CZ2000320A3

CZ2000320A3 - Deriváty 4-oxo-3,5dihydro-4H-pyridazino[4,5-b]indol-1-acetamidu a farmaceutický prostředek, který je obsahuje

Info

Publication number: CZ2000320A3
Application number: CZ2000320A
Authority: CZ
Inventors: Yannick Evanno; Laurent Dubois; Mireille Sevrin; Frank Marguet; Jacgues Froissant; Régine Bartsch; Catherine Gille
Original assignee: Sanofi-Synthelabo
Priority date: 1997-07-30
Filing date: 1998-07-28
Publication date: 2000-05-17
Also published as: NZ502361A; IL133633A; PL194245B1; SK1292000A3; CO5210883A1; US6262045B1; TR200000278T2; DE69808921T2; ZA986786B; ATE226584T1; UA57088C2; IL133633A0; HUP0002650A2; AU736600B2; ES2186212T3; BR9811582B1; EE04317B1; JP4322421B2; SK283075B6; SI1000063T1

Description

Deriváty ' 4-oxo-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-acétamidu a farmaceutický prostředek,, který je obsahuje

Oblast techniky

Vynález se týká derivátů 4-pxo-3,5-dihydro-4H-pyri/

i] ’ dazinof 4,5-b] indol-l-acétamidu, jejich přípravy a léčiv a'·· farmaceutických prostředků, které je obsahují.

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu jsou sloučeniny obecného vzorce I

ve kterém

X představuje atom vodíku, atom halogenu, methylovou skupinu, methoxyskupinu nebo fenylmethoxyskupinu,

Y znamená atom vodíku, 1 nebo 2 atomy ,halogenů nebo hydroxylovou skupinu, methoxyskupinu, nitroskupinu nebo methylovou skupinu,

R_; představuje atom vodíku nebo álkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, a symboly R₂ a R₃ nezávisle na sobě znamenají vždy atom vodíku, álkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo fenylmethylovou skupinu, nebo symboly R₂ a R₃ společně s atomem dusíku, který je nese, tvoří azětidinylovou, pyrrolidihylovou, 3-ethoxypyrrolidinylovóu, piperidinylovou, morfolinylovou, 4-methyÍT 'piperazinylovou nebo 1,3-thiazolidinylovou skupinu, přičemž vzorce těchto skupin jsou následující:

Výhodné jsou, ty sloučeniny obecného vzorce I, . ve kterých < . .

X je v poloze 8 nebo 9 - a představuje atom vodíku nebo atom halogenu,.

Y znamená -atom vodíku,

R, . představuje methylovou nebo ethylovou skupinu, R.,' znamená atom vodíku nebo methylovou skupinu a Rý představuje methylovou skupinu,·' - ' nebo symboly R, a R, společně s. atomem dusí ku, který je nese, tvoří azetidinylový nebo pyrrolidinylový kruh.

Sloučeniny obecného vzorce I lze připravit pomocí způsobů ilustrovaných v-následujících schématech.

Pokračování schématu 1

Podle schématu 1 se sloučenina ' obecného vzorce II, ve které mají symboly X' a Rj výše definované významy a· R znamená alkylovou. skupinu s-.l až 4 atomy' uhlíku, podrobí reakci s oxalylchloridem v aprotickém rozpouštědle, jako je toluen, při. teplotě mezi . 50° C a teplotou varu pod zpětným, chladičem· a meziprodukt z této reakce se poté při teplotě místnosti podrobí reakci ' š” alkoholem obecného vzorce ROH, kde R představuje alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, pro získání .diesteru obecného vzorce III, nebo se sloučenina obecného, vzorce II podrobí reakci s alkyl-chlorglyoxylátem v polárním aprotickém. rozpouštědle, jako je dichlořmethan, při teplotě místnosti, za přítomnosti Lewisovy' kyseliny, například chloridu . titaničitého, pro získání diesteru obecného vzorce III'.

Tento diester se poté v kyselině octové, 'nejprve při teplotě místnosti á poté při teplotě varu pod zpětným chladičem, podrobí reakci s fenylhydrazinem, popřípadě, substituovaným skupinou Y, jak je definována výše, pro získání esteru obecného vzorce IV. Pokud R_a představuje alkylovou skupinu, přemění se tento ester na odpovídající alkohol obecného vzorce V redukcí pomocí redukčního činidla, jako je natriumborohydrid, v rozpouštědle, jako je tetrahydrofuran, za přítomnosti - alkoholů, například. methanolu. Tento alkohol obecného . vzorce V se následně přemění na halogenovanou sloučeninu obecného vzorce VIII libovolnou reakci známou odborníkovi v oboru,, například reakci s tetrabrommethanem za přítomnosti trifenylf-osfinu, v rozpouštědle, jako ' je dichlormethan, nebo působením chloračního činidla, jako je methan,sulfonyl chlor id, ve., směsi rozpouštědel, jako je tetrahydrofuran a pyridin.

Následně se provede nukleofilni substituční reakce s kyanidovým iontem, buď ve směsi polárních rozpouštědel, jáko, -ί rií -F vm a m i u vnd 3 . riři ťpnl ntp 2 Ω až 80° Č. nebo ve

J — — ----, X-----x------dvoufázové směsi, jako je.' voda a dichlormethan, při teplotě mezi teplotou místnosti . a teplotou varu pod zpětným chladičem, za přítomnosti katalyzátoru fázového přenosu, pro .získáni sloučeniny obecného vzorce IX. .

Následně se provede kyselá · hyďrolýza, například za použiti směsi kyseliny octové a kyseliny chlorovodíkové, při teplotě varu pod zpětným chladičem, nebo bázická hydrolýza, například za použití hydroxidu draselného ve směsi rozpouště-) del, jako je voda a 2-methoxyethanol, při teplotě varu pod zpětným chladičem,, pro získání sloučeniny obecného vzorce X. í ' ' .. ¹

Tato kyselina se poté převede na sekundární nebo terciární amid obecného vzorce. I reakcí s. aminem obecného vzorce ,-HNR₂R₃, kde mají symboly R₂ a R₃ výše . definované významy, kterážto.reakce probíhá.například přes intermediární imidažolid získaný reakcí s 1,1'-karbonylbis-lH-imidazol.

Pokud je žádoucí získat výslednou sloučeninu obecného vzorce I, ve které Rj představuje atom vodíku, ₍je možné přeměnit ’sloučeninu obecného vzorce IV, kde Rj představuje atom vodíku, na sloučeninu obecného vzorce IV, kde R_r znamená chránící skupinu, jako je methoxymethylová skupina, například alkylační reakcí, která je odborníkovi. v oboru, známá. V reakcích · podle schématu 1 se poté pokračuje až do získání sloučeniny obecného vzorce IX a následnou kyselou hydrolýzou této sloučeniny, kterou se současně odstrahí methoxymethýlová chránící .skupina, se získá sloučenina obecného vzorce X, kde R představuje atom vodíku.

Schéma 2

Podle schématu 2 se sloučenina obecného vzorce II, jak je definována výše, přemění na sloučeninu obecného vzorce VI libovolným 'způsobem známým odborníkovi v oboru, například elektro.filní reakcí v kyselém prostředí... Sloučenina obecného vzorce VI se poté v kyselině' octové, nejprve při teplote místnosti a pote při teplotě varu pod zpětným chladičem, podrobí reakci s fenylhydrazinem, popřípadě substituovaným skupinou Y, jak je definována výše.· Získá se sloučenina obecného vzorce. VII, která se přemění na odpovídající halogenovaný derivát obecného vzorce VIII reakcí radikálového typu, například za použití N-bromsukcinimídu, v rozpouštědle, jako-je tetrachlormethan, ' za. přítomnosti činidla jako je 2,2'-azobis-(2-methylpropionitril). Sloučenina obecného vzorce VIII se následně podrobí reakcím popsaným v souvislosti se schématem 1. . ·

Pokud- je to. žádoucí, je možné přeměnit sloučeninu obecného vzorce I, ve které X představuje’ atom halogenu,, na sloučeninu obecného vzorce I, vé které X představuje methylovou skupinu, libovolnou reakcí známou odborníkovi v oboru, například' za^:p_Oužití tetramethylstánia za přítomnosti komplexu palladia. .....

- Podobně lze sloučeninu obecného vzorce I, ve které Y představuje methoxyskupinu, přeměnit na sloučeninu obecného vzorce I, ve které Y znamená hydroxyskupinu, libobolným známým způsobem, například působením bromidu boritého, v chlórovaném rozpouštědle, jako je dichlormethan.

Pokud je to žádoucí, je rovněž možné přeměnit sloučeninu obecného vzorce I, ve které X představuje atom chloru, na sloučeninu obecného vzorce I, ve které' X znamená atom vodíku, například hydrogenácíza přítomnosti palladia na aktivním uhlí.

: · . -9 «

Podle schématu 3 se sloučenina obecného vzorce V, ve které Rj představuje álkylovou .skupinu a X znamená ₇atom chloru, přemění na sloučeninu obecného vzorce XI oxidací alkoholové funkční skupiny, například za použití oxidu manganičitého v rozpouštědle, jako.je dichlormethan. Al.dehyo. obecného vzorce XI se následně přemění na nitril obecného' vzorce XII reakcí s (4-methylbenzensulfonyl) methyl i so.kyanidem (TosMIC) v rozpouštědle’, jako je 1,2-dimethoxyet-han, ·. za přítomnosti báze, jako je kalium-1,1-dimethylethoxid. Nitril obecného vzroce XII se poté přemění na. ester obecného vzorce XIII, ve kterém R představuje nižší álkylovou . skupinu, působením kyseliny, jako je kyselina chlorovodíková, v alkoholickém rozpouštědle obecného vzorce ROH.

