CZ280560B6 - 5-(Hydroxy-2-piperidinopropyl)-2(1H,3H)-indolonové deriváty a odvozené deriváty jako neuroprotek tivní látky - Google Patents

Abstract

5(1-Hydroxy-2-piperidinpropyl)-2(1H,3H)-indolo- nové deriváty a analogy těchto sloučenin, představující racemické nebo optické aktivní sloučeniny obecného vzorce I, II, nebo III, kde A má v patentových nárocích uvedený význam , n je 0 nebo 1, m je 0 nebo celé číslo od 1 do 6, R, R.sup.1 .n.a R.sup.2 .n.jsou nezávisle atom vodíku nebo alkylová skupina, R.sup.3 .n.a R.sup.4 .n.odděleně znamenají vodík nebo společně znamenají ethylenovou skupinu, X je vodík, alkoxyskupina nebo alkoxykarbonylová skupina, Y je CH.sub.2 .n.nebo kyslík a Z a Z.sup.1 .n.je každý nezávisle vodík, alkyl, alkoxyskupina, fluor, chlor nebo brom. Dále jsou nárokovány některé meziprodukty použitelné při přípravě uvedených sloučenin.ŕ

Description

Racemický nebo opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperidino-propyl)-2-(lH, 3H)-indolový derivát, 5-(l-oxo-2-piperidinopropyl)-2-(1H,3H)-indol jako meziprodukt pro jeho přípravu a farmaceutický prostředek s jeho obsahem.

Oblast techniky

Vynález se týká nových racemických nebo opticky aktivních 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(lH, 3H)-indolových derivátu dále uvedených obecných vzorců, které projevují neuroprotektivní účinky, to znamená antiischemické účinky a schopnost blokovat excitační receptory aminokyselin. Do rozsahu vynálezu také náleží určité 5-(l-oxo-2-piperidinopropyl)-2-(lH, 3H)-indolové sloučeniny jako meziprodukty postupu přípravy shora uvedených sloučenin, farmaceutické prostředky obsahující shora uvedené racemické nebo opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(1H,3H)-indolové deriváty a použití těchto sloučenin pro přípravu léčiv k léčení infarktu neboli mrtvice, traumatických poškození mozku nebo degenerativních onemocnění centrálního nervového systému (neboli CNS), jako je například Alzheimerova nemoc, senilní demence Alzheimerova typu, Huntingtonova nemoc a Parkinsonova nemoc.

Dosavadní stav techniky

Z dosavadního stavu techniky je znám ifenprodil, což je racemická sloučenina, která má následující stereochemický vzorec A:

(A) přičemž tato sloučenina představuje běžně se na trhu vyskytující hypotenzivní činidlo, a účinky této sloučeniny má také celá řada blízkých analogů, viz například patent Spojených států amerických č. 3 509 164 (autor Carron a kol.) a dále publikace Carron a kol., Drug Res., v. 21, str. 1992 až 1999 (1971). U tohoto ifenprodilu bylo také zjištěno, že projevuje antiischemický účinek a účinek projevující se v blokování excitačních receptorů aminokyselin, viz. například publikace Gotti a kol. J.Pharm. Exp. Therap., v. 247, str. 1211 až 1221 (1988); a dále Carter a kol., shora uvedená publikace, str. 1222 až 1232. Také je možno v tomto směru poukázat na publikovanou evropskou patentovou přihlášku č. 322361 a na francouzský patent č. 2546166.

Také jsou z dosavadního stavu techniky známy určité strukturně příbuzné 1-fenyl-3-(4-aryl-4-acyloxy-piperidino)-1-propanoly, které jsou používány jako analgetické prostředky, viz například patent Spojených států amerických č. 3 294 804, a také jsou známy z dosavadního stavu technicky určité l-[4-(amino- a hydroxyalkyl)fenyl]-2-(4-hydoxy-4-tolylpiperazin)-1-alkanoly a alkanony,

-1CZ 280560 B6 které projevují analgetický účinek, antihypertenzní účinek, psychotropní účinek a účinek proti zánětlivým onemocněním, přičemž v tomto směru je možno uvést například Japanesse Kokai 53-02.474 (CA 89 : 43498y; Derwent Abs. 14858A) a 53-59,675 (CA 89 : 14638w; Derwent Abs. 48671A).

Z poslední doby jsou známy například z publikované evropské patentové přihlášky č. 351, 282 sloučeniny, které se dají shrnout pod následující obecný vzorec B:

ve kterém znamená:

R^a a R^ každý nezávisle atom vodíku nebo alkylovou skupinu obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

R^c benzylovou skupinu, fenoxyskupinu, benzyloxyskupinu nebo fenoxymethylovou skupinu, a

Z^a je CH₂, C(CH₃)₂ nebo CH₂CH₂.

O těchto sloučeninách se uvádí, že projevují účinnost neuroprotektivního typu.

Nomenklatura použitá v popisu uvedeného vynálezu odpovídá obvyklé nomenklatuře podle Rigaudyho a kol. viz IUPAC Nomenclature of Organic Chemistry, 1979 Edition, Pergamon Press, New York, přičemž 1(1H, 3H)-indolony se podle této nomenklatury také označují jako oxindoly.

Podstata vynálezu

Cílem uvedeného vynálezu je nalezení takových sloučenin, které by projevovaly neuroprotektivní účinek v dostatečné míře, přičemž by tyto sloučeniny měly současně menší nebo nevýznamný hypotenzivní účinek.

Podstatu uvedeného vynálezu tvoří racemické nebo opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(1H,3H)-indolové deri-

(III) ve kterých:

A znamená jednu ze skupin

n je 0 nebo 1, m je 0 nebo celé číslo od 1 do 6,

R, R¹ a R² jsou každý nezávisle atom vodíku nebo alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

R³ a R⁴ každý zvlášť nezávisle představují atom vodíku, nebo R³ a R⁴ společně představují ethylenovou skupinu, X představuje atom vodíku, alkoxyskupinu obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo alkoxykarbonylovou skupinu obsahující v alkoxy části 1 až 3 atomy uhlíku,

Y představuje skupinu CH₂ nebo atom kyslíku, a

Za Z¹ každý nezávisle představují atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxyskupinu obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, atom fluoru, atom chloru nebo atom bromu, a farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinami odvozené od těchto sloučenin.

-3CZ 280560 B6

Ve výhodném provedení podle uvedeného vynálezu je uvedeným racemickým nebo opticky aktivním 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(1H,3H)-indolovým derivátem sloučenina obecného vzorce I, ve kterém:

m znamená 0 nebo 1, η 9

Z a Z představují každý atom vodíku, a R znamena atom vodíku nebo methylovou skupinu.

Z této skupiny je dále podle uvedeného vynálezu výhodný racemický nebo opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(lH,3H)-indolový derivát shora uvedeného obecného vzorce I, ve kterém znamená

R² methylovou skupinu, přičemž tato sloučenina má obecný stereochemický vzorec:

Z této skupiny výhodných sloučenin je dále podle uvedeného vynálezu výhodný racemický nebo opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(1H,3H)-indolový derivát shora uvedeného obecného vzorce I, ve kterém:

R³ a R⁴ každý zvláště nezávisle představují atom vodíku.

Z této skupiny výhodných sloučenin je dále podle uvedeného vynálezu výhodný opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(lH, 3H)indolový derivát shora uvedeného stereochemického vzorce, ve kterém m znamená 0.

Dále je podle uvedeného vynálezu výhodný racemický nebo opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(1H,3H)-indolový derivát o shora uvedeném stereochemickém vzorci, ve kterém: R³ a R⁴ společně představují ethylenovou skupinu.

Podle uvedeného vynálezu je dále výhodný racemický nebo opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(1H,3H)-indolový derivát shora uvedeného obecného vzorce II, ve kterém: Z znamená atom vodíku,

Z¹ znamená atom vodíku nebo atom chloru, a

R² znamená methylovou skupinu.

Z této skupiny výhodných sloučenin je zejména výhodný racemický nebo opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(1H,3H)-indolový derivát obecného vzorce II, který má relativní stereochemický vzorec:

-4CZ 280560 B6

ve kterém:

R a R¹ je každý atom vodíku, a Y je skupina CH₂.

Dále je podle uvedeného vynálezu výhodný opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)lový derivát shora uvedeného obecného vzorce III, symboly A, n, m, R, R¹, R², R³, R⁴ , X, Y, Z a Z jako bylo uvedeno shora.

Do rozsahu uvedeného vynálezu také náleží 5-( dinopropyl)-2-(1H,3H)-indol obecného vzorce IV:

racemický nebo -(1H,3H)-indove kterém mají stejný význam

-oxo-2-piperi-

(IV) nebo obecného vzorce V:

(V)

-5CZ 280560 B6 (VI)

ve kterých A znamená jednu ze skupin:

n je 0 nebo 1, m je 0 nebo celé číslo od 1 do 6, _v

R, R a R jsou každý nezávisle atom vodíku nebo alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

R³ a R⁴ každý zvlášť nezávisle představují atom vodíku.

nebo R³ a R⁴ společně představují ethylenovou skupinu,

X představuje atom vodíku, alkoxyskupinu obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo alkoxykarbonylovou skupinu obsahující v alkoxy části 1 až 3 atomy uhlíku,

Y představuje skupinu CH₂ nebo atom kyslíku, a

Za Z¹ každý nezávisle představují atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxyskupinu obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, atom fluoru, atomu chloru nebo atom bromu, jako meziprodukt postupu přípravy racemického nebo opticky aktivního 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(1H,3H)-indolového derivátu shora uvedeného obecného vzorce I, II nebo III.

Ve výhodném provedení podle vynálezu představuje substituent R atom vodíku nebo methylovou skupinu, nejvýhodněji je tímto 2 substituentem R methylová skupina, přičemž relativní stereochemické uspořádání na 1-hydroxypropylové straně řetězce je možno znázornit následujícím způsobem:

OH i

CH₃

-6CZ 280560 B6 a tyto sloučeniny je možno specifikovat jako sloučeniny s uspořádáním (1S*, 2S*) nebo (IR*, 2R*).

Stručně je možno shrnout, že ve výhodném provedení podle uvedeného jsou substituentem A následující skupiny:

(tvořící 2(lH,3H)-indolon nebo oxindol) (tvořící 3,4-dihydro-2(lH)-chinolon);

(tvořící indol);

(tvořící 2(3H)-benzoxazolon

Do rozsahu uvedeného vynálezu také náleží farmaceutické prostředky pro léčení infarktu, traumatických poškození mozku a CNS degenerativních onemocnění, jejichž podstata spočívá v tom, že obsahují racemické nebo opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperi-dinopropyl)-2-(1H,3H)-indolové deriváty shora uvedeného obecného vzorce I, II nebo III společně s farmaceuticky přijatelnou nosičovou látkou.

Do rozsahu uvedeného vynálezu také náleží použití racemických nebo opticky aktivních 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl-2-(1H,3H)-indolových derivátu shora uvedeného obecného vzorce I, II nebo III pro přípravu léčiva k léčení infarktu, traumatických onemocnění mozku nebo CNS degenerativních onemocnění.

Shora uvedeným termínem farmaceuticky přijatelná adiční sůl s kyselinou se míní následující soli, které ovšem nijak neomezují rozsah možných použitelných solí a které jsou uvedeny pouze jako příkladné : sůl s kyselinou chlorovodíkovou, sůl s kyselinou bromovodíkovou, sůl s kyselinou jodovodíkovou, sůl s kyselinou dusičnou, sůl s kyselinou hydrogensírovou, sůl s kyselinou dihydrogenfosforečnou, sůl s kyselinou methansulfonovou, sůl s kyselinou maleinovou a sůl s kyselinou jantarovou. Tyto soli se obvykle připraví reakcí volné bazické formy sloučeniny obecného vzorce I, II nebo III se vhodnou kyselinou, v obvyklém provedení se použije jednoho ekvivalentu (míněno jako molární ekvivalent) a reakce se provede ve vhodném rozpouštědle. Takto vzniklé soli, které se obvykle přímo nevysráží z roztoku, se v obvyklém provedení získají zkoncentrováním roztoku a/nebo přídavkem ne-rozpouštědla.

