CZ2000320A3

CZ2000320A3 - Deriváty 4-oxo-3,5dihydro-4H-pyridazino[4,5-b]indol-1-acetamidu a farmaceutický prostředek, který je obsahuje

Info

Publication number: CZ2000320A3
Application number: CZ2000320A
Authority: CZ
Inventors: Yannick Evanno; Laurent Dubois; Mireille Sevrin; Frank Marguet; Jacgues Froissant; Régine Bartsch; Catherine Gille
Original assignee: Sanofi-Synthelabo
Priority date: 1997-07-30
Filing date: 1998-07-28
Publication date: 2000-05-17
Also published as: PT1000063E; TW506971B; RU2197490C2; NO20000462L; ES2186212T3; NZ502361A; JP2001512122A; DE69808921T2; PL194245B1; SK1292000A3; UA57088C2; SI1000063T1; WO1999006406A1; DK1000063T3; NO313963B1; BR9811582A; US6262045B1; EP1000063B1; CN1265108A; CZ290011B6

Description

Oblast techniky . '

Vynález se týká derivátů 4-oxo-3,5-dihydro-4H-pyri/ ' dazino[ 4,5-b] indol-l-acétamidu, jejich přípravy a léčiv a farmaceutických prostředků, které je obsahují.

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu jsou sloučeniny obecného vzorce I

(I) ve kterém

X představuje atom vodíku, atom halogenu, methylovou skupinu, méthoxyskupinu nebo fenylmethoxyskupinu,

Y znamená atom vodíku, 1 nebo 2 atomy halogenů nebo hydroxylovou skupinu, méthoxyskupinu, nitroskupinu nebo methylovou skupinu,

R_; představuje atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, a symboly R, a R₃ nezávisle na sobě znamenají vždy atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo fenylměthylovou skupinu, nebo symboly R₂ a R₃ společně s atomem dusíku, který je nese, tvoří azětidinyhovou, pyrrolidinylovou, 3-ethoxypyrrolidinylovou, piperidinylovou, morfolinylovou, 4-methylT ‘piperazinylovou nebo 1,3-thiazolidinylovou skupinu, přičemž vzorce těchto skupin jsou následující:

·'<· · ' · · ·'··· ···· 9 99- 999 ' 99 99OEt

Výhodné jsou. ty sloučeniny obecného vzorce I, . ve kterých : .

X je v poloze 8 nebo 9 - a představuje atom vodíku nebo atom halogenu,.

Y znamená -atom vodíku, '

R, . představuje methylovou nebo ethylovou skupinu,

R_;.' znamená atom vodíku nebo methylovou skupinu a

R, . představuje methylovou skupinu, - ' nebo symboly R, a R, společně s. atomem dusí ku, který je nese, tvoří azetidinylový nebo pyrrolidinylový kruh.

Sloučeniny obecného vzorce I lze připravit pomocí

.. . · . '. ; ·ν způsobů ilustrovaných v-následujících schématech.

(II).

(III)

(IV) • · · · · · • · • · • 9

- 3 • Φ ···» ·

Pokračování schématu 1

Ν' (IV)

(V)

• · • 9 • · · · • 9 9 999 9 9 * · · .9 · 9 · · · · · · « · 9 9 · ····»« · 9 9· ····

99·· V «a ··· 9 9 ··

-4-.

Pokračování schématu 1 (X) .

▼

Podle schématu 1 se sloučenina'obecného vzorce II, ve které mají symboly X a Rj výše definované významy a· R' znamená alkylovou. skupinu s-.l až 4 atomy¹ uhlíku, podrobí reakci s oxalylchloridem v aprotickém rozpouštědle, jako je toluen, při. teplotě mezi. 50° C. a teplotou varu pqd zpětným chladičem' a meziprodukt z této reakce se poté při teplotě místnosti podrobí reakci s alkoholem obecného vzorce ROH, kde R představuje alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, pro získání .diesteru obecného vzorce III, nebo se sloučenina obecného, vzorce II podrobí reakci s alkyl-chlorglyoxylátem v polárním aprotickém. rozpouštědle, jako je dichlormethan, při teplotě místnosti, , za přítomnosti Lewisovy' kyseliny, například chloridu . titaničitého, pro získání diesteru obecného vzorce III·. ' . · · '

Tento diester sě poté v kyselině octové, 'nejprve při teplotě místnosti á poté při teplotě varu pod zpětným chladičem, podrobí reakci s fenylhydrazinem, popřípadě, substituovaným skupinou Y, jak je definována výše, pro získání esteru obecného vzorce IV. Pokud R, představuje alkylovou skupinu, přemění se tento ester na odpovídající alkohol obecného vzorce V redukcí pomocí redukčního činidla, jako je natriumborohydrid, v rozpouštědle, jako je tetrahydro.furan, za přítomnosti - alkoholu, například, methanolu. Tento ·· ···· ·· φ ·· ··.

9 9 9·9 '·9 4 99'9·..

9 99 9 999·

9 9 9 9 » · · · · · ·' · ··.·«··(*

99 9 9 9 9 9' · 9 9 9 9··

- 5 alkohol obecného _: vzorce V se následně přemění na halogenovanou sloučeninu obecného vzorce VIII libovolnou reakcí známou odborníkovi v oboru,, například reakcí s tetrabrommethanem za přítomnosti trifenylf-osfinu, v rozpouštědle, jako' je dichlormethan, nebo působením chloračního činidla, jako je methan.sulfonylchlorid, ve, směsi rozpouštědel, jako je tetrahydrofuran a pyridin.

Následně se provede nukleofilní substituční reakce s kyanidovým iontem, buď ve směsi polárních rozpouštědel, jako. je dimethylformamid a voda, při teplotě 20 až 80° C, nebo ve dvoufázové směsi, jako je.· voda a dichlormethan, při teplotě mezi teplotou místnosti , a teplotou varu pod zpětným chladičem, za přítomnosti katalyzátoru fázového přenosu, pro získání sloučeniny obecného vzorce IX..

Následně se provede kyselá hydrolýza, například za použití směsi kyseliny octové a kyseliny chlorovodíkové, při teplotě varu pod zpětným chladičem, nebo bázická hydrolýza, například za použití hydroxidu draselného ve směsi rozpouštěť del, jako je voda a 2-methoxyethanol, při teplotě varu pod zpětným chladičem,, pro získání sloučeniny obecného vzorce X.

Tato kyselina se poté převede na sekundární nebo terciární amid obecného vzorce. I reakcí s. aminem obecného vzorce ,-HNR₂R₃, kde mají symboly ’ R₂ a R₃ výše , definované významy, kterážto.reakce probíhá.například přes intermediámí imidažolid získaný reakcí s 1,1'-karbonylbis-lH-imida.zol.

Pokud je žádoucí získat výslednou sloučeninu obecného vzorce I, ve které R_} představuje atom vodíku, ₍je možné přeměnit 'sloučeninu obecného vzorce IV, kde Rj představuje atom vodíku, na sloučeninu obecného vzorce IV, kde R_r znamená chránící skupinu', jako je methoxymethylová skupina, například alkylační reakcí, která je odborníkovi, v oboru, známá. V reakcích · podle schématu 1 se poté pokračuje až do získání sloučeniny obecného vzorce IX a následnou kyselou hydrolýzou.

• · této sloučeniny., kterou , se současně odsťrahí methoxymethylová chránící .skupina, se získá sloučenina obecného vzorce X, kde R. představuje atom vodíku.

Schéma 2

• · · · · · « ·. · • ' · . · « · · · .φ » « · • · · · · · ,·· · ο · · · * . « · · · · « • · · · · ·'·-·· ···· · ·♦ ··< ·· · . Podle schématu 2 se sloučenina obecného vzorce II, jak je definována výše, přemění na sloučeninu obecného vzorce VI libovolným 'způsobem známým odborníkovi v oboru, například elektro.filní reakcí v kyselém prostředí., Sloučenina obecného vzorce VI se poté v kyselině octové, nejprve pří teplotě místnosti a pote při teplotě varu pod zpětným chladičem, podrobí reakci s fenylhydrazinein, popřípadě substituovaným skupinou Y, jak je definována výše.· Získá se sloučenina obecného vzorce, VII, . která se .přemění na odpovídající halogenovaný derivát obecného vzorce VIII reakcí radikálového typu, například za použití N-bromsukcinimidu, v rozpouštědle, . j ako ' j.e tetrachlormethan, za přítomnosti činidla jako je 2,2'-azobis-(2-methylpropionitril). Sloučenina obecného vzorce VIII se následně podrobí reakcím popsaným v souvislosti se schématem 1.

Pokud, je to: žádoucí, je možné přeměnit sloučeninu obecného vzorce I, ve které X představuje' atom halogenu,, na sloučeninu obecného vzorce I, ve které X představuje methylovou skupinu, libovolnou reakcí známou Odborníkovi v oboru, například za 'použití tetramethyls.tania za přítomnosti komplexu palladia. . .

Podobně lze sloučeninu obecného vzorce I, ve které Y představuje methoxyskupinu,' přeměnit na .sloučeninu obecného vzorce I, ve které Y znamená hydroxyskupinu, lihobolným známým způsobem, například působením bromidu boritého, v chlorovaném rozpouštědle, jako je dichlormethan.

Pokud je to žádoucí, je rovněž možné přeměnit sloučeninu obecného .vzorce I, ve které X představuje atom chloru, na sloučeninu obecného vzorce I, ve které' X znamená atom vodíku, například hydrogenací za přítomnosti palladia na aktivním uhlí.

• · · · · · « · 4 • 4	• · « · 4 ·	« • 4	« · ’« 4 • 4	9 9 9 · • «
• 4	• ·	•	' 4 ·	• · ·
·,· · · *	• 4	* 4 ·	9 9	4'· .

