CS270420B2 - Method of mucopolysaccharides production with increased antitrombotic activity - Google Patents
Method of mucopolysaccharides production with increased antitrombotic activity Download PDFInfo
- Publication number
- CS270420B2 CS270420B2 CS857467A CS746785A CS270420B2 CS 270420 B2 CS270420 B2 CS 270420B2 CS 857467 A CS857467 A CS 857467A CS 746785 A CS746785 A CS 746785A CS 270420 B2 CS270420 B2 CS 270420B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- mixture
- chains
- usp
- titer
- mucopolysaccharide
- Prior art date
Links
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 title claims description 35
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 32
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 title description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 47
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 22
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 21
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 claims description 19
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 claims description 19
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 claims description 9
- 230000002785 anti-thrombosis Effects 0.000 claims description 8
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 8
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 7
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 7
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 5
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 5
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000011707 mineral Substances 0.000 claims description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 4
- LKAPTZKZHMOIRE-KVTDHHQDSA-N (2s,3s,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolane-2-carbaldehyde Chemical group OC[C@H]1O[C@H](C=O)[C@@H](O)[C@@H]1O LKAPTZKZHMOIRE-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 3
- MCHWWJLLPNDHGL-KVTDHHQDSA-N (2r,3s,4s,5r)-2,5-bis(hydroxymethyl)oxolane-3,4-diol Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MCHWWJLLPNDHGL-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 2
- LKAPTZKZHMOIRE-UHFFFAOYSA-N chitose Natural products OCC1OC(C=O)C(O)C1O LKAPTZKZHMOIRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 2
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 claims description 2
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 claims description 2
- 238000012056 up-stream process Methods 0.000 claims 5
- 125000003158 alcohol group Chemical group 0.000 claims 1
- 230000019635 sulfation Effects 0.000 claims 1
- 238000005670 sulfation reaction Methods 0.000 claims 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 9
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 6
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-N Nitrous acid Chemical compound ON=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 4
- 239000005995 Aluminium silicate Substances 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 230000001858 anti-Xa Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 230000014508 negative regulation of coagulation Effects 0.000 description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 3
- PGOHTUIFYSHAQG-LJSDBVFPSA-N (2S)-6-amino-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-4-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-1-[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-1-[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]propanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]acetyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-sulfanylpropanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-4-carboxybutanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]hexanoic acid Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O PGOHTUIFYSHAQG-LJSDBVFPSA-N 0.000 description 2
- 108010074860 Factor Xa Proteins 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 206010029113 Neovascularisation Diseases 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 2
- 108010000499 Thromboplastin Proteins 0.000 description 2
- 102000002262 Thromboplastin Human genes 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 2
- 238000012691 depolymerization reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 2
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- -1 nitrite ions Chemical class 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 2
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ITRJWOMZKQRYTA-RFZYENFJSA-N Cortisone acetate Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@@](C(=O)COC(=O)C)(O)[C@@]1(C)CC2=O ITRJWOMZKQRYTA-RFZYENFJSA-N 0.000 description 1
- 108010074864 Factor XI Proteins 0.000 description 1
- 108010080805 Factor XIa Proteins 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- OHJKXVLJWUPWQG-PNRHKHKDSA-N Heparinsodiumsalt Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](NS(O)(=O)=O)[C@@H](O)O[C@H](COS(O)(=O)=O)[C@H]1O[C@H]1[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C(O)=O)O1 OHJKXVLJWUPWQG-PNRHKHKDSA-N 0.000 description 1
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 description 1
- 102100027378 Prothrombin Human genes 0.000 description 1
- 235000005811 Viola adunca Nutrition 0.000 description 1
- 240000009038 Viola odorata Species 0.000 description 1
- 235000013487 Viola odorata Nutrition 0.000 description 1
- 235000002254 Viola papilionacea Nutrition 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 230000003527 anti-angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000002429 anti-coagulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003124 biologic agent Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000013043 chemical agent Substances 0.000 description 1
- AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M cobalt(2+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical class [Co+2].N#[C-].[N-]([C@@H]1[C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 229960003290 cortisone acetate Drugs 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000003791 organic solvent mixture Substances 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 235000010603 pastilles Nutrition 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 229940039716 prothrombin Drugs 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L sulfate group Chemical group S(=O)(=O)([O-])[O-] QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
- C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
- C08B37/0075—Heparin; Heparan sulfate; Derivatives thereof, e.g. heparosan; Purification or extraction methods thereof
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Hematology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Description
Vynález se týká způsobu výroby směsí mukopolysacharidů se zvýšenou antitrombotickou aktivitou.