-7CZ 280560 B6

V souvislosti se shora uvedenými sloučeninami je třeba poznamenat, že tyto sloučeniny obecných vzorců I až VI, které ve středové části molekuly představují 1-alkanoly, mají asymetrický C-l atom uhlíku, zatímco u sloučenin shora uvedených vzorců, ve kterých je substituent R jiný než vodík, se vyskytuje druhé asymetrické centrum na C-2 uhlíku uvedeného alkanolu. Podobně je možno uvést, že sloučeniny shora uvedených obecných vzorců IV až VI, které představují 1-alkanony, u kterých substituent R má jiný význam než atom vodíku, mají C-2 asymetrický atom. Pro odborníky pracující v daném oboru organické chemie je vzhledem se shora uvedenému zřejmé, že tyto sloučeniny je možno rozštěpit na optické isomery, které stáčejí rovinu polarizovaného světla ve stejné míře, ale v opačném smyslu. Například je možno uvést, že všechny uvedené sloučeniny je možno popřípadě rozštěpit pomocí frakční krystalizace jejich diastereomerních adičních solí v přítomnosti opticky aktivních kyselin, jak bude podrobně uvedeno v příkladech provedení. Uvedené alkoholy je možno také popřípadě rozštěpit chromatografickou metodou nebo frakční krystalizaci esterů nebo uretanů, získaných reakcí s aktivními formami opticky aktivních kyselin nebo s opticky aktivními isokyanatany, jak bude také uvedeno v následujících příkladech.

Sloučeniny podle uvedeného vynálezu, které mají shora uvedené obecné vzorce I, II a III se připraví jednoduchým způsobem.

Ketony představující prekurzory sloučenin podle vynálezu se obecně připraví nukleofilní výměnou vhodného substituovaného 2-halogen-, 2-alkansulfonyloxy- nebo 2-arylsulfonyloxy-l-alkanonu za pomoci vhodného substituovaného piperidinového derivátu, jako

je například reakce:
	O		,---71
	11 .X	OH
A	r v r - r-(CH^-	Jf
|	R2
z
H

(IV) kde substituentem X je obvykle chlor, brom, mesyloxyskupina nebo tosyloxyskupina.

Tato shora uvedená reakce se provádí za podmínek, při kterých se všeobecně provádí typická nukleofilní výměna. Jestliže jsou shora uvedené reakčni látky k dispozici ve formě molárních ekvivalentů, potom je možno použít k tomuto postupu shora uvedené látky ve v podstatě molárním ekvivalentním množství. Ovšem jestliže je jedna z těchto sloučenin snadněji dostupná, potom je obvykle výhodné použít tuto sloučeninu v přebytku, přičemž účelem tohoto opatření je urychlit reakčni průběh této bimolekulární reakce a dokončit tuto reakci v kratším časovém intervalu. Tato reakce se obvykle provádí v přítomnosti přinejmenším jednoho molárního ekvivalentu bazické látky, to znamená výhodně samotného piperidinového derivátu jestliže je snadno získatelný, ovšem

-8CZ 280560 B6 obvyklejší je použití terciárního aminu, který je přinejmenším srovnatelný pokud se týče bazické síly s uvedeným nukleofilním piperidinem. Obvykle se tato reakce provádí v inertním reakčnim rozpouštědle, jako je například ethanol. V případě potřeby je možno tuto reakci katalyzovat, což je možno provést za přídavku až jednoho molárního ekvivalentu jodidové soli (jako je například jodid sodný Nal nebo jodid draselný KI), nebo je možno použít i většího množství. V případě provádění shora uvedené reakce není teplota důležitá, ovšem obvykle se tato reakce provádí při poněkud zvýšené teplotě za účelem urychlení průběhu této reakce a dokončení přípravy konečného produktu v kratším časovém intervalu, ovšem na druhé straně nesmí být tato teplota příliš vysoká, aby nezpůsobovala nežádoucí rozklad použitých a připravovaných sloučenin. V obvyklém provedení je vhodná teplota v rozmezí od 50 do 120 °C. Výhodné se tato shora uvedená reakce provádí při teplotě varu použitého rozpouštědla pod zpětným chladičem.

Ve shora uvedeném textu byl použit termín inertní reakční rozpouštědlo, přičemž tímto termínem se míní libovolné rozpouštědlo, které nepůsobí na výchozí látky, reakční činidla, meziprodukty ani na produkty reakce takovým způsobem, že by tato vzájemná reakce nebo působeni mělo nepříznivý vliv na výtěžek požadovaného produktu.

Takto získaný výsledný ketonový meziprodukt se obvyklým způsobem převede na odpovídající alkohol, což se provede běžnou redukcí za pomocí borohydridu sodného NaBH₄, který je použit obvykle v přebytku, přičemž tato reakce se provede v protickém rozpouštědle, jako je například methanol nebo ethanol, a obvykle se tato reakce provádí při teplotě v rozmezí od asi 15 do asi 45 °C.

Výchozí látky a reakční činidla nutná k provedení syntetické přípravy sloučenin podle uvedeného vynálezu jsou snadno dostupná, ať již to je ve smyslu získání těchto látek na trhu nebo přípravy pomocí obvyklých metod známých z dosavadního stavu techniky, přičemž tyto metody budou pro ilustraci uvedeny v příkladové části.

Sloučeniny obecných vzorců I, II a III projevují selektivní neuroprotektivní účinnost, to znamená že mají antiischemickou aktivitu a schopnost blokovat excitační receptory aminokyselin, přičemž současně mají sníženou nebo nevýznamnou hypotenzní účinnost. Antiischemickou účinnost sloučenin podle vynálezu je možno stanovit podle některé nebo více metod, které jsou známy z publikací podle dosavadního stavu techniky, viz shora citované publikace Gotti a kol., a Carter a kol. nebo je možno tuto antiischemickou účinnost stanovit některými jinými podobnými metodami. Nežádoucí hypotenzivní účinnost je možno také stanovit metodami, které jsou známy z dosavadního stavu techniky, jako je například metoda podle Carrona a kol. viz. shora uvedený odkaz.

Tato uvedená selektivní neuroprotektivní antiischemická účinnost a schopnost blokovat excitační receptory aminokyselin u uvedených sloučenin podle vynálezu představuje cenné vlastnosti, které je možno využít při léčení infarktu, traumatického poškození mozku a degenerativních CNS poruch (poruch v centrálním nervovém systému), jako je například Alzheimerova nemoc, senilní demence Alzheimerova typu, Parkinsonova nemoc a Huntingtonova

-9CZ 280560 B6 nemoc. Sloučenin podle uvedeného vynálezu je možno použít pro shora uvedené účely, přičemž je významné také to, že při jejich použití nedochází k současnému nežádoucímu poklesu tlaku krve.

Při systematickém léčení shora uvedených onemocnění za použití neuroprotektivních množství sloučenin obecného vzorce I, II nebo III se dávka těchto sloučenin podle vynálezu obvykle pohybuje v rozmezí od asi 0,02 miligramu na kilogram tělesné hmotnosti na den do asi 10 mg/kg/den (to znamená 1 až asi 500 miligramů za den pro průměrného člověka o hmotnosti 50 kilogramů) ve formě jedné nebo rozdělených dávek, což nezávisí na způsobu podávání těchto sloučenin. Rozumí se jako samozřejmé, že podle konkrétní specifické sloučeniny a podle přesné povahy léčeného onemocnění mohou být použité dávky i mimo shora uvedené rozmezí, což je nutno stanovit ošetřujícím lékařem. Ve výhodném provedení se tyto dávky podávají perorálním způsobem. Ovšem jestliže pacient není schopen polykat nebo je toto perorální podávání jakýmkoliv jiným způsobem ztíženo, potom se ve výhodném provedení používá parenterálního podávání těchto sloučenin podle vynálezu (i.m, i.v.) nebo se používá topického podávání.

Sloučeniny podle uvedeného vynálezu se obvykle podávají ve formě farmaceutických prostředků, které obsahují přinejmenším jednu účinnou látku, to znamená sloučeninu podle uvedeného vynálezu obecného vzorce I, II nebo III, společně s farmaceuticky přijatelným nosičem, což je například vehikulum nebo ředidlo. Tyto prostředky se obvykle připravují běžným způsobem, přičemž je možno použít pevného nebo kapalného vehikulu nebo ředidla podle vhodné metody určené k podávání těchto prostředků. Pro perorální podávání mohou být tyto prostředky ve formě tablet, tvrdých nebo měkkých želatinových kapslí, ve formě suspenzí, granulí, prášků a podobných jiných prostředků. Pro parenterální podávání je vhodné připravit roztoky nebo suspenze nebo podobné jiné formy vhodné pro injekce, a pro topické podávání je možno vhodně použít roztoků, pleťových prostředků, mastí, balzámů a podobných jiných prostředků .

Stanovení farmakologické účinnosti.

Schopnost sloučenin podle uvedeného vynálezu blokovat excitační receptory aminokyselin je možno demonstrovat na jejich schopností blokovat elevace cGMP indikované N-methyl-D-aspartovou kyselinou (NMDA) v neonatálním malém mozku u krys, což je možno zjistit pomocí následujícího postupu. Malý mozek krys Wistar o stáří 8 až 14 dní se rychle vyjme a umístí do Krebs/hydrogenuhličitanového tlumicího roztoku o teplotě 4 ’C a o pH 7,4, přičemž potom se rozkouskuje na části 0,5 milimetru x 0,5 milimetru za použití přístroje na rozřezávání tkání Mcllvain (The Nickle Laboratory Engineering Co., Gomshall, Surrey, England). Takto získané kousky malého mozku se převedou do 100 mililitrů Krebs/hydrogenuhličitanového pufru o teplotě 37 °C, který je kontinuálně doplňován směsí O₂/CO₂ v poměru 95 : 5. Kousky malého mozku se inkubují tímto způsobem po dobu devadesáti minut se třemi změnami pufru. Tento pufr se potom dekantuje, tkáň se odstředí (odstředování po dobu 1 minuty při otáčkách 3 200 za minutu) a takto získaná tkáň se potom opětné suspenduje ve 20 mililitrech Krebs/-hydrogenuhličitanového pufru. Potom se odstraní 250 μΐ

-10CZ 280560 B6 alikvotního podílu (přibližně 2 miligramy) a tento podíl se umístí do 1,5 mililitrové mikroštěrbinové trubice. Do této trubice se potom přidá 10 μΐ testované sloučeniny ze zásobníku roztoku, přičemž po inkubační periodě 10 minut následuje přídavek 10 μΐ 2,5 mM roztoku NMDA. U kontrolních vzorků se NMDA nepřidává. Tyto uvedené trubice se potom inkubují po dobu jedné minuty při teplotě 37 °C v lázni s promíchávanou vodou, potom se přidá 750 μΐ 50 mM Tris-Cl, 5 mM EDTA roztoku za účelem zastavení reakce. Tyto trubice se potom okamžitě umístí do vroucí vody, respektive do lázně s vroucí vodou, kde se ponechají po dobu pěti minut. Na obsah těchto trubic se potom působí ultrazvukem po dobu 15 sekund za použití jednotky s ultrazvukovou sondou, která se nastaví na třetí stupeň výkonové hladiny. Potom se oddělí 10 mikrolitrů, přičemž se u tohoto podílu stanoví obsah proteinů metodou podle Lowryho, viz. Anal. Biochem. 100: 201 až 220 (1979). Tyto trubice se potom odstřeďují (po dobu 5 minut, 10 000 x g) potom se oddělí 100 μΐ kapaliny nad usazeninou a v tomto podílu se stanoví hladina cyklického GMP (cGMP), přičemž se použije metody podle cGMP-RIA-testu, který je přiložen k přístroji New England Nuclear (Boston, Massachussetts), na kterém byl test proveden. Hodnoty jsou uvedeny v pmolech cGMP vzniklých na miligram proteinu. Touto metodou je možno stanovit schopnost blokovat excitační receptory aminokyselin. Neurodegenerace buněčné kultury se stanoví v hodnotách IC₅₀ (μΜ) nebo v procentu inhibování při koncentraci 1 μΜ.

