CZ20032723A3

CZ20032723A3 - Bipiperidinylové deriváty a jejich použití jako inhibitorů chemokinových receptorů

Info

Publication number: CZ20032723A3
Application number: CZ20032723A
Authority: CZ
Inventors: Rainer Albert; Christian Bruns; François Nuninger; Markus Streiff; Gebhard Thoma; Hans-Günter Zerwes
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 2001-04-09
Filing date: 2002-04-08
Publication date: 2003-12-17
Also published as: KR20030087066A; EP1379504A1; PE20021004A1; RU2003130642A; ATE446950T1; PT1379504E; SK12422003A3; IL157428A0; HUP0303724A3; CN1501915A; HUP0303724A2; ZA200306432B; RU2296751C2; CA2439241A1; NO20034324D0; CA2439241C; KR100616039B1; US20040142920A1; DE60234167D1; NZ528712A

Description

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká piperidinových derivátů, způsobů jejich přípravy, jejich použití a farmaceutických prostředků, které je obsahují.

Podstata vynálezu

Konkrétněji předkládaný vynález poskytuje sloučeniny obecného vzorce I

kde

X je přímá vazba; -CH₂~; -CH₂-CH₂-; -CHR₉-; -C(O)-; -NH- nebo NR₉;

Ri je případně Rio a/nebo Rn-substituovaný fenyl; případně Rio a/nebo Rn-substituovaný heteroaryl; případně R_xo a/nebo Rnsubstituovaný heteroaryl-N-oxid; nebo případně Rio a/nebo Rnsubstituovaný naftyl;

R₂ má jeden z významů uvedených pro Ri; nebo případně R₁₀ a/nebo Rn- substituovaný fluorenyl; případně Ri₀- substituovaný alkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; případně Ri₀-substituovaný alkenyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; případně Rio-substituovaný cykloalkyl obsahující 3 až 6 atomů uhlíku; případně Ri₀• · · · · · · ··· ·· ·· · · substituovaný adamantyl; nebo případně Rio-substituovaný cykloalkenyl obsahující 4 až 8 atomů uhlíku;

R₃ má jeden z významů uvedených pro Ri; nebo případně Rio a/nebo Rn-substituovaný fluorenyl; Ri₀-substituovaný alkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; případně Ri₀-substituovaný alkenyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; případně Ri₀-substituovaný cykloalkyl obsahující 3 až 6 atomů uhlíku; případně R-lo^-substituovaný adamantyl; nebo případně Ri₀-substituovaný cykloalkenyl obsahující 4 až 8 atomů uhlíku;

nebo

kde A je -CH₂-, -NH-, -NR₉-, -S-, -SO-, S0₂- nebo -0-, n je 0, nebo 2 a každý aromatický kruh je případně nezávisle substituován s Ri₀;

každá ze skupin R₄ má nezávisle jeden z významů R₅; nebo je CN; OH; OR₉; F; Cl; Br; nebo I;

každá ze skupin R₅ je nezávisle Η; alkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; hydroxyalkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; alkoxyalkyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; halogenalkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; fenyl; benzyl; nebo heteroaryl;

každá ze skupin R₆ má nezávisle jeden z významů uvedených pro R₄ ;

každá ze skupin R₇ má nezávisle jeden z významů uvedených pro Rs;

Rs je H; alkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; alkenyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; alkynyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; fenyl; benzyl; CN; CH₂NH₂; CH₂NHR₉; CH₂NR₉R₉; CH₂NHC(O)R₉; CH₂NR₉C(O)R₉; CH₂NHC (0) NHR₉; CH₂NR₉C (0) NHR₉;

CH₂NR₉C (O)NRgR₉; ch₂nhc (O) or₉; ch₂nr₉c (O) or₉; ch₂nhso₂r₉;

CH₂N(SO₂R₉)₂; nebo CH₂NR₉SO₂R₉;

každá skupina R₉ je nezávisle alkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; cykloalkyl obsahující 3 až 6 atomů uhlíku; alkenyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; alkynyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; fenyl; benzyl; heteroaryl; nebo CF₃;

Rio představuje 1 až 4 substituenty nezávisle vybranými ze skupiny, která obsahuje alkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; hydroxyalkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; alkoxyalkyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; halogenalkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; cykloalkyl obsahující 3 až 6 atomů uhlíku; alkenyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; cykloalkenyl obsahující 3 až 6 atomů uhlíku; alkynyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; fenyl; heteroaryl; heteroaryl-N-oxid; F; Cl; Br; I; OH; 0R₉; CONH₂; CONHR₉; CONR₉R₉; OC(O)R₉; OC(O)NHR₉; OC(O)NR₉R₉; OSO₂R₉; COOH; COOR₉; CF₃; CHF₂; CH₂F; CN; N0₂; NH₂; NHR₉; NRgR₉; NHC(O)R₉; NR₉C(O)R₉; NHC(O)NHR₉; NHC(O)NH₂;

NR₉C (O)NHR₉; NR₉C (O) NR₉R₉; NHC(O)OR₉; NR₉C(O)OR₉; NHSO₂R₉; N(SO₂R₉)₂; NR₉SO₂R₉; SR₉; S(O)R₉; SO₂R₉; Sí(CH₃)₃ a B (OC (CH₃) ₂) ₂; Rn znamená dva sousední substituenty, které tvoří 4-7 členný nearomatický kruh, případně obsahující až dva heteroatomy nezávisle vybrané z N, 0 a S; a

Y je přímá vazba; -C(0)-; -C(O)-CH₂-; -S(O)-; -S(O₂)-; -C(S)-; -CH₂-; -C(-CH₂-CH₂)-; -CH(R₄)- nebo -C(R₅)₂-; ve volné formě nebo ve formě soli.

Kterýkoliv alkyl, alkenyl nebo alkynyl může být lineární nebo rozvětvený. Halogen je F, Cl, Br nebo I.

Heteroaryl znamená aromatický kruhový systém obsahují mono-, bi- nebo tricyklické systémy, které obsahují až 4 heteroatomy vybrané nezávisle z N, 0 a S, jako například furyl, thienyl, pyrrolyl, imidazolyl, pyrazolyl, thiazolyl, izothiazolyl, oxazolyl, izoxazolyl, oxadiazolyl, thiadiazolyl, thiazolyl, • · · triazolyl, tetrazolyl, pyridyl, pyridazinyl, pyrimidinyl, pyrazinyl, triazinyl, tetrazinyl, indolyl, benzothiofenyl, benzofuranyl, benzimidazolyl, indazolyl, benzotriazolyl, benzothiazolyl, benzoxazolyl, chinolinyl, izochinolinyl, ftalazinyl, chinoxalinyl, chinazolinyl, cinnolinyl a naftyridinyl.

Výhodný 4-7 členný nearomatický kruh, jak je představován R_nje 5 nebo 6 členný nearomatický kruh, případně obsahující 1 nebo 2 atomy kyslíku a zahrnuje například -O-CH₂-O- nebo O-CH₂-CH₂-O-, připojené ke dvěma sousedním atomům uhlíku.

Sloučeniny obecného vzorce I mohou existovat ve volné formě nebo ve formě soli, například adiční soli s například organickými nebo anorganickými kyselinami, například kyselinou chlorovodíkovou, kyselinou octovou, když Ri, R₂ a/nebo R₃obsahuje případně substituovanou aminoskupinu nebo heterocyklický zbytek, který může tvořit soli. Jestliže sloučeniny obecného vzorce I mají jedno nebo více asymetrických center v molekule, například jestliže je piperidinový kruh substituován, předkládaný vynález také zahrnuje různé optické izomery a rovněž racemáty, diastereomery a jejich směsi.

Ve sloučenině obecného vzorce I jsou výhodné následující významy, jednotlivě nebo v jakékoliv dílčí kombinaci:

1. Ri je případně Rio-substituovaný fenyl; případně Ri₀-substituovaný heteroaryl; nebo případně Rn-substituovaný fenyl;

2. R₂ je případně Ri₀-substituovaný fenyl; případně Ri₀-substituovaný heteroaryl; případně Rio-substituovaný heteroaryl-N -oxid; nebo případně Rio-substituovaný naftyl.

• · · ·

3. R₂ je případně Ri₀ ^_substituovaný fenyl; případně Ri₀-substituovaný heteroaryl; nebo případně Ri₀-substituovaný naftyl.