Schéma 3

(V) (XI) (XII) (XIII) (I)

- 9 Podle schématu 3 se sloučenina obecného vzorce V, ve které Rj představuje alkylovou .skupinu a X znamená ₇atom chloru, přemění na sloučéninú obecného vzorce XI oxidací alkoholové funkční skupiny, například za použití oxidu manganičitého v rozpouštědle, jako.je dichlormethan. Aldehyd obecného vzorce XI se následně přemění na nitril obecného' vzorce XII reakcí s (4-methylbenzensulfonyl)methyliso.kyanidem (TosMIC) v rozpouštědle’, jako je 1,2-dimethoxyethan, ·. za přítomnosti báze, jako je kalium-1,1-dimethylethoxid. Nitril obecného vzroce XII se poté přemění na. ester obecného vzorce XIII, ve kterém R představuje nižší alkylovou skupinu, působením kyseliny, jako je kyselina chlorovodíková, v alkoholickém rozpouštědle obecného vzorce R”OH. .

Nakonec se.tento ester obecného vzorce XIII přemění na sekundární nebo terciární amid. obecného vzorce I reakcí s aminem obecného vzorce HNR₂R₃, ve kterém mají symboly R₂ a .R₃výše definované významy, například za přítomnosti trialkylaluminiového derivátu, v rozpouštědle, jako je toluen·.

Výchozí sloučeniny obecného vzorce II, zejména ' ty,, ve kterých R₃ představuje atom vodíku, jsou popsány v literatuře. Pokud je. to žádoucí, lže sloučeninu obecného vzorce II, ve které Rj představuje atom vodíku, podrobit alkylační reakci · pro získáni sloučeniny sloučeniny obecného vzorce II, ve které R₁ znamená alkylovou skupinu.

Následující , sloučenin podle infračervená (IR) příklady vynálezu.

spektra a získaných.sloučenin ilustrují přípravu některých Elementární . mikroanalýzy a NMR-spektra potvrzují struktury

Čísla sloučenin uváděná v závorkách v.názvech příkladů odpovídají číslům v prvním sloupci tabulky 1 uvedené dále.

·· · ·· » · · · ' · · ·· « · · « · · · *' · * · , · · · · · · · * • « · « « · · · · · · • ' · · · .· · · · · ···· · ·· *·« . ** ·9

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1 (sloučenina č. 9)

5-ethyl-.8-fluo.r-N/N-dimethyl-4-oxo-3-fenyl~3, 5-dihydro-4'H;p.yridazino[ 4,5-b] indol-l-acetamid

1.1. Ethyl-l-ethyl-5-fluor-lH-indol-2-karboxylát .

Suspenze .3,8 g (95 mmol) 6.0% natriumhydridu (předem promytého petroletherem) a 15 g (72,4 mmol) ethyl-5-fluor-lH-irídol-2-karboxylátu ve 100 ml dimethylformamidu se míchá po dobu 2 . hodin. - při teplotě místnosti. Následně se přidá

7,5 ml.. (93, 7 mmol) jodethanu, - v roztoku ve 20 ml dimethylformamidu. Reakční směs se míchá po.dobu 10 hodin při teplotě místnosti a poté se vylije do, ledově chladné vody. Směs se extrahuje diethyletherem.. Organická fáze . se několikrát promyje vodou, vysuší se nad síranem hořečnatým a zahustí za sníženého tlaku. Získá se 17 g (72 mmol) žlutého oleje, který se bez dalšího zpracování použije v následujícím stupni.

1.2. Methyl-2- (ethoxykarbonyl) -l-ethyl-5-f luor-a-oxo-lH-indol-3-acetát ' .

Roztok 17 g (72 mmol) ethyl-l-ethyl-5-fluor-lH-indol-2-karboxylátu a 7,4 ml- (84,5 mmol) oxalylchloridu v 500 ml toluenu se zahřívá k.varu pod zpětným chladičem po dobu '6 hodin. Přidá se dalších 5 ml (57 mmol) oxalylchloridu, směs se zahřívá po dobu další 1' hodiny k varu pod zpětným chladičem a poté se nechá vychladnout na teplotu místnosti. Přidá se 200 ml methanolu, směs se míchá po dobu 10 minut a rozpouštědla se odpaří za sníženého tlaku. Výsledný olej se’ vyjme dichlormethanem a organická fáze se promyje vodou, vysuší se nad síranem hořečnatým a zahustí za sníženého tlaku. Po překrystalování z 2-propanolu se získá 14 g (43,6 mmol) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé pevné látky.

1.3. Methyl-5-ethyl-8-fluor-4^Joxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazinof 4,5-b] indol-l-karbcxylšt

K roztoku 14 g (43,6 mmol) methyl-2-(ethoxykarbonyl)• ,i-ethyl-5-fluor-a-oxo-lH-indol-3-acetátu vé 150. ml kyseliny octové se při teplotě místnosti přidá. 18,4. ml (187,2 mmol) fenylhydrazinu a reakční Směs ťe míchá po .dobu 30 minut při *·? · teplotě místnosti a poté po dobu 2 hodin za varu'pod zpětným chladičem.. Směs. se ochladí, přidá se .100 ml vody a filtrací «

se oddělí·nerozpustný materiál, který, se promyje na nálevce ze slinutého skla. směsí vody a acetonu v poměru 70 : 30.

Izoluje se tak 10,5 g (28,6 mmol) bílé pevné látky, která se bez dalšího zpracování použije'v následujícím stupni.

1.4. 5-ethyl-8-f luor-1-(hydroxymethyl)-3.-fenyl-3, 5-dihýdro.. -4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-on

K roztoku 10 g (27,3 mmol) methyl-5-ethyl-8-fluor-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino( 4,5-b]. indol-l-karboxylátu ve -200 ml tetrahydrofuranu a 5*, 8 ml methanolu se při teplotě, místnosti v několika částech přidá 5,1 g (135 mmol) natriumborohydridu a směs se míchá po dobu 4 hodin za varu pod zpětným chladičem. Poté se směs vylije do ‘ledově chladného 0, IM roztoky kyseliny chlorovodíkové, filtrací se < oddělí nerozpustný materiál, který se promyje na nálevce ze slinutého skla vodou a diethyletherem a' poté se vysuší.'

Izoluje .se tak .7,2 g· (21,4 mmol) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé pevné látky, která se bez dalšího zpracování «· . použije.v následujícím stupni. . . ' ¹ 1.5. 1-(brommethyl)-5-ethyl-8-fluor-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-on

K roztoku 7,2 g (21,4 mmol) 5-ethyl-8-fluor-l-(hydroxymethyl)-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-onu a

15,3 g (46,13 mmol) . tetrabrommethanu v 500 ml dichlormethanu se v několika částech přidá 11,5 g (43,84 mmol) trifenylfosfinu a roztok se míchá po' dobu. 12 hodin při teplotě » · · · · · · · · • ·

- 12 ·· ·♦·· ···· «

I a poté se zahustí na 1/3.

promyje se etherem a vysuší dalších 3,2 g (8 mmol) pevne místnosti..

Směs se zahustí na .1/3 za sníženého tlaku, a sraženina se izoluje filtrací, promyje se etherem a .vysuší se za sníženého . tlaku. Získají se 4 g (.10 mmol) pevné/látky. K_:matečnému louhu se přidá 300 ml dichlormethanu, 8 g (24,1.mmol) tetrabrommethanu a 5 g (19,06 mmol) trifenylfosfinu, roztok' se míchá po ,dobu 12 hodin při teplotě .místnosti Sraženina se izoluje filtrací, se za sníženého tlaku. Získá se.

á 4* V 5 r ·, ’ j.3. c.v j .

..6. 5.-eťhyl-8-fluor-4-oxo-3-fehyl-3, 5-dihydfp-4H-pyridazi-.

' no[ 4,5-b] indol-l-acetonitril

Dvoufázová směs .7,2 g (18 mmol)· 1-(brommethyl)-5-ethyl-8-fluor-3-fenyl-3, 5~dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-cnu, 3,53 g (72 mmol) kyanidu sodného a 0,58 g (1,8 mmol) tetrabutylamoniumbromidu ve 300 ml dichlormethanu a 150 ml vody se intenzivně míchá po dobu 12 hodin.. Organická fáze se oddělí, několikrát se promyje vodou, vysuší s'e nad síranem hořečnatým a zahustjí se za sníženého tlaku. Izoluje se 5,8 g (16,8 mmol) sloučeniny uvedené v názvu, která se bez dalšího zpracování použije v následujícím stupni. .

1.7. 5-ethyl-8—fluor--4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro~4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-1-octová kyselina

Roztok. 5,8 g (16,8 mmol) 5-ethyl-8-fluor-4-oxo-3-fenyl-3., 5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-ačetonitrilu. . ve 200 ml směsi koncentrované, kyseliny chlorovodíkové a ledové kyseliny octové v poměru 1 : 1'se zahřívá k varu pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin.

Roztok se ochladí, přidá· se 100 ml vody, nerozpustný materiál se izoluje filtrací . a důkladně se promyje vodou a etherem na nálevce ze slinutého skla..

Po vysušení v peci se získá 5,2 g (15 mmol) bílé pevné

0,7 g (4,3 mmol) tetrahydrofuranu se

KeaKcm směs látky, která se bez dalšího zpracování použije v následujícím stupni .·

1.8. 5-ethyl-S-fluor-N,N-dimethyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro- 4H-pyridazino[ 4,.5-b] indol-l-acetamid - ..

Suspenze 1 g. (2,73 mmol) ’5-ethyl-8-fluor-4-oxo~3-fenyl-3,5-dihydro-,4H-p.yridazino[ 4,5-b] indol-l-octové kyseliny a 1,1'-karbonylbis-lH-imidazolu . ve 20Ó ml míchá po dobu 3 hodin při teplotě 50° C.

se ochladí na teplotu. 25° C, přidá se nadbytek zkapalněného dimethylaminu a reakční směs se míchá po dobu 12 hodin při teplotě místnosti. Poté se směs zahustí za sníženého tlaku, přidá se 100 ml dichlormethanu a .100 ml vody a organická fáze· se oddělí, promyje se vodou, vysuší se nad síranem hořečnatým a zahustí se za sníženého tlaku. Výsledný olej se vykrystaluje z etheru.