Příklady provedení vynálezu

Sloučeniny podle uvedeného vynálezu, tzn. racemické nebo opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(1Η,3H)-indolové analogy a odvozené deriváty a postupy jejich přípravy a meziprodukty a postupy přípravy těchto meziproduktů budou v dalším ilustrovány s pomocí konkrétních příkladů, které jsou pouze příkladné a nijak neomezují rozsah vynálezu. V závěru budou uvedeny výsledky farmakologických testů.

Příklad 1

Postup přípravy 5-[2-(4-benzyl-4-hydroxypiperidin)propinyl]-2(1H,3H)-indolonu.

Při provádění postupu podle tohoto příkladu byly 5-(2-chlorpropionyl)-2-(1H, 3H)-indolon (v množství 2,5 gramu, což odpovídá 11,2 mmolu), dále 4-hydroxy-4-benzylpiperidin (v množství 2,1 gramu, což odpovídá 11,2 mmolu) a triethylamin (v množství 1,56 mililitru, což odpovídá 11,2 mmolu) spojeny v prostředí ethanolu a potom byla tato směs zahřívána pod zpětným chladičem při teplotě varu po dobu přes noc. Takto získaná reakční směs byla potom ochlazena na teplotu místnosti a potom byla zkoncentrována za použití sníženého tlaku. Získaný zbytek byl potom rozdělen mezi ethylester kyseliny octové a vodu, přičemž takto vzniklé fáze byly odděleny. Získaná vodná vrstva byla potom extrahována za použiti ethylesteru kyseliny octové a spojené organické fáze byly potom promyty solankou, potom byl tento roztok sušen za pomoci síranu vápenatého a potom byl zkoncentrován. Takto získaný surový produkt byl potom podroben zpracovávání metodou mžikové chromatografie a koloně naplněné silikagelem, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanu

-11CZ 280560 B6 v poměru 1 :1a nejdříve byl eluován nezreagovaný 5-(2-chlorpropionyl)-2(lH,3H)-indolon. Kontinuální eluci ethylesterem kyseliny octové bylo získáno 3,6 gramu produktu ve formě světle hnědé pěny. Tento produkt byl potom rekrystalován ze směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanu, přičemž bylo získáno 1,23 gramu vyčištěného požadovaného produktu, uvedeného v záhlaví tohoto příkladu. Méně čisté frakce z kolony a matečné louhy z rekrystalizace byly potom podrobeny opětnému chromatografickému zpracovávání, které bylo prováděné stejným způsobem jako je uvedeno shora, přičemž jako elučního činidla bylo nejdříve použito směsí ethylesteru kyseliny octové a hexanu v poměru 1 : 1 a potom bylo použito stejné směsi v poměru 3:1. Frakce produktu byly potom triturovány za pomoci eteru a hexanu, přičemž tímto způsobem bylo získáno dalších 0,2 gramu produktu, takže celkový výtěžek byl 1,43 gramu (což je 34 %).

Teplota tání:	188	až 192 °C;
NMR 8,22 (s,	1H) ,		8,08	(D, J=8 Hz, 2H),
7,99 (s,	1H) ,		7,31	- 7,13 (m, 5H),
6,89 (d,	J=8	Hz, 1H),	4,03	q, J=6,8 Hz, 1H),
3,57 (s,	2H) ,		2,72	(s, 2H),
2,72-2,58	(m,	3H) ,	2,46	(deformované t, 1H),
1,75-1,40	(m,	4H)	1,26	(d, J=6,8 Hz, 3H),
1,23-1,19	(m,	1H).
Analýza pro C2	3H26	N2°3:

vypočteno C = 72,99, H = 6,92, N = 7,40 % nalezeno C = 72,68, H = 6,77, N = 7,28 %.

Příklad 2

Postup přípravy 5[2S⁺-(4-benzyl-4-hydroxypiperidin)-lS⁺-hydroxypropyl]-2(1H,3H)-indolonu.

Při provádění postupu podle tohoto příkladu byl produkt připravený postupem podle příkladu 1 ( v množství 0,75 gramu, což odpovídá 1,98 mmolu) rozpuštěn v 50 mililitrech horkého ethanolu a potom byla tato směs ponechána ochladit. Takto získaný roztok byl potom přidán během intervalu 1 až 2 minut k suspenzi borohydridu sodného (v množství 0,113 gramu, což odpovídá 2,98 mmolu) v ethanolu (v množství 50 mililitrů), přičemž potom bylo provedeno propláchnutí této směsi 25 mililitry ethanolu. Potom byla takto získaná reakční směs míchána po dobu přes noc. K takto vzniklé reakční směsi byla potom přidána voda (v množství 2 mililitry) a použité rozpouštědlo bylo potom odstraněno za sníženého tlaku. Takto získaný zbytek byl potom rozdělen mezi ethylester kyseliny octové a vodu. Potom bylo přidáno malé množství dithioničitanu k celkovému podílu vodných proplachových podílů za účelem zabránění oxidace produktu vzduchem. Získaná organická vrstva byla potom oddělena, potom byla promyta vodou a potom solankou. Potom byl tento podíl sušen za pomoci síranu vápenatého a potom byl tento podíl zkoncentrován za bílou pevnou látku. Tato pevná látka byla potom podrobena rekrystalování z echanolu, přičemž bylo získáno 0,24 gramu produktu. Matečný louh byl potom podroben zpracování mžikovou chromatografickou metodou na silikagelu, přičemž

-12CZ 280560 B6 jako elučního činidla bylo použito ethylesteru kyseliny octové a tímto způsobem bylo získáno dalších 0,19 gramu produktu, takže celkový výtěžek byl 0,43 gramu, což odpovídá 57 %.

Teplota tá	ní:	228 až 229 °C;
NMR 7,66	(br	s, 1H),	7,31	- 7,10 (m,	7H) ,
6,77	(d,	J=8 Hz, 1H),	4,17	(d, J=10 H	z) ,
3,49	(s,	2H) ,	2,84	(dt, J=2,5	, 11 Hz,
2,76	(s,	2H) ,	2,65	- 2,40 (m,	4H) ,
1,86	- 1	,50 (m, 5H)	1,15	(s, 1H),
0,76	(d,	J=6,5 Hz, 3H);
Analýza pr	o C	23H28N2°3 :
vypočteno	c	= 72,61, H = 7,42,	N = 7(	,36 %
nalezeno	c	= 73,04, H = 7,50,	N = 7(	,35 %.

1H) ,

Příklad 3

Postup přípravy 5[2S⁺-(4-hydroxy-4-fenylpiperidin)-lS⁺-hydroxypropyl]-2(1H,3H)-indolonu.

Při provádění postupu podle tohoto příkladu se postupovalo stejným způsobem jako v příkladech 1 a 2, přičemž byl 4-hydroxy-4-fenylpiperidin převeden na shora uvedený produkt s celkovým výtěžkem 38 %. Takto získaný produkt byl potom přečištěn metodou mžikové chromatografie na silikagelu a potom byl triturován za použití ethylesteru kyseliny octové.

Teplota tání: 216 až 218 °C;

NMR 7,51 (d, J=9 Hz, 3H měl NH proton v tomto záznamu),

7,36 (t, J=7,5 Hz, 2H), 7,24 (dt, J=1,2, 7,5 Hz,2H)

7,17 (dd, J=1,2, 7,5 Hz, 1H), 6,78 (d, J=8 Hz, 1H)

4,22 (d, J=10 Hz, 1H),

3,08 (dt, J=2, 11 HZ, 1H),

2,24 - 1,98 (m, 2H),

1,49 (s, 1H),

3,51 (s, 2H),

2,7 - 2,48 (m, 5H),

1,83 - 1,70 (br, d, 2H),

0,82 (d, J=7 Hz, 3H),

Analýza pro ^C22^H26^N2°3 vypočteno C = 72,11, H = 7,15, nalezeno C = 72,23, H = 7,30,

N = 7,64 %

N = 7,30 %.

Příklad 4

Postup přípravy 5[2S⁺-(4-hydroxy-4-fenylpiperidin)-lS⁺-hydroxypropyl]-3-methyl-2(1H, 3H)-indolonu.

Při provádění postupu podle tohoto provedení bylo postupováno stejným způsobem jako v příkladech 1 a 2, přičemž podle tohoto příkladu byly 5-(2-chlorpropionyl)-3-methyl-2(1H,3H)-indolon a 4-hydroxy-4-fenylpiperidin převedeny na požadovanou sloučeninu uvedenou v záhlaví tohoto příkladu ve výtěžku 24 %.

Teplota tání : 219 až 220 ’C (z ethylacetátu).

-13CZ 280560 B6

Příklad 5

Postup přípravy 5-[2-(4-hydroxy-4-fenylpiperidin)-propionyl]-l-(p-toluensulfonyl)indolu.

Při provádění postupu podle tohoto příkladu byl 5-(2-brompropionyl)-1-(p-toluensulfonyl)indol (v množství 1,67 gramu, což odpovídá 3,37 mmolu, o čistotě 83 %) rozpuštěn v horském ethanolu (v množství 100 mililitrů) a potom byl přidán 4-hydroxy-4-fenylpiperidin (v množství 0,6 gramu, což odpovídá 3,39 mmolu) a triethylamin (v množství 0,94 mililitru, což odpovídá 6,74 mmolu). Tato směs byla potom zahřívána pod zpětným chladičem po dobu přes noc. Takto získaná reakční směs byla potom ochlazena a zkoncentrována a potom byla převedena přímo ke zpracování chromatografickou mžikovou metodou na silikagelu. Jako elučního činidla bylo podle tohoto provedení použito směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanu v poměru 1:3, přičemž bylo odstraněno 0,1 gramu nebromovaného ketonu. Při pokračující eluci, která byla prováděna potom směsí ethylesteru kyseliny octové a hexanu v poměru 1 : 1, bylo získáno 1,47 gramu požadované sloučeniny uvedené v záhlaví tohoto příkladu ve formě sklovité oranžové pevné látky (výtěžek 87 %) .

NMR	8,34	(s, 1H),	8,09	(d, J=9 Hz	, 1H),
	8,00	(d, J=8,5 Hz, 1H),	7,77	(d, J=8,5	Hz, 2H),
	7,61	(d, J=3,5 Hz, 1H),	7,45	(d, J=9 Hz	, 2H),
	7,33	-7,29 (m, 2H),	7,24	- 7,21 (m,	4H) ,
	6,72	(d, J=3,5 Hz, 1H),	4,18	q, J=7 Hz,	1H) ,
	2,88	- 2,84 (m, 2H),	2,73	- 2,62 (m,	2H) ,
	2,32	(s, 3H),	2,18	- 2,06 (m,	1H) ,
	2,05	- 1,97 (m, 1H),	1,77	— 1,66 (m,	1H) ,
	1,59	- 1,54 (m, 1H),	1,31	(d, J=7 Hz	, 3H),
IR	1 679	, 1 605, 1 375, 1 289,	1 260, 1 169, 1 12	6, 994.
FAB	HRMS ;	pro C29H31N2O4S (MH+)

vypočteno : 503.2006; nalezeno m/e : 503.2023.

