CN1284942A - 基质金属蛋白酶抑制剂 - Google Patents

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Abstract

式(Ⅰ)化合物或其药用盐或二者的溶剂化物,其中取代基如说明书中所述,它们是基质蛋白酶(MMP)抑制剂。

Description

基质金属蛋白酶抑制剂
本发明涉及某些化合物及其药用盐，它们抑制基质金属蛋白酶(MMP)，特别是MMP-3、MMP-12和MMP-13。因此，它们可用于治疗患有通过抑制MMP、特别是MMP-3、MMP-12和MMP-13可缓解的病症的哺乳动物。
MMP构成了一族结构相近的含锌的金属蛋白酶，作为正常生理过程的一部分及在病理状态中，它们参与细胞外基质蛋白的改型、修补和降解。由于它们的高破坏潜力，MMP通常在封闭调节之下，且MMP调节失调作为一种因素与一些病症相关。认为MMP为重要因素的病症的实例为涉及骨重构、子宫中胚胎植入、免疫细胞渗入炎性位点、排卵、精子发生、伤口修复期间的组织重构和器官分化的病症，如静脉性和糖尿病性溃疡、褥疮、结肠溃疡如溃疡性结肠炎和节段性回肠炎、十二指肠溃疡、纤维变性、肿瘤局部侵染邻近区域、肿瘤细胞从原发位点至继发位点的转移传播及关节炎中的组织破坏、皮肤病如营养不良性表皮松解大泡形成、疱疹样皮炎或由栓塞现象引起或并发的病症如慢性或急性心脏或脑梗塞形成。
涉及MMP-3和MMP-13的病症包括组织破坏如静脉性和糖尿病性溃疡、褥疮、结肠溃疡如溃疡性结肠炎和节段性回肠炎、十二指肠溃疡，及关节炎中的组织破坏，皮肤病如营养不良性表皮松解大泡形成、疱疹样皮炎，或由栓塞现象引起或并发的病症如慢性或急性心脏或脑梗塞形成。
某些MMP的另一个重要功能是活化其它酶，包括其它MMP，这是通过将它们的蛋白酶功能域的前功能域酶切实现的。因此，某些MMP调节其它MMP的活性，因而一种MMP的超量产生可能导致另一种MMP将细胞外基质过量蛋白水解。
MMP-3的过量产生被认为是引起病理组织破坏的原因，这种破坏是一些疾病和病症的基础。例如，MMP-3已发现于骨关节炎和类风湿性关节炎患者的的滑膜和软骨，因此认为MMP-3参与这些疾病引起的关节破坏(见K.L.Sirum，C.E Brinkerhoff，Biochemistry，1989，28，8691；Z.Gunja-Smith，H.Nagasse，J.F.Woessner，Biochem.J.，1989，258，115)。MMP-13也被认为在骨关节炎和类风湿性关节炎中扮演重要角色(M.Stahle-Backdahle，B.Sandstedt，K.Bruce，A.Lindahl，M.G.Jimenez，J.A.Vega，C.Lopez Otin，Lab.Invest.，1997，76，717-28；O.Lindy，Y.T.Konttinen，T.Sorsa，Y.Ding，S.Santavirta，A.Ceponis，C.Lopez Otin，Arthritis Rheum.1997，40，1391-9)。
MMP-3的超量表达也被认为是引起很多组织破坏和慢性伤口的慢性性质如静脉性和糖尿病性溃疡及褥疮的原因(见M.Vaalamo，M.Weckroth，P.Puoakkainen，J.Kere，P.Saarinen，J.Lauharanta，U.K.Saarialho-Kere，Brit.J.Dermatology，1996，135，52-59)。
在正常和慢性伤口的愈合期间，伤口边缘的迁移的角质细胞表达MMP-1(U.K.Saarialho-Kere，S.O.Kovacs，A.P.Pentland，J Clin.Invest.1993，92，2858-66)。有证据表明在体外角化细胞在Ⅰ型胶原基质上的迁移需要MMP-1，并在存在非选择性MMP抑制剂SC44463((N4-羟基)-N1-[(1S)-2-(4-甲氧基苯基)甲基-1-((1R)-甲基氨基)羰基)]-(2R)-2-(2-甲基丙基)丁二酰胺)时被彻底抑制(B.K.Pilcher，J.A.Dumin，B.D.Sudbeck，S.M.Krane，H.G.Welgus，W.C.Parks，J.Cell Biol.，1997，137，1-13)。体内角质细胞迁移是发生有效的伤口愈合的基础。
在延长的重构阶段和上皮重新形成的开始期间，MMP-2和MMP-9似乎在伤口愈合中分别起重要作用(M.S.Agren，Brit.J.Dermatology，1994，131，634-40；T.Salo，M.Makanen，M.Kylmaniemi，Lab.Invest.，1994，70，176-82)。强非选择性MMP抑制剂BB94((2S，3R)-5-甲基-3-{[(1S)-1-(甲基氨基甲酰基)-2-苯基乙基]氨基甲酰基}-2-[(2-噻吩基硫基)甲基]己酰基羟胺酸，巴马司他)抑制基膜的内皮细胞侵入，于是抑制血管生成(G.Tarboletti，A.Garofalo，D.Belotti，T.Drudis，P.Borsotti，E.Scanziani，P.D.Brown，R.Giavazzi，J.Natl.Cancer Inst.，1995，87，293-8)。有证据表明此过程需要活化的MMP-2和/或9。
因此，非选择性MMP抑制剂，其抑制MMP 1和/或2和/或9，预计会损害伤口愈合。如上所述，MMP-14引起MMP-2的活化，因此抑制MMP-14也可导致伤口愈合的损害。
MNT-3的产生也已被认为参与了存在结肠或十二指肠溃疡的病症中的组织损伤(如在溃疡性结肠炎和节段性回肠炎中，见S.L.Pender，S.P.Tickle，A.J.Docherty，D.Howie，N.C.Wathen，T.T.MacDonald，J.Immunol.，1997，158，1582；C.J.Bailey，R.M.Hembry，A.Alexander，M.H.Irving，M.E.Grant，C.A.Shuttleworth，J.Clin.Pathol.，1994，47，113-6)，十二指肠(见U.K.Saarialho-Kere，M.Vaalamo，P.Puolakkainen，K.Airola，W.C.Parks，M.L.Karjalainen-Lindsberg，Am.J.Pathol.，1996，148，519-26)。在这些病症的愈合阶段中也可能需要MMP-1和MMP-2。选择性的MMP-3抑制剂较非选择性抑制剂可能更有效。
MMP-3也参与皮肤病如营养不良性表皮松解大泡形成(T.Sato，K.Nomura，I.Hashimoto，Arch.Dermatol.Res.，1995，287，428)和疱疹样皮炎(K.Airola，M.Vaalamo，T.Reunala，U.K.Saarialho-Kere，J.Invest.Dermatology，1995，105，184-9)。
MMP-3引起的动脉硬化斑破裂可导致心脏和脑血管梗塞(F.Mach等，Circulation，1997，96，396-9)。因此，MMP-3抑制剂可以应用于治疗栓塞现象引起的或并发的病症，如慢性或急性心脏或脑血管梗塞。
MMP-12(巨噬细胞弹性蛋白酶)被认为对动脉粥样硬化、胃肠道溃疡和肺气肿的发病有贡献。例如，在兔动脉粥样硬化模型中，巨噬细胞泡沫细胞大量表达MMP-12(S.Matsumoto等，Am.J.Pathol.1998，153，109)。在人胃肠道溃疡，如在溃疡性结肠炎和节段性回肠炎所见，在脱落粘膜上皮的附近，MMP-12也由巨噬细胞大量表达(M.Vaalamo等，Am.J.Pathol.，1998，152，1005)。人们认为MMP-12对由吸烟造成的肺损伤的恶化来说是重要的。在吸烟引起的肺气肿模型中，缺乏MMP-12基因的小鼠对该症状的发展有抵抗作用，而野生小鼠患有显著的肺损伤(RD Hautamaki等，Science，1997，2 77，2002)。
对MMP的最新综述见Zask等，现代药物设计(CurrentPharmaceutical Design)，1996，2，624-661；Beckett，Exp.Opin.Ther.Patents，1996，6，1305-1315；及Beckett等，现代药物发现(Drug Discovery Today)，第1卷(第1期)，1996，16-26。
各种MMP及其作用底物的其它名称见下表(Zask等，同上)。
Figure 9881293600171
一些出版物中，包括上述综述中提及的一些，描述了作为MMP抑制剂的如下通式化合物。
其中“A”是“α”基团而XCO是锌结合基团如羧酸或羟胺酸部分。
上述Beckett等的综述称P2’位可以是很大范围的基团，而不显著影响这些化合物的作用。
国际专利申请WO96/33165和WO96/33161(British BiotechPharmaceuticals Ltd.)以通式方式公开了上述式“GENMMP”化合物，特别是P1’为选择性取代的苯基(C1-6)烷基而P3’是基团CHRxRy，其中Rx和Ry表示选择性取代的苯基或杂芳基环。据称这些化合物是相对于人成纤维细胞胶原酶(MMP-1)和72kDa明胶酶(MMP-2)的MMP-3和MMP-7的选择性抑制剂。
国际专利申请WO96/16027(Syntex Inc.和AgouronPharmaceuticals Inc.)公开了如上所述通式“GENMMP”的MMP抑制剂，其中COX包括CO2H和CONHOH，P1’是基团R2X，其中包括任选性取代的芳基(C0-4亚烷基)，而P3’是(CH2)pR7，其中p是0至4，其条件是当p不是0时，则R2X是联苯基烷基，而R7是芳基或杂芳基。据称其中p是0、2或3的化合物是优选的，而p是0及COX是CO2H或CONHOH的化合物优选用来抑制matrilysin(即MMP-7)。
所述WO96/16027的通式“GENMMP”中的一些化合物已被Agourongroup公开(2nd Winter Conference on Medicinal and BioorganicChemistry，Steamboat Springs，Colorado，USA，January 1997)，例如其中X是OH，P1’是任选性地4′-取代的联芳基丙基，P2’是异丁基而P3’是4-甲氧羰基苯基。据报告这些化合物具有较差至中等的MMP-3/MMP-2选择性。发现使用α-取代基并用4-甲基苯硫基代替4-甲氧羰基苯基大大提高了MMP-3/MMP-2的选择性。
Beckett的综述(如上)也提及了通式“GENMMP”的Agouron化合物(综述的#31)，其中X是OH，P1’是联苯基丙基，P2’是叔丁基而P3’是4-吡啶基。此化合物对MMP-3和MMP-2具有几乎相等的Ki值，故对MMP-3和MMP-2之间没有选择性。
国际专利申请WO95/12603(Syntex)公开的上述式“GENMMP”化合物据称是MMP-3和MMP-7的抑制剂，其中P3’是取代的苯基而P1’包括芳烷基。
我们现在发现一组MMP抑制剂化合物，其对MMP-3、MMP-12和MMP-13具有良好的活性，并较其它MMP如MMP-1、2、9和14而言对MMP-3具有良好的选择性。现已发现此组化合物的MMP-3选择性显著依赖于P1’和P3’取代基的特定组合，这种效果从上述现有技术中是不能预见的。
因此，本发明提供了式(Ⅰ)的化合物及其药用盐：
Figure 9881293600181
其中
R1是H、OH、C1-4烷基、C1-4烷氧基或C2-4链烯基，
R2是C1-6烷基，其任选性地被氟、吲哚基、咪唑基、SO2(C1-4烷基)、C5-7环烷基取代，或被任选性保护的OH、SH、CONH2、CO2H、NH2或NHC(=NH)NH2基团取代，
任选性被C1-6烷基取代的C5-7环烷基，
或者是被任选性保护的OH、C1-6烷氧基、苄氧基或苄硫基任选性取代的苄基，
其中所述OH、SH、CONH2、NH2或NHC(=NH)NH2基团的任选性保护基选自C1-6烷基、苄基、C1-6烷酰基，
且所述CO2H的任选性保护基选自C1-6烷基或苄基，R3、R5和R6彼此独立地选自H和F，R4是甲基、Cl和F，X是HO或HONH，Y是直接连接或0，Z是式(a)基团：
其中R10是C1-4烷基、C1-4烷氧基甲基、羟基(C2-4烷基)、羧基(C1-4烷基)或(氨基或二甲基氨基)C2-4烷基，
而R11是苯基、萘基或吡啶基，其被不超过3个独立地选自卤素和甲基的取代基任选性取代；
或Z为(b)    
Figure 9881293600201
R14是H、OH、甲基或卤素，
Ar是式(c)、(d)或(e)的基团：
其中
A是N或CR12，
B是N或CR13，
条件是A和B不都是N，
R7和R9彼此独立地为H或F，
R8、R12和R13彼此独立地为H、CN、C1-6烷基、羟基(C1-6烷基)、羟基(C1-6)烷氧基、C1-6烷氧基(C1-6)烷氧基、(氨基或二甲基氨基)C1-6烷基、CONH2、OH、卤素、C1-6烷氧基、(C1-6烷氧基)甲基、哌嗪基羰基、哌啶基、C(NH2)=NOH或C(=NH)NHOH，条件是R8、R12和R13中的至少两个是H。
只要碳原子数允许，“烷基”，包括“烷氧基”的烷基部分，以及“链烯基”可以是直链或支链。
“卤素”指F、Cl、Br或I。
本发明的化合物是MMP抑制剂，并是特别强和选择性的MMP-3抑制剂，特别与对MMP-1，2，9和/或14比较具有良好的选择性。此外，本发明的某些化合物具有有利的MMP-12和/或MMP-13抑制活性。
优选，R1是H、OH、C1-4烷基或C1-4烷氧基。
更优选R1是H、OH、正丙基或乙氧基。
首选R1是H。
优选R2是C1-6烷基，其任选性地被吲哚基、C1-6烷硫基、SO2(C1-4烷基)、C5-7环烷基、OH或SH取代，
任选性地被C1-6烷基取代的C5-7环烷基，
或者R2是苄基。
更优选R2是被OH、SO2(C1-4烷基)或C5-7环烷基任选性取代的C1-6烷基，
被C1-6烷基任选性取代的环己基，
或者R2是苄基。
还更优选R2是环己基甲基、异丙基、1-甲基环己基、叔丁基、C(CH3)2SO2CH3、苄基或C(CH3)2OH。
还进一步更优选R2是异丙基、叔丁基或苄基。
首选R2是叔丁基。
优选Z是式(a)基团：
其中R10是C1-4烷基、C1-4烷氧基甲基或羟基(C2-4烷基)，
而R11是苯基或吡啶基，其任选性地被不超过3个独立地选自卤素和甲基的取代基取代，
或Z是    
Figure 9881293600221
更优选Z是式(a)基团：
Figure 9881293600222
其中R10是C1-4烷基、C1-4烷氧基甲基或羟基(C2-4烷基)，而R11是苯基、吡啶-4-基或吡啶-3-基，
或Z是
Figure 9881293600223
还更优选Z是式(a)基团：
Figure 9881293600224
其中R10是甲基、CH2OCH3或CH2OH，而R11是苯基、吡啶-4-基或吡啶-3-基，
或Z是
首选Z是下式基团
Figure 9881293600226
优选R3是H。
当Y是0时，优选R4是F。
当Y是直接连接时，优选R4是氯或甲基。
优选R5是H。
优选R6是H。
优选Ar是式(c)基团，
其中
A是CR12而B是CR13，
R7和R9彼此独立地为H或F，
R8和R13彼此独立地为H、F、Cl、CN、CONH2、甲基或甲氧基，而
R12是H、C1-6烷基、CN、羟基(C2-6烷基)、(氨基或二甲基氨基)C2- 6烷基、CONH2、OH、卤素、C1-6烷氧基、(C1-6烷氧基)甲基、哌嗪基羰基、哌啶基、C(NH2)NOH或C(=NH)NHOH。
更优选Ar是式(c)基团，
Figure 9881293600232
其中A是CR12、B是CR13，而R7、R8和R9是H。
还更优选Ar是式(c)基团，
其中
A是CR12、B是CR13、R7、R8和R9为H，
R12是H、C1-6烷基、CN、羟基(C2-6烷基)、(氨基或二甲基氨基)C2- 6烷基、CONH2、OH、卤素、C1-6烷氧基、(C1-6烷氧基)甲基、C(NH2)=NOH或C(=NH)NHOH，
而R13是H、甲氧基、CN、CONH2、甲基或F。
还进一步优选Ar是苯基、3-甲氧基苯基、4-氰基苯基、3-氰基苯基、3-氨基甲酰基苯基或4-羟基脒基苯基。
首选Ar是苯基或3-甲氧基苯基。
优选的一组物质是其取代基定义如实施例中所述的那些化合物及其盐，即：
R1是H、OH、正丙基或乙氧基，
R2是叔丁基、异丙基或苄基，
Z是式
其中R10是甲基、CH2OCH3或CH2OH，而R11是苯基、吡啶-4-基或吡啶-3-基，
或Z是    
R3是H，
R4是甲基、氯或氟，
R5是H，
R6是H，
而Ar是苯基、3-甲氧基苯基、4-氰基苯基、3-氰基苯基、3-氨基甲酰基苯基或4-羟基脒基苯基。
另一组优选的化合物是下文实施例的化合物及其盐。
最优选的物质选自实施例3、4、8、14、15、16、22、29、30、31和32的化合物及其盐。
药用盐是本领域技术人员熟知的，例如包括上述现有技术中提及的那些，及Berge等在J.Pharm.Sci.，66，1-19(1977)中所提及的。适宜的酸加成盐为与能形成无毒盐的酸形成的盐，包括盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硝酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸氢盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、葡萄糖酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、枸橼酸盐、酒石酸盐、抗坏血酸盐、瑚珀酸盐、马来酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐和对甲苯磺酸盐。
药用碱加成盐是本领域技术人员熟知的，例如包括上述现有技术中提及的，可以由能形成无毒盐的碱形成，包括铝、钙、锂、镁、钾、钠和锌盐，及无毒胺的如二乙醇胺的盐。
式(Ⅰ)的某些化合物可以以几何异构体的形式存在。式(Ⅰ)中除了标明的中心外，式(Ⅰ)化合物可以具有一个或多个不对称中心，故可以以两个或多个立体异构体的形式存在。除了包括基团Z的式(Ⅰ)中标明的中心外，本发明包括式(Ⅰ)化合物的所有单个立体异构体和几何异构体及其混合物。
本发明的另一方面是含上述定义的化合物或盐以及药用辅剂、稀释剂或载体的药物组合物。
本发明的另一方面是用作药物的上述定义的化合物或盐。
本发明的另一方面是上述定义的化合物或盐在制备治疗由一种或多种基质金属蛋白酶、特别是MMP-3和/或MMP-12和/或MMP-13介导的病症的药物方面的用途。
本发明的另一方面是治疗由一种或多种基质金属蛋白酶、特别是MMP-3和/或MMP-12和/或MMP-13介导的病症的方法。
应领会所谓治疗包括预防以及减轻MMP介导病症的已有症状。
本发明还提供了制备本发明化合物的方法，其在下文和实施例中描述。本领域技术人员将领会本发明的化合物可以通过不同于本文中特别描述的方法，通过将下文中描述的方法进行修改和/或其变化形式，以及本领域已知的方法进行合成。对合成、官能团转化、保护基的使用等的适当指导，例如，见RC Larock的“有机转化大全(ComprehensiveOrganic Transformations)”，VCH Publishers Inc.(1989)、J March的“高等有机化学(Advanced Organic Chemitry)”，Wiley Interscience(1985)、S Warren的“有机合成设计(Designing Organic Synthesis)”，Wiley Interscience(1978)、S Warren的“Organic Synthesis-TheDisconnection Approach”，Wiley Interscience(1982)、RK Mackie和DM Smith的“有机合成指南(Guidebook to Organic Synthesis)”Longman(1982)、TW Greene和PGM Wuts的“有机合成中的保护基(Protective Groups in Organic Synthesis)”，John Wiley和Sons Inc.(1991)及PJ Kocienski的“保护基(Protecting Groups)”，GeorgThieme Verlag(1994)。
在下述方法中，除非另外说明，取代基的定义如上述式(Ⅰ)化合物中所述。
方法1
X是OH的式(Ⅰ)化合物可以通过相应的下式(Ⅱ)化合物获得，在式(Ⅱ)中X1是在不引起式(Ⅱ)化合物的其它部分实质转变的条件下能转变为羧基的基团。此基团的适宜的实例是CO2(叔丁基或甲基)。该叔丁基可以通过与酸如氢氯酸或三氟乙酸(TFA)在适宜的溶剂如无水二氯甲烷或二噁烷中，在适宜的温度如0至20℃之间反应而被解除。甲酯可以用氢氧化物如氢氧化锂在适宜的溶剂系统如四氢呋喃/水混合物中在室温下水解。
式(Ⅱ)化合物可以通过本领域已知方法制备，并在下面的制备例中举例说明，例如通过适宜的胺和酸衍生物偶联，这些衍生物是通过已知化学途径可得的。
方法2
其中X是NHOH的式(Ⅰ)化合物可以由X是OH的相应式(Ⅰ)化合物获得，即通过用羟胺和偶合试剂如N-[(二甲基氨基)-1H-1，2，3-三唑并[4，5-b]吡啶-1-基亚甲基-N-甲基甲铵(methaninium)六氟磷酸盐N-氧化物(“HATU”，该试剂描述于Tet.Letts.(1994)35，2279)，在适当的温度如0-20℃下处理X是OH的式(Ⅰ)化合物，羟胺例如通过由羟胺盐如盐酸盐用适宜的碱如叔胺如二异丙基乙胺在适宜的溶剂如N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中处理获得。
X是OH的式(Ⅰ)化合物可以通过常规方法及本文中描述的方法制备。
方法3
其中X是NHOH的式(Ⅰ)化合物可以由X是OH的相应式(Ⅰ)化合物获得，即通过用O-烯丙基羟胺和偶合试剂如肽偶合试剂如7-氮杂苯并三唑-1-基氧基三(吡咯烷基)鏻六氟磷酸盐(“PyAOP”)，在适当的温度如0-20℃下处理X是OH的式(Ⅰ)化合物，该烯丙基羟胺例如通过由O-烯丙基羟胺盐如盐酸盐用适宜的碱如叔胺如二异丙基乙胺在适宜的溶剂如N，N-二甲基甲酰胺(DMF)或二氯甲烷中处理获得。此步骤给出下式(Ⅲ)的化合物。
该偶合方法描述于Tet.Letts.(1994)35，2279。
Figure 9881293600281
在适当的催化剂如双(三苯基膦)钯(Ⅱ)醋酸盐的存在下，在适当的溶剂如含水乙醇中，在适宜的温度如含水乙醇的回流温度下，通过用甲酸铵处理，可以将式(Ⅲ)的化合物转变为X是NHOH的式(Ⅰ)化合物。
方法4X是NHOH而R1是OH的式(Ⅰ)化合物可以通过式(Ⅳ)的化合物与羟胺反应制备，该羟胺例如由羟胺盐如盐酸盐和适宜的碱如甲醇钠在适宜的溶剂如甲醇中获得。
Figure 9881293600291
式(Ⅳ)化合物可以通过以下制备例中例举的常规方法制备。
方法5
由下式(Ⅴ)的化合物通过与下式(Ⅵ)的化合物交叉偶联，可以制备式(Ⅰ)的化合物：
其中X2是被保护的酸如叔丁基酯或甲酯基团而LG是交叉偶联离去基团如I、Br或OSO2CF3。此交叉偶联反应可以在催化剂如双(三邻甲苯基)膦钯(Ⅱ)醋酸盐用适宜的碱如三乙胺、在适宜的溶剂如乙腈或DMF中在适宜的温度如50-150℃之间进行。
此类反应总体上由Heck在Tet.Letts.(1984)25，2271和其它一些文章描述。
式(Ⅴ)化合物可以通过常规方法如通过采用下述制备例中描述的方法制备。
式(Ⅵ)的化合物可以通过常规方法如通过采用下述制备例中描述的方法制备，并参考下列文献：
Synthesis(1984)709；J Chem Soc Perkin Trans I(1977)1841；J Org Chem(1994)59，6095；出处同上，(1979)44，4444及Tet.Letts.(1997)38，1749。
此反应所得产物是式(Ⅶa)和(Ⅶb)化合物的混合物，其中X2定义如式(Ⅴ)化合物所示。
通过用常规方法如在催化剂的存在下氢化或与二酰亚胺反应(该二酰亚胺例如由对甲苯磺酰基肼产生)将烯键还原，并将保护的酸部分X2脱保护，可以将式(Ⅶa)和(Ⅶb)的化合物转变为X是OH的式(Ⅰ)化合物。
本领域技术人员会领会在本发明化合物的合成过程中其它的保护和随后的脱保护方案可以通过常规技术来实现，例如由Greene和Wuts，及Kocienski(见上)的论著中描述的。
当需要或必要时，将式(Ⅰ)的化合物转变为其药用盐。式(Ⅰ)化合物的药用盐可以通过将式(Ⅰ)化合物的溶液和所需的适当酸或碱的溶液一起混合而方便地制备。此盐可以从溶液中沉淀并过滤收集，或可以通过其它方式如将溶剂蒸发来收集。
通过文献中熟知的方法，本发明的某些化合物互变为本发明的某些其它化合物。
本发明的化合物既可以由在本文方法和实施例部分中描述的方法获得，也可以用本领域已知方法对上述方法进行适当的改变来获得。应理解本文中提及的合成转变方法可以以多种不同的顺序进行，以便有效地合成所需的化合物。熟练的化学工作者将根据其判断和技能为合成靶化合物采用最有效率的反应顺序。
本发明的化合物和盐可以通过常规方法分离和纯化。
可以通过常规技术分离非对映异构体，例如，通过将式(Ⅰ)化合物或其适当的盐或其衍生物的立体异构体混合物进行分部结晶、色谱或HPLC。式(Ⅰ)化合物的单个对映体也可以通过相应的光学纯中间体制备，或通过拆分，例如将相应的外消旋混合物用适当的手性载体进行HPLC，或将相应的外消旋混合物与适当光学活性的酸或碱反应所形成的非对映异构盐进行分部结晶。
为了给人使用，式(Ⅰ)的化合物或其盐可以单独给药，但是一般是以与药用稀释剂或载体的混合物形式给药，稀释剂或载体的选择视给药途径和标准药学实践而定。例如，它们可以口服，包括舌下给药，其形式为含赋形剂如淀粉或乳糖的片剂，或单独或与赋形剂混合的胶囊或卵状胶囊，含矫味剂或着色剂的酏剂、溶液剂或混悬剂形式。此化合物或盐可以掺混入胶囊或片剂中以在口服给药后特定时间内通过延迟所述胶囊或片剂的溶解，完成靶向结肠或十二指肠的给药。通过药剂对发现于十二指肠或结肠的细菌的敏感性，可以控制溶解，以便在到达胃肠道的靶区域前基本不发生溶解。这些化合物或盐可以非肠道注射，例如，静脉、肌肉或皮下注射。对于非肠道给药，它们最好以灭菌含水溶液或悬液的形式使用，其中可以含有其它物质，例如，足够的盐或葡萄糖以使该溶液与血液等渗。它们可以局部给药，其形式为灭菌霜剂、凝胶剂、混悬剂、洗剂、软膏、散剂、喷雾剂、加入药物的敷料或透皮帖剂。例如，它们可以掺入由聚乙二醇或液体石蜡的水性或油性乳液组成的霜中，或它们可以掺入由白蜡软石蜡基质构成的软膏中，或为用纤维素或聚丙烯酸衍生物或其它粘度改进剂形成的水凝胶，或作为干粉或用丁烷/丙烷、HFA或CFC抛射剂的液体喷雾剂或气雾剂，或作为掺混了药物的敷料，如为纱布敷料，含软白蜡或聚乙二醇的薄纱敷料，或含水凝胶、水胶体、藻酸盐，或是薄膜敷料。这些化合物或盐也可以眼内给药，其用适当的缓冲剂、粘度改进剂(如纤维素衍生物)、防腐剂(如苯扎氯铵(BAK))和调节渗透压的试剂(如氯化钠)制成滴眼剂。这些制剂技术是本领域熟知的。
所有的制剂还可以含有适当的稳定剂和防腐剂。
对于给人口服和非肠道给药，式(Ⅰ)化合物或其盐的日剂量水平为0.001至20，优选0.01至20，更优选0.1至10，首选0.5至5mg/kg(单次或多次给药)。于是，这些化合物的片剂或胶囊应含有0.1至500，优选50至200mg的活性化合物，单剂给药，或如果适当则一次使用两个或多个单剂量。
对于给有慢性伤害的人局部给药，在混悬剂或其它制剂中，这些化合物的日剂量水平为0.01至50mg/ml，优选0.3至30mg/ml。
在任何情况下，医生会确定对个体患者最合适的实际剂量，且此剂量将随着特定患者的年龄、体重和反应而变化。上述剂量是平均情况的举例；当然个别情况下采用较高或较低的剂量范围是有利的，而这在本发明的范围内。
实验方法
化合物抑制由MMP 1、2、3、9、12、13和14引起的荧光肽裂解的能力，描述如下。
对MMP 2、3、9和14的检测基于Knight等描述的原始方案(Fed.Euro.Biochem.Soc.，296(3)，263-266；1992)，其中作了如下的小改动。
MMP-1的抑制
(ⅰ)酶的制备
在Pfizer Central Research制备催化域MMP-1。通过加入氨基苯基醋酸汞(APMA)，以1mM的最终浓度将MMP-1(1μM)的贮存液在37℃活化20分钟。然后，在Tris-HCl实验缓冲液(50mM Tris，200mM氯化钠，5mM氯化钙，20μM硫酸锌，0.05％Brij 35)pH7.5中稀释至浓度为10nM。该实验中所用酶的最终浓度为1nM。
(ⅱ)底物
实验中使用的荧光底物是Dnp-Pro-β-环己基-Ala-Gly-Cys(Me)-His-Ala-Lys (N-Me-Ala)-NH2，其最先由Bickett等描述(Anal.Biochem，212，58-64，1993)。此实验中所用最终底物浓度是10μM。
(ⅲ)酶抑制的测定
被测化合物溶解于二甲基亚砜并用实验缓冲液稀释，以便存在不超过1％的二甲基亚砜。向96孔板中的每个孔加入被测化合物和酶，并在37℃，在加入底物前，在轨道振摇器中平衡15分钟。然后，将板在37℃下孵育1小时，再用荧光计(Fluostar；BMG Lab Technologies，Aylesbury，UK)在激发波长355nm和发射波长440nm处测定荧光(底物裂解)。使用被测化合物浓度的一定范围从底物裂解的量测定抑制剂的效力，并由所得剂量效应曲线计算IC50值(抑制50％酶活性需要的抑制剂浓度)。
MMP-2、MMP-3和MMP-9的抑制
(ⅰ)酶的制备
在Pfizer Central Research制备催化域MMP-2、MMP-3和MMP-9。通过加入氨基苯基醋酸汞(APMA)将MMP-2、MMP-3或MMP-9的贮存液(1μM)活化。对于MMP-2和MMP-9，加入最终浓度为1mM的APMA，接着在37℃孵育1小时。通过加入2mM APMA，接着在37℃孵育3小时活化MMP-3。然后，在Tris-HCl实验缓冲液(100mM Tris，100mM氯化钠，10mM氯化钙和0.16％Brij 35 pH7.5)中将酶稀释至浓度为10nM。此实验中所用酶的最终浓度为1nM。
(ⅱ)底物
此筛选中使用的荧光底物是Mca-Arg-Pro-Lys-Pro-Tyr-Ala-Nva-Trp-Met-Lys(Dnp)-NH2(Bachem Ltd，Essex，UK)，其最先由Nagase等描述(J.Biol.Chem.，269(33)，20952-20957，1994)。选择此底物是因为其对MMP 2、3和9具有平衡的水解速率(分别为Kcat/Km 54000，59400和55300s-1M-1)。此实验中所用最终底物浓度是5μM。
(ⅲ)酶抑制的测定
被测化合物溶解于二甲基亚砜并用实验缓冲液(如上)稀释，以便存在不超过1％的二甲基亚砜。向96孔板中的每个孔加入被测化合物和酶，并在37℃，在加入底物前，在轨道振摇器中平衡15分钟。然后，将板在37℃下孵育1小时，再用荧光计(Fluostar；BMG LabTechnologies，Aylesbury，UK)在激发波长328nm和发射波长393nm测定荧光。使用被测化合物浓度的一定范围从底物裂解的量测定抑制剂的效力，并由所得剂量效应曲线计算IC50值(抑制50％酶活性需要的抑制剂浓度)。
MMP-2(人巨噬细胞弹性蛋白酶)的抑制
(ⅰ)酶的制备
使用催化域MMP-12(200μg/ml)。在Tris-HCl实验缓冲液(50mMTris，200mM氯化钠，5mM氯化钙、20μM硫酸锌、0.20％Brij 35)pH7.4中将MMP-12稀释至浓度为240ng/ml。实验中所用酶的最终浓度为60ng/ml。
(ⅱ)底物
此实验中使用的荧光底物是DNP-Pro-Cha-Gly-Cys(Me)-His-Ala-Lys(NMA)-NH2。此实验中所用最终底物浓度是10μM。
(ⅲ)酶抑制的测定
被测化合物溶解于二甲基亚砜并用实验缓冲液(如上)稀释，以便存在不超过1％的二甲基亚砜。向96孔板中的每个孔加入被测化合物和酶，并在37℃，在加入底物前，在轨道振摇器中平衡15分钟。然后，将板在37℃下孵育2小时，再用荧光计在激发波长360nm和发射波长460nm测定荧光。使用被测化合物浓度的一定范围从底物裂解的量检测抑制剂的效力，并由所得剂量效应曲线计算IC50值(抑制50％酶活性需要的抑制剂浓度)。
MMP-13的抑制
(ⅰ)酶的制备
由Pan Vera Corporation (Madison，Wisconsin)制备人重组MMP-13并在Pfizer(Groton，CT)鉴定。在37℃用2mM APMA将1.9 mg/ml的贮存液活化2小时。然后，用Tris-HCl实验缓冲液(50mM Tris，200mM氯化钠，5mM氯化钙、20μM氯化锌和0.20％Brij 35)pH7.5中将MMP-13稀释至浓度为5.3nM。此实验中所用酶的最终浓度为1.3nM。
(ⅱ)底物
此实验中使用的荧光底物是DNP-Pro-Cha-Gly-Cys(Me)-His-Ala-Lys(NMA)-NH2。此实验中所用最终底物浓度是10μM。(ⅲ)酶抑制测定
被测化合物溶解于二甲基亚砜并用检测缓冲液稀释，以便存在不超过1％的二甲基亚砜。向96孔板中的每个孔加入被测化合物和酶。向每个孔中加入底物引发反应。在96孔板式荧光计(Cytofluor II；PerSeptive Biosystems，Inc，Framingham，MA)在激发波长360nm和发射波长460nm处测定荧光强度。使用被测化合物浓度的一定范围从底物裂解的量检测抑制剂的效力，并由所得剂量效应曲线计算IC50值(抑制50％酶活性需要的抑制剂浓度)。
MMP-14的抑制
(ⅰ)酶的制备
催化域MMP-14购自德国Bielefeld大学化学系生化部Tschesche教授。将10μM酶贮存液在25℃下活化20分钟，接着加入5μg/ml的胰蛋白酶(Sigma，Dorset，UK)。然后，通过加入50μg/ml的大豆胰蛋白酶抑制剂(Sigma，Dorset，UK)中和此胰蛋白酶活性，之后将此酶贮存液在Tris-HCl实验缓冲液(100mM Tris，100mM氯化钠，10mM氯化钙和0.16％Brij 35，pH7.5)中稀释至浓度为10nM。实验中所用酶的最终浓度为1nM。
(ⅱ)底物
此筛选中所用荧光底物是Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH2(Bachem Ltd，Essex，UK)，如Will等(J.Biol.Chem.，271(29)，17119-17123，1996)所述。此实验中所用底物的最终浓度是10μM。
被测化合物对酶抑制的检测按照MMP2、3和9下所述进行。实施例的某些化合物的一些活性数据在下表中给出。
“MMP-x”抑制剂的IC50/nM
实施例 x=3 x=2 x=1 x=12 x=13 x=14 x=9 3/2se1
1 101 10803 85 107
2 13.5 1269 6000 130 5650 1908 94
*较之MMP-2对MMP-3的选择性
实施例6、8、9、14、15和22的化合物的MMP-3 IC50值为8-65nM，而MMP-3/MMP-2选择性在195-930。
实施例和制备例
用开口的玻璃毛细管和Gallenkamp熔点仪测定熔点并未校准。核磁共振(NMR)数据得自Varian Unity Inova-400，Varian UnityInova-300或Bruker AC300谱仪并用相对四甲基甲硅烷计的百万份数给出。质谱(MS)数据得自Finnigan Mat.TSQ 7000或FisonsInstruments Tr10 1000。计算和测得的离子数据指最低质量的同位素组分。红外(IR)光谱用Nicolet Magna 550 Fourier转换红外光谱仪检测。快速层析指在硅胶(Kieselgel 60，230-400目，得自E.Merck，Darmstadt)硅胶上的柱层析。得自E.Merck的Kieselgel 60 F254板用于TLC，用UV光、5％高锰酸钾水溶液或Dragendorff试剂(用亚硝酸钠水溶液喷雾)显示化合物。己烷指b.p.65-70℃的己烷混合物(hplc级)。乙醚指二乙基醚。乙酸指冰醋酸。1-羟基-7-氮杂-1H-1，2，3-苯并三唑(HOAt)，N-[(二甲基氨基)-1H-1，2，3-三唑并[4，5-b]吡啶-1-基亚甲基]-N-甲基甲铵六氟磷酸盐N-氧化物(HATU)和7-氮杂苯并三唑-1-基氧基三(吡咯烷基)鏻六氟磷酸盐(PyAOP)购自PerSeptiveBiosystems U.K.Ltd。“DIPE”指二异丙基醚。快速层析用的反向硅胶得自Fluka(Fluka 100，C18，40-63μ)。戊烷指h.p.l.c级正戊烷(b.p.35-37℃)。
注意：在一些制备例中描述了4-氨基联苯的某些衍生物。4-氨基联苯是已知的人致癌物质。因此，其类似物应小心处理。主要参考文献，见Yuta，K.，Jurs，P.C.，药物化学杂志(J.Med.Chem.)(1981)，24(3)，241-51；You，Z.，Brezzell，M.D.，Das，S.K.，Hooberman，B.H.，Sinsheimer，J.E.Mutat.Res.(1994)，320(1-2)，45-58；Hecht，S.S.等，药物化学杂志(1979)，22(8)，981-7。
实施例1。
(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[(3-甲基-4-苯基)苯基]己酸
