CZ284379B6 - Tropanové deriváty, způsob jejich přípravy a jejich použití - Google Patents

Abstract

Řešení se týká sloučenin uvedených obecných vzorců, jejich směsí nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí, přičemž v uvedených obecných vzorcích R, R.sup.3.n. mají specifické významy. Tyto sloučeniny mají cenné farmaceutické vlastnosti jako inhibitory resorpce monoaminového neurotransmitoru, tj. dopaminu, serotoninu, noradrenalinu.ŕ

Description

Tropanové deriváty, způsob jejich přípravy, farmaceutické kompozice tyto deriváty obsahující a použití těchto derivátů pro výrobu léčiv

Oblast techniky

Vynález se týká nových oximových derivátů, které jsou inhibitory resorpce monoaminových neurotransmitorů, tj. dopaminu, serotoninu a noradrenalinu. Vynález se zejména týká nových oximových derivátů, které jsou potentními inhibitory resorpce dopaminu a jako takové mají výraznou antiparkinsonovskou, antidepresivní, antiobezitní, antinarkoleptickou a protidrogovou účinnost a současně nízkou míru nežádoucích vedlejších účinků. Vynález se rovněž týká způsobů přípravy uvedených nových oximových derivátů, farmaceutických kompozic, které tyto oximové deriváty obsahují jako účinné látky a způsobu léčení parkinsonismu, deprese, obezity, narkolepsie a drogové závislosti podáním terapeuticky účinného množství jednoho nebo několika uvedených nových oximových derivátů do živého živočišného těla, včetně lidského.

Dosavadní stav techniky

Dopamin se uvolňuje do synaptické štěrbiny za účelem stimulace postsynaptických dopaminergních receptorů. Odstraňování dopaminu se normálně děje resorpčním mechanismem do presynaptických terminálů. Inhibicí této resorpce dochází ke zlepšení fyziologické dopaminergní účinnosti. Sloučeniny, schopné inhibovat resorpci dopaminu, jsou předurčeny k léčení Parkinsonovy choroby, deprese, závislosti na kokainu, obezity a narkolepsie.

Velmi dobře známou látkou, která má silnou schopnost uvolňovat dopamin a inhibovat resorpci dopaminu, je kokain. Kokain má spektrum farmakologických účinků, především silnou CNSstimulaci a lokální anestetický účinek.

Tyto účinky jsou doprovázeny vysokou toxicitou a náchylností k vytvoření návyku na tuto drogu (viz například R. L. Clarke a kol. v Journal of Medical Chemistry 16(11), 1261-1267 (1973)). Tato schopnost k vytvoření návyku, tj. drogové závislosti, se podle současných znalostí vztahuje ke kombinaci silného stimulačního účinku kokainu, jako krátkodobému účinku a rychlému náběhu tohoto účinku společně se silnou schopností uvolňovat dopamin. Předpokládá se, že sloučeniny, mající dlouhodobou schopnost selektivně inhibovat resorpci dopaminu a nemající schopnost uvolňovat dopamin, budou extrémně užitečné jako nový typ antiparkinsonovských, antidepresivních, antiobezitních a antinarkoleptických činidel. Kromě toho budou takové sloučeniny extrémně užitečné při léčení narkomanie, a zejména při léčení závislosti na kokainu a při léčení jeho používání jako drogy.

V průběhu minulých let byly učiněny četné pokusy optimalizovat vlastnosti kokainu. Za tím účelem bylo syntetizováno mnoho derivátů kokainu a jeho izomerů. O tom viz například R. L. Clarke a kol., Journal of Medicinal Chemistry 16(11), 1261-1267(1973) a F. lvy Caroll a kol., Journal of Medicinal Chemistry 34, 883-886. Mnoho z těchto derivátů, a zejména deriváty, syntetizované R. L. Clarkem a kol., jsou velmi silnými stimulačními sloučeninami a bylo o nich zjištěno, že jsou velmi potentními inhibitory resorpce dopaminu, avšak u žádného z až dosud syntetizovaného derivátu kokainu nebylo zjištěno, že by byl prostý nežádoucích vedlejších účinků. Proto je zde stále potřeba nových inhibitorů resorpce dopaminu.

Některé sloučeniny mají také potentní inhibiční účinnost na resorpci serotoninu (5hydroxytryptamin, 5-HT) v kombinaci se schopností inhibovat resorpci dopaminu.

Farmaceutickými činidly, běžně používanými v antidepresivní terapii, jsou inhibitory resorpce noradrenalinu (Desipramin, Nortriptylin a Protriptylin) nebo směsné inhibitory resorpce

- 1 CZ 284379 B6 serotoninu a resorpce noradrenalinu (Imipramin a Amitriptylin). Vážným nedostatkem těchto farmaceutických činidel je jejich pozdní nástup účinku (několik týdnů). Předpokládá se, že směsný inhibitor resorpce serotoninu a resorpce dopaminu by mohl vykazovat výrazný antidepresivní účinek s rychlým nástupem účinku.

Vzhledem k výše uvedenému je tedy cílem vynálezu poskytnout nové oximové deriváty, mající antiparkinsonovskou, antidepresivní, antiobezitní, antinarkoleptickou a protidrogovou účinnost.

Dalším cílem vynálezu je poskytnout nové farmaceutické kompozice, obsahující uvedené nové oximové deriváty, které budou použitelné pro léčení parkinsonismu, deprese, obezity, narkolepsie a závislosti na drogách.

Ještě dalším cílem vynálezu je poskytnout způsob léčení parkinsonismu, deprese, obezity, narkolepsie a zneužívání drog podáním terapeuticky účinného množství jednoho nebo několika nových oximových derivátů do živého živočišného těla včetně lidského.

Další cíle vynálezu budou odborníkovi zřejmé z následujícího popisu.

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu jsou tropanové deriváty obecného vzorce

H

Η H směs tropanových derivátů uvedených obecných vzorců, nebo jejich farmaceuticky přijatelná sůl, přičemž v uvedených obecných vzorcích

R znamená atom vodíku, alkylovou skupinu, obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, alkenylovou skupinu, obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, alkinylovou skupinu, obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, cykloalkylovou skupinu, obsahující 3 až 7 uhlíkových atomů, cykloalkylalkylovou skupinu, ve které cykloalkylový zbytek obsahuje 3 až 7 uhlíkových atomů a alkylový zbytek obsahuje 1 až 6 uhlíkových atomů, nebo 2hydroxyethylovou skupinu,

R³ znamená skupinu CH=NOR', ve které

R' znamená atom vodíku, alkenylovou skupinu, obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, alkinylovou skupinu, obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, cykloalkylovou skupinu, obsahující 3 až 7 uhlíkových atomů, cykloalkylalkylovou skupinu, ve které cykloalkylový zbytek obsahuje 3 až 7 uhlíkových atomů a alkylový zbytek obsahuje 1 až 6 uhlíkových atomů, arylovou skupinu, jakou je fenylová a naftylová skupina, nebo

-2 CZ 284379 B6 alkylovou skupinu, obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, z nichž každá může být substituována skupinou COOH, COO-alkylovou skupinou, ve které alkylový zbytek obsahuje 1 až 6 uhlíkových atomů, COO-cykloalkylovou skupinou, ve které cykloalkylový zbytek obsahuje 3 až 7 uhlíkových atomů, nebo fenylovou skupinou, která může být jednou nebo vícekrát substituována substituenty, zvolenými z množiny, zahrnující atom halogenu, skupinu CF₃, skupinu CN, alkoxyskupinu, obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, cykloalkoxyskupinu, obsahující 3 až 7 uhlíkových atomů, alkylovou skupinu, obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, cykloalkylovou skupinu, obsahující 3 až 7 uhlíkových atomů, alkenylovou skupinu, obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, alkinylovou skupinu, obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, amino-skupinu a nitroskupinu, a

R⁴ znamená fenylovou skupinu, která může být jednou nebo vícekrát substituována substituenty, zvolenými z množiny, zahrnující atom halogenu, skupinu CF₃, skupinu CN, alkoxyskupinu, obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, cykloalkoxyskupinu, obsahující 3 až 7 uhlíkových atomů, alkylovou skupinu, obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, cykloalkylovou skupinu, obsahující 3 až 7 uhlíkových atomů, alkenylovou skupinu, obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, alkinylovou skupinu, obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, amino-skupinu, nitro-skupinu, 5- nebo 6-člennou heterocyklickou skupinu, obsahující 1 až 3 heteroatomy, zvolené z množiny, zahrnující atom kyslíku, atom síry a atom dusíku, a arylovou skupinu, jakou je fenylová a naftylová skupina, 3,4-methylendioxyfenylovou skupinu, benzylovou skupinu, která může být jednou nebo vícekrát substituována substituenty, zvolenými z množiny, zahrnující atom halogenu, skupinu CF₃, skupinu CN, alkoxyskupinu, obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, cykloalkoxyskupinu, obsahující 3 až 7 uhlíkových atomů, alkylovou skupinu, obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, cykloalkylovou skupinu, obsahující 3 až 7 uhlíkových atomů, alkenylovou skupinu, obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, alkinylovou skupinu, obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, amino-skupinu, nitro-skupinu, 5- nebo 6-člennou heterocyklickou skupinu, obsahující 1 až 3 heteroatomy, zvolené z množiny, zahrnující atom kyslíku, atom síry atom dusíku, a arylovou skupinu, jakou je fenylová a naftylová skupina, nebo naftylovou skupinu, která může být jednou nebo vícekrát substituována substituenty, zvolenými z množiny, zahrnující atom halogenu, skupinu CF₃, skupinu CN, alkoxyskupinu, obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, cykloalkoxyskupinu, obsahující 3 až 7 uhlíkových atomů, alkylovou skupinu, obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, cykloalkylovou skupinu, obsahující 3 až 7 uhlíkových atomů, alkenylovou skupinu, obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, alkinylovou skupinu, obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, amino-skupinu, nitro-skupinu, 5- nebo 6-člennou heterocyklickou skupinu, obsahující 1 až 3 heteroatomy, zvolené z množiny, zahrnující atom kyslíku, atom síry a atom dusíku, a arylovou skupinu, jakou je fenylová a naftylová skupina,

Tropanovými deriváty podle vynálezu výhodně jsou:

3-(3,4-d ich lorfeny l)tropan-2-aldoxim, 3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-methylaldoxim, 3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-benzylaldoxim, 3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-ethoxykarbonylmethylaldoxim, 3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-methoxykarbonylmethylaldoxim, 3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-0-(l-ethoxykarbonyl-l,l-dimethylmethyl)aldoxim,

-3CZ 284379 B6

3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-0-karboxymethylaldoxim, N-normethyl-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-inethylaldoxim nebo

N-normethyl-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-benzylaldoxim, nebo jejich farmaceuticky přijatelná adiční sůl.

Výhodněji tropanovými deriváty podle vynálezu jsou:

(1 R,2R,3S)-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-aldoxim, (1 R,2 R,3 S)—3—(3,4-d ich lorfeny l)tropan-2-O-benzy laldoxim, (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-ethoxykarbonylmethylaldoxim, (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-methoxykarbonylmethylaldoxim, (1 R,2R,3S)-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-(l-ethoxykarbonyl-l, l-dimethylmethyl)aldoxim, (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-karboxymethyl-2-aldoxim, (1 R,2R,3S)-N-norinethyl-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-methylaldoxim, nebo (lR,2R,3S)-N-normethyl-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-benzylaldoxim, nebo jejich farmaceuticky přijatelná adiční sůl.

Tropanovým derivátem podle vynálezu obzvláště výhodně je (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-0-methylaldoxim nebo jeho farmaceuticky přijatelná adiční sůl.

Tropanovým derivátem podle vynálezu jsou zejména:

anti-izomer (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-0-methylaldoximu, syn-izomer (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-methylaldoximu, jejich směs nebo jejich farmaceuticky přijatelná adiční sůl.

Předmětem vynálezu je také farmaceutická kompozice pro léčení poruch s odezvou na inhibici resorpce dopaminu, jejíž podstata spočívá vtom, že obsahuje účinné množství výše uvedeného tropanového derivátu nebo jeho farmaceuticky přijatelná adiční soli společně s alespoň jedním farmaceuticky přijatelným nosičem nebo ředidlem.

Předmětem vynálezu je také výše uvedený tropanový derivát pro výrobu léčiva pro léčení poruchy nebo nemoci živočišného těla, včetně lidského těla, přičemž tato porucha nebo nemoc kladně reaguje na inhibici resorpce monoaminového neurotransmitoru v centrální nervové soustavě, zejména na resorpci dopaminu, a obzvláště pro léčení parkinsonismu, deprese, obezity, narkolepsie, návyku na návykové léčivé látky nebo/a narkomanie.

Předmětem vynálezu je konečně způsob přípravy uvedených tropanových derivátů, jehož podstata spočívá v tom, že se sloučenina obecného vzorce

její enantiomer nebo jejich směs, kde R má výše uvedený význam a R¹² znamená skupinu esteru karboxylové kyseliny nebo má výše uvedený význam pro R³. uvede v reakci se sloučeninou obecného vzorce

-4 CZ 284379 B6

R⁴-A, ve kterém R⁴ má výše uvedený význam a A znamená libovolný typ reaktivní funkce, vhodný pro vytvoření karbanionu jako jejího protějšku, jako Li, MgX, kde X znamená atom halogenu, a CuLi, při Michaelově 1,1-adiční reakci, a v případě, že R¹² znamená skupinu esteru karboxylové kyseliny, potom se takto získaná sloučenina převede na tropanový derivát podle vynálezu.

