CS391191A3 - Complex of p-anisoyl streptokinase and plasminogen, and pharmaceuticalscomprising thereof - Google Patents
Complex of p-anisoyl streptokinase and plasminogen, and pharmaceuticalscomprising thereof Download PDFInfo
- Publication number
- CS391191A3 CS391191A3 CS913911A CS391191A CS391191A3 CS 391191 A3 CS391191 A3 CS 391191A3 CS 913911 A CS913911 A CS 913911A CS 391191 A CS391191 A CS 391191A CS 391191 A3 CS391191 A3 CS 391191A3
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- plasminogen
- complex
- streptokinase
- anisoyl
- derivative
- Prior art date
Links
- 108010023197 Streptokinase Proteins 0.000 title claims description 43
- 229960005202 streptokinase Drugs 0.000 title claims description 43
- -1 p-anisoyl Chemical group 0.000 title claims description 37
- 102000013566 Plasminogen Human genes 0.000 title claims description 34
- 108010051456 Plasminogen Proteins 0.000 title claims description 34
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 13
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 13
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 claims description 9
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 7
- 108010087750 lysyl-plasminogen Proteins 0.000 claims description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 6
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 5
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 4
- 241000282412 Homo Species 0.000 claims description 3
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 2
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 claims 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims 1
- 239000008196 pharmacological composition Substances 0.000 claims 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 claims 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 22
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 16
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 16
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 16
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 15
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 15
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 9
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 description 8
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 description 7
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 5
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 5
- 239000003527 fibrinolytic agent Substances 0.000 description 5
- 230000003480 fibrinolytic effect Effects 0.000 description 5
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 5
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 5
- 229940012957 plasmin Drugs 0.000 description 5
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 5
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 4
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010047249 Venous thrombosis Diseases 0.000 description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 4
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 4
- 230000020176 deacylation Effects 0.000 description 4
- 238000005947 deacylation reaction Methods 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 4
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 3
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 3
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 125000003647 acryloyl group Chemical group O=C([*])C([H])=C([H])[H] 0.000 description 3
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 3
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 239000010630 cinnamon oil Substances 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 3
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 3
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M .beta-Phenylacrylic acid Natural products [O-]C(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M 0.000 description 2
- ZEYHEAKUIGZSGI-UHFFFAOYSA-N 4-methoxybenzoic acid Chemical compound COC1=CC=C(C(O)=O)C=C1 ZEYHEAKUIGZSGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000723347 Cinnamomum Species 0.000 description 2
- ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N Dimethylamine Chemical compound CNC ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BVHLGVCQOALMSV-JEDNCBNOSA-N L-lysine hydrochloride Chemical compound Cl.NCCCC[C@H](N)C(O)=O BVHLGVCQOALMSV-JEDNCBNOSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 229930016911 cinnamic acid Natural products 0.000 description 2
- 235000013985 cinnamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 235000017803 cinnamon Nutrition 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 2
- WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N methyl p-hydroxycinnamate Natural products OC(=O)C=CC1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000636 p-nitrophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1*)[N+]([O-])=O 0.000 description 2
- 229940127126 plasminogen activator Drugs 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 2
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 2
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000003335 steric effect Effects 0.000 description 2
- 108010008962 streptokinase-plasminogen complex Proteins 0.000 description 2
- 229960000103 thrombolytic agent Drugs 0.000 description 2
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- PGOHTUIFYSHAQG-LJSDBVFPSA-N (2S)-6-amino-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-4-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-1-[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-1-[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]propanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]acetyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-sulfanylpropanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-4-carboxybutanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]hexanoic acid Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O PGOHTUIFYSHAQG-LJSDBVFPSA-N 0.000 description 1
- CFOQGBUQTOGYKI-UHFFFAOYSA-N (4-nitrophenyl) 4-(diaminomethylideneamino)benzoate Chemical compound C1=CC(N=C(N)N)=CC=C1C(=O)OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 CFOQGBUQTOGYKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODIGIKRIUKFKHP-UHFFFAOYSA-N (n-propan-2-yloxycarbonylanilino) acetate Chemical group CC(C)OC(=O)N(OC(C)=O)C1=CC=CC=C1 ODIGIKRIUKFKHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UOBYKYZJUGYBDK-UHFFFAOYSA-M 2-naphthoate Chemical compound C1=CC=CC2=CC(C(=O)[O-])=CC=C21 UOBYKYZJUGYBDK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- NMIJQVGEQUAMTN-UHFFFAOYSA-N 3-carbamimidoyl-6-methyl-2-phenylbenzoic acid Chemical compound CC1=C(C(=C(C=C1)C(=N)N)C2=CC=CC=C2)C(=O)O NMIJQVGEQUAMTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001999 4-Methoxybenzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1OC([H])([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- FUWREDLHIUFGIA-UHFFFAOYSA-N 4-acetamido-4-carbamimidoyl-2-phenylcyclohexa-1,5-diene-1-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)NC1(CC(=C(C=C1)C(=O)O)C2=CC=CC=C2)C(=N)N FUWREDLHIUFGIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VGCVGWCATXMJPC-UHFFFAOYSA-N 4-butyl-4-carbamimidoyl-2-phenylcyclohexa-1,5-diene-1-carboxylic acid Chemical compound CCCCC1(CC(=C(C=C1)C(=O)O)C2=CC=CC=C2)C(=N)N VGCVGWCATXMJPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VRJWMZFTJMHQJF-UHFFFAOYSA-N 4-carbamimidoyl-2-methoxy-3-phenylbenzoic acid Chemical compound COC1=C(C=CC(=C1C2=CC=CC=C2)C(=N)N)C(=O)O VRJWMZFTJMHQJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KOVBSYHWYZUXQZ-UHFFFAOYSA-N 4-carbamimidoyl-3,4-dimethyl-2-phenylcyclohexa-1,5-diene-1-carboxylic acid Chemical compound CC1C(=C(C=CC1(C)C(=N)N)C(=O)O)C2=CC=CC=C2 KOVBSYHWYZUXQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RERGZUQQJQQETF-UHFFFAOYSA-N 4-carbamimidoyl-4-ethoxy-2-phenylcyclohexa-1,5-diene-1-carboxylic acid Chemical compound CCOC1(CC(=C(C=C1)C(=O)O)C2=CC=CC=C2)C(=N)N RERGZUQQJQQETF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HITZTFCPBZDCCV-UHFFFAOYSA-N 4-carbamimidoyl-4-methoxy-3-methyl-2-phenylcyclohexa-1,5-diene-1-carboxylic acid Chemical compound CC1C(=C(C=CC1(C(=N)N)OC)C(=O)O)C2=CC=CC=C2 HITZTFCPBZDCCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BBYDXOIZLAWGSL-UHFFFAOYSA-M 4-fluorobenzoate Chemical compound [O-]C(=O)C1=CC=C(F)C=C1 BBYDXOIZLAWGSL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000013 Ammonium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- JPIXEHZJYIUJPE-UHFFFAOYSA-N C(N)(=N)C1(C(C(=C(C(=O)O)C=C1C)C1=CC=CC=C1)C)OC Chemical compound C(N)(=N)C1(C(C(=C(C(=O)O)C=C1C)C1=CC=CC=C1)C)OC JPIXEHZJYIUJPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282465 Canis Species 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N Cinnamic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N 0.000 description 1
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282324 Felis Species 0.000 description 1
- 101710196208 Fibrinolytic enzyme Proteins 0.000 description 1
- 101000605403 Homo sapiens Plasminogen Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 description 1
- ZYQDEQFTXCPPJR-UHFFFAOYSA-N NC(=N)C1=CC=C(C(O)=O)C(C=2C=CC=CC=2)=C1 Chemical compound NC(=N)C1=CC=C(C(O)=O)C(C=2C=CC=CC=2)=C1 ZYQDEQFTXCPPJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 108010001014 Plasminogen Activators Proteins 0.000 description 1
