PT750619E

PT750619E - Compostos heteroindazois anelados

Info

Publication number: PT750619E
Application number: PT95913595T
Authority: PT
Inventors: Ambrogio Oliva; Silvano Spinelli; A Paul Krapcho; Ernesto Menta
Original assignee: Univ Vermont; Novuspharma Spa
Priority date: 1994-03-08
Filing date: 1995-03-08
Publication date: 2001-09-28
Also published as: GR3036463T3; EP0750619A1; CA2183735C; ATE201685T1; EP0750619B1; US5596097A; AU2097695A; NZ282995A; DK0750619T3; CA2183735A1; WO1995024407A1; DE69521123D1; ES2157325T3; DE69521123T2

Description

1

Descrição “Compostos heterolndazóls anelados”

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

Campo da invenção A presente invenção diz respeito a compostos heteroindazóis anelados e aos correspondentes mono-N-óxidos.

Demonstrou-se que estes compostos possuem actividade antitumoral.

Antecedentes

Foram já descritos determinados compostos l,4-bis[(aminoalquil)-amino]-antraceno--9,10-diona que revelaram possuir actividade antitumoral em experiências clínicas. Possuem um interesse particular os compostos ametantrona, ou seja, l,4-bis{[2-(2-MdroxietUamino)-etil]--amino}-antraceno-9,10-diona, e mitoxantrona, ou seja, 5,8-di-hidroxi-l,4-bis{[2-(2-hidroxi-etilamino)-etil]-amino}-antraceno-9,10-diona [Zee-Cheng et al., J, Med. Chem, 21, 291-4 (1978); Cheng et al, “Progress in Medicinal Chemistiy”, Ellis, G.P. e West, G.B., eds.; Elsevier: Amsterdão, 1983, vol. 20, pág. 83 e referências aí citadas]. O composto mitoxantrona é um agente oncolítico de largo espectro cuja actividade é idêntica à do antibiótico antraciclina, a doxorrubicina. Experiências clínicas realizadas demonstraram que a mitoxantrona possui uma actividade particularmente promissora para o tratamento de estados avançados do cancro da mama, leucemia aguda e linfoma [Legha, Drugs of Today. 20. 629 (1984)]. Embora os estudos realizados com animais tenham demonstrado uma cardiotoxicidade diminuta em 2 comparação com a doxorrubicina, também foi observada alguma cardiotoxicidade clínica com a mitoxantrona, principalmente em pacientes previamente tratados com doxorrubicina (R. Stuart Harris et al, Lancet 219, (1984) e obras aí citadas). O composto ametantrona foi descrito como sendo, em animais, cerca de 10 vezes menos potente e cardiotóxico do que a mitoxantrona. Devido ao facto de ter sido observada uma toxicidade retardada apenas com a mitoxantrona, após a administração dos dois fármacos por via i.p. a ratos imo portadores de cancro, segundo dosagens antitumorais equieficazes, foi sugerido que a presença da substituição 5,8-di-hidroxi na mitoxantrona poderia estar implicada nos decessos adiados [Corbett et al, Câncer Chemotfaer. Pharmacol., 6, 161 (1981)].

Além disso, tanto a mitoxantrona como a ametantrona possuem uma extraordinária toxicidade mielodepressiva e ambos os compostos manifestam resistência cruzada a histotipos celulares, desenvolvendo resistência contra a doxorrubicina mediada pela sobreexpressão da glicoproteína P. Uma tal resistência, que é designada por resistência múltipla aos fáimacos, envolve inúmeros antibióticos antitumorais, entre os quais a amsacrina e os derivados podo-fílotoxínicos, e constitui uma das razões principais dos insucessos terapêuticos no tratamento de tumores sólidos com tais antibióticos.

Numa tentativa para ultrapassar os revezes referidos supra foram preparados alguns compostos antracenodiona modificados com cromóforos. Por exemplo, no pedido de patente de invenção europeia com o n° 103 381 estão descritos compostos antra[l,9-d]pirazol-6(2H)-ona substituídos com grupos 2-ammoalquil-5-aminoalquilamino (antrapirazóis) para os quais se afirma que possuem actividade antitumoral. A actividade antitumoral de tais compostos em inúmeros modelos pré-clínicos foi descrita por H.D. Hollis Showalter et al. (J. Med. Chem., 30, 121-131 (1987)). No entanto, os antrapirazóis não estão isentos de efeitos tóxicos

secundários, sendo a leucopenia grave (grau 3 e 4 da OMS) e a neutropenia grave (grau 4 da OMS) limitadoras da dose nas experiências clínicas de fase I e fase Π realizadas com o antrapirazol CI-941 (I-E- Smith et ai, J. Clin. Oncol. 9, 2141-2147, (1991)). Além disso, associada ao tratamento de ratos com o produto CI-941, há uma notável nefrotoxicidade (D. Campling e M.E.C. Robbins, Nephrotoxicity, Peter H. Dekker Bach editor, págs. 345-352, (1991), Nova Iorque); ver Chemical Abstract 116:294n, (1992)), tendos estes autores sugerido que a lesão renal pode constituir um problema clínico na terapia com antrapirazóis. Para além disso, estudos recentes [Drugs of the Future, 17, 725, (1992); Judson, I.R. et al, Proc. Amer. Assoe. Câncer Res., 32, abstr. 1059 (1991)] indicaram que o antrapirazol CI-941 induz cardio-toxicidade irreversível nos seres humanos, embora nunca tenham sido registados sintomas de insuficiência cardíaca ou fenómenos cardíacos agudos.

Assim sendo, continua a ser bastante desejável a pesquisa de novos análogos activos.

Descobrimos agora que a introdução de um ou dois átomos de azoto nas posições 7, 8, 9 ou 10 dos compostos antra( l,9-cd]pirazoI-6(2H)-ona supramencionados proporciona compostos heteroindazóis anelados e os correspondentes mono-N-óxidos, os quais são dotados de uma notável actividade antitumoral.

DESCRIÇÃO ABREVIADA DA INVENÇÃO

Os compostos da presente invenção possuem a fórmula estrutural (I)

A

O NH

(I) pelo menos um dos símbolos X, Y, Z e T representa uma funcionalidade azoto (=N) ou N-óxido [-N(0)~] e os outros representam grupos seleccionados entre o conjunto constituído por =CH-, =C(-0-P)- ou =N-, desde que sejam satisfeitas as condições seguintes: no máximo, um dos símbolos X, Y, Z e T pode representar um grupo =C(-0-P)- ou ~N(0)-; no máximo, dois dos símbolos X, Y, Z e T podem representar =N-; os símbolos X e T não podem representar um grupo =N(0)-; os símbolos Y e Z não podem representar um grupo =C(-0-P)-; os símbolos X e Z não podem representar simultaneamente =N-; os símbolos Y e T não podem representar simultaneamente =N-; o substituinte P é seleccionado entre o conjunto constituído por átomos de hidrogénio e grupos metilo, benzilo e 4-metoxibenzilo; os substituintes A e B são iguais ou diferentes e são seleccionados entre o conjunto constituído por grupos alquilo(Ci-Cio); grupos alquilo(C2-Cio) que possuem um ou dois substituintes seleccionados entre o conjunto constituído por grupos de fórmula geral ORi e -NR2R3; grupos alquilo(C2-C]0) interrompidos por um ou dois átomos de oxigénio ou por um grupo de fórmula geral -NR4-, sendo os referidos grupos alquilo(C2-Cio) facultativamente substituídos por um ou dois grupos hidroxi (OH) ou grupos de fórmula geral -NR2R3; 0 substituinte Ri é seleccionado entre 0 conjunto constituído por átomos de hidrogénio e grupos alquilo(CrC6) e alquiMÇVCe), facultativamente substituído com grupos -NR2R3, e grupos de fórmula geral -S(02)Rs; os substituintes R2 e R3 podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados entre o conjunto constituído por átomos de hidrogénio e grupos alquilo(Ci-Cio) e alquilo(C2-Cio), substituído com um ou dois grupos hidroxi (OH), ou então os substituintes R2 e R3, considerados em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados, formam um anel heterocíclico aromático ou não aromático, pentagonal ou hexagonal, o qual contém facultativamente outro heteroátomo seleccionado entre átomos de enxofre, oxigénio e azoto; o substituinte R4 é seleccionado entre o conjunto constituído por átomos de hidrogénio e grupos alquilo(Ci-Ci0), hidroxialquilo(C2-Cio) e alquilo(C2-Cio) substituído com grupos de fórmula geral -NR2R3; o substituinte R5 é seleccionado entre o conjunto constituído por grupos alquilo(Cr C10), fenilo e fenilalquilo, sob a forma de bases livres e dos seus sais obtidos com ácidos farmaceuticamente aceitáveis, desde que sejam satisfeitas as condições seguintes: - no caso de o símbolo Y representar um átomo de azoto, então os símbolos X, Z e T não representam simultaneamente um grupo =CH-; - no caso de o símbolo Z representar um átomo de azoto, então os símbolos X, Y e T não representam simultaneamente um grupo =CH-; - no caso de o símbolo Z representar um átomo de azoto, então os símbolos T e Y representam simultaneamente um grupo <Ή- e o símbolo X não representa um grupo =C(-OH)-. A presente invenção também diz respeito às formas tautoméricas e aos enantiómeros e aos diastereoisómeros individuais dos compostos de fórmula estrutural (I) e bem assim às suas misturas. A presente invenção também diz respeito aos sais não tóxicos dos compostos de fórmula estrutural (Γ), obtidos com ácidos aceitáveis para fins farmacêuticos e veterinários, 6 6

tais como os que são obtidos por adição de ácidos inorgânicos, por exemplo, os ácidos clorídrico, bromídrico, sulfíuico, fosfórico ou pirofosfórico, e/ou por adição de de ácidos orgânicos, por exemplo, os ácidos acético, propiónico, cítrico, benzóico, láctico, maleico, fumárico, succínico, tartárico, glutâmico, aspártico, glucónico, ascórbico e quejandos.

DESCRIÇÃO MINUCIOSA DA INVENÇÃO

Nos compostos de fórmula estrutural (I) o termo “fenilo” designa os anéis fenilo que podem conter facultativamente substituintes seleccionados entre átomos de halogénio e grupos alquilo(Ci-C4), CF3, nitro, amino, acetilamino, formilamino, dimetílamino, dietilamino, hidroxi, metoxi e etoxi.

Como exemplos preferíveis de grupos a!quilo(Ci-Cio) refere-se os seleccionados entre metilo, etilo, n-propilo, sec-propilo, n-butilo, sec-butilo, terc-butilo, n-pentilo e n-hexilo.

Como exemplos preferíveis de grupos alquilfenilo refere-se o 4-metilfenilo. Nos compostos de fórmula estrutural (I), no caso de os símbolos A e B representarem um grupo alquilo(C2-Cio) interrompido por um ou dois átomos de oxigénio ou por um grupo -NR4- e facultativamente substituído com um ou dois grupos hidroxi ou -NR2R3, então há pelo menos dois átomos de carbono interpostos preferencialmente entre os referidos átomos de oxigénio e/ou os grupos -N-R4 e -NR2R3.

Nos compostos de fórmula estrutural (I), no caso de 0 substituinte -NR2R3 ser um anel heterocíclico pentagonal ou hexagonal, aromático ou não aromático, que pode conter outro heteroátomo seleccionado entre átomos de enxofre, oxigénio e azoto, então como exemplos preferíveis de tais anéis heterocíclicos refere-se os grupos l-imidazolilo, 4-hidroxi-l-imidazolilo, 2-imino-l(3H)-imidazolilo, 1-pirrolilo, 1-tetra-hidro-pirrolilo, 1-pirazolilo, 4-morfolinilo, 1--piperidinilo, 1-piperazinilo, l-(4-metil)-piperazinilo e l-(4-benzil)-piperazinilo.

Os compostos preferidos da invenção são os que satisfazem à fórmula estrutural (I), em que os símbolos X, Y, Z e T possuem as significações definidas no quadro 1 seguinte. QUADRO 1

O NH

A X Y Z T COMPOSTOS DE FÓRMULA ESTRUTURAL I NCMEDO SLSTEMA HETEROCÍCUCO CH CH CH N ** 0 NH N-N. B quiiK)[87,6-od]indazoK2H)-ona N CH CH CH 0 NH N-N. B quino[5Á7-od|mdazol-6(2H><)na CH CH N(0) CH „A 0 NH N—% isoquiiK)[8J,6Kxi]iixta}I-6(2H)-ona-9-óxido CH N(0) CH CH ✓A 0 NH τφφ N-N- B iscxpiK<5,67<dliiK3azol^2H)H)m^Háxi<i) CH N CH QOH) .A 0 NH OH N-N B 104iidroxi-isoquiiK)[5.67-<xíJuKfcizol-6(2H>ona 8

QUADRO 1 (continuação) X Y Z T COMPOSTOS DE FORMULA ESTRUTURAL I NOME DO SISTEMA HETEiROCÍCLICO N CH CH N Λ 0 NH Cif] N-N B quhoxa]ino[5,6,7-cd]inda2Dl-6(2H><jia CH N N CH 0 NH N-N. B flalazitK)[5,6,7KxQmda2ol^2H)-ona

Os compostos mais preferidos são aqueles que satisfazem à fórmula estrutural (1), em que os símbolos X, Y, Z e T possuem as significações definidas antes e os substituintes A e B são seleccionados independentemente entre o conjunto constituído por: • resíduos de fórmula geral ^CH2)p-NH2 em que o símbolo p representa um dos números inteiros 2 ou 3; • resíduos de fórmula geral ^CH2)p-NR2R3 em que o símbolo p possui as significações definidas antes e ambos os símbolos R2 e R3 representam grupos metilo, etilo ou 2-hidroxietilo; • resíduos de fórmula geral -(CH2)p-NR2R3 em que o símbolo p possui as significações definidas antes, o símbolo R2 representa um átomo de hidrogénio e o símbolo R3 representa um grupo metilo; • resíduos de fórmula geral -{CH2)p-NR2R3 em que o símbolo p possui as significações definidas antes e o radical -NR2R3 é um dos grupos 4-morflinilo, 1-piperidinilo, 1-piperazinilo ou 1-imidazolilo; • resíduos de fórmula geral -(CH2)p-OH em que o símbolo p possui as significações definidas antes; 9 • resíduos de fórmula geral -(CH2)p-NH-(CH2)q-OH em que os símbolos p e q representam independentemente um dos números inteiros 2 ou 3.

Como exemplos específicos dos compostos preferidos da presente invenção refere-se os agrupados no quadro 2, os quais possuem as designações químicas seguintes: (60) 2-metil-5-[[2-(dimetdamino)-etil]-amino]-10-hidroxi-isoquino[5>6,7-cd]indazol-6(2H)--ona; (61) 2-[2-aminoetil]-5-[[2-(dimetilamino)-etil]-amino]-10-hidroxi-isoquino[5,6,7-cd]indazol--6(2H)-ona; (62) 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-[[2-(dimetdamino)-etil]-amino]-10-Mdroxi-isoquino[5,6,7--cd]indazoI-6(2H)-ona; (63) 2-[2-aminoetil]-5-[(2-aminoetil)-amino]- 10-tódroxi-isoqumo[5,6,7-cdlindazol-6(2H)-ona; (64) 2-[2-aminoetil]-5-[[2-(dimetilamino)-etil]-amino]- I0-hidroxi-isoquino[5,6,7-cdjindazol--6(2H)-ona; (65) 2-metil-5-[[2-(dimetilamino)-etil]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]mdazol-6(2H)-ona-9-óxído; (66) 2-[2-aminoetil]-5-[[2-(dimetilamino)-etil]-aninol-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona--9-óxido; (67) 2-[2-(dimetilammo)-etil]-5-[[2-(dimetilamino)-etil]-amíno]-isoquino[8,7,6-cd]mdazol--6(2H)-ona-9-óxido; (68) 2-[2-aminoetil]-5-[(2-aminoetil)-amino]-ísoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona-9-óxido; (69) 2-[2-aminoetill-5-[[2-(dimetilamino)-eti]j-amino]-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona- -9-óxido; 10 (70) 2-met3l-5-|12-(dimetilamino)-etil]-aTnino]-isoqmno[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona-8-óxido; (71) 2-[2-aminoe1il]-5-[[2-(dimeíilamino)-etilJ-amino]-isoquino[5,6,7-cdJindazoí-6(2H)-ona--8-óxido; (72) 2-[2^dimetUamino)^td]-5-[[2-(dimetdamino)-etil]-amino]-isoquino[5,6,7-cd]indazol--6(2H)-ona-8-óxido; (73) 2-me1il-5-[[2^dimetilammo)-etil]-amino]-quino[8,7,6-cd]indazol-6(2 H)-ona; (74) 2-[2-aminc>etil]-5-[[2^dimetilammo)-etil]-amino]-quino[8,7,6-cd]indazol-6(2II)-ona; (75) 2-[2^dimetilamino)^tí]-5-[[2^dimetJainmo)-etil]-ammo]-quino[8,7,6-cd]inda2OÍ--6(2H)-ona; (76) 2-(2-aminoetil]-5-[(2-aminoetil)-amínoJ-quino[8,7,6-cd|indazol-6(2H)-ona; (77) 2-[2-aminoetn]-5-[[2^metilairiino)-etil]-animo]-quino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona; (78) 2-metiI-5-[[2-(dimetilamino)-etiIJ-amino[-quino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona; (79) 2-[2-aminoetfl]-5-[[2^dimetíamino)^td]-ammo]-quino[5,6,7-cd]inda2)ol-6(2H)-ona; (80) 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-[[2-(dimetilainino)-etil]-amino]-quino[5,6,7-cd]indazoI--6(2H)-ona; (81) 2-[2-aminoetí]-5-[(2-aminoetil)-amino]-qmno[5,6,7-cd]mdazol-6(2H)-ona; (82) 2-[2-aminoetd]-5-[[2^dimetdammo)-etil]-ammo]-quino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona; (83) 2-metí-5-[[2^dimetUaniino)^td]-ammo]-quinoxalino[5,6,7-cd]mdazol-6(2H)-ona; (84) 2-[2-aminoetilj-5-[[2-(dimetjlamino)-etil]-amino]-quinoxalmo[5,6,7-cd]indazol-6(2H)--ona; (85) 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-[|2-(dimetilamino)-etilJ-amino]-quinoxalino[5,6,7-cd]indazol- -6(2H)-ona;

(86) 2-[2-aminoetil]-5-[(2-ammoetil)-ammo]H5uinoxalino[5,6,7-cd]mdazol-6(2H)-ona; (87) 2-[2-aminoetil]-5-[[2^metnamino)-etil]-amino]-qumoxalino[5,6,7-cd]indazoI-6(2H)-ona; (88) 2-metil-5-[[2^dimetilamino)^til]-araino]-ítalazino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona; (89) 2-[2-aimnoetn]-5-[[2-(dimetilamino)-eti]]-amino]-fíalazino[5,6,7-cd]indazoI-6(2H)-ona; (90) 2-[2^dimetnamino)-etil]-5-[[2-(dimetilamino)-etil]-amino]-ftalazino[5,6,7-cd]indazol--6(2H)-ona; (91) 2-[2-ammoetd]-5-[(2-aminoetQ)-amino]-ftalazmo[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona. QUADRO 2

A

O NH

N° T Y Z X A B 60 C(OH) N CH CH CH2CH2N(CH3)2 ch3 61 C(OH) N CH CH CH2CH2N(CH3)2 ch2ch2nh2 62 C(OH) N CH CH CH2CH2N(CH3)2 CH2CH2N(CH3)2 63 C(OH) N CH CH ch2ch2nh2 ch2ch2nh2 64 C(OH) N CH CH CH2CH2N(CH3)2 ch2ch2nh2 65 CH CH N(0) CH CH2CH2N(CH3)2 ch3 66 CH CH N(0) CH CH2CH2N(CH3)2 ch2ch2nh2 67 CH CH N(0) CH CH2CH2N(CH3)2 CH2CH2N(CH3)2 68 CH CH N(O) CH ch2ch2nh2 ch2ch2nh2 69 CH CH N(0) CH CH2CH2N(CH3)2 ch2ch2nh2 70 CH N(0) CH CH CH2CH2N(CH3)2 ch3 71 CH N(0) CH CH CH2CH2N(CH3)2 ch2ch2nh2 72 CH N(0) CH CH CH2CH2N(CH3)2 CH2CH2N(CH3)2 12 QUADRO 2 (continuação) N° T Y Z X A B 73 N CH CH CH CH2CH2N(CH3)2 ch3 74 N CH CH CH CH2CH2N(CH3)2 ch2ch2nh2 75 N CH CH CH CH2CH2N(CH3)2 CH2CH2N(CH3)2 76 N CH CH CH ch2ch2nh2 ch2ch2nh2 77 N CH CH CH ch2ch2nhch3 ch2ch2nh2 78 CH CH CH N CH2CH2N(CH3)2 ch3 79 CH CH CH N CH2CH2N(CH3)2 ch2ch2nh2 80 CH CH CH N CH2CH2N(CH3)2 CH2CH2N(CH3)2 81 CH CH CH N CH2CH2NH2 ch2ch2nh2 82 CH CH CH N CH2CH2N(CH3)2 ch2ch2nh2 83 N CH CH N CH2CH2N(CH3)2 ch3 84 N CH CH N CH2CH2N(CH3)2 ch2ch2nh2 85 N CH CH N CH2CH2N(CH3)2 CH2CH2N(CH3)2 86 N CH CH N CH2CH2NH2 ch2ch2nh2 87 N CH CH N CH2CH2NHCH3 ch2ch2nh2 88 CH N N CH CH2CH2N(CH3)2 ch3 89 CH N N CH CH2CH2N(CH3)2 ch2ch2nh2 90 CH N N CH CH2CH2N(CH3)2 CH2CH2N(CH3)2 91 CH N N CH CH2CH2NH2 ch2ch2nh2

De acordo com uma primeira variante da presente invenção, os compostos de fórmula estrutural (I) podem ser preparados pelo processo ilustrado no esquema 1, o qual implica a reacção (reacção a) de um composto de fórmula estrutural (ΠΙ):

O W 13 em que os símbolos X, Y, Z e T possuem as significações definidas antes, o substituinte U é seleccionado entre o conjunto constituído por átomos de flúor e cloro e grupos OTs (designando o termo OTs o grupo p-tolueno-sulfoniloxi) e o símbolo W representa um átomo de cloro ou de flúor, desde que os símbolos U e W não representem simultaneamente um átomo de cloro, com uma hidrazina de fórmula estrutural (IV): H2N-NH-B’ (IV) em que o símbolo B’ possui as mesmas significações atribuídas ao símbolo B na fórmula estrutural (I), ou então o símbolo B’ representa um grupo que pode ser convertido num grupo B por remoção dos grupos protectores das aminas primárias ou secundárias e dos grupos hidroxi facultativamente presentes em B’, para se obter um composto de fórmula estrutural (Π):

9 o qual se faz depois reagir (reacção b) com um composto de fórmula estrutural (V): H2N-A’ (V) em que o símbolo A’ possui as mesmas significações atribuídas ao símbolo A na fórmula estrutural (I), ou então o símbolo A’ representa um grupo que pode ser convertido num grupo A por remoção dos grupos protectores das aminas primárias ou secundárias ou dos grupos hidroxi facultativamente presentes em A’, para se obter os compostos de fórmula estrutural (Γ):

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No caso de os substituintes A’ e/ou B’ serem diferentes de A e/ou B, então os compostos de fórmula estrutural (Γ) são convertidos em compostos de fórmula estrutural I por remoção dos grupos protectores das aminas primárias ou secundárias ou dos grupos hidroxi facultativamente presentes em A’ e/ou B\

Os compostos de fórmula estrutural (I), em que um dos símbolos X, Y, Z ou T representa um grupo C(0-P) e em que o símbolo P representa um grupo metilo, benzilo ou 4--metoxibenzilo, podem ser convertidos em compostos de fórmula estrutural (I), em que o símbolo P representa um átomo de hidrogénio, por remoção dos grupos metilo, benzilo ou 4--metoxibenzilo.

De acordo com outra variante da presente invenção, os compostos de fórmula estrutural (I) podem ser obtidos peto processo de fases múltiplas ilustrado no esquema 2, o qual consiste em fazer reagir (reacção c) um composto de fórmula estrutural (DF):

em que os símbolos X, Y, Z e T possuem as significações definidas antes, com uma amina de fórmula estrutural (V) para se obter um composto de fórmula estrutural (VI) /A'

(VI) o qual se faz depois reagir (reacção d) com uma hidrazina de fórmula estrutural (IV) para se obter os compostos de fórmula estrutural (F) que são então facultativamente desprotegidos, conforme indicado supra, para se obter os compostos de fórmula estrutural (I). /

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Como exemplos de grupos de protecção para as axnmas primárias e/ou secundárias, facultativamente presentes nos grupos representados por A’ e/ou B’, vantajosamente utilizáveis para a preparação de compostos de fórmula estrutural (1), refere-se os seleccionados entre derivados acilo(Q-C3) (de preferência derivados acetilo), derivados alcoxi(Ci-C4)-carbonilo (de preferência derivados terc-butoxicarbonilo) e derivados aralquiloxi(C7-Cio)-carbonilo (de preferência derivados benziloxicarbonilo).