Příklad 6

Postup přípravy 5-[2-(4-hydroxy-4-fenylpiperidin)propionyl]indolu.

Při provádění postupu podle tohoto příkladu byl produkt připravený postupem podle předchozího příkladu (v množství 1,3 gramu, což odpovídá 2,75 mmolu) rozpuštěn v methanolu (v množství 50 mililitrů), přičemž potom byl přidán hydroxid draselný (v množství 0,324 gramu, což odpovídá 5,79 mmolu) ve formě jednorázového přídavku. Takto připravená reakční směs byla potom zahřívána při teplotě varu pod zpětným chladičem pod dobu 6 hodin, přičemž v další fázi byla ochlazena a použité rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku. Tímto způsobem byl získán zbytek, který byl rozdělen mezi ethylester kyseliny octové a vodu. Takto vzniklé fáze byly odděleny a získaná vodná vrstva byla extrahována ethylesterem kyseliny octové. Získané spojené organické vrstvy byly promyty solankou, přičemž potom byl tento podíl usušen a za pomoci síranu vápenatého a potom byl zkoncentrován. Takto vzniklý

-14CZ 280560 B6 zbytek byl potom podroben zpracovávání mžikovou chromatografickou metodou na silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi ethyl-esteru kyseliny octové a hexanu, a tímto způsobem bylo získáno 0,719 gramu požadovaného produktu uvedeného v názvu tohoto příkladu ve formě sklovité pevné látky (výtěžek byl 75 %).

Teplota tání : 60 až 70 ’C;

NMR 8,52 (s, 1H),

8,00 (dd, J=l,5, 8,5 Hz, 7,35-7,21 (m, 4H),

4,30 (q, J=6,5 Hz, 1H), 2,66 (t, J=9,5 Hz, 1H) , 1,77-1,65 (m, 2H),

IR (CHC1₃) 3 470, 2 924, 1 673, 1 224, 1 115.

FAB HRMS pro C₂2^H25^N2°4 ^: vypočteno (MH⁺) : 349.1918 nalezeno m/e : 349.1930.

8,49 (br s, 1H),

1H), 7,49 - 7,41 (m, 3H),

6,67 (s, 1H)

2,89 až 2,85 (m, 3H)

2,23 až 2,07 (m, 2H),

1,38 (d, J=6,5 Hz, 3H),

613, 1 412, 1 348, 1 323, 1 276,

Příklad 7

Postup přípravy 5-[2S⁺-(4-hydroxy-4-fenylpiperidin)-lS⁺-hydroxypropyl]indolu.

Při provádění postupu podle tohoto příkladu byl produkt připravený podle předchozího příkladu redukován, přičemž tato redukce byla provedena stejným způsobem jako je to uvedeno v postupu podle příkladu 2. Požadovaná sloučenina uvedená v záhlaví tohoto příkladu byla získána tímto způsobem ve formě bílé pevné látky v podobě vaty (15% výtěžek) po provedení chromatografického zpracování na silikagelu a po rekrystalizací z ethanolu.

Teplota tá	ní	: 220,5 až 221 ’C;
NMR 8,16	(br	s, 1H)	7	,63	(s, 1H),
7,54	(d,	J=8,5 Hz),2H)	7	,38	(t, J=7,5	Hz,	3H) ,
7,30	- 7	,19 (m, 3H),	6	,53	(s, 1H),
4,39	(d,	J=10 Hz, 1H),	3	,08	(dt, J=2,	11,5	HZ, 1H
2,90	- 2	,62 (m, 4H)	2	,35	- 2,10 (m.	, 2H)	t
1,90	- 1	,80 (m, 2H),	0	,82	(d, J=6,5	HZ ,	3H) ,
IR (CHC13)		3 475, 2 922, 1 731,	1	376 ,	, 1 250, 1	201,	1 038.

Analýza pro ^C22^H26^N2°2 :

vypočteno	C = 75,40,	H = 7,48,	N = 7,99	%
nalezeno	C = 74,99,	H = 7,47,	N = 7,91	%.

Příklad 8

Postup přípravy 5-[2-(4-benzyl-4-hydroxypiperidino)acetyl]-2(lH,3H)-indolonu.

-15CZ 280560 B6

Při provádění postupu podle tohoto příkladu byla směs obsahující 5-(chloracetyl)-2(lH,3H)-indolon (v množství 2,05 gramu, což odpovídá 9,78 mmolu), 4-hydroxy-4-benzyl-piperidin (v množství 1,87 gramu, což odpovídá 9,78 mmolu), uhličitan draselný (v množství 2,97 gramu, což odpovídá 21,4'9 mmolu) a jodid draselný (v množství 0,08 gramu, což odpovídá 0,48 mmolu) v acetonitrilu (v množství 200 mililitrů) zahřívána pod zpětným chladičem po dobu přes noc při teplotě varu. Takto získaná reakční směs byla potom ochlazena a potom byla zfiltrována přes celitovou vrstvu. Takto získaný filtrát byl potom zkoncentrován za vzniku oranžové pěny, a tato látka byla potom zpracovávána mžikovou chromatografickou metodou na silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito ethylesteru kyseliny octové. Tímto způsobem bylo připra-

vem	0 0,79	grai	mu olejově žluté pevné látky.
NMR	9,41	(br	, s, 1H), 7,91	(d, J=8	Hz	, 1H)
	7,86	(s,	1H), 7,28	- 7,14	(m,	5H) ,
	6,90	(d,	J=8 Hz, 1H), 3,76	(s, 2H)	/
	3,52	(s,	2H), 2,78	- 2,73	(m,	4H) ,
	2,43	(t,	J=10,5 HZ, 2H), 1,86	- 1,76	(m,	2H) ,
	1,50	(br	d, J=12 Hz, 2H), 1,36	(br s,	1H)	•
IR	(KBr)	: 2	920, 2 815, 1 710, 1 685,	1 615,	1 2	40, 1
FAB	HRMS	pro '	C22H25N2°3 '

vypočteno: 365.1867 pozorováno m/e : 365.1883.

Příklad 9

Postup přípravy 5-[2-(4-benzyl-4-hydroxypiperidino)-l-hydroxyethyl]-2(1H,3H)-indolonu.

Při provádění postupu podle tohoto příkladu se postupovalo tak, že produkt, který byl připraven postupem podle předchozího příkladu, byl redukován, přičemž bylo použito stejného postupu jako v příkladu 2. Takto získaný produkt byl potom přečištěn postupem mžikové chromatografie a potom byl tento produkt rekrystalován z ethylesteru kyseliny octové. Tímto postupem byl získán produkt uvedený v záhlaví tohoto příkladu ve formě žlutohnědé pevné látky s 18% výtěžkem.

Teplota tam: 168,5 az 169,5 C.

NMR	8,40	(br	s,	1H) ,
	6,80	(d,	J=8	Hz, 1H),
	3,50	(s,	2H)	Λ
	2,77	(s,	2H)	f
	1,83	- 1	,67	(m, 2H),
	1,27	(br	s,	1H) ,
IR	(KBr):	3 4	20 ,	3 170, 2 945, 2
		1 1	15,	830, 707.
FAB	MRMS	pro	C22H	27n2o3 (MH+)

7,35 - 7,17 (m, 7H),

4,66 (dd, J=3,5, 10 Hz, 1H),

2,89 (br d, J=ll Hz, 1H),

2,68 - 2,33 (m, 6H),

1,59 - 1,52 (m, 2H),

20, 1 705, 1 625, 1 490, 1 320, vypočteno : 367.2023 nalezeno m/e : 367.2061.

-16CZ 280560 B6

Příklad 10

Postup přípravy 5-[2-(4-hydroxy-4-fenylpiperidino)-l-hydroxyethyl]-2(1H,3H)-indolonu.

Při provádění postupu podle tohoto příkladu se postupovalo stejným způsobem jako v příkladech 8 a 2, přičemž podle tohoto provedení byl 4-hydroxy-4-fenylpiperidin převeden na požadovaný produkt uvedený v záhlaví tohoto příkladu, přičemž po provedení mžikové chromatografické metody a po opakované rekrystalizaci ze směsi methylenchloridu a eteru byl tento produkt získán s 5% výtažkem.

Teplota tání : 192 až 194 °C,

IR (KBr) : 3 410, 3 180, 2 930, 2 825, 1 715, 1 490, 705.

Analýza pro C₂₁H₂₄N₂O₃ . 0,5 H₂O :

vypočteno C = 69,79, H = 6,97, N = 7,75 % nalezeno C = 69,77, H = 6,52, N =7,60 %.

Příklad 11

Postup přípravy 6-[2-(4-hydroxy-4-fenylpiperidin)-l-hydroxyethyl]-2(3H)-benzoxazolonu.

Při provádění postupu podle tohoto příkladu bylo postupováno stejným způsobem jako v příkladech 8 a 2, přičemž podle tohoto provedení byly 6-(2-chloracetyl)-2(lH)-benzoxazolon a 4-hydroxy-4-fenyl-piperidin převedeny na požadovanou sloučeninu, která je uvedena v záhlaví tohoto příkladu, přičemž po rekrystalizaci ze směsi ethanolu a eteru byl tento produkt získán s 25% výtěžkem.

Teplota tání : 175 až 177 °C,

NMR (methanol-d₄)

7,35 - 7,29 (m, 3H),

7,05 (d, J=8 Hz, 1H),

2,96 - 2,90 (m, 2H),

2,19 (dq, J=4,5, 13 Hz,2H)

IR (KBr) : 3 320, 3 115, 2 920

7,51 (dd, J=l,5, 8,5 Hz, 2H),

7,24 - 7,19 (m, 2H),

4,94 - 4,90 (m, 1H přešel na dd J=3, 8,5 Hz s proplachem D₂O), 2,80 - 2,57 (m, 4H),

1,74 (br, d, J=14,5 Hz, 2H).

, 2 830, 1 785, 1 750.

Příklad 12

Postup přípravy 6-[2S⁺-(4-hydroxy-4-fenylpiperidin)-lS⁺-hydroxypropyl)-3,4-dihydro]-2(1H)-chinolonu.

Při provádění postupu podle tohoto příkladu se postupovalo tak, že byl použit stejný postup jako v příkladech 1 a 2 a při tomto provedení byly 5-(2-chlorpropionyl)-3,4-dihydro-2(1H)-chinolon a 4-hydroxy-4-fenylpiperidin převedeny na požadovaný produkt uvedený v záhlaví tohoto příkladu ve formě bílé pevné

-17CZ 280560 B6 látky, přičemž po zpracování mžikovou chromatografickou metodou a po rekrystalizaci z ethylesteru kyseliny octové byl tento produkt získán s 28% výtěžkem.

Teplota tání 218 až 219 C,

7,92	(s,	1H) ,		7,52	(d,	J=7,5 Hz, 2H),
7,38	(t,	J=7,5 H	z, 2H),	7,28	(t částečně nejasné
				překr	yto	NMR rozpouštědlovým
				pikem	6 J=	=7 Hz, 1H),
7,20	(s,	1H) ,		7,14	(d,	J=8 HZ, 1H),
6,70	(d,	J=8 Hz,	1H) ,	5,27	(br	s, 1H),
4,22	(d,	J=10 Hz	, 1H),	3,09	(t,	J=ll Hz, 1H),
2,96	(t,	J=7 Hz,	2H) ,	2,73	- 2	,58 (m, 6H),
2,32	- 2	,05 (m,	2H) ,	1,86	(br	d, J=14 Hz, 2H),
1,57	(s,	1H) ,		0,84	(d,	J=6,5 Hz, 3H).

