを緩やかな
窒素ガス気流により除去し、残渣の固体を減圧下に一晩
置いた。冷飽和NaCl溶液を固体に加え、生成物をクロロ
ホルム（６×25ml）で抽出した。抽出物を硫酸マグネシ
ウムで乾燥しロータリーエバポレーターで濃縮して化合
物11c（140mg）82％を得た。mp97−99℃;¹H NMR（CDCl
₃）11.15−11.35（2m,2H）,9.60（s,1H）,8.85（d,1
H）,8.08（d,1H）,7.30（m,2H）,3.85（m,8H）,3.57−
3.75（2m,9H）,2.75−3.25（br s,1H）．実施例20 6,9−ビス｛［３−（アミノ）プロピル］アミノ｝ベン
ゾ［ｇ］−イソキノリン−5,10−ジオン（12a）１）遊離アミン:1,3−ジアミノプロパン（870mg,11.76m
mol）のクロロホルム（3ml）溶液を化合物９（300mg,1.
22mmol）のクロロホルム（6ml）に加えた。紫色の混合
物を室温で166時間撹拌した。混合物を濾過し、塩をク
ロロホルムで洗浄した。溶媒をロータリーエバポレータ
ーで除去し、残渣を減圧下一晩放置し、化合物12a（290
mg,93％）を得た。TLC（シリカゲル,25％MeOH/75％クロ
ロホルム／水酸化アンモニウム数滴）により一つの青色
スポツトがみられた。

