CZ20002810A3 - Použití extraktů rostlin Iris a Cimicifuga racemosa a tektorigeninu jako estrogenního organoselektivního léčiva bez uterotropního účinku - Google Patents

Description

Oblast techniky

Předložený vynález se týká extraktů z rostlin Iris (Iridaceae) podle patentového nároku 1, stejně jako extraktů z rostliny Cimicifuga racemosa, jako estrogenního organoselektivního léčiva a tektorigeninu a/nebo glykosidů tektorigeninu jako léčiva podle patentového nároku 8.

Dosavadní stav techniky

V ovariích se tvořící 17p-estradiol (v dalším označován také E2) má v organismu obecně proliferaci podporující účinek (když se dále bude mluvit o estradiolu, je vždy uvažován 17p-estradiol). Vedle řízení ženského cyklu má mezi jiným homeostatický vliv na látkovou výměnu v kostech a brání vzniku aterosklerotického plaku na endotelu cév.

V menopauze dochází k poklesu hladiny estradiolu následkem vyhasnutí funkce vaječníků. To vyúsťuje do zeslabení proliferačních pochodů a v hypothalamu to vede k zesílení aktivity generátoru impulsů GnRH. [Generátor impulsů spouštěče gonadotropního hormonu je druhem synchronizátoru v hypothalamu a taktuje pulsní vyplavování luteinizačního hormonu (LH), při čemž steroidy ovlivňují amplitudu a frekvenci.] Vznikající stimulované vyplavování LH vede u ženy v klimakteriu k rušivě pociťovaným vznikajícím návalům horkosti, tzv. hot flushes.

Při nepřítomnosti dostatečně vysoké hladiny estradiolu v krvi převažuje v kostní dřeni aktivita osteoklastů a tím odbourávání hmoty kostí, které přichází spolu s nebezpečím zlomenin kostry. Současně dlouhodobě existuje nebezpečí tvorby plaku v cévním systému a tím zvýšené riziko infarktu.

Stejně jako o extraktech z Cimicifuga racemosa tak také z Belamcanda sinensis je z lidového léčitelství známo, že mohou zmírňovat potíže kolem a po menopauze. Odvozovalo se to až dosud z toho, že extrakty obou rostlinných drog vykazují estrogenní účinek se vším jejich positivním působením na množství orgánů lidského těla, zejména mozek, vaječníky, kosti, cévní systém. Nevýhodné by byly estrogenní účinky na dělohu, vagínu, prsní tkáň a játra. Nežádoucí zatím však je, že • 4 • · · 4 • «4··· už dlouho při současném stavu techniky nebylo z těchto rostlinných drog k disposici žádné léčivo, které by mohlo být použito k organoselektivní profylaxi nebo terapii při nedostatku estrogenu.

Podstata vynálezu

Vycházeje z tohoto stavu techniky je proto úkolem předkládaného vynálezu poskytnout rostlinná léčiva s estrogenním účinkem, která vykazují organoselektivní účinek bez nebo jen s malým účinkem na dělohu.

Řešení tohoto úkolu se děje nezávisle na sobě podle význaků patentového nároku 1 vztahujících se na použití extraktů rostlin iris Iridaceae), a na použití extraktů z Cimicifuga racemosa podle nároku 3. Shora uvedený úkol je dále řešen význaky nároku 2 vztahujícími se na léčivo na basi tektorigeninu a/nebo jeho glykosidů podle nároku 8.

Další nezávislé řešení představuje tektorigenin a/nebo glykosid tektorigeninu obsahující nebo tektorigeninem a/nebo glykosidem tektorigeninu obohacený rostlinný extrakt podle nároku 11.

U pokusů in vitro a in vivo se překvapivě ukázalo, že extrakty připravené v organických rozpouštědlech nebo s nadkritickým CO₂ jak z rostlin iris (Iridaceae), zejména z Belamcanda sinensis, tak také z Cimicifuga racemosa, působí na centrální nervový systém, kostní systém a na cévní systém, při čemž účinek na dělohu, tak zvaný uterotropní účinek, chybí. Proto jsou podle vynálezu používané extrakty vhodné pro výrobu hotově formulovaných prostředků pro selektivní ošetřování a/nebo profylaxi osteoporósy. Dále jsou vhodné pro zhotovení hotově formulovaných prostředků pro selektivní ošetřování a/nebo profylaxi kardiovaskulárních onemocnění zvláště aterosklerosy. Jsou dále vhodné pro výrobu hotově formulovaných prostředků pro selektivní ošetřování a/nebo profylaxi psychovegetativních potíží kolem a po menopauze jako např. návalů horkosti.