Nakonec se.tento ester obecného vzorce XIII přemění na sekundární nebo terciární amid, obecného vzorce I reakcí s aminem obecného vzorce HNR₂R₃, ve kterém mají symboly R₂ a . R₃výše .definované významy, například za přítomnosti trialkylaluminiového derivátu, v rozpouštědle, jako je toluen·.

Výchozí sloučeniny obecného vzorce II, zejména ’ ty,, ve kterých R_T představuje atom vodíku, jsou popsány v literatuře. Pokud je. to žádoucí, lže sloučeninu obecného vzorce II, ve které R₁ představuje atom vodíku, podrobit alkylačni reakci .pro získání sloučeniny sloučeniny obecného vzorce II, ve které R_x znamená álkylovou skupinu.

- Následující příklady ilustruji přípravu některých ,sloučenin podle vynálezu. Elementární mikroanalýzy a infračervená (IR) spektra a NMR-spektra potvrzují struktury získaných.sloučenin.

Čísla sloučenin uváděná v závorkách v.názvech příkladů odpovídají číslům v prvním sloupci tabulky 1 uvedené dále.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1 (sloučenina č. 9)

5-ethyl-8-fluor-N;N-dimethyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-py ridazinof 4,5^_b] indol-l-acetamid

1.1. Ethyl-l-ethyl-5-fluor-lH-indol-2-karboxylát

Suspenze .3,8 g (95 mmol.) 6.0% natriumhydridu (předem promytého petroletherem) a 15 g (72,4 mmol), ethyl-5-fluor -lH-in'dol-2-karboxylátu ve 100 ml dimethyl formami d.u se míchá po dobu 2 hodin. - pri teplotě místnosti. Následně se přidá 7,5 ml.. (93,7 mmol) jodethanu, - v roztoku ve 20 ml dimethylformamidu. Reakční směs se míchá po. dobu 10 hodin při teplouš místnosti a poté se vylije do, ledově chladné vody. Směs sé extrahuje diethyletherem,. Organická fáze se několikrát promyje vodou, vysuší se nad síranem hořečnatým a zahustí za sníženého tlaku. Získá se 17 g (72 mmol) žlutého oleje, který se bez dalšího zpracování použije v následujícím stupni.

1.2. Methyl-2-(ethoxykarboriyl)-l-ethyl-5-fluor-a-oxo-lH-indol-3-acetát '

Roztok 17 g (72 mmol) ethyl-l-ethyl-5-fluor-lH-indol-2-karboxylátu a 7,4 ml· (84,5 mmol) oxalylchloridu v 500 ml toluenu se zahřívá k . varu pod zpětným chladičem po dobu ’6 hodin. Přidá se dalších 5 ml (57 mmol) oxalylchloridu, směs se zahřívá po dobu další 1' hodiny k varu pod zpětným chladičem a poté se nechá vychladnout na teplotu místnosti. Přidá se 200 ml methanolu, směs se míchá po dobu 10 minut a rozpouštědla se odpaří za sníženého tlaku. Výsledný olej se vyjme dichlormethanem a organická fáze se promyje vodou, vysuší se nad síranem hořečnatým a zahustí za sníženého tlaku. Po překrystalování z 2-propanolu se získá 14 g (43,6 mmol) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé pevné látky.

Methyl-5-ethyl-8-fluor-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H py ridazino[ 4,5-b] inďol-l-karboxylát

K roztoku 14 g (43,6 mmol) methyl-2- (ethoxykarbonyl) l-ethyl-5-fluor-a-oxo-lH-indol-3-acetátu ve 150. ml kyseliny octové se při teplotě místnosti přidá. 18,4. ml (187,2 mmol) fenylhydrazinu a reakční Směs 'Se míchá po .dobu 30 minut při teplotě místnosti a poté pp dobu 2 hodin za varu pod zpětným chladičem.. Směs, se ochladí, přidá se 100 ml vody a . filtraci se oddělínerozpustný materiál, který, se promyje na nálevce _ ί 2 —..x. ~ „1,1 < ^™x a .a v ‘ Doměřu 7 0 : 30 .

Ztí blinULCHU O/V-LC1. -oin^ů-u --------- ·. _x ·Izoluje se tak 10,5 g (28,6 mmol) bílé pevné látky, která se bez dalšího zpracování použije'v následujícím stupni.

1.4. 5-ethyl-8-fluor-1- (hydroxymethyl) -3.-fenyl-3, 5-dihýdro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-on

K roztoku 10 g (27,3 mmol) methyl-5-ethyl-8-fluor-4-oxo-3-fenyl-3, 5-dihydrb-4H-pyridazino[ 4,5-b]. indol-l-karboxylátu ve -200 ml tetrahydrofuranu a 5,8 ml methanolu se při teplotě, místnosti v několika částech přidá -5,1 g (135 mmol) natriumborohydridu a směs se míchá po dobu 4 hodin za varu pod zpětným chladičem. Poté se .směs vylije do ledově chladného · 0,1M roztoky kyseliny , chlorovodíkové, filtrací se oddělí nerozpustný materiál, který se promyje na nálevce ze slinutého skla vodou a diethyletherem a' poté se vysuší. Izoluje .se tak ..7,2 g- (21,4 mmol) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé pevné látky, která se bez oalšího zpracování použije.v následujícím stupni. . .

1.5. 1-(brommethyl)-5-ethyl-8-.fluor-3 fenyl 3,5 dihydro

-4H-pyridazino[. 4,5-b] indol-4-on

K roztoku 7,2 g (21,4 mmol) 5-ethyl-8-fluor-1-(hydroxymethyl )-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b]indol-4-onu a 15,3 g (46,13 mmol) tetrabrommethanu v 500 ml dichlormethanu se v několika částech přidá 11,5 g (43,84 mmol) trifenylfosfinu a roztok se míchá po' dobu. 12 hodin při teplotě místnosti..

Směs se zahustí na.1/3 za sníženého tlaku, a sraženina 'se izoluje filtrací, promyje se etherem a .vysuší se za sníženého . tlaku. Získají se 4 g (.10 mmol) pevné / látky. K_:matečnému louhu se přidá 300 ml dichlormethanu, 8 g (24,1 mmol) tetrabrommethanu a 5 g (19,06 rrimol) trifenylfosfinu, roztok'se míchá po .dobu 12 hodin při teplotě místnosti a poté se zahustí na 1/3. Sraženina se izoluje filtrací, promyje se etherem a vysuší se za sníženého tlaku. Získá se. dalších 3,2 g (8 mmol) pevne látky.

.,6 . 5-eťhyl-8-fluor-4-oxo-3-fenyl-3, 5-dihydřp-4H-pyridazí-.

no[ 4,5-b] indol-l-acetoriitril

Dvoufázová směs .7,2 g (18 mmol)·. 1-(brommethyl)-5-ethyl-8-fluor-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-onu, 3,53 g (72 mmol) kyanidu sodného a 0,58 g (1,8 mmol) tetrabutvlamoniumbromidu ve 300 ml dichlormethanu a 150 ml vody se intenzivně míchá po dobu 12 hodin.· Organická fáze se oddělí, několikrát se promyje vodou, vysuší se nad síranem horečnatým ^!a zahustji se za sníženého tlaku. Izoluje se 5,8 g (16,8 mmol) sloučeniny uvedené v názvu, která se bez dalšího zpracování použije v následujícím stupni. .

' 1.7. 5-ethyl-8—flůOr^4-oxo-3-fenýl-3/5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-octová kyselina

Roztok.5,8 g (16,8 mmol) 5-ethyl-8-fluor-4-oxo-3-fenyl-3,5-díhydro-4H-pyrídazíno[ 4,5-b] indol-l-acetonitrilu . ve 200 ml směsi koncentrované . kyseliny chlorovodíkové a ledové kyseliny octové v poměru 1 : 1 ' se zahřívá k varu pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin.

iRoztok se ochladí, přidá· se 100 ml vody, nerozpustný materiál se izoluje filtrací a oůkladně se promyje vodou a etherem na nálevce ze slinutého skla..

Po vysušení v peci se získá 5,2 g (15 mmol) bílé pevné látky, která se bez dalšího zpracování použije v následujícím· stupni .·

1.8. 5-ethyl-8-fluor-N,N-dimethyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-

-4H-pyridazino[ 4,.5-b] indol-l-acetamid j ..

Suspenze 1 g (2,73 mmol) 5 ethyl 8 fluor 4 oxo 3 fenyl -3,5-dihydro-4H-p.yridazino[ 4,5-b] indol-l-octové kyseliny a 0,7 g (4,3 mmol) 1,1'-karbonylbis-lH-imidazolu .. ve 200 ml tetrahydrofuranu se míchá po dobu 3 hodin při teplotě 50. C.

Keakční směs se

UUIU-QU-L 1-XCl přidá se nadbytek zkapalněného dimethylaminu a reakční směs se míchá po dobu 12 hodin při teplotě místnosti. Poté se směs zahustí za sníženého tlaku, přidá se 100 ml dichlormethanu a .100 ml vody a organická fáze· se oddělí, promyje se vodou, vysuší se nad síranem horečnatým a zahustí se za sníženého tlaku. Výsledný olej se vy.krystaluje z etheru.

Po filtraci' á.‘překrystalování z ethylacetátu se izoluje 0,75 g (1,9 mmol) bílých krystalů o. teplotě tání 183 až

184° C.

