CZ20002459A3 - Inhibitory matričních metaloproteinas, způsoby jejich výroby, farmaceutické kompozice a způsoby léčení na jejich bázi - Google Patents

Inhibitory matričních metaloproteinas, způsoby jejich výroby, farmaceutické kompozice a způsoby léčení na jejich bázi Download PDF

Info

Publication number
CZ20002459A3
CZ20002459A3 CZ20002459A CZ20002459A CZ20002459A3 CZ 20002459 A3 CZ20002459 A3 CZ 20002459A3 CZ 20002459 A CZ20002459 A CZ 20002459A CZ 20002459 A CZ20002459 A CZ 20002459A CZ 20002459 A3 CZ20002459 A3 CZ 20002459A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
mmol
phenyl
carbonyl
amino
dimethyl
Prior art date
Application number
CZ20002459A
Other languages
English (en)
Inventor
Michael Jonathan Fray
Roger Peter Dickinson
Kevin Neil Dack
Original Assignee
Pfizer, Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from GBGB9800510.1A external-priority patent/GB9800510D0/en
Priority claimed from GBGB9811843.3A external-priority patent/GB9811843D0/en
Application filed by Pfizer, Inc. filed Critical Pfizer, Inc.
Publication of CZ20002459A3 publication Critical patent/CZ20002459A3/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/75—Amino or imino radicals, acylated by carboxylic or carbonic acids, or by sulfur or nitrogen analogues thereof, e.g. carbamates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/08—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for gonadal disorders or for enhancing fertility, e.g. inducers of ovulation or of spermatogenesis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/22—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton having nitrogen atoms of amino groups bound to the carbon skeleton of the acid part, further acylated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C259/00—Compounds containing carboxyl groups, an oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a nitrogen atom, this nitrogen atom being further bound to an oxygen atom and not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C259/04—Compounds containing carboxyl groups, an oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a nitrogen atom, this nitrogen atom being further bound to an oxygen atom and not being part of nitro or nitroso groups without replacement of the other oxygen atom of the carboxyl group, e.g. hydroxamic acids
    • C07C259/06—Compounds containing carboxyl groups, an oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a nitrogen atom, this nitrogen atom being further bound to an oxygen atom and not being part of nitro or nitroso groups without replacement of the other oxygen atom of the carboxyl group, e.g. hydroxamic acids having carbon atoms of hydroxamic groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C259/00—Compounds containing carboxyl groups, an oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a nitrogen atom, this nitrogen atom being further bound to an oxygen atom and not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C259/12—Compounds containing carboxyl groups, an oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a nitrogen atom, this nitrogen atom being further bound to an oxygen atom and not being part of nitro or nitroso groups with replacement of the other oxygen atom of the carboxyl group by nitrogen atoms, e.g. N-hydroxyamidines
    • C07C259/18—Compounds containing carboxyl groups, an oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a nitrogen atom, this nitrogen atom being further bound to an oxygen atom and not being part of nitro or nitroso groups with replacement of the other oxygen atom of the carboxyl group by nitrogen atoms, e.g. N-hydroxyamidines having carbon atoms of hydroxamidine groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D317/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D317/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3
    • C07D317/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 not condensed with other rings
    • C07D317/32—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 not condensed with other rings with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D317/34—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/07—Optical isomers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2602/00—Systems containing two condensed rings
    • C07C2602/02—Systems containing two condensed rings the rings having only two atoms in common
    • C07C2602/04—One of the condensed rings being a six-membered aromatic ring
    • C07C2602/08—One of the condensed rings being a six-membered aromatic ring the other ring being five-membered, e.g. indane
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Pregnancy & Childbirth (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

( 57) Anotace:
Sloučeniny obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodné soli nebo solváty všech těchto látek, kde obecné symboly mají specifický význam, jsou užitečné jako inhibitory matričních metaloproteinas. Popsány jsou také způsoby těchto sloučenin a farmaceutické kompozice s obsahem těchto sloučenin.
ιυυυ - 2459 Α3
01-1447-00-Ma
Inhibitory matričních metaloproteinas, způsoby jejich výroby, farmaceutické kompozice a způsoby léčení na jejich bázi
Oblast techniky
Vynález se týká určitých sloučenin a jejich farmaceuticky vhodných solí, které inhibují matriční metaloproteinasy (MMP), zejména MMP-3, MMP-12 a MMP-13, a farmaceutických kompozic a způsobů léčení na jejich bázi. Tyto sloučeniny jsou tedy užitečné při léčení savců trpících stavy, které lze zmírňovat inhibicí MMP, zejména MMP-3, MMP-12 a MMP-13.
Dosavadní stav techniky
Matriční metalloproteinasy (MMP) tvoří třídu strukturně podobných metalloproteinas obsahujících zinek, které se účastní remodelace, opravy a degradace extracelulárních matričních proteinů, a to jak u normálních fyziologických procesů, tak i^patologických stavů. Jelikož MMP mají vysoký destrukční potenciál, jsou přísně regulovány a selhání regulace MMP může být součástí řady chorob a patologických stavů. Jako příklady stavů, u nichž se předpokládá důležitá role MMP,je možno uvést přestavbu kostí, implantaci embrya v děloze, infiltraci imunitních buněk do míst zánětu, ovulaci, spermatogenesi, přestavbu tkání během hojení ran a diferenciaci orgánů, k nimž dochází u žilních a diabetických vředů, proleženin, vředů tlustého střeva, například při . ulcerosni kolitis a Crohnově chorobě, duodenálních vředy, fibrózy, místní invazi nádorů do sousedních oblastí, metastatického šíření nádorových buněk z primárních na sekundární místa, tkáňové destrukce u arthritis, kožních poruchy) • · jako je dystrofická epidermolysis bulosa, dermatitis herpetiformis nebo stavů vyvolaných nebo komplikovaných embolickými jevy, jako jsou chronické nebo akutní srdeční nebo mozkové infarkty.
Stavy, u nichž se předpokládá účast MMP-3 a MMP-13 zahrnují destrukci tkání, jak je tomu u žilních a diabetických vředů, proleženin, vředů tlustého střeva, například při ulcerosní kolitis a Crohnově chorobě, duodenálních vředů a destrukci tkání u arthritis, kožních poruch, jako je dystrofická epidermolysis bulosa, dermatitis herpetiformis nebo stavy vyvolané nebo komplikované embolickými jevy, jako jsou chronické nebo akutní srdeční nebo mozkové infarkty.
Další důležitou funkcí určitých MMP je aktivace jiných enzymů, jako jsou jiné MMP, vyštěpením prodomény z jejich proteinasové domény. Některé MMP tedy regulují aktivity jiných MMP, takže nadprodukce jedné MMP může vést k nadměrné proteolýze extracelulární matrice jinou MMP.
Má se za to, že nadprodukce MMP-3 je zodpovědná za patologickou degradaci tkání, která je základem řady chorob a stavů. Například MMP-3 byla nalezena v synoviu a chrupavce pacientů postižených osteoarthritis a rheumatoidní arthritis, což tedy prokazuje účast MMP-3 na poškození kloubů vyvolaném těmito chorobami (viz K. L. Sirům, C. E. Brinkerhoff, Biochemistry, 1989, 28, 8691; a Z. Gunja-Smith, H. Nagasse,
J. F. Woessner, Biochem. J. 1989, 258, 115). O MMP-13 se také předpokládá, že hraje významnou roli v patologii osteoarthritis a rheumatoridní arthritis (M. Stahle-Backdahle,
B. Sandstedt, K. Bruče, A. Lindahl, M. G. Jimenez, J. A.
Vega, C. Lopez Otin, Lab. Invest., 1997, 76, 717 až 728; a O. Lindy, Y. T. Konttinen, T. Sorsa, Y. Ding, S. Santavirta, A. Ceponis, C. Lopez Otin, Arthritis Rheum., 1997,
40, 1391 až 1399).
• ·
Nadexprese MMP-3 se rovněž pokládá za zodpovědnou za mnoho tkáňových poškození a chronických stavů nebo chronických ran, jako jsou žilní vředy, diabetické vředy a proleženiny (viz M. Vaalamo, M. Weckroth, P. Puoakkainen, J. Keře, P. Saarinen, J. Lauharanta, U. K. Saarialho-Kere, Brit. J. Dermatology, 1996, 135, 52 až 59).
Během hojení normálních a chronických ran je MMP-l exprimována migrujícími keratinocyty na okrajích rány (U. K. Saarialho-Kere, S. O. Kovacs, A. P. Pentland, J. Clin. Invest. 1993, 92, 2858 až 2866). Existuje důkaz, na jehož základě lze usoudit, že MMP-l je potřebná pro migraci keratinocytů na matrici kolagenu typu I in vitro, a je zcela inhibována přítomnosti neselektivního inhibitoru MMP, látky SC44463 ((N4-hydroxy)-Nl-[(1S)-2-(4-methoxyfenyl)methyl-l-((lR)-methylamino)karbonyl)]-(2R)-2-(2-methylpropyl)butandiamidu) (B. K. Pilcher, J. A. Dumin, B. D. Sudbeck, S. M. Krane, H. G. Welgus, W. C. Parks, J. Cell. Biol., 1997, 137, 1 až 13). Migrace keratinocytů in vivo pro nezbytná, aby došlo k efektivnímu zhojení ran.
Zdá se, že MMP-2 a MMP-9 hrají důležitou roli při hojení ran během fáze zvýšené přestavby (MMP-2) a nástupu reepitelizace (MMP-9) (M. S. Agren, Brit. J. Dermatology, 1994, 131, 634 až 640; T. Sálo, M. Mákánen, M. Kylmániemi, Lab. Invest., 1994, 70, 176 až 182). Účinný neselektivní inhibitor MMP BB94 ((2S,3R)-5-methyl-3-{[(1S)-1-(methylkarbamoyl)-2-fenylethylJkarbamoyl}-2-[(2-thienylthio)methyl]hexanohydroxamová kyselina, batimastat) inhibuje invazi základu membrány endotheliálními buňkami, čímž inhibuje angiogenesi (G. Tarboletti, A. Garofalo, D.
Belotti, T. Drudis, P. Borsotti, E. Scanziani, P. D. Brown, R. Giavazzi, J. Nati. Cancer Inst., 1995, 87, 293 až 298). Existuje tedy důkaz, že tento proces vyžaduje aktivní MMP-2 a/nebo 9.
O neselektivních inhibitorech MMP, které inhibují MMP 1 a/nebo 2 a/nebo 9, se tudíž má za to, že zhoršují hojení ran. Jak je již uvedeno výše, MMP-14 je odpovědná za aktivaci MMP-2, a inhibice MMP-14 tedy také může vést ke zhoršenému hojení ran.
Předpokládá se také, že produkce MMP-3 se také účastní na poškození tkání při stavech, kdy dochází k ulceraci tračníku (jako je ulcerosní kolotis a Crohnova choroba, viz S. L. Pender, S. P. Tickle, A. J. Docherty, D. Howie, N. C. Wathen, T. T. MacDonald, J. Immunol., 1997, 158, 1582; C. J. Bailey, R. M. Hembry, A. Alexander, Μ. H. Irving., Μ. E. Grant, C. A. Shuttleworth, J. Clin. Pathol., 1994, 47, 113 až 116) nebo dvanáctníku (viz U. K. Saarialho-Kere, M. Vaalamo, P. Puolakkainen, K. Airola, W. C. Parks, M. L. Karjalainen-Lindsberg, Am. J. Pathol., 1996, 148, 519 až 529). Rovněž je pravděpodobné, že MMP-1 a MMP-2 jsou potřebné během fáze hojení těchto stavů. Selektivní inhibitor MMP-3 by byl účinnější než neselektivní inhibitor.
O MMP-3 se také má za to, že se podílí na chorobách kůže, jako je dystrofická epidermolysis bullosa (T. Sáto, K. Nomura, I. Hashimoto, Arch. Dermatol. Res., 1995, 287, 428) a dermatitis herpetiformis (K. Airola, M. Vaalamo, T. Reunala, U. K. Saarialho-Kere, J. Invest. Dermatology, 1995, 105, 184 až 189).
Ruprura atherosklerotických plaků, na níž se podílí MMP-3, může vést k srdečnímu nebo mozkovému infarktu (F.
Mach et al., Circulation, 1997, 96, 396 až 399). Inhibitory MMP-3 proto mohou být užitečné při léčení stavů vyvolaných nebo komplikovaných embolickými fenomény, jako je chronický nebo akutní srdeční nebo mozkový infarkt.
• ·
O MMP-12 (makrofágové elastase) se předpokládá, že se podílí na patologii atherosklerosy, gastrointestinálních vředů a emfyzému. Například při rozvíjející se atherosklerose u králičího modelu je MMP-12 v hojné míře exprimována makrofágovými pěnovými buňkami (S. Matsumoto et al., Am. J. Pathol. 1998, 153, 109). MMP-12 je také hojně exprimována makrofágy v blízkém okolí ubývající mukosální výstelky při gastrointestinálních vředech u člověka, jak je tomu u pacientů s ulcerosní kolitis a Crohnovou chorobou (M. Vaalamo et al., Am. J. Pathol., 1998, 152, 1005). Má se za to, že MMP-12 hraje důležitou roli při progresi poškození plic cigaretovým kouřem. Při modelu emfyzému indukovaného cigaretovým kouřem byly myši postrádající gen pro MMP-12 odolné proti rozvoji tohoto stavu, zatímco myši divokého typu utrpěly výrazné poškození plic (R. D. Hautamaki et al., Science, 1997, 277, 2002).
Přehledné články o MMP lze nalézt v Zask et al., Current Pharmaceutical Design, 1996, 2, 624 až 661; Beckett, Exp. Opin. Ther. Patents, 1996, 6, 1305 až 1315; a Beckett et al., Drug Discovery Today, sv. 1 (č. 1), 1996, 16 až 26.
Alternativní názvy různých MMP a jejich substrátů jsou uvedeny v následující tabulce (Zask et al., výše).
Tabulka
Enzym Jiný název
Preferované substráty
MMP-1 kolagenasa-1; intercticial- kolageny I, II, III, ní kolagenasa
MMP-2 želatinasa A;
72kDa želatinasa
VII, X; želatiny želatiny; kolageny IV V, VII, X; elastin, fibronektin; aktiváty pro-MMP-13 • · • ·
MMP-3 stromelysin-1 proteoglykany; laminin fibronektin; želatiny;
MMP-7 pumpa, matrilysin proteoglykany; laminin fibronektin; želatiny; kolagen IV; elastin; aktiváty pro-MMP-1 a -:
MMP-8 kolagenasa-2; neutro- filní kolagenasa kolageny I, II, III
MMP-9 želatinasa B; 92kDa želatinasa želatiny; kolageny IV, V; elastin
MMP-12 makrofágová metaloelastasa elastin; kolagen IV; fibronektin; aktiváty pro-MMP-2 a -3
MMP-13 kolagenasa-3 kolageny I, II, III; želatiny
MMP-14 MT-MMP-1 aktiváty pro-MMP-2 a pro-MMP-13; želatiny
MMP-15 MT-MMP-2 neznámé
MMP-16 MT-MMP-3 aktiváty pro-MMP-2
MMP-17 MT-MMP-4 neznámé
Řada publikací, včetně některých publikací citovaných výše, popisuje sloučeniny obecného vzorce GENMMP o p,· θ
A^A^sAn/’· (GENMMP) p;
··· · * · ,J. ». »· ·· .....
kde A je známa jako alfa skupina a XCO představuje skupinu, která váže zinek, jako je zbytek karboxylové kyseliny nebo hydroxamové kyseliny, jako inhibitory MMP.
V přehledném článku Beckett et al., citovaném výše, se uvádí, že v poloze P2' je tolerováno značné množství různých skupin, aniž by to mělo výrazný vliv na chování těchto sloučenin.
V mezinárodní patentové přihlášce WO96/33165 a WO96/33161 (British Biotech Pharmaceuticals Ltd.) jsou genericky popsány sloučeniny obecného vzorce GENMMP znázorněného výše, kde mj. P3' představuje popřípadě substituovanou fenylalkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části a P3' představuje skupinu CHRxRy, kde Rx a Ry představují opopřípadě substituované fenylové nebo heteroarylové kruhy. O těchto sloučeninách se uvádí, že jsou selektivními inhibitory MMP-3 a MMP-7 vzhledem k lidské fibroblastové kolagenase (MMP-1) a 72kDa želatinase (MMP-2).
V mezinárodní patentové přihlášce W096/16027 (Syntex lne. a Agouron Pharmaceuticals lne.) jsou popsány inhibitory MMP obecného vzorce GENMMP znázorněného výše, kde skupina COX zahrnuje CO2H a CONHOH, P^' představuje skupinu R2X, která zahrnuje popřípadě substituovanou arylalkylenskupinu s 0 až 4 atomy uhlíku v alkylenové části, a P3 ' představuje skupinu (CH9)„R7, kde p představuje číslo 0 až 4, přičemž když p nepředstavuje číslo 0, potom R^X představuje bifenylalkylskupinu, a R7 představuje arylskupinu nebo heteroarylskupinu. Sloučeniny, kde p představuje číslo 0, 2 nebo 2, jsou uvedeny jako přednostní a sloučeninám, kde p představuje číslo 0 a COX představuje skupinu CO2H nebo CONHOH se dává přednost při inhibici matrilysinu (tj.
MMP-7).
Řada sloučenin z uvedené patentové přihlášky W096/16027 obecného vzorce GENMMP byla popsána skupinou Agouron (2nd Winter Conference on Medicinal and Bioorganic Chemistry, Steamboat Springs, Colorado, USA, leden 1997), například kde X představuje hydroxyskupinu, Pj' představuje popřípadě 4'-substituovanou biarylpropylskupinu, P2' představuje isobutylskupinu a P3 ' představuje 4-methoxykarbonylfenylskupinu. 0 těchto sloučeninách se uvádí, že mají špatnou až střední MMP-3/MMP-2 selektivitu. Zjistilo se, že použití alfa-substituentu a nahrazení 4-methoxykarbonylfenylového zbytku 4-methylthiofenylskupinou značně zvyšuje MMP-3/MMP-2 selektivitu.
V Beckettově přehledném článku (viz výše) je také zmíněna sloučenina skupiny Agouron (č. 31 přehledu) obecného vzorce GENMMP, kde X představuje hydroxyskupinu, Pj^' představuje bifenylpropylskupinu, P2' představuje terc.butylskupinu a P3' představuje 4-pyridylskupinu. Tato sloučenina má téměř stejné hodnoty pro MMP-3 a MMP-2, takže není selektivní pro MMP-3 vzhledem k MMP-2.
Mezinárodní patentová přihláška WO95/12603 (Syntex) popisuje sloučeniny, o nichž se uvádí, že jsou inhibitory MMP-3 a MMP-7, obecného vzorce GENMMP znázorněného výše, kde P3' představuje substituovaný fenylový zbytek a Pj_' zahrnuje arylalkylskupinu.
Nyní byla vyvinuta skupina sloučenin inhibujících MMP s dobrou aktivitou pro MMP-3, MMP-12 a MMP-13 a dobrou selektivitou pro MMP-3 oproti ostatním MMP, jako MMP-1, 2, a 14. Zjistilo se, že v této skupině sloučenin, že selektivita pro MMP-3 je značně závislá na konkrétní kombinaci substituentů P-jJ a P3' , což je výsledek, který na základě výše popsaného dosavadního stavu techniky, nebylo možno předvídat.
t · ·· 4 » * · * * • · · · · φ 9 9 999 · 9
Podstata vynálezu
Předmětem vynálezu tedy jsou sloučeniny obecného vzorce I kde
(i:
RJ představuje vodík, hydroxyskupinu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo alkenylskupinu se 2 až 4 atomy uhlíku;
Rz představuje alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku popřípadě substituovanou fluorem, indolylskupinou, imidazolylskupinou, skupinou SO2-alkyl s 1 až 4 atomy uhlíku, cykloalkylskupinou s 5 až 7 atomy uhlíku nebo popřípadě chráněnou skupinou OH, SH, CONH2, CO2H, NH2 nebo NHC(=NH)NH2, cykloalkylskupinu s 5 až 7 atomy uhlíku popřípadě substituovanou alkylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo benzylskupinu popřípadě substituovanou popřípadě chráněnou hydroxyskupinou, alkoxyskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, benzyloxyskupinou nebo benzylthioskupinou, přičemž případné chránící skupiny skupin OH, SH, CONH2, NH2 nebo NHC(=NH)NH2 jsou zvoleny ze souboru sestávajícího z alkylskupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, benzylskupiny a alkanoylskupiny s 1 až 6 atomy uhlíku a případné chránící skupiny skupiny CO2H jsou zvoleny ze souboru sestávajícího z alkylskupiny s 1 až 6 atomy uhlíku a benzylskupiny;
• 9 *
9
9· 99
·
9
R3 , R5 a R6 představují každý nezávisle vodík nebo fluor; R4 představuje skupinu CH3, chlor nebo fluor;
X představuje skupinu HO nebo HONH;
představuje představuje přímou vazbu nebo kyslík;
buď skupinu obecného vzorce
(a) kde
Ω
R představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxymethylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxy lové části, hydroxyalkylskupinu se 2 až 4 atomy uhlíku, karboxyalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části nebo (amino nebo dimethylamino)alkylskupinu se 2 až 4 atomy uhlíku v alkylové části; a
R11 představuje fenylskupinu, naftylskupinu nebo pyridylskupinu, popřípadě substituovanou až třemi substituenty nezávisle zvolenými z halogenu a me thy1skupiny;
nebo skupinu obecného vzorce b kde
(b)
R14 představuje vodík, OH, CH3 nebo halogen;
Ar • *
představuje skupinu obecného vzorce c d nebo e
kde
A představuje dusík nebo skupinu CR12;
B představuje dusík nebo skupinu CR13;
přičemž A a B nepředstavují oba dusík;
R7 a R9 představuje každý nezávisle vodík nebo fluor;
R8, R12 a R13 představuje každý nezávisle vodík, CN, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, hydroxyalkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, hydroxyalkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkoxyalkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v každé z alkoxylových částí, (amino nebo dimethylamino)alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, CONH2, OH, halogen, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkoxymethylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové části, piperazinylkarbonylskupinu, piperidylskupinu, C(NH2)=NOH nebo C(=NH)NHOH, přičemž alespoň dva z R8, R12 a R13 představují vodík;
a jejich farmaceuticky vhodné soli nebo solváty všech těchto látek.
• ·♦ • · · · • «· • · * * ♦ · · • · · · · ·· ·♦ • · · · • · · * « ♦ ··· • · · ·· »·
Alkylskupiny, včetně alkylových částí alkoxyskupin a alkenylskupin, mohou mít řetězec přímý nebo rozvětvený, v případě, že to počet atomů uhlíku umožňuje.
Pod pojmem halogen se rozumí fluor, chlor, brom nebo jod.
Sloučeniny podle vynálezu jsou inhibitory MMP a jsou zvláště účinnými a selektivními inhibitory MMP-3, zejména s dobrou selektivitou vzhledem k MMP-1, 2, 9 a/nebo 14. Některé ze sloučenin podle vynálezu kromě toho mohou vykazovat inhibiční aktivitu na MMP-12 a/nebo MMP-13.
R1 přednostně představuje vodík, OH, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku. Ve výhodnějším provedení R1 představuje vodík, OH, n-propylskupinu nebo ethoxyskupinu. R1 nejvýhodněji představuje vodík.
R2 přednostně představuje alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku popřípadě substituovanou indolylskupinou, alkylthioskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, skupinou SO2-alkyl s 1 až 4 atomy uhlíku, cykloalkylskupinou s 5 až 7 atomy uhlíku, hydroxyskupinou nebo skupinou SH; cykloalkylskupinu s 5 až 7 atomy uhlíku popřípadě substituovanou alkylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku; nebo R2 představuje benzylskupinu. Ve výhodnějším provedeni R“6 představuje alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku popřípadě substituovanou hydroxyskupinou, skupinou SO2-alkyl s 1 až 4 atomy uhlíku nebo cykloalkylskupinou s 5 až 7 atomy uhlíku; cyklohexylskupinu substituovanou alkylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo R2 představuje benzylskupinu. V ještě výhodnějším provedení R2 představuje cyklohexylmethylskupinu, isopropylskupinu, 1-methylcyklohexylskupinu, terc.butylskupinu, skupinu C(CH3)2SO2CH3, benzylskupinu nebo C(CH3)2OH. R2 ještě « ·· • ♦ · · • ·· · · ♦ * * • · · ·· • * · • · » « ·«·
výhodněji představuje isopropylskupinu, terc.butylskupinu nebo benzylskupinu, a nejvýhodněji terc.butylskupinu.
V přednostním provedení obecného vzorce a představuje skupinu
(a) kde R10 představuje alkylskupinu s l až 4 atomy uhlíku, alkoxymethylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylové části nebo hydroxyalkylskupinu se 2 až 4 atomy uhlíku, a R11 představuje fenylskupinu nebo pyridylskupinu, které jsou popřípadě substituovány až třemi substituenty nezávisle zvolenými z halogenu a methylskupiny; nebo Z představuje skupinu vzorce
Z výhodněji představuje skupinu obecného vzorce a
R” am» (a) kde R10 představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxymethylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylové části nebo hydroxyalkylskupinu se 2 až 4 atomy uhlíku, a R11 představuje fenylskupinu, pyridin-4-ylskupinu nebo pyridin-3-ylskupinu; nebo Z představuje skupinu vzorce ·* t 4 0 4
V ještě výhodnějším provedení obecného vzorce a
Z představuje skupinu (a) kde R10 představuje CH3, CH2OCH3 nebo CH2OH, a R11 představuje fenylskupinu, pyridin-4-ylskupinu nebo pyridin-3-ylskupinu, nebo Z představuje skupinu vzorce
Z nejvýhodněji skupinu vzorce představuje
R3 přednostně představuje vodík.
R4 přednostně představuje fluor, když Y představuje kyslík.
R4 přednostně představuje chlor nebo CH3, když Y představuje přímou vazbu.
R5 přednostně představuje vodík.
R6 přednostně představuje vodík.
Ar přednostně představuje skupinu obecného vzorce c
Λ *
>· ·
• » »· • · • · · · * • · « » «4» ·* ··· ·· r'
Ř’ (c) kde
A představuje skupinu CR12;
B představuje skupinu CR13;
R7 a R9 představuje každý nezávisle vodík nebo fluor;
R8 a R13 představuje každý nezávisle vodík, fluor, chlor,
CN, CONH2, CH3 nebo OCH3; a
R představuje vodík, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, CN, hydroxyalkylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku, (amino nebo dimethylamino)alkylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, CONH2, OH, halogen, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkoxymethylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové části, piperazinylkarbonylskupinu, piperidylskupinu, C(NH2)NOH nebo C(=NH)NHOH.
Ve výhodnějším provedení Ar představuje skupinu obecného vzorce c r’ r’ (c) r’ kde A představuje CR12, B představuje CR13 a R7, R8 a R9 představují atomy vodíku.
*· ·· ·* .. .
« · ···! ί ί «4 · · · · · ·
Λ · · · · ··· 9 · · • · · · · · · • ·· ·· ·· ·· *
Ještě výhodněji Ar představuje skupinu obecného vzorce c
(c) kde představuje skupinu CR12;
představuje skupinu CR13;
R7, R8 a R9 představují atomy vodíku;
představuje vodík, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, CN, hydroxyalkylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku, (amino nebo dimethylamino)alkylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, CONH2, OH, halogen, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkoxymethylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, C(NH2)=NOH nebo C(=NH)NHOH; a představuje vodík, OCH3, CN, CONH2, CH3 nebo fluor
Ještě výhodněji Ar představuje fenylskupinu, 3-methoxyfenylskupinu, 4-kyanofenylskupinu, 3-kyanofenylskupinu, 3-karbamoylfenylskupinu nebo 4-hydroxyamidinofenylskupinu. Nejvýhodněji Ar představuje fenylskupinu nebo 3-methoxyfenylskupinu.
Přednost se dává sloučeninám, kde substituenty maj význam uvedený v příkladech, viz:
R1 představuje vodík, hydroxyskupinu, n-propylskupinu nebo ethoxyskupinu;
R2 terc.butylskupinu, isopropylskupinu nebo benzylskupinu;
Z představuje skupinu obecného vzorce
R‘° kde
R10 představuje CH3, CH2OCH3 nebo CH2OH, a R11 představuje fenylskupinu, pyridin-4-ylskupinu nebo pyridin-3-ylskupinu, nebo představuje skupinu vzorce
R‘
R~
Rc představuje představuje představuje představuje
vodík;
CH3, chlor nebo fluor;
vodík;
vodík; a
Ar představuje fenylskupinu, 3-methoxyfenylskupinu, 4-kyanofenylskupinu, 3-kyanofenylskupinu, 3-karbamoylfenylskupinu nebo 4-hydroxyamidinofenylskupinu, a jejich solím.
»· ·· ·· * · · · · · · • · · · · ·
Další přednostní skupinu sloučenin tvoří sloučeniny uvedené v příkladech provedení a jejich soli.
Největší přednost se dává sloučeninám zvoleným z příkladů 3, 4, 8, 14, 15, 16, 22, 29, 30, 31 a 32 a jejich solím.
Farmaceuticky vhodné soli jsou odborníkům v tomto oboru dobře známé a zahrnují například soli uvedené v dokumentech citovaných výše v dosavadním stavu techniky a publikaci Berge et al., J. Pharm. Sci., 66, 1 až 19 (1997). Vhodné adiční soli s kyselinami vznikají s kyselinami, které tvoří netoxické soli. Jako příklady takových solí je možno uvést hydrochloridy, hydrobromidy, hydrojodidy, nitráty, sulfáty, hydrogensulfáty, fosfáty, hydrogenfosfáty, acetáty, trifluoracetáty, glukonáty, laktáty, salicyláty, citráty, tartráty, askorbáty, sukcináty, maleáty, fumaráty, glukonáty, formiáty, benzoáty, methansulfonáty, ethansulfonáty, benzensulfonáty a p-toluensulfonáty.
Farmaceuticky vhodné adiční soli s bázemi jsou odborníkům v tomto oboru rovněž dobře známy a zahrnují například soli uvedené v dokumentech citovaných výše v dosavadním stavu techniky. Takové soli mohou vznikat s bázemi, které tvoří netoxické soli. Jako příklady takových solí lze uvést soli s hliníkem, vápníkem, lithiem, hořčíkem, draslíkem, sodíkem a zinkem a soli netoxických aminů, jako diethylaminu.
Určité sloučeniny obecného vzorce I se mohou vyskytovat ve formě geometrických isomerů. Sloučeniny obecného vzorce I, vyjma center znázorněných v obecném vzorci I, mohou obsahovat jedno nebo více center asymetrie, takže se mohou vyskytovat ve dvou nebo větším počtu stereoisomerních forem. Do rozsahu vynálezu spadají všechny individuální
- 19 • · · · · · • · · · · ♦ · • · · · · · ·· · · · · · · · • · · · · stereoisomery a geometrické isomery sloučenin, vyjma center znázorněných v obecném vzorci I, zahrnující skupinu Z, a jejich směsi.
Dále je předmětem vynálezu farmaceutická kompozice, jejíž podstata spočívá v tom, že obsahuje sloučeninu nebo sůl podle výše uvedených definic a farmaceuticky vhodné adjuvans, ředidlo nebo nosič.
Předmětem vynálezu je také sloučenina nebo sůl podle výše uvedených definic pro použití jako léčivo.
Dále je předmětem vynálezu je použití sloučeniny nebo soli podle výše uvedených definic pro výrobu léčiva pro léčení stavu zprostředkovaného jednou matriční metaloproteinasou nebo větším počtem matričních metaloproteinas, zejména MMP-3 a/nebo MMP-12 a/nebo MMP-13.
Předmětem vynálezu je také způsob léčení stavu zprostředkovaného jednou matriční metaloproteinasou nebo větším počtem matričních metaloproteinas, zejména MMP-3 a/nebo MMP-12 a/nebo MMP-13.
Pojem léčení zahrnuje rovněž profylaxi a zmírňování symptomů stavů zprostředkovaných MMP.
Dále jsou předmětem vynálezu způsoby výroby sloučenin podle vynálezu, které jsou popsány dále a v příkladech provedení. Odborníku bude zřejmé, že sloučeniny podle vynálezu je možno získat i jinými způsoby než způsoby popsanými v tomto textu, přizpůsobením způsobů popsaných v následující části a/nebo přizpůsobením o sobě známých způsobů. Vhodné vodítko pro syntézu, transformace funkčních skupin, použití chráničích skupin atd. lze například nalézt v Comprehensive Organic Transformations, R. C. Larock, VCH Publishers, lne.
(1989), Advanced Organic Chemistry, J. March, wiley Interscience (1985), Designing Organic Synthesis, S.
Warren, Wiley Interscince (1978), Organic Synthesis - The Disconnection Approach, S. Warren, Wiley Interscience (1982), Guidebook to Organic Synthesis, R. K. Mackie and D. M. Smith, Longman (1982), Protective Group in Organic Synthesis, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, John Wiley and Sons lne. (1991) a P. J. Kocienski, Protecting Group,
Georg Thieme Verlag (1994).
V následujícím popisu způsobů výroby mají substienty význam uvedený v souvislosti se sloučeninami obecného vzorce I, pokud není uvedeno jinak.
Způsob 1
Sloučeniny obecného vzorce I, kde X představuje hydroxyskupinu, je možno získat přes odpovídající sloučeniny obecného vzorce II
kde X3 představuje skupinu transformovatelnou na karboxyskupinu za podmínek, které nevedou k zásadní transformaci zbývajících částí sloučeniny obecného vzorce II. Jako vhodné příklady takových skupin je možno uvést skupinu C02(terc.butyl nebo methyl), terč.Butylskupinu je možno štěpit reakcí s kyselinou, jako chlorovodíkem nebo trifluoroctovou kyselinou (TFA) ve vhodném rozpouštědle, jako bezvodém dichlor• ·
emthanu nebo dioxanu, při vhodné teplotě, jako 0 až 20°C. Methylester je možno hydrolyzovat hydroxidem, jako hydroxidem lithným, ve vhodném rozpouštědlovém systému, jako směsi tetrahydrofuranu a vody, s výhodou při teplotě místnosti.
Sloučeniny obecného vzorce II je možno připravovat způsoby známými v tomto oboru, které jsou například popsány v prepararivních postupech, například kopulací vhodného aminového derivátu a derivátu kyseliny, které jsou dostupné za použití známých chemických způsobů.
Způsob 2
Sloučeniny obecného vzorce I, kde X představuje skupinu NHOH, je možno získat z odpovídajících sloučenin obecného vzorce I, kde X představuje hydroxyskupinu, tak, že se sloučenina obecného vzorce I, kde X představuje hydroxyskupinu, nechá reagovat s hydroxylaminem, jako hydroxylaminem generovaným ze soli hydroxylaminu, jako hydrochloridu, vhodnou bází, jako terciárním aminem, například diisopropylethylaminem, ve vhodném rozpouštědle, jako N,N-dimethylformamidu (DMF), a kopulačním činidlem, jako N-[(dimethylamino)-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]pyridin-l-ylmethylen]-N-methylmethaniniumhexafluorfosfát-N-oxidem (HATU, což je činidlo popsané v Tet. Letts. (1994) 35, 2279), při vhodné teplotě, jako 0 až 20°C.
Sloučeniny obecného vzorce I, kde X představuje hydroxyskupinu, je možno připravit obvyklými způsoby a způsoby popsanými v tomto textu.
··
Způsob 3
Sloučeniny obecného vzorce I, kde X představuje skupinu NHOH, je možno získat z odpovídajících sloučenin obecného vzorce I, kde X představuje hydroxyskupinu tak, že se sloučenina obecného vzorce I, kde X představuje hydroxyskupinu, nechá reagovat s O-allylhydroxylaminem, jako O-allylhydroxylaminem generovaným ze soli O-allylhydroxylaminu, jako hydrochloridu, vhodnou bází, jako terciárním aminem, jako diisopropylethylaminem, ve vhodném rozpouštědle, jako Ν,Ν-dimethylformamidu (DMF) nebo dichlormethanu, a kopulačním činidlem, například činidlem pro kopulaci peptidů, jako je 7-azabenzotriazol-l-yloxytris(pyrrolidino)fosfoniumhexafluorfosfát (PyAOP), při vhodné teplotě, jako 0 až 20 °C. V tomto stupni se získá sloučenina obecného vzorce III
Ar u*
CH
(III)
Tento kopulační způsob je obecně popsán v Tet. Letts.
(1994), 35, 2279. Sloučeninu obecného vzorce III je možno převést na sloučeninu obecného vzorce I, kde X představuje skupinu NHOH reakcí s mravenčanem amonným za přítomnosti vhodného katalyzáotru, jako octanu bis(trifenylfosfin)palladnatého, ve vhodném rozpouštědle, jako vodném ethanolu, při vhodné teplotě, jako teplotě zpětného toku vodného ethanolu.
• 4
- 23 Způsob 4
Sloučeniny obecného vzorce I, kde X představuje skupinu NHOH a R1 představuje hydroxyskupinu, je možno připravovat reakcí sloučeniny obecného vzorce IV
(IV) s hydroxylaminem, například generovaným ze soli hydroxylaminu, jako hydrochloridu, vhodnou bází, jako methoxidem sodným, ve vhodném rozpouštědle, jako methanolu.
Sloučeniny obecného vzorce IV je možno získat obvyklými postupy, jako jsou například postupy uvedené v preparativních postupech.
Způsob 5
Sloučeniny obecného vzorce I je možno získat ze sloučenin obecného vzorce V
NH
O (V)
• ·
I křížovou kopulací se sloučeninou obecného vzorce VI
kde X2 představuje chráněnou kyselinu, například ve formě terc.butylesteru nebo methylesteru a LG představuje skupinu odstupující při křížové kopulaci, jako jod, brom nebo skupinu OSO2CF3. Křížovou kopulační reakci je možno provádět za přítomnosti katalyzátoru, jako octanu bis(tri-o-tolyl)fosfinpalladnatého, za použití vhodné báze, jako triethylaminu, ve vhodném rozpouštědle, jako acetonitrilu nebo DMF, při vhodné teplotě, jako 50 až 150C. Tento typ reakce je obecně popsán v Heck, Tet. Letts. (1984) 25, 2271 a řadě jiných článků.
Sloučeniny obecného vzorce V lze připravit obvyklými způsoby, jako jsou jejich adaptace popsané v preparativních postupech.
Sloučeniny obecného vzorce VI je možno připravit obvyklými způsoby, jako jsou jejich adaptace popsané v preparativních postupech a způsoby popsanými v následujících článcích: Synthesis (1984), 709; J. Chem. Soc. Perkin Trans I (1977) 1841; J. Org. Chem. (1994) 59, 6095; tamtéž (1979) 44, 4444 a Tet. Letts. (1997) 38, 1749.
Produktem této reakce je směs sloučenin obecného vzorce Vila a Vllb
• 99
(VHb) kde X2 má význam uvedený u obecného vzorce V.
Sloučeniny obecného vzorce Vila a VHb je možno převést na sloučeniny obecného vzorce I, kde X představuje hydroxyskupinu, redukcí olefinické vazby za použití obvyklých postupů, jako je hydrogenace za přítomnosti katalyzátoru, nebo reakcí s diimidem, který je možno generovat například z p-toluensulfonylhydrazidu, a deprotekcí chráněného zbytku kyseliny X2.
Odborníkům v tomto oboru bude zřejmé, že při syntéze sloučenin podle vynálezu je možno obvyklými postupy dosáhnout jiných režimů ochrany a následné deprotekce, jak je to například popsáno v publikacích Greene a Wuts a Kocienski uvedených výše.
Pokud je to žádoucí nebo potřebné, převede se sloučenina obecného vzorce I na svou farmaceuticky vhodnou sůl. Farmaceuticky vhodné soli sloučenin obecného vzorce I je možno účelně připravovat tak, že se smísí roztoky sloučeniny obecného vzorce I a podle potřeby požadované kyseliny nebo
• 4 báze. Sůl je možno z roztoku vysrážet a shromáždit filtrací či jiným způsobem, jako odpařením rozpouštědla.
Určité sloučeniny podle vynálezu je možno převádět na jiné určité sloučeniny podle vynálezu za použití způsobů známých z literatury.
Sloučeniny podle vynálezu jsou dostupné způsoby popsanými v tomto popisu a příkladech provedení nebo jejich vhodným přizpůsobením za použití o sobě známých způsobů. Pořadí stupňů syntetických transformací zmiňovaných v tomto textu je možno s ohledem na účelnost měnit. Nejúčelnější pořadí reakčních stupňů syntézy dané cílové sloučeniny bude odborník v oboru chemie schopen stanovit na základě svého úsudku a zkušeností.
Separaci a čištění sloučenin podle vynálezu a jejich solí lze provádět za použití obvyklých postupů, například frakční krystalizací nebo chromatografií, například vysokotlakou kapalinovou chromatografií, stereisomerní směsi sloučeniny obecného vzorce I nebo její vhodné soli nebo derivátu. Individuální enantiomery sloučenin obecného vzorce I je možno připravovat z odpovídajících opticky čistých meziproduktů nebo optickým štěpením tak, že se racemická sloučenina obecného vzorce I podrobí vysokotlaké kapalinové chromatografii na vhodném chirálním nosiči, nebo ve vhodném případě, frakční krystalizací diastereoisomerních solí vznikajících reakcí racemické sloučeniny s vhodnou opticky aktivní bází nebo kyselinou.
Sloučeniny obecného vzorce I a jejich soli lze člověku podávat samotné, ale obvykle se budou podávat ve směsi s farmaceuticky vhodným ředidlem nebo nosičem zvoleným s ohledem na zamýšlený způsob podávání a standardní farmaceutickou praxi. Tyto látky je například možno podávat
• · perorálně, včetně sublinguálního podávání, ve formě tablet, které obsahují takové excipienty, jako škrob nebo laktosu, nebo ve formě tobolek nebo ovulí, do nichž mohou být plněny samotné nebo ve směsi s excipienty, nebo ve formě elixírů, roztoku nebo suspenzí obsahujících aromatizační a barvicí činidla. Sloučeniny podle vynálezu a jejích soli je možno zpracovávat do kapslí nebo tablet pro cílenou dodávku do tračníku nebo dvanáctníku, což je umožněno opožděným rozpuštěním takové kapsle nebo tablety po určité době po perorálním podání. Rozpouštění se může řídit citlivostí formulace na bakterie, které se necházejí ve dvanáctníku nebo tračníku, takže před dosažením cílové oblasti gastrointestinálního traktu nedochází k žádnému podstatnému rozpouštění. Sloučeniny podle vynálezu a jejich soli je možno podávat parenterálními injekcemi, například intravenosně, intramuskulárně nebo subkutánně. Při parenterálním podávání se nejvýhodněji používá sterilních vodných roztoků nebo suspenzí, které mohou obsahovat i jiné látky, například dostatečné množství soli nebo glukosy pro isotonizaci roztoku s krví. Sloučeniny podle vynálezu a jejich soli lze také podávat topicky, ve formě sterilních krémů, želé, suspenzí, lotionů, mastí, zásypů, sprejů, obvazů se začleněným léčivem nebo transdermálních náplastí. Například je lze zapracovávat do krémů obsahujících vodné nebo olejové emulze polyethylenglykolů nebo kapalného parafinu, či do mastí sestávajících z bílého voskového měkkého parafinového základu, nebo jako hydrogel s celulosou nebo polyakrylátovými deriváty nebo jinými modifikátory viskozity, nebo jako suché prášky nebo kapalné spreje nebo areosoly s butanem/propanem, HFA nebo CFC, jako propelenty, nebo jako obvazy se začleněným léčivem, jako jsou tylové obvazy, gázové obvazy impregnované bílým měkkým parafinem nebo polyethylenglykoly nebo krycích materiálů na bázi hydrogelů, hydrokoloidů, alginátů nebo filmů. Sloučeniny podle vynálezu a jejich soli lze také podávat intraokulárně ve formě očních kapek obsahujících «* ί « • 4 vhodné pufry, modifikátory viskozity (například deriváty celulosy), konzervační látky (například benzalkoniumchlorid, BZK) a činidly pro nastavení tonicity (například chlorid sodný). Takové formulační postupy jsou v tomto oboru dobře známy.