Dále bylo zjištěno, že obsahová látka tektorigenin, který byl isolován z Belamcanda sinensis, má v podstatě stejné účinky jako celkový extrakt.

• · · · · * · φ φ * · φ φ φ φ φ · φ φφφφ φ φ φφ φ φφφφφ φφ φ φ φ φφ φφφφφ φφφφ φφφφ φφ ·Φ φφ φφ

ΗΟ

CH₃O

OH tektorigenin

Tato obsahová látka byla vedle Belamcanda sinensis nalezena i v jiných druzích iris porostů jako např. Iris germanica, I. tectorum, I. illyrica, I dichotoma.

Z taxonomického hlediska je zařazení Belamcanda sinensis následující:

Řád:	Liliales
Čeleď	: Iridaceae
Rod:	Belamcanda

Druh Belamcanda sinensis (Leman) DC. = Pardanthus chinensis (L.) Ker-Gawler též Ixia chinensis L. (= Gemmingia chinensis (L.) O. Kuntze

Při zhotovení extraktů se dává přednost oddenkům, lodyhám, listům a/nebo okvětním lístkům rostlin.

Zevrubný fytochemický popis Belamcanda sinensis a jejích obsahových látek byl podán v disertaci paní A. Nenninger (LMU Můnchen, 1997) pod titulem Phytochemische und pharmakologische Untersuchungen von Belamcanda sinensis, einer Arzneipflanze der TCM und anderer Irisarten.

S léčivy podle vynálezu jsou poprvé dány k disposici prostředky z Cimicifuga racemosa a Belamcanda sinensis a jiných druhů iris, stejně jako prostředky na basi tektorigeninu, které fungují jako plní agonisté estrogenových receptorů v kostech, kardiovaskulárním systému a v mozku.

Další výhody a znaky předkládaného vynálezu vyplývají z popisu experimentálních dat právě tak jako z obrázků.

Přehled obrázků na výkresech

Obr.1 ukazuje srovnání organické a vodné fáze Cimicifuga racemosa. Vytěsňovací křivka při representativním eseji vazby ligandů na estrogenový receptor.

4· ♦ · · · ······· · · · ·

Koncentrace výchozího roztoku je 17,66 mg/ml. Následují ředění jsou 1:2, 1:4 atd. až 1:64.

Obr. 2 ukazuje LH v séru 2 hodiny před a po intravenosní injekci extraktu Belamcanda sinensis, E2 a vehikulu. Extrakt Belamcanda sinensis má podobnou potenci snižovat zvýšenou hladinu LH v séru jako E2.

Obr. 3 ukazuje účinky Cimicifuga racemosa a E2 na hmotnost dělohy (obr. 3a) a hladinu LH v krvi (obr. 3b) u krys s odoperovanými vaječníky po sedmidenním subkutánním ošetřování (střední hodnoty + SEM, n=8, *= p< 0,05 vs. Cremophor jako vehikulum)

Obr. 3a) ukazuje hmotnost dělohy.

Obr. 3b) ukazuje koncentrace LH v krvi.

Obr. 4a) ukazuje účinky Cimicifuga racemosa a E2 u krys s odoperovanými vaječníky po sedmidenním subkutánním ošetření (střední hodnoty + SEM, n = 8, * = p < 0,05 vs. Cremophor jako vehikulum) na expresi mRNA pro E2-receptor a v preoptické oblasti hypothalamu.

Obr. 4b) ukazuje expresi mRNA pro IGF1 a C3 v děloze u krys s odoperovanými vaječníky po sedmi dnech subkutánní dávky a

Obr. 4c) ukazuje expresi mRNA pro kalagen 1 (ColH) a osteokalcin v kostech krys s odoperovanými vaječníky po sedmi dnech subkutánní dávky.