Je znáno, že směsi tohoto druhu lze získávat z heparinu extrakcí alkoholem nebo též depolymerací chemickým nebo enzymatickým postupem.
Obecně umožňují tyto postupy získávat směsi nebo frakce tvořené mukopolysacharidy (MPS), jejichž řetězce obsahují maximálně 25 až 30 skupin a mají vyšší aktivitu anti-Xa, měřeno titrem Yin Wessler (YW), než heparin, a nižší celkovou antikoagulační aktivitu, vyjádřenou titrem USP, než heparin, přičemž tento titr může mít sám o sobě velmi nízkou, ba prakticky nulovou hodnotu.
Tyto produkty, vykazující specifičtější účinek než heparin v jistých etapách koagulačního postupu, nabývají nyní na významu.
Pro danou léčbu se volí produkt podle svého titru YW a poměru svých titrů YM a USP.
Se zřetelem к tomu, co bylo uvedeno, byly hledány prostředky, které by umožňovaly snadno získávat směsi odpovídající daným požadavkům, zejména pokud jde o jejich titr YW a jejich poměr titru YW к titru USP. Uskutečněné práce vedly ke konstatování, že při postupu za jistých podmínek lze izolovat takové produkty z jiných výchozích směsí mukopolysacharidů.
Cílem tohoto vynálezu je tudíž získat nový způsob výroby směsi mukopolysacharidů se zvýšenou antitrombotickou aktivitou, který by spočíval ve zpracování jiné směsi mukopolysacharidů, jež je obsahuje, kterýžto způsob by uzmožňoval snadno získávat velmi užitečné produkty.
Předmětem tohoto vynálezu je tudíž způsob výroby mukopolysacharidů se zvýšenou antiч trombotickou aktivitou, které jsou tvořené řetězci o průměrné molekulové hmotnosti 4 000 až 5 000 daltonů, zejména řádu 4 500, a mají poměr titrů YW/USP nižší nebo rovný 10, s výhodqu 6 až 3, zejména pak 4.
i. . Podstata vynálezu je v tom, že se směsi, které jsou tvořené z řetězců mukopolysacha- ridů s molekulovou hmotností 1 800 až 8 000 daltonů a které mají titr YW a poměr titrů
YW/USP vyšší než heparin, podrobí alespoň v jedné etapě frakcionování pomocí směsi vody obsahující minerální sůl a organické rozpouštědlo, v němž alespoň více než polovina poΊ * žadovaných produktů je selektivně nerozpustná, přičemž se z výchozí směsi odstraní ales4 poňvíce než polovina řetězců mukopolysacharidů o molekulové hmotnosti nižší než 2 000
T a řetězců o vyšší molekulové hmotnosti, avšak majících nižší stupeň sulfatace než je průJ měrný počet řetězců směsi, načež se frakce zbavené těchto řetězců, které mají poměr titrů YW/USP nižší než výchozí směsi, avšak vyšší než heparin, u něhož je titr USP vyšší než u výchozích směsí, oddělí.
' Jako organické rozpouštědlo se při postupu podle tohoto vynálezu používá s výhodou alkohol, zejména ethanol.
- Jako minerální sůl se při postupu podle vynálezu používá sůl, která je mísitelná s
... použitým organickým rozpouštědlem, jako je chlorid sodný nebo chlorid draselný.
Podle výhodného provedení způsobu podle tohoto vynálezu se hodnota pH reakční směsi upraví na hodnotu odpovídající kyselému prostředí, zejména na hodnotu pH nižší než 4.
Podle dalšího výhodného provedení způsobu podle vynálezu se к frakcionování používá í směsí mukopolysacharidů s poměrem titrů YW/USP alespoň 10 a s titrem YW kolem 200 až
250 m/mg.
Jiné výhodné provedení způsobu podle vynálezu předpokládá, že se do roztoku ve vodě uvádí 5 obj. % směsi mukopolysacharidů obsahující 10 g/1 chloridu sodného a po upravení pH na hodnotu 3,8 se uskutečňuje frakcionování přidáním jednoho objemu ethanolu, načež se vzniklá sraženina oddělí.