Po filtrací a.‘překrystalování z ethylaeětátu se izoluje 0,75 . g (1,9 mmol) bílých krystalů o. teplotě tání 183 až • 184° C. I

Příklad 2 (sloučenina č. 25) l-[ 2-(8-Chlor-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridázino[ 4,5-b] indoi.-1-yl)-1-oxoethyl] pyrrolidin '.' .‘1. Methyl-5-chlor-2- (ethoxykarbonyl) -1-methyl-a-ox.o-lH-indol-3-acetát

K roztoku 31,5' g (133 mmol). ethyl-5-chlor-l-methyl-lH-indol-2-kárboxylátu ve 100 ml toluenu zahřátému na teplotu 60° C se přidá 15 ml (170 mmol) oxalylchloridu a směs' varu pod zpětným· chladičem po dobu 1 hodiny. · se ochladí, přidá se 50 ml methanolu, směs se sníženého tlaku a zbytek se vyjme 100 ml dichlormethanu . a·. 50 ml' vody. Přidá se hydrogenuhličitan se zahříva.k

Roztok zahustí za

4 ···· 4 4 · .44 · · « · · 4 · 44 · 4 '4 · '4 4 4 4 ·' 4 4·· «4 · · · · ··*··· • · 4 4 · 4 · 4 . ·

44·· 4 44. 444' 44 ··'

- 14' - sodný, .organická fáze se' oddělí a vysuší se nad síranem hořečnatým, rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku, zbytek se., trituruje s etherem a sraženina se izoluje filtrací a vysuší se za sníženého tlaku. Získá se 19 g (59 mmol) pevné látky o teplotě tání 119 až 120° C.,

2.2. Methyl-8-chlor-5-methyl-4-.oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-i-karboxylát '

Roztok 19 g (59 mmol) . methyl-5-chlor-2-(ethoxykarbonyl)-l-methyl7a-oxo-lH-indol-3-acetátu a .26 g (240 mmol) fenylhydrazinu ve 250 ml kyseliny octové se zahřívá k varu pod zpětným chladičem po dobu 2· hodin.· Směs se ochladí, přidá

se 250 ml směsi· vody	a acetonu 'v poměru	1- : 1 a	směs	se nechá
stát při teplotě 4° '	C po dobu 15 hodin.
. Sraženina se.	izoluje filtrací,	) ‘promyj e	se .	vodou a
acetonem á vysuší se	za sníženého tlaku..			1
Získá se 17,4	g (47 mmol) pevné	látky ' o	teplotě tání-

265 áž 2.66° C. /

2.3. 8-chlor-l-(hydroxymethyl)-5-methyl-3-fenyl-3,5-dihydro -4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-on

Roztok 17,2 g (47- mmol) methyl-'8-chlor-5’-methyl-4-oxo-. -3-fenyl-3, 5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] índol-l-karboxylátu,. 8/7 g (230 mmol) natriumborohydridu· a 9,4 ml (230 mmol) methanolu ve 300 ml tetrahydrofuranu se zahřívá k varu.-.pod zpětným chladičem po dobu 4 hodin. Poté se . směs ochladí.‘a vylije do míchaného roztoku 100 ml 2M kyseliny chlorovodíkové a 100 ml dichlormethanu. Sraženina se. izoluje filtrací, promyje se vodou a dichlormethanem a vysuší se za sníženého tlaku.

Získá se 15 g (44 mmol) pevné látky o teplotě tání 278 až 280° C.

9999·· 9 9 · ·· · ·

9 9 999 9 9 9 9

9 99 9 9999

- 15 9 9 9 9 9 9 · 9 ·

9999 9 99 999 99 99

2.4. 1-(brommethyl)-8-chlor-5-methyl-3-fenyl-3, 5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-on

Pracuje se postupem jako v. příkladu 1.5., za použití 15 g. (44 mmol) 8-chlor-l-(hydroxymethyl)-5-methyl-3-fenyl-3, 5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b) ihdol-4-onu.. Po několika zpracováních a vyčištěních chromatografií na silikagelu se izoluje 15. ,g (.37 mmol) pevné látky o teplotě tání .253 až 254° C.

2.5. 8-chlor-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5~b] indol-l-acetonitril

Pracuje se postupem jakó ^; v příkladu 1.6., ža' použití'

12,5 g (3 mmol) 1-(brommethyl)-8-chlor-5-methyl-3-fenyl-. -3,5-dihydro~4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-onu ve směsi chloroformu a vody. Po vyčištění na sloupci silikagelu se získá 10 g (28' mmol) pevné látky o teplotě^- tání 230°, C.

2.6. 8-chlor-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-octová kyselina

Roztok 10 g (28 mmol) 8-chlor-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3, 5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-acetonitrilu ve směsi' 200 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové a 200 ml kyseliny octové se zahřívá po dobu 4 hodin na teplotu 100° C.. Roztok se zahustí za sníženého tlaku, zbytek se vyjme 250 ml vody a· sraženina se izoluje filtrací. Poté se promyje vodou a vysuší se za sníženého tlaku.' Získá se 10,2 g (27 mmol) pevné látky ,o teplotě tání 206 až 208° C. ,

2.7. l-[ 2-(8-chlor-5-methyÍ-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] inďol-l-yl)-1-oxoethyl] pyrrolidin

Roztok 1,5 g (4 mmol) '8-chlor-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3, 5-dihydro--4H-pyridazino[ 4,5-b] ihdol-l-octové kyseliny a

1,2 g (7,4 mmol) 1,.1'-karbonylbis-lH-imidazolu v ..tetrahydrofuranu se míchá po dobu 1 hodiny při teplotě 50°.C.

•9 9999

- 16 Směs se. ochladí a přidá se nadbytek pyrrolidinu. Směs se míchá po dobu 15 hodin a poté se filtrací izoluje sraženina, která se promyje vodou a etherem a. překrystaluje se z ·2-propanolu. Získá se 0,65 g (1,5 mmol) pevné látky o teplotě tání 261 až 262° C. '

Příklad 3 (sloučenina č. 27)

N, N, 5-trimethyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazi.no[ 4,5-b]indol-l-acetamid

3.1. 5-methyr-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol⁴-1-octová kyselina

Roztok 3,3 g (9 mmol) 8-chlor-5-methyl-4-oxo-3-fényl-3, 5-dihydro-4H-pyridaz.ino[ 4,5-b],indol-l-octové .kyséliny, 2,8 g (44 mmol) amoniumformiátu a 1,8 \g 10% palladia na aktivním uhlí v 500 ml ethanolu s.e zahřívá k ,varu pod· zpětným chladičem po dobu' 5 hodin. .

Reakční Směs se ochladí, přidá se - dichlormethan, katalyzátor se odstraní filtrací přes vrstvu křémel.iny a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Získají se 3 g (9 mmol) sloučeniny uvedené v názvu, která se bez dalšího zpracování použije v následujícím stupni. .

3.2. N, N,5-trimethyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-acetamid >

Suspenze 1 g (3 mmol) 5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-octové kyseliny a 0,7 g (4,3 mmol) 1,1'-karbonylbis-lH-imidazolu ve 200 ml tetrahydrofuranu se míchá po dobu,. 2 hodin při teplotě 60° C. Reakční směs se ochladí na 25° C, přidá se nadbytek zkapalněného dimethylaminu v roztoku v tetrahydrofuranu a reakční směs se míchá po dobu 72 hodin při teplotě místnosti.

Poté . se směs zahustí za sníženého tlaku, přidá se 300 ml vody a filtrací se izoluje sraženina, která se promyje

- .17 vodou a etherem a překrystaluje se z 2-propanolu. Získá se 0,75 g (2 mmol) pevné látky o. teplotě tání 214 až 215° C.

Příklad 4 (sloučenina, č.. 26) l-[ 2-(5-methyl-4-oxo-3-fenyl.-'3,5-dihydřo-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-yl)-1-oxpethyl] pyrrolidin ,

Pracuje se- postupem . jako v příkladu 3.2..., za použití 1 g (3 mmol) 5-methyl-4.-oxo-3-fenyl-3, 5-dihydro-4H-pyri.dazino[ 4,5-b] indol-l-octové kyseliny a nadbytku pyrrolidinu. Produkt se překrystaluje z 2-propanolu. Získá se 0,5 g '.(1,3 mmol) pevné látky o teplotě táni ‘214 až¹ 215° C..

-Příklad 5 (sloučenina č. 31) ‘ . , l-[ 2-(9-brom-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihyďro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-yl)-1-oxoéthyl] pyrrolidin

5.1. Methyl-2-azido-3-(2-bromfenyl)pro.p-2ⁱ-ěnoát_/

K roztoku 47'6 ml natřiummethoxidu (30% v methanolu) ve 950 ml methanolu se za mechanického míchání' v atmosféře β

dusíku při teplotě -10’ C až -8° C v průběhu ;3 hodin po kapkách přidá roztok 75 ml' (6.24 mmol). 2-brombenzaldehydu a 252 g (2,2 mmol) methylazidpacetátu ve 160 ml methanolu. V míchání se pokračuje po dobu .2 hodin při teplotě pod 5° C a poté se směs vylije na 1,5 kg ledu. Sraženina se izoluje filtrací, promyje se vodou a vysuší se za sníženého tlaku bez přístupu světla. Získá se 116 g (0,41 mol) pevné látky,· která ..se rychle použije v následujícím stupni.

5.2. Methyl-4-brom-lH-indol-2-karboxy,lát

Roztok 116 g (0,41 mol) methyl-2-azido-3-(2-bromfenyl)prop-2-enoátu v 1,5 1. tolueu se za mechanického míchání v průběhu 4 hodin po kapkách přidá k roztoku 2 1 toluenu zahřívanému k varu pod zpětným chladičem a v zahřívání k varu pod zpětným chladičem se pokračuje po dobu další 1 hodiny.