Příklady farmaceuticky přijatelných adičních solí zahrnují adiční soli s anorganickými a organickými kyselinami, jakými jsou hydrochlorid, hydrobromid, fosfát, nitrát, chloristan, sulfát, citrát, laktát, tartrát, maleát, fumarát, mandlan, benzoát, askorbát, cinnmát, benzensulfonát, methansulfonát, sukcinát, stearát, glutamát, glykolát, toluen-p-sulfonát, formiát, malonát, naftalen-2-sulfonát, salicylát a acetát. Takové soli se připraví velmi dobře známými způsoby.

Mohou být použity i další kyseliny, jako například kyselina šťavelová, které i když nejsou samy o sobě farmaceuticky přijatelné, mohou být užitečné při přípravě solí, použitelných jako meziprodukty při přípravě sloučenin podle vynálezu a jejich farmaceuticky přijatelných adičních solí s kyselinami.

Atomem halogenu je atom fluoru, atom chloru, atom bromu nebo atom jodu.

Alkylová skupina znamená přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu, obsahující jeden až šest uhlíkových atomů, zahrnující neomezujícím způsobem methylovou skupinu, ethylovou skupinu, propylovou skupinu, izopropylovou skupinu, butylovou skupinu, izobutylovou skupinu, terc.butylovou skupinu, pentylovou skupinu a hexylovou skupinu, přičemž výhodnými alkylovými skupinami jsou methylová skupina, ethylová skupina, propylová skupina a izopropylová skupina.

Cykloalkylová skupina znamená cyklickou alkylovou skupinu, obsahují tři až sedm uhlíkových atomů a zahrnující neomezujícím způsobem cyklopropylovou skupinu, cyklobutylovou skupinu, cyklopentylovou skupinu a cyklohexylovou skupinu.

Alkenylová skupina znamená skupinu, obsahující dva až šest uhlíkových atomů a mající alespoň jednu dvojnou vazbu, přičemž taková alkenylová skupina zahrnuje neomezujícím způsobem ethenylovou skupinu, 1,2-propenylovou skupinu, 2,3-propenylovou skupinu, 1,2-butenylovou skupinu, 2,3-butenylovou skupinu nebo 3,4-butenylovou skupinu.

Alkinylová skupina znamená skupinu, obsahující dva až šest uhlíkových atomů a mající alespoň jednu trojnou vazbu, přičemž taková alkenylová skupina zahrnuje neomezujícím způsobem například ethinylovou skupinu, 2,3-propinylovou skupinu, 2,3-butinylovou skupinu nebo 3,4butinylovou skupinu.

Cykloalkylalkylová skupina má jako cykloalkylový zbytek výše definovanou cykloalkylovou skupinu a jako alkylový zbytek výše definovanou alkylovou skupinu, přičemž tato cykloalkylalkylová skupina zahrnuje například cyklopropylmethylovou skupinu.

Alkoxy-skupina znamená O-alkylovou skupinu, ve které alkylový zbytek znamená výše definovanou alkylovou skupinu.

Cykloalkoxy-skupina znamená O-cykloalkylovou skupinu, která jako cykloalkylový zbytek obsahuje výše definovanou cykloalkylovou skupinu.

Amino-skupina znamená skupinu NH₂ nebo NH-alkylovou skupinu nebo N-(alkyl)₂-ovou skupinu, přičemž poslední dvě skupiny obsahují jako alkylové zbytky výše definované alkylové skupiny.

-5 CZ 284379 B6

Heteroarylovou skupinou je vhodně 5— nebo 6-členná heterocyklická monocyklická skupina. Taková heteroarylová skupina zahrnuje například oxazol-2-ylovou skupinu, oxazol-4-ylovou skupinu, oxazol-5-ylovou skupinu, izoxazol-3-yIovou skupinu, izoxazoW-ylovou skupinu, izoxazol-5-ylovou skupinu, thiazol-2-ylovou skupinu, thiazol-4-ylovou skupinu, thiazol-5ylovou skupinu, izothiazol-3-ylovou skupinu, izothiazol-4-ylovou skupinu, izothiazol-5ylovou skupinu, l,2,4-oxadiazol-3-ylovou skupinu, l,2,4-oxadiazol-5-ylovou skupinu, 1,2,4thiadiazol-3-ylovou skupinu, l,2,4-thiadiazol-5-ylovou skupinu, l,2,5-oxadiazol-3-ylovou skupinu, 1,2,5-oxadiazoW-ylovou skupinu, l,2,5-thiadiazol-3-ylovou skupinu, 1,2,5thiadiazol-4-ylovou skupinu, 2-imidazolylovou skupinu, 4-imidazolylovou skupinu, 5imidazolylovou skupinu, 2-pyrrolylovou skupinu, 3-pyrrolylovou skupinu, 2-furanylovou skupinu, 3-furanylovou skupinu, 2-thienylovou skupinu, 2-pyridylovou skupinu, 3-pyridylovou skupinu, 4-pyridylovou skupinu.

Arylová skupin znamená aromatickou uhlovodíkovou skupinu, jakou je fenylová skupina a naftylová skupina.

Zkratka l.p. znamená intraperitoneálně, což je velmi dobře známý způsob podání účinné látky.

Zkratka P.o. znamená perorálně, což je velmi dobře známý způsob podání účinné látky.

Sloučeniny podle vynálezu mohou existovat jak v nesolvatované formě, tak i v solvatované formě s farmaceuticky přijatelnými rozpouštědly, jakými jsou vóda, ethanol a podobně. Pro účely tohoto vynálezu jsou obecně solvatované formy považovány za ekvivalentní nesolvatovaným formám.

Pro odborníka je zřejmé, že sloučeniny podle vynálezu obsahují několik chirálních center a že tedy tyto sloučeniny existují ve formě izomerů (tj. enantiomerů). Vynález zahrnuje všechny takové izomery a všechny jejich libovolné směsi, včetně racemických směsí.

Některé ze sloučenin podle vynálezu existují ve formách (+) a (-), jakož i v racemických formách. Racemické směsi mohou být štěpeny na optické antipody známými postupy, například rozdělením jejich diastereomerních solí s opticky aktivní kyselinou a následným uvolněním opticky aktivní aminové sloučeniny působením báze. Jiná metoda štěpení racemátů na optické antipody je založena na chromatografií na opticky aktivní matrici. Racemické sloučeniny podle vynálezu mohou být takto rozštěpeny na jejich optické antipody, například frakční krystalizaci d- nebo 1—solí (tartrát, mandlan nebo kafrsulfonát). Sloučeniny podle vynálezu mohou být rovněž rozštěpeny vytvořením diastereomerních amidů reakcí sloučenin podle vynálezu s opticky aktivní aktivovanou karboxylovou kyselinou, jakou je kyselina, odvozená od (+)- nebo (-)fenylalaninu, (+)- nebo (-)-fenylglycinu, (+)- nebo (-)-kamfanové kyseliny, nebo vytvořením diastereomerních karbamátů reakcí sloučenin podle vynálezu s opticky aktivním chloroformiátem nebo podobně.

Mohou být použity i další metody štěpení optických izomerů, které jsou obecně známé. Takové metody jsou například diskutovány J. Jaques-em, A. Collet-em a S. Wilen-em v „Enantiomers, Racemates, and Resolutions“, John Wiley and Sons, New York (1981).

Kromě toho, poněvadž jsou sloučeniny podle vynálezu oximy, mohou existovat ve dvou formách, tj. ve formách syn a anti, a to v závislosti na uspořádání substituentů okolo dvojné vazby -C=N- Vynález zahrnuje jak syn-, tak i antiformu sloučenin podle vynálezu, jakož i směsi těchto forem.

Kyseliny katalyzují izomeraci syn-anti.

Sloučeniny podle vynálezu mohou být připraveny četnými způsoby. Sloučeniny podle vynálezu a jejich farmaceuticky přijatelné deriváty mohou být takto připraveny libovolnou vhodnou známou

-6CZ 284379 B6 metodou pro přípravu sloučenin, majících analogickou strukturu, jak je to ilustrováno v dále zařazených příkladech.

Následující reakční schéma ilustruje jednu z metod, kterou mohou být připraveny sloučeniny podle vynálezu:

(i) (1R.2S.3S) cis-íorma (1R.2R.3S) trans-forma

Ve výše uvedeném reakčním schématu A znamená libovolný typ reaktivní funkce, vhodné pro tvorbu karbanionu jako jejího protějšku, jakou je Li, MgX, kde X znamená halogen, a CuLi, při Michaelově 1,4-adiční reakci, R¹² znamená skupinu esteru karboxylové kyseliny, jakou je například skupina COO-Me, COO-Et a COO-iPro, nebo R¹² má výše uvedený význam pro R³, a R a R⁴ mají výše uvedené významy.

Výše uvedenou reakcí sloučeniny obecného vzorce i se sloučeninou obecného vzorce R⁴-A mohou být získány jak forma cis, forma trans, tak i jejich směsi, avšak získané sloučeniny jsou téměř výlučně sloučeninami, ve kterých je substituent R⁴ v ekvatoriální poloze.

Izomerace cis-izomeru na trans-izomer může být provedena v silné bázi, jakou je alkoxid.

Enantiomery, cis- a trans-sloučenin ve výše uvedeném reakčním schématu mohou být získány za použití stejného postupu a enantiomeru sloučeniny vzorce i, majícího vzorec

(iv) jako výchozí látky.

Racemické směsi cis- a trans-sloučenin mohou být získány za použití sloučenin vzorců i a iv jako výchozích látek.

Sloučeniny, získané výše popsaným způsobem, ve kterých R¹² znamená skupinu esteru karboxylové kyseliny, mohou být převedeny na sloučeniny podle vynálezu za použití konvenčních metod. Takové metody zahrnují reakci 2-esterové skupiny na 2hydroxymethylovou skupinu a následnou oxidaci na odpovídající 2-aldehydovou skupinu.

Oximy podle vynálezu mohou být potom získány reakcí 2-aldehydové sloučeniny s hydroxylaminovými deriváty NH₂-OR', kde R' má výše uvedený význam:

R R R

Sloučenina podle vynálezu může být převedena na jinou sloučeninu podle vynálezu za použití konvenčních metod.

Výchozí látky pro způsoby, popsané v této patentové přihlášce, jsou buď známými sloučeninami, nebo mohou být připraveny známými způsoby z komerčně dostupných sloučenin.

Výchozí látky obecného vzorce i, ve kterém R¹² znamená skupinu esteru karboxylové kyseliny, mohou být takto získány z kokainu za použití konvenčních postupů, tj. postupů, které jsou popsány v dále zařazených příkladech.

Výchozí látky obecného vzorce i, ve kterém R¹² znamená oximovou skupinu, mohou být získány za použití stejného postupu, jaký byl popsán výše pro přípravu oximů podle vynálezu a jaký byl popsán v patentovém dokumentu EP-A2-316-718.

Produkty výše popsaných reakcí se izolují konvenčními postupy, mezi které patří extrakce, krystalizace, destilace, chromatografíe a podobně.

Biologická část

Sloučeniny podle vynálezu byly testovány za účelem stanovení jejich schopnosti vázat se na dopaminový transportér při následujících testech in vitro a in vivo inhibice činidla ³H-WIN 35428.

In vitro inhibice vazby činidla 'H-WIN 35428

Podstata testu

Místa transportu/resorpce dopaminu na nervových ukončeních pravděpodobně způsobují ukončení neuronálních signálů odstraněním dopaminu ze synaptické štěrbiny. Aktivita nebo přítomnost integrálního proteinového transportéru dopaminu může být měřena in vitro synaptosomální resorpcí ³H-dopaminu nebo membránovým vazebným testem za použití ³Hligandů, o kterých je známo, že se váží na uvedený transportér.

Vazebné studie s kokainem in vitro prokázaly, že se kokain váže na dopaminový transportér a inhibuje tak resorpci ³H-dopaminu. Navíc byly popsány četné ligandy několika strukturních typů, které se váží na místa resorpce dopaminu, avšak zůstává otázka, zda jejich vazebná místa jsou identická s vazebnými místy kokainu. Strukturní analog kokainu, kterým je činidlo ³H-WIN 35428, se selektivně váže s vysokou afinitou ke transportérovému komplexu dopaminu.

- 8 CZ 284379 B6

Příprava tkáně

Příprava se provádí při teplotě 0 až 4 °C, pokud není výslovně uvedeno jinak. Těleso žíhané z krysích samečků Wistar (150 až 200 g) se homogenizuje po dobu 5 až 10 sekund v 10 ml NaH₂PO₄ (50 mM, pH 7,4) za použití homogenizéru Ultra-Turrax. Získaná suspenze se odstředí při 27 000 x g po dobu 15 minut. Supernatant se odlije a peleta se opětovně suspenduje v 50 ml NaH₂PO₄, pH 7,4 (1000 ml na gram původní tkáně) a suspenze se použije pro vazebný test.