Příklady provedení vynálezu

Experimentální důkaz estrogenního účinku Cimicifuga racemosa a Belamcanda sinensis

Experimentální důkaz selektivního estrogenního účinku byl postupně prováděn na řadě rozdílně konvexních testovacích systémů.

• · · 9 · * · 9 * * * » • · · · · · φ · · · • 9 ♦ · 9 ·«· · · · · 9 • · · 9 · 9 9 9 · • •9« ···· ·· «· 99 9·

Příklad 1

1. Pokusy in vitro

1.1. Cimicifuga racemosa, pokusy in vitro

Rozeznání estrogenní struktury obsahových látek bylo in vitro prokázáno protilátkou zacílenou na 17p-estradiol (=E2). Extrakt Cimicifuga racemosa byl připraven do sucha. Rozdělením fází mezi dichlormethan a vodu došlo k obohacení látek s různou polaritou. Byla stanovena afinita obsahových látek obou fází k vazbě na receptory estrogenu z prasečí dělohy. Cytosolní receptory estrogenu z děloh prasat byly isolovány standardními procedurami a nasazeny do experimentů na potlačování ligandů.

Při tom bylo nalezeno, že estrogenní struktury, např. z Cimicifuga racemosa, nejsou povahy hydrofilní, ale lipofilní, protože se dají z extraktu extrahovat organickým rozpouštědlem. Látky, které se nalézají v extrahované organické fázi se vážou na protilátku přibližně desetkrát silněji než ty substance, které zůstávají ve fázi vodné.

Ještě větší rozdíl mezi oběma fázemi je při eseji vazby na receptor estradiolu. Podobnost substance vázající se s estradiolem musí být tak veliká, aby mohlo dojít k selektivní, kompetitivní interakci s receptorem estradiolu při preparaci buněk prosté. Při tomto testovacím systému vodná fáze žádnou aktivitu nemá, organická fáze se naproti tomu na receptor váže velmi pevně.

Výsledky jsou uvedeny na obr. 1.

1.2. Belamcanda sinensis in vitro

Z jiných výzkumů je známo, že v extraktech z Belamcanda sinensis jsou rovněž obsahové látky, které byly zjištěny protilátkou vůči 17p-estradiolu a vážou se na receptor 17p-estradiolu (viz Nenninger tamtéž). Autoři předkládaného vynálezu však překvapivě zjistili, že tyto extrakty působí estrogenně na rozdílné systémy orgánů různě, zvláště pak, že nemají uteroíopní účinek.

• * » 0 • * · * • · >

• · •000 0·0·

000 0 0

00 * * • 0 0 • 0 0

0 0

0« «0

2. Pokusy in vivo: důkaz estrogenního účinku na krysy s odoperovanými vaječníky

Vazba na receptor E2 je velice selektivní; nelze ovšem říci, zda procesy nastavší potom v buňce, jsou podporovány nebo potlačovány, tzn. zda je substance agonistou nebo antagonistou. Tato vlastnost může být stanovena pouze ve vhodných buněčných systémech nebo v celku na zvířeti.

Krysa s odoperovaným vaječníkem je osvědčeným modelem pro ženu po menopause, u které došlo ke zmizení endogenní produkce estradiolu. Externím přívodem 17p-estradiolu nebo látek s estrogenním působením dochází k obnovení na estrogen sensibilních anatomicky-morfologických parametrů, jako přibývání hmotnosti dělohy a výskyt zrohovatělých, tj. krust epitelových buněk na epitelu vagíny nebo hormonálních změn jako poklesu hladiny LH v krvi ošetřovaných zvířat.

Všechny v dalším popisované pokusy byly prováděny se Srague-ovými Dawley-ovými krysami s odoperovanými vaječníky (= ovx krysy) s hmotností mezi 240 a 280 g.