在氮气氛下，在20℃、5分钟内将三氟乙酸(5mL)滴加到搅拌的(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]己酸叔丁基酯(制备例3)(285 mg，0.47 mmol)的无水二氯甲烷(5 mL)溶液中。将此溶液搅拌4小时并减压浓缩。将此残余物溶解于甲苯中并减压浓缩(两次)，并用乙醚研磨得到无色固体(210 mg，82％)。
m.p.160-162℃(乙酸乙酯)。
Rf 0.17(己烷/乙醚/乙酸=50∶50∶1)
HPLC保留时间7.3分钟(Phenomenex Magellen C18硅烷化的硅胶(5μ)，用乙腈/水/三氟乙酸=70∶30∶0.1(1mL/min)洗脱，通过u.v.(220nm)检测。
δH(400MHz，CD3OD)(可交换氢原子只部分交换)1.02(9H，s)，1.44(3H，d，J=7 Hz)，1.52(4H，m)，2.16(3H，s)，2.37(1H，dd，J=4和15 Hz)，2.50(2H，m)，2.60(1H，dd，J=9和15 Hz)，2.84(1H，m)，4.37(1H，d，J=10 Hz)，4.99(1H，五重峰，J=7 Hz)，6.94(1H，d，J=8 Hz)，7.00(2H，s和d，J=8 Hz，重叠)，7.13(1H，t，J=7 Hz)，7.16(2H，t，J=7 Hz)，7.23(4H，t，J=7 Hz)，7.29(1H，t，J=7 Hz)，7.38(2H，t，J=7 Hz)，7.72(1H，br d)，8.45(1H，br d)。
LRMS(热喷雾)m/z=543(NH+)
FTIRνmax。(KBr片)3290，2980，2930，1707，1661，1633，1553，700 cm-1
实测值：        C，75.22；H，7.73；N，5.16；
C34H42N2O4理论值C，75.25；H，7.80；N，5.16％
实施例2。
(2R)-2-｛3-[3-氯-(4-苯基)苯基]丙基｝-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-(N4-羟基)丁二酰胺
Figure 9881293600391
a)在氮气氛下，在0℃下，将0-烯丙基羟胺盐酸盐(17 mg，0.152mmol)加入到(3R)-6-[(3-氯-4-苯基)苯基]-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)己酸(制备例4)(66 mg，0.117 mmol)和二异丙基乙胺(78μL，0.456 mmol)的搅拌的无水二氯甲烷(1ml)溶液中。一次加入7-氮杂苯并三唑-1-基氧基三(吡咯烷基)鏻六氟磷酸盐(79 mg，0.152mmol)，并将此混合物在0℃下搅拌2小时，然后升温至室温。加入1小时后，将此混合物倒入乙酸乙酯(25 mL)中并用5％枸橼酸水溶液(2×10mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(2×10mL)依次洗涤。将此有机溶液干燥(硫酸钠)并减压浓缩。将此固体残余物悬浮于乙醚(3 mL)并过滤得到(2R)-2-｛3-[3-氯-(4-苯基)苯基]丙基｝-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-(N4-3-丙烯基氧基)丁二酰胺(58 mg，82％)，为白色固体。
Rf 0.45(乙酸乙酯∶己烷=2∶1)。
δH(400MHz，CDCl3)0.98(9H，s)，1.46(3H，d，J=6.5 Hz)，1.48(4H，m)，2.17(1H，m)，2.39(1H，m)，2.50(2H，m)，2.74(1H，m)，4.13(1H，d，J=8 Hz)，4.29(2H，d，J=6 Hz)，5.06(1H，五重峰，J=6.5Hz)，5.29(2H，br d)，5.87(2H，m和br d重叠)，6.45(1H，br s)，6.97(1H，d，J=8 Hz)，7.19(7H，复杂)，7.35(5H，复杂)，8.36(1H，br s)。
LRMS(热喷雾)m/z=618(MH+，弱)。
b)将(2R)-2-｛3-[3-氯-(4-苯基)苯基]丙基｝-N1-[(1S)-2，2二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-(N4-3-丙烯基氧基)丁二酰胺(56 mg，0.091 mmol)和甲酸铵(59 mg，0.93 mmol)在乙醇/水(4∶1，4 mL)中的搅拌的混合物在氮气氛下加热回流得到无色溶液。加入双(三苯基膦)醋酸钯(3.4 mg，0.00465 mmol)。并将混合物加热回流40 min。冷却后，将此棕色溶液用乙酸乙酯(25 mL)稀释并用饱和氯化钠水溶液(2×10mL)洗涤，干燥(硫酸钠)并减压浓缩。将此残余物通过柱层析纯化(C18硅烷化的硅胶(40-63μ，用甲醇∶水=5∶1洗脱)得到(2R)-2-｛3-[3-氯-(4-苯基)苯基]丙基｝-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基)氨基｝羰基)丙基]-(N4-羟基)丁二酰胺(46 mg，88％)，为无色固体。
m.p.107-109℃。
Rf 0.43(C18硅烷化的硅胶，甲醇∶水=5∶1)
δH(400 MHz，CD3OD)0.98(9H，s)，1.39(3H，d，J=6.5 Hz)，1.47(4H，m)，2.13(1H，dd，J=6和14 Hz)，2.31(1H，dd，J=9和14 Hz)，2.48(2H，m)，2.85(1H，m)，4.32(1H，s)，4.96(1H，q，J=6.5 Hz)，6.80(1H，d，J=8 Hz)，7.11(4H，复杂)，7.22(3H，复杂)，7.32(5H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=578(MH+，弱)，562(MH+-0)
实测值：                   C，67.69；H，6.90；N，7.19；
C33H40ClN3O4·0.5H2O理论值 C，67.51；H，7.04；N，7.16％
实施例3。
N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-(N4-羟基)-(2R)-2-｛3-[3-甲基-(4-苯基)苯基]丙基｝丁二酰胺
a)在氮气氛、0℃下，将0-烯丙基羟胺盐酸盐(295 mg，2.69 mmol)加入到(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[(3-甲基-4-苯基)苯基]己酸(实施例1)(974mg，1.79mmol)和二异丙基乙胺(1.56mL，8.97mmol)的搅拌的无水二甲基甲酰胺(25mL)溶液中。一次加入7-氮杂苯并三唑-1-基氧基三(吡咯烷基)鏻六氟磷酸盐(1.40 gm，2.69 mmol)，并让此混合物升温至室温。再过4.25小时后，将此混合物倒入乙酸乙酯(500mL)并用饱和碳酸氢钠水溶液(2×200 mL)洗涤。将此洗涤液用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将此合并的有机溶液干燥(硫酸钠)并减压浓缩。将此固体残余物悬浮于乙醚(3 mL)并过滤，然后用乙酸乙酯重结晶得到N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-(2R)-2-｛3-[3-甲基-(4-苯基)苯基]丙基｝-(N4-3-丙烯基氧基)丁二酰胺(640mg，60％)，为白色固体。
Rf 0.31(乙酸乙酯/己烷=1∶1)。
δH(400MHz，CDCl3)1.00(9H，s)，1.48(3H，d，J=6.5 Hz)，1.56(4H，m)，2.22(3H，s)，2.42(1H，m)，2.52(3H，m)，2.80(1H，m)，4.20(1H，d，J=8 Hz)，4.29(2H，d，J=5 Hz)，5.07(1H，五重峰，J=6.5Hz)，5.28(2H，br)，5.90(1H，m)，6.13(1H，br s)，6.61(1H，brd)，6.95(1H，d，J=8 Hz)，7.00(1H，s)，7.10(1H，d，J=8 Hz)，7.25(8H，复杂)，7.38(2H，t，J=7 Hz)，8.69(1H，br s)。
LRMS(热喷雾)m/z=598(MH+，弱)，542(MH2 +-烯丙氧基，基峰)。
b)将N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-(2R)-2-｛3-[3-甲基-(4-苯基)苯基]丙基｝-(N4-3-丙烯基氧基)丁二酰胺(794 mg，1.32 mmol)和甲酸铵(419 mg，6.64 mmol)在乙醇/水(4∶1，25 mL)中的搅拌的混合物在氮气氛下加热回流得到无色溶液。加入双(三苯基膦)醋酸钯(40 mg，0.066 mmol)，并将混合物加热回流90 min。冷却后，将此棕色溶液用乙酸乙酯(250 mL)稀释并用饱和氯化钠水溶液(2×100 mL)洗涤，干燥(硫酸钠)并减压浓缩。将此残余物通过柱层析纯化(C18硅烷化的硅胶，用甲醇∶水=5∶1洗脱)并再用甲醇/二异丙基醚研磨得到N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-(N4-羟基)-(2R)-2-｛3-[3-甲基-(4-苯基)苯基]丙基｝丁二酰胺(440 mg，59％)，为无色固体。
m.p.114-116.5℃。
Rf 0.23(C18硅烷化的硅胶，甲醇∶水=5∶1)
δH(400Mhz，DMSO-d6)0.85(9H，s)，1.24(3H，d，J=7 Hz)，1.31(1H，m)，1.44(3H，m)，1.98(1H，dd，J=7和13 Hz)，2.11(1H，m，和3H，s重叠)，2.42(2H，m)，2.77(1H，m)，4.26(1H，d，10 Hz)，4.87(1H，五重峰，J=7 Hz)，6.91(1H，d，J=8 Hz)，6.97(2H，s和d，J=8 Hz，重叠)，7.18(7H，复杂)，7.29(1H，t，J=6 Hz)，7.35(2H，t，J=8 Hz)，7.64(1H，br d)，8.23(1H，br d)，8.44(1H，s)，10.28(1 H，br s)。
LRMS(热喷雾)m/z=558(MH+，弱)，542(MH+-0)
FTIR νmax(KBr片)3290，2970，2930，1643，1540，700 cm-1
实测值：                            C，72.60；H，8.02；N，7.31；
C34H43N3O4·0.25H2O理论值 C，72.63；H，7.80；N，7.47％
实施例4．
N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-(2R)-2-[3-(3-氟-4-苯氧基苯基)丙基]-(N4-羟基)丁二酰胺
Figure 9881293600431
在0℃、氮气氛下，将N-[(二甲基氨基)-1H-1，2，3-三唑并[4，5-b]吡啶-1-基亚甲基]-N-甲基甲铵六氟磷酸盐N-氧化物(740 mg，1.95mmol)加入到(3R)-3(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-(3-氟-4-苯氧基苯基)己酸(制备例5)(731mg，1.30 mmol)和二异丙基乙胺(220μL，1.30 mmol)的无水二甲基甲酰胺(10mL)的搅拌的溶液中。25分钟后，加入羟胺盐酸盐(271 mg，3.90mmol)，接着加入二异丙基乙胺(880μL，5.20 mmol)。将所得混合物在20℃搅拌16小时，倒入乙酸乙酯(150 mL)中并用pH7磷酸缓冲液(3×50mL)、饱和氯化钠水溶液(50mL)洗涤，干燥(硫酸钠)，并减压浓缩。将此残余物用二氯甲烷/二异丙基醚重结晶得到标题化合物，为无色固体(275 mg，24％)。将样本(130mg)通过制备hplc(Phenomenex C18Magellan柱，150×20mm，5μ填料，20 mL/min乙腈∶磷酸盐缓冲液(8.3 mM，pH 7.2)=1∶1，保留时间13.5 min)纯化，然后用二异丙基醚研磨，过滤并在50℃下真空干燥得到得到50 mg白色固体。
m.p.136-137℃
Rf 0.39(二氯甲烷∶甲醇∶浓氨水=90∶10∶1)
δH(400 MHz，CD3OD)1.02(9H，s)，1.42(3H，d，J=7 Hz)，1.48(3H，m)，1.58(1H，m)，2.16(1H，dd，J=6和14 Hz)，2.34(1H，dd，J=8和14 Hz)，2.49(2H，m)，2.86(1H，m)，4.34(1H，s)，4.99(1H，q，J=7 Hz)，6.86(4H，m)，6.94(1H，d，J=11.5 Hz)，7.04(1H，t，J=7 Hz)，7.12(1H，t，J=7 Hz)，7.18(2H，t，J=7 Hz)，7.27(4H，m)。
LRMS(热喷雾)m/z=535(MH+-HNCO)
FTIR νmax(KBr片)3290，2970，2930，1644，1508，1490，1220，700cm-1
实测值：                              C，68.14；H，6.94；N，7.21；
C33H40N3O5·0.25H2O理论值 C，68.08；H，7.01；N，7.22％
实施例5．
N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-(N4-羟基)-(2R)-2-[3-(3-甲基-4-苯氧基苯基)丙基]丁二酰胺
Figure 9881293600441
在20℃、氮气氛下，将N-[(二甲基氨基)-1H-1，2，3-三唑并[4，5-b]吡啶-1-基亚甲基]-N-甲基甲铵六氟磷酸盐N-氧化物(655 mg，1.72mmol)加入到(3R)-3(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-(3-甲基-4-苯氧基苯基)己酸(制备例6)(640 mg，1.15 mmol)和二异丙基乙胺(198μL，1.15 mmol)的无水二甲基甲酰胺(5 mL)的搅拌的溶液中。25分钟后，加入羟胺盐酸盐(239 mg，3.44 mmol)，接着加入二异丙基乙胺(792μL，4.60 mmol)。将所得混合物在20℃搅拌48小时，倒入乙酸乙酯(150 mL)中并用pH7磷酸缓冲液(3×50 mL)、饱和氯化钠水溶液(50 mL)洗涤，干燥(硫酸镁)，并减压浓缩。将此粗品通过快速层析纯化。首先，用二氯甲烷∶甲醇∶浓氨水=90∶10∶1洗脱进行层析得到黄色油状物。再通过快速层析纯化(用二氯甲烷∶甲醇=95∶5洗脱)得到桔黄色油状物，将其用二氯甲烷/二异丙基醚结晶得到标题化合物(25 mg，4％)。
Rf 0.27(二氯甲烷∶甲醇=90∶10)
δH(300 MHz，CDCl3)0.98(9H，s)，1.31(3H，d，J=7 Hz)，1.60(4H，m)，2.16(3H，s)，2.24(1H，m)，2.47(3H，m)，2.82(1H，m)，4.17(1H，d，J=9 Hz)，5.05(1H，五重峰，J=7 Hz)，6.31(1H，br d)，6.77(1H，d，J=8 Hz)，6.85(2H，d，J=8 Hz)，6.97(1H，s)，7.02(1H，t，J=8 Hz)，7.22(9H，复杂)，9.50(1H，br s)。
LRMS(热喷雾)m/z=573(M+，弱)，531(MH+-O)。
实施例6。
N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-(3S)-乙氧基-(2R)-2-[3-(3-氟-4-苯氧基苯基)丙基]-(N4-羟基)丁二酰胺
Figure 9881293600451
在0℃、氮气氛下，将N-[(二甲基氨基)-1H-1，2，3-三唑并[4，5-b]吡啶-1-基亚甲基]-N-甲基甲铵六氟磷酸盐N-氧化物(88 mg，0.232mmol)加入到(2S，3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-([(1R)-1-苯基乙基]氨基羰基)丙基]氨基羰基)-2-乙氧基-6-(3-氟-4-苯氧基苯基)己酸(制备例8)(94mg，0.155 mmol)和二异丙基乙胺(54μL，0.31 mmol)的无水二甲基甲酰胺(2.5 mL)的搅拌的溶液中。45分钟后，加入羟胺盐酸盐(32 mg，0.465 mmol)，接着加入二异丙基乙胺(81μL，0.465 mmol)。将所得混合物在0℃搅拌5小时，倒入乙酸乙酯(50 mL)中并用pH7磷酸缓冲液(3×30 mL)、饱和氯化钠水溶液(30 mL)洗涤，干燥(硫酸镁)，并减压浓缩。将此残余物通过快速层析(用二氯甲烷∶甲醇∶浓氨水=95∶5∶0.5洗脱)纯化得到标题化合物，为无色泡沫(43mg，34％)。
Rf 0.32(二氯甲烷∶甲醇∶浓氨水=95∶5∶0.5)
δH(400 MHz，CD3OD)1.04(9H，s)，1.12(3H，t，J=7 Hz)，1.32(1H，m)，1.42(3H，d，J=7 Hz)，1.46(2H，m)，1.53(1H，m)，2.42(1H，dt，J=14和7 Hz)，2.54(1H，ddd，J=7，9和14 Hz)，2.74(1H，dt，J=10和7.5 Hz)，3.32(1H，m，部分被CHD2OD峰隐藏)，3.49(1H，dq，J=10和7 Hz)，3.69(1H，d，J=10 Hz)，4.39(1H，s)，5.00(1H，q，J=7 Hz)，6.84(4H，复杂)，6.92(1H，dd，J=12和2 Hz)，7.04(1H，t，J=8 Hz)，7.14(3H，复杂)，7.26(4H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=606(MH+-O)，533(基峰，MNa+-(Ph(CH3)CHNH2)
HRMS(正离子电喷雾)实测值：m/z=644.3113 C35H44FNaN3O6理论值644.3112。
实测值：                          C，66.79；H，7.05；N，6.66；
C35H44FN3O6·0.5H2O理论值 C，66.65；H，7.17；N，6.66％
实施例7。
(2S，3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[(3-甲基-4-苯基)苯基]-2-丙基己酸
Figure 9881293600461
按照实施例1的方法，用三氟乙酸在无水二氯甲烷中处理(2S，3R)-3-({[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基}羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]-2-丙基己酸叔丁基酯(制备例13)(360 mg，0.56mmol)，用甲醇重结晶后得到标题化合物，为无色固体(163 mg，50％)。用甲醇从母液中得到得到第二批结晶(45 mg，14％)。
m.p.212-215℃(甲醇)。
Rf 0.4(二氯甲烷/甲醇/乙酸=90∶10∶1)
δH(400 MHz，DMSO-d6)0.77(3H，t，J=6 Hz)，0.92(9H，s)，1.13(1H，m)，1.29(3H，d，J=6.5Hz，和3H，m，重叠)，1.61(4H，m)，2.13(3H，s)，2.35(2H，m)，2.45(1H，m)，2.66(1H，br t，J=8 Hz)，2.60(1H，dd，J=9和15 Hz)，4.34(1H，d，J=9 Hz)，4.90(1H，五重峰，J=6.5 Hz)，6.89(1H，d，J=7 Hz)，6.97(2H，s和d，J=8 Hz，重叠)，7.25(7H，复杂)，7.31(1H，t，J=7 Hz)，7.39(2H，m)，7.94(1H，br d)，8.29(1H，br d)，11.66(1H，br s)。
LRMS(热喷雾)m/z=586(MH+)
FTIRνmax(KBr片)1710，1630，cm-1
实测值：C，72.60；H，8.14；N，4.59；
C37H48N2O4·0.33MeOH中1.25H2O理论值
        C，72.62；H，8.45；N，4.54％
实施例8。
N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-(N4-羟基)-(2R)-2-｛3-[3-甲基-(4-苯基)苯基]丙基]-(3S)-丙基丁二酰胺
按照实施例4的方法，(2S，3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基)氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[(3-甲基-4-苯基)苯基]-2-丙基己酸((实施例7)130mg，0.22 mmol)与羟胺盐酸盐(45.9 mg，0.66 mmol)在20℃反应5小时，接着通过相同的处理并用乙醚研磨粗品得到标题化合物(64 mg，49％)为无色固体。
Rf 0.31(二氯甲烷∶甲醇∶浓氨水=90∶10∶1)
δH(400 MHz，DMSO-d6)0.74(3H，t，J=6.5 Hz)，0.92(9H，s)，1.03(1H，m)，1.16(2H，m)，1.24(3H，d，J=7.5 Hz，和1H，m重叠)，1.37(3H，m)，1.44(1H，m)，2.12(3H，s和1H，m，重叠)，2.33(1H，m)，2.44(1H，m)，2.61(1H，m)，4.31(1H，d，J=9 Hz)，4.89(1H，五重峰，J=7.5 Hz)，6.88(1H，d，J=8 Hz)，6.95(1H，s)，6.97(1H，d，J=8 Hz)，7.13(3H，m)，7.22(4H，m)，7.30(1H，t，J=8 Hz)，7.38(2H，t，J=8 Hz)，)，7.88(1H，br d)，8.18(1H，br d)，8.73(1H，br s)，10.28(1H，br s)。
LRMS(热喷雾)m/z=556(基峰，MNH4 +-HCONHOH)
实测值：                    C，72.14；H，8.18；N，6.85；
C37H49N3O3O4·0.75H2O理论值 C，72.46；H，8.30；N，6.85％
FTIRνmax(KBr片)3290，2970，2930，1637，1530，700 cm-1
实施例9。
(N4，3S)-二羟基-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-(2R)-2-[3-(3-氟-4-苯氧基苯基)丙基]丁二酰胺
Figure 9881293600481
在氮气氛、室温下，将甲醇钠(35 mg，0.67 mmol)加入到无水羟胺盐酸盐(45 mg，0.67 mmol)的无水甲醇(1 mL)溶液中。将此混合物搅拌2 h并通过Arbocel助滤剂快速过滤，用无水甲醇(1 mL)洗涤。加入(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基)-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-5-[(3-氟-4-苯氧基)苯基]戊酰胺(制备例15)(103mg，0.16 mmol)和无水甲醇(1mL)，并将此混合物室温下搅拌18小时。将此溶液减压浓缩，并将此残余物通过快速层析纯化，先在C18硅烷化的硅胶(40-63μ)上用甲醇∶水=4∶1洗脱，然后在正向硅胶上(用二氯甲烷∶甲醇梯度洗脱)层析。获得的产物为无色固体(25 mg，26％)。
m.p.90-95℃
Rf 0.38(二氯甲烷∶甲醇=90∶10)
δH(300 MHz，CD3OD)1.03(9H，s)，1.45(3H，d，J 7 Hz)，1.52(3H，m)，1.66(1H，m)，2.53(2H，m)，2.77(1H，m)，4.02(1H，d，J=8 Hz)，4.36(1H，s)，5.01(1H，q，J=7 Hz)，6.87(4H，复杂)，6.97(1H，d，J=12 Hz)，7.04(1H，t，J=8 Hz)，7.16(3H，复杂)，7.28(4H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=533(基峰，MH+-HONHCO)
实测值：                              C，65.94；H，6.89；N，6.95；
C33H40FN3O6·0.4H2O理论值 C，65.96；H，6.84；N，6.99％
实施例10。
(N4，3S)-二羟基-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-(2R)-2-｛3-[3-甲基-(4苯基)苯基]丙基｝丁二酰胺
Figure 9881293600491
按照实施例9的方法，(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-5-[(3-甲基-4苯基)苯基]戊酰胺(制备例16)(440 mg，0.73 mmol)与羟胺在室温下反应18小时，将此溶液减压浓缩，并将此残余物通过快速层析(C18硅烷化的硅胶(40-63μ)，用甲醇∶水=4∶1然后5∶1洗脱)纯化得到无色固体(339 mg，81％)。
m.p.95-97℃
Rf 0.16(二氯甲烷∶甲醇=95∶5)
δH(300 MHz，CDCl3)0.98(9H，s)，1.50(3H，d，J=7 Hz)，1.65(3H，m)，1.89(1H，m)，2.23(3H，s)，2.58(2H，br t，J=6 Hz)，3.27(1H，m)，4.15(1H，d)，4.20(1H，br s)，5.09(1H，五重峰，J=7 Hz)，5.32(1H，br s)，6.20(1H，br d)，6.98(1H，d，J=8 Hz)，7.01(1H，s)，7.10(1H，d，J=8 Hz)，7.31(10H，复杂)，7.86(br d)，9.50(1H，br s)。
LRMS(热喷雾)m/z=514(基峰，MH+-HONHCO)
实测值：                                C，70.50；H，7.58；N，7.23；
C34H43N3O5·0.25H2O理论值 C，70.62；H，7.58；N，7.27％
实施例11。
(2R)-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-2-｛3-[3-氟-(4-苯基)苯基]丙基｝-(N4-羟基)丁二酰胺
a)按照实施例2的方法，(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基)氨基｝羰基)-6-[(3-氟-4-苯基)苯基]己酸(制备例17)(426 mg，0.78 mmol)与O-烯丙基羟胺盐酸盐(128 mg，1.17 mmol)反应。将粗品通过快速层析(用己烷∶异丙醇梯度洗脱)进行纯化，接着用乙醚和乙酸乙酯研磨得到(2R)-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-2-｛3-[3-氟-(4-苯基)苯基]丙基)-(N4-3-丙烯基氧基)丁二酰胺(260mg，55％)，为白色固体。
m.p.182-186℃
Rf 0.32(己烷∶异丙醇=10∶1)。
δH(400 MHz，DMSO-d6)0.87(9H，s)，1.26(3H，d，J=6.5 Hz)，1.28(1H，m)，1.43(3H，m)，1.97(1H，m)，2.13(1H，m)，2.50(2H，m)，2.84(1H，m)，4.16(2H，m)，4.27(1H，d，J=9 Hz)，4.87(1H，五重峰，J=6.5 Hz)，5.15(1H，d，J=10 Hz)，5.20(1H，d，J=17 Hz)，5.85(1H，m)，6.97(2H，m)，7.13(4H，复杂)，7.29(2H，m)，7.45(4H，m)，7.65-(1H，br s)，8.26(1H，br s)，10.37(1H，br s)。
LRMS(热喷雾)m/z=602(MH+)。
实测值：                            C，70.91；H，7.33；N，6.84；
C36H44FN3O4·0.5H2O理论值 C，70.80；H，7.43；N，6.88％
b)按照实施例2的方法，(2R)-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-2-｛3-[3-氟-(4-苯基)苯基]丙基)-(N4-3-丙烯基氧基)丁二酰胺(210 mg，0.35 mmol)与甲酸铵(110mg，1.75 mmol)在乙醇/水(4∶1，5mL)中在钯催化剂的存在下回流2小时。
处理后，将残余物通过快速层析(用二氯甲烷∶甲醇∶浓氨水梯度洗脱)纯化并用乙醚研磨得到(2R)-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-2-｛3-[3-氟-(4-苯基)苯基]丙基)-(N4-羟基)丁二酰胺(120 mg，61％)，为无色固体。
Rf 0.25(二氯甲烷∶甲醇∶浓氨水=90∶10∶1)
δH(400 MHz，DMSO-d6)0.87(9H，s)，1.25(3H，d，J=6.5 Hz)，1.31(1H，m)，1.44(3H，m)，2.00(1H，dd，J=7和15 Hz)，2.13(1H，dd，J=4和15 Hz)，2.48(2H，m)，2.80(1H，m)，4.26(1H，d，J=9 Hz)，4.87(1H，五重峰，J=6.5 Hz)，6.97(2H，m)，7.06(1H，m)，7.13(2H，t，J=8 Hz)，7.20(2H，m)，7.30(2H，m)，7.43(4H，复杂)，7.66(1H，br d)，8.23(1H，br d)，8.58(1H，s)，10.27(1H，br s)。
LRMS(热喷雾)m/z=563(MH+)
实测值：                   C，70.02；H，7.25；N，7.52；
Ca3H40FN3O4·0.25H2O理论值 C，70.00；H，7.21；N，7.42％
实施例12．
(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-(2S)-乙氧基-6-[(3-甲基-4-苯基)苯基]己酸
Figure 9881293600521
将氢氧化锂水合物(30 mg，0.71 mmol)加入到(2S，3R)3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-2-乙氧基-6-[(3-甲基-4-苯基)苯基]己酸甲酯(制备例18)(384mg，0.64 mmol)的四氢呋喃∶水=3∶2(10 mL)悬浮液中并将此混合物室温下搅拌2小时。此溶液用1M盐酸酸化并用乙酸乙酯萃取(3×30 mL)。将合并的萃取物干燥(硫酸钠)，并减压浓缩。用乙醚研磨得到标题化合物(196 mg，52％)，为无色固体。
δH(400MHz，CD3OD)(可交换氢原子只部分交换)1.02(9H，s)，1.16(3H，t，J=7 Hz)，1.42(3H，d，J=7 Hz)，1.52(3H，m)，1.65(1H，m)，2.16(3H，s)，2.50(2H，m)，2.74(1H，m)，3.39(1H，m)，3.58(1H，m)，3.90(1H，d，J=9 Hz)，4.38(1H，d，J=9 Hz)，5.00(1H，五重峰，J=7 Hz)，6.92(2H，m)，7.00(2H，m)，7.20(7H，复杂)，7.38(2H，t，J=7)，7.86(1H，br d)，8.35(1H，br d)。
实测值：                  C，73.11；H，7.89；N，4.79；
C36H46N2O5·0.25H2O理论值 C，73.12；H，7.92；N，4.74％
实施例13。
N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-(3S)-乙氧基-(N4-羟基)-(2R)-2-｛3-[3-甲基-(4-苯基)苯基]丙基｝丁二酰胺
在氮气氛、0℃下，将N-[(二甲基氨基)-1H-1，2，3-三唑并[4，5-b]吡啶-1-基亚甲基]-N-甲基甲铵六氟磷酸盐N-氧化物(164 mg，0.43mmol)加入到(2S，3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-2-乙氧基-6-[(3-甲基4-苯基)苯基]己酸(实施例12)(169 mg，0.29 mmol)和二异丙基乙胺(50μl，0.29 mmol)的搅拌的无水二甲基甲酰胺(3 mL)溶液中。60分钟后，加入羟胺盐酸盐(60 mg，0.86 mmol)，接着加入二异丙基乙胺(81μL，0.465 mmol)。将所得混合物在20℃下搅拌16小时，用乙醚稀释并用水洗涤。用乙醚(两批)和乙酸乙酯萃取此水层。将合并的有机溶液用水洗涤，干燥(硫酸钠)，并减压浓缩。将此残余物通过重复快速层析(用二氯甲烷∶甲醇∶浓氨水97.5∶2.5∶0.5，然后用96∶4∶0.5洗脱)纯化，得到标题化合物，为无色泡沫(20 mg，11％)。
Rf 0.25(二氯甲烷∶甲醇∶浓氨水=90∶10∶1)
δH(300 MHz，CDCl3)0.97(9H，s)，1.31(3H，t，J=7 Hz)，1.55(3H，d，J=7 Hz)，1.71(3H，m)，1.84(1H，m)，2.23(3H，s)，2.65(2H，m)，2.84(1H，m)，3.48(1H，五重峰，J=7 Hz)，3.76(1H，m)，3.95(1H，d，J=7 Hz)，3.98(1H，d，J=10 Hz)，5.12(1H，q，J=7 Hz)，6.47(1H，br d)，7.02(2H，m)，7.13(1H，d，J=8 Hz)，7.30(10H，复杂)，9.65(1H，br s)。
HRMS(正离子电喷雾)实测值：m/z=624.3403 C36H47NaN3O5理论值624.3413。
实施例14。
(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[(3-甲基-4-苯基)苯基]己酸
Figure 9881293600541
按照实施例1的方法，将(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]-己酸叔丁基酯(制备例19)(535 mg，0.85 mmol)用三氟乙酸在无水二氯甲烷中在室温下处理2小时。将此残余物溶解于甲苯中并减压浓缩(两次)，并用乙酸乙酯重结晶，得到无色固体(387mg，80％)。
m.p.184-186℃(乙酸乙酯)。
Rf 0.47(己烷/乙醚/乙酸=50∶50∶1)
δH(400MHz，CD3OD)(可交换氢原子只部分交换)1.03(9H，s)，1.51(4H，m)，2.15(3H，s)，2.36(1H，dd，J=5和17 Hz)，2.46(2H，m)，2.60(1H，dd，J=10和17 Hz)，2.82(1H，m)，3.32(3H，s)，3.57(2H，d，J=7 Hz)，4.42(1H，d，J=10 Hz)，5.10(1H，q，J=7 Hz)，6.87(1H，d，J=8 Hz)，6.98(2H，s和d，J=8 Hz，重叠)，7.22(8H，复杂)，7.39(2H，t，J=7 Hz)，7.74(1H，br d)，8.48(1H，br d)。
LRMS(热喷雾)m/z=573(MH+)
FTIR νmax(KBr片)3300，2960，2930，1711，1639，1543，700 cm-1
实测值：          C，73.32；H，7.73；N，4.80；
C35H44N2O5理论值：C，73.40；H，7.74；N，4.89％
实施例15。
(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-(3’-甲氧基-2-甲基联苯-4-基)己酸
Figure 9881293600551
按照实施例1的方法，将(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-(3’-甲氧基-2-甲基联苯-4-基)己酸叔丁基酯(制备例21)(660 mg，1.0mmol)用三氟乙酸在无水二氯甲烷中在室温下处理3小时。将此残余物溶解于甲苯并减压浓缩(两次)，并用乙酸乙酯重结晶，得到无色固体(326 mg，54％)。将母液重结晶得到另外的107 mg(18％)。
m.p.155.5-157.5℃(乙酸乙酯)。
Rf 0.34(己烷/乙醚/乙酸=50∶50∶1)
δH(400MHz，CD3OD)(可交换氢原子只部分交换)1.03(9H，s)，1.51(4H，m)，2.16(3H，s)，2.37(1H，dd，J=5和17 Hz)，2.47(2H，m)，2.59(1H，dd，J=10和17 Hz)，2.83(1H，m)，3.32(3H，s)，3.57(2H，d，J=7 Hz)，3.80(3H，s)，4.43(1H，d，J=10 Hz)，5.10(1H，q，J=7 Hz)，6.77(1H，s)，6.80(1H，d，J=7 Hz)，6.87(2H，m)，6.97(2H，m)，7.16(3H，m)，7.28(3H，m)，7.74(1H，br d)，8.50(1H，brd)。