- 102000001938 Plasminogen Activators Human genes 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 208000010378 Pulmonary Embolism Diseases 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000002262 Thromboplastin Human genes 0.000 description 1
- 108010000499 Thromboplastin Proteins 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 150000001262 acyl bromides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001263 acyl chlorides Chemical group 0.000 description 1
- 125000004423 acyloxy group Chemical group 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 125000005236 alkanoylamino group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 229960002684 aminocaproic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000012538 ammonium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 230000003444 anaesthetic effect Effects 0.000 description 1
- 229940071248 anisate Drugs 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001174 ascending effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 239000002981 blocking agent Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- YYXYBWIDIWTCGS-UHFFFAOYSA-N chembl363685 Chemical compound NC(=N)C1=CC=C(O)C=C1 YYXYBWIDIWTCGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009918 complex formation Effects 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- UKJLNMAFNRKWGR-UHFFFAOYSA-N cyclohexatrienamine Chemical group NC1=CC=C=C[CH]1 UKJLNMAFNRKWGR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 125000000118 dimethyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N dimethylformamide Substances CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L disodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC([O-])=O PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 210000003191 femoral vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000020764 fibrinolysis Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical group 0.000 description 1
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 1
- 229940106780 human fibrinogen Drugs 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M monosodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M 0.000 description 1
- 235000013923 monosodium glutamate Nutrition 0.000 description 1
- 125000001038 naphthoyl group Chemical group C1(=CC=CC2=CC=CC=C12)C(=O)* 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical group 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 239000003495 polar organic solvent Substances 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000011045 prefiltration Methods 0.000 description 1
- 230000000019 pro-fibrinolytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229940073490 sodium glutamate Drugs 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000008227 sterile water for injection Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000009424 thromboembolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002537 thrombolytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/315—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Streptococcus (G), e.g. Enterococci
- C07K14/3153—Streptokinase
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/99—Enzyme inactivation by chemical treatment
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Description
Komplex p-anisoyl streptokináza/plasminogenproťťrepfey $
Oblast techniky
ΑΛ3Γ90VAZ3TVÍ»ζ»Λ úhdávgn ————·—— 2 6 i! L 0
Vynález se týká derivátů enzymů, zvláště derivátůjakti-vačního enzymového komplexu streptokináza/plasminogen používa-né k léčbě venozní trombózy. . ji 9 8 6 9 0 0
Dosavadní stav techniky ,r„
ϊ
Je obecně známo, že komplexy tvořené streptokinázou a en-zymem plaminogenem lze použít jako, trombolytické látky přiléčbě venozní trombózy. Inaktivním prekurzdřem fibrinolytické-ho· enzymu plasminu je plasmatickýy^-globulin plasminogen.Streptokináza je sekrečnim produktem hemolytických streptokokůa lze ji získat levně ve velkých množstvích. Smísením strepto-kinázy a plasminogenu vznikne dvousložkový komplex,kde jsouobě látky vzájemně vázány velmi silnou nekovalentní vazbou.Později dojde ke konformačním změnám v plasminogenové kompo-nentě a odkrytí katalytického místa s proteolytickou aktivi-ítou. Tím_šBrozštěpí peptidická vazba nejdříve u streptokiná-zové komponenty a druhotně také u plasminogenu z něhož vznikáplasmin. Výsledný komplex, který se volně označuje jako "strep-tokináza/plasminogenový komplex” je v podstatě komplexem frag-mentů streptokinázy a plasminu. V současné době není známažádná metoda jak izolovat počáteční dvousložkový komplex strep-tokinázy a plasminogenu s katalytickými místy předtím než doj-de k rozštěpení vnitřní peptidické vazby, protože se jednáo komplex, který je velmi labilní a okamžitě se rozkládá.
Tento komplex byl však prokázán tím, že katalytická místa bylablokována přidáním acylační látky p-nitrophenyl p'-guanidino-benzoátu ke směsi streptokinázy a plasminogenu / viz D KMcUlintock a P H Bell, Biochem Biophys Res Uomm 43, 694-702,1979/. - 2 V Evropské přihlášce vynálezu č. 79301773*2 byly popsányderiváty fibrinolytických enzymů, jejichž katalytická místa profibrinolytickou aktivitu byla blokována pomocí skupiny, kterou,bylo možné za určitých okolností odstranit hydrolýzou. Jednímz vyhovujících enzymů byl komplex streptokináza/plasminogen.Protože tento komplex vzniká nejdříve smísením streptokinázya plasminogenu^ a následným blokováním katalytických míst, pakprodukt popsaný v patentu je blokovaná forma "komplexu strep-tokináza/plasminogen”, tedy blokovaná forma komplexu rozštěpe-né streptokinázy a plasminu.
Nyní bylo zjištěno, že blokovaný derivát původního dvou-složkového komplexu streptokinázy a plasminogenu lze izolovattak, že při jejich smísení se přidá v nadbytku blokující látka.Tento komplex si podrží svou trombolytickou aktivitu, navíc jehomogenější, účinnější a tvorbu komplexu je snazší sledovatnež u vynálezu popsaného v Evropské přihlášce vynálezu č.7930177 *2.
Podstata vynálezu
Vynález popisuje vznik enzymatického derivátu skládající-,ho se z dvousložkového komplexu streptokinázy a plasminogenu.Tento komplex má katalytická místa nezbytná pro fibrinolytic-kou aktivitu blokována skupinou, kterou lze odstranit tak, žerychlostní konstanta reakce pseudo-prvého řádu pro hydrolýzu derivátu je v rozsahu 1 O^sW"1 až 10 ^s^| ' v izotonickéms o vodném prostředí při pH 7,4 a 37 C, za předpokladu, že skupi-na, která blokuje katalytická místa?není ze skupiny p- guanidinobenzoylu.
Jak bylo uvedeno shora, McClintock a Bell použilip-guanidinobenzoylovou skupinu k acylaci původního komplexustreptokinázy a plasminogenu. Výsledný blokovaný derivát vzniklaž při titraci aktivních míst komplexu. Nebyla popsána izolacetohoto derivátu. Rovněž nebylo předpokládáno použití těchtoblokovaných derivátů jako fibrinolytik. V souladu s těmito poznatky, další výhled tohoto vynálezu byl izolovat enzymatický derivát dvousložkového komplexu strep-tokinázy a plasminogenu, kde by katalytická místa nezbytná profibrinolytickou aktivitu byla blokována skupinou, kterou lzeodstranit hydrolýzou tak, že rychlostní konstanta reakcepseudo-prvého řádu pro hydrolýzu derivátu je v rozsahu 1ste^f až 1 0 3s^ v izotonickém vodném médiu při pH 7,4 a37 °C.
Streptokinázová komponenta použitá v tomto vynálezu jenativní nefragmentováná streptokináza o molekulové hmotnostikolem 47 000."Komplex streptokináza/plasminogen" obsahovalfragmentovanou streptokinázu o molekulové hmotnosti menší než40 000.
Charakteristickým rysem derivátu v tomto vynálezu je, žepři redukci a elektroforetické analýze za přítomnosti natriumdodecyl^sulfátu lze stanovit pouze dva polypeptidové řetězce,jeden odpovídající streptokinéze o molekulové hmotnosti kolem47 000 a druhý odpovídající plasminogenu. V rozporu s tímtozjištěním, shora uvedený "komplex streptokináza/plasminogen"vykazoval nejméně tři polypeptidické komponenty, z nichž jed-na odpovídá streptokinázovému fragmentu o molekulové hmotnostiméně než 40 000 a další lehkému a těžkému řetězci plasminu.
Pro přípravu derivátu v tomto vynálezu byl použit libovol-ný plasminogen, který je schopen tvořit bimolekulární komplexse streptokinázou, například lidský, kočičí, psí nebo králičí.Jako nejvhodnější se jevil lidský plasminogen. Základní vlastností chránící skupiny pro katalytická mís-ta derivátu v našem vynálezu je její odstranitelnost pomocíhydrolýzy , kde rychlostní konstanta reakce pseudo-prvníhuřádu není menší než 1a není větší než l0-3sfe^ Ί.Nejvhodnější rychlostní konstanta je v rozmezí 10 ag 10 3’s^q 1.
Jestliže mají deriváty rychlostní konstantu větší než10’3s^”1 uvolňují neúměrně více volnéh^yrdÉž^ se může vázat nafibrin. Jestliže deriváty naopak mají rychlostní konstantumenší než 10”^sft|”^ uvolňují enzym příliš pomalu na to, abydošlo k jakémukoli klinickému použití. >1 - 4 -
Tento vynález se zabývá deriváty určenými jak k léčebné-mu, tak k profylaktickému použití. Pro účely profylaxe jsoupreferovány deriváty s. pomalou rychlostí hydrolýzy a z tohoplynoucím delším poločasem. Deriváty vhodné pro tento účel měly rychlostní konstantu reakce pseudo-prvého řádu hydrolýzy v roz- —5 -5—1 * mezí 5x10 J až 1 0 sf-y a poločas od 3^5 do 16 hodin. Proterapeutické účely byly vhodnější deriváty, které se.rychleji hydrolyzovaly, například preparát o rychlostní kons.tantě pro -4 -5 -1 hydrolýzu pseudo-prvého řádu v rozmezí 5x10 až 7x10 sp-y ,což odpovídá poločasu asi 30 minut až dvě hodiny.
