SK280875B6 - Tropánové deriváty, spôsob ich prípravy, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a použitie týchto derivátov na výrobu liečiv - Google Patents

Abstract

Sú opísané tropánové deriváty všeobecného vzorca (I), ich zmesi alebo ich farmaceuticky prijateľné soli, pričom v uvedenom vzorci R znamená atóm vodíka, alkylovú skupinu, alkenylovú skupinu, alkinylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, cykloalkylalkylovú skupinu alebo 2-hydroxyetylovú skupinu, R3 znamená skupinu CH=NOR' a R4 znamená prípadne substituovanú fenylovú, benzylovú alebo naftylovú skupinu alebo 3,4-metyléndioxyfenylovú skupinu. Uvedené tropánové deriváty majú cenné farmakologické vlastnosti ako inhibítory spätného vychytávania monoamínových neurotransmiterov. Ďalej je opísaný spôsob ich prípravy, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a použite týchto tropánových derivátov na výrobu liečiv.ŕ

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka derivátov tropánu, ktoré inhibujú spätné vychytávanie monoamínových neurotransmiterov, napr. dopamínu, sérotonínu alebo noradrenalínu. Predložený vynález sa týka najmä derivátov tropán-2-aldoxímu, ktoré účinne inhibujú spätné vychytávanie dopamínu a ktoré samy osebe majú výraznú antiparkinsonickú, antidepresívnu, antiobezitnú, antinarkoleptickú a antinarkomanickú účinnosť a ktoré súčasne majú iba málo nežiaducich vedľajších účinkov; ďalej sa týka spôsobu prípravy týchto derivátov tropán-2-aldoxímu; farmaceutických prípravkov, obsahujúcich tieto deriváty tropán-2-aldoxímu a ich použitia na výrobu liečiva na liečbu Parkinsonovcj choroby, depresie, obezity, narkolepsie a narkománie.

Doterajší stav techniky

Dopamín sa uvoľňuje do synaptickej štrbiny aby stimuloval postsynaptické dopamínergické receptory. Dopamín sa odstraňuje spätným vychytávaním do presynaptických zakončení. Inhibíciou tohto vychytávania sa dosiahne zvýšenie fyziologickej dopamínergickej aktivity. O látkach, ktoré sú schopné inhibovať spätne vychytávanie dopamínu možno predpokladať, že budú užitočné pri liečbe Parkinsonovej choroby, depresie, návyku na kokaín, obezity a narkolepsie.

Kokaín je dobre známou látkou, ktorá účinne uvoľňuje dopamín a ktorá súčasne inhibuje jeho spätné vychytávanie. Kokaín má mnoho farmakologických účinkov, najmä však mohutne stimuluje CNS a má miestny znecitlivejúci účinok. Tieto účinky sprevádza jeho vysoká toxicita a návykovosť (pozri napr. R.L.Clarke a spol. v Joumal of Medicinal Chemistry 16(11), 1261-1267 (1973)). Predpokladá sa, že návyk na kokaín súvisí s jeho silným stimulačným pôsobením, krátkotrvajúcim účinkom a rýchlym nástupom účinku spolu s jeho výraznou schopnosťou uvoľňovať dopamín. Predpokladá sa, že látky, ktoré sú schopné na dlhý čas selektívne inhibovať spätné vychytávanie dopamínu a ktoré nemajú schopnosť uvoľňovať dopamín, budú mimoriadne užitočné ako nový typ antiparkinsonických, antidepresívnych, antiobezitných a antinarkoleptických prostriedkov. Tieto látky budú ďalej mimoriadne užitočné pri liečbe návyku na drogy, najmä na liečbu návyku či zneužívania kokaínu.

V priebehu rokov boli mnohé pokusy optimalizovať vlastnosti kokaínu. Syntetizovali sa mnohé deriváty a izoméry kokaínu. Príklady možno nájsť v článkoch, ktoré publikovali R.L.Clarke a spol. v Joumal of Medicinal Chemistry' 16(11), 1261-1267 (1973) a F.Ivy Caroll a spol. v Joumal of Medicinal Chemistry 34, 883-886 (1961). Mnohé z týchto derivátov, ale pravdepodobne najmä deriváty, ktoré uvádza R.L.Clarke a spol., sú látky s veľmi silným stimulačným účinkom, pri ktorých sa zistilo, že sú veľmi účinnými inhibítormi spätného vychytávania dopamínu. Pri žiadneho z týchto dodnes syntetizovaných derivátov kokaínu sa však nezistilo, že by nemal nežiaduce účinky. Preto potreba nových inhibítorov spätného vychytávania dopamínu je stále aktuálna.

Niektoré z látok, ktoré poskytuje tento vynález, popri schopnosti inhibovať spätné vychytávanie dopamínu, sú aj účinnými inhibítormi spätného vychytávania sérotonínu (5-hydroxytryptamínu, 5-HT). Farmaká, ktoré sa v súčasnosti používajú v liečbe depresií, sú inhibítormi spätného vychytávania noradrenalínu (desipramín, nortriptylín a protriptylín), alebo sú zmiešanými inhibítormi spätného vy chytávania sérotonínu aj noradrenalínu (imipramín a amitriptylín). Vážnym nedostatkom týchto látok je oneskorený nástup ich účinku (niekoľko týždňov). Predpokladá sa, že zmiešaný inhibítor spätného vychytávania sérotonínu i dopamínu môže mať výhodnejší antidepresívny účinok s rýchlejším nástupom účinku.

Podstata vynálezu

Cieľom predloženého vynálezu je poskytnúť tropánové deriváty, ktoré majú antiparkinsonickú, antidepresívnu, antiobezitnú, antinarkoleptickú a antinarkomanickú účinnosť.

Ďalším cieľom vynálezu je poskytnúť farmaceutické prostriedky obsahujúce deriváty tropán-2-aldoxímu, ktoré sú použiteľné pri liečbe Parkinsonovej choroby, depresie, obezity, narkolepsie a narkománie.

Ešte ďalším cieľom vynálezu je použitie jedného alebo viacerých tropánových derivátov na výrobu liečiva na liečenie Parkinsonovej choroby, obezity, narkolepsie a narkománie podávaním terapeuticky účinného množstva tohto derivátu organizmu živočíchov, vrátane človeka.

Predmetom predloženého vynálezu sú tropánové deriváty všeobecného vzorca (I)

ich akákoľvek zmes alebo ich farmaceutický vhodná soľ; kde

R je vodík, alkyl, obsahujúci 1 až 6 atómov uhlíka, alkenyl, obsahujúci 2 až 6 atómov uhlíka, alkinyl, obsahujúci 2 až 6 atómov uhlíka, cykloalkyl, obsahujúci 3 až 7 atómov uhlíka, cykloalkylalkyl, kde cykloalkylový zvyšok obsahuje 3 až 7 atómov uhlíka a alkylový zvyšok obsahuje 1 až 6 atómov uhlíka alebo 2-hydroxyetyl;

R³jeCH=NOR', kde

R' je vodík alebo alkenyl, obsahujúci 2 až 6 atómov uhlíka, alkinyl, obsahujúci 2 až 6 atómov uhlíka, cykloalkyl, obsahujúci 3 až 7 atómov uhlíka, cykloalkylalkyl, kde cykloalkylový zvyšok obsahuje 3 až 7 atómov uhlíka a alkylový zvyšok obsahuje 1 až 6 atómov uhlíka, aryl, ako je fenyl a naftyl alebo alkyl, obsahujúci 1 až 6 atómov uhlíka, z ktorých všetky môžu byť substituované skupinou COOH, COO-alkylom, v ktorom alkylový zvyšok obsahuje 1 až 6 atómov uhlíka, COO-cykloalkylom, v ktorom cykloalkylový zvyšok obsahuje 3 až 7 atómov uhlíka, alebo fenylom, ktorý môže byť raz alebo viackrát substituovaný substituentmi vybranými zo skupiny pozostávajúcej z halogénu, CF₃, CN, alkoxylu, obsahujúceho 1 až 6 atómov uhlíka, cykloalkoxylu, obsahujúceho 3 až 7 atómov uhlíka, alkylu, obsahujúceho 1 až 6 atómov uhlíka, cykloalkylu, obsahujúceho 3 až 7 atómov uhlíka, alkenylu, obsahujúceho 2 až 6 atómov uhlíka, alkinylu, obsahujúceho 2 až 6 atómov uhlíka, aminoskupiny a nitroskupiny; a

R⁴ je fenyl, ktorý môže byť substituovaný raz alebo viacnásobne substituentmi vybranými zo skupiny pozostávajúcej z halogénu, CF₃, CN, alkoxylu, obsahujúceho 1 až 6 atómov uhlíka, cykloalkoxylu, obsahujúceho 3 až 7 atómov uhlíka, alkylu, obsahujúceho 1 až 6 atómov uhlíka, cykloalkylu, obsahujúceho 3 až 7 atómov uhlíka, alkenylu, obsahujúceho 2 až 6 atómov uhlíka, alkinylu, obsahujúceho 2 až 6 atómov uhlíka, aminoskupiny, nitroskupiny, 5alebo 6-člennej heterocyklickej skupiny, obsahujúcej 1 až 3 heteroatómy, vybrané zo skupiny zahŕňajúcej kyslík, síru a dusík a arylu, ako je fenyl a naftyl; 3,4-metyléndioxyfenyl;

benzyl, ktorý môže byť substituovaný raz alebo viacnásobne substituentmi vybranými zo skupiny pozostávajúcej z halogénu, CF₃, CN, alkoxylu, obsahujúceho 1 až 6 atómov uhlíka, cykloalkoxylu, obsahujúceho 3 až 7 atómov uhlíka, alkylu, obsahujúceho 1 až 6 atómov uhlíka, cykloalkylu, obsahujúceho 3 až 7 atómov uhlíka, alkenylu, obsahujúceho 2 až 6 atómov uhlíka, alkinylu, obsahujúceho 2 až 6 atómov uhlíka, aminoskupiny, nitroskupiny, 5- alebo 6-člennej heterocyklickej skupiny, obsahujúcej 1 až 3 heteroatómy, vybrané zo skupiny zahŕňajúcej kyslík, síru a dusík, a arylu, ako je fenyl a naftyl;

naftyl, ktorý môže byť substituovaný raz alebo viacnásobne substituentmi vybranými zo skupiny pozostávajúcej z halogénu, CF₃, CN, alkoxylu, obsahujúceho 1 až 6 atómov uhlíka, cykloalkoxylu, obsahujúceho 3 až 7 atómov uhlíka, alkylu, obsahujúceho 1 až 6 atómov uhlíka, cykloalkylu, obsahujúceho 3 až 7 atómov uhlíka, alkenylu, obsahujúceho 2 až 6 atómov uhlíka, alkinylu, obsahujúceho 2 až 6 atómov uhlíka, aminoskupiny, nitroskupiny, 5- alebo 6-člennej heterocyklickej skupiny, obsahujúcej 1 až 3 heteroatómy, vybrané zo skupiny zahŕňajúcej kyslík, síru a dusík, a arylu, ako je fenyl a naftyl.

Výhodné uskutočnenie predloženého vynálezu zahŕňa tropánové deriváty: 3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-aldoxím, 3-(3,4-dichlórtenyl)tropán-2-O-metylaldoxím, 3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-benzylaldoxím, 3-(3,4-dichIórfenyl)tropán-2-Oetoxykarbonylmetylaldoxím, 3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-0-metoxykarbonylmetylaldoxím,

3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-( 1 -etoxykarbony 1-1,1-dimetyl-metylj-aldoxím, 3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-karboxymetylaldoxím, N-normetyl-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-metylaldoxím alebo

N-normetyl-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-benzylaldoxím alebo ich farmaceutický prijateľná adičná soľ.

Ešte výhodnejšími sú nasledujúce tropánové deriváty: (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-aldoxím, (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-benzylaldoxím, (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-etoxykarbonylmetylaldoxím, (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-metoxykarbonylmetylaldoxím, (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-(l-etoxykarbonyl-1,1 -dimetyl-metylj-aldoxím, (1 R,2R,3 S)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-karboxymetyl-2-aldoxím, (lR,2R,3S)-N-normetyl-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-0-metylaldoxím alebo (1 R,2R,3 S)-N-normetyl-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-0-benzylaldoxím, alebo ich farmaceutický prijateľná adičná soľ.

Výhodným aspektom vynálezu je (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlór-fcnyl)tropán-2-O-metylaldoxím alebo jeho farmaceutický prijateľná adičná soľ.

Ďalším výhodným uskutočnením vynálezu sú anti-izomér (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-metylaldoxímu, syn-izomér (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlórfenyl)-tropán-2-O-metylaldoxímu ich zmes, alebo ich farmaceutický prijateľná adičná soľ.

Predmetom predloženého vynálezu je aj farmaceutický prostriedok na liečenie porúch alebo chorôb odpovedajúcich na inhibíciu spätného vychytávania dopamínu, ktorý obsahuje účinné množstvo derivátu tropánu alebo jeho far maceutický prijateľnej adičnej soli, spoločne s aspoň jedným farmaceutický vhodným nosičom alebo riedidlom.

Uvedené tropánové deriváty je možné použiť na výrobu liečiva na liečenie porúch alebo chorôb živého organizmu živočíchov, vrátane ľudského tela, pričom táto porucha alebo choroba kladne reaguje na inhibíciu spätného vychytávania monoamínových neurotransmiterov, ako napríklad dopamínu v centrálnom nervovom systéme. Konkrétne na liečenie parkinsonizmu, depresie, obezity, narkolepsie, drogovej závislosti a/alebo narkománie.