LRMS(热喷雾)m/z=603(MH+)
FTIR νmax(KBr片)3300，2960，2930，1711，1640，1545，1484，1217，1211，700cm-1
实测值：          C，71.77；H，7.69；N，4.61；
C36H46N2O6理论值∶C，71.73；H，7.69；N，4.65％。
实施例16。
(2R)-N-1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-2-｛3-[(3-甲基-4-苯基)苯基]丙基)-(N4-羟基)丁二酰胺
a)按照实施例2的方法，(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[(3-甲基-4-苯基)苯基]己酸(实施例14)(347 mg，0.61 mmol)与O-烯丙基羟胺盐酸盐(81 mg，0.73 mmol)反应。将粗品通过快速层析(用己烷∶乙酸乙酯=2∶1洗脱)纯化，接着用乙醚和乙酸乙酯研磨，得到(2R)-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-2-｛3-[(3-甲基-4-苯基)苯基]丙基｝-(N4-3-丙烯基氧基)丁二酰胺(306 mg，80％)，为白色固体。
m.p.117-120 ℃。
Rf 0.28(己烷∶乙酸乙酯=1∶2)。
δH(400 MHz，CDCl3)1.02(9H，s)，1.40-1.70(4H，复杂)，2.20(3H，s，和1H，m重叠)，2.34-2.60(3H，复杂)，2.76(1H，m)，3.36(3H，s)，3.63(2H，d，J=5 Hz)，4.28(1H，d，J=9.5 Hz)，4.34(2H，d，J=6 Hz)，5.12(1H，dt，J=7.5和5 Hz)，5.30(2H，m)，5.90(1H，m)，6.44(1H，d，J=7.5 Hz和1H，br s重叠)，6.94(1H，m)，6.98(1H，s)，7.08(1H，d，J=7 Hz)，7.18-7.38(8H，复杂)，7.40(2H，m)，8.50(1H，br s)。
LRMS(热喷雾)m/z=628(MH+)。
b)将搅拌下的(2R)-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-2-｛3-[(3-甲基-4-苯基)苯基]丙基｝-(N4-3丙烯基氧基)丁二酰胺(300mg，0.48 mmol)和甲酸铵(300mg，4.76mmol)的混合物溶解于热乙醇/水(4∶1，6 mL)中，得到无色溶液。加入醋酸钯(4 mg，0.018 mmol)和三苯基膦(9.6 mg，0.037 mmol)在乙醇/水(4∶1，2mL)中的溶液，并将混合物加热回流60分钟。冷却后，将此棕色溶液用乙酸乙酯(100 mL)稀释并用饱和氯化钠水溶液(2×50mL)洗涤，干燥(硫酸镁)并减压浓缩。将此残余物通过柱层析纯化(C18硅烷化的硅胶(40-63μL)，用甲醇∶水4∶1洗脱)，然后用二异丙基醚研制得到(2R)-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-2-｛3-[(3-甲基-4-苯基)苯基]丙基｝-(N4-羟基)丁二酰胺(226 mg，80％)，为白色固体。
m.p.92-96℃
Rf 0.57(二氯甲烷∶甲醇∶浓氨水=90∶10∶1)
δH(400 MHz，CH3OD)1.02(9H，s)，1.40-1.68(4H，m)，2.17(3H，s)，2.20(1H，m)，2.36(1H，m)，2.48(2H，m)，2.86(1H，m)，3.30(3H，s)，3.58(2H，d，J=6.5 Hz)，4.40(1H，s)，5.10(1H，t，J=6.5Hz)，6.88(1H，m)，6.98(2H，m)，7.10-7.36(8H，复杂)，7.39(2H，m)。
LRMS(热喷雾)m/z=588(MH+)
实测值：                  C，70.95；H，7.85；N，7.00；
C35H45N3O5·0.25H2O理论值 C，70.98；H，7.74；N，7.09％
实施例17和18。
(N4，3S)-二羟基-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-(2R)-2-｛3-[4-(4-氰基苯基)-3-甲基苯基]丙基｝丁二酰胺和(N4，3S)-二羟基-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-(2R)-2-｛3-[4-(4-羟基脒基)苯基-3-甲基苯基]
Figure 9881293600581
按照实施例9的方法，(2R)-5-｛[4-(4-氰基苯基)-3-甲基]苯基｝-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]戊酰胺(制备例22)(384 mg，0.62 mmol)与羟胺在室温下反应18小时。将此溶液减压浓缩并将此残余物通过柱层析(C18硅烷化的硅胶(40-63μ)，用甲醇∶水=70∶30然后用80∶20洗脱)进行纯化，得到两种馏份。第一个流出的产物鉴定为(N4，3S)-二羟基-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-(2R)-2-｛3-[4-(4-氰基苯基)-3-甲基苯基]丙基｝丁二酰胺，Rf 0.38(二氯甲烷∶甲醇=90∶10)，将其用二异丙基醚研磨得到白色固体(115 mg，31％)。
m.p.103-109℃。
δH(400 MHz，DMSO-d6)0.92(9H，s)，1.25(1H，m)，1.26(3H，d，J=7.5 Hz)，1.40-1.54(3H，m)，2.14(3H，s)，2.40(1H，m)，2.44(1H，m)，2.70(1H，m)，3.76(1H，t，J=7.5 Hz)，4.34(1H，d，J=9.5 Hz)，4.90(1H，五重峰，J=7.5 Hz)，5.24(1H，d，J=7.5 Hz)，6.98(1H，m)，7.00(2H，m)，7.10(3H，m)，7.20(2H，m)，7.46(2H，d，J=8 Hz)，7.58(1H，d，J=9.5 Hz)，7.82(2H，d，J=8 Hz)，8.26(1H，d，J=7.5 Hz)，8.80(1H，br s)，10.56(1H，br s)。
LRMS(热喷雾)m/z=538(基峰，M+-HONHCO)
实测值：C，69.26；H，7.15；N，9.10；
C35H42N4O5·0.1EtOAc·0.4H2O理论值
        C，69.16；H，7.15；N，9.11％
第二种洗脱产物鉴定为(N4，3S)-二羟基-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-(2R)-2-｛3-[4-(4-羟基脒基)苯基-3-甲基苯基]丙基｝丁二酰胺，Rf 0.20(二氯甲烷∶甲醇90∶10)，为白色固体(84 mg，21％)。
m.p.131-135℃
δH(400MHz，DMSO-d6)0.90(9H，s)，1.24(1H，m，和3H，d，J=7Hz重叠)，1.38-1.58(3H，m)，2.16(3H，s)，2.40(1H，m)，2．44(1H，m)，2.58(1H，m)，3.76(1H，t，J=7 Hz)，4.34(1H，d，J=10.5 Hz)，4.90(1H，五重峰，J=7 Hz)，5.24(1H，d，J=7 Hz)，5.80(2H，s)，6.96(1H，m)，7.00(2H，m)，7.04-7.20(3H，m)，7.21(2H，m)，7.46(2H，d，J=8 Hz)，7.58(1H，d，J=10.5 Hz)，7.70(2H，d，J=8 Hz)，8.24(1H，d，J=7 Hz)，8.80(1H，br s)，9.60(1H，s)，10.58(1H，br s)。
LRMS(热喷雾)m/z=632(MH+)
实测值：           C，64.86；H，7.21；N，10.28；
C36H45N5O6·0.1CH3OH·0.9H2O理论值
                   C，64.74；H，7.31；N，10.75％
实施例19。
(N4，3S)-二羟基-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-(2R)-2-(3-[4-(3-氰基苯基)-3-甲基苯基]丙基｝丁二酰胺
Figure 9881293600601
在氮气氛、室温下，将甲醇钠(43 mg，0.80 mmol)加入到无水羟胺盐酸盐(56 mg，0.80 mmol)的无水甲醇(1mL)溶液中。将此混合物搅拌2.5小时并通过Arbocel助滤剂滤垫快速过滤，用无水甲醇(1mL)洗涤。在4℃下向此混合物中加入(2R)-5-｛[4-(3-氰基苯基)-3-甲基]苯基)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]戊酰胺(制备例24)(123mg，0.20 mmol)的无水甲醇(1mL)溶液并将此混合物搅拌15分钟。将此混合物升温至室温并搅拌9小时。将此溶液减压浓缩并将此残余物通过柱层析(C18硅烷化的硅胶(40-63μ)，用甲醇∶水=3∶1洗脱)纯化。将此残余物与乙醇共沸，然后与乙酸乙酯共沸，并用二异丙基醚研磨得到标题化合物，为非结晶白色固体(58 mg，48％)。没有明确的熔点。
Rf 0.11(二氯甲烷∶甲醇∶浓氨水=90∶10∶1)
δH(400MHz，DMSO-d6)0.92(9H，s)，1.24(1H，m和3H，d，J=7Hz重叠)，1.38-1.54(3H，m)，2.14(3H，s)，2.40(1H，m)，2.48(1H，m)，2.70(1H，m)，3.76(1H，t，J=7.5 Hz)，4.34(1H，d，J=9.5 Hz)，4.90(1H，五重峰，J=7 Hz)，5.22(1H，d，J=7.5 Hz)，6.98(1H，d，J=7 Hz)，7.02(2H，m)，7.14(3H，m)，7.22(2H，d，J=7 Hz)，7.58(1H，d，J=9.5 Hz)，7.60(2H，d，J=5 Hz)，7.72(1H，s)，7.80(1H，m)，8.26(1H，d，J=7 Hz)，8.80(1H，br s)，10.56(1H，br S)。
LRMS(热喷雾)m/z=599(MH+)，538(基峰，M+-HONHCO)
实测值：                 C，69.12；H，7.20；N，9.04；
C35H42N4O5·0.5H2O理论值 C，69.17；H，7.13；N，9.22％
实施例20。
(2R)-2-｛3-[4-(3-氨基甲酰基苯基)-3-甲基苯基]丙基｝-(N4，3S)-二羟基-N1-(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]丁二酰胺
Figure 9881293600611
按照实施例19的方法，(2R)-5-｛[4-(3-氨基甲酰基苯基)-3-甲基]-苯基-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]戊酰胺(制备例26)(126 mg，0.20 mmol)与羟胺在室温下反应13小时。将此溶液减压浓缩并将此残余物通过柱层析(C18硅烷化的硅胶(40-63μ)，用甲醇∶水=3∶2洗脱)进行纯化。将此残余物与乙醇共沸，然后与乙酸乙酯共沸并用乙醚研磨得到标题化合物，为白色固体(74mg，60％)。
m.p.85-100℃
Rf 0.04(二氯甲烷∶甲醇∶浓氨水=90∶10∶1)
δH(400 MHz，DMSO-d6)0.94(9H，s)，1.24(1H，m和3H，d，J=7Hz重叠)，1.43(3H，m)，2.14(3H，s)，2.40(1H，m)，2.50(1H，m)，2.70(1H，m)，3.76(1H，t，J=7 Hz)，4.36(1H，d，J=10Hz)，4.90(1H，五重峰，J=7 Hz)，5.24(1H，d，J=7.5 Hz)，6.98(1H，d，J=7Hz)，7.02(2H，m)，7.14(3H，m)，7.20(2H，m)，7.34(1H，s)，7.40(1H，d，J=7 Hz)，7.46(1H，d，J=7 Hz)，7.58(1H，d，J=10Hz)，7.80(1H，s)，7.82(1H，d，J=7 Hz)，7.98(1H，s)，8.26(1H，d，J=7 Hz)，8.90(1H，s)，10.60(1H，s)。
LRMS(热喷雾)m/z=617(MH+)
实测值：                 C，65.35；H，7.29；N，8.57；
C35H44N4O6·1.33H2O理论值 C，65.61；H，7.34；N，8.74％
实施例21。
(3R)-3-[(｛(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)-[(1S)-2-甲基]-1-丙基｝氨基)羰基]-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]己酸。
Figure 9881293600621
按照实施例1的方法，将(3R)-3-[(｛(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)-[(1S)-2-甲基]-1-丙基｝氨基)羰基]-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]己酸叔丁基酯(制备例28)(700mg，1.14mmol)用三氟乙酸在无水二氯甲烷中在室温下处理4小时。将此残余物与甲苯共沸(两次)，并用乙醚重结晶得到标题化合物，为无色固体(506 mg，79％)。
m.p.141-144℃。
Rf 0.28(戊烷∶乙酸乙酯∶乙酸=50∶50∶1)
δH(400 MHz，DMSO-d6)0.83(3H，d，J=8 Hz)，0.85(3H，d，J=8Hz)，1.36(1H，m)，1.48(3H，m)，1.94(1H，八重峰，J=8 Hz)，2.18(3H，s)，2.22(1H，m)，2.42(3H，m)，2.76(1H，m)，3.20(3H，s)，3.44(2H，d，J=7.5 Hz)，4.20(1H，t，J=8 Hz)，5.00(1H，q，J=7.5Hz)，6.94(1H，m)，7.00(2H，m)，7.12-7.38(8H，复杂)，7.40(2H，m)，7.90(1H，d，J=8 Hz)，8.02(1H，d，J=7.5 Hz)，12.04(1H，brs)。
LRMS(热喷雾)m/z=559(MH+)
实测值：            C，72.86；H，7.52；N，5.04；
C34H42N2O5理论值    C，73.09；H，7.58；N，5.01％
实施例22。
(3R)-3-(｛[(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)-(1S)-2-苯基乙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]己酸。
Figure 9881293600631
按照实施例1的方法，(3R)-3-(｛[(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)-(1S)-2-苯基乙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]己酸叔丁基酯(制备例30)(920 mg，1.39 mmol)用三氟乙酸在无水二氯甲烷中在室温下处理4小时。将此残余物与甲苯共沸(两次)，并用乙醚重结晶得到标题化合物，为无色固体(665 mg，79％)。
m.p.152-157℃。
Rf 0.27(戊烷∶乙酸乙酯∶乙酸=50∶50∶1)
δH(400MHz，DMSO-d6)1.30-1.50(4H，m)，2.16(3H，s)，2.18(1H，m)，2.30(1H，m)，2.42(2H，m)，2.62(1H，m)，2.84(1H，m)，2.98(1H，m)，3.18(3H，s)，3.38(2H，d，J=6 Hz)，4.60(1H，dt，J=6和8.5 Hz)，4.98(1H，q，J=8 Hz)，6.94(1H，m)，7.00(2H，m)，7.12-7.38(13H，复杂)，7.40(2H，m)，8.08(1H，d，J=8.5 Hz)，8.20(1H，d，J=8 Hz)，12.05(1H，br s)。
LRMS(热喷雾)m/z=607(MH+)
实测值：        C，75.02；    H，6.96；    N，4.63；
C38H42N2O5理论值C，75.22；    H，6.98；    N，4.62％
实施例23。
(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-｛[(1R)-1-(4-吡啶基)乙基氨基]羰基｝丙基]氨基｝羰基)-6-[(3-甲基-4-苯基)苯基]己酸盐酸盐．
Figure 9881293600641
在氮气氛、0℃下，将氯化氢气体通入(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-｛[(1R)-1-(4-吡啶基)乙基氨基]羰基｝丙基]氨基｝羰基)-6-[(3-甲基-4-苯基)苯基]己酸叔丁基酯(制备例31)(285 mg，0.47 mmol)的二噁烷(15 mL)溶液中，直到饱和。在0℃将此溶液搅拌3小时，然后减压浓缩。将此残余物用乙醚研磨得到标题化合物，为白色固体(390 mg，88％)。
m.p.132℃(分解)。
Rf 0.16(乙酸乙酯∶己烷∶乙酸=75∶25∶1)
δH(400MHz，CD3OD)1.06(9H，s)，1.50(4H，m和3H，d，J=7 Hz，重叠)，2.16(3H，s)，2.40-2.60(3H，m)，2.64(1H，m)，2.90(1H，m)，4.32(1H，d，J=10 Hz)，5.16(1H，五重峰，J=7 Hz)，6.86(1H，m)，6.98(2H，m)，7.21(2H，m)，7.30(1H，m)，7.40(2H，m)，7.90(1H，d，J=10 Hz)，7.96(2H，d，J=8 Hz)，8.56(2H，d，J=8 Hz)，8.90(1H，d，J=7 Hz)。
LRMS(热喷雾)m/z=544(MH+)
实测值：    C，65.43；H，7.28；N，6.72；
C33H41N3O4·HCl·1.5H2O理论值C，65.28；H，7.47；N，6.92％
实施例24。
N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-([(1R)-1-(3-吡啶基)乙基氨基]羰基)丙基]-(N4-羟基)-(2R)-2-｛3-[3-甲基-(4-苯基)苯基]丙基｝丁二酰胺
Figure 9881293600651
a)按照实施例2的方法，(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-｛[(1R)-1-(3-吡啶基)乙基氨基]羰基｝丙基]氨基｝羰基)-6-[(3-甲基-4-苯基)苯基]己酸(制备例32)(330 mg，0.57 mmol)与O-烯丙基羟胺盐酸盐(76 mg，0.68 mmol)反应。将粗品通过用热乙酸乙酯重结晶，得到N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-([(1R)-1-(3-吡啶基)乙基氨基]羰基)丙基]-(N4-3-丙烯基氧基)-(2R)-2-｛3-[3-甲基-(4苯基)苯基]丙基｝丁二酰胺(219 mg，64％)，为白色固体。
m.p.187-189℃
Rf 0.21(乙酸乙酯)。
δH(400 MHz，DMSO-d6)0.90(9H，s)，1.32(3H，d，J=7.5 Hz)，1.42(4H，m)，2.04(1H，m)，2.16(3H，s)，2.18(1H，m)，2.46(2H，m)，2.86(1H，m)，4.20(2H，m)，4.28(1H，d，J=9 Hz)，4.96(1H，m)，5.20(2H，m)，5.88(1H，m)，6.94(1H，m)，7.00(2H，m)，7.18(1H，m)，7.26(2H，m)，7.32(1H，m)，7.40(2H，m)，7.60(1H，m)，7.70(1H，m)，8.38(1H，m)，8.40(1H，d，J=7.5 Hz)，8.48(1H，s)，10.85(1H，s)。
LRMS(APCI)m/z=599(MH+)。
b)按照实施例2的方法，N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-([(1R)-1-(3-吡啶基)乙基氨基]羰基)丙基]-(N4-3-丙烯基氧基)-(2R)-2-｛3-[3-甲基-(4-苯基)苯基]丙基｝丁二酰胺(219 mg，0.37 mmol)与甲酸铵(230 mg，3.66 mmol)在乙醇/水(4∶1，8 mL)中在钯催化剂存在下回流1.25小时。处理后，将此残余物通过柱层析纯化(C18硅胶化硅胶(40-63μ)，用甲醇∶水=4∶1洗脱)，并用二异丙基醚研磨得到N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-([(1R)-1-(3-吡啶基)乙基氨基]羰基)丙基]-(N4-羟基)-(2R)-2-｛3-[3-甲基-(4-苯基)苯基]丙基｝丁二酰胺(122 mg，60％)，为白色固体。
m.p.112-114℃
Rf 0.33(C18硅烷化硅胶，甲醇∶水=5∶1)
δH(400MHz CH3OD)1.01(9H，s)，1.46(3H，d，J=7 Hz)，1.40-1.64(4H，m)，2.16(3H，s)，2.20(1H，m)，2.36(1H，m)，2.50(2H，m)，2.88(1H，m)，4.32(1H，s)，5.02(1H，q，J=7 Hz)，6.92(1H，m)，7.00(2H，m)，7.18(1H，m)，7.22(2H，m)，7.32(1H，m)，7.40(2H，m)，7.72(1H，m)，8.28(1H，m)，8.48(1H，s)。
LRMS(热喷雾)m/z=559(MH+)
实测值：C，70.13；H，7.83；N，9.48；
C33H42N4O4·0.33H2O·0.33DIPE理论值
        C．70.20；H，7.80；N，9.63％
实施例25。
(N4，3S)-二羟基-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-(4-吡啶基)乙基]氨基｝羰基)丙基]-(2R)-2-｛3-[3-甲基-(4苯基)苯基]丙基｝丁二酰胺
Figure 9881293600671
按照J.Amer.Chem.Soc.，1973，95，811的方法，通过将此外消旋胺的(-)-酒石酸盐重结晶制备(R)-(+)-(4-吡啶基)乙胺，[α]D 20=-16.7°(c 0.20，H2O)。通过将此酒石酸盐溶解于过量的用氯化钠饱和的氢氧化钠水溶液中释放出游离碱，并利用二氯甲烷萃取几次。将此游离碱不经纯化立即使用。
a)在氮气氛、0℃下，将7-氮杂苯并三唑-1-基氧基三(吡咯烷基)鏻六氟磷酸盐(208 mg，0.40 mmol)加入到(2R)-N-[(1S)-1-(羧基)-2，2-二甲基丙基]-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-5-[(3-甲基-4-苯基)苯基]戊酰胺(制备例33)(198 mg，0.40mmol)、(R)-(+)-1-(4-吡啶基)乙胺(49 mg，0.40 mmol)和可力丁(53μl，0.40 mmol)的搅拌下的无水二氯甲烷(4 mL)溶液中。1小时后，将此溶液在20℃搅拌3小时。将此混合物倒入乙酸乙酯(100mL)和水(100mL)中，加入固体氯化钠产生相分离。分层并用5％碳酸氢钠水溶液(2×75mL)洗涤有机层，再加入固体氯化钠。将此有机溶液干燥(硫酸钠)并减压浓缩。将残余物通过快速层析(用己烷∶乙酸乙酯=5∶1至1∶5梯度洗脱)进行纯化，得到固体，将其用二异丙基醚研磨，得到(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-(4-吡啶基)乙基]氨基｝羰基)丙基]-5-[(3-甲基-4-苯基)苯基]戊酰胺(104 mg，43％)，为白色固体。
M.P.167-170℃
Rf 0.10(己烷∶乙酸乙酯=1∶3)
δH(400 MHz，DMSO-d6)0.92(9H，s)，1.34(3H，d，J=7 Hz)，1.45(3H，s和2H，m，重叠)，1.56(3H，s和1H，m重叠)，1.72-1.82(1H，m)，2.14(3H，s)，2.40-2.60(2H，m)，2.98(1H，m)，4.40(1H，d，J=9 Hz)，4.46(1H，d，J=9 Hz)，4.90(1H，五重峰，J=7 Hz)，6.94(1H，m)，7.00(2H，m)，7.20(2H，d，J=5.5 Hz)，7.30(3H，m)，7.40(2H，m)，7.86(1H，d，J=9 Hz)，8.30(2H，d，J=5.5 Hz)，8.58(1H，d，J=7 Hz)。
LRMS(热喷雾)m/z=600(MH+)。
实测值：C，69.04；H，7.31；N，6.68；
C36H45N3O5·1.2H2O·0.13EtOAc理论值C，69.32；H，7.71；N，6.64％
b)按照实施例19的方法，(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-(4-吡啶基)乙基]氨基｝羰基)丙基]-5-[(3-甲基-4-苯基)苯基]戊酰胺(得自上述a))(86mg，0.14 mmol)与羟胺在室温下反应18小时。将此溶液减压浓缩并通过柱层析纯化(C18硅烷化的硅胶(40-63μ)，用甲醇∶水=3∶1洗脱)。将残余物与乙醇共沸，然后与乙酸乙酯共沸，并用二异丙基醚研磨得到标题化合物，为白色固体(45 mg，56％)。
m.p.100-110℃
Rf 0.10(二氯甲烷∶甲醇∶浓氨水=90∶10∶1)
δH(400 MHz，DMSO-d6)0.92(9H，s)，1.26(1H，m和3H，d，J=7Hz，重叠)，1.36-1.60(3H，m)，2.10(3H，s)，2.40(1H，m)，2.48(1H，m)，2.70(1H，m)，3.80(1H，t，J=7.5 Hz)，4.34(1H，d，J=9.5 Hz)，4.88(1H，五重峰，J=7 Hz)，5.24(1H，d，J=7.5 Hz)，6.90(1H，m)，6.98(2H，m)，7.20(2H，d，J=5.5 Hz)，7.28(3H，m)，7.40(2H，m)，7.60(1H，d，J=9.5 Hz)，8.32(2H，d，J=5.5 Hz)，8.42(1H，d，J=7Hz)，8.80(1H，s)，10.60(1H，br s)。
实测值：                 C，67.88；H，7.44；N，9.42；
C33H42N4O5·0.5H2O理论值C，67.90；H，7.43；N，9.06％
实施例26。
(N4，3S)-二羟基-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-(3-吡啶基)乙基]氨基｝羰基)丙基]-(2R)-2-｛3-[3-甲基-(4-苯基)苯基]丙基｝丁二酰胺
Figure 9881293600691
按照J.Amer.Chem.Soc.，1973，95，811的方法，通过将此外消旋胺的(-)-酒石酸盐重结晶制备(R)-(+)-(3-吡啶基)乙胺，[α]D 20=-20.1°(c=1.67，H2O)。通过将此酒石酸盐溶解于过量的用氯化钠饱和的1M氢氧化钠水溶液中释放出游离碱，并利用二氯甲烷萃取几次。将此游离碱不经纯化立即使用。
a)按照实施例25(a)的方法，(2R)-N-[(1S)-1-(羧基)-2，2-二甲基丙基]-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-5-[(3-甲基-4-苯基)苯基]戊酰胺(制备例33)(86 mg，0.14 mmol)与(R)-(+)-1-(3-吡啶基)乙胺游离碱(49 mg，0.40 mmol)在室温下反应3小时，接着经同样的后处理并将此粗品用二异丙基醚研磨得到(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-(3-吡啶基)乙基]氨基｝羰基)丙基]-5-[(3-甲基-4-苯基)苯基]戊酰胺(165 mg，69％)，为白色固体。
m.p.172-176℃
Rf 0.10(己烷∶乙酸乙酯=1∶3)
δH(400MHz，DMSO-d6)0.92(9H，s)，1.35(3H，d，J=7.5 Hz)，1.45(2H，m和3H，s重叠)，1.55(1H，m和3H，s重叠)，1.75(1H，m)，2.12(3H，s)，2.38-2.58(2H，m)，2.95(1H，m)，4.35(1H，d，J=10Hz)，4.45(1H，d，J=9.5 Hz)，4.98(1H，五重峰，J=7.5Hz)，6.94(1H，m)，7.00(2H，m)，7.10(1H，m)，7.25(2H，m)，7.35(1H，m)，7.40(2H，m)，7.68(1H，d，J=8 Hz)，7.82(1H，d，J=9.5 Hz)，8.32(1H，m)，8.45(1H，s)，8.55(1H，d，J=7.5 Hz)。
LRMS(热喷雾)m/z=600(MH+)
b)按照实施例19的方法，(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-(3-吡啶基)乙基]氨基｝羰基)丙基]-5-[(3-甲基-4-苯基)苯基]戊酰胺(得自上述a))(142 mg，0.24 mmol)与羟胺在室温下反应17小时。将此反应减压浓缩并通过柱层析纯化(C18硅烷化的硅胶(40-63μ)，用甲醇∶水=60∶40至80∶20梯度洗脱)得到浅黄褐色固体。将此固体通过反向色谱纯化(用甲醇∶水=75∶25洗脱)。然后，将此产物与乙醇、乙酸乙酯共沸并用二异丙基醚研磨，得到标题化合物，为白色固体(50 mg，36％)。
m.p.85-95℃
Rf 0.11(二氯甲烷∶甲醇∶浓氨水=90∶10∶1)
δH(400 MHz，DMSO-d6)0.90(9H，s)，1.25(1H，m)，1.30(3H，d，J=7 Hz)，1.36-1.55(3H，m)，2.15(3H，s)，2.40(2H，m)，2.70(1H，m)，3.78(1H，t，J=7.5 Hz)，4.30(1H，d，J=9.5 Hz)，4.94(1H，五重峰，J=7 Hz)，5.24(1H，d，J=7.5 Hz)，6.90(1H，m)，7.00(2H，m)，7.12(1H，m)，7.20-7.38(3H，m)，7.40(2H，m)，7.60(2H，m)，8.32(1H，m)，8.38(1H，d，J=7 Hz)，8.50(1H，s)，8.82(1H，br s)，10.55(1H，br s)。
LRMS(热喷雾)m/z=514(基峰，M+-HONHCO)
实测值：                  C，67.52；H，7.44；N，9.52；
C33H42N4O5·0.67H2O理论值 C，67.57；H，7.44；N，9.55％
实施例27。
(N4，3S)-二羟基-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2-羟基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-(2R)-2-｛3-[3-甲基-(4-苯基)苯基]丙基)丁二酰胺
a)按照实施例25(a)的方法，(2R)-N-[(1S)-1-(羧基)-2，2-二甲基丙基]-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-S-[(3-甲基-4苯基)苯基]戊酰胺(制备例33)(150 mg，0.30 mmol)与(S)-(+)-2-苯基甘氨醇(glycinol)(41 mg，0.30 mmol)在室温下反应3小时。将此混合物倒入乙酸乙酯(75 mL)中并用0.5M磷酸二氢钠水溶液(2×50mL)洗涤(加入固体氯化钠进行相分离)。将有机溶液干燥(硫酸钠)并减压浓缩。将残余油状物用乙醚研磨得到(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2-羟基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-5-[(3-甲基-4-苯基)苯基]戊酰胺(80 mg，43％)，为白色固体。
m.p.206-209℃
Rf 0.33(己烷∶乙酸乙酯∶乙酸=50∶50∶1)
δH(400 MHz，DMSO-d6)0.95(9H，s)，1.42(2H，m和3H，s重叠)，1.56(1H，m和3H，s重叠)，1.75(1H，m)，2.16(3H，s)，2.48(2H，m)，2.95(1H，m)，3.55(2H，m)，4.40(1H，d，J=9.5 Hz)，4.48(1H，d，J=9.5 Hz)，4.75(1H，t，J=5.5 Hz)，4.84(1H，q，J=7 Hz)，6.94(1H，m)，7.00(2H，m)，7.10(3H，m)，7.20(2H，m)，7.30(3H，m)，7.40(2H，m)，7.80(1H，d，J=9.5 Hz)，8.32(1H，d，J=7 Hz)。
LRMS(热喷雾)m/z=615(MH+)
实测值：                  C，71.46；H，7.53；N，4.59；
C37H46N2O6·0.33H2O理论值 C，71.59；H，7.58；N，4.51％
b)按照实施例19的方法，(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2-羟基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-5-[(3-甲基-4-苯基)苯基]戊酰胺(得自上述a))(66 mg，0.11mmol)与羟胺在室温下反应17小时。将此溶液减压浓缩并通过柱层析纯化(C18硅烷化的硅胶(40-63μ)，用甲醇∶水60∶40至80∶20梯度洗脱)。将残余物与乙醇，然后与乙酸乙酯共沸，并用二异丙基醚研磨，得到标题化合物，为浅黄褐色固体(35 mg，54％)。
m.p.80-90℃
Rf 0.06(二氯甲烷∶甲醇∶浓氨水=90∶10∶1)
δH(400 MHz，DMSO-d6)0.92(9H，s)，1.22(1H，m)，1.30-1.55(3H，m)，2.15(3H，s)，2.40(2H，m)，2.68(1H，m)，3.56(2H，m)，3.78(1H，t，J=7.5 Hz)，4.38(1H，d，J=9.5 Hz)，4.75(1H，m)，4.82(1H，q，J=7.5 Hz)，5.22(1H，d，J=7.5 Hz)，6.90，(1H，m)，7.00(2H，m)，7.15(3H，m)，7.20-7.38(5H，m)，7.40(2H，m)，7.58(1H，d，J=9.5 Hz)，8.20(1H，d，J=7.5 Hz)，8.80(1H，br s)，10.58(1H，brs)。
LRMS(热喷雾)m/z=529(基峰，M+-HONHCO)
实测值：C，67.91；H，7.71；N，6.58；
C34H43N3O6·0.67H2O·0.25DIPE理论值
        C，67.99；H，7.69；N，6.70％
实施例28。
(N4，3S)-二羟基-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-2，3-二氢-1H-茚-1-基]氨基｝羰基)丙基]-(2R)-2-｛3-[3-甲基-(4-苯基)苯基]丙基｝丁二酰胺    
a)按照实施例25(a)的方法，(2R)-N-[(1S)-1-(羧基)-2，2-二甲基丙基]-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-5-[(3-甲基-4-苯基)苯基]戊酰胺(制备例33)(150 mg，0.30 mmol)与(R)-(-)-1-氨基二氢化茚(40 mg，0.30 mmol)在室温下反应3小时。将此混合物倒入乙酸乙酯(75 mL)中并用0.5M磷酸二氢钠水溶液(2×50mL)和5％酸氢钠水溶液(50mL)洗涤(加入固体氯化钠进行相分离)。将此有机溶液干燥(硫酸钠)并减压浓缩。将残余油状物通过快速层析纯化(用己烷∶乙酸乙酯=10∶1至2∶1梯度洗脱)，然后用二异丙基醚研磨得到(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-2，3-二氢-1H-茚-1-基]氨基｝羰基)丙基]-5-[(3-甲基-4-苯基)苯基]戊酰胺，为白色固体(135 mg，74％)。
Rf 0.76(己烷∶乙酸乙酯∶乙酸=50∶50∶1)
δH(400MHz，CDCl3)1.02(9H，s)，1.55(3H，s)，1.60(3H，s)，1.65-2.00(5H，复杂)，2.20(3H，s)，2.60(1H，m)，2.66(3H，m)，2.86(1H，m)，2.95(1H，m)，4.20(1H，d，J=10 Hz)，4.54(1H，d，J=7 Hz)，5.42(1H，q，J=8 Hz)，5.82(1H，d，J=7 Hz)，6.62(1H，d，J=8 Hz)，7.00-7.40(12H，复杂)。