Rychlostní konstanta pseudo-prvého řádu byla stanovenahydrolýzou enzymového derivátu za fyziologických podmínek, toznamená v izotonickém vodním prostředí při pH 7;4 a při 37 °C. V pravidelných Intervalech byly odebírány podíly,-inkuboványs chromegenním nebo fluorogenním proteázovým substrátem jakoje S-2251 / H-D-val-leu-lys-p-nitroanilid 2HC1/ a byla měřenarychlost konverze substrátu.
Hydrolýza byla měřena do doby, kdy rychlost konverze sub-strátu dosáhla maxima. Rychlostní konstanta k byla pak vypoč- ·tena vynesením do grafu: l0«e / 1 - At/Amslr/ proti t kde Afflax je maximální rychlost přeměny určitého podílu substrá-tu a je rychlost přeměny určitého podílu substrátu v čase t.Mezi vhodné skupiny, které chránily katalytická místa patří acylové skupiny jako je benzoyl, akryloyl nebo substi-tuované skupiny akryloylové. Rychlostní konstanta pro hydro-lýzu psaudo-prvého řádu pro kterýkoli enzymový derivát substi-tuovaný benzoylem byla stanovena na základě Hammettovy hodnoty (Τ'· Stanovovala se najednou rychlostní konstanta pseudo-prvé-ho řádu pro dva a více substituovaných benzoylových derivátůa předpokládalo se, že nedochází k žádné zvláštní interakcimezi jednotlivými substituenty a enzymem. Všeobecně se uznává, že Hammettovy hodnoty pro meta a pa-ra substituenty //Ta / poskytují přijatelnou predikcirychlosti hydrolýzy. Navíc hodnoty a ve svém součtu - 5 - umožňují se značnou přesností vypočítat kinetické vlastnostidalších substituovaných benzoylových skupin,zvláště, když seječná o více substituentů. Hammettovy hodnoty pro orto substi-tuenty /(7^/ nelze sčítat s takovou spolehlivostí jako (j^a (fc hodnoty pro jejich sterický efekt. Jestliže se však jed-ná o malý orto substituent, jehož sterický efekt je zanedbatel-ný, např. u methyl a methoxy fluorid, kde (Γ'θ hodnota je v rám-ci všeobecně přípustné chyby a lze ji použít samotnou, nebo veoučtu s (T^ anebo s (F^ hodnotami při výpočtu rychlosti reak-ce .
Podle uvedených omezení je nejvhodnější chránící skupinoupro vynález taková substituovaná benzoylová skupina, kde nafenylovém kruhu je ječen nebo více substituentů, zvláště v po-loze meta a para a kde součet, Hammettových ^hodnot je v rozsa-hu .0,1 — 1,1.
Do_vhodných benzoylových a substituovaných benzoylovýchskupin patří benzoyl, podle volby substituovaný halogenem, C-j _galkylem, _g alkoxylem, alkanoyloxylem, C, alkanoylami- nem /RCONH-/. Do této skupiny patří benzoyl, p-fluorobenzoyl,o-, m- nebo p-toluoyL, o-, m- nebo p-methoxybenzoyl /anisoyl/,o-, m- nebo p-ethoxybenzoyl, 2,4-dimethoxybenzoyl, 3>4 di-methoxybenzoyl, 4-butylbenzoyl, 3-methyl-4-methoxybenzoyl,o-acetoxybenzoyl /acetylsalicyloyl/ a p-acetaminobenzoyl. Dalšíaromatickou skupinou je naftoyl. Výjimkou z tohoto všeobecného pravidla je případ, kdy bentrzoylová skupina obsahuje aminovou, dimethylaminovou a guanidi-novou složku. Rychlost hydrolýzy u takových derivátů je vícenež desetkrát pomalejší než vypočítaná hodnota.
Jinou skupinou, která by mohla být vhodně použita ve vy- *nálezu akryloyl samotný nebo substituovaný, zvláště skořicovásilice samotná nebo substituovaná^edním nebo více substituenty,zvláště meta nebo para substituenty, kde součet Hammettových (^hodnot je v rozsahu -1.0 až +0.15> vzhledem k omezením uvedeným nahoře.
Mezi vhodné substituované afcryloylové skupiny patří C, alkyl-akryloyl, skořicová silice, alkyl-skořicové silice. - 6 -
Zvláštní případy představují 3,3-dimethylakryloyl, 2-furyl-“3-el^ryloyl, skořicová silice a p-methyl skořicové silice.
Derivát uvedený v tomto vynálezu byl připraven smísenímstreptokinázy s plasminogenem za přítomnosti chránících látekpodle vzorce A-B nebo podle vzorce E-F; kde A je skupina selek-tivní pro katalytická mí sta, nezbytná pro fibrinolytickou akti1··vitu. Skupina B je odstupující skupina, která má za účel pře-nos skupiny A na katalytické místo a urychlení vazby této sku-piny na enzym. Skupina E určuje polohu agens na katalytickémmístě a skupina F je odpovědná za přenos na katalytické místo,čímž lze dosáhnout volitelnou izolaci derivátu.
Použití agens A-B představuje přímou chránící metodu. Látky působící tímto způsobem jsou známy. Jedním příkladem jep-hitrofenyl- p 'guanidinobenzoát. Guanidinobenzoylová část jeselektivně situována v těsné blízkosti katalytického místa ajejí navázání je podporováno p-nitrofenylovou odstupující sku-pinou.
Použiti agens E-F představuje nepřímou chránící metodu.Příklady skupiny E zahrnují p-aminofenyl a p-acetamidinofenylnebo strukturálně stejně substituované fenylové skupiny obsa-hující pozitivně nabitou část v pozici meta nebo para. Příklady inverzně chránících látek jsou: p-amidinofenyl^,p '«fluorobenzoát, p-amidinofenyl'p ítoluát, p-amidinofenyl-píani-sát, p-amidinofenyl^benzoát, p-amidinofenyl_skořicové silice, ·p-amidinofenyl p 'methyl-skořicové silice, p-amidinofenyl~3-/2-furyl/-akrylát, p-amidinofenyL'2-naftoát, p-amidinofenyl'3,3-dimetylakrylát, p-amidinofenyl-4-butyl^benzoát, p-amidinofenyl — 2,4-dibenzoát, p-amidinofenyl_^acetylsalicylát, p-amidinofenyl- 4-ethoxybenzoát, p-acetamidinofenyl-d "-anizát, p-amidinofenyl-o-toluát, p-amidinofenyl—o-anizát, p-amidinofenyl-3,4-dimethyl-benzoát, p-amidinofenyl-3-methy1-4-methoxy^benzoát a p-amidino-fenyl"4-acetamidobenzoát.
Je vhodné,, aby přímá i invérzní chránící reakce probíhalav pufrovaném vodním prostředí při pH, které není škodlivé en-zymu, chránící látce nebo produktu, což je pH od 6 do 9, nej-lépe kolem ptt 7· - 7 -
Reakce se většinou provádí tak, že se nejdříve smísí chrá-nící látka budí se streptokinázou nebo plasminogenem a pak sepřidají další komponenty. Molární koncentrace streptokinázy byměla být přibližně stejná jako molární koncentrace plasminogenu.U většiny chránících látek je poměr chránící látky ke strepto-kináze 100-násobek molární^o základu, přičemž je nejvhodnější250-ti násobný přebytek. U některých zvlášt reaktivních inverz-ních nebo přímých chránících látek, jako je p-nitrofenyl-pguanidinobenzoát lze použít i nižší molární poměr.
Chránící reakce lze provádět při mírných teplotách, to jeod 0 °C do 20 °C.
Doba trvání reakce závisí na použitém chránícím reagensa na teplotě za které reakce probíhá. Vhodná doba je od 0.5 do1 hodiny při 0 °C, ale je možné nechat reakci probíhat i déle.