De acordo com uma variante preferível da presente invenção, prepara-se os compostos de fórmula estrutural I, em que o símbolo X representa CH ou COP, um dos símbolos Z ou Y representa N ou N(0) e o outro representa CH e o símbolo T representa CH, fazendo reagir um composto de fórmula estrutural Dl”:

(ΙΙΓ-) o w em que o símbolo R representa um átomo de hidrogénio ou um grupo H-P e os símbolos P e W possuem as significações definidas antes, com uma hidrazina de fórmula estrutural (TV) para se obter um composto de fórmula estrutural (1Γ).

N-N\ (ΙΓ) B'

Faz-se então reagir os compostos de fórmula estrutural (1Γ) com um composto de fórmula estrutural (V) para se obter um composto de fórmula estrutural (I’), sendo este passo seguido pela remoção dos grupos protectores das aminas primárias e secundárias ou dos grupos hidroxi, 16 facultativamente presentes nos grupos representados por A’ e/ou B\ para se obter um composto de fórmula estrutural (I), em que o símbolo X representa CH ou COP, um dos símbolos Z ou Y representa N ou N(0) e o outro representa CH e o símbolo T representa CH.

De acordo com outra variante preferível da presente invenção, os compostos de fórmula estrutural (T), em que os símbolos Xe Z representam CH, o símbolo Y representa N ou N(0) e o símbolo T representa CH ou COP, são preparados preferivelmente fazendo reagir um composto de fórmula estrutural (ΠΓ”):

R O F (ΙΙΓ") em que o símbolo R representa um átomo de hidrogénio ou um grupo O-P e o símbolo P possui as significações definidas antes, com uma hidrazina de fórmula estrutural (IV) para se obter um composto de fórmula estrutural (Π”):

(ΙΓ)

Faz-se então reagir os compostos de fórmula estrutural (II”) com um composto de fórmula estrutural (V) para se obter um composto de fórmula estrutural (I’), sendo este passo seguido pela remoção dos grupos protectores das aminas primárias e secundárias ou dos grupos hidroxi, facultativamente presentes nos grupos representados por A’ e/ou B’, para se obter um composto de fórmula estrutural (Γ), em que os símbolos X e Z representam CH, o símbolo Y representa N ou N(0) e o símbolo T representa CH ou COP. 1

A reacção dos compostos de fórmula estrutural (ΠΙ) com as hidrazinas de fórmula estrutural (TV) pode ser efectuada por aquecimento dos compostos de fórmula estrutural (ΠΙ) com uma quantidade estequiométrica de hidrazinas (IV) ou com um excesso de hidrazinas (TV). Efectua-se a reacção normalmente num solvente inerte, tal como cloreto de metileno, clorofórmio, 1,1,1-tricloroetano, dimetoxietano, tetra-hidrofurano, dimetilsulfóxido, dimetil-formamida, piridina, picolina e suas misturas, ou então, se desejado, utilizando o próprio composto de fórmula estrutural (TV) como solvente, facultativamente na presença de uma base inorgânica, tal como um carbonato ou um hidrogeno-carbonato de um metal alcalino ou de um metal alcalino-terroso, ou de uma base orgânica, tal como uma trialquilamina, a uma temperatura compreendida entre -20°C e a temperatura de refluxo do solvente.

De preferência, efectua-se a reacção num solvente, por exemplo, seleccionado entre piridina, tetra-hidrofurano, dimetilsulfóxido ou Ν,Ν,Ν’,Ν’-tetrametiletilenodiamina, utilizando entre 2 e 10 equivalentes de composto de fórmula estrutural (TV) por cada 1 equivalente de composto de fórmula estrutural (ΓΠ) e trabalhando a uma temperatura compreendida entre 5°C e 50°C.

De acordo com uma variante particular da presente invenção, no caso de se fazer reagir um composto de fórmula estrutural (ΠΓ ’) com uma hidrazina de fórmula estrutural (TV), então efectua-se a reacção de preferência com uma proporção molar entre os compostos (ΙΠ”) e (IV) compreendida entre 1:1,05 e 1:1,25 e utilizando tetra-hidrofurano como solvente, a uma temperatura compreendida entre a temperatura ambiente e 50°C. A reacção dos compostos de fórmula estrutural (Π) com os compostos de fórmula estrutural (V) pode ser efectuada por aquecimento dos compostos de fórmula estrutural (Π) com uma quantidade estequiométrica de amina (V) ou com um excesso de amina (V). Efectua-se normalmente a reacção num solvente inerte, por exemplo, seleccionado entre cloreto de 18

metileno, clorofórmio, 1,1,1-tricloroetano, dimetoxietano, tetra-hidrofurano, dimetilsulfóxido, dimetilformamida, piridina, picolina e suas misturas, ou então, se desejado, utilizando o próprio composto de fórmula estrutural (V) como solvente, facultativamente na presença de uma base inorgânica, tal como um carbonato ou um hidrogeno-carbonato de um metal alcalino ou de um metal alcalino-terroso, ou de uma base orgânica, tal como uma trialquilamina, a uma temperatura compreendida entre 0°C e a temperatura de refluxo do solvente.

De preferência, efectua-se a reacção num solvente, tal como a piridina, o clorofórmio ou o dimetilsulfóxido, utilizando entre 2 e 10 equivalentes de compostos de fórmula estrutural (V) por cada 1 equivalente de composto de fórmula estrutural (Π) e trabalhando a uma temperatura compreendida entre a temperatura ambiente e 100°C. A reacção de um composto de fórmula estrutural (ΠΓ) com uma amina de fórmula estrutural (V) para se obter um composto de fórmula estrutural (VI) é efectuada utilizando uma quantidade estequiométrica ou um ligeiro excesso molar do composto de fórmula estrutural (V). Efectua-se normalmente a reacção num solvente inerte, por exemplo, seleccionado entre cloreto de metileno, clorofórmio, 1,1,1-tricloroetano, dimetoxietano, tetra-hidrofurano, dimetilsulfóxido, dimetilformamida, piridina, picolina e suas misturas, facultativamente na presença de uma base inorgânica, tal como um carbonato ou um hidrogeno-carbonato de um metal alcalino ou de um metal alcalino-terroso, ou de uma base orgânica, tal como uma trialquilamina, a uma temperatura compreendida entre 0°C e a temperatura de refluxo do solvente.

De preferência, efectua-se a reacção num solvente, tal como a piridina, o clorofórmio ou o dimetilsulfóxido, e à temperatura ambiente. A reacção dos compostos de fórmula estrutural (VI) com as hidrazinas (TV) é efectuada de um modo idêntico ao descrito para a reacção dos compostos de fórmula estrutural (III) com as mesmas hidrazinas (IV). 19

Nos compostos de fórmula estrutural (F), no caso de os substituintes A’ e/ou B’ serem diferentes de A e/ou B, a remoção do grupo protector das funções amina primárias e/ou secundárias é realizada em conformidade com os procedimentos bem conhecidos pelos especialistas na matéria. É possível encontrar preceitos úteis na obra de Green, T.W., Wuts, P.G.M., “Protective Groups in Organic Synthesis”, segunda edição, John Wiley & Sons, 1991.

Por exemplo, é possível remover o grupo de protecção N-(terc-butoxicarbonilo) por tratamento de um composto de fórmula estrutural (F) com um excesso de ácido clorídrico anidro num solvente, tal como um alcanol(Ci-C4), o diclorometano, o clorofórmio ou suas misturas, a uma temperatura compreendida entre 0°C e a temperatura de refluxo do solvente e durante um período compreendido entre vários minutos e algumas horas. De preferência, efectua-se a reacção em etanol ou em clorofórmio, utilizando entre 10 e 20 equivalentes molares de ácido clorídrico anidro, a uma temperatura compreendida entre 20°C e 50°C, ficando gerahnente completa ao fim de 4 horas. A remoção dos grupos de protecção benzilo e p-metoxibenzilo para a funcionalidade fenólica, facultativamente presente nos compostos de fórmula estrutural (I’), é efectuada geralmente por hidrogenação catalítica (grupo de protecção benzilo) ou por tratamento com ácidos orgânicos ou inorgânicos (grupo de protecção p-metoxibenzilo).

Os compostos de fórmula estrutural (ΠΙ), em que um dos símbolos Y ou Z representa a funcionalidade N-óxido (N(0)), são preparados por oxidação de um composto de fórmula estrutural (VII):

O W 20

em que um dos símbolos Y’ ou Z’ representa um átomo de azoto e o outro possui as significações definidas para os símbolos Y e Z na fórmula estrutural (I), exceptuando N(0), com agentes oxidantes, tais como perácidos, peróxidos e seus sais.

De um modo geral, a oxidação dos compostos de fórmula estrutural (VII) é efectuada utilizando uma quantidade estequiométrica ou um ligeiro excesso molar de um agente oxidante num solvente, por exemplo, seleccionado entre clorofórmio, cloreto de metileno, 1,2-dicloro-etano e ácido acético, facultativamente na presença de um carbonato ou um bicarbonato de um metal alcalino ou de um metal alcalino-terroso, a uma temperatura compreendida entre 0°C e a temperatura de refluxo do solvente e durante um período compreendido entre algumas horas e alguns dias, dependendo das condições experimentais.

Como exemplos de agentes oxidantes que podem ser utilizados eficazmente na oxidação dos compostos de fórmula estrutural (VII) para se obter os correspondentes N-óxidos refere-se os seleccionados entre peróxido de hidrogénio; perácidos, tais como ácido peracético, ácido tri-fluoroperacético, ácido pefbenzóico ou ácido m-cloroperbenzóico; ácido monoperoxiftálico ou o seu sal de magnésio; e ácido persuccínico. De preferência, efectua-se a reacção utilizando um perácido orgânico, tal como o ácido m-cloroperbenzóico, num solvente, tal como o cloreto de metileno.

Os compostos de fórmula estrutural (VTÍ), em que os símbolos X, Y\ Z’ e T possuem as significações definidas antes e os símbolos U e W representam átomos de flúor, designadamente os compostos de fórmula estrutural (VII’):

2

podem ser preparados por um procedimento multifásico, ilustrado no esquema 3, o qual consiste em: - submeter o composto 1,4-difluorobenzeno a uma acilação de Friedel e Crafts com um composto de fórmula estrutural (VH[) (passo e):

O (VIU) em que os símbolos X, Y’, Z’ e T possuem as significações definidas antes, na presença de AICI3 (110°C, 22 horas), dando origem aos ceto-ácidos regioisoméricos de fórmulas estruturais (IXa) e (IXb); em alternativa, os ceto-ácidos regioisoméricos de fórmulas estruturais (IXa) e (IXb) podem ser obtidos fazendo reagir os compostos de fórmula estrutural (VIII) com 1-lítio--2,5-difluorobenzeno (passo f), composto este que é preparado por reacção de 1,4-difluoro--benzeno com um reagente de alquil-Iítio tal como, por exemplo, 0 sec-butil-lítio, em THF e à temperatura ambiente; - efectuar a ciclização da mistura de ceto-ácidos regioisoméricos de fórmulas estruturais (IXa) e (IXb) com ‘óleum’ a 20%, a uma temperatura compreendida entre 130°C e 140°C (passo g), para se obter o composto de fórmula estrutural (VII) em que os símbolos UeW representam átomos de flúor (compostos de fórmula estrutural (VII’)).

Os compostos de fórmula estrutural (VII), em que 0 símbolo X representa um grupo C(R), o símbolo T representa CH, os símbolos Y’, Z’,WeRpossuem as significações definidas antes e o símbolo U representa um grupo OTs, designadamente os compostos de fórmula estrutural (VET): 22

podem ser preparados por um procedimento multifásico, ilustrado no esquema 4, o qual compreende os passos seguintes: - reacção dos cetoácidos de fórmulas estruturais (EXa) e (IXb), obtidos em conformidade com o esquema 3 e em que o símbolo X representa um grupo C(R), o símbolo T representa um grupo CH e os símbolos Y’, Z’eW possuem as significações definidas antes, nomeadamente os compostos de fórmulas estruturais (TX’a) e (IX’b), com metóxido de sódio em metanol (8,5 horas, refluxo) para dar origem aos cetoácidos regioisoméricos, substituídos com metoxi, de fórmulas estruturais (Xa) e (Xb) (passo h); é possível fazer reagir tal qual os compostos de fórmulas estruturais (Xa) e (Xb), em que o símbolo R represente um átomo de hidrogénio, no passo subsequente; no caso de o símbolo R não representar um átomo de hidrogénio, então purifica-se o composto de fórmula estrutural (Xa) por cristalização e faz-se reagir como regioisómero puro; - redução dos compostos de fórmula estrutural (Xa) (em que o símbolo R não representa um átomo de hidrogénio) com um par Zn/Cu numa solução aquosa de ácido fórmico a 75% (15 minutos à temperatura ambiente e depois 2 horas a 80°C) para se obter o composto de fórmula estrutural (XI) (passo i); no caso de o símbolo R representar um átomo de hidrogénio, os ácidos de fórmulas estruturais (Xla) e (Xlb) podem ser separados por cromatografia, proporcionando os regioisómeros puros isolados de fórmulas estruturais (Xla) e (Xlb); - ciclização do ácido (XI) adequado por aquecimento de uma suspensão do composto em ácido polifosfórico, a uma temperatura compreendida entre 110°C e 120°C durante 2 horas, para se obter as benzo[g]isoquinolinas de fórmula estrutural (ΧΠ) (passo j); 23 23<Λ - oxidação dos compostos de fórmula estrutural (ΧΠ) para se obter as correspondentes dionas de fórmula estrutural (ΧΠΙ), utilizando nitrato de cério e amónio numa mistura de acetonitrilo e água (60°C, 2 horas) (passo k); - remoção do grupo metoxi da diona (ΧΠΓ), utilizando cloreto de alumínio em cloreto de metileno (2 horas à temperatura ambiente e depois 1,5 horas à temperatura de refluxo), para se obter os compostos de fórmula estrutural (XTV), os quais correspondem a uma mistura de 9--flúor-6-hidroxi-5,10-dianas e 9-cIoro-6-hidroxi-5,10-dionas (XIV) devido à substituição parcial do fluoreto removível por meio de AICI3 (passo 1); e - funcionalização final do grupo hidroxi livre do composto de fórmula estrutural (XTV), utilizando cloreto de p-tolueno-sulfonilo em piridina à temperatura ambiente, para se obter os compostos desejados de fórmula estrutural (VII) em que é Z = OTs [compostos de fórmula estrutural (VII”)] (passo m).

De acordo com uma variante preferencial da presente invenção, efectua-se a preparação de intermediários de fórmula estrutural (ΧΠΓ) recorrendo a um procedimento multifásico, ilustrado no esquema 5, o qual compreende as seguintes reacções: - ciclização da mistura dos ceto-ácidos regioisoméricos de fórmulas estruturais (IXa) e (IXb) com ‘óleum’ a 20%, a uma temperatura compreendida entre 130°C e 140°C, para se obter as 6,9-difluorobenzo[g]isoquinolinas de fórmula estrutural (XV) (passo n); - reacção do composto de fórmula estrutural (XV) com um equivalente de metilato de sódio num solvente, tal como o metanol, para se obter uma mistura de intermediários de fórmula estrutural (ΧΙΠ), a qual é separada nos compostos puros individuais de fórmulas estruturais (XlIIa) e (XHIb) por recristalização a partir de um solvente e/ou por cromatografia em coluna (passo o). 24

Os compostos de fórmula estrutural (VII), em que os símbolos X, Y\ Z’eT possuem as significações definidas antes e um dos símbolos U ou W representa um átomo de flúor e o outro representa um átomo de cloro, nomeadamente os compostos de fórmula estrutural (ΥΠ” ’):

podem ser preparados por um procedimento multifásico, ilustrado no esquema 6, o qual compreende os passos que consistem em: - submeter o composto l-cloro-4-fluorobenzeno a uma acilação de Friedel e Craft (passo p) com um composto de fórmula estrutural (VIU) na presença de A1CI3 (110°C, 22 horas) para se obter os ceto-ácidos regioisoméricos de fórmulas estruturais (XVIa) e (XVIb), os quais podem ser utilizados tal qual no passo subsequente ou então podem ser separados nos regioisómeros puros por cristalização fraccional ou por sublimação; em alternativa, os ceto--áddos regioisoméricos de fórmulas estruturais (XVIa) e (XVIb) podem ser obtidos (passo q) por reacção dos compostos de fórmula estrutural (VIII) com 1 -lítio-2-flúor-5-clorobenzeno, composto este que é preparado fazendo reagir l-cloro-4-fluorobenzeno com um reagente de alquil-Iítio tal como, por exemplo, sec-butil-lítio, em THF a uma temperatura baixa; - efectuar a ciclização da mistura dos ceto-ácidos regioisoméricos de fórmulas estruturais (XVIa) e (XVIb) com ‘oleiam’ a 20%, a uma temperatura compreendida entre 130°C e 140°C, para se obter o composto de fórmula estrutural (VIT) em que um dos símbolos U ou W representa um átomo de flúor e o outro representa um átomo de cloro [compostos de fórmula estrutural (Vfl’”)] (passo r).

O processo preferido da presente invenção, o qual proporciona os compostos de fórmula estrutural (VII), em que o símbolo X representa um grupo C(R), os símbolos Y’eT representam grupos CH, o símbolo Z’ representa um átomo de azoto, o símbolo U representa um átomo de flúor e o símbolo W representa um átomo de cloro, nomeadamente os compostos 9-cloro-6--fluorobenzo[g]isoqumolma-5,10-diona de fórmula estrutural (VII””):

(ΥΙΓ·") O Cl está ilustrado no esquema 7 e compreende as reacções seguintes: - Mação (passo s) de l-cloro-4-fluorobenzeno com um reagente de alquil-Iítio, tal como o sec-butil-lítio, em THF à temperatura de -75°C para se obter l-lítio-5-cloro-2-fluorobenzeno; - acilação (passo t) de l-lítio-5-cloro-2-fluorobenzeno, gerado in situ em conformidade com o passo anterior, com anidridos piridina-3,4-dicarboxílicos (VIU; X = C(R); Y\ T = CH; Z’ = N) para se obter uma mistura dos ceto-ácidos de fórmulas estruturais (XVIIa) e (XVIIb) que podem ser separados nos compostos individuais puros por recristalização a partir de um solvente ou então por sublimação; - redução (passo u) do cetoácido puro de fórmula estrutural (XVIIa) com um par Zn/Cu ou com Zn em pó numa solução aquosa a 75% de ácido fórmico (15 minutos à temperatura ambiente e depois 2 horas à temperatura de 80°C), dando origem ao composto de fórmula estrutural (XVffl); - ciclização oxidativa (passo v) do composto de fórmula estrutural (XVIII) com ácido sulfurico fumante (S03 a 20%-30%, 10 minutos, 130°C) para se obter os compostos 9-cIoro--6-fluoro-benzo[g]isoquinolina-5,10-diona de fórmula estrutural (VII””).

Os intermediários de fórmula estrutural (VII), em que o símbolo X representa um grupo C(0-P), o símbolo Z’ representa N, os símbolos Y’ e T representam grupos CH, o símbolo U representa um átomo de flúor e o símbolo W representa um átomo de cloro, designadamente os compostos 4-substitmdo-6-flúor-9-clorobenzo[g]isoquinolina-5,10-diona de fórmula estrutural (VTT””):

(vir”) 9 são preparados preferencialmente por um processo multifásico, ilustrado no esquema 8, o qual compreende as reacções seguintes: - acilação de Friedel e Crafts do composto 1 -cloro-4-fluorobenzeno com anidrido maleico (passo x) para se obter ácido (E)-4-(2 ’-flúor-5 ’ -cIorofenil)-4-oxo-butenóico de fónnula estrutural (XIX); - esterificação do composto de fónnula estrutural (XIX) com metanol (passo y) para se obter o intermediário (E)-4-(2 ’ -flúor-5 ’ -clorofenil)-4-oxo-butenoato de metilo de fórmula estrutural (XX); - reacção de Diels-Alder do intermediário de fónnula estrutural (XX) com o conhecido ácido 5-etoxi-oxazol-2-carboxíIico de fórmula estrutural (XXI) (passo w) para se obter o composto S-Wdroxi^-^-flúor^-clorobenzofl^nicotinato de metilo de fórmula estrutural (ΧΧΠ); - saponifícação (passo z) do éster metílico do composto de fónnula estrutural (ΧΧΠ) para se obter o ácido 5-hidroxi-4-(2-flúor-5,-clorobenzoíl)-nicotíiiico de fórmula estrutural (ΧΧΙΠ);

- redução (passo aa) do cetoácido puro de fórmula estrutural (XXIH) com o par Zn/Cu ou com Zn em pó numa solução aquosa a 75% de ácido fórmico para se obter o ácido 5--Mdroxi-4-(2-flúor-5’-clorobenzil)-nicotínico de fórmula estrutural (XXTV); - ciclização oxidativa (passo áb) do composto de fórmula estrutural (XXTV) com ácido sulfurico fumante para se obter o composto 4-hidroxi-9-cloro-6-fluorobenzo[g]isoquinolina--5,10-diona de fórmula estrutural (XXV); - protecção do grupo 4-hidroxi dos compostos de fórmula estrutural (XXV), sob a forma de éter metílico, éter benzílico ou de preferência éter p-metoxibenzílico, por reacção respectivamente com diazometano, fenildiazometano ou 0-(p-metoxÍbenzfl)-N,N’-diisopropil--ureia (passo ac) para se obter os compostos de fórmula estrutural (VIF””).

Os compostos de fórmula estrutural Vin podem ser preparados a partir de compostos de fórmula estrutural (XXVI):

(XXVI) em que os símbolos X, Y’, Z’ e T possuem as significações definidas na fórmula estrutural (Vm), por reacção com um agente de desidratação adequado, por exemplo, seleccionado entre os anidridos de ácidos carboxílicos (v.g. anidrido acético ou trifluoroacético), carbodiimidas, tais como a Ν,Ν’-diciclo-hexilcarbodiimida, e semelhantes.

Em condições de reacção preferíveis utilizar-se-á anidrido acético a uma temperatura compreendida entre 80°C e a temperatura de refluxo do solvente ou então N,N’-diciclo-hexil-carbodiimida num solvente aprótico.

Os compostos de fórmula estrutural XXTV são conhecidos ou então encontram-se comercialmente disponíveis. 28

ACTrVTDADE BIOLÓGICA DOS COMPOSTOS DA PRESENTE INVENÇÃO A avaliação da actividade biológica dos compostos da presente invenção foi efectuada in vitro e in vivo, em confoimidade com os protocolos desenvolvidos pelo “U.S. National Câncer Institute”.

Efectuou-se a avaliação da actividade citotóxica dos compostos da presente invenção, in vitro, utilizando uma linhagem ou variedade celular do adenocarcinoma do cólon humano (Lo Vo), isolado a partir de um nódulo metastático, e uma subvariedade que exprime resistência a multifáimacos. A subvariedade é resistente a inúmeros agentes antitumorais, entre os quais se encontram a doxorrubicina, a substância VP-16 e a vincristina. Esta subvariedade (designada por Lo Vo/DX) revela uma reduzida acumulação de doxonubicina e sobreexpressão de uma proteína (Grandi, M., Feroni, C., Giuliani, F.C., British J. Câncer, (1986), 54, 515). Os compostos foram testados em conformidade com o ensaio MTT (Mosman, T., “Rapid Colorimetric assay for cellular growth and survival: apphcation to proliferation and cytotoxicity assay”, J. hnmunol. Methods, (1983), 65,55-63; Green, L.M., “Rapid Colorimetric assay for cell viability; application to the quantitation of cytotoxic and growth inhibitory lymphokines”, J. hnmunol. Metiiods, (1984), 70,257-268), em comparação com a mitoxantrona e a doxorrubicina.

De um modo geral, os compostos representativos da presente invenção revelaram ser mais citotóxicos do que a doxorrubicina e tão citotóxicos quanto a mitoxantrona na linhagem celular Lo Vo. Quando se testou a mitoxantrona na linhagem celular Lo Vo/DX, determinou-se um índice de resistência IR (definido como a razão entre o valor CI50 da linhagem celular resistente e o valor (¾ da linhagem celular sensível) da ordem de 22,5, demonstrando isso que esta subvariedade possui mesmo uma resistência adquirida à mitoxantrona. Por outro lado, alguns compostos da invenção, quando testados na mesma subvariedade resistente, não

demonstraram nenhuma resistência adquirida à mitoxantrona. A avaliação dos compostos representativos da presente invenção, efectuada in vitro, sugere que os compostos representativos da presente invenção podem ser úteis para ultrapassar o mecanismo, mediado pela resistência a fármacos múltiplos, da resistência aos tumores.