Metodika testu

0,5 ml alikvoty tkáně se přidají k 25 ml testovaného roztoku a 25 ml ³H-WIN 35428 (1 nM, finální koncentrace), načež se získaná směs promísí a inkubuje po dobu 60 minut při teplotě 2 °C. Nespecifická vazba se stanoví za použití kokainu (30 mM, finální koncentrace). Po inkubaci se ke vzorkům přidá 5 ml ledově chladného pufru a směs se přímo nalije a zfiltruje za sání na filtru ze skleněných vláken Whatman GF/C, načež se filtr bezprostředně promyje 5 ml ledově chladného pufru. Množství radioaktivity na filtru se stanoví konvenční kapalinovou scintilografií. Specifická vazba je rovna celkové vazbě, od které se odečte nespecifická vazba.

Dříve než se vypočte IC₅o, musí být získána 25 až 75% inhibice specifické vazby. Výsledky testu jsou vyjádřeny jako 1C_5O (koncentrace v mikromolech testované sloučeniny, která z 50 % inhibuje specifickou vazbu činidla ³H-WIN 35428.

In vivo inhibice vazby činidla ³H-WIN 35428

Podstata testu

Činidlo ³H-WIN 35428 může být rovněž použito pro studie receptorů u myší za použití radiačně značených činidel. K akumulaci ³H-WrN 35428 dochází přednostně v mozkových oblastech, obsahujících dopaminergní nervová ukončení. Těleso žíhané, které obsahuje nejvyšší koncentraci dopaminu, vykazuje nejvyšší akumulaci ³H-WIN 35428. Specifická vazba v tělese žíhaném dosahuje maxima 30 minut po intravenózní injekci ³H-WIN 35428 a toto maximum se udržuje po dobu dalších 30 minut. Specifická vazba ³H-WIN 35428 může být částečně nebo zcela inhibována současným nebo předcházejícím podáním účinných látek, o kterých je známo, že inhibují transport dopaminu, a ligandů, vázajícího se k transportérovému komplexu dopaminu, tj. GBR 129, kokain a nomifensin (Scheffel a kol., J. Pharm. Exp. Ther. 257, 954-958 (1991)).

Všechny testované látky, které jsou při testu použity, jsou ve formě roztoků nebo suspenzí, připravených v 10% Tveenu 80. Skupinám tří myších samiček NMRI (tělesná hmotnost 25 g) se intraperitoneálně injikuje testovaná látka. Bezprostředně po této injekci se myši intravenózně do ocasní žíly injikují 2,0 mCi ³H-WIN 35428 v 0,2 ml fyziologického roztoku. Čtyřicetpět minut po injekci ³H-WIN 35428 se myš usmrtí odříznutím hlavy, načež se z hlavy urychleně na ledu izoluje těleso žíhané. Tkáň se zváží a rozpouští po dobu 36 hodin v 1 ml 2% scintilační kapaliny a stanoví se množství radioaktivity na miligram tkáně konvenční kapalinovou scintilografií. Skupiny neošetřených myší slouží jako kontrolní subjekty. Za účelem stanovení nespecifické vazby se myším v době injekce ³H-WIN intraperitoneálně injikuje WIN 35428 (2,5 mg/kg). Specifická vazba je míra vazby, stanovená u kontrolních skupin, od které se odečte míra vazby stanovená u myší, kterým byl injikován WIN 35428.

Z křivek dávka-odezva se potom stanoví hodnota ED₅₀. V případě, že se podá pouze jedna dávka testované látky, potom se hodnota ED₅₀ vypočte následujícím způsobem za předpokladu, že inhibice specifické vazby je v rozmezí od 25 do 75 %:

ED₅₀ = (podaná dávka v mg/kg) x 1 /(Co/C\ - 1),

-9CZ 284379 B6 kde

C_o znamená specifickou vazbu u kontrolních skupin a

C\ znamená specifickou vazbu u myší, ošetřených testovanou látkou.

Výsledky uvedených testů, získané pro sloučeniny podle vynálezu, jsou uvedeny v následující tabulce 1.

Tabulka 1

Testovaná sloučenina (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlor-fenyl)tropan-2-O-methyl-aldoxim, H2SO4 (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlor-fenyl)tropan-2-aldoxim (1 R,2R,3S)-3-(3,4-dichlor-fenyl)tropan-2-O-benzyl-aldoxim, HC1 (1 R,2R,3 S )-3-(3,4-dichlor-fenyl)tropan-2-O-ethoxykarbonylmethylaldoxim, HC1 (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlor-fenyl)tropan-2-aldoxim (1 R,2R,3S)-N-Normethyl-3-(3,4dichlor-fenyl)tropan—2-O-methylaldoxim, HC1 (lR,2R,3S}-3-(4-chlorfenyl)tropan-2-aldoxim (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlor-fenyl) tropan-2-O-(2-propinyl)-aldoxim, HC1 (1 R,2 R,3 S)-3-(3,4-d ich lor-feny 1) tropan-2-O-(2-propenyl)-aldoxim, HC1 (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlor-fenyl)tropan-2-O-(2-methylpropyl)aldoxim, HC1 (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlor-fenyl)tropan-2-O-cyklopropylmethylaldoxim, HC1

In vivo	in vitro
ED5o (mg/kg)	/C50 μΜ
0,90	0,0030
3,80	0,0034
>10,00	0,0760
>10,00	0,024
0,56	0,0020
1,4	0,006
1,05	0,013
n.t.	0,019
n.t.	0,022
n.t.	0,056
n.t.	0,02

- 10CZ 284379 B6

Tabulka 1 - pokračování

Testovaná sloučenina	In vivo ED50 (mg/kg)	in vitro /C50 μΜ
(lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlor-fenyI)-	0,37	0,0018
tropan-2-O-methyl-aldoxim
(1 R,2R,3S)-3-(4-chlor-fenyl)tropan	1,0	0,048

-2-O-methyl-aldoxim, HC1

n.t. = netestováno

Výše uvedené výsledky testů ukazují, že sloučeniny pole vynálezu se váží jak in vitro, tak i in vivo s vysokou afinitou ke transportérovému komplexu dopaminu.

Sloučeniny podle vynálezu byly rovněž testovány za účelem stanovení jejich schopnosti inhibovat resorpci dopaminu (DA), noradrenalinu (NA) a serotoninu (5-HT) v synaptosomech.

Podstata testu

Specifická místa transportu/resorpce neuromediátorů na nervových ukončeních pravděpodobně způsobují ukončení neuronální signalizace odstraněním dopaminových, noradrenalinových a seroton i nových nervových mediátorů ze synaptické štěrbiny. Aktivita transportérových integrálních proteinů může být měřena in vitro synaptosomální resorpci ³H-dopaminu, ³H-nordrenalinu a ³H-serotoninu.

In vitro inhibice resorpce ³H-dopaminu (³H-DA) ve striatálních synaptosomech.

Příprava tkáně

Příprava tkání byla provedena při teplotě mezi 0 a 4 °C, pokud není výslovně uvedeno jinak. Tělesa žíhaná z krysích samečků Wistar (tělesná hmotnost mezi 150 a 200 g) se homogenizují po dobu 5 až 10 sekund ve 100 objemech ledově chladné 0,32M sacharóze, obsahující 1 mM pargylinu, za použití homogenizéru Ultra-Turrax. Aktivita monoamin-oxidázy bude v přítomnosti pargylinu inhibována. Získaný homogenizát se odstředí při lOOOx g po dobu 10 minut. Rezultující supernatant se potom odstředí při 27000 xg po dobu 50 minut a supernatant se odlije. Získaná peleta (P₂) se opětovně suspenduje v okysličovaném (v rovnováze s atmosférou, tvořenou 96 % kyslíku a 4 % oxidu uhličitého, po dobu alespoň 30 minut) KrebsRingerově inkubačním pufru (8000 ml na gram původní tkáně) při pH 7,2, obsahujícím 122 mMNaCl, 0,16 mM EDTA, 4,8 mM KCI, 12,7 mM Na₂HPO₄, 3,0 mM NaH₂PO₄, 1,2 mM MgSO₄, 1 mM, 1 mM CaCI₂, 10 mM glukózy a 1 mM kyseliny askorbové.

Metodika testu

4,0 ml alikvoty tkáňové suspenze se přidají do 100 mikrolitrů testovaného roztoku a

100 mikrolitrů ³H-DA (1 nM, finální koncentrace), načež se získaná směs promísí a inkubuje po dobu 25 minut při teplotě 37 °C. Nespecifická resorpce se stanoví za použití benztropinu (10 μΜ, finální koncentrace). Po inkubaci se vzorky nalijí přímo na filtry ze skelných vláken

Whatman GF/C a zfiltrují ze sání. Filtry se potom třikrát promyjí vždy 5 ml ledově chladného

0,9% (hmotn./obj.) roztoku chloridu sodného. Potom se stanoví množství radioaktivity na filtrech za použití konvenční kapalinové radioaktivity na filtrech za použití konvenční kapalinové

- 11 CZ 284379 B6 scintilografie. Specifická resorpce se vypočte jako rozdíl mezi celkovou resorpcí a nespecifickou resorpcí.

Před provedením výpočtu hodnot IC50 musí být dosaženo 25 až 75% inhibice specifické vazby.

Výsledky testu jsou vyjádřeny jako IC50 (což je koncentrace testované látky v mikromolech, která inhibuje z 50 % specifickou vazbu činidla ³H-DA).

In vitro inhibice resorpce ³H-noradrenalinu (³H-NA) v hippokampálních synaptosomech

Příprava tkání byla provedena při teplotě mezi 0 a 4 °C, pokud není výslovně uvedeno jinak. Hippocampi z krysích samečků Wistar (tělesná hmotnost mezi 150 a 200 g) se homogenizují po dobu 5 až 10 sekund ve 100 objemech ledově chladné 0,32M sacharóze, obsahující 1 mM pargylinu, za použití homogenizéru Ultra-Turrax. Aktivita monoamin-oxidázy bude v přítomnosti pargylinu inhibována. Získaný homogenizát se odstředí při lOOOxg po dobu 10 minut. Rezultující supernatant se potom odstředí při 27000 x g po dobu 50 minut a supernatant se odlije. Získaná peleta (P₂) se opětovně suspenduje v okysličovaném (v rovnováze s atmosférou, tvořenou 96 % kyslíku a 4 % oxidu uhličitého, po dobu alespoň 30 minut) KrebsRingerově inkubačním pufru (8000 ml na gram původní tkáně) při pH 7 ,2, obsahujícím 122 mM NaCI, 0,16 mM EDTA, 4,8 mM KC1, 12,7 mM Na₂HPO₄, 3,0 mM NaH₂PO₄, 1,2 mM MgSO₄, 1 mM, 1 mM CaCl₂, 10 mM glukózy a 1 mM kyseliny askorbové.

Metodika testu

4,0 ml alikvoty tkáňové suspenze se přidají do 100 mikrolitrů testovaného roztoku a 100 mikrolitrů ³H-NA (1 nM, finální koncentrace), načež se získaná směs promísí a inkubuje po dobu 90 minut při teplotě 37 °C. Nespecifická resorpce se stanoví za použití desipraminu (1 μΜ, finální koncentrace). Po inkubaci se vzorky nalijí přímo na filtry ze skelných vláken Whatman GF/C a zfiltrují ze sání. Filtry se potom třikrát promyjí vždy 5 ml ledově chladného 0,9% (hmotn./obj.) roztoku chloridu sodného. Potom se stanoví množství radioaktivity na filtrech za použití konvenční kapalinové scintilografie. Specifická resorpce se vypočte jako rozdíl mezi celkovou resorpcí a nespecifickou resorpcí.

Před provedením výpočtu hodnot IC₅₀ musí být dosaženo 25 až 75% inhibice specifické vazby.

Výsledky testu jsou vyjádřeny jako IC₅₀ (což je koncentrace testované látky v mikromolech, která inhibuje z 50 % specifickou vazbu činidla ³H-NA).

In vitro inhibice resorpce ³H-5-hydroxytryptaminu (³H-5-HT), serotonin) v kortikálních synaptosomech

Příprava tkáně

Příprava tkání byla provedena při teplotě mezi 0 a 4 °C, pokud není výslovně uvedeno jinak. Kůra mozková z krysích samečků Wistar (tělesná hmotnost mezi 150 a 200 g) se homogenizuje po dobu 5 až 10 sekund ve 100 objemech ledově chladné 0,32M sacharóze, obsahující 1 mM pargylinu, za použití homogenizéru Ultra-Turrax. Aktivita monoamin-oxidázy bude v přítomnosti pargylinu inhibována. Získaný homogenizát se odstředí při 1000 xg po dobu 10 minut. Rezultující supernatant se potom odstředí při 27000 xg po dobu 50 minut a supernatant se odlije. Získaná peleta (P₂) se opětovně suspenduje v okysličovaném (v rovnováze s atmosférou, tvořenou 96 % kyslíku a 4 % oxidu uhličitého, po dobu alespoň 30 minut) KrebsRingerově inkubačním pufru (8000 ml 11a gram původní tkáně) při pH 7,2, obsahujícím 122 mM

- 12 CZ 284379 B6

NaCl, 0,16 mM EDTA, 4,8 mM KC1, 12,7 mM Na₂HPO₄, 3,0 mM NaH₂PO₄, 1,2 mM MgSO₄, 1 mM, 1 mM CaCl₂, 10 mM glukózy a 1 mM kyseliny askorbové.