CS 270 420 B2
Při dalším jiném výhodném provedení způsobu podle tohoto vynálezu se používají výchozí směsi mukopolysacharidů, které mají ke konci redukce skupinu se strukturou 2,5-anhydromanno, vybranou s výhodou ze skupin zahrnujících 2,5-anhydromannosu, 2,5-anhydromannitol nebo 2,5-anhydromannovou kyselinu.
Titru Yin a Wessler se používá jako míry aktivity anti-Xa podle autorů Yin E.T., Wessler 8., Butler J.V., viz Lab. Clin. Med. 1973, 81, str. 298 až 310.
Používané směsi mukopolysacharidů se s výhodou získávají částečnou depolymerací heparinu účinkem chemického činidla, jako je kyselina dusitá. Zde lze odkázat zejména na postup popsaný ve francouzském patentu č. 2 488 646, který je dodatkovým patentem к patentu č. 2 440 376.
Podle jednoho výhodného provedení způsobu podle tohoto vynálezu se používá při depolymeraci postupu uvedeného druhu, avšak na bázi samovolné regulace depolymerační reakce, jak je popsáno ve francouzském patentu č. 2 503 714.
Obecně se při samovolně regulovatelné depolymerací nechá reagovat heparin s kyselinou dusitou ve vodném prostředí při pH v rozsahu 2 až 3, s výhodou při 2,5, v takových množstvích, kdy koncentrace heparinu je alespoň přibližně 0,02 až 0,1 M, a po samočinném ukončení depolymerační reakce vlivem spotřebování kyseliny dusité se znovu získá směs mukopolysacharidů, které se srážejí organickým rozpouštědlem.
Kyselina dusitá vzniká in sítu přidáním kyseliny, která obsahuje s výhodou biologicky vhodné anionty, jako je kyselina chlorovodíková nebo kyselina octová, к derivátu kyseliny dusité, zejména к dusitanu, etherátu a především pak к dusitanu, alkalického kovu nebo к dusitanu kovu alkalické zeminy. Používá se především dusitan sodný v molárním poměru 0,03 až 0,05 M.
Při provádění způsobu podle tohoto vynálezu je výhodné používat dusitanu sodného v molárním poměru 0,040 až 0,046 M, především pak v molárním poměru 0,043 M.
Podle způsobu přípravy obsahují směsi mukopolysacharidů ke konci redukce skupinu se strukturou 2,5-anhydromanno, jak již bylo uvedeno.
Po upravení pH na hodnotu 3,8 se frakcionování mukopolysacharidů provádí pomocí organického rozpouštědla, které umožňuje selektivní srážení mukopolysacharidů, jež mají vyšší molekulovou hmotnost a/nebo jsou ze směsi nejvíce sulfatovány.
Odstranění řetězců s nízkou molekulovou hmotností a nízkým počtem sulfátových skupin má za následek, že se ve frakcích mukopolysacharidů získá vyšší titr USP, přičemž titr YW zůstává prakticky zachován.
Směsi mukopolysacharidů, jež se znovu získávají po srážení, lze obecně charakterizovat tak, že jsou tvořeny v podstatě řetězci (1) s průměrnou molekulovou hmotností 4000 až 5000 daltonů, zejména 4500, (2) jež mají titr YW přibližně 180 až 200 ju/mg a poměr titru YW/USP nižší než 10,zejména přibližně 6 až 3, především pak řádu 4.
Tyto směsi jsou kromě toho tvořené většinou řetězci ukončenými skupinami se strukturou 2,5-anhydromanno, pocházejí-li výchozí směsi z dusitanové depolymerace heparinu.
Směsi získávané postupem podle tohoto vynálezu vykazují biologické aktivity, což především umožňuje kontrolovat s jejich pomocí specifikcky jisté etapy krevní koagulace.
Jsou tudíž zvlášť cenné pro výrobu léčiv používaných zejména к prevenci a terapii trombů a stárnutí tkání. Těchto léčiv se používá ve formách určených к podávání a v obvyklých nosologiích pro vizuální indikace.
CS 270 420 D2
J
Získávané směsi mukopolysacharidů se rovněž používají к přípravě biologických činidel používaných v laboratořích, zejména pro srovnávání při studiu jiných produktů, u nichž se testuje antikoagulační aktivita, zejména pokud jde o inhibici faktoru Xa.
Pokud se jedná o produkty rozpustné ve směsi voda-organické rozpouštědlo, jež se к frakcionování používá, jsou zbaveny nebo prakticky zbaveny antitrombotických účinků.