Fora efectuados estudos sobre a actividade biológica, in vivo, dos compostos representativos da invenção, utilizando o modelo da leucemia P388 dos murinos. Injectou-se por via intravenosa (iv) células de leucemia P388 dos murinos em murganhos da estirpe CD2F1. O tratamento teve início decorridas aproximadamente 24 horas após o transplante do tumor, tendo as doses do fánnaco sido administradas por via iv (P388 iv/iv) em conformidade com protocolos preestabelecidos, normalmente a intervalos de 3 dias (P388 iv/iv). Os estudos foram realizados ao longo de um período de 60 dias, tendo sido registada a data da morte de cada animal. Determinou-se o valor percentual T/C utilizando o tempo médio de sobrevivência (TMS) para cada grupo, em conformidade com a expressão: T/C (%) = [(TMS dos animais tratados)/(TMS dos animais de contraprova)] x 100%

Os compostos representativos da presente invenção foram capazes de aumentar o tempo de sobrevivência dos animais tratados sigoificativamente mais do que a mitoxantrona, dando origem a valores T/C (%) mais elevados para dosagens bem toleradas. Além disso, os compostos representativos da invenção demonstraram que possuem actividade antileucémica para um amplo intervalo de dosagens bem toleradas e em particular foram activos para dosagens inferiores à sua dose máxima tolerada, significando isso que possuem um índice terapêutico mais favorável em comparação com a mitoxantrona.

Uma vez que os compostos representativos da presente invenção demonstram bons resultados contra este significativo modelo in vivo de leucemia P388 dos murinos, facto este que 30 permite prever uma actividade antitumoral nos seres humanos, admite-se que os compostos aqui descritos sejam funcionais contra leucemias humanas e contra tumores sólidos sensíveis ao tratamento com antibióticos antitumorais.

Assim sendo, os compostos da presente invenção podem ser utilizados como ingredientes activos de composições terapêuticas que induzem a regressão e/ou a paliação de cancros em mamíferos quando administradas em quantidades compreendidas entre cerca de 1 mg e cerca de 0,4 g por quilograma de massa corporal. Um regime de dosagem preferível poderia estar compreendido entre cerca de 1 mg e cerca de 50 mg por quilograma de massa corporal por dia. É possível utilizar doses unitárias por forma a que sejam administrados entre cerca de 70 mg e cerca de 3,5 g do composto activo a um paciente com aproximadamente 70 kg de massa corporal, num período de 24 horas. É possível ajustar o regime de dosagem de forma a ser compatível com outros regimes de tratamento, tal como a terapia por radiação.

Quadro 3

Actividade antitumoral de compostos exemplificativos que não fazem parte da invenção reivindicada P 388 Lv./i.v. + 1, 4,7 Estrutura N° do composto CI50 ± DP. Dose T/C% Tox. (ver o quadro 2) (mg/mL) (mg/kg) 1 15 (a) LoVo 0,35 ±0,17 3 329 338 0/16 o nh ^ 4 381 0/8 ^ A /L LoVo/Dx 1+0,53 6 212 219 15/16 Γ ij Jj ] 12 135 8/8 Ννγγ I R. 2,8 N- 1 x-v^NH, O NH 13 (a) LoVo 0,16 + 0,09 1,3 175 0/8 2 213 0/8 LoVo/Dx 4,3 ±1,4 3 171 238 0/16 6 124 8/8 N_1 1 I.R. 27 12 100 8/8 31

Quadro 3 (continuação)

Actividade antitumoral de compostos exemplificativos que não fazem parte da invenção reivindicada P388 i.v./i.v. +1, 4,7 Estrutura N° do composto CIjo±D.P. Dose T/C % Tox. (ver o quadro 2) (mg/mL) (mg/kg) 45 (a) LoVo 0,4 3 150 0/8 4 175 0/8 0/8 O Mi LoVo/Dx 0,7 6 194 1.R 1,7 N 1 46 (a) LoVo 1,9 6 150 0/8 12 188 0/8 O NH LoVo/Dx 2,7 24 256 256 0/16 36 306 2/8 I.R. 1,4 54 119 7/8 N 1 1 25 (b) LoVo 0,3 ±0,17 3 141 0/8 ------- 4 169 0/8 LoVo/Dx 15,9 ±8 6 182 188 0/16 í I 1 ] 9 231 0/8 I.R 53 12 176 8/8 N- ^^nh2 ^nh2 23 (b) LoVo 0,86 ±0,06 3 150 0/8 O NH 6 181 181 0/16 ^:SNií^ T LoVo/Dx 15,4 ±8,9 7,5 194 0/8 *^yy 10 231 8/8 N^"N—nh2 I.R 18 12 181 8/8 1 5 (a) LoVo 0,5 3 138 0/8 O NH 6 156 0/8 rAiSrS LoVo/Dx 33,1 12 200 0/8 N- I I.R 66,2 1 H

Quadro 3 (continuação)

(a) sal dimaleato (b) sal txicloridrato P 388 i.v/i.v 1,4,7 Composto Dose T/C% Tox. Composto Dose T/C% Tox. (mg/kg) (mg/kg) Mitoxantrona 2 176 0/130 Doxorrubicina 4,6 162 0/8 3 197 14/188 6 176 0/39 4 147 45/56 7,5 201 0/72 9 201 8/40

33 A composição farmacêutica pode assumir a forma de comprimidos, cápsulas, cápsulas de gel, supositórios, pós liofilizados e soluções para administração intravenosa. A presente invenção é ilustrada pelos exemplos não limitativos seguintes e suas variações que são evidentes para os especialistas na matéria.

SÍNTESE DE COMPOSTOS DA INVENÇÃO

Exemplo 1 preparativo

Anidrido do ácido piridina-3,4-dicarboxílico

Prepara-se uma mistura de 15,0 g de ácido piridina-3,4-dicarboxílico e 30 mL de anidrido acético e mantém-se ao refluxo durante 2 horas. Remove-se o excesso de anidrido acético por destilação, recolhe-se o anidrido e purifica-se por sublimação (123°C a 3 mmHg) para se obter 10,1 g do anidrido do ácido piridina-3,4-dicarboxílico com o aspecto de um sólido branco. P.f.: 74°C-76°C. RMN-Ή (CDC13): 7,94 (d, 1H); 9,24 (d, 1H); 9,39 (s, 1H).

Exemplo 2 preparativo

De acordo com o procedimento descrito no exemplo 1 preparativo e utilizando como materiais de partida ácido piridina-2,3-dicarboxílico ou ácido pirazina-2,3-dicarboxílico, comercialmente disponíveis, prepara-se os compostos a seguir indicados: anidrido do ácido piridina-2,3-dicarboxílico, p.f. 134°C-136°C; anidrido do ácido pirazina-2,3-dicarboxílico, p.f. 190°C (dec.).

Exemplo 3 preparativo Ácido 4-(2,5-difluorobenzoíl)-nicotmico e ácido 3-(2,5-difhiorobenzoíI)-isonicotínico

Prepara-se uma mistura de 5,0 g de anidrido do ácido piridina-3,4-dicarboxílico e 17,5 g de cloreto de alumínio em 65 mL de 1,4-difIuorobenzeno e aquece-se em banho de óleo à temperatura de 110°C durante 22 horas. Recupera-se o excesso de 1,4-difluorobenzeno por destilação. Arrefece-se o resíduo em banho de gelo e extingue-se com 75 mL de gelo fundente e com 6,3 mL de ácido clorídrico concentrado. Filtra-se o sólido precipitado e seca-se para se obter 7,7 g de uma mistura aproximadamente a 4/1 de ácido 4-(2,5-difluorobenzoíl)-nicotínico e ácido 3-(2,5-difluorobenzoíl)-isonicotmico respectivamente, com o aspecto de um pó branco, que pode ser recristalizada a partir de acetonitrilo e água. P.f.: 214°C-217°C. RMN-!H (DMSO-dô): 7,4 (m); 7,5 (m); 7,90 (m); 8,80 (d); 8,90 (d); 9,15 (s). A recristalização de 15,97 g deste material a partir de 360 mL de etanol absoluto proporciona 1,146 g de ácido 3-(2,5-difluorobenzoíl)-isonicotímco praticamente puro.

Exemplo 4 preparativo

De acordo com o procedimento descrito no exemplo 3 preparativo e utilizando como materiais de partida os compostos obtidos no exemplo 2 preparativo, prepara-se os compostos a seguir indicados: mistura de ácido 3-(2,,5’-difluorobenzoíl)-piridina-2-carboxílico e ácido 2-(2’,5’-difluorobenzoíl)--nicotínico; ácido 2-(2’,5’-difluorobenzoíl)-pirazina-3-carboxílico, p.f. 151°C-153°C.

Exemplo 5 preparativo Ácido 4-(2’,5 ’-difluorobenzofl)-piridazina-5-carboxílico

Com o auxílio de uma seringa, adiciona-se gota a gota uma quantidade 1,25 mL de sec--butil-lítio (1,32 M em dclo-hexano), durante 0,25 horas, a uma solução agitada constituída por 0,162 g de 1,4-difluorobenzeno em 5 mL de tetra-hidroíurano (THF) à temperatura de -84°C e sob uma atmosfera de azoto. Agita-se a mistura amarela durante mais 45 minutos à temperatura de -80°C e depois ao longo de 5 minutos adiciona-se com uma cânula a uma solução agitada de 0,22 g de anidrido do ácido piridazma-4,5-dicarboxílico (preparado em conformidade com X Het. Chem. 14, 1099, (1977)) em THF à temperatura de -80°C e sob pressão de azoto. Aquece-se a mistura até à temperatura ambiente de um dia para o outro e neutraliza-se com cloreto de amónio. Após a remoção do THF sob pressão reduzida trata-se o sólido castanho--amarelado resultante com 10 mL de uma solução aquosa de bicarbonato de sódio e lava-se com 10 mL de éter dietílico. Acidifica-se a fase aquosa com uma solução aquosa de ácido clorídrico. Recolhe-se por filtração o precipitado, lava-se com água fria (3 x 10 mL) e seca-se para se obter 0,23 g de ácido 4-(2’,5’-difluorobenzoíl)-piridazina-5-carboxíhco com o aspecto de um sólido esbranquiçado, p.f. 202°C-205°C.

Exemplo 6 preparativo

De acordo com o procedimento descrito no exemplo 3 preparativo e utilizando l-cloro-4--fluorobenzeno como material de partida para a reacção de Friedel-Craft do anidrido do ácido piridina-2,3-dicarboxílico ou anidrido do ácido pira2ãna-2,3-dicarboxílico, prepara-se os compostos a seguir indicados: mistura de ácido 3-(2’-flúor-5’-clorobenzoíl)-piridina-2-carboxílico e ácido 2-(2?-flúor-5’--clorobenzoíl)-nicotínico;

ácido 2-(2’-flúor-5 ’-clorobenzoíl)-pirazina-3-carboxílico.

Exemplo 7 preparativo

Ácido 4-(2-metoxi-5-fluorobenzofl)-mcotímco e ácido 3-(2-metoxi-5-fluorobenzoíl)-isonicotínico Adiciona-se 14,1 g da mistura de ácido 4-(2,5-difluorobenzofl)-nicotmico e ácido 3-(2,5--difluorobenzoíl)-isonicotínico, obtida no exemplo 3 preparativo, a uma solução de metilato de sódio, preparada por adição progressiva de 6,8 g de sódio a 140 mL de metanol anidro. Deixa-se a mistura de reacção reagir à temperatura de refluxo durante 8,5 horas e depois à temperatura ambiente de um dia para o outro. Concentra-se a mistura de reacção para cerca de um terço do seu volume, junta-se 100 mL de água e remove-se por destilação o metanol restante. Acrescenta-se lentamente ao resíduo uma quantidade de 25 mL de HCI concentrado, sob arrefecimento para 10°C, recupera-se por sucção o precipitado obtido e lava-se com HCI O, 1N para se obter 11,31 g de uma mistura aproximadamente a 4:1 de ácido 4-(2-metoxi-5--fluorobenzoíl)-nicotínico e ácido 3-(2-metoxi-5-fluorobenzoíl)-isonicotmico. P. f.: >230°C. RMN-'H (DMSO-de): 3,40 (s); 3,45 (s); 7,15 (m); 7,37 (d); 7,42-7,63 (m); 7,26 (d); 8,60 (s); 8,83 (d); 9,07 (s); 13,55 (slr).

Exemplo 8 preparativo Ácido 4-(2-metoxi-5-fluorobenzil)-nicotmico (e ácido 3-(2-metoxi-5-fluorobenzil)-isonicotínico) Adiciona-se 1,5 g de par zinco-cobre (L.F. Fieser e M. Fieser, Reagents for Organic Synthesis, Vol. 1, página 1292) a uma suspensão agitada de 1,222 g da mistura de ácido 4-(2--metoxi-5-fluorobenzoíl)-nicotímco e ácido 3-(2-metoxi-5-fluorobenzoíl)-isomcotmico- obtida no

exemplo 7 preparativo, em 15 mL de ácido fórmico e 5 mL de água. Ao fim de 15 minutos à temperatura ambiente, aquece-se a mistura de reacção durante 2 horas em banho de óleo mantido à temperatura de 80°C. Depois de se deixar arrefecer até à temperatura ambiente, filtra-se a mistura de reacção através de um filtro de frita de vidro e lava-se muito bem os sólidos com 10 mL de uma solução aquosa a 75% de ácido fórmico e depois com 10 mL de acetato de etilo. Concentra-se os filtrados combinados até cerca de 5 mL, trata-se com 15 mL de HC1 O, 5N e extrai-se com acetato de etilo (3 x 20 mL); finalmente satura-se com cloreto de sódio e extrai-se novamente com uma mistura de acetato de etilo/l,2-dimetoxietano a 3:1 (2 x 20 mL). Seca-se as fases orgânicas combinadas sobre sulfato de sódio anidro e remove-se o solvente sob pressão reduzida para se obter um resíduo amarelado. Submetendo este material a cromato-grafia em coluna através de gel de sílica (eluente: misturas de acetato de etilo/metanol/ácido acético desde 96/4/0 até 90/10/1 v/v/v) obtém-se 0,805 g de ácido 4-{2-metoxi-5-fhiorobenzil)--nicotínico com o aspecto de um sólido branco amarelado. P. f.: > 220°C. RMN^H (DMSO-dé): 3,70 (s, 3H); 4,33 (s, 2H); 6,91-7,12 (m, 3H); 7,21 (d, 1H); 8,61 (d, 1H); 8,97 (s, 1H). A partir da coluna de cromatografia anterior também é possível recuperar alguma quantidade de ácido 3-(2-metoxi-5-fluorobenzil)-isonicotinico.

Exemplo 9 preparativo 9-Flúor-10-hidroxi-6-metoxibenzo[g]isoquinolina

Prepara-se uma mistura de 0,63 g de ácido 4-(2-metoxi-5-fluorobenzil)-nicotínico e 15 g de ácido polifosfórico e aquece-se a uma temperatura compreendida entre 110°C e 120°C durante 2 horas, sob agitação. Remove-se o aquecimento e junta-se 50 mL de água à mistura de reacção 38 enquanto está quente (60°C). Arrefece-se a mistura para 0°C, neutraliza-se com hidróxido de sódio a 20% e mantém-se sob agitação à temperatura ambiente durante 1,5 horas; finalmente extrai-se com 475 mL de metanol a 4% em clorofórmio. Lava-se com salmoura as fases orgânicas combinadas, seca-se sobre sulfato de sódio anidro e remove-se os solventes sob pressão reduzida para se obter 0,40 g de 9-flúor-10-hidroxi-6-metoxibenzo[g]isoquinolina com o aspecto de um sólido vermelho purpúreo. P.fi: > 210°C (a partir de etanol). RMN-Ή (DMSO-dó): 3,87 (s, 3H); 6,70-6,83 (m, 2H); 6,92-7,00 (m, 1H); 7,30 (d, 1H); 7,50 (d, 1H); 8,75 (s, 1H); 12,30 (s lr, 1H). UV (etanol): λ™* (rnn) (Em) (cm): 539 (204); 398 (513); 378 (452); 266 (1232). IV (KBr): 729, 1245, 1499, 1528, 1620, 1644 e 2838 cm'1.

Exemplo 10 preparativo 9-Flúor-6-metoxibenzo[g]isoqumolina-5,10-diona

Prepara-se uma solução de 13,70 g de nitrato de cério e amónio (NCA) em 50 mL de água e adiciona-se durante 20 minutos a uma suspensão agitada de 1,22 g de 9-flúor-10--hidroxi-6-metoxibenzo[g]isoquinolina em 150 mL de acetonitrilo. No final da adição aquece-se a suspensão obtida à temperatura de 60°C durante 2 horas para se obter uma solução escura límpida que se deixa arrefecer até à temperatura ambiente e se dilui com 100 mL de água. Após a remoção do acetonitrilo por destilação sob pressão reduzida, satura-se a fase aquosa com cloreto de sódio e extrai-se com cloreto de metileno (3 x 150 mL). Seca-se sobre sulfato de sódio anidro as soluções orgânicas combinadas e remove-se o solvente sob pressão reduzida. Purifica-se o resíduo obtido por cromatografia em coluna através de gel de sílica (eluente: 39 misturas de cloreto de metileno/acetato de etilo desde 85/15 até 75/25 v/v) para se obter 0,48 g de 9-flúor-6-metoxibenzo[g]isoquinolina-5,10-diona com o aspecto de um sólido amarelo acastanhado. P.f.: >220°C. * RMN-JH (CDCI3): 4,05 (s, 3H); 7,38 (dd, J = 3,39, 9,39 Hz, 1H); 7,55 (dd, J = 10,37, 9,39 Hz, 1H); 8,00 (dd, J = 5,09,0,78 Hz, 1H); 9,07 (d, J = 5,09 Hz, 1H); 9,45 (d, J = 0,78 Hz, 1H).

Exemplo 11 preparativo 6,9-Difhiorobenzo[g]isoquinolina-5,10-diona

Prepara-se uma solução de 61,07 g da mistura de ácido 4-(2,5-difluorobenzoíl)--nicotínico e ácido 3-(2,5-difluorobenzofl)-isonicotínico, obtida no exemplo 3 preparativo, em 100 mL de ‘óleum’ a 20% e aquece-se à temperatura de 140°C enquanto se vai acrescentando ‘óleum’ a 20% em quatro porções (de 13,2 mL cada uma) a intervalos de 20 minutos. Depois de se ter juntado a quarta porção, aquece-se a mistura durante 20 minutos, deixa-se então arrefecer até à temperatura ambiente e extingue-se com uma mistura de 1 500 g de gelo, 1 500 mL de água e 350 mL de NaOH a 35%. Extrai-se a mistura quatro vezes com cloreto de metileno (11000 mL e depois 3500 mL). Lava-se as soluções orgânicas combinadas, utilizando 21000 mL de água para o efeito), seca-se (Na2S04) e remove-se o solvente por evaporação rotativa. Dissolve-se 56,0 g do sólido vermelho-escuro obtido em 840 mL de THF a ferver e junta-se 8,40 g de carvão descolorante. Decorridos 30 minutos filtra-se a mistura enquanto está quente e concentra-se o filtrado até um volume de 200 mL. Recolhe-se por filtração por sucção o precipitado obtido para se obter 43,00 g de 6,9-difluorobenzo[g]isoquinolina-5,10-diona. p.f.: 201°C-203°C.

Por concentração das águas-mãe até um volume de 70 mL obtém-se uma segunda colheita de produto (3,35 g), p.f. 20Ó°C-202°C.

Exemplo 12 preparativo

De acordo com o procedimento descrito no exemplo 11 preparativo e utilizando como materiais de partida os compostos obtidos nos exemplos 4, 5 e 6 preparativos, prepara-se os compostos a seguir indicados: 6.9- difluorobenzo[g]quinolina-5,10-diona, sólido amarelo, p.f. 251°C-252°C; 6.9- difluorobenzo[g]quinoxalina-5,10-diona, sólido amarelo, p.f. 230°C (dec.); 6.9- difluorobenzo[g]ftalazina-5,10-diona, sólido amarelo, p.f 255°C-258°C; 6-cloro-9-fluorobenzo[g]quinolina-5,10-diona; 6-flúor-9-clorobenzo[g]quinolina-5,10-diona; 6-cloro-9-fluorobenzo[g]quinoxalina-5,10-diona.

Exemplo 13 preparativo 9-Flúor-6-metoxibenzo[g]isoquinolina-5,10-diona e 6-flúor-9-metoxibenzo[g]isoquinolina--5,10-diona

Num funil de adição por gotejamento prepara-se uma solução de metilato de sódio sob uma atmosfera de azoto a partir de 97,6 mL de metanol e 2,024 g de sódio acrescentado progressivamente. Depois de o sódio ter desaparecido totalmente, adiciona-se a solução gota a gota, durante 2 horas e 35 minutos, a uma solução agitada constituída por 19,615 g de 6,9-di-fluorobenzo[g]isoquinolina-5,10-diona, obtida no exemplo 11 preparativo, em 883 mL de THF anidro à temperatura de 20°C. No final da adição concentra-se a solução para metade do seu

volume por evaporação rotativa e depois arrefece-se para 18°C durante 30 minutos. Recupera-se por filtração por sucção o sólido que se separa e lava-se com 100 mL de THF; depois coloca-se em suspensão em 80 mL de água, sob agitação de um dia para o outro, e filtra-se novamente para se obter 7,4 g do sólido A.

Concentra-se a solução-mãe de THF até à secura. Coloca-se o sólido obtido em suspensão em 78 mL de água, sób agitação durante 1 hora, e filtra-se para se obter 12,9 g do sólido B.

Aquece-se ao refluxo durante 30 minutos uma quantidade de 9,30 g de sólido A em 45 mL de cloreto de metileno. Após o arrefecimento até à temperatura ambiente, recupera-se o sólido por filtração por sucção, lava-se com cloreto de metileno (5x3 mL) e seca-se sob vácuo à temperatura de 40°C para se obter 8,65 g de 6-metoxi-9-fluorobenzo[g]isoquinolina-5,10--diona sob a forma de um composto puro. P.fi: 248°C-250°C. RMN-JH (CDCI3): 4,05 (s, 3H); 7,40 (dd, J = 9,39, 3,91 Hz, 1H); 7,55 (dd, J = 10,37, 9,39 Hz, 1H); 8,00 (dd, J 0 5,09,0,78 Hz, 1H); 9,05 (d, J = 5,09 Hz, 1H); 9,48 (d, J = 0,78 Hz, 1H).

Dissolve-se 14,0 g do sólido B em 140 mL de cloreto de metileno e remove-se por filtração a porção insolúvel. Aplica-se a solução de cloreto de metileno a uma coluna de cro-matografia através de gel de sílica (630 g), efectuando a sua eluição à pressão ambiente com cloreto de metileno. Quando as bandas cromatográficas amarelas aparecem bem separadas efectua-se a eluição da coluna com misturas de cloreto de metileno/acetato de etilo desde 10/1 até 8/2 e 1/1 para se obter uma mistura a 94:6 (avaliação por CLER) respectivamente de 9--metoxi-6-fluorobenzo[g]isoquinolina-5,10-diona e 6-metoxi-9-fluorobenzo[g]isoquinolina--5,10-diona(6,50g). P.í: 168°C-170°C. 42

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Exemplo 14 preparativo a) 9-Flúor-6-hidroxibenzo[g]isoquinolina-5,10-diona e 9-cloro-6-Mdroxibenzo[g]isoquinolina--5,10-diona (mistura a 1/1: reacção em pequena escala)

Prepara-se uma mistura de 0,072 g de 9-flúor-6-metoxibenzo[g]isoquinolina-5,10--diona e 6-flúor-9-metoxibenzo[g]isoquinolina-5,10-diona e 0,112 g de tricloreto de alumínio em 40 mL de cloreto de metíleno anidro e agita-se à temperatura ambiente durante 4 horas sob uma atmosfera de azoto. Adiciona-se mais uma porção de 0,190 g de cloreto de alumínio e deixa-se a mistura reagir ao refluxo durante 1,5 horas e à temperatura ambiente de um dia para o outro. Após a adição de 15 mL de salmoura separa-se a fase aquosa e extrai-se com cloreto de metíleno (3x5 mL). Seca-se sobre sulfato de sódio anidro as soluções orgânicas combinadas e remove-se o solvente por destilação sob pressão reduzida para se obter (0,070 g) de uma mistura aproximadamente a 1:1 de 9-flúor-6-hidroxibenzo[g]isoquinoíina-5,10-diona (mancha amarela que se move mais lentamente sobre a placa de gel de sílica da CCF, eluente: mistura de cloreto de metileno/acetato de etilo a 70/30) e 9-cIoro-6-hidroxibenzo[g]isoquinolina--5,10-diona (mancha amarela que se move mais rapidamente no sistema cromatográfico anterior), a qual é utilizada sem mais purificação no passo subsequente. O composto 9-flúor-6-hidroxibenzo[g]isoquinolina-5,10-diona tem o seguinte espectro de RMN-1!! (CDCI3): 7,38 (dd, 1H); 7,53 (dd, 1H); 8,09 (dd, 1H); 9,15 (d, 1H); 9,57 (d, 1H); 12,56 (s, 1H). O composto 9-cloro-6-hidroxibenzo[g]isoquinolina-5,10-diona tem o seguinte espectro de RMN-lH (CDC13): 7,91 (d, 1H); 7,75 (d, 1H); 8,07 (dd, 1H); 9,13 (d, 1H); 9,58 (d, 1H); 12,95 (s, 1H). b) 9-Flúor-6-hidroxibenzo[g]isoquinolina-5,10-diona e 9-cloro-6-hidroxibenzo[g]isoquinolina--5,10-diona (mistura a 9/1: preparação de vários gramas)

Adiciona-se de uma só vez 19,05 g de cloreto de alumínio a uma solução agitada ao refluxo constituída por 7,20 g de 6-metoxi-9-fluorobenzo[g]isoqumolina-5,10-diona em 432 mL de cloreto de metileno. Depois de se manter ao refluxo durante 4 horas, deixa-se a mistura de reacção arrefecer e verte-se em 1300 mL de água. Junta-se 200 mL de cloreto de metileno e depois de se agitar durante 10 minutos separa-se a fase orgânica. Satura-se a solução aquosa com NaCl e extrai-se com 3400 mL de cloreto de metileno. Lava-se as soluções orgânicas combinadas, utilizando 1000 mL de salmoura para o efeito, seca-se e remove-se o solvente por evaporação rotativa. Deixa-se o sólido castanho assim obtido (6,5 g) recristalizar a partir de 65 mL de uma mistura de acetato de etilo/n-hexano a 1:1 para se obter uma mistura a 9/1 (avaliação por RMN-1!!) respectivamente de 9-flúor-6-hidroxibenzo[g]isoquinolina-5,l 0-diona e 9-cloro-6--hidroxibenzo[g]isoquinolina-5,10-diona (6,00 g). P.f.: fusão parcial a 1769°C-181°C; fusão total a 193°C-195°C.