Metodika testu

4,0 ml alikvoty tkáňové suspenze se přidají do 100 mikrolitrů testovaného roztoku a 100 mikrolitrů ³H-5-HT (1 nM finální koncentrace), načež se získaná směs promísí a inkubuje po dobu 30 minu při teplotě 37 °C. Nespecifická resorpce se stanoví za použití benztropinu (1 μΜ, finální koncentrace). Po inkubaci se vzorky nalijí přímo na filtry ze skelných vláken Whatman GF/C a zfiltrují za sání. Filtry se potom třikrát promyjí vždy 5 ml ledově chladného 0,9% (hmotn./obj.) roztoku chloridu sodného. Potom se stanoví množství radioaktivity na filtrech za použití konvenční kapalinové scintilografle. Specifická resorpce se vypočte jako rozdíl mezi celkovou resorpcí a nespecifickou resorpcí.

Před provedením výpočtu hodnot IC₅₀ musí být dosaženo 25 až 75% inhibice specifické vazby.

Výsledky testu jsou vyjádřeny jako IC₅o (což je koncentrace testované látky v mikromolech, která inhibuje z 50 % specifickou vazbu činidla ³H-5-HT).

Výsledky uvedených testů pro sloučeniny podle vynálezu jsou uvedeny v následující tabulce 2.

Tabulka 2

Testovaná sloučenina	DA-resorpce IC50(pM)	NA-resorpce IC5o(gM)	5-HT-resorpce IC50(pM)
(1 R,2R,3S)-3—(3,4—dichlor—fenyl)- tropan-2-O-methyl-aldoxim, H2SO4	0,03	0,0013	0,13
(lR,2R,3S)-N-Normethyl-3-(3,4dichlor-fenyl)tropan-2-O-methylaldoxim, HC1 ( 1 R,2R,3S)-3-(3,4-dichlor-fenyl)tropan-2-O-methyl-aldoxim, syn-	0,002	0,0013	0,0017
0,0034	0,0015	n.t

isomer

n.t. = netestováno

Výše uvedené výsledky ukazují, že testované sloučeniny účinně inhibují resorpcí dopaminu, noradrenalinu a serotoninu v synaptosomech.

Sloučeniny podle vynálezu byly rovněž testovány při následujících zvířecích modelech Parkinsonovy nemoci.

Antagonismus parkinsonismu, indukovaného činidlem MTPT u kosmanů (opice z čeledi kosmanovitých)

Podání činidla MPTP (l-methyl-4-fenyl-l,2,3,6-tetrahydropyridin-hydrochloridu) opicím indukuje lézi v dopaminergním systému v mozku a vede ke vzniku parkinsonovských symptomů. Následným podáním testovaných sloučenin lze testovat schopnost těchto sloučenin omezovat uvedené parkinsonovské symptomy.

- 13 CZ 284379 B6

Metodika testu

Při tomto testu se použijí kosmani obojího pohlaví (tělesná hmotnost 350 až 400 g, stáří 3 až 5 let). Pokusná zvířata byla přechovávána v samostatných klecích za standardních podmínek při teplotě 25 až 27 °C a při 50% relativní vlhkosti za použití 12 hodinového cyklu světlo-tma. Pokusná zvířata měla volný přístup k potravě a vodě.

Několik měsíců před provedením lokomočních testů a testů modifikujících chování byl pokusným zvířatům podán MPTP (1-methyl—4-fenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridin-hydrochlorid), rozpuštěný ve sterilním 0,9% fyziologickém roztoku v dávkách 2 mg/kg, podávaných subkutánně každý den po dobu 5 dnů nebo až do doby, kdy dojde k rozvoji parkinsonovského stavu. Kumulativní podávané dávky se pohybují mezi 8 a 12 mg/kg. V průběhu podávání MPTP a v průběhu následujících 2 až 3 týdnů byla pokusná zvířata krmena ručně až do doby, kdy se natolik zotavila, že byla schopna krmit se sama. Před provedením testu, vyhodnocujícího chování, všechna zvířata vykazovala výrazné omezení bazální lokomoční aktivity, chabou koordinaci pohybů, omezení kontrolních pohybů hlavy a nenormální postavení zejména hřbetu a končetin.

Sloučeniny se rozpustí ve 100% Tweenu 80 za zahřívání na teplotu 40 až 50 °C, načež se získané roztoky zředí vodou. Testované sloučeniny byly podány perorálně v objemu 2 ml/kg. Vedle testované sloučeniny bylo každý pokusný den podáváno vehikulum pro srovnání s pokusy, kdy byla podávána testovaná sloučenina. Každé pokusné zvíře bylo ošetřeno vehikulem nebo jednou ze tří dávek testované sloučeniny v průběhu následujících týdnů s jednotýdenní zotavovací periodou mezi jednotlivými aplikacemi.

Vyhodnocení nezpůsobilosti

Nezpůsobilost pokusných zvířat byla oznámkována následujícím způsobem:

bdělost: 0-normální,

2-ospalá, reakce na stimuly:

kontrolní pohyby:

0-normální,

1- snížená,

2- pomalá,

3- žádná,

0-existuj í

1- omezené

2- neexistují, pozornost a pohyby očí:0-normální,

1-nenormální, postavení:

0-normální,

1-nenormální postavení trupu,

1-nenormální postavení končetin,

1-nenormální postavení ocasu,

4-mimořádně nenormální postavení, rovnováha a koordinace pohybů:

0-normální,

1- zhoršené,

2- nestabilní,

- 14CZ 284379 B6

3-spontánní pády, vokalizace: 0-normální,

1- snížená,

2- nepřítomná.

Měření lokomoční aktivity

Lokomoční aktivita byla měřena současně u čtyř individuálních zvířat, která byla přechovávána v individuálních kovových klecích (šířka: 50 cm, délka: 60 cm, výška: 70 cm) s transparentními plastikovými dvířky (šířka: 50 cm, výška: 70 cm), které jsou podobné domácím klecím, přičemž jsou však opatřena osmi horizontálně orientovanými infračervenými fotočlánky. Paprsky těchto fotočlánků jsou lokalizovány v úrovni podlahy, skrze klec a vždy jeden podél každého ze dvou bidýlek. Další paprsky jsou směrovány od čela klece k zadní části klece v úrovni podlahy a nad každým bidýlkem. Zaznamenávají se lokomoční signály, reprezentované přerušeními světelných paprsků, přičemž k těmto přerušením dochází pokaždé, když tělo pokusného zvířete vstoupí do cesty světelnému paprsku. Zaznamenávají se počty takových lokomočních signálů ve 30 minutových intervalech, a to při celkové době testu rovné 10 hodinám.

Analýza získaných výsledků

Pro časové úseky a akumulované počty lokomočních signálů nebo pro skóre nezpůsobilosti chování pro různé skupiny pokusných zvířat se vypočtou střední (+ -) standardní odchylky měření.

Výsledky, získané testováním sloučeniny podle vynálezu, kterou je (lR,2R,3S)-3-(3,4dichIorfenyl)tropan-2-O-methylaldoxim (NS2214), jsou graficky vyneseny na připojených obrázcích 1 a 2. Z těchto obrázků je zřejmé, že uvedená sloučenina podle vynálezu způsobuje při dávkách v rozmezí od 0,1 do 2,5 mg/kg na dávce závislé zvýšení lokomoční aktivity a na dávce závislé snížení skóre nezpůsobilosti.

Sloučeniny podle vynálezu byly rovněž testovány v následujících testech, stanovujících antidepresivní aktivitu.

Test v závěsu za ocas

Podstata testu

Po systemickém podání činidel, stimulujících centrální nervovou soustavu, a antidepresivních činidel bylo pozorováno zkrácení doby nehybnosti myší, zavěšených za ocas (Steru, L., Chermat, R., Thierry, B. and Simon, P. (1985), The tail suspension test: A new method for screening antidepressants in mice, Psychopharmacology 85:367-370).

Metodika testu

Při tomto testu se použijí myší samičky NMRI (tělesná hmotnost 20 až 25 g), navyklé na prostor testu (12 hodinový cyklus světlo-tma) po dobu alespoň 16 hodin a přechovávané v počtu 25 pokusných zvířat v každé kleci. Myši byly potom zavěšeny pomocí adhezní pásky za ocas k tyči, umístěné 30 cm nad laboratorním stolem, a to po perorálním podání vehikula nebo účinné látky. Po dobu následujících 6 minut byla zaznamenána akumulovaná doba nehybnosti, definované jako žádný pohyb tělem nebo končetinami (přičemž však zde není pohyb hlavy zahrnut mezi pohyby). Použije se 6 myší pro každou dávku.

- 15 CZ 284379 B6

Pokusná zvířata, ošetřená vehikulem nebo fyziologickým roztokem, mají dobu nehybnosti mezi 160 a 180 sekundami (průměrně). Grafickou interpolací z alespoň 3 dávek se vypočte hodnota ED₅o jako dávka, snižující dobu nehybnosti na 100 sekund.

V následující tabulce 4 jsou uvedeny výsledky, získané testováním některých sloučenin podle vynálezu.

Tabulka 4

Testovaná sloučenina	ED5o(mg/kg)
(1 R,2R,3S)-3-(3,4-dichlor-fenyl)tropan-2aldoxim	0,41
(1 R,2R,3S)-3-(3,4-dichlor-fenyl)-tropan-2- O-methyl-aldoxim, H2SO4	0,1
(1 R,2R,3S)-3-(3,4-dichlor-fenyl)-tropan-2- O-benzyl-aldoxim, HC1	2 0,25

(lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlor-fenyl)tropan-2-Omethoxykarbonylmethylaldoxim

(1 R,2R,3 S )-3-(3,4—dichlor-feny l)tropan-2aldoxim	0,27
(lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlor-fenyl)tropan-2-0- (2-propenyl)-aldoxim	0,23
(1 R,2R,3S)-N-Normethyl-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-methyl-aldoxim, HC1	0,95
(1 R,2R,3S)-3-(3,4-dichlor-fenyl)tropan-2-Omethyl-aldoxim	0,4
(1 R,2S,3S)-3-(3,4-dichlor-fenyl)-tropan-2- O-benzyl-aldoxim, HC1	0,94
(1 R,2R,3S)-3-(4-chlor-fenyl)tropan-2aldoxim	0,19
(1 R,2R,3 S)-3-(3,4-dichlor-fenyl)-tropan-2- O-(2-propinyl)-aldoxim	0,04
(1 R,2R,3S)-3-(3,4-dichlor-fenyl)-tropan-2- O-cyklopropylmethyl-aldoxim	0,7
(lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlor-fenyl)-tropan-2- O-(2-methylpropyl)-aldoxim	0,8
(1 R,2R,3S)-3-(4-chlor-fenyl)tropan-2-Omethyl-aldoxim, HC1	0,43

- 16CZ 284379 B6

Výsledky uvedené ve výše uvedené tabulce předurčují sloučeniny podle vynálezu jako potentní antidepresivní činidla.

Profil vedlejších účinků sloučenin podle vynálezu

Vedlejší účinky kokainu a derivátu amfetaminu, stimulujících centrální nervovou soustavu, zahrnují u zvířat včetně primátů excitaci a stimulaci centrální nervové soustavy a tyto účinky mohou být pozorovány i u lidí. Vážným vedlejším účinkem kokainu a amfetaminových derivátů je způsobilost vyvolávat toxické psychotické symptomy, které velmi věrně připomínají duševní chorobu schizofrenii a které zahrnují halucinace, paranoi a abnormální bizarní stereotypní mentální aktivitu a stereotypii.

Podle běžných znalostí se předpokládá, že tyto syndromy u primátů a u lidí jsou důsledkem extenzivního a masivního uvolňování dopaminu ve striatálním komplexu a zejména v mesolimbickém dopaminovém systému, které inervuje limbické struktury včetně jádrových akumbenů.

Indukce abnormálního stereotypního chování u hlodavců takto představuje jeden z nejpoužívanějších zvířecích modelů schizofrenie v modelech pro antipsychotické neuroleptické účinné látky (včetně haloperidolu a chlorpromazinu).

Rozvoj níže popsaného toxického abnormálního stereotypního amfetaminového syndromu může předběžně určit toxický centrálně stimulační vedlejší účinek sloučenin, uvolňujících dopamin u lidí.

Klasifikace abnormálního stereotypního chování

Obecně lze abnormální stereotypní chování po podání amfetaminu a kokainu-podobných centrálně stimulujících účinných látek klasifikovat jako stereotypní chování se skórem „nízké“ a „vysoké“ intenzity. Uvedené skóre s nízkou intenzitou stereotypie zahrnuje abnormální a stále opakované lokomoční, vzpínavé a čenichavé chování, přičemž tyto syndromy lze obvykle pozorovat pouze po nižších dávkách centrálních dopaminergních centrálně stimulujících účinných látek, nebo mohou být pozorovány pre- a postfázích vysokých dávek. Nízkointenzitní účinky na chování jsou zde zahrnuty do lokomočního a vzpínavého syndromu.

Za syndromy stereotypie s vysokou intenzitou jsou zde považovány případy, kdy se repertoárové chování krysy silně omezí, pokud jde o změny jednotlivých prvků chování, a je tvořeno pouze neustálým opakováním jednoho nebo několika prvků chování.

Syndrom stereotypního čenichavého chování je takto realizován neustále pouze na malé omezené ploše klece. Tato aktivita obvykle začíná u horní části stěny a při zvýšených dávkách účinné látky přibírá na intenzitě a soustřeďuje se na čenichání směrem ke spodní části stěny klece nebo směrem k drátům na podlaze klece. V průběhu tohoto stádia stereotypie s vysokou intenzitou dochází k absenci všech normálních prvků chování, mezi které patří konzumace potravy, pití, čistění povrchu těla a normální průzkum okolí.