Tyto produkty lze znovu získat filtrací na gelu, čímž se oddělí od rozpustného podílu. Použitím postupu chromatografické výměny iontů se umožňuje oddělit ze směsi, je-li to žádáno, různé typy oligosacharidů, především řetězce hexasacharidové, jež mají zvýšenou inhibiční aktivitu proti neoangiogenezi.
Regenerace produktů z frakcí se s výhodou provádí například srážením alkoholem nebo lyofilizací.
Ostatní charakteristiky a výhody vynálezu vyplynou z následujících příkladů. Příklady 1 a 2 se týkají přípravy směsí mukopolysacharidů, jež mají poměr titrů YW к USP řádu 4, příklady 3 a 4 se týkají účinků protuktů získaných podle příkladů 1 a 2, a příklad 5 se týká přípravy produktů, prakticky zbavených antitrombotické aktivity, z rozpustných frakcí.
Příklad 1 Příprava směsí mukopolysacharidů s poměrem titrů YW/USP přibližně 4
500 g injekčního heparinu ve formě sodné soli se přafede do roztoku ve 4500 ml demineralizované vody při teplotě 18 °C.
Poměr YW/USP použitého heparinu je blízký 1, jeho titry mají hodnotu řádu 160 až 170.
Získaný roztok se intenzivně míchá a jeho pH se sníží na 2,5 přidáním konc. kyseliny chlorovodíkové. Potom se připojí 15 g dusitanu sodného rozpuštěného ve 300 ml vody. Hodnota pH reakčni směsi se upraví na 2,5 koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou a celkový objem roztoku se doplní na 500 ml. Reakce se nechá probíhat 45 minut, potom se ověří, zda v reakčni směsi nezbývají Žádné dusitanové ionty, například použitím indikačního škrobového papírku impregnovaného jodidem draselným (v přítomnosti iontů NO2 nastává modrofialové zbarvení).
Reakce se nechá probíhat až do úplného vymizení dusitanových iontů a roztok pak již nereaguje na jodoŠkrobový papírek, přičemž se kontrola provádí každé 3 nebo 4 minuty.
Když již jsou tyto kontroly negativní, lze reakci pokládat za skončenou. Hodnota pH roztoku se pak zvýší na 10 pomocí koncentrovaného louhu sodného a přidá se 5 g tetrahydroboritanu sodného.
Roztok se míchá 15 hodin.
Nezreagovaný tetrahydroboritan se rozloží snížením pH na 3,0 přidáním koncentrované kyseliny chlorovodíkové. Roztok se míchá 15 minut, potom se pH znovu upraví na 7,0 přídavkem koncentrovaného louhu sodného.
Reakčni produkty se získají přidáním 10 litrů ethanolu. Po 48 hodinách stání se produkt dekantuje a odstraní se vznášející se část.
Sraženina se znovu rozpustí v 9 litrech demineralizované vody. Přidá se 100 g chloridu sodného a pH roztoku se sníží na 3,8 přidáním koncentrované kyseliny chlorovodíkové. Objem se doplní přesně na 10 litrů demineralizovanou vodou a za energického míchání se přidá 10 litrů ethanolu. Směs se nechá stát 48 hodin. Násoskou se stáhne vznášející se část, která se odstraní. Sraženina se oddělí, promyje ethanolem, rozetře a vysuší ve vakuu.
CS 270 420 B2
Získá se 230 g produktu, který má tyto vlastnosti:
titr USP titr Yin A Wessler průměrná molekulová hmotnost ^il/mg
225 jul/mg
4000 až 5000 daltonů
Příklad 2 Příprava frakcí mukopolysacharidů s titry YW a USP v poměru přibližně 4 5000 g injekčního heparinu se rozpustí ve 45 litrech demineralizované vody při 1B °c.
Postupuje se obdobně jako v příkladě 1, jenže s desetinásobnými dávkami reakčních složek, to znamená:
- přidá se 150 g dusitanu sodného v roztoku 3 litrů vody,
- objem reakční směsi se upraví na 50 litrů,
- přidá se 50 g tetrahydroboritanu,,
- sráží se pomocí 100 litrů ethanolu,
- znovu se rozpouští v 90 litrech vody,
- přidá se 1000 g chloridu sodného,
- konečný objem sc upraví na 100 litrů, -nakonec se přidá 100 litrů ethanolu.
Získá se takto 2230 g produktu, který má tyto vlastnosti:
titr USP 54 jul/mg titr Yin a Wessler 232 дЯ/тд průměrná molekulová hmotnost 4000 až 5000 daltonů.