实测值：                    C，74.06；H，7.61；N，4.47；
C38H46N2O5·0.33EtOAc理论值C，73.81；H，7.66；N，4.38％
b)按照实施例19的方法，(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-2，3-二氢-1H-茚-1-基]氨基｝羰基)丙基]-5-[(3-甲基-4-苯基)苯基]戊酰胺(得自上述a))(105 mg，0.17 mmol)与羟胺在室温下反应17小时。将此溶液减压浓缩并通过柱层析纯化(C18硅烷化的硅胶(40-63μ)，用甲醇∶水=60∶40至85∶15梯度洗脱)。将残余物与乙醇，然后与乙酸乙酯共沸并用二异丙基醚研磨得到标题化合物，为浅黄褐色固体(60 mg，60％)。
m.p.100-120℃
Rf 0.10(二氯甲烷∶甲醇∶浓氨水=90∶10∶1)
δH(400MHz，DMSO-d6)0.92(9H，s)，1.26(1H，m)，1.42-1.60(3H，m)，1.65(1H，m)，2.15(3H，s)，2.22(1H，m)，2.40-2.62(2H，m)，2.72(2H，m)，2.80(1H，m)，3.80(1H，t，J=8 Hz)，4.30(1H，d，J=9.5 Hz)，5.25(2H，m)，6.90-7.45(12H，复杂)，7.62(1H，d，J=9.5 Hz)，8.20(1H，d，J=8.5 Hz)，8.80(1H，s)，10.58(1H，br s)。
LRMS(热喷雾)m/z=526(基峰，MH+-HONHCO)
实测值：                  C，70.94；H，7.50；N，6.81；
C35H43N3O5·0.33H2O理论值 C，71.05；H，7.44；N，7.10％
实施例29。
(N4，3S)-二羟基-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-(2R)-2-｛3-[3-甲基-(4苯基)苯基]丙基｝
Figure 9881293600751
a)按照实施例25(a)的方法，(2R)-N-[(1S)-1-(羧基)-2，2二甲基丙基]-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-5-[(3-甲基-4-苯基)苯基]戊酰胺(制备例33)(198 mg，0.40 mmol)与(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基胺(61 mg，0.40 mmol)在室温下反应3小时，将此混合物倒入乙酸乙酯(75 mL)中并用0.5M磷酸二氢钠水溶液(2×50mL)和5％碳酸氢钠水溶液(50mL)洗涤(加入固体氯化钠进行相分离)。将此有机溶液干燥(硫酸钠)并减压浓缩。将油状残余物通过快速层析纯化(用己烷∶乙酸乙酯=4∶1至1∶1梯度洗脱)并用二异丙基醚研磨得到(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-5-[(3-甲基-4-苯基)苯基]戊酰胺，为白色固体(172 mg，68％)。
Rf 0.53(己烷∶乙酸乙酯∶乙酸=50∶50∶1)
δH(400MHz，CDCl3)1.02(9H，s)，1.50(3H，s)，1.55(3H，s)，1.54(2H，m)，1.90(2H，m)，2.20(3H，s)，2.60(3H，m)，3.30(3H，s)，3.60(2H，d，J=5 Hz)，4.28(1H，d，J=9 Hz)，4.50(1H，d，J=6Hz)，5.10(1H，dt J=5和7 Hz)，6.36(1H，d，J=7 Hz)，6.50(1H，d，J=9 Hz)，6.98(1H，d，J=8 Hz)，7.01(1H，s)，7.10(1H，d，J=8Hz)，7.15-7.36(8H，复杂)，7.40(2H，m)。
LRMS(热喷雾)m/z=629(MH+)，651(MNa+)。
实测值：        C，72.41；H，7.76；N，4.50；
C38H48N2O6理论值C，72.49；H，7.72；N，4.48％
b)按照实施例9的方法，(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-5-[(3-甲基-4-苯基)苯基]戊酰胺(得自上述a))(142 mg，0.22 mmol)与羟胺在室温下反应17小时。将此溶液减压浓缩并通过柱层析纯化(C18硅烷化的硅胶(40-63μ)，用甲醇∶水=3∶1洗脱)。将残余物与乙醇，然后与乙酸乙酯共沸并用二异丙基醚研磨得到标题化合物，为白色固体(109mg，82％)。
M.P.100-110℃
Rf 0.07(二氯甲烷∶甲醇∶浓氨水=90∶10∶1)
δH(400MHz，DMSO-d6)0.90(9H，s)，1.20(1H，m)，1.30-1.50(3H，m)，2.10(3H，s)，2.38(1H，m)，2.44(1H，m)，2.65(1H，m)，3.17(3H，s)，3.45(2H，d，J=7.5 Hz)，3.75(1H，t，J=8 Hz)，4.40(1H，d，J=9.5 Hz)，5.00(1H，q，J=7.5 Hz)，5.22(1H，d，J=8 Hz)，6.90(1H，d)，6.98(2H，m)，7.15(3H，m)，7.25(4H，m)，7.35(1H，m)，7.40(2H，m)，7.58(1H，d，J=9.5Hz)，8.35(1H，d，J=7.5 Hz)，8.80(1H，br s)，10.58(1H，br s)。
LRMS(热喷雾)m/z=575(MH+)，514 (M+-HONHCO)。
实测值：                 C，68.71；H，7.64；N，6.65；
C35H45N3O6·0.5H2O理论值 C，68.60；H，7.57；N，6.86％
实施例30。
(N4，3S)-二羟基-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-(2R)-2-｛3-[(3’-甲氧基-2-甲基联苯-4-基)丙基｝丁二酰胺    
Figure 9881293600781
a)按照实施例25(a)的方法，(2R)-N-[(1S)-1-(羧基)-2，2-二甲基丙基]-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-5-[(3’-甲氧基-2-甲基联苯-4-基)丙基]戊酰胺(制备例34)(150 mg，0.28 mmol)与(R)-1-苯基乙基胺(35μl，0.28 mmol)在室温下反应2.5小时。将此混合物倒入乙酸乙酯(75mL)中并用0.5M磷酸二氢钠水溶液(2×50mL)和5％碳酸氢钠水溶液(50mL)洗涤(加入固体氯化钠进行相分离)。将此有机溶液干燥(硫酸钠)并减压浓缩。将此油状残余物通过快速层析纯化(用己烷∶乙酸乙酯=35∶65洗脱)得到(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-5-[(3’-甲氧基-2-甲基联苯-4-基)丙基]戊酰胺，为白色固体(133 mg，76％)。
Rf 0.49(己烷∶乙酸乙酯∶乙酸=50∶50∶1)
δH(300MHz，CDCl3)1.00(9H，s)，1.40-1.60(11H，复杂)，1.62(1H，m)，1.90(1H，m)，2.21(3H，s)，2.60(3H，m)，3.80(3H，s)，4.18(1H，d，J=9 Hz)，4.45(1H，d，J=7 Hz)，5.05(1H，五重峰，J=7.5 Hz)，5.85(1H，d，J=7.5 Hz)，6.50(1H，d，J=9 Hz)，6.84(3H，m)，7.00(2H，m)，7.14(1H，d，J=9.5 Hz)，7.18-7.40(6H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=646(MNH4 +)。
b)按照实施例19的方法，(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3二氧杂环戊烷-4-基)-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-5-[(3’-甲氧基-2-甲基联苯-4-基)丙基]戊酰胺(得自上述a))(133 mg，0.21 mmol)与羟胺(59 mg，0.85 mmol)在室温下反应18小时。将此溶液减压浓缩，将残余物通过柱层析纯化(C18硅烷化的硅胶(40-63μ)，用甲醇∶水3∶2至4∶1梯度洗脱)，再用二异丙基醚研磨得到标题化合物，为白色固体(57 mg，45％)。
m.p.98-100℃
Rf 0.20(二氯甲烷∶甲醇=95∶5)
δH(400 MHz，DMSO-d6)0.92(9H，s)，1.18-1.30(1H，m)，1.25(3H，d，J=7.5 Hz)，1.38-1.58(3H，m)，2.15(3H，s)，2.40(1H，m)，2.46(1H，m)，2.70(1H，m)，3.76(4H，m)，4.35(1H，d，J=9.5 Hz)，4.90(1H，五重峰，J=7.5 Hz)，5.22(1H，d，J=8 Hz)，6.75-7.40(12H，复杂)，7.58(1H，d，J=9.5 Hz)，8.26(1H，d，J=7.5 Hz)，8.80(1H，s)，10.58(1H，s)。
LRMS(热喷雾)m/z=621(MNH4 +)
实测值：                 C，69.17；H，7.55；N，6.87；
C35H45N3O6·0.2H2O理论值 C，69.22；H，7.53；N，6.92％
实施例31。
(N4，3S)-二羟基-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-(2R)-2-｛3-[(3’-甲氧基-2-甲基联苯-4-基)丙基]｝丁二酰胺
Figure 9881293600791
a)按照实施例25(a)的方法，(2R)-N-[(1S)-1-(羧基)-2，2-二甲基丙基]-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-5-[(3’-甲氧基-2-甲基联苯-4-基)丙基]戊酰胺(制备例34)(220 mg，0.42 mmol)与(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基胺(63 mg，0.42 mmol)在室温下反应2.5小时。将此混合物倒入乙酸乙酯(75 mL)中并用0.5M磷酸二氢钠水溶液(2×50mL)和5％碳酸氢钠水溶液(50mL)洗涤(加入固体氯化钠进行相分离)。将此有机溶液干燥(硫酸钠)并减压浓缩。将残余物通过快速层析纯化(用己烷∶乙酸乙酯=30∶70至60∶40洗脱)得到白色固体，将其再通过快速层析(sorbsil C60，(20-40μ)硅胶纯化，用己烷∶乙酸乙酯35∶65洗脱，得到(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-5-[(3’-甲氧基-2-甲基联苯-4-基)丙基)戊酰胺，为白色固体(I 91 mg，69％)。
Rf 0.37(己烷∶乙酸乙酯=1∶1)
δH(400 MHz，CDCl3)1.00(9H，s)，1.50(3H，s)，1.55(3H，s)，1.65(2H，m)，1.86(2H，m)，2.20(3H，s)，2.60(3H，m)，3.35(3H，s)，3.60(2H，d，J=5 Hz)，3.80(3H，s)，4.25(1H，d，J=9 Hz)，4.45(1H，d，J=6 Hz)，5.10(1H，dt，J=5和7.5 Hz)，6.35(1H，d，J=7.5Hz)，6.50(1H，d，J=9 Hz)，6.80-6.92(3H，m)，6.96-7.04(2H，m)，7.10(1H，d，J=8 Hz)，7.15-7.35(6H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=659(MH+)。
b)按照实施例19的方法，(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-5-[(3’-甲氧基-2-甲基联苯-4-基)丙基]戊酰胺(得自上述a))(191mg，0.29 mmol)与羟胺在室温下反应17小时。将此溶液减压浓缩，将残余物通过柱层析纯化(C18硅烷化的硅胶(40-63μ)，用甲醇∶水=60∶40至70∶30梯度洗脱)并用二异丙基醚研磨，得到标题化合物，为白色固体(81 mg，44％)。
m.p.82-89℃
Rf 0.40(二氯甲烷∶甲醇=90∶10)
δH(400 MHz，DMSO-d6)0.90(9H，s)，1.20(1H，m)，1.40(3H，m)，2.15(3H，s)，2.38(1H，m)，2.45(1H，m)，2.70(1H，m)，3.20(3H，s)，3.44(2H，d，J=7 Hz)，3.76(4H，m)，4.38(1H，d，J=9.5Hz)，5.00(1H，q，J=7 Hz)，5.21(1H，d，J=7.5 Hz)，6.78(1H，s)，6.80(1H，d，J=8 Hz)，6.88(2H，m)，7.00(2H，m)，7.14(3H，m)，7.24(2H，m)，7.32(1H，t)，7.58(1H，d，J=9.5 Hz)，8.32(1H，d，J=7 Hz)，8.80(1H，br s)，10.58(1H，br s)。
LRMS(热喷雾)m/z=634(MH+)
实测值：                 C，67.47；H，7.52；N，6.55；
C36H47N3O7·0.4H2O理论值 C，67.46；H，7.52；N，6.56％
实施例32。
(2R)-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-(N4-羟基)-2-｛3-[3’-甲氧基-2-甲基联苯-4-基]丙基｝丁二酰胺
a)按照实施例2的方法，(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2-甲氧基-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基)氨基｝羰基)-6-[3’-甲氧基-2-甲基联苯-4-基]己酸(实施例15)(603 mg，1.0 mmol)与O-烯丙基羟胺盐酸盐(134 mg，1.2 mmol)反应。将粗品通过快速层析(用己烷∶乙酸乙酯=1∶1至1∶2)纯化，接着重复快速层析(用二氯甲烷∶甲醇∶浓氨水=95∶5∶0.5洗脱)纯化，得到(2R)-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-2-｛3-[3’-甲氧基-2-甲基联苯-4-基]丙基｝-(N4-3-丙烯基氧基)丁二酰胺(397 mg，60％)，为无色泡沫。
M.p.76-79℃。
Rf 0.35(己烷∶乙酸乙酯=1∶2)。
δH(300 MHz，DMSO-d6)0.92(9H，s)，1.42(4H，m)，2.01(1H，dd，J=7和15 Hz)，2.15(3H，s和1H，m，重叠)，2.44(1H，m)，2.55(1H，m)，2.84(1H，m)，3.20(3H，s)，3.47(2H，d，J=8 Hz)，3.77(3H，s)，4.20(2H，m)，4.35(1H，d，J=10 Hz)，5.02(1H，q，J=7Hz)，5.19(1H，d，J=10 Hz)，5.40(1H，d，J=17 Hz)，5.87(1H，m)，6.78(1H，s)，6.84(1H，d，J=8Hz)，6.90(2H，m)，7.00(2H，m)，7.23(6H，m)，7.70(1H，br d，J=10)，8.32(1H，br d，J=7 Hz)，10.85(1H，br s)。
LRMS(热喷雾)m/z=658(基峰，MH+)，680(MNa+)。
νmax(KBr片)3310，2970，2930，1640，1537，1481，700 cm-1
实测值：        C，70.89；H，7.85；N，6.27；
C39H51N3O6理论值C，71.21；H，7.81；N，6.39％
b)按照实施例2的方法，(2R)-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基)-2-｛3-[3’-甲氧基-2-甲基联苯-4-基]丙基｝-(N4-3-丙烯基氧基)丁二酰胺(380 mg，0.58mmol)与甲酸铵(366 mg，5.80mmol)在乙醇/水(4∶1，10mL)中，在钯催化下反应回流1小时。后处理后，将此残余物通过反相快速层析(C18硅烷化的硅胶40-63μ，用甲醇∶水=4∶1洗脱)纯化，得到(2R)-N1-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-(N4-羟基)-2-｛3-[3’-甲氧基-2-甲基联苯-4-基]丙基｝丁二酰胺(260 mg，73％)，为无色固体。
m.p.166-168℃
Rf 0.29(反相tlc，甲醇∶水=4∶1)
δH(300 MHz，甲醇-d4)1.03(9H，s)，1.51(4H，m)，2.16(3H，s，和1H，m，重叠)，2.35(1H，dd，J=8和13 Hz)，2.48(2H，m)，2.87(1H，m)，3.33(3H，s)，3.58(2H，d，J=7Hz)，4.40(1H，s，)，5.10(1H，t，J=7 Hz)，6.92(1H，s)，6.80(1H，d，J=8 Hz)，6.89(2H，br d，J=8 Hz)，6.97(1H，s)，6.98(1H，d，J=8 Hz)，7.15(3H，m)，7.27(3H，m)。
LRMS(热喷雾)m/z=618(MH+)
νmax(KBr片)3290，3240，2960，2930，1644，1531，1481，1226，703 cm-1。
实测值：                 C，69.06；H，7.80；N，6.65；
C36H47N3O6·0.5H2O理论值 C，68.99；H，7.72；N，6.70％
制备例1。
(2S)-氨基-3，3-二甲基-N-[(1R)-1-苯基乙基]丁酰胺，盐酸盐
a)在氮气氛、4℃下，将N-(二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐(35.47g，185mmol)加入到搅拌下的N-[(1S)-2，2-二甲基-1-羧基)丙基]氨基甲酸叔丁基酯(34.7 g，150 mmol)(Fluka Chemicals；J.Pospisek，K.Blaha，Coll.Czech。Chem.Commun.，1977，42，1069-76)和1-羟基-1，2，3-苯并三唑水合物(22.3g，165 mmol)在无水二氯甲烷(350 mL)中的混合物中。1小时后，加入(R)-(1-苯基)乙胺(19.14 g，158mmol)，随后加入N-甲基吗啉(16.7g，165 mmol)。再过30分钟后，让此混合物升温至室温。室温下17小时后，将此混合物减压浓缩，并在乙酸乙酯(400mL)和水(400mL)之间分配。将有机层用5％枸橼酸水溶液(2×400 mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(500mL)连续洗涤，干燥(硫酸镁)，并减压浓缩。将此残余物用二异丙基醚研磨，过滤并干燥得到(2S)-(叔丁氧羰基)氨基-3，3-二甲基-N-[(1R)-1-苯基乙基]丁酰胺(47.5g，94％)，，为无色固体。
m.p.166-169℃
Rf 0.7(己烷∶乙醚∶乙酸=30∶70∶1)
δH(400MHz，CDCl3)0.97(9H，s)，1.39(9H，s)，1.45(3H，d，J=7 Hz)，3.73(1H，br d)，5.04(1H，五重峰，J=7 Hz)，5.15(1H，br s)，5.84(1H，br d)，7.26(5H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=335(MH+)
FTIR νmax(KBr片)3340，3280，2980，1713，1696，1642，1179，700cm-1
实测值：        C，68.30；H，9.08；N，8.39；
C19H30N2O3理论值C，68.23；H，9.04；N，8.38％
b)(2S)-(叔丁氧羰基)氨基-3，3-二甲基-N-[(1R)-1-苯基乙基]丁酰胺(46.4 g，139 mmol)溶解于无水二氯甲烷(600mL)和二噁烷(150mL)的混合物中并冷却至4℃。搅拌下，向此溶液中通入氯化氢直到形成饱和溶液。在4℃搅拌4小时后，将此溶液减压浓缩。将残余物用乙醚研磨并过滤得到标题化合物(38.0 g，100％)。
Rf 0.46(己烷/异丙醇/浓氨水=80∶20∶1)
δH(400 MHz，d6-DMSO)1.03(9H，s)，1.37(3H，d，J=7 Hz)，3.50(1H，d，J=8 Hz)，4.94(1H，五重峰，J=7 Hz)，7.24(1H，t，J=8 Hz)，7.33(2H，t，J=8 Hz)，7.39(2H，d，J=8 Hz)，8.10(3H，br s)，8.88(1H，br d)。
LRMS(热喷雾)m/z=235(MH+)
FTIR νmax(KBr片)2960，1674，1557，1505，700 cm-1
实测值：    C，61.98；H，8.71；N，10.09；
C14H22N2O·HCl·H2O理论值C，62.09；H，8.56；N，10.34％
制备例2。
(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)己-5-烯酸叔丁基酯
在氮气氛、4℃下，将N-(二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺(4.21g，22.0 mmol)加入到搅拌下的(2R)-2-[2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基]戊-4-烯酸(A.L.Castelhano，S.L.Bender，J.G.Deal，S.Horner，T.J.Liak，Z.Yuan，国际专利WO96/16027(1996))(3.80 g，17.8mmol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(2.49 g，18.3mmol)在无水二甲基甲酰胺(60mL)中的混合物中。1小时后，加入(2S)-氨基-3，3-二甲基-N-[(1R)-1-苯基乙基)丁酰胺盐酸盐(制备例1)(5.10 g，18.8 mmol)，接着加入二异丙基乙胺(2.42 g，19.2 mmol)。再过30分钟后，让此混合物升温至室温。室温下17小时后，将此混合物减压浓缩，并在乙酸乙酯(400mL)和水(400mL)之间分配。将水层用碳酸氢钠饱和并用乙酸乙酯(2×100 mL)萃取。将合并的有机溶液减压浓缩，将残余物溶解于乙醚(500mL)并用水(3×200 mL)洗涤，干燥(硫酸镁)，并减压浓缩。将残余物用戊烷研磨，过滤并干燥得到(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基)氨基｝羰基)丙基)氨基｝羰基)己-5-烯酸叔丁基酯(6.70 g，88％)，为无色固体。
m.p.123-126℃。
Rf 0.16(己烷∶异丙醇=98∶2)
δH(400 MHz，CDCl3)0.97(9H，s)，1.39(9H，s)，1.46(3H，d，J=7 Hz)，2.06(1H，dt，13和6.5Hz)，2.09(1H，m)，2.31(1H，dd，J=15和3 Hz)，2.71(1H，m)，2.77(1H，m)，4.14(1H，d，J=10Hz)，4.90(1H，d，J=10Hz)，4.94(1H，d，J=15 Hz)，5.05(1H，五重峰，J=7 Hz)，5.42(1H，m)，5.95(1H，br d)，6.36(1H，br d)，7.26(5H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=431(MH+)
FTIR νmax(KBr片)2635，2098，1733，1640，1540，1363，1153，696 cm-1
实测值：        C，69.30；H，8.96；N，6.54；
C25H38N2O4理论值C，69.74；H，8.90；N，6.51％
制备例3。
(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]-己酸叔丁基酯
Figure 9881293600861
a)将醋酸钯(52 mg，0.23 mmol)和三-(2-甲基苯基)膦(141 mg，0.46 mmol)在无水乙腈(10 mL)的混合物在室温下超声处理1分钟直到形成奶油色混悬液。在氮气氛下，将此混悬液通过Pasteur滴管加入到搅拌下的(3R)-3-(｛([(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)己-5-烯酸叔丁基酯(制备例2)(861 mg，2.0mmol)、3-甲基-4-苯基溴代苯(M.Gomberg，J.C.Pernert，J Amer.Chem。Soc.，1926，48，1372-84，也可见制备例19B)(1.32 gm，5.34mmol)和三乙胺(1.28 mL，9.29 mmol)在无水乙腈(15 ml)中的溶液中。将此混合物用氮气吹洗，再加热回流24小时。将此混合物倒入乙酸乙酯(200mL)并用饱和氯化钠水溶液(2×100 mL)洗涤，干燥(硫酸钠)，并减压浓缩。将此残余物通过快速层析(用二氯甲烷∶乙酸乙酯梯度洗脱)纯化得到(3R，5E)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基)氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]己-5-烯酸叔丁基酯，为无色泡沫(1.91 gm，69％)。1H NMR表明还存在两个烯异构体(5Z)和(4E)。将此烯的混合物用于下步反应(见下b)。
Rf 0.52(二氯甲烷∶乙酸乙酯=9∶1)
δH(400MHz，CDCl3)((5E)异构体)∶1.00(9H，s)，1.39(9H，s)，1.47(3H，d，J=7 Hz)，2.26(1H，m)，2.40(2H，m)，2.60(1H，dd，J=9和15 Hz)，2.71(1H，m)，4.20(1H，d，J=9 Hz)，5.02(1H，五重峰，J=7 Hz)，6.04(2H，m)，6.35(1H，d，J=14 Hz)，6.51(1H，br d)，7.19(11H，复杂)，7.36(2H，t，J=8 Hz)。
b)将(3R，5E)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]己-5-烯酸叔丁基酯(1.91 gm，3.2 mmol)的乙醇(80mL)溶液，在3巴和20℃下，在10％碳上氢化16小时。将此混合物通过Arbocel助滤剂滤垫过滤并减压浓缩得到(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]己酸叔丁基酯(2.07 gm，108％)，为无色泡沫，将其不经纯化直接用于下步反应(将实施例1)。
Rf 0.52(二氯甲烷∶乙酸乙酯=9∶1)
δH(400 MHz，CDCl3)0.99(9H，s)，1.38(9H，s)，1.47(3H，d，J=7 Hz)，1.52(4H，复杂)，2.20(3H，s)，2.29(1H，m)，2.53(4H，m)，4.16(1H，d，J=9 Hz)，5.05(1H，五重峰，J=7 Hz)，5.97(1H，br d)，6.42(1H，br d)，6.93(1H，d，J=8Hz)，6.98(1H，s)，7.07(1H，d，J=8 Hz)，7.23(8H，复杂)，7.36(2H，t，J=7 Hz)。
LRMS(热喷雾)m/z=599(MH+)
实测值：        C，75.86；H，8.44；N，4.60；
C38H50N2O4理论值C，76.22；H，8.42；N，4.68％
实施例33/制备例4。
(3R)-6-[(3-氯-4-苯基)苯基]-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)己酸
Figure 9881293600881
a)将醋酸钯(24 mg，0.1 mmol)和三-(2-甲基苯基)膦(61 mg，0.2mmol)在无水乙腈(1 mL)中的混合物在室温下超声处理1分钟直到形成奶油色混悬液。在氮气氛下，将此混悬液通过Pasteur滴管加入到搅拌下的(3R)-3-(｛([(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)己-5-烯酸叔丁基酯(制备例2)(861 mg，2.0mmol)、三氟甲磺酸(3-氯-4-苯基)苯基酯(制备例9)(740mg，2.2mmol)和三乙胺(420μL，3.0 mmol)在无水乙腈(3 mL)中的溶液中。将此混合物用氮气吹洗，再加热回流22小时。再加入如下量的试剂和催化剂：三氟甲磺酸(3-氯-4-苯基)苯基酯(200mg，0.59 mmol)、三乙胺(420μL，3.0mmol)、醋酸钯(35 mg，0.145 mmol)和三-(2-甲基苯基)膦(89 mg，0.29 mmol)，并继续加热8小时。将此混合物倒入乙酸乙酯(100mL)中并用饱和氯化钠水溶液洗涤(2×50 mL)，干燥(硫酸镁)，并减压浓缩。将残余物通过快速层析(用甲苯∶乙酸乙酯=9∶1洗脱)进行纯化，主要得到(3R，5E)-6-[3-氯-(4-苯基)苯基]-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)己-5-烯酸叔丁酯，为无色泡沫(936 mg，76％)。1NMR表明还存在两个烯异构体，(5Z)和(4E)。将此烯的混合物用于下步反应(见下b)。
Rf 0.14(甲苯∶乙酸乙酯=10∶1)
δH(400MHz，CDCl3)((5E)异构体)：0.96(9H，s)，1.37(9H，s)，1.45(3H，d，J=6.5 Hz)，2.29(1H，m)，2.36(1H，dd，J=3和15 Hz)，2.45(1H，m)，2.6l(1H，dd，J=9和15 Hz)，2.73(1H，m)，4.16(1H，d，J=9.5 Hz)，5.02(1H，五重峰，J=6.5 Hz)，5.85(1H，br d)，6.09(1H，dt，J=6.5和15 Hz)，6.32(1H，d，J=15 Hz)，6.49(1H，br d)，7.18(8H，复杂)，7.37(5H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=617(MH+)
b)将(3R，5E)-6-[3-氯-(4-苯基)苯基]-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝)羰基)丙基]氨基｝羰基)己-5-烯酸叔丁基酯(936 mg，1.52 mmol)和对甲苯磺酰基肼(1.41 grn，7.60 mmol)在甲苯(15 mL)中的混合物，在氮气氛下搅拌回流4小时。冷却后，将此混合物用乙醚(150 mL)稀释，并用水(50 mL)、0.5M盐酸(50 mL)和饱和氯化钠水溶液(50 mL)洗涤，干燥(硫酸镁)，并减压浓缩。将残余物通过快速层析(梯度洗脱，洗脱剂为己烷/乙酸乙酯)纯化得到(3R)-6-[3-氯-(4-苯基)苯基]-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)己酸叔丁基酯(701 mg，74％)，为无色泡沫。
Rf 0.36(己烷∶乙酸乙酯=5∶1)
δH(400 MHz，CDCl3)1.03(9H，s)，1.43(9H，s)，1.52(3H，d，J=7 Hz)，1.43-1.70(4H，复杂)，2.32(1H，m)，2.60(4H，m)，4.18(1H，d，J=9 Hz)，5.09(1H，五重峰，J=7 Hz)，5.95(1H，br d)，6.47(1H，br d)，7.03(1H，d，J=8 Hz)，7.23(7H，复杂)，7.42(5H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=620(MH+)
c)在氮气氛下，将(3R)-6-[3-氯-(4-苯基)苯基]-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基)氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)己酸叔丁基酯(665 mg，1.07 mmol)溶解于无水二噁烷(30 mL)并在冰水浴中冷却。向搅拌的溶液中通入氯化氢气体15分钟直到溶液饱和。将此溶液搅拌3小时，并再减压浓缩。将此残余物溶解于甲苯并减压浓缩三次得到无色的胶状物，将其加入到己烷和乙酸乙酯中结晶。将此白色固体用乙酸乙酯/二异丙基醚重结晶得到标题化合物(325 mg，54％)。
m.p.154-155.5℃(乙酸乙酯/二异丙基醚)。
Rf 0.38(乙醚∶己烷∶乙酸=70∶30∶1)
δH(400MHz，CD3OD)(只显示了酰胺NH信号的部分交换)1.03(9H，s)，1.43(3H，d，J=6.5 Hz)，1.48(2H，m，)，1.52(2H，m)，2.39(1H，dd，J=3和14 Hz)，2.53(2H，m)，2.61(1H，dd，J=9和14 Hz)，2.86(1H，m)，4.36(1H，s)，5.00(1H，五重峰，J=6.5Hz)，7.03(1H，d，J=9 Hz)，7.17(7H，复杂)，7.36(5H，复杂)，7.76(0.5H，br d)，8.47(0.8H，br d)。
LRMS(热喷雾)m/z=562(MH+)
实测值：          C，70.29；H，6.98；N，4.91；
C33H39ClN2O4理论值C，70.38；H，6.98；N，4.97％
实施例34/制备例5。
(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-(3-氟-4苯氧基苯基)己酸
a)在氮气氛下，将醋酸钯(20 mg，0.08 mmol)和三-(2-甲基苯基)膦(50 mg，0.16 mmol)的混合物加入到搅拌下的(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)己-5-烯酸叔丁基酯(制备例2)(700mg，1.63 mmol)、3-氟-4-苯氧基-溴代苯(制备例10)(479 mg，1.79 mmol)和三乙胺(340μL，2.43 mmol)在无水乙腈(3 mL)中的溶液中。将此混合物用氮气吹洗，再加热回流14小时。再加入醋酸钯(20 mg，0.08 mmol)和三-(2-甲基苯基)膦(50 mg，016 mmol)并将此混合物加热9小时。冷却后，将此混合物倒入乙酸乙酯(100mL)并用饱和氯化钠水溶液洗涤(2×50 mL)，干燥(硫酸镁)，并减压浓缩。将此残余物通过快速层析(用己烷∶乙酸乙酯=9∶1洗脱)进行纯化，主要得到(3R，5E)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-(3-氟-4-苯氧基苯基)己-5-烯酸叔丁基酯，为无色油状物(949 mg)。1HNMR表明还存在两个烯异构体，(5Z)和(4E)，还存在烯起始物(10％)。将此烯的混合物用于下步反应(见下b)。
Rf 0.24(己烷∶乙酸乙酯=3∶1)
δH(300MHz，CDCl3)((5E)异构体)1.02(9H，s)，1.40(9H，s)，1.50(3H，d，J=6 Hz)，2.26(1H，m)，2.40(2H，m)，2.64(1H，dd，J=9和17 Hz)，2.74(1H，m)，4.23(1H，d，J=10Hz)，5.06(1H，五重峰，J=6 Hz)，5.98(1H，m)，6.02(1H，br d)，6.30(1H，d，J=15Hz)，6.50(1H，br d)，6.94(3H，m)，7.07(2H，复杂)，7.27(8H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=617(MH+)
b)(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-(3-氟-4-苯氧基苯基)己酸叔丁基酯(949 mg，1.53mmol)、甲酸铵(474 mg，7.51 mmol)和10％钯碳(100mg)在甲醇(10 mL)中的溶液在20℃下搅拌16小时。将此混合物通过Arbocel助滤剂过滤并减压浓缩。将此残余物溶解于乙酸乙酯并用饱和氯化钠水溶液洗涤，干燥(硫酸镁)并减压浓缩得到(3R)-3(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-(3-氟-4-苯氧基苯基)己酸叔丁基酯(876 mg，92％)，为无色泡沫，将其不经纯化用于下步反应。
Rf 0.29(己烷∶乙酸乙酯=3∶1)