Exemplo 15 preparativo a) 9-Flúor-6-(p-tolueno-sulfoniloxi)-benzo[g]isoqumolina-5,10-diona e 9-cloro-6-(p-tolueno--sulfoniloxi)-benzo[gJisoquinolina-5,10-diona (mistura a 1/1; preparação em pequena escala) Dissolve-se 0,060 g da mistura a 1:1 de 9-flúor-6-hidroxibenzo[g]isoqumolina-5,10-diona e 9-doro-6-hidroxibenzo[gJisoquinolina-5,10-diona, obtida no exemqplo 14a preparativo, em 2 mL de piridina anidra e a seguir adiciona-se 0,095 g de cloreto de p-tolueno-sulfonilo. Depois de se agitar à temperatura ambiente durante 1 hora adiciona-se 0,25 mL de trietilamina e mantém-se sob agitação durante mais 1 hora. Concentra-se a mistura de reacção praticamente 44 até à secura e reparte-se entre HC1 IN (4 mL)/sulfato de amónio a 20% (6 mL) e 10 mL de acetato de etilo. Separa-se a fase aquosa, extrai-se com 35 mL de acetato de etilo e elimina-se. Seca-se sobre sulfato de sódio anidro as soluções orgânicas combinadas e concentra-se até à secura para se obter 0,095 g de uma mistura aproximadamente a 1:1 de 9-flúor-6-(p-tolueno--sulfoniloxi)-benzo[g]isoquinolina-5,10-diona e 9-cloro-6-(p-tolueno-sulfoniloxi)-benzo[g]-isoquinolina-5,10-diona, a qual é utilizada sem mais purificação no passo subsequente. É possível obter os compostos individuais puros submetendo esta mistura a cromatografia em coluna através de gel de sílica (eluente: mistura de cloreto de metileno/n-hexano/acetato de etilo desde 50/45/5 até 50/40/10 v/v/v), os quais possuem os seguintes dados analíticos: 9-flúor-6-(p-tolueno-sulfoniloxi)-benzo[g]isoquinolina-5,10-diona: p.f. 173°C-174°C. RMN-1H (CDC13): 2,45 (s, 3H); 7,35 (s, 2H); 7,50-7,57 (m, 2H); 7,82-7,94 (m, 3H); 9,08 (d, 1H); 9,48 (s, 1H). 9-cloro-6-(p-tolueno-sulfoniloxi)-benzo[g]isoquinolina-5,10-diona: p.f.: 180°C-181°C. RMN-'Η (CDC13): 2,45 (s, 3H); 7,35 (s, 2H); 7,47 (d, 1H), 7,78-7,91 (m, 4H), 9,07 (d, 1H); 9,48 (s, 1H). b) 9-Húor-6-(p-tohieno-sulfomloxi)-benzo[g]isoquinolina-5,10-diona e 9-cloro-6-(p-tolueno--sulfoniloxi)-benzo[g]isoquinolina-5,10-diona (mistura a 9/1; preparação de vários gramas)

Adiciona-se 8,20 mL de trietilamina a uma suspensão agitada de 5,53 g da mistura a 9/1 de 9-flúor-6-hidroxibenzo[g]isoqumolina-5,10-diona e 9-cloro-6-hidroxibenzo[g]isoquinolina--5,10-diona, obtida no exemplo 14b preparativo, e 8,47 mL de cloreto de p-tolueno-sulfonilo em 166 mL de cloreto de metileno. Mantém-se a solução violeta avermelhada assim obtida à temperatura ambiente e sob uma atmosfera de azoto durante 1 hora e depois verte-se sobre 45- 500 mL de água. Separa-se a fase orgânica e extrai-se novamente a solução aquosa com 100 mL de cloreto de metileno. Seca-se (Na2S04) as soluções orgânicas combinadas e concentra-se até à secura. Coloca-se o sólido obtido em suspensão em 100 mL de n-hexano durante 1 hora e filtra-se para se obter uma mistura a 9:1 (avaliação por RIVIN-1!!) respectivamente de 9--flúor-6-(p-tolueno-sulfoniloxi)-benzo[g]isoquinolina-5,10-diona e 9-cloro-6-(p-tolueno-sul-foniloxi)-benzo[g]isoquinolina-5,10-diona (8,85 g). Ρ.1: Í56°C-158°C.

Exemplo 16 preparativo 6-Flúor-9-hidroxibenzo[g]isoquinolina-5,10-diona e 6-cloro-9-hidroxibenzo[g]isoquinolina--5,10-diona

De acordo com o procedimento descrito no exemplo 14 preparativo e utilizando como material de partida o composto 6-flúor-9-metoxibenzo[g]isoquinolina-5,10-diona, obtido no exemplo 13 preparativo, obtém-se uma mistura aproximadamente a 2:1 de 6-flúor-9-hidroxi-benzo[g]isoquinolina-5,10-diona e 6-cloro-9-hidroxibenzo[g]isoquinolina-5,10-diona com o aspecto de um pó amarelo, p.f.: 175oC-177°C/188oC-190°C.

Exemplo 17 preparativo 6-Flúor-9-(p-tolueno-sulfomloxi)-benzo[g]isoqumolina-5,10-diona e 6-cloro-9-(p-tolueno--sulfoniloxi)-benzo[g]isoquinolina-5,10-diona

De acordo com o procedimento descrito no exemplo 15 preparativo e utilizando como material de partida a mistura de 6-flúor-9-hidroxibenzo[g]isoquinolina-5,10-diona e 6-cIoro--9-hidroxibenzo[g]isoquinolina-5,10-diona, obtida no exemplo 16 preparativo, obtém-se uma 0 46 0 46

mistura aproximadamente a 60/40 de 6-flúor-9-(p-tohieno-sulfoniloxi)-benzo[g]isoquinolina--5,10-diona e 6-cloro-9-(p-tolueno-sulfoniloxi)-beiizo[g]isoquinolina-5,10-diona com o aspecto de um pó amarelo, p.f.: 193°C-195°C (a partir de cloreto de metileno).

Exemplo 18 preparativo Ácido 3-(5-cloro-2-fluorobenzoíl)-isonicotmico e ácido 4-(5-cloro-2-fluorobenzoíl)-nicotmico

Com o auxílio de uma seringa adiciona-se gota a gota 6,0 mL de sec-butil-lítio (1,3 M em ciclo-hexano) a uma solução agitada constituída por 0,97 g de l-clor-4-fluorobenzeno em 70 mL de THF à temperatura de -75°C, mantendo-se sob uma atmosfera de azoto. Depois de se agitar durante mais 30 minutos transfere-se a mistura amarela, gota a gota, com o auxílio de uma cânula envolta por uma camisa, para dentro de uma mistura constituída por 1,00 g de anidrido do ácido piridina-3,4-dicarboxílico em 100 mL de THF à temperatura de -78°C e sob uma corrente de azoto. Deixa-se a solução amarela ténue aquecer até -20°C durante 4 horas. Remove-se o THF sob pressão reduzida. Dissolve-se o sólido amarelo resultante em 10 mL de água, arrefece-se para 0°C e acidifica-se com HC1 diluído em banho de gelo, sendo o precipitado resultante recolhido por filtração. Após o aquecimento do sólido branco com 30 mL de acetona, sobram 0,095 g de um material insolúvel, o qual se determina por análise de RMN-]H ser uma mistura a 94/4 respectivamente de ácido 3-(5-cloro-2-fIuorobenzoíI)--isonicotínico e ácido 4-(5-cloro-2-fluorobenzoíl)-mcotínico. p.f.: 289°C-291°C,

Após a centrifugação remove-se o sobrenadante e evapora-se rotativamente para se obter 0,947 g de cristais de uma mistura a 94/6 (por análise de RMN-*H) respectivamente de ácido 4-(5-cloro-2-fluorobenzoíl)-nicotínico e ácido 3-(5-cloro-2-fluorobenzoíl)-isonicotínico. p.f.: 236°C-237°C.

A sublimação desta mistura (0,025 g) a 180°C-205°C/0,5 mm Hg proporciona um sólido branco com uma proporção a 98/2 respectivamente de ácido 4-(5-cloro-2-fluorobenzoíl)--nicotínico e ácido 3-(5-cloro-2-fluorobenzoíl)-isonicotínico (20 mg). ácido 4-(5-cloro-2-fluorobenzofl)-nicotínico: ΚΜΝ-'Η (CDCI3/CD3OD a 9/1): 6,96 (m, 1H); 7,21 (d, 1H); 7,45 (m, 1H); 7,86 (m, 1H); 8,76 (d, 1H); 9,18 (s, 1H). ácido 3-(5-cloro-2-fluorobenzofl)-isonicotínico: RMN-lH (DMSO-dô): 7,37 (m, 1H); 7,75 (m, 2H); 7,83 (d, 1H); 8,77 (s, 1H); 8,90 (d, 1H).

Exemplo 19 preparativo Ácido 4-(5-cloro-2-fluorobenzil)-nicotmico

Adiciona-se 0,75 g do par zinco/cobre a uma mistura agitada de ácido 4-(5-cloro-2--fluorobenzoíl)-nicotmico e ácido 3-(5-cloro-2-fluorobenzofl)-isonicotínico (a 94/6 numa base molar; 0,60 g), obtida no exemplo 18 preparativo, em ácido fórmico a 75%. Agita-se a mistura de reacção exotérmica e efervescente durante 15 minutos antes de se aquecer até 80°C durante 2 horas. Após 0 arrefecimento para 40°C. Filtra-se a mistura através de um funil de frita de vidro. Lava-se 0 sólido com ácido fóimico a 75% (1x5 mL) e com acetato de etilo (2x5 mL). Concentra-se a mistura por evaporação rotativa até se obter um volume de cerca de 2 mL. Dissolve-se 0 óleo cor-de-laranja assim obtido em 3 mL de HC1 0,5N, extrai-se com acetato de etilo (3 x 10 mL), depois satura-se com NaCl e extraiu-se com /1,2-dimetoxietano (2x5 mL). Seca-se os extractos combinados sobre Na2SC>4 e remove-se os solventes por evaporação rotativa para se obter uma espuma amarela. Deixa-se a espuma (0,541 g) recristalizar a partir de 1 mL de acetonitrilo quente para proporciona 0,142 g de ácido 4-(5-cloro-2-fIuorobenzil)--nicotínico.

4B

P.f.: 174°C-176°C, RMN-'Η (CDCI3/CD3OD a 9/1): 4,43 (s, 2H); 6,79 (m, 1H); 6,86 (m, 1H); 6,95 (m, 1H); 7,11 (d, 1H); 8,55 (d, 1H), 9,12 (s, 1H).

Exemplo 20 preparativo 9-Cloro-6-fluorobenzo[g]isoquinolina-5,10-diona

Adiciona-se 0,31 mL de ácido sulfurico fumante (SO3 a 30%) ao ácido 4-(5-cloro-2--fluorobenzil)-nicotínico obtido no exemplo 19 preparativo. Num balão, equipado com um tubo de secagem com enchimento de algodão, aquece-se a mistura escura rapidamente até 130°C durante 10 minutos. Após o arrefecimento para a temperatura ambiente, extingue-se a mistura de reacção com 3 g de gelo e extrai-se com cloreto de metileno (4x7 mL). Seca-se sobre Na2S04 os extractos combinados e remove-se o solvente por evaporação rotativa para se obter 0,045 g (rendimento de 82%) de 9-cloro-6-fluorobenzo[g]isoquinolina-5,10-diona com 0 aspecto de um sólido amarelo. P.f.: 204°C-206°C. RMN-1!! (CDCI3): 7,45 (m, 1H); 7,83 (m, 1H); 7,98 (d, 1H); 9,08 (d, 1H); 9,49 (s, 1H). Exemplo 21 preparativo 9-flúor-6-(p-tolueno-sulfoniloxi)-benzo[g]isoquinolina-5,10-diona-2-óxido

Prepara-se uma solução de 3,92 g de ácido 3-cloroperoxibenzóico (concentração de 55%) em 50 mL de diclorometano e adiciona-se gota a gota, durante 5 minutos, a uma mistura de 1,98 g de 9-flúor-6-(p-tolueno-sulfoniloxi)-benzo[g]isoquinolina-5,10-diona em 20 mL de diclorometano. Procede-se com cuidado para evitar a adição da camada aquosa que se separa 4 da solução de ácido 3 -cloroperoxibenzóico em diclorometano. Ocorre uma reacção exotérmica e no final da adição mantém-se a mistura ao refluxo de um dia para o outro. Depois de se deixar arrefecer até à temperatura ambiente dilui-se a mistura de reacção com 50 mL de diclorometano e lava-se a solução orgânica com água (3 x 30 mL). Seca-se sobre sulfato de sódio e depois concentra-se a solução orgânica até se obter um volume de aproximadamente 20 mL, dilui-se com 30 mL de etanol absoluto e concentra-se para um pequeno volume. Depois de se agitar à temperatura de 0°C durante 1 hora, ocorre a separação de um sólido amarelo que é filtrado para se obter 1,35 g de 9-flúor-6-(p-tolueno-siilfoniloxi)-benzo[g]isoquinolina-5,10-diona-2-óxido. P.f.: 234°C-236°C.

Exemplo 22 preparativo

De acordo com o procedimento descrito no exemplo 21 preparativo e utilizando como material de partida a mistura de 6-flúor-9-(p-tolueno-sulfoniloxi)-benzo[g]isoquinolina-5,10--diona e 6-cloro-9-(p-tolueno-suIfoniloxi)-benzo[g]isoquinolina-5,10-diona do exemplo 17 preparativo ou então o composto 9-cloro-6-fluorobenzo[g]isoquinolina-5,10-diona do exemplo 20 preparativo, prepara-se os compostos a seguir indicados: 2-óxido de 6-flúor-9-(p-tolueno-sulfoniloxi)-benzo[g]isoquinolina-5,10-diona; 2-óxido de 6-cIoro-9-(p-toIueno-sulfoniloxi)-benzo[g]isoquinolina-5,10-diona; 2-óxido de 9-cloro-6-fluorobenzo[g]isoquinolina-5,10-diona.

Exemplo 23 preparativo Ácido 4-(2?-flúor-5 ’-clorofenil)-4-oxo-2E-butenóico

Adiciona-se 3,0 g de anidrido maleico finamente pulverizado progressivamente a uma mistura constituída por 24,6 g de l-cloro-4-fluorobenzeno e 11,56 g de cloreto de alumínio 50 50

anidro. Aplica-se na parte de cima do condensador um injector para fazer borbulhar gás e aquece-se a mistura em banho de óleo a uma temperatura compreendida enlre 80°C e 85°C durante 2 horas, tempo este ao fim do qual se observa nitidamente uma pequena libertação de ácido clorídrico gasoso. Arrefece-se a mistura e recupera-se o excesso de l-cloro-4-fluoro-benzeno por destilação à pressão de um aspirador hidráulico. Extingue-se a mistura resultante com gelo e depois destila-se sob vapor para remover os últimos vestígios de l-cloro-4--fluorobenzeno. Adiciona-se 10 mL de ácido clorídrico concentrado à mistura arrefecida e recolhe-se 9,2 g do sólido resultante por filtração. Retoma-se este material em 50 mL de benzeno em ebulição, trata-se com carvão descolorante e filtra-se através de uma camada de celite. Manteve-se em repouso de um dia para o outro e recolheu-se o sólido amarelo por filtração (2,45 g). Uma segunda recristalização a partir de 40 mL de benzeno proporciona 2,1 g de ácido 4-(2,-flúor-5’-clorofenil)-4-oxo-2E-butenóico sob a fornia de regioisómero puro. P.f.: 146°C-147°C. RMN-*H (CDC13) δ 7,81 (dd, Jhh = 15,4 Hz, Jhf = 3,3 Hz, 1H), 7,79 (dd, Jhf = 6,1 Hz, Jhh = 2,7 Hz, 1H), 7,54 (m, Jhh = 10 Hz, J^ = 4,7 Hz, J^ = 2,7 Hz, 1H), 7,15 (dd, Jhh = 10 Hz, J^ = 9 Hz, 1H), 6,85 (dd, Jhh = 15,4 Hz, Jhf = 1,2 Hz, 1H).

Exemplo 24 preparativo 4-(2’-Flúor-5,-clorofenil)-4-oxo-2E-butenoato de metilo

Prepara-se uma solução de 4,6 g de ácido 4-(2’-flúor-5,-clarofenil)-4-oxo-2E-butenóico do exemplo 23 preparativo em 90 mL de metanol, contendo 20 gotas de ácido sulfurico concentrado, e aquece-se ao refluxo durante 2 horas. Deixa-se a mistura arrefecer até à temperatura ambiente e remove-se o metanol por evaporação rotativa para se obter um óleo 5

amarelo ténue. Adiciona-se gelo fundente ao resíduo, recolhe-se o sólido por filtração e lava-se várias vezes com gelo fundente. Retoma-se o sólido em 100 mL de pentano e seca-se a solução sobre sulfato de sódio. Remove-se o agente de secagem e coloca-se a solução de pentano no congelador durante 3 dias. Recolhe-se por filtração 3,2 g de 4-(2’-flúor-5’-clorofenil)-4-oxo--2E-butenoato de metilo puro. P.f.: 42°C-143°C. RMN-'Η (CDC13) δ 7,78 (dd, Jhf = 6,1 Hz, Jhh = 2,7 Hz, 1H), 7,70 (dd, Jhh = 15,6 Hz, Jhf = 3,3 Hz, 1H), 7,51 (m, Jhh = 9,8 Hz, Jhf = 4,5 Hz, Jhh = 2,7 Hz, 1H), 7,13 (dd, Jhh = 9,8 Hz, Jhf = 8,9 Hz, 1H), 6,84 (dd, Jhh = 15,6 Hz, Jhf = 1,3 Hz, 1H), 3,84 (t, 3H).

Exemplo 25 preparativo 4-(2’-Flúor-5’-clorobenzoíl)-5-hidroxinicotmato de metilo

Prepara-se uma mistura de 2,0 g de 4-(2’-flúor-5’-clorofeml)-4-oxo-2E-butenoato de metilo do exemplo 24 preparativo e 1,5 g de ácido 5-etoxi-oxazol-2-carboxíIico (preparado em conformidade com lRec. Trav. Chim. des Pays-Bas’, (1913), 32, 144) e aquece-se à temperatura de 90°C durante 1,75 horas, tempo este findo o qual cessa a libertação de dióxido de carbono. Lava-se a mistura de reacção arrefecida (sólido vermelho alaranjado) com 5 mL de acetato de etilo. Recolhe-se 1,43 g de sólido amarelo ténue por filtração. É possível obter mais 0,4 g de 4-(2 ’-flúor-5 ’-clorobenzoíl)-5-hidroxinicotinato de metilo a partir do filtrado (recuperação total de 1,82 g). A recristalização a partir de 7 mL de acetato de etilo proporciona cristais incolores. P.f.: 163°C-164°C. RMN-'Η (CDC13) δ 8,71 (t, 1H), 8,55 (t, 1H), 7,86 (dd, Jhh = 2,7 Hz, Jhf = 6,2 Hz, 1H), 7,50 (m, Jhh = 10,1 Hz, Jhf = 4,4 Hz, Jhh = 2,7 Hz, 1H), 7,04 (dd, Jhh = 10,1 Hz, Jhf = 8,8 Hz, 1H), 3,71 (t, 3H). A análise por raios X estabelece inequivocamente a regioquímica da reacção de Diels-Alder.

Exemplo 26 preparativo Ácido 4-(2 ’ -ílúor-5 ’ -c!orobenzoíl)-5 -hidroxinicotínico

Adiciona-se 1,2 g de 4-(2’-flúor-5>-clorobenzoíl)-5-hidroxinicotmato de metilo do exemplo 25 preparativo a uma solução constituída por 0,67 g de hidróxido de sódio em 4 mL de água e 12 mL de metanol. Obtém-se uma solução amarela ao fim de 5 minutos. Agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 1,25 horas. Acidifica-se a solução resultante para pH=2 com 14 mL de ácido clorídrico IN e mantém-se a mistura em repouso de um dia para o outro. Recolhe-se por filtração o sólido branco, lava-se com água (3x5 mL) e seca-se para se obter 1,04 g de ácido 4-(2’-flúor-5’-clorobenzoU)-5-hidroxinicotmico. P.f.: 262°C-264°C. RMN-íH (DMDO-íL) δ 13,60 (s, 1H), 10,70 (s, 1H), 8,60 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 7,75 (m, 2H), 7,36 (t, 1H, J = 9,4 Hz).

Exemplo 27 preparativo Ácido 4-(2 ’-flúor-5 ’-clorobenziI)-5-hichoximcotmico A uma suspensão agitada de 100 mg de zinco em pó (malha > 230) em 1,3 mL de ácido fóimico a 75%, à temperatura de 80°C (temperatura externa do banho), adiciona-se progressivamente 100 mg de ácido 4-(2’-flúor-5,-clorobenzoíl)-5-hidroxinicotmico, obtido no exemplo 26 preparativo, durante 5 minutos. Subsequentemente acrescenta-se mais três porções de zinco em pó (3 x 50 mg) de 30 em 30 minutos. Mantém-se sob agitação durante mais 10 minutos após a última adição de zinco em pó e depois reparte-se a mistura entre 10 mL de acetato de etilo e 10 mL de HC1 0,5N. Extrai-se a fase aquosa três vezes com acetato de etilo (3 x 10 mL), satura-se com NaCl e extrai-se novamente com 10 mL de acetato de etilo. Tritura-se o resíduo em 2 mL de acetona e deixa-se cristalizar de um dia para o outro. Recolhe-se por filtração o sólido branco, lava-se com éter terc-butil-metílico e seca-se sob vácuo à temperatura de 100°C. Obtém-se 47 mg de ácido 4-(2’-flúor-5’-cIorobenzil)-5-hidroxinicotmico com o aspecto de um sólido branco. P.f.: > 280°C. RMN-lH (DMDO-4) 6 13,25 (s, 1H), 10,34 (s, 1H), 8,47 (s, 1H), 8,30 (s, 1H), 7,25 (m, 2H), 6,80 (dd, 1H), 4,27 (s, 2H).

Exemplo 28 preparativo 9-Cloro-6-flúor-4-hidroxibenzo[g]isoqumolina-5,10-diona

Prepara-se uma mistura de 0,15 g do ácido d-^-flúor-ó ’-clorobenzil)-5-Mdroxmicotímco, obtido no exemplo 27 preparativo, e 2 mL de ‘óleum’ a 20% e agita-se durante 45 minutos a uma temperatura compreendida entre 125°C-130°C (temperatura externa do banho). Depois deixa-se a mistura de reacção arrefecer até à temperatura ambiente, verte-se sobre 20 g de gelo moído e neutraliza-se a mistura resultante para pH=7 com bicarbonato de sódio no estado sólido. Extrai-se a diona com diclorometano (4 x 20 mL), seca-se sobre MgS04 as fase orgânicas cominadas e concentra-se até à secura. O produto é obtido com o aspecto de um sólido amarelo acobreado (0,12 g) que escurece por contacto com o ar. P.f.: 227°C-228°C. RMN-!H (CDC13) δ 11,48 (s, 1H), 9,02 (s, 1H), 8,86 (s, 1E), 7,88 (dd, Jhh = 9,1 Hz, Jhf = 4,5 Hz, 1H), 7,47 (dd, Jhf = 10,2 Hz, Jhh = 9,1 Hz, 1H).