4. Každá ze skupin R₄, R₅, R₆ nebo R₇ je nezávisle H; alkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; nebo benzyl.

5. R₈ je H; alkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku nebo alkenyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku.

6. R₉ je alkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; cykloalkyl obsahující 3 až 6 atomů uhlíku; alkenyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; alkynyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; fenyl; benzyl; heteroaryl; nebo CF₃.

7. R₁₀ představuje 1 až 3 substituenty nezávisle vybrané ze skupiny, která obsahuje alkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; hydroxyalkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; alkoxyalkyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; halogenalkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; cykloalkyl obsahující 3 až 6 atomů uhlíku; alkenyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; cykloalkenyl obsahující 3 až 6 atomů uhlíku; alkynyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; fenyl; heteroaryl; heteroaryl-N-oxid; F; Cl; Br; I; OH; 0R₉; CONH₂; CONHR₉; CONR₉R₉; OC(O)R₉; OC(O)OR₉; OC(O)NHR₉; OC(O)NR₉R₉; OSO₂R₉; COOH; COOR_g; CF₃; CHF₂; CH₂F; CN; N0₂; NH₂; NHR₉; NR₉R₉; NHC(O)R₉; NR₉C(O)R₉; NHC(O)NHR₉; NHC(0)NH₂; NR₉C(O)NHR₉; NR₉C (O) NR₉R₉; NHC(O)OR₉; NR₉C(O)OR₉; NHSO₂R₉;

n(so₂r₉)₂; nr₉so₂r₉; sr₉; s(o)r₉; so₂r₉ a sí(ch₃)₃.

8. Rn znamená -O-CH₂-O- vázaný na dva sousední atomy uhlíku.

9. X je přímá vazba nebo -CH₂-.

10. Y je -C(O)

Ve výhodném provedení sloučenin obecného vzorce I, Rio může znamenat 1 až 3 substituenty vybrané ze skupiny, která obsahuje alkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; fenyl; heteroaryl; heteroaryl-N-oxid; F; Cl; Br; I; OH; OR₉; CONH2; CONHRg;

CONR9R9; COOH; COORg; CF₃; CHF₂; CH₂F; NH₂; NHR₉; NR₉R₉; NHC(O)R₉; nr₉c(0)r₉; nhc(O)nhr₉; nhc(O)nh₂; nr₉c(O)nhr₉; nr₉c (0)nr₉R₉; NHC(O)OR₉ a NR₉C(O)OR₉.

R₉ je výhodně alkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; cykloalkyl obsahující 3 až 6 atomů uhlíku; fenyl; benzyl; nebo heteroaryl; výhodněji alkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku.

Předkládaný vynález také zahrnuje způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce I, kde způsob zahrnuje

a) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, kde X je přímá vazba, -CH₂-, -CH₂-CH₂- nebo -CHR₉- a Y je -CO-, -C(O)CH₂-,

-S (O) - nebo -S (O₂) -, amidaci sloučeniny obecného vzorce II

kde Ri a R₃ až R₈ mají význam uvedený shora a X' je přímá vazba, -CH₂-, -CH₂-CH₂- nebo -CHRgse sloučeninou obecného vzorce III

R₂-Y'-A' III kde R₂ má význam uvedený shora, Y' je -C0-, -C(O)CH₂-, -S(0₂)a A' je odštěpující se skupina, například Cl nebo Br,

b) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, kde X je přímá vazba a Y je -CH₂-, podrobení sloučeniny obecného vzorce II,

jak je definována shora, kde X' je přímá vazba, reduktivní aminaci; nebo

c) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, kde X je -CH₂-, -CH₂-CH₂- nebo -CHRg- a Y je -CO-, -C(O)CH₂-, -S(O)- nebo -s (O₂)-, reakci sloučeniny obecného vzorce IV

kde R₂ až R₈ a Y' mají význam uvedený shora, se sloučeninou obecného vzorce V

Ri-X-Hal V kde Ri má význam uvedený shora a X'' je -CH₂-nebo -CHRg-; a je-li to žádoucí, vzniklá sloučenina obecného vzorce I ve volné formě se převede na žádanou sůl nebo naopak.

Reakční stupně a), b) nebo c) se mohou provést metodami, které jsou známé ve stavu techniky nebo jak je popsáno v příkladech dále. Jestliže R₈ zahrnuje skupinu, která se nemá zúčastnit reakce, tato skupina může být chráněna způsoby, které jsou známé ve stavu techniky.

Sloučeniny obecného vzorce II, které se používají jako výchozí materiál se mohou připravit následovně:

• · · · · · • ·

alkylace, pokud X je jiná než přímá vazba

Tl(OiPr)₄Et₂AlCN když Rg neníH

BrMgRg ¹¹ nebo reduktivní aminace kdyžRgjeH kde X' a Ri až R₈ mají význam uvedený shora a Hal je Cl, Br nebo I. Ve shora uvedených vzorcích je Boc terc-butyloxykarbonylová chránící skupina. Tato chránící skupina může být nahrazena ve shora uvedeném reakčním schématu kteroukoliv skupinou chránící aminoskupinu, například jak je popsáno v „Protective Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene, J. Wiley & Sons NY, 2. vydání, kapitola 7, 1991 a odkazech zde uvedených, jako je například benzyloxykarbonylová skupina nebo 9-fluorenylmethoxykarbonylová skupina.

Sloučeniny obecného vzorce IV, použité jako výchozí materiál se mohou připravit následovně:

• · • ·

kde R₂ až R₈ a Y mají význam definovaný shora a Bn je benzylová skupina.

Shora uvedené reakce se mohou provést podle metod známých ve stavu techniky, nebo jak je uvedeno dále.

Pokud jde o přípravu výchozích materiálů, tato příprava není konkrétně popsána, jedná se o známé sloučeniny nebo sloučeniny, které se mohou připravit podle metod známých ve stavu techniky nebo jak je popsáno dále.

Následující příklady jsou uvedeny pro ilustraci předkládaného vynálezu, přičemž tyto příklady v žádném případě neomezují rozsah vynálezu. Používají se následující zkratky:

Bn = Benzyl

Boc = terc-Butyloxykarbonyl DMF = Dimethylformamid

DMSO = Dimethylsulfoxid

BINAP = 2,2'-Bis(difenylfosfino)-1,1'-binaftyl

THF = Tetrahydrofuran

TFA = Kyselina trifluoroctová

RT = Teplota místnosti

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1 (2, 6-Dimethylfenyl)-(4-difenylamino-4'-methyl-[1,4]'bipiperidinyl-1'-yl)methanon

Směs (4'-methyl-[1,4']bipiperidinyl-4-yl)difenylaminů (0,25 g, 0,71 mmol), 2,6-dimethylbenzoové kyseliny (0,32 g, 2,13 mmol), 2-(lH-benzotriazol-l-yl)-1,1,3,3-tetramethyluroniumtetrafluorborátu (0,57 g, 1,5 mmol), EtN(i-Pr)₂ (0,6 ml) a DMF (5 ml) se míchá 16 hodin při teplotě 20 °C. Směs se zředí terc-butylmethyletherem (25 ml), promyje se 2N NaOH (25 ml) a solankou (25 ml) a suší se nad síranem sodným. Rozpouštědlo se odstraní a zbytek se čistí chromatografií (SiO₂, terc-butylmethylether/cyklohexan 1: 4-»l: 0) . Sloučenina uvedená v názvu se izoluje jako bezbarvá látka. MS/ESI 482 (M+H⁺) ; ¹H NMR (400 MHz, DMSO) δ = 0,89 (3 H, s) , 1,14 - 1,25 (3H, m) , 1,39 (1 H, m) , 1,59 (1 H, m) , 1,75 (1 H, m) , 1,83 - 1,95 (2 H, m) , 2,01 (3 H, s), 2,13 (3 H, s), 2,11 - 2,24 (2 H, m), 2,85 (2 H, m), 2,95 (1 H, m), 3,01 (1 H, m) , 3,35 (1 H, m) , 3,70 - 3, 83 (2 H, m) , 6,77 (4 H, m) , 6, 92 - 7,05 (4 H, m) , 7,12 (1 H, m) , 7,26 (4 H, m) .