Vynález opisuje aj spôsob prípravy tropánových derivátov spočívajúci v tom, že zlúčenina všeobecného vzorca

jej enantiomér alebo ich zmes, kde R je definované v nároku 1 a R¹² je ester karboxylovej kyseliny, alebo kde R¹² má význam ako definované R³, reaguje so zlúčeninou vzorca

R⁴-A, kde R⁴ je definované a A je akýkoľvek typ reaktívnej skupiny, vhodnej na vytvorenie karbaniónu ako jej protičasti, ako Li, MgX, kde X je halogén a CuLi v Michaelovej 1,4-adičnej reakcii, a kde v prípade, ak R¹² je ester karboxylovej kyseliny, sa esterová skupina s významom R¹² prevedie na definovanú oxímovú skupinu v R³.

Príklady farmaceutický vhodných prídavných solí zahŕňajú aditívne soli anorganických a organických kyselín, napr. hydrochlorid, hydrobromid, fosforečnan, dusičnan, chloristan, síran, citran, mliečnan, vínan, maleínan, fumaran, mandelan, benzoan, askorban, škorican, benzosulfónan, metanosulfónan, stearan, jantáran, glutamát, glykolát, toluén-p-sulfónan, mravčan, malónan, naftalén-2-sulfónan, salicylan a octan. Takéto soli sa vytvárajú všeobecne známymi postupmi.

Iné kyseliny, hoci samy osebe nie sú farmaceutický prijateľné, napr. kyselina oxalová, môžu byť užitočné pri príprave solí použiteľných ako medziprodukty pri získaní látok, ktoré sú predmetom vynálezu a ich farmaceutický prijateľných adičných solí.

Halogénom je fluór, chlór, bróm alebo jód.

Alkyl znamená priamy reťazec alebo rozvetvený reťazec pozostávajúci z jedného až šiestich atómov uhlíka, vrátane ale nie výhradne, metyl, etyl, propyl, izopropyl, butyl, izobutyl, t-butyl, pentyl a hexyl, pričom preferované skupiny sú metyl, etyl, propyl a izopropyl.

Cykloalkyl znamená cyklický alkyl pozostávajúci z troch až siedmich atómov uhlíka, vrátane, ale nie výhradne, cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl a cyklohexyl.

Alkenyl znamená skupinu pozostávajúcu z dvoch až šiestich atómov uhlíka, ktorá má aspoň jednu dvojitú väzbu, napríklad, ale nie výhradne etenyl, 1,2- alebo 2,3-propenyl, 1,2- 2,3- alebo 3,4 butenyl.

Alkinyl znamená skupinu dvoch až šiestich atómov uhlíka, ktorá má aspoň jednu trojitú väzbu, napríklad, ale nie výhradne etinyl, 2,3-propinyl, 2,3- alebo 3,4-butinyl.

Cykloalkylalkyl znamená cykloalkyl ako vyššie a alkyl ako vyššie, znamenajúc napr. cyklopropylmetyl.

Alkoxy je O-alkyl, kde alkyl jc definovaný ako vyššie.

Cykloalkoxy je O-cykloalkyl, kde cykloalkyl je definovaný ako vyššie.

Amino je NH₂ alebo NH-alkyl, alebo N-(alkyl)₂, kde alkyl je definovaný ako vyššie.

SK 280875 Β6

Heteroaryl je výhodne 5- alebo 6-členná heterocyklická monocyklická skupina. Takáto heteroarylová skupina zahŕňa napr. oxazol-2-yl, oxazol-4-yl, oxazol-5-yl, izoxazol-3-yl, izoxazol-4-yl, izoxazol-5-yl, tiazol-2-yl, tiazol-4-yl, tiazol-5-yl, izotiazol-3-yl, izotiazol-4-yl, izotiazol-5-yl, l,2,4-oxadiazol-3-yl, l,2,4-oxadiazol-5-yl, 1,2,4-tiadiazol-3-yl, l,2,4-tiadiazol-5-yl, l,2,5-oxadiazol-3-yl, 1,2,5-oxadiazol-4-yl, l,2,5-tiadiazol-3-yl, l,2,5-tiadiazol-4-yl, 2-imidazolyl, 4-imidazolyl, 5-imidazolyl, 2-pyrolyl, 3-pyrolyl, 2-furanyl, 3-furanyl, 2-tienyl, 3-tienyl, 2-pyridyl, 3-pyridyl, 4-pyridyl.

Aryl je aromatický uhľovodík, napr. fenyl a nafty L

l.p. znamená intraperitoneálne, čo je dobre známy spôsob podania látok.

P.o. znamená perorálne, čo je dobre známy spôsob podávania látok.

Ďalej, látky opisované v tomto vynáleze môžu existovať v nerozpustných ako aj rozpustných formách s farmaceutický prijateľnými rozpúšťadlami, akými sú voda, etanol a pod. Rozpustné formy sa z hľadiska predmetu vynálezu vo všeobecnosti pokladajú za rovnocenné s nerozpustnými formami.

Odborník si uvedomí, že látky opisované v tomto vynáleze majú niekoľko chirálnych centier a že takéto látky existujú vo forme izomérov (tzn. enantiomérov). Vynález zahrnuje všetky takéto izoméry a ich akékoľvek zmesi, vrátane racemických zmesí.

Niektoré zo zlúčenín podľa predloženého vynálezu existujú vo forme (+) a (-), ako aj v racemických formách. Racemické formy možno rozdeliť na optické antipódy známymi metódami, napr. separáciou ich diastereoizomérnych solí pomocou opticky aktívnej kyseliny a uvoľnením opticky aktívnej amínovej látky pôsobením zásady. Iná metóda delenia racemátov na optické antipódy je založená na ich chromatografii na opticky aktívnom matrixe. Racemické zlúčeniny podľa súčasného vynálezu možno teda deliť na optické antipódy, napr. frakciovanou kryštalizáciou ich d- alebo I- soli (napr. vínanu, mandlanu alebo gáfrosulfónanu). Deriváty tropán-2-aldoxímu podľa predloženého vynálezu sa dajú deliť vytvorením diastereoizomémych amidov reakciou zlúčenín podľa tohto vynálezu s opticky aktívnou aktivovanou karboxylovou kyselinou, napr. odvodenou od (+) alebo (-) fenylalanínu, (+) alebo (-) fenylglycínu, (+) alebo (-) kamfánovej kyseliny alebo vytvorením diastereoizomémych karbamátov reakciou zlúčenín podľa tohto vynálezu s opticky aktívnym chlórmravčanom a pod.

Na rozdelenie optických izomérov sa dajú použiť i ďalšie všeobecne známe metódy, ktoré poznajú aj priemerní odborníci. Medzi takéto metódy patria aj tie, ktoré opísali J.Jacques, A.Collet a S.Wilen v publikácii Enantiomers, Racemates, and Resolutions, vyd. John Wiley and Sons, NewYork(1981).

Okrem toho, keďže zlúčeninami podľa vynálezu sú oxímy, môžu existovať vo dvoch formách a to vo forme syn- a anti-, čo závisí od usporiadania substituentov okolo dvojitej väzby -C=N-. Tento vynález pokrýva syn- aj anti-formu zlúčenín opisovaných vynálezom, ako aj ich zmesi. Kyseliny katalyzujú anti-syn izomerizáciu.

Deriváty tropán-2-aldoxímu podľa vynálezu môžu byť pripravené početnými spôsobmi. Zlúčeniny podľa vynálezu a ich farmaceutický prijateľné deriváty je možné teda pripraviť akoukoľvek metódou známou na prípravu zlúčenín s analogickou štruktúrou a tak, ako to ukazujú reprezentatívne príklady, ktoré nasledujú.

Prehľad obrázkov na výkresoch

Obrázok 1 graficky znázorňuje účinok (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropan-2-O-metylaldoxímu (NS 2214) na skóre neschopnosti pri chvostnatých opiciach ovplyvnených hydrochloridom l-metyl-4-fenyl-l,2,3,6-tetrahydropyridínia (MPTP).

Obrázok 2 graficky znázorňuje účinok (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropan-2-0-metylaldoxímu (NS 2214) na lokomotorickú aktivitu pri chvostnatých opiciach ovplyvnených hydrochloridom l-metyl-4-fenyl-l,2,3,6-tetrahydropyridínia (MPTP).

Príklady uskutočnenia vynálezu

Nasledujúca schéma ilustruje spôsob, ktorým je možné pripraviť deriváty tropán-2-aldoxímu podľa tohto vynálezu:

(i) (1R.2S.3S) (IR.2R.3S) cis-fbrma trans-fonna

V tejto schéme reakcie A označuje akýkoľvek druh reaktívnej skupiny vhodnej na tvorbu karbaniónu ako jeho protičastice, ako napr. Li, MgX, kde X je halogén a CuLi v adičnej reakcii podobnej Michaelovej reakcii typu 1,4, R¹² je karboxylový ester, napr. COO-Me, COO-Et a COO-iPro, alebo R¹² je R³ podľa uvedenej definície a kde R a R⁴ sú definované.

Reakciou zlúčeniny vzorca (i) s R⁴-A podľa opisovanej rovnice sa môže získať cis-forma aj trans-forma a ich zmesi, ale získané zlúčeniny sú skoro výhradne látky, v ktorých substituent R⁴ je v ekvatoriálnej polohe.

Izomerizácia cis-izoméru na trans-izomérnu formu môže byť ovplyvnená silnou zásadou, napr. alkoholátom.

Enantioméry cis- a trans-zlúčenín v uvedenej schéme sa dajú získať takým istým postupom a použitím enantioméru zlúčeniny vzorca (i):

(iv) ako východiskového materiálu.

Racemické zmesi cis- a trans- zlúčenín sa dajú získať pomocou zmesi látok vzorcov (i) a (iv) ako východiskového materiálu.

Zlúčeniny získané uvedenou metódou, kde R¹² je karboxylový ester, sa môžu konvertovať na látky, ktoré sú predmetom vynálezu, pomocou konvenčných metód. Takéto metódy zahŕňajú redukciu 2-karboxylového esteru na 2-hydroxymetyl, nasledovanú ďalšou oxidáciou na príslušný 2-aldehyd. Deriváty tropán-2-aldoxímu, ktoré sú predmetom vynálezu, sa potom môžu získať reakciou 2-aldehydu s hydroxylamínovými derivátmi NH₂-0R', kde R'je definované ako sa spomínalo:

‘ COO·** \ CHj-OH ' CHO

H “· H ~ H r‘ r' a‘

N CHO ‘ CH^NOR' /H.

Zlúčeninu podľa vynálezu je možné konvertovať na inú zlúčeninu podľa vynálezu pomocou konvenčných metód.

Východiskové materiály reakcií, opisovaných v tejto patentovej prihláške, sú známe alebo sa dajú pripraviť reakciami komerčne dostupných zložiek.

SK 280875 Β6

Východiskové suroviny vzorca (i), kde R¹² je ester karboxylovej kyseliny, sa dajú teda získať z kokaínu pomocou konvenčných metód, t. j. tak, ako sa opisuje v nasledujúcich príkladoch.

Východiskové látky vzorca (i), kde R¹² je oxím, sa dajú pripraviť pomocou tej istej procedúry ako sa opisuje pri príprave oxímov podľa tohto vynálezu a ako sa opisuje v EP-A2-316718.

Produkty reakcií, ktoré sa tu opisujú, sa izolujú konvenčnými spôsobmi, akými sú napr. extrakcia, kryštalizácia, destilácia, chromatografia a pod.

Biológia

Pri zlúčeninách podľa predloženého vynálezu sa testovala schopnosť viazať sa na prenášač dopamínu v nasledovných testoch na inhibíciu väzby ’H-WIN 35428 in vitro a in vivo.

Inhibícia väzby ³H-WIN 35428 in vitro

Podstata

Dopamínové prenášače, resp. miesta vychytávania dopamínu v nervových zakončeniach, ukončujú pravdepodobne nervovú signalizáciu odstránením dopamínu zo synaptickej štrbiny. Činnosť alebo prítomnosť integrálneho proteínu transportujúceho dopamín sa dá merať in vitro vychytávaním ³H-dopamínu do synaptozómov alebo stanovením väzby ³H-ligandov, o ktorých je známe, že sa viažu na tento transportér.

Štúdie zamerané na väzbu kokaínu ukázali, že kokaín sa viaže na dopamínový transportér a že inhibuje vychytávanie ³H-dopamínu. Zistilo sa, že na dopamínové vychytávacie miesto sa viažu početné ligandy s rôznou štruktúrou, ale je stále nejasné, či ich väzbové miesta sú identické s miestami, na ktoré sa viaže kokaín. Štrukturálny analóg kokaínu ³H-WIN 35428 sa viaže selektívne a s vysokou afinitou na komplex dopamínového transportéra.

Príprava tkaniva

Preparáty sa pripravujú pri 0 až 4 °C, pokiaľ sa to neuvádza ináč. Corpus striatum, vypreparované z mozgu samcov potkanov kmeňa Wistar (150-200 g), sa homogenizuje počas 5-10 sekúnd v 10 ml NaH₂PO₄ (50 mM, pH 7,4) pomocou homogenizátora Ultra-Turrax. Suspenzia sa centrifuguje pri 27.000 x g počas 15 min. Supematant sa odstráni, pelet sa resuspenduje v 50 mM NaH₂PO₄, pH 7,4 (1000 ml na 1 g pôvodného tkaniva) a použije sa na väzbové štúdie.