Příklad 2 (sloučenina č. 25) l-[ 2-(8-Chlor-5-methyl-4-oxo-3-fenylr3,5-dihydro-4H-pyridázinp[ 4,5-b] indol-l-yl)-1-oxoethyl] pyrrolidin ' ' .Ί . Methyl-5-chlor-2- (ethoxykarbonyl) -1-methyl-a-ox.o-lH-indol-3-acetát

K roztoku 31,5' g (133 mmol). ethyl-5-chlor-l-methyl~ -lH-indol-2~kárboxylátu ve 100 ml toluenu zahřátému na teplotu 60° C se přidá 15 ml (170 mmol) oxalylchloridu a směs' se zahřívá, k varu pod zpětným· chladičem po dobu 1 hodiny. · • Roztok se ochladí, přidá se 50 ml methanolu, směs se zahustí za sníženého tlaku a zbytek se vyjme 100 ml dichlormethanu . a- 50 ml vody. Přidá se hydrogenuhličitan

- 14 sodný, organická fáze se oddělí a vysuší se nad síranem horečnatým, rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku, zbytek trituruje s etherem a sraženina se izoluje filtrací a vysuší se za sníženého tlaku. Získá se 19 g (59 mmol) pevné látky o teplotě tání 119 až 120° C., 2.2. Methyl-8-chlor-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-í-karboxylát

Roztok 19 g (59 mmol) . methyl-5-chlor-2-(ethoxykarbonyl)-l-methylra-oxo-lH-indol-3-acetátu a .26 g (240 mmol) fenylhydrazinu ve 250 ml kyseliny octové se zahřívá k varu pod zpětným chladičem po dobu 2· hodin.· Směs se ochladí, přidá se 250 ml směsi vody a acetonu'v poměru 1- : 1 a směs se nechá stát při teplotě 4° C po dobu 15 hodin. ⁷.Sraženina se. izoluje filtraci, ‘promyje se. vodou a acetonem á vysuší se za sníženého tlaku.. .Získá se’ 17,4 g (47 mmol) pevné látky o teplotě tání265 áž 2.66° C. ’.

2.3. 8-chlor-l-(hydroxymethyl)-5-methyl-3-fenyl-3,5-dihydro-

-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-on

Roztok 17,2 g (47- mmol) methyl-8-chlor-5’-methyl-4-oxo-. -3-fenyl-3,5-dihydr©-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-karboxylátu,. 8,'7 g (2 30 mmol) 'nátriumborohydridu· a 9,4 ml (230 mmol) methanolu ve 300 ml tetrahydrofuranu se zahřívá k varu.,pod zpětným chladičem po dobu 4 hodin. Poté se . směs ochladí, 'a vylije do míchaného roztoku 100 ml 2M kyseliny chlorovodíkové a 100 ml dichlormethanú. Sraženina se. izoluje filtrací, promyje se vodou a di chlorine thanem a vysuší se za sníženého tlaku.. , .

Získá se 15 g (44 mmol) pevné látky o teplotě tání 278 až 280° C. ' .

2.4. 1-(brommethyl)-8-chlor-5-methyl-3-fenyl-3,5-dihydro-

-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-on , ý '

Pracuje se postupem jako v. příkladu 1.5., za použití 15 g. (44 mmol) 8-chlor-l-(hydroxymethyl)-5-methyl-3-fenyl-3, 5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-onu.. Po několika zpracováních a vyčištěních chromatografií na silikagelu se izoluje 15. ,g (37 mmol) pevné látky o teplotě tání .253 až 254° C.

2.5. 8-chlor-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyrídazino[ 4,5-b] indol-l-acetonitril

Pracuje se postupem jako ^; v příkladu 1.6., ža' použiti 12,5 g (3 mmol) 1-(bromměthyl)-8-chlor-5-methyl-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] índol-4-onu ve směsi chloroformu a vody. Po vyčištění na sloupci silikagelu se získá 10 g (28 mmol) pevné látky o teplotě- tání 230°.C.

2.6. 8-chlor-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-octová kyselina , v

Roztok 10 g (28 .mmol) 8-chlor-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3, 5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-acetonitrilu ve směsi' 200. ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové a 200 ml kyseliny octové se zahřívá po dobu 4 hodin na teplotu 100° C.. Roztok se zahustí za sníženého tlaku, zbytek se vyjme 250 ml vody a· sraženina se izoluje filtrací. Poté se promyje vodou a vysuší se za sníženého tlaku.' Získá se 10,2 g (27 mmol) pevné látky o teplotě tání 206 až 208° C. .

2.7. l-[ 2-(8-Chlor-5-methyÍ-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-py- ridázinof 4,5-b] inďol-l-yl)-1-oxoethyl] pyrrolidin

Roztok 1,5 g (4 mmol) 8-chlor-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3, 5-dihydro--4H-pyridazino[ 4,5-b] ihdol-l-octové kyseliny a 1,2 g (7,4 mmol) 1,.1'-karbonylbis-lH-imidazolu v ..tetrahydrofuranu se míchá po. dobu 1 hodiny při teplotě 50°. C.

-16Směs se. ochladí a přidá se nadbytek pyrrolidinu. Směs se míchá po dobu 15 hodin a poté se filtrací izoluje sraženina, která se promyj.e vodou a etherem a. překrystaluje se z ' 2-propanolU. Získá se 0,65 g (1,5 mmol) pevné látky o teplotě tání 261 až 262° C. .. '

Příklad 3 (sloučenina č. 27)

N, N, 5-trímethyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazi.no[ 4,5-b]indol-l-acetamid

3.1. 5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol⁴-1-octová kyselina , ) .

Roztok 3,3 g (9 mmol) 8-chlor-5-methyl-4-oxo-3-fényl-3, 5-dihydro-4H'-pyri'daz.ino[ 4,5-b], indol-1-octové .kyseliny, 2,8 g (44 mmol) amoniumformiátu a 1,8 ^: g 10% palladia na aktivním uhlí v 500 ml ethanolu se zahřívá k ,varu pod. zpětným chladičem po dobu' 5 hodin. .

Reakční směs se ochladí, přidá se - dichlormethan, katalyzátor se odstraní filtrací přes vrstvu křěmeliny a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Získají se 3 g (9 mmol) sloučeniny uvedené y názvu, která se bez dalšího zpracování použije v následujícím stupni. .

3.2. N, N, 5-trimethyl-4-oxp-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[. 4,5-b] indol-l-acetamid -

Suspenze 1 g (3 mmol) 5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyrídazíno[ 4,5-b] indol-l-octové kyseliny a 0,7 g (4,3 mmol) 1,1'-karbonylbís-lH-imidazolu ve 200 ml tetrahydrofuranu se míchá po dobu,. 2 hodin při teplotě 60° C. Reakční směs se ochladí na 25° C, přidá se nadbytek zkapalněného dimethylaminu v roztoku v tetrahydrofuranu a reakční směs se míchá po dobu 72 hodin při teplotě místnosti.

Poté . se směs zahustí za sníženého tlaku, přidá se 300 ml vody a filtrací se izoluje sraženina, která se promyje

- .17 vodou a etherem a překrystaluje se z 2-propanolu. Získá se 0,75 g (2 mmol) pevné látky o. teplotě tání 214 až 215° C.

Příklad 4 (sloučenina č. 26) l-[2-(5-methyl-4-oxp-3-fenyl.-'3,5-dihydřo-4H.-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-yl)-1-oxpethyl] pyrrolidin . « Pracuje se- postupem . jako v příkladu 3.2.., za použití _a ’ . ’ · i g (3 mmol) 5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyri. dazinoí 4,5-b] indol-l-octové kyseliny a nadbytku pyrrolidinu. Produkt se překrystaluje z 2-propanolu. Získá se 0,5 g -.(1,3 mmol) pevné látky o teplotě tání 214 až· 215° C. \

-Příklad 5 (sloučenina č. 31) ,

.. . I

·. . ' l-[2-(9-brom-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-yl)-1-oxoethyl] pyrrolidin

5.1. Methyl-2-azido-3-(2-bromfenyl) prop-2-énoát_;

K roztoku 47'6 ml natřiummethoxidu (30% v methanolu) ve - 950 ml methanolu se za mechanického míchání' v atmosféře a · · · · dusíku při teplotě -10’ C až -8° C v průběhu ;3 hodin po kapkách přidá roztok 75 ml’ (624 mmol). 2-brombenzaldehydu a 252 g (2,2 mmol) methylazidpacetátu ve 160 ml methanolu. V míchání se pokračuje po dobu .2 hodin při teplotě pod 5° C a .' poté se směs vylije na 1,5 kg ledu. Sraženina se izoluje

7' filtrací, promyje se vodou a vysuší se za sníženého tlaku bez přístupu světla. Získá se 116 g (0,41 mol) pevné látky,· která .se rychle použije v následujícím stupni.

5.2. Methyl-4-brom-lH-indol-2-karboxylát

Roztok 116 g (0,41 mol) methyl-2-azido-3-(2-bromfenyl)prop-2-enoátu v 1,5 1. tolueu se za mechanického míchání v průběhu 4 hodin po kapkách přidá k roztoku 2 1 toluenu zahřívanému k varu pod zpětným chladičem a v zahřívání k varu poči zpětným chladičem se pokračuje po dobu další 1 hodiny.

Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se vyjme. 21 cyklohexanu. Filtrací se izoluje sraženina, která se promyje toluenem a vysuší se za sníženého tlaku. Izoluje se 37,85 g ' (149 mmol). produktu. Matečný louh se ·zahustí za sníženého tlaku a zbytek . se chromatografíčky vyčistí na sloupci, silikagelu. Izoluje se dalších 12,2 g ,(48 mmol) Γ produktu .

< 5.3. Methyl-4-brom-l-methyl-lH-indol-2-karboxylát

Pracuje se postupem jako v příkladu 1.1., za použití 20 g (79 .mmol) · methyl-4-brom-lH-indol-2-karboxylátu, 3,8 g ,60% natriumhydridu a 6' ml jodmethanu. Po ukončení reakce se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku a zbytek se vyjme , .vodou. Směs se extrahuje ethylacet.átem. Organická fáze se vysuší a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Produkt se vysuší za sníženého tlaku. Získá se.20,6 g (77. mmol) pevné látky o teplotě tání 85 až 86° C.

5.4· .· Methyl-3-ace.týl-4-bróm-l-methyl-lH-índol-2-karboxylát

K roztoku 1.3,2 ml kyseliny .octové, 1,6 ml kyseliny fosforečné a 170 ml acetonitrílu. se přidá^: 33 ml anhydridu kyseliny trifluoroctové, směs se míchá po dobu 10 minut při teplotě místnosti a poté’ se přidá roztok 20,6 g (77 mmol) methyl-4-brom-.l-methyl-lH-indol-2-karboxýlátu ve · 120 ml .acetonitrílu. Směs se míchá po dobu 4 hodin při teplotě místnosti, poté se vylije do vody a extrahuje se etherem. Organická fáze se vysuší nad síranem sodným, rozpouštědlo se odpaří za sníženého 'tlaku a zbytek se.vyjme směsí cyklohexanu a dichlormethanu. Sraženina se izoluje filtrací, promyje se etherem a vysuší se za sníženého tlaku. Získá, se 18,8 g (61 mmol) produktu.

Matečný louh se zahustí a zbytek se chromatograficky vyčistí na sloupci silikagelu. Izoluje se dalších 3,2 g (10 mmol) produktu. ' ' Teplota táni produktu činí 128° C.

5.5. 9-brom-l’, 5-dimethyl-3-fenyl-3, 5-dihydro-4H-pyri-dazino-

[ 4,5-b] indol- 4-on g (71 mmol) methyl-3-aceťyl~4-brom-l-methyl-lH-indol-2-karboxylátu. se za zahřívání rozpustí ' ve. 350. ml kyseliny octové·. Přidá se 30 ml (300 mmol) fenylhydrazinu, v míchání se' pokračuje po dobu 1 hodiny při teplotě místnosti a reakční směs se zahřívá k varu pod.zpětným chladičem po dobu 5 hodin/ nechá se stát při teplotě místnosti po.dobu 15 hodin a znovu se zahřívá k varu pod zpětným chladičem po dobu 7 hodin. Přidá se 28 ml fenylhydrazinu a postup' se opakuje. Směs se zahustí za sníženého tlaku, zbytek se vyjme,vodou a sraženina se izoluje filtrací, promyje se vodou a vysuší se zá sníženého tlaku. Poté se sraženina chromatograficky vyčistí na sloupci silikagelu. Izoluje se., 11,1. g (oO mmol) produktu o teplotě tání 189 až 190° C.. . . ' , ' ,

5.6. ' 9-brom-l-(brommeťhyl)-5-methyl-3-fenyl-3,5-dihydro-. -

-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-on

Roztok 10', 1 g‘ (27,1 mmol) 9-brom-l,5-dimethyl-3-fenyl-3,5-dihydřo-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-onu, 6 g .(34 mmol). N-bromsukcinimidu a 0,46 g (2,8 mmol) 2,2 -azobis-(2-methylpropionitrilu) se zahřívá k varu pod zpětným chladičem po dobu 5 hodin. Přidají se další 3 g (17 mmol) N-bromsukcin imidu a 0,23- g (1,4 mmol) 2,2'-azobis- (2-methylpropionitrilu) .· Směs se zahřívá k varu pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin, nechá, se .stát, při teplotě místnosti po dobu 15 hodin a znovu se zahřívá k varu pod zpětným chladičem po dobu 5 hodin. Poté se směs zahustí za sníženého tlaku, zbytek se vyjme vodou a.extrahuje se ethylacetátem. Organická fáze se vysuší, rozpouštědlo se. odpaří za sníženého tlaku a zbytek se chromatografíčky vyčistí na sloupci silikagelu. Izoluje se 5,9 g (13 mmol) produktu.

5.7. 9-brOm-5-methyl-4-oxo-3-fenyl 3,5 dihydro 4H pyridazi no[ 4,5-b] indol-l-acetonitr'il

Roztok 6,4 g (14,3 . mmol) 9-brom-l-(brommethyl)-5-methyl-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-onu, 3,6 g (73 mmol) kyanidu sodného a 0,.57 g (1 mmol) tetrabutyl' amoniumbromidu ve směsi 170 ml ,dichlormethanu a 85 ml vody se ř . _za míchání zahřívá k varu pod zpětným chladičem po dobu 3 hodin. Usazením se provede .separace a reakční směs se extrahuje dichlormethanem. Organická fáze .se promyje vodou, . .·____xr___ <4 Λ m 7. ΑΌΓΗ3 St^dl O SS Odpaří Z 8.

.vybUbi iiau .----s ~ “ sníženého tlaku. Získá se 5,6 g (14,2 mmol) produktu, který se bez dalšího.zpracování' použije v následujícím stupni. . < - . ' , ' . i

5.8. 9^_brom— 5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyrida zi no[ 4,5-b] indol-1-o'ctová kyselina

Roztok 4,8. g (12,2 mmol)9-brom-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3, 5-dihydro~4H-pyridazino[ 4‘, 5-b] indol-l-acetonitrilu ve směsi 190 ml kyseliny ,octové a'50 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové se zahřívá k varu pod zpětným chlaoičem po dobu 6 hodin. Roztok se. zahusti za sníženého tlaku a zbytek se vyjme směsí ‘dichlormethanu a vody. Směs se zalkaližuje 30 o roztokem hydroxidu sodného, usazením se provede separace a směs se extrahuje dichlormethanem.. Vodná fáze se za chlazení v ledové lázni okýseli koncentrovanou kyselinou chlorovo.. dikovou. Sraženina, se izoluje' filtrací, promyje se vodou .a .vysuší se za sníženého tlaku. Získá se 3,1 g (7,5 mmol) pevné i látky

5.9. l-[ 2-(9-brom-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-py-..

. ridazinof 4,5-b] indol-l-yí)-1-oxoethyl] pyrrolidin

Pracuje se postupem jako v příkladu 3.2., za použití 3,1 g (7,5 mmol) 9-brom-5-'methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro• -4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-octové kyseliny, 1,4 g l,l'.-karbonylbis-lH-imidazolu a 0,7. ml pyrrolidinu. Po ukončení reakce se přidá voda a filtrací se izoluje sraženina, která

·.·'··'» ΐ · t · . » • · · · · « · · ·. ..'····« «· ··· ·· ··

- 21 se vysuší’ za sníženého) tlaku. Poté se překrystaluje z 2-propanolu a. promyje še . etherem - a pentahem. Produkt se vysuší za sníženého tlaku. Získá se 2,3 g (4,9· mmol) ,p’evné látky o teplotě tání 209 až 210° C.

Příklad 6 (sloučenina č.ll) >

9-brom-5-methyl-N-methyl-4-óxo-3-fenyl-3 ,'5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-acetamid

Pracuje sé postupem jako v ,příkladu 3.2.,· za použití 0,78 g (1,9 mmol) 9-brom-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-.dihydro,-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-octpvé kyseliny. ·. Produkt se překrystaluje z’2-propan’olu. Získá , se .0,57 ,g (1-, 3 mmol) pevné látky o teplotě tání 267 až 268° C.

Příklad 7. (sloučenina č. 38) '

1-Γ 2-.(5, 9-dimethyl-4-oxo-3-fenyl-3, 5-dihydro-4H-pyridazino- ( [ 4,5-b] indol-l-yl-)-1-oxoethyl] pyrrolidin

Roztok 1,2 g (2,6 .mmol) l-[ 2-(9-brom-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5~b] indol-l-yl)-1-oxoéthyl] pyrrolidinu, .0,22 g (0,3 mmol) - bis(trifenylfosfin)palladium(II)chloridu, 0,41 g (1,55 mmol) trifenylfosfinu a 1,5 ml. (10,3 mmol) tetramethylstannia v 15- ml dimethyl formami du se zahřívá na teplotu 120° C po dobu 18^;hodin v uzavřené nádobě. Směs se zahustí za sniž.eného tlaku a zbytek se vyjme dichlormethanem · a. roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Organická fáze se promyje 10% roztokem fluoridu draselného, vysuší se nad síranem sodným, rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se chromatograficky .vyčistí na sloupci silikágelu.' Produkt se překrystaluje z 2-prppanólu, promyje se etherem a pentanem. a vysuší se za sníženého tlaku. Získá se 0,82' g (2 mmol) pevné látky o teplotě tání 214 až 215° C.