Po ukončení reakce je derivát purifikován standardnímimetodami jako je dialýza, afinitní chromatografie a ultrafil-trace a dále zpracována standardními metodami jako je odpařová-ní vodního média. Je-li to nezbytné, může být materiál upravennapříklad sterilizací pro intravenozní použití u lidí. U inver^žních chránících látek typu E-F, kde E je představováno p-ami-dinofenoxylem a F acylovou skupinou lze postupovat tak, že sepřipraví acylovaná sůl p-hydroxybenzamidinu:s acylačním derivá-tem o vzorci F-X, kde F je shora popsáno a X je hydroxyl nebojeho aktivovaný derivát za volitelné přítomnosti katalyzátoru.Příklad aktivovaného acy lační ho derivátu je acyl__chlorid neboacyl bromid. Tyto deriváty lze připravit standardními metoda-mi .
Vhodné katalyzátory pro tento proces představují terciár-ní organické báze jako například pyridin a kondenzační látkupředstavuje například dicyklohexylkarbodiimid.
Acylační reakce probíhají obvykle v polárním organickémrozpouštědle, které je inertní k reagenciím i k produktu.Ν,Κ-dimethylformamid a dimethylsulfoxid jsou příklady vhodnéhorozpouštědla. Jestliže je katalyzátor tekutina, jako tomu jev případě pyridinu, pak může reakce probíhat za nepřítomnostirozpouštědla. - 8 -
Reakce je prováděna většinou za mírné teploty, to znamenápři méně než 70 Ca všeobecně při méně než 40 C; přičemž jenejvhodnější okolní teplota.
Doba potřebná pro ukončení reakce závisí od specifickýchreagens, jež byla použita, od rozpouštědla a od teploty za kte-ré reakce probíhá. Dobu lze stanovit, když sledujeme reakcinapříklad pomocí chromatogtsfie na tenké vrstvě.
Když je reakce ukončena, produkt je regenerován a čištěnstandardními pastupy..
Vynález se dotýká rovněž farmaceutického složení,jež za-hrnuje farmaceuticky přijatelný nosič spolu s enzymatickým de-rivátem^ představovaným dvousložkovým komplexem streptokinázya plasminogenu. Tento komplex má katalytická místa nezbytnápro fibrinolytickou aktivitu chráněna skupinou, jež je odstra-nitelná hydrolýzou, kde rychlostní konstanta reakce pseudo-prvého řádu pro hydrolýzu je v rozsahu 10“^ až 10 v izotonickém vodním prostředí při pH 7*4 a při teplotě 37 °C.
Složení uvedené ve vynálezu je vyjádřeno, v souladu s běž-ným postupem u farmaceutických sloučenin upravených pro intra-venozní podání lidem.
Charakteristické složení pro intravenozní podání představí/’je roztok sterilního derivátu v sterilním izotonickém vodnímpufru. Jestliže je to nezbytné, sloučenina může obsahovat takésolubilizační činidlo zajištující rozpustnost derivátu a takéanestetikum, jako je například lignákain, za účelen sníženíbolestivosti·, v místě vpichu. Enzymatický derivát je většinoudodáván v balení po jednotlivých dávkách, bud jako suchý prá-šek, nebo jako bezvodý koncentrát, jež je hermeticky zatavenv obalu v podobě ampulí nebo sáčků s označením množství enzy-mu v jednotkách aktivity, spolu a indikací a dobou v průběhukteré se enzym uvolní. V případě, že by derivát měl být podánv infuzi, je dodáván s * infuzní láhví obsahující sterilní"^fodu pro injekci". Pokud by se derivát měl podávat injekčně,pak^dodáván spolu s ampulí sterilní vody pro injekci. Injekční,nebo infuzní roztok se připraví smísením ingrediencií předpodáním. wxstuuKUxjn..'«v-. - 9 -
Množství podaného materiálu závisí od toho, jak velká fi-brinolýza je požadována a od rychlosti, kterou by měla probí-hat a také od závažnosti tromboembolických podmínek, tedy odpolohy a velikosti sraženiny. Například, u pacienta s pulmonál-ní embolií, nebo u pacienta s velkým^ život ohrožujícím stoupa-jícím ileo-femorálním trombem, bude nutné podat velké množstvírychle působícího materiálu. Pokud by však, na druhé straně,bylo potřeba preventivně zabránit tvorbě trombů po operaci, sta-čí malé dávky pomalu působícíhoo materiálu. 0 velikosti dávkya způsobu podání rozhodni lékař odpovědný za léčtfu. Nicméně,pacient léčený pro trombus střední velikosti bude,obecně dos-távat denní dávku od 0^10 do 1 0 mg kg ve?iy těla v injekcíchdo počtu osmi dávek anebo infuzí. V porovnání s jinými trombo-lytickými látkami má derivát uvedený v tomto vynálezu výhoduv tom, že ho lze podávat spíše v injekci než v kontinuálníinfuzi a že lze vystačit s jednou nebo dvěma injekcemi za den. Příklady provedení vynálezu Příklad 1 Příprava lyofyiizovaného komplexu streptokináza/plasminogenbez rozštěpení vnitření peptidické vazby
Streptokináza / 250,000 jednotek, Kabi, Stockohlm, Sweden/byla rozpuštěna v 0ř1 M hydrochloridu trishydróxymethy lmethanuo pH 7>4 / 2j5 ml/ a byl přidán roztok 0t1 M p-amioíóu.0 pz-anisátu v dimethylsulfoxidu / 0.25 ml/. Vznikla mírná sra-ženina. K této směsi bylo přidáno 0.5 ml roztoku lidského lys- >plasminogenu /8.99 mg/ml ve shora uvedeném pufru/ /Kabi,Stockholm/ a došlo k důkladnému a rychlému smísení. Poté, cobyl roztok zchlazen na ledu po dobu 15 minut, byl uskladněnna ledu do doby dalšího použití. Po asi 2 hodinách bylo 0^4 ml/40,000 j./ materiálu rozpuštěno v 3;0 ml suspenze L-lysin-sepharosa 4B / 33 g/1 00 ml suspenze ve shora uvedeném pufru/a roztok uložen po dobu 1 hodiny do teploty 0 C. Gel byl od- - 10 filtrován v nálevce ze slinutého skla při 4 °C a odsáván, dálepromyt pufrem /100 ml/. Gel byl eluován mírným odsáváním sestejným pufrem obsahujícím 0^1 M £-aminokapronové kyseliny/3 dávky po 5 ml/. Chemicky vázaný filtrát byl dialyzován podobu 2 hodin při 4 °C v pufru s amohiem bikarbonátem /50 mM,pH 7^0/ obsahujícím 2^5 g manitolu na 100 ml. Produkt byl paklyofilizován na 0^799 g pevné bílé látky. Přibližně 195 g to-hoto materiálu bylo analyzováno pomocí gelové elektpoforézys' vrstvou gelového polyakrylamidu, kde bylo celkem 10% suchéhmotnosti gelů. Tato elektroforéza proběhla za přítomnosti do-decyl sulfátu sodného. Byly pozorovány dva hlavní polypeptó-vé pruhy, jeden odpovídající lys-plasminogenu /molekulováhmotnost 84 000/ a streptokinázový pruh /m.h. 47 000/. Bylarovněž pozorována stopa odpovídající příměsi lidského sérovéhoalbuminu z komerčního přípravku streptokinázy. Příklad 2 Příprava farmaceutické, lyoj?|p.izované směsi obsahující aktivač-ní komplex p-anisoyl-/streptokináza-plasminogen/
Roztok Oj 03 M fosforečnanu sodného a 0,12 M glutamátusodného o pH 7^5 obsahující streptokinázu / 9·95 mg/ml v uve-dených roztocích, kde celkový objem byl pak 45»4 ml/, byl smí-šen s lyšin/manitolovým pufrem /110 ml/ při pH 7·0 a se steril-ním gylcerolem /60 ml/ a míchán po dobu 5 minut za teploty 4°C.Po dobu 2 min* byl přidávván sterilní filtrovaný roztok p-amidi-nofenyl pzanisátu v DMSO / 15 ml, 20 mM/ a míchán po dobu 5 mi-nut. Po dobu 2 minut byl přidáván lidský plasminogen / 71 ml, 11 ,4 mg/ml - Kabi, Stockholm/ a směs se míchala 60 min^ při4 °C. Dále byl do směsi přidán lidský sérový albumin /klinickášarže/ /18^9 ml roztoku o 20 g na 100 ml/ a tato směs se mí-chala 2 minuty při 4 °C. Po přidání lysin/manitolového pufruobsahovala reakční nádoba až 400 ml tekutiny. Tekutina bylafiltrována v průběhu 2 1/2 hodiny při 18 °C až bylo dosaženo2400 ml filtrátu. Tekutina byla profiltrována přes sterilnímateriál Millipor o průměru 14 cm a s průměrem otvorů 0.22 /i hv - 11 /za použití hrubého předfiltru/ a převeden do sterilního re-zervoáru. Jednotlivé podíly po 5,0 ml byly rychle rozděleny dosterilních lahviček o obsahu 20 ml, opatřeny dvoustupňovýmuávěrem. a zmraženy nebo lyofilizovány při -40 °C. Lyofilizaceprobíhala po dobu nejméně 24 hodin, uzávěry by3yuzavírányve sterilním Ng a zataveny.