Stanovenie

Alikvoty po 0,5 ml tkaniva sa pridajú k 25 ml skúšobného roztoku a k 25 ml ³H-WIN 35428 (v konečnej koncentrácii 1 nM), pomiešajú sa a inkubujú sa počas 60 min. pri 2 °C. Nešpecifická väzba sa stanoví pomocou kokaínu (v konečnej koncentrácii 30 mM). Po inkubácii sa k vzorkám pridá 5 ml ľadového nárazníkového roztoku a vzorky sa nalejú priamo na Whatmanov GF/C filter zo sklených vlákien za stáleho odsávania, pričom sa ihneď prepláchnu 5 ml ľadového nárazníkového roztoku. Množstvo rádioaktivity na filtri sa stanoví bežnou tekutinovou scintilačnou spektrofotometriou. Špecifická väzba sa vyjadrí odčítaním nešpecifickej väzby od celkovej väzby.

Pred výpočtom IC₅₀ sa musí získať 25-75% inhibícia špecifickej väzby. Meraná hodnota sa vyjadruje ako IC₅₀ (t. j. taká koncentrácia testovacej látky vyjadrená v mM, ktorá inhibuje špecifickú väzbu ³H-WIN 35428 na 50 %).

Inhibícia väzby ³H-WTN 35428 in vivo Podstata

Ligand ³H-WIN 35428 sa môže použiť aj v štúdiách zameraných na označovanie receptorov pri myšiach in vivo. Hromadenie ³H-WIN 35428 sa vyskytuje najmä v oblastiach mozgu, ktoré obsahujú dopamínergické nervové zakončenia. Striatum, ktoré obsahuje najvyššiu koncentráciu dopamínu, má i najvyššiu akumuláciu ³H-WIN 35428. Špecifická väzba v striate dosahuje maximum 30 min. po i.v. podaní ³H-WIN 35428 a toto maximum sa udrží počas ďalších 30 min. Tejto špecifickej väzbe ³H-WIN 35428 sa dá zabrániť súčasným alebo predchádzajúcim podaním látok, o ktorých je známe, že inhibujú transport dopamínu a väzbu ligandu na komplex, ktorý transportuje dopamín, teda GBR 12909, kokaín a nomifenzín (Scheffel a spol., J. Pharm. Exp. Ther. 257, 954-958 (1991).

Všetky testované látky sú roztoky alebo suspenzie pripravené v 10% TWEEN-e 80. Myšiam, samiciam kmeňa NMRI (25 g), rozdeleným do skupín po 3, sa injikuje testovaná látka i.p. Ihneď po tejto injekcii sa myšiam do chvostovej žily injikuje 2,0 mCi ³H-WIN 35428 v 0,2 ml fyziologického roztoku. Štyridsaťpäť minút po podaní ³H-WIN 35428 sa myši usmrtia dekapitáciou a rýchlo sa na ľade vypreparujú corpora striata. Tkanivo sa odváži a rozpustí v 1 ml 2% Na-laurylsulfátu v priebehu 36 hodín. Solubilizované tkanivo sa potom pridá do 2 ml scintilačného koktailu a bežnou tekutinovou scintilačnou spektrofotometriou sa stanoví množstvo rádioaktivity na mg tkaniva. Skupiny nemcdikovaných myší slúžia ako kontroly. Na stanovenie nešpecifickej väzby sa skupinám myší injikuje WIN 35428 (2,5 mg/kg) i.p. súčasne s injikovaním ³H-WIN 35428. Špecifická väzba je množstvo väzby pri kontrolných zvieratách po odčítaní množstva väzby pri myšiach, ktorým-sa podal WIN 35428.

Hodnota ED₅₀ sa stanoví z krivky reprezentujúcej závislosť účinku od dávky. Ak sa podá iba jedna dávka testovanej látky a ak inhibícia špecifickej väzby je v rozpätí 25-75 %, ED₅₀ sa vypočíta takto:

ED_S0 = (podaná dávka v mg/kg) x l/(Co/C_x - 1), kde-C₀ je špecifická väzba pri kontrolách a C_x je špecifická väzba pri myšiach, ktorým sa podala testovaná látka.

Výsledky, získané s testovanými látkami podľa vynálezu, sú uvedené v tabuľke 1:

Tabuľka 1

testovaná látka	ta vivo EDJaelkg)	IC. nM
:iR.2R,IS>-3-(3,<ďdiJorfey1)trofan-2-O-oietyMdodm, ^SO,	0,9	0,0030
(HUMS)-H3,*dKHwftay()ttoptn-í-ebfaxitn	3.8	0,0034
tropan-i-O-benzyl-aMoKm, HCI	>10,00	0.0760
(lR,2R,JS)-3-(J,4<iicl*jTÍaiyi). tropu-2-O-etaxykaiÍMiylnetyl· iktoxkn.HCt	>10.00	0,024
(lVR^^-q/dieNMfeoyl}· Vopan-Ž-aktoxim	o.%	0.0020
(lR,2iUS)-N-eonnayl-3-(3,4 idúoďtayl}-trop*a-2-0-n>eryliktoxún,HC1	1.4	0,006
(lR.2R.35H-(4cMorftayO· trapai>2-a]dcxísi	1.0S	0,013
()R2US>-3-(J.4didiloffeiyl)Uopan-l-O-fž-prTjijiiyQιΐΑχύη,ΗΟ	n. t.	0,019
(lR4R,3S)-3-(J,4dicK«far> Lrop*n-2-O-(7-propeiyl)itdtndnuHQ	..t	0,022
(lR,2R,3S)-3^3,<d)d*wfeiyi)tropu-2-C-(2-fncylproprt)ιΚαώη,ΗΟ		0,016
UWR,3S)-3-(3,4dieh4aísiy!)npan-2-0-cyldaprapyÍMtyl· ιΜκίιη,ΗΟ	n.t	0.02
!lR,23i.3S)-3-(4-metytfe»yt)ffi>pn-2-O4nR0-(Mata, BQ	n.t	0,<M2
(!R,2R,3S)-:3-{l.*dkKorfayl}7upxn-2O-tnctyi-Bl4<Mfrn, HQ	0.37	0,001 S
(lR,2R,3S!-3-{4-<hbrfs>yl}TopaB-2-0-nct)rl«Hom, HO	1.0	0,048

n.t. = netestované

SK 280875 Β6

Výsledky testov ukazujú, že látky, ktoré sú predmetom vynálezu, sa viažu s vysokou afinitou na komplex dopamínového prenášača v podmienkach in vitro, aj v podmienkach in vivo.

Látky podľa predloženého vynálezu sa testovali aj na ich schopnosť tlmiť opätovné vychytávanie dopamínu (DA), noradrenalínu (NA) a sérotonínu (5-HT) do synaptozómov.

Podstata

Špecifické prenášače neurotransmiterov/miesta ich vychytávania v nervových zakončeniach ukončujú pravdepodobne neuronálnu signalizáciu odstránením neurotransmitera dopamínu, noradrenalínu alebo sérotonínu zo synaptickej štrbiny. Činnosť integrálnych proteínov prenášača možno merať v in vitro podmienkach vychytávaním ³H-dopamínu, ³H-noradrenalínu alebo ³H-serotonínu do synaptozómov.

Inhibícia vychytávania ³H-dopamínu (³H-DA) do striatálnych synaptozómov in vitro

Príprava tkaniva

Preparáty sa pripravujú pri teplote 0 až 4 °C, ak nie je uvedené inak. Corpora striata izolované z potkanov kmeňa Wistar, samcov (150-200 g), sa homogenizujú počas 5 -10 sekúnd v 100 objemových dieloch ľadového roztoku sacharózy s koncentráciou 0,32 M obsahujúceho 1 mM pargylínu pomocou homogenizátora Ultra-Turrax. Aktivita monoaminooxidázy sa za prítomnosti pargylínu inhibuje. Homogenál sa centrifuguje 10 min. pri 1000 x g. Získaný supematant sa potom centrifuguje pri 27.000 x g počas 50 min. a supematant sa odstráni. Peleta (P₂) sa resuspenduje v oxygenovanom (ekvilibrovanom s atmosférou obsahujúcou 96 % O₂ a 4 % CO₂ počas aspoň 30 min.) Krebs-Ringerovom inkubačnom nárazníkovom roztoku (8000 ml na gram pôvodného tkaniva) pri pH 7,2, ktorý obsahuje 122 mM NaCl, 0,16 mM EDTA, 4,8 mM KC1, 12,7 mM Na₂HPO₄, 3,0 mM NaH₂PO₄, 1,2 mM MgSO₄, 1 mM CaCl₂, 10 mM glukózy a 1 mM kyseliny askorbovej.

Stanovenie

Alikvoty po 4 ml tkanivovej suspenzie sa pridajú do 100 ml testovaného roztoku a 100 ml ³H-DA (konečná koncentrácia 1 nM), premiešajú sa a inkubujú počas 25 min. pri 37 °C. Nešpecifické vychytávanie sa stanoví pomocou benzlropínu (konečná koncentrácia 10 mM). Po inkubácii vzoriek sa vzorky nalejú priamo na Whatmanove GF/C filtre zo sklených vlákien a prefíltrujú sa pod saním. Filtre sa potom trikrát premyjú 5 ml ľadového roztoku NaCl s koncentráciou 0,9 % (hmotnosť/objem). Množstvo rádioaktivity na filtri sa stanoví bežnou tekutinovou scintilačnou spektrofotometriou. Špecifické vychytávanie sa vypočíta ako rozdiel medzi celkovým a nešpecifickým vychytávaním.

Pred výpočtom hodnoty IC₅₀ sa musí získať 25-75% inhibícia špecifickej väzby.

Meraná hodnota sa vyjadruje ako IC₅₀ (koncentrácia testovanej látky vyjadrená v mM, pri ktorej testovaná látka inhibuje špecifickú väzbu ³H-DA na 50 %).

Inhibícia vychytávania ³H-noradrenalínu (³H-NA) do hipokampálnych synaptozómov in vitro

Príprava tkaniva

Preparáty sa pripravujú pri teplote 0 až 4 °C, ak to nie je uvedené inak. Hipokampy izolované z potkanov kmeňa

Wistar, samcov (150-200 g), sa homogenizujú počas 5-10 sekúnd v 100 objemových dieloch ľadového roztoku sacharózy s koncentráciou 0,32 M, obsahujúceho 1 mM pargylínu, pomocou homogenizátora Ultra-Turrax. Aktivita monoaminooxidázy sa za prítomnosti pargylínu inhibuje. Homogenát sa centrifuguje 10 min. pri 1000 x g. Získaný supematant sa potom centrifuguje pri 27.000 x g počas 50 min. a supematant sa odstráni. Peleta (P₂) sa resuspenduje v oxygenovanom (ekvilibrovanom s atmosférou obsahujúcou 96 % O₂ a 4 % CO₂ počas aspoň 30 min.) Krebs-Ringerovom inkubačnom nárazníkovom roztoku (2000 ml na gram pôvodného tkaniva) pri pH 7,2, ktorý obsahuje 122 mM NaCl, 0,16 mM EDTA, 4,8 mM KC1, 12,7 mM Na₂HPO₄, 3,0 mM NaH₂PO₄, 1,2 mM MgSO₄, 0,97 mM CaCl₂, 10 mM glukózy a 1 mM kyseliny askorbovej.

Stanovenie

Alikvoty po 4 ml suspenzie tkaniva sa pridajú do 100 ml testovacieho roztoku a 100 ml ³H-NA (konečná koncentrácia 1 nM), premiešajú sa a inkubujú počas 90 min. pri 37 °C. Nešpecifické vychytávanie sa stanoví pomocou dezipramínu (konečná koncentrácia 1 mM). Po inkubácii vzoriek sa vzorky nalejú priamo na Whatmanove GF/C filtre zo sklených vlákien a prefíltrujú sa pod saním. Filtre sa potom trikrát premyjú 5 ml ľadového roztoku NaCl s koncentráciou 0,9 % (hmotnosť/objem). Množstvo rádioaktivity na filtri sa stanoví bežnou tekutinovou scintilačnou spektrofotometriou. Špecifické vychytávanie sa vypočíta ako rozdiel medzi celkovým a nešpecifickým vychytávaním.

Pred výpočtom hodnoty IC₅₀ sa musí získať 25-75% inhibícia špecifickej väzby.

Meraná hodnota sa udáva ako IC₅₀ (koncentrácia testovanej látky v mM, v ktorej látka inhibuje špecifickú väzbu ³H-NAna 50%).

Inhibícia vychytávania ³II-5-hydroxytryptamínu (³H-5-HT, sérotonínu) do kortikálnych synaptozómov in vitro

Príprava tkaniva

Preparáty sa pripravujú pri teplote 0 až 4 °C, ak nie je uvedené inak. Kôra mozgu izolovaného z potkanov kmeňa Wistar, samcov (150-200 g), sa homogenizuje počas 5 až 10 sekúnd v 100 objemových dieloch ľadového roztoku sacharózy s koncentráciou 0,32 M, obsahujúceho 1 mM pargylínu, pomocou homogenizátora Ultra-Turrax. Aktivita monoaminooxidázy sa za prítomnosti pargylínu inhibuje. Homogenát sa centrifuguje 10 min. pri 1000 x g. Získaný supematant sa potom centrifuguje pri 27.000 x g počas 50 min. a supematant sa odstráni. Peleta (P₂) sa resuspenduje v oxygenovanom (ekvilibrovanom s atmosférou obsahujúcou 96 % O₂ a 4 % CO₂ počas aspoň 30 min.) Krebs-Ringerovom inkubačnom nárazníkovom roztoku (1000 ml na gram pôvodného tkaniva) pri pH 7,2, ktorý obsahuje 122 mM NaCl, 0,16 mM EDTA, 4,8 mM KC1, 12,7 mM Na₂HPO₄, 3,0 mM NaH₂PO₄, 1,2 mM MgSO₄, 1 mM CaCl₂, 10 mM glukózy a 1 mM kyseliny askorbovej.