·,···· «··». ···· · ·♦ ·c · ·· · ·

Přiklad 8 (sloučenina č. 23) ’ l-[ 2- (5-methyl-4-oxo-3-fenyl^8- (fenylmethoxy) -3, 5-dihydr.o-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-yl)-1-oxoethyl] pyrrolidin 8.1. 5-methyl-4-oxo-3-fenyl-8-(feriylmethoxy)-3,5-dihydro-4H-pyridazi'no[ 4,5-b] indol-l-yl)-1-octová kyselina

Roztok 1,15 g (2,7 mmol) 5-methyl-4-oxo-3-fenyl-8(fenylmethoxy) -3, 5-dihy-dro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-yl) -1-acetonitrilu a 1,54 g ,(39 mmol) .hydroxidu draselného ye směsi 10 ml vody a 20 ml 2-methoxyethariolui se zahřívá k varu pod zpětným chladičem·. Směs se extrahuje, dichlormethanem,. vodná fáze se okyselía extrahuje se.ethylacetátem, organická ..fáze se vysuší nad síranem sodným a rozpouštědlo se odpaří za .sníženého tlaku. Izoluje se 0,38 g (0,86 mmol) pevné látky, která se bez dalšího zpracování použije v . následujícím .stupni. ' ' \

8.2. 1 —[ 2 — (5-methyl- 4 -bxo—3- f eny 1 — 8 —' (f enyImethox.y) - 3, 5—di — ·· hydro-4H-pyridazi.no[ 4, 5-b] indol-l-yl)-1-oxoethyl] pyrrolidin

Pracuje -se. postupem jako v příkladu 3.2., za použití 0,38 g (0,86 mmol) 5-methyl-4-oxo-3-f eny.1-8-(fenylmethoxy).-3, 5-dihydro-4H-pyridazino[ 4, 5-b] indol-l-octové . kyseliny. Získá se 0,35 g (0,7 mmol) pevné látky.d teplotě tání 2203 až 204° c. ;

Příklad 9 (sloučenina č. 17) ^!

N,N,5,8-tétramethyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino~, [ 4,5-b] indol-l-acetamid .’

9.1. 1-(chlórmethyl)-5,8-dimethyl-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-on . ~ ’

K suspenzi 9,5 g (29,7 mmol) 1-(hydroxymethyl)-5,8-dimethyl-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-onu v

v - 23 600 ml tetrahydrófuranu zahřáté na teplotu 6.0°. C se přidá 50 ml pyridinu. Poté se.přidá 4,5 ml (59,4 mmol) methansulfonylchloridu a směs se nechá'stát po dobu 15 hodin při teplotě místnosti. Přidá se 500 ml. dichlormethanu,. sraženina se .oddělí filtrací,- usazením s'e provede separace a organická fáze se promyje vodou. Poté se vysuší nad síranem sodným . a rozpouštědlo, se odpaří za- sníženého tlaku. Získá se 5 g (.14,8 mmol) produktu,·který se bez dalšího zpracování použije v následujícím stupni.' · .

' · í • Q · O C C.. /ITT _____4 -3_____ >.4-. _f-u j. “3· j^_uiny ui u'*tn~uy LiuazLiuu”

[ 4,5-b]indol-l-acetonitril

Roztok 5 g (14,8 mmol) l-(chlormethyl)-5,8-dimethyl-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-onu, 2,7 g (55. mmol) kyanidu sodného a 0,5 g (3 mmol) jodidu sodného ve směsi 50 ml . dimethylformamidu a-30..ml vody se míchá po dobu 2 hodin při teplotě. 50° C. Směs se nechá stát při teplotě ' místnosti ' a filtraci se-izoluje sraženina, která -se' promyje· vodou a pentanem a vysuší se za sníženého tlaku. Získají se . 3 g (9,1 mmol) produktu, který se bez dalšího , zpracování použije.v následujícím stupni. .

9.3. 5,8-dimethyl-4-oxo-.3-fenyl-3, 5-dihydro-4H-pyridazino- .

[ 4,5-b] indol-l-óctová kyselina *

Pracuje se postupem jako, v příkladu 1.7., za použití 3,4 g (10,4 mmol) 5,8-dimethyl-4-oxo—3-fenyl-3,5-dihydror4H-pyřidazinp[ 4,5-b] indol-l-acetonitrilu. Získají se 2 g (5,8 mmol) produktu, který se bez- dalšího zpracování použije v následujícím stupni. \ ·,

9.4. N, N, 5,8-tetramethyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-acetamid

Pracuje se postupem jako v příkladu 3.2., za použití g (2,9 mmol) 5,8-dimethyl-4-oxo-3-fenyl-3,5~dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-octové kyseliny. Produkt se • · · · » · · · · é* í · : : : · ι :: i '«>··· ··« tie ·* ·· ,-24překrystaluje z 2-propanolu. Získá se 0,5 g (1,3 mmol) pevné látky o teplotě tání 209 až 210° C.

Příklad. 10. (sloučenina č. 43)

8-fluor-N,N-dimethyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-acetamid '

10.1. Ethyl-2-(ethoxykarbonyl)-5-fluor-a-oxo-lH-indOl-3-acetát ¹

Rnztnk 4Ω ml ÍR1R mmnl 1 or hvl - ch 1 r>-r rrl vnwl £ Ή n = *3 £ ml

-------- _χ--------~ j v u* tx v hu.

(313 mmol) chloridu titaničitého v .1 1 dichlormethanu se míchá po dobu 15 minut při teplotě místnosti.. Přidá se roztok 50 g (241 mmol) ethyl-5-f luor.-lH-indol-2-karboxylátu v •dichlormethanu a směs se míchá po dobu 2 hodin při teplotě místnosti. Směs· se vylije_x do vody, organická, fáze se separuje usazením, -promyje se zředěným roztokem· hydroxidu sodného a vysuší se nad síranem sodným. Získá se 31,5 g (102 mmol) produktu, ' který . se bez dalšího zpracování, použije v následujícím stupni.

10.2 . Ethyl-8-f luor-4-oxo-3-fe.nyl-3, 5-dihyďro-4H-pyridazino-

[ 4,5-b] indol-l-karboxylát

Pracuje se postupem jako v příkladu 1.3.,. za použití 5 g (16,2. mmol) ethyl-2-(ethoxykarbonyl)-5-fluor-a-oxo-lH-indol-3-acetátu a 9,5 ml fenylhydrazinu ve 150 ml kyseliny octové. Izoluje se 3,9 g (11 mmol) pevné látky, která se bez dalšího zpracování použije v následujícím stupni.

10.3. Ethyl-8-fluor-5-(methoxymethyl)-4-oxo-3-fenýl-3, 5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-karboxylát '

K suspenzi 0,66 g (16 mmol)· natriumhydridu ve 100 ml dimethylformamidu se přidá suspenze 3,9 g (11 mmol) ethyl-8-fluór-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-1-karboxylátu ve 200 ml dimethylformamidu. Směs se míchá pdo dobu 1,5 hodiny při teplotě 'místnosti a přidá se roztok

1,15 ml (14,3 mmol) chlormethoxymethanu v 10 ml tetrahydrofuranu. Směs se míchá po dobu 2 hodin, přidá se zředěná kyselina chlorovodíková a sraženina se izoluje filtrací a vysuší se za sníženého tlaku. Izoluje se 4,1 g. (10,4 mmol) pevné látky, která se bez dalšího zpracováni použije v následujícím stupni. . -

10.4- . '8-fluor-1’- (hydroxymethyl) -5- (methoxymethyl) -3-fenýl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-on

Pracuje se postupem jako v .příkladu 1.4·, za použití 4,1 g (10,4 mmol) ethyl-8-fluor-5-(methoxymethyl)-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro—4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-karboxylátu. Izoluje se 3,2 g (9. mmol) pevné látky, která se bez dalšího . zpracování použije v následujícím stupni. -

10.5, 1- (brommethyl).-8-fluor-5- (methoxymethyl )'-3-fenyl-

-.3, 5-dihydro-4H-pyridazino[ 4., 5-b] indol-4-oň

K roztoku 3,2 g (9 mmol) 8-fluor-l-(hydroxymethyl)-5- (methoxymethyl·) -3-fenyl-3,5^dihydro-4H-pyridazin©[ 4', 5-b] indol-4-onu a 6,3 g (19 mmol) tet rabrommet hanu ve 200 ml dichlormethanu se přidá 4,5 g (17,1 mmol) trifenylfosfinu. Směs se míchá po dobu 2 hodin,' přidá se .50 ml cyklohexanu a filtrací se izoluje sraženina, která se vysuší- za sníženého . tlaku. Izoluje se 2,9 g (7 mmol) pevné látky, která se bez dalšího zpracování použije v následujícím stupni.

10.6. 8-fluor-5-(methoxymethyl)-4~oxo-3~fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4·, 5-b] indol-l-acetonitril

Dvoufázová směs 2,8 g (6,7 mmol) 1-(brommethyl)-8-fluor-5-(methoxymethyl)-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b]indol-4-onu, 1,3 g (26 mmol) kyanidu sodného a 0,23 g (0,7 mmol) tetrabutylamoniumbromidu ve .100 ml dichlormethanu a 100 ml vody se intenzivně mÍQhá po dobu 12 hodin. Organická fáze se oddělí, několikrát se promyje vodou, vysuší se nad síranem sodným a zahustí se za sníženého tlaku. Přidá se s - 26 . _k · Ί diethylether a' filtrací se izoluje sraženina, která se vysuší za sníženého tlaku.. Izoluje se 2,l..g (5,8 mmol) pevné látky, která se bez dalšího zpracování použije v následujícím, stupni.

10.7. 8-fluor-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-octová kyselina . Pracuje se postupem jako v příkladu 1.7., .za použití 1,2 g (3,3 mmol) 8—fluor-5^(methoxymethyl)-4-oxo~3-fenyl-3, 5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l.-acetonítrilu. Po filtraci á vysušení se izoluje 1,1 g (3,2 mmol) pevné látky, která se bez dalšího zpracování použije v následujícím stupni.