Všechny prostředky mohou také obsahovat vhodné stabilizátory a konzervační činidla.
Pro orální a parenterální podávání člověku bude denní dávka sloučeniny obecného vzorce I nebo její soli ležet v rozmezí od 0,001 do 20, přednostně od 0,01 do 20, výhodněji od 0,1 do 10, a nejvýhodněji od 0,5 do 5 mg/kg, přičemž může být podána ve formě jediné dávky nebo několika dílčích dávek. Tablety a tobolky budou tedy obsahovat 0,1 až 500, přednostně 50 až 200 mg účinné sloučeniny, přičemž lze podat jednu, dvě či více takových forem, podle toho jak je to vhodné.
Pro topické podávání člověku s chronickými ranami bude denní dávka sloučeniny obecného vzorce I nebo její soli v suspenzi nebo jiné formulaci ležet v rozmezí od 0,01 do 50 mg/ml, přednostně od 0,3 do 30 mg/ml.
Přesnou dávku, která je nejvhodnější pro jednotlivého pacienta v každém případě stanoví ošetřující lékař a tato dávka bude záviset na věku, hmotnosti a odpovědi konkrétního pacienta. Výše uvedená dávková rozmezí je nutno chápat jako průměrné hodnoty, které v jednotlivých případech mohou samozřejmě být překročeny směrem dolů i nahoru, aniž by to představovalo únik z rozsahu tohoto vynálezu.
• · • ·
·· ··
Zkušební postup
Schopnost sloučenin inhibovat štěpení různých fluorogenních peptidů prostřednictvím MMP 1, 2, 3, 9, 12, 13 a 14 je popsána dále.
Stanovení pro MMP 2, 3, 9 a 14 jsou založena na původním protokolu popsaném ve Knight et al., Fed. Euro. Giochem. Soc., 296 (3), 263 až 266, 1992, který je mírně modifikován dále popsaným způsobem.
Inhibice MMP-1 (i) Příprava enzymu
Katalytická doména MMP-1 byla připravena v laboratořích Pfizer Central Research. Zásobní roztok MMP-1 (ΙμΜ) se během 20 minut při 37°C aktivuje aminofenylmerkuryacetátem (ΑΡΜΑ) při konečné koncentraci lmM. MMP-1 se poté zředí zkouškovým pufrem Tris-HCl (50mM Tris, 200mM chlorid sodný, 5mM chlorid vápenatý, 20μΜ síran zinečnatý a 0,05% Brij 35, pH 7,5) na koncentraci lOnM. Konečná koncentrace enzymu, kterého se používá při zkoušce, je lnM.
(ii) Substrát
Při této zkoušce se použije fluorogenního substrátu Dnp-Pro-p-cyklohexyl-Ala-Gly-Cys(Me)-His-Ala-Lys-(N-Me-Ala)-NH2 podle původního popisu v Bickett et al., Anal. Biochem.,
212, 58 až 54, 1993. Konečná koncentrace substrátu použitého při zkoušce je ΙΟμΜ.
(iii) Stanovení inhibice enzymu «» » « ·9
I 9 9 9 » · · · • · 999
9 9
99
Zkoušená sloučenina se rozpustí v dimethylsulfoxidu a vzniklý roztok se zředí zkouškovým pufrem tak, aby koncentrace dimethylsulfoxidu byla nižší než 1 %. Zkoušená sloučenina a enzym se přidají do každé z jamek 96-ti jamkové plotny a před přídavkem substrátu nechají ekvilibrovat 15 minut při 37°C v orbitální třepačce. Plotny se poté inkubují 1 hodinu při 37°C a stanoví se fluorescence (štěpení substrátu) za použití fluorimetru (Fluostar, BMG Lab Technologies, Aylesbury, UK) s excitací při vlnové délce 355 nm a emisi při vlnové délce 440 nm. Účinnost inhibice se zjistí z dosaženého množství štěpeného substrátu za použití různých koncentrací zkoušené sloučeniny a z výsledné křivky závislosti odpovědi na dávce se vypočítá hodnota IC50 (koncentrace inhibitoru potřebná pro 50% inhibici enzymatické aktivity).
Inhibice MMP-2, MMP-3 a MMP-9 (i) Příprava enzymu
Katalytické domény MMP-2, MMP-3 a MMP-9 byly připraveny v laboratořích Pfizer Central Research. Zásobní roztoky MMP-2, MMP-3 nebo MMP-9 (ΙμΜ) se aktivují přídavkem aminofenylmerkuryacetátu (ΑΡΜΑ). V případě MMP-2 a MMP-9 se přidá ΑΡΜΑ v konečné koncentraci lmM a následuje jednohodinová inkubace při 37°C. MMP-3 se aktivuje přídavkem 2mM ΑΡΜΑ, načež následuje tříhodinová inkubace při 37°C. Enzymy se poté zředí zkouškovým pufrem Tris-HCl (lOOmM Tris, lOOmM chlorid sodný, lOmM chlorid vápenatý, a 0,16% Brij 35, pH 7,5) na koncentraci lOnM. Konečná koncentrace enzymu, kterého se používá při zkoušce, je lnM.
(ii) Substrát
Při této zkoušce se použije fluorogenního substrátu
Mca-Arg-Pro-Lys-Pro-Tyr-Ala-Nva-Trp-Met-Lys(Dnp)-NH2 (Bachem
• 44 4 « 4 • 4 4 4 44 4 4 44 4 4
• ·· 4 4 4 4 4 4
4*4 • 4 4 4 4 4 4 4 4
44 44 44 4 4 4 4
Ltd., Essex, UK) podle původního popisu v Nagase et al., J.
Biol. Chem., 269 (33), 20952 až 20957, 1994. Tento substrát je zvolen vzhledem k tomu, že má rychlost hydrolýzy v rovnováze vzhledem k MMP-2 (kkat/km = 54 000 s-1M1),
MMP-3 (kkat/kTO = 59 400 3-¼1) a MMP-9 (kkat/km = 55 300 “1 1 s M). Konečná koncentrace substrátu použitého při zkoušce je 5μΜ.
(iii) Stanovení inhibice enzymu
Zkoušená sloučenina se rozpustí v dimethylsulfoxidu a vzniklý roztok se zředí zkouškovým pufrem tak, aby koncent race dimethylsulfoxidu byla nižší než 1 %. Zkoušená sloučeni na a enzym se přidají do každé z jamek 96-ti jamkové plotny a před přídavkem substrátu nechají ekvilibrovat 15 minut při 37 °C v orbitální třepačce. Plotny se poté inkubují 1 hodinu při 37°C a stanoví se fluorescence za použití fluorimetru (Fluostar, BMG Lab Technologies, Aylesbury, UK) s excitací při vlnové délce 328 nm a emisí při vlnové délce 393 nm. Účinnost inhibice se zjistí z dosaženého množství štěpeného substrátu za použití různých koncentrací zkoušené sloučeniny a z výsledné křivky závislosti odpovědi na dávce se vypočítá hodnota IC50 (koncentrace inhibitoru potřebná pro 50% inhibici enzymatické aktivity).
Inhibice MMP-12 (i) Příprava enzymu
Použije se katalytické domény MMP-12 (200 μg/ml). MMP-12 se zředí zkouškovým pufrem Tris-HCl (50mM Tris,
200mM chlorid sodný, 5mM chlorid vápenatý, 20μΜ síran zinečnatý a 0,02% Brij 35, pH 7,4) na koncentraci 240 ng/ml. Konečná koncentrace enzymu, kterého se používá při zkoušce, je 60 ng/ml.
• ** ♦» · · · • ·· » · · » • · · · * · · · T
9 9 9 9 · » t · ·* ** ·· (ii) Substrát
Při této zkoušce se použije fluorogenního substrátu Dnp-Pro-Cha-Gly-Cys(me)-His-Ala-Lys(NMA)-NH2. Konečná koncentrace substrátu použitého při zkoušce je ΙΟμΜ.
(iii) Stanovení inhibice enzymu
Zkoušená sloučenina se rozpustí v dimethylsulfoxidu a vzniklý roztok se zředí zkouškovým pufrem tak, aby koncentrace dimethylsulfoxidu byla nižší než 1 %. Zkoušená sloučenina a enzym se přidají do každé z jamek 96-ti jamkové plotny a před přídavkem substrátu nechají ekvilibrovat 15 minut při 37°C v orbitální třepačce. Plotny se poté inkubují 2 hodiny při teplotě místnosti a stanoví se fluorescence (štěpení substrátu) za použití fluorimetru s excitací při vlnové délce 360 nm a emisi při vlnové délce 460 nm. Účinnost inhibice se zjistí z dosaženého množství štěpeného substrátu za použití různých koncentrací zkoušené sloučeniny a z výsledné křivky závislosti odpovědi na dávce se vypočítá hodnota IC5Q (koncentrace inhibitoru potřebná pro 50% inhibici enzymatické aktivity).
Inhibice MMP-13 (i) Příprava enzymu
Humánní rekombinantní MMP-13 byl připraven v PanVera Corporation (Madison, Winconsin, USA) a charakterizován v laboratořích Pfizer Central Research. Zásobní roztok MMP-13 (o koncentraci 1,9 mg/ml) se během 2 hodin při 37°C aktivuje 2mM ΑΡΜΑ. MMP-13 se poté zředí zkouškovým pufrem Tris-HCl (50mM Tris, 200mM chlorid sodný, 5mM chlorid vápenatý, 20μΜ síran zinečnatý a 0,02% Brij 35, pH 7,5) na
0« ·# • ·
- 33 - :
koncentraci 5,3nM. Konečná koncentrace enzymu, kterého se používá při zkoušce, je l,3nM.
(ii) Substrát
Při této zkoušce se použije fluorogenního substrátu Dnp-Pro-Cha-Gly-Cys(Me)-His-Ala-Lys-(NMA)-NH2. Konečná koncentrace substrátu použitého při zkoušce je ΙΟμΜ.
(iii) Stanovení inhibice enzymu
Zkoušená sloučenina se rozpustí v dimethylsulfoxidu a vzniklý roztok se zředí zkouškovým pufrem tak, aby koncent race dimethylsulfoxidu byla nižší než 1 %. Zkoušená sloučeni na a enzym se přidají do každé z jamek 96-ti jamkové plotny. Reakce se zahájí tak, že se do každé jamky přidá substrát. Intenzita fluorescence se stanoví za použití fluorimetru pro plotny s 96 jamkami (Cytofluor II; PerSeptive Biosystems, lne., Framingham, MA, USA) s excitací při vlnové délce 360 nm a emisí při vlnové délce 460 nm. Účinnost inhibice se zjistí z dosaženého množství štěpeného substrátu za použití různých koncentrací zkoušené sloučeniny a z výsledné křivky závislosti odpovědi na dávce se vypočítá hodnota IC5Q (koncentrace inhibitoru potřebná pro 50% inhibici enzymatické aktivity).
Inhibice MMP-14 (i) Příprava enzymu
Katalytická doména MMP-14 pochází od Prof.
Tschesche z katedry biochemie chemické fakulty Bielefeldské univerzity v SRN. Zásobní roztok enzymu o koncentraci ΙΟμΜ se aktivuje po přídavku trypsinu (5 μg/ml) (Sigma, Dorset, UK) 20 minut při 25°C. Aktivita trypsinu se poté • 0 0 · * < · · ·
0» · · 0 · * · • 0·· * 0 0 0 * · ·
0 0 0 0 Μ · neutralizuje přídavkem sojového inhibitoru trypsinu (50 gg/ml, Sigma, Dorset, UK) a potom se zásobní roztok enzymu zředí zkouškovým pufrem Tris-HCl (lOOmM Tris, lOOmM chlorid sodný, lOmM chlorid vápenatý, 0,16% Brij 35, pH 7,5) na koncentraci lOnM. Konečná koncentrace enzymu, kterého se požívá při zkoušce, je lnM.
(ii) Substrát
Při této zkoušce se jako fluorogenního substrátu použije Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH2 (Bachem Ltd., Essex, UK) podle původního popisu ve Will et al., J. Biol. Chem., 271 (29), 17119 až 17123.
Stanovení inhibice enzymu se provádí postupem, který je popsán pro stanovení inhibice MMP-2, MMP-3 a MMP-9.
Údaje o aktivitě některých sloučenin z příkladů provedení jsou uvedena v následující tabulce:
IC50 inhibitoru MMP-x (nM)
Př. x=3 x=2 x=l x=12 x=13 x=14 x=9 3/2*
č. sel
101 10803 85 107
13,5 1269 6000 130 5650 1908 94 *selektivita pro MMP-3 oproti MMP-2
Sloučeniny z příkladů 6, 8, 9, 14, 15 a 22 vykazují hodnoty MMP-3 IC50 v rozmezí 8 až 65nM a selektivitu MMP-3/MMP-2 v rozmezí od 195 do 930.
♦* ·* ·* ·· · · · · · · • ·« · · » · • · « · · · ··· • ♦ · · · * «•a ·· ·· 99 • 9 · · • e • · • 9
9
Vynález je blíže objasněn v následujících příkladech provedení a preparativních postupech. Tyto příklady a postupy mají výhradně ilustrativní charakter a rozsah vynálezu v žádném ohledu neomezují. V nich uváděné teploty tání byly stanoveny za použití otevřených skláněných kapilár a Gallenkampova bodotávku a jsou nekorigovány. Spektra nukleární magnetické resonance (NMR) byla zaznamenána za použití spektrometrů Varian Unity Inova-400, Varian Unity Inova-300 nebo Bruker AC300, a jsou uváděna v dílech na milion dílů od tetramethylsilanu. Hmotnostní spektra (MS) byla získána za použití hmotnostních spektrometrů Finnigan Mat. TSQ 7000 a Fisons Instrument Trio 1000. Uváděné vypočtené a stanovené ionty se vztahují k isotopu o nejnižší hmotnosti. Infračervená spektra (IR) byla naměřena na transformačním infračerveném spektrometru Nicolet Magna 550. Pod pojmem mžiková chromatografie se rozumí chromatograf ie na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 39 až 63 μπι,
E. Merck, Darmstadt. Pro chromatografii na tenké vrstvě bylo použito desek se silikagelem Kieselgel 60 F254 od firmy E. Merck a sloučeniny byly vizualizovány UV světlem, 5% vodným manganistanem draselným nebo Dragendorffovým činidlem (přestříkány vodným dusitanem sodným). Pod pojmem hexan se rozumí hexany (v kvalitě pro HPLC) o teplotě varu 65 až 70°C. Pojmem ether se označuje diethylether. Pod pojmem kyselina octová se rozumí ledová kyselina octová. l-Hydroxy-7-aza-lH-l,2,3-benzotirazol (HOAt), N-[(dimethylamino)-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]pyridin-l-ylmethylen]-N-methylmethaniniumhexafluorfosfát-N-oxid (HATU) a 7-azabenzotriazol-l-yloxytris(pyrrolidino)fosfoniumhexafluorfosfát (PyAOP) pocházejí od firmy PerSeptive Biosystems U.K. Ltd. Zkratkou DIPE je označován diisoproylether. Silikagel s obrácenými fázemi pro mžikovou chromatotrafii byl získán od firmy Fluka (Fluka 100, C18, 40 až 63 μπι). Pod pojmem pentan se rozumí n-pentan v kvalitě pro HPLC (teplota varu 35 až 37°C).
• 4
444 ·· • ·
4 ·
·· 44
4 4 4
4 4 4
4 444
4 4
44
4
4
4 4
4
Upozornění:
V dále uvedených preparátivních postupech jsou posány určité deriváty 4-aminobifenylu. 4-Aminobifenyl je známým lidským karcinogenem. S jeho analogy je tedy nutno zacházet opatrně. Viz hlavní publikace: Yuta, K., Jurs, P. C., J. Med. Chem. (1981), 24(3), 241 až 251; You, Z., Brezzell, M. D., Das, S. K., Hooberman, B. Η., Sinsheimer, J. E., Mutat. Res. (1994), 320 (1-2), 45 až 58; Hecht, S. S et al., J. Med. Chem. (1979), 22 (8), 981 až 987.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1 (3R) -3-({[(1S)-2,2-Dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]amino}karbony1)propyl]amino}karbonyl)-6-[(3-methyl-4-fenyl)fenyljhexanová kyselina
Trifluoroctová kyselina (5 ml) se během 5 minut pod atmosférou dusíku při 20°C přikape k míchanému roztoku terč.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl ]amino}karbony1)propyljamino}karbonyl)-6-[3-methyl-(4-fenyl)fenyljhexanoátu z preparátivního postupu 3 (285 mg, 0,47 mmol) v bezvodém dichlormethanu (5 ml). Vzniklý roztok se 4 hodiny míchá a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí v toluenu a toluenový roztok se zkoncentruje za sníženého tlaku (dvakrát). Zbytek se trituruje s etherem. Získá se bezbarvá pevná látka (210 mg, 82 %) o teplotě tání 160 až 162°C (z ethylacetátu). Rf 0,17 (hexan/ether/kyselina octová, 50 : 50 : 1). Retenční doba HPLC 7,3 min (silanizovaný silikagel (5 μιη) Phenomenex Magellen, směs acetonitrilu, vody a trifluor-octové kyseliny v poměru 70 : 30 : 0,1, 1 ml/min, detekce UV (220 nm)) δΗ (400 MHz, CD3OD) (vyměnitelné vodíky vyměněny pouze částečně) 1,02 (9H, s), 1,44 (3H, d, J = 7 Hz), 1,52 (4H, m), 2,16 (3H, S), 2,37 (1H, dd, J = 4 a 15 Hz), 2,50 (2H,
m), 2,60 (1H, dd, J = 9 a 15 Hz), 2,84 (1H, m) , 4,37 (1H, d, J = 10 Hz), 4,99 (1H, pentet, J = 7 Hz), 6,94 (1H, d, J = 8 Hz), 7,00 (2H, s ad, J = 8 Hz, překrývání), 7,13 (1H, t, J = 7 Hz), 7,16 (2H, t, J = 7 Hz), 7,23 (4H, t, J = 7 Hz),
7,29 (1H, t, J = 7 Hz), 7,38 (2H, t, J = 7 Hz), 7,72 (1H, br d) , 8,45 (1H, br d)
LRMS (termosprej) m/z 543 (MH+)
FTIR Vmax (KBr disk) 3290, 2980, 2930, 1707, 1661, 1633, 1553, 700 cm-1
Nalezeno: C 75,22, H 7,73, N 6,16, C34H42N2°4 vypočteno C 75,25, H 7,80, N 5,16 %
Příklad 2 (2R)-2-{3-[3-Chlor-(4-fenyl)fenylJpropyl}-Nl-[(1S)-2,2-dimethyl-1-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]-(N4-hydroxy)butandiamid
a) Hydrochlorid O-allylhydroxylaminu (17 mg, 0,152 mmol) se pod atmosférou dusíku při 0°C přidá k míchanému roztoku (3R)-6-[3-chlor-4-fenyl)fenyl]-3-({[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]amino}karbonylJpropyllamino}karbonyl)hexanové kyseliny (z preparativního postupu 4) (66 mg, 0,117 mmol) a diisopropylethylaminu (78 μΐ, 0,456 mmol) v bezvodém dichlormethanu (1 ml). Ke vzniklé směsi se v jedné dávce přidá 7-azabenzotriazol-l-yloxytris(pyrroli39 dino)fosfoniumhexafluorfosfát (79 mg, 0,152 mmol). Reakční směs se 2 hodiny míchá při 0°C, nechá zahřát na teplotu místnosti a po další 1 hodině nalije do ethylacetátu (25 ml). Ethylacetátová směs se postupně promyje 5% vodnou kyselinou citrónovou (2 x 10 ml) a nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2 x 10 ml). Organický roztok se vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Pevný zbytek se suspenduje v etheru (3 ml) a suspenze se přefiltruje. Získá se (2R)-2-{3-[3-chlor-(4-fenyl)fenyl]propyl}-Nl-[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]-(N4-3-propenyloxy)butandiamid (58 mg, 82 %) ve formě bílé pevné látky.
Rf 0,45 (ethylacetát : hexan, 2:1) δΗ (400 MHz, CDC13) 0,98 (9H, s), 1,46 (3H, d, J = 6,5 Hz),
1,48 (4H, m), 2,17 (1H, m), 2,39 (1H, m), 2,50 (2H, m), 2,74 (1H, m), 4,13 (1H, d, J =8 Hz), 4,29 (2H, d, J = 6 Hz), 5,06 (1H, pentet, J = 6,5 Hz), 5,29 (2H, br d), 5,87 (2H ra a br d, překrývání), 6,45 (1H, br s), 6,97 (1H, d, J = 8 Hz),
7,19 (7H, komplex), 7,35 (5H, komplex), 8,36 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 618 (MH+, slabý).
b) Míchaná směs (2R)-2-{3-[3-chlor-(4-fenyl)fenyl]propyl}-Nl-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]-(N4-3-propenyloxy)butandiamidu (56 mg, 0,091 mmol) a mravenačn amonný (59 mg, 0,94 mmol) ve směsi ethanolu a vody (4 : 1, 4 ml) se pod atmosférou dusíku zahřívá ke zpětnému toku, čímž se získá bezbarvý roztok.
K tomuto roztoku se přidá octan bis(trifenylfosfin)palladnatý (3,4 mg, 0,00465 mmol). Reakční směs se 40 minut zahřívá ke zpětnému toku a poté ochladí. Hnědý roztok se zředí ethylacetátem (25 ml) a ethylacetátová směs se promyje nasyceným vodným roztokem sodným (2 x 10 ml), vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí sloupcovou chromatografií (silanizovaný silikagel Clg, 40 až 63 μιη, eluce směsí methanolu a vody v poměru 5 : 1). Získá se (2R)-2-{3-[3-chlor-(4-fenyl)fenyl]propyl}-NI-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]-(N4-hydroxy)butandiamid (46 mg, 88 %) ve formě bezbarvé pevné látky o teplotě tání 107 až 109’C
Rf 0,43 (silanizovaný silikagel C18' směs methanolu a vody v poměru 5:1) δΗ (400 MHz, CD3OD) 0,98 (9H, s), 1,39 (3H, d, J = 6,5 Hz), 1,47 (4H, m), 2,13 (1H, dd, J = 6 a 14 Hz), 2,31 (1H, dd, J = 9 a 14 Hz), 2,48 (2H, m), 2,85 (1H, m), 4,32 (1H, s), 4,96 (1H, q, J = 6,5 Hz), 6,80 (1H, d, J = 8 Hz), 7,11 (4H, komplex), 7,22 (3H, komplex), 7,32 (5H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 578 (MH+ slabý), 562 (MH+ - O) Nalezeno: C 67,79, H 6,90, N 7,19, C33H40C1N3°4·0'5 H2° vypočteno C 67,51, H 7,04, N 7,16 %
Příklad 3
Nl-[(1S)-2,2-Dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]-(N4-hydroxy)-(2R)-2-{3-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl]propyl}butandiamid
a) Hydrochlorid O-allylhydroxylaminu (295 mg, 2,69 mmol) se pod atmosférou dusíku při 0°C přidá k (3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbony1)—6—[(3-methyl-4-fenyl)fenylJhexanové kyselině (z příkladu 1) (974 mg, 1,79 mmol) a diisopropylethylaminu
• · (1,56 ml, 8,97 mmol) v bezvodém dimethylformamidu (25 ml).
Ke vzniklé směsi se v jedné dávce přidá 7-azabenzotriazol-l-yloxytris(pyrrolidino)fosfoniumhexafluorfosfát (1,4 g,
2,69 mmol). Výsledná směs se nechá zahřát na teplotu místnosti a po dalších 4,25 hodiny nalije do ethylacetátu (500 ml). Ethylacetátová směs se promyje nasyceným vodným hydrogenuhličitaném sodným (2 x 200 ml). Vodné promývací louhy se extrahují ethylacetátem (2 x 100 ml). Spojené organické roztoky se vysuší síranem sodným a zkoncentrují za sníženého tlaku. Pevný zbytek se suspenduje v etheru (3 ml). Výsledná suspenze se přefiltruje. Po překrystalování z ethylacetátu se získá NI-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]-(2R)-2-{3-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl]propyl}-(N4-3-propenyloxy)butandiamid (640 mg, 60 %) ve formě bílé pevné látky.
Rf 0,31 (ethylacetát/hexan, 1:1) δΗ (400 MHz, CDC13), 1,00 (9H, s), 1,48 (3H, d, J = 6,5 Hz), 1,56 (4H, M), 2,22 (3H, s), 2,42 (1H, m), 2,52 (3H, m) , 2,80 (1H, m), 4,20 (1H, d, J =8 Hz), 4,29 (2H, d, J = 5 Hz), 5,07 (1H pentet, J = 6,5 Hz), 5,28 (2H, br), 5,90 (1H, m), 6,13 (1H, br s), 6,61 (lh, br d), 6,95 (1H, d, J = 8 Hz), 7,00 (1H, d, J = 8 Hz), 7,25 (8H, komplex), 7,38 (2H, t, J =
Hz), 8,69 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 598 (MH+, slabý), 542 (MH2 + - allyloxy, pík báze).
b) Míchaná směs Nl-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]amino}karbony1)propyl]-(2R)-2-{3-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl]propyl}-(N4-3-propenyloxy)butandiamidu (794 mg, 1,32 mmol) a mravenčanu amonného (419 mg, 6,64 mmol) ve směsi ethanolu a vody v poměru 4 : 1 (25 ml) se pod atmosférou dusíku zahřívá ke zpětnému toku, čímž se získá bezbarvý roztok. K tomuto roztoku se přidá octan bis(trifenylfosfin)palladnatý (40 mg, 0,066 mmol). Reakční směs se 90 minut zahřívá ke zpětnému toku a poté ochladí. Hnědý roztok se zředí ethylacetátem (250 ml) a ethylacetátová směs se promyje nasyceným vodným chloridem sodným (2 x 100 ml), vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí sloupcovou chromatografií (silanizovaný silikagel C18, eluce směsí methanolu a vody v poměru 5 : 1) a poté trituraci se směsi methanolu a diisopropyletheru. Získá se Nl-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethy1]amino}karbony1)propy1] - (N4-hydroxy)-(2R)-2-{3-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl]propyl}butandiamid (440 mg, 59 %) ve formě bezbarvé pevné látky o teplotě tání 114 až 116,5°C.
Rf 0,23 (silanizovaný silikagel C18, methanol : voda, 5:1) δΗ (400 MHz, DMSO-d6) 0,85 (9H, s), 1,24 (3H, d, J = 7 Hz), 1,31 (1H, m), 1,44 (3H, m), 1,98 (1H, dd, J = 7 a 13 Hz),
2,11 (1H, m, a 3H, překrývání), 2,42 (2H, m), 2,77 (1H, m),
4,26 (1H, d, 10 Hz), 4,87 (1H, pentet, J = 7 Hz), 6,91 (1H, d, J = 8 Hz), 6,97 (2H, sad, J =8 Hz, překrývání), 7,18 (7H, komplex), 7,29 (1H, r, J = 6 Hz), 7,35 (2H, t, J =8 Hz), 7,64 (1H, br d), 8,23 (1H, br d), 8,44 (1H, s), 10,28 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 558 (MH+, slabý), 542 (MH+ - O)
FTIR vmax (KBr disk) 3290, 2970, 2930, 1643, 1540, 700 cm1 Nalezeno: C 72,60, H 8,02, N 7,31,
C34H43N3O4.0,25 H20 vypočteno C 72,63, H 7,80, N 7,47 %
Příklad 4
Nl-[(lS)-2,2-Dimethyl-l-({[(IR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propy1]-(2R)-2-[3-(3-fluor-4-fenoxyfeny1)propy1]-(N4-hydroxy)-
N-[(Dimethylamino)-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]pyridin-l-ylmethylen]-N-methylmethaniniumhexafluorfosfát-N-oxid (740 mg, 1,95 mmol) se při 0°C pod atmosférou dusíku přidá k míchanému roztoku (3R)-3-({[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[(1R)-1-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-(3-fluor-4-fenoxyfenyl)hexanové kyseliny (z preparativního postupu 5) (731 mg, 1,30 mmol) a diisopropylethylaminu (220 μΐ, 1,30 mmol) v bezvodém dimethylformamidu (10 ml). Po 25 minutách se ke vzniklé směsi přidá hydrochlorid hydroxylaminu (271 mg, 3,90 mmol) a poté diisopropylethylamin (880 μΐ, 5,20 mmol). Výsledná směs se 16 hodin míchá při 20°C a nalije ethylacetátu (150 ml). Ethylacetátová směs se promyje fosfátovým pufrovacím roztokem (pH 7, 3 x 50 ml) a nasyceným vodným chloridem sodným (50 ml), vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se překrystaluje ze směsi dichlormethanu a diisopropyletheru, čímž se získá sloučenina uvedená v nadpisu ve formě bezbarvé pevné látky (275 mg, 24 %). Vzorek této látky (130 mg) se dále přečistí preparativní vysokotlakou kapalinovou chromatografií (sloupec Phenomenex Magellan C18, 150 x 20 mm, 5 μιη, 20 ml/min acetonitril:vodný fosfátový pufr (8,3mM, pH 7,2), 1 : 1, retenční doba 13,5 min) a poté trituruje s diisopropyletherem, odfiltruje a suší za vakua při 50°C. Získá se 50 mg bílé pevné látky o teplotě tání 136 až 137°C.
Rf 0,39 (dichlormethan : methanol : koncentrovaný vodný amoniak =90 : 10 : 1)
5H (400 MHz, CD3OD) 1,02 (9H, s), 1,42 (3H, d, J = 7 Hz),
1,48 (3H, m), 1,58 (1H, m), 2,16 (1H, dd, J = 6 a 14 Hz),
2.34 (1H, dd, J = 8 a 14 Hz), 2,40 (2H, m), 2,86 (1H, m),
4.34 (1H, s), 4,99 (1H, q, J = 7 Hz), 6,86 (4H, m), 6,94 (1H, d, J = 11,5 Hz), 7,04 (1H, t, J = 7 Hz), 7,12 (1H, t, J = 7 Hz), 7,18 (2H, t, J = 7 Hz), 7,27 (4H, m).
LRMS (termosprej) m/z = 535 (MH+ - HNCO)
FTIR Vmax (KBr disk) 3290, 2970, 2930, 1644, 1508, 1490,
1220, 700 m”1
Nalezeno: C 68,14, H 6,94, N 7,21, C33H40FN3°5*θ'25 H2° vypočteno C 68,08, H 7,01, N 7,22 %
Příklad 5
Nl-[(1S)-2,2-Dimethyl-l-({[(iR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]-(N4-hydroxy)-(2R)-2-[3-(3-methyl-4-fenoxyfenyl)propyl]butandiamid
N-[(Dimethylamino)-1Η-1,2,3-triazolo[4,5-b]pyridin-l-ylmethylen]-N-methylmethaniniumhexafluorfosfát-N-oxid (655 mg, 1,72 mmol) se při 20°C pod atmosférou dusíku přidá k míchanému roztoku (3R)-3-({[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-i-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-(3-methyl-4-fenoxyfenyl)hexanové kyseliny (z preparativního postupu 6) (640 mg, 1,15 mmol) v bezvodém dimethylformamidu (5 ml).
Po 25 minutách se ke vzniklé směsi přidá hydrochlorid hydroxylaminu (239 mg, 3,44 mmol) a poté diisopropylethylamin (792 μΐ, 4,60 mmol). Výsledná směs se 48 hodin míchá při 20°C a nalije do ethylacetátu (150 ml). Ethylacetátová směs se promyje fosfátovým pufrovacím roztokem (3 x 50 ml) a nasyceným vodným chloridem sodným (50 ml), vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Surový produkt se přečistí mžikovou chromatografií. Nejprve se provede chromatograf ie za použití směsi dichlormethanu, methanolu a koncentrovaného vodného amoniaku v poměru 90 : 10 : 1, čímž se • ·
získá žlutý olej. Tento olej se podrobí dalšímu přečištění mžikovou chromatografií za použití směsi dichlormethanu a methanolu v poměru 95 : 5, čímž se získá oranžový olej. Po vykrystalování ze směsi dichlormethanu a diisopropyletheru se získá sloučenina uvedená v nadpisu (25 mg, 4 %).
Rf 0,27 (dichlormethan : methanol, 90 : 10) δΗ (300 MHz, CDC13) 0,98 (9H, s), 1,31 (3H, d, J = 7 Hz),
1,60 (4H, m), 2,16 (3H, s), 2,24 (1H, m), 2,47 (3H, m), 2,82 (1H, m), 4,17 (1H, d, J = 9 Hz), 5,05 (1H, pentet, J = 7 Hz), 6,31 (1H, br d), 6,77 (1H, d, J = 8 Hz), 6,85 (2H, d, J = 8 Hz), 6,97 (1H, s), 7,02 (1H, t, J = 8 Hz), 7,22 (9H, komplex), 9,50 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 573 (M+, slabý), 531 (MH+ - O).
Příklad 6
Nl-[(lS)-2,2-Dimethyl-l-({[(IR)-l-fenylethyl]amino}karbony1)propyl]-(3S)-ethoxy-(2R)-2-[3-(3-fluor-4-fenoxyfenyl)propyl ](N4-hydroxy)butandiamid
N- [ (Dimethylamino) -1H-1,2,3-triazolo [ 4,5-b ] pyridin-l-ylmethylen]-N-methylmethaniniumhexafluorfosfát-N-oxid (88 mg, 0,232 mmol) se při 0°C pod atmosférou dusíku přidá k míchanému roztoku (2S,3R)-3-([(lS)-2,2-dimethyl-l-([(lR)-l-f enylethyl ]aminokarbonyl )propyl]aminokarbonyl )-2-ethoxy-6-(3-fluor-4-fenoxyfenyl)hexanové kyseliny (z preparativního
postupu 8) (94 mg, 0,155 mmol) a diisopropylethylaminu (54 μΐ, 0,31 mmol) v bezvodém dimethylformamidu (2,5 ml). Po 45 minutách se ke vzniklé směsi přidá hydrochlorid hydroxylaminu (32 mg, 0,465 mmol) a poté diisopropylethylamin (81 μΐ, 0,465 mmol). Výsledná směs se 5 hodin míchá při 0’C a poté nalije do ethylacetátu (50 ml). Ethylacetátová směs se promyje fosfátovým pufrovacím roztokem (pH 7, 3 x 30 ml) a nasyceným vodným chloridem sodným (30 ml), vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití směsi dichlormethanu, methanolu a koncentrovaného vodného amoniaku v poměru 95 : 5 : 0,5 jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě bezbarvé pěny (43 mg, 34 %).
Rf 0,3 2 (dichlormethan : methanol : koncentrovaný vodný amoniak v poměru 95 : 5 : 0,5) δΗ (400 MHz, CD3OD) 1,04 (9H, s), 1,12 (3H, t, J = 7 Hz),
1,32 (lh, m), 1,42 (3H, d, J = 7 Hz), 1,46 (2H, m), 1,53 (1H, m), 2,42 (1H, dt, J = 14 a 7 Hz), 2,54 (1H, ddd, J =
7, 9 a 14 Hz), 2,74 (1H, dt, J = 10 a 7,5 Hz), 3,32 (1H, částečně zastíněn pikem CHD2OD), 3,49 (1H, dq, J = 10 a 7 Hz), 3,69 (1H, d, J = 10 Hz), 4,39 (1H, s), 5,00 (1H, q, J = 7 Hz), 6,84 (4H, komplex), 6,92 (1H, dd, J = 12 a 2 Hz),
7,04 (lh, t, J = 8 Hz), 7,14 (3H, komplex), 7,26 (4H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 606 (MH+ - 0), 533 (pík báze, MNa+ (Ph(ch3)chnh2)
HRMS (pozitivní iontový elektrosprej) Nalezeno: m/z 644,3113 c35H44FNaN3°6 vypočteno 644,3112.
Nalezeno: C 66,79, H 7,05, N 6,66, C35H44FN3°6‘0,5 H2° vypočteno C 66,65, H 7,17, N 6,66 %
• ·· ·« • ♦ · * * · • ··· · · ·
Příklad Ί (2S,3R)-3-({[(lS)-2,2-Dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino)karbonyl)-6-[(3-methyl-4-fenyl)feny1]-2-propylhexanová kyselina
Způsobem popsaným v příkladu 1 se tert.butyl-(2S,3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl]-2-propylhexanoát (z preparativního postupu 13) (360 mg, 0,56 mmol) nechá reagovat s trifluoroctovou kyselinou v bezvodém dichlormethanu. Získá se sloučenina uvedná v nadpisu (163 mg, 50 %, po překrystalování z methanolu). Z matečných louhů se získá druhá frakce krystalů (45 mg, 14 %, po překrystalování z methanolu).
Teplota tání 212 až 215 °C (po překrystalování z methanolu) δΗ (400 MHz, DMSO-d6) 0,77 (3H, t, J = 6 Hz), 0,92 (9H, s),
1,13 (1H, m), 1,29 (3H, d, J = 6,5 Hz a 3H, m, překrývání),
1,61 (4H, m), 2,13 (3H, s), 2,35 (2H, m), 2,45 (1H, m), 2,66
(1H, br t, J = 8 Hz), 2,60 (1H, dd, J = 9 a 15 Hz), 4,34
(1H, d, J = 9 Hz) , 4,90 (1H, pentet, J = 6,5 Hz), 6,89 (1H,
d, J = 7 Hz), 6,97 (2H, s a d, J = 8 Hz, překrývání) 7,25 (7H, komplex), 7,31 (1H, t, J =7 Hz), 7,39 (2H, m), 7,94 (1H, br d), 8,29 (1H, br d), 11,66 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 586 (MH+)
FTIR Vmax (KBr disk) 1710, 1630, cm1
Nalezeno: C 72,60, H 8,14, N 4,59, C37H48N2°4·0'33 MeOH.1,25 H20 vypočteno C 72,62, H 8,45, N
4,54 %
Příklad 8
Nl-[(lS)-2,2-Dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyllamino}karbonyl)propyl]-(N4-hydroxy) — (2R) — 2—{3 — [3-methyl-(4-fenyl)fenyl]propyl}
-(3 S)-propylbutandiamid
Způsobem popsaným v příkladu 4 se reakcí (2S,3R)-3({[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethylJamino}karbony1)propyl]amino}karbonyl)-6-[(3-methyl-4-fenyl)fenyl]-2-propylhexanové kyseliny (z příkladu 7, 130 mg, 0,22 mmol) s hydrochloridem hydroxylaminu (45,9 mg, 0,66 mmol) po dobu 5 hodin při 20°C a po stejném zpracování a trituraci surového produktu s etherem získá sloučenina uvedená v nadpisu (64 mg, 49 %) ve formě bezbarvé pevné látky.
Rf 0,31 (dichlormethan : methanol : koncentrovaný vodný amoniak, 90 : 10 : 1) δΗ (400 MHZ, DMSO-dg) 0,74 (3H, t, J = 6,5 Hz), 0,92 (9H, s), 1,03 (1H, m), 1,16 (2H, m), 1,24 (3H, d, J = 7,5 Hz a 1H, m, překrývání), 1,37 (3H, m), 1,44 (1H, m), 2,12 (3H, s a 1H, m, překrývání), 2,33 (1H, m), 2,44 (1H, m), 2,61 (1H, m), 4,31 (1H, d, J = 9 Hz), 4,89 (1H, pentet, J = 7,5
• 9
9
9« 9
Hz), 6,88 (1H, d, J = 8 Hz), 6,95 (1H, s), 6,97 (1H, d, J = 8 Hz), 7,13 (3H, m), 7,22 (4H, m) , 7,30 (1H, t, J = 8 Hz),
7,38 (2H, t, J = 8 Hz), 7,88 (1H, br d), 8,18 (1H, br d),
8,73 (1H, br s), 10,28 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 556 (pík báze, MNH4 + - HCONHOH) Nalezeno: C 72,14, H 8,18, N 6,85,
C37H49N3O4.0,75 H2O vypočteno C 72,46, H 8,30, N 6,85 %
FTIR vmax (KBr disk) 3290, 2970, 2930, 1637, 1530, 700 cm1
Příklad 9 (N4,3S)-Dihydroxy-Nl-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbúnyl)propyl]-(2R)-2-[3-(3-fluor-4-fenoxyfenyl)propyl]butandiamid
Methoxid sodný (35 mg, 0,67 mmol) se pod atmosférou dusíku při teplotě místnosti přidá k roztoku bezvodého hydrochloridu hydroxylaminu (45 mg, 0,67 mmol) v bezvodém methanolu (1 ml). Výsledná směs se 2 hodiny míchá a rychle přefiltruje přes vrstvu pomocné filtrační látky Arbocel za promývání bezvodým methanolem (1 ml). K filtrátu se přidá (2R)-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]-5-[(3-fluor-4-fenoxy)fenyl]pentanamid (z preparativního postupu 15, 103 mg, 0,16 mmol) s bezvodým methanolem (1 ml). Výsledná směs se 18 hodin míchá při teplotě místnosti.
Vzniklý roztok se zkoncentruje za sníženého tlaku a zbytek se přečistí mžikovou chromatografií, nejprve na silanizovaném silikagelu Clg (40 až 63 μιη) za použití směsi methanolu a vody v poměru 4 : 1 jako elučního činidla a poté na silikagelu s normálními fázemi za použití elučního gradientu dichlormethan : methanol. Získá se produkt ve formě bezbarvé pevné látky (25 mg, 26 %) o teplotě tání 90 až 95° C.
Rf 0,38 (dichlormethan : methanol, 90 : 10)
SH (300 MHz, CD3OD) 1,03 (9H, s), 1,45 (3H, d, J = 7 Hz),
1,52 (3H, m), 1,66 (IH, m), 2,53 (2H, m), 2,77 (IH, m), 4,02 (lh, d, J = 8 Hz), 4,36 (IH, s), 5,01 (IH, q, J = 7 Hz) , 6,87 (4H, komplex), 6,97 (IH, d, J =12 Hz), 7,04 (IH, t, J = 8 Hz), 7,16 (3H, komplex), 7,28 (4H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 533 (pík báze, MH+ - HONHCO) Nalezeno: C 65,94, H 6,89, N 6,95, C33^40^^3°6’θ'4 ^2° vypočteno C 65,96, H 6,84, N 6,99 %
Příklad 10 (N4,3S)-Dihydroxy-Nl-[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]-(2R)-{3-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl]propyl}butandiamid
Způsobem popsaným v příkladu 9 se (2R)-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]-5-[(3-methyl-451 ·· ··
-fenyl)fenylIpentanamid (z preparativního postupu 16, 440 mg, 0,73 mmol) nechá 18 hodin při teplotě místnosti reagovat s hydroxylaminem. Výsledný roztok se zkoncentruje za sníženého tlaku a zbytek se přečistí mžikovou chromatografií na silanizovaném silikagelu C18 (40 až 63 μη) za použití směsi methanolu a vody v poměru 4:1a poté 5 : 1 jako elučního činidla. Získá se bezbarvá pevná látka (339 mg, 81 %) o teplotě tání 95 až 97 °C.
Rf 0,16 (dichlormethan : methanol, 95 : 5) δΗ (300 MHz, CDC13) 0,98 (9H, s), 1,50 (3H, d, J = 7 Hz),
1,65 (3H, m), 1,89 (1H, m), 2,23 (3H, s), 2,58 (2H, br t, J = 6 Hz), 3,27 (1H, m), 4,15 (1H, d), 4,20 (1H, br s), 5,09 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,32 (1H, br s), 6,20 (1H, br d), 6,98 (1H, d, J = 8 Hz), 7,01 (1H, s), 7,10 (1H, d, J =8 Hz), 7,31 (10H, komplex), 7,86 (br d), 9,50 (1H, br s).