ΦΦ ΦΦΦΦ . ·· Φ ΦΦ . ·· .9 · . · ' · · Φ ·„ . φ ·· · • φ ΦΦ φ φφφ.·

Φ Φ Φ Φ Φ Φ ΦΦ · Φ Φ

Φ Φ ΦΦ Φ ΦΦΦΦ

ΦΦΦΦ Φ ΦΦ ΦΦΦ ΦΦ ΦΦ

Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se vyjme. 2 1 cyklohexanu. Filtrací se izoluje sraženina, která se promyje toluenem a vysuší se za sníženého tlaku,. Izoluje se 37,85 g ’ (149 mmol). produktu. Matečný louh se - zahustí za sníženého tlaku a zbytek . se chromatografický vyčistí na sloupci, silikagelu. Izoluje se dalších 12,2 g ,(48 mmol) produktu., . .

5.3. Methyl-4-brom-l-methyl-lH-indol-2-karboxylát

Pracuje se postupem jako v příkladu 1.1., za použití 20 g (79 ..mmol) methyl-4-brom-lH-indol-2-karboxylátu, 3,8 g· ,60% natriumhydridu a 6 ml jodmethanu. .Po ukončení reakce se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku a zbytek se vyjme .vodou. Směs se extrahuje ethylacetátem. Organická fáze se vysuší a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Produkt se -vysuší za sníženého tlaku. Získá se ,20,6 g (77. mmol) pevné látky o teplotě tání 85 až 86° C.

5.4. · · Methyl-3-ace.týl-4-brom-l-methyl-lH-indol-2-karboxylát

K roztoku 1.3,2 ml kyseliny .octové, 1,6 ml kyseliny fosforečné a 170 ml acetonitrilu se přidá' 33 ml anhydridu kyseliny trifluoroctové, směs se míchá po dobu 10 minut při teplotě místnosti a poté’ se přidá roztok 20,6 g (77 mmol) methyl-4-brom-.l-methyl-lH-indol-2-karboxýlátu ve · 120 ml .acetonitrilu. Směs se míchá po dobu 4 hodin při teplotě místnosti, poté se vylije do vody a extrahuje se etherem. Organická fáze se vysuší nad síranem.sodným, rozpouštědlo se odpaří za sníženého 'tlaku a zbytek se.vyjme směsí cyklohexanu a dichlormethanu. Sraženina se izoluje filtrací, promyje se etherem a vysuší se za sníženého tlaku. Získá se 18,8 g (61 mmol) produktu.

Matečný louh se zahustí a zbytek se chromatografický vyčistí na sloupci silikagelu. Izoluje se dalších 3,2 g (10 mmol) produktu.

·· ···» ·· φ« • ·· · • · · · · ·· · · · · f · · τ * · · · • ·.*.'· · · · · · · ···· · ·· *·· - ·· ·· ' \

Teplota tání produktu činí 128° C.

5.5. 9-brom-í, 5-diniethyl-3-fenyl~3, 5-dihydro-4H-pyri-dazino[ 4,5-b] indol-4-on , g (71 mmol) methyl-3-aceťyl-4-brom-l-methyl-lH-indol-2-karboxylátu. se za zahřívání rozpustí ve. 350. ml kyseliny octové·. Přidá se 30 ml (300 mmol) fenylhydrazinu,. ..v. .míchání se' pokračuje po dobu 1 hodiny při teplotě místnosti a reakční směs se zahřívá k varu pod . zpětným chladičem po dobu 5 hodin/ nechá- se stát při teplotě místnosti po.dobu 15 hodin a znovu se. zahřívá k varu pod zpětným chladičem po dobu 7 hodin. Přidá se 28 ml fenylhydrazinu a postup se opakuje. Směs se zahustí za sníženého tlaku, zbytek se vyjme, vodou a sraženina se izoluje filtrací, promyje se vodou a vysuší se zá sníženého tlaku. Poté se sraženina chromátograf ick-y vyčistí na sloupci silikagelu. Izoluje- se, 11,1 .g (30 mmol) produktu o teplotě tání 139 až 190° C..

5.6. 9-brom-l-(brommethyl)-5-methy.l-3-fenyl-3, 5-dihydro- --4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-on ' Roztok 10', 1 g‘ (27,1 mmol) 9-brom-l, 5-dime.thyl-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-onu, 6 g (34 mmol).

N-bromšukcinimidu a' 0,46 g (2,8 mmol) 2,2'-azobis-(2-methylpropionitrilu) se zahřívá k varu pod zpětným chladičem po dobu 5 hodin. Přidají se 'další 3g (17 mmol) N-bromsukcinimidu a 0,23· g (1,4 mmol) 2,2'-azobis-(2-methylpropionitrilu) .- Směs se zahřívá k varu pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin, nechá, se .stát, při teplotě místností po dobu- 15 hodin a znovu se zahřívá k varu pod zpětným chladičem po dobu 5 hodin. Poté se směs zahustí za sníženého tlaku, zbytek se vyjme vodou a . extrahuje se ethylacetátem. Organická fáze se vysuší, rozpouštědlo.se. odpaří za sníženého tlaku a zbytek se chromatograficky vyčistí na sloupci silikagelu. Izoluje se

5,9 g (13 mmol) produktu. · ·· ···· • φ · • ' · ··

- 20 40 ··

Φ ΦΦΦ • · · Φ

5.7. 9-brom-5-methyl-4-oxo-3-fenýl-3,5-dihydro-4H-pyridazi- . ηο[ 4,5-b] indol-l-acetonitríl

Roztok 6, 4 g (1.4,3 . mmol) 9-brom-Y- (brommethyl)-5-methy.l-3-fenyl-3_Y 5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-onu,

3,6 g. (73 mmol) kyanidu sodného a 0,57 g (1 mmol) tetrabutylamoniumbromidu ve směsi 170 ml .dichlormethanu a 85 ml vody se za míchání zahřívá k varu pod zpětným chladičem po dobu 3 hodin. Usazením se provede separace a reakční směs se extrahuje dichlormethanem. Organická fáze .se promyje vodou, vysuší se nad síranem sodným a rozapouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Získá se 5,6 g (14,2 mmol) produktu, který se bez dalšího.zpracování· použije v následujícím stupni.

, - ' i

5.8. 9-brom-5-methyr-4-o_:xo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-1-o'ctová kyselina

Roztok 4,'8. g (12,2 mmol) · 9-brom-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3, 5-dihydro-4H-pyridazino[ 4‘, 5-b] indol-l-acetonitrilu ve směsi 190 ml kyseliny , octové a ’50 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové se zahřívá k var.u pod zpětným chladičem po dobu 6 hodin. Roztok se zahustí za sníženého tlaku a zbytek se vyjme·směsí ‘dichlormethanu a vody. Směs se zalkalizuje 30% roztokem hydroxidu sodného, usazením se provede separace a směs se extrahuje dichlormethanem.. Vodná fáze se za chlazení v ledové lázni okýselí koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou. Sraženina se izoluje' filtrací, promyje se vodou .a .vysuší se za sníženého tlaku. Získá se 3,1 g (7,5 mmol) pevné látky

5.9., l-[ 2- (9-brom-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3, 5-dihydro-4H-py- ., r,idazino[ 4,5-b] indol-l-yí)-1-oxoethyl] pyrrolidin

Pracuje se postupem jako v příkladu 3.2., za použití 3,1 g (7,5 mmol) 9-brom-5-'methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-octové kyseliny, 1,4 g l,l'-karbonylbis-lH-imidazolu a 0,7 ml pyrrolidinu. Po ukončení reakce se přidá voda a filtrací se izoluje sraženina, která

• · • · · ·

- 21 se vysuší’ za sníženého) tlaku. Poté se překrystaluje z

2-propanolu a. promyje še etherem - a pentanem. Produkt se vysuší za sníženého tlaku. Získá se 2,3 g (4,9 mmol) p'evné látky o teplotě tání 209 až 210° C.

Příklad 6 (sloučenina č.ll) - 9-brom-5-methyl-N-methyl-4-óxo-3-fenyl-3, 5-dihydro-4H-pyrídazino[ 4,5-h] indol-l-acetamid

Pracuje sé postupem jako v ,příkladu 3.2.,· za použití 0,78 g (1,9 mmol) ,.9-brom-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3, 5-dihydro.-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-octpvé kyseliny. . Produkt se překrystaluje z.’2-propan’olu. Získá.se .0,57 ,g (1, 3 mmol) pevné látky o teplotě tání 267 až 268° C.

Příklad 7 (sloučenina č. 38) ' l-[ 2-.(5, 9-dimethyl-4-oxo-3-fenyl-3, 5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-yl-)-1-oxoethyl] pyrrolidin

Roztok 1,2 g (2,6 .mmol) l^-í 2-(9-brom-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3, 5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-yl)-1-oxoéthyl] p.yrrolidinu, .0,22 g (0,3 mmol)- bis (trif enylf osf in) palladium (II) chloridu, 0, 41 g (1,55 mmol) trifenylfosfinu a 1,5 ml. (10,3 mmol) tetramethylstannia v 15- ml dimethyl formami du se zahřívá na teplotu 120° C po dobu 18^;hodin v uzavřené nádobě. Směs se zahustí za sníženého tlaku a zbytek se vyjme dichlormethaňem a. roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Organická fáze se promyje 10% roztokem fluoridu draselného, -vysuší se nad síranem sodným, rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se chromatograficky .vyčistí na sloupci silikágelu. Produkt se překrystaluje z 2-propanólu, promyje se etherem a pentanem. a vysuší se za sníženého tlaku. Získá se 0,82 g (2 mmol) pevné látky o teplotě tání 214 až 215° C.

• · · · • · · Φ . · '· · · ·. · · φΦβ'φ'φίφφ··· . · . φ · · · . Φ Φ · Φ •••••'•••Φ» ΦΦΦΦ·.