2.1. Jednorázová dávka Belamcanda sinensis

Nástup účinku estrádiolového působení extraktu Belamcanda sinensis nastává velice rychle. Již po jednorázové intravenosní dávce vehikula, estradiolu a extraktu Belamcanda sinensis krysám s odoperovanými vaječníky ustává pulsatilita při E2 stejně jako při Belamcanda sinensis. Při průměrném průběhu nastávají výrazná potlačování hladiny LH v séru jak ve srovnání s předešlými hodnotami, tak také ve srovnání s kontrolními zvířaty ošetřenými Cremophorem. Cremophor je emulgátor na basi polyethoxylovaných derivátů ricinového oleje.

Výsledky jsou uvedeny na obr. 2.

V děloze zvířat není šest hodin po injekci Belamcanda sinensis exprese děložních VEGF-, IGF- a C3-genů ve srovnání s kontrolami změněna, zatímco injekce estradiolu má za následek zřetelné zvýšení genové exprese těchto tří estrogenem regulovaných proteinů. Konstitutivně exprimovaný CCD-gen nebyl výrazně ovlivněn žádným z ošetření.

Z nálezů vyplývá, že obsahové látky Belamcanda sinensis v hypothalamických, estrogen-receptivních strukturách způsobují zábranu GnRH ·· «· ·· ·· ·· fefe ···· ···· ···· • · ···· ···« • fe ·· fe fefefe 9 fe fefe · fe · · · fe fe » fe fe fefefefe fefefefe ·· ·· fefe fefe generátoru pulsů, takže mají estrogen- agonistické účinky. Tím je výrazně brzděna hypofyzární LH-sekrece jak obsahovými látkami Belamcanda sinensis tak také estradiolem. Na rozdíl od estradiolu nemají obsahové látky z Belamcanda sinensis žádný uterotropní účinek. Estradiol reguluje výrazné zvyšování genové exprese VEGF, IGF1 a C3, což je efekt, který u Belamcanda sinensis zaznamenáván není.

Provedení akutního pokusu na účinek intravenosní injekce extraktu Belamcanda sinensis:

krysám (tj. 8 zvířat na skupinu) byl den před pokusem v etherové narkose implantován katétr do jugulárních žil. V den pokusu bylo odebíráno 6 vzorků krve v intervalech po 10 minutách. Bezprostředně po odebrání šestého vzorku bylo inravenosně injikováno 62,5 mg extraktu Belamcanda sinensis nebo 10 mg 17bestradiolu (E2) respektive rozpouštědla (5 %) Cremophoru v isotonickém NaCI (1 ml) a a další dvě hodiny byly v 10 minutových intervalech odebírány vzorky krve. 6 hodin po intravenosní dávce byla zvířata dekapitována, krev zachycena, byly odebrány dělohy, zváženy a v kapalném dusíku hluboce zmraženy.

2.2. Jednorázová dávka tektorigeninu

Po jednorázové dávce tektorigeninu byl určován časový průběh ovlivnění hladiny LH v krvi a estradiolu podobná imunní reaktivita.

Tectorigenin vyvolává rychlý pokles LH. Při tom kinetika tektorigeninem dosaženého poklesu LH, až do časové hranice 60 minut po intravenosní dávce, odpovídá přesně té, jako u estradiolu, ale potom nevede k dalšímu poklesu, nýbrž opět pomalu stoupá.

Provedení:

Ovx-krysám v etherové narkose byl 24 hodin před začátkem pokusu zaveden do vény jugularis externa katétr podle metody Harmse a Ojedy [Harms P.G., Ojeda

S.R.: A rapid and simple proceduře for chronic cannulation of the rat jugular vein, J. Appl. Physiol. (1974) 36, 391-392], Konec hadičky byl umístěn do kožní kapsy na zádech. Aby zvířata nemusela být pro odebírání krevních vzorků dotýkána, byl katétr prodloužen silikonovou hadičkou. Katétr a hadička byly promyty Ringerovým roztokem obsahujícím 50 IU heparinu v 1 ml.

• 9

9

9 9 9

999 9 9999 99 99 >9 9

9

9 9

9 9

Zvířatům byly v 10 intervalech odebírány krevní vzorky o 100 μΙ a odebraný objem byl nahrazován Ringerovým roztokem s heparinem. Po šestém vzorku byl intravenosně aplikován 1 ml příslušného testovacího roztoku. Jako testovací roztoky byly používány: 2 %-ní Cremophor (= roztok vehikula), tektorigenin 7 mg / ml vehikula, 17p-estradiol 10 pg / ml vehikula. Odběr krve byl v desetiminutových intervalech prováděn dalších 140 minut.