LRMS (termosprej) MÚZ = 514 (pík báze, MH+ - HONHCO)
Nalezeno: C 70,50, H 7,58, N 7,23, C34H43N3°5·0'25 H2° vYP°čteno C 70,62, H 7,58, N 7,27 %
Příklad 11 (2R)-Nl-[(1S)-2,2-Dimethyl-l-({[(IR)-l-fenylethyllamino}karbonyl)propyl]-2-{3-[3-fluor-(4-fenyl)fenyl]propyl}-(N4-hydroxy)butandiamid
HO
HONH
• ί
9 9 · • 9 9 9
9 9 99
9 9
9
a) Způsobem popsaným v příkladu 2 se (3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]amino}karbony1)propyl]amino}karbony1)-6-[(3-fluor-4-fenyl)fenyl]hexanová kyselina (z preparativního postupu 17) (426 mg, 0,78 mmol) nechá reagovat s hydrochloridem O-allylhydroxylaminu (128 mg, 1,17 mmol). Surový produkt se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu hexan : isopropylalkohol a poté triturací s etherem a ethylacetátem. Získá se (2R)-Nl-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]-2-{3-[3-fluor-(4-fenyl)feny1]propyl}-(N4-3-propenyloxy)butandiamid (260 mg, 55 %) ve formě bílé pevné látky o teplotě tání 182 až 186“C.
Rf 0,32 (hexan : isopropylalkohol, 10 : 1) δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 0,87 (9H, s), 1,26 (3H, d, J = 6,5
Hz), 1,28 (1H, m), 1,43 (3H, m), 1,97 (1H, m), 2,13 (1H, m), 2,50 (2H, m), 2,84 (1H, m), 4,16 (2H, m), 4,27 (1H, d, J = 9 Hz), 4,87 (1H, pentet, J = 6,5 Hz), 5,15 (1H, d, J = 10 Hz), 5,20 (1H, d, J = 17 Hz), 5,85 (1H, m), 6,97 (2H, m),
7,13 (4H, komplex), 7,29 (2H, m), 7,45 (4H, m), 7,65 (1H, br s), 8,26 (1H, br s), 10,37 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 602 (MH+).
Nalezeno: C 70,91, H 7,33, N 6,84, C36H44FN3O4.0,5 H20 vypočteno C 70,80, H 7,43, N 6,88 %
b) Způsobem popsaným v příkladu 2 se za přítomnosti katalyzátoru na bázi palladia po dobu 2 hodin při teplotě zpětného toku (2R)-Nl-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]amino}karbony1)propyl]-2-{3-[3-fluor-(4-fenyl)fenyl]propyl}-(N4-3-propenyloxy)butandiamid nechá reagovat s mravenčanem amonným (110 mg, 1,75 mmol) ve směsi ethanolu a vody v poměru 4 : 1 (5 ml). Po zpracování se zbytek přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu dichlormethan : methanol : koncentrovaný vodný amoniak a triturací s etherem. Získá se (2R)-Nl-[(lS)-2,2-dimethyl-l- ({[ (IR)-1-fenylethyl]amino}karbony1)propyl]-2-{3-[3-fluor53
99 • « · · • 9 9 9
9 ··· • · * ·« ··
Ι· »
-(4-fenyl)fenyl]propyl}-(N4-hydroxy)butandiamid (120 mg, 61 %) ve formě bezbarvé pevné látky.
Rf 0,25 (dichlormethan : methanol : koncentrovaný vodný amoniak, 90 : 10 : 1) δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 0,87 (9H, s), 1,25 (3H, d, J = 6,5
Hz), 1,31 (1H, m), 1,44 (3H, m), 2,00 (1H, dd, J = 7 a 15
Hz), 2,13 (1H, dd, J = 4 a 15 Hz), 2,48 (2H, m), 2,80 (1H, m), 4,26 (1H, d, J = 9 Hz), 4,87 (1H, pentet, J = 6,5 Hz),
6,97 (2H, m), 7.06 (1H, m), 7,13 (2H, t, J = 8 Hz), 7,20 (2H, m), 7,30 (2H, m), 7,43 (4H, komplex), 7,66 (1H, br d),
8,23 ( 1H, br d), 8,58 (1H, s), 10,27 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z =563 (MH+)
Nalezeno: C 70,02, H 7,25, N 7,52 C33H40FN3o4.0,25 H2O vypočteno C 70,00, H 7,21, N 7,42 %
Příklad 12 (3R)-3-({[(1S)-2,2-Dimethyl-l-({[(IR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-(2S)-ethoxy-6-[(3-methyl-4-fenyl)fenyl]hexanová kyselina
Hydrát hydroxidu lithného (30 mg, 0,71 mmol) se přidá k suspenzi methyl-(2S,3R)-3-({[(iS)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]amino}karbony1)propyl]amino}karbony1)-2-ethoxy-6-[(3-methyl-4-fenyl)fenyl]hexanoátu (z preparativního postupu 18, 384 mg, 0,64 mmol) ve směsi tetra54 hydrofuranu a vody v poměru 3 : 2 (10 ml). Výsledná směs se 2 hodiny míchá při teplotě místnosti. Vzniklý roztok se okyselí 1M kyselinou chorovodíkovou a extrahuje ethylacetátem (3 x 30 ml). Spojené extrakty se vysuší síranem sodným a zkoncentrují za sníženého tlaku. Po trituraci s etherem se získá sloučenina uvedená v nadpisu ve formě bezbarvé pevné látky (196 mg, 52 %).
δΗ (400 MHz, CD3OD) (zaměnitelné vodíky jsou zaměněny pouze
zčásti) 1, 02 (9H, : s) , 1 ,16 (3H, t, J = 7 Hz), 1,42 (3H,
d, J = 7 Hz), 1,52 (3H, m), 1,65 (1H, m), 2,16 (3H, s) ,
2,50 (2H, m), 2,74 (1H, m), 3,39 (1H, m), 3,58 (1H, m),
3,90 (1H, d, J = 9 Hz) , 4,38 (1H, d, J = 9 Hz), , 5,0 0 (1H,
pentet, J = 7 Hz), 6,92 (2H, m), 7,00 (2H, m), 7,20 (7H,
komplex), 7,38 (2H , t, J = 7 Hz), 7,86 (1H, br d) , 8,35
(1H, br d) .
Nalezeno: C 73,11, H 7, 89, N 4,79,
C36H46N2°5·0'25 H2° vYP°čteno C 73,12, H 7,92, N 4,74 %
Příklad 13
Nl-[(1S)-2,2-Dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]aminojkarbonyl)propyl]-(3S)-ethoxy-(N4-hydroxy)-(2R)-2-{3-[3-methyl-(4-fenyl) fenyl]propyl}butandiamid
N-[(Dimethylamino)-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]pyridin-l-ylmethylen]-N-methylmethaniniumhexafluorfosfát-N-oxid ·· ··· «· * · «· ·· »· ·· • · · • · · • ··· • · «· (164 mg, 0,43 mmol) se při 0°C pod atmosférou dusíku přidá k míchanému roztoku (2S,3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-(2)-ethoxy-6-[(3-methyl-4-fenyl)fenyljhexanové kyseliny (z příkladu 12) (169 mg, 0,29 mmol) a diisopropylethylaminu (50 μΐ, 0,29 mmol) v bezvodém dimethylformamidu (3 ml). Po 60 minutách se k reakční směsi přidá hydrochlorid hydroxylaminu (60 mg,
0,86 mmol) a poté diisopropylethylamin (81 μΐ, 0,465 mmol). Vzniklá směs se 16 hodin míchá při 20°C a zředí etherem. Etherová směs se prmoyje vodou. Vodná vrstva se extrahuje etherem (dvěma dávkami) a ethylacetátem. Spojené organické roztoky se promyjí vodou, vysuší síranem sodným a zkoncentrují za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí opakovanou mžikovou chromatografií za použití směsi dichlormethanu, methanolu a koncentrovaného vodného amoniaku v poměru nejprve 97,5 ; 2,5 : 0,5 a poté 96 : 4 : 0,5 jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě bezbarvé pěny (20 mg, 11 %).
Rf 0,25 (dichlormethan : methanol : koncentrovaný vodný amoniak, 90 : 10 : 1) δΗ (300 MHz, CDC13) 0,97 (9H, s), 1,31 (3H, t, J = 7 Hz),
1,55 (3H, d, J = 7 Hz), 1,71 (3H, m), 1,84 (1H, m), 2,23 (3H, s), 2,65 (2H, m), 2,84 (1H, m), 3,48 (1H, pentet, J = 7 Hz), 7,36 (1H, m), 3,95 (1H, d, J =7 Hz), 3,98 (1H, d, J = 10 Hz), 5,12 (1H, q, J = 7 Hz), 6,47 (1H, br d), 7,02 (2H,
m), 7,13 (1H, d, J = 8 Hz), 7,30 (10H, komplex), 9,65 (1H, br s).
HRMS (pozitivní iontový elektrosprej) nalezeno: m/z = 624,3403 C36H47NaN3O5 vypočteno 624,3413.
Příklad 14 (3R)-3-({[(lS)-2,2-Dimethyl-l-({[(lS)-2-methoxy-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-((3-methy1-4-feny1)fenyljhexanová kyselina
Způsobem popsaným v příkladu 1 se terc.butyl-(3R)-3-({[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[(lS)-2-methoxy-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl]hexanoát (z preparativního postupu 19) (535 mg, 0,85 mmol) nechá reagovat s trifluoroctovou kyselinou v bezvodém dichlormethanu po dobu 2 hodin při teplotě místnosti. Zbytek se rozpustí v toluenu, zkoncentruje za sníženého tlaku (dvakrát) a překrystaluje z ethylacetátu. Získá se bezbarvá pevná látka (387 mg, 80 %) o teplotě tání 184 až 186°C (po překrystalování z ethylacetátu).
Rf 0,47 (hexan : ether : kyselina octová, 50 : 50 : 1) δΗ (400 MHz, CDgOD) (zaměnitelné vodíky zaměněny pouze
Zčásti) 1,03 (9H, s), 1,51 (4H, m), 2,15 (3H, s), 2,36 (1H, dd, J = 5 a 17 Hz), 2,46 (2H, m), 2,60 (1H, dd, J = 10 a 17 Hz), 2,82 (1H, m), 3,32 (3H, s), 3,57 (2H, d, J = 7 Hz),
4,42 (1H, d, J = 10 Hz), 5,10 (1H, q, J = 7 Hz), 6,87 (1H, d, J = 8 Hz), 6,98 (2H, s a d, J = 8 Hz, překrývání), 7,22 (8H, komplex), 7,39 (2H, t, J = 7 Hz), 7,74 (1H, br d),
8,48 (1H, br d).
LRMS (termosprej) m/z =573 (MH+)
FTIR vmax (KBr disk) 3300, 2960, 2930, 1711, 1639, 1543,
700 cm-1
Nalezeno: C 73,32, H 7,73, N 4,80, C35H44N2°5 vypočteno: C 73,40, H 7,74, N 4,89 %
Příklad 15 (3R)-3-({[(lS)-2,2-Dimethyl-l-({[(1S)-2-methoxy-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-(31-methoxy-2-methylbifen-4-yl)hexanová kyselina
Způsobem popsaným v příkladu 1 se terc.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(1S)-2-methoxy-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino]karbonyl)-6-(3'-methoxy-2-methylbifen-4-yl)hexanoát (z preparativního postupu 21) (660 mg, 1,0 mmol) nechá 3 hodiny při teplotě místnosti reagovat s trifluoroctovou kyselinou v bezvodém dichlormethanu. Zbytek se rozpustí v toluenu a toluenový roztok se zkoncentruje (dvakrát). Zbytek se překrystaluje z ethylacetátu. Získá se bezbarvá pevná látka (326 mg, 54 %). Překrystalováním matečných louhů se získá dalších 107 mg (18 %) produktu. Teplota tání 155,5 až 157,5°C (po překrystalování z ethylacetátu)
Rf 0,34 (hexan : ether : kyselina octová, 50 : 50 : l) δΗ (400 MHz, CDgOD) (zaměnitelné vodíky zaměněny pouze zčásti) 1,03 (9H, s), 1,51 (4H, m), 2,16 (3H, s), 2,37 (1H, dd, J = 5 a 17 Hz), 2,47 (2H, m), 2,59 (1H, dd, J = 10 a 17 Hz), 2,83 (1H, m), 3,32 (3H, s), 3,57 (2H, d, J = 7 Hz),
3,80 (3H, s), 4,43 (1H, d, J = 10 Hz), 5,10 (1H, q, J = 7 Hz), 6,77 (1H, s), 6,80 (1H, d, J = 7 Hz), 6,87 (2H, m),
6,97 (2H, m), 7,16 (3H, m), 7,28 (3H, m), 7,74 (1H, br d),
8,50 (1H, br d) .
LRMS (termosprej) m/z = 603 (MH+)
FTIR Vmax (KBr disk) 3300, 2960, 2930, 1711, 1640, 1545,
1217, 1211, 700 cm1
Nalezeno: C 71,77, H 7,69, N 4,61, C36H46N2°6 vypočteno: C 71,73, H 7,69, N 4,65 %
Příklad 16 ( 2R)-N1-[(1S)-2,2-Dimethyl-l-({[(lS)-2-methoxy-l-fenylethyl]aminojkarbonyl)propy1] — 2—{3—[(3-methyl-4-fenyl)feny1]propy1}(N-4-hydroxy)butandiamid
a) Způsobem popsaným v příkladu 2 se (3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(1S)-2-methoxy-l-fenylethyllamino}karbonyl)propyl]amino}karbony1)-6-[(3-methyl-4-fenyl)fenyl]hexanová kyselina (z příkladu 14) (347 mg, 0,61 mmol) nechá reagovat s hydrochloridem O-allylhydroxylaminu (81 mg, 0,73 mmol). Po přečištění surového produktu mžikovou chromatografií za použití směsi hexanu a ethylacetátu v poměru 2 : 1 jako elučního činidla a následnou trituraci etherem a ethylacetátem se získá (2R)-Nl-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(1S)-2-methoxy-l-fenylethyl]amino}karbony1)propyl]—2—{3—[(3—
-methy1-4-fenyl)fenyl]propyl}(N4-3-propenyloxy)butandiamid (306 mg, 80 %) ve formě bílé pevné látky o teplotě tání 117 až 120°C.
Rf 0,28 (hexan : ethylacetát, 1:2) δΗ (400 MHz, CDC13) 1,02 (9H, s), 1,40 - 1,70 (4H, komplex), 2,20 (3H, s, a 1H, m, překrývání), 2,34 - 2,60 (3H, komplex), 2,76 (1H, m), 3,36 (3H, s), 3,63 (2H, d, J = 5 Hz), 4,28 (1H, d, J = 9,5 Hz), 4,34 (2H, d, J = 6 Hz), 5,12 (1H, dt, J = 7,5 a 5 Hz), 5,30 (2H, m), 5,90 (1H, m), 6,44 (1H, d, J = 7,5 Hz a 1H, br s, překrývání), 6,94 (1H, m),
6,98 (1H, s), 7,08 (1H, d, J = 7 Hz) , 7,18 - 7,38 (8H, komplex), 7,40 (2H, m), 8,50 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 628 (MH+)
b) Míchaná směs (2R)-N1-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(1S)-2-methoxy-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propylJ-2-{3-[(3-methyl-4-fenyl)fenylJpropyl}(N4-3-propenyloxy)butandiamidu (300 mg, 0,48 mmol) a mravenčanu amonného (300 mg, 4,76 mmol) se rozpusté v horké směsi ethanolu a vody v poměru 4 :
1, 6 ml). K výslednému bezbarvému roztoku se přidá roztok octanu palladnatého (4 mg, 0,018 mmol) a trifenylfosfinu (9,6 mg, 0,037 mmol) ve směsi ethanolu a vody v poměru 4 : 1 (2 ml). Reakční směs se 60 minut zahřívá ke zpětnému toku a poté ochladí. Vzniklý hnědý roztok se zředí ethylacetátem (100 ml) a ethylacetátová směs se promyje nasyceným vodným chloridem sodným (2 x 50 ml), vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí sloupcovou chromatografií (silanizovaný silikagel Clg (40 až 63 μπι), eluce směsi methanolu a vody v poměru 4 : 1) a poté triturací s diisopropyletherem. Získá se (2R)-N1-[(1S)-2,2dimethyl-l-({[(lS)-2-methoxy-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propy1J-2-{3-[(3-methyl-4-fenyl)fenyl]propy1}-(N-4-hydroxy)butandiamid (226 mg, 80 %) ve formě bílé pevné látky o teplotě tání 92 až 96°C.
Rf 0,57 (dichlormethan : methanol : koncentrovaný vodný amoniak, 90 : 10 : 1) δΗ (400 MHz, CH3OD) 1,02 (9H, s), 1,40 - 1,68 (4H, m), 2,17 (3H, s), 2,20 (1H, m), 2,36 (1H, m), 2,48 (2H, m), 2,86 • · · · · (1H, m), 3,30 (3H, s), 3,58 (2H, d, J = 6,5 Hz), 4,40 (1H,
S), 5,10 (1H, t, J = 6,5 Hz), 6,88 (1H, m), 6,98 (2H, m) ,
7,10 - 7,36 (8H, komplex), 7,39 (2H, m).
LRMS (termosprej) m/z = 588 (MH+)
Nalezeno: C 70,95, H 7,85, N 7,00,
C35H45N3O5.0,25 H2O vypočteno C 70,98, H 7,74, N 7,09 %
Příklady 17 a 18 (N4,3S)-Dihydroxy-Nl-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-l-fenylethyl ]amino}karbony1)propyl]-(2R)-2-{3-[4-(4-kyanofenyl)-3-methylfenyl]propyl}butandiamid a (N4,3S)-dihydroxy-Nl-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]-(2R)-2-{3-[4-(4-hydroxyamidino)fenyl-3-methy1fenyl]propyl}butandiamid
OH
Způsobem popsaným v příkladu 9 se (2R)-5-{[4-(4kyanofenyl)-3-methyl]fenyl}-2-[(4S)-2,2,dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbony1)propylJpentanamid (z preparativního postupu 22) (384 mg, 0,62 mmol) nechá 18 hodin při teplotě místnosti reagovat s hydroxylaminem. Výsledný roztok se zkoncentruje za sníženého tlaku a zbytek se přečistí sloupcovou chromátografií (silanizovaný silikagel C18 (40 až 63 μιη), eluce směsí methanolu a vody v poměru 70 : 30 a poté 80 : 0), při níž se získají dvě frakce. První eluovaný produkt byl identifikován jako (N4,3S)-dihydroxy-Nl-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]-(2R)-2-{3-[4-(4-kyanofenyl)-3-methylfenyl]propyl}butandiamid, Rf 0,38 (dichlormethan : methanol, 90 : 10), po trituraci s diisopropyletherem ve formě bílé pevné látky (115 mg, 31 %) o teplotě tání 103 až 109°C.
δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 0,92 (9H, s), 1,25 (1H, m), 1,26 (3H, d, J = 7,5 Hz), 1,40 - 1,54 (3H, m), 2,14 (3H, s), 2,40 (1H, m), 2,44 (1H, m), 2,70 (1H, m), 3,76 (1H, t, J = 7,5 Hz), 4,34 (1H, d, J = 9,5 Hz), 4,90 (1H, pentet, J = 7,5
Hz), 5,24 (1H, d, J = 7,5 Hz), 6,98 (1H, m), 7,00 (2H, m),
7,10 (3H, m), 7,20 (2H,m), 7,46 (2H, d, J = 8 Hz), 7,58 (1H, d, J = 9,5 Hz), 7,82 (2H, d, J = 8 Hz), 8,26 (1H, d,
J = 7,5 Hz), 8,80 (1H, br s), 10,56 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 538 (pík báze, M+ - HONHCO)
Nalezeno: C 69,26, H 7,15, Ν 9,10,
C35H42N4O5.0,lEtOAc.0,4H2O vypočteno C 69,16, H 7,15,
N 9,11 %
Druhý eluovaný produkt byl idenfitikován jako (N4,3S)-dihydroxy-Nl-[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-l-fenylethyl ]amino}karbony1)propyl]-(2R)-2-{3-[4-(4-hydroxyamidino)fenyl-3-methylfenyl]propyl}butandiamid, Rf 0,20 (dichlormethan : methanol, 90 : 0) ve formě bílé pevné látky (84 mg, 21 %) o teplotě tání 131 až 135°C.
δΗ (400 MHz, DMSO-d6) 0,90 (9H, s), 1,24 (1H, m, a 3H, d,
J = 7 Hz, překrývání), 1,38 - 1,58 (3H, m), 2,16 (3H, s),
2,40 (1H, m), 2,44 (1H, m) , 2,58 (1H, m),. 3,76 (1H, t,
J = 7 Hz), 4,34 (1H, d, J = 10,5 Hz), 4,90 (1H, pentet,
J = 7 Hz), 5,24 (1H, d, J = 7 Hz), 5,80 (2H, s), 6,96 (1H, m), 7,00 (2H, m), 7,04 - 7,20 (3H, m), 7,21 (2H, m), 7,46 (2H, d, J = 8 Hz), 7,58 (1H, d, J = 10,5 Hz), 7,70 (2H, d, J = 8 Hz), 8,24 (1H, d, J = 7 Hz), 8,80 (1H, br s), 9,60 (1H, s), 10,58 (1H, br s ).
LRMS (termosprej) m/z = 632 (MH+)
Nalezeno: C 64,86, H 7,21, N 10,28, C35H45N5o6.0,lCH3OH.0,9H2O vypočteno C 64,74, H 7,31,
N 10,75 %
Příklad 19 (N4,3S)-Dihydroxy-Nl-[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]-(2R)-2-{3-[4-(3-kyanofenyl)-3-methylfenyl]propyl}butandiamid
Methoxid sodný (43 mg, 0,80 mmol) se pod atmosférou dusíku při teplotě místnosti přidá k roztoku bezvodého hydrochloridu hydroxylaminu (56 mg, 0,80 mmol) v bezvodém methanolu (1 ml). Vzniklá směs se 2,5 hodiny míchá a rychle přefiltruje přes vrstvu pomocné filtrační látky Arbocel za promývání bezvodým methanolem (1 ml). K přefiltrované směsi • Α· ·« ** ·* • · · · · · · * · ·· ··« ·····» ♦ · · · · ···*»· · • · · · · · 0 · • « » · « ·· · · · · · se při 4°C přidá (2R)-5-{[4-(3-kyanofenyl)-3-methyl]fenyl}-2- [(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethy1-1-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]pentanamid (z preparativniho postupu 24) (123 mg, 0,20 mmol) v bezvodém methanolu (1 ml). Reakční směs se 15 minut míchá, poté nechá zahřát na teplotu místnosti a míchá dalších 9 hodin. Vzniklý roztok se zkoncentruje za sníženého tlaku a zbytek se přečistí sloupcovou chromatografií (silanizovaný silikagel C18 (40 až 63 μπι) za použití směsi methanolu a vody v poměru 3 : 1 jako elučního činidla. Zbytek se azeotropicky odpaří s ethanolem a poté s ethylacetátem a trituruje s diisopropyletherem. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě nekrystalické pevné látky (58 mg, 48 %) bez určité teploty tání.
Rf 0,11 (dichlormethan, methanol a koncentrovaný vodný amoniak, 90 : 10 : 1) δΗ (400 MHz, DMSO-d6) 0,92 (9H, s), 1,24 (1H, m a 3H, d,
J = 7 Hz, překrývání), 1,38 - 1,54 (3H, m), 2,14 (3H, s),
2,40 (1H, m), 2,48 (1H, m), 2,70 (1H, m), 3,76 (1H, t, J = 7,5 Hz), 4,34 (1H, d, J = 9,5 Hz), 4,90 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,22 (1H, d, J = 7,5 Hz), 6,98 (1H, d, J = 7 Hz), 7,02 (2H, m), 7,14 (3H, m), 7,22 (2H, d, J = 7 Hz), 7,58 (1H, d,
J = 9,5 Hz), 7,60 (2H, d, J = 5 Hz), 7,72 ( 1H, s), 7,80 (1H, m), 8,26 (1H, d, J = 7 Hz), 8,80 (1H, brs), 10,56 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 599 (MH+) , 538 (pík báze, M+ - HONHCO)
Nalezeno: C 69,12, H 7,20, N 9,04, C35H42N4°50'5 H2° vYP°čteno C 69,17, H 7,13, N 9,22 %
Příklad 20 (2R)-2-{3-[4-(3-Karbamoylfenyl)-3-methylfenyl]propyl}-(N4,3S)dihydroxy-Nl-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethylJamino}karbonyl)propyl]butandiamid
CONHj
Způsobem popsaným v příkladu 19 se (2R)-5-{[4-(3-karbamoylfenyl)-3-methyl]fenyl}-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-1,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]amino}karbonyl)propylIpentanamid (z preparativního postupu 26) (126 mg, 0,20 mmol) nechá při teplotě místnosti po dobu 13 hodin reagovat s hydroxylaminem. Výsledný roztok se zkoncentruje za sníženého tlaku a zbytek se přečistí sloupcovou chromatografií (silanizovaný silikagel C18 (40 až 63 μιη)) za použití směsi methanolu a vody v poměru 3 : 2 jako elučního činidla. Zbytek se azeotropicky odpaří s ethanolem a poté ethylacetátem a trituruje s diethyletherem. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě bílé pevné látky (74 mg, 60 %) o teplotě tání 85 až 100°C.
Rf (dichlormethan, methanol a koncentrovaný vodný amoniak, : 10 : 1) δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 0,94 (9H, s), 1,24 (1H, m a 3H, d,
J = 7 Hz, překrývání), 1,43 ( 3H, m), 2,14 (3H, s), 2,40 (1H, m), 2,50 (1H, m), 2,70 (1H, m), 3,76 (1H, t, J = 7 Hz), 4,36 (1H, d, J = 10 Hz), 4,90 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,24 (1H, d, J = 7,5 Hz), 6,98 (1H, d, J = 7 Hz), 7,02 (2H, m) , 7,14 (3H, m), 7,20 (2H, m), 7,34 (1H, s), 7,40 (1H, d, J =
Hz), 7,46 (1H, d, J = 7 Hz), 7,58 (1H, d, J = 10 Hz),
7,80 (1H, s), 7,82 (1H, d, J = 7 Hz), 7,98 (1H, s), 8,26 (1H, d, J = 7 Hz), 8,90 (1H, s), 10,60 (1H, s).
LRMS (termosprej) m/z = 617 (MH+)
«
Nalezeno: C 65,35, Η 7,29, N 8,57, C35H44N4°6·1,33 H20 vypočteno C 65,61,
H 7,35, N 8,74 %
Příklad 21 (3R)-3-[({({[(1S)-2-Methoxy-l-fenylethyl]amino}karbonyl)-[(1S)-2-methyl]-l-propyllamino)karbonylj-6-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl]hexanová kyselina
Způsobem popsaným v příkladu 1 se terc.butyl-(3R)-3-[({({[(1S)-2-methoxy-l-fenylethyl]amino}karbonyl)-[(1S)-2-methyl]-l-propyl}amino)karbonyl]-6-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl]hexanoát (z preparativního postupu 28) (700 mg, 1,14 mmol) hodiny při teplotě místnosti nechá reagovat s trifluoroctovou kyselinou v bezvodém dichlormethanu. Zbytek se azeotropicky odpaří s toluenem (dvakrát) a překrystaluje z diethyletheru. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě bezbarvé pevné látky (506 mg, 79 %) o teplotě tání 141 až 144°C.
Rf 0,28 (pentan : ethylacetát : kyselina octová, 50 : 50 : 1) SH (400 MHz, DMSO-dg) 0,83 (3H, d, J = 8 Hz), 0,85 (3H, d, J = 8 Hz), 1,36 (1H, m), 1,48 ( 3H, m) , 1,94 (1H, oktet,
J = 8 Hz), 2,18 (3H, s), 2,22 (1H, m), 2,42 (3H, m), 2,76 (1H, m), 3,20 (3H, s), 3,44 (2H, d, J = 7,5 Hz), 4,20 (1H, t, J = 8 Hz), 5,00 (1H, q, J = 7,5 Hz), 6,94 (1H, m), 7,00 (2H, m), 7,12 - 7,38 (8H, komplex), 7,40 (2H, m), 7,90 (1H,
• · d, J = 8 Hz), 8,02 (IH, d, J = 7,5 Hz), 12,04 (IH, br s). LRMS (termosprej) m/z = 559 (MH+)
Nalezeno: C 72,86, H 7,52, N 5,04, C34H42N2°5 vypočteno C 73,09, H 7,58, N 5,01 %
Příklad 22 (3R)-3-({[({[(lS)-Methoxy-l-fenylethyl]amino}karbonyl)-(lS) -2-fenylethyl]aminojkarbonyl)-6-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl]hexanová kyselina
Způsobem popsaným v příkladu 1 se terc.butyl-(3R)-3-( {[ ({[(1S)-2-methoxy-l-fenylethylJamino}karbony1)-(1S)-2-fenylethyl]amino}karbony1)-6-[3-methyl(4-fenyl)fenyl]hexanoát (z preparativního postupu 30) (920 mg, 1,39 mmol) nechá 4 hodiny při teplotě místnosti reagovat s trifluoroctovou kyselinou v bezvodém dichlormethanu. Zbytek se azeotropicky odpaří s toluenem (dvakrát) a překrystaluje z diethyletheru. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě bezbarvé pevné látky (665 mg, 79 %) o teplotě tání 152 až 157°C.
Rf 0,27 (pentan, ethylacetát a kyselina octová, 50 : 50 : 1) δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 1,30 - 1,50 (4H, m), 2,16 (3H, s),
2,18 (IH, m), 2,30 (IH, m), 2,42 (2H, m), 2,62 (IH, m),
2,84 (IH, m), 2,98 (IH, m), 3,18 (3H, s), 3,38 (2H, d, J =
Hz), 4,60 ( IH, dt, J = 6 a 8,5 Hz), 4,98 (IH, g, J = 8 • ·
Hz), 6,94 (1H, m), 7,00 (2H, m) , 7,12 - 7,38 (13H, komplex),
7,40 (2H, m), 8,08 (1H, d, J = 8,5 Hz), 8,20 (1H, d, J = 8 Hz), 12,05 (1H, br s) .
LRMS (termosprej) m/z = 607 (MH+)
Nalezeno: C 75,02, H 6,96, N 4,63, C38H42N2°5 vYPočteno C 75,22, H 6,98, N 4,62 %
Příklad 23
Hydrochlorid (3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-{[(IR)-1-(4-pyridy1)ethylamino]karbony1}propyljamino}karbony1)-6-[(3-methyl-4-fenyl)fenyljhexanové kyseliny
Plynný chlorovodík se při 0°C vede roztokem terc.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-{[(IR)-1-(4-pyridyl)ethylamino]karbony1}propyl]amino jkarbonyl)-6-[(3-methyl-4-fenyl)fenyljhexanoátu (z preparativního postupu 31) (285 mg, 0,47 mmol) v dioxanu (15 ml) pod atmosférou dusíku až do jeho nasycení. Vzniklý roztok se 3 hodiny míchá při 0°C a poté zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se trituruje s diethyletherem, čímž se získá sloučenina uvedená v nadpisu ve formě bílé pevné látky (390 mg, 88 %) o teplotě tání 132°C (za rozkladu).
Rf 0,16 (ethylacetát : hexan : kyselina octová, 75 : 25 : 1) δΗ (400 MHz, CD3OD) 1,06 (9H, s), 1,50 (4H, m a 3H, d, J %
Hz, překrývání), 2,16 (3H, s), 2,40 - 2,60 (3H, m), 2,64 • ·
(1H, m), 2,90 (1H, m ), 4,32 (1H, d, J = 10 1 Hz), 5,16 (1H,
pentet, J = 7 Hz), 6,86 (1H, m), 6,98 (2H, m), 7,21 (2H, m),
7,30 (1H, m), 7,40 (2H, m), 7,90 (1H, d, J = 10 Hz), 7,96
(2H, d, J = 8 Hz), 8,56 (2H, d, J = 8 Hz), 8,90 (1H, d,
J = 7 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 544 (MH+)
Nalezeno: C 65,43, H 7,28, N 6,72,
C33H41N3O4.HCl.1,5 H20 vypočteno C 65,28, H 7,47, N 6,92 %
Příklad 24
Nl-[(lS)-2,2-Dimethyl-l-([(IR)-1-(3-pyridyl)ethylamino]karbo nyl)propyl]-(N4-hydroxy)-(2R)-2-{3-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl] propyl}butandiamid
a) Způsobem popsaným v příkladu 2 se (3R)-3-({[(1S )-2,2-dimethyl-l-{[(IR)-l-(3-pyridyl)ethylamino]karbonyl}propyl3 amino}karbonyl)-6-[(3-methyl-4-fenyl)fenylJhexanová kyselina (z preparativního postupu 32) (330 mg, 0,57 mmol) nechá reagovat s hydrochloridem O-allylhydroxylaminu (76 mg, 0,68 mmol). Surový produkt se přečistí překrystalováním z horkého ethylacetátu. Získá se Nl-[(lS)-2,2-dimethyl-l-([(IR) -1-(3-pyridyl)ethylamino]karbonyl)propyl]-(N4-propenyloxy)-(2R)-2-{3-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl]propyl}butandiamid (219 mg, 64 %) ve formě bílé pevné látky o teplotě tání 187 až 189°C.
.: .·*· : :: : : : .”· · : :··:*:
Rf 0,21 (ethylacetát) δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 0,90 (9H, s), 1,32 (3H, d, J = 7,5 Hz), 1,42 (4H, m), 2,04 (1H, m), 2,16 (3H, s), 2,18 (1H, m) , 2,46 (2H, m), 2,86 (1H, m) , 4,20 (2H, m) , 4,28 (1H, d, J =
Hz), 4,96 (1H, xn), 5,20 (2H, m) , 5,88 (1H, m) , 6,94 (1H, m), 7,00 (2H, m), 7,18 (1H, m), 7,26 (2H, m), 7,32 (1H, m),
7.40 (2H, m), 7,60 (1H, m), 7,70 (1H, m), 8,38 (1H, m) ,
8.40 (1H, d, J = 7,5 Hz), 8,48 (1H, s), 10,85 (1H, s).
LRMS (APCI) m/z = 599 (MH+)
b) Způsobem popsaným v příkladu 2 se Nl-[(1S)-2,2-dimethyl-l-( [ (IR)-1-(3-pyridyl)ethylamino]karbonyl)propyl]-(N4-propenyloxy)-(2R)-2-{3-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl]propyl} butandiamid (219 mg, 0,37 mmol) po dobu 1,25 hodiny při teplotě zpětného toku nechá reagovat s mravenčanem amonným (230 mg, 3,66 mmol) ve směsi ethanolu a vody v poměru 4 : 1 (8 ml) za přítomnosti palladiového katalyzátoru. Po zpracování se zbytek přečistí sloupcovou chromatografií (silanizovaný silikagel C18 (40 až 63 μιη) ) za použití směsi methanolu a vody v poměru 4 : 1 jako elučního činidla, a triturací s diisopropyletherem. Získá se NI-[(1S)-2,2-dimethy1-1-([(IR)-1-(3-pyridyl)ethylamino]karbonyl)propyl]-(N4-hydroxy)-(2R)-2-{3-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl]propyl}butandiamid (122 mg, 60 %) ve formě bílé pevné látky o teplotě tání 112 až 114°C.
Rf 0,33 (silanizovaný silikagel C18, methanol : voda, 5:1) δΗ (400 MHz, CD3OD) 1,01 (9H, s), 1,46 (3H, d, J = 7 Hz),
1,40 - 1,64 (4H, m), 2,16 (3H, s), 2,20 (1H, m) , 2,36 (1H,
m), 2,50 (2H, m), 2,88 (1H, m), 4,32 (1H, s), 5 ,02 (1H,
q, J = 7 Hz), 6,92 (1H, m), 7,00 (2H, m), 7,18 (1H, m),
7,22 (2H, m), 7,32 (1H, m), 7,40 (2H, m), 7,72 8,28 (1H, m), 8,48 (1H, s). LRMS (termosprej) m/z = 559 (MH+) Nalezeno: C 70,13, H 7,83, N 9,48, ( 1H, m),
C33H42N4O4-9'33H2O-0,33DIPE vYPočteno c 70,20, H 7,80, N 9,63 % • ·
Příklad 25 (N4,3S)-Dihydroxy-Nl-[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-(4-pyridyl) ethyl]amino}karbony1)propyl]-(2R)-2-{3-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl]propyl}butanidiamid
(R)-(+)-l-(4-Pyridyl)ethylamin se připraví způsobem popsaným v J. Amer. Chem. Soc., 1973, 95, 811, překrystalováním soli racemického aminu s kyselinou (-)-vinnou, [a]D 20 = -16,7° (c = 0,20, H20). Volná báze se získá tak, že se tartrátová sůl rozpustí v přebytku vodného hydroxidu sodného nasyceného chloridem sodným a vzniklý roztok se několikrát extrahuje dichlormethanem. Volné báze se použije bezprostředně, bez dalšího přečištění.
a) 7-Azabenzotriazol-l-yloxytris(pyrrolidino)fosfoniumhexafluorfosfát (208 mg, 0,40 mmol) se pod atmosférou dusíku při 0°C přidá k míchanému roztoku (2R)-N-[(1S)-1-(karboxy)-2,2-dimethylpropyl]-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-1,3-dioxolan-4-yl]-5-[(3-methyl-4-fenyl)fenyl]pentanamidu (z preparativního postupu 33) (198 mg, 0,40 mmol), (R)-(+)-l-(4-pyridylJethylaminu (49 mg, 0,40 mmol) a kolidinu (53 μΐ, 0,40 mmol) v bezvodém dichlormethanu (4 ml). Po 1 hodině se vzniklý roztok 3 hodiny míchá při 20C. Reakční směs se nalije do ethylacetátu (100 ml) a vody (100 ml). Aby se dosáhlo oddělení fází, přidá se ke směsi chlorid sodný. Vrstvy se oddělí a organická vrstva se promyje 5% vodným hydrogenuhličitaném sodným (2 x 75 ml), přičemž se přidává další pevný chlorid sodný. Organický roztok se vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu hexan : ethylacetát 5 : 1 až 1 : 5 a výsledný produkt se trituruje s diisopropyletherem. Získá se (2R)-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-(4-pyridyl)ethyl]amino}karbonyl)propyl]-5-[(3-methyl-4-fenyl)fenylJpentanamid (104 mg, 43 %) ve formě bílé pevné látky o teplotě tání 167 až 170°C.
Rf 0,10 (hexan : ethylacetát, 1:3) δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 0,92 (9H, s), 1,34 (3H, d, J = 7 Hz), 1,45 (3H, s a 2H, m, překrývání), 1,56 (3H, s a 1H, m, překrývání), 1,72 - 1,82 (1H, m), 2,14 (3H, s), 2,40 - 2,60 (2H, m), 2,98 (1H, m), 4,40 (1H, d, J = 9 Hz), 4,46 (1H, d,
J = 9 Hz), 4,90 (1H, pentet, J = 7 Hz), 6,94 (1H, m), 7,00 (2H, m), 7,20 (2H, d, J = 5,5 Hz), 7,30 (3H, m), 7,40 (2H, m), 7,86 (1H, d, J = 9 Hz), 8,30 (2H, d, J = 5,5 Hz), 8,58 (1H, d, J = 7 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 600 (MH+)
Nalezeno: C 69,04, H 7,31, N 6,68, C36H45N3°5’1'2Η2θ·0,13EtOAc vypočteno C 69,32, H 7,71,
N 6,64 %
b) Způsobem popsaným v příkladu 19 se (2R)-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-(4-pyridyl)ethyl]amino}karbonyl)propyl]-5-[(3-methyl-4-fenyl)fenylJpentanamid (ze stupně a) (86 mg, 0,14 • ·
- 72 mmol) 18 hodin při teplotě místnosti nechá reagovat s hydroxylaminem. Vzniklý roztok se zkoncentruje za sníženého tlaku a zbytek se přečistí sloupcovou chromatografií (silanizovaný silikagel Clg (40 až 63 μ)) za použití směsi methanolu a vody v poměru 3 : 1 jako elučního činidla. Zbytek se azeotropicky odpaří s ethanolem a poté s ethylacetátem a trituruje s diisopropyletherem. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě bílé pevné látky (45 mg, 56 %) o teplotě tání 100 až 110°C.
0,10 (dichlormethan : methanol : koncentrovaný vodný amoniak, 90 : 10 : 1) δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 0,92 (9H, s), 1,26 (1H, m a 3H, d,
J = 7 Hz, překrývání), 1,36 - 1,60 (3H, m), 2,10 (3H, s),
2.40 (1H, m), 2,48 (1H, m), 2,48 (1H, m), 2,70 (1H, m) ,
3,80 (1H, t, J = 7,5 Hz), 4,34 (1H, d, J = 9,5 Hz), 4,88 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,24 (1H, d, J = 7,5 Hz), 6,90 (1H, m), 6,98 (2H, m), 7,20 (2H, d, J = 5,5 Hz), 7,28 (3H, m) ,
7.40 (2H, m), 7,60 (1H, d, J = 9,5 Hz), 8,32 (2H, d, J =
5,5 Hz), 8,42 (1H, d, J = 7 Hz), 8,80 (1H, s), 10,60 (1H, br s).
Nalezeno: C 67,88, H 7,44, N 9,42, C33H42N4°5-°'5H2° vyPočteno c 67,90, H 7,43, N 9,06 %
Příklad 26 (N4,3S)-Dihydroxy-Nl-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-l-(3-pyridyl ) ethyl ] amino} karbonyl) propyl ]-(2R)-2-{3-[3 -methyl- (4-f enyl) f enyl]propyl}butandiamid
(R)-(+)-l-(3-Pyridyl)ethylamin se připraví způsobem popsaným v J. Amer. Chem. Soc., 1973, 95, 811, překrystalováním soli racemického aminu s kyselinou (-)-vinnou, [a]D 20 = -20,1° (c = 1,67, H20). Volná báze se získá tak, že se tartrátová sůl rozpustí v přebytku vodného hydroxidu sodného nasyceného chloridem sodným a vzniklý roztok se několikrát extrahuje dichlormethanem. Volné báze se použije bezprostředně bez dalšího přečištění.
a) Způsobem popsaným v příkladu 25(a) se (2R)-N[(1S)-1-(karboxy)-2,2-dimethylpropyl]-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-5-[(3-methyl-4-fenyl)fenyl]pentanamid (z preparativního postupu 33) (86 mg, 0,14 mmol), nechá 3 hodiny při teplotě místnosti reagovat s (R)-(+)-l-(3-pyridyl)ethylaminovou volnou bází (49 mg, 0,40 mmol). Po stejném zpracování a trituraci s diisopropylethyletherem se získá (2R)-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-
• · ·
-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-(3-pyridyl)ethyl]amino}karbonyl)propyl]-5-[(3-methyl-4-fenyl)fenyljpentanamid (165 mg, 69 %) ve formě bílé pevné látky o teplotě tání 172 až 176°C.