Reakční produkty se regenerují přidáním 20 litrů ethanolu, následuje 48hodinové stání, dekantace a odstranění vznášející se Části.
Sraženina se znovu rozpustí v 9 litrech demineralizované vody. Přidá se 1OO g chloridu sodného a pH roztoku se sníží na 3,8 přidáním koncentrované kyseliny chlorovodíkové.
Objem se upraví přesně na 10 litrů demineralizovanou vodou a za energického míchání se přidá 10 litrů ethanolu. Směs se nechá 48 hodin stát. Vznášející se částice se stáhnou násoskou a odstraní. Sraženina se oddělí, promyje ethanolem, rozetře a vysuší ve vakuu.
Získá se 230 g produktu s těmito vlastnostmi:
titr USP titr Yin a Wessler průměrná molekulová hmotnost yUl/mg
225 ^ul/mg
4000 až 5000 daltonů.
V následujícím příkladě 3 jsou uváděny výsledky farmakologických pokusů, které byly prováděny s produkty připravenými postupem podle příkladu 1.
Příklad 3 Stanovení in vitro aktivity produktů
Na obrázcích 1 až 4 jsou znázorněny křivky získané stanovením in vitro změny času koagulace vyvolané v plasmech lidské krve v závislosti na vzrůstajících dávkách komerčního heparinu a produktu připraveného podle příkladu 1.
V pokusech odpovídajících výsledkům uvedeným v obrázcích 3 a 4 bylo použito placem zbavených destiček a ochuzených o faktor XI.
Uvedené obrázky ukazují změny časů ve vteřinách trombinu (obrázek 1), cefalin-kaolinu (obr. 2), koagulace v přítomnosti koncentrované tromboplastiny (obr. 3) a zředěné tromboplastiny (obr. 4), vyvolané testovanými sloučeninami, a to produkty podle příkladu 1 (křivky a^, a^ a a^) a heparinu (křivky b^, b2, a v závislosti na jednotlivě použitých dávkách.
CS 270 420 B2
Časy trombinu a Časy cefalin-kaolinu představují oba druhy měření, jež odrážejí spíše účinek zkoumaných preparátů jednotlivě na inhibici aktivovaného faktoru II a celkovou koagulaci. Ze studia křivek na obrázcích 1 a 2 vyplývá, že mukopolysacharidy podle vynálezu mají zřetelně nižší účinek než má heparin na inhibici aktivace protrombinu a na hladinu celkové koagulace. Obrázky 3 a 4, které znázorňují daný jev bezprostředněji vztažený na úsek enzymatické reakce, charakteristiky vedlejší koagulace (zejména v podmíněné nepřítomnosti faktoru Xla),ukazují výhodný účinek mukopolysacharidů připravených postupem podle tohoto vynálezu ve srovnání s heparinem.
Následující příklad 4 se týká výsledků získaných při pokusech provedených in vivo na králících při aplikaci mukopolysacharidů připravených postupem podle příkladu 2.
Příklad 4 Stanovení antitrombotických účinků produktu připraveného podle příkladu 2 na králících
Podáním 500 yu YW králíku se vyvolá výrazný účinek anti-Xa, zatímco celkový antikoagulační účinek zůstává poměrně slabý.
Dvě hodiny po podání je účinek YW řádu 0,88 yu/ml, kdežto čas cefalin-kaolin je 0,09 yul/ml.
Pokusy provedenými in vitro a in vivo lze tudíž dokázat zřetelně selektivnější účinek mukopolysacharidů připravených postupem podle tohoto vynálezu, zejména pokud se jedná o hodnotu inhibice faktoru Xa, ve srovnání s účinkem heparinu.
Příklad 5 Příprava frakcí mukopolysacharidů prakticky zbavených antitrombotických účinků
Rozpustná frakce z příkladu 1 se regeneruje. Tato frakce obsahuje řetězce se 2 až 14 skupinami.
Jeden stupeň dodatečného alkoholického řrakcionování této řrakce vede к získání sraženiny, jež se oddělí a rozpustné frakce, z níž se znovu získá směs y. Tato směs je v podstatě tvořena řetězci s maximálně 6 až 8 skupinami a mají titr YW nižší než 70 a titr USP nižší než 5.
Podrobí-li se směs у filtraci na gelu postupem podle klasické techniky, získají se znovu hexasacharidové směsi. Tyto směsi jsou prakticky zcela zbaveny celkové antikoagulační aktivity a aktivity YW.