Stanovenie

Alikvoty po 4 ml suspenzie tkaniva sa pridajú do 100 ml testovaného roztoku a 100 ml ³H-5-HT (výsledná koncentrácia 1 nM), premiešajú sa a inkubujú počas 30 min. pri 37 °C. Nešpecifické vychytávanie sa stanoví pomocou citalopramu (výsledná koncentrácia 1 mM). Po inkubácii sa vzorky nalejú priamo na Whatmanove GF/C filtre zo sklených vlákien a prefíltrujú sa pod saním. Filtre sa potom trikrát premyjú 5 ml ľadového roztoku NaCl s koncentráciou 0,9 % (hmotnosť/objem). Množstvo rádioaktivity na

SK 280875 Β6 filtri sa stanoví bežnou tekutinovou scintilačnou spektrofotometriou. Špecifické vychytávanie sa vypočíta ako rozdiel medzi celkovým a nešpecifickým vychytávaním.

Pred výpočtom hodnoty IC₅₀ sa musí získať 25-75% inhibícia špecifickej väzby.

Meraná hodnota sa udáva ako IC_S0 (koncentrácia testovanej látky v mM, v ktorej látka inhibuje špecifickú väzbu ’Η-5-ΗΤ na 50 %).

Výsledky testov, získané s vybranými látkami podľa predloženého vynálezu, sú uvedené v nasledujúcej tabuľke:

Tabuľka 2

testovaní látka	vychytávanie DA IC,XuM)	vychytávanie NA	vychytávanie 5-HT ICw(wM)
(lH4K3S)-3-(5.4dicMorftoyO-tropafi-2-0 -metyl -aldedm, H^O.	0,003	0,0013	0,013
(lR.21US)-N-wwMtyl· 3-(3,4-diehlnrfenyl>tropan-ž-O-mtyl-	0,002	0,0013	0,0017
(llUR.3S)-3-(3,4· 4d>lorfaiyl}4ropan-2-0 ^netyi-aMoxta, iynizM>ir	0,0034	0,0015	nt.

n.t. = netestované

Výsledky ukazujú, že testované látky účinne tlmia spätné vychytávanie dopamínu, noradrcnalínu a sérotonínu do synaptozómov.

Látky podľa predmetného vynálezu sa skúšali aj na nasledovných modeloch Parkinsonovej choroby na zvieratách.

Antagonizmus parkinsonizmu indukovaného MPTP pri chvostnatých opiciach (Callitricidae)

Podstata

Podanie MPTP (hydrochlorid l-metyl-4-fenyl-l,2,3,6-tetrahydropyridínia) opiciam spôsobuje poruchu dopamínergického systému v mozgu a vyvoláva príznaky parkinsonizmu. Po nasledujúcom podaní testovaných látok je možné zisťovať ich schopnosť oslabiť príznaky parkinsonizmu.

Metóda

V štúdii sa použili bežné chvostnaté opice (Marmoset Monkeys, Callitricidae) s hmotnosťou 350-400 g vo veku 3-5 rokov bez rozdielu pohlavia. Zvieratá boli umiestnené každé zvlášť v štandardných podmienkach pri teplote 25-27 °C a pri 50% relatívnej vlhkosti, pričom sa dodržiaval 12 hodinový cyklus svetlo-tma.

Zvieratá mali voľný prístup k potrave a vode.

Niekoľko mesiacov pred započatím testovania lokomócie a správania sa zvierat podával sa im MPTP (hydrochlorid l-metyl-4-fenyl-l,2,3,6-terahydropyridinia), rozpustený v sterilnom fyziologickom roztoku (0,9% NaCl) v dávke 2 mg/kg podkožné počas 5 dní, alebo až pokiaľ sa na nich nevyvinul zreteľný parkinsonický stav. Kumulatívna dávka sa pohybovala medzi 8-12 mg/kg. Počas podávania MPTP a v priebehu nasledujúcich 2-3 týždňov sa zvieratá kŕmili ručne, až pokiaľ sa nezotavili natoľko, aby sa kŕmili samé. Pred testovaním správania sa na všetkých zvieratách vyskytovala výrazná redukcia bazálnej lokomotorickej aktivity, znížené prehliadacie pohyby hlavy a abnormálna poloha chrbtice, ale najmä končatín.

Testované látky sa rozpúšťali v 100% Tweene 80 zohriatom na 40-50 °C. Potom sa riedili vo vode. Testované látky sa podávali orálnou sondou v objeme 2ml/kg. Na porovnanie účinku testovaných látok sa v doplnkovom pokuse podávalo vehikulum v každý experimentálny deň. Každé mu zvieraťu sa v priebehu nasledujúcich týždňov podalo vehikulum, alebo jedna z troch dávok testovaných látok s jednotýždňovou prestávkou medzi podávaním.

Hodnotenie slabostí

Slabosť zvierat sa vyhodnocovala takto: vedomie (normálne 0, ospalosť 2), reakcia na podráždenie (normálna 0, zmenšená 1, pomalá 2, neprítomná 3), prehliadacie pohyby (prítomné 0, zmenšené 1, neprítomné 2), pozornosť a pohyby očí (normálne 0, abnormálne 1), postoj (normálny 0, abnormálna poloha trupu 1, abnormálna poloha končatín 1, abnormálna poloha chvosta 1 alebo celkove abnormálna poloha 4), rovnováha a koordinácia (normálna 0, poškodená 1, nestabilná 2, spontánne pády 3), vokalizácia (normálna 0, zmenšená 1, neprítomná 2).

Meranie lokomotorickej aktivity

Lokomotorická aktivita sa merala súčasne na štyroch zvieratách, pričom každé z nich bolo umiestnené zvlášť v kovovej klietke (50 x 60 x 70 cm - šírka, dĺžka, výška) s priehľadnými dvierkami z plastickej hmoty (50 x 70 cm - šírka, výška), ktoré sa podobali chovným klietkam, ale v ktorých bolo zabudovaných osem horizontálne umiestnených infračervených fotobuniek. Ich lúče boli umiestnené na úrovni podlahy, naprieč cez klietku a jedna bola orientovaná pozdĺž každého z dvoch bidielok. Ďalšie lúče smerovali od čelnej steny na zadnú stenu klietky na úrovni podlahy a nad úrovňou každého bidielka. Lokomotorické impulzy sa počítali ako počet prerušení lúčov spôsobených pohybom zvieraťa. Tieto impulzy sa zratúvali v priebehu 30-minútových intervalov a zaznamenávali sa počas 10-hodinového experimentu.

Analýza údajov

Pre časové priebehy a akumulovaný počet lokomotorických impulzov sa vypočítaval priemer so strednou chybou priemeru (± S.E.M) v každej skupine zvlášť.

Výsledky, získané testovanou látkou podľa vynálezu (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropan-2-0-mctylaldoxím (NS 2214), sú uvedené na obr.l a 2. Z obrázkov je zrejmé, že látka podľa predloženého vynálezu v rozmedzí dávok od 0,1 do 2,5 mg/kg, v závislosti od dávky, zvyšuje motorickú aktivitu a zmenšuje skóre, ktoré vyjadruje pohybovú neschopnosť.

Látky podľa tohto vynálezu sa testovali aj v nasledujúcom teste antidepresívnej účinnosti.

Záves za chvost

Podstata

Po systémovom podaní centrálnych stimulantov a antidepresiv možno pozorovať skrátenie nehybnosti na myšiych zavesených za chvost (Steru, L., Chermat, R., Thierry, B. and Šimon, P. (1985) Tail suspension test: A new method for screening antidepressants in mices, Psychopharmacology 85:367-370.).

Metóda

V teste sa použili myši kmeňa NMRI, samice (20-25 g), ktoré boli navyknuté na priestor (12 hodinový cyklus svetlo/tma) aspoň počas 16 hodín a ktoré boli umiestnené v skupinách po 25 jedincov v jednej klietke. Myši sa na 30 min. zavesili pomocou lepiacej pásky za chvost na tyčku umiestnenú 30 cm nad laboratórnym stolom potom, ako sa im perorálnou cestou podalo vehikulum alebo látka. V priebehu ďalších 6 min. sa meralo akumulované trvanie nehybnosti definované ako absencia pohybov trupu alebo končatín (pohyby hlavy sa však nedefinovali ako pohyby). Na testovanie jednej dávky sa použilo šesť zvierat.

Pri myšiach, ktoré dostali fyziologický roztok alebo vehikulum, sa skóre nehybnosti pohybovalo priemerne medzi 160-180 s. Hodnota ED₅₀ sa vyjadrovala grafickou interpoláciou najmenej z 3 dávok ako dávka, ktorá zmenšuje nepohyblivosť na 100 s.

Nasledujúca tabuľka 4 prezentuje výsledky získané s niekoľkými látkami podľa tohto vynálezu:

Tabuľka 4

testovaná látka	Εϋ* (m^g)
(lE\2R,3S)-3-(3,4-dichlofftnyI)tiopíua-2-aldoxíin	0,41
(]R,2IQS)-3-(3,4-dchloiftifyI)trôpaD-2-O-m«yl·· aldoxím, HjS04	0,1
(ÍR, 2R,3S)-3-(3,4-di chlorfenyI)troj>an-2-Obenzyi-aldoxlm, BCI	2
(lR,2R,3S)-3-(3,4-djchlQf&ayl)uopao-2-0mctoxykaibaiylinctyÍ-aldoxím	0,25
(lR,2S,3S>3-O,4-dcNorfeayI)tropaa-2-aldoxím	0,27
(lR,2R,3S)-3fy3,4-óchJarfenyl)tro]Mn-2-O(2-proptnyl)-aldoxln	0,23
(1Κ,2ΙΙ,38)-14-ηο(τηΛϊΙ·3Χ3,4·<1κΗθΓ(Β!ΐ>1)lropan-2-O-mety(-413oxirn, HC1	0.95 I
(1R,2S, 38)-3-(3,4-díchlorfaiyt)Lropaa-2-0-nictylaldcKÍm	0.4

(1 R.2S,35)-3-(3,4-dich]orfényl)tropan-2-O-beti2y( -aldoxim, HC!	0,94
(1 R,2R,3 S)-3 -(4-chlorfcoy l)tropan-2-akloxím	0,19
(lR,2R,3S)-3-(3,4-dichJorfenyl)tropan-2-O- (2-propynyl)-aJdoxim	0,04
(lR,2R,3S)-3-(3,4-dich]orfenyl)tropan-2-0· cyklopropyimetyl-aldcxini	0.7
(!R,2R,3S)-3-(3,4-óch!orfenyI)tropan-2-0- (2-mety!propy])aldoxím	0,8
(lR,2R,3S)-3-(4<hJorftoyl)tropan-2-O-metyl· aldaxún, HC1	0,43

Výsledky uvedené v uvedenej tabuľke predikujú výraznú antidepresívnu účinnosť látok podľa tohto vynálezu.

Profil vedľajších účinkov látok podľa súčasného vynálezu

Vedľajšie účinky kokaínu a derivátov amfetamínu s centrálnym stimulačným pôsobením zahŕňajú centrálne podmienené vzrušenie a stimuláciu na zvieratách vrátane primátov a tieto účinky možno pozorovať aj u ľudí. Medzi vážne vedľajšie účinky kokaínu a derivátov amfetamínu patrí aj schopnosť spôsobovať toxické psychotické príznaky, nápadne pripomínajúce duševnú chorobu schizofréniu, medzi ktoré patria halucinácie, paranoja a abnormálna bizarná stereotypná duševná činnosť a stereotypia.

Súčasné poznatky s veľkou pravdepodobnosťou indikujú a poukazujú na to, že tieto príznaky sú u primátov a u ľudí spôsobené rozsiahlym a masívnym uvoľnením dopamínu v striatálnom komplexe, a najmä v mezolimbickom dopamínergickom systéme, ktorý inervuje limbické štruktúry vrátane nucleus accumbens.

Vyvolanie stereotypného abnormálneho správania sa hlodavcov teda predstavuje jeden z najčastejšie používaných modelov schizofrénie na zvieratách, vhodných na testovanie pôsobenia antipsychotických neuroleptických látok (vrátane haloperidolu a chlórpromazínu).

Vývoj toxického abnormálneho stereotypného amfetamínového syndrómu, aký sa opisuje ďalej, dovoľuje predvídať nežiaduci toxický centrálny stimulačný účinok látok uvoľňujúcich dopamín u ľudí.

Klasifikácia abnormálneho stereotypného správania sa

Vo všeobecnosti možno abnormálne stereotypné správanie sa po podaní centrálnych stimulantov typu amfetamínu a kokaínu rozdeliť na stereotypné správanie sa s níz kym a vysokým skóre intenzity. Stereotypia s nízkym skóre intenzity zahrnuje abnormálne a trvalé opakovanie lokomócie, vztyčovania sa na zadných končatinách, ňuchania. Tieto syndrómy možno zvyčajne pozorovať iba po nižších dávkach dopamínergických centrálnych stimulancií, alebo sa môžu pozorovať počas úvodnej fázy a počas odoznievania účinku po podaní vysokých dávok. Účinky na správanie sa s nízkou intenzitou sa tu zahŕňajú do lokomotorického a vztyčovacicho syndrómu.

Za syndróm stereotypie s vysokou intenzitou sa tu pokladá, ak bchaviorálny repertoár potkana sa výrazne obmedzuje vo variabilite a ak pozostáva z trvalého opakovania jedného alebo iba niekoľkých typov správania sa.