Takto získané vzorky krve byly naplněny do 0,5 ml Eppendorfovy reakční nádobky, která obsahovala 10 μΙ roztoku heparinu (5000 lU/ml, Liquemin), centrifugovány 10 min při 10 000 *g a plasma byla až do provedení imunologických radioesejů (RIA ) uložena při -20°C.

RIA pro LH a prolaktin jsou založeny na antisérech, referenčních a jodačních preparátech pro NIH (Bethesda, Maryland, USA). Koncentrace estradiolu a křížově reagujících isoflavonů byly měřeny pomocí RIA fy. DPC, Bad Nauheim.

2.3. Účinek extraktu Belamcanda sinensis po sedmidenním podávání

Účinky opakované dávky estradiolu, extraktu z Belamcanda sinensis a vehikula na celkovou hmotnost, hmotnost dělohy, hladinu hormonu a aktivaci genu v děloze a kostech byly po každodenní subkutánní aplikaci po sedm dní sledovány u krys s odoperovanými vaječníky.

Průměrné tělesné hmotnosti zvířat ošetřených Cremophorem a Belamcanda sinensis se neliší, zatímco zvířata ošetřená E2 byla výrazně lehčí. Také hmotnosti dělohy zvířat ošetřených Cremophorem a Belamcanda sinensis se výrazně neliší, zatímco ošetření E2 hmotnost dělohy více než ztrojnásobilo.

Hladiny LH v séru zvířat ošetřených Belamcanda sinensis byly proti kontrolám s Cremophorem nepatrně, ale signifikantně sníženy; zřetelnější snížení působil estradiol.

V děložním mRNA extraktu zvýšil estradiol po jednotýdenním ošetřování genovou expresi VEGF výrazně na 149 % hodnoty kontroly. Při extraktu Belamcanda sinensis byla exprese lehce, avšak ne výrazně zvýšena. Exprese estrogenem neregulovaného konstitutivního genu cytochrom C oxidásy (= CCO) nebyla ovlivněna. V extraktech z hlavy femuru byla stanovena exprese kolagen-1A1-, osteokalcin- IGF1- a právě tak TGFp-mRNA. Estradiol stejně jako Belamcanda

99

9 9

9 9

9 9

9 9 9

99 ·· *♦ *4 ·· • 9 9 · · ·· 9

9 9 9 9 9 • · 9 · 9 999

9 9 9 9

9999 9999 99 99 sinensis inhibují expresi všech čtyř genů výrazně, aniž by projevovaly vliv na konstitutivní CCO-gen.

Rozdílný účinek estradiolu a Belamcanda sinensis se velice zřetelně projeví po sedmidenním ošetřování. Extrakt z Belamcanda sinensis má pro estradiol agonistický vliv na hypofysární LH sekreci brzděním generátoru GnRH pulsů stejně jako na genovou expresi čtyř estrogenem regulovaných genů v kostech. Naproti tomu neexistuje žádný účinek na dělohu; ani hmotnost dělohy ani estrogenem regulovaný VEGF gen nejsou extraktem Belamcanda sinensis ovlivněny. Naproti tomu estradiol vede ke zduření dělohy a k aktivisaci VEGF genu.

Provedení subakutního pokusu na účinek denní subkutánní injekce po sedm dnů:

Příslušných osm zvířat na pokusnou skupinu (celkem 24) dostávalo denně mezi 08,00 a 09,00 hodin subkutánní injekci 62,5 mg extraktu z Belamcanda sinensis, respektive 10 pg estradiolu nebo rozpouštědla (5 %-ní Cremophor, 1 ml). 6 hodin po poslední aplikaci byla zvířata dekapitována a každému zvířeti byla odňata aorta, děloha a hlava levého femuru, byly očištěny a zmrazený v kapalném dusíku. Ve vzorcích krve byl stanoven LH a estradiolová imunoreaktivita.