10.8., 8-fluor-Ň,N~dimethyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-acetamid

Suspenze 1,7 g (10,5 mmol) 1,1-karbonylbis-lH-ímidazolu a 3 g (8>9 mmol).- 8-fluór-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-octové kyseliny ve 300 ml tetrahydrofuranu se irííchá .pří teplotě 40° C po dobu 3 hodin. Směs se ochladí , na teplotu místnosti.,· přidá se 1.0 ml zkapalněného dimethylaminu a směs se. míchá po dobu 2 hodin. Směs se nechá stát přes noc, poté se přidá 300 ml : vody a filtrací se izoluje sraženina, která se překrystaluje z dimethylformamidu. Získá se 0,8 g (2,2 mmol) pevné látky o teplotě tání 289 až 290°. C. ^; ' ·' ·

Příklad 11 (sloučenina č. 52) .

7-chlor-N,N-diethyl-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5^_dihydro~4H-pyridazinot 4,5-b] indol-l-acetamid

11.11 Ethyl-6-chlor-l-meťhyl-lH-indol-2-karboxylát

Pracuje se postupem jako v příkladu 1.1., za použití 8,0 g (35,8 mmol) ethyl-6-chlor-lH-indol-2-karboxylátu, 1,8 g .60% nátriumhydridu a 2,8 ml jodmethanu.

Po dokončení reakce se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku a zbytek se vyjme vodou.. Směs se extrahuje dichlcrmethanem., organická‘fáze se vysuší a zfiltruje a rozpouštědlo se odpaří- za sníženého tlaku. Zbytek s.e. chromatograficky vyčistí na sloupci silikagelu. Izoluje se 8,5 ’g (35,8 mmol) bílé krystalické sloučeniny, vykazující teplotu tání 75,5 až 76,5° C.

11.2. Ethyl-6-chlor-2-(ethoxykarbonyl)-1-methyl-a-oxo-

-lH-indol-3-acetát ' · .

K roztoku 4 ml (36 mmol) ethylchloroxoacétátu ve 100 ml 1-, 2-dichlorethanu se přidají '4 ml ' (36, 4. mmol)_; . chloridu titaničitého. Reakční směs se míchá po dobu 30 minut při teplotě místnosti, poté se přidá 7,8 g (32,8 mmol) ethyl-6-chlor-l-.methyl-lH-indol-2-karboxylátu a reakční směs se míchá po dobu dalších 4 hodin při teplotě místnosti·.

Poté se směs ochladí a přidá’se 200 ml dichlormethanu a 100 ml vody. Organická fáze se separuje usazením,.promyje se vodou, vysuší se nad síranem sodným, zfiltruj.e a zahustí za sníženého tlaku. Zbytek se chromatograficky vyčistí . na sloupci silikagelu. Izoluje se 9,4.· g (27,7 mml). produktu o teplotě tání 94 až 95° C.

11.3. Ethyl-7-chlor-5—meťhyl-4-bxo-3-fenyl-3,5-dihydro~4H-pyrídazino[ 4,5-b] indol-l-karboxylát

K roztoku 4,6 g .(13,6' mmol) ethyl-6-.chlor-2-(ethoxykarbonyl)-l-methyl-a-oxo-lH'-indol-3-acetátu ve 120 ml kyseliny octové se při teplotě místnosti'přidají 4 ml (40,6 mmol) fenylhydrazinu. Reakční směs se míchá po dobu 30. minut při - teplotě místnosti a poté po dobu' 4 hodin za varu pod zpětným chladičem.

Směs se ochladí a přidá se 350 ml dichlormethanu a 100 ml vody. Organická fáze se separuje usazením, promyje se.

- 28 nasyceným vodným roztokem hydřogenuhličitanu sodného a- poté vodou,· vysuší se nad síranem sodným, zfiltruje a zahustí -za sníženého tlaku. Zbytek se chromatografíčky vyčistí· na sloupci silikagelu. Izoluje se 4,1 g (10,7 mml) produktu o teplotě tání -216 až 218,5° C,.

11.. 4 . 7-chlor-l- (hydroxymethyl) -5-methyl-3-fenyl-.3, 5-dihydro-4H-pyrídazino[ 4,5-b] indol-4-on .

. K roztoku 4)04 ,g. (10,6 mmol) et.hyl-7-chlor-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,.5-dihydro-4H-pyrídazino[ 4,5-b] indol-l-karboxylátu ve 150 ml te.trahydrofuranu se přidá 2,5 g (66,1 mmol) natriumborohydridu. Za . míchání se postupně přidá 2,25 ml methanolu a.poté se směs zahřívá k varu pod zpětným chladičem po dobu 5 hodin. Směs .se vylije do ledově chladného 1M roztoku kyseliny chlorovodíkové a nerozpustný produkt se oddělí 'filtrací na nálevce ze’slinutého skla. Tento produkt se promyje vodou a diethyletherem a poté se vysuší.

Izoluje sé 3,3 g (9,7 mmol) sloučeniny 'uvedené v názvu ve formě bí.lé pevné látky, která -se bez dalšího zpracování použije v následujícím stupni,. Teplota tání produktu činí 219 až 220,5° C.. ·

11.5. .7-chlor-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridažino[ 4,5-b] indol-1— karboxaldehyd

K roztoku 3,3 g (9,7 mmol) 7-chlor-l-(hydroxymethyl)-5-methyl-3-fenyl-3,5-di.hydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-onu ve · 300 ml dichlormethanu se přidá 5,7 g (65,6 mmol) oxidu manganičitého a reakční směs se míchá za varu pod zpětným chladičem po dobu 24 hodin. ,

Poté se. směs ochladí a zfiltruje přes teflonovou membránu, pevná látka se promyje dichlormethanem a filtrát se poté zahustí za sníženého tlaku.

Izoluje se 2,88 g (8,53 mmol) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé pevné látky, která se bez' dalšího zpracování použije v následujícím stupni. Teplota tání produktu činí 235 až 236’ C. - ^u .

11.6. 7-chlor-5-methyl-4-oxo-3-feríyl-3,5-dihydro-4H-pyri- . . dazino[ 4,5-b] índo'1-l-a.cetonitril / '

K roztoku 2,14 g (10,96 mmol) (4-methylbenzensulfonyl)• methylisokyanidu v 50 ml 1,2-dimethoxýethanu se .po malých částech . přidá 1,27 g (10,96 mmol) kalium^-1,1 — dimethyl^- ethoxidu', reakční směs se míchá po dobu 30 minut při teplotě -60° C, přidá se 2,88 g (8,53'mmol).7-chlor-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro^-4H-pyridazino[ 4,5-b]indol-l-karboxaldehydu a reakční' směs se míchá po dobu .3. hodin a 30 minut při teplotě -60° C. Přidá se 9 ml methanolu a reakční směs se . dále míchá po dobu 30 minut při teplotě místnosti a po dobu 1 hodiny za varu pod zpětným chladičem. ' _f

Směs se ochladí a zahustí za sníženého tlaku,ke zbytku se'přidá voda, 5 ml kyseliny octové a 200 ml dichlormethanu, organická fáze se separuje usazením a vodná fáze se extrahuje dichlormethanem. Organické fáze se smíchají,·. promyji se . vodou, vysuší se nad síranem sodným, zfiltrují a zahustí za sníženého tlaku a zbytek se' chromatografíčky vyčistí na sloupci silikagelu. ' . '

Izoluje se 1,87 g (5,36 mmol) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé pevné· látky, která se bez dalšího 5' zpracování použije v následujícím s-tupni. Teplota tání produktu činí 305 až 315° C.

11.7. Methyl-7-chlor-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro^-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-acetát .·

K roztoku 1,83 g (5,25 mmol) 7-chlor~5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3, 5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-acetonítrilu ve 250 ml methanolu se přidává chlorovodík až do nasycení roztoku a poté se reakční směs míchá po dobu 4 hodin za varu pod zpětným chladičem. Směs se ochladí, zahustí se za

- 30 sníženého tlaku a ke zbytku se přidá 25 ml vody a 25 ml methanolu.. P,Q promíchání se nerozpustný produkt izoluje filtrací, proinyje . se vodou a diethyletherem, vysuší se ^; á chromátograficky se vyčistí na sloupci silikagelu. ^;

Izoluje se 1,00 g (2,62 mmol)· sloučeniny uvedené v názvu ve ^; formě bílé pevné látky o teplotě tání 188,5 až 190° C. . ,· , · . -

11.8 .. 7-chlpr-N,N-diethyl-5-methýl-4-oxq-3-fenyl-3, 5-dihydro-4H-pyriďazino[ 4,5-b] indol^_l~acetamid

K roztoku 2 ml (4 mmol) trimethylaluminia. (2M v toluenu) ve 30 ml toluenu se v atmosféře argonu při teplotě 0° C přidá 0,41 ml (4 mmol) diethylaminu, reakční směs se míchá po dobu 20. minut při teplotě' místnosti, přidá se 0,095 g (.0,25'. mmol) methyl-7-chlor-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5~dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-acetátu a reakční směs se míchá za varu pod zpětným chladičem· po dobu 4 hodin.