Rf 0,10 (hexan : ethylacetát, 1:3) δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 0,92 (9H, s), 1,35 (3H, d, J = 7,5
Hz) , 1,45 (2H, m a 3H, s, překrývání) , 1,55 (1H , m a 3H, s
přek rývání), 1,75 (1H, m), 2,12 (3H, s) , 2 , 38 - 2,58 (2H,
m), 2,95 (1H, m), 4,35 (1H, d, J = 10 HZ) , 4,45 (1H, d,
J = 9,5 Hz), 4,98 (1H, pentent, J = 7 ,5 Hz) , 6, 94 (1H, m),
7,00 (2H, m), 7,10 (1H, m), 7,25 (2H, m), 7 ,35 (1H, m),
7,40 (2H, m), 7,68 (1H, d, J = 8 Hz), 7,82 (1H, d, J = 9,5
Hz) , 8,32 (1H, m), 8,45 (1H, s), 8,55 (1H, d , J = 7,5 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 600 (MH+)
b) Způsobem popsaným v příkladu 19 se (2R)-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-(3-pyridyl)ethyl]amino}karbonyl)propyl]-5-[(3-methyl-4-fenyl)fenylJpentanamid (ze stupně a) (142 mg, 0,24 mmol) po dobu 17 hodin při teplotě místnosti nechá reagovat s hydroxylaminem. Výsledný roztok se zkoncentruje za sníženého tlaku a zbytek se přečistí sloupcovou chromatografií (silanizovaný silikagel C18 (40 až 63 μιη)) za použití elučního gradientu methanol : voda 60 :
až 80 : 20. Získaná žlutohnědá pevná látka se znovu přečistí chromatografií s obrácenými fázemi za použití směsi methanolu a vody v poměru 75 : 25 jako elučního činidla. Produkt se azeotropicky odpaří s ethanolem a ethylacetátem a trituruje s diisopropyletherem. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě bílé pevné látky (50 mg, 36 %) o teplotě tání 85 až 95°C.
Rf 0,11 (dichlormethan : methanol : koncentrovaný vodný amoniak, 90 : 10 : 1) δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 0,90 (9H, s), 1,25 (1H, m), 1,30 (3H, d, J = 7 Hz), 1,36 - 1,55 (3H, m), 2,15 (3H, s), 2,40 (2H,
m), 2,70 (1H, m), 3,78 (1H, t, J = 7,5 Hz), 4,30 (1H, d,
J = 9,5 Hz), 4,94 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,24 (1H, d, J =
7,5 Hz), 6,90 (1H, m) , 7,00 (2H, m), 7,12 (1H, m), 7,20 - 7,38 (3H, m), 7,40 (2H, m) , 7,60 (2H, m) , 8,32 (1H, m) , 8,38 (1H, d, J = 7 Hz), 8,50 (1H, s), 8,82 (1H, br s), 10,55 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 514 (pík báze, M+ - HONHCO) Nalezeno: C 67,52, H 7,44, N 9,52, C33H42N405.0,67 H2O vypočteno C 67,57, H 7,44, N 9,55 %
Příklad 27 (N4,3S)-Dihydroxy-Nl-[(1S)-2,2-dimethyl-({[(1S)-2-hydroxy-l f enylethyl]amino}karbonyl)propyl]-(2R)-2-{3-[3-methyl-(4f enyl)feny1]propyl}butandiamid
HONH
Ί€>
»· »
• * · • · * • ··* · • · h ** €*·
a) Způsobem popsaným v příkladu 25(a) se (2R)-N[(1S)-1-(karboxy)-2,2-dimethylpropyl]-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-5-[(3-methyl-4-fenyl)fenylJpentanamid (z preparativního postupu 33) (150 mg, 0,30 mmol), nechá 3 hodiny při teplotě místnosti reagovat s (S)-(+)-2-fenylglycinolem (41 mg, 0,30 mmol). Výsledná směs se nalije do ethylacetátu (75 ml) a promyje 0,5M vodným dihydrogenfosforečnanem sodným (2 x 50 ml) (aby se dosáhlo rozdělení fází, přidá se chlorid sodný). Organický roztok se vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku.
Olejovitý zbytek se trituruje s diethyletherem. Získá se (2R)-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S )-2,2-dimethyl-l-({[(1S)-2-hydroxy-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propy1]-5-[(3-methyl-4-fenyl)fenylJpentanamid (80 mg, 43 %) ve formě bílé pevné látky o teplotě tání 206 až 209°C.
Rf 0,33 (hexan : ethylacetát : kyselina octová, 50 : 50 : 1) δΗ (400 MHz, DMSO-d6) 0,95 (9H, s), 1,42 (2H, m a 3H, s, překrývání), 1,56 (1H, m a 3H, s, překrývání), 1,75 (1H, m), 2,16 (3H, s), 2,48 (2H, m), 2,95 (1H, m), 3,55 (2H, m),
4.40 (1H, d, J = 9,5 Hz), 4,48 (1H, d, J = 9,5 Hz), 4,75 (1H, t, J = 5,5 Hz), 4,84 (1H, q, J = 7 Hz), 6,94 (1H, m) ,
7,00 (2H, m), 7,10 (3H, m), 7,20 (2H, m), 7,30 (3H, m) ,
7.40 (2H, m), 7,80 (1H, d, J = 9,5 Hz), 8,32 (1H, d, J = 7
Hz) .
LRMS (termosprej) m/z = 615 (MH+)
Nalezeno: C 71,46, H 7,53, N 4,59, C37H46N2°6’9'33H2° vypočteno C 71,59, H 7,58, N 4,51 %
b) Způsobem popsaným v příkladu 19 se (2R)-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(lS)-2-hydroxy-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]-5-[(3-methyl-4-fenyl)fenylJpentanamid (ze stupně a) (66 mg, 0,11 mmol) po dobu 17 hodin při teplotě místnosti nechá reagovat s hydroxylaminem. Výsledný roztok se zkon• ·
centruje za sníženého tlaku a zbytek se přečistí sloupcovou chromatograf i í (silanizovaný silikagel C18 (40 až 63 μιη)) za použití elučního gradientu methanol : voda 60 : 40 až 80 : 20. Zbytek se azeotropicky odpaří s ethanolem a poté s ethylacetátem a trituruje s diisopropyletherem. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě žlutohnědé pevné látky (35 mg, 54 %) o teplotě tání 80 až 90°C.
0,06 (dichlormethan : methanol : koncentrovaný vodný amoniak, 90 : 10 : 1) δΗ (400 MHz, DMSO-d6) 0,92 (9H, s), 1,22 (1H, m), 1,30 - 1,55 (3H, m), 2,15 (3H, s), 2,40 (2H, m), 2,68 (1H, m) , 3,56 (2H, m), 3,78 (1H, t, J = 7,5 Hz), 4,38 (1H, d, J =
9,5 Hz), 4,75 (1H, m), 4,82 (1H, q, J = 7,5 Hz), 5,22 (1H, d, J = 7,5 Hz), 6,90 (1H, m), 7,00 (2H, m), 7,15 (3H, m),
7.20 - 7,38 (5H, m), 7,40 (2H, m), 7,58 (1H, d, J = 9,5 Hz),
8.20 (1H, d, J = 7,5 Hz), 8,80 (1H, br s), 10,58 (1H, br s). LRMS (termosprej) m/z = 529 (pík báze, M+ - HONHCO)
Nalezeno: C 67,91, H 7,71, N 6,58, C34H43N3°6·0·67H2O.0,25DIPE vypočteno C 67,99, H 7,69, N 6,70 %
Příklad 28 (N4,3S)-Dihydroxy-Nl[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[ (IR)-2,3-dihydro-lH-inden-l-yl ] amino} karbonyl) propyl ] - (2R) - 2- {3 - [ 3-methyl-(4-fenyl)fenyl]propyl}butandiamid • ·
a) Způsobem popsaným v příkladu 25(a) se (2R)-N[(1S) -1-(karboxy)-2,2-dimethylpropyl]-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-5-[(3-methyl-4-fenyl)fenyl]pentanamid (z preparativního postupu 33) (150 mg, 0,30 mmol), nechá 3 hodiny při teplotě místnosti reagovat s (R)—(—)— 1-aminoindanem (40 mg, 0,30 mmol). Výsledná směs se nalije do ethylacetátu (75 ml) a promyje 0,5M vodným dihydrogenfosforečnanem sodným (2 x 50 ml) a 5% vodným hydrogenuhličitanem sodným (50 ml) (aby se dosáhlo rozdělení fází, přidá se chlorid sodný). Organický roztok se vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Olejovitý zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu hexan : ethylacetát 10 : 1 až 2 : 1 a poté trituruje s diethyletherem. Získá se (2R)-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-2,3-dihydro-lH-inden-l-yl]amino}karbonyl)propyl]-5-[(3-methyl-4-fenyl)fenyljpentanamid ve formě bílé pevné látky (135 mg, 74 %).
• · • · · · · 9 9
9 9 9 • 9 ··· • · · • · · ·
Rf 0,76 (hexan : ethylacetát : kyselina octová, 50 : 50 : 1) δΗ (400 MHz, CDC13) 1,02 (9H, s), 1,55 (3H, s), 1,60 (3H, s), 1,65 - 2,00 (5H, komplex), 2,20 (3H, s), 2,60 (1H, m), 2,66 (3H, m), 2,86 (1H, m), 2,95 (1H, m), 4,20 (1H, d, J =
Hz), 4,54 (1H, d, J = 7 Hz), 5,42 (1H, q, J = 8 Hz),
5,82 (1H, d, J = 7 Hz), 6,62 (1H, d, J = 8 Hz), 7,00 - 7,40 (12H, komplex).
Nalezeno: C 74,06, H 7,61, N 4,47, C38H46N2°5'0'33 Ε^ΟΑο vypočteno C 73,81, H 7,66, N 4,38 %
b) Způsobem popsaným v příkladu 19 se (2R)-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-1,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-2,3-dihydro-lH-inden-l-yl]amino}karbonyl)propyl]-5-[(3-methyl-4-fenyl)fenyl]pentanamid (ze stupně a) (105 mg, 0,17 mmol) po dobu 17 hodin při teplotě místnosti nechá reagovat s hydroxylaminem. Výsledný roztok se zkoncentruje za sníženého tlaku a zbytek se přečistí sloupcovou chromatografií (silanizovaný silikagel C18 (40 až 63 μπι)) za použití elučního gradientu methanol : voda 60 :
až 85 : 15. Zbytek se azeotropicky odpaří s ethanolem a poté s ethylacetátem a trituruje s diisopropyletherem. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě žlutohnědé pevné látky (60 mg, 60 %) o teplotě tání 100 až 120°C.
Rf 0,10 (dichlormethan : methanol : koncentrovaný vodný amoniak, 90 : 10 : 1) δΗ (400 MHz, DMSO-d6) 0,92 (9H, s), 1,26 (1H, m), 1,42
- 1,60 (3H, m), 1,65 (1H, m) , 2,15 (3H, s) , 2,22 (1H, m),
2,40 - 2,62 (2H, m), 2,72 (2H, m), 2,80 (1H, m), 3,80 (1H,
t, J = 8 HZ), 4,30 (1H, d , J = 9,5 Hz) , 5,25 ’ (2H, • m), 6,90
- 7,45 (12H, komplex), 7, 62 (1H, d, J = 9,5 Hz) , 8,20 (1H,
d, J = 8,5 Hz), 8,80 (1H, s), 10,58 (1H, , br s).
LRMS (termosprej) m/z = 526 (pík báze, MH+ - HONHCO) Nalezeno: C 70,94, H 7,50, N 6,81,
C35H43N3O5.0,33 H20 vypočteno C 71,05, H 7,44, N 7,10 % • · • ·
Příklad 29 (N4,3S)-Dihydroxy-Nl-[ (1S)-2,2-dimethyl-l-({[ (lS)-2-methoxy-1-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]-(2R)-2-{3-[3-methyl-(4fenyl)fenyl]propyl}butandiamid
a) Způsobem popsaným v příkladu 25(a) se (2R)-N[ (1S) -1- (karboxy) -2,2-dimethylpropyl ] -2- [ (4S) -2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-5-[(3-methyl-4-fenyl)fenyl ]pentanamid (z preparativního postupu 33) (198 mg, 0,40 mmol), nechá 3 hodiny při teplotě místnosti reagovat s (lS)-2-methoxy-l-fenylethylaminem (61 mg, 0,40 mmol). Výsledná směs se nalije do ethylacetátu (75 ml) a promyje 0,5M vodným dihydrogenfosforečnanem sodným (2 x 50 ml) a 5% vodným hydrogenuhličitanem sodným (50 ml) (aby se dosáhlo rozdělení fází, přidá se chlorid sodný). Organický roztok se vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Olejovitý zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu hexan : ethylacetát 4 : 1 až 1 : 1 a poté trituruje s diethyletherem. Získá se ( 2R)-2-[(4S)-2,2-di- 81 methyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-Ν-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(lS)-2-methoxy-l-fenylethyl]aminojkarbonyl)propyl]-5-[(3-methyl-4-fenyl)fenyl]pentanamid ve formě bílé pevné látky (172 mg, 68 %).
Rf 0,53 (hexan : ethylacetát : kyselina octová, 50 : 50 : 1) δΗ (400 MHz, CDC13) 1,02 (9H, s), 1,50 (3H, s), 1,55 (3H, s), 1,54 (2H, m), 1,90 (2H, m), 2,20 (3H, s), 2,60 (3H, m), 3,30 (3H, s), 3,60 (2H, d, J = 5 Hz), 4,28 (1H, d, J = 9 Hz), 4,50 (1H, d, J = 6 Hz), 5,10 (1H, dt, J = 5 a 7 Hz), 6,36 (1H, d, J = 7 Hz), 6,50 (1H, d, J = 9 Hz), 6,98 (1H, d, J = 8 Hz), 7,01 (1H, s), 7,10 (1H, d, J = 8 Hz), 7,15
- 7,36 (8H, komplex), 7,40 (2H, m).
LRMS (termosprej) m/z = 629 (MH+), 651 (MNa+).
Nalezeno: C 72,41, H 7,76, N 4,50, C38H48N2°6 vypočteno C 72,49, H 7,72, N 4,48 %
b) Způsobem popsaným v příkladu 9 se (2R)-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(1S)-2-methoxy-l-fenylethyl]amino} karbonyl)propyl]-5-[(3-methyl-4-fenyl)fenyl]pentanamid (ze stupně a) (142 mg, 0,22 mmol) po dobu 17 hodin při teplotě místnosti nechá reagovat s hydroxylaminem. Výsledný roztok se zkoncentruje za sníženého tlaku a zbytek se přečistí sloupcovou chromatografií (silanizovaný silikagel C18 (40 až 63 μιη)) za použití směsi methanolu a vody v poměru 3 : 1 jako elučního činidla. Zbytek se azeotropicky odpaří s ethanolem a poté s ethylacetátem a trituruje s diisopropyletherem. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě bílé pevné látky (109 mg, 82 %) o teplotě tání 100 až ll0°C.
Rf 0,07 (dichlormethan : methanol : koncentrovaný vodný amoniak, 90 : 10 : 1) δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 0,90 (9H, s), 1,20 (1H, m), 1,30
- 1,50 (3H, m), 2,10 (3H, s), 2,38 (1H, m), 2,44 (1H, m), 2,65 (1H, m), 3,17 (3H, s), 3,45 (2H, d, J = 7,5 Hz), 3,75 (1H, t, J = 8 Hz), 4,40 (1H, d, J = 9,5 Hz), 5,00 (1H, q, • ·
J = 7,5 Hz), 5,22 (1H, d, J = 8 Hz), 6,90 (1H, d), 6,98 (2H, lil) , 7,15 (3H, m) , 7,25 (4H, m) , 7,35 (1H, m) , 7,40 (2H, m), 7,58 (1H, d, J = 9,5 Hz), 8,35 (1H, d, J = 7,5 Hz),
8,80 (1H, br s), 10,58 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 575 (MH+), 514 (M+ - HONHCO) Nalezeno: C 68,71, H 7,64, N 6,65, C35H45N3°6*θ'5 H2° vypočteno C 68,60, H 7,57, N 6,86 %
Příklad 30 (N4,3S)-Dihydroxy-Nl-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl] amino} karbonyl ) propyl ]—(2R)—2—{3—[3*-methoxy-2-methylbifen-4-yl)propyl}butandiamid
a) Způsobem popsaným v příkladu 25(a) se (2R)-N[(1S)-1-(karboxy)-2,2-dimethylpropyl]-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-5-[(31-methoxy-2-methylbifen-4-yll)propyljpentanamid (z preparativního postupu 34) (150 mg, 0,28 mmol), nechá 2,5 hodiny při teplotě místnosti reagovat s (R)-l-fenylethylaminem (35 μΐ, 0,28 mmol).
Výsledná směs se nalije do ethylacetátu (75 ml) a promyje 0,5M vodným dihydrogenfosforečnanem sodným (2 x 50 ml) a 5% vodným hydrogenuhličitanem sodným (50 ml) (aby se dosáhlo rozdělení fází, přidá se chlorid sodný). Organický roztok se vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku.
Olejovitý zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití směsi hexanu a ethylacetátu v poměru 35 : 65 jako elučního činidla. Získá se (2R)-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-1,3-dioxolan-4-yl ] -N- [ (1S) -2,2-dimethyl-l- ({[ (IR) -1-f enylethyl ] amino} karbonyl) propyl ]-5-[ (3'-methoxy-2-methylbifen-4-yl)propyl]pentanamid ve formě bílé pevné látky (133 mg,
%).
Rf 0,49 (hexan : ethylacetát : kyselina octová, 50 : 50 : 1) δΗ (300 MHz, CDC13) 1,00 (9H, s), 1,40 - 1,60 (11H, komplex), 1,62 (IH, m), 1,90 (IH, m), 2,21 (3H, s), 2,60 (3H, m), 3,80 (3H, s), 4,18 (IH, d, J = 9 Hz), 4,45 (IH, d,
J = 7 Hz), 5,05 (IH, pentet, J = 7,5 Hz), 5,85 (IH, d, J =
7,5 Hz), 6,50 (IH, d, J = 9 Hz), 6,84 (3H, m), 7,00 (2H, m),
7,14 (IH, d, J = 9,5 Hz), 7,18 - 7,40 (6H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 646 (MNH4 +)
b) Způsobem popsaným v příkladu 19 se (2R)-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]-5-[(3'-methoxy-2-methylbifen-4-yl)propyl]pentanamid (ze stupně a) (133 mg, 0,21 mmol) po dobu 18 hodin při teplotě místnosti nechá reagovat s hydroxylaminem (59 mg, 0,85 mmol). Výsledný roztok se zkoncentruje za sníženého tlaku a zbytek se přečistí sloupcovou chromatografií (silanizovaný silikagel C18 (40 až 63 μιη)) za použití elučního gradientu methanol : voda 3 : 1 až 4 : 1 a poté triturací s diisopropyletherem. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě bílé pevné látky (57 mg, 45 %) o teplotě tání 98 až 100°C.
Rf 0,20 (dichlormethan : methanol, 95 : 5)
δΗ (400 MHz, DMSO-d6) 0,92 (9H, s), 1,18 - 1,30 (1H, m), 1,25 (3H, d, J = 7,5 Hz), 1,38 - 1,58 ( 3H, m), 2,15 (3H, s), 2,40 (1H, Itl) , 2,46 (1H, m) , 2,70 (1H, m) , 3,76 (4H, m) ,
4,35 (1H, d, J = 9,5 Hz), 4,90 (1H, pentet, J = 7,5 Hz) ,
5,22 (1H, d, J = 8 Hz), 6, ,75 - 7,40 (12H, komplex), 7,58
(1H, d, J = 9,5 Hz), 8,26 (1H, d, J = 7,5 Hz), 8,80 (1H, s),
10,58 (1H, , s) .
LRMS (termosprej) m/z = 621 (MNH4 +)
Nalezeno: C 69,17, H 7,55, N 6,87,
C35H45N3O6·0,2 H2O vypočteno C 69,22, H 7,53, N 6,92 %
Příklad 31 (N4,3S)-Dihydroxy-Nl-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(1S)-2-methoxy-1-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl] - ( 2R) -2- {3- [ (3 '-methoxy-2-methylbifen-4-yl)propyl]}butandiamid
HONH
a) Způsobem popsaným v příkladu 25(a) se (2R)-N[(1S)-1-(karboxy)-2,2-dimethylpropyl]-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-5-[(3'-methoxy-2-methylbifen-4-yll)propyl]pentanamid (z preparativního postupu 34) (220 mg, 0,42 mmol) nechá 2,5 hodiny při teplotě místnosti reagovat s (lS)-2-methoxy-l-fenylethylaminem (63 mg, 0,42 mmol). Výsledná směs se nalije do ethylacetátu (75 ml) a promyje 0,5M vodným dihydrogenfosforečnanem sodným (2 x 50 ml) a 5% vodným hydrogenuhličitanem sodným (50 ml) (aby se dosáhlo rozdělení fází, přidá se chlorid sodný). Organický roztok se vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu hexan : ethylacetát 30 : 70 až 60 : 40. Získaná bílá pevná látka se znovu přečistí mžikovou chromatograf i í (Sorbsil C60 (20 až 40 μπι)) za použití směsi hexanu a ethylacetátu v poměru 35 : 65 jako elučního činidla. Získá se (2R)-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(1S)-2-methoxy-l-fenylethyl]amino}karbony 1)propyl]-5-[ (3 '-methoxy-2-methylbifen-4-yl)propyl]pentanamid ve formě bílé pevné látky (191 mg,
%) .
Rf 0,37 (hexan : ethylacetát, 1:1) δΗ (400 MHz, CDC13) 1,00 (9H, s), 1,50 (3H, s), 1,55 (3H, s), 1,65 (2H, m), 1,86 (2H, m), 2,20 (3H, s), 2,60 (3H, m) , 3,35 (3H, s), 3,60 (2H, d, J = 5 Hz), 3,80 (3H, s), 4,25 (1H, d, J = 9 Hz), 4,45 (1H, d, J = 6 Hz), 5,10 (1H, dt,
J = 5 a 7,5 Hz), 6,35 (1H, d, J = 7,5 Hz), 6,50 (1H, d,
J = 9 Hz), 6,80 - 6,92 (3H, m), 6,96 - 7,04 (2H, m), 7,15 - 7,35 (6H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 659 (MH+)
b) Způsobem popsaným v příkladu 19 se (2R)-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl—1—({[(lS)-2-methoxy-l-fenylethylJamino}karbonyl) propyl]-5-[(3'-methoxy-2-methylbifen-4-yl)propyl]pentanamid (ze stupně ·
9
a) (191 mg, 0,29 mmol) po dobu 17 hodin při teplotě místnosti nechá reagovat s hydroxylaminem. Výsledný roztok se zkoncentruje za sníženého tlaku a zbytek se přečistí sloupcovou chromatografií (silanizovaný silikagel C18 (40 až 63 μιη)) za použití elučního gradientu methanol : voda 60 : 40 až 70 : 30 a poté triturací s diisopropyletherem. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě bílé pevné látky (81 mg, 44 %) o teplotě tání 82 až 89°C.
Rf 0,40 (dichlormethan : methanol, 90 : 10) δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 0,90 (9H, s), 1,20 (1H, m), 1,40 (3H, m) , 2,15 (3H, s), 2,38 (1H, m), 2,45 (1H, m), 2,70 (1H, m), 3,20 (3H, s), 3,44 (2H, d, J = 7 Hz), 3,76 (4H, m), 4,38 (1H, d, J = 9,5 Hz), 5,00 (1H, q, J = 7 Hz), 5,21 (1H, d,
J = 7,5 Hz), 6,78 (1H, s), 6,80 (1H, d, J = 8 Hz), 6,88 (2H, m), 7,00 (2H, m), 7,14 (3H, m), 7,24 (2H, m), 7,32 (1H, t), 7,58 (1H, d, J = 9,5 Hz), 8,32 (1H, d, J = 7 Hz),
8,80 (1H, br s), 10,58 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 634 (MH+)
Nalezeno: C 67,47, H 7,52, N 6,55, C36H47N3°7·0,4 H2O vypočteno C 67,46, H 7,52, N 6,56 %
Příklad 32 (2R)-Nl-[(lS)-2,2-Dimethyl-l-({[(1S)-2-methoxy-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propy1]-(N4-hydroxy)-2-{3-[3'-methoxy-2-methy1bifen-4-yl]propyl}butandiamid
a) Způsobem popsaným v příkladu 2 se (3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(1S)-2-methoxy-l-fenylethyljaminojkarbonyl)propyl]amino jkarbonyl)-6-(3'-methoxy-2-methylbifen-4-yl)hexanová kyselina (z příkladu 15) (603 mg, 1,0 mmol) nechá reagovat s hydrochloridem O-allylhydroxylaminu (134 mg, 1,2 mmol). Surový produkt se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu hexan : ethylacetát 1 : 1 až 1 :
a poté opakovaně mžikovou chromatografií za použití směsi dichlormethanu, methanolu a koncentrovaného vodného amoniaku v poměru 95 : 5 : 0,5 jako elučního činidla. Získá se (2R)-Nl-[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[(1S)-2-methoxy-l-fenylethyl]amino}karbony1)propyl]-2-{3-[3'-methoxy-2-methylbifen-4-yl]propyl}-(N4-3-propenyloxy)butandiamid (397 mg, 60 %) ve formě bezbarvé pěny. Teplota tání 76 až 79°C.
Rf 0,35 (hexan : ethylacetát, 1:2) δΗ (300 MHz, DMSO-dg) 0,92 (9H, s), 1,42 (4H, m), 2,01 (1H, dd, J =7 a 15 Hz), 2,15 (3H, s a 1H, m, překrývání), 2,44 (1H, m), 2,55 (1H, m), 2,84 (1H, m), 3,20 (3H, s), 3,47 (2H, d, J = 8 Hz), 3,77 (3H, s), 4,20 (2H, m), 4,35 (1H, d, J =
Hz), 5,02 (1H, q, J = 7 Hz), 5,19 (1H, d, J = 10 Hz), 5,40 (1H, d, J = 17 Hz), 5,87 (1H, m), 6,78 (1H, s), 6,84 (1H, d, J = 8 Hz), 6,90 (2H, m), 7,00 (2H, m), 7,23 (6H, m), 7,70 (1H, br d, J = 10 Hz), 8,32 (1H, br d, J = 7 Hz), 10,85 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 658 (pík báze MH+), 680 (MNa+) vmax (KBr disk) 3310, 2970, 2930, 1640, 1537, 1481, 700 cm-1.
Nalezeno: C 70,89, H 7,85, N 6,27, C39H51N3°6 νΥΡθ6ύβηο C 71,21, H 7,81, N 6,39 %
b) Způsobem popsaným v příkladu 2 se (2R)—Nl[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(1S)-2-methoxy-l-fenylethyl]aminojkarbonyl)propyl]-2-{3-[3'-methoxy-2-methylbifen-4-yl]propylj-(N4-3-propenyloxy)butandiamid (380 mg, 0,58 mmol) hodinu při teplotě zpětného toku nechá reagovat s mravenčanem amonným (366 mg, 5,80 mmol) ve směsi ethanolu a vody »» ·· ··
v poměru 4 : 1 (10 ml) za přítomnosti palladiového katalyzátoru. Po zpracování se zbytek přečistí mžikovou chromatograf ií s obrácenými fázemi (silanizovaný silikagel C18 (40 až 63 μπι) ) za použití směsi methanolu a vody v poměru 4 : 1 jako elučního činidla. Získá se (2R)-Nl-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(lS)-2-methoxy-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]-(N4-hydroxy)-2-{3-[3'-methoxy-2-methylbifen-4-yl]propyl}butandiamid (260 mg, 73 %) ve formě bezbarvé pevné látky o teplotě tání 166 až 168°C.
Rf 0,29 (tle s reversními fázemi, methanol : voda, 4:1) δΗ (300 MHz, methanol-d4) 1,03 (9H, s), 1,51 (4H, m), 2,16 (3H, s a 1H, m, překrývání), 2,35 (1H, dd, J = 8 a 13 Hz), 2,48 (2H, m), 2,87 (1H, m), 3,33 (3H, s), 3,58 (2H, d, J =
Hz), 4,40 (1H, s), 5,10 (1H, t, J = 7 Hz), 6,92 (1H, s),
6,80 (1H, d, J = 8 Hz), 6,89 (2H, br d, J = 8 Hz), 6,97 (1H, s), 6,98 (1H, d, J = 8 Hz), 7,15 (3H, m), 7,27 (3H, m). LRMS (termosprej) m/z = 618 (MH+)
FTIR vmax (KBr disk) 3290, 3240, 2960, 2930, 1644, 1531,
1481, 1226, 703 cm“1.
Nalezeno: C 69,06, H 7,80, N 6,65, C36H47N3°6·0'5 H2° vypočteno C 68,99, H 7,72, N 6,70 %
Preparativní postup 1
Hydrochlorid (2S)-amino-3,3-dimethyl-N-[(IR)-l-fenylethyl]butanamidu
H C O CH,
ΛμΧ ·. xAVn
L. “ : -— CH.
CH* °H,cTCH3 CH, CH· Vřen,
CH,
a) Hydrochlorid N-(dime thy laminopropyl)-Ν'-ethyl karbodiimidu (35,47 g, 185 mmol) se pod atmosférou dusíku » « · « • ♦ · * • · « · • 4 · ·· «· při 4°C přidá k míchané směsi N-[(lS)-2,2-dimethyl-l-karboxy)propylJkarbamátu (34,7 g, 150 mmol) (Fluka Chemicals; J. Pospisek, K. Blaha, Coll. Czech. Chem. Commun., 1997, 42, 1069 až 1076) a hydrátu 1-hydroxy-l,2,3-benzotriazolu (22,3 g, 165 mmol) v bezvodém dichlormethanu (350 ml). Po 1 hodině se ke vzniklé směsi přidá (R)-(l-fenyl)ethylamin (19,14 g,
158 mmol) a poté N-methylmorfolin (16,7 g, 165 mmol). Po dalších 30 minutách se reakční směs nechá zahřát na teplotu místnosti a po 17 hodinách při teplotě místnosti zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se rozdělí mezi ethylacetát (400 ml) a vodu (400 ml). Organická vrstva se promyje postupně 5% vodnou kyselinou citrónovou (2 x 400 ml) a nasyceným vodným hydrogenuhličitaném sodným (500 ml), vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se trituruje s diisopropyletherem, odfiltruje a vysuší.
Získá se (2S)-terč.(butoxykarbonyl)amino-3,3-dimethyl-N-[(IR)-1-fenylethyl]butanamid (47,5 g, 94 %) ve formě bezbarvé pevné látky o teplotě tání 166 až 169°C.
Rf 0,7 (hexan : ether : kyselina octová, 30 : 70 : 1)
Sh (400 MHz, CDC13) 0,97 (9H, s), 1,39 (9H, s), 1,45 (3H, d,
J = 7 Hz), 3,73 (1H, br d), 5,04 (1H, pentet, J = 7 Hz),
5,15 (1H, br s), 5,84 (1H, br d), 7,26 (5H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 335 (MH+)
FTIR Vmax (KBr disk) 3340, 3280, 2980, 1713, 1696, 1642,
1179, 700 cm“1
Nalezeno: C 68,30, H 9,08, N 8,39, C19H30N2°3 vypočteno C 68,23, H 9,04, N 8,38 %
b) (2S)-terč.(Butoxykarbonyl)amino-3,3-dimethyl-N-[(IR)-1-fenylethyl]butanamid (46,4 g, 139 mmol) se rozpustí ve směsi bezvodého dichlormethanu (600 ml) a dioxanu (150 ml). Vzniklý roztok se ochladí na 4°C a za míchání se jím vede chlorovodík, dokud nevznikne nasycený roztok. Po čtyřhodinovém míchání při 4°C se roztok zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se trituruje s etherem a odfiltruje se » · ♦ · · κ ♦ · · · • · *·· · ·
I · · · *· * sloučenina uvedená v nadpisu (30,8 g, 100 %).
Rf 0,46 (hexan : isopropylalkohol : koncentrovaný amoniak, 80 : 20 : 1)
SH (400 MHz, dg-DMSO) 1,03 (9H, s), 1,37 (3H, d, J = 7 Hz) , 3,50 (1H, d, J = 8 Hz), 4,94 (1H, pentet, J = 7 Hz), 7,24 (1H, t, J = 8 Hz), 7,33 (2H, t, J = 8 Hz), 7,39 (2H, d,
J = 8 Hz), 8,10 (3H, br s), 8,88 (1H, br d).
LRMS (termosprej) m/z = 235 (MH+)
FTIR vmax (KBr disk) 2960, 1674, 1557, 1505, 700 cm-1 Nalezeno: C 61,98, H 8,71, N 10,09, C14H22N2O,HC1,H2° vypočteno C 62,09, H 8,56, N 10,34 %
Preparativní postup 2 terč.Butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-l-fenylethyl ]amino}karbony1)propyl]amino}karbony1)hex-5-enoát
N-(Dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimid (4,21 g, 22,0 mmol) se pod atmosférou dusíku při 4°C přidá k míchané směsi (2R)-2-[2-(terc.butoxy)-2-oxoethyl]pent-4-enové kyseliny (A. L. Castelhano, S. L. Bender, J. G. Deal, S. Horner, T. J. Liak, Z. Yuan, WO96/16027, 1996) (3,80 g, 17,8 mmol) a l-hydroxy-7-azabenzotriazolu (2,49 g, 18,3 mmol) v bezvodém dimethylformamidu (60 ml). Po 1 hodině se k reakční směsi přidá hydrochlorid (2S)-amino-3,3-dimethyl-N-[(IR)-l-fenylethyl]butanamidu (z preparativního postupu 1) (5,10 g, 18,8 mmol) a poté diisopropylethylamin (2,42 g, 19,2 mmol). Po dalších 30 minutách se reakční směs nechá zahřát na teplotu místnosti. Po 17 hodinách při tep91
·· · · · lotě místnosti se reakční směs zkoncentruje za sníženého tlaku a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát (400 ml) a vodu (400 ml). Vodná vrstva se nasytí hydrogenuhličitaném sodným a extrahuje ethylacetátem (2 x 100 ml). Spojené organické roztoky se zkoncentrují za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí v etheru (500 ml) a etherový roztok se promyje vodou (3 x 200 ml), vysuší síranem horečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se trituruje s pentanem, suspenze se přefiltruje a produkt se vysuší. Získá se terč.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbony1)hex-5-enoát (6,70 g, 88 %) ve formě bezbarvé pevné látky o teplotě tání 123 až 126°C.
Rf 0,16 (hexan : isopropylalkohol, 98 : 2) δΗ (400 MHz, CDC13) 0,97 (9H, s), 1,39 (9H, s), 1,46 (3H, d,
J = 7 Hz), 2,06 (1H, dt, 13 a 6,5 Hz), ě,09 (1H, m), 2,31 (1H, dd, J = 15 a 3 Hz), 2,71 (1H, m), 2,77 (1H, m), 4,14 (1H, d, J = 10 Hz), 4,90 (1H, d, J = 10 Hz), 4,94 (1H, d,
J = 15 Hz), 5,05 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,42 (1H, m), 5,95 (1H, br d), 6,36 (1H, br d), 7,26 (5H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 431 (MH+)
FTIR vmax (KBr disk) 2635, 2098, 1733, 1640, 1540, 1363,
1153, 696 cm1
Nalezeno: C 69,30, H 8,96, N 6,54, C25H38N2°4 vypočteno C 69,74, H 8,90, N 6,51 %
Preparativní postup 3 terč.Butyl-(3R)-3-({[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-[3-methyl-(4-fenyl)f enyl]hexanoát
a) Směs octanu palladnatého (52 mg, 0,23 mmol) a tri-(2-methylfenyl)fosfinu (141 mg, 0,46 mmol) v bezvodém acetonitrilu (10 ml) se sonikuje 1 minutu při teplotě místnosti, dokud nevznikne krémově zbarvená suspenze. Tato suspenze se pod atmosférou dusíku Pasteurovou pipetou přidá k míchanému roztoku terc.butyl-(3R)-3-({[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-l-fenylethylJamino}karbonyl)propylJamino}karbonyl )hex-5-enoátu (z preparativního postupu 2) (861 mg, 2,0 mmol), 3-methyl-4-fenylbrombenzenu (M. Bombert, J. C. Pernert, J. Amer. Chem. Soc., 1926, 48, 1372 až 1384 a dále viz preparativní postup 19B) (1,32 g, 5,34 mmol) a triethylaminu (1,28 ml, 9,29 mmol) v bezvodém acetonitrilu (15 ml). Výsledná směs se promyje dusíkem, poté 24 hodin zahřívá ke zpětnému toku a nalije do ethylacetátu (200 ml). Ethylacetátový roztok se promyje nasyceným vodným chloridem sodným (2 x 100 ml), vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu dichlormethan : ethylacetát.
• ·
Získá se převážně terč.butyl-(3R,5E)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino }karbonyl)-6-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl]hex-5-enoát ve formě bezbarvé pěny (1,91 g, 69 %). Podle NMR jsou v produktu také přítomny dva alkenové isomery, (5Z) a (4E). Této směsi se použije v následujícím stupni (viz stupeň b níže).
Rf 0,52 (dichlormethan : ethylacetát, 9:1)
Sjj (400 MHz, CDClg) (pro (5E) isomer) . 1,00 (9H, s), 1,47 (3H, d, J = 7 Hz), 2,26 (1H, m), 2,40 (2H, m), 2,60 (1H, dd, J = 9 a 15 Hz), 2,71 (1H, m), 4,20 (1H, d, J = 9 Hz), 5,02 (1H, pentet, J = 7 Hz), 6,04 (2H, m), 6,35 (1H, d, J = 14 Hz), 6,51 (1H, br d), 7,19 (11H, komplex), 7,36 (2H, t,
J = 8 Hz).
b) Roztok terč.butyl-(3R,5E)-3-({[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl]hex-5-enoátu (1,91 g,
3,2 mmol) v ethanolu (80 ml) se 16 hodin hydrogenuje za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (120 mg) za tlaku 0,3 MPa při 20°C. Reakční směs se přefiltruje přes vrstvu pomocné filtrační látky Arbocel a filtrát se zkoncentruje. Získá se terč.butyl-(3R)-3-({[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-[3-methyl-(4-fenyl)fenyljhexanoát (2,07 g, 108 %) ve formě bezbarvé pěny, které se použije v následujícím stupni bez dalšího přečištění (viz příklad 1).
Rf 0,52 (dichlormethan : ethylacetát, 9:1)
SH (400 MHz, CDC13) 0,99 (9H, s), 1,38 (9H, s), 1,47 (3H, d,
J = 7 Hz), 1,52 (4H, komplex), 2,20 (3H, s), 2,29 (1H, m),
2,53 (4H, m), 4,16 (1H, d, J = 9 Hz), 5,05 (1H, pentet,
J = 7 Hz), 5,97 (1H, br d), 6,42 (1H, br d), 6,93 (1H, d,
J = 8 Hz), 6,98 (1H, s), 7,07 (1H, d, J = 8 Hz), 7,23 (8H, komplex), 7,36 (2H, t, J = 7 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 599 (MH+)
•
Nalezeno: C 75,86, H 8,44, N 4,60, C38H50N2°4 vypočteno C 76,22, H 8,42, N 4,68 %
Příklad
33/Preparativní postup 4 (3R)-6-[3-Chlor-4-fenyl)fenyl]-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]amino}karbony1)propyl]amino)karbony1)hexanová kyselina
a) Směs octanu palladnatého (24 mg, 0,1 mmol) a tri-(2-methylfenyl)fosfinu (61 mg, 0,2 mmol) v bezvodém acetonitrilu (l ml) se sonikuje 1 minutu při teplotě místnosti, dokud nevznikne krémově zbarvená suspenze. Tato suspenze se pod atmosférou dusíku Pasteurovou pipetou přidá k míchanému roztoku terc.butyl-(3R)-3-({[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)hex-5-enoátu (z preparativniho postupu 2) (861 mg, 2,0 mmol), (3-chlor-4-fenyl)fenyltrifluormethansulfonátu (z preparativniho postupu 9) (740 mg, 2,2 mmol) a triethyl• · ♦ · · * * · »· · · · · · · • ··· · · · · · · · aminu (420 μΐ, 3,0 mmol) v bezvodém acetonitrilu (3 ml). Výsledná směs se promyje dusíkem, poté 22 hodin zahřívá ke zpětnému toku, načež se k ní přidá další množství (3-chlor-4-fenyl)fenyltrifluormethansulfonátu (200 mg, 0,59 mmol), triethylaminu (420 μΐ, 3,0 mmol), octanu palladnatého (35 mg, 0,145 mmol) a tri-(2-methylfenyl)fosfinu (89 mg, 0,29 mmol) a v zahřívání se pokračuje dalších 8 hodin. Poté se reakční směs nalije do ethylacetátu (100 ml). Ethylacetátový roztok se promyje nasyceným vodným chloridem sodným (2 x 50 ml), vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití směsi toluenu a ethylacetátu v poměru 9 : 1 jako elučního činidla. Získá se převážně terc.butyl-(3R,5E)-6-[3-chlor-(4-fenyl)fenyl]-3-({[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[(1R)-1-fenylethyl]amino)karbonyl)propyl]amino)karbonyl)hex-5-enoát ve formě bezbarvé pěny (936 mg, 76 %). Podle 1H NMR jsou v produktu také přítomny dva alkenové isomery, (5Z) a (4E). Této směsi se použije v následujícím stupni (viz stupeň b níže).
Rf 0,14 (toluen : ethylacetát, 10 : 1) δΗ (400 MHz, CDC13) (pro (5E) isomer). 0,96 (9H, s), 1,37 (9H, S), 1,45 (3H, d, J = 6,5 Hz), 2,29 (1H, m), 2,36 (1H, dd, J % 3 a 15 Hz), 2,45 (1H, m), 2,61 (1H, dd, J = 9 a 15
Hz), 2,73 (1H, m), 4,16 (1H, d, J = 9,5 Hz), 5,02 (1H, pentet, J = 6,5 Hz), 5,85 (1H, br d), 6,09 (1H, dt, J = 6,5 a 15 Hz), 6,32 (1H, d, J = 15 Hz), 6,Č9 (1H, br d), 7,18 (8H, komplex), 7,37 (5H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 617 (MH+)
b) Směs terc.butyl-(3R,5E)-6-[3-chlor-(4-fenyl)fenyl]-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]amino} karbonyl ) propyl ] amino) karbony 1 )hex-5-enoátu (936 mg, 1,52 mmol) a p-toluensulfonylhydrazidu (1,41 g, 7,60 mol) v toluenu (15 ml) se 4 hodiny pod atmosférou dusíku zahřívá ke zpětnému toku, poté ochladí a zředí etherem (150 ml).
• ·
Etherová směs se promyje vodou (50 ml), 0,5M kyselinou chlorovodíkovou (50 ml) a nasyceným vodným chloridem sodným (50 ml), vysuší síranem horečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu hexan : ethylacetát. Získá se terc.butyl-(3R)-6-[3-chlor-4-fenyl)fenyl]-3-({[(lS)-2,2-dimethyl- l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino)karbonyl)propyl]amino}karbonylJhexanoát (701 mg, 74 %) ve formě bezbarvé pěny.
Rf 0,36 (hexan : ethylacetát, 5:1) δΗ (400 MHz, CDC13) 1,03 (9H, s), 1,43 (OH, s), 1,52 (3H, d, J = 7 Hz), 1,43 - 1,70 (4H, komplex), 2,32 (1H, ), 2,60 (4H, m), 4,18 (1H, d, J = 9 Hz), 5,09 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,95 (1H, br d), 6,47 (1H, br d), 7,03 (1H, d, J = 8 Hz), 7,23 (7H, komplex), 7,42 (5H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 620 (MH+)
c) terč.Butyl-(3R)-6-[3-chlor-4-fenyl)fenyl]-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)hexanoát (665 mg, 1,07 mmol) se rozpustí v bezvodém dioxanu (30 ml). Výsledný roztok se pod atmosférou dusíku ochladí v lázni z ledu a vody a po dobu 15 minut se jím až do nasycení vede plynný chlorovodík. Reakční roztok se 3 hodiny míchá a poté zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se třikrát rozpustí v toluenu a toluenový roztok se zkoncentruje za sníženého tlaku. Získá se bezbarvá pryskyřice, která po přidání hexanu a ethylacetátu vykrystaluje. Bílá pevná látka se překrystaluje ze směsi ethylacetátu a diisopropyletheru. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (325 mg, 54 %) o teplotě tání 154 až 155,5°C (po překrystalování ze směsi ethylacetátu a diisopropyletheru ).