• · · · (4'-Methyl-[1,4']bipiperidinyl-4-yl)difenylamin, použitý jako výchozí materiál, se může připravit následovně:

a) Směs fenylpiperidin-4-ylaminu (4,14 g; 15,0 mmol), jodbenzenu (3,06 g; 15,0 mmol), Pd(OAc)₂ (0,14 g; 0,63 mmol), BINAP (0,43 g; 0,69 mmol), terc-BuOK (17,5 ml 1M roztoku v THF) v toluenu (20 ml) se zahřívá 5 hodin při teplotě 110 °C. Směs se zředí ethylacetátem, extrahuje se hydrogenuhličitanem sodným a solankou a suší se nad síranem sodným. Rozpouštědlo se odstraní a zbytek se podrobí chromatografií (SiO₂, terc-butylmethylether/cyklohexan 1:9->1:1). terc-Butylester 4-difenylaminopiperidin-l-karboxylové kyseliny se izoluje jako žlutá pevná látka. MS/ESI 353 (M+H⁺) .

b) Směs TFA (5 ml), methylenchloridu (5 ml), vody (0,25 ml) a terc-butylesteru 4-difenylaminopiperidin-l-karboxylové kyseliny (1,5 g; 4,2 mmol) se míchá 2 hodiny při teplotě 20 °C. Přidá se hydroxid sodný (4N) a směs se extrahuje ethylacetátem. Organická fáze se suší nad síranem sodným a rozpouštědlo se odstraní. Difenylpiperidin-4-ylamin se izoluje jako bezbarvý olej. MS/ESI 253 (M+H)⁺.

c) Suspenze difenylpiperidin-4-ylaminu (1,26 g, 5,00 mmol),

1-(terc-butyloxykarbonyl)-4-piperidonu (1,00 g, 5,00 mmol) a izopropoxidu titaničitého (1,42 g, 5,00 mmol) v 1,2-dichlorethanu (25 ml) se míchá 1 hodinu při teplotě 80 °C a poté 16 hodin při teplotě 20 °C. Přidá se diethylaluminiumkyanid (10 ml 1M roztok v toluenu) a směs se míchá dalších 24 hodin. Rozpouštědlo se odstraní a surový materiál se rozpustí v tetrahydrofuranu (25 ml). Po kapkách se přidá methylmagnesiumbromid (8,7 ml 3M roztok v etheru) a směs se míchá 3 hodiny při teplotě 20 °C. Přidá se chlorid amonný (10 % roztok, 50 ml) a ethylacetát (50 ml), organická fáze se promyje chloridem amonným (10 % roztok, 50 ml) a hydrogen-

uhličitanem sodným (10 % roztok, 50 ml), suší se nad síranem sodným a rozpouštědlo se odstraní. Zbytek se podrobí chromatografii (SiO₂, ethylacetát/cyklohexan 1:9-1:1). Izoluje se terč -butylester 4-difenylamino-4'-methyl-[1,4']bipiperidinyl-1'-karboxylové kyseliny jako bezbarvá pevná látka. MS/ESI 450 (M+H) ⁺ .

d) Směs trifluoroctové kyseliny (2 ml) a vody (0,1 ml) se přidá po kapkách k roztoku výše uvedené sloučeniny a) (0,81 g, 1,80 mmol) v methylenchloridu (5 ml) a směs se míchá 3 hodiny při teplotě 20 °C. Přidá se hydrogenuhličitan sodný (10 % roztok, 10 ml) a ethylacetát (20 ml) a organická fáze se suší nad síranem sodným. Rozpouštědlo se odstraní a zbytek se podrobí chromatografií (RP-18, methanoi/H₂0 1:3-1:1). Sloučenina uvedená v názvu se izoluje jako bezbarvý olej.

MS/ESI	350	(M+H)⁺; ¹	H NMR	(400 MHz,	CDCI3) δ	= 0,88	(3 H, s),
1,35 (4	H,	m) , 1,60	(4 H,	m) , 1,93	(2 H, m),	2, 15	(2 H, m),
2,58 (2	H,	m) , 2,87	(2 H,	m) , 2,96	(2 H, m),	3,76	(1 H, m) ,
6,78 (4	H,	m) , 6,94	(2 H,	m) , 7,22	(4 H, m) .

Postupem popsaným v příkladu 1 a za použití (4'-methyl-[1,4'] bipiperidinyl-4-yl)difenylaminu jako výchozího materiálu se mohou připravit sloučeniny obecného vzorce Xi

kde R₂ má význam jako je uvedeno v tabulce 1.

• · · ·

Tabulka 1

Příklad	r₂	MS/ESI (M+Hf
2	Λ/“’ Η,Ο-θ	483
3	λλ	499
4	b	460
5	b	454
6	b	470
7		522
8		468
9	•x/”·	484
10	^N“A	560
11	<z* ΗΛ-θ	514
12	>Γ· j·	561
13	y	488

• · · ·

14	·\ 7^α -Q	523
15	'W	504
16		500
17		506
18	X .c ^α—C V 0'	539
19	ď	498
20		525
21	Vz“ Q OH	488
22	w	506
23	iP	505
24	oPP	581
25	0—	535
26	řP	505

27		506
28	tP 0*	521
29	w	505
30		505
31	PP	518
32	X-	577
33	X	511
34		493
35	X	493
36	O v#	530
37	ύ	528
38		548

• · ·· ····

• · · ·· ··

39		547
40		519

Příklad 41 [4'-Methyl-1'-(2,4,6-trimethylbenzensulfonyl) -[1,4']bipiperidinyl-4-yl]difenylamin

Směs (4'-methyl-[1,4']bipiperidinyl-4-yl)difenylaminu (70 mg, 0,20 mmol) a 2, 4,6-trimethylbenzensulfonylchloridu (65 mg,

0,30 mmol) a diizopropylethylaminu (0,50 ml) v methylenchloridu (3 ml) se míchá 4 hodiny při teplotě místnosti. Směs se zředí ethylacetátem, extrahuje hydrogenuhličitanem sodným (10 % roztok) a suší se nad síranem sodným. Rozpouštědlo se odstraní a zbytek se podrobí chromatografií (SiO₂/ terc-butylmethylether/cyklohexan 1:9-+1:0). Sloučenina uvedená v názvu se izoluje jako bezbarvá pevná látka. MS/ESI 532 (M+H)⁺.

Příklad 42 [1'-(2, 6-Dimethylbenzyl)-4'-methyl-[1,4']bipiperidinyl-4-yl]difenylamin

····

Směs (4'-methyl-[1,4']bipiperidinyl-4-yl)difenylaminu (70 mg, 0,20 mmol) a 2,6-dimethylbenzaldehydu (34 mg, 0,25 mmol) a Na(OAc)₃BH (53 mg, 0,25 mmol) v 1,2-dichlorethanu (10 ml) se míchá 16 hodin při teplotě místnosti. Směs se zředí ethylacetátem, extrahuje se hydrogenuhličitanem sodným (10 % roztok) a suší se nad síranem sodným. Rozpouštědlo se odstraní a zbytek se podrobí chromatografií (SiO₂, terc-butylmethylether/methanol 1:0-+10:1). Sloučenina uvedená v názvu se izoluje jako bezbarvá pevná látka. MS/ESI 468 (M+H)⁺.

Příklad 43 (2,6-Dimethylfenyl)-(4-difenylamino-[1,4']bipiperidinyl-1'-yl)methanon

Směs soli TFA [1,4']bipiperidinyl-4-yldifenylaminu (77 mg,

0,23 mmol), 2,6-dimethylbenzoové kyseliny (100 mg, 0,67 mmol), 2-(lH-benzotriazol-l-yl)-1,1,3,3-tetramethyluroniumtetrafluorborátu (254 mg, 0,67 mmol), EtN(i-Pr)₂ (2 ml) a DMF (3 ml) se míchá 5 hodin při teplotě místnosti. Směs se zředí terc-butylmethyletherem (10 ml), promyje se 2N NaOH a solankou a suší se nad síranem sodným. Rozpouštědlo se odstraní a zbytek se čistí chromatografií (SiO₂, terc-butylmethylether/cyklohexan 1: l-»ethylacetát->ethylacetát/H₂O 98:2). Sloučenina uvedená v názvu se izoluje jako bezbarvá pevná látka. MS/ESI 468 (M+H)⁺.