Syndróm stereotypie ňuchacieho správania sa vytvára teda trvalo iba na malej, obmedzenej oblasti klietky. Táto činnosť sa zvyčajne začína na hornej časti steny a po podaní látok vo vyšších dávkach sa zvyšuje intenzita ňuchania smerom k dolnej časti klietky na stene alebo na drôtoch podlahy. V tejto fáze stereotypie s vysokou intenzitou všetky normálne prvky správania sa nie sú prítomné, vrátane príjmu potravy, pitia, čistenia sa a normálneho prieskumného vyšetrovania prostredia.

Pri potkanoch sa môže ňuchanie s vysokou intenzitou vyvinúť až do ňuchania spojeného s oblizovaním, príp. i s hryzením a žutím drôteného výpletu klietky, ktoré sa vyskytuje po podaní ešte vyšších dávok stimulancií. Potkany vtedy sedia zvyčajne v typicky zhrbenej polohe v rohu klietky. Občas možno pozorovať spätnú lokomóciu, cúvanie.

Na vyhodnotenie stereotypie s vysokou intenzitou sa používa táto stupnica za predpokladu, že syndrómy správania sa sú také, ako sa spomínalo:

+ = iba stereotypné ňuchanie, ++ = stereotypné ňuchanie a občasné oblizovanie, +++ = trvalé oblizovanie spojené prípadne i s obhrýzaním a žutím.

Tabuľka zlúčenina dávka (p.o.) účinnosť (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-O-metylaldoxím 15mg/kg +++

Dávka 15 mg/kg je najnižšia dávka, ktorá vyvoláva uvedenú činnosť.

Farmaceutické kompozície

Aj keď je možné, aby sa pri liečbe látka podľa tohto vynálezu podávala v podobe čírej chemikálie, odporúča sa, aby sa aktívna zložka podávala ako farmaceutická lieková forma.

Vynález teda ďalej poskytuje farmaceutické liekové formy, pozostávajúce z látky podľa tohto vynálezu, alebo z jej farmaceutický prijateľnej soli, alebo z jej derivátov spolu s ich jedným alebo viacerými farmaceutický prijateľnými nosičmi a prípadne s inými liečebnými a prípadne profylaktickými zložkami. Tento nosič alebo nosiče musia byť prijateľné v zmysle ich kompatibility s inými zložkami liekovej formy a nesmú mať škodlivý vplyv na užívateľa.

Farmaceutické formy sú také formy lieku, ktoré sú vhodné na podávanie orálne, rektálne, nazálne, miestne (vrátane bukálneho a sublingválneho), vaginálne alebo parenterálne (vrátane intramuskulámeho, subkutánneho a intravenózneho), alebo ktoré sú vo forme vhodnej na podávanie inhalačné alebo insuflačné.

Látky podľa vynálezu spolu s bežným adjuvans, s nosičom, alebo s rozpúšťadlom sa teda môžu použiť na prípravu farmaceutickej formy a ich dávkových jednotiek a v takejto forme ich možno použiť ako tuhé prípravky, napr. tablety, príp. napĺňané ako tobolky, ako tekutiny, napr. roztoky, suspenzie, emulzie, elixíry, alebo ako kapsuly napĺňané týmito tekutinami. Všetky tieto formy možno použiť na orálne používanie, vo forme čapíkov na rektálne podávanie, alebo vo forme sterilných injikovateľných roztokov na parenterálne použitie, vrátane podkožného podania. Takéto ich farmaceutické formy a jednotkové dávkovacie formy môžu obsahovať bežné zložky v bežných pomeroch s ďalšími prídavnými aktívnymi látkami alebo princípmi alebo i bez nich a takéto jednotkové dávkovacie formy môžu obsahovať ľubovoľné vhodné účinné množstvo aktívnych zložiek, zodpovedajúce rozsahu predpokladaných denných dávok. Primeranou reprezentatívnou jednotkovou dávkovacou formou sú teda formy obsahujúce 10 (desať) miligramov účinnej zložky, alebo všeobecnejšie, od 0,1 do jednosto (100) miligramov v jednej tablete.

Látky podľa predloženého vynálezu možno podávať v pestrej palete perorálnych a parenterálnych aplikačných foriem. Odborníkovi z oblasti je zrejmé, že uvedené aplikačné formy môžu obsahovať ako aktívnu zložku látku podľa súčasného vynálezu, alebo farmaceutický prijateľnú soľ látky podľa súčasného vynálezu.

Na prípravu farmaceutických zmesí z látok, opisovaných súčasným vynálezom, môžu byť farmaceutický prijateľné nosiče v tuhej alebo v tekutej forme. Tuhé preparáty zahŕňajú prášky, tablety, piluly, tobolky, kapsuly, čapíky a disperzibilné granuly. Tuhý nosič môže byť tvorený jednou alebo viacerými substanciami, ktoré môžu pôsobiť aj ako rozpúšťadlá, prichucovacie látky, solubilizátory, lubrikanty, podporné látky, viazače, konzervanciá, látky podporujúce dezintegráciu tabliet alebo ako materiál pokrývajúci tobolku.

V práškoch je nosičom jemne rozptýlená tuhá látka, ktorá s jemne rozptýlenou aktívnou zložkou tvorí zmes.

V tabletách je aktívna zložka zmiešaná v dostatočnom pomere s nosičom, ktorý má potrebnú viazaciu schopnosť, pričom tableta je vyformovaná do želaného tvaru a veľkosti.

Prášky a tablety obsahujú výhodne od piatich alebo desiatich do približne sedemdesiatich percent účinnej látky. Vhodnými nosičmi sú uhličitan horečnatý, stearan horečnatý, mastenec, cukor, laktóza, pektín, dextrín, škrob, želatína, tragant, metylcelulóza, natrium karboxymetylcelulóza, ľahkotopiteľný vosk, kakaové maslo a pod. Predpokladá sa, že termín preparát zahrnuje aplikačnú formu (formuláciu) účinnej látky s materiálom pokrývajúcim tobolku ako nosič za predpokladu, že tobolka, v ktorej je aktívna látka či už s nosičmi alebo bez nich, je obklopená nosičom, ktorý je takto s ňou spojený. Podobne sú tu zahrnuté i kapsuly a meditované cukríky. Ako tuhé aplikačné formy, vhodné na perorálnu aplikáciu, je možné použiť tablety, prášky, tobolky, piluly, kapsuly a mcdikované cukríky.

Pri príprave čapíkov sa najprv roztopí ľahkotopiteľný vosk, napr. zmes glyceridov mastných kyselín alebo kakaové maslo a účinná látka sa v nich rovnomerne disperguje napr. miešaním. Roztopená homogénna zmes sa potom naleje do bežných primerane vytvarovaných foriem, ponechá sa vychladnúť až do stuhnutia.

Aplikačnými formami vhodnými na vaginálne podávanie môžu byť napr. pesary, tampóny, krémy, pasty, peny alebo spreje, ktoré obsahujú okrem aktívnej zložky aj všeobecne známe vhodné nosiče.

Tekuté aplikačné formy môžu predstavovať roztoky, suspenzie a emulzie, napr. voda alebo zmesi vody a propylénglykolu. Parenterálne injekčné tekuté prípravky možno napríklad formulovať ako roztoky vo vodnom roztoku polyetylénglykolu.

Látky podľa predloženého vynálezu možno teda formulovať na parenterálne podávanie (napr. injekciou vo forme injekčného bolusu alebo trvalou infúziou) a možno ich pripraviť vo forme dávkovej jednotky v ampuliach, vopred naplnených striekačkách, máloobjemových infúziách alebo vo viacdávkových kontajneroch s pridaním konzervačnej látky. Liečivé prípravky môžu byť vo forme suspenzií, roztokov alebo emulzií v olejových alebo vodných vehikulách a môžu obsahovať ďalšie formulačné zložky, napr. podporné, stabilizačné, prípadne dispergujúce látky. Účinná látka môže byť alternatívne v práškovej forme, získanej aseptickou izoláciou sterilnej tuhej látky alebo lyofilizáciou roztoku, pričom pred použitím sa zmieša s vhodným vehikulom, napr. so sterilnou, nepyrogénnou vodou.

Vodné roztoky, vhodné na perorálne používanie, sa dajú pripraviť rozpustením účinnej zložky vo vode a ak je potrebné, tak i pridaním vhodných farbív, dochucovadiel, stabilizačných a riediacich látok.

Vodné roztoky, vhodné na perorálne používanie, sa dajú pripraviť dispergovaním jemne rozptýlenej účinnej zložky vo vode s viskóznym materiálom, akými sú napr. prírodné alebo syntetické gumy, živice, metylcelulóza, natrium karboxymetylcelulóza alebo iné všeobecne známe suspendujúce látky.

Zahrnuté sú i tuhé preparáty, pri ktorých sa predpokladá, že tesne pred použitím sa zmenia na tekuté aplikačné formy určené na perorálne podávanie. Takýmito preparátmi sú roztoky, suspenzie a emulzie. Tieto preparáty môžu obsahovať okrem účinnej zložky aj farbivá, dochucovadlá, stabilizátory, tlmivé roztoky, umelé alebo prírodné sladidlá, disperzanty, riedidlá, solubilizátory a pod.

Na miestnu aplikáciu na pokožku možno látky podľa tohto vynálezu upraviť do formy masti, krémov alebo lócií, alebo ako transdermálne náplasti. Masti a krémy možno napríklad formulovať vo vodnej alebo olejovej báze pridaním vhodných riediacich alebo gélovacích látok. Lóciá možno formulovať vo vodnej alebo olejovej báze a vo všeobecnosti budú obsahovať jeden alebo viac emulgátorov, stabilizačných látok, dispergantov, suspcndujúcich látok, riedidiel alebo farbív.

Liekové formy vhodné na miestnu aplikáciu v ústach sú meditované cukríky (lozengeny), ktoré sa skladajú z účinnej látky v chuťovom základe, obyčajne sacharózy a bieleho agátu alebo tragantu; pastilky pozostávajú z účinnej látky v inertnom základe, napr. v želatíne a glyceríne alebo v sacharóze a agáte. Ústne vody sa skladajú z účinnej látky vo vhodnom tekutom nosiči.

Roztoky alebo suspenzie sa aplikujú priamo do nosnej dutiny bežnými prostriedkami, napr. kvapkadlom, pipetou alebo sprejom. Aplikačné formy sa môžu poskytovať v jednodávkovej alebo viacdávkovej forme. V druhom prípade si môže pacient pomocou kvapkadla alebo pipety dávkovať vhodný, vopred určený objem roztoku alebo suspenzie. Pri použití spreja možno toto dávkovanie dosiahnuť pomocou odmernej rozprašovacej pumpy spreja.

Podávanie do dýchacieho systému možno dosiahnuť aerosólovou liekovou formou, pri ktorej sa účinná látka poskytuje tlakovým obalom s vhodným hnacím plynom, ako napr. chlórfluórkarbónom (CFC), akým môže byť dichlórfluórmetán, trichlórfluórometán alebo dichlórtetrafluóretán, oxid uhličitý alebo iný vhodný plyn. Aerosól môže výhodne obsahovať aj surfaktant, napr. lecitín. Dávku látky možno regulovať pomocou odmemého ventilu.

Alternatívne, účinné látky možno poskytovať vo forme suchého prášku, napr. zmesou prášku látky s práškovým základom, ktorým môže byť laktóza, škrob, deriváty škrobu, napr. hydroxypropylmetylcelulóza a polyvinylpyrolidón (PVP). Práškový nosič môže výhodne tvoriť v nosnej dutine gél. Zmesi práškov možno podávať v jednodávkovej liekovej forme, napr. ako kapsuly alebo náplne, napr. zo želatíny, alebo v blistrovom balení, z ktorého možno prášok podávať pomocou inhalátora.

V aplikačných formách, určených na podávanie do dýchacieho systému, vrátane vnútronosných aplikačných foriem, budú častice látky vo všeobecnosti malé, napr. približne 5 mikrónov, alebo ešte menšie. Častice s takouto veľkosťou možno získať pomocou známych prostriedkov, napr. mikronizáciou.

Ak to je potrebné, možno využiť aj liekové formy prispôsobené na dlhodobé uvoľňovanie účinnej zložky.

Uprednostňujú sa farmaceutické prípravky v jednotkovej dávkovacej liekovej forme. V takomto prípade je preparát ďalej delený na jednotlivé dávky, ktoré obsahujú vhodné množstvá účinnej zložky. Jednotkovou dávkovacou liekovou formou môže byť balený preparát, balíček obsahujúci oddelené množstvá preparátu, ako napr. balené tablety, tobolky a prášky vo fľaštičkách alebo v ampulkách. Jednotkovou dávkovacou liekovou formou môže byť i tobolka, tableta, kapsula alebo medikovaný cukrík sám osebe, alebo to môže byť primerané množstvo ktoréhokoľvek z týchto balených foriem.

Na perorálne podávanie sa uprednostňujú tablety alebo tobolky, na intravenózne podávanie sa uprednostňujú tekutiny.

Možnosti použitia

Látky podľa tohto vynálezu sú mimoriadne užitočné pri liečbe parkinsonizmu, depresie, obezity, narkolepsie a narkománie kvôli ich výraznej schopnosti inhibovať spätné vychytávanie dopamínu pri nízkom stupni výskytu ich nežiaducich vedľajších účinkov. Tieto vlastnosti vytvárajú z látok podľa tohto vynálezu prostriedky mimoriadne užitočné pri liečbe parkinsonizmu, depresie, obezity, narkolepsie a narkománie, ako aj iných porúch, citlivých na schopnosť látok podľa tohto vynálezu inhibovať spätné vychytávanie dopamínu. V zhode s tým sa môžu látky podľa tohto vynálezu podávať živému organizmu živočíchov, vrátane človeka, na liečenie, zoslabenie alebo na odstránenie akejkoľvek indikácie spojenej s inhibíciou spätného vychytávania dopamínu, alebo poruchy citlivej na túto inhibíciu. Sem patria najmä parkinsonizmus, depresia, obezita, narkolepsia a narkománia. Rozpätie vhodných dávok je od 0,1 do 500 miligramov denne, najmä však 10 až 70 miligramov denne, podaných jeden alebo dva razy denne v závislosti od príslušného spôsobu podania, použitej liekovej formy, od indikácie liečby, subjektu liečby a od jeho telesnej hmotnosti a od ďalších dôvodov a skúseností lekára alebo veterinára, ktorý liečbu vykonáva.