m.p.105℃（softens）112−115℃.¹H−NMR（DMSO−d₆）
11.15（m,1H）,11.05（m,1H）,9.45（s,1H）,8.90（d,1
H）,8.0（d,1H）,7.55（br s,2H）,3.55（br m,4H）,4.
65（t,4H）,3.75（t,4H）,1.75（t,4H）． Anal.Calcd for C₁₉H₂₃N₅O₂;C,64.57:H,6.56;N,19.81. Found:C,65.00;H,6.50;N,19.78. ２）マレエート塩：マレイン酸（11mg,0.86mmol）のメ
タノール溶液を化合物12a（100mg,0.28mmol）のメタノ
ール（2ml）及び酢酸エチル（2ml）溶液に加えた。更に
酢酸エチルを加えて得られた青色沈殿を濾過し、減圧下
で乾燥した（120mg,79％）。¹H NMR（DMSO−d₆）11.10
（t,1H）,11.00（t,1H）,9.45（s,1H）,8.95（d,1H）,
8.05（d,1H）,7.75（br,4H）,7.60（s,2H）,6.0（s,4
H）,3.60（m,4H）,2.95（t,4H）,1.95（m,4H）． Anal.Calcd for C₂₃H₂₇N₅O₆;C,58.84:H,5.80;N,14.92. Found:C,58.75;H,5.70;N,14.85. 実施例21 6,9−ビス｛［４−（アミノ）ブチル］アミノ｝ベンゾ
［ｇ］−イソキノリン−5,10−ジオン（12b）１）遊離アミン:1,4−ジアミノブタン（960mg,10.9mmo
l）のクロロホルム（3ml）溶液を化合物９（319mg,1.3m
mol）のクロロホルム（6ml）に加えた。紫色の混合物を
室温で217時間（９日）撹拌した。沈殿した塩を濾過に
より除去し、濾液を緩やかな窒素気流下濃縮して遊離ア
ミン12b（400mg,80％）を得た。TLC（シリカゲル,25％M
eOH/75％クロロホルム／水酸化アンモニウム数滴）m.p.
80℃（softens）90−92℃.¹H NMR（DMSO−d₆）11.15
（m,1H）,11.05（m,1H）,9.42（s,1H）,8.90（d,1H）,
8.0（d,1H）,7.5（br s,2H）,3.45（m,4H）,2.60（m,4
H）,1.70（m,4H）,1.45（m,4H）． Anal.Calcd for C₂₁H₂₇N₅O₂;C,66.12:H,7.13;N,18.36. Found:C,64.26;H,6.95;N,17.42. ２）マレエート塩：マレイン酸（116mg,1mmol）の酢酸
エチル（4ml）溶液を化合物12b（124mg,0.40mmol）のメ
タノール（6ml）及び酢酸エチル（8ml）溶液に加えた。
青色油状物質を分離し、混合物を冷蔵庫に一晩置いた。
溶媒をデカンテイシヨンにより除去し得られた固体を酢
酸エチルで十分に洗浄して青色の非常に吸湿性の固体を
得た（125mg,63％）。¹H NMR（DMSO−d₆）11.20（m,1
H）,11.10（m,1H）,9.45（s,1H）,8.95（d,1H）,8.05
（d,1H）,7.70（br s,4H）,6.00（s,4H）,3.55（m,4
H）,2.85（m,4H）,1.70（m,8H）． Anal.Calcd for C₂₉H₃₅N₅O₁₀;C,56.76:H,5.75;N,11.41. Found:C,53.65;H,6.10;N,10.05. 実施例22 6,9−ビス｛［３−（ジメチルアミノ）プロピル］アミ
ノ｝ベンゾ［ｇ］−イソキノリン−5,10−ジオン（12
c）３−ジメチルアミノプロピルアミン（700mg,6.9mmo
l）のピリジン（2ml）溶液を化合物９（100mg,0.41mmo
l）のピリジン（2ml）に加えた。混合物を室温で120時
間撹拌した。過剰のジアミン及びピリジンを緩やかな窒
素ガス気流により除去し、残渣を減圧下に一晩置いた。
残渣を冷水に加えクロロホルム（４×20ml）で抽出し
た。抽出液をNa₂SO₄で乾燥し、ロータリーエバポレータ
ーで濃縮した。青色固体をシリカゲルカラムクロマトグ
ラフイーで精製した。先ず10％メタノール/90％クロロ
ホルム、続いて25％メタノール/75％クロロホルムで展
開した。25％エタノール/75％クロロホルムに少量の水
酸化アンモニウムを加えた混合物で生成物を展開した。
これらの留分を濃縮して目的物12cを92mg（55％）得
た。mp107−109℃.¹H NMR（CDCl₃）:11.00−11.20（2
m,2H）,9.63（s,1H）,8.93（d,1H）,8.12（d,1H）,7.37