[1,4']Bipiperidinyl-4-yldifenylamin, použitý jako výchozí materiály, se může připravit následovně:

a) Směs difenylpiperidin-4-ylaminu (1,06 g; 4,2 mmol), tercbutylesteru 4-oxopiperidin-l-karboxylové kyseliny (1,0 g; 5,0 » · · ··· ···· * · · ····· · · · · mmol), AcOH (0,62 g; 10,3 mmol) a NaíOAcHBH (1,0 g; 4,7 mmol) v 1,2-dichlorethanu (15 ml) se míchá 4 hodiny při teplotě 65 °C. Směs se zředí terc-butylmethyletherem, extrahuje se IN NaOH a suší se nad síranem sodným. Rozpouštědlo se odstraní a zbytek se podrobí chromatografíí (SiO₂, terc-butylmethylether/cyklohexan 1:9->1:O). Izoluje se terc-butylester 4-difenylamino-[1,4']bipiperidinyl-1'-karboxylové kyseliny jako bezbarvá pevná látka. MS/ESI 436 (M+H)⁺.

b) Směs terc-butylesteru 4-difenylamino-[1,4']bipiperidinyl-1'-karboxylové kyseliny (1,06 g; 2,4 mmol), TFA (2,5 ml), H₂O (0,25 ml) a methylenchloridu (5 ml) se míchá 4 hodiny při teplotě místnosti. Směs se po kapkách přidá k etheru a vytvořená sraženina se odfiltruje. Sůl TFA [1,4']bipiperidinyl-4-yldifenylaminu se izoluje jako bezbarvá pevná látka. MS/ESI 336 (M+H)⁺.

Postupem popsaným ve výše uvedeném příkladu 2 a za použití [1,4 ' ]bipiperidinyl-4-yldifenylaminu jako výchozích materiálů se mohou připravit sloučeniny obecného vzorce X₂

kde R₂ má jeden z významů uvedených v tabulce 2.

Tabulka 2

Příklad	r₂	MS/ES1
44	5=7’	469
45		485
46		470
47	a ^a V/	509
48	•vz· •‘“V/⁰’	486
49	^H \ o	547
50	^O-	525

Příklad 51 {4-[(4-Bromfenyl)fenylamino]-4'-methyl-[1,4']bipiperidinyl-1'-yl.} - (2, 6-dimethylfenyl)methanon

Směs [4-(4-bromf enylamino)-4'-methyl-[1,4']bipiperidinyl-l'-yl]-(2,6-dimethylfenyl)methanonu (97 mg; 0,2 0 mmol), jodbenzenu (41 mg; 0,20 mmol), Pd(OAc)₂ (1,9 mg; 0, 008 mmol), BINAP (5,7 mg; 0,009 mmol) a terc-BuOK (0,23 ml 1 M roztoku v THF) v toluenu (3 ml) se zahřívá 16 hodin při teplotě 110 °C.

Směs se zředí ethylacetátem a filtruje se. Výsledný roztok se extrahuje 2N NaOH a solankou a suší se nad síranem sodným. Rozpouštědlo se odstraní a zbytek se podrobí chromatografií (nejprve SiO₂, terc-butylmethylether/cyklohexan 1:4-.1:0 a následně RP-18, methanol/H₂0 7:3). Sloučenina uvedená v názvu se izoluje jako bezbarvá pevná látka. MS/ESI 560 (M+H)⁺.

[4-(4-Bromfenylamino)-4'-methyl-[1,4]bipiperidinyl-1'-yl]-2,6-dimethylfenyl)methanon, použitý jako výchozí materiál, se může připravit následovně:

a) 8-(l-Benzyl-4-methylpiperidin-4-yl)-1,4-dioxa-8-azaspiro[4,5]děkan se připraví z 1,4-dioxa-8-azaspiro[4,5]děkanu a l-benzylpiperidin-4-onu podle postupu popsaného v příkladě lc). MS/ESI 331 (M+H)⁺.

b) Směs 8-(l-benzyl-4-methylpiperidin-4-yl)-l,4-dioxa-8-azaspiro[4,5]děkanu (2,0 g, 6,1 mmol) a Pd(OH)₂ (20%) na aktivním uhlí (1 g) v methanolu (30 ml) se hydrogenuje 16 hodin při teplotě místnosti. Katalyzátor se odfiltruje a rozpouštědlo se odstraní. Surový 8-(4-methylpiperidin-4-yl)-1,4-dioxa-8-azaspiro[4,5]děkan se izoluje jako žlutý olej. MS/ESI 241 (M+H)⁺.

c) (2,6-Dimethylfenyl)-[4-(1,4-dioxa-8-azaspiro[4,5]dec-8-yl)-4-methylpiperidin-l-yl]methanon se získá ze surového 8-(4-methylpiperidin-4-yl)-1,4-dioxa-8-azaspiro[4,5]děkanu a 2,6-dimethylbenzoové kyseliny podle postupu popsaného v příkladě 1. MS/ESI 373 (M+H).

d) Roztok (2, 6-dimethylfenyl)-[4-(1,4-dioxa-8-azaspiro[4,5]dec-8-yl)-4-methylpiperidin-l-yl]methanonu (915 mg; 2,46 mmol) v dioxanu (30 ml) a HCI (6N; 30 ml) se míchá 4 hodiny při teplotě 50 °C. Směs se zředí ethylacetátem (50 ml), extrahuje se 2N NaOH a solankou a suší se nad síranem sodným. Odstra-

něním rozpouštědla se získá 1'-(2,6-dimethylbenzoyl)-4'-methyl- [1,4'-]bipiperidinyl-4-on jako bezbarvý olej. MS/ESI 329 (M+H) ⁺ .

e) Směs 1'-(2, 6-dimethylbenzoyl)-4'-methyl-[1,4']bipiperidinyl-4-onu (49,3 mg; 0,15 mmol), 4-bromfenylaminu (29 mg, 0,165 mmol), kyseliny octové (18 mg; 0,30 mmol) a,NaBH(OAc)3 (35 mg; 0,165 mmol) v (CH₂C1)₂ (4 ml) se míchá 16 hodin při teplotě místnosti. Směs se zředí ethylacetátem, extrahuje se 2N NaOH a solankou a suší se nad síranem sodným. Rozpouštědlo se odstraní a zbytek se podrobí chromatografii (RP-18, methanol/H₂0 8:2-1:0). [4-(4-Bromfenylamino)-4'-methyl-[1,4]bipiperidinyl-1'-yl]-2,6-dimethylfenyl)methanon se izoluje jako bezbarvá pevná látka. MS/ESI 484 (M+H)⁺.

Příklad 52 {4-[Benzyl-(4-bromfenyl)amino]-4'-methyl-[1,4']bipiperidinyl-1'-yl}-(2,6-dimethylfenyl)methanon

Směs {4-[(4-bromfenyl)fenylamino]-4'-methyl-[1,4']bipiperidinyl-1'yl}-(2,6-dimethylfenyl)methanonu (97 mg; 0,20 mmol), brommethylbenzenu (376 mg, 2,2 mmol) a K₂CO₃ (138 mg; 1,0 mmol) v DMF (3 ml) se míchá 16 hodin při teplotě 100 °C. Směs se zředí ethylacetátem, extrahuje se 2N NaOH a solankou a suší se nad síranem sodným. Rozpouštědlo se odstraní a zbytek se podrobí chromatografii (nejprve SiO₂, terc-butylmethylester a následně RP-18, methanol/H₂0 8:2). Sloučenina uvedená v názvu se izoluje jako bezbarvá pevná látka. MS/ESI 574 (M+H)⁺.

Příklad 53

[4-(Benzylfenylamino)-4'-methyl-[1,4']bipiperidinyl-1'-yl]- (2,6-dimethy1fenyljmethanon

Připraví se z (2,6-dimethylfenyl)-(4'-methyl-4-fenylamino-[1,4']bipiperidinyl-1'-yl)methanonu a benzylbromidu podle postupu popsaného v příkladě 52. MS/ESI 496 (M+H) ⁺ . Výchozí materiál se může připravit z 1'-(2,6-dimethylbenzoyl)-4'-methyl- [1, 4 ' ]bipiperidinyl-4-onu podle podobného postupu k tomu, který je popsán v příkladě 51 e). MS/ESI 406 (M+H)⁺.

Podle postupu popsaného ve výše uvedeném příkladě 53 a za použití vhodných výchozích materiálů se mohou připravit sloučeniny obecného vzorce X₃

*3 kde -X-Ri má význam, který je uveden níže v tabulce 3.