Složení každé lahvičky tylo následující: aktivační komplex p-anisoyl-/st,reptokináza-plásminogen/: 4-6 mg L-lysin HC1: 22.8 mgD-mannitol: 50 mgp-amidinofenyl pzanisát : < 50^ugchlorid sodný: stopa . Příklad 3
Podobně jako u příkladu 1, s tím rozdílem, že místo p-amidino-fenyl-p'ani sátu bylapoužitdpr.amidinofenyl-3-methyl, 4-methoxy —benzoová kyselina pro přípravu aktivačního komplexu 3-methyl, 4-methoxybenzoyl-/streptokináza-plasminogerví Příklad 4 Příprava lyodklizovaného komplexu 3,5-dimethyl 4-methoxy ben-zoyl streptokináza/plasminogen bez štěpení vnitřních peptidic-kých vazeb.
Streptokináza / 20 ml roztoku připraveného rozpuštěním3^58 mg streptokinázy na 1 ml 0^03 M fosforečnanu sodného a0^12 M glutamátu sodného o pH 7^5/ byl^smísena^ glycerolem/20 ml/ a míchánajpo dobu 5 minut při teplotě 4 °C . Pak bylapřidána p-amidinofenyl-3,5-dimethyl-4-methoxy_benzoová kyseli-na HC1 /2ψ7 mg/ v dimethylsulfoxidu / 3j0 ml/ a přidána kesměsi, míchána po dobu 5 minut při teplotě 4 °C. Lidský lys-plasminogen / 144 mg v 25 ml, 20 mM L-lysin HCl, Ig D-manni-tolu na 100 ml, o pH 7^0/ byl dále přidán ke směsi a 2 hodinymíchán při 4 °C. Pak byl přidán lidský sérový albumin / 3ml^ 20 g na 100 ml rozpuštěného ve vodě/, celá směs pak byla zře- - 12 děna na 250 ml lysin/manitolovým pufrem a filtrována po dobu2 1/2 hodináři 4 °C, dokudnebylo dosaženo 1130 ml filtrátu.Při lyofilizaci zbytkového roztoku vzniklo 3y0l8 g bílého prášku, který po deacylaci obsahoval 23^5 jug/^g volného aktiváto-ru.
Biologické údaje:
Králík s radioaktivně označenou sraženinou ve véna cavainferior sloužil ke srovnání systémového podání preparátů:derivátů připravených podle příkladu 1 až 3; p-anisoylového derivátu známého **komplexu streptokináza/plasminogen" připrave-ného podle příkladu 22 Evropské přihlášky vynálezu č.79301773*2 a nemodifikovaného aktivačního, komplexu streptoki-náza/plasminogen. Na rozdíl od metody použité v Evropské při-hlášce vynálezu byl trombus zachycen vlněným vláknem místokonstrikční ligaturou. V tabulce č. 1 jsou uvedeny průměrné hodnoty lýze stanovéné na různém počtu zvířat:
Tabulka 1
Počet Průměrnázvířat lýze /%/ 1 . Kontroly, které dostaly fyzidLogický 8 roztok 2. Nemodifikovaný aktivační komplex střep- 6tokináza-plasminogen připravený.v ekvi-molárních množstvích obou proteinů při 0°C a 10 min. a podáván ihned 3. Nemodifikovaný komerční aktivační komplex cstreptokináza-plasminogen /Behringwerke/ ? 4. Aktivační komplex p-anisoyl-/streptokiná- 5za-plasminogen/ a rozštěpenou vnitření pep-tidickou vazbou připravený podle příkladu 22 EU 79301773.2 5. Aktivační komplex p-anisoyl-/streptokináza- 5plasminogen/ s nerozštěpenou vnitřní pepti-dickou vazbou připravený podle příkladu 1 20 ~ 4 14 + 4 24+8 42+6 - 13 - pokračování tabulky 1
Počet zvířat Průměrnálýze /%/ 6. Podle příkladu 2 připravený lyofilizo- 13 41+6 váný aktivační komplex p-anisoy.l-yfetrep- tokináza-plasminogen/ • 7. Podle příkladu 3 připravený aktivační 5 29 + 5 komplex 3-methyl, 4-methoxy-benzoyl- /streptokináza-plasminogen/
Uvedené výsledky ukazují, že za použití tohoto experi-mentálního uspořádáni jsou deriváty vyrobené podle příkladu1 a 2 skoro dvakrát více účinné v rozpouštění trombů,než de-riváty připravené blokováním fragmentovaného komplexu strep-tokináza/plasmin. Z tabulky 1 je rovněž patrné, že deriváty aktivačníhokomplexu streptokináza-plasminogen, jež mají aktivní místaacylo.vána, jsou účinnější než jejich nemodifikované protějšky,a to i v případě, že nemodifikované komplexy jsou připravenyco nejčerstvější.
Pro testování fibrinolytických látek bylo vytvořeno dru-hé experimentální uspořádání, kde se trombus vytvořil kolemvlněného vlákna upevněného ve femorální véně psů rasy beagle.
Po uvolnění ligatúry se pomocí venozní kanyly odsála krev1 25 z venozníhos segmentu a byla označena pomocí na lidském fibrinogenu /viz Evropská přihláška vynálezu č. 79301773·2/a pak spolu s králičím mozkovým tromboplastinem vpravenado segaentu, odkud byla odebrána. Po vzniku sraženiny bylaligatura odstraněna a výsledný radioaktivně značený okluziv-ní trombus byl upevněn pomocí nití. Tabulka 2 shrnuje výsled-ky léčby těchto psů různými fibrinolytickými látkami. Koneč-ná lýza byla stanovena radiochemicky po excizi zbylého trombu - V4 - na konci pokusu. Z tabulky 2 je patrné, že p-anisoyl strepto-kináza-plasminogenový komplex připravený ve vynálezu vedvou dávkách^íčinnější, než ve stejných dávkách podaný nemo-difikovaný a čerstvě připravený aktivační komplex.
Chemické údaje
Tabulka 3 podává zdánlivé konstanty prvního řádu prodeacylaci aktivních míst substituovaného aktivačního komplexustreptokináza-plasminogen při 37 °CapH 7^4 · Z tabulky jezřejmé, že konstanta deacylační rychlosti má vztah k elektro-nové struktuře substituované benzoylové skupiny. V zásadě lzepozorovat, že substituenty, které odebírají elektrony zvyšujírychlost deacylace a skupiny dodávající elektrony tento pro-ces zpomalují.