δH(400 MHz，CDCl3)0.98(9H，s)，1.26(1H，m)，1.37(9H，s)，1.44(3H，m)，1.46(3H，d，J=6.5Hz)，2.23(1H，m)，2.40(2H，m)，2.52(2H，m)，4.32(1H，d，J=10 Hz)，5.08(1H，五重峰，J=6.5Hz)，6.48(1H，br d)，6.58(1H，br d)，6.74(1H，d，J=8 Hz)，6.87(3H，m)，7.01(1H，t，J=7 Hz)，7.19(8H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=619(MH+)
c)在氮气氛、20℃下，在5分钟内将三氟乙酸(2 mL)滴加到搅拌的(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基)氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-(3-氟-4-苯氧基苯基)己酸叔丁基酯(876 mg，1.41mmol)的无水二氯甲烷(6 mL)溶液中。将此溶液搅拌16小时并减压浓缩。将残余物溶解于甲苯并减压浓缩(两次)。通过快速层析(用己烷∶乙酸乙酯∶乙酸75∶25∶1洗脱)纯化，得到标题化合物，为黄色胶状物(784 mg，98％)。
Rf 0.21(己烷∶乙酸乙酯∶乙酸=75∶25∶1)
δH(400 MHz，CDCl3)0.96(9H，s)，1.40(3H，m)，1.47(3H，d，J=7 Hz)，1.58(1H，m，)，2.42(3H，m)，2.68(2H，m)，4.32(1H，d，J=10)，5.04(1H，五重峰，J=7 Hz)，6.35(1H，br d)，6.73(1H，d，J=6 Hz)，6.82(2H，m)，6.89(2H，d，J=8 Hz)，7.01(1H，t，J=6 Hz)，7.11(1H，d，J=8 Hz)，7.20(7H，复杂)。
LRMS(APCI)m/z=563(MH+)
实施例35/制备例6。
(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-(3-甲基4-苯氧基苯基)己酸
Figure 9881293600931
    
Figure 9881293600941
a)在氮气氛下，将醋酸钯(20 mg，0.08 mmol)和三-(2甲基苯基)膦(50mg，0.16 mmol)的混合物加入到搅拌的(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)己-5-烯酸叔丁基酯(制备例2)(578 mg，1.23 mmol)、1-碘-3-甲基-4-苯氧基苯(制备例11)(384 mg，1.35 mmol)和三乙胺(300μL，2.14 mmol)在无水乙腈(3 mL)中的溶液中。将此混合物用氮气吹洗，再加热回流24小时。冷却后，将此混合物倒入乙酸乙酯(100mL)中并用饱和氯化钠水溶液(2×50mL)洗涤，干燥(硫酸镁)，并减压浓缩。将此残余物通过快速层析(用己烷∶乙酸乙酯=9∶1并再用4∶1洗脱)纯化，主要得到(3R，5E)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-(3-甲基-4-苯氧基苯基)己-5-烯酸叔丁基酯，为桔黄色泡沫(615 mg)。1HNMR表明存在两个烯异构体，(5Z)和(4E)，还存在烯起始物(10％)。将此烯的混合物用于下步反应(见下b)。
Rf 0.5(己烷∶乙酸乙酯=3∶1)
δH(300MHz，CDCl3)((5E)异构体)1.02(9H，s)，1.26(9H，s)，1.50(3H，d，J=7 Hz)，2.19(3H，s)，2.29(1H，m)，2.44(2H，m)，2.63(1H，m)，2.74(1H，m)，4.19(1H，d，J=10 Hz)，5.04(1H，五重峰，J=7 Hz)，5.91(1H，br d)，6.00(1H，dt，J=16和8 Hz)，6.35(1H，d，J=16Hz)，6.51(1H，br d)，6.80(1H，d，J=9 Hz)，6.87(2H，d J=9 Hz)，7.06(2H，m)，7.26(8H，复杂)。LRMS(热喷雾)m/z=613(MH+)
b)将(3R，5E)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-(3-甲基-4-苯氧基苯基)己-5-烯酸叔丁基酯(615 mg，1.00mmol)，甲酸铵(310 mg，4.9 mmol)和10％钯碳(65 mg)的甲醇(8 mL)溶液在20℃下搅拌16小时。将此混合物通过Arbocel助滤剂过滤并减压浓缩。将残余物溶解于乙酸乙酯并用饱和氯化钠水溶液溶液洗涤，干燥(硫酸镁)并减压浓缩得到(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-(3-甲基-4-苯氧基苯基)己酸叔丁基酯(550 mg，90％)，为泡沫状，将其不经纯化直接用于下步反应。
Rf 0.5(己烷∶乙酸乙酯=3∶1)
δH(300MHz，CDCl3)1.03(9H，s)，1.41(9H，s)，1.33-1.60(4H，m，被其它峰掩盖)，1.50(3H，d，J=7 Hz)，2.16(3H，s)，2.30(1H，m)，2.48(2H，m)，2.57(2H，m)，4.26(1H，d，J=9 Hz)，5.10(1H，五重峰，J=7 Hz)，6.22(1H，br d)，6.44(1H，br d)，6.77(1H，d，J=9 Hz)，6.86(3H，m)，6.99(2H，m)，7.26(7H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=615(M+)
c)在氮气氛、20℃下，在5分钟内将三氟乙酸(2.5 mL)滴加到搅拌的(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-(3-甲基-4-苯氧基苯基)己酸叔丁基酯(550 mg，0.9 mmol)的无水二氯甲烷(5 mL)溶液中。将此溶液搅拌1小时并减压浓缩。将残余物用盐酸(2M)稀释并用三批乙酸乙酯萃取。将合并的有机溶液用饱和氯化钠水溶液洗涤，干燥(硫酸镁)并减压浓缩。加入两批甲苯并蒸发得到标题化合物为黄色胶状物(640 mg)，其中还含有甲苯和三氟乙酸。
Rf 0.18(二氯甲烷∶甲醇=99∶1)
δH(300 MHz，CDCl3)0.99(9H，s)，1.44(3H，m)，1.50(3H，d，J=7 Hz)，1.57(1H，m，)，2.15(3H，s)，2.43(3H，m)，2.71(2H，m)，4.43(1H，d，J=10 Hz)，5.06(1H，五重峰，J=7 Hz)，6.77(2H，m)，6.84(2H，d，J=8 Hz)，6.93(1H，s)，7.00(1H，t，J=8 Hz)，7.10(8H，复杂)，7.46(1H，d，J=10 Hz)，7.74(2H，br s)。
LRMS(热喷雾)m/z=558(M+)
制备例7。
(2S，3R)-3-羧基-2-乙氧基-己-4-烯酸甲酯
a)在氮气氛、-78℃下，将正丁基锂(23.0 mL，2.5M在己烷中，57.5mmol)滴加至搅拌的二异丙基胺(9.63 mL，69.0 mmol)的无水四氢呋喃(10 mL)溶液中。将反应烧瓶置于冰水浴中10分钟，然后再冷却至-78℃。加入无水四氢呋喃(10 mL)，随后滴加(S)-苹果酸二异丙基酯(6.0gm，27.0 mmol)的无水四氢呋喃(20 mL)溶液。将此混合物升温至-20℃并搅拌8小时。将此混合物再冷却至-78℃并滴加新蒸馏的烯丙基碘(2.75 mL，30 mmol)。将此混合物升温至-40℃并搅拌36小时。将此混合物倒入冰冷的5％橼酸水溶液(150 mL)中，并用乙酸乙酯(3×150mL)萃取。将此合并的有机溶液用饱和氯化钠水溶液洗涤，干燥(硫酸镁)，并减压浓缩。将残余物通过快速层析(用己烷∶乙酸乙酯=80∶20洗脱)纯化，得到(2S，3R)-和(2S，3S)-2-羟基-3-(2-丙氧基羰基)-5-己烯酸异丙酯的混合物(5.42 gm，76％)(14∶1)，为淡黄色油状物。
Rf 0.63(己烷∶乙酸乙酯=1∶1)
δH(400 MHz，CDCl3)(major异构体)1.19(6H，m)，1.26(6H，m)，2.39(1H，m)，2.58(1H，m)，2.87(1H，m)，3.14(1H，d，J=6.5 Hz，OH)，4.19(1H，m)，4.98(1H，m)，5.07(2H，m)，5.13(1H，d，J=15Hz)，5.79(1H，m)；(小量异构体的峰)2.29(1H，m)，2.50(1H，m)，2.78(1H，m)，3.06(1H，d)，4.40(1H，m)。
LRMS(热喷雾)m/z=276(MNH4 +)，259(MH+)。
b)将三氟甲磺酸乙酯(1.45 mL，11.2 mmol)加入到(2S，3R)-和(2S，3S)-2-羟基-3-(2-丙氧基羰基)-5-己烯酸异丙酯(14∶1)(1.45 gm，5.6 mmol)和2，6-二-叔丁基-4-甲基吡啶(2.88 g，14.0 mmol)的混合物中，并将此混合物在氮气氛下在45℃搅拌5.5小时，20℃下搅拌18小时，及45℃下搅拌24小时。将此冷却的混合物加入到硅胶短柱的顶部并用乙酸乙酯洗脱。将此滤液减压浓缩并进一步通过快速层析(己烷∶乙酸乙酯=85∶15)纯化，得到(2S，3R)-2-乙氧基-3-(2-丙氧基羰基)-5-己烯酸异丙酯(627 mg，39％)。
Rf 0.62(己烷∶乙酸乙酯=70∶30)
δH(400 MHz，CDCl3)1.13(3H，t，J=7.5 Hz)，1.17(6H，m)，1.24(6H，m)，2.24(1H，dt，J=13和6.5 Hz)，2.36(1H，dt，J=13和6.5Hz)，2.83(1H，m)，3.38(1H，dq，J=9.5和7.5 Hz)，3.62(1H，J=9.5和7.5 Hz)，3.92(1H，d，J=8 Hz)，5.02(4H，m)，5.70(1H，m)。
LRMS(热喷雾)m/z=304(MNH4 +)，287(MH+)
c)将(2S，3R)-2-乙氧基-3-(2-丙氧基羰基)-5-己烯酸异丙酯(500mg，1.75mmol)和氢氧化锂水合物(154mg，3.67mmol)在甲醇∶水=1∶1(6mL)中的混合物在氮气氛及室温下搅拌22小时，再减压浓缩。NMR表明反应不完全，再加入氢氧化锂水合物(154 mg，3.67 mmol)和甲醇∶水=1∶1(6 mL)，并将此混合物加热至50℃，并保持20小时。将此混合物冷却，减压浓缩，并加入甲苯并蒸发几次。将残余物真空下用氢氧化钠颗粒干燥，并不经纯化直接用于下步反应。
δH(400 MHz，CD3OD)1.15(3H，t，J=7.5 Hz)，2.26(1 H，m)，2.40(1H，m)，2.46(1H，m)，3.35(1H，dq，J=9.5和7.5 Hz)，3.45(1H，dq，J=9.5和7.5 Hz)，3.72(1H，d，J=7 Hz)，4.94(2H，部分被HOD遮盖)，5.84(1H，m)。
d)在氮气氛、0℃下，向搅拌的(2S，3R)-2-乙氧基-3-(丙-3-烯基)丁二酸二锂(393 mg，得自上述c)的无水四氢呋喃(2.6 mL)的悬浮液中滴加三氟乙酸酐(2.62 mL)。将此混合物搅拌4小时，并减压浓缩。加入甲苯并蒸发几次。在0℃，将所得胶状物溶解于无水甲醇(2 mL)并升温至室温过夜。将此溶液减压浓缩，并将残余物在饱和枸橼酸二氢钠水溶液和乙酸乙酯之间分配。用两批乙酸乙酯萃取水层。将合并的有机溶液用饱和氯化钠水溶液洗涤，干燥(硫酸钠)，并减压浓缩得到标题化合物(220 mg)，为淡黄色油状物。由1H NMR确定主要的杂质为(2S，3S)异构体。
Rf 0.3(二氯甲烷∶甲醇∶乙酸=95∶5∶1)
δH(400 MHz，CD3OD)1.16(3H，t，J=7.5 Hz)，2.32(1H，m)，2.44(1H，m)，2.95(1H，m)，3.42(1H，dq，J=9.5和7.5 Hz)，3.68(m)，3.74(3H，s)，4.01(1H，d，J=6 Hz)，4.94(2H，m)，5.74(1H，m)。
实施例36/制备例8。
(2S，3R)-3-([(1S)-2，2-二甲基-1-([(1R)-1-苯基乙基]氨基羰基)丙基]氨基羰基)-2-乙氧基-6-(3-氟-4-苯氧基苯基)己酸。
Figure 9881293600981
    
Figure 9881293600991
a)在氮气氛、0℃下，将N-(二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐(214 mg，1.12 mmol)加入到搅拌的(2S，3R)-3-羧基-2-乙氧基-己-4-烯酸甲酯(制备例7)(210 mg，0.97 mmol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(139 mg，1.02 mmol)在无水二甲基甲酰胺(4 mL)中的混合物中。1小时后，加入(2S)-氨基-3，3二甲基-N-[(1R)-1-苯基乙基]丁酰胺盐酸盐(制备例1)(276 mg，1.02mmol)，随后加入二异丙基乙胺(0.18μl，1.02 mmol)。再过30分钟后，让此混合物升温至室温。室温下17小时后，将此混合物减压浓缩，并在乙酸乙酯(50 mL)和水(50 mL)之间分配。将此水层用碳酸氢钠饱和并用乙酸乙酯(2×20 mL)萃取。将此合并的有机溶液减压浓缩，溶解于乙醚(50 mL)，用水(3×20 mL)洗涤，干燥(硫酸钠)，并减压浓缩。将残余物通过快速层析(用己烷∶乙酸乙酯=60∶40洗脱)纯化，得到(2S，3R)3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基)氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-2-乙氧基-己-5-烯酸甲酯(181 mg，43％)，为无色固体(由1H NMR确定为单一对映体)。
m.p.131-134℃。
Rf 0.4(己烷∶乙酸乙酯=1∶1)
δH(300 MHz，CDCl3)1.00(9H，s)，1.22(3H，t，J=7 Hz)，1.49(3H，d，J=6.5 Hz)，2.31(1H，dt，14和8 Hz)，2.51(1H，dt，14和6.5 Hz)，2.68(1H，m)，3.42(1H，dq，J=16和7 Hz)，3.66(1H，dq，J=16和7 Hz)，3.69(3H，s)，4.05(1H，d，J=5 Hz)，4.13(1H，d，J=9 Hz)，5.04(1H，d，J=10Hz)，5.07(1H，d，J=18 Hz)，5.14(1H，五重峰，J=7 Hz)，5.70(1H，dddd，J=6，7，10和18 Hz)，6.42(1H，br d)，7.06(1H，br d)，7.29(5H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=433(MH+)
b)将醋酸钯(12 mg，0.05 mmol)和三-(2-甲基苯基)膦(30 mg，0.10mmol)在无水乙腈(1mL)中的混合物在室温下超声波处理1分钟直到形成奶油色混悬液。在氮气氛下，将此混悬液通过Pasteur滴管加入到搅拌的(2S，3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基)氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-2-乙氧基-己-5-烯酸甲酯(415 mg，0.96mmol)、3-氟-4-苯氧基-溴代苯(制备例10)(400 mg，1.50 mmol)和三乙胺(280μL，2.0mmol)在无水乙腈(1mL)中的混合物中。将此混合物用氮气吹洗，然后加热回流16小时。冷却后，将此混合物倒入乙酸乙酯(70 mL)并用5％枸橼酸水溶液(20mL)、饱和氯化钠水溶液(50 mL)洗涤，干燥(硫酸镁)，并减压浓缩。将残余物通过快速层析(用二氯甲烷∶乙酸乙酯梯度洗脱)纯化，主要得到(2S，3R，5E)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基)氨基｝羰基)-2-乙氧基-6-(3-氟-4-苯氧基苯基)己-5-烯酸甲酯，为淡黄色泡沫(359 mg，69％)。1H MNR证明还存在两个烯异构体，(5Z)和(4E)。将此烯的混合物用于下一步反应(将下c)。
Rf 0.36(二氯甲烷∶乙酸乙酯=10∶1)
δH(400MHz，CDCl3)((5E)异构体)：1.01(9H，s)，1.16(3H，t，J=7 Hz)，1.49(3H，d，J=6.5 Hz)，2.48(1H，m)，2.68(1H，m)，2.80(1H，m)，3.26(1H，m)，3.69(1H，m和3H，s，重叠)，4.06(1H，d，J=4 Hz)，4.15(1H，d，J=9.5 Hz)，5.10(1H，五重峰，J=6.5 Hz)，6.03(1H，dt，16和8 Hz)，6.36(1H，d，J=16 Hz)，6.42(1H，br d)，6.95(3H，m)，7.01(1H，d，J=8 Hz)，7.09(3H，m)，7.22(1H，m)，7.28(6H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=636(MNH4 +)
c)将(2S，3R，5E)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-2-乙氧基-6-(3-氟-4-苯氧基苯基)己-5-烯酸甲酯(350 mg，0.566 mmol)在乙醇(15 mL)中的溶液在3巴和20℃下在10％钯碳上氢化16小时。将此混合物通过Arbocel助滤剂过滤并减压浓缩。将此残余物溶解于环己烷并蒸发(两次)得到(2S，3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝)羰基)-2-乙氧基-6-(3-氟-4-苯氧基苯基)己酸甲酯(368gm，105％)，为无色泡沫，将其不经纯化直接用于下步反应。
Rf 0.29(己烷∶乙酸乙酯=2∶1)
δH(400 MHz，CDCl3)1.01(9H，s)，1.19(3H，t，J=7 Hz)，1.49(3H，d，J=6.5 Hz)，1.61(3H，m)，1.75(1H，m)，2.58(3H，m)，3.41(1H，dq，J=10和7 Hz)，3.61(1H，dq，J=10和7 Hz)，3.70(3H，s)，3.99(1H，d，J=5 Hz)，4.15(1H，d，J=9 Hz)，5.12(1H，五重峰，J=6.5Hz)，6.38(1H，br d)，6.83(1H，d，J=10 Hz)，6.87(1H，d，J=12 Hz)，6.93(4H，m)，7.03(1H，t，J=9.5 Hz)，7.20(1H，m)，7.29(6H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=638(MNH4 +)
d)将氢氧化锂水合物(116 mg，2.83 mmol)加入到(2S，3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基)氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-2-乙氧基-6-(3-氟-4苯氧基苯基)己酸甲酯(368 mg，0.566 mmol)的甲醇∶水=10∶1(5 mL)溶液中，并将此混合物在室温下搅拌2小时。将此溶液用5％枸橼酸水溶液中和并减压浓缩。将残余物在乙酸乙酯(100mL)和5％枸橼酸水溶液(20 mL)之间分配，用饱和氯化钠水溶液(20 mL)洗涤，干燥(硫酸镁)，并减压浓缩。通过快速层析(用二氯甲烷∶甲醇=20∶1至10∶1洗脱)纯化，得到标题化合物(62 mg，18％)，为无色玻璃状物，和一些混合的馏份。将其合并并再次通过快速层析(用乙酸乙酯∶己烷∶乙酸=33∶66∶1至50∶50∶1洗脱)纯化，得到标题化合物(37 mg，11％)，，为白色固体。
m.p.185-187℃
Rf 0.23(乙醚∶己烷∶乙酸=70∶30∶1)
δH(400MHz，CD3OD)(NB一些位移依赖于浓度)1.02(9H，s)，1.15(3H，t，J=7 Hz)，1.44(3H，d，J=7 Hz)，1.56(3H，m)，1.69(1H，m)，2.54(2H，m)，2.68(1H，m)，3.35(1H，dq，J=10和7 Hz)，3.66(1H，dq，J=10和7 Hz)，4.31(1H，s)，5.02(1H，q，J=7 Hz)，6.87(4H，m)，6.96(1H，d，J=12 Hz)，7.02(1H，t，J=7 Hz)，7.13(1H，m)，7.19(2H，t，J=7 Hz)，7.28(4H，m)。
LRMS(热喷雾)m/z=607(MH+)
FTIRνmax(KBr片)3330，2980，1643，1593，1508，1493，1217，700cm-1
制备例9。
三氟甲磺酸(3-氯-4-苯基)苯基酯
在氮气氛、0℃下，在2分钟内，将三氟甲磺酸酐(755μL，4.45mmol)滴加到搅拌的(3-氯-4-苯基)苯酚(759 mg，3.71 mmol)(国际专利97/20815)和无水吡啶(785μL，9.65 mmol)的无水二氯甲烷溶液中。将此混合物在0℃搅拌1.5小时并再在20℃下搅拌2.5小时。将此混合物倒入乙醚/己烷(200 mL，50∶50)的混合物中并过滤。将此滤液减压浓缩，并将残余物通过快速层析(用己烷∶乙醚=20∶1洗脱)纯化，得到标题化合物，为无色油状物(1062 mg，85％)，将其在室温下反应放置几天结晶。
m.p.43-44℃
Rf 0.27(己烷)
δH(300 MHz，CDCl3)7.27(1H，dd，J=8和2 Hz)，7.29(7H，brs)。
LRMS(EI)m/z=336(M+)
制备例10。
3-氟4-苯氧基-溴代苯。
Figure 9881293601031
将氢氧化钠水溶液(5.5 mL，1M，5.5 mmol)加入至4-溴-2-氟苯酚(0.96 gm，5.0 mmol)和溴化二苯基碘鎓(1.99gm，5.5 mmol)在水(20mL)中的混合物中，并将混合物加热回流4小时。冷却后，将此反应混合物用乙醚稀释，并过滤。将有机相用饱和氯化钠水溶液洗涤，干燥(硫酸镁)，并减压浓缩。将残余的暗桔黄色油状物通过快速层析纯化(用己烷洗脱)得到标题化合物，为桔黄色油状物(1.2 gm，90％)。
Rf 0.36(己烷)
δH(400 MHz，CDCl3)6.90(3H，m)，7.06(1H，m)，7.20(1H，m)，7.30(3H，m)。
制备例11。
1-碘-3-甲基-4-苯氧基苯。
将氢氧化钠水溶液(33mL，1M，33mmol)加入到4-碘-2-甲基苯酚(7.0 gm，29.9 mmol)和溴化二苯基碘鎓(11.89 gm，32.9 mmol)在水(120mL)中的混合物中，并将混合物加热回流4小时。冷却后，将此反应混合物用乙酸乙酯(4×100 mL)萃取，将合并的萃取物用饱和氯化钠水溶液洗涤，干燥(硫酸镁)，并减压浓缩。将残余的暗桔黄色油状物通过快速层析重复纯化(第一个柱用己烷洗脱，第二个用戊烷洗脱)，得到标题化合物，为桔黄色油状物(7.84 gm，84％)。
Rf 0.78(己烷)
δH(400 MHz CDCl3)2.23(3H，s)，6.65(1H，d，J=9 Hz)，6.94(2H，m)，7.10(1H，m)，7.32(2H，m)，7.47(1H，d，J=9 Hz)，7.59(1H，s)。
LRMS(热喷雾)m/z=310(MH+)
制备例12。
(2S，3R)-3-羧基-2-丙基-己-5-烯酸叔丁基酯
a)在氮气氛、-50℃下，将正丁基锂(2.2 mL，2.5M在己烷中，5.6mmol)滴加至搅拌的二异丙基胺(0.73 mL，5.6 mmol)的无水四氢呋喃(3mL)溶液中。1小时后将此溶液冷却至-70℃并加入N，N’-二甲基亚丙基脲(DMPU)(3 mL)。再在15分钟内滴加(2R)-2-[2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基)戊-4-烯酸(535 mg，2.5 mmol)的无水四氢呋喃(6 mL)溶液，保持该反应温度在-70℃。搅拌1小时后，滴加1-碘丙烷(680mg，4.0 mmol)并将此混合物-70℃搅拌1小时，再-40℃搅拌2小时，最后升温至0℃。加入甲醇(1mL)，并将此混合物在5％枸橼酸水溶液(150 mL)和乙醚(200mL)之间分配。将有机层用5％枸橼酸水溶液(75 mL)、水(3×200mL)洗涤，干燥(硫酸镁)并减压浓缩得到淡黄色油状物。通过快速层析纯化(用己烷∶乙酸乙酯∶乙酸=80∶20∶2洗脱)，得到(2R，3R)-和(2R，3S)-3-[(2-甲基丙-2-基)氧羰基]-2-(3-丙烯-1-基)己酸(472 mg，74％)，为无色油状物，其中非对映异构体的比例为97∶3。
Rf 0.31(己烷∶乙酸乙酯∶乙酸=80∶20∶2)
δH(400MHz，CDCl3)(2R，3R异构体)0.92(3H，t，J=7.5 Hz)，1.34(2H，m)，1.45(9H，s)，1.58(2H，m)，2.39(2H，t，J=7 Hz)，2.60(1H，dt，J=6和8 Hz)，2.74(1H，dt，6和7.5Hz)，5.06(1H，d，J=10Hz)，5.10(1H，d，J=17 Hz)，5.74(1H，ddt，J=17，10和7.5 Hz)。
LRMS(热喷雾)m/z=256(弱，M+)，200(基峰，MH+-t-Bu)
FTIRνmax(膜)2970，1730，1370，1250，1160 cm-1
b)将(2R，3R)-和(2R，3S)-3-[(2-甲基丙-2-基)氧羰基]-2-(3-丙烯-1-基)己酸(97∶3，得自上述a)(3.05 g，11.9 mmol)溶解于无水四氢呋喃(35 mL)中并在-70℃在30分钟内将其滴加至搅拌的二异丙基氨化锂(得自正丁基锂(19.2 mL，2.5M在己烷中，48 mmol)和二异丙基胺(7.0 mL，50 mmol)在无水四氢呋喃(25 mL)中的混合物中。将此混合物升温至-10℃，搅拌30分钟然后升温至0℃，保持2小时。然后，将此溶液冷却至-70℃并通过注射器快速加入甲醇(15 mL)。让此混合物升温至室温并在5％枸橼酸水溶液(150 mL)和乙醚(200mL)之间分配。将此有机层用5％枸橼酸水溶液(50 mL)、水(3×200 mL)洗涤，干燥(硫酸镁)并减压浓缩得到淡黄色油状物。通过快速层析纯化(用己烷∶乙酸乙酯∶乙酸梯度洗脱)，得到(2R，3S)-和(2R，3R)-3-[(2-甲基丙-2-基)氧羰基]-2-(3-丙烯-1-基)己酸(3.05 g，100％)，为无色油状物，其中非对映异构体比例为58∶42。
Rf 0.31(己烷∶乙酸乙酯∶乙酸=80∶20∶2)
这两个异构体的立体化学鉴定如下。将(2R，3S)-和(2R，3R)-3-[(2-甲基丙-2-基)氧羰基]-2-(3-丙烯-1-基)己酸(比率1∶3)在乙醇中的溶液在10％钯碳(3巴)上氢化，并再用存在于无水二氯甲烷/二噁烷的氯化氢处理(4℃，4h)，得到(2R，3S)-和(2R，3R)-2，3-二丙-1-基丁二酸(比率1∶3)的混合物，其是文献中已知的(Bull.Chem.Soc.(France)1975，2189)。质子NMR谱检测(丙酮-d6)显示δH 2.70(2H，m，CHCO2H，主要异构体)和δH2.55(2H，m，CHCO2H，次要异构体)：
c)将(2R，3S)-和(2R，3R)-3-[(2-甲基丙-2-基)氧羰基]-2-(3-丙烯-1-基)己酸(3.04 g，11.9 mmol)(非对映异构体比率58∶42)和碳酸氢铯(2.30 g，11.9 mmol)在水(35 mL)和乙腈(90 mL)中的溶液在20℃下搅拌5分钟。将此溶液减压蒸发并将残余物溶解于甲苯并从中蒸发4次。将所得胶状物真空干燥30分钟，再溶解于无水N，N-二甲基乙酰胺(50 mL)。加入碘代甲烷(3.41 g，24 mmol)并将此溶液在20℃下搅拌17小时。将此溶液减压浓缩并在乙醚(250 mL)和水(250 mL)之间分配。将此有机层用水(3×200 mL)洗涤，用硫酸镁干燥并减压浓缩得到(2R，3S)-和(2R，3R)-3-[(2-甲基丙-2-基)氧羰基]-2-(3-丙烯-1-基)己酸甲酯的混合物，为黄色油状物(3.0 g，94％)。TLC(戊烷∶乙醚=10∶1)表明产物点的Rf=0.41和0.30。
d)将得自上述c的(2R，3S)-和(2R，3R)-3-[(2-甲基丙-2-基)氧羰基]-2-(3-丙烯-1-基)己酸甲酯的混合物通过快速层析(戊烷∶乙醚=20∶1再10∶1)分离得到两个馏份。第一个洗脱产物鉴定为(2R，3S)-3-[(2-甲基丙-2-基)氧羰基]-2-(3-丙烯-1-基)己酸甲酯(1.78 g，56％)，Rf0.41(戊烷∶乙醚=10∶1)，为无色油状物。
δH(400MHz，CDCl3)0.87(3H，t，J=7 Hz)，1.30(3H，m)，1.46(9H，s)，1.56(1H，m)，2.23(1H，m)，2.34(1H，m)，2.54(1H，dt，3和10Hz)，2.69(1H，4.5和10 Hz)，3.66(3H，s)，5.00(1H，d，J=10Hz)，5.04(1H，d，J=17 Hz)，5.72(1H，ddt，J=17，10和7 Hz)。
C15H26O4理论值C，66.61；H，9.77；
                实测值：C，66.64；H，9.69％
FTIRνmax(KBr片)2970，1730，1370，1150 cm-1
第二个洗脱产物鉴定为(2R，3R)-3-[(2-甲基丙2-基)氧羰基]-2-(3-丙烯-1-基)己酸甲酯(760 mg，24％)，Rf 0.30(戊烷∶乙醚=10∶1)，为无色油状物。
δH(400 MHz，CDCl3)0.90(3H，t，J=7 Hz)，1.27(1H，m)，1.35(1H，m)，1.45(9H，s)，1.55(2H，m)，2.36(2H，m)，2.58(1H，dt，J=5和9 Hz)，2.71(1H，dt，5和9 Hz)，3.66(3H，s)，5.02(1H，d，J=10 Hz)，5.08(1H，d，J=16 Hz)，5.76(1H，m)。
C15H26O4理论值    C，66.70；H，9.81；
实测值：          C，66.64；H，9.69％。
FTIRνmax(KBr片)2970，1730，1370，1160cm-1
e)将(2R，3S)-3-[(2-甲基丙-2-基)氧羰基]-2-(3-丙烯-1-基)己酸酯(1.49 g，5.51 mmol)和无水碘化锂(11g，82 mmol)在水吡啶(50 mL)中的混合物在氮气氛下加热回流17小时。冷却后，将此混合物倒入20％枸橼酸水溶液(500mL)中并用乙酸乙酯(250 mL)萃取。将此有机层用5％枸橼酸水溶液(2×150 mL)、水(3×250 mL)洗涤，用硫酸镁干燥，并减压浓缩。将此残余物用己烷研磨，过滤并将此滤液减压浓缩。将此粗品通过重复快速层析纯化(第一个柱用二氯甲烷∶甲醇∶乙酸=80∶20∶2洗脱，第二个柱用己烷∶乙酸乙酯∶乙酸梯度洗脱)得到(2R，3S)-3-[(2-甲基丙-2-基)氧羰基]-2-(3丙烯-1-基)己酸(788 mg，56％)，为无色油状物。
Rf 0.3(己烷∶乙酸乙酯∶乙酸=80∶20∶2)
δH(400 MHz，CDCl3)0.91(3H，t，J=7 Hz)，1.35(3H，m)，1.47(9H，s)，1.62(1H，m)，2.26(1H，dt，J=10和7.5 Hz)，2.38(1H，dt，J=7.5和10 Hz)，2.58(1H，dt，J=3和10 Hz)，2.70(1H，dt，5和9 Hz)，5.04(1H，d，J=10 Hz)，5.08(1H，d，J=18 Hz)，5.76(1H，ddt，J=18，10和7.5 Hz)。
LRMS(热喷雾)m/z=257(弱，MH+)
实测值：          C，65.30；H，9.44；
C14H24O4理论值    C，65.60；H，9.44％
制备例13。
(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]-(2S)-丙基己酸叔丁基酯
a)按照制备例2的方法，(2R，3，S)-3-[(2-甲基丙-2-基)氧羰基]-2-(3-丙烯-1-基)己酸(380 mg，1.48 mmo1)与(2S)-氨基-3，3-二甲基-N-[(1R)-1-苯基乙基]丁酰胺盐酸盐(制备例1)(441mg，1.62 mmol)在4℃反应1小时并再在20℃下反应72小时。将此混合物减压浓缩，并在乙酸乙酯(100mL)和水(100mL)之间分配。将此水层用碳酸氢钠饱和并用乙酸乙酯(2×100 mL)萃取。将合并的有机溶液减压浓缩，将残余物溶解于乙醚(500 mL)并用水(3×200 mL)洗涤，干燥(硫酸镁)，并减压浓缩。将残余物用戊烷研磨，过滤并干燥得到(2S，3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-2-(1-丙基)己-5-烯酸叔丁基酯(579 mg，80％)，为无色固体。
m.p.180-183℃。
Rf 0.51(己烷∶异丙醇=90∶10)
δH(400 MHz，CDCl3)0.84(3H，t，J=7.5 Hz)，1.02(9H，s)，1.22-1.50(4H，m)，1.45(9H，s)，1.50(3H，d，J=7 Hz)，2.08(1H，m)，2.22(1H，m)，2.34(1H，dt J=4和10 Hz)，2.52(1H，dt，J=3和10 Hz)，4.18(1H，d，J=9 Hz)，4.72(1H，d，J=9.5 Hz)，4.85(1H，d，J=16.5 Hz)，5.09(1H，五重峰，J=7 Hz)，5.53(1H，ddt J=9.5，16.5和7 Hz)，6.03(1H，br d)，6.24(1H，br d)，7.26(5H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=473(MH+)
FTIRνmax(KBr片)3320，2970，2930，1725，1640，1540，1370，1150，700 cm-1
实测值：        C，71.09；H，9.46；N，6.10；
C28H44N2O4理论值C，71.15；H，9.38；N，5.93％
b)按照制备例3的方法，将(2S，3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-2-(1-丙基)己-5-烯酸叔丁基酯(543 mg，1.15 mmol)与3-甲基-4-苯基溴代苯(356 mg，1.44mmol)在钯催化下在无水乙腈和二甲基甲酰胺(2∶5，7 mL)的混合物中，在90℃下反应17小时。将此混合物减压浓缩，倒入乙酸乙酯(100mL)并用水(2×100mL)洗涤，干燥(硫酸镁)，并减压浓缩。将残余物通过快速层析(用己烷∶乙酸乙酯梯度洗脱)纯化，主要得到(2S，3R，5E)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]-2-(1-丙基)己-5-烯酸叔丁基酯，为无色胶状物(460 mg，63％)。1H NMR表明还存在两个烯异构体，(5Z)和(4E)。将此烯的混合物用于下步反应(见下c)。
Rf 0.46(己烷∶乙酸乙酯=3∶1)
δH(400 MHz，CDCl3)((5E)异构体)：0.87(3H，t，J=7 Hz)，1.03(9H，s)，1.32(2H，m)，1.46(9H，s，3H，d，J=7 Hz，和2H，m，重叠)，2.22(3H，s)，2.34(1H，m)，2.48(2H，m)，2.60(1H，m)，4.19(1H，d，J=9 Hz)，4.93(1H，五重峰，J=7 Hz)，5.85(1H，br d)，6.05(1H，dt，J=14和7 Hz)，6.35(1H，d，J=14 Hz)，6.27(1H，br d)，7.20(11H，复杂)，7.37(2H，m)。
LRMS(热喷雾)m/z=639(MH+)
c)将(2S，3R，5E)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]-2-(1-丙基)己-5-烯酸叔丁基酯(437 gm，0.68 mmol)在乙醇(50 mL)中在20℃、3巴压力下在10％钯碳(50 mg)上氢化17小时。将此混合物通过Arbocel助滤剂过滤并减压浓缩。快速层析(己烷∶乙酸乙酯梯度洗脱)催化，得到(2S，3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基)羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]-2-(1-丙基)己酸叔丁基酯(395 gm，62％)，为无色泡沫。
Rf 0.38(己烷∶乙酸乙酯=3∶1)
δH(400 MHz，CDCl3)0.85(3H，t，J=7 Hz)，1.03(9H，s)，1.26(4H，m)，1.37(9H，s)，1.48(4H，m，和3H，d，J=7 Hz，重叠)，2.20(3H，s)，2.29(1H，m)，2.48(4H，m)，4.24(1H，d，J=9 Hz)，5.10(1H，五重峰，J=7 Hz)，6.02(1H，br d)，6.29(1H，br d)，6.94(1H，d，J=8 Hz)，6.98(1H，s)，7.09(1H，d，J=8 Hz)，7.24(7H，复杂)，7.32(1H，d，J=7 Hz)，7.39(2H，t，J=7 Hz)。