Směs se ochladí na teplotu .4° C, přidají se 3 ml vody a dichl ořme than, roztok se zfiltruj.e a filtrát se zahusti za sníženého tlaku. Ke zbytku se přidá voda, 1M kyselina chlorovodíková a .150 ml dichlormethanů, organická fáze se oddělí, promyje se vodou, vysuší se nad síranem sodným, zfiltruje 3 zahustí za sníženého tlaku. Zbytek se chromato-, graficky vyčistí na sloupci silikagelu. Po překrystalování z diethyletheru se izoluje 0,10 g (0,24 mmol.) sloučeniny uvedené v· názvu ve formě bílé .pevné látky vatového vzhledu. Teplota tání produktu činí 167 ,až 168° C.

Chemické, struktury a fyzikální· vlastnosti- některých sloučenin podle vynálezu jsou uvedeny pro ilustraci v následující tabulce.

- 31 Tabulka

O

č.	X	. Y	' Λ	:¾	t.t. . (°C).
. 1-	8-F	,Η	Me	NMe₂	248-249 .
2	8-F	Η	Me	NHMe.'	303-304
3	8-F	Η -	Me	NHCH₂Ph	298-299
4 '	8-F	' Η	Me	pyrrolidinyl .	268-269
5	-8-F	Η	Me	piperidinyl	, 248-249
' . 6	8-C1	Η	Me	^vNHMe	314-315
' 7	. 8-C1	Η	Me ·	NMe₂	250-251.
8	8-F	Η-	' -Et	• NHMe ·'..·	310-312
' ⁹	' 8-F	. Η ·.	Et	NMe₂	183-184 .
'10	8-F	Η	Me	NHEt.	291-292
11	9-Br .	Η '	Me	NHMe	267-268
12	8-F	Η	Me -	NHPr .	. 290-291
13.	8-F	Η	Me	morfolinyl.	. 259-260
14	8-F	Η	Me	4-Me-piperazinyl	233-234
. 15	8-OMe	Η	Me	•NMe₂	194-195
1 ¹⁶	8-OMe	Η	Me	NHMe	258-259 - .
17	8-Me	Η	Me	NMe₂	209-210
18	.8 -Me	Η	Me	. ' NHMe	268-269
19	8-Me	Η	Me	pyrrolidinyl	216-217

č.	' X . .	Y		. '	t.t. (°C)
20	8-E	. H .	^: Et	pyrrolidinyl	229-230
2L	, 8-F	H	Me	azetidinyl	236-237
22	8-F. ’	H .	Me	, 1,3-thiazolidinyl	246-247
'23'	8-OCH₂Ph	H	Me	pyrrolidinyl	203-204
’ 24	8-F	H .,	Me	3-EtO-pyrrolidinyl	204-206
25	8-Cl	H '	Me	pyrrolidinyl	261-262
26	H	H	Me	pyrrolidinyl	214-215
27	H	H	Me	NMe₂	214-215.
. 28	H	. ’ H	Me	NHMe	262-263
. 29	8-F	. H'	. Me .	NEt₂	179-180
^; 30	8-F	H	Me	NMeEt	231-232
31	9-Br	H ,.	Me	pyrrolidinyl	209-210
32 ·	8-F	H	Et	NMeEt	. 167-168
. 33	8-F	'. H	Et	. azetidinyl	.186-187 :
34	8-F	. 4-Cl	Me	pyrrolidinyl	241-242 .
35:.	8-F	'. 4-C1	Me	NMe₂ ·	.243-244
. 36	8-F , '	3-C1 ·	Me	NHMe	315-316
37	8-F .·	4-Cl	Me	NHMe '	290-291
38	9-Me	H	Me	pyrrolidinyl	214-215 - :
39 .	8-F	3-C1	Me	pyrrolidinyl	210-211
40	8-F	2-C1	' Me	pyrrolidinyl	248-249
4.1	8-F	H	H	pyrrolidinyl	242-243
' 42	8-F	2-C1	Me '	NMe₂.	226-227
⁴ 3.	8-F	. H	H	NMe₂	289-290
•44	9-F	H	Me	. NHMe	298-299
45	8-F	H '	Et	nh₂	> 260 .
46	8-F	H	Pr	NMe₂	167-168

' č.	X	Y			t.t. (°C)
.47	9-F	H	Me	pyrrolidinyl	194-195
48	' 9-F	H	Me	NMe₂	186-187 ·
49	8-F ,	4-OMe	Et	NMe₂	197-198 .-
'50	. 8-F -	4-OH	' Et	NMe₂	270
51.	7-Cl	H	Me	/ · NMe₂	229,5-230'
52	' 7-Cl	H	Me	NEt₂	167-168-
53	7-Cl '	' H	Me .	pyrrolidinyl	260-263
54.	. 7-Cl	H	Me	morfolinyl	273,5-274,5
55	7-C1 .	3-Me	Me	NMe, ' ¹ .	204-205,5
56	7-Cl .	3-Me	Me		200,5-201
57	7-Cl	3-Me	Me	pyrrolidinyl	268-269,5
58	7-Cl	3-C1 .	Me	NMe, ' 1 ²	'231-232
59	. 7-Cl '	3-C1	Me	NÉt₂	202,5-203
60'	7-Cl	3-C1	Me	pyrrolidinyl	• 257-258,5
61	7-Cl	3-C1	Me	piperidinyl	218-219
62	7-Cl	. 2-C1	Me	NMe₂	253-255
63	7-Cl	2-C1	Me	NEt₂	. . 206-208 '
64	. 7-Cl	; 2-C1	Me	pyrrolidinyl	295-297
65	7-Cl	4-Cl	'Me	NMe₂	- 235-237'
66	. 7-Cl	4-C1	Me	NEt₂	223,5-224,5
67 .	7-Cl·	4-C1 .	Me	pyrrolidinyl'	265-266
68	7-Cl	3-OMe	Me	NMe₂	200,5-202,5
69	7-Cl	3-OMe.	Me	NEt₂ >	201-202
70	7-Cl	3-OMe	Me	pyrrolidinyl	240-242
71	• 7-Cl	3-NO₂	Me	NMe;₂	275-277,5
72	7-Cl	3-NO₂	Me	NEt₂	228-228,5-
73	7-Cl	3-NO₂ .	Me	pyrrolidinyl	261-263

Č;	X	Y.		NR^	t.t. (°C)
74	7-C1	3-F	-Me	NMe₂	225-226,5
75	7-C1	3-F	Me	NEt₂	171-172 .
76	. 7-C1	3-F	Me	pyrrolidinyl	27.0-271-,5
77	. 7-C1 .	3,5- (Cl)₂	Me	NEt₂	239-240,5
78	7-C1 .	4-C1	Me	NMeEt	216,5-217,5

Legenda k tabulce:. ·

t.t. = teplota táni

Mé = methyl'·

Et = ethyl ’'

Pr = propyl

Ph = fenyl _Λ'

Sloučeniny podle vynálezu byly podrobeny farmakologickým.testům, které dokazují jejich působení jako terapeuticky, -'účinných látekStudie vazby na membrány pokud jde · o recepto.ry cy mozečku (benzodiazepin typu 1) á receptpry ω₂ míchy ..(benzodiazepin typu- 2) . .'

I

Afinita sloučenin podle vynálezu k receptorům mozečku a receptorům ω₂ míchy se stanoví variantou metody, kterou popsali S. Z. , Langer a S. Arbilla ve Fund. Clin. Pharmacol., 2, 159-170 (1988), za použití [ ³H] -flumazenilu_rmísto [ ³H] -diazepamu jako radioligandu.

Tkáň mozečku, nebo míchy se homogenizuje po . dobu 60 sekund ve 120 respektive 30 objemech ledově chladného pufru (50 mM Tris-HCl, ' pH 7,4, 120 mM chloridu sodného, 5 mM chloridu draselného) a poté se, po zředění na 1/3, suspenze inkubuje s [ ³H] -flumazenilem (specifická aktivita 78.Ci/mmol, New England Nuclear) v lnM koncentraci a se sloučeninami podle vynálezu v různých koncentracích, ve výsledném objemu

525 pl. Po 30 minutách inkubace při teplotě 0° C se vzorky zfi-ltrují za .sníženého tlaku na filtrech . Whatman GF/B® a okamžitě se promyji ledově chladným pufrem. .....

Specifická' vazba [ ³H] -flumazenilu se stanoví za ' Přítomnosti 1 μΜ neznačeného diazepamu. Údaje se analyzuji

L ‘ podle standardních metod a vypočítají se koncentrace IC₅₀,

----------k^-_B-een4^a-ce—ktex-é_in.h.ibují 50 %’ vazby [ ³H] -flumazenilu. , ----Hodnoty IC₅₀ nejvíce afinitniďh sloučenin podle .vynálezu lezi mezi 5 a 1000 nM pro receptory ω₃ mozečku a mezi 20 a .1000 nM pro receptory ω₂ míchy. , - ..

Studie anxiolytické účinnosti

Test konfliktu při příjmu pití \

Anxiolytická účinnost se vyhodnotí.na krysách v cestu ·’ konfliktu při přijmu pití podle metody, . kterou popsali J- R-.

Vogel, B. Beer.a D. E. Clody v Psychópharmacologica (Berl.), , ' 21, 1-7 (1971) .‘

Kryse se- neposkytuje voda po dobu 4 8 hodin. Pote se . krysa umístí do zvukotěsné komory, vybavené pipetou s vodou,. .

. . ' napojenou na anxiometr, dávající malý elektrický sok. po . každých 20. líznutích. Počet · přijatých šoků je automaticky zaznamenáván po :dobu 3 minut a umožňuje vyhodnotit anxioly# tickou účinnost testovaných· sloučenin. Výsledky se vyjádři jako minimální účinná dávka '(MED), t.j. dávka, kterou.se ' dosáhne významného zvýšení- počtu přijatých šoků' vzhledem k počtu pozorovanému u kontrolních zvířat.