Analýza pro ^C23^H28^N2°3 vypočteno C = 72,60, nalezeno C = 72,16,

H = 7,42,

H = 7,34,

N = 7,36 %

N = 7,29 %.

Příklad 13

Postup přípravy 5-[2S⁺-(3-(4-chlorfenylthio)-8-azabicyklo[3.2.1]— -okt-8-yl)-lS⁺-hydroxypropyl]-2(1H, 3H)-indolonu.

Při provádění postupu podle tohoto přikladu bylo postupováno stejným způsobem jako v příkladech 1 a 2, přičemž podle tohoto provedení byl 3-(4-chlorfenylthio)-8-azabicyklo[3.2.1]oktan převeden na požadovanou sloučeninu uvedenou v záhlaví tohoto příkladu, která byla po triturování za použití eteru získána s výtěžkem 7 %, přičemž tento produkt byl získán ve formě směsi s odpovídajícím 1R⁺, 2S⁺-isomerem,

Teplota tání : 146 až 158 °C.

Příklad 14

Postup přípravy 6-[2S⁺-(3-fenylthio-8-azabicyklo[3.2.l]-okt-8-yl)-lS⁺-hydroxypropyl]-3,4-dihydro-2(1H)-chinolonu.

Při provádění postupu podle tohoto příkladu bylo postupováno stejným způsobem jako v příkladech 1 a 2, přičemž podle tohoto provedení byly 6-(2-chlorpropionyl)-3,4-dihydro-2(lH)-chinolon a 3-fenylthio-8-azabicyklo—[3.2.1]oktan převedeny na odpovídající požadovanou sloučeninu uvedenou v záhlaví tohoto příkladu, přičemž požadovaný produkt byl podle tohoto provedení získán s 15% výtěžkem.

Teplota tání : 144 až 145 °C (z ethylacetátu).

-18CZ 280560 B6

Příklad 15

Postup přípravy 5-chlor-6-[2S⁺-(4-hydroxy-4-fenylpiperidin)1S⁺-hydroxypropyl]-2(3H)-benzoxazolonu.

Při provádění postupu podle tohoto příkladu bylo postupováno stejným způsobem jako v příkladech 1 a 2, přičemž podle tohoto provedení byly 5-chlor-6-(2-chlor-propionyl)-2(1H)-benzoxazolon a 4-hydroxy-4-fenylpiperidin převedeny na požadovanou shora uvedenou sloučeninu, přičemž tento produkt byl získán s výtěžkem 79 %.

Teplota tání : 198 až 199 °C (z ethanolu).

Příklad 16

Postup přípravy 5-[2S⁺-(3-hydroxy-3-fenyl-8-azabicyklo-[3.2.1]-okt-8-yl)-lS⁺-hydroxypropyl]-2(1H,3H)-indolonu.

Při provádění postupu podle tohoto příkladu bylo postupováno stejným způsobem jako v příkladech 1 a 2, přičemž podle tohoto provedení byl 3-hydroxy-3-fenyl-8-azabicyklo[3.2.1]oktan převeden na požadovanou sloučeninu uvedenou v záhlaví tohoto příkladu.

Příklad 17

Postup přípravy 5-[2S⁺-(3-benzyl-3-hydroxy-8-azabicyklo[3.2.1]-okt-8-yl)-lS⁺-hydroxypropyl]-2(1H,3H)-indolonu.

Při provádění postupu podle tohoto příkladu bylo postupováno stejným způsobem jako v příkladech 1 a 2, přičemž podle tohoto provedení byl 3-benzyl-3-hydroxy-8-azabicyklo[3.2.1]oktan převeden na požadovanou sloučeninu uvedenou v záhlaví tohoto příkladu.

Příklad 18

Postup optického rozštěpení 5-[2S⁺-(4-hydroxy-4-fenylpiperidin)-lS⁺-hydroxypropy1]-2(1H,3H)-indolonu.

Metoda A:

Při provádění postupu podle tohoto provedeni byla směs obsahující (+)-kafrsulfonovou kyselinu (v množství 232 miligramů, což odpovídá 1 mmolu) a produkt získaný postupem podle příkladu 3 (v množství 366 miligramů, což odpovídá 1 mmolu) míchána v 25 mililitrech ethanolu. Při provádění tohoto postupu vznikl předtím, než se začala z tohoto roztoku srážet sůl, čirý homogenní roztok. Potom byla tato směs ponechána stát při teplotě prostředí po dobu přes noc, získaná sůl byla oddělena, potom byla opláchnuta ethanolem a nakonec byla usušena proudem dusíku. Tímto způsobem bylo získáno 460 miligramů soli růžového zabarvení, přičemž tento produkt byl potom rekrystalován z ethanolu celkem čtyřikrát. Tímto způsobem byl získán výsledný produkt s výtěžkem 260 miligramů.

-19CZ 280560 B6

Teplota tání : 241 až 242,5 °C, [^a)Na ^{= +19},° °^c (^{c =} 0/295, methanol), což naznačovalo, že tento produkt byl pouze částečně rozštěpen.

Metoda B :

Při provádění postupu podle tohoto provedení byl ke směsi obsahující CH₂C1₂ (v množství 25 mililitrů) a dimethylformamid DMF (v množství 1 mililitr) přidán produkt připravený postupem podle příkladu 3 (v množství 0,366 gramu, což odpovídá 1 mmolu), dále dicyklohexylkarbodiimid (v množství 0,226 gramu, což odpovídá 1,1 mmolu), 1-hydroxybenzotriazol (v množství 0,148 gramu, což odpovídá 1,1 mmolu), 4-dimethylaminopyridin (v množství 0,134 gramu, což odpovídá 1,1 mmolu) a N-terc.-butyloxykarbonyl-L-alanin (v množství 0,189 gramu, což odpovídá 1 mmolu). Takto získaná směs byla potom promíchávána pod atmosférou dusíku po dobu přes noc. Tímto způsobem byl získán homogenní roztok, který byl potom zředěn ethylesterem kyseliny octové (v množství 25 mililitrů) a potom byla tato směs zfiltrována přes celitovou vrstvu za účelem odstranění dicyklohexylmočoviny. Tímto způsobem byl získán filtrát, který byl potom zkoncentrován a potom byl tento filtrát vložen do ethylesteru kyseliny octové (v množství 150 mililitrů) . Druhou filtrací byl odstraněn další podíl stále ještě přítomného močovinového vedlejšího produktu. Takto získaný filtrát byl potom promyt vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, potom vodou, potom 1 N vodným roztokem chloridu lithného LÍCI a potom solankou. Takto získaná organická fáze byla potom sušena za pomoci síranu vápenatého a potom bylo provedeno zkoncentrování, přičemž byla získána olejová pěna. Tato pěna byla potom zpracována mžikovou chromatografickou metodou prováděnou v koloně naplněné silikagelem (kolona měla rozměry 5 x 10 centimetrů a byla naplněna směsí 50% ethylesteru kyseliny octové a hexanu), přičemž po eluování směsí ethylesteru kyseliny octové a hexanu o koncentraci 75 % hmot. bylo nejdříve získáno 0,1 gramu téměř čistého diastereomerního alaninového aduktu. Dalším zpracováváním bylo získáno 0,2 gramu směsi diastereomerů a nakonec bylo získáno 0,1 gramu částečně obohaceného vzorku dalších diastereomerů. Shora uvedený podíl 0,2 gramu shora uvedeného vzorku byl potom opětně podroben chromatografickému zpracovávání, které bylo provedeno stejným způsobem jako je uvedeno shora, přičemž podle tohoto provedení bylo získáno dalších 0,06 gramu prvního čistého diastereomeru. Takto získaný spojený podíl, to znamená 0,16 gramu produktu, byl potom podroben rekrystalování ze směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanu, přičemž bylo získáno 0,094 gramu požadovaného aduktu ve formě bílé pevné látky.

Teplota tání : 189 až 190 °C,

NMR (CDC1₃):

7,48	(dd, J;	=1,5,	8 Hz, 2H),	7,37	(t,	J=7,5 HZ, 2H),
7,34	- 7,18	(m,	3H) ,	6,83	(d,	J=8 Hz, 1H),
5,76	(d, J=	10 Hz	, 1H),	5,19	(br	d, J=7 Hz, 1H),
4,37	(br t,	J=7	Hz, 1H),	3,54	(s,	2H) ,
3,06	- 2,90	(m,	2H) ,	2,84	- 2	,52 (m, 3H),
2,16	- 1,88	(m,	2H) ,	1,82	- 1	,69 (m, 2H),

-20CZ 280560 B6

1,52 (d, J=7 Hz, 3H), 1,40 (š, 9H) ,

0,78 (d, J=7 Hz, 3H).

[a]_D = +69,5° (c = 0,295 v methanolu).

Analýza pro ^c3o^H39^N3°6 :

vypočteno C = 67,02, H = 7,31, N = 7,82, nalezeno C = 66,92, H = 7,46, N = 7,80.

Takto získaný t-boc-alaninový adukt (v množství 0,047 gramu, což odpovídá 0,087 mmolu) byl potom rozpuštěn v 9 mililitrech 0,32 N roztoku methoxidu sodného (v množství 0,15 gramu sodíku rozpuštěného ve 20 mililitrech methanolu). Takto získaná směs byla potom promíchávána po dobu 2 hodin a potom bylo použité rozpouštědlo odstraněno při teplotě okolí za použití vakua. Tímto způsobem byl získán zbytek, který byl potom vložen do ethylesteru kyseliny octové a potom byla tato směs extrahována vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a potom solankou. Tímto způsobem byla získána organická fáze, která byla potom sušena za použití síranu vápenatého a potom byl tento podíl zkoncentrován. Takto získaný surový produkt byl potom zpracován postupem mžikové chromatograf ie v koloně naplněné silikagelem (o rozměrech 2,5 x 5 centimetrů). Po propláchnutí této kolony 50% směsí ethylesteru kyseliny octové a hexanu byl zcela rozštěpený pravotočivý produkt eluován ethylesterem kyseliny octové, přičemž bylo získáno 0,011 gramu produktu (výtěžek 34 %);

[a]_D = +45,3° (c = 0,19 v methanolu).

Opačný enantiomer byl připraven podobným způsobem z N-terc.-butyloxykarbonyl-D-alaninu, ovšem při adiční reakci bylo podle tohoto provedení použito karbonyldiimidazolu. Tento karbonyldiimidazol (v množství 0,42 gramu, což odpovídá 2 mmolúm) byl přidán naráz ve formě jednorázového přídavku k míchanému roztoku N-terč.-butyloxykarbonyl-D-alaninu (v množství 0,76 gramu, což odpovídá 2 mmolům) v methylenchloridu (v množství 80 mililitrů). Takto získaná směs byla potom promíchávána po dobu 1 hodiny, přičemž potom byl a přidán produkt získaný postupem podle příkladu 3 (v množství 0,366 gramu, což odpovídá 1 mmolu) a tato látka byla také přidána najednou ve formě jednorázového přídavku, a získaná reakční směs byla potom promíchávána po dobu přes noc. Takto získaná směs byla potom zředěna methylenchloridem a potom byla extrahována vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Tímto způsobem byla získána organická fáze, která byla usušena, potom byla zkoncentrována a získaný zbytek byl potom podroben zpracovávání mžikovou chromatografickou metodou v koloně naplněné silikagelem (rozměr kolony 5 x 18 centimetru). Jako elučního činidla bylo použito směsi ethylesteru kyseliny octové v hexanu o koncentraci 25 % hmot., přičemž potom následovala eluce směsí ethylesteru kyseliny octové v hexanu o koncentraci 50 % hmot., přičemž tímto způsobem bylo získáno 0,13 gramu požadovaného diastereomeru, který byl potom v dalším postupu rekrystalován ze směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanu a tímto způsobem bylo získáno 0,077 gramu vyčištěné látky.