U krys může vysoká intenzita čenichání přejít do čenichání sdruženého s olizováním nebo/a kousáním a hryzáním do drátů, tvořících pletivo klece, a to při ještě vyšších dávkách stimulačních účinných látek. Krysy přitom obvykle sedí ve skrčené poloze. Příležitostně lze pozorovat i couvavý pohyb.

Pro stereotypii s vysokou intenzitou, vyznačující se výše popsanými syndromy chování, je použita následující vyhodnovací stupnice:

- 17CZ 284379 B6 + = pouze stereotypní čenichání, ++ = stereotypní čenichání a epizodní olizování, +++ = neustálé olizování nebo/a kousání a hryzání.

Tabulka

Sloučenina	Dávka (p.o)	Aktivita
(lR,2R,3S)-3-(3,4-di-
chlorfenyl)tropan-O-
methylaldoxim	15 mg/kg	+++

Dávka 15 mg/kgje nejnižší dávkou, poskytující uvedenou aktivitu.

Farmaceutické kompozice l když je možné, že sloučenina podle vynálezu může být pro účely terapie podávána samostatně, je výhodné formulovat účinnou látku ve formě farmaceutické kompozice.

Vynález takto dále poskytuje farmaceutické kompozice, obsahující sloučeninu podle vynálezu nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl nebo její derivát společně sjedním nebo několika farmaceuticky přijatelnými nosiči a případně s terapeutickými nebo/a profylaktickými činidly. Uvedený nosič nebo nosiče musí být přijatelné v tom smyslu, že jsou slučitelné s ostatními složkami kompozice a že nemají škodlivý vliv na příjemce.

Farmaceutické kompozice zahrnují kompozice pro perorální, rektální, nazální, topické (včetně bukválního a sublingválního podání), vaginální nebo parenterální (včetně intramuskulámího, subkutánního a intravenózního podání) podání, nebo kompozice, mající formu vhodnou pro podání inhalací nebo insuflací.

Sloučeniny podle vynálezu společně s konvenčními přísadami, nosiči nebo ředidly mohou být takto formulovány do formy farmaceutické kompozice a jejích jednotkových dávkových forem, přičemž taková kompozice může být použita v pevné formě, jako tablety nebo plněné kapsle, nebo v kapalné formě, jako roztoky, suspenze, emulze, elixíry nebo kapsle, plněné uvedenými kapalnými galenickými formami, pro perorální použití, ve formě čípků pro rektální podání, nebo ve formě sterilních injikovatelných roztoků pro parenterální podání (včetně subkutánního podání). Taková farmaceutická kompozice a její jednotkové dávkovači formy mohou obsahovat konvenční přísady v konvenčních množstvích, a to s dalšími účinnými sloučeninami nebo bez nich, přičemž uvedené jednotkové dávkovači formy mohou obsahovat libovolné vhodné účinné množství účinné látky, které je souměřitelné se zamýšleným denním dávkováním. Kompozice, obsahující deset miligramů účinné látky, nebo šírej i, 0,1 až 100 miligramů účinné látky v každé tabletě, jsou takto vhodnými reprezentativními jednotkovými dávkovými formami.

Sloučeniny podle vynálezu mohou být podávány ve formě širokého spektra perorálních a parenterálních dávkovačích forem. Pro odborníka je zřejmé, že dále uvedené dávkovači formy mohou obsahovat jako účinnou látku buď sloučeninu podle vynálezu nebo farmaceuticky přijatelnou sůl sloučeniny podle vynálezu.

Nosiče, použitelné pro přípravu farmaceutických kompozic ze sloučenin podle vynálezu, musí být farmaceuticky přijatelnými nosiči, které mohou být buď pevné nebo kapalné. Pevné formy kompozic zahrnují prášky, tablety, pilulky, kapsle, tobolky, čípky a dispergovatelné granule. Pevným nosičem může být jedna nebo několik látek, které mohou rovněž působit jako ředidla,

- 18CZ 284379 B6 ochucující činidla, solubilizační činidla, maziva, suspendační činidla, pojivá, konzervační prostředky, dezintegrační činidla nebo zapouzdřující materiál.

V prášcích je nosič jemně rozdruženou pevnou látkou, která je ve směsi s jemně rozdruženou účinnou látkou.

V tabletách je účinná látka smísena s nosičem, majícím požadovanou vazebnou schopnost, ve vhodném poměru a slisována do požadovaného tvaru a velikosti.

Prášky a tablety výhodně obsahují od pěti až deseti do asi sedmdesáti procent účinné látky. Vhodnými nosiči jsou uhličitan hořečnatý, stearát hořečnatý, talek, cukr, laktóza, pektin, dextrin, škrob, želatina, tragant, methylcelulóza, natriumkarboxymethylcelulóza, nízkotající vosk, kakaové máslo a podobně. Může být použita i formulace účinné látky se zapouzdřujícím materiálem jako nosičem, tvořícím kapsli, ve které je účinná látka s nosičem nebo bez něho obklopena zapouzdřujícím nosičem, který se takto nachází v kombinaci s účinnou látkou. Obdobně mohou být použity oplatky a pastilky. Tablety, prášky, kapsle, pilulky, oplatky a pastilky mohou být použity v pevných formách, vhodných pro perorální podání.

Při přípravě čípků se nízkotající vosk, jakým je směs glyceridů mastných kyselin, nebo kakaové máslo nejdříve roztaví, načež se v něm homogenně disperguje účinná látka, zejména mícháním. Roztavená homogenní směs se potom nalije do forem konvenční velikosti a tvaru, načež se směs ponechá vychladnout a tím i ztuhnout.

Formulace, vhodné pro vaginální podání, mohou mít formu pesarů, tamponů, krémů, gelů, past, pěn nebo sprejů, obsahujících kromě účinné látky přísady, jakými jsou nosiče, které jsou pro tento účel známé.

Kompozice v kapalné formě zahrnují roztoky, suspenze a emulze, například roztoky ve vodě nebo ve směsi vody a propylenglykolu. Tak například parenterální injekční kapalné kompozice mohou být formulovány jako roztoky ve vodném roztoku polyethylenglykolu.

Sloučeniny podle vynálezu mohou být takto formulovány pro parenterální podání (například za použití injekce, bolusu nebo kontinuální infuze) v jednotkové dávkovači formě v ampulích, předběžně naplněných injekčních stříkačkách a v maloobjemových zásobnících nebo ve vícedávkových kontejnerech společně s přidaným stabilizátorem. Kompozice mohou mít také formu suspenzí, roztoků nebo emulzí v olejových nebo vodných vehikulech a mohou obsahovat formulační činidla, jakými jsou suspendační činidla, stabilizační činidla nebo/a dispergační činidla. Alternativně může být účinná látka v práškové formě, získané aseptickou izolací sterilního pevného produktu nebo lyofilizací z roztoku. Tato látka může být bezprostředně před použitím solubilizována za použití vhodného vehikula, jakým je například sterilní pyrogenuprostá voda.

Vodné roztoky, vhodné pro perorální použití, mohou být připraveny rozpuštěním účinné látky ve vodě a přidáním vhodných barviv, ochucovacích činidel, stabilizačních činidel a zahušťovadel v případě, že je to žádoucí.

Vodné suspenze, vhodné pro perorální použití, mohou být připraveny dispergováním jemně rozdružené účinné látky ve vodě s viskózním materiálem, jakým je přírodní nebo syntetická guma, pryskyřice, methylcelulóza, natriumkarboxymethylcelulóza nebo další dobře známá suspendační činidla.

Rovněž sem patří přípravky v pevné formě, které mají být krátce před použitím převedeny na kapalnou kompozici pro perorální podání. Takové kapalné formy zahrnují roztoky, suspenze a emulze. Tyto přípravky mohou obsahovat kromě účinné látky barviva, ochucovací činidla,

- 19CZ 284379 B6 stabilizátory, pufry, umělá nebo přírodní sladidla, dispergační činidla, zahušťovadla, solubilizační činidla a podobně.

Pro topické podání na pokožku mohou být sloučeniny podle vynálezu formulovány jako masti, krémy nebo lotiony, anebo jako transdermální náplast. Masti a krémy mohou být například formulovány s vodným nebo olejovým základem a za přidání vhodného zahušťovadla nebo/a želatinačního činidla. Lotiony mohou být formulovány s vodným nebo olejovým základem a budou obecně rovněž obsahovat jedno nebo více emulgačních činidel, stabilizačních činidel, dispergačních činidel, suspendačních činidel, zahušťovacích činidel nebo barviv.

Formulace, vhodné pro topické podání do úst, zahrnují pastilky, obsahující účinnou látku v ochuceném základu, obvykle v sacharóze a akácii nebo tragantu, zdravotní bonbony, obsahující účinnou látku v inertním základu, jakým je želatina a glycerin nebo sacharóza a akácia, jakož i ústní vody, obsahující účinnou látku ve vhodném kapalném nosiči.

Roztoky nebo suspenze se aplikují přímo do nosní dutiny konvenčními prostředky, například za použití kapátka, pipety nebo spreje. Tyto formulace mohou být v jednodávkové nebo vícedávkové formě. V posledně uvedeném případě si může sám pacient pomocí kapátka nebo pipety nadávkovat případě spreje toho může být například dosaženo pomocí ventilu, odměřujícího danou dávku.

Podání do dýchacího traktu může být rovněž dosaženo pomocí aerosolové formulace, ve které je účinná látka obsažena v tlakovaném kontejneru s vhodným hnacím plynem, jakým je chlorofluorouhlovodík (CFC), například dichlordifluormethan, trichlorfluormethan nebo dichlortetrafluorethan, oxid uhličitý nebo jiný vhodný plyn. Takový aerosol může vhodně rovněž obsahovat povrchově aktivní činidlo, jakým je lecitin. Dávka účinné látky může být kontrolována pomocí odměřovacího ventilu.

Alternativně může být účinná látka poskytnuta ve formě suchého prášku, například ve formě práškové směsi účinné látky ve vhodném práškovém základu, kterým je například laktóza, deriváty škrobu, jako hydroxypropylmethylcelulóza, polyvinylpyrrolidon (PVP). Výhodně práškový nosič vytvoří v nosní dutině gel. Tato prášková kompozice může být v jednotkové dávkové formě, například v kapsli nebo patrone, například z želatiny, nebo v blisterovém balení, ze kterého může být prášek podáván pomocí inhalátoru.

Ve formulacích, zamýšlených pro podání do dýchacího traktu, včetně intranasálních formulací, bude mít účinná látka obecně velmi malou velikost částic, například asi 5 mikrometrů nebo ještě méně. Taková velikost částic může být dosažena pomocí známých postupů, například mikronizací.

V případě, že je to žádoucí, mohou být použity formulace s regulovaným uvolňováním účinné látky.

Farmaceutické kompozice jsou výhodně v jednotkových dávkovačích formách. V takové formě je kompozice rozdělena do jednotkových dávek, obsahujících příslušná množství účinné látky. Uvedené jednotková dávková forma může mít balenou formu, přičemž každé takové balení obsahuje diskrétní množství kompozice a má formu balených tablet, kapslí a prášků v lékovkách nebo ampulích. Jednotkou dávkovou formou může být také samotná tableta, kapsle, oplatka nebo zdravotní bonbon, anebo libovolný z těchto přípravků může být v balené formě.

Výhodnými kompozicemi jsou tablety nebo kapsle pro perorální podání a kapaliny pro intravenózní podání.

-20CZ 284379 B6

Způsob léčení

Sloučeniny podle vynálezu jsou extrémně užitečné při léčení parkinsonismu, deprese, obezity, narkolepsie a narkomanie vzhledem kjejich schopnosti inhibice resorpce dopaminu a kjejich nízké míře nežádoucích vedlejších účinků. Tyto vlastnosti činí sloučeniny podle vynálezu extrémně vhodnými pro léčení parkinsonismu, deprese, obezity, narkolepsie a narkomanie, jakož i dalších poruch, kladně reagujících na schopnost sloučenin podle vynálezu inhibovat resorpci dopaminu. V souladu s tím mohou být sloučeniny podle vynálezu podávány živému živočišnému tělu, včetně lidského těla, které má potřebu léčení, zmírnění nebo eliminace indikace, sdružené nebo kladně reagující na inhibici resorpce dopaminu. Takové indikace zahrnují zejména parkinsonismus, depresi, obezitu, narkolepsii a narkomanii. Vhodné dávkování zahrnuje 0,1 až 500 miligramu denně a zejména 10 až 70 miligramů denně, přičemž tyto dávky se podávají jednou nebo dvakrát denně v celkové denní dávce nebo ve dvou dílčích dávkách, a to v závislosti na přesném způsobu podání, na formě, která je podávána, na indikaci, ke které podání směřuje, subjektu léčení a tělesné hmotnosti tohoto subjektu a konečně na zkušenosti ošetřujícího lékaře nebo veterináře.