δΗ (400 MHz, CD3OD) (zřejmá pouze částečná záměna signálů NH amidu) 1,03 (9H, s), 1,43 (3H, d, J = 6,5 Hz), 1,48 (2H, m), 1,52 (2H, m), 2,39 (1H, dd, J = 3 a 14 Hz), 2,53 (2H, m) , 2,61 (1H, dd, J = 9 a 14 Hz), 2,86 (1H, m), 4,36 (1H, s),
5,00 (1H, pentet, J = 6,5 Hz), 7,03 (1H, d, J = 9 Hz), 7,17 (7H, komplex), 7,36 (5H, komplex), 7,76 (0,5H, br d), 8,47 (0,8H, br d).
LRMS (termosprej) m/z = 562 (MH+)
Nalezeno: C 70,29, H 6,98, N 4,91, C33H39C1N2°4 vypočteno C 70,38, H 6,98, N 4,98 %
Příklad 34/ Preparativní postup 5 (3R)-3-({[(1S)-2,2-Dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyllamino}karbony1)-6-(3-fluor-4-fenoxyfenyl)hexanová kyselina
a) Směs octanu palladnatého (20 mg, 0,08 mmol) a tri-(2-methylfenyl)fosfinu (50 mg, 0,16 mmol) se pod atmosférou dusíku přidá k k míchanému roztoku terč.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-l-fenylethyl]amino}karbo98 • · 9 9 ··
9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9 nyl)propyl]amino}karbonyl)hex-5-enoátu (z preparativního postupu 2) (700 mg, 1,63 mmol), 3-fluor-4-fenoxybrombenzenu (z preparativního postupu 10) (479 mg, 1,79 mmol) a triethylaminu (340 μΐ, 2,43 mmol) v bezvodém acetonitrilu (3 ml). Výsledná směs se promyje dusíkem, poté 14 hodin zahřívá ke zpětnému toku, načež se k ní přidá další množství octanu palladnatého (20 mg, 0,08 mmol) a tri-(2-methylfenyl)fosfinu (50 mg, 0,16 mmol) a v zahřívání se pokračuje dalších 9 hodin. Poté se reakční směs ochladí a nalije do ethylacetátu (100 ml). Ethylacetátový roztok se promyje nasyceným vodným chloridem sodným (2 x 50 ml), vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití směsi toluenu a ethylacetátu v poměru 9 : 1 jako elučního činidla. Získá se převážně terc.butyl-(3R,5E)- -3-({[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-(3-fluor-4-fenoxyfenyl)hex-5-enoát ve formě bezbarvého oleje (949 mg). Podle 3H NMR jsou v produktu také přítomny dva alkenové isomery, (5Z) a (4E). Této směsi alkenů se použije v následujícím stupni (viz stupeň b níže).
Rf 0,24 (hexan : ethylacetát, 3:1) δΗ (400 MHz, CDClg) (pro (5E) isomer). 10,2 (9H, s), 1,40 (9H, s), 1,50 (3H, d, J = 6 Hz), 2,26 (1H, m), 2,40 (2H, m) , 2,64 (1H, dd, J = 9 a 17 Hz), 2,74 (1H, m), 4,23 (1H, d,
J = 10 Hz), 5,06 (1H, pentet, J = 6 Hz), 5,98 (1H, m), 6,02 (1H, br d), 6,30 (1H, d, J = 15 Hz), 6,50 (1H, br d), 6,94 (3H, m), 7,07 (2H, komplex), 7,27 (8H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 617 (MH+)
b) Roztok terc.butyl-(3R,5E)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-( {[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-(3-fluor-4-fenoxyfenyl)hex-5-enoátu (949 mg, 1,53 mmol), mravenčanu amonného (474 mg, 7,51 mmol) a 10% palladia na uhlíku (100 mg) v methanolu (10 ml) se 16 hodin míchá při 20C a poté přefiltruje přes pomocnou filtrační látku
·« ·· • · · · ♦ ·
Arbocel. Filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu a ethylacetátový roztok se promyje nasyceným vodným chloridem sodným, vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Získá se terč.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl ]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-(3-fluor-4-fenoxyfenyl)hexanoát (876 mg, 92 %) ve formě bezbarvé pěny, které se použije v následujícím stupni bez dalšího přečištění.
Rf 0,29 (hexan : ethylacetát, 3:1) δΗ (400 MHz, CDC13) 0,98 (9H, s), 1,26 (1H, m), 1,37 (9H, s), 1,44 (3H, m), 1,46 (3H, d, J = 6,5 Hz), 2,23 (1H, m) , 2,40 (2H, m), 2,52 (2H, m), 4,32 (1H, d, J = 10 Hz), 5,08 (1H, pentet, J = 6,5 Hz), 6,48 (1H, br d), 6,58 (1H, br d), 6,74 1H, d, J = 8 Hz), 6,87 (3H, m), 7,01 (1H, t, J = 7 Hz), 7,19 (8H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 619 (MH+)
c) Trifluoroctová kyselina (2 ml) se během 5 minut pod atmosférou dusíku při 20“C přikape k míchanému roztoku terč.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl ]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-(3-fluor-4-fenoxyfenylJhexanoátu (876 mg, 1,41 mmol) v bezvodém dichlormethanu (6 ml). Výsledný roztok se 16 hodin míchá a poté zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se dvakrát rozpustí v toluenu a zkoncentruje a poté přečistí mžikovou chromatografii za použití směsi hexanu, ethylacetátu a kyseliny octové v poměru 72 : 25 : 1 jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě žluté pryskyřice (784 mg, 98 %).
Rf 0,21 (hexan : ethylacetát : kyselina octová, 75 : 25 : 1) δΗ (400 MHz, CDC13) 0,96 (9H, s), 1,40 (3H, m), 1,47 (3H, d, J = 7 Hz), 1,58 (1H, m), 2,42 (3H, m), 2,68 (2H, m), 4,32 (1H, d, J = 10 Hz), 5,04 (1H, pentet, J = 7 Hz), 6,35 (1 H, br d), 6,73 (1H, d, J = 6 Hz), 6,82 (2H, m), 6,89 (2H, d,
100
J = 8 Hz), 7,01 (1H, t, J = 6 Hz), 7,11 (1H, d, J = 8 Hz), 7,20 (7H, komplex).
LRMS (APCI) m/z = 563 (MH+)
Příklad 35/
Preparativní postup 6 (3R)-3-({[(1S)-2,2-Dimethyl-l-({[(IR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-(3-methyl-4-fenoxyfenyl)hexanová kyselina
a) Směs octanu palladnatého (20 mg, 0,08 mmol) a tri-(2-methylfenyl)fosfinu (50 mg, 0,16 mmol) se pod atmosférou dusíku přidá k k míchanému roztoku terc.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl) propyllamino}karbonyl)hex-5-enoátu (z preparativního postupu 2) (578 mg, 1,23 mmol), l-jod-3-methyl-4-fenoxybenzenu (z preparativního postupu ll) (384 mg, 1,35 mmol) a triethylaminu (300 μΐ, 2,14 mmol) v bezvodém acetonitri101
4« 99 44 ♦· » « ···« ··· •4 4 · · 4 · · • 4 · · 0 999 9 9 · • · 4 · · · ♦
44 99 99 9 lu (3 ml). Výsledná směs se promyje dusíkem, poté 24 hodin zahřívá ke zpětnému toku, ochladí a nalije do ethylacetátu (100 ml). Ethylacetátový roztok se promyje nasyceným vodným chloridem sodným (2 x 50 ml), vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití směsi hexanu a ethylacetátu v poměru 9:1a poté 4 : 1 jako elučního činidla. Získá se převážně terč.butyl-(3R,5E)-3-({[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)— -1-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-(3-methyl-4-fenoxyfenyl)hex-5-enoát ve formě oranžové pěny (615 mg). Podle NMR jsou v produktu spolu s alkenovou výchozí látkou (10 %) také přítomny dva alkenové isomery, (5Z) a (4E). Této směsi alkenů se použije v následujícím stupni (viz stupeň b níže).
Rf 0,5 (hexan : ethylacetát, 3:1) δΗ (300 MHz, CDC13) (pro (5E) isomer) 1,02 (9H, s), 1,26 (9H, s), 1,50 (3H, d, J = 7 Hz), 2,19 (3H, s), 2,29 (1H, m), 2,44 (2H, m), 2,63 (1H, m), 2,74 (1H, m), 4,19 (1H, d, J =
HZ), 5,04 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,91 (1H, br d), 6,00 (1H, dt, J = 16 a 8 Hz), 6,35 (1H, d, J = 16 Hz), 6,51 (1H, br d), 6,80 (1H, d, J = 9 Hz), 6,87 (2H, d, J = 9 Hz), 7,06 (2H, m), 7,26 (8H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 613 (MH+)
b) Roztok terč.butyl-(3R,5E)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-(3-methyl-4-fenoxyfenyl)hex-5-enoátu (615 mg,
1,0 mmol), mravenčanu amonného (310 mg, 4,9 mmol) a 10% palladia na uhlíku (65 mg) v methanolu (8 ml) se 16 hodin míchá při 20’C a poté přefiltruje přes pomocnou filtrační látku Arbocel. Filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu a ethylacetátový roztok se promyje nasyceným vodným chloridem sodným, vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Získá se terč.butyl-(3R)-3-({[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenyl102
ethyl]amino}karbonyl)propy1]amino}karbonyl)-6-(3-methyl-4-fenoxyfenyl)hexanoát (550 mg, 90 %) ve formě pěny, které se použije v následujícím stupni bez dalšího přečištění.
Rf 0,5 (hexan : ethylacetát, 3:1) δΗ (300 MHz, CDC13) 1,03 (9H, s), 1,41 (9H, s), 1,33 - 1,60 (4H, m, zastíněn jinými píky), 1,50 (3H, d, J = 7 Hz), 2,16 (3H, S), 2,30 (1H, m), 2,48 (2H, m), 2,57 (2H, m), 4,26 (1H, d, J = 9 Hz), 5,10 (1H, pentet, J = 7 Hz), 6,22 (1H, br
d), 6,44 (1H, br d), 6,77 (1H, d, J = 9 Hz), 6,86 (3H, m) , 6,99 (2H, m), 7,26 (7H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 615+)
c) Trifluoroctová kyselina (2,5 ml) se během 5 minut pod atmosférou dusíku při 20°C přikape k míchanému roztoku terč.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(1R)-1-fenylethyl]amino}karbonylJpropyl]amino}karbonyl)-6-(3-methyl-4-fenoxyfenylJhexanoátu (550 mg, 0,9 mmol) v bezvodém dichlormethanu (5 ml). Výsledný roztok se 1 hodinu míchá a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se zředí kyselinou chlorovodíkovou (2M) a extrahuje třemi dávkami ethylacetátu. Spojené organické roztoky se promyjí nasyceným vodným chloridem sodným, vysuší síranem hořečnatým a zkoncentrují za sníženého tlaku. Ke zbytku se přidají dvě dávky toluenu a toluenový roztok se odpaří. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě žluté pryskyřice (640 mg), která znečištěna toluenem a trifluoroctovou kyselinou.
Rf 0,18 (dichlormethan : methanol, 99 : 1) δΗ (300 MHz, CDC13) 0,99 (9H, s), 1,44 (3H, m), 1,50 (3H, d, J = 7 Hz), 1,57 (1H, m), 2,15 (3H, s), 2,43 (3H, m), 2,71 (2H, m), 4,43 (1H, d, J = 10 Hz), 5,06 (1H, pentet, J = 7
Hz), 6,77 (2H, m), 6,84 (2H, d, J = 8 Hz), 6,93 (1H, s),
7,00 (1H, t, J = 8 Hz), 7,10 (8H, komplex), 7,46 1H, d,
J = 10 Hz), 7,74 (2H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 558 (MH+)
103 • ·« ·· · · • i·
9 ·
9 ·
9 9 9 ·· ··
9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9
9 999 9 9 9
9 9 9 9
Preparativní postup 7
Methyl-(2S,3R)-3-karboxy-2-ethoxy-hex-4-enoát
a) n-Butyllithium (23,0 ml, 2,5M v hexanu, 57,5 mmol) se pod atmosférou dusíku při -78°C přikape k míchanému roztoku diisopropylaminu (9,63 ml, 69,0 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (10 ml). Reakční nádoba se na 10 minut umístí do lázně z ledu a vody a poté znovu ochladí na -78°C. Ke směsi se přidá tetrahydrofuran (10 ml) a poté přikape roztok (S)-diisopropylmalátu (6,0 g, 27,0 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (20 ml). Reakční směs se nechá zahřát na -20°C, 8 hodin míchá, znovu ochladí na -78°C a přikape se k ní čerstvě předeštilovaný allyljodid (2,75 mg, 30 mmol). Reakční směs se nechá zahřát na -40°C, 36 hodin míchá a nalije do ledově chladné 5% vodné kyseliny citrónové (150 ml). Vzniklá směs se extrahuje ethylacetátem (3 x 150 ml). Spojené organické roztoky se promyjí nasyceným vodným chloridem sodným, vysuší síranem hořečnatým a zkoncentrují za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití směsi hexanu a ethylacetátu v poměru 80 : 20 jako elučního činidla. Získá se (2S,3R)- a (2S,3S)-isopropyl-2-hydroxy-3-(2-propyloxykarbonyl)-5104 ·« #« »· ·· « · · · » » « · · ·· · · · ♦ · · • · · · · ··· · « ·
-hexanoát (5,42 g, 76 %) (14 : 1) ve formě světle žlutého oleje.
Rf 0,63 (hexan : ethylacetát, 1:1) δΗ (400 MHz, CDC13) (převažující isomer) 1,19 (6H, m), 1,26 (6H, m), 2,39 (IH, m), 2,58 (IH, m), 2,87 (IH, m), 3,14 (IH, d, J = 6,5 Hz, OH), 4,19 (IH, m), 4,98 (IH, m), 5,07 (2H, m), 5,13 (IH, d, J = 15 Hz), 5,79 (IH, m); (píky, které lze přisoudit menšinovému isomeru) 2,29 (IH, m), 2,50 (IH, m), 2,78 (IH, m), 3,06 (IH, d), 4,40 (IH, m).
LRMS (termosprej) m/z =276 (MNH4 +), 259 (MH+).
b) Ethyltrifluormethansulfonát (1,45 ml, 11,2 mmol) se přidá ke směsi (2S,3R)- a (3S,3S)-isopropyl-2-hydroxy-3-( 2-propyloxykarbonyl)-5-hexanoátu (14 : 1) (1,45 g, 5,6 mmol) a 2,6-diterc.butyl-4-methylpyridinu (2,88 g, 14,0 mmol). Vzniklá směs se pod atmosférou dusíku 5,5 hodiny míchá při 45°C, 18 hodin při 20“C a 24 hodin při 45°C, ochladí, umístí na krátký sloupec silikagelu a eluuje ethylacetátem. Filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku a zbytek se dále přečistí mžikovou chromatografii za použití směsi hexanu a ethylacetátu v poměru 85 : 15 jako elučního činidla. Získá se (2S,3R)-isoporpyl-2-ethoxy-3-(2-propyloxykarbonyl)-5-hexenoát (627 mg, 39 %).
Rf 0,62 (hexan : ethylacetát, 70 : 30) δΗ (400 MHz, CDC13) 1,13 (3H, t, J = 7,5 Hz), 1,17 (6H, m), 1,24 (6H, m), 2,24 /IH, dt, J = 13 a 6,5 Hz), 2,36 (IH, dt,
J = 13 a 6,5 Hz), 2,83 (IH, m), 3,38 (IH, dq, J = 9,5 a 7,5 Hz), 3,62 (IH, J = 9,5 a 7,5 Hz), 3,92( IH, d, J = 8 Hz), 5,02 (4H, m), 5,70 (IH, m).
LRMS (termosprej) m/z = 304 (MNH4 +), 287 (MH+).
c) Směs (2S,3R)-isopropyl-2-ethoxy-3-(2-propyloxykarbonyl)-5-hexenoátu (500 mg, 1,75 mmol) a hydrátu hydroxidu lithného (154 mg, 3,67 mmol) ve směsi methanolu a vody v poměru 1 : 1 (6 ml) se 22 hodin míchá při teplotě míst105 ·· · · • · • 99 « · · • · · • · « · •
··· · • e
9 9
9
9
9 «· <1 nosti pod atmosférou dusíku a poté zkoncentruje za sníženého tlaku. Podle NMR reakce ještě není dokončena, takže se ke zbytku přidá další hydrát hydroxidu lithného (154 mg, 3,67 mmol) a směs methanolu a vody v poměru 1 : 1 (6 ml). Výsledná směs se 20 hodin zahřívá na 50°C, ochladí a zkoncentruje za sníženého tlaku. Ke zbytku se přidá toluen a toluenová směs se odpaří. Tento postup se několikrát opakuje. Zbytek se vysuší za vakua za přítomnosti pelet hydroxidu sodného a použije se ho v následujícím stupni bez dalšího přečištění.
δΗ (400 MHz, CD3OD) 1,15 (3H, t, J = 7,5 Hz), 2,26 (1H, m), 2,40 (1H, m), 2,46 (1H, m), 3,35 (1H, dq, J = 9,5 a 7,5 Hz),
3,45 (1H, dq, J = 9,5 a 7,5 Hz), 3,72 (1H, d, J = 7 Hz),
4,94 (2H, částečně zastíněn pikem HOD), 5,84 (1H, m).
d) K míchané suspenzi (2S,3R)-2-ethoxy-3-(prop-3-enyl)butandioátu dvojlithného (393 mg, ze stupně c) v bezvodém tetrahydrofuranu (2,6 ml) se pod atmosférou dusíku při 0°C přikape anhydrid trifluoroctové kyseliny (2,62 ml). Výsledná směs se 4 hodiny míchá a zkoncentruje za sníženého tlaku. Ke zbytku se přidá toluen a toluenová směs se zkoncentruje. Tento postup se několikrát opakuje. Výsledná pryskyřice se při 0“C rozpustí v bezvodém methanolu (2 ml). Roztok se přes noc nechá zahřát na teplotu místnosti a poté zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se rozdělí mezi nasycený vodný dihydrogencitran sodný a ethylacetát. Vodná vrstva se extrahuje dvěma dávkami ethylacetátu. Spojené organické roztoky se promyjí nasyceným vodným chloridem sodným, vysuší síranem sodným a zkoncentrují za sníženého tlaku. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (220 mg) ve formě světle žlutého oleje. Hlavní nečistotou, která je patrná z 1H NMR, je pravděpodobně (2S,3S)-isomer.
Rf 0,3 (dichlormethan : methanol : kyselina octová, 95 : 5 : 1) ·· ··
106
δΗ (400 MHz, CD3OD) 1,16 (3H, t, J = 7,5 Hz), 2,32 (1H, m),
2,44 (1H, m), 2,95 (1H, m), 3,42 Hz), 3,68 (m), 3,74 (3H, s), 4,01 (2H, m), 5,74 (1H, m). (1H, dq, J = 9,m5 a 7,5 (1H, d, J = 6 Hz), 4,94
Příklad 36 /
Preparativní postup 8
(2S,3R)-3-([(lS)-2,2-Dimethyl-l-([(lR)-l-fenylethyl]aminokarbonyl)propyl]aminokarbonyl)-2-ethoxy-6-(3-fluor-4-fenoxyfeny1)hexanová kyselina
- 107 a) Hydrochlorid N-(dimethylaminopropyl)-N’-ethylkarbodiimidu (214 mg, 1,12 mmol) se pod atmosférou dusíku při 0’C přidá k míchané směsi methyl-(2S,3R)-3-karboxy~2-ethoxyhex-4-enoátu (z preparativního postupu 7) (210 mg, 0,97 mmol) a l-hydroxy-7-azabenzotriazolu (139 mg, 1,02 mmol) v bezvodém dimethylformamidu (4 ml). Po 1 hodině se ke vzniklé směsi přidá hydrochlorid (2S)-amino-3,3-dimethyl-N-[(IR)-l-fenylethyljbutanamidu (z preparativního postupu 1) (276 mg, 1,02 mmol) a poté diisopropylethylamin (0,18 μΐ, 1,02 mmol). Po dalších 30 minutách se reakční směs nechá zahřát na teplotu místnosti. Po 17 hodinách při teplotě místnosti se reakční směs zkoncentruje za sníženého tlaku a rozdělí mezi ethylacetát (50 ml) a vodu (50 ml). Vodná vrstva se nasytí hydrogenuhličitanem sodným a extrahuje ethylacetátem (2 x 20 ml). Spojené organické roztoky se zkoncentrují za sníženého tlaku a zbytek se rozpustí v etheru (50 ml). Etherový roztok se promyje vodou (3 x 20 ml), vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití směsi hexanu a ethylacetátu v poměru 60 : 40 jako elučního činidla. Získá se methyl-(2S,3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[ (IR)-l-fenylethyllaminojkarbonyl)propyl]aminojkarbonyl)-2-ethoxyhex-5-enoát (181 mg, 43 %) ve formě bezbarvé pevné látky (podle 1H NMR jediný diastereomer) o teplotě tání 131 až 134°C.
Rf 0,4 (hexan : ethylacetát, 1:1)
SH (300 MHz, CDC13), 1,00 (9H, s), 1,22 (3H, t, J = 7 Hz), 1,49 (3H, d, J = 6, 5 Hz), 2,31 (1H, dt, 14 a 8 Hz), 2,51 (1H, dt, 14 a 6,5 Hz), 2,68 (1H, m), 3,42 (1H, dq, J = 16 a 7 HZ), 3,66 (1H, dq, J = 16 a 7 Hz), 3,69 (3H, s), 4,05 (1H, d, J = 5 Hz), 4,13 (1H, d, J = 9 Hz), 5,04 (1H, d,
J = 10 Hz), 5,07 (1H, d, J = 18 Hz), 5,14 (1H, pentet, J =
Hz), 5,70 (1H, dddd, J = 6, 7, 10 a 18 Hz), 6,42 (1H, br
d), 7,29 (5H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 433 (MH+)
108
b) Směs octanu palladnatého (12 mg, 0,05 mmol) a tri-(2-methylfenyl)fosfinu (30 mg, 0,10 mmol) v bezvodém acetonitrilu (1 ml) se sonikuje 1 minutu při teplotě místnosti , dokud nevznikne krémově zbarvená suspenze. Tato suspenze se pod atmosférou dusíku Pasteurovou pipetou přidá k míchanému roztoku methyl-(2S,3R)-3-({[ (1S)-2,2-dimethyl-l-({[ (lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-2-ethoxyhex-5-enoátu (415 mg, 0,96 mmol), 3-fluor-4-fenoxybrombenzenu (z preparativniho postupu 10) (400 mg, 1,5 mmol) a triethylaminu (280 μΐ, 2,0 mmol) v bezvodém acetonitrilu (1 ml). Výsledná směs se promyje dusíkem, poté 16 hodin zahřívá ke zpětnému toku, ochladí a nalije do ethylacetátu (70 ml). Ethylacetátový roztok se promyje 5% vodnou kyselinou chlorovodíkovou (20 ml), nasyceným vodným chloridem sodným (50 ml), vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu dichlormethan : ethylacetát. Získá se převážně methyl-(2S,3R,5E)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l -({[ (IR)-1-fenylethyl ]amino}karbonyl) propyl ] amino}karbonyl) -2-ethoxy-6-(3-fluor-4-fenoxyfenyl)hex-5-enoát ve formě světle žluté pěny (359 mg, 69 %). Podle NMR jsou v produktu také přítomny dva alkenové isomery, (5Z) a (4E). Této směsi alkenů se použije v následujícím stupni (viz stupeň c)
Rf 0,36 (dichlormethan : ethylacetát, 10 : 1) δΗ (400 MHz, CDC13) (pro (5E) isomer). 1,01 (9H, s), 1,16 (3H, t, J = 7 Hz), 1,49 (3H, d, J = 6,5 Hz), 2,48 (1H, m) , 2,68 (1H, m), 2,80 (1H, m), 3,26 (1H, m) , 3,69 (1H, m a 3H, s, překrývání), 4,06 (1H, d, J = 4 Hz), 4,15 (1H, d, J =
9,5 Hz), 5,10 (1H, pentet, J = 6,5 Hz), 6,03 (1H, dt, 16 a 18 Hz), 6,36 (1H, d, J = 16 Hz), 6,42 (1H, br d), 6,95 (3H, m), 7,01 (1H, d, J = 8 Hz), 7.09 (3H, m), 7,22 (1H, m) , 7,28 (6H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 636 (MNH4 +)
- 109
c) Roztok methyl-(2S,3R,5E)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-2-ethoxy-6-(3-fluor-4-fenoxyfenyl)hex-5-enoátu (350 mg,
0,566 mmol) v ethanolu (15 ml) se 16 hodin hydrogenuje za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (60 mg) za tlaku 0,3 MPa při 20°C a poté přefiltruje přes pomocnou filtrací látku Arbocel. Filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí v cyklohexanu a odpaří. Tento postup se dvakrát opakuje. Získá se methyl-(2S,3R)-3-({[(lS)-2,2-dimethyl-l- ( { [ (IR) -1-fenylethyl ]amino}karbonyl)propyl ] amino}karbonyl) -2-ethoxy-6-(3-fluor-4-fenoxyfenyl)hexanoát (368 mg, 105 %) ve formě bezbarvé pěny, které se použije v následujícím stupni bez dalšího přečištění.
Rf 0,29 (hexan : ethylacetát, 2:1) δΗ (400 MHZ, CDC13) 1,01 (9H, s), 1,19 (3H, t, J = 7 Hz),
1,49 (3H, d, J = 6,5 Hz), 1,61 (3H, m), 1,75 (1H, m), 2,58 (3H, m), 3,41 (1H, dq, J = 10 a 7 Hz), 3,61 (1H, dq, J = 10 a 7 Hz), 3,70 (3H, s), 3,99 (1H, d, J = 5 Hz), 4,15 (1H, d,
J = 9 Hz), 5,12 (1H, pentet, J = 6,5 Hz), 6,38 (1H, br d),
6,83 (1H, d, J = 10 Hz), 6,87 (1H, d, J = 12 Hz), 6,93 (4H, m), 7,03 (1H, t, J = 9,5 Hz), 7,20 (1H, m), 7,29 (6H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 638 (MNH4 +)
d) Hydrát hydroxidu lithného (116 mg, 2,83 mmol) se přidá k roztoku methyl-(2S,3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-l-fenylethyl]amino)karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-2-ethoxy-6-(3-fluor-4-fenoxyfenyl)hexanoátu (368 mg, 0,566 mmol) ve směsi methanolu a vody v poměru 10 : 1 (5 ml). Reakční směs se 2 hodiny míchá při teplotě místnosti. Vzniklý roztok se neutralizuje 5% vodnou kyselinou citrónovou a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se rozdělí mezi ethylacetát (100 ml) a 5% vodnou kyselinu citrónovou (20 ml), promyje nasyceným vodným chloridem sodným (20 ml), vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku.
110
Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu dichlormethan : methanol 20 : 1 až 10 : 1. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (62 mg, 18 %) ve formě bezbarvého skla a určité směsné frakce. Tyto frakce se spojí a znovu přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gracientu ethylacetát : hexan : kyselina octová 33 : 66 : l až 50 : 50 : 1. Získá se sloučneina uvedená v nadpisu (37 mg, 11 %) ve formě bílé pevné látky.
Teplota tání 185 až 187°C
Rf 0,23 (ether : hexan : kyselina octová, 70 : 30 : 1) δΗ (400 MHz, CD3OD) (NB některé posuny jsou závislé na koncentraci) 1,02 (9H, s), 1,15 (3H, t, J = 7 Hz), 1,44 (3H, d, J = 7 Hz), 1,56 (3H, m), 1,69 (1H, m), 2,54 (2H, m), 2,68 (1H, m), 3,35 (1H, dq, J = 10 a 7 Hz), 3,66 (1H, dq,
J = 10 a 7 Hz), 4,31 (1H, s), 5,02 (1H, q, J = 7 Hz), 6,87 (4H, m), 6,96 (1H, d, J = 12 Hz), 7,02 (1H, t, J = 7 Hz), 7,13 (1H, m), 7,19 (2H, t, J = 7 Hz), 7,28 (4H, m).
LRMS (termosprej) m/z = 607 (MH+)
FTIR Vmax (KBr disk) 3330, 2980, 1643, 1593, 1508, 1493, 1217, 700 cm1
Preparativní postup 9 (3-Chlor-4-fenyl)fenyltrifluormethansulfonát
Anhydrid trifluormethansulfonové kyseliny (755 μΐ, 4,45 mmol) se pod atmosférou dusíku při 0°C během 2 minut přikape k roztoku (3-chlor-4-fenyl)fenolu (759 mg, 3,71 mmol) (WO 97/20815) a bezvodého pyridinu (785 μΐ, 9,65 mmol) v bezvodém dichlormethanu. Vzniklá směs se 1,5 hodiny míchá při 0’C, poté 2,5 hodiny při 20°C a nalije do směsi etheru
111 • ·· ·« · · · · • · · · · ·· · « » · • ·· · · · · ·· ·· · · · ·····« · a hexanu (200 ml, 50 : 50). Výsledná směs se přefiltruje a filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografii za použití směsi hexanu a etheru v poměru 20 : 1 jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě bezbarvého oleje (1062 mg, 85 %), který během několikadenního stání při teplotě místnosti vykrystaluje.
Teplota tání: 43 až 44°C
Rf 0,27 (hexan) δΗ (300 MHz, CDC13) 7,27 (1H, dd, J = 8 a 2 Hz), 7,29 (7H, br s).
LRMS (El) m/z = 336 (M+)
Preparativní postup 10
3-Fluor-4-fenoxybrombenzen
Vodný hydroxid sodný (5,5 ml, 1M, 5,5 mmol) se přidá ke směsi 4-brom-2-fluorfenolu (0,96 g, 5,0 mmol) a difenyljodoniumbromidu (1,99 g, 5,5 mmol) ve vodě (20 ml). Výsledná směs se 4 hodiny zahřívá ke zpětnému toku, ochladí a zředí etherem. Zředěná směs se přefiltruje. Organická fáze se promyje nasyceným vodným chloridem sodným, vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Tmavě oranžový olejovitý zbytek se přečistí mžikovou chromatografii za použití hexanu jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě oranžového oleje (1,2 g, 90 %).
Rf 0,36 (hexan) δΗ (400 MHz, CDC13) 6,90 (3H, m), 7,06 (1H, m), 7,20 (1H, m), 7,30 (3H, m).
112
Preparativní postup 11
1-Jod-3-methyl-4-fenoxyben z en
Vodný hydroxid sodný (33 ml, 1M, 33 mmol) se přidá ke směsi 4-jod-2-methylfenolu (7,0 g, 29,9 mmol) a difenyljodoniumbromidu (11,89 g, 32,9 mmol) ve vodě (120 ml). Výsledná směs se 4 hodiny zahřívá ke zpětnému toku, ochladí a extrahuje ethylacetátem (4 x 100 ml). Spojené extrakty se promyjí nasyceným vodným chloridem sodným, vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Tmavě oranžový olejovitý zbytek se přečistí opakovanou mžikovou chromatografií za použití hexanu jako elučního činidla pro první sloupec a poté pentanu jako elučního činidla pro druhý sloupec. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě oranžového oleje (7,84 g, 84 %).
Rf 0,78 (hexan) δΗ (400 MHz, CDC13) 2,23 (3H, s), 6,65 (1H, d, J = 9 Hz), 6,94 (2H, m), 7,10 (1H, m), 7,32 (2H, m) , 7,47 (1H, d, J =
Hz), 7,59 (1H, S).
LRMS (termosprej) m/z = 310 (MH+)
Preparativní postup 12 terč.Butyl-(2S,3R)-3-karboxy-2-propylhex-5-enoát
113 • «· ·· ·· ·· • · · · · 9 9 9 9 9 9 • ·· 9 · 9 9 9 9
9 9 9 9 9 99999 9
99999 99 99 99 9
a) n-Butyllithium (2,2 ml, 2,5M v hexanu, 5,6 mmol) se pod atmosférou dusíku při -5°C přikape k míchanému roztoku diisopropylaminu (0,73 m,l 5,6 mmol) v bezvodém tetrahydrof uranu (3 ml). Po 1 hodině se vzniklý roztok ochladí na -70°C a přidá se k němu N,N'-dimethylpropylenmočovina (DMPU) (3 ml). K výsledné směsi se během 15 minut, kdy se teplota udržuje na -70°C, přikape roztok (2R)-2-[2-(terc.butoxy)-2-oxoethyl]pent-4-enové kyseliny (535 mg, 2,5 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (6 ml). Výsledná směs se 1 hodinu míchá, načež se k ní přikape 1-jodpropan (680 mg, 4,0 mmol). Reakční směs se l hodinu míchá při -70°C, poté 2 hodiny při -40°C, nechá se zahřát na 0°C a přidá se k ní methanol. Vzniklá směs se rozdělí mezi 5% vodnou kyselinu citrónovou (150 ml) a ether (200 ml). Organická vrstva se promyje 5% vodnou kyselinou citrónovou (75 ml) a vodou (3 x 200 ml), vysuší síranem horečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Získá se světle žlutý olej. Po přečištění mžikovou chromatograf ií za použití směsi hexanu, ethylacetátu a kyseliny octové v poměru 80 : 20 : 2 jako elučního činidla se získá (2R,3R)- a (2R,3S)-3-[(2-methylprop-2-yl)oxykarbonyl]-2-(3-propen-l-yl)hexanová kyselina (472 mg, 74 %) ve formě bezbarvého oleje (poměr diastereomerů 97 : 3).
Rf 0,31 (hexan : ethylacetát : kyselina octová, 80 : 20 : 2)
114
9» · » 99 «9
9« 99 9999 999
99 9999 99
9 · · 9 9 9 9 · · * 9 δΗ (400 MHz, CDC13) (pro 2R,3R isomer) 0,92 (3H, r, J = 7,5 Hz), 1,34 (2H, m), 1,45 (9H, s), 1,58 (2H, m), 2,39 (2H, t,
J = 7 Hz), 2,60 (1H, dt, J = 6 a 8 Hz), 2,74 (1H, dt, 6 a 7,5 Hz), 5,06 (1H, d, J = 10 Hz), 5,10 (1H, d, J = 17 Hz), 5,74 (1H, ddt, J = 17, 10 a 7,5 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 256 (slabý, M+), 200 (pík báze,
MH+- t-Bu)
FTIR Vmax (film) 2970, 1730, 1370, 1250, 1160 cm-1
b) Směs (2R,3R)- (2R,3S)-3-[(2-methylprop-2-yl)oxykarbonyl]-2-(3-propen-l-yl)hexanové kyseliny (97 : 3, ze stupně a) (3,05 g, 11,9 mmol) se rozpustí v bezvodém tetrahydrofuranu (35 ml). Tento roztok se během 30 minut při -70°C přikape k míchanému roztoku lithiumdiisopropylamidu (z n-butyllitnia (19,2 ml, 2,5M v hexanech, 48 mmol) a diisopropylaminu (7,0 ml, 50 mmol)) v bezvodém tetrahydrofuranu (25 ml). Reakční směs se nechá zahřát na teplotu -10°C, 30 minut míchá, během 2 hodin nechá zahřát na 0°C, znovu ochladí na -70°C a injekční stříkačkou se k ní rychle přidá methanol (15 ml). Výsledná směs se nechá zahřát na teplotu místnosti a rozdělí mezi 5% vodnou kyselinu citrónovou (150 ml) a ether (200 ml). Organická vrstva se promyje 5% vodnou kyselinou chlorovodíkovou (50 ml) a vodou (3 x 200 ml), vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Světle žlutý olejovitý zbytek se přečistí mžikovou chromátografií za použití elučního gradienu hexan : ethylacetát :
: kyselina octová. Získá se (2R,3S)- a (2R,3R)-3-[(2-methylprop-2-yl)oxykarbonyl]-2-(3-propen-l-yl)hexanová kyselina (3,05 g, 100 %) ve formě bezbarvého oleje (poměr diastereomerů 58 : 42).
Rf 0,31 (hexan : ethylacetát : kyselina octová, 80 : 20 : 2)
Stereochemie těchto dvou isomerů se stanoví následujícím postupem: Směs (2R,3S)- a (2R,3R)-3-[(2-methylprop-2-yl)oxykarbonyl]-2-(3-propen-l-yl)hexanové kyseliny (v
115 * 9 « «9 • 9 · 9 »9
9 « • 99 « 9 *9 • 9 99 • 9 «
9 9
9 9 9
9 9
9 Ί· poměru 1 : 3) v ethanolu se hydrogenuje za přítomnosti 10% palladia na uhlíku za tlaku 0,3 MPa a poté smísí s chlorovodíkem ve směsi suchého dichlormethanu a dioxanu (4°C, 4 h). Získá se směs (2R,3S)- a (2R,3R)-2,3-diprop-l-ylbutandiové kyseliny (v poměru 1 : 1), která je známa z literatury (Bull. Chem. Soc., Francie, 1975, 2189). Zkoumání protonového NMR spektra (aceton-d6) ukáže δΗ 2,70 (2H, m, CHCO2H, hlavní isomer) a δΗ (2H, m, CHCO2H, menšinový isomer).
c) Roztok (2R,3S)- a (2R,3R)-3-[(2-methylprop-2-yl)oxykarbonyl]-2-(3-propen-l-yl)hexanové kyseliny (3,04 g,
11,9 mmol) (poměr diastereomerů 58 : 42) a hydrogenuhličitan česný (2,30 g, 11,9 mmol) ve vodě (35 ml) a acetonitrilu (90 ml) se 5 minut míchá při 20°C a poté odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se čtyřikrát rozpustí v toluenu a odpaří. Výsledná pryskyřice se suší 30 minut za vysokého vakua a poté rozpustiv bezvodém N,N-dimethylacetamidu (50 ml). Ke vzniklému roztoku se přidá jodmethan (3,41 g, 24 mmol), roztok se míchá 17 hodin při 20eC a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se rozdělí mezi ether (250 ml) a vodu (250 ml). Organická vrstva se promyje vodou (3 x 200 ml), vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Získá se směs methyl-(2R,3S)- a (2R,3R)-3-[(2-methylprop-2-yl)oxykarbonyl]-2-(3-propen-l-ylJhexanoátu ve formě žlutého oleje (3,0 g, 94 %). Chromátografie na tenké vrstvě za použití směsi pentanu a etheru v poměru 10 : 1 jako elučního činidla ukáže dvě skvrny produktů o Rf 0,41 a 0,30.
d) Směs methyl-(2R,3S)- a (2R,3R)-3-[(2-methylprop-2-yl)oxykarbonyl]-2-(3-propen-1-yl)hexanoátu ze stupně c) se rozdělí mžikovou chromatografií za použití směsi pentanu a etheru v poměru 20 : 1 a poté 10 : 1, čímž se získají dvě frakce. Produkt eluovaný jako první byl identifikován jako methyl-(2R,3S)-3-[(2-methylprop-2-yl)oxykarbonyl]-2-(3-propen-l-ylJhexanoát (1,78 g, 56 %, Rf 0,41 (pentan : ether, 10
116 • *9 *· V« »· ·♦ · · 9 · · W <k · • ** · Λ · 9 · ♦ • 9 9 9· « »·· · 9 · : 1)) ve formě bezbarvého oleje.
δΗ (400 MHz, CDC13) 0,87 (3H, t, J = 7 Hz), 1,30 (3H, m) ,
1,46 (9H, s), 1,56 ( 1H, m), 2,23 (1H, m), 2, 34 (1H, m),
2,54 (1H, dt, 3 a 10 Hz), 2,69 (1H, 4,5a 10 Hz), 3,66 (3H,
s), 5,00 (1H, d, J = 10 Hz), 5,04 (1H, d, J= 17 Hz), 5, 72
(1H, ddt, J = 17, 10 a 7 Hz).
c15h26°4 vypočteno C 66,61, H 9,77,
Nalezeno: C 66,64, H 9,69 %
FTIR vmax (KBr disk) 2970, 1730, 1370, 1150 cm“1
Produkt eluovaný jako druhý byl identifikován jako methyl-(2R,3R)-3-[(2-methylprop-2-yl)oxykarbonyl]-2-(3-propen-l-yl)hexanoát (760 mg, 24 %, Rf 0,30 (pentan : ether, 10 : 1)) ve formě bezbarvého oleje.
δΗ (400 MHz, CDC13) 0,90 (3H, t, J = 7 Hz), 1, 27 (1H, m) ,
1,35 (1H, m), 1,45 (9H, s), 1,55 (2H, m), 2,36 (2H, m) t
2,58 (1H, dt, J = 5 a 9 Hz), 2,71 (1H, dt, 5 a 9 Hz) , 3,66
(3H, s), 5,02 (1H, d, J = 10 Hz), 5,08 (1H, d, J % 16 Hz) ,
5,76 (1H, m).
C15H26°4 vypočteno C 66,70, H 9,81,
Nalezeno: C 66,64, H 9,69 %
FTIR vmax (KBr disk) 2970, 1730, 1370, 1160 cm'
e) Směs methyl-(2R,3S)-3-[(2-methylprop-2-yl)oxykarbonyl]-2-(3-propen-l-yl)hexanátu (1,49 g, 5,51 mmol) a bezvodého jodidu lithného (11 g, 82 mmol) v bezvodém pyridinu (50 ml) se 17 hodin pod atmosférou dusíku zahřívá ke zpětnému toku, ochladí a nalije do 20% vodné kyseliny citrónové (500 Ml). Výsledná směs se extrahuje ethylacetátem (250 ml). Organická vrstva se promyje 5% vodnou kyselinou citrónovou (2 x 150 ml), vodou (3 x 250 ml), vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se trituruje s hexanem, přefiltruje a filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Surový produkt se přečistí opakovanou mžikovou chromatografií (první sloupec se eluuje směsi di• · · · ··
117
chlormethanu, methanolu a kyseliny octové v poměru 80 : 20 :
a druhý sloupec se eluuje gradientem hexan : ethylacetát : kyselina octová). Získá se (2R,3S)-3-[(2-methylprop-2-yl)oxykarbonyl]-2-(3-propen-l-yl)hexanová kyselina (788 mg, 56 %) ve formě bezbarvého oleje.
Rf 0,3 (hexan : ethylacetát : kyselina octová, 80 : 20 : 2) δΗ (400 MHz, CDC13) 0,91 (3H, t, J = 7 Hz), 1,35 (3H, m),
1,47 (9H, s), 1,62 (1H, m), 2,26 (1H, dt, J = 10 a 7,5 Hz),
2,38 (1H, dt, J = 7,5 a 10 Hz), 2,58 (1H, dt, J = 3 a 10 Hz), 2,70 (1H, dt, 5 a 9 Hz), 5,04 (1H, d, J = 10 Hz), 5,08 (1H, d, J = 18 Hz), 5,76 (1H, ddt, J = 18, 10 a 7,5 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 257 (slabý, MH+)
Nalezeno: C 65,30, H 9,44, C14H24°4 vypočteno C 65,60, H 9,44 %
Preparativní postup 13 terč.Butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl](2S)-propylhexanoát
118
a) Způsobem popsaným v preparativním postupu 2 se (2R,3S)—3—[(2-methylprop-2-yl)oxykarbonyl]-2-(3-propen-l-yl)hexanová kyselina (380 mg, 1,48 mmol) nechá po dobu 1 hodiny při 4°C a poté 72 hodin při 20C reagovat s hydrochloridem (2S)-amino-3,3-dimethyl-N-[(IR)-1-fenylethyl]butanamidu (z preparativního postupu 1, 441 mg, 1,62 mmol). Výsledná směs se zkoncentruje za sníženého tlaku a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát (100 ml) a vodu (100 ml). Vodná vrstva se nasytí hydrogenuhličitanem sodným a extrahuje ethylacetátem (2 x 100 ml). Spojené organické roztoky se zkoncentrují za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí v etheru (500 ml) a etherový roztok se promyje vodou (3 x 200 ml), vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se trituruje s pentanem. Produkt se odfiltruje a vysuší. Získá se terč.butyl-(2S,3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-2-(1-propyl)hex-5-enoát (579 mg, 80 %) ve formě bezbarvé pevné látky o teplotě tání 180 až 183°C.