Tabulka 3

Příklad	-X-R,	MS/ESI (M+H)⁺
54	V	517
55		497

Příklad 56 (2,4-Dimethylpyridin-3-yl) - {4'-methyl-4- [fenyl- (4-trifluormethylf enyl) amino]-[1,4']bipiperidinyl-1'-yl}methanon

Připraví se z terc-butylesteru 4-(4-trifluormethylfenylamino)piperidin-l-karboxylové kyseliny za použití postupu popsaného v příkladě 1. MS/ESI 551 (M+H)⁺. Výchozí materiál se připraví z 4-trifluormethylfenylaminu a terc-butylesteru 4-oxopiperidin-l-karboxylové kyseliny podle postupu popsaného v příkladě 51 e). MS/ESI 345 (M+H)⁺.

Příklad 57 [4-(Bifenyl-4-ylfenylamino)-4'-methyl-[1,4']bipiperidinyl-1'-yl]-(2,β-dimethylfenyl)methanon

Připraví se z terc-butylesteru 4-fenylaminopiperidin-l-karboxylové kyseliny a 4-brombifenylu za použití postupu popsaného v příkladě 1. MS/ESI 558 (M+H)⁺.

Příklad 58 {4-[(4-Bromfenyl)fenylamino]-[1,4']bipiperidinyl-1'-yl}-(4,6-dimethylpyrimidin-5-yl)methanon

Br.

Připraví se z [1,4']bipiperidinyl-4-yl-(4-bromfenyl)fenylaminu a 4,6-dimethylpyrimidin-5-karboxylové kyseliny podle postupu popsaného v příkladě 1. MS/ESI 548 (M+H)⁺.

[1,4']Bipiperidinyl-4-yl-(4-bromfenyl)fenylamin, použitý jako výchozí materiály, se připraví následovně:

a) terc-Butylester 4-(4-bromfenylamino)piperidin-l-karboxylové kyseliny se připraví z 4-bromfenylaminu a terc-butylesteru 4-oxopiperidin-l-karboxylové kyseliny podle postupu popsaného v příkladě 51 e). MS/ESI 355 (M+H)⁺.

b) terc-Butylester 4-[ (4-bromfenyl)fenylamino]piperidin-l-karboxylové kyseliny se připraví z terc-butylesteru 4-(4-bromfenylamino)piperidin-l-karboxylové kyseliny a jodbenzenu podle postupu popsaného v příkladě 51. MS/ESI 431 (M+H)⁺.

c) (4-Bromfenyl)fenylpiperidin-4-ylamin se připraví z terc-butylesteru 4-[(4-bromfenyl)fenylamino]piperidin-l-karboxylové kyseliny podle postupu popsaného v příkladě lb). MS/ESI 331 (M+H)⁺.

d) terc-Butylester 4-[(4-bromfenyl)fenylamino]-[1,4']bipiperidinyl-1'-karboxylové kyseliny se připraví z (4-bromfenyl)fenylpiperidin-4-ylaminu a terc-butylesteru 4-oxopiperidin-l-karboxylové kyseliny podle postupu popsaného v příkladě 43a). MS/ESI 514 (M+H) ⁺ .

e) [1,4']Bipiperidinyl-4-yl-(4-bromfenyl)fenylamin se připraví z terc-butylesteru 4-[(4-bromfenyl)fenylamino]-[1,4']bipiperidinyl-1'-karboxylové kyseliny podle postupu popsaného v příkladě lb). MS/ESI 414 (M+H)⁺.

Za použití postupu popsaného výše a za použití odpovídajících výchozích materiálů se mohou připravit sloučeniny obecného vzorce X₄

kde R₂ má význam uvedený v tabulce 4 dále.

Tabulka 4

Příklad	r₂	MS/ESI (M+H)⁺
59	V*· ^h,c~O	546
60	.'ť P	587
61	0	• 603
62		563
63		564
64		548
65	o	625
66	^H,c v/ o 0	641

• · · · • · • · ·

Příklad 67 (2, 6-Dimethylfenyl) -[4-(fenylpyridin-3-ylamino)-[1,4']bipi-

Připraví se z terc-butylesteru 4-fenylaminopiperidin-l-karboxylové kyseliny a 3-brompyridinu za použití postupu popsaného v příkladě 58 a 58b) až e). MS/ESI 469 (M+H)⁺.

Podle výše popsaného postupu se mohou připravit sloučeniny obecného vzorce X₅

kde R₂ je definováno níže v tabulce 5.

Tabulka 5

Příklad	r₂	MS/ESI (M+H)⁺
68	λλ	471
69	/^a	510
70	/^a 0	526
71	V·	486
72	ΛΛ	487

Příklad 73 (4, 6-Dimethylpyrimidin-5-yl) - [ 4 ' -methyl-4- (fenylpyridin-3-ylamino)—[1,4']bipiperidinyl-1'-yl]methanem

Připraví se z fenylpiperidin-4-ylpyridin-3-ylaminu a terc-butylesteru 4-fenylaminopiperidin-l-karboxylové kyseliny za použití postupu popsaného v příkladě 1, lc) a ld). MS/ESI 485 (M+H)⁺.

Podle postupu popsaného v příkladě 73 se mohou připravit sloučeniny obecného vzorce Χε

kde R₂ má význam označený v tabulce 6.

Tabulka 6

Příklad	r₂	MS/ESI (M+H)⁺
74	^H’^C~O^Í°*	500
75	/^a	540
76	-b	483

Příklad 77 {4—[(4-Bromfenyl)fenylamino]-4'-methyl-[1,4'] bipiperidinyl-1'yl}-(4,6-dimethylpyrimidin-5-yl)methanon

Br

Připraví se z (4-bromfenyl)fenylpiperidin-4-ylaminu a terc-butylesteru 4-fenylaminopiperidin-l-karboxylové kyseliny za použití postupu popsaného v příkladě 1, lc) a ld). MS/ESI 562 (M+H) ⁺ .

Příklad 78 {4-[4-Bromfenyl)fenylamino]-4'-methyl-[1,4']bipiperidinyl-1'yl}-(2,4-dimethyl-l-oxypyridin-3-yl)methanon

Připraví se z (4-bromfenyl)fenylpiperidin-4-ylaminu a tercbutylesteru 4-fenylaminopiperidin-l-karboxylové kyseliny za použití postupu popsaného v příkladě 1, lc) a ld). MS/ESI 577 (M+H)⁺.

Příklad 79 [4- (Benzo[1,3]dioxol-5-ylbenzylamino)-4'-methyl-[1,4'[bipiperidinyl-1 '-yl]-(2,β-dimethylfenyl)methanon

o.

Připraví se z 1'-(2,6-dimethylbenzoyl)-4’-methyl-[1,4']bipiperidinyl-4-onu a benzo[1,3]dioxol-5-ylaminu podle postupu popsaného v příkladech 51 a 52. MS/ESI 540 (M+H)⁺.

Příklad 80 {4-[1,3-Benzodioxol-5-yl-(2-methylthiazol-4-ylmethyl)amino]4 ' -methyl-1,4'-bipiperidinyl-1'-yl}-(2,6-dimethylfenyl)methanon

Připraví se z 1'-(2,6-dimethylbenzoyl)-4'-methyl-[1,4']bipiperidinyl-4-onu a benzo[1, 3]dioxol-5-ylaminu podle postupu popsaného v příkladech 51 a 52. MS (ESI) 561 (M+H)⁺.

Příklad 81 {4 - [(4-Bromfenyl)pyridin-3-ylamino]-4'-methyl-[1,4']bipiperidinyl-1 '-yl}-(2,4-dimethyl-l-oxypyridin-3-yl)methanon

Br

Připraví se z terc-butylesteru 4-(pyridin-3-ylamino)piperidin-1-karboxylové kyseliny a 1,4-dibrombenzenu podle postupu popsaného v příkladě 1. MS/ESI 578 (M+H)⁺.

• ·

Příklad 82 [4-(Benzylfenylamino)-4'-methyl-[1,4']bipiperidinyl-1'-yl]-(2,4-dimethyl-l-oxypyridin-3-yl)methanon

Připraví se z fenylpiperidin-4-ylaminu podle postupu popsaného v příkladech 52 a 1. MS/ESI 513 (M+H)⁺.