（s,2H）,3.55（q,4H）,2.55（m,4H）,2.35（s,12H）,
2.00（m,4H）．実施例23 6,9−ピス｛［２−（エチルアミノ）エチル］アミノ｝
ベンゾ［ｇ］−イソキノリン−5,10−ジオン（10n）Ｎ−エチルエチレンジアミン（400mg,4.5mmol）のピ
リジン（1ml）溶液を化合物９（98mg,0.40mmol）のピリ
ジン（1ml）溶液に加えた。混合物を室温で66時間撹拌
した。ピリジン及び過剰のジアミンを緩やかな窒素ガス
気流により除去し、残渣を減圧下に一晩置いた。残渣に
クロロホルムを加えクロロホルム層を冷水で２回洗浄し
た。クロロホルム層をMgSO₄で乾燥し、溶媒をロータリ
ーエバポレーターで除去した。青色固体を５％メタノー
ル/95％クロロホルムを用いたシリカゲルカラムクロマ
トグラフイーで精製した。展開剤をクロロホルム中５
％、10％次いで50％メタノールと徐々に変えた。目的物
を50％メタノール/48％クロロホルム/2％水酸化アンモ
ニウムにより展開した。溶媒を除去して、生成物（10
n）を32mg（21％）得た。mp101−102℃.¹H NMR（CDC
l₃）:11.10（m,1H）,11.00（m,1H）,9.6（s,1H）,8.9
（d,1H）,8.05（d,1H）,7.3（m,2H）,3.55（m,4H）,3.0
（t,4H）,2.8（q,4H）,1.15（t,6H）．実施例24 6,9−ビス｛［２−（プロピルアミノ）エチル］アミ
ノ｝ベンゾ［ｇ］−イソキノリン−5,10−ジオン（10
o）Ｎ−プロピルエチレンジアミン（403mg,4.0mmol）の
ピリジン（1ml）溶液を化合物９（98mg,0.40mmol）のピ
リジン（1ml）溶液に加えた。混合物を室温で24時間撹
拌し、緩やかな窒素ガス気流により濃縮した。残渣を減
圧下に一晩置いた。残渣に冷水を加え水層をクロロホル
ム（５×40ml）で抽出した。抽出液を硫酸マグネシウム
で乾燥し、クロロホルムをロータリーエバポレーターで
除去した。青色固体をシリカゲルカラムクロマトグラフ
イーで精製した。展開剤として先ず５％メタノール/95
％クロロホルムを用い、続いてメタノールの量を10％,2
0％、30％、40％及び50％に徐々に増加した。目的物を
水酸化アンモニウムを含む60％メタノール/40％クロロ
ホルムにより展開した。展開剤を除去して、生成物（10
o）を50mg（30％）得た。mp105−106℃.¹H NMR（CDC
l₃）11.15（m,1H）,11.05（m,1H）,9.6（s,1H）,8.9
（d,1H）,8.10（d,1H）,7.3（m,2H）,3.6（m,m,4H）,3.
0（t,4H）,2.75（t,4H）,1.6（m,4H,H₂O peak superimp
osed）,0.95（t,6H）．実施例25 6,9−ビス｛［２−（イソプロピルアミノ）エチル］ア
ミノ｝ベンゾ［ｇ］−イソキノリン−5,10−ジオン（10
p）Ｎ−イソプロピルエチレンジアミン（450mg,4.5mmo
l）のピリジン（2ml）溶液を化合物９（110mg,0.45mmo
l）のピリジン（1ml）溶液に加えた。瞬間的な過マンガ
ン酸様の着色がみられた。混合物を室温で40時間撹拌し
た。ピリジン及び過剰のジアミンを緩やかな窒素ガス気
流により除去し、残渣を減圧下に一晩置いた。残渣にク
ロロホルム（20ml）を加え、次いで冷水を加えた。青色
発色が水層にみられてから、クロロホルム（４×25ml）
で抽出した。合わせた抽出液をMgSO₄で乾燥し、クロロ
ホルムをロータリーエバポレーターで除去した。得られ
た青色固体を先ずクロロホルムを用いたシリカゲルカラ
ムクロマトグラフイーで精製し、次いで、クロロホルム
中メタノールの量を２％,5％,10％,20％,40％及び50％
に徐々に変えて精製した。目的物を50％メタノール/49
％クロロホルム/1％水酸化アンモニウムにより展開し
た。展開剤を除去して、生成物（10p）を56mg（30％）
得た。mp136−137℃．¹ H NMR（CDCl₃）11.1（t,1H）,11.0（t,1H）,9.6（s,1
H）,8.9（d,1H）,8.1（d,1H）,7.30（m,2H）,3.6（m,4
H）,3.0（t,4H）,2.9（m,2H）,1.05（d,6H）．実施例26 生体外での生物学的評価：ヒト結腸腺癌Lovo細胞につい
てのMTT検定 MTT検定は、Mosmann,T.,J.Immunol.Methods,65巻55〜
63頁1983年およびGreen,L.M.,J.Immunol.Methods,70巻2
57〜268頁1984年にしたがって実施した。