Příklad 6 Aktivita na neoangiogenezi směsí у a z
Pokusy in vitro vzhledem na antiangiogenezní aktivitu se provádějí na chlorioallantoidní membráně 6denních kuřecích embryí kultivací v Petriho miskách.
Připraví se pastilky smícháním 5 ug hydrokortisonu s 10 ul methylcelulozy, potom se přidají směsi у a z, jejichž dávky jsou 5 ug až 100 yug. Vytvořené pastilky se suší, potom se umístí na chlorioallantoidní membránu, к níž přilnou. Pro každý pokus se používá 4 vajec.
Po 48 hodinách inkubace se zkoumá výskyt avaskulárních zón. Zjišřuje se důležité zmenšení vaskulárních zón. Tyto pozorovatelné výsledky se získají již s pouhými 6 yug testovaných výrobků.
Příklad 7 Působení hexasacharidové směsi z na melanom typu В 16 u myší
Pokusy se provádějí na myších C57 BL/6 majících melanomy В 16.
Testování se provádí po dobu 15 dní. Každé myši se injekčně podává subkutánně dvakrát denně 0,15 mg směsí hexasacharidů a kortisonacetátu v dávkách, jež se během oŠetřo6
CS 270 420 B2 vání zmenšují z 250 mg/kg/den na 40 až 50 mg/kg/den. Po 15 dnech se zjistí, že tumor přestává bujet.
Lze rovněž jasně pozorovat regresi těchto tumorů.
Claims (7)
1. Způsob výroby mukopolysacharidů se zvýšenou antitrombotickou aktivitou, tvořených řetězci o průměrné molekulové hmotnosti 4 000 až 5 000 daltonů, zejména řádu 4 500, * majících poměr titrů YW/USP nižší než 10, s výhodou 6 až 3, zejména 4, vyznačující se tím, že se směsi tvořené z řetězců mukopolysacharidů s molekulovou hmotností 1800 až
8 000 daltonů, které mají titr YW a poměr titrů YW/USP vyšší než heparin, podrobí ales- * poň v jedné etapě frakcionování pomocí směsi vody obsahující minerální sůl a organické rozpouštědlo, v němž alespoň více než polovina požadovaných produktů je selektivně nerozpustná, přičemž se z výchozí směsi odstraní alespoň více než polovina řetězců mukopolysacharidů o molekulové hmotnosti nižší než 2 000 a řetězců o vyšší molekulové hmotnosti, avšak majících nižší stupeň sulfatace než je průměrný počet řetězců směsi, načež se těchto řetězců zbavené frakce, které mají poměr titrů YW/USP nižší než výchozí směsi, avšak vyšší než heparin, u něhož je titr USP vyšší než u výchozích směsí, oddělí.
2. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se jako organické rozpouštědlo používá alkohol, zejména ethanol.
3. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se jako minerální sůl používá sůl misitelná s použitým organickým rozpouštědlem, jako je chlorid sodný nebo chlorid draselný.
4. Způsob podle kteréhokoliv z bodů 1 až 3, vyznačující se tím, že se hodnota pH reakční směsi upraví na hodnotu odpovídající kyselému prostředí, zejména na hodnotu pH nižší než 4.
5. Způsob podle kteréhokoliv z bodů 1 až 4, vyznačující se tím, že se к frakcionování používá směsí mukopolysacharidů s poměrem titrů YW/USP 10 a s titrem YW 200 až 250 u/mg.
6. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se do roztoku ve vodě uvádí 5 obj.
% směsi mukopolysacharidů obsahující 10 g/1 chloridu sodného a po upravení pH na hodnotu 3,8 se uskutečňuje frakcionování přidáním jednoho objemu ethanolu, načež se vzniklá sraženina oddělí.