Příklad 83 (2,4-Dimethyl-l-oxypyridin-3-yl)-{4'-methyl-4-[(2-methylthiazol-4-ylmethyl)fenylamino]-[1,4']bipiperidinyl-1'-yl}methanon

Připraví se z (4'-methyl-[1,4']bipiperidinyl-4-yl)-(2-methylthiazol-4-ylmethyl)fenylaminu za použití postupu popsaného v příkladě 1. MS/ESI 534 (M+H).

(4'-Methyl-[1,4']bipiperidinyl-4-yl)-(2-methylthiazol-4-ylmethyl)fenylamin, použitý jako výchozí materiál, se získá následovně: směs terc-butylesteru 4-(benzylfenylamino)-4'-methyl- [1, 4' Jbipiper idinyl- 1 '-karboxylové kyseliny (1,0 g, 2,16 mmol), formiátu amonného (0,5 g, 7,92 mmol) a Pd(OH)₂ (20%) na aktivním uhlí (0,25 g) v methanolu (25 ml) se zahřívá při zpětném toku 3 hodiny. Katalyzátor se odfiltruje a promyje

methanolem. Rozpouštědlo se odstraní a zbytek se rozpustí v ethylacetátu. Organický roztok se extrahuje IN NaOH a solankou a suší se nad síranem sodným. Odstraněním rozpouštědla se získá surový terc-butylester 4'-methyl-4-fenylamino-[1,4']bipiperidinyl-1'-karboxylové kyseliny, který se použije v dalším kroku bez dalšího čištění. MS/ESI 374 (M+H).

terc-butylester 4'-methyl-4-fenylamino-[1,4']bipiperidinyl-1'-karboxylové kyseliny se převede na (4'-methyl-[1,4']bipiperidinyl-4-yl)-(2-methylthiazol-4-ylmethyl)fenylamin za použití postupu popsaného v příkladech 52 a ld).

Sloučeniny obecného vzorce I ve volné formě nebo ve formě farmaceuticky přijatelné soli vykazují cenné farmakologické vlastnosti, například jako antagonisty CCR5, například jak bylo indikováno in vitro testy a jsou proto určené pro terapii.

a) Zkouška vazby membránového CCR5

Ke generování stabilních transfektantů v CHO K1 buňkách se použije lidský CCR5. Membrány, připravené z těchto CCR5 transfektantů se použijí v radioligandové vazebné zkoušce, za použití 125-1 ΜΙΡ-Ια jako ligandu a sloučeniny obecného vzorce I jsou testovány na inhibiční aktivitu. Data se uvádějí jako IC₅oz tj. koncentrace sloučeniny požadovaná k dosažení 50% inhibice vazby [Ι-125]ΜΙΡ-1α. V této zkoušce sloučeniny obecného vzorce I mají IC50 <1 μΜ. Sloučeniny příkladů 16, 53 a 83 mají IC₅o 2 až 3 nM.

b) Funkční zkouška CCR5 - mobilizace Ca²⁺

Ke generování stabilních transfektantů v CHO K1 buňkách se použije lidský CCR5. Tyto CCR5 transfektanty se použijí ke

zjišťování mobilizace Ca²⁺ jako odezva na stimulaci CCR5 ligandami ΜΙΡ-1α, ΜΙΡ-Ιβ, HCC-1 (9-74) nebo RANTES. Při provedení zkoušky se buňky naplní s fluorochromem citlivým na Ca⁺² (Fluo3 nebo Fluo4) . K indukování mobilizace Ca⁺², která se sleduje s fluorometrem s příslušným nastavením se použijí koncentrace ligandu mezi 0,01 - 100 nM.

Při hodnocení aktivity sloučenin, které se testují, se provede odečtení základní linie, načež se přidají k buňkám sloučeniny v žádané koncentraci a fluorescence se zaznamenává po určitou dobu ke zjištění, zda sloučeniny vykazují agonistické účinky. Poté se přidá ke směsi agonista a sleduje se fluorescence. Inhibice toku Ca²⁺ v přítomnosti sloučenin, které se mají testovat se vypočte z inhibice maximální fluorescence indukované agonistou. Hodnoty IC₅₀ se vypočítají z křivek dávka-odezva získaných se sloučeninami. V této zkoušce mají sloučeniny obecného vzorce I hodnotu IC₅₀ < 1 μΜ. Například sloučeniny příkladů 1, 18 a 52 mají hodnotu IC50 10, 9 a 4.

c) Funkční zkouška CCR5 - chemotaxe

CCR5 transfektanty se generují v Jurkatových T buňkách nebo myší pre B buněčné linii LI.2. Migrace transfektantů CCR5 se testuje v systému s vložkami pro tkáňové kultury (Transwell) s CCR5 agonistem ΜΙΡ-Ια při koncentracích 1 - 100 nM. Buňky, které migrují jako odezva na agonistu se porovnají s pufrovou kontrolou a kvantifikují se v průtokovém cytometru.

Sloučeniny, které se mají testovat se přidají k buňkám a do agonistových oddělení. Hodnoty IC50 se vypočtou z křivek koncentrace - odezva získaných se sloučeninami v přítomnosti ΜΙΡ-Ια. Při této zkoušce měly sloučeniny obecného vzorce I IC₅₀< 1 μΜ.

d) Experimenty provedené na myších modelech ukázaly, že obnova cévní stěny po experimentálním poranění (například indukované allotransplantací) je do značné míry inhibována při absenci funkčního CCR5.

Sloučeniny obecného vzorce I jsou proto užitečné při prevenci a/nebo léčbě nemocí nebo chorob zprostředkovaných interakcí mezi chemokinovými receptory, například CCR5 a jejich ligandami, například v transplantaci, jako je akutní nebo chronické odmítnutí orgánu, tkáňových nebo buněčných allonebo xenoimplantátů nebo zpožděná funkce implantátu, autoimunních nemocí, například revmatické artritidy, systémového lupus erythematodes, Hashimotovy tyreohydy, násobné sklerózy, myasthenie gravis, diabetů typu I a II a chorob s nimi spojených, vaskulitidy, perniciózní anemie, Sjoegrenova syndromu, uveitidy, psoriázy, alopecia areata a další, alergických nemocí, například alergického astma, atopické dermatitidy, alergické rinitidy/konjuktivitidy, alergické kontaktní dermatitidy, zánětlivých nemocí případně se závažnými aberantními reakcemi, jako je například zánětlivá nemoc střeva, Crohnova choroba nebo ulcerativní kolitida, vnitřní astma, zánětlivé poranění plic, zánětlivé poranění jater, zánětlivé glomerulární poranění, ateroskleróza, osteoartritida, dráždivá kontaktní dermatitida a další ekzematózní dermatitidy, seboroická dermatitida, kožní projevy imunologicky zprostředkované choroby, zánětlivá nemoc očí, keratokonjuktivitida, myokarditida nebo hepatitida, ischemických/reperfuzních poranění, například infarktu myokardu, mrtvice, střevní ischémie, renálního selhání nebo hemoragického šoku, traumatického šoku a další, rakoviny, například pevných nádorů nebo lymfatické rakoviny, jako je lymfomatóza T buněk nebo leukémie T buněk, tvorba metastází nebo angiogenéze, infekčních nemocí, například toxického šoku (například indukovaná superantigenem), septického šoku, ·· ···· · ·· ·· ···· ·· · ···· * · · ··· ·»»··· » · · · ······ · • · · ··· · · · · ·· · ····· · · ·· respiračního stresu dospělých nebo virových nemocí, například AIDS. Transplantací se míní alo- nebo xenoimplantáty, například buňky, tkáně nebo pevné orgány, například pankreatické ostrůvky, kmenové buňky, kostní dřeň, korneální tkáň, nervová tkáň, srdce, plíce, kombinace srdce-plíce, ledvina, játra, střevo, průdušnice nebo jícen. Chronické odmítnutí se také nazývá choroba cévního štěpu („graft vessel disease).

Pro shora uvedené použití se budou požadované dávky lišit v závislosti na způsobu podání, konkrétním stavu, který se má léčit a požadovaném účinku. Obecně, uspokojivých výsledků se dosáhne při systematických denních dávkách od okolo 0,01 do 10 mg/kg tělesné hmotnosti. Indikovaná denní dávka u většího savce, například člověka je v rozsahu od okolo 0,5 mg do okolo 1000 mg, obvykle podávaná například až ve čtyřech dávkách nebo v retardované formě, λ/hodné jednotkové dávkové formy pro orální podání obsahují od cca 1 do 500 mg aktivní složky.