使用直前に、化合物と対照標準を適切な溶媒に溶解
し、続いてさらに完全培地で希釈する。ヒト結腸腺癌細
胞Lovoとドキソルビシンに対して耐性のそのサブライン
（Lovo/DX）（2.5.10⁴細胞/ml）を、96ウエルプレート
にプレートし、培地内で24時間予備インキュベートを行
う。その後、細胞を144時間医薬に曝露し、次にチアゾ
リルブルーテトラゾリウムブロミド溶液（MTT溶液）を
添加し、細胞を４時間再びインキュベートする。上澄み
液を除き、ジメチルスルホキシド150μｌを添加してホ
ルマザンの結晶を可溶化する。プレートを570nmにてミ
クロプレートリーダー（microplate reader）で読み取
り、50％細胞増殖の阻害濃度（IC₅₀;μg/ml）を計算す
る。

結果を表VIに示す。

実施例27 生体外での生物学的評価:L1210マウス白血病 L1210マウス白血病細胞を、10％ウマ血清、グルタミ
ン、ペニシリンおよびストレプトマイシンを補充したマ
ッコイ5A培地の懸濁培養物中に通常どおりに保持し、10
％の二酸化炭素と90％の空気の浸潤環境下で37℃にて増
殖させた。

生体外での細胞毒性を評価するために、各化合物をジ
メチルスルホキシドに溶解し、1mlのL1210細胞（10⁵細
胞／試験管）に添加して、最終濃度が0.01、0.1および
１μｇ医薬/ml培養物のものを得た。医薬に連続して72
時間暴露した後、細胞の濃度をコールターカウンターで
測定した。増殖阻害率を各医薬について、下記の式を用
いて計算した。

増殖阻害率％＝１−［処理された場合の細胞の数 /DMSOのみの場合の細胞の数］×100 この増殖阻害率のデータは、IC₅₀値（細胞の増殖を対
照の50％にまで阻害するのに必要な医薬濃度の計算値）
を計算するのに使用した。

結果は表VIIに報告してある。

表VII 従来技術の化合物5aと比較して示した本発明の代表的
化合物のL1210白血病に対する生体外細胞毒性活性化合物実施例 IC₅₀（μg/ml） 10a 4 0.006 10f 9 0.002 10i^(a) 12 0.05 10l^(b) 17 0.06 5a^(c) − 0.155 （ａ）塩酸塩:10i・HCl （ｂ）ジマレイン酸塩:10l・マレイン酸塩（ｃ）公知の化合物の6,9−ビス｛［２−（ジメチルア
ミノ）エチル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］キノリン−5,10−
ジオン:A.P.Krapchoら、J.Med.Chem.,28巻1124〜６頁19
85年実施例28 生体内での生物学的試験:P388マウス白血病（iv/iv,d1,
4,7） DBA2マウスに10⁶の細胞を腹腔内（ip）に逐次注射す
ることによって、P388マウス白血病細胞を生体内に保持
した。試験のために、CDF1マウスに、10⁶のP388細胞を
静脈（i.v.）注射で接種し、治療を24時間後に開始し
た。医薬のi.v.投与量を１日目、４日目および７日目に
投与した。マウスは細胞毒性の徴候と生存について毎日
観察した。死亡日は、60日間の試験期間中、死亡したか
または殺した各動物について記録した。各治療グループ
に対する平均生存時間（MST）を計算し、T/C％を下記式
を使って測定した。

T/C％＝［（治療したグループのMST）／（対照グループのMST）］×100 表VIIIにミトザントロンと比較して実施例４の6,9−
ビス｛［２−（ジメチルアミノ）エチル］アミノ｝ベン
ゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン（10a）及び実施
例12の6,9−ビス｛［２−（アミノ）エチル］アミノ｝
ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオンジマレエー
ト（10iマレエート）の抗白血病活性を示す。

実施例29 生体内での生物学的試験:P388マウス白血病（ip/iP,d1,
5,9） DBA2マウスに10⁶の細胞を腹腔内（ip）に逐次注射す
ることによって、P388マウス白血病細胞を生体内に保持
した。試験のために、CDF1マウスに、10⁶のP388細胞を
i.p.注射で接種し、治療を24時間後に開始した。医薬の
i.p.投与量を１日目、５日目および９日目に投与した。
マウスは細胞毒性の徴候と生存について毎日観察した。
死亡日は、60日間の試験期間中、死亡したかまたは殺し
た各動物について記録した。各治療グループに対する平
均生存時間（MST）を計算し、T/C％を下記式を使って測
定した。

T/C％＝［（治療したグループのMST）／（対照グループのMST）］×100 表IXにミトザントロンと比較して実施例12の6,9−ビ
ス｛［２−（アミノ）エチル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］イ
ソキノリン−5,10−ジオンジマレエート（10i）の２
塩酸塩（10i・HCl）及びジマレエート（10i・マレエー
ト）塩の抗白血病活性を示す。

実施例30 生体内での生物学的試験:L1210マウス白血病（ip/ip.d
1,5,9）ａ）BDF₁マウスに10⁶の細胞を腹腔内（ip）に毎週注射
することによって、L1210マウス白血病細胞を生体内に
保持した。試験のために、マウスに、10⁶のL1210細胞を
i.p.注射で接種し、治療を24時間後に開始した。医薬の
所望の投与量を１日目、５日目および９日目に投与し
た。マウスは細胞毒性の徴候と生存について毎日観察し
た。死亡日は、60日間の試験期間中、死亡したかまたは
殺した各動物について記録した。各治療グループに対す
る平均生存時間（MST）を計算し、T/C％を下記式を使っ
て測定した。