Exemplo 29 preparativo 9-Cloro-6-flúor-4-(p-metoxibenziloxi)-benzo[g]isoquinolma-5,10-diona Passo a)

Adiciona-se 8 mg de cloreto cúprico anidro a uma mistura de 2,76 g de álcool 4--metoxibenzílico e 3,13 mL de 1,3-diisopropilcarbodiimida sob uma atmosfera de azoto. A reacção é muito exotérmica, procedendo-se ao seu arrefecimento em banho de gelo durante 1 hora. Depois aquece-se a mistura durante 3,5 horas à temperatura de 65°C. Purifica-se o produto por destilação para se obter 4 g de 0-p-metoxibenzil-N,N’-diisopropil-ureia. p.e.: 98°C-100°C (0,05 mm). RMN-JH (CDCI3) δ 7,32 (d, JHH = 9 Hz, 2H), 6,86 (d, Jhh = 9 Hz, 2H), 5,02 (s, 2H), 3,80 (s, 3H), 4,40 (m, 1H), 3,20 (m, 1H), 1,12 (dd, sobreposição, 12H).

Passo b)

Prepara-se uma solução de 0,050 g do composto 9-cloro-6-flúor-4-hidroxibenzo[g]-isoquinolina-5,10-diona, obtido no exemplo 28 preparativo, e 0,095 g de O-p-metoxibenzil--Ν,Ν’-diisopropihsoureia, obtida no passo a, em 1 mL de diclorometano e agita-se à temperatura ambiente durante 3,5 horas sob uma atmosfera de azoto. Purifica-se a mistura de cor 5 5

castanho-escuro avermelhado por cromatografía intermitente através de gel de sílica, efectuando a eluição em gradiente utilizando em primeiro lugar 300 mL de uma mistura a 100:2 de clorofórmio:éter terc-butil-metílico e depois 300 mL dessa mesma mistura a 100:4. A remoção do eluente proporciona 0,032 g de 9-cloro-6-flúor-4-(p-metoxibenziloxi)-benzo[g]isoquinolma--5,10-diona com o aspecto de um sólido castanho amarelado. P.f.: 155°C-157°C. RMN-‘H (CDC13) δ 9,06 (s, 1H), 8,78 (s, 1H), 7,75 (dd, Jhh = 9,0 Hz, Sw = 4,6 Hz, 1H), 7,45 (d, Jhh = 8,3 Hz, 2H), 7,38 (t, Jhf = 9,8 Hz, Jhh = 9,0 Hz, 1H), 6,93 (d, Jhh = 8,3 Hz, 2H), 5,36 (s, 2H), 3,82 (s, 3H).

Exemplo 30 preparativo 9-Flúor-6-(p-tolueno-sulfoniloxi)-benzo[g]ftalazina-5,10-diona ou 9-flúor-6-(p-tolueno--sulfoniloxi)-benzo[g]quinoxalina-5,10-diona

De acordo com o procedimento descrito no exemplo 13 preparativo e utilizando um dos compostos 6,9-difluorobenzo[g]fitalazina-5,10-diona ou 6,9-difluorobenzo[g]quinoxalina--5,10-diona, obtidos no exemplo 12 preparativo, prepara-se respectivamente um dos compostos 9--flúor-6-metoxibenzo[g]flalazma-5,10-diona ou 9-flúor-6-metoxibenzo[g]quinoxalina-5,10--diona.

Faz-se reagir estes últimos intermediários em conformidade com o procedimento descrito no exemplo 14 preparativo para se obter um dos compostos 9-flúor-6-hidroxibenzo[g]-ftalazina-5,10-diona ou 9-flúor-6-hidroxibenzo[g]quinoxalina-5,10-diona, em mistura com alguns dos respectivos derivados de grupo 9-cloro.

A reacção destes inteimediários com cloreto de p-tolueno-sulfonilo. em conformidade com o exemplo 15 preparativo, proporciona um dos compostos 9-flúor-6-(p-tolueno-sulfoniloxi)--benzo[g]ftalazina-5,10-diona ou 9-flúor-6-(p-tolueno-sulfoniloxi)-benzo[g]quinoxalma-5,10--diona.

Exemplo 1 5-(p-tolueno-sulfoniloxi)-2-metil-isoquino[8,7,6-cd]mdazol-6(2H)-ona

Dissolve-se 0,041 g da mistura a 1:1 de 9-flúor-6-(p-tolueno-sulfoniloxi)-benzo[g]- isoquinoíina-5,10-diona e 9-cloro-6-(p-tolueno-sulfoniloxi)-benzo[g]isoquinolina-5,10-diona, obtida no exemplo 15a preparativo, em 2 mL de piridina anidra e adiciona-se 90,183 mL de uma solução 1M recém-preparada de N-metil-hidrazina em piridina. Depois de se agitar durante 3 horas à temperatura ambiente, concentra-se a mistura de reacção até à secura, adiciona-se-lhe 5 mL de água e 5 mL de uma solução saturada de NaH2P04 e depois extrai-se várias vezes com cloreto de metileno (50 mL). Seca-se sobre sulfato de sódio anidro as soluções orgânicas combinadas e remove-se o solvente sob pressão reduzida. Purifica-se o resíduo assim obtido por cromatografia em coluna através de gel de sílica (eluente: mistura de cloreto de metileno/acetato de etilo a 90/10 v/v (50 mL), depois a 75/25 (50 mL), a seguir a 60/40 (50 mL) ♦ e finalmente a 40/60 (50 mL)) para se obter 5-(p-tolueno-sulfoniloxi)-2-metil-isoquino[8,7,6--cd]indazol-6(2H)-ona. RMN-1!! (CDCI3): 2,42 (s, 3H); 4,25 (s, 3H); 7,33 (d, 2H); 7,53 (d, 1H); 7,63 (d, 1H); 7,95 (d, 2H); 8,07 (4 1H); 8,80 (4 1H); 9,50 (s, 1H).

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Exemplo 2 2-[2-(Drnietilamino)-etil]-5-(p-toIueno-sulfoniloxi)-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona

Prepara-se uma solução de 1,86 g de N-[2-(dimetilamino)-etil]-hidrazina (J. Med. Chem. 7, 493, 1964) em 6,0 mL de THF anidro e adiciona-se, sob uma atmosfera de azoto e durante 30 minutos, a uma quantidade de 2,4 g da mistura agitada a 9:1 de 9-flúor-6-(p-tolueno--sulfoniIoxi-benzo[gJisoquinoIina-5,10-diona e 9-cloro-6-(p-tolueno-suífoniloxi-benzo[g]-isoquinolina-5,10-diona, obtida no exemplo 15b preparativo, em 24 mL de THF contendo 1,10 mL de Ν,Ν-dnsopropilettiamina. Tem lugar uma reacção ligeiramente exotérmica, aumentando a temperatura da reacção desde 20°C até 25°C. Ao fim de 1 hora à temperatura ambiente, verte-se a mistura de reacção sobre 240 mL de água e depois agita-se a suspensão obtida durante 30 minutos. Separa-se o sólido por sucção, lava-se com água e seca-se a 40°C para se obter 1,44 g de 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-(p-tolueno-sulfoniloxi)-isoqumo[8,7,6-cd|-indazol-6(2H)-ona.

P.f.: 139°C-141°C RMN^H (CDC13): 2,35 (s, 6H); 2,45 (s, 3H); 2,95 (t, 2H); 4,65 (t, 2H); 7,35 (d, 2H); 7,52 (d, 1H); 7,80 (d, 1H); 7,95 (d, 2H); 8,10 (d, 1H); 8,80 (d, 1H); 9,55 (s, 1H).

Exemplo 3 2-[2-(N-terc-butoxicarbonilamino)-etil]-5-(p-tolueno-sulfoniloxi)-isoquino[8,7,6-cd]indazol- -6(2H)-ona

Prepara-se (2-N-terc-butoxicarbonilaminoetil)-hidrazina fazendo reagir N-t-butoxi-carbonil-2-cloro-etilamina com hidrazina em conformidade com um procedimento adaptado da obra J. Med. Chem. 7, 493, (1964). Prepara-se uma solução de 9,2 g de (2-N-terc- 5

-butoxicarbonilanunoetil)-hidrazina em 10 mL de THF anidro e adiciona-se, sob uma atmosfera de azoto e durante 30 minutos, a uma quantidade de 3,0 g da mistura agitada a 9:1 de 9-flúor-6-(p-tolueno-sulfoniloxi-benzo[g]isoquinolina-5,10-diona e 9-cloro-6-(p-tolueno--sulfoniloxi-benzo[g]isoquinolina-5,10-diona, obtida no exemplo 15b preparativo, em 25 mL de THF contendo 1,38 mL de Ν,Ν-diisopropiletilamina. Tem lugar uma reacção ligeiramente exotérmica, aumentando a temperatura da reacção desde 21°C até 24°C. Ao fim de 1 hora à temperatura ambiente, recupera-se por sucção o precipitado resultante, lava-se com 15 mL de uma mistura a 1/1 de THF/n-hexano e seca-se sob vácuo a 40°C para se obter 1,33 g de 2-[2-(N--terc-butoxicarbonilamino)-etil]-5-(p-tolueno-sulfoniloxi)-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona. P.fi: 206°C-208°C ΚΜΝ^Η (CDCls): 1,4 (s, 9H); 2,45 (s, 3H); 3,75 (q, 2H); 4,70 (t, 2H); 4,92 (lr, 1H); 7,35 (d, 2H); 7,50 (d, 1H); 7,75 (d, 1H); 7,95 (d, 2H); 8,09 (d, 1H); 8,78 (d, 1H); 9,50 (s, 1H).

Exemplo 4 2-[2-[(2-hidroxietil)-amino]-etil]-5-(p-tolueno-sulfoniloxi)-isoqumo[8,7,6-cd]mdazol-6(2H)-ona Prepara-se uma solução de 0,179 g de N-[2-[(2-hidroxietilamino)-etil]]-hidrazina (J. Het Chem, 26,85, (1989)) em 0,5 mL de etanol absoluto e adíciona-se gota a gota a uma solução agitada constituída por 0,200 g da mistura a 9:1 de 9-flúor-6-(p-tolueno-sulfoniloxi-benzo[g]-isoquinolina-5,10-diona e 9-cIoro-6-(p-tolueno-sulfoniloxi-benzo[g]isoquinolina-5,10-diona, obtida no exemplo 15b preparativo, em 2,0 mL de THF contendo 0,073 mL de trietilamina. Depois de se agitar durante 2 horas à temperatura ambiente, acrescenta-se nova quantidade de 0,179 g de N-[2-[(2-hidroxietilamino)-etil]]-hidrazina em 0,5 mL de etanol absoluto e 59

decorridas mais duas horas concentra-se a mistura de reacção para um volume de aproxima-damente 1 mL. Junta-se 20 mL de água e mantém-se a mistura sob agitação à temperatura ambiente de um dia para o outro. Recolhe-se o precipitado por filtração por sucção, seca-se sob vácuo a 40°C e finalmente amassa-se com acetato de etilo em ebulição para se obter 0,060 g de 2--[2-[(2-hidroxietil)-amino]-etil]-5-(p-tolueno-sulfoniloxi)-isoquino[8,7,6-cd]indazoI-6(2H)-ona. P.fi: 131°C-133°C RMN-JH (DMSO-dô/DaO): 2,45 (s, 3H); 2,62 (t, 2H); 3,13 (t, 2H); 3,40 (t, 2H); 4,65 (ζ 2H); 7,25 (d, 1H); 7,40 (d, 2H); 7,75 (d, 2H); 7,95 (d, 1H); 8,15 (d, 1H); 8,80 (d, 1H); 9,40 (s, 1H).

Exemplo 5

Preparação de 2-(aminoalquil)-5-(p-tolueno-sulfoniloxi)-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-onas.

Utilizando o procedimento descrito nos exemplos 1 a 4, obtém-se os compostos a seguir indicados fazendo reagir as misturas de 9-flúor-6-(p-tolueno- sulfoniloxi-benzo [g] isoquinol ina--5,10-diona e 9-cloro-6-(p-tolueno-sulfoniloxi-benzo[g]isoquinoIina-5,10-diona, obtidas no exemplo 15 preparativo, com uma hidrazina substituída seleccionada entre o conjunto constituído por N-[2-(dietilamino)-etfi]-hidrazina [J. Med. Chem., 7, 493, (1964)], N-[3-(dimetilamino)--propil]-hidrazina [J. Het. Chem., 23,1491, (1986)], N-(2-aminoetil)-hidrazina [J. Het Chem., 23, 1491, (1986)],, N-[2-(metdammo)-etil]-hidrazina, N-(2-hidroxietil)-hidrazina, N-(3-aminopropiI)--hidrazina [J. Het. Chem., 23,1491, (1986)]: 2-[2-(dietilamino)-etil]-5-(p-tohieno-sulfomIoxi)-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona; 2-[3-(dimetilamino)-propil]-5-(p-tohieno-sulfoniloxi)-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona; 2-[2-(amino)-etil]-5-(p-tolueno-sulfoniloxi)-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona; 2-[2-(metilamino)-etil]-5-(p-tolueno-suIfoniloxi)-isoquiiio[8,7,6-cd]mdazol-6(2H)-ona; 2-[3-(amino)-propil]-5-(p-tolueno-sulfoniloxi)-isoquino[8,7;,6-cd]indazol-6(2H)-ona; 2-[2-(hidroxi)-etil]-5-(p-tolueno-siiIfomloxi)-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona, p.f. 211°C--213°C.

Exemplo 6 2-(Aminoalquil)-5-(p-tolueno-sulfomloxi)-isoqumo[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-onas

Utilizando o procedimento descrito nos exemplos 1 a 4, obtém-se os compostos a seguir indicados fazendo reagir as misturas de 6-flúor-9-(p-tolueno-sutfonfloxi-benzo[g]isoquinolina--5,10-diona e 6-cloro-9-(p-tolueno-sulfoniloxi-benzo[g]isoquinolina-5,10-diona, obtidas no exemplo 17 preparativo, com as hidrazinas substituídas adequadamente escolhidas: 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-(p-tolueno-suIfomloxi)-isoquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona, p.f. 168°C-170°C; 2-[2-(N-terc-butoxicarbonilamino)-etil]-5-(p-tolueno-sulfoniloxi)-isoquino[5,6,7-cd]indazol--6(2H)-ona, p.f. 169°C-171°C; 2-[2-[(2-Mdroxietil)-amino]-etil]-5-(p-tolueno-sulfoniloxi)-isoquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona, p.f. 83°C-85°C; 2-[2-(hidroxi)-etil]-5-(p-tolueno-sulfomloxi)-isoquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona.

Exemplo 7 5-Cloro-2-metilisoquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona

Prepara-se uma solução de 0,021 g de metil-hidrazina (0,76 M) em 0,6 mL de piridina e adiciona-se gota a gota durante dois minutos a uma solução agitada de 9-cloro-6- -fluorobenzo[g]isoquinolina-5, ΙΟ-diona, obtida no exemplo 20 preparativo, em 0,5 mL de piridina arrefecida em banho de gelo. Ao fim de 6 minutos aparece um precipitado amarelo na solução escura. Decorridas 1,3 horas reduz-se o volume da mistura de reacção para metade sob uma atmosfera suave de azoto e depois extingue-se com 5 g de gelo. Recolhe-se por filtração por sucção o precipitado amarelo ténue, lava-se com gelo fundente (2x1 mL) e seca-se sob vácuo. Purifica-se o sólido amarelo por cromatografia em coluna através de gel de sílica (eluente: mistura de clorofóimio/metanol a 96/4 v/v) para se obter 0,033 g (rendimento de 71%) de 5-cloro-2-metilisoqumo[5,6,7-cd]mdazol-6(2H)-ona com o aspecto de um sólido amarelo.

P.f : 244°C-245°C RMN-Ή (CDCfe): 4,25 (s, 3H); 7,59 (dd, 2H); 7,92 (d, 1H); 8,84 (d, 1H); 9,55 (s, 1H).

Exemplo 8

Preparação de 2-(aminoalquil)-5-cloroisoquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-onas

Utilizando o procedimento descrito no exemplo 7, obtém-se os compostos a seguir indicados fazendo reagir o composto 9-cloro-6-fluorobenzo[g]isoquinolina-5,10-diona, obtido no exemplo 20 preparativo, com uma hidrazina substituída seleccionada entre o conjunto constituído por (2-N-terc-butoxicarbonilaminoetil)-hidrazma, N-[2-(dimetilammo)-etil]-hidrazina [J. Med. Chem., 7, 493, (1964)], N-[2-(dietilammo)-etil]-Mdrazina [J. Med. Chem., 7, 493, (1964)], N-[2-[(2-hidroxietilamino)-etil]]-hidrazina [J. Het. Chem., 26, 85, (1989)], N-[3-(di-metilamino)-propil]-hidrazina [J. Het. Chem., 23, 1491, (1986)], N-(2-aimnoetil)-hidrazina [J. Het. Chem., 23, 1491, (1986)], N-[2-(metilamino)-etÍl]-hidrazina, N-(2-hidroxietil)-hidrazma, N-(3-aminopropil)-hidrazina [J. Het. Chem., 23, 1491, (1986)]: 62 2-[2-(N-terc-butoxicarbomlamino)-etd]-5-cloroisoquino[5,6,7-cd]indazoI-6(2H)-ona; p.f.: 226°C-228°C. RMN-1!! (CDC13 + CD3OD): 1,30 (s, 9H); 3,58 (t, 2H); 4,63 (t, 2H); 7,54 (d, 1H); 7,70 (d, 1H); 7,90 (dd, 1H); 8,70 (d, 1H); 9,40 (s, 1H). 2-[2-(dimetilamino)-etiI]-5-cloroisoqmno[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona; p.f.: 160°C-161°C. RMN-Ή (CDCI3): 2,32 (s, 6H); 2,95 (t, 2H); 4,65 (t, 2H); 7,60 (d, 1H); 7,69 (d, 1H); 8,00 (dd, 1H); 8,88 (d, 1H); 9,60 (s, 1H). 2-[2-(dietilaimno)-etil]-5-cloroisoquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona; 2-[2-(dietilaimno)-etil]-5-cloroisoquino[5,6,7-cd]mdazol-6(2H)-ona; 2-[2-[(2-hidroxietil)-amino]-etil]-5-cloroisoqiiino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona; p.f.: 148°C-152,5°C. RMN-’H (CDCI3 + CD3OD): 2,75 (t, 2H); 3,43 (t, 2H); 3,60 (t, 2H); 4,63 (t, 2H); 7,55 (d, 1H); 7,75 (d, 1H); 7,98 (dd, 1H); 8,73 (d, 1H); 9,40 (s, 1H). 2-[3-(dimetilanijno)-propil]-5-cloroisoqumo[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona; 2-[2-(amino)-etil]-5-cloroisoquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona; 2-[2-(metilanmio)-etil]-5-cloroisoqumo[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona; 2-[2-(hidroxi)-etil]-5-cloroisoquino[5,6,7-cd]iiidazol-6(2H)-ona; 2-[3-(amino)-etil]-5-cloroisoquino[5,6,7-cd3mdazol-6(2H)-ona.

Exemplo 9 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-(p-toIueno-sulfoiiiloxi)-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona-9-óxido Prepara-se lima solução de 0,805 g de N-[2-(dimetdaiimio)-etil]-hidrazina em 10,75 mL de THF e adiciona-se, sob uma atmosfera de azoto, a uma suspensão agitada de 1,075 g de 2-óxido de 9-flúor-6-(p-tolueno-sulfoniloxi)-benzo[g]ÍsoquÍnolÍna-5,10-diona, obtido no exemplo 21 preparativo, em 10,75 mL de THF. Depois de se agitar durante 2 horas aquece-se a mistura a 40°C durante 1 hora. Após o arrefecimento até à temperatura ambiente verte-se a mistura sobre 150 mL de água e agita-se a suspensão obtida durante 2 horas. Recupera-se por filtração o precipitado e deixa-se reciistalizar a partir de acetato de etilo/n-hexano para se obter 0,31 g de 2-[2-(dimetilamino)-etiI]-5-(p-tolueno-sulfoniIoxi)-isoquino[8,7,6-cd]mdazol-6(2H)-ona-9-óxido. p.f.: 212°C-214°C. ΚΜΝ-'Η (CDC13): 2,32 (s, 6H); 2,49 (s, 3H); 2,95 (t, 2H); 4,63 (í, 2H); 7,38 (d, 2H); 7,55 (d, 1H); 7,80 (d, 1H); 8,0 (d, 2H); 8,20 (m, 2H); 8,95 (d, 1H).

Exemplo 10

Utilizando o procedimento descrito no exemplo 9, prepara-se os compostos a seguir indicados fazendo reagir os benzo[g]isoquinolina-5,10-diona-2-óxidos, obtidos nos exemplos 21 e 22 preparativos, com as hidrazinas substituídas adequadamente escolhidas: 2-metil-5-(p-tolueno-sulfoniloxi)-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona-9-óxido; 2-[2-(N-terc-butoxicarbonilamino)-etil]-5-(p-tolueno-sulfomloxi)-isoquino[8,7,6-cd]mdazol--6(2H)-ona-9-óxido; 2-[2-[(2-hidroxietil)-amino]etil]-5-(p-tolueno-sulfoniloxi)-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona-9- -óxido; 64 64

2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-(p-tolueno-sulfoniloxi)-isoquino[5,6,7-cd]indazoI-6(2H)-ona-8- -óxido; 2-[2-(N-terc-butoxicarbonilamino)-etil]-5-(p4ohieno-sulfoniloxi)-isoquino[5,6,7-cd]indazol- -6(2H)-ona-8-óxido; 2-[2-[(2-hidroxietil)-amino]etil]-5-(p-tolueno-sulfoniloxi)-isoquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona-8- -óxido.

Exemplo 11 10-(p-Metoxibenziloxi)-5-cloro-2-metilisoquino[5,6,7-cd]mdazol-6(2H)-ona

Prepara-se uma solução de 0,015 g de metil-hidrazina em 0,6 mL de piridina, adiciona-se ao longo de um período de 2 minutos a uma solução de 0,055 g de 9-cloro-6-flúor-4-(p-metoxi-benziloxi)-benzo[g]isoqumolina-5,10-diona, composto obtido no exemplo 29 preparativo, em 0,5 mL de piridina à temperatura de 0°C e agita-se então a mistura durante 1 hora e 20 minutos. Remove-se a piridina fazendo passa através da mistura uma corrente lenta de azoto e coloca-se o resíduo resultante sob vácuo durante 2 horas. Purifica-se o resíduo por cromatografia radial (placa de gel de sílica de 2 mm), utilizando um gradiente de eluição em primeiro lugar de cloro-fórmio (100 mL), depois de 1% de metanol/99% de clorofórmio (75 mL) e fínalmente 2% de metanol/98% de clorofórmio (175 mL). Após a remoção dos últimos eluentes obtém-se 25 mg de 10-(p-metoxibenziloxi)-5-cloro-2-metilisoqumo[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona com o aspecto de um sólido amarelo brilhante, p.f.: 181°C-183°C. RMN-Ή (CDCls) δ 9,28 (s, 1H), 8,62 (s, 1H), 7,66 (d, Jhh = 8,3 Hz, 1H), 7,62 (d, Jhh = 8,4 Hz, 2H), 7,57 (d, Jhh = 8,3 Hz, 1H), 6,94 (d, Jhh = 8,4 Hz, 2H), 5,44 (s, 2H), 4,31 (s, 3H), 3,83 (s, 3H). 65 65

Exemplo 12 5-cloro-2-[2-(dimetilantino)-etil]-10-(p-metoribenziloxi)-isoqumo[5,6,7-<xl]indazol-6(2H)-ona

Prepara-se uma solução de 8,5 mg de N-[2-(dimetilamino)-etil3-hidrazina em 0,5 mL de piridina, adiciona-se a 13 mg de 9-cloro-6-flúor-4-(p-metoxibenziloxi)-benzo[g]isoquinoima--5,10-diona, obtida no exemplo 29 preparativo, ao longo de um período de 2 minutos, à temperatura de 0°C e sob uma atmosfera de azoto, e agita-se então a mistura durante 2 horas. Remove-se o excesso de piridina e alguma hidrazina em excesso sob uma corrente de azoto. Coloca-se o resíduo sob vácuo de um dia para o outro. Purifica-se o produto por cromatografia em camada espessa (gel de sílica, 10 cm por 20 cm), utilizando 4% de metanol/96% de diclorometano. Raspa-se do prato a principal banda amarela e extrai-se o composto amarelo com 25% de metanol/75% de diclorometano. A remoção do solvente proporciona 3 mg de 5--cloro-2-[2-(dimetilamino)-etil]-10-(p-metoxibenziloxi)-isoquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona com o aspecto de um sólido amorfo.