Nasledujúce príklady ďalej dokreslia vynález, ale tieto príklady netreba chápať ako obmedzujúce.

Príklad 1

Metylester (-)-anhydroekgonínu

kyseline soľnej a potom sa roztok ochladil na ľade. Kyselina benzoová sa odstránila filtráciou a filtrát sa skoncentroval vo vákuu. Triturácia zvyšku s etanolom a filtrácia poskytla (lR,2R,3S)-3-hydroxy-tropán-2-karboxylát hydrochlorid ako bielu kryštalickú látku, ktorá sa bez ďalšej purifikácie vysušila a refluxovala v oxichloride fosforitom (50 ml) počas dvoch hodín. Roztok sa zahustil vo vákuu a pomaly sa pridal absolútny metanol (150 ml) za chladenia na ľade. Roztok sa miešal pri izbovej teplote počas 16 hodín a zahustil sa vo vákuu. Zvyšok sa ochladil ľadom a roztokom hydroxidu sodného (10 M, približne 100 ml) sa zalkalizoval. Potom nasledovala 5-násobná extrakcia s dietyléterom. Kombinovaná organická fáza sa vysušila a skoncentrovala sa vákuom. Získal sa pritom olej, ktorý po destilácii vo vákuu (70-74 °C, 100 Pa) poskytol zlúčeninu uvedenú v nadpise vo forme čistého oleja.

Príklad 2 (lR,2S,3S)-2-Karbometoxy-3-(4-fluórfenyl)tropán a (lR,2R,3S)-2-karbometoxy-3-(4-fluórfenyl)tropán

V troch reakčných bankách s úzkym hrdlom a s mechanickým miešacím zariadením, s výkonným chladičom a s lievikom s tlakovým vyrovnávačom sa zo 4brómfluórbenzénu (27,5 ml, 250 mmol) a horčíkových stružlín (6,3 g, 260 mmol) v 250 ml absolútneho dietyléteru pripravilo Grignardovo činidlo. Roztok Grignardovho činidla sa ochladil na -20 °C a v priebehu 1/2 hodiny sa pridal roztok metylesteru (-)-anhydro-ekgonínu (21,7 g, 120 mmol) v 100 ml absolútneho dietyléteru. Reakčná zmes sa miešala 1 hodinu pri -20 °C a reakcia sa rýchlo ochladila v jednom z týchto dvoch spôsobov:

1. Reakčná zmes sa vmiešala do 250 ml rozdrveného ľadu a vodná fáza sa okyslila pridaním približne 100 ml 4M kyseliny chlorovodíkovej. Organická fáza sa odstránila a vodná fáza sa premyla 100 ml dietyléteru. pH vodnej fázy sa zalkalizovalo pridaním 25% roztoku hydroxidu amónneho, potom sa vodná fáza saturovala chloridom sodným a napokon sa extrahovala tri razy dietyléterom. Kombinovaná organická fáza sa vysušila a skoncentrovala vo vákuu, pričom sa získal olej, ktorý sa predestiloval vo vákuu (150-160 °C, 200 Pa). Touto metódou sa získala zmes dvoch stereoizomérov (2S/2R - 1/3), ktorá sa separovala stĺpcovou chromatografiou, zmesou dietyléteru a pentánu (1 + 1) + 1% trietylamínom ako eluentom. Hrubé produkty sa triturovali v pentáne, čím sa získal (lR,2S,3S)-2-karbometoxy-3-(4-fluórfenyl)tropán, biele kryštály s t.t. 91-92 °C a (1 R,2R,3S)-2-karbometoxy-3 -(4-fluórfenyl)tropán, biele kryštály s 1.1. 65-66 °C.

2. Reakčná zmes sa ochladila na -78 °C a v priebehu 10 min. sa pridal roztok kyseliny trifluóroctovej (20 ml, 250 mmol) v 50 ml dietyléteru. Chladiaci kúpeľ sa odstavil a keď teplota dosiahla 0 °C zmes sa vmiešala do 700 ml vody. pH tejto vodnej fázy sa nastavilo na pH = 1 pridaním koncentrovanej kyseliny soľnej, za čím nasledovala procedúra s vodnou fázou a purifikácia rovnakým spôsobom, ako je opísané. Táto metóda poskytla zmes dvoch stereoizomérov (2S/2R - 2/1).

(lR,2R,3S)-2-karbometoxy-3-benzoxytropán hydrochlorid (100 g, 0,28 mol) sa 18 hodín refluxoval v 1000 ml 1 M

Podobným spôsobom sa pripravili nasledovné látky:

(1 R,2R,3 S)-2-Karbometoxy-3-benzyltropán a (lR,2S,3S)-2-kabometoxy-3-benzyl-tropán, len metódou č. 2, (lR,2S,3S)-2-karbometoxy-3-benzyltropán sa získal bez znečistenia druhým izomérom ako olej, ktorý kryštalizoval v pokoji, s 1.1. 53-54 °C.

(lR,2R,3S)-2-Karbometoxy-3-benzyltropán sa získal izomerizáciou zmesi ako sato opisuje v príklade č.3.

(1 R,2R,3 S)-2-Karbometoxy-3 -(4-chlórfenyl)tropán a (lR,2S,3S)-2-karbometoxy-3-(4-chlórfenyl)tropán metódou č. 2. Tieto dva izoméry sa neseparovali, ale zmes sa izomerizovala, ako sa to opisuje v príklade č. 3 (lR,2R,3S)-2-Karbometoxy-3-(4-chlórfenyl)tropán, (lR,2S,3S)-2-karbometoxy-3-(4-chlórfenyl)tropán, (1 S,2S,3R)-2-karbometoxy-3-(4-chlórfenyl)tropán a (lS,2R,3R)-2-karbometoxy-3-(4-chlórfenyl)tropán sa pripravili metódou č. 2. Tieto dva súbory párov enantiomérov sa neseparovali, ale zmes sa izomerizovala, ako sa to opisuje v príklade č. 3.

(1 R,2R,3 S)-2-Karbometoxy-3 -(4-metylfenyl)tropán a (lR,2S,3S)-2-karbometoxy-3-(4-metylfenyl)tropán sa pripravili metódou č.2. Obidva izoméry sa neseparovali, ale zmes sa izomerizovala, ako sa to opisuje v príklade č. 3 (lR,2S,3S)-2-Karbometoxy-3-(2-naftyl)tropán a (lR,2R,3S)-2-karbometoxy-3-(2-naftyl)tropán sa pripravili metódou č. 2. Grignardovo reagens sa pripravilo pridaním zmesi jedného ekvivalentu 2-brómnaftalénu a 1,2-dibrómetánu v dietyléteri do refluxujúcej suspenzie dvoch ekvivalentov horčíka. Obidva produkty boli biele kryštalické látky, s t.t. 79-80 °C, resp. 86-87 °C.

(1 R,2R,3 S)-2-Karbometoxy-3 -(1 -naftyljtropán a (lR,2S,3S)-2-karbometoxy-3-( 1 -naftyljtropán hydrochlorid, metóda č.2. Grignardovo reagens sa pripravilo pridaním zmesi jedného ekvivalentu 1-brómnaňalénu a 1,2-dibrómetánu v dietyléteri do refluxujúcej suspenzie dvoch ekvivalentov horčíka. Získali sa obidve látky, uvedené v nadpise, pričom prvá z nich bola biela kryštalická látka s t.t. 133-135 °C a druhá bola amorfná látka.

(1 R,2S,3S)-2-Karbometoxy-3-(3,4-dichlórfeny ljtropán a (1 R,2R,3 S)-2-karbometoxy-3 -(3,4-dichlórfeny ljtropán metódou č.2. Obidva produkty boli biele kryštalické látky s

1.1. 69-70 °C, resp. 61-63 °C.

Racemická zmes (lR,2R,3S)-2-karbometoxy-3-(3,4-dichlórfenyljtropánu a jeho enantioméru (lS,2S,3R)-2-karbometoxy-3-(3,4-dichlórfenyl)tropánu sa pripravila z metylesteru (±)-anhydroekgonínu ako východiskového materiálu pomocou metódy č.2, za ktorou nasledovala izomerizácia podľa metódy opísanej v príklade 3.

(1 S,2S,3 R)-2-Karbometoxy-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán sa pripravil metódou č. 2. Zlúčenina sa neizolovala, ale izomerizovala sa metódou č. 3.

(1 R,2S,3S)-2-Karbomctoxy-3-(4-fenyl-fenyl)tropán a (lR,2R,3S)-2-karbometoxy-3-(4-fenyl-fenyl)tropán sa pripravil metódou č.2. Obidva produkty boli biele kryštalické látky s 1.1. 130-132 °C, resp. 95-96 °C.

(1 R,2S,3S)-2-Karbometoxy-3-(4-í-butyl-fenyl)tropán a (lR,2R,3S)-2-karbometoxy-3-(4-t-butyl-fenyl)tropán sa pripravili metódou č.2. Obidva produkty boli biele kryštalické látky s t.t. 84-85 °C, resp. 83-84 °C.

Príklad 3 (1 R,2R,3S)-2-Karbometoxy-3-benzyltropán hydrochlorid 'N ^<XOU“

K roztoku (lR,2S,3S)-2-karbometoxy-3-benzyltropánu (5,6 g, 20,5 mmol) v absolútnom metanole (100 ml) sa pridal roztok nátrium metanolátu v metanole (2 M, 2 ml) a zmes sa refluxovala po 16 hodín. Reakčná zmes sa zahustila vo vákuu, zvyšok sa rozpustil v dietyléteri a premyl sa vodou. Organická fáza sa vysušila a skoncentrovala vo vákuu. Hrubý produkt sa prečistil stĺpcovou chromatografiou, pričom ako eluent sa použila zmes dietyléteru a pentánu (1 + 1) + 1 % trietylamínu. Získal sa (lR,2R,3S)-2-karbometoxy-3-benzyltropán v podobe oleja. Po rozpustení tohto produktu v dietyléteri po pridaní roztoku kyseliny soľnej v dietyléteri látka uvedená v nadpise precipitovala v podobe bielych kryštálov s 1.1. 188-199 °C.

Príklad 4 2-Karbometoxy-3-tropanón

-H -n COOM·

M - H o o

K suspenzii hydridu sodného (3,2 g 80%, 107 mmol, predmytý v cyklohexáne) a dimetylkarbonátu (9,13 ml, 108 mmol) v absolútnom cyklohexáne, zohriatej na refluxnú teplotu, sa pridal roztok (±)-3-tropanónu (6,9 g, 50 mmol) v 50 ml absolútneho cyklohexánu v priebehu 15 minút. Nebolo vidno žiadnu tvorbu vodíka, takže sa pridalo 0,2 ml metanolu. Reakčná zmes sa miešala cez noc pri refluxnej teplote a po ochladení na izbovú teplotu sa opatrne pridalo 75 ml vody. K vodnej fáze sa pridalo 40 g chloridu amónneho a výsledná zmes sa extrahovala 8 krát metylénchloridom. Kombinované metylénchloridové fázy sa vysušili, a po koncentrácii vo vákuu nasledovala stĺpcová chromatografla hrubého produktu pomocou metylénchloridu so zvyšujúcim sa množstvom (až do 10 %) metanolu ako eluentu. Frakcie obsahujúce produkt sa zahustili vo vákuu a výsledný olej sa podrobil destilácii v límcovke (kugelrohr destillation) (100 Pa, 120 °C), čím sa získala látka uvedená v nadpise, v podobe oranžových kryštálov s t. t. 104-107 °C.

Príklad 5

2-Karbometoxy-3-hydroxy-tropán hydrochlorid COOM. COOM·

M - H O OH

K roztoku 2-karbometoxy-3-tropanónu, ktorý sa získal v príklade 4 (17 g, 85 mmol), v 750 ml etanolu ochladeného na -35 °C sa pridal bórohydrid sodný (17 g, 450 mmol) a zmes sa miešala 4 hodiny. Reakcia v ochladenom roztoku sa prerušila pomalým pridaním koncentrovanej kyseliny soľnej (40 ml) a zmes sa skoncentrovala vo vákuu. Pridala sa voda (400 ml) a pH sa nastavilo na 3 pridaním koncentrovanej kyseliny soľnej. Po trojnásobnom premytí vodnej fázy dietyléterom sa pH upravilo na hodnotu 11 pridaním koncentrovaného hydroxidu amónneho a vodná fáza sa extrahovala trikrát pomocou metylénchloridu. Koncentráciou vo vákuu sa získal olej, ktorý sa rozpustil v etanole a po pridaní koncentrovanej kyseliny nasledovala koncentrácia vo vákuu. Vysušením rezídua v mraze sa získala látka, uvedená v nadpise, ako amorfná látka.

(lS)-Karbometoxy-3-hydroxy-tropán, amorfná tuhá látka, sa pripravila podobným spôsobom, pričom sa ako východiskový materiál použil (lS)-2-karbomctoxy-3-tropanón, získaný delením opísaným v J.Med.Chem., 3Ί, 2007(1994) zo zlúčeniny, ktorá sa získala v príklade 4.