Tabulka 2
Aktivita enzymových derivátů na modelu venozní trombózy u psa
Enzymatický derivát Lávka Počet Průměrnám.j./kg zvířat lýze /%/ 1. Kontrolní fyziologický roztok - 7 22+10 2. Nemodifikovaný aktivační komplexstreptokináza-plasminogen připra-vený v ekvimolarníchomnožstvíchobou proteinů při 0 C a 10 minx'podávaný ihned 3. Nemodifikovaný aktivační komplexstreptokináza-plasminogen připra-vený v ekvimolárníchomnožstvíchobo,u proteinů při 0 °C a 1 0 min^rpodávaný ihned - 15 pokračování tabulky 2
Aktivita enzymových derivátů na modelu venozní trombózy u psa
Enzymatický derivát Dávka Počet Průměrnám.j./kg zvířat lýze /%/ 4. Podle příkladu 2 připravený akti- 1500 5 * 79 + 14 vační komDlex p-anisoyl-/strepto-kináza-plasminogen/ 5. Podle příkladu 2 připravený akti- 2500 5 85+14 vační komplex p-anisoyl-/strepto-kináza-plasminogen/ 6. Streptokináza 1500 3 24+21
Tabulka 3
Zdánlivé konstanty prvého řádu pro deacylaci aktivních místacylovaných derivátů aktivačního komplexu streptokináza-plas-minogen
Acylová skupin /s^ý ^při pH 7*4 a 37^C
Benzoyl 2- toloyl 4-anisoyl 4-fluorobenzoyl 3- methyl 4-anisoyl 3,5 dimethyl 4- anisoyl 4-nitrobenzoyl 4-chlorobenzoyl 3.5 X 10"4 1 .9 X 10’4 2.9 X 10“4 2.6 X 1 O-4 1 .2 X io-4 1 .6 X 10"4 2.3 X 10“2 2.5 X 10-3
advokátka
Claims (12)
- ^11- 16 PATENTOVÉ NÁROKY • 1. Komplex p-anisoyl > značujícíset peptidické vazby. streptokináza/plasminogen, v y ΛΛ3Γ80V í m, že nemá rozštěpené vnitř‘fKfe3ivr>,,,· 3^dvyn
- 2. Komplex podle nároku 1, vyznačující s' e- θ Z 7 t í m, že uvedený plasminogen je lidský lys-plasminogen.: 5--: i
- 3. Farmaceutický prostředek pro prevenci nebo léčbJ q θ q θtrombózy, vyznačující se tím, že obsahujetrombolyticky aktivní množství komplexu p-anisoyl strepto- " «4 ·4»· TTtr·· kináza/plasminogen s nerozštěpenou vnitrní peptidickou vaz-bou, spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem.
- 4. Farmaceutický prostředek podle nároku 3, v y z n a_čující se tím, že je vhodná pro nitrožilní podání.
- 5. Farmaceutický prostředek podle nároku 3, vyzna-čující se tím, že plasminogen tohoto komplexu je lidský lys-plasminogen.
- 6. Farmaceutický prostředek podle nároku 3, vyznáčující se tím, že je ve formě lyofilizátu.
- 7. Způsob léčby venozní trorfíbozy u pacientů, vyzna-čující se tím, že/še aplikují léčebné nebo profy-laktické dávky bučí komplex*! p-anisoyl streptokináza/plasmi-nogen bez rozštěpených znitřnícn peptidických vazeb, nebo farmakologický prostředek obsahující komplex spolu s farma- / klogicky přijatelným nosičem.
- 8. ZpůsoX podle nároku 7, vyznačujícítím, že/denní dávka pro člověka je 0,10 až 1,0 mg/kgtělesné hmotnosti. s e-1 17
- 9. Způsob podle nároku 7, v y z n/a čující setím, že plasminogenová komponenta Zvěděného komplexuje lidský lys-plasminogen.
- 10. Způsob léčby pacientů á trombozou, v y z n a č ující se tím, že se .aplikuj6 tromboly ticky aktivnímnožství p-anisoyl streptokináza/plasminogenového komplexu,který nemá rozštěpené vnitrní peptidické vazby.
- 11. Způsob podle/nároku 10, vyznačujícíse t í m , že je ι/vedený komplex podáván v injekcích.
- 12. Způsob bodle nároku 10, vyznačující se tím, žy plasminogenová komponenta uvedeného komple-xu obsahuje Lidský lys-plasminogen. Zastupuje:
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB7938279 | 1979-11-05 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS391191A3 true CS391191A3 (en) | 1992-08-12 |
Family
ID=10508982
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS913911A CS391191A3 (en) | 1979-11-05 | 1991-12-19 | Complex of p-anisoyl streptokinase and plasminogen, and pharmaceuticalscomprising thereof |
| CS913919A CS391991A3 (en) | 1979-11-05 | 1991-12-19 | Enzyme derivatives, process of their preparation and pharmaceuticals comprising thereof |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS913919A CS391991A3 (en) | 1979-11-05 | 1991-12-19 | Enzyme derivatives, process of their preparation and pharmaceuticals comprising thereof |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4808405A (cs) |
| EP (1) | EP0028489B1 (cs) |
| JP (1) | JPS5678590A (cs) |
| AR (1) | AR224786A1 (cs) |
| CA (1) | CA1174621A (cs) |
| CS (2) | CS391191A3 (cs) |
| DE (1) | DE3065190D1 (cs) |
| DK (1) | DK158994C (cs) |
| ES (1) | ES8204467A1 (cs) |
| GR (1) | GR72121B (cs) |
| HK (1) | HK65886A (cs) |
| HU (1) | HU185223B (cs) |
| IE (1) | IE50174B1 (cs) |
| IL (1) | IL61408A (cs) |
| NL (1) | NL930029I2 (cs) |
| NO (1) | NO163867C (cs) |
| NZ (1) | NZ195469A (cs) |
| ZA (1) | ZA806641B (cs) |
Families Citing this family (78)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0091240B1 (en) * | 1982-04-07 | 1985-12-27 | Beecham Group Plc | Enzyme derivatives, process for preparing them and pharmaceutical compositions containing them |
| WO1984001960A1 (en) * | 1982-11-11 | 1984-05-24 | Beecham Group Plc | Pharmaceutically active compounds |
| GB8400653D0 (en) * | 1984-01-11 | 1984-02-15 | Beecham Group Plc | Conjugates |
| GB8430253D0 (en) * | 1984-11-30 | 1985-01-09 | Beecham Group Plc | Compounds |
| US5231006A (en) * | 1986-10-16 | 1993-07-27 | Behringwerke Aktiengesellschaft | Method for the determination of plasminogen |
| US5256642A (en) * | 1988-04-01 | 1993-10-26 | The Johns Hopkins University | Compositions of soluble complement receptor 1 (CR1) and a thrombolytic agent, and the methods of use thereof |
| JPH0296536A (ja) * | 1988-09-29 | 1990-04-09 | Green Cross Corp:The | プラスミノゲン乾燥製剤 |
| WO1990013640A1 (en) * | 1989-05-01 | 1990-11-15 | The University Of Notre Dame Du Lac | Methods and materials for expression of human plasminogen in a eukaryotic cell system |
| EP0397366A1 (en) * | 1989-05-09 | 1990-11-14 | The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma | Hybrid streptokinases with fibrin binding domains and methods for the synthesis of same |
| EP0472657B1 (en) * | 1989-05-17 | 1996-03-13 | Research Corporation Technologies, Inc. | Method and composition for the treatment of thrombosis in a mammal |
| AU6470590A (en) | 1989-10-23 | 1991-04-26 | Smithkline Beecham Corporation | Cyclic anti-aggregatory peptides |
| US5190756A (en) * | 1989-12-01 | 1993-03-02 | Genentech, Inc. | Methods and materials for expression of human plasminogen variant |
| US5087572A (en) * | 1989-12-01 | 1992-02-11 | Genentech, Inc. | Dna encoding human plasminogen modified at the cleavage site |
| GB8928163D0 (en) * | 1989-12-13 | 1990-02-14 | Beecham Group Plc | Novel treatment |
| US6458360B1 (en) | 1990-04-25 | 2002-10-01 | The Johns Hopkins University | Soluble complement regulatory molecules |