V následující části popisu bude vynález blíže objasněn pomocí konkrétních příkladů jeho provedení, přičemž tyto příklady mají pouze ilustrační charakter a nikterak neomezují rozsah vynálezu, který je jednoznačně definován formulací patentových nároků.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1 (-)-Anhydroekgon i n-methy lester

(lR,2R,3S)-2-Karbomethoxy-3-benzoxytropan-hydrochlorid (100 g, 0,29 mol) se v 1000 ml 1M kyseliny chlorovodíkové zahřívá na teplotu varu pod zpětným chladičem po dobu 18 hodin, načež se roztok ochladí ledem. Kyselina benzoová se izoluje filtrací a filtrát se zahustí za vakua. Po rozetření zbytku s ethanolem a filtraci se získá (lR,2R,3S)-3-hydroxy-tropan-2-karboxyláthydrochlorid ve formě bílé krystalické látky, která se bez dalšího čištění zahřívá na teplotu varu pod zpětným chladičem v oxychloridu fosforečném (50 ml) po dobu dvou hodin. Roztok se potom zahustí za vakua a za chlazení se přidá absolutní methanol (150 ml). Získaný roztok se potom míchá při okolní teplotě po dobu 16 hodin, načež se zahustí za vakua. Zbytek se ochladí ledem a zalkalizuje přidáním roztoku hydroxidu sodného (10M, přibližně 100 ml), načež se roztok pětkrát extrahuje diethyletherem. Sloučené organické fáze se vysuší a zahustí za vakua, přičemž se získá olej, který se destiluje za vakua (teplota 70-74 °C, tlak 100 Pa). Získá se požadovaná sloučenina ve formě čirého oleje.

Příklad 2 (1 R,2R,3S)-2-karbomethoxy-3-(4-fluorfenyl)tropan a (1 R,2R,3S)-2-karbomethoxy-3-(4fluorfenyl)tropan

-21 CZ 284379 B6

Ve tríhrdlé reakční baňce, vybavené mechanickým míchadlem, účinným chladičem a nálevkou s vyrovnávačem tlaku, se připraví Grignardovo činidlo za použití 4-bromfluorbenzenu (27,5 ml, 250 mmol) a hořčíkových třísek (6,3 g, 260 mmol) ve 250 ml absolutního diethyletheru. Získaný roztok Grignardova činidla se ochladí na teplotu -20 °C, načež se k němu v průběhu 30 minut přidá roztok (-)-anhydroekgonin-methylesteru (21,7 g, 120 mmol) ve 100 ml absolutního diethyletheru. Reakční směs se míchá po dobu jedné hodiny při teplotě -20 °C a reakce se dokončí jedním z následujících dvou způsobů:

1) Reakční směs se vmíchá do 250 ml drceného ledu a vodná fáze se okyselí přidáním přibližně 100 ml 4M kyseliny chlorovodíkové. Organická fáze se odlije a vodná fáze se promyje 100 ml diethyletheru. Vodná fáze se zalkalizuje přidáním 25% roztoku hydroxidu amonného a potom nasytí chloridem sodným a nakonec třikrát extrahuje diethyletherem. Sloučená organická fáze se vysuší a zahustí za vakua, přičemž se získá olej, který se destiluje za vakua (150-160 °C, 200 Pa). Tento způsob poskytuje směs dvou stereoizomerů (2S/2R v poměru 1/3), která se rozdělí sloupcovou chromatografií za použití eluční soustavy, tvořené směsí diethyletheru a pentanu v objemovém poměru 1:1, obsahující 1 % triethylaminu. Získané surové produkty se rozetřou v pentanu, přičemž se získají (lR,2S,3S)-2-karbomethoxy-3-(4-fluorfenyl)tropan ve formě bílých krystalů, mající teplotu tání 91 až 92 °C, a (lR,2R,3S)-2-karbomethoxy-3-(4fluorfenyl)-tropan ve formě bílých krystalů, mající teplotu tání 65 až 66 °C.

2) Reakční směs se ochladí na teplotu -78 °C, načež se k ní v průběhu 10 minut přidá roztok kyseliny trifluoroctové (20 ml, 250 mmol) v 50 ml diethyletheru. Chladicí lázeň se odstaví a když reakční směs dosáhla 0 °C, směs se vmíchá do 700 ml vody. pH vodné fáze se nastaví na hodnotu 1 přidáním koncentrované kyseliny chlorovodíkové a směs se podrobí vodnému zpracování a čištění, které se provedou stejným způsobem, jak to bylo popsáno výše. Tento způsob poskytuje směs dvou stereoizomerů (2S/2R v poměru 2:1).

Stejným způsobem se získají následující sloučeniny:

(1 R,2R,3S)-2-Karbomethoxy-3-benzyltropan a (1 R,2S,3S)-2-karbomethoxy-3-benzyltropan, způsob 2), získá se pouze (lR,2S,3S)-2-karbomethoxy-3-benzyltropan, který není znečištěn druhým izomerem a který má formu oleje, který v průběhu stání krystalizuje.

Teplota tání: 53-54 °C.

(lR,2R,3S)-2-Karbomethoxy-3-benzyltropan se získá izomerací směsi, jak je to popsáno v příkladu 3.

(1 R,2R,3S)-2-Karbomethoxy-3-(4-chlorfenyl)tropan a (1 R,2S,3S)-2-karbomethoxy-3-(4chlorfenyl)tropan, způsob 2). Oba izomery se nerozdělí, nýbrž směs se izomeruje způsobem, popsaným v příkladu 3.

(1 R,2R,3S)-2-Karbomethoxy-3-(4-chlorfenyl)tropan, (1 R,2S,3S)-2-karbomethoxy-3-(4chlorfenyl)tropan, (lS,2S,3R)-2-karbomethoxy-3-(4-chlorfenyl)tropan a (lS,2R,3R}-2karbomethoxy-3-(4-chlorfenyl)tropan, způsob 2). Dvě sady enantiomerních párů se neseparují, nýbrž se tato směs izomeruje způsobem, popsaným v příkladu 3.

-22CZ 284379 B6 (lR,2R,3S)-2-K.arbomethoxy-3-(4-methylfenyl)tropan a (lR,2S,3S)-2-karbornethoxy-3-(4methylfenyl)tropan, způsob 2). Tyto dva izomery se neseparují, nýbrž se jejich směs izomeruje způsobem, popsaným v příkladu 3.

(1 R,2S,3S)-2-Karbomethoxy-3-(2-naftyl)tropan a (I R,2R,3S)-2-karbomethoxy-3-(2naftyl)tropan, způsob 2). Grignardovo činidlo se připraví přidáním směsi jednoho ekvivalentu 2bromnaftalenu a 1,2-dibromethanu v diethyletheru k suspenzi dvou ekvivalentů hořčíku, zahřívané na teplotu varu pod zpětným chladičem. Oba produkty mají formu bílých krystalických sloučenin s teplotami tání 79 až 80 °C, resp. 86 až 87 °C.

(1 R,2R,3S)-2-Karbomethoxy-3-(l-naftyl)tropan a (l R,2S,3S)-2-karbomethoxy-3-( l-naftyl)tropan-hydrochlorid, způsob 2). Grignardovo činidlo se připraví přidáním směsi jednoho ekvivalentu 1-bromnaftalenu a 1,2-dibromethanu v diethyletheru k suspenzi dvou ekvivalentů hořčíku, zahřívané na teplotu varu pod zpětným chladičem. Výše uvedené sloučeniny se izolují ve formě bílé krystalické sloučeniny s teplotou tání 133-135 °C, resp. bílé amorfní sloučeniny.

(1 R,2S,3S)-2-Karbomethoxy-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan a (1 R,2R,3S)-2-karbomethoxy-3(3,4-dichlorfenyl)tropan, způsob 2). Oba produkty se získají ve formě bílých krystalických sloučenin s teplotami tání 69 až 70 °C, resp. 61 až 63 °C.

Racemická směs (lR,2R,3S)-2-karbomethoxy-3-(3,4-dichlorfenyl)tropanu a jeho enantiomeru, (lS,2S,3R)-2-karbomethoxy-3-(3,4-dichlorfenyl)tropanu, se připraví za použití (±)anhydroekgonin-methylesteru jako výchozí látky, způsob 2), a následnou izomerací, popsanou v příkladu 3.

(lS,2S,3R)-2-Karbomethoxy-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan se připraví za použití způsobu 2). Získaná sloučenina se neizoluje, nýbrž izomeruje způsobem, popsaným v příkladu 3.

(lR,2S,3S)-2-Karbomethoxy-3-(4-fenylfenyl)tropan a (lR,2R,3S)-2-karbomethoxy-3-(4fenylfenyl)tropan, způsob 2). Oba produkty mají formu bílých krystalických látek s teplotami tání 130 až 132 °C, resp. 95 až 96 °C.

(1 R,2S,3S)-2-Karbomethoxy-3-(4-terc.butylfenyl)tropan a (1 R,2R,3S)-2-karbomethoxy-3(4-terc.butylfenyl)tropan, způsob 2). Oba produkty mají formu bílých krystalických sloučenin s teplotami tání 84 až 85 °C, resp. 83 až 84 °C.

Příklad 3 (lR,2R,3S)-2-Karbomethoxy-3-benzyltropan-hydrochlorid

N COOMe

K roztoku (lR,2S,3S)-2-karbomethoxy-3-benzyltropanu (5,6 g, 20,5 mmol) v absolutním methanolu (100 ml) se přidá roztok methoxidu sodného v methanolu (2M, 2 ml) a směs se zahřívá na teplotu varu pod zpětným chladičem po dobu 16 hodin. Reakční směs se potom zahustí za vakua a zbytek se rozpustí v diethyletheru a promyje vodou. Organická fáze se vysuší a zahustí za vakua. Získaný surový produkt se přečistí sloupcovou chromatografii za použití eluční soustavy, tvořené směsí diethyletheru a pentanu v objemovém poměru 1:1, obsahující 1 %

-23 CZ 284379 B6 triethylaminu, přičemž se získá (lR,2R,3S)-2-karbomethoxy-3-benzyltropan ve formě oleje. Rozpuštěním tohoto produktu v diethyletheru a následným přidáním roztoku kyseliny chlorovodíkové v diethyletheru se dosáhne vysrážení požadované sloučeniny ve formě bílých krystalů.

Teplota tání: 188 až 190 °C.

Příklad 4

2-Karbomethoxy-3-tropanon

K. suspenzi hydridu sodného (3,2 g, 80%, 107 mmol, předběžně promyta v cyklohexanu) a dimethylkarbonátu (9,13 ml, 108 mmol) v absolutním cyklohexanu, zahřívané na teplotu varu pod zpětným chladičem, se v průběhu 15 minut přidá roztok (±)-3-tropanonu (6,9 g, 50 mmol) v 50 ml absolutního cyklohexanu. Nebyl pozorován žádný vývoj vodíku, a tak se přidá 0,2 ml methanolu. Reakční směs se míchá přes noc za zahřívání na teplotu varu pod zpětným chladičem, načež se ochladí na okolní teplotu a potom se k ní opatrně přidá 75 ml vody. K vodné fázi se přidá 40 g chloridu amonného a získaná směs se extrahuje osmkrát methylenchloridem. Sloučené organické methylenchloridové fáze se vysuší a zahustí za vakua, načež se zbytek, tvořící surový produkt, chromatografuje za použití eluční soustavy, tvořené methylenchloridem, obsahujícím postupně zvyšující se množství (až 10%) methanolu. Frakce obsahující produkt se zahustí za vakua a získaný olej se destiluje za použití kuličkového chladiče (tlak 100 Pa, teplota 120 °C), přičemž se získá požadovaná sloučenina ve formě oranžových krystalů.

Teplota tání: 104 až 107 °C.

Příklad 5

2-Karbomethoxy-3-hydroxytropan-hydrochlorid — N COOMe —N , COOMe

Μ - Λ

O OH

K roztoku 2-karbomethoxy-3-tropanonu, získaného v příkladu 4 (17 g, 85 mmol), v 750 ml methanolu, ochlazeného na teplotu -35 °C, se přidá borohydrid sodný (17 g, 450 mmol) a získaná směs se míchá po dobu 4 hodin. K. ochlazenému roztoku se přidá koncentrovaná kyselina chlorovodíková (40 ml) a směs se zahustí za vakua. Přidá se voda (400 ml) a pH se nastaví na hodnotu 3 přidáním koncentrované kyseliny chlorovodíkové. Po trojnásobném promytí vodné fáze diethyletherem se pH nastaví na hodnotu 11 přidáním koncentrovaného roztoku hydroxidu amonného a vodná fáze se třikrát extrahuje methylenchloridem. Po zahuštění za vakua se získá olej, který se rozpustí v ethanolu, načež se k získanému roztoku přidá koncentrovaná kyselina chlorovodíková a směs se zahustí za vakua. Mrazovou sublimací (lyofilizací) zbytku se získá požadovaná sloučenina ve formě amorfního produktu.

(lS)-Karbomethoxy-3-hydroxytropan ve formě amorfní pevné látky se získá obdobným způsobem za použití výchozího produktu, tvořeného (lS)-2-karbomethoxy-3-tropanonem,

-24CZ 284379 B6 získaným štěpením, popsaným v J. Med. Chem., 37, 2007 (1994), sloučeniny, získané v příkladu 4.

Příklad 6 (1 RS)-Anhydroekgonin-methylester

N COOMe

JH

OH

COOMe

Směs 2-karbomethoxy-3-hydroxytropan-hydrochloridu, získaného v příkladu 5 (0,5 g,

2,1 mmol) a thionylchloridu (0,4 ml, 5,3 mmol) se míchá při teplotě 60 °C po dobu dvou hodin, přičemž se po uplynutí této doby získá čirý roztok. Po ochlazení na okolní teplotu se přidá drcený led a hodnota pH se nastaví na 11 přidáním koncentrovaného roztoku hydroxidu amonného. Získaná směs se extrahuje dvakrát methylenchloridem, načež se rozpouštědlo odstraní za vakua, přičemž se získá požadovaná sloučenina ve formě oleje, který destiluje při tlaku 100 Pa a teplotě 70 až 85 °C.