2.4. Opakovaná dávka Cimicifuga racemosa

Zvířata nejdříve 14 dní po odoperování vaječníhů obdržela subkutánní injekcí příslušnou testovací látku v dávce 62,5 mg Cimicifuga racemosa na krysu nebo 8 pg estradiolu na krysu jednou denně po dobu 7 dní. Obě látky byly rozpuštěny v 5 %ním Cremophoru, kontrolní zvířata obdržela pouze vehikulum.

Po dekapitaci zvířat byly pro získání mRNA preparovány mozek, děloha a femur. Pomocí RIA byla v krvi stanovena koncentrace LH. Exprese estrogenem regulovaných genů ve shora jmenovaných orgánech byla stanovena pomocí semikvantitativního RT-PCR.

Dělohy estradiolem ošetřených zvířat jsou více než třikrát tak těžké než u zvířat ošetřených s Cimicifuga racemosa a vehikulem a ve svých průměrných hodnotách se prakticky neliší. To znamená, že obsahové látky Cimicifuga racemosa nemají na dělohu zvířat žádný vliv. To platí také pro vagínu, kde u zvířat ošetřených s • 4 *

Cimicifuga racemosa a vehikulem, nenastává v protikladu k estradiolem ošetřeným zvířatům žádné zrohovatění epitelové tkáně.

LH hladiny vehikulem ošetřených zvířat zůstávají vysoké, zatímco jak estradiolem tak s Cimicifuga racemosa jsou výrazně sníženy.

Výsledky jsou uvedeny na obr. 3a) a 3b).

• 4 44 44 44 ·4 » 4444 4444

4 · 4 4 · 4444

4 44 444444 44 4

4 44 4 4444

4444 4444 44 44 44 44

Hmotnosti dělohy (vlhké)

	Cremophor [kontrola]	Cimicifuga racemosa	E2
Počet zvířat	8	8	8
Průměrné hodnoty [mg]	185,6	192,3	702,1
SD	18,81	22,53	194,97
SEM	6,65	7,97	68,92

Koncentrace LH v krvi

	Cremophor [kontrola]	Cimicifuga racemosa	E2
Počet zvířat	8	8	8
Průměrné hodnoty [ng/ml]	16,9	12,5	7,83
SD	3,99	3,4	5,57
SEM	1,41	1,2	1,97

Jako další znak estrogenního působení byla měřena aktivace mRNA estrogenem indukovatelných proteinů. Při tom byla zkoumána tkáň z dělohy, z kostní dřeně (femur) a z preoptické oblasti hypothalamu.

Jak Cimicifuga racemosa tak také E2 stimulují pro estrogenový receptor a expresi mRNA (obr. 4a). Také v kostní dřeni se Cimicifuga racemosa chová jako estrogen a zmenšuje analogicky jako estradiol expresi mRNA pro kosti specifického kolagenu 1 a pro gen osteokalcinu (obr. 4b).

• · 9 4 9 9 94 94 44

4 4 9 4 4 4 4 4 4 4 4

9 4 9 4 9 4 4 4 4

4 9 9 9 944 4 9 4 4 4 • · 4 4 4 4 4 4 4

9444 4444 44 44 44 44

Naproti tomu se nepozoruje žádný účinek Cimicifuga racemosa na estrogenem regulované geny v děloze. mRNA pro IGF1 a komplementární faktor C3 zvyšuje pouze estradiol (obr. 4c).

Tato zjištění dokládají, že obsahové látky z Cimicifuga racemosa působí na jednotlivé orgány selektivně: extrakt působí estrogenně v hypothalamu (exprese E2 receptorů a, uvolňování LH) a na kostech, jak dokázáno expresí genů pro kolagen 1 a osteokalcin. Na rozdíl od estradiolu nemá však Cimicifuga racemosa žádný vliv na dělohu, jak ukazuje chybějící účinek na hmotnost dělohy a exprese genu pro IGF1 a C3.

In vitro a in vivo uskutečněnými pokusy bylo možné ukázat, že extrakty z Cimicifuga racemosa a z Belamcanda sinensis působí estrogenním účinkem. Překvapivě bylo zjištěno, že extrakty z jmenovaných drog působí organoselektivně na ZN$, kosti a cévy, avšak nikoliv na dělohu, a proto se vynikajícím způsobem hodí k profylaxi a terapii nedostatku estrogenu, aniž by měly negativní vliv na endometrium.