LRMS(热喷雾)m/z=641(MH+)
实测值：    C，76.71；H，8.97；N，4.35；
C41H56N2O4理论值C，76.84；H，8.81；N，4.37％
制备例14。
(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]戊-4-烯酰胺
Figure 9881293601111
a)将(2S，3R)-和(2S，3S)-2-羟基-3-(2-丙氧基羰基)-5-己烯酸异丙基酯(6.28 gm，24.3 mmol)的混合物(异构体比率=14∶1)(制备例7，步骤a)和氢氧化钾(4.09 g，72.9 mmol)在二噁烷∶水(50 mL，5∶2)中的混合物在氮气氛下90℃加热18小时。将此混合物冷却，用水(200mL)稀释并通过通过离子交换柱(Dowex 50×8，300 g)，用水洗脱至没有二酸洗脱出。将此洗脱物减压浓缩，溶解于并从乙醇中蒸发两次，再乙醚同样处理(两次)，并真空干燥得到(2S，3R)-2-羟基-3-(丙-3-烯-1-基)丁二酸(蜡状黄色固体，4.85 g，＞100％，含乙醇和乙醚)，为8∶1的异构体混合物的主要组分，将其不经纯化直接用于下步反应。
δH(300MHz，CDCl3)2.47(1H，dt，J=7.5和15.5 Hz)，2.60(1H，m)，3.00(1H，dt，J=4和6 Hz)，4.26(1H，d，J=4 Hz)，5.09(1H，d，J=10 Hz)，5.15(1H，d，J=18 Hz)，5.83(1H，m)。
b)室温下将上述a)的二酸粗品溶解于二甲基甲酰胺(36 mL)和2，2-二甲氧基丙烷(133 mL)的混合物中并加入对甲苯磺酸水合物(231mg)。将此混合物在30℃下加热2.5天。减压除去溶剂得到7.5 g油状物，其中含有(4S)-4-[(1R)-1-羧基-丁-3-烯基]-2，2-二甲基-1，3-二氧杂环戊烷-5-酮，为主要组分，还含有二甲基甲酰胺和对甲苯磺酸。
δH(400 HMz，CDCl3)1.53(3H，s)，1.60(3H，s)，2.47(1H，dt，J=7.5和15.5 Hz)，2.71(1H，dt，J=7.5和15.5 Hz)，3.00(1H，m)，4.30(1H，d，J=4 Hz)，5.12(1H，d，J=10 Hz)，5.16(1H，d，J=16 Hz)，5.80(1H，m)。
c)在氮气氛下，将得自上述b的部分粗品(4S)-4-[(1R)-1-羧基-丁-3-烯基]-2，2-二甲基-1，3-二氧杂环戊烷-5-酮(按照NMR计算含1.54 g，7.19 mmol)和1-羟基-7-氮杂-1H-1，2，3-苯并三唑(1.09g，7.55 mmol)在无水二氯甲烷(30 mL)中混合并冷却至0℃。加入N-(二甲基氨基丙基)-N，-乙基碳二亚胺盐酸盐(1.60 g，8.27 mmol)，并将此混合物在0℃下搅拌1.5小时。加入(2S)-氨基-3，3-二甲基-N-[(1R)-1-苯基乙基]丁酰胺盐酸盐(制备例1)(2.15 g，7.55mmol)，随后加入二异丙基乙胺(1.37 mL，7.55mmol)。再过45分钟后，让此混合物升温至室温。室温下3小时后，将此混合物在乙酸乙酯(200mL)和pH7磷酸盐缓冲液(100mL)之间分配。将此有机层用碳酸氢钠、盐水洗涤，干燥(硫酸钠)，并减压浓缩。将所得泡沫通过加入乙醚结晶，滤出白色固体(1.89 g)。用乙酸乙酯/己烷重结晶得到(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3二氧杂环戊烷-4-基)-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]戊-4-烯酰胺，为白色固体(1.30 g，42％，为单一的非对映异构体)。
m.p.178-180℃。
Rf 0.25(二氯甲烷∶乙醚=90∶10)
δH(300 MHz，CDCl3)1.02(9H，s)，1.48(3H，d，J=7 Hz)，1.51(3H，s)，1.56(3H，s)，2.47(1H，dt，15和7.5 Hz)，2.58(1H，dt，15和7.5 Hz)，2.70(1H，dt，J=11和5 Hz)，4.15(1H，d，J=9Hz)，4.50(1H，d，J=5 Hz)，4.99(1H，d，J=10 Hz)，5.08(2H，m)，5.67(1H，m，)，5.67(1H，br d)，6.45(1H，br d)，7.27(5H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=431(MH+)
制备例15。
(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-5-[(3-氟-4-苯氧基)苯基]戊酰胺
Figure 9881293601131
a)将醋酸钯(17 mg，0.075 mmol)和三-(2-甲基苯基)膦(46 mg，0.15 mmol)在无水乙腈(2 mL)中的混合物在室温下超声处理1分钟直到形成奶油色混悬液。在氮气氛下，将此混悬液通过Pasteur滴管加入到搅拌的(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]戊-4-烯酰胺(650mg，1.5 mmol)、1-溴-3-氟-4-苯氧基苯(制备例10)(587mg，2.26 mmol)和N-乙基吗啉(348μL，3.0 mmol)在无水乙腈(2.5mL)中的溶液中。将此混合物用氮气吹洗，再加热回流16小时。冷却后，将此混合物倒入乙酸乙酯(100mL)中并用5％枸橼酸水溶液(30 mL)、饱和氯化钠水溶液(50 mL)洗涤，干燥(硫酸钠)，并减压浓缩。将残余物通过快速层析(用二氯甲烷∶乙醚梯度洗脱)纯化，主要得到(2R，5E)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-5-(3-氟-4-苯氧基苯基)戊-4-烯酰胺，为淡黄色泡沫(210 mg，22％)。1HNMR表明存在两个烯异构体。将此烯的混合物用于下步反应(见下b)。
Rf 0.36(二氯甲烷∶乙醚=10∶1)
δH(400MHz，CDCl3)((5E)异构体)：1.00(9H，s)，1.50(3H，d，J=7 Hz)，1.53(3H，s)，1.58(3H，s)，2.65(1H，m)，2.77(2H，m)，4.18(1H，d，J=9 Hz)，4.56(1H，d，J=5 Hz)，5.03(1H，五重峰，J=7Hz)，5.88(1H，br d)，6.01(1H，dt，16和7 Hz)，6.43(1H，d，J=16Hz)，6.58(1H，br d)，6.94(4H，m)，7.08(2H，m)，7.20(2H，m)，7.24(5H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=618(MH+)，542(M+-(CH3)2CO2)
b)将(2R，5E)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-5-(3-氟-4-苯氧基苯基)戊-4-烯酰胺(210 mg，0.34 mmol)在乙醇∶乙酸乙酯=5∶1(10mL)中的溶液在3巴20℃下在10％钯碳(20 mg)上氢化3小时。将此混合物通过Arbocel助滤剂过滤并减压浓缩得到(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-5-(3-氟-4-苯氧基苯基)戊酰胺(103mg，49％)，为无色固体，将此不经纯化直接用于实施例9。
Rf 0.71(二氯甲烷∶甲醇=90∶10)
δH(400 MHz，CDCl3)1.03(9H，s)，1.50(3H，d，J=7 Hz)，1.52(3H，s)，1.57(3H，s，和2H，m，重叠)，1.85(2H，m)，2.58(3H，m)，4.16(1H，d，J=10 Hz)，4.45(1H，d，J=8 Hz)，5.06(1H，五重峰，J=7Hz)，5.92(1H，br d)，6.55(1H，br d，)，6.84(1H，d，J=8 Hz)，6.94(3H，m)，7.06(1H，t，J=7 Hz)，7.26(8H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=619(MH+)
制备例16。
(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-5-[(3-甲基-4-苯基)苯基]戊酰胺
a)按照制备例15 a)的方法，(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]戊-4-烯酰胺(制备例14)(860 mg，2.0 mmol)与1-溴-3-甲基-4-苯基苯(740 mg，3.0 mmol)在钯催化下在乙腈中回流16小时。冷却后，将此混合物在乙酸乙酯(3×50 mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(50 mL)之间分配。将合并的有机溶液干燥(硫酸钠)并减压浓缩。将残余物通过快速层析(用二氯甲烷∶甲醇=97.5∶2.5洗脱)纯化，主要得到(2R，5E)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-5-[(3-甲基-4-苯基)苯基]戊-4-烯酰胺，为浅黄褐色泡沫(480 mg，40％)。1HNMR表明还存在两个烯异构体。将此烯的混合物用于下步反应(见下b)。
Rf 0.59(二氯甲烷∶甲醇=95∶5)
δH(400MHz，CDCl3)((5E)异构体)：1.03(9H，s)，1.48(3H，d，J=7 Hz)，1.54(3H，s)，1.59(3H，s)，2.25(3H，s)，2.71(1H，dt，J=15和7.5 Hz)，2.77(1H，q，J=6 Hz)，2.85(1H，dt，J=15和7.5Hz)，4.18(1H，d，J=9 Hz)，4.58(1H，d，J=5 Hz)，5.03(1H，五重峰，J=7 Hz)，5.87(1 H，br d)，6.13(1H，dt，16和7 Hz)，6.52(1H，d，J=16 Hz)，6.58(1H，br d)，7.23(10H，复杂)，7.38(3H，m)。
LRMS(热喷雾)m/z=521(M+-(CH3)2CO2)
b)将(2R，5E)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基)-N-[(1S)-2，2二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-5-[(3-甲基-4-苯基)苯基]戊-4-烯酰胺(480 mg，0.80 mmol)在乙醇(20 mL)中的溶液在3巴20℃在10％钯碳(48 mg)上氢化4小时。将此混合物通过Arbocel助滤剂过滤并减压浓缩得到(2R)-2-[(4’S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]-5-[(3-甲基-4-苯基)苯基]戊酰胺(440 mg，92％)，为奶油色固体，将其不经纯化用于实施例10。
Rf 0.53(二氯甲烷∶甲醇=95∶5)
δH(400 MHz CDCl3)1.03(9H，s)，1.50(3H，d，J=7 Hz)，1.53(3H，s)，1.58(3H，s)，1.64(2H m)，1.87(2H，m)，2.46(3H，m)，4.20(1H，d，J=10 Hz)，4.47(1H，d，J=5 Hz)，5.07(1H，五重峰，J=7 Hz)，5.99(1H，br d)，6.55(1H，br d，)，7.00(1H，d，J=8 Hz)，7.04(1H，s)，7.13(1H，d，J=8 Hz)，7.29(5H，复杂)，7.40(2H，m)。
LRMS(热喷雾)m/z=600(MH+)，523(基峰，M+-(CH3)2CO2)
实施例37/制备例17。
(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[(3-氟4-苯基)苯基]己酸
步骤a)(用1-溴-3-氟-4-苯基苯代替1-溴-3-甲基-4-苯基苯)和b)按照制备例3的方法进行，得到：
(3R，5E)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[3-氟-(4-苯基)苯基]己-5-烯酸叔丁基酯，为无色胶状物(997mg，83％)。1HNMR表明还存在两个烯异构体，(5Z)和(4E)。将此烯的混合物用于下步反应。
Rf 0.23(己烷∶乙酸乙酯=3∶1)
δH(400MHz，CDCl3)((5E)异构体)：0.96(9H，s)，1.39(9H，s)，1.47(3H，d，J=6.5Hz)，2.28(1H，dt，J=14和7 Hz)，2.37(1H，dd，J=4和15 Hz)，2.44(1H，m)，2.62(1H，dd，J=8和15 Hz)，2.73(1H，m)，4.16(1H，d，J=9 Hz)，5.03(1H，五重峰，J=6.5 Hz)，5.88(1H，br d)，6.06(1H，dt，J=7.5和15 Hz)，6.33(1H，d，J=15 Hz)，6.48(1H，br d)，7.06(2H，m)，7.19(5H，m)，7.30(2H，m)，7.39(2H，t，J=8 Hz)，7.48(2H，d，J=8 Hz)。
LRMS(热喷雾)m/z=602(MH+)
和
(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[3-氟-(4-苯基)苯基]己酸叔丁基酯(702 mg，72％)，为无色泡沫。
Rf 0.28(己烷∶乙酸乙酯=3∶1)
δH(400MHz，CDCl3)1.00(9H，s)，1.37(9H，s)，1.46(3H，d，J=7 Hz)，1.50(3H，m)，1.61(1H，m)，2.28(1H，m)，2.55(4H，m)，4.16(1H，d，J=9 Hz)，5.06(1H，五重峰，J=7 Hz)，5.90(1H，br d)，6.42(1H，br d)，6.89(2H，m)，7.22(7H，复杂)，7.40(2H，t，J=7 Hz)，7.48(2H，d，J=7 Hz)。
LRMS(热喷雾)m/z=603(MH+)
C37H47FN2O4理论值C，73.66；H，7.88；N，4.64；
实测值：         C，73.73；H，7.86；N，4.65％
c)按照制备例1的方法，将(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[3-氟-(4-苯基)苯基)己酸叔丁基酯(650 mg，1.08 mmol)用三氟乙酸在20℃下处理4小时得到标题化合物(470 mg，80％)。
m.p.165-168℃(用二异丙基醚研磨后)。
Rf 0.38(乙醚∶己烷∶乙酸=70∶30∶1)
δH(400 MHz DMSO-d6)0.87(9H，s)，1.43(3H，d，J=7 Hz)，1.42(4H，m)，2.20(1H，dd，J=3和15 Hz)，2.44(3H，m)，2.79(1H，m)，4.27(1H，d，J=10 Hz)，4.89(1H，五重峰J=7 Hz)，6.97(2H，m)，7.16(5H，复杂)，7.32(2H，m)，7.45(4H，m)，7.65(1H，br d)，8.27(1H，br d)，11.97(1H，br s)。
C33H39FN2O4理论值C，72.52；H，7.24；N，5.09；
实测值：         C，72.50；H，7.19；N，5.12％
FTIRνmax=(KBr片)3300，3070，3030，2965，1710，1633，1543，764，700 cm-1
制备例18。
(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-(2S)-乙氧基-6-[(3-甲基4-苯基)苯基]己酸甲酯
a)按照制备例15 a)的方法，将(2S，3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-2-乙氧基-己-5-烯酸甲酯(415 mg，0.96 mmol)(制备例8a)(396 mg，0.92 mmol)与1-溴-3-甲基-4-苯基苯(340 mg，1.37 mmol)在钯催化下在乙腈中反应回流16小时。冷却后，将此混合物倒入乙酸乙酯(70 mL)中并用5％枸橼酸水溶液(20 mL)、饱和氯化钠水溶液(50 mL)洗涤，干燥(硫酸镁)，并减压浓缩。将残余物通过快速层析(用己烷∶乙酸乙酯梯度洗脱)纯化，主要得到(2S，3R，5E)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-2-乙氧基-6-[(3-甲基-4-苯基)苯基]己-5-烯酸甲酯，为淡黄色泡沫(415 mg，75％)。1HNMR表明还存在两个烯异构体，(5Z)和(4E)。将此烯的混合物用于下步反应(见下b)。
Rf 0.51(己烷∶乙酸乙酯=1∶1)
δH(400MHz，CDCl3)((5E)异构体)：1.02(9H，s)，1.26(3H，t，J=7 Hz)，1.50(3H，d，J=7 Hz)，2.24(3H，s)，2.55(1H，m)，2.73(1H，m)，2.82(1H，m)，3.45(1H，五重峰，J=7 Hz)，3.69(1H，m和3H，s，重叠)，4.11(1H，d，J=4 Hz)，4.14(1H，d，J=10 Hz)，5.12(1H，五重峰，J=7 Hz)，6.14(1H，dt，16和8 Hz)，6.46(1H，d，J=16Hz)，6.50(1H，br d)，7.24(11H，复杂)，7.40(3H，m)。
b)将(2S，3R，5E)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-2-乙氧基-6-[(3-甲基-4苯基)苯基]己-5-烯酸甲酯(415 mg，0.70 mmol)在乙醇(20 mL)中的溶液在3巴在20℃下在10％钯碳(40 mg)上氢化2小时。将此混合物通过Arbocel助滤剂过滤并减压浓缩。将残余物溶解于环己烷并蒸发(两次)得到(2S，3R)-3-(｛[(1S)-2，2二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基)氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-2-乙氧基-6-(3-氟-4-苯氧基苯基)己酸甲酯(384 gm，91％)，为无色泡沫，将其不经纯化用于实施例12。
Rf 0.48(己烷∶乙酸乙酯=1∶1)
δH(400MHz，CDCl3)1.01(9H，s)，1.14(3H，t，J=7 Hz)，1.49(3H，d，J=7 Hz)，1.65(3H，m)，1.80(1H，m)，2.24(3H，s)，2.60(3H，m)，3.40(1H，dt，J=16和8 Hz)，3.62(1H，m)，3.70(3H，s)，4.01(1H，d，J=5 Hz)，4.15(1H，d，J=9 Hz)，5.13(1H，五重峰，J=7Hz)，6.41(1H，br d)，6.92(1H，d，J=9 Hz)，7.00(1H，d，J=7 Hz)，7.03(1H，s)，7.11(1H，d，J=7 Hz)，7.29(7H，复杂)，7.40(3H，m)。
LRMS(热喷雾)m/z=602(MH+)。
制备例19A。
(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]己酸叔丁基酯
Figure 9881293601211
a)在氮气氛、0℃下，将N-(二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺(2.298 g，12 mmol)加入到搅拌的(2R)-2-[2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基]戊-4-烯酸(2.13 g，10 mmol)、L-叔赖氨酸苄基酯(2.834g，11mmol)(N.Moss等，J.Med.Chem.，1996，39，2178)、N-甲基吗啉(2.40 mL，22mmol)和1-羟基苯并三唑水合物(1.836 g，12 mmol)在无水二氯甲烷(50mL)中的混合物中。在冷却浴中将此混合物缓慢升温至室温。20小时后，将此混合物倒入乙酸乙酯(250 mL)中并用5％枸橼酸水溶液(2×100mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(2×70 mL)、盐水(70 mL)洗涤，干燥(硫酸镁)，并减压浓缩。通过加入戊烷将此油状残余物结晶。将此固体过滤并干燥得到(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(苄氧基羰基)丙基]氨基｝羰基)己-5-烯酸叔丁基酯(4.068 g，97％)，为无色固体。
m.p.55-57℃
Rf 0.37(己烷∶乙酸乙酯=10∶1)
δH(300 MHz，CDCl3)0.95(9H，s)，1.42(9H，s)，2.15(1H，dt，16和6.5 Hz)，2.39(2H，m)，2.59(1H，d，J=10 Hz)，2.68(2H，m)，4.50(1H，d，J=10 Hz)，5.00(1H，d，J=10 Hz)，5.04(1H，d，J=17Hz)，5.13(1H，d，J=12 Hz)，5.19(1H，d，J=12 Hz)，5.71(1H，m)，6.35(1H，br d)，7.34(5H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=418(MH+)
b)通过制备例3a)的方法，将(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(苄氧基羰基)丙基]氨基｝羰基)己-5-烯酸叔丁基酯(2.085 g，5.0 mmol)与3-甲基-4-苯基溴代苯(1.855g，7.5 mmol)在钯催化下，用N-乙基吗啉作为碱在乙腈中回流16.5小时。如上所述后处理，接着通过重复快速层析(第一个柱用己烷∶乙醚=4∶1；第二个柱用甲苯∶乙醚=20∶1)纯化，主要得到(3R，5E)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(苄氧基羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]己-5-烯酸叔丁基酯，为淡黄色胶状物(2.205 gm，75％)。1HNMR表明还存在两个烯异构体，(5Z)和(4E)。将此烯的混合物用于下步反应(见下c)。
δH(400MHz，CDCl3)0.95(9H，s)，1.42(9H，s)，2.26(3H，s)，2.35(1H，m)，2.45(1H，dd，3和17 Hz)，2.54(1H，dt，J=15和6.5)，2.69(1H，dd，J=9和17 Hz)，2.77(1H，m)，4.52(1H，d，J=10Hz)，4.97(1H，d，J=12 Hz)，5.06(1H，d，J=12 Hz)，6.16(1H，dt，J=18和7 Hz)，6.42(2H，m)，7.29(13H，复杂)。
c)将(3R，5E)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(苄氧基羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]己-5-烯酸叔丁基酯(2.205 g，3.78 mmol)在乙醇/水=10∶1(44 mL)中的溶液在3巴在20℃下在10％钯碳(40 mg)上氢化6小时。将此混合物通过Arbocel助滤剂过滤，用乙醇充分洗涤。将此滤液减压浓缩。将残余物溶解于甲苯并蒸发(三次)，溶解于乙醚并蒸发(两次)，并最后溶解于乙醚并通过加入己烷沉淀为油状物。减压除去溶剂得到(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(羧基)丙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]己酸叔丁基酯(1.817 g，97％)，为无色泡沫，m.p.51-56℃。
Rf 0.38(己烷∶乙醚∶乙酸=50∶50∶1)
δH(400 MHz，DMSO-d6)0.94(9H，s)，1.37(9H，s和1H，m，重叠)，1.50(3H，m)，2.17(3H，s)，2.23(1H，m，)，2.39(1H，dd，J=10和15 Hz)，2.53(2H，m)，2.86(1H，m)，4.10(1H，d，J=10 Hz)，7.05(3H，m)，7.29(3H，m)，7.40(2H，t，J=8 Hz)，7.90(1H，br d)。
LRMS(热喷雾)m/z=513(MNH4 +)。
d)在氮气氛下，在0℃将7-氮杂苯并三唑-1-基氧基三(吡咯烷基)鏻六氟磷酸盐(522 mg，1.0 mmol)加入到搅拌的(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(羧基)丙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]己酸叔丁基酯(496 mg，1.0 mmol)、(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基胺(151 mg，1.0 mmol)(J.Amer.Chem.Soc.，1995，117，10885)和可力丁(267μL，2.0 mmol)的无水二氯甲烷(5 mL)溶液中。1小时后，将此溶液在20℃下搅拌2.75小时。将此混合物倒入乙酸乙酯(70 mL)中并用5％枸橼酸水溶液(2×50 mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(2×50 mL)和盐水(50 mL)依次洗涤。将有机溶液干燥(MgSO4)并减压浓缩。将残余物通过快速层析(用己烷∶乙酸乙酯=3∶1洗脱)纯化，得到(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]-己酸叔丁基酯(537 mg，85％)，为无色泡沫。
Rf 0.16(己烷∶乙酸乙酯=4∶1)
δH(400 MHz，CDCl3)1.02(9H，s)，1.40(9H，s和1H，m，重叠)，1.55(2H，m)，1.68(1H，m)，2.23(3H，s)，2.32(1H，m)，2.55(4H，m)，3.33(3H，s)，3.62(2H，d，J=5 Hz)，4.28(1H，d，J=9 Hz)，5.12(1H，dt，J=8和5 Hz)，6.35(1H，br d)，6.44(1H，br d)，6.96(1H，d，J=8 Hz)，7.00(1H，s)，7.10(1H，d，J=8 Hz)，7.26(8H，复杂)，7.39(2H，m)。
LRMS(热喷雾)m/z=630(MH+)
FTIRνmax(KBr片)3320，2930，1729，1643，1543，1370，1157和700cm-1
制备例19B。
(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]己酸叔丁基酯
Figure 9881293601241
a)合成3-甲基-4-苯基溴代苯的另一种方法如下：
将5-溴-2-碘-甲苯(5.01g，16.9 mmol)、苯基硼酸(2.26 g，18.5mmol)、醋酸钯(190 mg，0.85 mmol)、三苯基膦(440 mg，1.68 mmol)和2M碳酸钠水溶液(25 mL)在丙酮(60 mL)中的混合物脱气并在氮气氛下加热回流18小时。将此混合物冷却并在乙醚(200 mL)和水(100mL)之间分配。将此有机层用盐水(100mL)洗涤，干燥(硫酸镁)并减压浓缩得到黄色油状物。通过快速层析纯化(用己烷洗脱)，得到3-甲基-4-苯基溴代苯(3.298 g，79％)。
b)在氮气氛、机械搅拌及回流下，将3-甲基-4-苯基溴代苯(12.36g，50.0 mmol)的无水四氢呋喃(30 mL)溶液滴加到镁屑(1.33 g，50 mmol)的无水四氢呋喃(23 mL)悬浮液中，其中含有碘结晶。加毕，将此混合物用无水四氢呋喃(55 mL)稀释并继续加热1小时。让此芳基镁溴化物溶液冷却至室温，并在氮气氛下在-40℃下再通过注射器滴加戊二酸酐(6.27 g，55 mmol)的无水四氢呋喃(125 mL)溶液。在-40℃90分钟后，将此混合物升温至0℃，并加入氢氯酸(1M，250 mL)。将此混合物用乙醚(500mL)萃取，用盐水(200mL)洗涤，干燥(硫酸镁)并减压浓缩。将此残余物通过快速层析(用二氯甲烷∶甲醇=95∶5洗脱)纯化，得到5-(3-甲基-4-苯基)苯基-5-氧代戊酸，为淡棕色油状物(8.6 g，60％)，随后其结晶。m.p.91-94℃。
Rf 0.26(二氯甲烷∶甲醇=95∶5)
δH(400MHz，CDCl3)2.11(2H，五重峰，J=7 Hz)，2.33(3H，s)，2.50(2H，t，J=7 Hz)，3.11(2H，t，J=7 Hz)，7.31(3H，m)，7.42(3H，m)，7.84(1H，d，J=8 Hz)，7.90(1H，s)。
LRMS(热喷雾)m/z=283(MH+)。
实测值：            C，76.49；H，6.48；
C18H18O3理论值C，76.57；H，6.43％
c)在氮气氛、0℃下，2分钟内将三乙基甲硅烷(1.4 mL，8.75 mmol)滴加到搅拌的5-(3-甲基-4-苯基)苯基-5-氧代戊酸(1.0 g，3.5 mmol)的三氟乙酸(5 mL)溶液中。将此混合物再升温至室温并搅拌2小时。将此混合物倒入水(20 mL)中并用二氯甲烷(3×15mL)萃取。将合并的有机溶液用盐水洗涤，干燥(硫酸镁)并减压浓缩。将此混合物通过快速层析纯化(用二氯甲烷∶甲醇95∶5洗脱)，得到[5-(3-甲基-4-苯基)苯基]戊酸和三乙基甲硅醇3∶1的混合物(1.1 g)。将此物质溶解于己烷(5 mL)并加入碳酸氢钠(290 mg，3.5 mmol)。将此混合物室温下搅拌过夜，并再减压浓缩。将固体残余物用乙酸乙酯研磨并过滤得到[5-(3-甲基-4-苯基)苯基]戊酸钠(820 mg，80％)。用氢氯酸处理此物质并进行溶剂萃取得到游离的酸，为粘稠的无色胶状物。
δH(400 MHz，CDCl3)1.74(4H，m)，2.27(3H，s)，2.43(2H，m)，2.65(2H，m)，7.06(1H，d，J=8 Hz)，7.11(1H，s)，7.16(1H，d，J=8 Hz)，7.33(3H，m)，7.42(2H，m)。
LRMS(热喷雾)m/z=286(MNH4 +)
实测值：            C，80.40；H，7.59；
C18H20O2，理论值C，80.56；H，7.51％
d)在氮气氛、-10℃下，将草酰氯(3.1 mL，35.5 mmol)滴加至搅拌的[5(3-甲基-4-苯基)苯基]戊酸(6.80 g，25.3 mmol)的无水二氯甲烷(60 mL)溶液中。加入二甲基甲酰胺(2滴)，10分钟后让此混合物升温至室温。5小时后，将此溶液减压浓缩，并将此残余物溶解于无水甲苯并减压浓缩(两次)。将此残余物溶解于己烷(150 mL)，放置17小时，再通过Arbocel助滤剂过滤，再用己烷洗涤此滤饼。将此滤液减压浓缩得到5-[(3-甲基-4-苯基)苯基]戊酰氯(7.1 g，97％)。
δH(400 MHz，CDCl3)1.77(4H，m)，2.26(3H，s)，2.63(2H，t，J=6.5 Hz)，2.95(2H，t，J=6.5 Hz)，7.06(1H，d，J=8 Hz)，7.10(1H，s)，7.36(5H，m)。
在氮气氛、-70℃下，15分钟内将正丁基锂溶液(9.92 mL，2.5M在己烷中，24.8 mmol)滴加到4-(S)-苄基噁唑烷-2-酮(4.39 g，24.8mmol)的无水四氢呋喃(70 mL)溶液中。将此混合物升温至-50℃，保持30分钟，再冷却至-70℃。15分钟内滴加[5-(3-甲基-4-苯基)苯基]戊酰氯(7.1 g，24.8 mmol)的无水四氢呋喃(10 mL)溶液。1小时后，将此混合物升温至0℃，同时快速加入20％氯化铵水溶液(75mL)。搅拌15分钟后，将此混合物用乙酸乙酯(250 mL)萃取，并用水(3×250 mL)洗涤有机相，干燥(硫酸镁)，并减压浓缩。将残余物通过快速层析(戊烷∶乙酸乙酯=20∶1至2∶1梯度洗脱)纯化，得到4-(S)苄基-3-([5-(3-甲基-4-苯基)苯基]戊酰基)噁唑烷-2-酮(9.66 g，91％)，为无色油状物。
Rf 0.4(戊烷∶乙酸乙酯=3∶1)
δH(300 MHz，CDCl3)1.79(4H，m)，2.28(3H，s)，2.70(2H，m)，2.79(1H，dd，J=10和13 Hz)，3.01(2H，m)，3.32(1H，dd，J=3和13 Hz)，4.19(2H，m)，4.70(1H，m)，7.06-7.43(13H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=445(MNH4 +)。
FTIR(KBr片)2930，1784，1700，1387，1350，1211，702 cm-1。
实测值：                       C，75.43；H，6.65；N，3.08
C28H29NO3·0.3CH2Cl2理论值 C，75.03；H，6.59；N，3.09％
e)在-75℃下，30分钟内将六甲基乙硅烷基叠氮化钠的溶液(31.3mL，1M在四氢呋喃中，31.3 mmol)滴加到搅拌的4-(S)-苄基-3-([5-(3-甲基-4-苯基)苯基)戊酰基)噁唑烷-2-酮(13.39 g，31.3 mmol)的无水四氢呋喃(100mL)溶液中。1小时后，在20分钟内滴加溴乙酸叔丁酯(4.95 mL，33.5 mmol)的无水四氢呋喃(10 mL)溶液，将温度保持在-70℃以下。将此混合物在此温度下搅拌2小时，再升温至-50℃，此时快速搅拌下加入20％氯化铵水溶液(150 mL)。将此混合物升温至10℃，并再倒入乙酸乙酯(400mL)和水(200mL)的混合物中。将此有机相分离，用水(3×250 mL)洗涤，干燥(硫酸镁)并减压浓缩。将残余物通过快速层析(用戊烷∶乙醚=20∶1至1∶1梯度洗脱)纯化，得到(3R)-3-[(4-(S)-4-苄基-2-氧代-1，3-噁唑烷-3-基)羰基]-6-(3-甲基-4-苯基)苯基)己酸叔丁基酯，为无色油状物(10.4 g，61％)。
Rf 0.6(戊烷∶乙醚=1∶1)
δH(300 MHz，CDCl3)1.45(9H，s)，1.58(1H，m)，1.74(3H，m)，2.27(3H，s)，2.51(1H，dd，J=5和18 Hz)，2.65(2H，m)，2.80(2H，m)，3.38(1H，dd，J=3和15 Hz)，4.16(2H，d，J=5 Hz)，4.25(1H，m)，4.68(1H，m)，7.04(1H，d，J=8 Hz)，7.08(1H，s)，7.14(1H，d，J=8 Hz)，7.35(10H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=542(MH+)，560(MNH4 +)。
实测值：C，74.55；H，7.40；N，2.44
C34H39NO5·0.1乙醚·0.2EtOAc理论值
        C，74.60；H，7.40；N，2.47％
FTIRνmax(KBr片)2980，2930，1780，1725，1700，1388，1350，1157，768，702 cm-1。
f)在0℃，将30％过氧化氢水溶液(12.75 mL，114 mmol)滴加至(3R)-3-[(4-(S)-4-苄基-2-氧代-1，3-噁唑烷-3-基)羰基]-6-(3-甲基-4-苯基)苯基)己酸叔丁基酯(10.3 g，19.0 mmol)的四氢呋喃∶水(3∶1，400 mL)溶液中。再一次加入氢氧化锂一水合物(1.595 g，38.0 mmol)。将此混合物在0℃下搅拌2小时，并在20℃下搅拌1小时。将此反应混合物再冷却至0℃，并在15分钟内滴加亚硫酸钠(15.56 g，123.5mmol)的水(80 mL)溶液。将此混合物在0℃下快速搅拌2.5小时，再加入2M盐酸(约8 mL)将pH调节至6。将此混合物减压浓缩至一半体积，通过加入2M氢氯酸将pH调节至2并用二氯甲烷(400mL和2×200mL)萃取。将合并的萃取物干燥(硫酸镁)，减压浓缩并将残余物通过快速层析纯化(用戊烷∶乙醚=15∶1至1∶4梯度洗脱)，得到(3R)-3-(羧基)-6-(3-甲基-4-苯基)苯基)己酸叔丁基酯(7.05 g，97％)，为无色油状物。
Rf 0.5(戊烷∶乙醚∶乙酸=30∶70∶1)
δH(300 MHz，CDCl3)1.45(9H，s)，1.63(1H，m)，1.77(4H，m)，2.26(3H，m)，2.42(dd，J=5和17 Hz)，2.65(3H，m)，2.87(1H，m)，7.06(2H，m)，7.15(1H，d，J=8 Hz)，7.34(5H，m)。
LRMS(热喷雾)m/z=400(MNH4 +)。
[α]D=+12.9°(c=0.716，甲醇，25℃)