Hodnoty MED 'u nejúčinnějších sloučenin podle vynálezu leží v tomto testu mezi 0,1 a 10 mg/kg při intraperitoneálním nebo orálním podání. · . <

- 3'6. Test ve. zvýšeném, křížovém labyrintu

Provedení 'tohoto testu, je modifikaci metody, .kterou popsali S. Fellow a S. File .ve Pharmacol. Biochem. Behav. (1986), 24, 525-529,. . , . Po období seznámení se s experimentálním, prostorem, trvajícím přibližně 24 hodin, se krysy jednotlivě umístí na centrální . plošinu, s čenichem, obráceným k jednomu z uzavřených ramen a po dobu · 4Τΐϋϋ^^ρνζτ>τ^η-ζ^ου^ . videokamery. Zaznamenává se čas strávený · zvířetem' v. •otevřených ramenech, počet vstupů do uzavřených ramen a do ^řotevřených ramen, počet pokusů vstoupit do otevřených' ramen, následovaných upuštěním od tohoto záměru, a zkoumání hran v otevřených ramenech. Výsledky se vyjádří pro každé zvíře: D jako procento průchodů do otevřených ramen vzhledem, k celkovému počtu vstupů do čtyř ramen zařízeni, 2) jako procento času stráveného v otevřených 'ramenech vzhledem k 'celkové době, trváni testu (4 minuty), 3) jako celkový počet pokusů provedených zvířetem,, od, kterých bylo, upuštěno, a 4). jako celkový počet zkoumání.

Testované látky še .podávají íntraperitoneálne nebo orálně ve zvyšujících se dávkách. Výsledky se vyjádří jao minimální, účinná dávka (MED), která vyvolá buď významné zvýšení (aktivity v otevřených ramenech) nebo významné snížení- (pokusů),., vzhledem k .chování pozorovanému u kontrolních zvířat.

' Hodnoty MED u. nejúčinnějších sloučenin podle vynálezu leží v tomto testu mezi 0,1 a 20 mg/kg při intraperitoneálním nebo orálním podání.

Studie hypnotické účinnosti

Sedativní nebo hypnotická účinnost sloučenin podle vynálezu se stanoví pozorováním jejich působení na krysí elektrokortikogram, pomocí metody, kterou- popsal H.

- 37 Depoortere, Rev. E.E.G. Neurophysiol., 10, .3, 207 214 (1980) a H. Depoortere a M. Decobert, J. Pharmacol., (Paris)-, 14, 2, 195-265 (1983). , , '

Testované sloučeniny se .podávají intraperitonealne ve zvyšujících . se dávkách. Nejúčinnější sloučeniny indukuji spánkové chování při dávkách v rozmezí od 0,1 do .30 mg/kg.

—Si:Tadř-e—an-ti-k-Gnv-ui-z.iy-ni-jlč-iimo_:S±ú—---.—__—.----------------------Účinnost na klonické křeče vyvolané.u krys injekcí pentetrazolu '

Provedení tohoto testu je modifikací metody, kterou popsali E. A. Swinyard a J. H. .Woodhead v Antiepileptic Drugs, Raven Press, New York, illl-126 (1982).

Testované sloučeniny se intraperitoneálně podají zvířatům .a po' 30 minutách se jim .intravenózně mjikuje 20 mg/kg pentetrazolu. Bezprostředně po injekci se podobu-o minut zaznamenává počet zvířat vykazujících·klonické křeče.‘

Výsledky se vyjádří jako AD₅₀, t, j . dávka, která chrání 50 % zvířat, přičemž výpočet se provede metodou kterou popsali J- T. Lichtfield a F. Wilcoxon ,(J.' Pharm. Exp. Ther.. (19491, 96, 99-113) na základě 3 .nebo 4 dávek, z nichž každá se podává skupině 8 až 10 krys.

Hodnoty ,AD₅₀ .nejúčinnějších sloučenin podle vynalezu leží mezi 0,1 a- 10 mg/kg při intraperitoneálním nebo orálním podání.

Studie antikonvulživní účinnosti

Účinnost na isoniazidem vyvolané křeče u myší

Vnitřní účinnost sloučenin se- stanoví pomoci doby latence do . nástupu křečí vyvolaných subkutánním podáním isoniázidu v dávce 800 mg/kg současně s testovanou

-. 38.sloučeninou injikovanou intraperitoneálně; podle metody kterou popsali' G. Perrault, E. Morel, D. Sanger a B..Zivkovic v Eur. J. Pharmacol., 156, 189-196 (1988). Výsledky se vyjádří jako AD₅₀, t.j. dávka, ’· která vyvolává 50 %'maximál- niho účinku, vzhledem ke 'kontrolním zvířatům. .Stanovení. se provede na základě 3 nebo 4 dávek, z nichž každá se podává skupině- 8 až 10 myší. Hodnoty AD₅₀ nejúčinnějších sloučenin podle vynálezu leží v tomto testu mezi 1 a 20 mg/kg pri intraperitoneálním podání a y závislosti' . na. konkrétní sloučenině může maximální účinek dosahovat az 400 %- .

Výsledky testů,, kterým byly podrobeny sloučeniny podle vynálezu, prokazují, že tyto sloučeniny in vitro vytěsňuji [ ³H] -flumazenil z ' jeho specifických vazebných, míst . ω_τ „v mozečku a specifických, vazebných míst ω₂ v míše, vykazuji afinitu k místům ω, a ω₂ nacházejícím se v 'makromolekularnim komplexu GABA, - místa ω - chlorový kanál.

In vivo působí sloučeniny podle vynálezu jako úplni nebo částeční agonisté vůči těmto subtypům receptorů.·

Sloučeniny podle vynálezu, vykazují anx.iolyticke, hypnotické a antíkonvulzívni vlastnosti.

V důsledku toho lze sloučeniny, podle vynálezu použit k léčení potíží spojených s poruchami GABA-ergního přenosu., jako je úzkost', poruchy spánky, epilepsie, křečovitost, kontrakce svalů, kognitivní poruchy, · abstinenční příznaky související s alkoholem, tabákem nebo drogami, a podobné.

. Sloučeniny^! podle vynálezu lze rovněž použít k léčení Parkirisonovy nemoci a vše.ch typů extrapyramidálníčh syndromů. Konečně je lze použít rovněž k premedikaci a jako celková anestetika pro vyvolání nebo/a udržování anestezie, nebo jako lokální ' anestetika, popřípadě . v kombinaci s dalšími anestetiky nebo/a svalovými relaxanty nebo/a analgetiky.

Sloučeniny . podle vynálezu lze podávat ve formě

39.

libovolného' prostředku vhodného pro enterální, parenterální nebo transdermálni podání, jako jsou tablety,, dražé, kapsle, včetně tvrdých želatinových kapslí, suspenze nebo roztoky pro požití nebo injekce, , jako jsou ..syrupy nebo tekutiny pro plnění ampulí, transdermálni náplasti a podobně, v kombinaci s vhodnými nosnými nebo/a pomocnými látkami, přičemž tyto prostředky obsahují dávku, která umožňuje denní podání 1 až 1000 mg účinné látky;

Claims

P Á- T E. W T· O VE NÁROKY

-1-acetamidu obecného- vzorce I -

ve kterém

X představuje atom vodíku, atom halogenu, methylovou skupinu, methoxyskupinu nebo fenylmethoxyskupinu,'

Y znamená atom vodíku, 1 nebo 2 atomy halogenů nebo hydroxylovou skupinu, methoxyskupinu, niťroskupinu nebo methylovou.skupinu,

R, představuje atom vodíku nebo . alkylovou skupinu s' 1 až 4 atomy uhlíku, a symboly R₂ a R₃ nezávislé na sobě znamenají vždy atom vodíku, alkyíovou skupinu s 1 až . 4 atomy uhlíku nebo fenylmethylovou skupinu, nebo symboly R₂ a' R₃ společně s. atomem dusíku, který je nese, tvoří azetidinylovou, ·. pyrrolídinylovou, 3-ethoxypyrrolidinylovou, piperidinylovou,.morfolinylovou, 4-methyl. piperazinylovou nebo 1,3-thiazolídinylovou skupinu.·

1. Derivát 4-o.xp-3, 5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-
2. Derivát 4-oxp-3, 5-dihydro-'4H-pyridazino[ 4, 5-b] indol-1-acetamidu obecného vzorce I podle nároku 1, ve kterém

X‘ je v poloze 8 nebo 9 a představuje atom vodíku nebo atom halogenu,

Y znamená atom vodíku, ”

Rj představuje methylovou nebo ethylovou skupinu,

R₂ znamená atom vodíku nebo methylovou skupinu a R, představuje' methylovou skupinu,

- 41 nebo symboly R₂ a R₃ společně s atomem dusíku, který je nese, _Λ . tvoří azetidinylový nebo pyrrolidinylový kruh.

' .
3. Léčivo, .vyznačující s e tím, že je tvoří derivát . 4-oxo-3, 5-dihydro-4H-pyrida,zino[ 4,5-b] indol-1-acetamidu obecného vzorce I podle· libovolného z nároků 1 a r · '
4. Farmaceutický prostředek, v y z n a č u j i c í s e tím, že obsahuje derivát 4-oxo-3_,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-acetamidu obecného vzorce I podle libovolného z nároků 1 a 2, · v· kombinaci s nosnou nebo/a pomocnou látkou.