Exemplo 13

Utilizando o procedimento descrito no exemplo 12, prepara-se o composto a seguir indicado fazendo reagir o composto 9-cIoro-6-flúor-4-(p-metoxibenziloxi)-benzo|gjisoquinolina--5,10-diona, obtido no exemplo 29 preparativo, com as hidrazinas substituídas adequadamente escolhidas: 2-[2-(terc-butoxicarbonilamino)-etil]-5-cloro-10-(p-metoxibenziloxi)-isoquino[5,6,7- cd]indazol-6(2H)-ona. 66 66

Exemplo 14

Prepara-se os compostos a seguir indicados fazendo reagir um dos compostos 6-flúor--9-clorobenzo[g]quinolina-5,10-diona ou 6-cloro-9-fluorobenzo[g]quinolina-5,10-diona, obtidos no exemplo 12 preparativo, com a hidrazina substituída adequadamente escolhida: 2-metil-5-cloroquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona; 2-metil-5-cloroquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona; 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-cloroquino[8,7,6-cdlindazol-6(2H)-ona; 2-[2-(dimetiIamino)-etil]-5-cIoroquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona.

Exemplo 15

Prepara-se os compostos a seguir indicados fazendo reagir um dos compostos 9-flúor--6-(p-tolueno-sulfoniloxi)-benzo[g]ftalazma-5,10-diona ou 9-flúor-6-(p-tolueno-sulfoniloxi)--benzo[g]qumoxaIina-5,10-diona, obtidos no exemplo 30 preparativo, com as hidrazinas substituídas adequadamente escolhidas: 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-(p-tolueno-sulfomloxi)-ftalazino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona; 2-metil-5-(p-tolueno-sulfoniloxi)-ftalazmo[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona; 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-(p-tolueno-sulfoniloxi)-qumoxalmo[5,6,7-cd]mdazol-6(2H)-ona; 2-metil-5-(p-tolueno-sulfomloxi)-quinoxalino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona.

Exemplo 16

Prepara-se uma solução de 0,327 g de N-(terc-butoxicarbonil)-etilenodiamina (preparada de acordo com Synt. Comm., 20, 2559, (1990)) em 0,40 mL de piridina e adiciona-se, sob 67 uma atmosfera de azoto e ao longo de 2 minutos, a uma suspensão de 0,25 g de ou 6,9-di-fluoroben2X)[g]quinolina-5,10-dioaia, obtida no exemplo 12 preparativo, em 2,5 mL de piridina. Depois de se agitar à temperatura ambiente durante 18 horas, reparte-se a mistura purpúrea entre 50 mL de água e 100 mL de acetato de etilo. Lava-se a camada orgânica com 50 mL de água e 50 mL de salmoura e depois seca-se sobre sulfato de sódio. Por remoção do solvente obteve-se um resíduo purpúreo que foi purificado por cromatografia em coluna através de gel de sílica, efectuando-se a eluição em gradiente com misturas de diclorometano/éter terc-butil--metílico entre 85/15 e 75/25, seguindo-se a utilização de mistura de diclorometano/acetato de etilo entre 60/40 e 20/80.

Obtém-se 0,0115 g de 6-[[2-(N-terc-butoricaibomlammo)-etil]-amino]-9-fluorobenzo[g]-quinolina-5,10-diona e 0,173 g de 9-[[2-(N-terc-butoxicarbomIamino)-etil]-amino]-6-fluoro-benzo[g]quinolina-5,10-diona com o aspecto de compostos amorfos puros.

Exemplo 17 9-Qoro-6-[(2-dimetilaminoetil)-amino]-4-(p-metoxibenziloxi)-benzo[g]isoquinolina-5,10-diona

Adiciona-se uma solução de 0,049 g de Ν,Ν-dimetiletilenodiaxmna em 0,4 mL de piridina a uma quantidade de 0,011 g do composto 9-cloro-6-flúor-4-(p-metoxibenziloxi)--benzo[g]isoquinolina-5,10-diona, obtido no exemplo 29 preparativo, e agitou-se a solução resultante sob uma atmosfera de azoto e à temperatura ambiente durante 1,75 horas. Remove-se o excesso de amina e de piridina sob uma corrente lenta de azoto. Coloca-se o resíduo sob vácuo durante 3 horas e purifica-se por cromatografia em coluna através de gel de sílica, efectuando a eluição com 1% a 2% de metanol em diclorometano. Por remoção dos solventes obteve-se 10 mg de 9^1oro^[(2Klimetilammc)etd)-ammo]-4-(p-metoxibenziloxi)-benzo[g]isoquinolina--5,10-diona com o aspecto de um sólido purpúreo. P.f.: 127°C-128°C; RMN^H (CDC13) δ 10,08 (m, 1H), 9,07 (s, 1H), 8,72 (s, 1H), 7,50 (m, 3H), 7,02 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 5,34 (s, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,42 (q, J = 6,3 Hz, 2H), 2,67 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 2,37 (s, 6H).

Exemplo 18 5-[[2-(dimetilammo)-etil]-amino]-2-metilisoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona

Adiciona-se de uma solução 1 M de N, N-dimetiletilenodiamina em 0,10 mL de piridina a uma suspensão agitada de 0,02 g de 2-metil-5-(p-tolueno-sulfoniloxi)-2-metil--isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona, obtida no exemplo 1, em 2 mL de piridina anidra. Depois de se agitar à temperatura ambiente durante 1 hora aquece-se a mistura de reacção à temperatura de 70°C durante 13 horas à medida que se vai adicionando quantidades adicionais de uma solução de N,N-dimetiletilenodiamina (0,1 mL; 0,05 mL; 0,05 mL) decorridas respectivamente 2, 4 e 11 horas. Remove-se a piridina e o excesso de Ν,Ν-dimetiletilenodiamina por destilação sob pressão reduzida e reparte-se o resíduo assim obtido entre 50 mL de CH2CI2 e 10 mL de salmoura a qual se adicionou 1 mL de uma solução saturada de NaHCCV Seca-se a solução orgânica sobre Na2S04 anidro e remove-se o solvente por destilação. Purifica-se o resíduo cor-de-laranja assim obtido por cromatografia em coluna através de gel de sílica (eluente: CHCls/MeOH a 95/5 (30 mL) seguindo-se CHCls/MeOH/NHíOH a 90/15/0,5 (50 mL)) para se obter 0,011 g de 2-metil-5-[[2-(dimetilamino)-etil]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)--ona com o aspecto de um sólido cor-de-laranja avermelhado. P.f.: 208°C-215°C (dec.). RMN-1!! (CDC13): 2,40 (s, 3H); 2,75 (t, 2H); 3,57 (q, 2H); 4,25 (s, 3H); 6,97 (d, 1H); 7,63 (d, 1H); 8,30 (dd, 1H); 8,79 (d, 1H); 9,30 (t lr, 1H); 9,62 (d, 1H).

Exemplo 19 2-[2-(Dnnetilammo)-etd]-5-[[2-(dimettiammo)-etti]-annno]-isoqumo[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona Prepara-se uma solução de 0,463 g de 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-(p-tolueno-sulfoniloxi)--isoquino[8,7,6-cdjindazol-6(2H)-ona, obtida no exemplo 2, e 0,80 mL de 2-(dimetilamino)--etilamina em 4,63 mL de piridina anidra e aquece-se à temperatura de 80°C durante 1 hora e 30 minutos sob uma atmosfera de azoto. Depois concentra-se a solução até à secura e reparte--se o resíduo escuro assim obtido entre 30 mL de salmoura e acetato de etilo (4 x 25 mL). Seca-se sobre Na2S04 as soluções orgânicas combinadas e concentra-se para um volume de aproxima-damente 3 mL. Depois de se adicionar 12 mL de n-hexano e de se agitar durante 1 hora, recolhe--se o precipitado por sucção e seca-se à temperatura de 40°C sob vácuo para se obter 0,23 g de 2--[2-(dmettiammo)-etil]-5-[[2-(dimetilammo)-etd]-armno]-isoqumo[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona. P.f.: 150°C-152°C (dec.). (CDC13): 2,32 (s, 6H); 2,40 (s, 6H); 2,70 (t, 2H); 2,95 (t, 2H); 3,60 (q, 2H); 4,65 (t, 2H); 6,98 (d, 1H); 7,70 (d, 1H); 8,30 (d, 1H); 8,80 (d, 1H); 9,30 (Ir, 1H); 9,65 (s, 1H).

Exemplo 20 2-[2-(N-terc-butoxicarbonUanmo)-etil]-5-[[2-(N-terc-butoxicarbonnamino)-etiíj-amino]-isoqumo- [8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona

Prepara-se uma suspensão de 0,535 g de 2-[2-(N-terc-butoxicarbonilamino)-etil]-5-(p--tolueno-sulfoniloxi)-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona, obtida no exemplo 3, e 1,12 g de 70 N-(terc-butoxicarbonil)-etilenodiamina em 5,35 mL de piridina anidra e aquece-se à temperatura de 80°C. Mantém-se a solução escura resultante a esta temperatura durante 5 horas, depois concentra-se até à secura e reparte-se entre 30 mL de salmoura e acetato de etilo (2 x 25 mL). Separa-se por filtração por sucção o sólido vermelho alaranjado, que é insolúvel na mistura bifásica, e seca-se à temperatura de 40°C sob vácuo (0,43 g).

Purifica-se 0,60 g deste material por cromatografia em coluna (Si02; eluente: cloreto de metileno/metanol de 90/10 a 70/30 v/v). Reúne-se as fracções que contêm o produto e concentra-se para cerca de 20 mL, ocorrendo a separação de 0,45 g de 2-[2-(N-terc-butoxi-carbanilanuno)-etil]-5-[[2-(N-terc-butoxicarbomIamino)-etil]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]indazol--6(2H)-ona com o aspecto de cristais cor-de-laranja avermelhados. P.f.:211°C-213°C. RMN-^ (CDCVDMSO-d* a 9/1): 1,3 (s, 9H); 1,4 (s, 9H); 3,32 (q, 2H); 3,58 (m, 4H); 4,58 (t, 2H); 6,20 (Ir, 1H); 6,40 (lr, 1H); 7,05 (d, 1H); 7,70 (d, 1H); 8,15 (d, 1H); 8,65 (d, 1H); 9,20 (lr, 1H); 9,49 (s, 1H).

Exemplo 21 2-[2-(N-terc-butoxicarbonilamino)-etil]-5-[[(2-dimetilamino)-etil]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]- indazol-6(2H)-ona

Prepara-se uma suspensão de 0,056 g de 2-[2-(N-terc-butoxicarbonilamino)-etil]-5-(p--tolueno-sulfoniíoxi)-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona, obtida no exemplo 3, e 0,080 mL de 2-(dimetilamino)-etilamina em 0,50 mL de piridina anidra e aquece-se à temperatura de 80°C. Mantém-se a solução escura resultante a esta temperatura durante 1 hora e depois

deixa-se em repouso à temperatura ambiente de um dia para o outro. Separa-se por sucção o precipitado escuro assim obtido e purifica-se por (S1O2; eluente: cloreto de metileno/metanol a 9/0,5 v/v) para se obter 0,024 g de 2-[2-(N-terc-butoxicaibonilamino)-etil]-5-[[(2-dimetilamino)--etil]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona com 0 aspecto de um sólido cor-de-Iaranja avermelhado. P.f.: 225°C-227°C (a partir de cloreto de metileno). RMN-1!! (CDCI3): 1,43 (s, 9H); 2,40 (s, 6H); 2,7 (t, 2H); 3,55 (q, 2H); 3,78 (m, 2H); 4,65 (t, 2H); 5,23 (m lr, 1H); 6,87 (d, 1H); 7,62 (d, 1H)· 8,28 (dd, 1H); 8,76 (d, 1H); 9,6 (s, 1H).

Exemplo 22 isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-onas

Em conformidade com os procedimentos descritos nos exemplos 18 a 21 são preparados os compostos a seguir indicados, fazendo reagir o composto 2-[2-(dimetilainino)-etilJ-5-(p--tolueno-sulfoniloxi)-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ana, obtido no exemplo 2, 0 composto 2--[2-(N-terc-butoxicarbonilamino)-etil]-5-(p-toIueno-sulfoniloxi)-isoquino[8,7,6-cd]mdazol-6(2H)--ona, obtido no exemplo 3, ou o composto 2-[2-[(2-hidroxietil)-amino]-etil]-5-(p-tolueno--sulfoniloxi)-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona, obtido no exemplo 4, com a amina adequadamente seleccionada: 2-[2-[(2-hidroxietil)-amino]-etií]-5-[[2-[(2-hidroxietiI)-amino]-etil]-ammo]-ísoquino[8,7,6-cdJ- indazol-6(2H)-ona; RMN-'H (CDCI3): 3,25 (m, 6H); 3,61 (t, 4H); 3,71 (m, 4H); 3,98 (q, 2H); 4,65 (t, 2H); 5,31 (lr, 2H); 7,08 (d, 1H); 7,70 (d, 1H); 8,30 (d, 1H); 8,83 (d, 1H); 9,30 (lr, 1H); 9,69 (s, 1H). 2-[2-[(2-Mdroxiettí)-amino]-etil]-5-[[3-(amino)-propU]-ammo]-isoqumo[8,7,6-cd]indazol-6(2H)--ona; RMN^H (CDCI3): 2,05 (m, 2H); 3,18 (m, 4H); 3,58 (t, 2H); 3,65 (t, 2H); 3,78 (q, 2H); 4,62 (t, 2H); 5,20 (Ir, 3H); 7,01 (d, 1H); 7,69 (d, 1H); 8,30 (d, 1H); 8,85 (d, 1H); 9,15 (lr, 1H); 9,30 (t, 1H); 9,71 (s, 1H). 2-[2-[(2-hidroxietil)-amino]-etil]-5-[[2-(aniino)-etil]-ainino]-isoqumo[8,7,6-cd]indazol-6(2H)- -ona; RMN-Ή (CDCI3): 3,20 (m, 4H); 3,58 (t, 2H); 3,66 (t, 2H); 3,86 (q, 2H); 4,61 (t, 2H); 5,15 (lr, 3H); 7,12 (d, 1H); 7,69 (d, 1H); 8,30 (d, 1H); 8,85 (d, 1H); 9,15 (lr, 1H); 9,30 (t, 1H); 9,71 (s, 1H). 2-[2-[(2-hidroxietil)-ammo]-etil]-5-[[2-(metilamino)-etil]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]indazol- -6(2H)-ona; RMN-1!! (CDC13): 2,61 (s, 3H); 3,06 (t, 2H); 3,20 (t, 2H); 3,58 (t, 2H); 3,67 (t, 2H); 3,88 (q, 2H); 4,65 (t, 2H); 5,10 (t, 1H); 7,05 (d, 1H); 7,70 (d, 1H); 8,33 (d, 1H); 8,81 (d, 1H); 8,99 (lr, 2H); 9,35 (t, 1H); 9,66 (s, 1H). 2-[2-[(2-hidroxietil)-amino]-etil]-5-[[2-(dmietilamino)-etil]-aniino]-isoquino[8,7,6-cd]indazol- -6(2H)-ona; ΙΙΜΝ-'Η (CDC13): 2,42 (s, 6H); 2,75 (t, 2H); 3,18 (t, 2H); 3,58 (q, 2H); 3,63 (t, 2H); 3,68 (t, 2H); 4,61 (t, 2H); 5,15 (t, 1H); 6,99(d, 1H); 7,66 (d, 1H); 8,31 (d, 1H); 8,80 (d, 1H); 9,11 (lr, 2-[2-[(2-MdroxietU)-amino]-etil]-5-[[2-(N-terc-butoxicarbonilamino)-etil]-ariiino]-isoquino- [8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona; RMN-‘H (CDC13 + CD3OD): 1,40 (s, 9H); 3,31 (m, 4H); 3,52 (q, 2H); 3,63 (t, 2H); 3,85 (t, 2H); 4,71 (t, 2H); 7,03 (d, 1H); 7,70 (d, 1H); 8,21 (dd, 1H); 8,76 (d, 1H); 9,61 (s, 1H). 2-[2-(N-terc-butoxicarbomlamino)--etil]-5-[[2-[(2-bidroxietil)-ammo]-etil]-amino]-isoquino- [8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona; RMN-1!! (CDCI3): 1,45 (s, 9H); 2,95 (t, 2H); 3,14 (t, 2H); 3,60 (q, 2H); 3,80 (m, 4H); 4,63 (t, 2H); 5,40 (m, 1H; permutável com D20); 6,85 (d, 1H); 7,58 (d, 1H); 8,15 (dd, 1H); 8,65 (d, 1H); 9,42 (t lr, 1H, permutável com D20); 9,52 (s, 1H). 2-[2-(dimetilainino)-etil]-5-[[2-[(2-hidroxietií)-ammo]-etil]-ammo]-isoquino[8,7,6-cd]mda2oI- -6(2H)-ona; p.f.: 156°C-157°C. RMN^H (CDCI3): 2,30 (s, 6H);2,91 (m, 4H); 3,08 (t, 2H); 3,60 (t, 2H); 3,75 (m, 2H); 4,60 (1, 2H); 6,90 (d, 1H); 7,60 (d, 1H); 8,25 (dd, 1H); 8,75 (d, 1H); 9,45 (lr, 1H); 9,60 (s, 1H). 2-[2-(dmetilamino)-etil]-5-[[2-(ammo)-etd]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona; RMN-‘H (CDCI3 + CD3OD): 2,30 (s, 6H); 2,95 (t, 2H); 3,13 (t, 2H); 3,65 (t, 2H); 4,58 (t, 2H); 7,04 (d, 1H); 7,70 (d, 1H); 8,18 (dd, 1H); 8,66 (d, 1H); 9,51 (s, 1H). 2-[2-(N-terc-butoxicarborrQamino)-etil]-5-[[2-(N-terc-butoxicarbomI-N-metiIainino)-etil]- -amino]-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona; ΙΙΜΝ-'Η (CDC13): 1,45 (s, 9H); 1,49 (s, 9H); 2,97 (s, 3H); 3,68 (m, 6H); 4,64 (t, 2H); 5,19 (lr, 1H); 7,05 (m, 1H); 7,68 (d, 1H); 8,22 (d, 1H); 8,75 (d, 1H); 9,25 (t, 1H); 9,60 (s, 1H). 74 2-[2-(dimetilamino)-e1il3-5-[[2-(tódroxi)-etil]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]mdazol-6(2H)-ona; 2-[2-[(2-hidroxietil)-airmo]-etil]-5-[[2-(N-terc-butoxicarbomI-N-metilammo)-etií]-amino]- -isoqumo[8,7,6-cd]mdazol-6(2H)-ona; RMN-!H (CDC13): 1,49 (s, 9H); 2,85 (t, 2H); 2,94 (s, 3H); 3,30 (t, 2H); 3,61 (m, 2H); 4,66 (t, 2H); 7,09 (m, 1H); 7,70 (d, 1H); 8,27 (d, 1H); 8,80 (d, 1H); 9,29 (t, 1H); 9,64 (s, 1H). 2-[2^dimetdamino)-^]-5-[[3^dimetdamino)-piOpil]-aniino]-isoquiiio[8,7,6-cd]indazol-6(2H)- -ona; RMN-1!! (CDCI3): 1,98 (m, 2H); 2,28 (s, 6H); 2,33 (s, 6H); 2,48 (t, 2H); 2,93 (t, 2H); 3,58 (q, 2H); 4,65 (t, 2H); 7,08 (d, 1H); 7,72 (d, 1H); 8,31 (d, 1H); 8,80 (d, 1H); 9,29 (t, 1H); 9,69 (s, 1H). 2-[2^dimetdamino)^til]-5-[[2-(4’-morfolmil)-etil]-amino]-isoqumo[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona; RMN^H (CDCI3): 2,35 (s, 6H); 2,60 (m, 4H); 2,80 (t, 2H); 2,95 (t, 2H); 3,61 (q, 2H); 3,83 (m, 4H); 4,65 (t, 2H); 7,01 (d, 1H); 7,74 (d, 1H); 8,34 (d, 1H); 8,81 (d, 1H); 9,37 (t, 1H); 9,67 (s, 1H). 242^dimetdaimno)-etd]-5-[[2-(dietilamino)-etil]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]mdazol-6(2H)-ona; RMN^H (CDCI3): 1,12 (t, 6H); 2,35 (s, 6H); 2,67 (q, 4H); 2,86 (t, 2H); 2,95 (t, 2H); 3,56 (q, 2H); 4,64 (t, 2H); 7,02 (d, 1H); 7,74 (d, 1H); 8,34 (d, 1H); 8,80 (4 1H); 9,33 (Ir, 1H); 9,67 (s, 1H). 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-[[3-(amino)-propil]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]mdazol-6(2H)-ona; RMN-‘H (CDCI3): 1,86 (m, 2H); 2,34 (s, 6H); 2,96 (m, 4H); 3,61 (q, 2H); 4,65 (t, 2H); 7,05 (d, 1H); 7,74 (d, 1H); 8,31 (d, 1H); 8,81 (d, 1H); 9,34 (t, 1H); 9,69 (s, 1H). 75

2-[2-(tódroxi)-etil]-5-[[2-(dimetilamno)-etil]-ammo]-isoqumo[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona; 2-[2-(Mdroxi)-etd]-5-[[2-(N-terc-butoxicarbondairLmo)-etil]-arnino]-isoqumo[8,7,6-cd]mdazol- -6(2H)-ona; p.f.: 178°C-180°C; 2-[2-(hidroxi)-etil]-5-[[2-(amino)-etil]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona; 2-[3-(dimetdamino)-propil]-5-[[2-(dimetdamino)-etil]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]mdazol- -6(2H)-ona; 2-[2-(dimetdamino)-etil]-5-[[2-( 1 ’-imidazolil)-etd]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]indazoI-6(2H)-ona; 2-[2-(dimetdamino)-etil]-5-[[2-[N-bis(2-hidroxie1il)-amino]-etil]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]-indazol-6(2H)-ona; 2-[2-(N-terc-butoxicarbonilamino)-etrt]-5-[[2-|N-bis(2-Mdroxietil)-amino]-etil]-amino]-isoqiiino- [8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona; 2-[2-(dimetilamino)-etíl]-5-[[2-(r-piperidinil)-etd]-amino]-isoqumo[8,7,6-cd]mdazol-6(2H)- -ona; 2-[2-(dimetilarnino)-etd]-5-[[2-(r-piperaziiiil)-etil]-aimno]-isoquino[8,7,6-cd]mdazol-6(2H)- -ona; 2-[2-(N-terc-butoxicarbonilainino)-etd]-5-[[2-(4,-morfolinil)-etil]-aimno]-isoquino[8,7,6-cd]- indazol-6(2H)-ona.

Exemplo 23 5-[[2-(Dimetilamino)-etil]-amino]-2-metilisoquino[5,6,7-cd]mdazol-6(2H)-ona

Adiciona-se 0,013 g de 5-cloro-2-metilisoquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona, obtida no exemplo 7, a 0,34 mL de 2-(dimetilamino)-etilamina Aquece-se a mistura amarela rapidamente 76, 76,

até ao refluxo durante 1 hora. Remove-se o excesso de diamina da solução cor-de-laranja, utilizando uma corrente suave de azoto. Purifica-se a mistura cor-de-laranja assim obtida por cromatografia em coluna através de gel de sílica, efectuando a eluição em gradiente (1% de metanol/clorofórmio (25 mL), 2% de metanol/clorofórmio (25 mL), 4% de metanol/clorofórmio (25 mL), 8% de metanol/clorofórmio (25 mL), 12% de metanol/clorofórmio (25 mL), 16% de metanol/clorofórmio (25 mL), 24% de metanol/clorofórmio (50 mL)) para se obter 0,010 g de 5-[[2-(dimetiIamino)-etil]-amino]-2-metibsoquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona com o aspecto de um sólido cor-de-laranja avermelhado. P.fi: 212°C-216°. RMN-1!! (CDC13): 2,36 (s, 6H); 2,69 (t, 2H); 3,54 (q, 2H); 4,21 (s, 3H); 6,91 (d, 1H); 7,54 (d, 1H); 8,00 (d, 1H); 8,79 (d, 1H); 9,19 (Ir, 1H); 9,67 (s, 1H).

Exemplo 24 2-[2-(Dimetilamino)-etil]-5-[[2-(dimetilamino)-etil]-amino]-isoquino[5,6,7-cd]mdazol-6(2H)-ona Sob uma atmosfera de azoto, adiciona-se 1,79 mL de Ν,Ν-dimetiletilenodiamina a uma solução agitada de 0,539 g de 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-cIoroisoquino[5,6,7-cd]indazoI--6(2H)-ona, obtida no exemplo 8, em 6,80 mL de piridina e aquece-se a solução resultante à temperatura de 80°C durante 12 horas. Remove-se a piridina e o excesso de Ν,Ν-dimetiletilenodiamina por evaporação rotativa e purifica-se o resíduo assim obtido por cromatografia em coluna através de gel de sílica, efectuando a eluição em primeiro hgar com cloreto de metileno, depois com uma mistura de cloreto de metileno/metanol a 95/5 e fínalmente com uma mistura de cloreto de metileno/metanol/amónia concentrada desde 95/5/0,5 até 95/5/1 v/v/v. Reúne-se as fiacções que contêm o produto amarelo desejado e remove-se os solventes por evaporação 77 77

rotativa. Deixa-se o resíduo assim obtido cristalizar a partir de álcool diisopropílico para se obter 0,291 g de 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-[[2-(dimetilainmo)-etil]-aniino]-isoquino[5,6,7--cd]indazol-6(2H)-ona. P.f.: 110oC-lll° RMN-'H (CDC13): 2,31 (s, 6H); 2,38 (s, 6H); 2,71 (t, 2H); 2,92 (t, 2H); 3,55 (q, 2H); 4,65 (t, 2H); 7,01 (d, 1H); 7,69 (d, 1H); 8,10 (dd, 1H); 8,83 (d, 1H); 9,30 (tlr, 1H); 9,71 (s, 1H).