Příklad 8 (sloučenina č. 23) ’

1-[ 2- (5-methyl-4-oxo-3-fenyl-8- (fenylmethoxy)-3,5-dihydro-4H-pyri.dazino[ 4,5-b] indol-l-yl)-1-oxoethyl] pyrrolidin

8.1. 5-methyl-4-oxo-3-fenyl-8-(fenylmethoxy)-3,5-dihydro-4H-pyridazihp[ 4,5-b] indol-l-yl)-1-octová kyselina

Roztok 1,15 g (2,7 mmol) 5-methyl-4—oxo-3-fenyl-8- (fenylmethoxy) -3, 5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-yl) -1-acetonitrilu a 1,54 g ,(39 mmol) .hydroxidu draselného ve směsi 10 ml vody a 20 ml 2—methoxyethanolui se zahřívá k varu pod zpětným chladičem; Směs se extrahuje, dichlormethanem,. vodná fáze se okyselí a extrahuje se.ethylacetátem, organická .fáze se vysuší nad síranem sodným a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Izoluje se 0,38 g (0,86 mmol) pevné látky,, která se bez dalšího zpracování použije v následujícím stupni. ' ,

8.2 . l-[ 2- (5-methyl-4-bxo-3-fenyl-8-'(fenylmethoxy) -3, 5-di- · · hydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-yl)-1-oxoethyl] pyrrolidin

Pracuje -se. postupem jako v příkladu 3.2·., za použití

0,38 g (0,86 mmol) 5-methyl-4-oxo-3-feny.l-8-(fenylmethoxy).-3, 5-dihydro-4H-pyridazino[ 4, 5-b] indol-l-octové kyseliny. Získá se 0,35 g (0,7 mmol) pevné látky.o teplotě tání 2203 až 204° C. '

Příklad 9 (sloučenina č. 17) ^!

N,N,5, 8-tětramethyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino-, [ 4,5-b] indol-l-acetamid ·. ’

9.1. 1-(chlórmethyl)-5,8-dimethyl-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-on . ~ ’

K suspenzi 9,5 g (29,7 mmol) 1-(hydroxymethyl)-5,8-dimethyl-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] índol-4-onu 'v ·'· ? ·

- 23 600 ml tetrahydrofuranu zahřáté na teplotu 6.0°. C se přidá 50 ml pyridinu. Poté se přidá 4,5 ml (59,4 mmol) methansulfonylchloridu a směs se nechá'stát po dobu 15 hodin při teplotě místnosti. Přidá se 500 ml dichlormethanu,. sraženina se oddělí filtrací,- usazením s'e provede separace a organická fáze se promyje vodou. Poté se vysuší nad síranem sodným . a rozpouštědlo, se’ odpaří za· sníženého tlaku. Získá se 5 g (14,8 mmol) produktu, · který se bez dalšího zpracování použije v následujícím stupni.' · .

J/V laJ-lLIC Ulij -L ' “3· kJSlkJ J c Λ - U _Λ _ Λ TI _-----1 -3 ---__ icnyxj, .j -'Uinywi u tn ^ynucibinu' [ 4,5-b]indol-l-acetonitril

Roztok 5 g (14,8 mmol) 1-(chlormethyl)-5,8-dimethyl-3~fenyl-3, 5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-onu, 2,7 g (55. mmol) kyanidu sodného a 0,5 g (3 mmol) jodidu sodného ve směsi 50 ml,dimethylformamidu a-30..ml vody se míchá po dobu 2 hodin při teplotě. 50° C. Směs se nechá stát při teplotě ' místnosti ' a ••filtrací se- izoluje sraženina, která -se' promyje· vodou a pentanem a vysuší se za sníženého tlaku. Získají se . 3 g (9,1 mmol) produktu, který se bez dalšího, zpracování použije.v následujícím stupni. .

9.3. 5,8-dimethyl-4-oxo-3-fenyl“3,5-dihydro-4H-pyridazino( 4,5-b] indol-l-óctová kyselina *

Pracuje se postupem jako. v příkladu 1.7., za použití 3,4 g (10,4 mmol) 5,8-dimethyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydror4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-acetonitrilu. Získají se 2 g (5,8 mmol) produktu, který se bez- dalšího zpracování použije v následujícím stupni.

9.4. N, N, 5, 8-tetramethyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-acetamid

Pracuje se postupem jako v příkladu 3.2., za použití 1 g (2,9 mmol) 5,8-dimethyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-octové kyseliny. Produkt se ·· · • « » * · · · «···* ·*·«·*

9 9 « ? 9 9 9 · *⁹ ί *·· · * l «· i '«>··· ·-« ··· 9· ·· „ ~ 24 - překrystaluje z 2-propanolu.' Získá se 0,5 g (1,3 mmol) pevné látky o teplotě tání 209 až 210° C.

Příklad. 10. (sloučenina č. 43)

8-fluor-N,N-dimethyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-1-ac'etamid '

10.. 1. Ethyl-2- (ethoxykarbonyl) -5-fluor-a-oxo-lH-indúl-3-acetát ¹ Roztok 40 ml (313 mmol) ethyl-chlorglyoxylátu a 36 ml (313 mmol) chloridu titaničitého v .1 1 dichlormethanu se míchá po dobu 15 minut při teplotě místnosti.. Přidá se roztok 50 g (241 mmol) ethyl-5-fluor-lH-indol-2-karboxylátu v -dichlormethanu a směs se míchá po dobu 2 hodin při teplotě místnosti. Směs· se vylije_x do vody, organická, fáze se separuje usazením, -promyje se zředěným roztokem· hydroxidu sodného a vysuší se nad síranem sodným. Získá se 31,5 g (102 mmol) produktu, ^; který . se bez dalšího zpracování, použije v následujícím stupni. ,

10.2 . Ethyl-8-f luor-4-oxo-3-fe.nyl-3, 5-dihyďro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-karboxylát

Pracuje se postupem jako v příkladu 1>3.,. za použití 5 g (16,2. mmol) ethyl-2-(ethoxykarbonyl)-5-fluor-a-oxo-lH-indoí-3-acetátu a 9,5 ml fenylhydrazinu ve 150 ml kyseliny octové. Izoluje-se 3,9 g (11 mmol) pevné látky, která se bez dalšího zpracování použije v následujícím stupni.

10.3. Ethyl-8-fluor-5-(methoxymethyl)-4-oxo-3-fenýl-3, 5-di’ . - 1 hydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-karboxylát

K suspenzi 0,66 g (16 mmol)- natriumhydridu ve 100 ml dimethylformamidu se přidá suspenze 3,9 g (11 mmol) ethyl-8-fluór-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b]indol-1-karboxylátu ve 200 ml dimethylformamidu. Směs se míchá pdo dobu 1,5 hodiny při teplotě 'místnosti a přidá se roztok

9' · 9 99 9

- 25 1,15 ml (14,3 mmol) chlormethoxymethanu v 10 ml tetrahydrofuranu. Směs se míchá po dobu 2 hodin, přidá se zředěná kyselina chlorovodíková a sraženina se izoluje filtrací a vysuší se za sníženého tlaku. Izoluje se 4,1 g. (10,4 mmol) pevné látky, která se bez dalšího zpracování použije v následujícím stupni. ¹

10.4-. '8-fluor-1- (hydroxymethyl) -5- (methoxymethyl) -3-fenýl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-on . Pracuje se postupem - jako v .příkladu 1.4., za použití 4,1 g (10,4 mmol) ethyl-8-fluor-5-(methoxymethyl)-4-oxo-3-fenyl-3/ 5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-1-karboxylátu . Izoluje se .3,2 g (9. mmol) pevné látky, .která se bez dalšího zpracování použije v následujícím stupni. 10.5, 1-(brommethyl).-8-fluor-5-(methoxymethyl )-3-řenyl. -.3, 5-dihydřo-4H-pyrídazino[ 4., 5-b] indol-4-oh

K roztoku 3) 2 g (9 mmol) 8-fluor-l--(hydroxymethyl)-5- (methoxymethyl·) -3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4', 5-b] indol-4-onu a 6,3 g (19 mmol) tet rabrommet hanu ve 200 ml dichlormethanu se přidá 4,5 g (17,1 mmol) trifenylfosfinu. Směs se míchá po dobu 2 hodin,' přidá se 50 ml cýklohexanu a filtrací se izoluje sraženina, která se vysuší- za sníženého tlaku. Izoluje se 2,9 g (7 mmol) pevné látky, která se bez dalšího zpracování použije v následujícím stupni.

10.6. 8-fluor-5-(methoxymethyl)-4-oxo-3~fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4-, 5-b] indol-l-aoetonitril

Dvoufázová směs 2,8 g (6,7 mmol) 1-(brommethyl)-8-fluor-5-(methoxymethyl)-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[4,5-b] indol-4-onu, 1,3 g (26 mmol) kyanidu sodného a 0,23 g (0,7 mmol) tetrabutylamoniumbromidu ve .100 ml dichlormethanu a 100 ml vody se intenzivně míghá po dobu 12 hodin. Organická fáze se oddělí, několikrát se promyje vodou, vysuší se nad síranem sodným a zahustí se za sníženého tlaku. Přidá se • · · ·

- 26 • _k · Ί diethylether a filtrací se izoluje sraženina, která se vysuší za sníženého tlaku.. Izoluje se 2,l..g (5,8 mmol) pevné látky, která se bez dalšího zpracování použije v následujícím, stupni.

•10.7. 8-fluor-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-octová kyselina . Pracuje se postupem jako v příkladu 1.7., .za použití

I, 2 g (3,3 mmol) 8-fluor-5^(methoxymethyl)-4-oxo~3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-acetonitrilu. Po filtraci á vysušeni se izoluje 1,1 g (3,2 mmol) pevné látky, která se bez dalšího zpracování použije v následujícím stupni.

10.8., 8-fluor-Ň,N-dimethyl-4-oxo-3-fenyl-3, 5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] índol-l-acetamid '.