Teplota tání: 187 až 188 °C,

-21CZ 280560 B6 [α]θ = -64,1° (c % 0,17 v methanolu).

Takto získaný produkt byl potom hydrolyžován methanolickým methoxidem sodným, což bylo provedeno stejným způsobem jako je uvedeno shora, přičemž tímto způsobem byl získán požadovaný produkt uvedený v záhlaví tohoto příkladu s výtěžkem 85 %.

[a]_D = -40,5° (c = 0,21 v methanolu).

Při pokračujícím eluování při provádění shora uvedené mžikové chromatografii byly získány další diastereomery, které byly kontaminované tímto prvním produktem.

Příklad 19

Postup přípravy 7-fluor-5-[2-(4-hydroxy-4-fenylpiperidin)propionyl]-2-(1H,3H)-indolonu.

Při provádění postupu podle tohoto příkladu byla směs obsahující 7-fluor-5-(2-chlorpropionyl)—2(1H,3H)-indolon (v množství 1,0 gram, což odpovídá 4,14 gramu), dále 4-hydroxy-4-fenylpiperidin (v množství 0,74 gramu, což odpovídá 4,17 mmolu) a triethylamin (v množství 1,2 mililitru, což odpovídá 8,6 mmolu) v bezvodém dimethylformamidu, zahřívána při teplotě pohybující se v rozmezí od 70 do 90 °C po dobu 3 hodin. Takto získaná směs byla potom nalita do 1 N vodného roztoku chloridu lithného LÍCI a potom byla tato směs extrahována dvěma podíly ethylesteru kyseliny octové. Tímto způsobem byly získány organické fáze, které byly spojeny a tento spojený podíl byl potom promyt 1 N roztokem kyseliny chlorovodíkové, potom vodou a nakonec solankou. Získaná organická fáze byla potom sušena za pomoci síranu hořečnatého, potom byla zfiltrována a potom byla zkoncentrována, přičemž bylo získáno 1,6 gramu červenavě zabarvené pevné látky. Takto získaný surový produkt byl potom přečištěn postupem mžikové chromatografie v koloně naplněné silikagelem (kolona měla rozměry 5 x 10 centimetrů, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi ethylesteru kyseliny octové v hexanu o koncentraci 50 % hmot, a tímto postupem bylo získáno 0,58 gramu požadovaného produktu. Tento produkt byl potom v dalším postupu přečištěn takovým způsobem, že byl rekrystalován ze směsi acetonitrilu a eteru. Tímto způsobem bylo získáno 0,2 gramu mírně žluté pevné látky.

Teplota tán	í :	197 až	199,5 °C,
NMR (DMSO-d	6 )
11,25	(s,	1H) ,		7,90	(d, J=ll,6 Hz,	1H) ,
7,82	(s,	1H) ,		7,42	(d, J=7,2 Hz,	2H) ,
7,28	(t,	J=7,4	HZ, 2H),	7,17	(t, J=7,2 Hz,	1H) ,
4,76	(s,	1H) ,		4,25	(q, J=6,6 Hz,	1H) ,
3,76	(s,	2H) ,		2,88	- 2,63 (m, 2H)	f
2,60	- 2	,55 (m,	1H) ,	2,49	- 2,38 (m, 1H)	f
1,88	(dt	, J=12,	2, 4,3 HZ,	1H), 1,77	- 1,49 (m, 3H)	f
1,16	(d,	J=6,6	HZ, 3H).

Matečné louhy byly potom podrobeny opětně chromatografickému zpracovávání, přičemž tímto způsobem bylo získáno dalších 0,15

-22CZ 280560 B6 gramu produktu, takže celkový výtěžek byl 0,35 gramu (což znamená 22 %) .

Analýza pro ^C22^H 23 FN₂O₃ :

vypočteno C = 69,09, H=6,06, N=7,32,

C = 68,36, H = 5,85, M = 7,31.

Příklad 20

Postup přípravy 7-fluor-5-[2S⁺-(4-hydroxy-4-fenylpiperidin)-1S⁺-hydroxypropy1]-2(1H,3 H)-indolonu.

Při provádění postupu podle tohoto příkladu byl borohydrid sodný (v množství 0,033 gramu, což odpovídá 0,872 mmolu) rozpuštěn v absolutním ethanolu (v množství 3 mililitry) a potom byl k tomuto roztoku přidán ketonový produkt, získaný postupem podle shora uvedeného příkladu (v množství 0,3 gramu, což odpovídá 0,78 mmolu), přičemž tato látka byla přidána najednou ve formě jednorázového přídavku jako pevná látka. Takto získaná reakční směs byla dále zředěna 10 mililitry ethanolu. Potom byla tato směs promíchávána pod atmosférou dusíku po dobu 2 hodin. Přebytkový hydrid byl rychle ochlazen vodou a takto získaná směs byla potom zkoncentrována. Tímto způsobem byl získán zbytek, který byl potom rozdělen mezi ethylester kyseliny octové a vodu. Takto získané fáze byly odděleny a organická vrstva byla potom promyta solankou, potom byl tento podíl usušen síranem hořečnatým a potom byl zkoncentrován, čímž vznikla sklovitá pevná látka. Tato sklovitá pevná látka byla potom zpracována mžikovou chromatografickou metodou v koloně naplněné silikagelem (kolona měla rozměry 2,5 x 10 centimetrů). K eluování bylo nejdříve použito směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanu o koncentraci 50 % hmot, a potom bylo použito 100% ethylesteru kyseliny octové, přičemž tímto postupem bylo získáno 0,2 gramu pevné bílé látky. Další čištění bylo prováděno rekrystalizaci této látky ze směsi acetonitrilu a ethylesteru kyseliny octové, přičemž tímto způsobem bylo získáno 0,1 gramu produktu ve formě bílého pevného prášku (výtěžek 33 %) .

Teplota tání : 225 až 227 °C;

NMR (DMSO-d₆) :

10,83 (br s, 1H)

7,33 (t, J=7,6 Hz 2H) ,

7,07 (t, J=5,3 HZ, 2H),

4,82 (s, 1H),

3,56 (s, 2H),

2.62 - 2,56 (m, 4H),

1.63 (br d, J=12,9 Hz),

Analýza pro ^C22^R25^^R2°3 : vypočteno C = 68,73, H= nalezeno C = 68,53, H =

7,54	(d,	J=7,3 Hz,	2H) ,
7,21	(t,	J=7,3 Hz,	1H) ,
5,09	(br	S, 1H),
4,26	(d,	J=9,3 HZ,	1H) ,
2,97	(t,	J=10,6 Hz,	1H)
2,12	- 1	,92 (m, 2H)	f
2H), 0,74	(d,	J=6,6 Hz,	3H) .

6,55, N = 7,29,

6,31, N = 7,13 %.

-23CZ 280560 B6

Příklady 21 - 30

Při provádění postupů podle těchto příkladů se postupovalo stejným způsobem jako v předchozích příkladech, přičemž se těmito metodami připravily další následující sloučeniny podle uvedeného vynálezu (v dále uváděných příkladech je kromě názvu těchto sloučenin uveden i výtěžek postupu v konečném stupni, teplota tání a rozpouštědlo, ze kterého byla tato sloučenina isolována).

Příklad 21

6-[lS⁺-hydroxy-2S⁺(4-hydroxy-4-(4-methylfenyl)-piperidin)propyl]-3,4-dihydro-2(1H)-chinolon;

výtěžek 4 %;

Teplota tání větší než 250 °C (ethanol).

Příklad 22

6-chlor-5-[lS⁺-hydroxy-2S⁺(4-hydroxy-4-fenylpiperidin)-propyl]-2(1H,3H)-indolon;

výtěžek 1,7 %;

Teplota tání : 200 až 203 °C (eter).

Příklad 23

6-chlor-5-[lR⁺-hydroxy-2S⁺(4-hydroxy-4-fenylpiperidin)propyl]-2(1H, 3H)indolon;

výtěžek 79 %;

teplota tání 198 až 199 C (ethanol).

Příklad 24

5-[lS⁺-hydroxy-2S⁺-(3-fenylthio-8-azabicyklo[3.2.1]-okt-8-yl)propyl-2(1H,3H)-indolon;

výtěžek 12 %;

teplota tání : 159 až 160 °C (ethylacetát/acetonitril).

Příklad 25

5-[lR⁺-hydroxy-2S⁺-(3-fenylthio-8-azabicyklo[3.2.1]-okt-8-yl)propy1-2(1H,8H)-indolon;

výtěžek 7 %;

teplota tání: 211 až 212 °C (ethylacetát/acetonitril).

Příklad 26

7-fluor-5-[lS⁺-hydroxy-2S⁺(4-hydroxy-4-fenylpiperidin)propyl]-2-(1H,3H)-indolon;

výtěžek 33 %;

teplota tání : 225 až 227 °C (ethylacetát/acetonitril).

-24CZ 280560 B6

Příklad 27

4-chlor-5-[lS⁺-hydroxy-2S⁺(4-hydroxy-4-fenylpiperidin)propy1]-2(1H, 3H)-indolon;

výtěžek 31 %;

teplota tání 231 až 233 °C (ethanol/ether).

Příklad 28

4-chlor-5-[lR⁺-hydroxy-2S⁺(4-hydroxy-4-fenylpiperidin)propy1]-2(1H,3H)-indolon;

výtěžek 14 %;

teplota tání : 213,5 až 218 C (ethanol/ether).

Příklad 29

5-[lS⁺-hydroxy-2S⁺-(4-hydroxy-4-fenylpiperidin)propyl]-7-methyl-2(1H,3H)-indolon;

výtěžek 14 %;

teplota tání : 227,5 až 230 °C (ethanol/dimethylsulfoxid).

Příklad 30

5-[lS⁺-hydroxy-2S⁺-(4-hydroxy-4-fenylpiperidin)propyl]-4-methyl-2(1H,3H)-indolon;

výtěžek 22 %;

teplota tání 241 až 242 °C (ethanol/dimethylsulfoxid).

Příprava 1

Postup přípravy 5-kyano-l-(p-toluensulfonyl)indol.

Podle tohoto postupu přípravy byl hydrid sodný (v množství 8,4 gramu, což odpovídá 210 mmolu) promýván dvakrát hexanem a potom byl suspendován v tetrahydrofuranu (v množství 500 mililitrů). Potom byl k této reakční směsi přidán 5-kyanoindol (v množství 20 gramů, což odpovídá 140 mmolúm) v tetrahydrofuranu (v množství 200 mililitrů), přičemž tento přídavek byl proveden opatrným způsobem po kapkách. Takto získaná výsledná směs byla promíchávána při teplotě okolí po dobu 1 hodiny a potom byl k této reakční směsi přidán p-toluensulfonylchlorid (v množství 26,7 gramu, což odpovídá 140 mmolům) v tetrahydrofuranu (v množství 200 mililitrů) . Takto připravená reakční směs byla potom promíchávána po dobu 3 hodin, přičemž potom byla do této reakční směsi přidána voda. Tímto způsobem se vytvořily jednotlivé fáze, které byly odděleny a vodná fáze byla potom extrahována dvakrát ethylesterem kyseliny octové. Tímto způsobem byly získány organické fáze, které byly spojeny a takto získaný spojený podíl byl potom promyt solankou, potom byl sušen pomocí síranu vápenatého a nakonec byl tento podíl zkoncentrován. Získaný zbytek byl potom rekrystalován z eteru, přičemž podle tohoto postupu bylo získáno 29,97 gramu požadovaného produktu uvedeného v záhlaví ve výtěžku 72 %.