Príklad 6

Metylester (lRS)-anhydroekgonínu ' COQM \ _zCOOM*

OH

Zmes hydrochloridu 2-karbometoxy-3-hydroxytropánu, ktoiý sa získal v príklade 5 (0,5 g, 2,1 mmol) a tionylchloridu (0,4 ml, 5,3 mmol) sa miešala 2 hodiny pri 60 °C, čím sa získal čistý roztok. Po ochladení na izbovú teplotu sa pridal rozdrvený ľad a pH sa nastavilo na hodnotu 11 pridaním koncentrovaného hydroxidu amónneho. Zmes sa extrahovala dva razy metylénchloridom, rozpúšťadlo sa odstránilo vo vákuu, čím sa získala látka uvedená v nadpise, v podobe oleja, ktorá sa potom predestilovala pri tlaku 100 Pa a teplote 70-85 °C.

Metylester (lS)-anhydroekgonínu, olej, sa pripravil podobným spôsobom, pričom ako východisková látka sa použil (]S)-karbometoxy-3-hydroxy-tropán, získaný v príklade

5.

Príklad 7 (lR,2R,3S)-N-Normetyl-2-karbometoxy-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán

Zmes (1 R,2R,3 S)-2-karbometoxy-3-(3,4-dichlórfenyl)tropánu (8,7 g, 27 mmol) a 2,2,2-trichlóretyl chloroformátu (14,6 ml, 106 mmol) v suchom toluéne (100 ml) sa refluxovala 18 hodín. Reakčná zmes sa zahustila vo vákuu a k zvyšku sa pridal metylénchlorid, ktorý sa potom premyl vodou. Organická fáza sa vysušila a zakoncentrovala sa vo vákuu. Zvyšok sa rozpustil v 75% vodnej kyseline octovej (60 ml). K reakčnej zmesi sa pridal zinok v prášku (8,7 g). Zmes sa potom miešala 18 hodín pri izbovej teplote. Pridal sa koncentrovaný hydroxid amónny (pH>7) a zmes sa extrahovala dva razy dietyléterom. Kombinovaná organická fáza sa vysušila vo vákuu, čím sa získala látka uvedená v nadpise v podobe oleja a ktorá sa použila bez ďalšieho čistenia.

Príklad 8 (lR,2R,3S)-N-normetyl-N-(íerí-butoxykarbonyl)-2-karbometoxy-3-(3,4-dichlórfenyl)-tropán

Roztok (lR,2R,3S)-N-normetyl-2-karbometoxy-3-(3,4-dichlórfenyl)tropánu (7 g, 22,3 mmol) a di-ŕert-butyl-dikarbonátu (7,7 ml, 33,6 mmol) v suchom tetrahydrofúráne (50 ml) sa miešal 1 hodinu pri izbovej teplote. Reakcia sa prerušila pridaním ľadu (100 ml). Zmes sa extrahovala dvakrát s dietyléterom a po vysušení a koncentrácii vo vákuu poskytla látku, uvedenú v nadpise, v podobe oleja, ktorá sa použila bez ďalšieho čistenia.

Príklad 9 (lR,2S,3S)-2-Hydroxymetyl-3-(4-fluórfenyl)tropán . , COOM« CH,OH

K suspenzii hydridu hlinitolítneho (0,8 g, 21 mmol) v dietyléteri (30 ml) sa pri izbovej teplote pomaly pridal roztok (lR,2S,3S)-2-karbometoxy-3-(4-fluórfenyl)tropánu (5 g, 18 mmol) v 100 ml dietyléteru. Reakcia prebehla počas 10- minútového miešania a prerušila sa pridaním 0,8 ml vody, 0,8 ml hydroxidu sodného (15%) a 2 ml vody. Hliníkové soli sa odstránili filtráciou a rozpúšťadlo sa odstránilo vákuom, čim sa získal olej. Látka uvedená v nadpise precipitovala pri triturácii s pentánom ako biele kryštály s t. t. 79 - 80 “C.

Podobným spôsobom sa pripravili nasledujúce látky: (1R,2R,3 S)-2-Hydroxymetyl-3 -(4-fluórfcnyl)tropán, bicie kryštály, t.t. 169-170 °C. (lR,2R,3S)-2-Hydroxymetyl-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán, biele kryštály, t.t. 145-150 °C.

(1 R,2R,3 S )-N-normety l-N-(íerí-butoxykarbony l)-2-hydroxymetyl-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán, olej. (lR,2S,3S)-2-Hydroxymetyl-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán, biele kryštály, t.t. 83-89 °C.

Racemická zmes (lR,2R,3S)-2-hydroxymetyl-3-(3,4-dichlórfenyl)tropánu a jeho enantioméru (lS,2S,3R)-2-hydroxymetyl-3-(3,4-dichlórfenyl)tropánu, t.t. 186-187 °C. (lS,2S,3R)-2-Hydroxymetyl-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán, t.t. 179-184 °C.

(lR,2R,3S)-2-Hydroxymetyl-3-(4-chlórfenyl)tropán, biele kryštály, t.t. 200-202 °C.

Príklad 10 (lR,2R,3S)-2-Formyl-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán

K roztoku oxalylchloridu (2,3 ml) v absolútnom metylénchloride (60 ml) pri -60 °C sa v priebehu 10 minút pridal roztok dimetylsulfoxidu (4 ml) v absolútnom metylénchloride (10 ml). Zmes sa miešala 10 minút a v priebehu 15 minút sa potom pridala suspenzia (lR,2R,3S)-2-hydroxymctyl-3-(3,4-dichlórfenyl)tropánu (7 g, 23,3 mmol) v absolútnom metylénchloride (400 ml). Výsledná zmes sa miešala 10 minút. Potom sa pridal trietylamín (17 ml, 0,12 mol) a zmes sa miešala ďalších 10 minút. Reakčná zmes sa ponechala do dosiahnutia izbovej teploty a reakcia sa prerušila pridaním vody (200 ml). Organická fáza sa dvakrát premyla vodou, vysušila sa a po zahustení vo vákuu sa získala látka, uvedená v nadpise, v podobe bielych kryštálov s

1.1. 131-135 °C.

Podobným spôsobom sa pripravili tieto látky:

Racemická zmes (lR,2R,3S)-2-formyl-3-(3,4-dichlórfenyljtropánu ajeho enantioméru (lS,2S,3R)-2-formyl-3-(3,4-dichlórfenyl)tropánu, ktorá sa použila bez ďalšieho čistenia.

(lS,2S,3R)-2-Formyl-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán, ktorý sa použil bez ďalšieho čistenia.

(lR,2R,3S)-2-Formyl-3-(4-chlórfenyl)tropán, ktorý sa použil bez ďalšieho čistenia.

(lR,2R,3S)-N-normetyl-N-(fôrt-butoxykarbonyl)-2-formyl-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán, olej, ktorý sa použil bez ďalšieho čistenia.

SK 280875 Β6

Podobným spôsobom sa pripravili aj nasledujúce látky, ale kvôli nebezpečiu izomerizácie z izoméru (1R,2S,3S) na izomér (1R,2R,3S) sa neizoloval intermediámy aldehyd. Namiesto zohriatia reakčnej zmesi na izbovú teplotu a pridania vody na prerušenie (kvenčovanie) reakcie sa k reakčnej zmesi pridalo primerané množstvo hydroxylamóniovej soli v nadbytku (3 ekvivalenty) a zmes sa ponechala do dosiahnutia izbovej teploty, pri ktorej sa potom miešala 18 hodín. Reakčná zmes sa dvakrát premyla vodou a organická fáza sa vysušila a zakoncentrovala vo vákuu.

(lR,2S,3S)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2aldoxím. Izolácia filtráciou reakčnej zmesi ako zmesi syn/anti izomérov 20 % + 80 % (posúdené podľa NMR), bez identifikácie identity týchto dvoch izomérov. Produkt sa ďalej nečistil, biele kryštály, 1.1. 248 - 252 °C.

(lR,2S,3S)-3-(3,4-Dichlórfenyl)tropán-2-O-metylaldoxím.

Koncentráciou metylénchloridovej fázy sa získal olej, ktorý sa podrobil stĺpcovej chromatografii, pričom ako eluent sa použila zmes metylénchloridu, acetónu a metanolu (4+1+1). Tým sa získala látka, uvedená v nadpise, v podobe bielych kryštálov s 1.1. 98 -100 °C.

(lR,2S,3S)-3-(3,4-Dichlórfenyl)tropán-2-O-benzylaldoxím hydrochlorid. Koncentrácia metylénchloridovej fázy poskytla olej, ktorý sa podrobil stĺpcovej chromatografii, pričom ako eluent sa použil etylacetát, čím sa získal opäť olej. Napokon tento olej sa rozpustil v malom objeme dietyléteru a pridal sa roztok kyseliny soľnej v dietyléteri, čím sa získala látka, uvedená v nadpise, v podobe bielych kryštálov s 1.1. 196-197 °C.

Príklad 11 (lR,2R3S)-3-(3,4-Dichlórfenyl)tropán-2-aldoxím

K roztoku (lR,2S,3S)-2-formyl-3-(3,4-dichlórfenyljtropánu (6,9 g, 23 mmol) v metanole (100 ml) sa pridal uhličitan sodný (4 g) a hydroxylamónium chlorid (2,6 g, 37 mmol). Zmes sa miešala 18 hodín pri izbovej teplote. Reakčná zmes sa zahustila vo vákuu a zvyšok sa trituroval s vodou. Hrubý produkt sa izoloval filtráciou a rekryštalizoval sa najprv v zmesi etanolu a vody (1+1) a potom v 99% etanole, čím sa získala látka uvedená v nadpise (zmes syn/anti izomérov - približne 1+2) v podobe bielych kryštálov s 1.1. 230 - 235 °C.

Podobným spôsobom sa získali nasledovné látky: (1 R,2R,3 S)-3 -(4-Chlórfenyl)tropán-2-0-aldoxím, biele kryštály, 1.1. 220- 222 °C.

(1 R,2R,3 S)-3 -(4-Chlórfenyl)tropán-2-O-metylaldoxím hydrochlorid, biele kryštály, 1.1. 90 - 93 °C.

(1 R,2R,3 S)-3 -(3,4-Dichlórfenyl)tropán-2-O-aldoxím, olej.

Racemická zmes (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-metylaldoxímu a jeho enantioméru (1 S,2S,3R)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-0-metylaldoxímu, 1.1.172- 178 °C.

(1 S,2S,3R)-3-(3,4-Dichlórfenyl)tropán-2-O-metylaldoxím,

1.1. 123 - 130 °C.

(1 R,2R,3 S)-3-(3,4-Dichlórfenyl)tropán-2-O-benzylaldoxím, biele kryštály,

1.1. 161 - 163 °C. (lR,2R,3S)-3-(3,4-Dichlórfenyl)tropán-2-O-fenylaldoxím, H₂SO₄,1.1. 100- 102 °C.

(1 R,2R,3 S)-N-normetyl-N-(/er/-butoxykarbonyl)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-metylaldoxím, olej, ktorý sa použil bez ďalšieho čistenia.

(1 R,2R,3 S)-N-normetyl-N-(tórí-butoxykarbonyl )-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-0-benzylaldoxím, olej, ktorý sa použil bez ďalšieho čistenia.

(1 R,2R,3S)-3-(3,4-Dichlórfenyl)tropán-2-0-(2-propinyl)-aldoxím hydrochlorid, biele kryštály, 1.1. <100 °C. (lR,2R,3S)-3-(3,4-Dichlórfenyl)tropán-2-O-(2-propenyl)-aldoxím hydrochlorid, biele kryštály, 1.1. 131 -133 °C. (lR,2R,3S)-3-(3,4-Dichlórfenyl)tropán-2-0-(2-metylpropyl)-aldoxím hydrochlorid, biele kryštály, 1.1. 161 -163 °C. (lR,2R,3S)-3-(3,4-Dichlórfenyl)tropán-2-O-cyklopropylmetylaldoxím hydrochlorid, biele kryštály, 1.1. 173-175 °C.

(lR,2R,3S)-3-(3,4-Dichlórfenyl)tropán-2-O-etylaldoxím hydrochlorid, biele kryštály, 1.1. <110 °C.

(lR,2R,3S)-3-(3,4-Dichlórfenyl)tropán-2-O-(l,l-dimetyletyl)-aldoxím hydrochlorid, biele kryštály, 1.1. 213-215 °C.

(1 R,2R,3 S)-3 -(4-Mety lfenyl)tropán-2-O-metylaldoxím hydrochlorid, biele kryštály, t.t. <95 °C (hygroskopické).

Soli (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-metyl-aldoxímu sa pripravili nasledovným spôsobom:

Roztok kyseliny (3,25 mmol) sa pridal k roztoku (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-metylaldoxímu (1 g, 3,0 mmol) v 96% etanole (5 ml) a zmes sa miešala pri izbovej teplote. Ak sa nepozorovala žiadna precipitácia po 18 hodinách, zmes sa zakoncentrovala vo vákuu a koncentrovaná zmes sa ponechala precipitovať v chladničke. Kryštalický produkt sa izoloval filtráciou a premyl sa malými množstvami ľadovo chladného 96% etanolu.

Soľ sa rekryštalizovala z vody alebo z izopropanolu.