T/C％＝［（治療したグループのMST）／（対照グループのMST）］×100 結果を表Ｘに示す。

ｂ）DBA2マウスに10⁵の細胞を腹腔内（ip）に毎週注射
することによって、L1210マウス白血病細胞を生体内に
保持した。試験のために、CDF1マウスに、10⁵のL1210細
胞をi.p.注射で接種し、治療を24時間後に開始した。医
薬の所望の投与量を１日目、５日目および９日目に投与
した。マウスは細胞毒性の徴候と生存について毎日観察
した。死亡日は、60日間の試験期間中、死亡したかまた
は殺した各動物について記録した。各治療グループに対
する平均生存時間（MST）を計算し、T/C％を下記式を使
って測定した。

T/C％＝［（治療したグループのMST）／（対照グループのMST）］×100 結果を表XIに示す。

実施例31 生体内での生物学的試験：マウスルイス肺癌とヒトMX−
１乳癌に対する抗腫瘍活性ａ）マウスルイス肺癌とヒトMX−１乳癌 C57b1/6雌マウスに10⁵の細胞を足に（im）移植した。
治療は、腫瘍を移植した（ゼロ日）から１日目、７日目
および15日目に静脈注射（iv）で行った。各治療グルー
プの平均腫瘍重量を、Geran.,R.I.ら、Cancer Chemothe
r.Rep.,３巻51〜61頁1972年にしたがって計算し、TWI％
は最後の医薬治療を終わってから７日後に下記式を使っ
て計算した。

TWI％＝100−［（治療を行ったマウスの平均腫瘍重量）／（対照マウスの平均腫瘍重量）］×100 結果は、本発明の代表的化合物である、実施例12のジ
マレイン酸塩（10iマレイン酸塩）としての6,9−ビス
｛［２−（アミノ）エチル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソ
キノリン−5,10−ジオン（10i）について表XIIに示し
た。

ｂ）ヒトMX−１乳癌 CD1nu/nu雌マウスに、腫瘍断片（約1mm×1mm×1mm）
を皮下に（sc）移植した。治療は１週間に１回ずつ３週
間にわたって静脈注射で行った。３週間後、腫瘍の重量
は平均約150mgになった。すべての個々の腫瘍につい
て、治療開始時（Vo）に対する重量の変化（相対腫瘍重
量）は、１日毎の測定値（Vt）に対して、Vt/Voで表し
た。TWI％は、最終の医薬治療の７日後に、下記式を使
って計算した。