* 7. Způsob podle kteréhokoliv z předchozích bodů, vyznačující se tím, že se používají výchozí směsi mukopolysacharidů, které mají ke konci redukce skupinu se strukturou 2,5-anhydromanno, vybranou s výhodou ze skupin zahrnujících 2,5-anhydromannosu, 2,5-anhydromannitol nebo 2,5-anhydromannovou kyselinu.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR8415978A FR2572080B1 (fr) | 1984-10-18 | 1984-10-18 | Procede de preparation de compositions de mucopolysaccharides dotees d'une activite antithrombotique elevee, les compositions obtenues et leur application en tant que medicaments |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS746785A2 CS746785A2 (en) | 1989-11-14 |
| CS270420B2 true CS270420B2 (en) | 1990-06-13 |
Family
ID=9308784
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS857467A CS270420B2 (en) | 1984-10-18 | 1985-10-18 | Method of mucopolysaccharides production with increased antitrombotic activity |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61101502A (cs) |
| KR (1) | KR920006002B1 (cs) |
| AR (1) | AR243539A1 (cs) |
| CS (1) | CS270420B2 (cs) |
| DD (1) | DD239798A5 (cs) |
| DZ (1) | DZ844A1 (cs) |
| EG (1) | EG17478A (cs) |
| FI (1) | FI81810C (cs) |
| FR (1) | FR2572080B1 (cs) |
| HU (1) | HU197931B (cs) |
| IL (1) | IL76701A (cs) |
| MA (1) | MA20554A1 (cs) |
| NO (1) | NO166369C (cs) |
| PL (1) | PL146770B1 (cs) |
| SU (1) | SU1570651A3 (cs) |
| UA (1) | UA5929A1 (cs) |
| YU (1) | YU45285B (cs) |
| ZA (1) | ZA857902B (cs) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2062307T3 (es) * | 1989-10-04 | 1994-12-16 | Akzo Nv | Un proceso para la fabricacion de glicosaminoglicuronano sulfatado con actividad antitrombotica. |
| DK3144325T3 (da) * | 2010-09-14 | 2021-01-25 | Univ Miyazaki | Heparin med høj renhed og fremstillingsfremgangsmåde dertil |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2478646A2 (fr) * | 1980-03-20 | 1981-09-25 | Choay Sa | Composition mucopolysaccharidique ayant une activite regulatrice de la coagulation, medicament la contenant et procede pour l'obtenir |
| FR2440376A1 (fr) * | 1978-11-06 | 1980-05-30 | Choay Sa | Composition mucopolysaccharidique ayant une activite regulatrice de la coagulation, medicament la contenant et procede pour l'obtenir |
| FR2495935A1 (fr) * | 1980-12-15 | 1982-06-18 | Choay Sa | Fractions mucopolysaccharidiques possedant des proprietes biologiques, leur procede de preparation et leur application en tant que medicaments |
| FR2503714B1 (fr) * | 1981-04-10 | 1986-11-21 | Choay Sa | Procede d'obtention de mucopolysaccharides biologiquement actifs, de purete elevee, par depolymerisation de l'heparine |
-
1984
- 1984-10-18 FR FR8415978A patent/FR2572080B1/fr not_active Expired
-
1985
- 1985-02-27 KR KR1019850007686A patent/KR920006002B1/ko not_active Expired
- 1985-10-13 EG EG650/85A patent/EG17478A/xx active
- 1985-10-14 IL IL76701A patent/IL76701A/xx not_active IP Right Cessation
- 1985-10-14 DZ DZ850225A patent/DZ844A1/fr active
- 1985-10-15 ZA ZA857902A patent/ZA857902B/xx unknown
- 1985-10-15 AR AR85301959A patent/AR243539A1/es active
- 1985-10-17 YU YU1660/85A patent/YU45285B/xx unknown
- 1985-10-17 SU SU853965564A patent/SU1570651A3/ru active
- 1985-10-17 UA UA3965564A patent/UA5929A1/uk unknown
- 1985-10-17 DD DD85281840A patent/DD239798A5/de not_active IP Right Cessation
- 1985-10-18 HU HU854046A patent/HU197931B/hu unknown
- 1985-10-18 JP JP60233118A patent/JPS61101502A/ja active Granted
- 1985-10-18 CS CS857467A patent/CS270420B2/cs not_active IP Right Cessation
- 1985-10-18 NO NO854154A patent/NO166369C/no not_active IP Right Cessation
- 1985-10-18 FI FI854073A patent/FI81810C/fi not_active IP Right Cessation
- 1985-10-18 MA MA20778A patent/MA20554A1/fr unknown
- 1985-10-18 PL PL1985255832A patent/PL146770B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FI854073A0 (fi) | 1985-10-18 |