Suspenze 1,7 g (10,5 mmol) 1,1 --karbonylbis-lH-imidazo Iu a 3 g (8,9-mmol),' 8-f'luór-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-octové kyseliny ve 300 ml tetrahydrofuranu se irííchá .pří teplotě 40° C po dobu 3 hodin. Směs se ochladí . na teplotu místnosti.,' přidá se 1.0 ml zkapalněného dimethylaminu a směs se. míchá po dobu 2 hodin. Směs se nechá stát přes noc, poté se přidá 300 ml ;vody a filtrací se izoluje sraženina, která se překrystaluje z dimethylformamidu. Získá se 0,8 g (2,2 mmol) pevné látky o teplotě tání 289 až 290°. C. ^; '

Příklad 11 (sloučenina č. 52)

7-chlor-N,N-diethyl-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-acetamid

II. 1·. Ethyl-6-chlor-l-methyl-lH-indol-2-karboxylát

Pracuje se postupem jako v příkladu 1:1., za použití 8,0 g (35,8 mmol) ethyl-6-chlor-lH-indol-2-karboxylátu, 1,8 g • · · · #» ····;»♦·· · • · · · · » ··· ««·· · 4'·· »··. «'· ' · β'·

-27-.60% natriumhydridu a 2,8 ml jodmethanu.

Po dokončení reakce se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku a zbytek se vyjme vodou. . Směs se extrahuje', dichlormethanem., organická‘fáze se vysuší a zfiltruje a rozpouštědlo se odpaří- za ' sníženého tlaku. Zbytek s,e. chromatografický vyčistí na sloupci silikagelu. Izoluje se 8,5 'g (35,8 mmol) bílé krystalické sloučeniny, vykazující teplotu tání. 75,5 až 76,5° C. , '

11.2. Ethyl-6-chlor-2-(ethoxykarbonyl)-1-methyl-a-oxo-lH-indol-3-acetát ' . ' '

K roztoku 4 ml (36 mmo,l) ethylchloroxoacetátu ve 100 ml 1-, 2-dichlorethanu se přidají '4 ml ' (36,4. mmol)_; . chloridu titaničitého. Reakční směs se míchá po dobu 30 minut při teplotě místnosti, poté se přidá 7,8 g (32,8 mmol) ethyl-6-chlor-l-.methyl-lH-indol-2-karboxylátu a reakční směs se míchá po dobu dalších 4 hodin při teplotě místnosti,·.

Poté se směs ochladí a přidá'se 200 ml dichlormethanu a 100 ml vody. Organická fáze se separuje usazením,.promyje se vodou, vysuší se nad síranem sodným, zfiltruj.e a zahustí za sníženého tlaku. Zbytek se chromatografický vyčistí . na sloupci silikagelu. Izoluje se 9>4.· g (27,7 mml). produktu o teplotě tání 94 až 95° C. 11.3. Ethyl-7-chlor-5-meťhyl-4-bxo-3-fenyl-3ž5-dihydroy4H-pyridazino[ 4,5-b] índol-l-karboxylát

K roztoku 4,6 g .(13,6’ mmol) ethyl-6-.chlor-2-(ethoxykarbonyl)-l-methyl-a-oxo-lH'-indol-3-acetátú ve 120 ml kyseliny octové se při teplotě místnosti ' přidají 4 ml (40,6 mmol) fenylhýdrazinu. Reakční směs se míchá po dobu 30. minut při - teplotě místnosti a poté po dobu' 4 hodin za varu pod zpětným chladičem.

Směs se ochladí a přidá se 350 ml dichlormethanu a 100 ml vody. Organická fáze se separuje usazením, promyje se.

· »·4 ·

4 4 4 «9

9 ·· ··

4' 4 ·· 4 4 4 ·

4 « »44» • 4 · 4 4 · 4 4· ' 4 4 4 4 · *

4 ·>4 4 ·.' 4 4' 9

- 28 nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a- poté vodou,· vysuší se nad síranem sodným, zfiltruje a zahustí -za • -sníženého tlaku. Zbytek se chromatograficky vyčistí· na sloupci silikagelu. Izoluje se 4,1 g (10,7 mml) produktu o teplotě tání-216 až 218,5° C.

11.. 4. 7-chlor-l-(hydroxymethyl)-5-methyl-3-fenyl-3,5-dihydro8

-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-4-on · • , . K roztoku 4)04 ,g. (10,6 mmol) ethyl-7-chlor-5-methyl-4-oxo~3~fenyl-3,,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-karboxylátu ve 150 ml tetrahydrofuranu se přidá 2,5 g (66,1 mmol) natriumborohydridu.. Za . míchání se postupně přidá .2,25 ml methanolu a poté se směs zahřívá k varu pod zpětným chladičem . . . po dobu 5 ho.din. Směs .se vylije do ledově chladného IM roztoku kyseliny chlorovodíkové a nerozpustný produkt se oddělí 'filtrací na nálevce ze'slinutého skla. Tento produkt se promyje vodou a diethyletherem a poté se vysuší.

•Izoluje se 3,3 g (9,7 mmol) sloučeniny'uvedené v názvu ve formě bí.lé pevné látky, která -se bez dalšího zpracování použije v následujícím stupni,. Teplota tání produktu činí 219 • až 220,5° C. . · .

11.5.. 7-chlor-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridažino[ 4,5-b]indol-l-karboxaldehyd

K roztoku 3, 3 g (9,7 mmol) 7-chlor-l-(hydroxymethyl)-5-methyl-3-fenyl-3, 5-dihýdro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol—4-onu ve · 300 ml dichlormethanu se -přidá 5,7 g (65,6 mmol) oxidu manganičitého a reakční směs se míchá za varu pod 'zpětným chladičem po dobu 24 hodin.

Poté se. směs ochladí a zfiltruje přes teflonovou membránu, pevná látka se promyje dichlormethanem a filtrát se poté zahustí za sníženého tlaku.

Izoluje se 2,88 g (8,53 mmol) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé pevné látky, která se bez' dalšího

• · · ·

- 29 ) • · 9 ·« * · · • tt · · · · · • · · · · · • »♦*··· • · · · · · ·« ·· «9 - 9;9 zpracování použije v následujícím stupni. Teplota tání produktu činí 235 až 236’ C. .7

11.6. 7-chlor-5-methyl-4-oxo-3-feríyl-3,5-dihydro-4H-pyri. dazinot 4,5-b] indo'l-l-a,cetonitril /

K roztoku 2,14 g (10,96 mmol) (4-methylbenzensulfonyl)methyíisokyanidu v 50 ml 1,2,-dimethoxyethanu se . po malých částech . přidá 1,27 g (10,96 mmol) kalium-1,1-dimethylethoxidu', reakční směs se míchá po dobu 30 minut při teplotě -60° C, přidá se 2,88 g (8,53' mmol) . 7-chlor-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b]indol-l-karboxaldehydu a reakční' směs se míchá po dobu .3. hodin a 30 minut při teplotě -60° C., Přidá se 9 ml methanolu a reakční směs se dále míchá po dobu 30 minut při teplotě místnosti a po dobu 1 hodiny za varu pod zpětným chladičem.

Směs se ochladí a zahustí za sníženého tlaku, ke zbytku se'přidá voda, 5 ml kyseliny octové a 200 ml dichlormethanu, organická fáze se separuje usazením a vodná fáze se extrahuje dichlormethanem. Organické fáze se smíchají, promyjí se vodou, vysuší se nad síranem sodným, zfiltrují a zahustí za sníženého tlaku a zbytek se’ chromatograficky vyčistí na sloupci silikagelu. ' '

Izoluje se 1,87 g (5,36 mmol) sloučeniny uvedené v názvu ve formě ..bílé pevné· látky, která se bez dalšího zpracování použije v následujícím s-tupni. Teplota tání produktu činí 305 až 315° C.

11.7. Methyl-7-chlor-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazinp[ 4,5-b] indol-l-acetát .

K roztoku 1,83 g (5,.25 mmol) 7-chlor~5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3, 5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b]indol-l-acetonitrilu ve 250 ml methanolu se přidává chlorovodík až do nasycení roztoku a poté se reakční směs míchá po dobu 4 hodin za varu pod . zpětným chladičem. Směs se ochladí, zahustí se za • · ·♦♦··. · '· · * β · · · * ·· ·*·· · ·· ,*·· ·· «.<

„ · . · · ' , - 30 sníženého tlaku a ke zbytku se přidá 25 ml vody a 25 ml methanolu.. P,o promíchání se nerozpustný produkt izoluje filtrací, promyje se vodou a diethyletherem, vysuší se ^;a chromatograficky se vyčistí na sloupci silikagelu. ^;

Izoluje se 1,00 g (2,62 mmol) · sloučeniny uvedené v názvu ve -formě bílé pevné látky o teplotě tání 188,5 až * . 190° C. . ,· , 11.8 .. 7-chlor-N,N-diethyl-5-methyl-4-oxo_<-3-fenyl-3, 5-dihydřo-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-acetamid ' K roztoku 2 ml (4 mmol) trimethylalumínia, . (2M v toluenu), ve 30 ml toluenu se v atmosféře - argonu při teplotě 0° C přidá 0,41 ml (4 mmol) diethylaminu, reakční směs se míchá po dobu 20. minut při teplotě' místnosti, přidá se 0,095 g (.0,25' mmol) methyl-7-chlor-5-methyl-4-oxo-3-fenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5^b] indol-1-acetátu a reakční směs se míchá za varu pod zpětným chladičem· po dobu 4 hodin.

Směs - se ochladí, na teplotu .4° C, přidají se 3 ml vody a ^r . dichlormethan, roztok se zfiltruje a filtrát se zahustí za sníženého tlaku. Ke zbytku se přidá voda, 1M .kyselina chlorovodíková a .150 ml dichlormethanu, organická -fáze se oddělí, promyje se vodou, vysuší se nad síranem sodným, zfiltruje a zahusti -za sníženého tlaku. Zbytek se chromatograficky vyčistí na sloupci silikagelu. Po překrystalování z diethyletheru se izoluje '0,10 g (0,24 . . mmol,) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé .pevné látky vatového vzhledu, *' Teplota tání produktu činí 167 ,až 168° C.