FTIRνmax(膜)2980，2930，1730，1705，1485，1368，1157，764，702cm-1。
实测值：        C，74.96；H，8.06；
C24H30O4·0.1H2O理论值C，75.01；H，7.92％
g)在氮气氛、4℃下，将N-(二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐(3.50 g，18.26 mmol)加入到搅拌的(2S)-氨基-3，3-二甲基-N-[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]丁酰胺盐酸盐(制备例1a)(6.78 g，17.43 mmol-含1摩尔当量的二噁烷)、(3R)-3-(羧基)-6-(3-甲基-4-苯基)苯基)己酸叔丁基酯(6.35 g，16.6mmol)、1-羟基-1，2，3-苯并三唑水合物(2.80 g，20.75 mmol)和二异丙基乙胺(5.9 mL，34.03mmol)在无水二氯甲烷(82 mL)中的混合物中。2小时后，将此混合物升温至室温。室温下17小时后，将此混合物倒入乙酸乙酯(600mL)中并用5％枸橼酸水溶液(2×250 mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(2×250 mL)、盐水(200 mL)依次洗涤，干燥(硫酸镁)，并减压浓缩。将残余物再溶解于乙醚并蒸发，得到(3R)-3-(｛[(1S)-2，2二甲基-1-(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]-己酸叔丁基酯(10.35 g，99％)，为无色泡沫。
实测值：                        C，73.99；H，8.31；N，4.51
C39H52N2O5·0.04EtOAc理论值 C，74.38；H，8.34；N，4.43％
制备例20。
4-碘-1-(3-甲氧基苯基)-2-甲基苯
Figure 9881293601291
a)在氮气氛下，室温下将2-溴-5-硝基甲苯(40.0 gm，185 mmol)的1，2-二甲氧基乙烷(600mL)溶液加入到四(三苯基膦)钯(0)(9.77 gm，9.25 mmol)中。加入3-甲氧基苯基硼酸(31.5 gm，207 mmol)的乙醇(150mL)溶液。最后，加入2M碳酸钠水溶液(800mL)并将此混合物在快速机械搅拌下加热回流18小时。冷却后，将此混合物在乙酸乙酯和水之间分配，并将有机相干燥干燥(硫酸钠)并减压浓缩。通过柱层析在硅胶上用己烷∶乙酸乙酯=98∶2再用95∶5洗脱进行纯化，得到1-(3-甲氧基苯基)-2-甲基-4-硝基苯(40.55 gm，90％)。
Rf 0.22(己烷∶乙酸乙酯=95∶5)
δH(400 MHz，CDCl3)2.38(3H，s)，3.85(3H，s)，6.83(1H，s)，6.88(1H，d，J=8 Hz)，6.96(1H，d，J=8 Hz)，7.38(2H，m)，8.02(1H，d，J=8 Hz)，8.14(1H，s)。
LRMS(热喷雾)m/z=261(MNH4 +)
b)将1-(3-甲氧基苯基)-2-甲基-4-硝基苯(23.4 gm，96 mmol)溶解于乙醇和乙酸乙酯(3∶1，470 mL)的混合物中并在3巴在20℃下在10％钯碳(2.3gm)上氢化2小时。将此混合物通过Arbocel助滤剂过滤，用乙酸乙酯洗涤。将此滤液减压浓缩得到4-氨基-1-(3-甲氧基苯基)-2-甲基苯(20.8gm，100％)，为粉红-棕色油状物。
Rf 0.06(己烷∶乙酸乙酯=90∶10)
δH(400 MHz CDCl3)2.22(3H，s)，3.65(2H，br s)，3.84(3H，s)，6.59(2H，m)，6.87(3H，m)，7.04(1H，d，J=8 Hz)，7.28(1H，m)。
c)搅拌下将4-氨基-1-(3-甲氧基苯基)-2-甲基苯(5.0 gm，23.4mmol)和碘(2.97 gm，25.8 mmol)的甲苯(120 mL)溶液加热至50℃，并加入亚硝酸异戊酯(3.46 mL，25.8 mmol)的甲苯(50 mL)溶液。将此混合物在90℃加热2小时并冷却。减压除去甲苯并将残余物溶解于二氯甲烷并用过量的5％偏亚硫酸氢钠水溶液洗涤除去碘。将此有机溶液干燥(硫酸钠)并减压浓缩。将残余物通过重复快速层析(第一个柱梯度洗脱，洗脱剂为己烷∶乙酸乙酯，以纯己烷开始；第二个柱用己烷洗脱)得到4-碘-1-(3-甲氧基苯基)-2-甲基苯，为淡桔黄色油状物(5.63 gm，74％)。
Rf 0.49(己烷∶乙酸乙酯=90∶10)
δH(400 MHz，CDCl3)2.23(3H，s)，3.84(3H，s)，6.81(1H，s)，6.86(1H，d，J=8 Hz)，6.90(1H，d，J=8 Hz)，6.95(1H，d，J=8 Hz)，7.32(1H，t，J=8 Hz)，7.55(1H，d，J=8 Hz)，7.47(1H，s)。
制备例21。
(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-(3’-甲氧基-2-甲基联苯-4-基)己酸叔丁基酯
Figure 9881293601311
a)通过制备例3a)的方法，(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(苄氧基羰基)丙基]氨基｝羰基)己-5-烯酸叔丁酯(2.085 g，5.0 mmol)与4-碘-1-(3-甲氧基苯基)-2-甲基苯(制备例20)(889 mg，2.13 mmol)在钯催化下反应，用N-乙基吗啉作为碱在乙腈中回流14.5小时。如上所述后处理，接着通过快速层析纯化(己烷∶乙酸乙酯10∶1)主要得到(3R，5E)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(苄氧基羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-(3’-甲氧基-2-甲基联苯-4-基)己-5-烯酸叔丁基酯，为淡黄色胶状物(1.043 gm，80％)。1HNMR表明还存在两个烯异构体，(5Z)和(4E)。将此烯的混合物用于下步反应(见下b)。
δH(400 MHz，CDCl3)0.95(9H，s)，1.43(9H，s)，2.26(3H，s)，2.36(1H，m)，2.45(1H，dd，3和17 Hz)，2.55(1H，dt，J=14和7)，2.68(1H，dd，J=9和17 Hz)，2.77(1H，m)，3.80(3H，s)，4.50(1H，d，J=10 Hz)，4.97(1H，d，J=12 Hz)，5.07(1H，d，J=12 Hz)，6.16(1H，dt，J=18和7 Hz)，6.40(2H，m)，6.85(3H，m)，7.30(9H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=614(MH+)
b)按照制备例19c)的方法，将(3R，5E)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(苄氧基羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-(3’-甲氧基-2-甲基联苯-4-基]己-5-烯酸叔丁基酯(1.040 g，1.69 mmol)在10％钯碳上氢化，得到(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(羧基)丙基]氨基｝羰基)-6-(3’-甲氧基-2-甲基联苯-4-基)己酸叔丁基酯(664 g，75％)，为无色泡沫。
Rf 0.33(己烷∶乙醚∶乙酸=50∶50∶1)
δH(400 MHz，CDCl3)1.02(9H，s)，1.42(9H，s)，1.47(1H，m)，1.66(2H，m)，1.77(1H，m)，2.25(3H，s)，2.37(1H，m，)，2.63(3H，m)，3.83(3H，s)，4.48(1H，d，J=10 Hz)，6.43(1H，br d)，6.87(3H，m)，7.03(2H，m)，7.13(1H，d，J=8 Hz)，7.28(1H，m)。
LRMS(热喷雾)m/z=526(MH+)
c)按照制备例19d)的方法，将(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(羧基)丙基]氨基｝羰基)-6-(3’-甲氧基-2-甲基联苯-4-基)己酸叔丁基酯(660 mg，1.26mmol)与(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基胺(190 mg，1.260mmol)反应。如上后处理，接着通过快速层析(用己烷∶乙酸乙酯3∶1洗脱)纯化，得到(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-(3’-甲氧基-2-甲基联苯-4-基)己酸叔丁基酯(672 mg，81％)，为无色泡沫。
Rf 0.16(己烷∶乙酸乙酯=4∶1)
δH(400 MHz，CDCl3)1.02(9H，s)，1.40(9H，s和1H，m，重叠)，1.55(2H，m)，1.68(1H，m)，2.23(3H，s)，2.33(1H，m)，2.56(4H，m)，3.33(3H，s)，3.63(2H，m)，3.82(3H，s)，4.29(1H，d，J=9 Hz)，5.13(1H，dt，J=8和5 Hz)，6.35(1H，br d)，6.45(1H，br d)，6.86(3H，m)，6.96(1H，d，J=8 Hz)，7.00(1H，s)，7.10(1H，d，J=8 Hz)，7.26(6H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=659(MH+)
实测值：                     C，72.15；H，8.21；N，4.17；
C40H54N2O6·1/2H2O理论值C，71.93；H，8.30；N，4.19％
制备例22。
(2R)-5-｛[4-(4-氰基苯基)-3-甲基]苯基]-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]戊酰胺。
Figure 9881293601331
    
Figure 9881293601341
a)按照制备例15a)的方法，(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]戊-4-烯酰胺(制备例14)(430 mg，1.0 mmol)与1-(4-氰基苯基)-4-碘-2-甲基苯(制备例23)(479 mg，1.5 mmol)在钯催化下在乙腈中回流16小时。冷却后，将此混合物在乙酸乙酯(3×30mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(30 mL)之间分配。将合并的有机溶液干燥(硫酸钠)并减压浓缩。将残余物通过快速层析(用二氯甲烷∶甲醇=97.5∶2.5洗脱)纯化，主要得到(2R，4E)-5-｛[4-(4-氰基苯基)-3-甲基]苯基｝-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]戊-4-烯酰胺，为浅黄褐色泡沫(403mg，65％)。1HNMR表明还存在两个烯异构体。将此烯的混合物用于下步反应(见下b)。
Rf 0.41(二氯甲烷∶甲醇=95∶5)
δH(400MHz，CDCl3)((4E)异构体)：1.00(9H，s)，1.46(3H，d，J=7.5 Hz)，1.54(3H，s)，1.59(3H，s)，2.20(3H，s)，2.70(1H，m)，2.81(2H，m)，4.20(1H，d，J=9 Hz)，4.60(1H，d，J=4.5 Hz)，5.04(1H，五重峰，J=7.5 Hz)，5.82(1H，d，J=7.5 Hz)，6.62(1H，dt，16和7 Hz)，6.50(1H，d，J=16 Hz)，6.58(1H，d，J=9 Hz)，7.10(1H，d，J=8 Hz)，7.15-7.30(7H，m)，7.38(2H，d，J=8 Hz)，7.70(2H，d，J=8 Hz)。
LRMS(热喷雾)m/z=564(MH+-丙酮)，547。
b)将(2R，4E)-S-｛[4-(4-氰基苯基)-3-甲基]苯基｝-2-[(4S)-2，2二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]戊-4-烯酰胺(403mg，0.65mmol)的乙醇(70 mL)溶液在10％钯碳(40 mg)上以3巴压力在20℃氢化5.5小时。将此混合物通过Arbocel助滤剂过滤并减压浓缩得到(2R)-5-｛[4-(4-氰基苯基)-3-甲基]苯基｝-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]戊酰胺(384 mg，61％)，为无色固体，将其不经纯化用于实施例17。
δH(400 MHz，CDCl3)1.00(9H，s)，1.48(3H，d，J=7 Hz)，1.50(3H，s)，1.55(3H，s)，1.62(2H，m)，1.68(2H，m)，2.20(3H，s)，2.60(3H，m)，4.18(1H，d，J=9.5 Hz)，4.45(1H，d，J=6 Hz)，5.08(1H，五重峰，J=7 Hz)，5.86(1H，d，J=7 Hz)，6.50(1H，d，J=9.5Hz)，7.00-7.10(3H，m)，7.15-7.30(5H，m)，7.40(2H，d，J=7.5 Hz)，7.70(2H，d，J=7.5 Hz)。
LRMS(热喷雾)m/z=624(MH+)，641(MNH4 +)。
制备例23。
1-(4-氰基苯基)-4-碘-2-甲基苯。
Figure 9881293601351
a)将2-溴-5-硝基甲苯(7.05 gm，32.67 mmol)、4-氰基苯基硼酸(Tet.Lett.，1993，34，8237)(6.0gm，40.83mmol)、氟化铯(11.02gm，72.53 mmol)和三-(2-甲基苯基)膦(1.0 gm，3.27 mmol)在1，2-二甲氧基乙烷(240 mL)中的混合物在氮气氛下室温搅拌40分钟。加入三(二亚苄基丙酮)二钯(1.50 gm，1.63 mmol)并在室温下搅拌10分钟，再在80℃下加热4小时。冷却后，将此混合物在乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠水溶液之间分配。将有机相分离，用水洗涤，再干燥(硫酸钠)并减压浓缩得到粗品1-(4-氰基苯基)-2-甲基-4-硝基苯(9．78 gm)，将其不经纯化直接用于下步反应。
Rf 0.89(二氯甲烷)
δH(300 MHz，CDCl3)2.35(3H，s)，7.35(1H，d，J=8 Hz)，7.45(2H，d，J=8 Hz)，7.68(2H，d，J=8 Hz)，8.10(1H，d，J=8 Hz)，8.18(1H，s)。
b)将1-(4-氰基苯基)-2-甲基-4-硝基苯(9.7 gm，40.76 mmol)溶解于甲醇和二氯甲烷(1∶1，400 mL)的混合物中，并在3巴在20℃下在10％钯碳(970 mg)上氢化18小时。将此混合物通过Arbocel助滤剂过滤并减压浓缩。将残余物通过快速层析(用己烷∶乙酸乙酯20∶1至1∶1梯度洗脱)纯化，得到4-氨基-1-(4-氰基苯基)-2-甲基苯(2.5 gm，30％)，为棕色油状物。
Rf 0.20(己烷∶乙酸乙酯=3∶1)
δH(400 MHz，CDCl3)2.20(3H，s)，3.75(2H，br s)，6.60(2H，m)，7.00(1H，d，J=8 Hz)，7.40(2H，d，J=8 Hz)，7.66(2H，d，J=8Hz)。
LRMS(热喷雾)m/z=226(MNH4 +)
c)将4-氨基-1-(4-氰基苯基)-2-甲基苯(250 mg，1.2 mmol)在浓盐酸(1.3 mL)和水(1.6 mL)中的悬浮液，在0℃用亚硝酸钠(183 mg，2.65 mmol)的水溶液(1mL)处理10分钟。将此混合物搅拌20分钟并再在10分钟内加入碘化钾(840 mg，5.06 mmol)的水(2 mL)溶液。将所得混合物在90℃加热2小时，再冷却。将残余物用二氯甲烷(3×30mL)萃取并将合并的有机萃取物用5％偏亚硫酸氢钠水溶液(4×30 mL)洗涤以除去碘。将此有机溶液干燥(硫酸钠)并减压浓缩。将此残余物通过快速层析(用己烷∶乙酸乙酯20∶1至10∶1洗脱)纯化，得到1-(4-氰基苯基)-4-碘-2-甲基苯，为白色固体(263 mg，69％)。
Rf 0.62(己烷∶乙酸乙酯=4∶1)
δH(300 MHz，CDCl3)2.20(3H，s)，6.92(1H，d J=8 Hz)，7.40(2H，d，J=8 Hz)，7.60(1H，d，J=8 Hz)，7.68(1H，s)，7.74(2H，d，J=8 Hz)。
LRMS(热喷雾)m/z=319(MH+)。
制备例24。
(2R)-5-｛[4-(3-氰基苯基)-3-甲基]苯基｝-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]戊酰胺。
a)在氮气氛下，将醋酸钯(12.2 mg，0.050 mmol)加入到搅拌的(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]戊-4-烯酰胺(制备例14)(430 mg，1.0 mmol)、1-(3-氰基苯基)-4-碘-2-甲基苯(制备例25)(457mg，1.50 mmol)、三-(2-甲基苯基)膦(30 mg，0.10mmol)和N-乙基吗啉(190μL，1.5 mmol)的无水乙腈(3 mL)溶液中。将此混合物用氮气吹洗，再加热回流14小时。冷却后，将此混合物溶解于乙酸乙酯(100 mL)，用水(100mL)、0.5M磷酸二氢钠水溶液(50 mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(50 mL)洗涤。将此有机溶液干燥(硫酸钠)并减压浓缩。将残余物通过快速层析(用己烷∶乙酸乙酯=3∶1至1∶1梯度洗脱)纯化，主要得到(2R，4E)-5-｛[4-(3-氰基苯基)-3-甲基]苯基｝-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基)氨基｝羰基)丙基]戊-4-烯酰胺，为浅黄褐色泡沫(385 mg，62％)。1HNMR表明还烯烃异构体。将此烯的混合物用于下步反应(见下b)。
Rf 0.27(二氯甲烷∶乙酸乙酯=10∶1)
δH(400MHz，CDCl3)((4E)异构体)：1.01(9H，s)，1.50(3H，d，J=7 Hz)，1.55(3H，s)，1.60(3H，s)，2.20(3H，s)，2.70(1H，m)，2.82(2H，m)，4.18(1H，d，J=8.5 Hz)，4.58(1H，d，J=5 Hz)，5.04(1H，五重峰，J=7 Hz)，5.84(1H，d，J=7 Hz)，6.16(1H，dt，16和7 Hz)，6.50(1H，d，J=16 Hz)，6.58(1H，d，J=8.5 Hz)，7.05(1H，d，J=8 Hz)，7.10-7.40(8H，复杂)，7.54(2H，m)，7.62(1H，m)。
LRMS(热喷雾)m/z=639(MNH4 +)。
实测值：                  C，72.88；H，7.05；N，6.63；
C38H43N3O5·0.25H2O理论值 C，72.88；H，7.00；N，6.71％
b)将(2R，4E)-5-｛[4-(3-氰基苯基)-3-甲基]苯基)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]戊-4-烯酰胺(359 mg，0.58mmol)的乙醇(35 mL)溶液在3巴20℃下在10％钯碳(35 mg)上氢化6小时。将此混合物通过Arbocel助滤剂过滤，减压浓缩并与乙酸乙酯、再与乙醚共沸。将油状残余物通过快速层析(用己烷∶乙酸乙酯5∶1至1∶1梯度洗脱)纯化，再用戊烷研磨并结晶得到(2R)-5-｛[4-(3-氰基苯基)-3-甲基]苯基｝]-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]戊酰胺(139 mg，38％)，为白色固体，将其用于实施例19。
Rf 0.40(己烷∶乙酸乙酯=1∶1)
δH(400MHz，CDCl3)1.02(9H，s)，1.52(3H，d，J=7 Hz)，1.55(3H，s)，1.58(3H，s)，1.64(2H，m)，1.90(2H，m)，2.20(3H，s)，2.60(3H，m)，4.20(1H，d，J=9.5 Hz)，4.46(1H，d，J=7.5Hz)，5.08(1H，五重峰，J=7 Hz)，5.86(1Hd，J=7 Hz)，6.50(1H，d，J=9.5Hz)，6.98-7.08(3H，m)，7.20(5H，m)，7.50(2H，m)，7.55(1H，s)，7.60(1H，m)。
LRMS(热喷雾)m/z=641(MNH4 +)。
实测值：        C，72.99；H，7.36；N，6.75；
C38H45N3O5理论值C，73.17；H，7.27；N，6.74％
制备例25。
1-(3-氰基苯基)-4-碘-2-甲基苯。
Figure 9881293601391
a)在氮气氛下，室温将2-溴-5-硝基甲苯(8.82 gm，40.83 mmol)的1，2-二甲氧基乙烷(150 mL)溶液加入到四(三苯基膦)钯(0)(2.35 gm，2.04 mmol)的1，2-二甲氧基乙烷(100mL)溶液中。加入3-氰基苯基硼酸(J.Med.Chem.，1997，40，4208)(9.0 gm，61.25 mmol)的乙醇(45 mL)溶液并搅拌10分钟。最后，加入2M碳酸钠水溶液(234 mL)并将混合物加热回流18小时。冷却后，将此混合物在乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠水溶液之间分配。将此有机相用水洗涤，干燥(硫酸钠)，减压浓缩并用乙醚研磨得到1-(3-氰基苯基)-2-甲基-4-硝基苯(8.48 gm，87％)，为棕色固体。
Rf 0.74(己烷∶乙酸乙酯1∶1)
δH(300 MHz，CDCl3)2.35(3H，s)，7.38(1H，d，J=8 Hz)，7.52-7.68，(3H，m)，7.75(1H，d，J=8 Hz)，8.15(1H，d，J=8 Hz)，8.20(1H，s)。
LRMS(热喷雾)m/z=239(MH+)。
b)1-(3-氰基苯基)-2-甲基-4-硝基苯(3.0 gm，12.61 mmol)和氯化锡(Ⅱ)二水合物悬浮于乙醇(30 mL)中并加热至70℃，保持30分钟。冷却后，将此混合物倒入冰中，并通过加入碳酸氢钠中和。将此混合物再用二氯甲烷(3×50 mL)萃取。将合并的有机层干燥(硫酸钠)并减压浓缩得到4-氨基-1-(3-氰基苯基)-2-甲基苯(1.8 gm，69％)，为黄色油状物。
Rf 0.36(己烷∶乙酸乙酯=2∶1)
δH(300 MHz，CDCl3)2.20(3H，s)，3.75(2H，br s)，6.60(2H，m)，7.00(1H，d，J=8 Hz)，7.42-7.60(4H，m)。
c)将4-氨基-1-(3-氰基苯基)-2-甲基苯(2.5 gm，12.0 mmol)在浓盐酸(13 mL)和水(16 mL)中的悬浮液在0℃用亚硝酸钠(1.83 gm，26.5mmol)的水(10 mL)溶液处理10分钟。将此混合物搅拌20分钟并再在10分钟内加入碘化钾(8.40 gm，50.6 mmol)的水(20 mL)溶液。将所得混合物在80℃加热2小时再冷却。将此残余物用二氯甲烷萃取并将合并的有机萃取物用过量的5％偏亚硫酸氢钠水溶液洗涤以除去碘。将此有机溶液干燥(硫酸钠)并减压浓缩。将残余物通过快速层析纯化(用己烷∶乙酸乙酯20∶1至10∶1梯度洗脱)，得到1-(3-氰基苯基)-4-碘-2-甲基苯，为白色固体(1.105 gm，29％)。
Rf 0.67(己烷∶乙酸乙酯=4∶1)
δH(300 MHz，CDCl3)2.20(3H，s)，6.90(1H，d，J=8 Hz)，7.45-7.75(6H，复杂)。
LRMS(APCI)m/z=319(MH+)。
制备例26。
(2R)-5-｛[4-(3-氨基甲酰基苯基)-3-甲基]苯基｝-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]戊酰胺。
a)在氮气氛下，将醋酸钯(10.4 mg，0.042 mmol)加入到搅拌的(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]戊-4-烯酰胺(制备例14)(366 mg，0.85 mmol)、1-(3-氨基甲酰基苯基)-4-碘-2-甲基苯(制备例27)(300mg，0.89 mmol)、三-(2-甲基苯基)膦(27 mg，0.09mmol)和N-乙基吗啉(115μL，0.89 mmol)的无水乙腈(3mL)溶液中。将此混合物用氮气吹洗，再加热回流3小时。加入醋酸钯(10.4 mg，0.042 mmol)并回流60分钟。以60分钟的间隔再分批加入醋酸钯(10.4 mg，0.042 mmol)，接着回流至反应回流8小时。将此反应冷却，用乙腈(10 mL)稀释并通过Arbocel助滤剂过滤，用乙酸乙酯(100mL)洗涤。将此滤液用5％碳酸氢钠水溶液(50 mL)洗涤，干燥(硫酸钠)并减压浓缩。将残余物通过快速层析纯化(用二氯甲烷∶乙酸乙酯10∶1至1∶1梯度洗脱)，得到(2R，4E)-5-｛[4-(3-氨基甲酰基苯基)-3-甲基]苯基)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基)戊-4-烯酰胺，为黄色泡沫(175 mg，32％)。
Rf 0.20(二氯甲烷∶乙酸乙酯=1∶1)
δH(400 MHz，CDCl3)1.02(9H，s)，1.50(3H，d，J=7 Hz)，1.54(3H，s)，1.60(3H，s)，2.20(3H，s)，2.70(1H，m)，2.78(1H，m)，2.88(1H，m)，4.22(1H，d，J=8.5 Hz)，4.60(1H，d，J=5.5 Hz)，5.04(1H，五重峰，J=7 Hz)，5.94(2H，br s)，6.00(1H，d，J=7 Hz)，6.12(1H，dt，J=16和7 Hz)，6.48(1H，d，J=16 Hz)，6.82(1H，d，J=8.5 Hz)，7.08(1H，d，J=7.5 Hz)，7.14(1H，m)，7.18-7.36(5H，复杂)，7.40-7.52(3H，m)，7.60(1H，s)，7.80(1H，d，J=7.5 Hz)。
LRMS(热喷雾)m/z=657(MNH4 +)。
实测值：                       C，70.59；H，7.16；N，6.42；
C38H45N3O6·0.2EtOAc理论值 C，70.89；H，7.14；N，6.39％
b)将(2R，4E)-5-｛[4-(3-氨基甲酰基苯基)-3-甲基]苯基]-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]戊-4-烯酰胺(160 mg，0.25 mmol)的乙醇(50 mL)溶液在3巴20℃下在10％钯碳(25 mg)上氢化8小时。将此混合物通过Arbocel助滤剂过滤，减压浓缩并与乙酸乙酯、再与乙醚共沸。将残余物通过快速层析纯化(用己烷∶乙酸乙酯5∶1至1∶3梯度洗脱)，再与乙醚共沸得到(2R)-5-｛[4-(3-氨基甲酰基苯基)-3-甲基]苯基)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-[(1S)-2，2-二甲基-1-(｛[(1R)-1-苯基乙基]氨基｝羰基)丙基]戊酰胺(82 mg，51％)，为白色固体，将其用于实施例20。
Rf 0.17(己烷∶乙酸乙酯=1∶3)
δH(400 MHz，DMSO)0.92(9H，s)，1.30(3H，d，J=7 Hz)，1.40-1.60(9H，复杂)，1.78(1H，m)，2.15(3H，s)，2.40-2.60(2H，m)，2.98(1H，m)，4.38(1H，d，J=9 Hz)，4.46(1H，d，J=9 Hz)，4.92(1H，五重峰，J=7 Hz)，6.98(1H，d，J=7.5 Hz)，7.02(2H，m)，7.12(3H，m)，7.20(2H，m)，7.30(1H，br s)，7.40(1H，d，J=7.5Hz)，7.50(1H，t，J=7.5 Hz)，7.80(3H，m)，8.00(1H，br s)，8.40(1H，d，J=7 Hz)。
LRMS(热喷雾)m/z=664(MNa+)。
实测值：                        C，70.26；H，7.59；N，6.36；
C38H47N3O6·0.25EtOAc理论值 C，70.56；H，7.44；N，6.33％
制备例27。
1-(3-氨基甲酰基苯基)-4-碘-2-甲基苯。
Figure 9881293601431
将氢氧化钾(1.21 gm，21.6 mmol)加入到1-(3-氰基苯基)-4-碘-2-甲基苯(1.27 gm，4.0 mmol)的乙醇(50 mL)溶液中并加热回流16小时。冷却后，将此混合物用水(100mL)稀释并用乙酸乙酯(3×50 mL)萃取。将合并的有机萃取物干燥(硫酸钠)并减压浓缩得到粗品(1.08gm)。将此粗品(540 mg)通过快速层析纯化(用二氯甲烷∶饱和氨甲醇溶液100∶2.5至二氯甲烷∶乙酸乙酯1∶1至二氯甲烷∶乙酸乙酯∶乙酸100∶100∶4梯度洗脱)，再与乙醇、乙酸乙酯和乙醚共沸得到1-(3-氨基甲酰基苯基)-4-碘-2-甲基苯(310mg，46％)，为浅黄褐色固体。
m.p.138-141℃
Rf 0.40(二氯甲烷∶乙酸乙酯∶乙酸=50∶50∶2.5)
δH(400MHz DMSO)2.18(3H，s)，7.00(1H，d，J=8 Hz)，7.38(1H，br s)，7.48(2H，m)，7.62(1H，d，J=8 Hz)，7.72(1H，s)，7.80(1H，s)，7.86(1H，d，J=8 Hz)，8.00(1H，br s)。
LRMS(热喷雾)m/z=355(MNH4 +)。
制备例28。
(3R)-3-[(｛(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)-[(1S)-2-甲基]-1-丙基｝氨基)羰基]-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]己酸叔丁基酯
a)按照制备例19a)的方法，N-叔丁氧羰基-L-缬氨酸(868mg，4.0mmol)与(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基胺(604 mg，4.0 mmol)反应72小时。将此混合物减压浓缩并在乙酸乙酯(200mL)和水(200mL)之间分配。将有机层用5％枸橼酸水溶液(100mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)洗涤，干燥(硫酸镁)，并减压浓缩。将此产物用二异丙基醚研磨，过滤并干燥得到(2S)-叔-(丁氧羰基)氨基-N-[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]-3-甲基丁酰胺(1.11g，79％)，为无色固体。
m.p.112-113℃。
Rf 0.71(二氯甲烷∶甲醇∶浓氨水=90∶10∶1)
δH(400 MHz，CDCl3)0.96(6H，d，J=7 Hz)，1.45(9H，s)，2.18(1H，m)，3.35(3H，s)，3.64(2H，m)，3.92(1H，m)，5.00(1H，brs)，5.18(1H，m)，6.60(1H，m)，7.32(5H，m)。
LRMS(热喷雾)m/z=351(MH+)。
b)(2S)-叔-(丁氧羰基)氨基-N-[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]-3-甲基丁酰胺(1.11 g，3.17 mmol)溶解于无水二氯甲烷(15 mL)和二噁烷(15 mL)的混合物中，并冷却至4℃。搅拌下向此溶液中通入氯化氢直到形成饱和溶液。在4℃搅拌4小时后，将此溶液减压浓缩。将残余物与二氯甲烷共沸，得到(2S)-氨基-N-[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]-3-甲基丁酰胺盐酸盐(948 mg，104％)，为淡黄色泡沫。
δH(400 MHz，CDCl3)0.95(3H，d，J=7.5 Hz)，1.00(3H，d，J=7.5Hz)，2.20(1H，m)，3.15(3H，s)，3.56(1H，m)，3.66(1H，m)，4.02(1H，m)，5.10(1H，m)，7.20-7.35(3H，m)，7.40(2H，d，J=8 Hz)，7.90(3H，br s)，8.18(1H，d，J=7.5 Hz)。
LRMS(热喷雾)m/z=251(MH+)。
c)按照制备例2的方法，(2R)-2-[2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基]戊-4-烯酸(646 mg，3.02mmol)与(2，S)-氨基-N-[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]-3-甲基丁酰胺盐酸盐(得自上述b))(908 mg，3.17 mmol)在4℃反应1小时，并再在20℃反应18小时。将此混合物减压浓缩，并在乙酸乙酯(100mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)之间分配。分层并将水层再次用乙酸乙酯(100mL)萃取。将合并的有机层干燥(硫酸镁)，并减压浓缩。将残余物通过快速层析(用二氯甲烷∶甲醇98∶2洗脱)纯化，得到(3R)-3-(｛[(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)-(1S)-2-甲基-1-丙基]氨基｝羰基)己-5-烯酸叔丁基酯(1.08 g，80％)，为白色固体。
m.p.155-157℃。
Rf 0.36(二氯甲烷∶甲醇=95∶5)
δH(400 MHz CDCl3)0.94(3H，d，J=7 Hz)，0.97(3H，d，J=7 Hz)，1.40(9H，s)，2.15(2H，m)，2.35(2H，m)，2.65(2H，m)，3.15(3H，s)，3.65(2H，d，J=5Hz)，4.26(1H，t，J=7.5)，4.96(1H，d，J=9Hz)，5.00(1H，d，J=18Hz)，5.15(1H，dt，J=5和7 Hz)，5.66(1H，m)，6.26(1H，d，J=7.5 Hz)，6.55(1H，d，J=7 Hz)，7.30(5H，m)。
LRMS(热喷雾)m/z=447(MH+)。
d)按照制备例15a)的方法，(3R)-3-(｛[(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)-(1S)-2-甲基-1-丙基]氨基｝羰基)己-5-烯酸(得自上述c))(1.08 g，2.42 mmol)与4-碘-2-甲基-1-苯基苯(制备例29)(1.07 g，3.63 mmol)在钯催化下在乙腈中回流18小时。冷却后，将此混合物用乙酸乙酯(200mL)稀释并用5％枸橼酸水溶液(50 mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(50 mL)、饱和盐水(50mL)依次洗涤，干燥(硫酸钠)并减压浓缩。将残余物通过快速层析(用二氯甲烷∶乙酸乙酯=30∶1至3∶1梯度洗脱)纯化，得到(3R，5E)-3-(｛[(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)-(1S)-2-甲基-1-丙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]己-5-烯酸叔丁基酯，为淡棕色泡沫(980 mg，66％)。
Rf 0.35(二氯甲烷∶乙酸乙酯=4∶1)
δH(400 MHz，CDCl3)，0.96(3H，d，J=7 Hz)，0.98(3H，d，J=7Hz)，1.40(9H，s)，2.18(1H，m)，2.22(3H，s)，2.36(1H，m)，2.40-2.58(2H，m)，2.66(1H，m)，2.75(1H，m)，3.35(3H，s)，3.62(2H，d，J=4.5 Hz)，4.30(1H，t，J=7.5 Hz)，5.12(1H，dt J=4.5和7 Hz)，6.10(1H，m)，6.36(1H，d，J=7 Hz)，6.40(1H，d，J=16Hz)，6.55(1H，d，J=7.5 Hz)，7.10(2H m)，7.20-7.38(9H，复杂)，7.40(2H，m)。
实测值：            C，74.43；H，7.85；N，4.57；
C38H48N2O5理论值C，74.48；H，7.90；N，4.57％