| MA20554A1 (fr) | 1986-07-01 |
| FI81810C (fi) | 1990-12-10 |
| IL76701A (en) | 1990-09-17 |
| HU197931B (en) | 1989-06-28 |
| JPH0552841B2 (cs) | 1993-08-06 |
| KR860003275A (ko) | 1986-05-21 |
| EG17478A (en) | 1991-03-30 |
| NO854154L (no) | 1986-04-21 |
| KR920006002B1 (ko) | 1992-07-25 |
| IL76701A0 (en) | 1986-02-28 |
| FI81810B (fi) | 1990-08-31 |
| FR2572080B1 (fr) | 1987-06-26 |
| PL146770B1 (en) | 1989-03-31 |
| NO166369B (no) | 1991-04-02 |
| PL255832A1 (en) | 1987-02-09 |
| CS746785A2 (en) | 1989-11-14 |
| ZA857902B (en) | 1987-03-25 |
| NO166369C (no) | 1991-07-17 |
| FR2572080A1 (fr) | 1986-04-25 |
| YU45285B (en) | 1992-05-28 |
| HUT38657A (en) | 1986-06-30 |
| SU1570651A3 (ru) | 1990-06-07 |
| YU166085A (en) | 1988-06-30 |
| JPS61101502A (ja) | 1986-05-20 |
| DD239798A5 (de) | 1986-10-08 |
| FI854073L (fi) | 1986-04-19 |
| DZ844A1 (fr) | 2004-09-13 |
| AR243539A1 (es) | 1993-08-31 |
| UA5929A1 (uk) | 1994-12-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0287477B1 (fr) | Héparines de bas poids moléculaire à structure régulière leur préparation et leurs applications biologiques | |
| DE3880577T2 (de) | Heparinderivate, verfahren zu deren herstellung und verwendung fuer pharmazeutische zwecke. | |
| AU643531B2 (en) | Mixtures of low molecular weight polysaccharides, and their preparation and use | |
| US5280016A (en) | Non-anticoagulant heparin derivatives | |
| JP5371167B2 (ja) | 抗脈管形成活性を有し、かつ、抗凝固作用がない、部分脱硫酸グリコサミノグリカンの誘導体 | |
| EP0040144B1 (fr) | Nouveaux polysaccharides sulfatés, procédés pour leur préparation et leur utilisation comme médicaments | |
| US4804652A (en) | Mucopolysaccharides having biological properties, preparation and application thereof as drugs | |
| HUT59828A (en) | Process for producing oligosaccharid-containing inhibitors of endothelial celle-multiplication and inhibitors of angiogenezis | |
| JPH03500788A (ja) | 補体カスケードの阻害剤としてのオリゴサッカライドヘパリン断片 | |
| EP0214879A2 (fr) | Procédé de sulfatation de glycosaminoglycanes, nouveaux glycosaminoglycanes obtenus et leurs applications biologiques | |
| CA2005739A1 (en) | Heparin fragments as inhibitors of smooth cell proliferation | |
| AU1669592A (en) | New non-anticoagulant heparin derivatives | |
| KR20010030803A (ko) | 신규 글리코사미노글리칸 및 이를 함유하는 의약 조성물 | |
| EP2025687A1 (en) | Process for the preparation of heparanase-inhibiting sulfated hyaluronates and products obtained thereby | |
| KR20090109104A (ko) | 바이오틴 또는 바이오틴 유도체와의 1개 이상의 공유 결합을 포함하는 저분자량 헤파린, 이의 제조 방법 및 이의 용도 | |
| EP0897393A1 (en) | Derivatives of k5 polysaccharide having high anticoagulant activity | |
| US4788307A (en) | Oligosaccharidic fractions devoid or practically devoid of antithrombotic activity | |
| EP0410002A1 (en) | Anti-hiv drug | |
| CS270420B2 (en) | Method of mucopolysaccharides production with increased antitrombotic activity | |
| CA2678166A1 (fr) | Heparines comprenant au moins une liaison covalente avec la biotine ou un derive de la biotine, leur procede de preparation et leur utilisation | |
| EP0956027B1 (en) | Semi-synthetic sulphaminoheparosansulphates having high anti-metastatic activity and reduced haemorrhagic risk | |
| DK172887B1 (da) | Fremgangsmåde til fremstilling af mucopolysaccharider med høj antithrombotisk virkning | |
| Svahn et al. | Inhibition of angiogenesis by heparin fragments in the presence of hydrocortisone | |
| US20050158146A1 (en) | Method of preparing purified biologically active oligosaccharide libraries | |
| RU2333222C2 (ru) | Эпимеризованные производные полисахарида к5 с высокой степенью сульфатирования |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| IF00 | In force as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MK4A | Patent expired |
Effective date: 20001018 |