Exemplo 25 isoquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-onas

Em conformidade com os procedimentos descritos nos exemplos 23 ou 24 são preparados os compostos a seguir indicados, fazendo reagir um dos compostos 2-[2-(N-terc-butoxicarbonil-amino)-etil]-5-cloroisoquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona, 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-cloro-isoqumo[5,6,7-cd]mdazol-6(2H)-ona ou 2-[2-[(2-hidroxietil)-aniino]-etil]-5-cloroisoquino-[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona, obtidos no exemplo 8: 2-[2-(N-terc-butoxicarbonilamino)-etil]-5-[[2-(N-terc-butoxicarbonilamino)-etil]-arnino]-isoquino- [5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona; p.f.: 211°C-213°C. RMN-JH (CDCI3): 1,40 (s, 9H); 1,46 (s, 9H); 3,55 (q, 2H); 3,65 (q, 2H); 3,77 (q, 2H); 4,69 (t, 2H); 5,55 (Ir, 2H); 7,00 (d, 1H); 7,60 (d, 1H); 7,93 (dd, 1H); 8,70 (d, 1H); 9,10 (t Ir, 1H); 9,38 (s, 1H). 2-[2-(N-terc-butoxicarbonilamino)-etil]-5-[[2-(anaino)-etil]-amino]-isoqumo[5,6,7-cd]mdazol- 6(2H)-ona; 78 (reacção efectuada a 50°C, utilizando DMSO como solvente); p.f.: 221°C-222°C. RMN-1!! (CDC13): 1,43 (s, 9H); 3,13 (t, 2H); 3,578 (q, 2H); 3,75 (q, 2H); 3,67 (t, 2H); 5,05 (lr, 1H); 7,00 (d, 1H); 7,65 (d, 1H); 8,05 (dd, 1H); 8,60 (d, 1H); 9,30 (lr, 1H); 9,75 (s, 1H). 2-[2-(N4erc-butoxicarbonilamino)-etil]-5-[[2-[(2-hidroxietil)-amino]-etil]-amino)-isoquino- [5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona; RMN-'Η (CDCI3 + CD3OD): 1,48 (s, 9H); 3,25 (m, 4H); 3,74 (q, 2H); 3,80 (m, 4H); 4,68 (t, 2H); 7,01 (d, 1H); 7,72 /d, 1H); 8,09 (dd, 1H); 8,80 (d, 1H); 9,75 (s, 1H). 2-[2-(N-terc-butoxicarbonilan3Íno)-etn]-5-[[2-(dímetilamino)-etil]-aniino]-isoquino[5,6,7-cdJ- indazol-6(2H)-ona; RMN-’Η (CDCI3): 1,44 (s, 9H); 2,31 (s, 6H); 2,75 (t, 2H); 3,68 (q, 2H); 3,75 (q, 2H); 4,68 (t, 2H); 5,10 (m, Ir, H); 7,03 (d, 1H); 7,70 (d, 1H); 8,15 (dd, 1H); 8,85 (d, 1H); 9,33 (t lr, 1H); 9,71 (s, 1H). 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-[[2-[(2-hidroxietil)-anuno]-etil]-ammo]-isoquino[5,6,7-cdlmdazol- -6(2H)-ona; RMN-’Η (CDCI3 + CD3OD): 2,40 (s, 6H); 2,95 (í, 2H); 3,23 (m,k 4H); 3,82 (m, 4H); 4,70 (t, 2H); 7,05 (d, 1H); 7,70 (d, 1H); 8,13 (dd, 1H); 8,85 (d, 1H); 9,70 (s, 1H). 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-[[2-(amino)-etil]-amino]-isoquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona; RMN-!H (CDCI3): 2,39 (s, 6H); 2,95 (t, 2H); 3,15 (t, 2H); 3,68 (q, 2H); 4,68 (t, 2H); 7,00 (d, 79 2-[2-[(2-hidroxietil)-amino]-etí]-5-[[2-[(2-hidroxietii)-amino]-etil]-amino]-isoqiiino[5,6,7--cd]indazol-6(2H)-ona; (reacção efectuada a 52°C, utilizando DMSO como solvente); p.f.: 148°C-151°C. RMN^ (D20): 2,75 (m, 6H); 2,95 (m, 2H); 3,12 (m, 2H); 3,70 (m, 4H); 4,05 (m, 2H); 6,10 (d, 1H); 6,65 (d, 1H); 6,90 (d, 1H); 7,83 (s, 1H); 7,95 (d, 1H). 2-[2-[(2-hidroxietil)-amino]-etil]-5-[[2-(amino)-etil]-amino]-isoquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona; RMN-'H (CDCI3 + CD3OD): 2,97 (t, 2H); 3,30 (m, 4H); 3,68 (t, 2H); 3,85 (t, 2H); 4,66 (t, 2H); 7,00 (d, 1H); 7,69 (d, 1H); 8,10 (dd, 1H); 8,83 (d, 1H); 9,76 (s, 1H). 2-[2-[(2-hidroxietil)-amino]-etiI]-5-[[3-(amino)-propil]-amino]-isoquino[5,6,7-cd]indazol- -6(2H)-ona; RMN-JH (CDCI3 + CD3OD): 2,09 (m, 2H); 2,57 (t, 2H); 3,30 (m, 4H); 3,53 (t, 2H); 3,82 (t, 2H); 4,66 (t, 2H); 7,01 (d, 1H), 7,68 (d, 1H); 8,05 (dd, 1H); 8,80 (d, 1H); 9,68 (s, 1H). 2-[2-[(2-hidroxietil)-amino]-etil]-5-[[2-(metilanmio)-etil]-amino]-isoquino[5,6,7-cd]mdazol- -6(2H)-ona; ΚΜΝ-*Η (CDC13 + CD3OD): 2,48 (s, 3H); 2,83 (t, 2H); 3,28 (m, 4H); 3,58 (t, 2H); 3,83 (t, 2H); 4,67 (t, 2H); 7,01 (d, 1H); 7,68 (d, 1H); 8,03 (dd, 1H); 8,80 (d, 1H); 9,67 (s, 1H). 2-[2-[(2-Mdroxietil}-amino]-etil]-54[2-(dimetilarnino)-etil]-ammo]-isoquino[5,6,7-cd]indazol- -6(2H)-ona; RMN^H (CDCI3 + CD3OD): 2,31 (s, 6H); 2,72 (t, 2H); 3,33 (m, 4H); 3,57 (t, 2H); 3,87 (t, 2H); 4,71 (t, 2H); 7,00 (d, 1H); 7,71 (d, 1H); 8,09 (dd, 1H); 8,81 (d, 1H); 9,70 (s, 1H). 8<

Exemplo 27

Em conformidade com o procedimento descrito no exemplo 26, são preparados os compostos a seguir indicados, fazendo reagir os isoquinoindazol-N-óxidos obtidos no exemplo 10 com as aminas adequadamente seleccionadas. 2-metil-5-[[2-(dimetilamino)-etil]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona-9-óxido; 2-[2-(N-terc-butoxicarbonilamino)-etil]-5-[[2-(dimetiIammo)-etil]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]-indazol-6(2I I)-ona-9-óxido; 2-[2-(N-terc-butoxicarbonilamino)-etil]-5-[2-(aminoetil)-amino]-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)- -ona-9-óxido; 2-[2-(N-terc-butoxicarbonilamino)-etil]-5-[[2-(dimetilamino)-etd]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]- indazol-6(2H)-ona-9-óxido; 2-[2-(N-terc-butoxicarbonilamino)-etil]-5-[[2-(dimetilamino)-etil]-amino]-isoqumo[5,6,7-cd]- indazol-6(2H)-ona-8-óxido; 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-[[2-(amino)-etil]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona-9- -óxido; 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-[[2-(dimetilamino)-etiI]-ammo]-isoquino[5,6,7-cd]mdazol-6(2H)- -ona-8-óxido.

Exemplo 28 10-p-Metoxibenziloxi-5-[[2-(dimetilanaino)-etil]-amino]-2-metiiisoquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)- -ona

Prepara-se uma solução de 0,053 g de 10-(p-metoxibenziloxi)-5-cloro-2-metilisoquino-[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona, obtida no exemplo 11, e 0,115 g de N,N-dimetiletilenodiamina 81 81

em 0,5 mL de piridina e aquece-se à temperatura de 120°C durante 3,5 horas sob uma atmosfera de azoto. Remove-se o excesso de diamina e de piridina, utilizando uma corrente suave de azoto gasoso, e coloca-se o resíduo cor-de-laranja escuro resultante sob vácuo durante 3 horas. Purifica-se o material impuro por cromatografia radial (gel de sílica, espessura de 2 mm), efectuando a eluição em gradiente em primeiro lugar com 2% de metanol/98% de clorofórmio (100 mL) e depois misturas contendo entre 4% de metanol (75 mL) e 6% de metanol (60 mL). Após a remoção do eluente constituído por 4% de metanol/96% de clorofórmio, recupera-se 10 mg do material de partida. A remoção do eluente constituído por 6% de metanol/94% de clorofórmio proporciona 22 mg de 10-p-metoxibenziloxi-5-[[2-(dimetilamino)-etil]-ammo]-2--metUisoquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona sob a forma de produto puro. P.f. = 231°C-232°C; RMN-JH (CDC13) δ 9,42 (s, 1H), 9,35 (t, 1H), 8,55 (s, 1H), 7,66 (d, Jhh = 9,1 Hz, 1H), 7,61 (d, Jhh = 8,5 Hz, 2H), 7,0 (d, Jhh = 9,1 Hz, 1H), 6,93 (d, Jhh = 8,5 Hz, 2H), 5,45 (s, 2H); 4,31 (s, 3H), 3,82 (s, 3H), 3,56 (q, Jhh = 6,5 Hz, Jhh = 6,2 Hz, 2H), 2,71 (t, Jhh = 6,5 Hz, 2H), 2,37 (s, 6H).

Exemplo 29

Utilizando o procedimento descrito no exemplo 28, são preparados os compostos a seguir indicados, fazendo reagir os compostos 2-(substituído)-5-cIoro-10-(p-metoxibenziloxi)--isoquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-onas obtidos no exemplo 12 ou no exemplo 13 com a amina adequada: 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-[[2-(dimetilamino)-etd]-ammo]-10-(p-metoxibenzrioxi)-isoquino-[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona;

2-[2-(dimetilammo)-etiI]-5-[[2-(arnino)-etil]-ainino]-10-(p-metoxibenziloxi)-isoquinof5,6,7- -cd]indazol-6(2H)-ona; 2-[2^toc-butoxicarbonilamino)-etil]-5-[[2-(terc-biitoxicarbomlamiiio)-etil]-aiiuno]-10-(p-metoxi- benziloxi)-isoquino[5,6,7-cd]mdazol-6(2H)-ona.

Exemplo 30 2-(substituído)-5-[(alquil substituído)-amino]-flalazino[5,6,7-cd]mdazol-6(2H)-onas

Os compostos a seguir indicados são obtidos por reacção de um dos compostos 2-[2--(dimetilamino)-etil]-5-(p-toIueno-sulfomloxi)-ftalazino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona ou 2-metil-5--(p-tolueno-sulfoniloxi)-fíalazino[5,6,7-cd]inda2ol-6(2H)-ona, obtidos no exemplo 15, com N,N-dimetiletilenodiamina: 2-metil-5-[[2-(dimetilamino)-etil]-amino]-ftalazmo[5,6,7-cd]mdazol-6(2H)-ona; 2-[2^dimetíamino)^til]-5-[[2-(dimetilammo)-etil]-armno]-ítalazmo[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona.

Exemplo 31 2-(substituído)-5-[(alquilsubstituído)-aniino]-quinoxalino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-onas

Os compostos a seguir indicados são obtidos por reacção de um dos compostos 2-[2--(dimetilamino)-etil]-5-(p-tolueno-sulfomloxi)-quinoxalino[5,6í7-cd]indazol-6(2H)-ona ou 2--metil-5-(p-tolueno-sulfoniloxi)-quinoxalino[5,6,7-cdJindazol-6(2H)-ona, obtidos no exemplo 15, com N,N-dimetiletUenodiamina: 2-metd-5-[[2-(dimetilamino)-etil]-ammo]-quinoxalino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona; 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-[[2-(dimetilaniino)-etil]-amino]-quinoxalino[5,6,7-cd]indazol--6(2H)-ona. 8: c ff

Exemplo 32 2-(substituído)-5-[(alquil substituído)-amino]-quinoindazoí-6(2H)-onas

Os compostos a seguir indicados são obtidos por reacção dos compostos 2-(substituído)--5-cloroquinoindazol, obtidos no exemplo 14, com as aminas adequadamente seleccionadas: 2-metil-5-[[2-(dimetilamino)-etil]-amino]-quino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona; 2-metil-5-[[2-(dimetilamino)-etil]-amino]-quino[8,7,6-cd]indazoI-6(2H)-ona; 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-[[2-(dimetilamino)-etil]-amino]-quino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona; 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-[[2-(dimetilamino)-etil]-amino]-quino[5,6,7-cd]indazoi-6(2H)-ona.

Exemplo 33

Prepara-se uma solução de 40 mg de N-[2-(dimetílamino)-etil]-hidrazina em 0,2 mL de piridina anidra e adiciona-se, sob uma atmosfera de azoto, a uma solução constituída por 50 mg de 9-[[2-(N-terc-butoxicarbomlamino)-etil]-amino]-6-fluorobenzo[g]quinolina-5,10-diona, obtida no exemplo 16, em 0,70 mL de piridina. Depois de se agitar durante 5 horas à temperatura ambiente reparte-se a mistura entre 20 mL de diclorometano e 20 mL de água. Separa-se a camada orgânica, lava-se com água (2 x 30 mL), reextrai-se os produtos resultantes da lavagem com 5 mL de diclorometano e seca-se sobre sulfato de sódio as soluções orgânicas combinadas.

Após a concentração para um pequeno volume (1 mL), aplica-se a solução de d-iclorometano à parte de cima de uma coluna de cromatografia em gel de sílica. A eluição em gradiente com misturas de diclorometano/metanol/hidróxido de amónio concentrado desde 95/5/0,2 (100 mL) a 90/10/0,4 (100 mL) e 88/12/0,5 (100 mL) proporciona uma primeira 84 fracção que é submetida a uma segunda purificação por cromatografia em gel de sílica, efectuando-se a eluição em gradiente com misturas de 1,2-dimetoxietano/hidróxido de amónio concentrado entre 100/0,2 e 100/0,7. A remoção dos produtos da eluição contendo a banda cor-de-laranja avermelhada mais lenta proporciona um óleo castanho que é então repartido entre 7 mL de diclorometano e 7 mL de água. Lava-se a solução orgânica com água (2x7 mL) e seca-se sobre sulfato de sódio. Por remoção do solvente obtém-se 3 mg de 2-[2-(dimetiIamino)-etil]-5-[[2-(N-terc-butoxicarbonil-arnino)-etil]-ammo]-qumo[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona com o aspecto de um sólido amorfo cor-de-laranja avermelhado. RMN-*H (CDC13-TMS): 1,45 (s, 9H); 2,35 (s, 6H); 3,05 (t, 2H); 3,48 (m, 2H); 3,68 (m, 2H); 4,68 (t, 2H); 5,10 (t Ir, 1H); 7,10 (d, 1H); 7,50 (m, 1H); 7,70 (d, 1H); 8,75 (d, 1H); 8,95 (m, 2H); 9,20 (tlr, 1H).

Exemplo 34

Repetindo o procedimento descrito no exemplo 33 e utilizando o composto 6-[[2-(N--terc-butoxicarbonilamino)-etil]-amino]-9-fluorobenzo[g]quinolina-5,10-diona, obtido no exemplo 16, como material de partida na reacção com N-[2-(dimetUamino)-etil]-hidrazina obtém-se 2--[2-(dimetilamino)-etil]-5-[[2-(N-terc-butoxicaiboriiIamino)-etil]-arnino]-quino[8,7,6-cd]mdazol--6(2H)-ona,

Exemplo 35

Remoção do grupo de protecção t-butoxicarbonilo

Sob uma atmosfera de azoto adiciona-se uma solução etanólica de HC1 anidro (5N; 0,40 mL) gota a gota a uma suspensão agitada de 0,104 g de 2-[2-(N-terc-butoxicarbonilamino)- -etil]-5-[[2-(N-terc-butoxicarbonilanxino)-etil]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]iridazol-6(2H)-ona, obtida no exemplo 20, em 2,1 mL de etanol absoluto. Durante a adição do HCI etanólico observa-se a dissolução inicial do material de partida, seguindo-se a precipitação de um sólido vermelho escuro. Dissolve-se este sólido novamente em etanol absoluto e aquece-se a solução à temperatura de 40°C durante 2 horas e 30 minutos. Durante o aquecimento observa-se a formação gradual de um precipitado amarantino avermelhado. Após o arrefecimento até à temperatura ambiente adiciona-se 10 mL de éter dietílico e recolhe-se o precipitado por filtração por sucção sob uma atmosfera de azoto para se obter 0,070 g de tricloridrato de 2-[2--(amino)-etil]-5-[[2-(amino)-etil]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona. p.f: 247°C-250°C. RMN-1!! (D20): 3,40 (t, 2H); 3,70 (t, 2H); 3,95 (t, 2H); 4,87 (t, 2H); 7,05 (d, 1H); 7,78 (d, 1H); 8,04 (dd, 1H); 8,62 (d, 1H); 9,10 (s, 2H). UV (H20): máx (Eio/o) = 230 nm (650 cm); 240 nm (555 cm); 370 nm (244 cm); 591 nm (342 cm). Exemplo 36

De acordo com o procedimento descrito no exemplo 35 são preparados os compostos a seguir indicados, sob a forma dos seus sais tricloridrato, utilizando como materiais de partida os derivados de N-terc-butoxicarbonilo adequados: 2-[2-[(2-hidroxietil)-amino]-etfl]-5-[[2-(ammo)-etiI]-antino]-isoqumo[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona;

p.f>250°C RMN-fH (D20): 3,31 (1, 2H); 3,34 (t, 2H); 3,80 (t, 2H); 3,88 (t, 2H); 3,95 (t, 2H); 4,93 (t, 2H); 7,10 (d, 1H); 7,88 (d, 1H); 8,25 (dd, 1H); 8,69 (d, 1H); 9,28 (s, 1H). UV (H20): máx (E1%) = 236 nm (451 cm); 381 nm (187 cm); 508 nm (210 cm).

δ 242^anrno)-etãl]-5-[[2-[(2-Mdroxietil>amino]^]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona; RMN-Ή (D20): 3,28 (t, 2H); 3,31 (t, 2H); 3,85 (m, 4H); 4,90 (t, 2H); 7,03 (d, 1H); 7,70 (d, 1H); 8,35 (dd, 1H); 8,72 (d, 1H); 9,77 (s, 1H). UV (H20): máx (Ei%) = 236 nm (485); 382 nm (198 cm); 507 nm (228 cm). 2-[2-(ammo)-etil]-5-[[2^dimetdamino)-etil]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]mdazol-6(2H)-ona; p.f.: 224°C (dec.) RMN-!H (D20): 3,00 (s, 6H); 3,60 (t, 2H); 3,70 (t, 2H); 4,07 (t, 2H); 4,93 (t, 2H=; 7,20 (d, 1H); 7,95 (d, 1H); 8,43 (dd, 1H); 8,77 (d, 1H); 9,43 (s, 1H). UV (HCL 0, IN): máx (Ei%) = 236 nm (485 cm); 382 nm (205 cm); 507 nm (232 cm). 2-[2-(amino)-etil]-5-[[2-(amino)-etil]-amino]-isoquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona; p.£>260°C. RMN-]H (D20): 3,42 (1, 2H); 3,75 (t, 2H); 4,00 (t, 2H); 5,05 (t, 2H); 7,32 (d, 1H); 8,09 (d, 1H); 8,62 (d, 1H); 8,87 (d, 1H); 9,55 (s, 1H). UV (HC1 0,1N): máx (Eio/o) = 245 nm (622 cm); 275 nm (181 cm); 351 nm (258 cm); 472 nm (327 cm); 494 nm (353 cm). 2-[2-[(2-hidroxietil)-amino]-etil]-5-[[2-(metilamino)-etil]-amino]-isoqumo[8,7,6-cd]mdazol- 6(2H)-ona; UV (HC10,01N): máx (Eio/o) = 236 nm (495 cm); 381 nm (198 cm); 501 nm (223 cm). 2-[2-[(2-hidroxietU)-amino]-etil]-5-[[2-[(2-hidroxietil)-amino]-etil]-amino]-isoqumo[8,7,6- cd]indazol-6(2H)-ona; RMN^H (D20): 3,32 (m, 4H); 3,51 (t, 2H); 3,87 (m, 6H); 4,02 (t, 2H); 4,96 (t, 2H); 7,12 (d, 1H); 7,91 (d, 1H); 8,35 (d, 1H); 8,74 (d, 1H); 9,33 (s, 1H). UV (H20): max (Ei%) = 230 ran (489); 240 ran (424); 370 rnn (185 cm); 492 nm (258); 470 nm (251 cm). 2-[2-(amino)-etil]-5-[[2-(metilainino)-etil]-airmio]-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona; RMNJH (D20): 2,80 (s, 3H); 3,45 (t, 2H); 3,70 (t, 2H); 4,0 (t, 2H); 4,89 (t, 2H); 7,11 (d, 1H); 7,89 (d, 1H); 8,38 (d, 1H); 8,76 (d, 1H); 9,35 (s, 1H); UV (H20): máx (Ei%) = 230 nm (534 cm); 240 nm (458 cm); 368 nm (198 cm); 470 nm (274 cm); 491 nm (280 cm). 2-[2-(Mdroxi)-etiI]-5-[[2-(amino)-etil]-amino]-isoqumo[8,7,6-cd]mdazoI-6(2H)-ona (sal dicloridrato); 2-[2-(amino)-etil]-5-[[2-[N-bis(2-hidroxietiI)-amino]-etil]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]indazol- -6(2H)-ona; 2-[2-(amino)-etiI]-5-[[2-(dietilamino)-etil]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]mdazol-6(2H)-ona; 2-[2-(amino)-etil]-5-[[2-(4’-morfolinil)-etil]-aniino]-isoqiiino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona; 2-[2^amino)^]-5-[[2-[(2-Mdroxietd)-ammo]-etil]-amino]-isoquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona; 2-[2-(amino)-etd]-5-[[2-(dimetnamino)-etil]-amino]-isoquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona; 2-[2-aminoetd]-5-[[2^dimetdamino)-etil]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona-9-óxido; 2-[2-aminoetil]-5-[(2-ammoetil)-ammo]-isc)qumo[8,7,6-cd]mdazol-6(2H)-ona-9-óxido; 2-[2-aminoetd]-54[2-(dimetíamino)-etí]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona-9-óxido; 2-[2-aminoetil]-5-[[2-(dimetilamino)-etil]-aniino]-isoquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona-8-óxido; 88 2-[2-(dimetilamino)-etU]-5-[[2-(ammo)-etíl]-ammo]-quino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona; 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-[[2-(amino)-etil]-amino]-qumo[8,7,6-cd]mdazol-6(2H)-ona.

Exemplo 37

Remoção do grupo de protecção p-metoxibenzilo: 5-[[2-(dimetilamino)-etil]-ainino]-2-metil--10-hidroxi-isoquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona A uma mistura de 0,010 g de 10Ap-metoxibenziloxi)-5-[[2^dimetilammo)-etil]-armno]-2--metUisoquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona, obtida no exemplo 28, em 1 mL de diclorometano adiciona-se ácido trifluoroacético, após o que todo o sólido está em solução. Ao fim de 1 hora dilui-se a mistura com 3 mL de diclorometano e adiciona-se 5 mL de uma solução saturada de bicarbonato de sódio. Separa-se a camada de diclorometano e extrai-se a fase aquosa com diclorometano (3x8 mL). Seca-se os extractos sobre sulfato de magnésio e remove-se sob uma corrente lenta de azoto. Coloca-se o material sob vácuo durante 2 horas para se obter 5--[[2-(dimetilamino)-etil]-aniinoJ-2-metil-10-hidroxi-isoquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona com o aspecto de um sólido amorfo. ΚΜΝ^Η (CDC13) δ 9,35 (s, 1H); 9,15 (t, 1H); 8,60 (s, 1H); 7,61 (d, 1H); 6,95 (d, H); 4,25 (s, 3H); 3,55 (q, 2H); 2,75 (t, 2H); 2,38 (s, 6H).