e)将(3R，5E)-3-(｛[(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)-(1S)-2-甲基-1-丙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]己-5-烯酸(得自上述d))(930 mg，1.51 mmol)的乙醇(50 mL)溶液在3巴20℃下在10％钯碳(75 mg)上氢化17小时。将此混合物通过Arbocel助滤剂过滤并减压浓缩。将残余物通过快速层析纯化(用戊烷∶乙酸乙酯10∶1至2∶1梯度洗脱)并用乙醚研磨得到(3R)-3-(｛[(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基)氨基｝羰基)-(1S)-2-甲基-1-丙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]己酸叔丁基酯(748 mg，81％)。为无色泡沫，将其用于实施例21。
Rf 0.35(戊烷∶乙酸乙酯=2∶1)
δH(400 MHz，CDCl3)0.95(3H，d，J=7 Hz)，0.98(3H，d，J=7 Hz)，1.40(9H，s)，1.42(1H，m)，1.60(2H，m)，1.70(1H，m)，2.18(1H，m)，2.22(3H，s)，2.38(1H，m)，2.45-2.66(4H，复杂)，3.32(3H，s)，3.60(2H，d，J=4.5 Hz)，4.28(1H，t，J=7.5 Hz)，5.15(1H，dt，J=4.55和7 Hz)，6.30(1H，d，J=7.5 Hz)，6.55(1H，d，J=7 Hz)，6.98(1H，d，J=8 Hz)，7.00(1H，s)，7.10(1H，d，J=8 Hz)，7.20-7.36(8H，复杂)，7.40(2H，m)。
实测值：            C，74.39；H，8.24；N，4.59；
C38H50N2O5理论值C，74.32；H，8.27；N，4.61％
制备例29。
4-碘-2-甲基-1-苯基苯。
Figure 9881293601481
a)按照制备例25(a)的方法，将2-溴-5-硝基甲苯(15 gm，69.4mmol)用苯基硼酸(12.7 gm，104.1 mmol)在钯催化下处理，用2M碳酸钠水溶液作为碱在二甲氧基乙烷中回流16小时。冷却后，从此混合物分出有机层，用乙醚稀释并用水洗涤(两次)。将此有机层干燥(硫酸钠)并减压浓缩。将残余物通过快速层析纯化(用己烷至己烷∶乙酸乙酯95∶5梯度洗脱)，得到2-甲基-4-硝基-1-苯基苯，为黄色固体(12.7gm，86％)。
Rf 0.33(己烷∶乙酸乙酯=95∶5)
δH(300MHz，CDCl3)2.40(3H，s)，7.20-7.50(6H，复杂)，8.10(1H，d，J=8 Hz)，8.15(1H，s)。
b)2-甲基-4-硝基-1-苯基苯(12.7gm，60 mmol)溶解于在乙醇(260 mL)中并在3巴20℃下在10％钯碳(1.27gm)上氢化2小时。将此混合物通过Arbocel助滤剂过滤，用乙酸乙酯洗涤。将此滤液减压浓缩得到4-氨基-2-甲基-1-苯基苯(10.49 gm，95％)带粉红色的棕色油状物。
δH(400 MHz，CDCl3)2.20(3H，s)，3.60(2H，br s)，6.60(2H，m)，7.05(1H，d，J=8 Hz)，7.30(3H，m)，7.40(2H，m)。
c)将搅拌的4-氨基-2-甲基-1-苯基苯(10.49 gm，57.2 mmol)的二碘甲烷(100mL)溶液，用亚硝酸异戊基酯(27mL，200.2 mmol)处理5分钟。将此混合物加热至75℃，保持45分钟，再65℃加热1小时。冷却后，将此混合物减压浓缩，并将残余物通过快速层析纯化(用己烷洗脱)得到4-碘-2-甲基-1-苯基苯(11.6 gm，66％)，为油状物。
Rf 0.33(己烷)
δH(400 MHz，DMSO-d6)2.20(3H，s)，6.98(1H，d，J=8 Hz)，7.30(2H，m)，7.35(1H，m)，7.45(2H，m)，7.60(1H，d，J=8 Hz)，7.70(1H，s)。
制备例30。
(3R)-3-(｛[(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)-(1S)-2苯基乙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]己酸叔丁基酯。
a)按照制备例19a)的方法，N-叔丁氧羰基-1-苯基丙氨酸(1.06 mg，4.0 mmol)与(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基胺(604 mg，4.0 mmol)反应72小时。将此混合物减压浓缩并在乙酸乙酯(200mL)和水(200mL)之间分配。将有机层用5％枸橼酸水溶液(100mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)洗涤，干燥(硫酸镁)，并减压浓缩。将此产物用二异丙基醚研磨，过滤并干燥得到(2S)-叔-(丁氧羰基)氨基-N-[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]-3-苯基丙酰胺(1.28 g，81％)，为白色固体。
m.p.133-134℃。
Rf 0.76(二氯甲烷∶甲醇∶浓氨水=90∶10∶1)
δH(400 MHz，CDCl3)1.40(9H，s)，3.02(1H，dd，J=7和13 Hz)，3.16(1H，dd，J=6和13 Hz)，3.22(3H，s)，3.40(1H，m)，3.56(1H，dd，J=4.5和10 Hz)，4.38(1H，m)，5.05(2H，m)，6.45(1H，d，J=8Hz)，7.18-7.36(10H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=399(MH+)。
b)(2S)-叔-(丁氧羰基)氨基-N-[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]-3-苯基丙酰胺(1.28 g，3.2 mmol)溶解于无水二氯甲烷(15 mL)和二噁烷(15 mL)的混合物中，并冷却至4℃。搅拌下，向此溶液中通入氯化氢直到形成饱和反应。在4℃搅拌4小时后，将此溶液减压浓缩。将残余物与二氯甲烷共沸得到(2S)-氨基-N-[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]-3-苯基丙酰胺盐酸盐(1.11g，103％)，为淡黄色泡沫。
δH(400 MHz，CDCl3)3.08(1H，dd，J=13和10 Hz)，3.20(3H，s)，3.32(2H，m)，3.50(1H，dd，J=7.5和6.5 Hz)，4.44(1H，m)，5.00(1H，m)，7.18(1H，m)，7.20(2H，m)，7.25(7H，复杂)，7.64(1H，d，J=8 Hz)，7.80(3H，br s)。
LRMS(热喷雾)m/z=299(MH+)。
c)按照制备例2的方法，(2R)-2-[2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基]戊-4-烯酸(658 mg，3.07 mmo1)与(2S)-氨基-N-[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]-3-苯基丙酰胺盐酸盐(得自上述b))(1.08 mg，3.23 mmol)在4℃反应1小时，并再在20℃反应18小时。将此混合物减压浓缩，并在乙酸乙酯(100mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)之间分配。分层并将此水层再次用乙酸乙酯(100mL)萃取。将合并的有机层干燥(硫酸镁)并减压浓缩。将残余物用二异丙基醚研磨得到(3R)-3(｛[(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)-(1S)-2-苯基乙基]氨基｝羰基)己-5-烯酸叔丁基酯(1.35 g，85％)，为白色固体。
M.P.122-125℃。
Rf 0.47(二氯甲烷∶甲醇=95∶5)
δH(400 MHz，CDCl3)1.40(9H，s)，2.12(1H，m)，2.26-2.40(2H，m)，2.50-2.60(2H，m)，3.00(1H，dd，8.5和14 Hz)，3.19(1H，dd，5.5和14 Hz)，3.20(3H，s)，3.36(1H，dd，4.5和9.5Hz)，3.50(1H，dd，4.8和9.5)，4.65(1H，q，J=7.5 Hz)，4.94-5.04(3H，m)，5.60(1H，m)，6.37(2H，m)，7.18-7.35(10H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=495(MH+)。
d)按照制备例15a)的方法，(3R)-3-(｛[(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)-(1S)-2-苯基乙基]氨基｝羰基)己-5-烯酸叔丁基酯(得自上述c))(1.35 g，2.73 mmol)与4-碘-2-甲基-1-苯基苯(制备例29)(1.21 g，4.09 mmol)在钯催化下在乙腈中回流反应18小时。冷却后，将此混合物用乙酸乙酯(200mL)稀释并用5％枸橼酸水溶液(50mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(50 mL)、饱和盐水(50 mL)洗涤，干燥(硫酸钠)并减压浓缩。将残余物通过快速层析纯化(用二氯甲烷∶乙酸乙酯=50∶1至5∶1梯度洗脱)得到(3R，5E)-3-(｛[(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基-(1S)-2-苯基乙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]己-5-烯酸叔丁基酯，为淡棕色泡沫(1.1 g，61％)。
Rf 0.35(二氯甲烷∶乙酸乙酯=5∶1)
δH(400 MHz，CDCl3)1.40(9H，s)，2.22(3H，s)，2.34(1H，m)，2.40-2.56(2H，m)，2.56-2.75(2H，m)，3.00(1H，dd，J=7.5和14Hz)，3.19(1H，dd，J=6和14 Hz)，3.20(3H，s)，3.35(1H，dd，J=4.5和10 Hz)，3.50(1H，dd，，J=4.5和10 Hz)，4.65(1H，q，J=7.5Hz)，5.00(1H，dt，J=4.5和7.5 Hz)，6.06(1H，dt，J=7和14 Hz)，6.34(1H，d，J=7.5 Hz)，6.38(1H，d，J=14 Hz)，6.44(1H，d，J=7.5Hz)，7.10-7.38(16H，复杂)，7.40(2H，m)。
实测值：            C，76.10；H，7.27；N，4.20；
C42H48N2O5理论值C，76.33；H，7.32；N，4.24％
e)将(3R，5E)-3-(｛[(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)-(1S)-2-苯基乙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]己-5-烯酸叔丁基酯(1.03g，1.56mmol)的乙醇(100mL)溶液在3巴20℃下在10％钯碳(125 mg)上氢化18小时。将此混合物通过Arbocel助滤剂过滤并减压浓缩。将残余物通过快速层析纯化(用戊烷∶乙酸乙酯10∶1至2∶1梯度洗脱)，并用乙醚研磨得到(3R)-3-(｛[(｛[(1S)-2-甲氧基-1-苯基乙基]氨基｝羰基)-(1S)-2-苯基乙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]己酸叔丁基酯(980mg，95％)，为无色泡沫，将其用于实施例22。
Rf 0.35(戊烷∶乙酸乙酯=2∶1)
δH(400 MHz，CDCl3)1.40(9H，s)，1.42(1H，m)，1.48-1.70(3H，m)，2.20(3H，s)，2.38(1H，m)，2.56(4H，m)，3.00(1H，dd，J=8和13 Hz)，3.20(3H，s，和1H，dd，J=5.5和13 Hz重叠)，3.36(1H，dd，J=5和9 Hz)，3.50(1H，dd，J=5和9 Hz)，4.65(1H，q，J=8 Hz)，5.00(1H，dt，J=5和8 Hz)，6.38(2H，d，J=8 Hz)，6.95(1H，d，J=8Hz)，7.00(1H，s)，7.10(1H，d，J=8 Hz)，7.14-7.35(13H，复杂)，7.40(2H，m)。
实测值：            C，76.03；H，7.70；N，4.25；
C42H50N2O5理论值C，76.10；H，7.60；N，4.23％
制备例31。
(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-([(1R)-1-(4-吡啶基)乙基氨基]羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[(3-甲基-4-苯基)苯基]己酸叔丁基酯
按照实施例25(a)的方法，(3R)-3-(｛[(1S)-1-(羧基)-2，2二甲基丙基]氨基｝羰基)-6-[(3-甲基-4-苯基)苯基]己酸叔丁基酯(制备例19c)(497 mg，1.0 mmol)与(R)-(+)-1-(4-吡啶基)乙胺(122 mg，1.0mmol)在室温下反应2.5小时，随后同样处理，得到(3R)3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-｛[(1R)-1-(4-吡啶基)乙基氨基]羰基｝丙基]氨基｝羰基)-6-[(3-甲基-4-苯基)苯基]-己酸叔丁基酯(460 mg，77％)，为白色固体。
Rf 0.21(己烷∶乙酸乙酯=1∶2)
δH(400 MHz，CDCl3)1.01(9H，s)，1.40(9H，s)，1.45(3H，d，J=7.5 Hz)，1.50-1.65(4H，m)，2.22(3H，s)，2.38(1H，m)，2.50-2.65(4H，m)，4.20(1H，d，J=9 Hz)，5.04(1H，五重峰，J=7.5Hz)，6.15(1H，d，J=7.5 Hz)，6.45(1H，d，J=9 Hz)，7.00(2H，m)，7.14(3H，m)，7.30(3H，m)，7.38(2H，m)，8.45(2H，d，J=7.5 Hz)。
LRMS(热喷雾)m/z=600(MH+)
实施例38/制备例32。
(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-｛[(1R)-1-(3-吡啶基)乙基氨基｝羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[(3-甲基4-苯基)苯基]己酸。    
Figure 9881293601541
a)按照实施例25(a)的方法，(3R)-3-(｛[(1S)-1-(羧基)-2，2二甲基丙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]己酸叔丁基酯(制备例19c)(497 mg，1.0 mmol)与(R)-(+)-1-(3-吡啶基)乙胺(122 mg，1.0mmol)在室温下反应2.5小时，接着同样处理并通过快速层析纯化(用己烷∶乙酸乙酯4∶1至100％乙酸乙酯梯度洗脱)，得到(3R)-3-(｛[(1S)-2，2-二甲基-1-｛[(1R)-1-(3-吡啶基)乙基氨基]羰基)丙基]氨基｝羰基)-6-[3-甲基-(4-苯基)苯基]己酸叔丁基酯(537 mg，89％)为无色泡沫。
Rf 0.33(乙酸乙酯)
δH(400 MHz，DMSO-d6)0.90(9H，s)，1.02(3H，d，J=7.5 Hz)，1.34(9H，s)，1.20-1.34(4H，m)，2.14(3H，s)，2.20(1H，m)，2.30-2.50(3H，m)，2.80(1H，m)，4.30(1H，d，J=9.5 Hz)，4.95(1H，五重峰，J=7.5 Hz)，6.92(1H，d，J=8 Hz)，7.00(2H，m)，7.18(1H，m)，7.24(2H，m)，7.32(1H，m)，7.40(2H，m)，7.60(1H，d，J=8Hz)，7.75(1H，d，J=9.5 Hz)，8.35(1H，m)，8.42(1H，d，J=7.5 Hz)，8.46(1H，s)。
LRMS(热喷雾)m/z=600(MH+)。
b)在氮气氛下，在0℃将氯化氢通入(3R)-3-(｛[(1S)-2，2二甲基-1-｛[(1R)-1-(3-吡啶基)乙基氨基]羰基｝丙基]氨基｝羰基)-6-[(3-甲基-4-苯基)苯基]-己酸叔丁基酯(285 mg，0.47 mmol)的二噁烷(15 mL)溶液中，直到饱和。将此溶液在0℃搅拌3小时，再减压浓缩。将残余物溶解于甲醇(3 mL)，加入乙醚(3 mL)，将此混合物过滤并将滤液减压浓缩。将残余物溶解于甲醇(3 mL)，加入甲苯(3 mL)并减压浓缩。最后，将乙醚(5 mL)加入到残余物中，将其超声处理得到白色固体，将其过滤并干燥得到标题化合物，为白色固体(338mg，65％)。
Rf 0.06(乙酸乙酯∶己烷∶乙酸=50∶50∶1)
δH(400 MHz CD3OD)1.02(9H，s)，1.40-1.60(4H，m)，1.54(3H，d，J=7.5 Hz)，2.16(3H，s)，2.30-2.58(3H，m)，2.62(1H，m)，2.90(1H，m)，4.20(1H，m)，5.15(1H，五重峰J=7.5 Hz)，6.90(1H，d，J=8 Hz)，6.98(2H，m)，7.22(2H，d，J=8 Hz)，7.32(1H，m)，7.40(2H，d，J=8 Hz)，7.80(1H，m)，7.85(1H，d，J=9.5 Hz)，8.50(2H，m)，8.80(2H，m)。
LRMS(热喷雾)m/z=544(MH+)
实测值：                          C，65.78；H，7.26；N，6.72；
C33H41N3O4·HCl·1.25H2O理论值C，65.74；H，7.63；N，6.76％
制备例33。
(2R)-N-[(1S)-1-(羧基)-2，2-二甲基丙基]-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-5-[(3-甲基4-苯基)苯基]戊酰胺。
Figure 9881293601551
    
a)按照制备例2的方法，(4S)-4-[(1R)-1-羧基-丁-3-烯基]-2，2二甲基-1，3-二氧杂环戊烷-5-酮(制备例14b)(2.39g，11.20 mmol)与L-叔亮氨酸苄基酯盐酸盐(3.03g，11.76mmol)在4℃反应1小时并再在20℃反应17小时。将此混合物减压浓缩，溶解于乙酸乙酯(200mL)，用0.5M磷酸二氢钠水溶液(2×200 mL)、5％饱和碳酸氢钠水溶液(200mL)、水洗涤，干燥(硫酸镁)，并减压浓缩。将此残余物通过快速层析(用己烷∶乙酸乙酯10∶1至1∶1梯度洗脱)纯化，得到(2R)-N-[(1S)-1-[(苄氧基)羰基]-2，2-二甲基丙基]-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]戊-4-烯酰胺(4.06g，87％)，为白色固体。
m.p.67-70℃。
Rf 0.30(己烷∶乙醚=1∶1)
δH(400MHz，DMSO-d6)0．9.5(9H，s)，1.45(3H，s)，1.54(3H，s)，2.30(1H，m)，2.45(1H，m)，3.00(1H，m)，4.02(1H，d，J=8 Hz)，4.50(1H，d，J=8 Hz)，4.85(1H，d，J=8 Hz)，5.00(1H，d，J=16 Hz)，5.10(2H，s)，5.60(1H，m)，7.34(5H，m)，8.12(1H，d，J=8 Hz)。
LRMS(热喷雾)m/z=418(MH+)
实测值：           C，66.13；H，7.50；N，3.36；
C23H31NO6理论值C，66.17；H，7.48；N，3.35％
b)在氮气氛下，将醋酸钯(58 mg，0.24 mmol)加入到搅拌的(2R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-N-｛(1S)-2，2-二甲基-1-[(苄氧基)羰基]丙基｝戊-4-烯酰胺(2.0 g，4.8mmol)、4-碘-2-甲基-1-苯基苯(制备例29)(2.1 g，7.20 mmol)和N-乙基吗啉(920μL，7.20 mmol)的无水乙腈(15 mL)溶液中。将此混合物用氮气吹洗，再加热回流。1小时后，由于钯盐沉淀，再加入醋酸钯(58 mg，0.24 mmol)并继续回流。再过2小时后，再加入58 mg的醋酸钯。再过2小时后，加入三-(2-甲基苯基)膦(304 mg，1.0 mmol)和醋酸钯(58 mg，0.24 mmol)并将此混合物回流2小时，此后再加入三-(2-甲基苯基)膦(304 mg，1.0 mmol和醋酸钯(58 mg，0.24 mmol)并将此混合物回流8小时。将此反应混合物冷却，用乙酸乙酯(200mL)和水(200mL)稀释，并通过Arbocel助滤剂过滤除去钯盐。分层并用水(2×100mL)洗涤有机层，干燥(硫酸钠)并减压浓缩。将此粗品通过快速层析纯化。首先，用二氯甲烷∶乙酸乙酯=50∶1至15∶1梯度洗脱进行层析得到黄色胶状物。再通过快速层析纯化(用己烷∶乙醚10∶1至1∶1梯度洗脱)并用戊烷∶乙醚研磨，得到(2R，4E)-N-｛(1S)-1-[(苄氧基)羰基]-2，2-二甲基丙基)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3二氧杂环戊烷-4-基]-5-[(3-甲基-4-苯基)苯基]戊-4-烯酰胺，为白色固体(710 mg，25％)。
m.p.115-118℃
Rf 0.30(己烷∶乙酸乙酯=1∶1)
δH(300 MHz，CDCl3)0.96(9H，s)，1.54(3H，s)，1.60(3H，s)，2.24(3H，s)，2.65-2.90(3H，m)，4.50(1H，d，J=9.5 Hz)，4.60(1H，d，J=7.5 Hz)，5.0(1H，d，J=9.5 Hz)，5.3(1H，d，J=9.5 Hz)，6.20(1H，m)，6.44(1H，d，J=9.5 Hz)，6.52(1H，d，J=16 Hz)，7.10-7.42(13H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=584(MH+)。
实测值：           C，73.96；H，7.02；N，2.41；
C36H41NO6理论值C，74.08；H，7.08；N，2.40％
c)将(2R，4E)-N-((1S)-1-[(苄氧基)羰基]-2，2-二甲基丙基)-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-5-[(3-甲基-4-苯基)苯基]戊-4-烯酰胺(1.24gm，2.12 mmol)的乙醇(150 mL)溶液在3巴室温下在10％碳(100mg)上氢化6小时。将此混合物通过Arbocel助滤剂过滤并减压浓缩。将残余物与乙醚共沸得到(2R)-N-[(1S)-1-(羧基)-2，2-二甲基丙基]-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-5-[(3-甲基-4-苯基)苯基]戊酰胺(1.08 gm，103％)，为无色泡沫。
Rf 0.40(己烷∶乙酸乙酯∶乙酸=50∶50∶1)
δH(400 MHz，DMSO-d6)0.95(9H，s)，1.46(3H，s)，1.55(3H，s)，1.50-1.66(3H，m)，1.80(1H，m，)，2.20(3H，s)，2.50(1H，m)，2.60(1H，m)，3.00(1H，m)，4.15(1H，d，J=8 Hz)，4.50(1H，d，J=8 Hz)，7.05(3H，m)，7.30(3H，m)，7.40(2H，m)，7.95(1H，d，J=8 Hz)。
实测值：                    C，69.50；H，7.69；N，2.69；
C29H37NO6·0.3H2O理论值 C，69.52；H，7.56；N，2.80％
制备例34。
(2R)-N-[(1S)-1-(羧基)-2，2-二甲基丙基]-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-5-[(3’-甲氧基-2-甲基联苯-4-基)丙基]戊酰胺。    
Figure 9881293601591
a)按照制备例15a)的方法，(2R)-N-[(1S)-1-[(苄氧基)羰基]-2，2-二甲基丙基]-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]戊-4-烯酰胺(制备例32a)(1.0 g，2.4 mmol)与4-碘-1-(3-甲氧基苯基)-2-甲基苯(制备例20)(1.16 g，3.59mmol)在钯催化下在乙腈中反应回流16小时。冷却后，将此混合物在乙酸乙酯(3×75 mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(75 mL)之间分配。将合并的有机溶液干燥(硫酸钠)并减压浓缩。将残余物通过快速层析纯化(用二氯甲烷∶乙醚=97.5∶2.5洗脱)得到(2R，4E)-N-｛(1S)-1-[(苄氧基)羰基]-2，2-二甲基丙基｝-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-5-[(3’-甲氧基-2-甲基联苯-4-基)丙基]戊-4-烯酰胺，为固体(1.08 mg，74％)。1HNMR表明还存在两个烯异构体。将此烯的混合物用于下步反应(见下b)。
Rf 0.44(二氯甲烷∶乙醚=95∶5)
δH(400MHz，CDCl3)((4E)异构体)：0.95(9H，s)，1.52(3H，s)，1.60(3H，s)，2.25(3H，s)，2.54-2.90(3H，m)，3.80(3H，s)，4.50(1H，d，J=9.5 Hz)，4.60(1H，d，J=5 Hz)，4.98(1H，d，J=12 Hz)，5.07(1H，d，J=12 Hz)，6.20(1H，m)，6.45(1H，d，J=9 Hz)，6.50(1H，d，J=16 Hz)，6.86(3H，m)，7.12-7.40(9H，复杂)。
LRMS(热喷雾)m/z=613(MH+)，630(MNH4 +)。
b)将(2R，4E)-N-}(1S)-1-[(苄氧基)羰基]-2，2-二甲基丙基｝-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-5-[(3’-甲氧基-2-甲基联苯-4-基)苯基]戊-4-烯酰胺(534 mg，0.87 mmol)的乙醇(75mL)溶液在3巴20℃下在10％碳(50 mg)上氢化5.75小时。将此混合物通过Arbocel助滤剂过滤，减压浓缩并与乙酸乙酯共沸得到(2R)-N-[(1S)-1-(羧基)-2，2-二甲基丙基]-2-[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧杂环戊烷-4-基]-5-[(3’-甲氧基-2-甲基联苯-4-基)丙基]戊酰胺(384 mg，61％)，为白色固体，将其不经纯化用于实施例30和31。
δH(400 MHz，DMSO-d6)0.96(9H，s)，1.45(3H，s)，1.55(3H，s)，1.50-1.65(3H，m)，1.80(1H，m)，2.20(3H，s)，2.50(1H，m)，2.60(1H，m)，2.96(1H，m)，3.78(3H，s)，4.15(1H，d，J=9 Hz)，4.50(1H，d，J=9 Hz)，6.85(3H，m)，7.00(1H，m)，7.05(2H，m)，7.32(1H，t，J=8Hz)，7.96(1H，d，J=9 Hz)，12.50(1H，br s)。
LRMS(热喷雾)m/z=526(MH+)。

Claims (38)

1．一种物质，其为式(Ⅰ)的化合物或其药用盐、或二者的溶剂化物：
其中
R1是H、OH、C1-4烷基、C1-4烷氧基或C2-4链烯基，
R2是C1-6烷基，其任选性地被氟、吲哚基、咪唑基、SO2(C1-4烷基)、C5-7环烷基取代，或被任选性保护的OH、SH、CONH2、CO2H、NH2或NHC(=NH)NH2基团取代，
任选性被C1-6烷基取代的C5-7环烷基，
或者是被任选性保护的OH、C1-6烷氧基、苄氧基或苄硫基任选性取代的苄基，
其中所述OH、SH、CONH2、NH2或NHC(=NH)NH2基团的任选性保护基选自C1-6烷基、苄基、C1-6烷酰基，
且所述CO2H的任选性保护基选自C1-6烷基或苄基，
R3、R5和R6彼此独立地选自H和F，
R4是甲基、Cl和F，
X是HO或HONH，
Y是直接连接或O，
Z是式(a)基团：
其中R10是C1-4烷基、C1-4烷氧基甲基、羟基(C2-4烷基)、羧基(C1-4烷基)或(氨基或二甲基氨基)C2-4烷基，
而R11是苯基、萘基或吡啶基，其被不超过3个独立地选自卤素和甲基的取代基任选性取代；
或Z为(b)
R14是H、OH、甲基或卤素，
Ar是式(c)、(d)或(e)的基团：
Figure 9881293600033
其中
A是N或CR12，
B是N或CR13，
条件是A和B不都是N，
R7和R9彼此独立地为H或F，
R8、R12和R13彼此独立地为H、CN、C1-6烷基、羟基(C1-6烷基)、羟基(C1-6)烷氧基、C1-6烷氧基(C1-6)烷氧基、(氨基或二甲基氨基)C1-6烷基、CONH2、OH、卤素、C1-6烷氧基、(C1-6烷氧基)甲基、哌嗪基羰基、哌啶基、C(NH2)=NOH或C(=NH)NHOH，条件是R8、R12和R13中的至少两个是H。
2．权利要求1所述的物质，其中R1是H、OH、C1-4烷基或C1-4烷氧基。
3．上述任一权利要求所述的物质，其中R2是被吲哚基、C1-6烷硫基、SO2(C1-4烷基)、C5-7环烷基、OH或SH任选性取代的C1-6烷基；任选性地被C1-6烷基取代的C5-7环烷基；或者R2是苄基。
4．上述任一权利要求所述的物质，其中Z是式(a)基团：
其中R10是C1-4烷基、C1-4烷氧基甲基或羟基(C2-4烷基)，
而R11是苯基或吡啶基，其任选性地被不超过3个独立地选自卤素和甲基的取代基取代，
或Z是
Figure 9881293600042
5．上述任一权利要求所述的物质，其中R3是H。
6．上述任一权利要求所述的物质，其中当Y是0时，R4是F，而当Y是直接连接时，R4是氯或甲基。
7．上述任一权利要求所述的物质，其中R5是H。
8．上述任一权利要求所述的物质，其中R6是H。
9．上述任一权利要求所述的物质，其中Ar是式(c)基团，
其中
A是CR12而B是CR13，
R7和R9彼此独立地为H或F，
R8和R13彼此独立地为H、F、Cl、CN、CONH2、甲基或甲氧基，而
R12是H、C1-6烷基、CN、羟基(C2-6烷基)、(氨基或二甲基氨基)C2-6烷基、CONH2、OH、卤素、C1-6烷氧基、(C1-6烷氧基)甲基、哌嗪基羰基、哌啶基、C(NH2)NOH或C(=NH)NHOH。
10．上述任一权利要求所述的物质，其中R1是H、OH、正丙基或乙氧基。
11．上述任一权利要求所述的物质，其中R2是被OH、SO2(C1-4烷 基)或C5-7环烷基任选性取代的C1-6烷基，
被C1-6烷基任选性取代的环己基，
或者R2是苄基。
12．上述任一权利要求所述的物质，其中Z是式(a)基团：
其中R10是C1-4烷基、C1-4烷氧基甲基或羟基(C2-4烷基)，而R11是苯基、吡啶-4-基或吡啶-3-基，
或Z是
13．上述任一权利要求所述的物质，其中Ar是式(c)基团，
其中A是CR12、B是CR13，而R7、R8和R9是H。
14．上述任一权利要求所述的物质，其中R1是H。
15．上述任一权利要求所述的物质，其中R2是环己基甲基、异丙基、1-甲基环己基、叔丁基、C(CH3)2SO2CH3、苄基或C(CH3)2OH。
16．上述任一权利要求所述的物质，其中Z是式(a)基团：
Figure 9881293600062
其中R10是甲基、CH2OCH3或CH2OH，而R11是苯基、吡啶-4-基或吡啶-3-基，
或Z是
Figure 9881293600063
17．上述任一权利要求所述的物质，其中Ar是式(c)基团，
Figure 9881293600064
其中
A是CR12、B是CR13、R7、R8和R9为H，
R12是H、C1-6烷基、CN、羟基(C2-6烷基)、(氨基或二甲基氨基)C2-6烷基、CONH2、OH、卤素、C1-6烷氧基、(C1-6烷氧基)甲基、C(NH2)NOH或C(=NH)NHOH，
而R13是H、甲氧基、CN、CONH2、甲基或F。
18．上述任一权利要求所述的物质，其中R2是异丙基、叔丁基或苄基。
19．上述任一权利要求所述的物质，其中Z是下式基团
Figure 9881293600071
20．上述任一权利要求所述的物质，其中Ar是苯基、3-甲氧基苯基、4-氰基苯基、3-氰基苯基、3-氨基甲酰基苯基或4-羟基脒基苯基。
21．上述任一权利要求所述的物质，其中R2是叔丁基。
22．上述任一权利要求所述的物质，其中Ar是苯基或3-甲氧基苯基。
23．权利要求1所述的物质，其中
R1是H、OH、正丙基或乙氧基，
R2是叔丁基、异丙基或苄基，
Z是式
其中R10是甲基、CH2OCH3或CH2OH，而R11是苯基、吡啶-4-基或吡啶-3-基，
或Z是
R3是H，
R4是甲基、氯或氟，
R5是H，
R6是H，
而Ar是苯基、3-甲氧基苯基、4-氰基苯基、3-氰基苯基、3-氨基甲酰基苯基或4-羟基脒基苯基。
24．权利要求1所述的物质、及其盐和溶剂化物，其基本上如本文中实施例中所定义。
25．权利要求1所述的物质，其选自实施例3、4、8、14、15、16、22、29、30、31和32的化合物及其盐。
26．含有上述任一权利要求所述的物质及与之混合的相容性辅剂、稀释剂或载体的药物组合物。
27．权利要求1至25任一项的物质，其用作药物。
28．权利要求1至25任一项的物质在制备治疗MMP、特别是MMP-3和/或MMP-12和/或MMP-13介导的病症的药物中的用途。
29．治疗或预防MMP、特别是MMP-3和/或MMP-12和/或MMP-13介导的病症的方法，其包括施用有效量的权利要求1至25任一项所述物质或权利要求26所述的组合物。
30．X是OH的权利要求1所述式(Ⅰ)物质的制备方法，包括式(Ⅱ)化合物的转化，
Figure 9881293600081
其中X1是能转变为羧基的基团，而其它取代基的定义如权利要求1，例如通过将X1是CO2(叔丁基或甲基)残基的式(Ⅱ)的化合物水解。
31．权利要求1所述物质的制备方法，其中X是NHOH而R1、R2、R3、R4、R5、R6、Y、Ar和Z定义如权利要求1，该方法包括X是OH的权利要求1的式(Ⅰ)化合物与羟胺或其衍生物反应。
32．权利要求1所述物质的制备方法，其中X是NHOH而R1、R2、R3、R4、R5、R6、Y、Ar和Z定义如权利要求1，该方法包括X是OH的权利要求1的式(Ⅰ)化合物与O-烯丙基羟胺或其盐在肽偶联试剂的存在下反应得到式(Ⅲ)的化合物：
随后在适宜的催化剂存在下用甲酸铵处理。
33．权利要求1所述物质的制备方法，其中X是NHOH，R1是OH而R2、R3、R4、R5、R6、Y、Ar和Z定义如权利要求1，该方法包括式(Ⅳ)的化合物与羟胺或其盐反应，
Figure 9881293600092
34．权利要求1所述物质的制备方法，其中X是OH而R1、R2、R3、R4、R5、R6、Y、Ar和Z定义如权利要求1，该方法包括式(Ⅴ)的化合物与式(Ⅵ)的化合物在催化剂存在下交叉偶联：    
Figure 9881293600101
其中X2是被保护的酸如CO2CH3或CO2(叔丁基)基团，而LG是交叉偶联离去基团如I、Br或OSO2CF3，而R1、R2、R3、R4、R5、R6、Y、A和Z定义如权利要求1，生成式(Ⅶa)和/或(Ⅶb)的一种或多种化合物，其中X2的定义如式(Ⅴ)化合物下所述，R1、R2、R3、R4、R5、R6、Y、Ar和Z的定义如权利要求1，
随后将烯残基还原并将被保护的酸残基X2脱保护。
35．式(Ⅱ)的化合物或其盐，或二者的溶剂化物，
Figure 9881293600103
其中X1、R1、R2、R3、R4、R5、R6、Y、Ar和Z的定义如权利要求30。
36．式(Ⅲ)的化合物或其盐，或二者的溶剂化物，
Figure 9881293600111
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、Y、Ar和Z的定义如权利要求32。
37．式(Ⅳ)的化合物或其盐，或二者的溶剂化物，
Figure 9881293600112
其中R2、R3、R4、R5、R6、Y、Ar和Z的定义如权利要求33。
38．式(Ⅶa)或(Ⅶb)的化合物或其盐，或它们的溶剂化物，其中X2、R1、R2、R3、R4、R5、R6、Y、Ar和Z的定义如权利要求34。
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