Chemické- struktury a, fyzikální vlastnosti - některých sloučenin podle vynálezu jsou uvedeny pro ilustraci v následující tabulce.

č.	X	. Y	' Λ	NRRa	t.t. . (°C).
.. 1	8-F	H	Me	NMe₂	248-249 .
2	8-F	H	Me ’	NHMe;	303-304
3	8-F	H -	Me	NHCH₂Ph	298-299
4 '	8-F	' H	Me	pyrrolidinyl .	268-269
5	8-F	H	Me	piperidinyl	, 248-249
.6	8-C1	H '	Me	NHMe	314-315
Ί	. 8-C1	H	Me	NMe₂	\. 250-251.
8	8-F	H·	' -Et	• NHMe	310-312
' ⁹	. 8-F	, ' H ·.	Et	NMe₂	183-184
'10	8-F	H	Me	NHEt.	291-292
11	9-Br .	H '	Me	NHMe	267-268
12	8-F	H	Me.	NHPr .	290-291
13.	8-F	H	Me	morfolinyl.	. 259-260
14	8-F	H	Me	4-Me-piperazinyl	233-234
. 15	8-OMe	H '	Me	NMe₂	194-195
16	8-OMe	H	Me	NHMe	258-259 - .
17	8-Me	H .	Me	NMe₂	209-210
18	8-Me	. H	Me	. ' NHMe	268-269
19	8-Me	H	Me	pyrrolidinyl	216-217

• · »»·· • · ·	• · Λ	•	• • ·	•	• · •	•	·'· Φ
, φ φ	Φ	•		•	•	•	. Φ.
							•
• φ	' ·	•	•	Φ	•	•	Φ
φφ,φφ ·	• ·		·· ·		• Φ		Φ Φ

Č.	' X , .	Y		• ΝΚ-Λ . ·	t.t. (°C)
20	8-F	. H .	' Et	pyrrolidinyl	229-230
21'	8-F	H	Me	azetidinyl	236-237
22	8-F.'	• H .	Me	, 1,3-thiazolidinýl	246-247
'23	8-OCH₂Ph	H	Me	pyrrolidinyl	203-204 '·
’ 24	8-F	H .,	Me	3-EtO-pyrrolidinyl	204-206
25	8-C1	H '	Me	pyrrolidinyl	261-262
. 26	Η	H	Me	pyrrolidinyl	214-215
27	Η	H	Me	NMe₂	214-215.
28	Η	. ’ H	Me	NHMe	262-263
. 29	8-F.	H'	. Me .	NEt₂	179-180
^; 30	8-F	H	Me	NMeEt	231-232
31	9-Br	Η ,	Me	pyrrolidinyl·	209-210
³² '	8-F	H ·	Et	NMeEt	, 167-168
. 33	8-F	·. H	Et	. azetidinyl	.186-187 .·
.34	8-F.	. 4-Cl	Me	pyrrolidinyl	241-242 .
35,	8-F	•. 4-C1	Me	NMe₂ ·	.243-244
36	8-F , '	3-C1	Me	NHMe	• 315-316
37	8-F .·	4-Cl	Me	NHMe '	290-291
38	9-Me	H	Me	pyrrolidinyl	214-215 · :
39 .	8-F	3-C1	Me	pyrrolidinyl	210-211
40	8-F	2-C1	Me	pyrrolidinyl	248-249
4.1	8-F	H	H	pyrrolidinyl	242-243
' 42	8-F	2-C1	Me '	NMe₂.	226-227
⁴³	8-F	. H	H	NMe₂	289-290
•44	9-F	H	Me	. NHMe	298-299
45	8-F	H '	Et	. nh₂	> 260 .
46	8-F	H	Pr	NMe₂	167-168

' č.	X	Y			t.t. (°C)
.47	9-F	H	Me	pyrrolidinyl	194-195
48	' 9-F,	H	Me	NMe₂	186-187 -
49	8-F ,	4-OMe	Et	NMe₂	197-198 ;
'50	. 8-F -	4-OH	' Et	NMe₂	270
51.	7-Cl	H	Me	/' · NMe₂	229,5-230 '
52	7-Cl	H	Me	NEt₂	167-168-
53	7-Cl '	' H	Me .	pyrrolidinyl	260-263
54.	7-Cl	H	Me	morfolinyl	273,5-274,5
55	7-Cl .	3-Me	Me	NMe₂ '	204-205,5
56	7-Cl .	3-Me	Me	' NEt₂	200,5-201
57	7-Cl	3-Me -	Me	pyrrolidinyl	268-269,5
58	7-Cl	3-C1 .	Me	NMe, 1 ²	'231-232
59	. 7-Cl '	3-C1	Me	NÉt₂	202,5-203
60'	7-Cl	3-C1	Me	pyrrolidinyl	257-258,5
61	7-Cl Λ	3-C1	Me	piperidinyl	218-219
62	7-Cl	. 2-C1	Me	NMe₂	253-255
63	7-Cl	2-C1	Me	NEt₂	.206-208
64	. 7-Cl -	2-C1	Me	pyrrolidinyl	295-297.
⁶⁵	7-Cl	4-C1.	<Me	NMe₂	235-237'
66	. 7-Cl	4-C1	Me	NEt₂	223, 5-224,5
67 .	7-Cl	4-C1 .	Me.'	pyrrolidinyl'	265-266
68	7-Cl	3-OMe	Me	NMe₂	200,5-202,5
69	7-Cl	3-OMe.	Me	NEt₂ >	201-202
70	7-Cl	3-OMe	Me	pyrrolidinyl	240-242
71	• 7-Cl	3-NO₂	Me	NMe₂	275-277,5
72	7-Cl	3-NO₂ ·	Me	NEt₂	228-228,5‘
73	7-Cl	/ 3“N°₂ .	Me	pyrrolidinyl	261-263

• · ·· ·.·'·

Či	X	Y		nr,r₃	t.t. (°C)
74	7-C1	3-F	-Me	NMe₂	225-226,5 ,
75	7-Cl	3-F	Me	NEt₂	171-172 ,
76	. 7-C1	3-F	Me	pyrrolidinyl	270-271-,5
77	. 7-C1 ,	3,5- (Cl)₂	Me	NEt₂	239-240,5
78	7-C1 .	4-C1	Me	NMeEt	216,5-217,5

Legenda k tabulce: . t.t. = teplota tání '·

Mé = methyl · Et = ethyl ' '

Pr = propyl ,

Ph = fenyl _Λ '

Sloučeniny podle vynálezu byly podrobeny farmakologickým. testům, které dokazují jejich působe.ní jako terapeuticky.

-'účinných látek .

Studie vazby na membrány pokud jde · o recepto.ry ω_ν mozečku (benzodiazepin typu 1) a receptpry ω₂ míchy ..(benzodiazepin typu- 2) . . ‘ í

Afinita sloučenin podle vynálezu k receptorům mozečku a receptorům ω₂ míchy se stanoví variantou metody, kterou popsali S. Z. .Langer a S. Arbilla ve Fund. Clin. Pharmacol., 2, 159-170 (1988), za použití [ ²H] -flumazenilu,. místo [ ’H] -diazepamu jako radioligandu.

Tkáň mozečku, nebo míchy se homogenizuje po . dobu 60 sekund ve 120 respektive 30 objemech ledově chladného pufru (50 mM Tris-HCl, ' pH 7,4, 120 mM chloridu sodného, 5 mM chloridu draselného) a poté se, po zředění na 1/3, suspenze inkubuje s [ ³H] -fluma zeni lem (specifická aktivita 78.Ci/mmol, New England Nuclear) v lnM koncentraci a se sloučeninami

podle vynálezu v různých koncentracích, ve výsledném objemu 525 μΐ. Po 30 minutách inkubace při teplotě 0° C se vzorky zfi-ltrují za .sníženého tlaku na filtrech ,'Whatman GF/B® a okamžitě se promyjí ledově chladným pufrem. .. .

Specifická' vazba [ ³H] -flumazenilu se' stanoví za přítomnosti .1 . μΜ neznačeného diazepamu'. Údaje se analyzují podle standardních metod a vypočítají . se .koncentrace IC50, -tmj-—k-o-n-ce-n-fe-ra-oe—k£-e-r-é_inhibují 50 % vazby [ ³H] -flumazenilu. Hodnoty IC50 nejvíce afinítních' sloučenin podle vynálezu leží mezi 5 a 1000 nM pro recéptorý mozečku a mezi 20 a .1000 nM pro receptory o₂ míchy. . ,

Studie anxiolytiCké účinnosti

Test konfliktu při příjmu pití

Anxiolytická účinnost se vyhodnotí. na krysách v testu konfliktu při příjmu pití podle metody,,kterou popsali J. R. Vogel, B. Beer/a D. E. Clody v Psychbpharmacologica -(Berl.), 21, 1-7 (1971) .

Kryse šé- neposkytuje voda po dobu 4 8 hodin. Poté se krysa umístí do zvukotěsné komory vybavené pipetou s vodou,, napojenou na anxiometr, dávající malý elektrický ' šok po každých 20. líznutích. . Počet ^? při j atých šoků je automaticky zaznamenáván po:dobu 3 minut a umožňuje vyhodnotit anxiolytickou účinnost testovaných' sloučenin. Výsledky se vyjádří jako minimální' účinná dávka (MED), t.j. dávka, kterou.se dosáhne významného zvýšení- počtu přijatých šoků' vzhledem k počtu pozorovanému u kontrolních zvířat.

Hodnoty MED .u nejúčinnějších sloučenin podle vynálezu leží v tomto testu mezi 0,1 a 10 mg/kg při intraperitoneélním nebo orálním podání.