TWI％＝100−［(治療されたマウスの平均相対腫瘍重量) ／（対照マウスの平均相対腫瘍重量）］×100 表XIIに本発明の代表的化合物、実施例12の6,9−ビス
｛［２−（アミノ）エチル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソ
キノリン−5,10−ジオン（10i）のジマレエート塩（10i
マレエート）の結果を示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) C07D 221/08 ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】遊離塩基としての下記式（Ｉ）の化合物及
びその薬学的に許容される酸との塩。ここでＲは OR₁及び−NR₂R₃から選ばれた置換基の１又は２を有する
炭素数２〜10のアルキル；１又は２の酸素原子又は−NR₄−を有し、水酸基（OH）
又は−NR₂R₃の１又は２により置換されていてもよい炭
素数２〜10のアルキル； R₁は水素、炭素数１〜６のアルキル、−Ｓ（O₂）R₅、又
は−NR₂R₃により置換された炭素数２〜６のアルキル； R₂及びR₃は同一又は異なつて水素、炭素数１〜10のアル
キル、１又は２の水酸基（OH）により置換された炭素数
２〜10のアルキル、−COR₅、−COOR₅であり、R₂及びR₃
はその結合する窒素と共にエチレンイミン環又はアジリ
ジン、モルホリン又はピロリジン環から選ばれた複素環
を示し、 R₄は水素、炭素数１〜10のアルキル、炭素数２〜10のヒ
ドロキシアルキル、−NR₂R₃により置換された炭素数２
〜10のアルキル、炭素数７〜10のアラルキル、フエニ
ル、−COR₅、−COOR₅又は−Ｓ（O₂）R₅; R₅は炭素数１〜10のアルキルを示す。
【請求項２】塩がマレイン酸塩又は塩酸塩である請求の
範囲第１項に記載の化合物。
【請求項３】Ｒが−（CH₂）ｐ−NH₂、ｐが２、３又は４
である請求の範囲第１項に記載の化合物。
【請求項４】Ｒが−（CH₂）ｐ−NR₂R₃、ｐが２、３又は
４、R₂及びR₃は炭素数１〜６のアルキル、又は窒素と共
に複素環を形成する請求の範囲第１項に記載の化合物。
【請求項５】Ｒが−（CH₂）ｐ−NR₂R₃、ｐが２、３又は
４、R₂は水素、R₃は炭素数１〜６のアルキルである請求
の範囲第１項に記載の化合物。
【請求項６】Ｒが−（CH₂）ｐ−NH−Ｃ（＝NH）−NH₂、
ｐが２、３又は４である請求の範囲第１項に記載の化合
物。
【請求項７】Ｒが−（CH₂）ｐ−NH−（CH₂）qOH、ｐ及
びｑがそれぞれ独立して２、３又は４である請求の範囲
第１項に記載の化合物。
【請求項８】Ｒが−（CH₂）ｐ−OH、ｐが２、３又は４
である請求の範囲第１項に記載の化合物。
【請求項９】Ｒが−（CH₂）ｐ−Ｏ−（CH₂）ｑ−OH、ｐ
及びｑがそれぞれ独立して２、３又は４である請求の範
囲第１項に記載の化合物。
【請求項１０】6,9−ビス｛［（２−（アミノ）エチ
ル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオ
ン； 6,9−ビス｛［２−（４′−モルホリノ）エチル］アミ
ノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［（２−ジメチルアミノ）エチル］アミ
ノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−（ジエチルアミノ）エチル］アミ
ノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−［ジ（sec−プロピル）アミノ］エチ
ル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオ
ン； 6,9−ビス｛［２−（１′−ピロリジノ）エチル］アミ
ノ］｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−（１′−アジリジノ）エチル］アミ
ノ］｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−メタンスルホニロキシ）エチル］ア
ミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［４−（アミノ）ブチル］アミノ｝ベンゾ
［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［３−（アミノ）プロピル］アミノ｝ベン
ゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−［（２−ヒドロキシエチル）アミ
ノ］エチル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10
−ジオン； 6,9−ビス｛［３−（ジメチルアミノ）プロピル］アミ
ノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［（２−ヒドロキシ）エチル］アミノ｝ベ
ンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチ
ル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオ
ン； 6,9−ビス｛［２−（メチルアミノ）エチル］アミノ｝
ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−（エチルアミノ）エチル］アミノ｝
ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−（ｎ−プロピルアミノ）エチル］ア
ミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−（sec−プロピルアミノ）エチル］ア
ミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−（グアニジノ）エチル］アミノ｝ベ
ンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン及び 6,9−ビス｛［（２−アミノ−2,2−ジメチル）エチル］
アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオンから選ばれた請求の範囲第１項に記載の化合物。
【請求項１１】6,9−ビス｛［（２−（アミノ）エチ
ル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオ
ン； 6,9−ビス｛［（２−（４″−モルホリノ）エチル］ア
ミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−（１′−ピロリジノ）エチル］アミ
ノ］｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−（１′−アジリジノ）エチル］アミ
ノ］｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［４−（アミノ）ブチル］アミノ｝ベンゾ
［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［３−（アミノ）プロピル］アミノ｝ベン
ゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−［（２−ヒドロキシエチル）アミ
ノ］エチル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10
−ジオン及びそのいずれかの化合物の塩から選ばれた請求の範囲第１
項に記載の化合物。
【請求項１２】6,9−ビス｛［２−（アミノ）エチル］
アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン又は
その塩である請求の範囲第１項に記載の化合物。
【請求項１３】上記塩がマレイン酸塩又は塩酸塩である
請求の範囲第12項に記載の化合物。
【請求項１４】請求の範囲第１項の化合物及び薬学的に
許容される希釈剤又は賦形剤を含む細胞増殖抑制又は抗
腫瘍活性を有する医薬組成物。
【請求項１５】請求の範囲第２項の化合物及び薬学的に
許容される希釈剤又は賦形剤を含む細胞増殖抑制又は抗
腫瘍活性を有する医薬組成物。
【請求項１６】請求の範囲第３項の化合物及び薬学的に
許容される希釈剤又は賦形剤を含む細胞増殖抑制又は抗
腫瘍活性を有する医薬組成物。
【請求項１７】請求の範囲第４項の化合物及び薬学的に
許容される希釈剤又は賦形剤を含む細胞増殖抑制又は抗
腫瘍活性を有する医薬組成物。
【請求項１８】請求の範囲第５項の化合物及び薬学的に
許容される希釈剤又は賦形剤を含む細胞増殖抑制又は抗
腫瘍活性を有する医薬組成物。
【請求項１９】請求の範囲第６項の化合物及び薬学的に
許容される希釈剤又は賦形剤を含む細胞増殖抑制又は抗
腫瘍活性を有する医薬組成物。
【請求項２０】請求の範囲第７項の化合物及び薬学的に
許容される希釈剤又は賦形剤を含む細胞増殖抑制又は抗
腫瘍活性を有する医薬組成物。
【請求項２１】請求の範囲第８項の化合物及び薬学的に
許容される希釈剤又は賦形剤を含む細胞増殖抑制又は抗
腫瘍活性を有する医薬組成物。
【請求項２２】請求の範囲第９項の化合物及び薬学的に
許容される希釈剤又は賦形剤を含む細胞増殖抑制又は抗
腫瘍活性を有する医薬組成物。
【請求項２３】6,9−ビス｛［（２−（アミノ）エチ
ル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオ
ン； 6,9−ビス｛［２−（４′−モルホリノ）エチル］アミ
ノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［（２−ジメチルアミノ）エチル］アミ
ノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−（ジエチルアミノ）エチル］アミ
ノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−［ジ（sec−プロピル）アミノ］エチ
ル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオ
ン； 6,9−ビス｛［２−（１′−ピロリジノ）エチル］アミ
ノ］｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−（１′−アジリジノ）エチル］アミ
ノ］｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−メタンスルホニロキシ）エチル］ア
ミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［４−（アミノ）ブチル］アミノ｝ベンゾ
［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［３−（アミノ）プロピル］アミノ｝ベン
ゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−［（２−ヒドロキシエチル）アミ
ノ］エチル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10
−ジオン； 6,9−ビス｛［３−（ジメチルアミノ）プロピル］アミ
ノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［（２−ヒドロキシ）エチル］アミノ｝ベ
ンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチ
ル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオ
ン； 6,9−ビス｛［２−（メチルアミノ）エチル］アミノ｝
ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−（エチルアミノ）エチル］アミノ｝
ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−（ｎ−プロピルアミノ）エチル］ア
ミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−（sec−プロピルアミノ）エチル］ア
ミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−（グアニジノ）エチル］アミノ｝ベ
ンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［（２−アミノ−2,2−ジメチル）エチル］
アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオンから選ばれた化合物及び薬学的に許容される希釈剤又は
賦形剤を含む細胞増殖抑制又は抗腫瘍活性を有する医薬
組成物。
【請求項２４】6,9−ビス｛［（２−（アミノ）エチ
ル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオ
ン； 6,9−ビス｛［（２−（４″−モルホリノ）エチル］ア
ミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−（１′−ピロリジノ）エチル］アミ
ノ］｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−（１′−アジリジノ）エチル］アミ
ノ］｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［４−（アミノ）ブチル］アミノ｝ベンゾ
［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［３−（アミノ）プロピル］アミノ｝ベン
ゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン； 6,9−ビス｛［２−［（２−ヒドロキシエチル）アミ
ノ］エチル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10
−ジオンから選ばれた化合物、そのいずれかの化合物の塩及び薬
学的に許容される希釈剤又は賦形剤を含む細胞増殖抑制
又は抗腫瘍活性を有する医薬組成物。
【請求項２５】6,9−ビス｛［（２−（アミノ）エチ
ル］アミノ｝ベンゾ［ｇ］イソキノリン−5,10−ジオン
又はその塩及び薬学的に許容される希釈剤又は賦形剤を
含む細胞増殖抑制又は抗腫瘍活性を有する医薬組成物。
【請求項２６】上記塩がマレイン酸塩である請求の範囲
第25項に記載の医薬組成物。
【請求項２７】上記塩が塩酸塩である請求の範囲第25項
に記載の医薬組成物。