(lS)-Anhydroekgonin-methylester ve formě oleje se připraví stejným způsobem za použití (1S)karbomethoxy-3-hydroxytropanu, získaného v příkladu 5, jako výchozí látky.

Příklad 7 (lR,2R,3S)-N-Normethyl-2-karbomethoxy-3-(3,4-dichlorfenyl)-tropan

Směs (lR,2R,3S)-2-karbomethoxy-3-(3,4-dichlorfenyl)-tropanu (8,7 g, 27 mmol) a 2,2,2trichlorethylchlorformiátu (14,6 ml, 107 mmol) v bezvodém toluenu (100 ml) se zahřívá na teplotu varu pod zpětným chladičem po dobu 18 hodin. Reakční směs se potom zahustí za vakua a ke zbytku se přidá methylenchlorid a směs se následně promyje vodou. Organická fáze se vysuší a zahustí za vakua. Zbytek se rozpustí v 75% vodném roztoku kyseliny octové (60 ml), načež se k reakční směsi přidá zinkový prach (8,7 g) a získaná směs se míchá při okolní teplotě po dobu 18 hodin. Potom se přidá koncentrovaný roztok hydroxidu amonného (pH vyšší než 7) a směs se extrahuje dvakrát diethyletherem. Sloučená organická fáze se vysuší a zahustí za vakua, přičemž se získá požadovaná sloučenina ve formě oleje, který se použije bez dalšího čištění.

Příklad 8 (1 R,2R,3 S)-N-Normethyl-N-(terc.butoxykarbonyl)-2-karbomethoxy-3-(3,4dichlorfenyl)tropan

-25 CZ 284379 B6

Roztok (lR,2R,3S)-N-normethyl-2-karbomethoxy-3-(3,4-dichlorfenyl)tropanu (7 g, 22,3 mmol) a di-terc.butyldikarbonátu (7,7 ml, 33,6 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (50 ml) se míchá při okolní teplotě po dobu jedné hodiny. Reakce se ukončí přidáním ledu (100 ml) a směs se extrahuje dvakrát diethyletherem a diethyletherová frakce se vysuší a zahustí za vakua, přičemž se získá požadovaná sloučenina ve formě oleje, který se použije bez dalšího čištění.

Příklad 9 (lR,2S,3S)-2-Hydroxymethyl-3-(4-fluorfenyl)tropan

K suspenzi lithiumaluminiumhydridu (0,8 g, 21 mmol) v diethyletheru (30 ml) se při okolní teplotě pozvolna přidá roztok (lR,2S,3S)-2-karbomethoxy-3-(4-fluorfenyl)tropanu (5 g, 18 mmol) ve 100 ml diethyletheru. Reakce je dokončena po 10 minutovém míchání, načež se k reakční směsi přidá 0,8 ml roztoku hydroxidu sodného (15%) a 2 ml vody. Hlinitá sůl se odstraní filtrací a rozpouštědlo se odežene za vakua, přičemž se jako zbytek získá olej. Požadovaná sloučenina se vysráží po rozetření s pentanem ve formě bílých krystalů.

Teplota tání: 79 až 80 °C.

Obdobným způsobem se získají následující sloučeniny:

(lR,2R,3S)-2-Hydroxymethyl-3-(4-fluorfenyl)tropan ve formě bílých krystalů. Teplota tání: 169-170 °C.

(lR,2R,3S)-2-Hydroxymethyl-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan ve formě bílých krystalů. Teplota tání: 145 až 150 °C.

(lR,2R,3S)-N-Normethyl-N-(terc.butoxykarbonyl)-2-hydroxymethyl-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan ve formě oleje.

(lR,2S,3S)-2-Hydroxymethyl-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan ve formě bílých krystalů. Teplota tání: 83 až 89 °C.

Racemická směs (lR,2R,3S)-2-hydroxymethyl-3-(3,4-dichlorfenyl)tropanu a jeho enantiomeru, (lS,2S,3R)-2-hydroxymethyl-3-(3,4-dichlorfenyl)tropanu.

Teplota tání: 186 až 187 °C.

(1 S,2S,3R)-2-Hydroxymethyl-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan.

Teplota tání: 179 až 184 °C.

(lR,2R,3S)-2-Hydroxymethyl-3-(4-chlorfenyl)tropan ve formě bílých krystalů.

Teplota tání: 200 až 202 °C.

-26CZ 284379 B6

Příklad 10 (lR,2R,3S)-2-Formyl-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan

K. roztoku oxalylchloridu (2,3 ml) v absolutním methylenchloridu (60 ml) se při teplotě -60 °C přidá v průběhu 10 minut roztok dimethylsulfoxidu (4 ml) v absolutním methylenchloridu (10 ml). Získaná směs se míchá po dobu 10 minut, načež se k ní v průběhu 15 minut přidá suspenze (lR,2R,3S)-2-hydroxymethyl-3-(3,4-dichlorfenyl)tropanu (7 g, 23,3 mmol) v absolutním methylenchloridu (400 ml). Získaná směs se míchá po dobu 10 minut, načež se přidá triethylamin (17 ml, 0,12 mol) a směs se míchá po dobu dalších 10 minut. Reakční směs se potom ponechá ohřát na okolní teplotu, načež se k ní přidá voda (200 ml). Organická fáze se potom dvakrát promyje vodou, vysuší a zahustí za vakua, přičemž se získá požadovaná sloučenina ve formě bílých krystalů.

Teplota tání: 131 až 135 °C.

Obdobným způsobem se získají následující sloučeniny:

Racemická směs (lR,2R,3S)-2-formyl-3-(3,4-dichlorfenyl)tropanu a jeho enantiomeru, (lS,2S,3R)-2-formyl-3-(3,4-dichlorfenyl)tropanu, která se použije bez dalšího čištění.

(lS,2S,3R)-2-Formyl-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan, který se použije bez dalšího čištění.

(lR,2R,3S)-2-Formyl-3-(4-chlorfenyl)tropan, který se použije bez dalšího čištění.

(1 R,2R,3 S)-N-Normethyl-N-(terc.butoxykarbonyl)-2-formyl-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan ve formě oleje, který se použije bez dalšího čištění.

Stejným způsobem se připraví následující sloučeniny, přičemž však se meziproduktový aldehyd neizoluje vzhledem k riziku izomerace (lR,2S,3S)-izomeru na (lR,2R,3S)-izomer. Namísto ohřátí reakční směsi na okolní teplotu a přidání vody za účelem ukončení reakce se přidá v přebytku (3 ekvivalenty) příslušná hydroxylamoniová sůl a směs se ponechá dosáhnout okolní teploty, při které se potom míchá po dobu 18 hodin. Reakční směs se potom dvakrát promyje vodou a organická fáze se vysuší a zahustí za vakua.

(lR,2S,3S)-3-(3,4-Dichlorfenyl)tropan-2-aldoxim. Izoluje se filtrací reakční směsi ve formě směsi izomerů syn a anti v poměru 20 % + 80 % (stanoveno nukleární magnetickorezonanční spektroskopií) bez identifikace identity obou izomerů. Získaný produkt nebyl dále čištěn a má formu bílých krystalů.

Teplota tání: 248 až 251 °C.

(lR,2S,3S)-3-(3,4-Dichlorfenyl)tropan-2-0-methylaldoxim. Po zahuštění methylenchloridové fáze se získá olej, který se podrobí sloupcové chromatografií za použití eluční soustavy, tvořené směsí methylenchloridu, acetonu a methanolu v objemovém poměru 4:1:1, přičemž se získá požadovaná sloučenina ve formě bílých krystalů.

Teplota tání: 98 až 100 °C.

-27 CZ 284379 B6 (lR,2S,3S)-3-(3,4-Dichlorfenyl)tropan-2-0-benzylaldoxim-hydrochlorid. Po zahuštění methylenchloridové fáze se získá olej, který se podrobí sloupcové chromatografii za použití ethylacetátu jako elučního činidla, přičemž se získá olejovitý produkt. Nakonec se tento olejovitý produkt rozpustí v malém objemu diethyletheru, načež se k získanému roztoku přidá roztok kyseliny chlorovodíkové v diethyletheru, čímž se získá požadovaná sloučenina ve formě bílých krystalů.

Teplota tání: 196 až 197 °C.

Příklad 11 (lR,2R,3S)-3-(3,4-Dichlorfenyl)tropan-2-aldoxiin

Cl

Cl

K roztoku (lR,2R,3S)-2-formyl-3-(3,4-dichlorfenyl)-tropanu (6,9 g, 23 mmol) v methanolu (100 ml) se přidá uhličitan sodný (4 g) a hydroxylamoniumchlorid (2,6 g, 37 mmol), načež se získaná směs míchá při okolní teplotě po dobu 18 hodin. Reakční směs se potom zahustí za vakua a zbytek se rozetře s vodou. Surový produkt se izoluje filtrací a rekrystalizací nejdříve ve směsi ethanolu a vody v objemovém poměru 1:1 a potom v 99% ethanolu, přičemž se získá požadovaná sloučenina (směs izomerů syn a anti v poměru přibližně 1:2) ve formě bílých krystalů.

Teplota tání: 230 až 235 °C.

Stejným způsobem se připraví následující sloučeniny:

(lR,2R,3S)-3-(4-Chlorfenyl)tropan-2-0-aldoxim ve formě bílých krystalů.

Teplota tání: 220 až 222 °C.

(lR,2R,3S)-3-(4-Chlorfenyl)tropan-2-O-methylaldoxim-hydrochlorid ve formě bílých krystalů.

Teplota tání: 90 až 93 °C.

(lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-methylaldoxim ve formě oleje.

Racemická směs (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-0-methylaldoximu a jeho enantiomeru, (lS,2S,3R)-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-0-methylaldoximu.

Teplota tání: 172 až 178 °C.

(lS,2S,3R)-3-(3,4-Dichlorfenyl)tropan-2-O-methylaldoxim, teplota tání: 123 až 130 °C.

(lR,2R,3S)-3-(3,4-Dichlorfenyl)tropan-2-O-benzylaldoxim ve formě bílých krystalů. Teplota tání: 161 až 163 °C.

(1 R,2R,3S)-3-(3,4-Dichlorfenyl)tropan-2-C>-fenylaldoxim, H₂SO₄,

Teplota tání: 100 až 102 °C.

(lR,2R,3S)-N-Normethyl-N-N-(terc.butoxykarbonyl)-3-(3,4-di-chlorfenyl)tropan-2-Omethylaldoxim ve formě oleje, který se použije bez dalšího čištění.

-28 CZ 284379 B6 (lR,2R,3S)-N-Normethyl-N-(terc.butoxykarbonyl)-3-(3,4-di-chlorfenyl)tropan-2-0benzylaldoxim ve formě oleje, který se použije bez dalšího čištění.

(1 R,2R,3S)-3-(3,4-Dichlorfenyl)tropan-2-0-(2-propinyl)aldoxim-hydrochlorid ve formě 5 bílých krystalů.

Teplota tání nižší než 100 °C.

(1 R,2R,3S)-3-(3,4-Dichlorfenyl)tropan-2-0-(2-propenyl)aldoxim4iydrochIorid ve formě bílých krystalů.

Teplota tání: 131 až 133 °C.

(lR,2R,3S)-3-(3,4-Dichlorfenyl)tropan-2-O-(2-methylpropyl)-aIdoxim-hydrochlorid ve formě bílých krystalů.

Teplota tání: 161 až 163 °C.

(lR,2R,3S)-3-(3,4-Dichlorfenyl)tropan-2-O-cyklopropylmethyl-aldoxim-hydrochlorid ve formě bílých krystalů.

Teplota tání: 173 až 175 °C.

(lR,2R,3S)-3-(3,4-Dichlorfenyl)tropan-2-0-ethylaldoxim-hydrochlorid ve formě bílých krystalů.

Teplota tání nižší než 110 °C.

(lR,2R,3S)-3-(3,4-Dichlorfenyl)tropan-2-O-(l,l-dimethyl-ethyl)aldoxim-hydrochlorid ve 25 formě bílých krystalů.

Teplota tání: 213 až 215 °C.

(lR,2R,3S)-3-(4-Methylfenyl)tropan-2-0-methyIaldoxim-hydrochlorid ve formě bílých krystalů.

Teplota tání nižší než 95 °C (hygroskopický produkt).

Soli (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-O-methyl-aldoximu se připraví následujícím způsobem.

K roztoku (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-0-methylaldoximu (1 g, 3,0 mmol) v 96% ethanolu (5 ml) se přidá roztok kyseliny (3,25 mmol) a směs se míchá při okolní teplotě. Jestliže nedojde po 18 hodinách k tvorbě sraženiny, směs se zahustí za vakua a zahuštěná směs se ponechá vysrážet v ledničce. Krystalický produkt se izoluje filtrací a potom promyje malými podíly ledově chladného 96% ethanolu. Získaná sůl se rekrystalizuje buď z vody nebo 40 z izopropanolu.