Rf 0,51 (hexan : isopropylalkohol, 90 : 10) δΗ (400 MHz, CDC13) 0,84 (3H, t, J = 7,5 Hz), 1,02 (9H, s),
1,22-1,50 (4H, m), 1,45 (9H, s), 1,50 (3H, d, J = 7 Hz) ,
2,08 (1H, m) , 2,22 (1H, rn), 2,34 (1H, dt, J = 4 a 10 Hz),
2,52 (1H, dt, J = : 3 a 1 0 Hz), 4,18 (1K [, d, J = 9 Hz) , 4,72
(1H, d, J = 9,5 Hz; >, 4, 85 (1H, d, J = 16,5 Hz), 5,09 (1H,
pentet, J = 7 HZ), 5,53 (1H, ddt, J = 9,5 Hz), 6,03 (1H, br
d), 6,24 (1H, br d), 7,26 (5H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 473 (MH+)
FTIR Vmax (KBr disk) 3320, 2970, 2930, 1725, 1640, 1540,
1370, 1150, 700 cm“1
Nalezeno: C 71,09, H 9,46, N 6,10, C28H44N24°4 vYP°čteno C 71,15, H 9,38, N 5,93 %
b) Způsobem popsaným v preparativním postupu 3 se terč.butyl-(2S,3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl ]amino}karbonyl)propy1]amino}karbonyl)-2-(1-propyl)hex« « • ·
- 119
-5-enoát (543 mg, 1,15 mmol) nechá reagovat s 3-methyl-4-fenylbrombenzenem (356 mg, 1,44 mmol) za katalýzy palladiem ve směsi bezvodého acetonitrilu a dimethylformamidu v poměru 2 : 5 (7 ml). Reakční směs se zkoncentruje za sníženého tlaku a zbytek se nalije do ethylacetátu (100 ml). Ethylacetátová směs se promyje vodou (2 x 100 ml), vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu hexan : ethylacetát. Získá se převážně terc.butyl-(2S,3R,5E)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl ]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-(3-methyl-(4-fenyl)fenyl]-2-(1-propyl)hex-5-enoát ve formě bezbarvé pryskřice (460 mg, 63 %). Podle NMR jsou ve směsi také přítomny dva alkenové isomery, (5Z) a (4E). Získané směsi alkenů se použije v následujícím stupni (viz c).
Rf 0,46 (hexan : ethylacetát, 3:1) δΗ (400 MHz, CDC13) (pro (5E) isomer) 0,87 (3H, t, J % 7 Hz), 1,03 (9h, s), 1,32 (2H, m), 1,46 (9H, s, 3H, d, J = 7 Hz a 2H, m, překrývání), 2,22 (3H, s), 2,34 (1H, m), 2,48 (2H, m), 2,60 (1H, m), 4,19 (1H, d, J = 9 Hz), 4,93 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,85 (1H, br d), 6,05 (1H, dt, J = 14 a 7 Hz), 6,35 (1H, d J = 14 Hz), 6,27 (1H, br d), 7,20 (11H, komplex), 7,37 (2H, m).
LRMS (termosprej) m/z = 639 (MH+)
c) terč.Butyl-(2S,3R,5E)-3-({[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-(3-methyl(4-fenyl)fenyl]-2-(1-propyl)hex-5-enoát (437 g, 0,68 mmol) v ethanolu (50 ml) se 17 hodin hydrogenuje za přítomnosti 10% palladia na uhlíku za tlaku 0,3 MPa při 20°C. Reakční směs se přefiltruje přes pomocnou filtrační látku Arbocel a filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se podrobí mžikové chromatografii za použití elučního gradientu hexan : ethylacetát. Získá se terč.butyl-(3R)-3(<[(1S)—2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]amino}karbonyl)• *
- 120 propyllamino}karbonyl)-6-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl](2S)-propylhexanoát (395 mg, 62 %) ve formě bezbarvé pěny.
Rf 0,38 (hexan : ethylacetát, 3:1)
SH (400 MHz, CDC13) 0,85 (3H, t, J = 7 Hz), 1,03 (9H, s), 1,26 (4H, m), 1,37 (9H, s), 1,48 (4H, m a 3H, d, J = 7 Hz, překrývání), 2,20 (3H, s), 2,29 (1H, m), 2,48 (4H, m), 4,24 (1H, d, J = 9 Hz), 5,10 (1H, pentet, J = 7 Hz), 6,02 (1H, br
d), 6,29 (1H, br d), 6,94 (1H, d, J = 8 Hz), 6,98 (1H, s), 7,09 (1H, d, J = 8 Hz), 7,24 (7H, komplex), 7,32 (1H, d,
J = 7 Hz), 7,39 (2H, t, J = 7 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 641 (MH+)
Nalezeno: C 76,71, H 8,97, N 4,35, C41H56N2°4 vypočteno C 76,84, H 8,81, N 4,37 %
Preparativní postup 14 (2R)-2-[(4S)-2,2-Dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyllaminojkarbonyl)propyl]pent-4-enamid
a) Směs isopropyl-(2S,3R)- a (2S,3S)-2-hydroxy-3(2-propyloxykarbonyl)-5-hexenoátu (6,28 g, 24,3 mmol) (poměr
- 121 isomerů 14 : 1) (z preparativního postupu 7, stupně a) a hydroxidu draselného (4,09 g, 72,9 mmol) ve směsi dioxanu a vody (50 ml, 5 : 2) se 18 hodin pod atmosférou dusíku zahřívá na 90°C, poté ochladí a zředí vodou (200 ml). Vodná směs se nechá projít sloupcem ionexu (Dowex 50X8, 300 g), přičemž eluce se provádí vodou tak dlouho, až již v eluátu není přítomna žádná dvojsytná kyselina. Eluát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí v ethanolu a ethanolický roztok se odpaří. Tento postup se provede dvakrát a dále ještě dvakrát za použití etheru. Produkt se vysuší za vakua. Získá se (2S,3R)-2-hydroxy-3-(prop-3-en-l-yl)butandiová kyselina (voskovítá žlutá pevná látka, 4,85 g, nad 100 %, která obsahuje ethanol a ether) jako hlavní složka směsi isomerů v poměru 8:1. Této směsi se použije přímo v následujícím stupni bez dalšího přečištění.
δΗ (300 MHz, CDC13) 2,47 (1H, dt, J = 7,5 a 15,5 Hz), 2,60 (1H, m), 3,00 (1H, dt, J = 4 a 6 Hz), 4,26 (1H, d, J = 4 Hz), 5,09 (1H, d, J = 10 Hz), 5,15 (1H, d, J = 18 Hz), 5,83 (1H, m).
b) Surová dvojsytná kyselina ze stupně a) se při teplotě místnosti rozpustí ve směsi dimethylformamidu (36 ml) a 2,2-dimethoxypropanu (133 ml). Ke vzniklému roztoku se přidá hydrát p-toluensulfonové kyseliny (231 mg). Výsledná směs se 2,5 dne zahřívá na 30 °C, načež se z ní za sníženého tlaku odpaří rozpouštědlo. Získá se olej (7,5 g), který obsahuje (4S)-4-[(15)-l-karboxybut-3-enyl]-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-5-on, jako hlavní složku, a dále dimethylformamid a p-toluensulfonovou kyselinu.
δΗ (400 MHz, CDC13) 1,53 (3H, s), 1,60 (3H, s), 2,47 (1H, dt, J = 7,5 a 15,5 Hz), 2,71 (1H, dt, J = 7,5 a 15,5 Hz),
3,00 (1H, m), 4,30 (1H, d, J = 4 Hz), 5,12 (1H, d, J = 10 Hz), 5,16 (1H, d, J = 16 Hz), 5,80 (1H, m).
122 • · · · * ·
c) Dávka surového (4S)-4-[(15)-l-karboxybut-3-enyl]-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-5-onu ze stupně b) (podle NMR obsahuje 1,54 g, 7,19 mmol) a l-hydroxy-7-aza-lH-l,2,3-benzotriazolu (1,09 g, 7,55 mmol) v bezvodém dichlormethanu (30 ml) se smísí pod atmosférou dusíku. Výsledná směs se ochladí na 0°C a přidá se k ní hydrochlorid N-(dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimidu (1,60 g, 8,27 mmol). Vzniklá směs se 1,5 hodiny míchá při 0°C a přidá se k ní hydrochlorid (2S)-amino-3,3-dimethyl-N-[(IR)-l-fenylethyl]butanamidu (z preparativního postupu 1) (2,15 g, 7,55 mmol) a poté diisopropylethylamin (1,37 ml, 7,55 mmol). Po dalších 45 minutách se reakční směs nechá zahřát na teplotu místnosti a po 3 hodinách při teplotě místnosti rozdělí mezi ethylacetát (200 ml) a vodný fosfátový pufr (pH 7, 100 ml). Organická vrstva se promyje hydrogenuhličitanem sodným a vodným chloridem sodným, vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Výsledná pěny po přídavku etheru vykrystaluje. Odfiltruje se bílá pevná látka (1,89 g). Po překrystalování ze směsi ethylacetátu a hexanu se získá (2R)-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]pent-4-enamid ve formě bílé pevné látky (1,30 g, 42 %, jako jediný diastereomer) o teplotě tání 178 až 180°C.
Rf 0,25 (dichlormethan : ether, 90 : 10) δΗ (300 MHz, CDC13) 1,02 (9H, s), 1,48 (3H, d, J = 7 Hz),
1,51 (3H, s), 1,5 >6 (3 H, s), 2,47 (1H, dt, 15 a 7,5 HZ),
2,58 (1H, dt, 15 a 7, 5 Hz), 2,70 (1H, dt, J = 11 a 5 Hz) ,
4,15 (1H, d, J = 9 HZ ), 4,50 (1H, d, J = 5 Hz), 4,99 (1H,
J = : 10 Hz) , 5,08 (2H, m), 5,67 (1H, m), 5,67 (1H, br d),
6,45 (1H, br d), 7,27 (5H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 431 (MH+)
123
Preparativní postup 15 (2R)-2-[(4S)-2,2-Dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]-5-[(3-fluor-4-fenoxy)fenyljpentanamid
H I “4c„ U
H,C ' CH. V
0,075 mmol) a
a) Směs octanu palladnatého (17 mg, tri-(2-methylfenyl)fosfinu (46 mg, 0,15 mmol) v bezvodém acetonitrilu (2 ml) se 1 minutu sonikuje při teplotě místnosti, dokud nevznikne krémově zbarvená suspenze. Tato suspenze se pod atmosférou dusíku Pasteurovou pipetou přidá k míchanému roztoku (2R)-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-l-fenylethyl ] amino} karbony 1) propyl ]pent- 4 -enamidu (650 mg, 1,5 mmol), l-brom-3-fluor-4-fenoxybenzenu (z preparativního postupu 10) (587 mg, 2,26 mmol) a N-ethylmorfolinu (348 μΐ, 3,0 mmol) v bezvodém acetonitrilu (2,5 ml). Výsledná směs se promyje dusíkem, poté 16 hodin zahřívá ke zpětnému toku, ochladí a nalije do ethylacetátu (100 ml). Ethylacetátový
124
roztok se promyje 5% vodnou kyselinou chlorovodíkovou (30 ml), nasyceným vodným chloridem sodným (50 ml), vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu dichlormethan : ether. Získá se převážně (2R,5E)-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]-5-(3-fluor-4-fenoxyfenyl)pent-4-enamid ve formě světle žluté pěny (210 mg, 22 %). Podle 1H NMR jsou v produktu také přítomny alkenové isomery. Této směsi alkenů se použije v následujícím stupni (viz stupeň c) δΗ (400 MHz, CDC13) (pro (5E) isomer) 1,00 (9H, s), 1,50 (3H, d, J = 7 Hz), 1,53 (3H, s), 1,58 (3H, s), 2,65 (1H, m), 2,77 (2H, m), 4,18 (1H, d, J = 9 Hz), 4,56 (1H, d, J = 5 Hz), 5,03 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,88 (1H, br d), 6,01 (1H, dt, 16 a 7 Hz), 6,43 (1H, d, J = 16 Hz), 6,58 (1H, br
d), 6,94 (4H, m), 7,08 (2H, m), 7,20 (2H, m), 7,24 (5H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 618 (MH+), 542 (M+-(CH3)2CO2).
b) Roztok (2R,5E)-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[ (lR)-l-fenylethy1]amino}karbonyl)propyl]-5-(3-fluor-4-fenoxyfenyl)pent-4-enamidu (210 mg, 0,34 mmol) ve směsi ethanolu a ethylacetátu v poměru 5 : 1 (10 ml) se 3 hodiny hydrogenuje za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (20 mg) za tlaku 0,3 MPa při 20°C. Výsledná směs se přefiltruje přes pomocnou filtrační látku Arbocel a filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Získá se (2R)-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]-5-[(3-fluor-4-fenoxy)fenyl ]pentanamid (103 mg, 49 %) ve formě bezbarvé pevné látky, které se použije při postupu podle příkladu 9 bez dalšího přečištění.
Rf 0,71 (dichlormethan : methanol, 90 : 10)
125 •9 99 ·9
9 9 9 9 9 9
9 · 9 9 9 • · · · 9 9 9 9 δΗ (400 MHZ, CDC13) 1,03 (9H, s), 1,50 ((3H, d, J = 7 Hz), 1,52 (3H, s), 1,57 (3H, s, a 2H, m, překrývání), 1,85 (2H, m), 2,58 (3H, m), 4,16 (1H, d, J = 10 Hz), 4,45 (1H, d,
J = 8 Hz), 5,06 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,92 (1H, br d),
6,55 (1H, br d), 6,84 (1H, d, J = 8 Hz), 6,94 (3H, m) , 7,06 (1H, t, J = 7 Hz), 7,26 (8H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 619 (MH+)
Preparativní postup 16 (2R)-2-[(4S)-2,2-Dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]-5-[(3-methyl-4-fenyl)fenyl]pentanamid
a) Způsobem popsaným v příkladu 15 b) se (2R)—2—[(4S)— -2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]pent-4-enamid (z preparativního postupu 14) (860 mg, 2,0 mmol) nechá 16 hodin při teplotě zpětného toku za katalýzy palladiem v acetonitrilu reagovat s l-brom-3-methyl-4-fenylbenzenem (740 mg, 3,0
126
mmol). Poté se reakční směs ochladí a rozdělí mezi ethylacetát (3 x 50 ml) a nasycený vodný hydrogenuhličitan sodný (50 ml). Spojené organické roztoky se vysuší síranem sodným a zkoncentrují za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu dichlormethan : methanol 97,5 : 2,5. Získá se převážně (2R,5E)-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]-5-[(3-methyl-4-fenyl)fenyl]pent-4-enamid ve formě žlutohnědé pěny (480 mg, 40 %). Podle 1H NMR jsou v produktu také přítomny alkenové isomery. Této směsi alkenů se použije v následujícím stupni (viz stupeň b)
Rf 0,59 (dichlormethan : methanol, 95 : 5) δΗ (400 MHz, CDC13) (pro (5E) isomer). 1,03 (9H, s), 1,48 (3H, d, J = 7 Hz), 1,54 (3H, s), 1,59 (3H, s), 2,25 (3H, s), 2,71 (1H, dt, J = 15 a 7,5 Hz), 2,77 (1H, q, J = 6 Hz),
2,85 (1H, dt, J = 15 a 7,5 Hz), 4,18 (1H, d, J = 9 Hz),
4,58 (1H, d, J = 5 Hz), 5,03 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,87 (1H, br d), 6,13 (1H, dt, 16 a 7 Hz), 6,52 (1H, d, J = 16 Hz), 6,58 (1H, br d), 7,23 (10H, komplex), 7,38 (3H, m).
LRMS (termosprej) m/z = 521 (M+ -(CH3)2CO2).
b) Roztok (2R,5E)-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl ]amino}karbonyl)propyl]-5-[(3-methyl-4-fenyl)fenyl]pent-4-enamidu (480 mg, 0,80 mmol) v ethanolu (20 ml) se 4 hodiny hydrogenuje za přítomnosti 10% palladia na uhlku (48 mg) za tlaku 0,3 MPa při 20°C. Vzniklá směs se přefiltruje přes pomocnou filtrační látku Arbocel a filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Získá se (2R)-2-[(4S)-2,2dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]aminojkarbonyl)propyl]-5-[(3-methyl-4-fenyl)fenyl]pentanamid (440 mg, 92 %) ve formě krémově zbarvené pevné látky, které se použije při postupu podle příkladu 10 bez dalšího přečištění.
127
0 0» • · · • M 0 0 ·« • · · W • · · 0 • 0 0 · 0 0 0 0
• · · · • · · · 0 0 0 ·
LRMS (termosprej) m/z = 526 (MH+)
Rf 0,53 (dichlormethan : methanol, 95 : 5)
SH (400 MHz, CDC13) 1,03 (9H, s), 1,50 (3H, d, J = 7 Hz), 1,53 (3H, s), 1,58 (3H, s), 1,64 (2H, m), 1,87 (2H, m),
2,46 (3H, m), 4,20 (IH, d, J = 10 Hz), 4,47 (IH, d, J = 5 Hz), 5,07 (IH, pentet, J = 7 Hz), 5,99 (IH, br d), 6,55 (IH, br d), 7,00 (IH, d, J = 8 Hz), 7,04 (IH, s), 7,13 (IH, d, J = 8 Hz), 7,29 (5H, komplex), 7,40 (2H, m) .
LRMS (termosprej) m/z = 600 (MH+), 523 (pík báze,
M+ -(CH3)2CO2).
Příklad 37
Preparativní postup 17 (3R )-3-({[(1S)-2,2-Dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-[(3-fluor-4-fenyl)fenyl]hexanová kyselina
128
9 9
9 99
Způsobem popsaným v preparativním postupu 3a) (za použití l-brom-3-fluor-4-fenylbenzenu namísto l-brom-3-methyl-4-fenylbenzenu) a b) se získá terc.butyl-(3R,5E)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-l-fenylethyl]amino}karbony1)propyl]amino}karbony1)-6-[3-fluor-(4-fenyl)fenyl]hex-5-enoát ve formě bezbarvé pryskyřice. Podle ^H NMR produkt také obsahuje dva alkenové isomery, (5Z) a (4E). Této směsi alkenů se použije v následujícím stupni.
Rf 0,23 (hexan : ethylacetát, 3:1)
SH (400 MHz, CDC13) (pro (5E) isomer). 0,96 (9H, s), 1,39 (9H, s), 1,47 (3H, d, J = 6,5 Hz), 2,28 (1H, dt, J = 14 a 7 Hz), 2,37 (1H, dd, J = 4 a 15 Hz), 2,44 (1H, m), 2,62 (1H, dd, J = 8 a 15 Hz), 2,73 (1H, m), 4,16 (1H, d, J = 9 Hz), 5,03 (1H, pentet, J = 6,5 Hz), 5,88 (1H, br d), 6,06 (1H, dt, J = 7,5 a 15 Hz), 6,33 (1H, d, J = 15 Hz), 6,48 (1H, br d), 7,06 (2H, m), 7,19 (5H, m), 7,30 (1H, m), 7,39 (2H, t, J = 8 Hz), 7,48 (2H, d, J = 8 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 602 (MH+) a terč.butyl-(3R)-3-({[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethy1]amino}karbonyl)propyl]amino}karbony1)-6-[3-fluor-
-(4-fenyl)fenyl]hexanoát (702 mg, 72 % ) ve formě bezbarvé
pěny.
Rf 0,28 (hexan : ethylac etát, 3 : 1)
δΗ (400 MHZ, CDC13) 1,00 (9H, s) , 1,37 (9H, S), 1,46 (3H, d
J = 7 Hz), 1,50 (3H, m), 1,61 (1H, m), 2,28 (1H, m), 2,55
(4H, m), 4,16 (1H, d, J = 9 Hz ), 5,06 (1H, pentet, J = 7
Hz), 5,90 (1H, br d), 6, 42 (1H :, br d), 6,89 (2H, m), 7,22
(7H, komplex), 7,40 (2H, t, J = 7 Hz), 7,48 ( 2H, d, J = 7
Hz) .
LRMS (termosprej) m/z = 603 (M H+)
C37H47FN2°4 vypočteno C 73,66, H 7,88, N 4, 64,
Nalezeno: C 73,73, H 7,8 6, N 4 ,65 %
- 129 9 9 ·
999 9 ·· • · · • · • · • ·
c) Způsobem popsaným v preparativním postupu 1 se terč.butyl-(3R)-3-({[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-l-fenylethyl ]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-[3-fluor-(4-fenyl)fenyljhexanoát 4 hodiny při 20°C nechá reagovat s trifluoroctovou kyselinou. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (470 mg, 80 %) o teplotě tání 165 až 168°C (po trituraci s diisopropyletherem).
Rf 0,38 (ether : hexan : kyselina octová, 70 : 30 : 1) δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 0,87 (9H, s), 1,43 (3H, d, J = 7 Hz), 1,42 (4H, m), 2,20 (1H, dd, J = 3 a 15 Hz), 2,44 (3H, m), 2,79 (1H, m), 4,27 (1H, d, J = 10 Hz), 4,89 (1H, pentet,
J = 7 Hz), 6,97 (2H, m), 7,16 (5H, komplex), 7,32 (2H, m) , 7,45 (4H, m), 7,65 (1H, br d), 8,27 (1H, br d), 11,97 (1H, br s).
C33H39FN2°4 vypočteno C 72,52, H 7,24, N 5,09,
Nalezeno: C 72,50, H 7,19, N 5,12 %
FTIR vmax (KBr disk) 3300, 3070, 3030, 2965, 1710, 1633, 1543, 764, 700 cm-1
Preparativní postup 18
Methyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[ (IR)-1-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-(2S)-ethoxy-6-[(3-methyl-4-fenyl)fenyljhexanoát
130
99 99 99 99 • 9 9 9 9 9 9 9 9 · 9
9 999 9 '999 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9
9 99 9 9 99 99 9
a) Způsobem popsaným v preparativním postupu 15 a) se methyl-(2S,3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethy 1]amino}karbonyl)propy1]amino}karbony1)-2-ethoxyhex-5-enoát (415 mg, 0,96 mmol) (z preparativního postupu 8a) (396 mg, 0,92 mmol) nechá 16 hodin při teplotě zpětného toku reagovat s l-brom-3-methyl-4-fenylbenzenem (340 mg, 1,37 mol) za katalýzy palladiem v acetonitrilu. Výsledná směs se ochladí a nalije do ethylacetátu (70 ml). Ethylacetátová směs se pomryje 5% vodnou kyselinou citrónovou (20 ml) a nasyceným vodným chloridem sodným (50 ml), vysuší síranem hřoečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu hexan : ethylacetát. Získá se převážně methyl-(2S,3R,5E)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl1amino}karbonyl)propy1]amino}karbonyl)-(2S)-ethoxy-6-[(3-methyl-4-fenyl)fenyl]hex-5-enoát ve formě žluté pěny (415 mg, 75 %). Podle 3H NMR produkt také obsahuje dva alkenové isomery, (5Z) a (4E). Této směsi alkenů se použije v následujícím stupni (viz stupeň b).
Rf 0,51 (hexan : ethylacetát, 1:1) δΗ (400 MHz, CDC13) (pro (5E) isomer). 1,02 (9H, s), 1,26 (3H, t, J = 7 Hz), 1,50 (3H, d, J = 7 Hz), 2,24 (3H, s),
2,55 (1H, m), 2,73 (1H, m), 2,82 (1H, m), 3,45 (1H, pentet,
J = 7 Hz), 3,69 (1H, m a 3H, s, překrývání), 4,11 (1H, d,
J = 4 Hz), 4,14 (1H, d, J = 10 Hz), 5,12 (1H, pentet,
J = 7 Hz), 6,14 (1H, dt, 16 a 8 Hz), 6,46 (1H, d, J = 16 Hz), 6,50 (1H, br d), 7,24 (11H, komplex), 7,40 (3H, m).
b) Roztok methyl-(2S,3R,5E)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl—1—({[(IR)-1-fenylethyllamino}karbonyl)propyllamino}karbonyl ) -(2S)-ethoxy-6-[(3-methyl-4-fenyl)fenyl1hex-5-enoátu (415 mg, 0,70 mmol) v ethanolu (20 ml) se 2 hodiny hydrogenuje za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (40 mg) za tlaku 0,3 MPa při 20C. Vzniklá směs se přefiltruje přes pomocnou filtrační látku Arbocel a filtrát se zkoncentruje za sníže- 131 ·< ·« ·· 90 • 0 · 9 Λ 0 0 0 ·« 0 · · 0 0 0
000 0 90000 0
0 0 0 0 0
0· 00 0 0 0 ného tlaku. Zbytek se rozpustí v cyklohexanu a odpaří (dvakrát). Získá se methyl-(2R,3S)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethylJamino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-(2S)-ethoxy-6-(3-fluor-4-fenoxyfenyl)hexanoát (384 mg, 91 %) ve formě bezbarvé pěny, které se při postupu podle příkladu 12 použije bez dalšího přečištění.
Rf 0,48 (hexan : ethylacetát, 1:1)
SH (400 MHz, CDC13) 1,01 (9H, s), 1,14 (3H, t, J = 7 Hz), 1,49 (3H, d, J = 7 Hz), 1,65 (3H, m), 1,80 (1H, m), 2,24 (3H, s), 2,60 (3H, m), 3,40 (1H, dt, J = 16 a 8 Hz), 3,62 (1H, m), 3,70 (3H, S), 4,01 (1H, d, J = 5 Hz), 4,15 (1H, d,
J = 9 Hz), 5,13 (1H, pentet, J = 7 Hz), 6,41 (1H, br d),
6,92 (1H, d, J = 9 Hz), 7,00 (1H, d, J = 7 Hz), 7,03 (1H, s), 7,11 (1H, d, J = 7 Hz), 7,29 (7H, komplex), 7,30 (3H, m).
LRMS (termosprej) m/z = 602 (MH+)
132 t «« ·* »· ·· · • · · · · « · « · ··· • ·« ···«··· • · · · » ······ · · » ♦ » » · · · « · ·*· ·· ·· ** «♦ ·«·
Preparativní postup 19A terč.Buty1-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(1S)-2-methoxy-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-[3-methy1-(4-fenyl)fenyl]hexanoát
a) N-(dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimid (2,298 g, 12 mmol) se pod atmosférou dusíku při 0°C přidá k míchané směsi (2R)-2-[(2-terc.butoxy)-2-oxoethyl]pent-4-enové kyseliny (2,13 g, 10 mmol), benzylesteru L-terc.leucinu (2,834 g, 11 mmol) (N. Moss et al., J. Med. Chem., 1996, 39, 2178), N-methylmorfolinu (ě,40 ml, 22 mmol) a hydrátu 1-hydroxybenzotriazolu (1,836 g, 12 mmol) v bez133 • 9
• 9 «9 99 · 9 9 9 9 « 9 · 9 9
999 99 9 • 9 9 9 9 • 9 99 * 9 9 vodém dichlormethanu (50 ml). Výsledná směs se nechá pomalu bez odstavení chladicí lázně zahřát na teplotu místnosti.
Po 20 hodinách se reakční směs nalije do ethylacetátu (250 ml), promyje 5% vodnou kyselinou citrónovou (2 x 100 ml), nasyceným vodným hydrogenuhličitanem sodným (2 x 70 ml) a vodným chloridem sodným (70 ml), vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Olejovitý zbytek po přídavku pentanu vykrystaluje. Pevná látka se odfiltruje a vysuší. Získá se terc.butyl-(3R)-3-({[(lS)-2,2-dimethyl-l-(benzyloxykarbonyl)propyl]amino}karbonyl)hex-5-enoát (4,068 g, 97 %) ve formě bezbarvé pevné látky o teplotě tání 55 až 57°C.
Rf 0,37 (hexan : ethylacetát, 10 : 1) δΗ (300 MHZ, CDC13) 0,95 (9H, s), 1,42 (9H, s), 2,15 (1H, dt, 16 a 6,5 Hz), 2,39 (2H, m), 2,59 (1H, d, J = 10 Hz),
2,68 (2H, m), 4,50 (1H, d, J = 10 Hz), 5,00 (1H, d, J = 10 HZ), 5,04 (1H, d, J = 17 Hz), 5,13 (1H, d, J = 12 Hz), 5,19 (1H, d, J = 12 Hz), 5,71 (1H, m), 6,35 (1H, br d), 7,34 (5H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 418 (MH+)
b) Způsobem popsaným v preparativním postupu 3 a) se terč.butyl-(3R)-3-({[(lS)-2,2-dimethyl-l-(benzyloxykarbonyl)propyl]amino}karbonyl)hex-5-enoát (1,855 g, 7,5 mmol) za katalýzy palladiem 16,5 hodiny při teplotě zpětného toku v acetonitrilu nechá reagovat s 3-methyl-4-fenylbrombenzenem (1,855 g, 7,5 mmol) za přítomnosti N-ethylmorfolinu, jako báze. Po zpracování se produkt přečistí opakovanou mžikovou chromatografií za použití směsi hexanu a etheru v poměru 4 : 1 (první sloupec) a toluenu a etheru v poměru 20 : 1 (druhý sloupec) jako elučního činidla. Získá se převážně terč.butyl-(3R,5E)-3-({[(lS)-2,2-dimethyl-l-(benzyloxykarbony1)propyl]amino}karbonyl)-6-[3-methyl-(4-feny1)feny1]hex-5-enoát ve formě světle žluté pryskyřice (2,205 g, 75 %). Podle 1H NMR produkt také obsahuje dva alkenové
134 • 40 «4 40
4 4 0 4 · « · ♦ 4 • 04 4 4 4 0 0 4
0 *40 4 400 0 4
0 0 4» 4 44 *44 04 04 04 44 0 isomery, (5Z) a (4E). Této směsi alkenů se použije v následujícím stupni (viz stupeň c).
δΗ (400 MHz, CDC13) 0,95 (9H, s), 1,42 (9H, s), 2 ,26 (3H,
s) , 2,35 (1H, m), 2, ,45 (1H, dd, 3 a 17 Hz), 2,54 (1H, dt,
J = 15 a 6,5), 2,69 (1H, dd, J = 9 a 17 Hz), 2,77 (1H z m),
4, 52 (1H, d, J = 10 Hz) , 4,97 (1H, d, J = 12 Hz), 5,0 6 (1H,
d, J = 12 Hz), 6,16 (1H, dt, J = 18 a 7 Hz), 6,42 (2H z rn),
7, 29 (13H, komplex).
c) Roztok terč.butyl-(3R,5E)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l- (benzyloxykarbonyl)propyl]amino}karbony1)-6-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl]hex-5-enoát (2,205 g, 3,78 mmol) ve směsi ethanolu a vody v poměru 10 : 1 (44 ml) se 6 hodin hydrogenuje při teplotě místnosti za tlaku 0,3 MPa za přítomnosti 10% palladia na uhlíku. Výsledná směs se za důkledného promývání ethanolem přefiltruje přes pomocnou filtrační látku Arbocel. Filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí v toluenu a toluenový roztok se odpaří (třikrát). Zbytek se rozpustí v etheru a etherový roztok se odpaří (dvakrát). Zbytek se rozpustí v etheru a po přídavku hexanu se vysráží jako olej. Po odstranění rozpouštědla za sníženého tlaku se získá terč.butyl- ( 3R )-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-(karboxy)propyl]amino}karbonyl)-6-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl]hexanoát (1,817 g, 97 %) ve formě bezbarvé pěny o teplotě tání 51 až 56°C.
Rf 0,38 (hexan : ether : kyselina octová, 50 : 50 : l) δΗ (400 MHz, DMSO-d6) 0,94 (9H, s), 1,37 (9H, s a 1H, m, překrývání), 1,50 3H, m), 2,17 (3H, s), 2,23 (1H, m), 2,39 (1H, dd, J = 10 a 15 Hz), 2,53 (2H, m), 2,86 (1H, m), 4,10 (1H, d, J = 10 Hz), 7,05 (3H, m), 7,29 (3H, m), 7,40 (2H, t, J = 8 Hz), 7,90 (1H, br d).
LRMS (termosprej) m/z = 513 (MNH4 +)
d) 7-Azabenzotriazol-l-yloxytris(pyrrolidino)fosfoniumhexafluorfosfát (522 mg, 1,0 mmol) se pod atmosférou
- 135 « «· »· β«Ι ·« ··*« ··*· » · · • ·« «··· # · • · » · · · ··· · · · ····· · · · ··· ·· ·· «· ·· · dusíku při 0°C přidá k míchanému roztoku terc.butyl-(3R)-3({[(1S)-2,2-dimethyl-l-(karboxy)propyl]amino}karbonyl)-6-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl]hexoátu (496 mg, 1,0 mmol), (1S)-2-methoxy-l-fenylethylaminu (151 mg, 1,0 mmol) (J. Amer. Chem. Soc., 1995, 117, 10885) a kolidinu (267 μΐ, 2,0 mmol) v bezvodém dichlormethanu (5 ml). Po 1 hodině se vzniklý roztok míchá 2,75 hodiny při 20°C. Výsledná směs se nalije do ethylacetátu (70 ml) a ethylacetátová směs se promyje postupně 5% kyselinou citrónovou (2 x 50 ml), nasyceným vodným hydrogenuhličitanem sodným (2 x 50 ml) a chloridem sodným (50 ml). Organický roztok se vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití směsi hexanu a ethylacetátu v poměru 3 : 1 jako elučního činidla. Získá se terc.butyl-(3R)-3-({[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[(1S)-2-methoxy-1-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)—6—[3— -methyl-(4-fenyl)fenyl]hexanoát (537 mg, 85 %) ve formě bezbarvé pěny.
Rf 0,16 (hexan : ethylacetát, 4:1) δΗ (400 MHz, CDC13) 1,02 (9H, s), 1,40 (9H, s a 1H, m, překrývání), 1,55 (2H, m), 1,68 (1H, m), 2,23 (3H, s), 2,32 (1H, m), 2,55 (4H, m), 3,33 (3H, s), 3,62 (2H, d, J = 5 Hz), 4,28 (1H, d, J = 9 Hz), 5,12 (1H, dt, J = 8 a 5 Hz), 6,35 (1H, br d), 6,44 (1H, br d), 6,96 (1H, d, J = 8 Hz), 7,00 (1H, s), 7,10 (1H, d, J = 8 Hz), 7,26 (8H, komplex), 7,39 (2H, m).
LRMS (termosprej) m/z = 630 (MH+)
FTIR vmax (KBr disk) 3320, 2930, 1729, 1643, 1543, 1370,
1157 a 700 cm-1
Preparativní postup 19B terc.Butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(lS)-2-methoxy-lfenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-[3-methyl(4-fenyl)fenyl]hexanoát
136
a) 3-Methyl-4-fenylbrombenzen se alternativně syntetizuje takto: Směs 5-brom-2-jodtoluenu (5,01 g, 16,9 mmol), fenylboronové kyseliny (2,26 g, 18,5 mmol), octanu palladnatého (190 mg, 0,85 mmol), trifenylfosfinu (440 mg, 1,68 mmol) a 2M vodného uhličitanu sodného (25 ml) v acetonu (60 ml) se odplyní a 18 hodin zahřívá ke zpětnému toku. Reakční směs se poté ochladí a rozdělí mezi ether (200 ml) a vodu (100 ml). Organická vrstva se promyje vodným roztokem chloridu sodného (100 ml), vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Žlutý olejovitý zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití hexanu jako elučního činidla. Získá se 3-methyl-4-fenylbrombenzen (3,298 g, 79 %).
137 • ·· ·· ·· ·· • · * · · · · · · · · • ·· · · · · · · • · ··· · ····· ·
b) Roztok 3-methyl-4-fenylbrombenzenu (12,36 g,
50,0 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (30 ml) se pod atmosférou dusíku za míchání mechanickým míchadlem při teplotě zpětného toku přikape k suspenzi hořčíkových hoblin (1,33 g, 50 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (23 ml) obsahující krystal jodu. Po dokončení přídavku se reakční směs zředí bezvodým tetrahydrofuranem (55 ml) a v zahřívání se pokračuje 1 hodinu. Roztok arylmagnesiumbromidu se nechá zchladnout na teplotu místnosti, načež se injekční stříkačkou pod atmosférou dusíku při -40°C přikape k roztoku anhydridu glutarové kyseliny (6,27 g, 55 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (125 ml). Po 90 minutách při -40°C se směs nechá zahřát na 0°C a přidá se k ní kyselina chlorovodíková (1M, 250 ml). Vzniklá směs se extrahuje etherem (500 ml), pormyje vodným roztokem chloridu sodného (200 ml), vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití směsi dichlormethanu a methanolu v poměru 95 : 5 jako elučního činidla. Získá se 5-(3-methyl-4-fenyl)fenyl-5-oxopentanová kyselina ve formě světle hnědého oleje (8,6 g, 60 %), který následně vykrystaluje.
Teplota tání 91 až 94°C.
Rf 0,26 (dichlormethan : methanol, 95 : 5) δΗ (400 MHz, CDC13) 2,11 (2H, pentet, J = 7 Hz), 2,33 (3H, s), 2,50 (2H, t, J = 7 Hz), 3,11 (2H, t, J = 7 Hz), 7,31 (3H, m), 7,42 (3H, m), 7,84 (IH, d, J = 8 Hz), 7,90 (IH, s). LRMS (termosprej) m/z = 283 (MH+)
Nalezeno: C 76,49, H 6,48, C18H18°3 vypočteno C 76,57, H 6,43 %
c) Triethylsilan (1,4 ml, 8,75 mmol) se během 2 minut pod atmosférou dusíku při 0°C přikape k míchanému roztoku 5-(3-methyl-4-fenyl)fenyl-5-oxopentanové kyseliny (1,0 g, 3,5 mmol) v trifluoroctové kyselině (5 ml). Vzniklá směs se nechá zahřát na teplotu místnosti, 2 hodiny míchá a
- 138 nalije do vody (20 ml). Vodná směs se extrahuje dichlormethanem (3 x 15 ml). Spojené organické roztoky se promyjí vodným roztokem chloridu sodného, vysuší síranem hořečnatým a zkoncentrují za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografii za použití směsi dichlormethanu a methanolu v poměru 95 : 5 jako elučního činidla. Získá se směs [5-(3-methyl-4-fenyl)fenyl]pentanové kyseliny a triethylsilanolu v poměru 3 : 1 (1,1 g). Tato směs se rozpustí v hexanu (5 ml) a ke vzniklému roztoku se přidá hydrogenuhličitan sodný (290 mg, 3,5 mmol). Výsledná směs se míchá přes noc při tpelotě místnosti a zkoncentruje za sníženého tlaku. Pevný zbytek se trituruje s ethylacetátem a odfiltruje se [5-(3-methyl-4-fenyl)fenyl]pentanoát (820 mg, 80 %). Tato látka se smísí s chlorovodíkovou kyselinou a po extrakci rozpouštědlem se získá volná kyselina ve formě viskosní bezbarvé pryskyřice.
δΗ (400 MHz, CDC13) 1,74 (4H, m), 2,27 (3H, s), 2,43 (2H,
m), 2,65 (2H, m),7,06 (1H, d, J =8 Hz), 7,11 (1H, s), 7,16 (1H, d, J = 8 Hz), 7,33 (3H, m), 7,42 (2H, m).
LRMS (termosprej) m/z = 286 (MNH4 +)
Nalezeno: C 80,40, H 7,59, C18H20°2 vypočteno C 80,56, N 7,51 %
d) Oxalylchlorid (3,1 ml, 35,5 mmol) se pod atmosférou dusíku při -10°C přikape k míchanému roztoku [5-(3-methyl-4-fenyl)fenyl]pentanové kyseliny (6,80 g, 25,3 mmol) v bezvodém dichlormethanu (60 ml). Ke vzniklé směsi se přidá dimethylformamid (2 kapky). Po 10 minutách se reakční směs nechá zahřát na teplotu místnosti. Výsledný roztok se po 5 hodinách zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí v bezvodém toluenu a toluenový roztok se zkoncentruje za sníženého tlaku (dvakrát). Zbytek se rozpustí v hexanu (150 ml), roztok se 17 hodin nechá stát a poté přefiltruje přes pomocnou filtrační látku Arbocel, přičemž se filtrační koláč promývá větším množstvím hexanu. Filtrát se zkon139
centruje za sníženého tlaku. Získá se 5-[(3-methyl-4-fenyl)fenyl]pentanoylchlorid (7,1 g, 97 %).
δΗ (400 MHZ, CDC13) 1,77 (4H, m) , 2,26 (3H, s), 2,63 (2H, t, J = 6,5 Hz), 2,95 (2H, t, J = 6,5 Hz), 7,06 (1H, d, J = 8
Hz), 7,10 (1H, s), 7,36 (5H, m) .
Roztok n-butyllithia (9,92 ml, 2,5M v hexanech, 24,8 mmol) se během 15 minut pod atmosférou dusíku při -70 °C přikape k roztku 4-(S)-benzyloxazolidin-2-onu (4,39 g, 24,8 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (70 ml). Vzniklá směs na 30 minut nechá zahřát na -50°C, znovu ochladí na -70°C a během 15 minut se k ní přikape roztok [5-(3-methyl-4-fenyl)fenyl]pentanoylchloridu (7,1 g, 24,8 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (10 ml). Po 1 hodině se směs nechá zahřát a 0’C, načež se k ní rychle přidá 20% vodný chlorid amonný (75 ml). Výsledná směs se 15 minut míchá a poté extrahuje ethylacetátem (250 ml). Organická fáze se promyje vodou (3 x 250 ml), vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu 20 : 1 až 2 : 1. Získá se 4-(S)-benzyl-3-{[5-(3-methyl-4-fenyl)fenylJpentanoyl}oxazolidin-2-on (9,66 g, 91 %) ve formě bezbarvého oleje.
Rf 0,4 (pentan : ethylacetát, 3:1) δΗ (300 MHz, CDC13) 1,79 (4H, m), 2,28 (3H, s), 2,70 (2H, m), 2,79 (1H, dd, J = 10 a 13 Hz), 3,01 (2H, m), 3,32 (1H, dd, J = 3 a 13 Hz), 4,19 (2H, m), 4,70 (1H, m), 7,06-7,43 (13H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 445 (MNH4 +)
FTIR vmax (KBr disk) 2930, 1784, 1700, 1387, 1350, 1211,
702 cm-1.
Nalezeno: C 75,43, H 6,65, N 3,08, C28H29NO3*0·3CH2C12 vYP°čteno C 75,03, H 6,59, N 3,09 %
e) Roztok hexamethyldisilazidu sodného (31,3 ml, IM v tetrahydrofuranu, 31,3 mmol) se během 30 minut při -75 °C přikape k míchanému roztoku 4-(S)-benzyl-3-{[5-(3-methyl• ·
- 140 ·« • ·
-4-fenyl)fenyl]pentanoyl}oxazolidin-2-onu (13,39 g, 31,3 imttol) v bezvodém tetrahydrofuranu (100 ml). Ke vzniklé směsi se po 1 hodině během 20 minut přikape roztok terc.butylbromacetátu(4,95 ml, 33,5 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (10 ml). Během přídavku se teplota udržuje pod -70°C. Poté se reakční směs 2 hodiny míchá při této teplotě, nechá zahřát na -50°C a za rychlého míchání se k ní přidá 20% vodný chlorid amonný (150 ml). Vzniklá směs se nechá zahřát na 10°C a nalije do směsi ethylacetátu (400 ml) a vody (200 ml). Organická fáze se oddělí, promyje vodou (3 x 250 ml), vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se peřčistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu pentan : ether 20 : 1 až 1 : 1. Získá se terc.butyl-(3R)-[(4-(S)-4-benzyl-2-oxo-l,3-oxazolidin-3-yl)karbonyl]-6-(3-methyl-4-fenyl)fenyl)hexanoát ve formě bezbarvého oleje (10,4 g, 61 %).