| US5187069A (en) * | 1990-08-06 | 1993-02-16 | Henry Ford Health System | Active site labelling of plasminogen |
| WO1992018139A1 (en) * | 1991-04-09 | 1992-10-29 | Brigham And Women's Hospital | Chimeric molecule with plasminogen activator activity and affinity for atherosclerotic plaques |
| US5520912A (en) * | 1993-07-02 | 1996-05-28 | Immuno Aktiengesellschaft | Prevention and treatment of ischemic events and reperfusion injury resulting therefrom using lys-plasminogen |
| DE4411143C2 (de) * | 1994-03-30 | 1996-08-01 | Immuno Ag | Thrombosemittel |
| US5760028A (en) * | 1995-12-22 | 1998-06-02 | The Dupont Merck Pharmaceutical Company | Integrin receptor antagonists |
| US6004955A (en) * | 1996-08-15 | 1999-12-21 | Dupont Pharmaceuticals Company | Cyclic carbamates and isoxazolidines as IIb/IIIa antagonists |
| IL133526A0 (en) | 1997-06-19 | 2001-04-30 | Du Pont Pharm Co | Inhibitors of factor xa with a neutral p1 specificity group |
| WO2001009188A1 (en) * | 1999-07-29 | 2001-02-08 | Dyax Corp. | Binding moieties for fibrin |
| US6388073B1 (en) | 2000-07-26 | 2002-05-14 | Shire Us Inc. | Method for the manufacture of anagrelide |
| KR20010000669A (ko) * | 2000-10-12 | 2001-01-05 | 김기환 | 스트렙토키나제와 사람 혈청알부민의 포합체를유효성분으로 함유하는 전신투여용 지속성 혈전 용해제 |
| US6984373B2 (en) * | 2000-12-23 | 2006-01-10 | Dyax Corp. | Fibrin binding moieties useful as imaging agents |
| CN110894196A (zh) | 2001-09-21 | 2020-03-20 | 百时美-施贵宝控股爱尔兰无限公司 | 含有内酰胺的化合物及其衍生物作为Xa因子的抑制剂 |
| US7550499B2 (en) | 2004-05-12 | 2009-06-23 | Bristol-Myers Squibb Company | Urea antagonists of P2Y1 receptor useful in the treatment of thrombotic conditions |
| US20060030574A1 (en) * | 2004-08-04 | 2006-02-09 | Shire Holdings Ag | Quinazoline derivatives useful for the treatment of peripheral arterial disease and as phosphodiesterase inhibitors |
| US7700608B2 (en) * | 2004-08-04 | 2010-04-20 | Shire Holdings Ag | Quinazoline derivatives and their use in the treatment of thrombocythemia |
| CN101137412B (zh) | 2005-01-13 | 2012-11-07 | 布里斯托尔-迈尔斯·斯奎布公司 | 用作凝血因子XIa抑制剂的取代的二芳基化合物 |
| US7645778B2 (en) | 2005-01-19 | 2010-01-12 | Bristol-Myers Squibb Company | Heteroaryl compounds as P2Y1 receptor inhibitors |
| AR056867A1 (es) | 2005-06-27 | 2007-10-31 | Bristol Myers Squibb Co | Antagonistas heterociclicos n- enlazados del receptor de p2y1 utiles en el tratamiento de condiciones tromboticas. composiciones farmaceuticas. |
| ATE485269T1 (de) | 2005-06-27 | 2010-11-15 | Bristol Myers Squibb Co | C-verknüpfte zyklische antagonisten des p2y1- rezeptors mit eignung bei der behandlung thrombotischer leiden |
| WO2007002634A1 (en) | 2005-06-27 | 2007-01-04 | Bristol-Myers Squibb Company | Carbocycle and heterocycle antagonists of p2y1 receptor useful in the treatment of thrombotic conditions |
| US7816382B2 (en) | 2005-06-27 | 2010-10-19 | Bristol-Myers Squibb Company | Linear urea mimics antagonists of P2Y1 receptor useful in the treatment of thrombotic condition |
| JP2009539873A (ja) | 2006-06-08 | 2009-11-19 | ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー | 抗凝固剤として有用な第ＶＩＩａ因子インヒビターとしての２−アミノカルボニルフェニルアミノ−２−フェニルアセトアミド類 |
| US7960569B2 (en) | 2006-10-17 | 2011-06-14 | Bristol-Myers Squibb Company | Indole antagonists of P2Y1 receptor useful in the treatment of thrombotic conditions |
| US8304420B2 (en) | 2006-11-28 | 2012-11-06 | Shire Llc | Substituted quinazolines for reducing platelet count |
| US7910597B2 (en) * | 2006-11-28 | 2011-03-22 | Shire Llc | Substituted quinazolines |
| WO2008076805A2 (en) | 2006-12-15 | 2008-06-26 | Bristol-Myers Squibb Company | Arylpropionamide, arylacrylamide, arylpropynamide, or arylmethylurea analogs as factor xia inhibitors |
| PE20081775A1 (es) | 2006-12-20 | 2008-12-18 | Bristol Myers Squibb Co | Compuestos macrociclicos como inhibidores del factor viia |
| AU2008266228A1 (en) | 2007-06-13 | 2008-12-24 | Bristol-Myers Squibb Company | Dipeptide analogs as coagulation factor inhibitors |
| US20090130017A1 (en) * | 2007-11-19 | 2009-05-21 | Searete Llc | Targeted short-lived drug delivery |
| CA2724430A1 (en) | 2008-05-19 | 2009-11-26 | Schering Corporation | Heterocyclic compounds as factor ixa inhibitors |
| SMT202000093T1 (it) | 2009-06-16 | 2020-03-13 | Pfizer | Forme di dosaggio di apixaban |
| EP2462123B1 (en) | 2009-08-04 | 2013-10-02 | Merck Sharp & Dohme Corp. | 4,5,6-trisubstituted pyrimidine derivatives as factor ixa inhibitors |
| EP2534152B1 (en) | 2010-02-11 | 2018-05-02 | Bristol-Myers Squibb Company | Macrocycles as factor xia inhibitors |
| TW201311689A (zh) | 2011-08-05 | 2013-03-16 | 必治妥美雅史谷比公司 | 作為因子ｘｉａ抑制劑之新穎巨環化合物 |
| TW201319068A (zh) | 2011-08-05 | 2013-05-16 | 必治妥美雅史谷比公司 | 作為ｘｉａ因子抑制劑之環狀ｐ１接合劑 |
| CN103974938B (zh) | 2011-10-14 | 2016-11-09 | 百时美施贵宝公司 | 作为因子xia抑制剂的经取代的四氢异喹啉化合物 |
| IN2014CN02805A (cs) | 2011-10-14 | 2015-07-03 | Bristol Myers Squibb Co | |
| ES2699226T3 (es) | 2011-10-14 | 2019-02-08 | Bristol Myers Squibb Co | Compuestos de tetrahidroisoquinolina sustituidos como inhibidores del factor XIa |
| SG11201401531RA (en) | 2011-11-11 | 2014-07-30 | Pfizer | 2-thiopyrimidinones |
| PE20142164A1 (es) | 2012-04-06 | 2014-12-27 | Pfizer | Inhibidores de diacilglicerol aciltransferasa 2 |
| SG11201500270RA (en) | 2012-08-03 | 2015-03-30 | Bristol Myers Squibb Co | Dihydropyridone p1 as factor xia inhibitors |
| US9409908B2 (en) | 2012-08-03 | 2016-08-09 | Bristol-Myers Squibb Company | Dihydropyridone p1 as factor XIa inhibitors |
| ES2712699T3 (es) | 2013-03-25 | 2019-05-14 | Bristol Myers Squibb Co | Tetrahidroisoquinolinas que contienen azoles sustituidos como inhibidores del factor XIa |
| JP6348582B2 (ja) | 2013-10-09 | 2018-06-27 | ファイザー・インク | プロスタグランジンｅｐ３受容体の拮抗薬 |
| TWI688564B (zh) | 2014-01-31 | 2020-03-21 | 美商必治妥美雅史谷比公司 | 作為凝血因子ｘｉａ抑制劑之具有雜環p2'基團之巨環化合物 |
| NO2760821T3 (cs) | 2014-01-31 | 2018-03-10 | ||
| SG11201606779RA (en) | 2014-03-17 | 2016-10-28 | Pfizer | Diacylglycerol acyltransferase 2 inhibitors for use in the treatment of metabolic and related disorders |
| DK3126330T3 (en) | 2014-04-04 | 2019-04-23 | Pfizer | BICYCLE-FUSED HETEROARYL OR ARYL COMPOUNDS AND USE THEREOF AS IRAC4 INHIBITORS |
| US9969724B2 (en) | 2014-04-16 | 2018-05-15 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Factor IXa inhibitors |
| NO2721243T3 (cs) | 2014-10-01 | 2018-10-20 | ||
| BR112017022340A2 (pt) | 2015-05-05 | 2018-07-10 | Pfizer | 2-tiopirimidinonas |
| BR112017026191B1 (pt) | 2015-06-17 | 2023-10-10 | Pfizer Inc | Compostos tricíclicos inibidores de fosfodiesterase, sua composição farmacêutica e uso dos mesmos |