Takto se získají následující soli (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-0-methylaldoximu:

maleát:	bílé krystaly, teplota tání (voda): 140-142 °C,
45 citrát:	bílé krystaly, teplota tání (izopropanol): 143-144 °C.
malonát:	bílé krystaly, teplota tání (izopropanol): 116-118 °C,
fumarát:	bílé krystaly, teplota tání (voda): 158-159 °C,
H2SO4: 50	bílé krystaly, teplota tání (voda): 84-87 °C, rekrystalizace z vody poskytne disulfátovou sůl s určitým podílem hydrogensulfátu. Vysrážení soli z izopropanolu poskytne hydrogensulfát s teplotou tání: 161-163 °C,
HCI:	bílé krystaly, teplota tání (voda): 74-75 °C.

-29CZ 284379 B6

Příklad 12 (lR,2R,3S)-3-(3,4-Dichlorfenyl)tropan-2-O-ethoxykarbonylmethylaldoxim-hydrochlorid

Cl

Roztok (lR,2R,3S)-2-formyl-3-(3,4-dichlorfenyl)tropanu (1 g), O-(2-acetoxy)hydroxylamoniumchloridu (0,5 g) a koncentrované kyseliny chlorovodíkové v ethanolu (1 ml) se zahřívá na teplotu varu pod zpětným chladičem po dobu 5 hodin, načež se míchá při okolní teplotě po dobu 18 hodin. Směs se zahustí za vakua a zbytek se rozetře s izopropanolem. Požadovaná sloučenina se izoluje filtrací, přičemž se získá ve formě bílých krystalů.

Teplota tání: 220-222 °C.

Stejným způsobem se připraví následující sloučeniny:

(lR,2R,3S)-3-(3,4-Dichlorfenyl)tropan-2-O-methoxykarbonylmethylaldoxim-hydrochlorid ve formě bílých krystalů.

Teplota tání: 193-195 °C. (lR,2R,3S)-3-(3,4-Dichlorfenyl)tropan-2-0-(l-ethoxykarbonyl-l,l-dimethylmethyl)aldoxim-hydrochlorid ve formě bílých krystalů.

Teplota tání: 214 až 215 °C. (lR,2R,3S)-3-(4-Chlorfenyl)tropan-2-0-methoxykarbonylmethyl-aldoxim-hydrochlorid ve formě bílých krystalů.

Teplota tání: 202-203 °C.

(1 R,2R,3S)-3-(3,4-Dichlorfenyl)tropan-2-O-karboxymethyl-2-aldoxim-hydrochlorid. Získá se společně s (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-0-methoxykarbonylmethylaldoximhydrochloridem po zahřívání na teplotu varu pod zpětným chladičem po dobu jedné hodiny, a to ve formě bílých krystalů.

Teplota tání: 158 až 160 °C.

Příklad 13 (lR,2R,3S)-N-Normethyl-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-methylaldoxim-hydrochlorid

Cl

Směs (1 R,2R,3S)-N-normethyl-N-(terc.butoxykarbonyl)-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-Omethylaldoximu (1,3 g, 3,1 mmol) a kyseliny trifluoroctové (10 ml) v absolutním methylenchloridu (10 ml) se míchá po dobu jedné hodiny. Přidá se led a methylenchlorid (50 ml) a hodnota pH směsi se nastaví na 10 přidáním 4M roztoku hydroxidu sodného. Organická fáze se vysuší a zahustí za vakua, přičemž se získá olej, který se podrobí sloupcové chromatografií za použití eluční soustavy, tvořené směsí methylenchloridu, methanolu a 25% roztoku hydroxidu

-30CZ 284379 B6 amonného v objemovém poměru 90:10:1. Frakce, obsahující produkt, se zahustí za vakua a získaný olej se rozpustí v malém množství diethyletheru, načež se k získanému roztoku přidá roztok kyseliny chlorovodíkové v diethyletheru. Požadovaná sloučenina se izoluje ve formě bílých krystalů.

Teplota tání: 226 až 230 °C.

Stejným způsobem se připraví následující sloučeniny:

(lR,2R,3S)-N-Normethyl-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-benzylaldoxim-hydrochlorid, io teplota tání: 70 až 72 °C.

(1 R,2R,3S)-N-Normethyl-3-(4-chlorfenyl)tropan-2-aldoxim-malonát, teplota tání: 70 až 75 °C.

(lR,2R,3S)-N-Normethyl-3-(4-chlorfenyl)tropan-2-O-methyl-aldoxim, H₂SO4.

Příklad 14

Syn- a anti-izomer (1R,2R,3S)- a (lS,2S,3R)-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-0-methylaldoximu

Tvorba (1R,2R,3S)- nebo (lS,2S,3R)-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-0-methylaldoximu reakcí odpovídající 2-formylové sloučeniny a methoxylamoniumchloridu, popsané v příkladu 12, poskytne směs syn- a anti-izomeru„ což je výsledkem kontroly kinetického produktu a 25 izomerace původně vytvořené směsi. V kinetické směsi je upřednostněn anti-izomer (více než 90%), zatímco rovnovážná směs obsahuje anti- a syn-izomer v poměru 7:3. Dosažení rovnovážné směsi syn-anti je katalyzováno kyselinou a rovnovážná směs může být snadno získána zahříváním vodného roztoku směsi na teplotu 100 °C po dobu tří hodin při hodnotě pH 4. Sloupcová chromatografie rovnovážné směsi za použití eluční soustavy, tvořené směsí toluenu a 30 ethylacetátu, obsahující 2 % triethylaminu, poskytne syn-izomer ve formě oleje, který může být destilován bez izomerace za použití kuličkového chladiče.

Claims (10)

1. Tropanové deriváty obecného vzorce

-31 CZ 284379 B6 směs tropanových derivátů uvedených obecných vzorců nebo jejich farmaceuticky přijatelná sůl, přičemž v uvedených obecných vzorcích

R znamená atom vodíku, alkylovou skupinu, obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, alkenylovou skupinu, obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, alkinylovou skupinu, obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, cykloalkylovou skupinu obsahující 3 až 7 uhlíkových atomů, cykloalkylalkylovou skupinu, ve které cykloalkylový zbytek obsahuje 3 až 7 uhlíkových atomů a alkylový zbytek obsahuje 1 až 6 uhlíkových atomů, nebo 2hydroxyethylovou skupinu,

R³ znamená skupinu CH=NOR', ve které

R' znamená atom vodíku, alkenylovou skupinu, obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, alkinylovou skupinu, obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, cykloalkylovou skupinu, obsahující 3 až 7 uhlíkových atomů, cykloalkylalkylovou skupinu, ve které cykloalkylový zbytek obsahuje 3 až 7 uhlíkových atomů a alkylový zbytek obsahuje 1 až

6 uhlíkových atomů, arylovou skupinu, jakou je fenylová a naftylová skupina, nebo alkylovou skupinu, obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, z nichž každá může být substituována skupinou COOH, COO-alkylovou skupinou, ve které alkylový zbytek obsahuje 1 až 6 uhlíkových atomů, COO-cykloalkylovou skupinou, ve které cykloalkylový zbytek obsahuje 3 až 7 uhlíkových atomů, nebo fenylovou skupinou, která může být jednou nebo vícekrát substituována substituenty, zvolenými z množiny, zahrnující atom halogenu, skupinu CF₃, skupinu CN, alkoxyskupinu, obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, cykloalkoxyskupinu, obsahující 3 až 7 uhlíkových atomů, alkylovou skupinu, obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, cykloalkylovou skupinu, obsahující 3 až 7 uhlíkových atomů, alkenylovou skupinu, obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, alkinylovou skupinu, obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, amino-skupinu a nitroskupinu, a

R⁴ znamená fenylovou skupinu, která může být jednou nebo vícekrát substituována substituenty, zvolenými z množiny, zahrnující atom halogenu, skupinu CF₃, skupinu CN, alkoxyskupinu, obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, cykloalkoxyskupinu, obsahující 3 až

7 uhlíkových atomů, alkylovou skupinu, obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, cykloalkylovou skupinu, obsahující 3 až 7 uhlíkových atomů, alkenylovou skupinu, obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, alkinylovou skupinu, obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, amino-skupinu, nitro-skupinu, 5- nebo 6-člennou heterocyklickou skupinu, obsahující 1 až 3 heteroatomy, zvolené z množiny, zhrnující atom kyslíku, atom síry a atom dusíku, a arylovou skupinu, jakou je fenylová a naftylová skupina, 3,4-methylendioxyfenylovou skupinu, benzylovou skupinu, která může být jednou nebo vícekrát substituována substituenty, zvolenými z množiny, zahrnující atom halogenu, skupinu CF₃, skupinu CN, alkoxyskupinu, obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, cykloalkoxyskupinu, obsahující 3 až 7 uhlíkových atomů, alkylovou skupinu, obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, cykloalkylovou skupinu, obsahující 3 až 7 uhlíkových atomů, alkenylovou skupinu, obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, alkinylovou skupinu, obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, amino-skupinu, nitro-skupinu, 5- nebo 6-člennou heterocyklickou skupinu, obsahující 1 až 3 heteroatomy, zvolené z množiny, zahrnující atom kyslíku, atom síry a atom dusíku, a arylovou skupinu, jakou je fenylová a naftylová skupina, nebo

-32 CZ 284379 B6 naftylovou skupinu, která může být jednou nebo vícekrát substituována substituenty, zvolenými z množiny, zahrnující atom halogenu, skupinu CF₃, skupinu CN, alkoxyskupinu, obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, cykloalkoxyskupinu, obsahující 3 až 7 uhlíkových atomů, alkylovou skupinu, obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, cykloalkylovou skupinu, obsahující 3 až 7 uhlíkových atomů, alkenylovou skupinu, obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, alkinylovou skupinu, obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, amino-skupinu, nitro-skupinu, 5- nebo 6-člennou heterocyklickou skupinu, obsahující 1 až 3 heteroatomy, zvolené z množiny, zahrnující atom kyslíku, atom dusíku a atom síry, a arylovou skupinu, jakou je fenylová a nafty lová skupina.

2. Tropanové deriváty podle nároku 1, kterými jsou

3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-aldoxim, 3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-methylaldoxim, 3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-benzylaldoxim, 3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-ethoxykarbonylmethylaldoxim, 3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-methoxykarbonylmethylaldoxim, 3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-0-(l-ethoxykarbonyl-l,l-dimethylmethyl)aldoxim, 3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-karboxymethylaldoxim, N-normethyl-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-methylaldoxim nebo

N-normethyl-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-0-benzylaldoxim, nebo jejich farmaceuticky přijatelná adiční sůl.

3. Tropanové deriváty podle nároku 1, kterými jsou (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-aldoxim, (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-0-benzylaldoxim, (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-0-ethoxykarbonylmethylaldoxim, (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-methoxykarbonylmethylaldoxim, (1R,2R,38)-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-(l-ethoxykarbonyl-l,l-dimethylmethyl)aldoxim, (lR,2R,3S}-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-karboxymethyl-2-aldoxim, (lR,2R,3S)-N-normethyl-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-O-methylaldoxim, nebo (lR,2R,3S)-N-normethyl-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-C)-benzylaldoxim, nebo jejich farmaceuticky přijatelná adiční sůl.

4. Tropanový derivát podle nároku 1, kterým je (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-Omethylaldoxim nebo jeho farmaceuticky přijatelná adiční sůl.

5. Tropanový derivát podle nároku 4, kterým je anti-izomer (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-0-inethylaldoximu, syn-izomer (1 R,2R,3S)-3-(3,4-dichlorfenyl)tropan-2-C)-methylaldoximu, jejich směs nebo jejich farmaceuticky přijatelná adiční sůl.

6. Farmaceutická kompozice pro léčení poruch s odezvou na inhibici resorpce dopaminu, vyznačená tím, že obsahuje účinné množství tropanového derivátu podle některého z nároků 1 až 5 nebo jeho farmaceuticky přijatelné adiční soli společně s alespoň jedním farmaceuticky přijatelným nosičem nebo ředidlem.

- CZ 284379 B6

7. Tropanový derivát podle některého z nároků 1 až 5 pro výrobu léčiva pro léčení poruchy nebo nemoci živého živočišného těla, včetně lidského těla, přičemž tato porucha nebo nemoc kladně reaguje na inhibici resorpce monoaminového neurotransmitoru v centrální nervové soustavě.

8. Tropanový derivát podle některého z nároků 1 až 5 pro výrobu léčiva pro léčení poruchy nebo nemoci živého živočišného těla, včetně lidského těla, přičemž tato porucha nebo nemoc kladně reaguje na inhibici resorpce dopaminu v centrální nervové soustavě.

9. Tropanový derivát podle některého z nároků 1 až 5 pro výrobu léčiva pro léčení parkinsonismu, deprese, obezity, narkolepsie, návyku na návykové léčivé látky nebo/a narkomanie.

10. Způsob přípravy tropanových derivátů podle nároku I, vyznačený tím, že se sloučenina obecného vzorce její enantiomer nebo jejich směs, kde R má význam uvedený v nároku 1 a R¹² znamená skupinu esteru karboxylové kyseliny nebo R¹² má význam, definovaný v nároku 1 pro R³, uvede v reakci se sloučeninou obecného vzorce ve kterém R⁴ má význam definovaný v nároku 1 a A znamená libovolný typ reaktivní funkce, vhodný pro vytvoření karbanionu jako jejího protějšku, jako Li, MgX, kde X znamená atom halogenu, a CuLi, při Michaelově 1,1—adiční reakci, a v případě, že R¹² znamená skupinu esteru karboxylové kyseliny, potom se esterová skupina ve významu R¹* převede na oximovou skupinu ve významu R³, definovanou v nároku 1.