Rf 0,6 (pentan : ether, 1:1) δΗ (300 MHz, CDC13) 1,45 (9H, s), 1,58 (1H, m), 1,74 (3H, m), 2,27 (3H, s), 2,51 (1H, dd, J = 5 a 18 Hz), 2,65 (2H, m), 2,80 (2H, m), 3,38 (1H, dd, J = 3 a 15 Hz), 4,16 (2H, d, J = 5 Hz), 4,25 (1H, m), 4,68 (1H, m), 7,04 (1H, d, J = 8 Hz), 7,08 (1H, s), 7,14 (1H, d, J = 8 Hz), 7,35 (10H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 542 (MH+), 560 (MNH4 +)
Nalezeno: C 74,55, H 7,40, N 2,44, C34H39NO5* θ'1 ether. 0,2 EtOAc vypočteno C 74,60, H 7,40,
N 2,47 %
FTIR Vmax (KBr disk) 2980, 2930, 1780, 1725, 1700, 1388,
1350, 1157, 768, 702 cm“1
f) 30% vodný peroxid vodíku (12,75 ml, 114 mmol) se při 0°C přikape k roztoku terc.butyl-(3R)-[(4-(S)-4-benzyl—2—oxo—1,3-oxazolidin-3-yl)karbonyl]-6-(3-methyl-4-fenyl)fenyl)hexanoátu (10,3 g, 19,0 mmol) ve směsi tetrahydrofuranu a vody v poměru 3 : 1 (400 ml). Ke vzniklé směsi se v jedné
141 »· · · · dávce přidá monohydrát hydroxidu lithného (1,595 g, 38,0 mmol). Reakční směs se 2 hodiny míchá při 0°C a 1 hodinu při 20°C, znovu ochladí na 0°C a během 15 minut se k ní přikape siřičitan sodný (15,56 g, 123,5 mmol) ve vodě (80 ml). Výsledná směs se 2,5 hodiny rychle míchá při 0°C, načež se její pH 2M kyselinou chlorovodíkovou nastaví na 6. Vzniklá směs se zkoncentruje na poloviční objem, okyselí 2M kyselinou chlorovodíkovou na pH 2 a extrahuje dichlormethanem (400 ml a 2 x 200 ml). Spojené extrakty se vysuší síranem hořečnatým a zkoncentrují za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu pentan : ether 15 : 1 až 1 : 4. Získá se terc.butyl-(3R)-3-(karboxy)-6-(3-methyl-4-fenyl)fenyl)hexanoát (7,05 g, 97 %) ve formě bezbarvého oleje.
Rf 0,5 (penthan : ether : kyselina octová, 30 : 70 : 1) δΗ (300 MHz, CDC13) 1,45 (9H, s), 1,63 (1H, m), 1,77 (4H, m), 2,26 (3H, m), 2,42 (dd, J = 5 a 17 Hz), 2,65 (3H, m), 2,87 (1H, m), 7,06 (2H, m), 7,15 (1H, d, J = 8 Hz), 7,34 (5H, m).
LRMS (termosprej) m/z = 400 (MNH4 +) [a]D = +12,9° (c=0,716, methanol, 25°C)
FTIR vmaJ£ (film) 2980, 2930, 1730, 1705, 1485, 1368, 1157, 764, 702 cm-1
Nalezeno: C 74,96, H 8,06.
C24H30°4’0'1H2° vypočteno C 75,01, H 7,92 %
g) Hydrochlorid N-(dimethylaminopropyl)-Ν'-ethylkarbodiimidu (3,50 g, 18,26 mmol) se pod atmosférou dusíku při 4°C přidá k míchané směsi hydrochloridu (2S)-amino-3,3-dimethyl-N-[(1S)-2-methoxy-l-fenylethyl]butanamidu (z preparativního postupu la) (6,78 g, 17,43 mmol s obsahem 1 mol. ekv. dioxanu), terc.butyl-(3R)-3-(karboxy)-6-(3-methyl-4-fenyl)fenyl)hexanoátu (6,35 g, 16,6 mmol), hydrátu l-hydroxy-l,2,3-benzotriazolu (2,80 g, 20,75 mmol) a diisopropylethylaminu (5,9 ml, 34,03 mmol) v bezvodém dichlor142 methanu (82 ml). Po 2 hodinách se reakční směs se nechá zahřát na teplotu místnosti a po 17 hodinách při teplotě místnosti nalije do ethylacetátu (600 ml). Ethylacetátová směs se postupně promyje 5% kyselinou citrónovou (2 x 250 ml), nasyceným vodným hydrogenuhličitanem sodným (2 x 250 ml) a vodným chloridem sodným (200 ml), vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí v etheru a etherový roztok se odpaří, získá se terč.Butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(1S)-2-methoxy-lfenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-[3-methyl-(4-fenyl)fenylJhexanoát (10,35 g, 99 %) ve formě bezbarvé pěny.
Nalezeno: C 73,99, H 8,31, N 4,51, C39H52N2°5-°,04EtOAc VYPOčteno c 74,38, H 8,34, N 4,43 %
Preparativní postup 20
4-Jod-l-(3-methoxyfenyl)-2-methylbenzen
a) Roztok 2-brom-5-nitrotoluenu (40,0 g, 185 mmol) v 1,2-dimethoxyethanu (600 ml) se pod atmosférou dusíku při teplotě místnosti přidá k tetrakis(trifenylfosfin)palladiu(0) (9,77 g, 9,25 mmol). Ke vzniklé směsi se přidá roztok 3-methoxyfeny-lboronové kyseliny (31,5 g, 207 mmol) v ethanolu (150 ml) a poté 2M vodný uhličitan sodný (800 ml). Reakční směs se za rychlého míchání mechanickým míchadlem 18 hodin
143 zahřívá ke zpětnému toku, poté ochladí a rozdělí mezi ethylacetát a vodu. Organická fáze se vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí chromátografií na sloupci silikagelu za použití směsi hexanu a ethylacetátu nejprve v poměru 98 : 2 a poté 95 : 5 jako elučního činidla. Získá se l-(3-methoxyfenyl)-2-methyl-4-nitrobenzen (40,55 g, 90 %).
δΗ (400 MHz, CDC13) 2,38 (3H, s), 3,85 (3H, s), 6,83 (1H,
S), 6,88 (1H, d, J = 8 Hz), 6,96 (1H, d, J = 8 Hz), 7,38 (2H, m), 8,02 (1H, d, J = Hz), 8,14 (1H, s).
LRMS (termosprej) m/z = 261 (MNH4 +)
b) l-(3-Methoxyfenyl)-2-methyl-4-nitrobenzen (23,4 g, 96 mmol) se rozpustí ve směsi ethanolu a ethylacetátu v poměru 3 : 1 (470 ml). Vzniklý roztok se hydrogenuje 2 hodiny za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (2,3 g) za tlaku 0,3 MPa při 20°C. Reakční směs se přefiltruje přes pomocnou filtrační látku Arbocel za promývání ethylacetátem. Filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Získá se 4-amino-l-(3-methoxyfenyl)-2-methylbenzen (20,8 g, 100 %) ve formě růžovohnědého oleje.
Rf 0,06 (hexan : ethylacetát, 90 : 10)
5H (400 MHz, CDC13) 2,22 (3H, s), 3,65 (2H, br s), 3,84 (3H, S), 6,59 (2H, m), 6,87 (3H, m), 7,04 (1H, d, J = 8 Hz), 7,28 (1H, m).
c) Míchaný roztok 4-amino-l-(3-methoxyfenyl)-2-methylbenzenu (5,0 g, 23,4 mmol) a jodu (2,97 g, 25,8 mmol) v toluenu (120 ml) se zahřeje na 50°C a přidá se k němu roztok isoamylnitritu (3,46 ml, 25,8 mmol) v toluenu (50 ml). Výsledná směs se 2 hodiny zahřívá na 90°C, ochladí a za sníženého tlaku se z ní odstraní toluen. Zbytek se rozpustí v dichlormethanu. Dichlormethanový roztok se promyje nadbytkem 5% vodného disiřičitanu sodného, aby se odstranil jod. Organický roztok se vysuší síranem sodným a zkoncentru144
je za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí opakovanou mžikovou chromatografií, přičemž první sloupec se eluuje gradientem hexan : ethylacetát, počínaje čistým hexanem; a druhý sloupec se eluuje hexanem. Získá se 4-jod-l-(3-methoxyfenyl)-2-methylbenzen ve formě světle oranžového oleje (5,63 g, 74 %).
Rf 0,49 (hexan ; ethylacetát, 90 : 10) δΗ (400 MHz, CDC13) 2,23 (3H, s), 3,84 (3H, s), 6,81 (1H, s), 6,86 (1H, d, J = 8 Hz), 6,90 (1H, d, J = 8 Hz), 6,95 (1H, d, J = 8 Hz), 7,32 (1H, t, J = 8 Hz), 7,55 (1H, d,
J = 8 Hz), 7,47 (1H, s).
Preparativní postup 21 terč.Butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(1S)-2-methoxy-l-f enylethy1]amino}karbonyl)propyl]amino]karbonyl)-6-(3'-methoxy-2-methylbifen-4-yl)hexanoát
145 ·«
a) Způsobem popsaným v preparativním postupu 3a se terč.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-(benzyloxykarbonyl)propyl]amino}karbonyl)hex-5-enoát (2,085 g, 5,0 mmol) za katalýzy palladiem při teplotě zpětného toku za použití N-ethylmorfolinu jako báze, v acetonitrilu, po dobu 14,5 hodiny nechá reagovat s 4-jod-l-(3-methoxyfenyl)-2-methylbenzenem (z preparativního postupu 20) (889 mg, 2,13 mmol). Výsledná směs se zpracuje a produkt se přečistí mžikovou chromatografií za použití směsi hexanu a ethylacetátu jako elučního činidla. Získá se převážně terč.butyl-(3R,5E)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-(benzyloxykarbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-(3'-methoxy-2-methylbifen-4-yl)hex-5-enoát ve formě světle žluté pryskyřice (1,043 g, 80 %). Podle NMR produkt také obsahuje dva alkenové isomery, (5Z) a (4E).
Této směsi alkenů se použije v následujícím stupni (viz stupeň b).
SH (400 MHz, CDC13) 0,95 (9H, s), 1,43 (9H, s), 2,26 (3H, s), 2,36 (1H, m), 2,45 (1H, dd, 3 a 17 Hz), 2,55 (1H, dt,
J = 14 a 7), 2,68 (1H, dd, J = 9 a 17 Hz), 2,77 (1H, m),
3,80 (3H, s), 4,50 (1H, d, J = 10 Hz), 4,97 (1H, d, J = 12 Hz), 5,07 (1H, d, J = 12 Hz), 6,16 (1H, dt, J = 18 a 7 Hz), 6,40 (2H, m), 6,85 (3H, m), 7,30 (9H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 614 (MH+)
b) Způsobem popsaným v preparativním postupu 19c se terč.butyl-(3R,5E)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-(benzyloxykarbonyl ) propyl ] amino} karbonyl ) -6- ( 3 '-methoxy-2-methylbifen-4-yl)hex-5-enoát (1,040 g, 1,69 mmol) hydrogenuje za přítomnosti 10% palladia na uhlíku. Získá se terc.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-(karboxy)propyllamino}karbonyl)-6-(3'-methoxy-2-methylbifen-4-yl)hexanoát (664 g, 75 %) ve formě bezbarvé pěny.
Rf 0,33 (hexan : ether : kyselina octová, 50 : 50 : 1) δΗ (400 MHz, CDC13) 1,02 (9H, s), 1,42 (9H, s), 1,47 (1H, m), 1,66 (2H, m), 1,77 (1H, m), 2,25 (3H, s), 2,37 (1H, m),
146
2,63 (3H, m), 3,83 (3H, s), 4,48 (1H, d, J = 10 Hz), 6,43 (1H, br d), 6,87 (3H, m), 7,03 (2H, m) , 7,13 (1H, d, J = 8 Hz), 7,28 (1H, m).
LRMS (termosprej) m/z = 526 (MH+)
c) Způsobem popsaným v preparativním postupu 19d se terč.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-(karboxy)propyl]aminojkarbonyl)-6-(3'-methoxy-2-methylbifen-4-yljhexanoát (660 mg, 1,26 mmol) nechá reagovat s (1S)-2-methoxy-l-fenylethylaminem (190 mg, 1,260 mmol). Po výše popsaném zpracování a mžikové chromatografii za použití směsi hexanu a ethylacetátu v poměru 3 : 1 jako elučního činidla. Získá se terč.butyl-(3R)-3-({[(lS)-2,2-dimethyl-l-({[(lS)-2-methoxy-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]amino]karbonyl)-6-(31-methoxy-2-methylbifen-4-yljhexanoát (672 mg, 81 %) ve formě bezbarvé pěny.
Rf 0,16 (hexan : ethylacetát, 4:1) δΗ (400 MHz, CDC13) 1,02 (9H, s), 1,40 (9H, s a 1H, m, překrývání), 1,55 (2H, m), 1,68 (1H, m), 2,23 (3H, s), 2,33 (1H, m), 2,56 (4H, m), 3,33 (3H, m), 3,82 (3H, s), 4,29 (1H, d, J = 9 Hz), 5,13 (1H, dt, J = 8 a 5 Hz), 6,35 (1H, br
d), 6,45 (1H, br d), 6,86 (3H, m), 6,96 (1H, d, J = 8 Hz),
7,00 (1H, s), 7,10 (1H, d, J = 8 Hz), 7,26 (6H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 659 (MH+)
Nalezeno: C 72,15, H 8,21, N 4,17, C40H54N2°6*í/2H2° vypočteno C 71,93, H 8,30, N 4,19 %
Preparativní postup 22 (2R)-5-{[4-(4-Kyanofenyl)-3-methyl]fenyl)-2-[(4S)-2,2,dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(1R)-1-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]pentanamid
147 • 00 · · 9 90
00000 00 00 0 0 ♦
a) Způsobem popsaným v preparativním postupu 15a se ( 2R)-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino)karbonyl)propyl]pent-4-enamid (z preparativniho postupu 14) (430 mg, 1,0 mmol) za katalýzy palladiem při teplotě zpětného toku v acetonitrilu po dobu 16 hodin nechá reagovat s l-(4-kyanofenyl)-4-jod-2-methylbenzenem (z preparativniho postupu 23) (479 mg, 1,5 mmol). Reakční směs se ochladí a rozdělí mezi ethylacetát (3 x 30 ml) a nasycený vodný hydrogenuhličitan sodný (30 ml). Spojené organické roztoky se vysuší síranem sodným a zkoncentrují za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití směsi dichlormethanu a methanolu v poměru 97,5 : 2,5 jako elučního činidla. Získá se převážně (2R,4E)-5-{[4-(4-kyanofenyl)-3-methyl]fenyl}-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]amino}karbony1)propyl]99
·· *♦
148 • 9 99 pent-4-enamid ve formě žlutohnědé pěny (403 mg, 65 %). Podle q
H NMR produkt také obsahuje alkenové isomery.
Této směsi alkenů se použije v následujícím stupni (viz stupeň b).
Rf 0,41 (dichlormethan : methanol, 95 : 5) δΗ (400 MHz, CDCl-j) (pro (4E) isomer). 1,00 (9H, s), 1,46 (3H, d, J = 7,5 Hz), 1,54 (3H, s), 1,59 (3H, s), 2,20 (3H,
S), 2,70 (1H, m), 2,81 (2H, m), 4,20 (1H, d, J = 9 Hz) ,
4,60 (1H, d, J = 4,5 Hz), 5,04 (1H, pentet, J = 7,5 Hz),
5,82 (1H, d, J = 7,5 Hz), 6,62 (1H, dt, 16 a 7 Hz), 6,50 (1H, d, J = 16 HZ), 6,58 (1H, d, J = 9 Hz), 7,10 (1H, d,
J = 8 Hz), 7,15-7,30 (7H, m), 7,38 (2H, d, J = 8 Hz) , 7,70 (2H, d, J = 8 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 564 (MH+ - aceton), 547
b) Roztok (2R,4E)-5-{[4-(4-kyanofenyl)-3-methyl]fenyl} -2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[ (IR)-1-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]pent-4-enamidu (403 mg, 0,65 mmol) v ethanolu (70 ml) se 5,5 hodiny hydrogenuje za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (40 mg) za tlaku 0,3 MPa při 20°C. Vzniklá směs se přefiltruje přes pomocnou filtrační látku Arbocel a filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Získá se (2R)-5-{[4-(4-kyanofenyl)-3-methyl]fenyl}-2-[ (4S )-2,2 ,dimethyl-5-oxo-l, 3-dioxolan-4-yl]-N-[ (1S)-2,2-dimethyl-l-({[ (IR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]pentanamid (384 mg, 61 %) ve formě bezbarvé prvné látky, které se použije při postupu podle příkladu 17 bez přečištění.
δΗ (400 MHz, CDC13) 1,00 (9H, s), 1,48 (3H, d, J = 7 Hz) ,
1,50 (3H, s), 1,55 (3H, s), 1,62 (2H, m), 1,68 (2H, m) ,
2,20 (3H, s), 2,60 (3H, m), 4,18 (1H, d, J = 9,5 Hz), 4,45 (1H, d, J = 6 Hz), 5,08 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,86 (1H, d,
J = 7 Hz), 6,50 (1H, d, J = 9,5 Hz), 7,00-7,10 (3H, m) , 7,15-7,30 (5H, m), 7,40 (2H, d, J = 7,5 Hz), 7,70 (2H, d,
J = 8,5 Hz).
- 149 ··· · ·
LRMS (termosprej) m/z = 624 (MH+), 641 (MNH4 +)
Preparativní postup 23
1-(4-Kyanofenyl)-4-j od-2-methylbenzen
0aN
CH,
Br a)
a) Směs 2-brom-5-nitrotoluenu (7,05 g, 32,67 mmol), 4-kyanofenylboronové kyseliny (Tet. Lett. 1993, 34, 8237) (6,0 g, 40,83 mmol), fluoridu česného (11,02 g, 72, 53 mmol) a tri(2-methylfenyl)fosfinu (1,0 g, 3,27 mmol) v 1,2-dimethoxyethanu (240 ml) se 40 minut míchá pod atmosférou dusíku při teplotě místnosti, načež se k ní přidá tris(dibenzylidenaceton)dipalladium (1,5 g, 1,63 mmol). Reakční směs se 10 minut míchá při teplotě místnosti, 4 hodiny zahřívá na 80°C, ochladí a rozdělí mezi ethylacetát a nasycený vodný hydrogenuhličitan sodný. Organická fáze se oddělí, pormyje vodou, vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Získá se surový l-(4-kyanofenyl)-2-methyl-4-nitrobenzen (9,78 g), kterého se použije bez dalšího přečištění.
Rf 0,89 (dichlormethan) δΗ (300 MHz, CDC13) 2,35 (3H, s), 7,35 (1H, d, J = 8 Hz), 7,45 (2H, d, J = 8 Hz), 7,68 (2H, d, J = 8 Hz), 8,10 (1H, d, J = 8 Hz), 8,18 (1H, s).
150 • «
b) l-(4-Kyanofenyl)-2-methyl-4-nitrobenzen (9,7 g, 40,76 mmol) se rozpustí ve směsi methanolu a dichlormethanu v poměru 1 : 1 (400 ml). Vzniklý roztok se 18 hodin hydrogenuje za přítomnosti palladia na uhlíku (970 mg) za tlaku 0,3 MPa při 20’C. Reakční směs se přefiltruje přes pomocnou filtrační látku Arbocel a filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu hexan : ethylacetát 20 : 1 až 1 : 1. Získá se 4-amino-l-(4-kyanofenyl)-2-methylbenzen (2,5 g, 30 %) ve formě hnědého oleje.
Rf 0,20 (hexan : ethylacetát, 3:1) δΗ (400 MHz, CDC13) 2,20 (3H, s), 3,75 (2H, br s), 6,60 (2H, m), 7,00 (1H, d, J = 8 Hz), 7,40 (2H, d, J = 8 Hz),
7,66 (2H, d, J = 8 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 226 (MNH4 +)
c) Suspenze 4-amino-l-(4-kyanofenyl)-2-methylbenzenu (250 mg, 1,2 mmol) v koncentrované kyselině chlorovodíkové (1,3 ml) a vodě (1,6 ml) se během 10 minut při 0°C smísí s roztokem dusitanu sodného (183 mg, 2,65 mmol) ve vodě (1 ml). Výsledná směs se 20 minut míchá, načež se k ní během 10 minut přidá roztok jodidu draselného (840 mg, 5,06 mmol) ve vodě (2 ml). Vzniklá směs se 2 hodiny zahřívá na 90°C, ochladí a extrahuje dichlormethanem (3 x 30 ml). Spojené organické extrakty se promyjí 5% vodným disiřičitanem sodným (4 x 30 ml), aby se odstranil jod. Organický roztok se vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gracientu hexan : ethylacetát 20 : 1 až 10 : l. Získá se 1—(4-kyanofenyl)-4-jod-2-methylbenzen ve formě bílé pevné látky (263 mg, 69 %).
Rf 0,62 (hexan : ethyl acetát, 4:1) δΗ (300 MHz, CDC13) 2,20 (3H, s), 6,92(1H, d, J = 8 Hz),
7,40 (2H, d, J = 8 Hz), 7,60 (1H, d, J = 8 Hz), 7,68 (1H, s), 7,74 (2H, d, J = 8 Hz).
151
LRMS (termosprej) m/z = 319 (MH+)
Preparativní postup 24 (2R)-5-{[4-(3-Kyanofenyl)-3-methyl]fenyl}-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]amino}karbonyl)propylJpentanamid
a) Octan palladnatý (12,2 mg, 0,050 mmol) se pod atmosférou dusíku přidá k míchanému roztoku (2R)-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]pent-4-enamidu (z preparativního postupu 14) (430 mg, 1,0 mmol), l-(3-kyanofenyl)-4-jod-2-methylbenzenu (z preparativního postupu 25) (457 mg, 1,50 mmol), tri-(2-methylfenyl)fosfinu (30 mg, 0,10 mmol) a N-ethylmorfolinu (190 μΐ, 1,5 mmol) v bezvodém acetonitrilu (3 ml). Reakční směs se promyje dusíkem, 14 hodin zahřívá ke zpětnému toku, ochladí a rozpustí v ethylacetátu (100 ml). Ethylacetátový roztok se
152 » , · · · · ··♦ • · · · » » ««« ·· ** *· ·» • * ·
promyje vodou (100 ml), 0,5M vodným dihydrogenfosforečnanem sodným (50 ml) a nasyceným vodným hydrogenuhličitanem sodným (50 ml). Organický roztok se vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografii za použití elučního gradientu hexan : ethylacetátu 3 : 1 až 1 : 1. Získá se převážně (2R,4E)-5-{[4-(3-kyanofenyl)-3-methyl]fenyl}-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-1,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]pent-4-enamid ve formě žlutohnědé pěny (385 mg, 62 %). Podle -^H NMR produkt také obsahuje alkenové isomery. Této směsi alkenů se použije v následujícím stupni (viz stupeň b).
Rf 0,27 (dichlormethan : ethyl acetát, 10 : 1) δΗ (400 MHz, CDC13) (pro (4E) isomer). 1,01 (9H, s), 1,50 (3H, d, J = 7 Hz), 1,55 (3H, s), 1,60 (3H, s), 2,20 (3H, s),
2,70 (1H, m), 2,82 (2H, m), 4,18 (1H, d, J = 8,5 Hz), 4,58 (1H, d, J = 5 Hz), 5,04 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,84 (1H, d,
J = 7 Hz), 6,16 (1H, dt, 16 a 7 Hz), 6,50 (1H, d, J = 16 Hz), 6,58 (1H, d, J = 8,5 Hz), 7,05 (1H, d, J = 8 Hz), 7,10-7,40 (8H, komplex), 7,54 (2H, m), 7,62 (1H, m) .
LRMS (termosprej) m/z = 639 (MNH4 +)
Nalezeno: C 72,88, H 7,05, N 6,63, C38H43N3°5·0·25H2° vYP°čteno C 72,88, H 7,00, N 6,71 %
b) Roztok (2R,4E)-5-{[4-(3-kyanofenyl)-3-methyl]fenyl}-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(1R)-1—fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]pent-4-enamidu (359 mg, 0,58 mmol) v ethanolu (35 ml) se 6 hodin hydrogenuje za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (35 mg) za tlaku 0,3 MPa při 20°C. Výsledná směs Se přefiltruje přes pomocnou filtrační látku Arbocel a filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se azeotropicky odpaří s ethylacetátem a poté s diethyletherem. Olejovitý zbytek se přečistí mžikovou chromatografii za použití elučního gradientu hexan : ethylacetát 5 : 1 až 1 : 1, poté triturací
153
4
4«
4 4 • ·
4 · • · 4 • 4 44 »
4 • 44
4 • ·
4 d * s pentanem a vykrystaluje. Získá se (2R)-5-{[4-(3-kyanofenyl)-3-methyl]fenyl}-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl ] amino}karbony1)propylJpentanamid (139 mg, 38 %) ve formě bílé pevné látky, které se použije při postupu podle příkladu 19.
Rf 0,40 (hexan : ethyl acetát, 1:1)
SH (400 MHz, CDC13) 1,02 (9H, s), 1,52 (3H, d, J = 7 Hz), 1,55 (3H, s), 1,58 (3H, s), 1,64 (2H, m), 1,90 (2H, m) ,
2.20 (3H, s), 2,60 (3H, m), 4,20 (1H, d, J = 9,5 Hz), 4,46 (1H, d, J = 7,5 Hz), 5,08 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,86 (1H, d, J = 7 Hz), 6,50 (1H, d, J = 9,5 Hz), 6,98_7,08 (3H, m) ,
7.20 (5H, m), 7,50 (2H, m), 7,55 (1H, s), 7,60 (1H, m) .
LRMS (termosprej) m/z = 641 (MNH4 +)
Nalezeno: C 72,99, H 7,36, N 6,75, C38H45N3°5 vypočteno C 73,17, H 7,27, N 6,74 %
Preparativní postup 25
1-(3-Kyanofenyl)-4-jod-2-methylbenzen
a) Roztok 2-brom-5-nitrotoluenu (8,82 g, 40,83 mmol) v 1,2-dimethoxyethanu (150 ml) se pod atmosférou dusíku při teplotě místnosti přidá k roztoku tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0) (2,35 g, 2,04 mmol) v 1,2-dimethoxyethanu (100 ml). Ke vzniklé směsi se přidá roztok
154
3-kyanofenylboronové kyseliny (J. Med. Chem., 1997, 40,
4208 (9,0 g, 61,25 mmol) v ethanolu (45 ml). Výsledná směs se 10 minut míchá, načež se k ní přidá 2M vodný uhličitan sodný (234 ml). Reakční směs se 18 hodin zahřívá ke zpětnému toku, ochladí a rozdělí mezi ethylacetát a nasycený vodný hydrogenuhličitan sodný. Organická fáze se promyje vodou, vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se trituruje s diethyletherem. Získá se l-(3-kyanofenyl)-2-methyl-4-nitrobenzen (8,48 g, 87 %) ve formě hnědé pevné látky.
Rf 0,74 (hexan : ethyl acetát, 1:1) δΗ (300 MHz, CDC13) 2,35 (3H, s), 7,38 (1H, d, J = 8 Hz), 7,52-7,68 (3H, m), 7,75 (1H, d, J = 8 Hz), 8,15 (1H, d,
J = 8 Hz), 8,20 (1H, s).
LRMS (termosprej) m/z = 239 (MH+)
b) l-(3-Kyanofenyl)-2-methyl-4-nitrobenzen (3,0 g, 12,61 mmol) a dihydrát chloridu cínatého se suspendují v ethanolu (30 ml). Vzniklá suspenze se 30 minut zahřívá na 70°C, ochladí, nalije na led a neutralizuje přídavkem hydrogenuhličitanu sodného. Vzniklá směs se extrahuje dichlormethanem (3 x 50 ml). Spojené organické vrstvy se vysuší síranem sodným a zkoncentrují za sníženého tlaku. Získá se 4-amino-l-(3-kyanofenyl)-2-methylbenzen (1,8 g, 69 %) ve formě žlutého oleje.
Rf 0,36 (hexan : ethyl acetát, 2:1) δΗ (300 MHz, CDC13) 2,20 (3H, s), 3,75 (2H, br s), 6,60 (2H, m), 7,00 (1H, d, J = 8 Hz), 7,42-7,60 (4H, m) .
c) Suspenze 4-amino-l-(3-kyanofenyl)-2-methylbenzenu (2,5 g, 12,0 mmol) v koncentrované kyselině chlorovodíkové (13 ml) a vodě (16 ml) se během 10 minut při 0°C smísí s roztokem dusitanu sodného (1,83 g, 26,5 mmol) ve vodě (10 ml). Vzniklá směs se 20 minut míchá, načež se k ní během 10 minut přidá jodid draselný (8,40 g, 50,6 mmol) ve
155
vodě (20 ml). Reakční směs se 2 hodiny zahřívá na 80°C, poté ochladí a extrahuje dichlormethanem. Spojené organické extrakty se promyjí nadbytkem 5% vodného disiřičitanu sodného, aby se odstranil jod. Organický roztok se vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu hexan : ethylacetát 20 : 1 až 10 : 1. Získá se l-(3-kyanofenyl)-4-jod-2-methylbenzen ve formě bílé pevné látky (1,105 g, 29 %).
Rf 0,67 (hexan : ethyl acetát, 4:1) δΗ (300 MHZ, CDC13) 2,20 (3H, s), 6,90 (1H, d, (J = 8 Hz), 7,45-7,75 (6H, komplex).
LRMS (APCI) m/z = 319 (MH+)
Preparativní postup 26 (2R)-5-{[4-(3-Karbamoylfenyl)-3-methyl]fenyl}—2—[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[ (lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]pentanamid
156
a) Octan palladnatý (10,4 mg, 0,042 mmol) se pod atmosférou dusíku přidá k míchanému roztoku (2R)-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(IR)-1-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]pent-4-enamidu (z preparativního postupu 14) (366 mg, 0,85 mmol),
1-(3-karbamoylfenyl)-4-jod-2-methylbenzenu (z preparativního postupu 27) (300 mg, 0,89 mmol), tri-(2-methylfenyl)fosfinu (27 mg, 0,09 mmol) a N-ethylmorfolinu (115 μΐ, 0,89 mmol) v bezvodém acetonitrilu (3 ml). Reakční směs se promyje dusíkem, 3 hodiny zahřívá ke zpětnému toku, přidá se k ní další octan palladnatý (10,4 mg, 0,042 mmol), v refluxování se pokračuje 60 minut. Další dávky octanu palladnatého (10,4 mg, 0,042 mmol) se přidávají v 60 minutových intervalech po dobu refluxu 8 hodin. Poté se reakční směs ochladí a zředí acetonitrilem (10 ml). Acetonitrilová směs se za promývání ethylacetátem (100 ml) přefiltruje přes pomocnou filtrační látku Arbocel. Filtrát se promyje 0,5% vodným hydrogenuhličitaném sodným (50 ml), vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu dichlormethan : ethylacetátu 10 : 1 až 1 : 1. Získá se (2R,4E)-5-{[4-(3-karbamoylfenyl)-3-methyl]fenyl}-2-[(4S) -2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]pent-4-enamid ve formě žluté pěny (175 mg, 32 %).
Rf 0,20 (dichlormethan : ethyl acetát, 1:1) δΗ (400 MHz, CDC13) 1,02 (9H, s), 1,50 (3H, d, J = 7 Hz), 1,54 (3H, s), 1,60 (3H, s), 2,20 (3H, s), 2,70 (1H, m),
2,78 (1H, m), 2,78 (1H, m), 2,88 (1H, m), 4,22 (1H, d, J =
8,5 Hz), 4,60 (1H, d, J = 5,5 Hz), 5,04 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,94 (2H, br s), 6,00 (1H, d, J = 7 Hz), 6,12 (1H, dt,
J = 16 a 7 Hz), 6,48 (1H, d, J = 16 Hz), 6,82 (1H, d, J =
8,5 Hz), 7,08 (1H, d, J = 7,5 Hz), 7,14 (1H, m), 7,18-7,36 (5H, komplex), 7,40-7,52 (3H, m), 7,60 (1H, s), 7,80 (1H, d, J = 7,5 Hz).
157 ·· · · · · · · • ··· · ····· ·
LRMS (termosprej) m/z - 657 (MNH4 +)
Nalezeno: C 70,59, H 7,16, N 6,42, C38H45N3°6*0z2Et0Ac vypočteno C 70,89, H 7,14, N 6,39 %
b) Roztok (2R,4E)-5-{[4-(3-karbamoylfenyl)-3-methyl]fenyl}-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]pent-4-enamidu (160 mg, 0,25 mmol) v ethanolu (50 ml) se 8 hodin hydrogenuje za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (25 mg) za tlaku 0,3 MPa při 20°C. Výsledná směs se přefiltruje přes pomocnou filtrační látku Arbocel a filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se azeotropicky odpaří s ethylacetátem a poté s diethyletherem. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu hexan : ethylacetát 5 : 1 až 1:3a poté azeotropickou destilací s diethyletherem. Získá se (2R)-5-{[4-(3-karbamoylfenyl)-3-methyl]fenyl}-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimethyl-l-({[(lR)-l-fenylethyl]amino}karbonyl)propyl]pentanamid (82 mg, 51 %) ve formě bílé pevné látky, které se použije při postupu podle příkladu 20.
Rf 0,17 (hexan : ethyl acetát, 1:3) δΗ (400 MHz, DMSO) 0,92 (9H, s), 1,30 (3H, d, J = 7 Hz),
1.40- 1,60 (9H, komplex), 1,78 (1H, m), 2,15 (3H, s),
2.40- 2,60 (2H, m), 2,98 (1H, m), 4,38 (1H, d, J = 9 Hz),
4,46 (1H, d, J = 9 Hz), 4,92 (1H, pentet, J = 7 Hz), 6,98 (1H, d, J = 7,5 Hz), 7,02 (2H, m), 7,12 (3H, m), 7,20 (2H, m), 7,30 (1H, br s), 7,40 (1H, d, J = 7,5 Hz), 7,50 (1H, t,
J = 7,5 Hz), 7,80 (3H, m), 8,00 1H, br s), 8,40 (1H, d,
J = 7 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 664 (MNa+)
Nalezeno: C 70,26, H 7,59, N 6,36, C38H47N3°6-°'25Et0Ac vypočteno C 70,56, H 7,44, N 6,33 %
158
Preparativní postup 27
1-(3-Karbamoylfenyl)-4-jod-2-methylbenzen
Hydroxid draselný (1,21 g, 21,6 mmol) se přidá k roztoku 1-(3-kyanofenyl)-4-jod-2-methylbenzenu (1,27 g, 4,0 mmol) v ethanolu (50 ml). Vzniklá směs se 16 hodin zahřívá ke zpětnému toku, ochladí a zředí vodou (100 ml). Vodná směs se extrahuje ethylacetátem (3 x 50 ml). Spojené organické extrakty se vysuší síranem sodným a zkoncentrují za sníženého tlaku, čímž se získá surový produkt (1,08 g). Tento surový produkt (540 mg) se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu dichlormethan : nasycený methanolický amoniak 100 : 2,5 až dichlormethan : ethylacetát 1 : l až dichlormethan : ethylacetát : kyselina octová 100 : 100 : 4 a poté azeotropicky odpaří s ethanolem, ethylacetátem a diethyletherem. Získá se 1-(3-karbamoylfenyl)-4-jod-2-methylbenzen (310 mg, 46 %) ve formě žlutohnědé pevné látky o teplotě tání 138 až 141°C.
Rf 0,40 (dichlormethan : ethylacetát : kyselina octová, : 50 : 2,5) δΗ (400 MHz, DMSO) 2,18 (3H, s), 7,00 (1H, d, J = 8 Hz),
7,38 (1H, br s), 7,48 (2H, m), 7,62 (1H, d, J = 8 Hz), 7,72 (1H, s), 7,80 1H, s), 7,86 (1H, d, J = 8 Hz), 8,00 (1H, br s) .
LRMS (termosprej) m/z = 355 (MNH4 +)
159 • · · · · · • · · · * · • · · · · • · · · · « ·
Preparativní postup 28 terc.Butyl-(3R)-3-[({({[(1S)-2-methoxy-l-fenylethyl]amino}karbonyl)-[(1S)-2-methyl]-1-propyllamino)karbonyl]-6-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl]hexanoát
a) Způsobem popsaným v preparativním postupu 19a se N-terc.butoxykarbonyl-L-valin (868 mg, 4,0 mmol) nechá 72 hodin reagovat s (1S)-2-methoxy-l-fenylethylaminem (604 mg, 4,0 mmol). Reakční směs se zkoncentruje za sníženého tlaku a rozdělí mezi ethylacetát (200 ml) a vodu (200 ml). Organická vrstva se promyje 5% vodnou kyselinou citrónovou (100 ml), nasyceným vodným hydrogenuhličitanem sodným (100 ml), vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se trituruje s diisopropyletherem, suspenze se
160
přefiltruje a produkt se vysuší. Získá se (2S)-terč.(butoxykarbonyl ) amino-N- [ (1S)-2-methoxy-l-fenylethyl]-3-methylbutanamid (1,11 g, 79 %) ve formě bezbarvé pevné látky o teplotě tání 112 až 113°C.
Rf 0,71 (dichlormethan : methanol : koncentrovaný vodný amoniak, 90 : 10 : 1) δΗ (400 MHz, CDC13) 0,96 (6H, d, J = 7 Hz), 1,45 (9H, s), 2,18 (1H, m), 3,35 (3H, s), 3,64 (2H, m), 3,92 (1H, m),
5,00 (1H, br s), 5,18 (1H, m), 6,60 (1H, m), 7,32 (5H, m). LRMS (termosprej) m/z = 351 (MH+)
b) (2S)-terč.(Butoxykarbonyl)amino-N-[(1S)-2-methoxy-l-fenylethyl]-3-methylbutanamid (1,11 g, 3,17 g) se rozpustí ve směsi bezvodého dichlormethanu (15 ml) a dioxanu (15 ml). Vzniklý roztok se ochladí na 4°C a za míchání se jím vede plynný chlorovodík, dokud nevznikne nasycený roztok. Tento roztok se 4 hodiny míchá při 4’C a poté zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se azeotropicky odpaří s dichlormethanem. Získá se hydrochlorid (2S)-amino-N-[(1S)-2-methoxy-l-fenylethyl]-3-methylbutanamidu (948 mg, 104 %) ve formě světle žluté pěny.
δΗ (400 MHz, CDC13) 0,95 (3H, d, J = 7,5 Hz), 1,00 (3H, d, J = 7,5 Hz), 2,20 (1H, m), 3,15 (3H, s), 3,56 (1H, m), 3,66 (1H, m), 4,02 (1H, m), 5,10 (1H, m) , 7,20-7,35 (3H, m), 7,40 (2H, d, J = 8 Hz), 7,90 (3H, br s), 8,18 (1H, d, J =
7,5 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 251 (MH+)
c) Způsobem popsaným v preparativním postupu 2 se (2R)-2-[2-(terc.butoxy)-2-oxoethyl]pent-4-enová kyselina (646 mg, 3,02 mmol) nechá 1 hodinu při 4°C a poté 18 hodin při 20°C reagovat s hydrochloridem (2S)-amino-N-[(lS)-2-methoxy-l-fenylethyl]-3-methylbutanamidu (ze stupně b) (908 mg, 3,17 mmol). Výsledná směs se odpaří za sníženého tlaku a rozdělí mezi ethylacetát (100 ml) a nasycený vodný
161 * · ·· ·· ·· • · · · ♦ * • « · · ····· · ··· ·» »· ·» ·· »·· hydrogenuhličitan sodný (100 ml). Vrstvy se oddělí a vodná vrstva se reextrahuje ethylacetátem (100 ml). Spojené organické vrstvy se vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruji za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití směsi dichlormethanu a methanolu v poměru 98 : 2 jako elučního činidla. Získá se terc.butyl-(3R)-3-({[({[(lS)-2-methoxy-l-fenylethyl]amino}karbonyl)-(lS)-2-methyl-l-propyllamino}karbonyl)hex-5-enoát (1,08 g, 80 %) ve formě bílé pevné látky o teplotě tání 155 až 157°C.
Rf 0,36 (dichlormethan : methanol, 95 : 5) δΗ (400 MHz, CDC13) 0,94 (3H, d, J = 7 Hz), 0,97 (3H, d,
J = 7 Hz), 1,40 (9H, s), 2,15 (2H, m), 2,35 (2H, m), 2,65 (2H, m), 3,15 (3H, s), 3,65 (2H, d, J = 5 Hz), 4,26 (1H, t,
J = 7,5 Hz), 4,96 (1H, d, J = 9 Hz), 5,00 (1H, d, J = 18 Hz), 5,15 (1H, dt, J = 5 a 7 Hz), 5,66 (1H, m), 6,26 (1H, d,
J = 7,5 Hz), 6,55 (1H, d, J = 7 Hz), 7,30 (5H, m).
LRMS (termosprej) m/z = 447 (MH+)
d) Způsobem popsaným v preparativním postupu 15a se terč.butyl-(3R)-3-({[({[(1S)-2-methoxy-l-fenylethyl]amino} karbonyl) - (1S) - 2-methyl-l-propyl lamino} karbonyl )hex-5-enoát (ze stupně c) (1,08 g, 2,42 mmol) nechá za katalýzy palladiem při teplotě zpětného toku v acetonitrilu 18 hodin reagovat s 4-jod-2-methyl-l-fenylbenzenem (z preparativního postupu 29) (1,07 g, 3,63 mmol). Reakční směs se ochladí a zředí ethylacetátem (200 ml). Ethylacetátová směs se promyje postupně 5% vodnou kyselinou citrónovou (50 ml), nasyceným vodným hydrogenuhličitanem sodným (50 ml) a nasyceným vodným chloridem sodným (50 ml), vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu dichlormethan : ethylacetát 30 : 1 až 3 : 1. Získá se terč.butyl-(3R,5E)-3-({[({[(1S)-2-methoxy-l-fenylethyl]amino}karbonyl)-(1S )-2-methyl-l-propyl]amino}karbonyl)-6-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl]hex-5-enoát ve formě světle hnědé pěny (980 mg, 66 %).
162
Rf 0,35 (dichlormethan : ethylacetát, 4:1) δΗ (400 MHz, CDC13) 0,96 (3H, d, J = 7 Hz), 0,98 (3H, d,
J = 7 Hz), 1,40 (9H, s), 2,18 (1H, m), 2,22 (3H, s), 2,36 (1H, m), 2,40-2,58 (2H, m), 2,66 (1H, m), 2,75 (1H, m),
3,35 (3H, s), 3,62 (2H, d, J = 4,5 Hz), 4,30 (1H, t, J =
7,5 Hz), 5,12 (1H, dt, J = 4,5 a 7 Hz), 6,10 (1H, m), 6,36 (1H, d, J = 7 Hz), 6,40 (1H, d, J = 16 Hz), 6,55 (1H, d,
J = 7,5 Hz), 7,10 (2H, m), 7,20-7,38 (9H, komplex), 7,40 (2H, m).