Exemplo 38

Utilizando o procedimento descrito no exemplo 37 prepara-se os compostos a seguir indicados, utilizando como material de partida os derivados adequados de grupo 4-(p--metoxibenziloxi) obtidos no exemplo 29: 89

y 2-[2^dimetUamino)^til]-5-[[2^dimetilaniino)-etil]-amino]-10-liidroxi-isoqiiino[5,6,7-cd]indazol- -6(2H)-ona; 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-J[2-(lamino)-etilj-aminoJ-10-hidroxi-isoqumo[5,6,7-cd]inday:ol- -6(2H)-ona; 2-[2-(ammo)-etd]-5-[[2-(amino)-etil]-amino]-10-hidroxi-isoquino[5,6,7-cd]inda2»l-6(2H)-ona. Exemplo 39

Dimaleato de 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-[[2-(amino)-etil]-amiiio]-isoquino[8,7,6-cd]indazol--6(2H)-ona

Prepara-se uma solução de 0,030 g de ácido maleico em 0,4 mL de etanol absoluto e adiciona-se gota a gota a uma solução agitada de 0,030 g de 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-[[2--(amino)-etil]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona, obtida no exemplo 22, em 1,5 mL de etanol absoluto à temperatura de 50«C. Depois de se completar a adição, mantém-se a mistura de reacção à temperatura de 50°C durante 3 minutos e depois deixa-se arrefecer até à temperatura ambiente. Decorrida 1 hora filtra-se o material cristalino amarantino avermelhado que se separou, lava-se com etanol e seca-se sob vácuo a 40°C para se obter 0,029 g de dimaleato de 2-[2-(dimetiIamino)-etd]-5-[[2-(amino)-etil]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]indazol--6(2H)-ona. p.f.: 175°C-175,5°C. RMN-1!! (D20): 3,00 (s., 6H); 3,40 (t, 2H); 3,80 (t, 2H); 3,93 (1, 2H); 4,90 (1, 2H); 6,00 (s, 4H); 7,00 (d, 1H); 7,70 (d, 1H); 7,80 (d, 1H); 8,55 (d, 1H); 9,00 (s, 1H). UV (HC10, IN): máx (Ep/0) = 236 nm (436 cm); 382 nm (169 cm); 507 nm (190 cm).

Exemplo 40

De acordo com o procedimento descrito no exemplo 39 prepara-se os sais maleato a seguir indicados por salificação dos compostos isoquinoindazol-6(2H)-ona adequados com ácido maleico: dimaleato de 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-[[2-(dimetilammo)-etil]-ammo]-isoquino[8,7,6-cd]- indazol-6(2H)-ona p.f: 189°C-191°C. (DMSO-de): 2,88 (s, 12H); 3,37 (t, 2H); 3,70 (t, 2H); 3,95 (q, 2H); 5,01 (t, 2H); 6,00 (s, 4H); 7,38 (d, 1H); 8,20 (dd, 1H); 8,85 (d, 1H); 9,20 (tlr, 1H); 9,55 (s, 1H). UV (H20): máx (EI%) = 368 nm (154 cm); 469 nm (206 cm); 490 nm (211 cm). dimaleato de 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-[[2-(dimetilanmio)-etil]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]- indazol-6(2H)-ona. p.f.: 142°C-146°C. RMN-fH (D20): 3,00 (s., 6H); 3,05 (s, 6H); 3,60 (t, 2H); 3,92 (t, 2H); 4,08 (t, 2H); 5,07 (t, 2H); 6,15 (s, 4H); 7,20 (d, 1H); 7,95 (d, 1H); 8,20 (d, 1H); 8,75 (d, 1H); 9,30 (s, 1H). UV (H20): máx (Ei%) - 292 nm (108 cm); 352 nm (133 cm); 476 nm (215 cm).

dimaleato de 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-[[2-[(2-hidroxietil)-ammo]-etil]-amino]-isoquino-[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona p.f: 145°C ΙΙΜΝ-'Η (D20): 3,05 (s., 6H); 3,30 (m, 2H); 3,54 (t, 2H); 3,88 (m, 4H); 4,03 (t, 2H); 4,96 (t, 2H); 6,00 (s, 4H); 7,00 (d, 1H); 7,70 (d, 1H); 7,83 (dd, 1H); 8,57 (d, 1H); 9,05 (s, 1H). UV (H20): máx (Ei%) = 368 nm (1057 cm); 491 nm (210 cm). dimaleato de 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-[[3-(dimetilammo)-propi]]-amino]-isoquino[8,7,6--cd]indazol-6(2H)-ona. p.f.: 139°C-141°C. RMN-1]-! (D20): 2,24 (m, 2H); 2,94 (s, 6H); 3,00 (s, 6H); 3,35 (1, 2H); 3,67 (t, 2H); 3,83 (t, 2H); 4,87 (t, 2H); 6,14 (s, 4H); 6,99 (d, 1H); 7,73 (d, 1H); 7,91 (d, 1H); 8,63 (d, 1H); 9,10 (s, 1H); UV (H20): máx (Ei%) = 366 nm (145 cm); 474 um (201 cm); 499 nm (211 cm). dimaleato de 2-[2-(dmetilamino)-etil]-5-[[2-(4,-morfolinil)-etil]-ammo]-isoquino[8,7,6-cd]- indazol-6(2H)-ona. p.f.: 180°C-182°C. RMN^H (D20): 3,01 (s., 6H); 3,49 (m, 4H); 3,57 (t, 2H); 3,81 (t, 2H); 4,01 (m, 6H); 4,89 (t, 2H); 6,01 (s, 4H); 7,00 (d, 1H); 7,74 (d, 1H); 7,88 (d, 1H); 8,60 (d, 1H); 9,05 (s, 1H). UV (H20): máx (Ejo/e) = 367 nm (116 cm); 477 nm (173 cm); 500 nm (173 cm). dimaleato de 2-[2-(dimetilamino)-etiIJ-5-[[2-(dietiIarnino)-etil]-amino]-isoqiiino[8,7,6-cdJindazol- -6(2H)-ona p.f.: 144°C-145°C. RMN-1!! (D20): 1,31 (t, 6H); 3,00 (s, 6H); 3,35 (q, 4H); 3,55 (f 2H); 3,84 (f 2H); 4,01 (t, 2H); 4,93 (t, 2H); 6,07 (s, 4H); 7,03 (d, 1H); 7,78 (d, 1H); 7,95 (d, 1H); 8,63 (d, 1H); 9,11 (s, 1H). UV (H20): màx (E1%) = 368 nm (116 cm); 471 nm (168 cm); 491 nm (174 cm). dimaleato de 2-[2-(dimetdamino)-etil]-5-[[2-(metiIamino)-etiI]-amino]-isoqiimo[8?7,6-cd]- indazol-6(2H)-ona p.f.: 166°C-167°C. RMN-Ή (D20): 2,80 (s, 3H); 3,04 (s, 6H); 3,44 (t, 2H); 3,82 (t, 2H); 3,95 (t, 2H); 4,90 (t, 2H); 5,99 (s, 4H); 6,98 (d, 1H); 7,74 (d, 1H); 7,89 (d, 1H); 8,59 (d, 1H); 9,04 (s, 1PI); UV (H20): máx (E1%) = 367 nm (150 cm); 470 nm (198 cm); 491 nm (203 cm). dimaleato de 2-[2-(dimetiIamino)-etiI]-5-[[3-(amino)-propil]-amiiio]-isoqumo[8,7,6-cdJ- indazol-6(2H)-ona p.f.: 175°C. RMN^H (D20): 2,15 (m, 2H); 3,00 (s, 6H); 3,20 (t, 2H); 3,62 (t, 2H); 3,81 (t, 2H); 4,85 (t, 2H; D20 sobreposto); 6,09 (s, 4H); 6,94 (d, 1H); 7,68 (d, 1H); 7,82 (d, 1H); 8,59 (d, 1H); 9,02 (s,lH). UV (H20): máx (E1%) - 368 nm (156 cm); 475 nm (221 cm); 500 nm (234 cm). dimaleato de 2-[2-(hidroxi)-etil]-5-[[2-(dimetilamino)-etil]-amino]-isoqumo[8,7,6-cd]mdazol- -6(2H)-ona p.f.: 105°C-107°C. RMN-'H (D20): 3,00 (s, 6H); 3,48 (t, 2H); 3,82 (t, 2H); 4,0 (t, 2H); 4,32 (t, 2H); 6,09 (s, 2H); 6,62 (d, 1H); 7,28 (d, ÍH); 7,44 (d, 1H); 8,20 (d, 1H); 8,42 (s, 1H). 2-[2-[(2-tódroxietiI)-amino]etil]-5-[[2-[(2-liidroxietií)-aniino]etil]-ainino]-isoqumo[5,6,7-cd]- indazol-6(2H)-ona p.f.: 123°C-126°C (dec.); 93 maleato de 2-metd>5-[[2-(dimetíIamino)-etiI]-ammo]-isoqumo[8,7,6-cd]mdazol-6(2H)-ona-9--óxido; dimaleato de 2-[2-(dimetdamino)-etU]-5-[[2-(dimetdamino)-etd]-amiiio]-isoquino[8,7,6-cd]-indazol-6(2H)-ona-9-óxido; dimaleato de 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-[[2-(dimetilamino)-etil]-ainino]-isoqumo[5,6?7-cd]- mdazol-6(2H)-ona-8-óxido.

Lisboa, 9 de Julho de 2001 \

Ϊ269-063 LISBOA

Claims

Reivindicações Composto que satisfaz à fórmula estrutural (I) A O NH

(I) em que: pelo menos um dos símbolos X, Y, Z e T representa uma funcionalidade azoto (=N) ou N-óxido [=N(0)-] e os outros representam grupos seleccionados entre o conjunto constituído por =CH-, =C(-0-P)- ou =N-, desde que sejam satisfeitas as condições seguintes: no máximo, um dos símbolos X, Y, Z e T pode representar um grupo =C(-0-P)- ou =N(0)-; no máximo, dois dos símbolos X, Y, Z e T podem representar =N-; os símbolos X e T não podem representar um grupo =N(0)-; os símbolos Y e Z não podem representar um grupo =C(-0-P)-; os símbolos X e Z não podem representar simultaneamente =N-; os símbolos Y e T não podem representar simultaneamente =N-; o substituinte P é seleccionado entre o conjunto constituído por átomos de hidrogénio e grupos metilo, benzilo e 4-metoxibenziIo; os substituintes A e B são iguais ou diferentes e são seleccionados entre o conjunto constituído por grupos alquilo(Ci-Cio); grupos alquilo(C2-Cio) que possuem um ou dois />% 2 substituintes seleccionados entre o conjunto constituído por grupos de fórmula geral ORj e -NR2R3; grupos alquilo(CrCio) interrompidos por um ou dois átomos de oxigénio ou por um grupo de fórmula geral -NR4-, sendo os referidos grupos alquilo(C2-Ci0) facultativamente substituídos por um ou dois grupos hidroxi (OH) ou grupos de fórmula geral -NR2R3; 0 substituinte Rj é seleccionado entre o conjunto constituído por átomos de hidrogénio e grupos alquilo(Ci-C6) e alquilo(C2-C6), facultativamente substituído com grupos -NR2R3, e grupos de fórmula geral -S(02)R5; os substituintes R2 e R3 podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados entre o conjunto constituído por átomos de hidrogénio e grupos alquilo(Ci-Cio) e alquilo(C2-Cio), substituído com um ou dois grupos hidroxi (OH), ou então os substituintes R2 e R3, considerados em conjunto com 0 átomo de azoto ao qual estão ligados, formam um anel heterocíclico aromático ou não aromático, pentagonal ou hexagonal, o qual contém facultativamente outro heteroátomo seleccionado entre átomos de enxofre, oxigénio e azoto, facultativamente substituído com grupos hidroxi, metilo, amino e benzilo; o substituinte R* é seleccionado entre o conjunto constituído por átomos de hidrogénio e grupos alquilo(Ci-Cio), hidroxialquilo(C2-Cio) e alquilo(C2-Cio) substituído com grupos de fórmula geral -NR2R3; 0 substituinte R5 é seleccionado entre o conjunto constituído por grupos alquilo(CrCio), fenilo e fenilalquilo, sob a forma de bases livres e dos seus sais obtidos com ácidos farmaceuticamente aceitáveis, em que o termo “fenilo” designa os anéis fenilo que podem conter facultativamente substituintes seleccionados entre átomos de halogénio e grupos alquilo(Ci-C4), CF3, nitro, amino, acetilamino, formilamino, dimetilamino, dietilamino, hidroxi, metoxi e etoxi, 3 desde que sejam satisfeitas as condições seguintes: - no caso de o símbolo Y representar um átomo de azoto, então os símbolos X, Z e T não representam simultaneamente um grupo =CH-; - no caso de o símbolo Z representar um átomo de azoto, então os símbolos X, Y e T não representam simultaneamente um grupo =CH-; - no caso de o símbolo Z representar um átomo de azoto, então os símbolos T e Y representam simultaneamente um grupo =CH- e o símbolo X não representa um grupo =C(-OH)-.
2. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o referido anel heterocíclico é seleccionado entre o conjunto constituído por grupos 1-imidazol, 4-hidroxi-l-imidazol, 2-imino-l(3H)-imidazol, 1-pirrolilo, 1-tetra-hidro-pirrolilo, 1-pirazolilo, 4-morfolinilo, 1-piperidinilo, 1-piperazinilo, l-(4-metil)-piperazinilo e l-(4-ben2ãl)-piperazinilo.
3. Composto de acordo com a reivindicação 1, o qual é seleccionado entre o conjunto constituído por: (60) 2-meUl-5-[[2^dimetdamino)-eti]]-amino]-l 0-tódroxusoqumo[5,6,7-cd]indazol--6(2H)-ona; (61) 2-[2-aminoetil]-5-[[2-(dimetilamino)-e1il]-amino]-10-hidroxiisoquino[5,6,7-cd]-indazol-6(2H)-ona; (62) 2-[2^dimetilamino)-etil]-5-[[2^dimetdamino)-etil]-amino]-10-hidroxiisoquino-[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona; (63) 2-[2-ammoetil]-5-[(2-aminoetti)-ammo]-10-hidroxiisoquino[5,6,7-cd]indazol- -6(2H)-ona; 4 (64) 2-[2-aminoetil]-5-[[2^dimetilaiTiino)-etil]-amino]-l()-hidroxiisc)qumo[5>6,7-cd]-indazol-6(2H)-ona; (65) 2-metU-5-[[2^dimetilarnino)-etil]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]in(Íazol-6(2H)-ona-9--óxido; (66) 2-[2-aminoetil]-5-[[2-(dimetilamino)-etil]-amino]-isoqumo[8,7,6-cd]indazol-6(2H)--ona-9-óxido; (67) 2-[2-(dimetUamino)-etil]-5-[[2-(dimetilammo)-etil]-amino]-isoqumo[8,756-cd]-mdazoI-6(2H)-ona-9-óxido; (68) 2-[2-aminoetil]-5-[(2-aminoetil)-amino]-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-ona-9--óxido; (69) 2-[2-aminoetil]-5-[[2-(dimetilamino)-etd]-amino]-isoquino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)--ona-9-óxido; (70) 2-metil-5-[[2-(dimetilaimno)-etil]-amino]-isoqumo[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona-8--óxido; (71) 2-[2-aminoetd]-5-[[2-(dimetdamino)-etiI]-amino]-isoquino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)--ona-8-óxido; (72) 2-[2-(dimetilamino)-etU]-5-[[2-(dimetilainino)-etil]-armno]-isoquino[5,6s7-cd]-indazoI-6(2H)-ona-8-óxido; (73) 2-metd-5-[[2-(dimetdainino)-etil]-ainmo]-quino[8,7,6-cd]mdazol-6(2H)-ona; (74) 2-[2-aminoetd]-5-[[2-(dimetílaniino)-etilJ-amino]-qiimo[8,7,6-cdJindazol-6(2H)--ona; (75) 2-[2-(dimetilamino)-etil]-5-[[2-(dimetilamino)-etil]-aiiiino]-qumo[8,7,6-cd]mdazoI- -6(2H)-ona; (76) 2-[2-aminoetil]-5-[(2-aminoetil)-ammo]-qumo[8,7J6-cd]indazol-6(2H)-ona; (77) 2-[2-aminoetd]-5-[[2-(metdamino)-etd]-amino]-qumo[8J,6-cd]mdazol-6(2H)-ona; (78) 2-metil-5-[[2-(dimetilamino)-etil]-amino]-quino[5,6,7-cd]mdazol-6(2H)-ona; (79) 2-[2-aminoetd]-5-[[2-(dimetdamino)-etil]-amino]-quino[5,6,7-cd]mdazol-6(2H)--ona; (80) 2-[2^dimetílamino)-etil3-5-[[2-(dimetilainmo)-^til]-ainino]-quino[5,6,7-cd]indazol--6(2H)-ona; (81) 2-[2-aminoetií]-5-[(2-aminoetiI)-amino]-qmno[5,6,7-cd]indazoí-6(2H)-ona; (82) 2-[2-aminoetil]-5-[[2-(dimetilamino)-ctil]-amino]-quino[5,6>7-cd]indazol-6(2H)--ona; (83) 2-metil-5-[[2-(dimetilammo)-etil]-amino]-quinoxalino[5,6,7-cdlindazol-6(2H)-ona; (84) 2-[2-aminoetilJ-5-[[2-(dimetilamino)-etiIJ-aininoj-quinoxalino[5,6,7-cd]indazoI- -6(2H)-ona; (85) 2-[2-(dimetdamino)-etil]-5-[[2-(dimetiIaniino)-etil]-aniino]-quinoxaIino[5,6,7-cd]-indazol-6(2I I)-ona; (86) 2-[2-aminoetil]-5-[(2-aminoetiI)-amino]-quinoxalino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona; (87) 2-[2-aminoetil]-5-[[2-(metilamino)-etÍl]-amino]-quinoxalino[5,6,7-cd]indazol--6(2H)-ona; (88) 2-metil-5-[[2-(dimetilanrino)-e1d]-amino]-ftalazino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-ona; (89) 2-[2-aininoetil]-5-[[2-(dimetilaraino)-€tiI]-ammo]-ftalazmo[5,6,7-cd]indazol-6(2H)--ona; (90) 2-[2-(dimetdammo)-etil]-5-[[2-(dimetilaimno)-et!ÍI]-amino]-flaJazino[5,6,7-cd]-indazol-6(2H)-ona;

(91) 2-[2-amiiioetil]-5-[(2-aminoetil)-amino]-fíaIazino[5,6,7-c<l]indazol-6(2H}-ona.
4. Composição farmacêutica adequada para o tratamento de tumores num paciente, a qual contém um composto de acordo com a reivindicação 1 e um diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável.
5. Compostos de fórmula estrutural (I) de acordo com a reivindicação 1 utilizáveis para o tratamento de tumores.
6. Processo para a síntese de um composto de acordo com a reivindicação 1, o qual compreende os passos que consistem em a) fazer reagir compostos de fórmula estrutural (ΠΙ):

(III) em que os símbolos X, Y, Z e T possuem as significações definidas na reivindicação 1, o substituinte U é seleccionado entre o conjunto constituído por átomos de flúor e cloro e grupos OTs (designando o termo OTs o grupo p-tolueno-sulfoniloxi), o símbolo W representa um átomo de cloro ou de flúor, desde que os símbolos UeW não representem simultaneamente um átomo de cloro, com umaMdrazina de fórmula estrutural (IV): H2N-NH-B’ (IV) em que o símbolo B’ possui as mesmas significações atribuídas ao símbolo B na reivindicação 1 ou então o símbolo B’ representa um grupo que pode ser convertido num 7 grupo B por remoção dos grupos protectores das aminas primárias ou secundárias e dos grupos hidroxi facultativamente presentes em B\ para se obter um composto de fórmula estrutural (H): 7

b) fazer reagir o composto de fórmula estrutural (II) com um composto de fórmula estrutural (V) H2N-A’ (V) em que o símbolo A’ possui as mesmas significações atribuídas ao símbolo A na reivindicação 1 ou então o símbolo A5 representa um grupo que pode ser convertido num grupo A por remoção dos grupos protectores das aminas primárias ou secundárias ou dos grupos hidroxi facultativamente presentes em A’, para se obter os compostos de fórmula estrutural (Γ): /A’

(Γ) c) no caso de os substituintes A’ e/bu B’ serem diferentes de A e/ou B, então os compostos de fórmula estrutural (I’) são convertidos em compostos de fórmula estrutural I por remoção dos grupos protectores das aminas primárias ou secundárias ou dos grupos hidroxi facultativamente presentes em A’ e/ou B\ 8
7. Processo para a síntese de um composto de acordo com a reivindicação 1, o qual compreende os passos que consistem em a) fazer reagir um composto de fórmula estrutural (ΠΓ):

em que os símbolos X, Y, Z e T possuem as significações definidas na reivindicação 1, com uma amina de fórmula estrutural (V) (V) H2N-A’ em que o símbolo A’ possui as significações definidas na reivindicação 6, para se obter um composto de fórmula estrutural (VI)

b) fazer reagir os compostos de fórmula estrutural (VI) com uma hidrazina de fórmula estrutural (TV) H2N-NH-B’ (IV) em que o símbolo B’ possui as significações definidas na reivindicação 6, para se obter os compostos de fórmula estrutural (I’), conforme indicado na reivindicação 6, e c) no caso de os substituintes A’ e/ou B’ serem diferentes de A e/ou B, então os compostos de fórmula estrutural (F) são convertidos em compostos de fórmula estrutural I por remoção dos grupos protectores das aminas primárias ou secundárias ou dos grupos hidroxi facultativamente presentes em A’ e/ou B\ 9
8. Processo para a síntese de um composto de acordo com a reivindicação 1, em que o símbolo X representa CH ou COP, um dos símbolos Z ou Y representa N ou N(O) e o outro representa CH e o símbolo T representa CH, o qual compreende os passos que consistem em a) fazer reagir um composto de fórmula estrutural ΙΓΓ

em que o símbolo R representa um átomo de hidrogénio ou um grupo O-P e o símbolo P possui as significações definidas na reivindicação 6, com uma hidrazina de fórmula estrutural (IV) H2N-NH-B’ (IV) em que o símbolo B’ possui as significações definidas na reivindicação 6, para se obter um composto de fórmula estrutural (IP).

b) fazer reagir os compostos de fórmula estrutural (ΙΓ) com um composto de fórmula estrutural (V) H2N-A’ (V) em que o símbolo A’ possui as significações definidas na reivindicação 6, para se obter um composto de fórmula estrutural (Τ’), conforme indicado na reivindicação 6, e 10 c) remover os grupos protectores para as aminas primárias e secundárias ou dos grupos hidroxi facultativamente presentes nos grupos representados por A’ e/ou B’ para se obter um composto de fórmula estrutural (I), em que o símbolo X possui as significações definidas antes, um dos símbolos Z ou Y representa N ouN(0) e o outro representa CH e o símbolo T representa CH.
9. Processo para a síntese de um composto de acordo com a reivindicação 1, em que os símbolos X e Z representam CH, o símbolo Y representa N ou N(0) e o símbolo T representa CH ou COP, o qual compreende os passos que consistem em a) fazer reagir um composto de fórmula estrutural (ΙΠ” ’):

em que o símbolo R representa um átomo de hidrogénio ou um grupo O-P e o símbolo P possui as significações definidas na reivindicação 1, com uma hidrazina de fórmula estrutural (TV) H2N-NH-B’ (rv) em que o símbolo B’ possui as significações definidas na reivindicação 6, para se obter um composto de fórmula estrutural (H”):

O Cl 11

b) fazer reagir os compostos de fórmula estrutural (Π”) com um composto de fórmula estrutural (V) (V) H2N-A’ em que o símbolo A’ possui as significações definidas na reivindicação 6, para se obter um composto de fórmula estrutural (Γ), conforme indicado na reivindicação 6, e c) remover os grupos protectores para as aminas primárias e secundárias ou dos grupos hidroxi facultativamente presentes nos grupos representados por A’ e/ou B’ para se obter um composto de fómtula estrutural (I), em que os símbolos X e Z representam CH, o símbolo Y representa N ou N(0) e o símbolo T possui as significações definidas na reivindicação 1.
10. Processo para a síntese de um composto de fórmula estrutural (UI)

conforme definido na reivindicação 6, mas em que um dos símbolos Y ou Z representa a funcionalidade N-óxido, N(0), o qual compreende os passos que consistem em a) efectuar a oxidação de um composto de fórmula estrutural (VII)

(VII) 12 em que um dos símbolos Y’ ou Z’ representa um átomo de azoto e o outro possui as significações definidas para os símbolos Y e Z na fórmula estrutural (I), excepto N(O), com um agente de oxidação. Lisboa, 9 de Julho de 2001 /// O Agente Oficia! da Propriedade Industrial

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