Teplota tání : 129 až 131 ’C

-25CZ 280560 B6

NMR	8,04	(d,	J=8 ,	5	Hz	, 1H),	7,85	(d,	J=1 Hz,	1H) ,
	7,75	(d,	J=9	Hz		2H) ,	7,67	(d,	J=3,5 HZ	, 1H),
	7,53	(m,	1H) ,				7,23	(m,	2H) ,
	6,68	(d,	J=3 ,	5	HZ	, 1H),	2,34	(s,	3H) ,
IR	(CHCI	-> roztok)		2	225, 1 597,	1 453,	1	380, 1	289, 1
					1	169, 1 138, 1	123 , 1	089	', (pás),	990.
FSB	HRMS	(MH+:	) :

vypočteno pro ^ci6^Hi3^N2°2^s 297.0669 nalezeno m/e : 297.0685.

Příprava 2

Postup přípravy 5-propionyl-l-(p-toluensulfonyl)indolu.

Při provádění postupu podle tohoto provedení byl produkt získaný postupem podle předchozího postupu (v množství 11,4 gramu, což odpovídá 40 mmolům) rozpuštěn v suchém toluenu (v množství 760 mililitrů) a potom byl tento roztok rychle ochlazen na teplotu 0 °C. Potom byl k této reakční směsi přidáván ethylmagnesiumbromid (v množství 14 mililitrů, což odpovídá 42 mmolů, roztok o koncentraci 3 M) ve 40 mililitrech suchého toluenu, přičemž tento přídavek byl prováděn opatrným způsobem po kapkách. Takto získaná směs byla potom zahřáta na teplotu 58 °C a při této teplotě byla udržována po dobu 24 hodin, přičemž potom byla tato reakční směs ochlazena a potom byla rychle přidána voda (v množství 60 mililitrů) za účelem rychlého zchlazení a 1 N roztok kyseliny chlorovodíkové (v množství 60 mililitrů), přičemž tento roztok byl potom promícháván po dobu 0,5 hodiny. Tímto způsobem byly vytvořeny vrstvy, které byly odděleny, přičemž vodná vrstva byla extrahována třikrát ethylesterem kyseliny octové. Organické fáze byly také spojeny, přičemž spojený podíl byl potom promyt solankou, potom byl sušen síranem vápenatým a potom byl tento roztok zkoncentrován. Získaný zbytek byl potom rekrystalován z ethylesteru kyseliny octové, přičemž tímto způsobem bylo získáno 6,8 gramu požadovaného produktu uvedeného v záhlaví tohoto provedení ve formě žluté pevné látky.

Výtěžek : 64 %, teplota tání : 162 až 164 ’C.

NMR 8,16	(d,	J=1,5	Hz, 1H),	8,01	(d,	J=8,5 Hz, 1H)
7,94	(dd	, J=l,	5 8,5 Hz, 1H),	7,75	(d,	J=8,5 Hz, 2H)
7,62	(d,	J=3,5	Hz, 1H),	7,23	(d,	J=8,5 Hz, 2H)
6,72	(d,	J=3,5	Hz, 1H),	3,02	(q.	J=7 Hz, 2H),
2,33	(s,	3H) ,		1,21	(t,	J=7 Hz, 3H).
Příprava 3

Postup přípravy 5-(2-brompropionyl)-l(p-toluensulfonyl)indolu.

Při provádění postupu podle tohoto provedení byl produkt připravený podle předchozí přípravy (v množství 2,0 gramy, což odpovídá 6,12 mmolu) rozpuštěn v chloroformu (v množství 60 mili

-26CZ 280560 B6 litrů) a potom byl tento roztok přidáván po kapkách k suspenzi bromidu mědnatého (v množství 2,1 gramu, což odpovídá 9,4 mmolu) v ethylesteru kyseliny octové (v množství 60 mililitrů). Takto získaná výsledná reakční směs byla potom zahřívána pod zpětným chladičem při teplotě varu po dobu přes noc. Takto získaná reakční směs byla ochlazena a potom byla zfiltrována přes celitovou vrstvu a potom byla tato reakční směs zkoncentrována. Tímto způsobem byl získán zbytek, který byl potom rekrystalován ze směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanu, přičemž tímto způsobem bylo získáno 1,70 gramu požadovaného produktu uvedeného v záhlaví tohoto příkladu ve formě hnědé pevné látky.

Výtěžek 69 %,

NMR analýza tohoto produktu ukázala, že se jedná o směs produktu a výchozího materiálu v poměru 83/17, přičemž tato směs byla použita pro adiční reakci bez dalšího čištění.

NMR záznam produktu:

8,22	(d,	J=l,5 HZ,	1H)	8,04	- 7	,91	(m, 2H),
7,77	- 7	,73 (m, 2H)	9	7,62	(d,	J=4	Hz, 1H),
7,24	- 7	,19 (m, 2H)	9	6,73	(d,	J=4	Hz, 1H),
5,31	(q,	J=6,5 HZ,	1H) ,	2,32	(s,	3H)	9
1,87	(d,	J=6,5 Hz,	3H) .

Příprava 4

Postup přípravy o-methansulfonyltropinu.

Při provádění postupu podle tohoto provedení byl tropin (v množství 14,2 gramu, což odpovídá 100 mmolům) rozpuštěn v methylenchloridu CH₂C1₂ (v množství 210 mililitrů) a potom byl přidán k této reakční směsi triethylamin (v množství 23 mililitrů, což odpovídá 160 mmolům). Potom byl k této reakční směsi přidán methansulfonylchlorid (v množství 9,3 mililitrů, což odpovídá 120 mmolům), přičemž tento přídavek byl proveden rychle po kapkách, což způsobilo, že tento methylenchloridový roztok počal mírně vřít za použití zpětného chladiče. Takto získaná reakční směs byla potom promíchávána po dobu jedné hodiny, potom byla tato směs extrahována za pomoci chladného 0,5 molárního roztoku hydroxidu sodného, potom byla provedena extrakce vodou a potom solankou, přičemž potom bylo provedeno sušení filtrací přes papír pro separaci fází a potom zkoncentrování, přičemž tímto způsobem bylo získáno 13,8 gramu požadovaného produktu uvedeného v záhlaví tohoto příkladu ve formě žluté pevné látky (výtěžek 65 %).

NMR 4,88 (t, J=5 Hz, 1H) 2,94 (s, 3H), 2,20 - 2,10 (m, 2H)

3,10 - 3,05 (m, 2H),

2,22 (s, 3H),

2,02 - 1,88 (m,6H).

Příprava 5

Postup přípravy 3-fenylthio-8-methyl-8-azabicyklo[3.2.1]oktanu.

Při provádění postupu podle této přípravy byl hydrid sodný (ve formě suspenze o koncentraci 60 % v oleji, v množství 2,77

-27CZ 280560 B6 gramu, což odpovídá 69 mmolům) promyt hexanem (celkem 3x) a potom byl tento hydrid sodný suspendován v tetrahydrofuranu (v množství 300 mililitrů). Potom byl k této směsi přidán thiofenol (v množství 6,5 mililitru, což odpovídá 63 mmolu) v tetrahydrofuranu (v množství 25 mililitrů), přičemž tento přídavek byl proveden po kapkách během intervalu 5 minut. Takto vzniklá mléčně bílá suspenze byla promíchávána po dobu 10 minut, přičemž se z ní uvolňoval vodík a potom byl k této reakční směsi přidán 0-methansulfonyltropin (v množství 13,8 gramu, což odpovídá 63 mmolu) ve 25 mililitrech tetrahydrofuranu, přičemž tento přídavek byl proveden jednorázově. Takto získaná reakční směs byla potom zahřívána pod zpětným chladičem při teplotě varu rozpouštědla po dobu přes noc, potom byla tato reakční směs ochlazena a potom byla zfiltrována přes křemelinu, přičemž promývání bylo prováděno eterem. Takto získaný filtrát byl potom zředěn ethylesterem kyseliny octové a potom bylo provedeno promytí této látky chladným 1 M roztokem hydroxidu sodného, vodou a nakonec solankou, potom byla tato látka sušena (za použití síranu vápenatého CaSO₄) a potom byla zkoncentrována. Při provádění tohoto postupu bylo získáno 11,48 gramu požadovaného produktu uvedeného v záhlaví tohoto příkladu ve formě žluté pevné látky (výtěžek 78 %).

NMR	7,50	- 7,18	(m,	5H) ,	3,32	- 3,21	(m,	1H) ,
	3,15	- 3,09	(m,	2H) ,	2,25	(s, 3H)	/
	2,02	- 1,94	(m,	2H) ,	1,79	- 1,72	(m,	4H) ,
	1,60	- 1,51	(m,	2H) ,
13c	- NMR	134,8	, 13	2,3 ,	128,8 , 126,	,9 , 61,	16	, 39,21
		37,72	, 26	,42.

Stejným způsobem jako je uvedeno shora byl 4-chlorthiofenol převeden na 3-(4-chlorfenylthio)-8-methyl-8-azabicyklo[3.2.1]-oktan.

Příprava 6

Postup přípravy 3-fenylthio-8-/2,2,2-trichlorethoxykarbonyl)-8-azabicyklo[3.2.1.]oktanu.

Při provádění postupu podle tohoto provedení byl produkt získaný postupem podle předchozího postupu (v množství 11,48 gramu, což odpovídá 49,3 mmolu) a uhličitan draselný K₂CO₃ (v množství 0,75 gramu, což odpovídá 5,4 mmolu) smíchány s benzenem (v množství 200 mililitry) a k této reakční směsi byl potom rychlým způsobem přidán 2,2,2-trichlorethylchlormravenčan (v množství 7,5 mililitru, což odpovídá 54,4 mmolu). Takto získaná reakční směs byla potom zahřívána pod zpětným chladičem při teplotě varu použitého rozpouštědla po dobu 2 hodin, přičemž potom byla tato reakční směs ochlazena, potom byla zfiltrována a nakonec zkoncentrována. Tímto způsobem byl získán oranžový olejový zbytek, který byl rozpuštěn v methylenchloridu CH₂C1₂, potom byl tento roztok promyt nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a potom solankou, přičemž potom byla tato látka sušena (za pomoci síranu vápenatého CaSO₄) a potom byla zkoncentrována. Tímto způsobem byl získán zbytek, který byl potom přečištěn postupem mžikové

-28CZ 280560 B6 chromatografie prováděné na silikagelu (přičemž jako elučního činidla bylo použito hexanu a potom směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanu o koncentraci 5 % hmot., přičemž tímto postupem byl nejdříve získán nezreagovaný thiofenol z předchozí reakce a potom požadovaná sloučenina uvedená záhlaví tohoto provedení ve formě žluté olejové látky v množství 13 gramů (výtěžek 67 %).

NMR 7,42 - 7,23 (m, 5H), 4,72 (AB q, J=12 Hz, 2H),

4,35 - 4,30 (m, 4H), 2,73 (heptet, J=6 Hz, 1H),

2,05 - 1,68 (m, 6H).

raci

Takto získaný olej byl potom převeden do hexanem.

tuhého stavu trituTeplota tání až 84,5 C

Analýza C = 48,47, vypočteno C = 48,68,

H = 4,58,

H = 4,60,

N = 3,49,

N = 3,55.

Stejným způsobem jako je uvedeno shora byl 4-chlor analog látky z předchozího postupu přípravy převeden na 3-(4-chlorfenylthio)-8-(2,2,2-trichlorethoxy-karbonyl)-8-azabicyklo[3.2.1]oktan.