Sloučeniny obecného vzorce I mohou být podávány jakoukoliv konvenční cestou, zejména enterálně, například orálně, například ve formě tablet nebo kapslí nebo parenterálně, například ve formě injektovatelných roztoků nebo suspenzí, topicky, například ve formě lotionů, gelů, mastí nebo krémů nebo nasálně nebo ve formě čípků. Farmaceutické prostředky obsahující sloučeninu obecného vzorce I ve volné formě nebo ve formě farmaceuticky přijatelné soli ve spojení s alespoň jedním farmaceuticky přijatelným nosičem nebo ředidlem se mohou vyrábět konvenčním způsobem smísením s farmaceuticky přijatelným nosičem nebo ředidlem.

Sloučeniny obecného vzorce I mohou být podávány ve volné formě nebo ve formě farmaceuticky přijatelné soli, například jak je indikováno shora.Takové soli se mohou připravit obvyklým • · způsobem a vykazují stejný charakter aktivity jako volné sloučeniny.

V souladu se shora uvedeným, předkládaný vynález dále poskytuje:

1.1. Způsob prevence nebo léčby chorob zprostředkovaných interakcemi mezi chemokinovými receptory a jejich ligandami, například jak je uvedeno shora v subjektu v případě potřeby takové léčby, který spočívá v podání uvedenému pacientovi účinného množství sloučeniny obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelné soli;

1.2 Způsob prevence nebo léčby akutního nebo chronického odmítnutí implantátu nebo zánětlivých autoimunních nemocí, například jak je indikováno shora u subjektu v případě potřeby takové léčby, kde tento způsob spočívá v podání uvedenému subjektu účinného množství sloučeniny obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelné soli;

2. Sloučeninu obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl pro použití jako léčivo, například při kterékoli metodě jak je indikováno pod 1.1 nebo 1.2 shora.

3. Farmaceutický prostředek, například pro použití při kterékoliv metodě 1.1 nebo 1.2 shora, obsahující sloučeninu obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl ve spojení s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo nosičem.

4. Sloučeninu obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelná sůl pro použití k přípravě farmaceutického prostředku pro použití v kterékoliv metodě 1.1 nebo 1.2 shora.

Sloučeniny obecného vzorce I mohou být podávány jako samotná aktivní složka nebo ve spojení s například jako adjuvant k ostatním léčivům, například v imunosupresivních nebo imunomodulačních režimech nebo s ostatními protizánětlivými činidly, například pro léčbu nebo prevenci akutního nebo chronického odmítnutí allo- nebo xenoimplantátů nebo zánětlivých nebo autoimunních chorob, jako chemoterapeutické činidlo nebo protiinfekční činidlo, například antivirové činidlo, jako je například antiretrovirové činidlo nebo antibiotikum. Například sloučeniny obecného vzorce I se mohou použít v kombinaci s kalcineurinovým inhibitorem, například cyklosporinem A nebo FK 506; makrocyklickým laktonem majícím imunosupresivní vlastnosti, například rapamycinem, 40-0-(2hydroxyethyl)rapamycinem, CCI779 nebo ABT578; ascomycinem majícím imunosupresivní vlastnosti, například ABT-281, ASM981 atd.; kortikosteroidy; cyklofosfamidem; azathioprinem; methotrexatem; leflunomidem; mizoribinem; mycofenolovou kyselinou; mycofenolátmofetilem; deoxyspergualinem nebo jeho imunosupresivním homologem, analogem nebo jeho deriváty; prostředkem urychlujícím pohyb lymfocytů, například FTY270; monoklonálními protilátkami na leukocytové receptory, například MHC, CD2, CD3, CD4, CD7, CD8, CDlla/CD18, CD25,

CD27, CD28, CD40, CD4, CD58, CD80, CD86, CD137, ICOS, CD150 (SLAM), 0X40, 40-1BB nebo jejich ligandy, například CD154, nebo jejich antagonisty; jinými imunomodulačními sloučeninami, například rekombinantními vazebnými molekulami mající alespoň jednu část extracelulární domény CTLA4 nebo jejího mutantu, například alespoň jednu extracelulární část CTLA4 nebo jejího mutantu vázanou na non-CTLA4 proteinové sekvence , například CTLA4Ig (například označené ATCC 68629) nebo jejich mutant, například LEA29Y; adhesivními molekulovými inhibitory, například antagonisty LFA-1, antagonisty ICAM-1 nebo -3, antagonisty VCAM-4 nebo antagonisty VLA-4; nebo antichemokinovými protilátkami nebo antichemokinovými • · •··· · ·· ·· ···· • · · ···· ·· · • · · ··· ··· ··· · ······ · • · · ··· ···· ’* ’ .........

receptorovými protilátkami nebo nízkomolekulárními chemokinovými receptorovými antagonisty, například anti MCP-1 protilátkami.

Jestliže jsou sloučeniny podle vynálezu podávány ve spojení s další imunosupresivní/imunomodulační/protizánětlivou nebo chemoterapeutickou terapií, dávky při takovém spojeném podání imunosupresivní, imunomodulační, protizánětlivé nebo chemoterapeutické sloučeniny budou záviset na typu použitého spoluléčiva, například zda se jedná o steroidní nebo kalcineurinový inhibitor, na specifickém použitém léčivu, na stavu, který se má léčit atd. V souladu se shora uvedeným, předkládaný vynález poskytuje ještě další aspekt:

5. Způsob, jak je definován shora, zahrnující společné podání, například současně nebo postupně, terapeuticky účinného netoxického množství sloučeniny obecného vzorce I a alespoň druhé léčivé substance, například imunosupresivního, protizánětlivého, protiinfekčního nebo chemoterapeutického činidla, jak je indikováno shora.

6. Farmaceutickou kombinace, jako je například souprava, obsahující a) první činidlo, kterým je antagonista CCR5, například sloučenina obecného vzorce I, jak je popsáno v tomto dokumentu, ve volné formě nebo ve formě farmaceuticky přijatelné soli a b) alespoň jedno spolučinidlo, například imunosupresivní, imunomodulační, protizánětlivé a protiinfekční nebo chemoterapeutické léčivo. Souprava může obsahovat instrukce pro jeho podání.

Výrazy „spojené podání nebo „kombinované podání nebo podobně jak se zde používá, znamená podání vybraných terapeutických činidel pacientovi a jsou určeny pro léčebné režimy, ve • · • · · kterých nejsou činidla nezbytně podávána stejnou cestou podání nebo ve stejnou dobu.

Výraz „farmaceutická kombinace jak se zde používá, znamená produkt, který je výsledkem míšení nebo kombinace více než jedné aktivní složky a zahrnuje jak pevné, tak nepevné kombinace aktivních složek. Výraz „pevná kombinace znamená, že aktivní složka, například sloučenina obecného vzorce I a spolučinidlo jsou podány pacientovi současně ve formě jedné entity nebo dávky. Výraz „nepevná kombinace znamená, že aktivní složky, například sloučenina obecného vzorce I a spolučinidlo jsou podávány pacientovi v oddělených entitách, buď současně, souběžně nebo postupně bez časového omezení, přičemž takové podání poskytuje terapeuticky účinné úrovně dvou sloučenin v těle pacienta. Později uvedené podání se také aplikuje při kokteilové terapii, například při podání tří nebo více aktivních složek.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Sloučenina obecného vzorce I kde

X je přímá vazba; -CH₂-; -CH₂-CH₂-; -CHRg-; -C(O)-; -NH- nebo NR₉;

Ri je případně R_i0 a/nebo Ru-substituovaný fenyl; případně Rio a/nebo Rn~substituovaný heteroaryl; případně R_i0 a/nebo Rusubstituovaný heteroaryl-N-oxid; nebo případně Ri₀ a/nebo Rusubstituovaný naftyl;

R₂ má jeden z významů uvedených pro Ri; nebo je případně R₁₀a/nebo Rn- substituovaný fluorenyl; případně Ri₀- substituovaný alkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; případně Ri₀-substituovaný alkenyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; případně Ri₀-substituovaný cykloalkyl obsahující 3 až 6 atomů uhlíku; případně Rio-substituovaný adamantyl; nebo případně Rio~substituovaný cykloalkenyl obsahující 4 až 8 atomů uhlíku;