Stejné účinky se docílily v Belamcanda obsaženým tektorigeninem.

Tímto jsou poprvé dána k disposici léčiva, která vykazují estrogenní účinek, avšak bez uterotropního působení.

Léčiva tohoto druhu mohou být aplikována pro ošetřování a/nebo profylaxi kardiovaskulárních onemocnění, zejména aterosklerosy, osteoporósy, stejně jako psychovegetativních potíží kolem a po menopause jako např. návalů horkosti.

Jako aplikační způsoby stojí v popředí orální, intravenosní a subkutánní aplikace.

flfl 99 ·· ·· 99 • 99« · 9 · 9 9999

9 9999 9999 • 9999 999 99 99 9 a ~ 99 9999999 ···· ···· ·· ♦· ·· *· ^Ooo-Mo

Claims (13)

1. PATENTOVÉ NÁROKY (Původní)

   1. Použití extraktů z rostlin iris (Iridaceae) k výrobě estrogenního, organoselektivního léčiva bez, nebo alespoň se zanedbatelným uterotropním účinkem.
2. 2. Použití podle nároku 1.vyznačuj ící setím, že extrakty jsou vyrobeny z Belamcanda sinensis.
3. 3. Použití extraktů z Cimicifuga racemosa pro výrobu estrogenního, organoselektivního léčiva bez, nebo alespoň se zanedbatelným uterotropním účinkem.
4. 4. Použití extraktů obsahujících tektorigenin a/nebo glykosid tektorigeninu s výjimkou extraktů z rostlin iris nebo tektorigeninem a/nebo glykosidem tektorigeninu obohacených extraktů k výrobě estrogenního, organoselektivního léčiva bez, nebo alespoň se zanedbatelným uterotropním účinkem.
5. 5. Použití podle některého z nároků 1 až 4 vyznačující se tím, ž e extrakt slouží k přípravě hotově formulovaného prostředku pro selektivní ošetřování a/nebo profylaxi kardiovaskulárních onemocnění, zvláště aterosklerosy.
6. 6. Použití podle některého z nároků 1 až 4 vyznačující setím, ž e extrakt slouží k přípravě hotově formulovaného prostředku pro selektivní ošetřování a/nebo profylaxi osteoporósy.
7. 7. Použití podle některého z nároků 1 až 4 vyznačující se tím, ž e extrakt slouží k přípravě hotově formulovaného prostředku pro selektivní ošetřování a/nebo profylaxi klimakterických potíží, zejména zabránění nebo zmírnění návalů horkosti.
8. 8. Tektorigenin a/nebo jeho giykosidy jako léčivo.

   ·· á· ·· ·· • · « · ···· ···· · ·· · « · · ··· · · · · 9 • · ' ·· ·· e t í m, ž e je se zanedbatelným se t í m, ž e je • · • · ···· ····
9. 9. Léčivo podle nároku 8 vyznačující s estrogenním, organoselektivním léčivem bez, nebo alespoň uterotropním účinkem.
10. 10. Léčivo podle nároku 8 nebo 9 vyznačující to léčivo pro selektivní ošetřování a/nebo profylaxi kardiovaskulárních onemocnění, zvláště aterosklerosy, osteoporósy stejně jako klimakterických potíží, zejména zabránění nebo zmírnění návalů horkosti.
11. 11. Tektorigenin a/nebo glykosid tektorigeninu nebo tektorigeninem a/nebo glykosidem tektorigeninu obohacený rostlinný extrakt.
12. 12. Rostlinný extrakt podle nároku 11 vyznačující se t í m, ž e je estrogenním, organoselektivním léčivem bez, nebo alespoň se zanedbatelným uterotropním účinkem.
13. 13. Rostlinný extrakt podle nároku 11 nebo 12 vyznačující se t í m, ž e je to léčivo pro selektivní ošetřování a/nebo profytaxi kardiovaskulárních onemocnění, zvláště aterosklerosy, osteoporósy stejně jako klimakterických potíží, zejména zabránění nebo zmírnění návalů horkosti.