- 36. ·· ··'·· ·· · ·· ·· ··· 4 4 44 · · · ·

·.. · · · ' · · · · · · · · · * · · · · 4 · · · · · · · · · 494· «·' 44 99 4 ' ·'· »♦

Test ve. zvýšeném, křížovém labyrintu

Provedení ' tohoto testu je modifikací metody., kterou popsali S./ Pellow a S. Filé -ve Pharmacol. Biochem. Behav. (1986) , 24, 525-529..

.Po období seznámení se s experimentálním, prostorem, trvajícím přibližně 24 hodin·, se krysy jednotlivě umístí na centrální . plošinu, s čenichem, obráceným k jednomu z uzavřených ramen a po - dobu ' 4 , rnihut^-še phrzO-ruj-í— z-a—-po-u-ž-i-bivideokamery. Zaznamenává se čas strávený · zvířetem ' v Otevřených ramenech, počet vstupů do uzavřených ramen a. do otevřených ramen, počet pokusů vstoupit do otevřených’ ramen, následovaných upuštěním od tohoto záměru, a zkoumání hran. v otevřených ramenech.. Výsledky se vyjádří pro každé zvíře: lj jako procento průchodů do· otevřených ramen .vzhledem, k celkovému počtu vstupů do čtyř . ramen . Zařízení,. 2) jako procento času stráveného v otevřených 'ramenech vzhledem k celkové době. trvání testu (4 minuty), 3) jako celkový počet pokusů provedených zvířetem,, od, kterých bylo, upuštěno, a 4). jako celkový počet zkoumání. ' . '

Testované látky se .podávají intraperitoneálně nebo Orálně ve zvyšujících se dávkách’. Výsledky se vyjádří jao minimální účinná dávka (MED), která vyvolá buď významné zvýšení (aktivity v otevřených ramenech) nebo významné snížení· (pokusů), , vzhledem k . chování pozorovanému . u kontrolních zvířat.

' Hodnoty MED u. nejúčinnějších sloučenin podle vynálezu leží v tomto testu mezi 0,1 a 20 mg/kg při intraperitoneálním nebo orálním podání. ’ .

Studie hypnotické účinnosti

Sedativní nebo hypnotická účinnost sloučenin podle vynálezu se stanoví pozorováním jejich působení na krysí élektrokortikogram, pomocí metody, kterou’ popsal H.

ΦΦ φφφφ φ φ φ φ φ φ φ φ .φ. φ φ φ φ ^f φ · φ φ φ · φ φ φ ΦΦ φ φ φ. φ φφφ φ φ φφ φ φ. 'φφφ

Φ'ΦΦΦ Φ ΦΦ Φ·Φ 99 φ» ·

- - 37 - | ···

Depoorbere, Rev. E.E.G. Neurophysiól., 10, 3, 207-214 (1980) a H. Depoorbere a M. Decobert, J. Pharmacol,, (Paris)-, 14, 2, 195-265 (1983) . ‘ . Testované sloučeniny se ,podávají intraperitcn.eáůně ve zvyšujících . se dávkách. Nejúčinnější sloučeniny indukují spánkové chování při dávkách v rozmezí od 0,1 do .30 mg/kg.

-Sbudi-e—a-B-t-i-k-o-n-v-u-l-z-iv-n.í—úo.i η n o s t i___·__

Účinnost na klonické křeče vyvolané ,u krys injekcí pentetrazolu '

Provedení, tohoto testu je modifikací metody, kterou popsali E. A. Swinyard a J. H. Woodhead v Antiepileptic Drugs, Raven Press, New York, ílll —126 (1982) . Testované. sloučeniny-, se intrap.eritoneálně podají zvířatům a po .30 minutách se. jim intravenózně injikuje 20 mg/kg pentetrazolu. Bezprostředně po injekci se po dobu—5 .minut zaznamenává počet zvířat vykazujicíchklonické.křeče.¹

Výsledky se vyjádří jako AD₅₀> t.j. dávka, která chrání 50 % zvířat, přičemž výpočet se provede metodou kterou popsali J. T. Lichtfield a F. -Wilcoxon (J. Pharm. Exp. Ther.. (1949/, 96, 99-113) na základě 3 .nebo 4 dávek, z nichž každá . se podává skupině 8 až 10 krys.

. Hodnoty ,AD₅₀ .nejúčinnějších sloučenin podle vynálezu leží mez.i 0,1 a- 10 mg/kg při intraperitoneélním nebo orálním podání.

Studie antikonvulzivní účinnosti '

Účinnost na isoniazidem vyvolané křeče u myší

Vnitřní účinnost sloučenin se- stanoví pomocí doby latence do nástupu křečí vyvolaných subkutánním podáním isoniázidu v dávce 800 mg/kg současně s testovanou φφ

• φ · · · ' φ · · φ φφφφ φ φφ ·φφ - φφ ··

- ' , -. 38. sloučeninou injikovanou intraperitoneálně, podle metody kterou popsali' G. Perrault, E. Morel, D. Sanger a B. .Zivkov.ic v Eur. J. Pharmacol., 156, 189-196, (198,8). Výsledky se vyjádří j.ako AD₅₀, t.j. dávka,' která vyvolává 50 % 'maximálního účinku, vzhledem ke kontrolním zvířatům. Stanovení se provede na základě 3 nebo 4 dávek, z nichž každá se podává _? ' skupině 8 až 10 myší . Hodnoty AD₅₀ nejúčinnějších sloučenin podle· vynálezu leží v tomto testu mezi 1 a 20 mg/kg při a ' intraperitoneálnim podání a v závislosti’. na. konkrétní sloučenině může maximální účinek dosahovat až 400 %.

Výsledky testů, kterým bylý podrobeny sloučeniny podle vynálezu, prokazují, že tyto sloučeniny in vitro vytěsňují [ ^?H] -flumazenil z' jeho specifických vazebných, míst ω₂ , v ' mozečku a specifických, vazebných míst o₂ v. míše, vykazují afinitu k místům ω₂ a ω₂ nacházejícím se v makromolekulárním komplexu GABAý - místa ω - chlorový kanál.

In vivo působí sloučeniny podle vynálezu jako úplní nebo částeční agonisté vůči těmto subtypům receptoru. ·

Sloučeniny podle vynálezu . vykazují anxioiytické, hypnotické a antikonvulzivní vlastnosti.

V důsledku toho lze sloučeniny, podle vynálezu použít k léčení potíží spojených s poruchami GABA-ergního přenosu, jako je úzkost', poruchy spánky, epilepsie, křečovitost, * kontrakce svalů, kognitivní poruchy, - abstinenční příznaky související s alkoholem, tabákem nebo drogami, a podobně.' . Sloučeniny podle vynálezu lze rovněž použít k léčení Parkinsonovy nemoci a vše.ch typů extrapyramidálníčh syndromů. Konečně je lze použít rovněž k premedikaci a jako celková anestetika pro vyvolání nebo/a udržování anestezie, nebo jako lokální anestetika, popřípadě v kombinaci· s dalšími anestetiky nebo/a svalovými relaxanty nebo/a analgetiky.

Sloučeniny . podle vynálezu lze podávat ve formě·

- 39. -

libovolného' prostředku vhodného pro enterální, parenterální nebo transdermální podání, jako jsou tablety, dražé, kapsle, včetně tvrdých želatinových kapslí, suspenze nebo roztoky pro požití nebo injekce, jako jsou ..syrupy nebo tekutiny pro plnění ampuli, transdermální náplasti a podobně, v' kombinaci s vhodnými nosnými nebo/a pomocnými látkami, přičemž tyto prostředky obsahují dávku, která umožňuje denní podání 1 až 1000 mg účinné látky;

Claims

1. Derivát 4-o.xo-3, 5-dihydro-4H-pyridazino[ -1-acetamidu obecného-vzorce I 4,5-b] indol0

-ve kterém ·.

X představuje atom vodíku, atom halogenu, methylovou skupinu, méthoxyskupinu nebo fenylmethoxyskupinu,'

Y znamená atom vodíku, 1 nebo 2 atomy halogenů nebo hydroxylovou skupinu, méthoxyskupinu, nitroskupinu nebo methylovou.skupinu,

R, představuje atom vodíku nebo,alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, a symboly R₂ a R₃ nezávisle na sobě znamenají vždy atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až . 4 atomy uhlíku nebo fenylmethylovou skupinu, nebo symboly R₂ a' R₃ společně s. atomem dusíku, který je nese, tvoří azetidinylovou, ·. pyrrolidinylovou, 3-ethoxypyrrolidinylovou, piperidinylovou,.morfolinylovou, 4-methyl. piperazinylovou nebo 1,3-thiazolidinylovou skupinu.2. Derivát 4-oxo-3, 5-dihydro-'4H-pyridazino[ 4, 5-b] indol-1-acetamidu obecného vzorce I podle nároku 1, ve kterém X- je v poloze 8 nebo 9 a představuje atom vodíku nebo atom halogenu,

Y znamená atom vodíku, . ’ .

Rj představuje methylovou nebo ethylovou skupinu,

R₂ znamená atom vodíku nebo methylovou skupinu a

R, představuje' methylovou skupinu, ·· ···· ·· · ·* ·· • · · · · · · · · · · nebo symboly R₂ a R₃ společně s atomem dusíku, který je nese, _Λ . tvoří azeťidinylový nebo pyrrolidinylový kruh.

' . 3. Léčivo, .vyznačující s e tím, že je tvoří derivát . 4-oxo-3, 5-dihydró-4H-pyr.ida,zino,[ 4,5-b] indol-1-acetamidu obecného vzorce I podle· libovolného z nároků 1 a r

>» 4 . Farmaceutický prostředek, v y z n a č u j í c í se tím, že obsahuje derivát 4-oxo-3,5-dihydro-4H-pyridazino[ 4,5-b] indol-l-acetamidu obecného vzorce I podle libovolného z nároků 1 a 2, v kombinaci s nosnou nebo/a pomocnou látkou.