Získali sa tieto soli (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-metylaldoxímu:

maleínan: biele kryštály, 1.1. (H₂O) 140 - 142 °C citran: biele kryštály, 1.1, (izopropanol) 143 - 144 °G malonan: biele kryštály, 1.1, (izopropanol) 116 -118 °G fumaran: biele kryštály, 1.1. (H2O) 158 - 159 °C síran: biele kryštály, 1.1. (H2O) 84 - 87 °C rekryštalizácia z H₂O poskytuje dvojsíranovú soľ s malým množstvom hydrogensíranu. Precipitácia soli z izopropanolu poskytuje hydrogensíran s 1.1.161 -163 °C.

chlorid: biele kryštály, 1.1. (H₂O) 74 - 75 °C.

Príklad 12 (1 R,2R,3S)-3-(3,4-Dichlórfenyl)tropán-2-0-etoxykarbonylmetylaldoxím hydrochlorid

Roztok (1 R,2R,3 S)-2-formy l-3-(dichlórfeny l)tropánu (I g), 0-(2-acetoxy)-2-hydroxylamónium chloridu (0,5 g) a koncentrovanej kyseliny soľnej v etanole (1 ml) sa refluxoval 5 hodín. Potom nasledovalo miešanie pri izbovej teplote, ktoré trvalo 18 hodín. Zmes sa zahustila vo vákuu a zvyšok sa trituroval s izopropanolom. Látka uvedená v nadpise sa izolovala filtráciou v podobe bielych kryštálov s

1.1. 220 - 222 °C.

Podobným spôsobom sa pripravili nasledujúce látky: (1 R,2R,3 S)-3 -(3,4-Dichlórfenyl)tropán-2-O-metoxykarbonylmetylaldoxím hydrochlorid, biele kryštály, t. t. 193-195 °C.

(1 R,2R,3 S)-3-(3,4-Dichlórfeny l)tropán-2-0-( 1 -etoxykarbonyl-l,l-dimetyl-metyl)-aldoxím hydrochlorid, biele kryštály,! t. 213-215 °C.

(1 R,2R,3 S)-3 -(4-Chlórfenyl)tropán-2-O-metoxykarbonylmetylaldoxím hydrochlorid, biele kryštály, 1.1. 202-203 °C.

(lR,2R,3S)-3-(3,4-Dichlórfenyl)tropán-2-O-karboxymetyl-2-aldoxím hydrochlorid. Získal sa spolu s (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-0-metoxykarbonylmetylaldoxím hydrochloridom po refluxovaní trvajúcom 1 hodinu. Biele kryštály, 1.1. 158-160 °C.

Príklad 13 (lR,2R,3S)-N-normetyl-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-metylaldoxím hydrochlorid

Zmes(lR,2R,3S)-N-normetyl-N-(/ert-butoxykarbonyl)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-O-metylaldoxímu (1,3 g, 3,1 mmol) a kyseliny trifluóroctovej (10 ml) v absolútnom metylénhydrochloride (10 ml) sa miešala 1 hodinu. Potom sa pridal ľad a metylénchlorid (50 ml) a pridaním 4M hydroxidu sodného sa upravilo pH zmesi na 10. Organická fáza sa vysušila a zakoncentrovala vo vákuu. Tým sa získal olej, ktorý sa prečistil stĺpcovou chromatografiou so zmesou metylénchloridu, metanolu a 25% hydroxidu amónneho (90+10+1). Frakcie, obsahujúce produkt, sa zahustili vo vákuu. Získaný olej sa rozpustil v malom množstve dietyléteru a pridal sa roztok kyseliny soľnej v dietyléteri. Látka uvedená v nadpise sa získala v podobe bielych kryštálov s t. L 226 - 230 °C.

Podobným spôsobom sa získali nasledujúce látky: (lR,2R,3S)-N-Normetyl-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-benzylaldoxím hydrochlorid, 1.1. 70 - 72 °C.

(lR,2R,3S)-N-Normctyl-3-(4-chlórfenyl)tropán-2-aldoxím malónan, 1.1. 70 - 75 °C.

(lR,2R,3S)-N-Normetyl-3-(4-chlórfenyl)tropán-2-O-metylaldoxím H₂SO₄.

Príklad 14

Syn- a anti-izoméry (1R,2R,3S) a (1 S,2S,3R)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-metylaldoxímu.

Tvorba (1R,2R,3S) a (lS,2S,3R)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-metylaldoxímu reakciou príslušnej 2-formylovej zlúčeniny a metoxyamóniumchloridu, ako sa opisuje v príklade 12, poskytuje zmes syn- a anti-izoméru, ktorá je výsledkom kinetickej regulácie produktu a izomerizácie pôvodne vytvorenej zmesi. Kinetická zmes uprednostňuje anti-izomér (viac ako 90 %) a rovnovážna zmes obsahuje anti/syn v pomere 7/3. Táto anti/syn rovnováha sa katalyzuje kyselinou a rovnovážnu zmes možno ľahko získať zohriatím vodného roztoku materiálu na 100 °C na tri hodiny pri pH 4. Stĺpcová chromatografia rovnovážnej zmesi pri použití zmesi toluénu, etylacetátu a trietylamínu (2+1) + 2 % ako eluentu poskytuje syn-izomér v podobe oleja, ktorý možno destilovať v límcovke (kugelrohr destillation) bez izomerizácie.

Claims (10)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Tropánové deriváty všeobecného vzorca (I) ’M-i

   B B (I) ich akákoľvek zmes alebo ich farmaceutický vhodná soľ; kde

   R je vodík, alkyl, obsahujúci 1 až 6 atómov uhlíka, alkenyl, obsahujúci 2 až 6 atómov uhlíka, alkinyl, obsahujúci 2 až 6 atómov uhlíka, cykloalkyl, obsahujúci 3 až 7 atómov uhlíka, cykloalkylalkyl, kde cykloalkylový zvyšok obsahuje 3 až 7 atómov uhlíka a alkylový zvyšok obsahuje 1 až 6 atómov uhlíka, alebo 2-hydroxyetyl;

   R³ je CH=NOR', kde

   R' je vodík alebo alkenyl, obsahujúci 2 až 6 atómov uhlíka, alkinyl, obsahujúci 2 až 6 atómov uhlíka, cykloalkyl, obsahujúci 3 až 7 atómov uhlíka, cykloalkylalkyl, kde cykloalkylový zvyšok obsahuje 3 až 7 atómov uhlíka a alkylový zvyšok obsahuje 1 až 6 atómov uhlíka, aryl, ako je fenyl a naftyl, alebo alkyl, obsahujúci 1 až 6 atómov uhlíka, z ktorých všetky môžu byť substituované skupinou COOH, COO-alkylom, v ktorom alkylový zvyšok obsahuje 1 až 6 atómov uhlíka, COO-cykloalkylom, v ktorom cykloalkylový zvyšok obsahuje 3 až 7 atómov uhlíka, alebo fenylom, ktorý môže byť raz alebo viackrát substituovaný substituentmi vybranými zo skupiny pozostávajúcej z halogénu, CF₃, CN, alkoxylu, obsahujúceho 1 až 6 atómov uhlíka, cykloalkoxylu, obsahujúceho 3 až 7 atómov uhlíka, alkylu, obsahujúceho 1 až 6 atómov uhlíka, cykloalkylu, obsahujúceho 3 až 7 atómov uhlíka, alkenylu, obsahujúceho 2 až 6 atómov uhlíka, alkinylu, obsahujúceho 2 až 6 atómov uhlíka, aminoskupiny a nitroskupiny; a

   R⁴ je fenyl, ktorý môže byť substituovaný raz alebo viacnásobne substituentmi vybranými zo skupiny pozostávajúcej z halogénu, CF₃, CN, alkoxylu, obsahujúceho 1 až 6 atómov uhlíka, cykloalkoxylu, obsahujúceho 3 až 7 atómov uhlíka, alkylu, obsahujúceho 1 až 6 atómov uhlíka, cykloalkylu, obsahujúceho 3 až 7 atómov uhlíka, alkenylu, obsahujúceho 2 až 6 atómov uhlíka, alkinylu, obsahujúceho 2 až 6 atómov uhlíka, aminoskupiny, nitroskupiny, 5- alebo 6-člennej heterocyklickej skupiny, obsahujúcej 1 až 3 heteroatómy, vybrané zo skupiny zahŕňajúcej kyslík, síru a dusík a arylu, ako je fenyl a naftyl;

   3,4-metyléndioxyfenyl;

   benzyl, ktorý môže byť substituovaný raz alebo viacnásobne substituentmi vybranými zo skupiny pozostávajúcej z halogénu, CF₃, CN, alkoxylu, obsahujúceho 1 až 6 atómov uhlíka, cykloalkoxylu, obsahujúceho 3 až 7 atómov uhlíka, alkylu, obsahujúceho 1 až 6 atómov uhlíka, cykloalkylu, obsahujúceho 3 až 7 atómov uhlíka, alkenylu, obsahujúceho 2 až 6 atómov uhlíka, alkinylu, obsahujúceho 2 až 6 atómov uhlíka, aminoskupiny, nitroskupiny, 5- alebo 6-člennej heterocyklickej skupiny, obsahujúcej 1 až 3 heteroatómy, vybrané zo skupiny zahŕňajúcej kyslík, síru a dusík, a arylu, ako je fenyl a naftyl;

   naftyl, ktorý môže byť substituovaný raz alebo viacnásobne substituentmi vybranými zo skupiny pozostávajúcej z halogénu, CF₃, CN, alkoxylu, obsahujúceho 1 až 6 atómov uhlíka, cykloalkoxylu, obsahujúceho 3 až 7 atómov uhlíka, alkylu, obsahujúceho 1 až 6 atómov uhlíka, cykloalkylu, obsahujúceho 3 až 7 atómov uhlíka, alkenylu, obsahujúce

   SK 280875 Β6 ho 2 až 6 atómov uhlíka, alkinylu, obsahujúceho 2 až 6 atómov uhlíka, aminoskupiny, nitroskupiny, 5- alebo 6-člennej heterocyklickej skupiny, obsahujúcej 1 až 3 heteroatómy, vybrané zo skupiny zahŕňajúcej kyslík, síru a dusík, a arylu, ako je fenyl a naftyl.
2. 2. Tropánové deriváty podľa nároku 1, ktorými sú 3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2aldoxím, 3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-metylaldoxim, 3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-benzylaldoxím, 3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-etoxykarbonylmetylaldoxím, 3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-metoxykarbonylmetylaldoxím, 3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-( 1 -etoxykarbonyl-1,1-dimetylmetyljaldoxím, 3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-0-karboxymetylaldoxím, N-normetyl-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-0-metylaldoxím alebo N-normetyl-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-0-benzylaldoxím, alebo ich farmaceutický prijateľná adičná soľ.
3. 3. Tropánové deriváty podľa nároku 1, ktorými sú (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-aldoxím, (1 R,2R,3S)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-benzylaldoxím, (1 R,2R,3 S )-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-etoxykarbonylmetylaldoxím, (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-0-metoxykarbonylmetylaldoxím, (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-0-(l-etoxykarbonyl-1,1 -dimetylmetyljaldoxím, (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-karboxymetyl-2-aldoxím, (lR,2R,3S)-N-normetyl-3-(3,4-dichiórfenyl)tropán-2-O-metyl-aldoxím alebo (lR,2R,3S)-N-normetyl-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-benzylaldoxim, alebo ich farmaceutický prijateľná adičná soľ.
4. 4. Tropánový derivát podľa nároku 1, ktorým je (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-metylaldoxím alebo jeho farmaceutický prijateľná adičná soľ.
5. 5. Tropánový derivát podľa nároku 4, ktorým je anti-izomér (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-0-metylaldoxímu, syn-izomér (lR,2R,3S)-3-(3,4-dichlórfenyl)tropán-2-O-metylaldoxímu, ich zmes alebo ich farmaceutický prijateľná adičná soľ.
6. 6. Farmaceutický prostriedok na liečenie porúch alebo chorôb odpovedajúcich na inhibíciu spätného vychytávania dopamínu, vyznačujúci sa tým, že obsahuje účinné množstvo derivátu tropánu podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 5, alebo jeho farmaceutický prijateľnú adičnú soľ, spoločne s aspoň jedným farmaceutický vhodným nosičom alebo riedidlom.
7. 7. Tropánový derivát podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 5 na výrobu liečiva na liečenie porúch alebo chorôb živého organizmu živočíchov, vrátane ľudského tela, pričom táto porucha alebo choroba kladne reaguje na inhibíciu spätného vychytávania monoamínových neurotransmiterov v centrálnom nervovom systéme.
8. 8. Tropánový derivát podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 5 na výrobu liečiva na liečenie porúch alebo chorôb živého organizmu živočíchov, vrátane ľudského tela, pričom táto porucha alebo choroba kladne reaguje na inhibíciu spätného vychytávania dopamínu v centrálnom nervovom systéme.
9. 9. Tropánový derivát podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 5 na výrobu liečiva na liečenie parkinsonizmu, depresie, obezity, narkolepsie, drogovej závislosti a/alebo narkománie.
10. 10. Spôsob prípravy tropánových derivátov podľa nároku 1,vyznačujúci sa tým, že zlúčenina všeobecného vzorca

    M jej enantiomér alebo ich zmes, kde R je definované v nároku 1 a R¹² je ester karboxylovej kyseliny, alebo kde R¹² má význam ako R³ v nároku 1, reaguje so zlúčeninou vzorca

    R⁴-A, kde R⁴ je definované v nároku 1 a A je akýkoľvek typ reaktívnej skupiny, vhodnej na vytvorenie karbaniónu ako jej protičasti, ako Li, MgX, kde X je halogén a CuLi vMichaelovej 1,4-adičnej reakcii, a kde v prípade, ak R¹² je ester karboxylovej kyseliny, sa esterová skupina s významom R¹² prevedie na oxímovú skupinu v R³, definovanú v nároku 1.