Nalezeno: C 74,43, H 7,85, N 4,57, C38H48N2°5 vypočteno C 74,48, H 7,90, N 4,57 %
e) Roztok terč.butyl-(3R,5E)-3-({[({[(1S)-2-methoxy-1-fenylethyl]amino}karbonyl)-(1S)-2-methyl-l-propyl]amino}karbonyl)-6-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl]hex-5-enoátu (ze stupně d) (930 mg, 1,51 mmol) v ethanolu (50 ml) se 17 hodin hydrogenuje za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (75 mg) za tlaku 0,3 MPa při 20°C. Reakční směs se přefiltruje přes pomocnou filtrační látku Arbocel a filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatograf ií za použití elučního gradientu pentan : ethylacetát 10 : 1 až 2 : 1 a triturací s diethyletherem. Získá se terc.butyl-(3R)-3-({[({[(lS)-2-methoxy-l-fenylethyl]amino}karbonyl)-(1S)-2-methyl-l-propyl]amino}karbonyl)-6-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl]hexanoát (748 mg, 81 %) ve formě bezbarvé pěny, které se použije při postupu podle příkladu 21.
Rf 0,35 (pentan : ethylacetát, 2:1) δΗ (400 MHz, CDC13) 0,95 (3H, d, J = 7 Hz), 0,98 (3H, d,
J = 7 Hz), 1,40 (9H, s), 1,42 (1H, m), 1,60 (2H, m), 1,70 (1H, m), 2,18 (1H, m), 2,22 (3H, s), 2,38 (1H, m),
2,45-2,66 (4H, komplex), 3,32 (3H, s), 3,60 (2H, d, J = 4,5 Hz), 4,28 (1H, t, J = 7,5 Hz), 5,15 (1H, dt, J = 4,5 a 7 Hz), 6,30 (1H, d, J = 7,5 Hz), 6,55 (1H, d, J = 7 Hz), 6,98 (1H, d, J = 8 Hz), 7,00 (1H, s), 7,10 (1H, d, J = 8 Hz), 7,20-7,36 (8H, komplex), 7,40 (2H, m).
163 ·# ·· ·· • * 9 · » » 0 • · · · · · • 0 ····« 0
Nalezeno: C 74,39, H 7,24, N 4,59, C38H50N2°5 vypočteno C 74,32, H 8,27, N 4,61 %
Preparativní postup 29
4-Jod-2-methyl-1-fenylbenz en
a) Způsobem popsaným v preparativním postupu 25a se 2-brom-5-nitrotoluen (15 g, 69,4 mmol) nechá 16 hodin za použití palladia jako katalyzátoru a 2M vodného uhličitanu sodného jako báze při teplotě zpětného toku v dimethoxyethanu reagovat s fenylboronovou kyselinou. Reakční směs se ochladí a oddělená organická vrstva se zředí diethyletherem. Diethyletherová směs se promyje vodou (dvakrát), vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití směsi hexanu a ethylacetátu v poměru 95 : 5 jako elučního činidla. Získá se 2-methyl-4-nitro-l-fenylbenzen ve formě žluté pevné látky (12,7 g, 86 %).
Rf 0,33 (hexan : ethylacetát, 95 : 5) δΗ (300 MHz, CDC13) 2,40 (3H, s), 7,20-7,50 (6H, komplex),
8,10 (1H, d, J = 8 Hz), 8,15 (1H, s).
b) 2-Methyl-4-nitro-l-fenylbenzen (12,7 g, 60 mmol) se rozpustí v ethanolu (260 ml) se 2 hodiny hydrogenuje za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (1,27 g) za tlaku 0,3 MPa
164
·· ·· • « · · • 99 9 9 9 při 20°C. Reakční směs se přefiltruje přes pomocnou filtrační látku Arbocel za promývání etylacetátem. Filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Získá se 4-amino-2-methyl-l-fenylbenzen (10,49 g, 95 %) ve formě narůžovělého hnědého oleje.
δΗ (400 MHz, CDC13) 2,20 (3H, s), 3,60 (2H, br s), 6,60 (2H, m), 7,05 (1H, d, J = 8 Hz), 7,30 (3H, m), 7,40 (2H, m) .
c) Míchaný roztok 4-amino-2-methyl-l-fenylbenzen (10,49 g, 57,2 mmol) v dijodmethanu (100 ml) se během 5 minut smísí s isoamylnitritem (27 ml, 200,2 mmol). Reakční směs se 45 minut zahřívá na 75°C, poté 1 hodinu na 65’C, ochladí a zkoncentruje za sníženého tlaku (95°C/4000 Pa). Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití hexanu jako elučního činidla. Získá se 4-jod-2-methyl-l-fenylbenzen (11,6 g, 66 %) ve formě oleje.
Rf 0,33 (hexan) δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 2,20 (3H, s), 6,98 (1H, d, J = 8 Hz), 7,30 (2H, m), 7,35 (1H, m), 7,45 (2H, m), 7,60 (1H, d, J =
Hz), 7,70 (1H, s).
Preparativní postup 30 terč.Butyl-(3R)-3-({[({[(1S)-2-methoxy-l-fenylethyl]amino }karbonyl)-(1S)-2-fenylethyl]amino}karbonyl)-6-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl]hexanoát
165
9 9
9
9
O CHjOCHj
b) CH3 O
a) Způsobem popsaným v preparativním postupu 19a se N-terc.butoxykarbonyl-L-fenylalanin (1,06 mg, 4,0 mmol) nechá 72 hodin reagovat s (1S)-2-methoxy-l-fenylethylaminem (604 mg, 4,0 mmol). Reakční směs se zkoncentruje za sníženého tlaku a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát (200 ml) a vodu (200 ml). Organická vrstva se promyje 5% kyselinou citrónovou (100 ml), nasyceným vodným hydrogenuhličitanem sodným (100 ml), vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Produkt se trituruje s diisopropyletherem, odfiltruje a vysuší. Získá se (2S)-terč.(butoxykarbonyl)amino-N-[(1S)-2-methoxy-l-fenylethyl]-3-fenylpropanamid
166 • 99 99 99 ·9 • 99 9 9 99 9 9 99
9· 9999 99
9 999 9 99999 9
9 · 99 « 99 • •9 99 ·9 ·· 99 9 (1,28 g, 81 %) ve formě bílé pevné látky o teplotě tání 133 až 134°C.
Rf 0,76 (dichlomethan : methanol : koncentrovaný vodný amoniak, 90 : 10 : 1) δΗ (400 MHz, CDC13) 1,40 (9H, s), 3,02 (1H, dd, J = 7 a 13 Hz), 3,16 (1H, dd, J = 6 a 13 Hz), 3,22 (3H, s), 3,40 (1H, m), 3,56 (1H, dd, J = 4,5 a 10 Hz), 4,38 (1H, m), 5,05 (2H, m), 6,45 (1H, d, J = 8 Hz), 7,18-7,36 (10H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 399 (MH+)
b) (2S)-terc.(Butoxykarbonyl)amino-N-[(1S)-2-methoxy-l-fenylethyl]-3-fenylpropanamid (1,28 g, 3,2 mmol) se rozpustí ve směsi bezvodého dichlormethanu (15 ml) a dioxanu (15 ml). Vzniklý roztok se ochladí na 4°C a za míchání se jím vede plynný chlorovodík, dokud nevznikne nasycený roztok. Tento roztok se 4 hodiny míchá při 4°C a poté zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se azeotropicky odpaří s dichlormethanem. Získá se hydrochlorid (2S)-amino-N-[(1S)-2-methoxy-l-fenylethyl]-3-fenylpropanamidu (1,11 g, 103 %) ve formě světle žluté pěny.
δΗ (400 MHz, CDC13) 3,08 (1H, dd, J = 13 a 10 Hz), 3,20 (3H, s), 3,32 (2H, m), 3,50 (1H, dd, J = 7,5 a 6,5 Hz),
4,44 (1H, m), 5,00 (1H, m), 7,18 (1H, m), 7,20 (2H, m),
7,25 (7H, komplex), 7,64 (1H, d, J = 8 Hz), 7,80 (3H, br s). LRMS (termosprej) m/z = 299 (MH+)
c) Způsobem popsaným v preparativním postupu 2 se (2R)-2-[2-(terč.butoxy)-2-oxoethyl]pent-4-enová kyselina (658 mg, 3,07 mmol) nechá 1 hodinu při 4°C a poté 18 hodin při 20°C reagovat s hydrochloridem (2S)-amino-N-[(lS)-2-methoxy-l-fenylethyl]-3-fenylpropanamidu (ze stupně b) (1,08 g, 3,23 mmol). Výsledná směs se zkoncentruje za sníženého tlaku a rozdělí mezi ethylacetát (100 ml) a nasycený vodný hydrogenuhličitan sodný (100 ml). Vrstvy se oddělí a vodná vrstva se reextrahuje ethylacetátem (100 ml).
167 • 99 99 99 99
9 9 9 9 99 9 9 · 9
99 9 9 9 9 9 9
9 999 9 9 9999 9
Spojené organické vrstvy se vysuší síranem horečnatým a zkoncentrují za sníženého tlaku. Zbytek se trituruje s diisopropyletherem. Získá se terc.butyl-(3R)-3-({[({[(lS)-2-methoxy-l-fenylethyl]amino}karbonyl)-(1S)-2-fenylethyl]amino}karbonyl)hex-5-enoát (1,35 g, 85 %) ve formě bílé pevné látky o teplotě tání 122 až 125°C.
Rf 0,47 (dichlormethan : methanol, 95 : 5) δΗ (400 MHz, CDC13) 1,40 (9H, s), 2,12 (1H, m), 2,26-2,40 (2H, m), 2,50-2,60 (2H, m), 3,00 (1H, dd, 8,5 a 14 Hz),
3,19 (1H, dd, 5,5 a 14 Hz), 3,20 (3H, s), 3,36 (1H, dd, 4,5 a 9,5 Hz), 3,50 (1H, dd, 4,8 a 9,5), 4,65 (1H, q, J = 7,5 Hz), 4,94-5,04 (3H, m), 5,60 (1H, m), 6,37 (2H, m),
7,18-7,35 (10H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 495 (MH+)
d) Způsobem popsaným v preparativním postupu 15a se terč.butyl-(3R)-3-({[({[(1S)-2-methoxy-l-fenylethyllamino}karbonyl)-(1S)-2-fenylethyl]amino}karbonyl)hex-5-enoát (ze stupně c) (1,35 g, 2,73 mmol) nechá za katalýzy palladiem při teplotě zpětného toku v acetonitrilu 18 hodin reagovat s 4-jod-2-methyl-l-fenylbenzenem (z preparativního postupu 29) (1,21 g, 4,09 mmol). Reakční směs se ochladí a zředí ethylacetátem (200 ml). Ethylacetátová směs se promyje 5% vodnou kyselinou citrónovou (50 ml), nasyceným vodným hydrogenuhličitanem sodným (50 ml) a nasyceným vodným chloridem sodným (50 ml), vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu dichlormethan : ethylacetát 50 : 1 až 5 : 1. Získá se terč.butyl-(3R,5E)-3-({[({[(lS)-2-methoxy-l-fenylethyl]amino}karbonyl)-(is)-2-fenylethyl]amino}karbonyl)-6-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl]hex-5-enoát ve formě světle hnědé pěny (1,1 g, 61 %). Rf 0,35 (dichlormethan : ethylacetát, 5:1) δΗ (400 MHz, CDC13) 1,40 (9H, s), 2,22 (3H, s), 2,34 (1H, m), 2,40-2,56 (2H, m), 2,56-2,75 (2H, m), 3,00 (1H, dd, «4 « *
- 168 ♦ » *· • · · · · · • * · · · ♦
J = 7,5 a 14 Hz), 3,19 (1H, dd, J = 6 a 14 Hz), 3,20 (3H,
s), 3,35 (1H, dd, J = 4,5 a 10 Hz), 3,50 (1H, dd, J = 4,5 a 10 Hz), 4,65 (1H, q, J = 7,5 Hz), 5,00 (1H, dt, J = 4,5 a 7,5 Hz), 6,06 (1H, dt, J = 7 a 14 Hz), 6,34 (1H, d, J =
7,5 Hz), 6,38 (1H, d, J = 14 Hz), 6,44 (1H, d, J = 7,5 Hz), 7,10-7,38 (16H, komplex), 7,40 (2H, m).
Nalezeno: C 76,10, H 7,27, N 4,20, C42H48N2°5 vypočteno C 76,33, H 7,32, N 4,24 %
e) Roztok terc.butyl-(3R,5E)-3-({[({[(1S)-2-methoxy—1—fenylethyl]amino}karbonyl)-(1S)-2-fenylethyl]amino}karbonyl) -6- [3-methyl-(4-f enyl) f enyl] hex-5-enoátu (1,03 g, 1,56 mmol) v ethanolu (100 ml) se 18 hodin hydrogenuje za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (125 mg) za tlaku 0,3 MPa při 20°C. Reakční směs se přefiltruje přes pomocnou filtrační látku Arbocel a filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu pentan : ethylacetát 10 : 1 až 2 : 1 a triturací s diethyletherem. Získá se terc.butyl-(3R)-3({[({[(1S)-2-methoxy-l-fenylethyl]amino}karbonyl)-(1S)-2-fenylethyl]amino}karbonyl)-6-[3-methyl-(4-fenyl)fenyl]hexanoát (980 mg, 95 %) ve formě bezbarvé pěny, které se použije při postupu podle příkladu 22.
Rf 0,35 (pentan : ethyl acetát, 2:1) δΗ (400 MHz, CDC13) 1,40 (9H, s), 1,42 (1H, m), 1,48-1,70 (3H, m), 2,20 (3H, s), 2,38 (1H, m), 2,56 (4H, m), 3,00
(1H, dd, , J = 8 a 13 Hz), 3,20 (3H, s a 1H, dd J = 5,5 a 13
Hz, překr ývání) , 3,36 (1H, dd, J = 5 a 9 Hz), 3,50 (1H, dd,
J = 5 a 9 Hz), 4,65 (1H, q, J = 8 Hz) , 5,00 (1H, dt,
J = 5 a 8 Hz), 6,38 (2H, d, J = 8 Hz) , 6,95 (1H, d, J = 8
Hz), 7,00 (1H, s), 7,10 (1H, d, J = 8 Hz), 7,14-7,35 (13H,
komplex), 7,40 (2H, m).
Nalezeno: C 76, 03, H 7,70, N 4,25,
C42H50N2°5 vypočteno C 76,10, H 7,60, N 4,23 % «4
- 169 •4 «· 44 • 4 · · 4 · · · · 4 4 • 44 4 4 4 4 4 4
4 444 4 444 44 4
444 44 4 44
44444 44 4« 44 4
Preparativní postup 31 terč.Butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-{[(IR)-1-(4-pyridyl)ethylamino]karbonyl}propy 1 ]amino}karbonyl)-6-[ (3-methyl-4-feny1)feny1]hexanoát
Způsobem popsaným v příkladu 25a se terč.butyl-(3R)-3-( {[ (lS)-l-(karboxy)-2,2-dimethylpropyl]amino}karbonyl)-6[(3-methyl-4-fenyl)fenyl]hexanoát (z preparativního postupu 19c) (497 mg, 1,0 mmol) nechá 2,5 hodiny při teplotě místnosti reagovat s (R)-(+)-l-(4-pyridyl)ethylaminem (122 mg,
1,0 mmol). Po výše popsaném zpracování se získá terc.butyl( 3R)-3-( {[ (lS)-2,2-dimethyl-l-{[ (IR)-1-(4-pyridyl)ethylamino]karbonyl}propyl]amino}karbonyl)-6-[(3-methyl-4-fenyl)fenyl] hexanoát (460 mg, 77 %) ve formě bílé pevné látky.
Rf 0,21 (hexan : ethyl acetát, 1:2) δΗ (400 MHz, CDC13) 1,01 (9H, s), 1,40 (9H, s), 1,45 (3H, d,
J = 7,5 Hz), 1,50-1,65 (4H, m), 2,22 (3H, s), 2,38 (1H, m) , 2,50-2,65 (4H, m), 4,20 (1H, d, J = 9 Hz), 5,04 (1H, pentet,
J = 7,5 Hz), 6,15 (1H, d, J = 7,5 Hz), 6,45 (1H, d, J = 9 Hz), 7,00 (2H, m), 7,14 (3H, m), 7,30 (3H, m), 7,38 (2H, m) , 8,45 (2H, d, J = 7,5 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 600 (MH+)
170 »* »· »* ·* • · r · · · · « * 0·
0« 0000 00 00 0*0 * 00« 00 0 • 00 00 0 00
Příklad 38/
Preparativní postup 32 (3R)-3-({[(1S)-2,2-Dimethyl-l-{[(IR)-1-(3-pyridyl)ethylamino]karbonyl}propyl]amino}karbonyl)-6-[(3-methyl-4-fenyl)fenyl]hexanová kyselina
a) Způsobem popsaným v příkladu 25a se terc.butyl-(3R)-3-({[(1S)-l-(karboxy)-2,2-dimethylpropy1]amino}karbonyl) -6-[(3-methyl-4-fenyl)fenyl]hexanoát (z preparativního postupu 19c) (497 mg, 1,0 mmol) nechá 2,5 hodiny při teplotě místnosti reagovat s (R)-(+)-1-(3-pyridyl)ethylaminem (122 mg, 1,0 mmol). Po výše popsaném zpracování a přečištění mžikovou chromatografii za použití elučního gradientu hexan : ethylacetát 4 : 1 až 100% ethylacetát se získá terc.butyl(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-{[(IR)-l-(3-pyridyl)ethylamino]karbonyl}propyl]amino}karbonyl)-6-[(3-methyl-4-fenyl)fenyl]hexanoát (537 mg, 89 %) ve formě bezbarvé pěny.
Rf 0,33 (ethylacetát) δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 0,90 (9H, s), 1,02 (3H, d, J = 7,5
44 ·4 44 *4
4 9 444 4 444
- 171 - 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 • 44 44 44 444 • «4
Hz), 1,34 (9H, s), 1,20-1,34 (4H, m), 2,14 (3H, s), 2,20
(1H, m), 2,30-2,50 (3H, m), 2,80 (1H, m), 4 ,30 (1H, d, J =
9,5 Hz), 4,95( 1H, pentet, J = 7,5 Hz), 6,92 (1H, d, J = 8
Hz), 7,00 (2H, m), 7,18 (1H, m), 7,24 (2H, m), 7,32 (1H, m),
7,40 (2H, m), 7,60 (1H, d, J = 8 Hz), 7,75 (1H, d, J = 9, 5
Hz), 8,35 (1H, m), 8,42 (1H, d, J = 7,5 Hz) , 8,46 (1H, s) •
LRMS (termosprej) m/z = 600 (MH+)
171
b) Roztokem terc.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimethyl-l-{[(lR)-l-(3-pyridyl)ethylamino]karbonyl}propyl]amino}karbonyl)-6-[(3-methyl-4-fenyl)fenylJhexanoátu (285 mg, 0,47 mmol) v dioxanu (15 ml) se pod atmosférou dusíku při 0°C vede plynný chlorovodík, dokud nevznikne nasycený roztok. Tento roztok se 3 hodiny míchá při 0°C a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí v methanolu (3 ml). K methanolickému roztoku se přidá diethylether (3 ml).
Výsledná směs se přefiltruje a filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí v methanolu (3 ml) a k methanolickému roztoku se přidá toluen (3 ml). Zbytek se zkoncentruje za sníženého tlaku. Ke zbytku se přidá diethylether (5 ml) a vzniklý roztok se sonikuje. Získá se bílá pevná látka, která se odfiltruje a vysuší. Získá se sloučenina uvedená v nadpise ve formě bílé pevné látky (338 mg, 65 %).
Rf 0,06 (ethyl acetát : hexan : kyselina octová, 50 : 50 : 1) δΗ (400 MHz, CD3OD) 1,02 (9H, s), 1,40-1,60 (4H, m), 1,54 (3H, d, J = 7,5 Hz), 2,16 (3H, s), 2,30-2,58 (3H, m), 2,62 (1H, m), 2,90 (1H, m), 4,20 (1H, m), 5,15 (1H, pentet, J =
7,5 Hz), 6,90 (1H, d, J = 8 Hz), 6,98 (2H, m), 7,22 (2H, d,
J = 8 Hz), 7,32 (1H, m), 7,40 (2H, d, J = 8 Hz), 7,80 (1H, m), 7,85 (1H, d, J = 9,5 Hz), 8,50 (2H, m), 8,80 (2H, m).
LRMS (termosprej) m/z = 544 (MH+)
Nalezeno: C 65,78, H 7,26, N 6,72, C33H41N3O4-HC1-1,25H2° vypočteno C 65,74, H 7,63, N 6,76 %
172
Preparativní postup 33 (2R)-N-[(1S)-1-(Karboxy)-2,2-dimethylpropyl]-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-5-[(3-methyl-4-fenyl)fenyl ] pentanamid
a) Způsobem popsaným v preparativním postupu 2 se (4S)-4-[(IR)-l-karboxybut-3-enyl] -2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-5-on (z preparativního postupu 14b) (2,39 g, 11,20 mmol) nechá 1 hodinu při 4°C a poté 17 hodin při 20°C reagovat s hydrochloridem benzylesteru L-terc.leucinu (3,03 g, 11,76 mmol). Reakční směs se zkoncentruje za sníženého tlaku a zbytek se rozpustí v ethylacetátu (200 ml). Ethylacetátový roztok se promyje 0,5M vodným dihydrogenfosforečnanem sodným (2 x 200 ml), 5% nasyceným hydrogenuhličitanem sodným (200 ml) a vodou, vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu hexan : ethylacetát 10 : 1 až 1:1. Získá se (2R)-N-[(lS)-l-[(benzyloxy)karbonyl]-2,2-dimethylpropyl]-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]pent-4-enamid (4,06 g, 87 %) ve formě bílé pevné látky o teplotě tání 67 až 70°C.
• ·
Rf 0,30 (hexan : diethylether, 1:1) δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 0,95 (9H, s), 1,45 (3H, s), 1,54 (3H, s), 2,30 (1H, m), 2,45 (1H, m) , 3,00 (1H, m) , 4,02 (1H, d, J = 8 Hz), 4,50 (1H, d, J= 8 Hz), 4,85 (1H, d, J = 8 Hz), 5,00 (1H, d, J = 16 Hz), 5,10 (2H, s), 5,60 (1H, m), 7,34 (5H, m), 8,12 (1H, d, J = 8 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 418 (MH+)
Nalezeno: C 66,13, H 7,50, N 3,36, C23H31NO6 vyPočteno C 66,17, H 7,48, N 3,35 %
b) Octan palladnatý (58 mg, 0,24 mmol) se pod atmosférou dusíku přidá k míchanému roztoku (2R)-N-[(1S)-1-[(benzyloxy)karbonyl]-2,2-dimethylpropyl]-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]pent-4-enamidu (2,0 g,
4,8 mmol), 4-jod-2-methyl-l-fenylbenzenu (z preparativního postupu 29) (2,1 g, 7,20 mmol) a N-ethylmorfolinu (920 μΐ, 7,20 mmol) v bezvodém acetonitrilu (15 ml). Výsledná směs se promyje dusíkem a poté zahřívá ke zpětnému toku. Vzhledem k vysrážení palladia se k ní přidá octan palladnatý (58 mg,
0,24 mmol) a v refluxování se pokračuje. Po dalších 2 hodinách se k ní přidá dalších 58 mg octanu palladnatého a po dalších 2 hodinách tri(2-methylfenyl)fosfin (304 mg, 1,0 mmol) a octan palladnatý (58 mg, 0,24 mmol). Reakční směs se 2 hodiny zahřívá ke zpětnému toku, načež se k ní přidá znovu tri(2-methylfenyl)fosfin (304 mg, 1,0 mmol) a octan palladnatý (58 mg, 0,24 mmol). Reakční směs se 8 hodin zahřívá ke zpětnému toku, ochladí a zředí ethylacetátem (200 ml) a vodou (200 ml). Výsledná směs se přefiltruje přes pomocnou filtrační látku Arbocel, aby se odstranilo palladium. Vrstvy se oddělí a organická vrstva se promyje vodou (2 x 100 ml), vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Surový produkt se přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu dichlormethan : ethylacetát 50 : 1 až 15 : 1. Výsledná žlutá pryskyřice se dále přečistí mžikovou chromatografií za použití elučního gradientu hexan : diethylether
174 : 1 až 1 : 1 a trituraci se směsí pentanu a diethyletheru. Získá se (2R,4E)-N-{(1S)-l-[(benzyloxy)karbonyl]-2,2-dimethylpropyl }-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-5-[(3— -methyl-4-fenyl)fenyl]pent-4-enamid ve formě bílé pevné látky (710 mg, 25 %) o teplotě tání 115 až 118°C.
Rf 0,30 (hexan : ethylacetát, 1:1)
SH (300 MHz, CDC13) 0,96 (9H, s), 1,54 (3H, s), 1,60 (3H, s), 2,24 (3H, s), 2,65-2,90 (3H, m), 4,50 (1H, d, J = 9,5 Hz), 4,60 (1H, d, J = 7,5 Hz), 5,0 (1H, d, J = 9,5 Hz), 5,3 (1H, d, J = 9,5 Hz), 6,20 (1H, m), 6,44 (1H, d, J = 9,5 Hz), 6,52 (1H, d, J = 16 Hz), 7,10-7,42 (13H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 584 (MH+)
Nalezeno: C 73,96, H 7,02, N 2,41, C36H41NO6 vypočteno C 74,08, H 7,08, N 2,40 %
c) Roztok (2R,4E)-N-{(1S)-1-[(benzyloxy)karbonyl]-2,2-dimethylpropyl}-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-5-[(3-methyl-4-fenyl)fenyl]pent-4-enamidu (1,24 g,
2,12 mmol) v ethanolu (150 ml) se 6 hodin hydrogenuje za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (100 mg) za tlaku 0,3 MPa při teplotě místnosti. Reakční směs se přefiltruje přes pomocnou filtrační látku Arbocel a filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se azeotropicky odpaří s diethyletherem. Získá se (2R)-N-[(1S)-1-(karboxy)-2,2-dimethylpropyl ]-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-5-[ (3-methyl-4-fenyl)fenyl]pentanamid (1,08 g, 103 %) ve formě bezbarvé pěny.
Rf 0,40 (hexan : ethylacetát : kyselina octová, 50 : 50 : 1) δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 0,95 (9H, s), 1,45 (3H, s), 1,55 (3H, s), 1,50-1,66 (3H, m), 1,80 (1H, m), 2,20 (3H, s), 2,50 (1H, m), 2,60 (1H, m), 3,00 (1H, m), 4,15 (1H, d, J = 8 Hz), 4,50 (1H, d, J = 8 Hz), 7,05 (3H, m), 7,30 (3H, m), 7,40 (2H, m), 7,95 (1H, d, J = 8 Hz).
Nalezeno: C 69,50, H 7,69, N 2,69, C29H37NO6·0'3H2° vypočteno C 69,52, H 7,56, N 2,80 %
175 ·· 0 0 · · ·
Preparativní postup 34 (2R)-N-[(1S)-1-(Karboxy)-2,2-dimethylpropyl]-2-[(4S)-2,2dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-5-[(3'-methoxy-2-methylbifen-4-yl)propyl]pentanamid
a) Způsobem popsaným v preparativním postupu 15a se (2R)-N-[(1S)-1-[(benzyloxy)karbonyl]-2,2-dimethylpropyl] -2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]pent-4-enamid (z preparativniho postupu 33a) (1,0 g, 2,4 mmol) za katalýzy palladiem při teplotě zpětného toku v acetonitrilu po dobu 16 hodin nechá reagovat s 4-jod-l-(3-methoxyfenyl)-2-methylbenzenu (z preparativniho postupu 20) (1,16 g, 3,59 mmol). Reakční směs se ochladí a rozdělí mezi ethylacetát (3 x 75 ml) a nasycený vodný hydrogenuhličitan sodný (75 ml). Spojené organické roztoky se vysuší síranem sodným a zkoncentrují za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí mžikovou chromátografií za použití směsi dichlormethanu a diethyletheru v poměru
97,5 : 2,5 jako elučního činidla. Získá se (2R,4E)-{(1S)176
-1-[(benzyloxy)karbonyl]-2,2-dimethylpropyl}-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-5-[(3'-methoxy-2-methylbifen-4-yl)propyl]pent-4-enamid ve formě pevné látky (1,08 mg, 74 %). Podle 1H NMR produkt také obsahuje alkenové isomery. Této směsi alkenů se použije v následujícím stupni (viz stupeň b).
Rf 0,44 (dichlormethan : diethylether, 95 : 5) δΗ (400 MHz, CDC13) (pro (4E) isomer). 0,95 (9H, s), 1,52 (3H, s), 1,60 (3H, s), 2,25 (3H, s), 2,54-2,90 (3H, m),
3,80 (3H, s), 4,50 (1H, d, J = 9,5 Hz), 4,60 (1H, d, J = 5 Hz), 4,98 (1H, d, J = 12 Hz), 5,07 (1H, d, J = 12 Hz), 6,20 (1H, m), 6,45 (1H, d, J = 9 Hz), 6,50 (1H, d, J = 16 Hz),
6,86 (3H, m), 7,12-7,40 (9H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 613 (MH+), 630 (MNH4 +)
b) Roztok (2R,4E)-{(lS)-l-[(benzyloxy)karbonyl]-2,2-dimethylpropyl}-2-[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-5-[(3'-methoxy-2-methyl-bifen-4-yl)propyl]pent-4-enamid (534 mg, 0,87 mmol) v ethanolu (75 ml) se 5,75 hodiny hydrogenuje za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (50 mg) za tlaku 0,3 MPa při 20°C. Reakční směs se přefiltruje přes pomocnou filtrační látku Arbocel, filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku a zbytek se azeotropicky odpaří s ethylacetátem. Získá se (2R)-N-[(lS)-l-(karboxy)-2,2-dimethylpropyl3 — 2 —[(4S)-2,2-dimethyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl] -5-[(3'-methoxy-2-methylbifen-4-yl)propylJpentanamid (384 mg,
%) ve formě bílé pevné látky, které se použije při postupu podle příkladu 30 a 31 bez přečištění.
δΗ (400 MHz, DMSO-d6) 0,96 (9H, s), 1,45 (3H, s), 1,55 (3H,
s) z 1,50-1,65 (3H, m), 1,80 (1H, m) , 2,20 (3H, S), 2,50
(1H, m) , 2,60 (1H, m), 2,96 (1H, m) , 3,78 (3H, S), 4,15
(1H, d, J = 9 Hz) , 4,50 (1H, d, J = 9 Hz), 6,85 i (3H, m),
7,00 (1H, m), 7,05 (2H, m), 7,32 (1H, t, J = 8 Hz), 7,96
(1H, d, J = 9 Hz) , 12,50 (1H, br s) .
177
PATENTOVÉ NÁROKY

Claims (1)

1. Sloučeniny obecného vzorce I
R1 představuje vodík, hydroxyskupinu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo alkenylskupinu se 2 až 4 atomy uhlíku;
R2 představuje alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku popřípadě substituovanou fluorem, indolylskupinou, imidazolylskupinou, skupinou SO2~alkyl s 1 až 4 atomy uhlíku, cykloalkylskupinou s 5 až 7 atomy uhlíku nebo popřípadě chráněnou skupinou OH, SH, CONH2, CO2H, NH2 nebo NHC(=NH)NH2, cykloalkylskupinu s 5 až 7 atomy uhlíku popřípadě substituovanou alkylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo benzylskupinu popřípadě substituovanou popřípadě chráněnou hydroxyskupinou, alkoxyskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, benzyloxyskupinou nebo benzylthioskupinou, přičemž případné chránící skupiny skupin OH, SH, CONH2, NH2 nebo NHC(=NH)NH2 jsou zvoleny ze souboru sestávajícího z alkylskupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, benzylskupiny a alkanoylskupiny s 1 až 6 atomy uhlíku a případné chránící skupiny skupiny CO2H jsou zvoleny ze souboru sestávajícího z alkylskupiny s 1 až 6 atomy uhlíku a benzylskupiny;
178
R3, R5 a R6 představují každý nezávisle vodík nebo fluor;
představuje skupinu CH3, chlor nebo fluor;
představuje skupinu HO nebo HONH;
představuje přímou vazbu nebo kyslík;
představuje buď skupinu obecného vzorce a r” (a) kde představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxymethylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylové části, hydroxyalkylskupinu se 2 až 4 atomy uhlíku, karboxyalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku alkylové části nebo (amino nebo dimethylamino)alkylskupinu se 2 až 4 atomy uhlíku v alkylové části; a představuje fenylskupinu, naftylskupinu nebo pyridylskupinu, popřípadě substituovanou až třemi substituenty nezávisle zvolenými z halogenu a methylskupiny;
nebo skupinu obecného vzorce b (b) kde * ·· ·· ·· ··
CZ20002459A 1998-01-09 1998-12-23 Inhibitory matričních metaloproteinas, způsoby jejich výroby, farmaceutické kompozice a způsoby léčení na jejich bázi CZ20002459A3 (cs)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB9800510.1A GB9800510D0 (en) 1998-01-09 1998-01-09 Therapeutic agents
GBGB9811843.3A GB9811843D0 (en) 1998-06-02 1998-06-02 Therapeutic agents

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ20002459A3 true CZ20002459A3 (cs) 2001-12-12

Family

ID=26312925

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20002459A CZ20002459A3 (cs) 1998-01-09 1998-12-23 Inhibitory matričních metaloproteinas, způsoby jejich výroby, farmaceutické kompozice a způsoby léčení na jejich bázi

Country Status (37)

Country Link
US (1) US6350907B1 (cs)
EP (1) EP1047665B1 (cs)
JP (1) JP3621884B2 (cs)
KR (1) KR100385662B1 (cs)
CN (1) CN1284942A (cs)
AP (1) AP1059A (cs)
AR (1) AR014270A1 (cs)
AT (1) ATE252547T1 (cs)
AU (1) AU736511B2 (cs)
BG (1) BG104575A (cs)
BR (1) BR9813719A (cs)
CA (1) CA2317604C (cs)
CO (1) CO4990971A1 (cs)
CZ (1) CZ20002459A3 (cs)
DE (1) DE69819206T2 (cs)
DK (1) DK1047665T3 (cs)
DZ (1) DZ2701A1 (cs)
EA (1) EA002971B1 (cs)
ES (1) ES2209244T3 (cs)
HN (1) HN1998000199A (cs)
HR (1) HRP20000460A2 (cs)
HU (1) HUP0101300A3 (cs)
IL (1) IL136889A0 (cs)
IS (1) IS5531A (cs)
MA (1) MA26594A1 (cs)
NO (1) NO20003506L (cs)
NZ (1) NZ504683A (cs)
OA (1) OA11435A (cs)
PA (1) PA8466101A1 (cs)
PE (1) PE20000176A1 (cs)
PL (1) PL342763A1 (cs)
PT (1) PT1047665E (cs)
SI (1) SI1047665T1 (cs)
SK (1) SK10112000A3 (cs)
TN (1) TNSN99002A1 (cs)
TR (1) TR200001909T2 (cs)
WO (1) WO1999035124A1 (cs)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6352976B1 (en) 1998-12-31 2002-03-05 Aventis Pharmaceuticals Inc. Selective inhibitors of MMP-12
CA2356919A1 (en) * 1998-12-31 2000-07-13 Michael J. Janusz Selective inhibitors of mmp-12
JP2001055327A (ja) * 1999-06-11 2001-02-27 Fuji Chemical Industries Ltd 新規なヒドロキサム酸誘導体を含む医薬
GB0025310D0 (en) * 2000-10-16 2000-11-29 Pfizer Ltd Process
US6452041B1 (en) 2000-10-16 2002-09-17 Pfizer Inc. Olefination process to itaconate and succinate derivatives
EA006636B1 (ru) * 2001-02-16 2006-02-24 Эллеликс Ньюросайенс, Инк. Замещенные амины (варианты), способ их получения и их применение в качестве ингибиторов транспорта глицина (варианты), композиция (варианты), промежуточный иодид и способ его получения, способ лечения пациента (варианты)
GB0126389D0 (en) * 2001-11-02 2002-01-02 Pfizer Ltd Wafer
PA8578101A1 (es) * 2002-08-13 2004-05-07 Warner Lambert Co Derivados de heterobiarilo como inhibidores de metaloproteinasa de la matriz
US20040138103A1 (en) * 2002-11-07 2004-07-15 Procyte Corporation Compositions containing peptide copper complexes and metalloproteinase inhibitors and methods related thereto
DE60331367D1 (de) 2002-12-30 2010-04-01 Angiotech Int Ag Wirkstofffreisetzung von schnell gelierender polymerzusammensetzung
PL1660471T3 (pl) * 2003-08-23 2011-10-31 Vernalis R&D Ltd Pochodne kwasu hydroksamowego jako inhibitory metaloproteinaz
CA2663730A1 (en) * 2006-09-29 2008-04-03 F. Hoffmann-La Roche Ag Assessing the risk of disease progression for a patient with rheumatoid arthritis
CN104788333B (zh) * 2015-03-19 2017-03-22 中国医科大学 2‑取代‑9,10‑蒽醌类化合物、制备方法及其用途

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5892112A (en) 1990-11-21 1999-04-06 Glycomed Incorporated Process for preparing synthetic matrix metalloprotease inhibitors
GB9215665D0 (en) 1992-07-23 1992-09-09 British Bio Technology Compounds
CA2149640A1 (en) 1992-11-25 1994-06-09 Kevin T. Chapman Carboxy-peptidyl derivatives as antidegenerative active agents
GB9308695D0 (en) 1993-04-27 1993-06-09 Celltech Ltd Peptidyl derivatives
ATE182137T1 (de) 1993-04-27 1999-07-15 Celltech Therapeutics Ltd Peptidylderivate als inhibitoren von metalloproteinase
GB9320660D0 (en) 1993-10-07 1993-11-24 British Bio Technology Inhibition of cytokine production
UA48121C2 (uk) 1993-11-04 2002-08-15 Сінтекс (С.Ш.А.) Інк. Інгібітори матричних металопротеаз і фармацетична композиція на їх основі
US6037472A (en) * 1993-11-04 2000-03-14 Syntex (U.S.A.) Inc. Matrix metalloprotease inhibitors
DK0822186T3 (da) 1994-01-20 2000-06-26 British Biotech Pharm L-tert-leucin-2-pyridylamid
KR970700652A (ko) 1994-01-22 1997-02-12 포올 리틀우드 금속단백질 분해효소 억제제
US6028110A (en) 1994-05-28 2000-02-22 British Biotech Pharmaceuticals Ltd. Succinyl hydroxamic acid, N-formyl-N-hydroxy amino carboxylic acid and succinic acid amide derivatives as metalloprotease inhibitors
US5461746A (en) * 1995-01-17 1995-10-31 Tdw Delaware, Inc. Magnetic cleaning pig
US5691381A (en) 1995-04-18 1997-11-25 The Dupont Merck Pharmaceutical Company Hydroxamic and carbocyclic acids as metalloprotease inhibitors
GB9507799D0 (en) * 1995-04-18 1995-05-31 British Biotech Pharm Metalloproteinase inhibitors
JPH11504934A (ja) 1995-05-10 1999-05-11 カイロサイエンス・リミテッド 金属プロテアーゼとｔｎｆの放出を抑制するペプチジル化合物およびその治療的使用
DE69624477T2 (de) 1995-05-10 2003-06-26 Darwin Discovery Ltd Peptide, die metallproteinasen und die tnf-freisetzung hemmen, und ihre therapeutische verwendung
GB9513331D0 (en) 1995-06-30 1995-09-06 British Biotech Pharm Matrix metalloproteinase inhibitors
US5917090A (en) * 1995-06-30 1999-06-29 British Biotech Pharmaceuticals Ltd. Matrix metalloproteinase inhibitors
US5840974A (en) * 1996-12-04 1998-11-24 Britisch Biotech Pharmaceuticals, Ltd. Metalloproteinase inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
CA2317604C (en) 2004-12-21
JP2002500215A (ja) 2002-01-08
EP1047665A1 (en) 2000-11-02
DE69819206D1 (de) 2003-11-27
NZ504683A (en) 2002-06-28
JP3621884B2 (ja) 2005-02-16
PA8466101A1 (es) 2000-05-24
BG104575A (en) 2001-02-28
IL136889A0 (en) 2001-06-14
DK1047665T3 (da) 2004-02-02
AU2277699A (en) 1999-07-26
ES2209244T3 (es) 2004-06-16
CN1284942A (zh) 2001-02-21
AP9901436A0 (en) 1999-03-31
OA11435A (en) 2004-04-28
AP1059A (en) 2002-04-22
PE20000176A1 (es) 2000-03-10
HUP0101300A3 (en) 2002-11-28
NO20003506D0 (no) 2000-07-07
HUP0101300A2 (hu) 2001-08-28
MA26594A1 (fr) 2004-12-20
US6350907B1 (en) 2002-02-26
HRP20000460A2 (en) 2001-06-30
EP1047665B1 (en) 2003-10-22
KR100385662B1 (ko) 2003-05-28
EA002971B1 (ru) 2002-12-26
SI1047665T1 (en) 2004-02-29
CO4990971A1 (es) 2000-12-26
AU736511B2 (en) 2001-07-26
NO20003506L (no) 2000-07-07
EA200000628A1 (ru) 2001-02-26
BR9813719A (pt) 2000-10-17
KR20010033990A (ko) 2001-04-25
WO1999035124A1 (en) 1999-07-15
PL342763A1 (en) 2001-07-02
SK10112000A3 (sk) 2002-02-05
DZ2701A1 (fr) 2003-09-01
TNSN99002A1 (fr) 2005-11-10
DE69819206T2 (de) 2004-04-15
TR200001909T2 (tr) 2000-12-21
AR014270A1 (es) 2001-02-07
PT1047665E (pt) 2004-01-30
CA2317604A1 (en) 1999-07-15
ATE252547T1 (de) 2003-11-15
HN1998000199A (es) 2000-11-03
IS5531A (is) 2000-06-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6090852A (en) Substituted alpha-aminosulphonyl-acetohydroxamic acids as therapeutic agents
US6399627B1 (en) Inhibitors of factor Xa
US5859061A (en) Bis-sulfonamides hydroxamic acids as MMP inhibitors
US20070010457A1 (en) Caspase inhibitors and uses thereof
US5872138A (en) Thrombin inhibitors
JPH0660144B2 (ja) シクロアルキル置換されたグルタルアミド抗高血圧剤
AU2011306396A1 (en) Matrix metalloproteinase inhibitors
CZ297278B6 (cs) Deriváty hydroxamové a karboxylové kyseliny a jejich pouzití
JP2004514669A (ja) セリンプロテアーゼ阻害剤として有用な酸誘導体
JPH0625195A (ja) スルホンアミドカルボキシアミド類
AU679474B2 (en) Carboxy-peptidyl derivatives as antidegenerative active agents
AU4411797A (en) Thrombin inhibitors
CZ20002459A3 (cs) Inhibitory matričních metaloproteinas, způsoby jejich výroby, farmaceutické kompozice a způsoby léčení na jejich bázi
JP2000503010A (ja) アミジノプロテアーゼ阻害剤
CZ145598A3 (cs) Merkaptoalkylpeptidylová sloučenina, její použití pro výrobu přípravku pro léčení nebo prevenci stavu souvisejícího s metalloproteinázou nebo TNF alfa a farmaceutický přípravek ji obsahující
JP5186384B2 (ja) メタロプロテイナーゼインヒビターとしての（２，５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−ｎ−ヒドロキシ−アセトアミド
US8119673B2 (en) Compounds 148
US8153647B2 (en) Aryl- and heteroaryl-ethyl-acylguanidine derivatives, their preparation and their application in therapeutics
US5773428A (en) Matrix metalloprotease inhibitors
MXPA00006761A (en) Matrix metalloprotease inhibitors
HRP960260A2 (en) Hover boat