| WO2016203335A1 (en) | 2015-06-18 | 2016-12-22 | Pfizer Inc. | Novel pyrido[2,3-b]pyrazinones as bet-family bromodomain inhibitors |
| ES2871111T3 (es) | 2015-07-29 | 2021-10-28 | Bristol Myers Squibb Co | Inhibidores macrocíclicos del factor XIa que contienen un grupo P2' no aromático |
| JP6785838B2 (ja) | 2015-08-05 | 2020-11-18 | ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ | 新規な置換グリシン誘導のｆｘｉａ阻害剤 |
| EP3858825A1 (en) | 2015-08-27 | 2021-08-04 | Pfizer Inc. | Bicyclic-fused heteroaryl compounds as irak4 modulators |
| KR20180117156A (ko) | 2016-03-02 | 2018-10-26 | 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 | 인자 XIa 억제 활성을 갖는 디아미드 마크로사이클 |
| AR109179A1 (es) | 2016-08-19 | 2018-11-07 | Pfizer | Inhibidores de diacilglicerol aciltransferasa 2 |
| AU2019329884B2 (en) | 2018-08-31 | 2022-01-27 | Pfizer Inc. | Combinations for treatment of NASH/NAFLD and related diseases |
| EP4578460A3 (en) | 2019-05-20 | 2025-08-27 | Pfizer Inc. | Combinations comprising benzodioxol as glp-1r agonists for use in the treatment of nash/nafld and related diseases |
| CA3189771A1 (en) | 2020-07-22 | 2022-01-27 | Janssen Pharmaceutica Nv | Compounds useful as factor xia inhibitors |
| US20250066337A1 (en) | 2021-08-26 | 2025-02-27 | Pfizer Inc. | Amorphous Form of (S)-2-(5-((3-Ethoxypyridin-2-YL)Oxy)Pyridin-3-YL)-N-(Tetrahydrofuran-3-YL)Pyrimidine-5-Carboxamide |
| WO2024118524A1 (en) | 2022-11-28 | 2024-06-06 | Cerevel Therapeutics, Llc | Azaindole compounds and their use as phosphodiesterase inhibitors |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4178368A (en) * | 1971-09-30 | 1979-12-11 | Behringwerke Aktiengesellschaft | Method for the treatment of thromboembolism |
| JPS5325775A (en) * | 1976-08-24 | 1978-03-09 | Miller Fluid Power Corp | Module type fluid flow control element |
| US4082612A (en) * | 1976-09-24 | 1978-04-04 | Michael Reese Research Foundation | Plasminogen activator complex |
| NZ191320A (en) * | 1978-09-07 | 1982-09-14 | Beecham Group Ltd | In vivo fibrinolytic enzyme having active site blocked by hydrolytically removable group pharmaceutical compositions |
-
1980
- 1980-10-27 DE DE8080303797T patent/DE3065190D1/de not_active Expired
- 1980-10-27 EP EP80303797A patent/EP0028489B1/en not_active Expired
- 1980-10-29 ZA ZA00806641A patent/ZA806641B/xx unknown
- 1980-11-03 GR GR63267A patent/GR72121B/el unknown
- 1980-11-04 IL IL61408A patent/IL61408A/xx not_active IP Right Cessation
- 1980-11-04 AR AR283122A patent/AR224786A1/es active
- 1980-11-04 DK DK468880A patent/DK158994C/da not_active IP Right Cessation
- 1980-11-04 NO NO803304A patent/NO163867C/no unknown
- 1980-11-04 CA CA000363957A patent/CA1174621A/en not_active Expired
- 1980-11-04 IE IE2277/80A patent/IE50174B1/en not_active IP Right Cessation
- 1980-11-05 HU HU802661A patent/HU185223B/hu not_active IP Right Cessation
- 1980-11-05 ES ES496586A patent/ES8204467A1/es not_active Expired
- 1980-11-05 NZ NZ195469A patent/NZ195469A/en unknown
- 1980-11-05 JP JP15573380A patent/JPS5678590A/ja active Granted
-
1986
- 1986-08-29 US US06/902,429 patent/US4808405A/en not_active Expired - Lifetime
- 1986-09-04 HK HK658/86A patent/HK65886A/en not_active IP Right Cessation
-
1991
- 1991-12-19 CS CS913911A patent/CS391191A3/cs unknown
- 1991-12-19 CS CS913919A patent/CS391991A3/cs unknown
-
1993
- 1993-04-22 NL NL930029C patent/NL930029I2/nl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| HK65886A (en) | 1986-09-12 |
| DK468880A (da) | 1981-05-06 |
| DK158994B (da) | 1990-08-13 |
| US4808405A (en) | 1989-02-28 |
| IE50174B1 (en) | 1986-02-19 |
| DE3065190D1 (en) | 1983-11-10 |
| DK158994C (da) | 1991-01-07 |
| IL61408A0 (en) | 1980-12-31 |
| IL61408A (en) | 1983-10-31 |
| EP0028489B1 (en) | 1983-10-05 |
| AU534017B2 (en) | 1983-12-22 |
| IE802277L (en) | 1981-05-05 |
| JPS5678590A (en) | 1981-06-27 |
| NO803304L (no) | 1981-05-06 |
| NL930029I1 (nl) | 1993-06-01 |
| CS391991A3 (en) | 1992-06-17 |
| JPH0316114B2 (cs) | 1991-03-04 |
| ES496586A0 (es) | 1982-05-01 |
| NO163867B (no) | 1990-04-23 |
| NL930029I2 (nl) | 1993-12-01 |
| HU185223B (en) | 1984-12-28 |
| NO163867C (no) | 1990-08-01 |
| NZ195469A (en) | 1984-05-31 |
| AU6401180A (en) | 1981-05-14 |
| AR224786A1 (es) | 1982-01-15 |
| EP0028489A1 (en) | 1981-05-13 |
| ES8204467A1 (es) | 1982-05-01 |
| GR72121B (cs) | 1983-09-16 |
| ZA806641B (en) | 1981-10-28 |
| CA1174621A (en) | 1984-09-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CS391191A3 (en) | Complex of p-anisoyl streptokinase and plasminogen, and pharmaceuticalscomprising thereof | |
| Schulman et al. | Feasibility of using recombinant factor VIIa in continuous infusion | |
| US4337244A (en) | Enzyme derivatives for use in the treatment of venous thrombosis | |
| AU784598B2 (en) | Method of thrombolysis by local delivery of reversibly inactivated acidified plasmin | |
| US6264945B1 (en) | Parenteral use of bacterial phage associated lysing enzymes for the therapeutic treatment of bacterial infections | |
| US4970159A (en) | Human tissue plasminogen activator consisting essentially of t-PA residues 160 to 527 | |
| Smith et al. | Acyl-enzymes as thrombolytic agents in a rabbit model of venous thrombosis | |
| JPH0567278B2 (cs) | ||
| KR20030045013A (ko) | 경구적으로 투여가능한 약제의 전파체로서 작용하는단백질 복합체 | |
| CN1326356A (zh) | 治疗病毒性出血热的方法 | |
| US4507283A (en) | Pharmacologically active compounds | |
| RU2143490C1 (ru) | Бифункциональный вариант урокиназы, плазмида, содержащая синтетический структурный ген, кодирующий бифункциональную урокиназу, плазмида (варианты), способ получения плазмиды, способ получения бифункционального варианта урокиназы, тромболитическое средство | |
| US7063837B2 (en) | Syrup composition containing phage associated lytic enzymes | |
| Sherry | Thrombolytic therapy in acute myocardial infarction: a perspective | |
| JPH07291999A (ja) | 血小板安定化因子ｉｘ−フラグメント、その製造方法及びこれを含有する薬剤 | |
| KR0135980B1 (ko) | 플라스미노겐 액티베이터 및 혈전용해제 | |
| FI67300B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av in vivo fibrinolytiska enzymderivat foer anvaendning vid behandling ventrombos | |
| JP2002529515A (ja) | ヘパリンにより誘発される血小板減少症の処置法 | |
| US5234686A (en) | Human tissue plasminogen activator consisting essentially of t-PA residues to 160 to 527, pharmaceutical compositions and methods of treatment | |
| WO1995033471A1 (en) | Intravasal thrombolysis | |
| JP2002531519A (ja) | 血栓性血小板減少性紫斑病および溶血性尿毒症性症候群の処置法 | |
| JPS61277614A (ja) | 抗プラスミン剤 | |
| WO2012020218A1 (en) | Compositions and methods for inducing platelet aggregation |