R₃ má jeden z významů uvedených pro R_x; nebo je případně Rio a/nebo Ru-substituovaný fluorenyl; Ri₀-substituovaný alkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; případně Rio-substituovaný alkenyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; případně Rio-substituovaný cykloalkyl obsahující 3 až 6 atomů uhlíku; případně Rio-substituovaný adamantyl; nebo případně Ri₀-substituovaný cykloalkenyl obsahující 4 až 8 atomů uhlíku;

nebo • · • · • · kde A je -CH₂-, -NH-, -NR₉-, -S-, -SO-, SO₂- nebo -O-, n je 0,

1 nebo 2 a každý aromatický kruh je případně nezávisle substituován s Ri₀;

každá ze skupin R₄ má nezávisle jeden z významů R₅; nebo je CN; OH; OR₉; F; Cl; Br; nebo I;

každá ze skupin Rs je nezávisle H; alkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; hydroxyalkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; alkoxyalkyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; halogenalkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; fenyl; benzyl; nebo heteroaryl;

každá ze skupin R₆ má nezávisle jeden z významů uvedených pro R₄;

každá ze skupin R? má nezávisle jeden z významů uvedených pro Rs)

Re je H; alkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; alkenyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; alkynyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; fenyl; benzyl; CN; CH₂NH₂; CH₂NHR₉; CH₂NR₉R₉; CH₂NHC(O)R₉; CH₂NR₉C (O) R₉; CH₂NHC (O) NHR₉; CH₂NR₉C (O) NHR₉;

CH₂NR₉C (O) NR₉R₉; CH₂NHC (O) OR₉; CH₂NR₉C (O) OR₉; CH₂NHSO₂R₉;

CH₂N (SO2R9) 2; nebo CH₂NR₉SO₂R₉;

každá skupina R₉ je nezávisle alkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; cykloalkyl obsahující 3 až 6 atomů uhlíku; alkenyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; alkynyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; fenyl; benzyl; heteroaryl; nebo CF₃;

R10 představuje 1 až 4 substituenty nezávisle vybrané ze skupiny, která obsahuje alkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; hydroxyalkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; alkoxyalkyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; halogenalkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; cykloalkyl obsahující 3 až 6 atomů uhlíku; alkenyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; cykloalkenyl obsahující 3 až 6 atomů uhlíku; alkynyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; fenyl; heteroaryl; heteroaryl-N-oxid; F; Cl; Br; I; OH; OR₉; CONH₂; CONHR₉; CONR₉R₉; OC(O)R₉; OC(O)OR₉; OC(O)NHR₉; OC(O)NR₉R₉; OSO₂R₉; COOH; COOR₉; CF₃; CHF₂; CH₂F; CN; NO₂; NH₂;

NHR₉; NR₉R₉; NHC(O)R₉; NR₉C(O)R₉; NHC(O)NHR₉; NHC(O)NH₂;

NR₉C(O)NHR₉; NR₉C (O) NR₉R₉; NHC(O)OR₉; NR₉C(O)OR₉; NHSO₂R₉;

N(SO₂R₉)₂; NR9SO2R9; SR₉; S(O)R₉; SO₂R₉; Sí(CH₃)₃ a B (OC (CH₃) ₂) ₂;

Ru znamená dva sousední substituenty, které tvoří 4-7 členný nearomatický kruh, případně obsahující až dva heteroatomy nezávisle vybrané z N, 0 a S; a

Y je přímá vazba; -C(0)-; -C(O)-CH₂-; -S(O)-; -S(0₂)-; -C(S)-; -CH₂-; -C (-CH₂-CH₂)-; -CH(Rs)- nebo -C(R₄)₂-; ve volné formě nebo ve formě soli.
2. Sloučenina obecného vzorce I, podle nároku 1, kde Ri je fenyl nebo heteroaryl, přičemž každý z nich je případně substituován Ri₀; nebo fenyl případně substituovaný Rn; kde R₁₀představuje 1 až 3 substituenty nezávisle vybrané ze skupiny, která obsahuje alkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; hydroxyalkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; alkoxyalkyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; halogenalkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; cykloalkyl obsahující 3 až 6 atomů uhlíku; alkenyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; cykloalkenyl obsahující 3 až 6 atomů uhlíku; alkynyl obsahující 2 až 6 atomů uhlíku; fenyl; heteroaryl; heteroaryl-N-oxid; F; Cl; Br; I; OH; 0R₉; CONH₂; CONHR₉; CONR₉R₉; OC(O)R₉; OC(O)OR₉; OC(O)NHR₉; OC(O)NR₉R₉; OSO₂R₉; COOH; COOR₉; CF₃; CHF₂; CH₂F; CN; NO₂; NH₂; NHR₉; NR₉R₉; NHC(O)R₉; NR₉C(O)R₉; NHC(O)NHR₉; NHC(O)NH₂; NR₉C(O)NHR₉; NR₉C (O) NR9R9; NHC (O) OR₉; NR₉C(O)OR₉; NHSO₂R₉;

N(SO₂R₉)2; NR₉SO₂R₉; SR₉; S(O)R₉; SO₂R₉ a Si(CH₃)₃ a Rn je 5 nebo 6 členný nearomatický kruh, případně obsahující 1 až 2 atomy kyslíku a vázaný ke dvěma sousedním atomům uhlíku.
3. Sloučenina obecného vzorce I, podle nároku 1, kde každá ze skupin R₄, R₅, R₆ nebo R7 představuje nezávisle H; alkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; nebo benzyl.
4. Sloučenina obecného vzorce I, podle nároku 1, kde Re je H; alkyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku; nebo alkenyl obsahující

2 až 6 atomů uhlíku.
5. Sloučenina obecného vzorce I, podle nároku 1, kde X je přímá vazba nebo -CH₂- a/nebo Y je -C(O)-..
6. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce I, podle nároku

1, vyznačuj ící se tím, že způsob zahrnuje

a) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, kde X je přímá vazba, -CH₂-, -CH₂-CH₂- nebo -CHR₉- a Y je -C0-, -C(O)CH₂-,

-S (O) - nebo -S (0₂) -, amidaci sloučeniny obecného vzorce II kde Ri a R₃ až R_a mají význam uvedený shora a X' je přímá vazba, -CH₂-, -CH₂-CH₂- nebo -CHR₉se sloučeninou obecného vzorce III

R₂-Y'-A^z III kde R₂ má význam uvedený shora, Y' je -CO-, -C(O)CH₂-, SO- nebo -S(O₂)- a A' je odštěpující se skupina, například Cl, Br nebo OH,

b) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, kde X je přímá vazba a Y je -CH₂-, podrobení sloučeniny obecného vzorce II, jak je definována shora, kde X' je přímá vazba, reduktivní aminaci; nebo • · »»·· · ·· ·· ···· • · · · · 9 9 9 9 9 • 99 ··· ···· • · · ····· 9 9 9 9

c) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, kde X je -CH₂-, -CH₂-CH₂- nebo -CHR₉- a Y je -CO-, -C(O)CH₂-, -S(0)- nebo -S(O₂)-, reakci sloučeniny obecného vzorce IV kde R₂ až R₈ a Y' mají význam uvedený shora, se sloučeninou obecného vzorce V

Ri-X-Hal V kde Ri má význam uvedený shora a X'' je -CH₂-nebo -CHR₉-; a je-li to žádoucí, vzniklá sloučenina obecného vzorce I ve volné formě se převede na žádanou sůl nebo naopak.
7. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5 nebo její farmaceuticky přijatelná sůl pro použití jako léčivo.
8. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu obecného vzorce I podle nároku 1 nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl ve spojení s jejím farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo nosičem.
9. Farmaceutická kombinace, vyznačující se tím, že obsahuje

a) první činidlo, kterým je sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1 nebo její farmaceuticky přijatelná sůl, a

b) alespoň jedno spolučinidlo.
10. Způsob prevence nebo léčby chorob zprostředkovaných interakcemi mezi receptory chemokinu a jejich ligandami u • · subjektu v případě potřeby takové léčby, vyznačuj ící se t í m, že se uvedenému subjektu podá účinné množství sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1 nebo její farmaceuticky přijatelné soli.