Příprava 7

Postup přípravy 3-fenylthio-8-azabicyklo[3.2.1Joktanu.

Při provádění postupu podle tohoto provedení byl produkt připravený podle shora uvedené přípravy (v množství 13,0 gramů, což odpovídá 33 mmolům) rozpuštěn v kyselině octové (v množství 400 mililitrů) a potom byl přidán zinečný prach (v množství 11 gramů, což odpovídá 168 mmolům). Takto získaná reakčni směs byla zahřívána při teplotě 100 °C po dobu přes noc, přičemž potom byla tato reakčni směs zkoncentrována a získaný zbytek byl potom rozdělen mezi methylenchlorid a nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného. Takto získaná výsledná emulze byla potom přečištěna filtrací přes křemelinu. Vzniklé fáze byly potom odděleny a organická vrstva byla potom usušena průchodem přes filtrační papír pro oddělování fází a potom byla tato látka zkoncentrována, přičemž tímto způsobem bylo získáno 6,1 gramu požadovaného produktu uvedeného v záhlaví tohoto provedení ve formě žlutého oleje (výtěžek 84 %), který byl potom převeden do tuhého stavu tak, že byl tento olej ponechán stát.

NMR 7,38 - 7,36 (m, 2H), 3,52 (s, 2H),

1,94 - 1,54 (m, 8H).

7,29 - 7,20 (m, 3H),

3,36 (heptet, J=6 Hz, 1H), ¹³C - NMR 134,0

39,01

132,43

28,98.

128,83

127,06

54,93 , 40,81

Stejným způsobem jako je uvedeno shora byl 4-chlor analog látky z předchozího postupu přípravy převeden na 3-(4-chlorfenylthio)-8-azabicyklo[3.2.1]oktan.

-29CZ 280560 B6

Příprava 8

Postup přípravy 8-(2,2,2-trichlorethoxykarbonyl)-3-endohydroxy-3-exo-fenyl-8-azabicyklo[3.2.1]oktanu.

Při provádění postupu podle tohoto provedení byl 8-(2,2,2-trichlorethoxykarbonyl)-8-azabicyklo[3.2.1]oktan-3-on (v množství 5,0 gramů, což odpovídá 16,6 mmolu) rozpuštěn v eteru (v množství 450 mililitrů) a potom byl k této reakční směsí přidán fenylmagnesiumbromid (v množství 7,2 mililitru, což odpovídá 21,6 mmolu, 3 M roztok v eteru), přičemž toto přidávání bylo provedeno opatrným způsobem po kapkách během intervalu 5 minut a za míchání. Tímto způsobem se vytvořila bílá sraženina a získaná směs byla potom promíchávána po dobu 30 minut. K této reakční směsi byl potom přidán nasycený roztok chloridu amonného a takto vzniklá směs byla zkoncentrována. Tímto způsobem vzniklý zbytek byl potom vložen do methylenchloridu a potom byla provedena extrakce této látky solankou. Takto byla získána organická fáze, která byla potom sušena tak, že byla vedena přes filtrační papír na separaci fází, a potom byla tato reakční směs zkoncentrována, přičemž byl získán požadovaný produkt uvedený v záhlaví tohoto příkladu ve formě hustého žlutého oleje.

Výtěžek : 5,94 gramu, tj. 94 %.

Tato látka byla potom použita bez dalšího přečišťování pro následující reakci.

Stejným způsobem jako je uvedeno shora byl také připraven homologický 3-exo-benzylový derivát, přičemž při tomto postupu byl benzylmagnesiumbromid nahrazen fenylmagnesiumbromidem.

Příprava 9

Postup přípravy 3-endo-hydroxy-3-exo-fenyl-8-azabicyklo[3.2.1]oktanu.

Podle tohoto příkladu provedení byl produkt, který byl připraven podle shora uvedeného postupu rozpuštěn v tetrahydrofuranu (v množství 100 mililitrů) a potom byla tato reakční směs přidána ke směsi zinkového prachu (v množství 45 gramů, což odpovídá 688 mmolu) a 1M vodného roztoku dihydrogenfosforečnanu draselného (v množství 45 mililitrů). Takto získaná reakční směs byla potom promíchávána po dobu 3 dní. K tomuto reakčním roztoku byla potom přidána voda (v množství 100 mililitrů) a hodnota pH byla potom upravena na asi 10 přídavkem pevného uhličitanu sodného. Takto připravená směs byla potom zfiltrována přes celitovou vrstvu a potom byla tato látka zkoncentrována, přičemž bylo získáno 1,85 gramů požadovaného produktu uvedeného v záhlaví tohoto příkladu ve formě bílé pevné látky (výtěžek 58 %). Integrací NMR spektra pro koncový proton můstku u tohoto produktu bylo zjištěno, že se jedná o směs požadovaného produktu (δ 3,6) a jeho 3-endo fenylisomeru (δ 3,85) v poměru 92 : 8. Tato směs byla potom použita ve stavu v jakém byla získána pro provedení adiční reakce, protože separace adičních produktů byla snadná.

-30CZ 280560 B6 ¹³C-NMR (300 MHz, CDC1₃) δ:

150,42 , 128,15 , 126,57 , 124.52 , 73,33 , 54,45 , 46,62 , 29,29. Doprovodný isomer vykazoval ¹³C záznamy alifatických skupin při δ :

54,92 , 50,99 , 30,33 , 30,16.

Homologický 3-exo-benzylový derivát byl připraven podobným způsobem.

Výsledky farmakologických testů.

Popis testu na neurodegeneraci buněčné kultury provedeného in vivo je uveden v popisné části. Tento test byl proveden s některými vybranými sloučeninami podle uvedeného vynálezu.

Získané výsledky jsou uvedeny v následující tabulce.

Tabulka

Hodnoty IC5Q (μΜ) nebo % inhibice při 1 μΜ
Sloučenina podle příkladu č.	Neurodegenerace buněčné kultury
2	0,175
3	0,023
4	0,085
7	0,61
9	0,32
10	84 %
11	0,20
12	0,025
13	0,038
14	0,022
18	0,054 0,047
20	0,045
21	0,008
22	0,25
23	0,095
24	0,035
25	0,045
26	0,45
27	0,40
28	0,20
29	0,090

-31CZ 280560 B6

Claims (16)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Racemický nebo opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(1H,3H)-indolový derivát obecného vzorce I, II nebo III:

   ve kterých :

   A znamená jednu ze skupin n je 0 nebo 1 m je 0 nebo celé číslo od 1 do 6,

   Ί o

   R, R a R jsou každý nezávisle atom vodíku nebo alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

   R³ a R⁴ každý zvlášt nezávisle představují atom vodíku, nebo R³ a R⁴ společně představují ethylenovou skupinu, X představuje atom vodíku, alkoxyskupinu obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo alkoxykarbonylovou skupinu obsahující v alkoxy části 1 až 3 atomy uhlíku,

   Y představuje skupinu CH₂ nebo atom kyslíku, a

   Z a Z¹ každý nezávisle představují atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxyskupinu obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, atom fluoru, atom chloru nebo atom bromu, nebo jeho farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinami.
2. 2. Racemický nebo opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(1H,3H)-indolový derivát podle nároku 1 obecného vzorce I, ve kterém : m znamená 0 nebo 1,

   Z a Z představuji každý atom vodíku, a

   R znamena atom vodíku nebo methylovou skupinu.
3. 3. Racemický nebo opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(1H,3H)-indolový derivát podle nároku 2 obecného vzorce I, ve kterém znamená

   R² methylovou skupinu,

   -33CZ 280560 B6
4. 4. Racemický nebo opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(1H,3H)-indolový derivát podle nároku 3 obecného vzorce I, ve kterém:

   R³ a R⁴ každý zvláště nezávisle představují atom vodíku.
5. 5. Opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(1H,3H)-indolový derivát podle nároku 4 obecného vzorce I, ve kterém m znamená 0.
6. 6. Racemický nebo opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(1H,3H)-indolový derivát podle nároku 3 obecného vzorce I, ve kterém:

   R³ a R⁴ společně představují ethylenovou skupinu.
7. 7. Racemický nebo opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl-2-(1H,3H)-indolový derivát podle nároku 1 obecného vzorce II, ve kterém:

   Z znamená atom vodíku,

   Z¹ znamená atom vodíku nebo atom chloru, a

   R² znamená methylovou skupinu.
8. 8. Racemický nebo opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(1H,3H)-indolový derivát podle nároku 7 obecného vzorce II, který má relativní stereochemický vzorec:

   H ve kterém:

   R a R¹ je každý atom vodíku, a

   Y je skupina CH₂.
9. 9. Racemický nebo opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(1H,3H)-indolový derivát podle nároku 1 obecného vzorce III, ve kterém mají symboly A, n, m, R, R¹, R², R³, R⁴, X, Y, Z a Z¹ stejný význam jako bylo uvedeno v nároku 1.
10. 10.5-(l-Oxo-2-piperidinopropyl)-2-(lH, 3H)-indol obecného vzorce IV:

    nebo obecného vzorce V:

    (V) nebo obecného vzorce VI:

    (VI) ve kterých A znamená jednu ze skupin:

    n je 0 nebo 1, m je 0 nebo celé číslo od 1 do 6,

    R, R a R jsou každý nezávisle atom vodíku nebo alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

    R³ a R⁴ každý zvlášť nezávisle představují atom vodíku,

    -35CZ 280560 B6 nebo R³ a R⁴ společně představují ethylenovou skupinu,

    X představuje atom vodíku, alkoxyskupinu obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo alkoxykarbonylovou skupinu obsahující v alkoxy části 1 až 3 atomy uhlíku,

    Y představuje skupinu CH₂ nebo atom kyslíku, a

    Z a Z¹ každý nezávisle představují atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxyskupinu obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, atom fluoru, atom chloru nebo atom bromu, jako meziprodukt pro přípravu racemického nebo opticky aktivního 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(lH,3H)-indolového derivátu obecného vzorce I, II nebo III podle nároku 1.
11. 11. Farmaceutický prostředek pro léčení infarktu, traumatických poškození mozku a CNS degenerativních onemocnění, vyznačující se tím, že obsahuje racemický nebo opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(1H,3H)-indolový derivát obecného vzorce I podle nároku 1 společně s farmaceuticky přijatelnou nosičovou látkou.
12. 12. Farmaceutický prostředek pro léčení infarktu, traumatických poškození mozku a CNS degenerativních onemocnění, vyznačující se tím, že obsahuje racemický nebo opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(1H,3H)-indolový derivát obecného vzorce II podle nároku 1 společně s farmaceuticky přijatelnou nosičovou látkou.
13. 13. Farmaceutický prostředek pro léčení infarktu, traumatických poškození mozku a CNS degenerativních onemocnění, vyznačující se tím, že obsahuje racemický nebo opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(1H,3H)-indolový derivát obecného vzorce III podle nároku 1 společně s farmaceuticky přijatelnou nosičovou látkou.
14. 14. Racemický nebo opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(1H,3H)-indolový derivát obecného vzorce I podle nároku 1 pro přípravu léčiva k léčení infarktu, traumatických onemocnění mozku nebo CNS degenerativních onemocnění.
15. 15. Racemický nebo opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(1H,3H)-indolový derivát obecného vzorce II podle nároku 1 pro přípravu léčiva k léčení infarktu, traumatických onemocnění mozku nebo CNS degenerativních onemocnění.
16. 16. Racemický nebo opticky aktivní 5-(l-hydroxy-2-piperidinopropyl)-2-(lH,3H)-indolový derivát obecného vzorce III podle nároku 1 pro přípravu léčiva k léčení infarktu, traumatických onemocnění mozku nebo CNS degenerativních onemocnění.