CS257757B2 - Method of reaction determination between antigen and antibody and reaction agent for realization of this process - Google Patents
Method of reaction determination between antigen and antibody and reaction agent for realization of this process Download PDFInfo
- Publication number
- CS257757B2 CS257757B2 CS823121A CS312182A CS257757B2 CS 257757 B2 CS257757 B2 CS 257757B2 CS 823121 A CS823121 A CS 823121A CS 312182 A CS312182 A CS 312182A CS 257757 B2 CS257757 B2 CS 257757B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- antigen
- reaction
- antibody
- reaction medium
- reactions
- Prior art date
Links
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 title claims abstract description 43
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims abstract description 40
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title claims abstract description 39
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title claims abstract description 39
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 18
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 title description 2
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 claims abstract description 17
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 10
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 claims description 10
- 229960000633 dextran sulfate Drugs 0.000 claims description 9
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 8
- -1 carboxyl anions Chemical class 0.000 claims description 7
- 229920005615 natural polymer Polymers 0.000 claims description 6
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 claims description 6
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 claims description 5
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 claims description 5
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000000472 sulfonyl group Chemical group *S(*)(=O)=O 0.000 claims description 4
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 2
- 239000012431 aqueous reaction media Substances 0.000 claims description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 claims description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 claims description 2
- 229920000447 polyanionic polymer Polymers 0.000 abstract description 17
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 9
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 7
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 7
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 4
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 4
- 206010029719 Nonspecific reaction Diseases 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 3
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 2
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 229920000172 poly(styrenesulfonic acid) Polymers 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 229940005642 polystyrene sulfonic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 2
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 1
- RNMCCPMYXUKHAZ-UHFFFAOYSA-N 2-[3,3-diamino-1,2,2-tris(carboxymethyl)cyclohexyl]acetic acid Chemical compound NC1(N)CCCC(CC(O)=O)(CC(O)=O)C1(CC(O)=O)CC(O)=O RNMCCPMYXUKHAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005995 Aluminium silicate Substances 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 229920000623 Cellulose acetate phthalate Polymers 0.000 description 1
- 229920001287 Chondroitin sulfate Polymers 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 206010049190 Red blood cell agglutination Diseases 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- GAMPNQJDUFQVQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid;phthalic acid Chemical compound CC(O)=O.OC(=O)C1=CC=CC=C1C(O)=O GAMPNQJDUFQVQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 238000005054 agglomeration Methods 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012211 aluminium silicate Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940081734 cellulose acetate phthalate Drugs 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 229960002086 dextran Drugs 0.000 description 1
- 239000012470 diluted sample Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 1
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940049920 malate Drugs 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N malic acid Chemical compound OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000004848 nephelometry Methods 0.000 description 1
- MGFYIUFZLHCRTH-UHFFFAOYSA-N nitrilotriacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CC(O)=O MGFYIUFZLHCRTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- CBXWGGFGZDVPNV-UHFFFAOYSA-N so4-so4 Chemical compound OS(O)(=O)=O.OS(O)(=O)=O CBXWGGFGZDVPNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 150000003457 sulfones Chemical class 0.000 description 1
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 229920005613 synthetic organic polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/536—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/811—Test for named disease, body condition or organ function
- Y10S436/813—Cancer
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/826—Additives, e.g. buffers, diluents, preservatives
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Data Exchanges In Wide-Area Networks (AREA)
- Photoreceptors In Electrophotography (AREA)
- Detergent Compositions (AREA)
Description
Vynález se týká Činidla pro stanovení reakce mezi antigenem a protilátkou a způsobu stanovení reakce mezi antigenem a protilátkou.
V současné době se věnuje velká pozornost reakcím in vivo, které mají vztah к interakci mezi antigenem a protilátkou, zejména v lékařství a hygieně. Tyto reakce jsou analyzovány a sledovány s cílem zajistit preventivní opatření, léčbu onemocnění, které spočívají na této reakci a podobně. Mimoto, pokud jde o reakce in vitro, provádí se intenzívní imunochemický výzkum při použití vzorků, které patrně jsou příčinou reakcí in vivo a část těchto reakcí již vedla к praktickému použití získaných výsledků. Typickým vysoce citlivým způsobem stanovení je například radioimunologické stanovení (RIA), aglutinace latexu se stanovením zákalu v části infračerveného spektra (LPIA), imunoanalýza při použití enzymu (EIA), fluoroimunoanalýza a nefelometrie. Až dosud byla provedena velká řada imunologických reakcí, při nichž se stanoví antigen nebo protilátka ve vzorku při použití reakčního činidla, které sestává kromě kapalné fáze ještě také z nosiče ve formě matrice, jde například o biologické nosiče jako červené krvinky nebo bakterie nebo částice Latexu, tvořené syntetickým organickým polymerem, které je možno senzitizovat příslušnou protilátkou nebo antigenem.
Imunologické reakce jsou vysoce specifické v. tom smyslu, že se reakce dostavuje okamžitě a selektivně, což je jedna z výjimečných vlastností těchto reakcí, které jsou důležitým lékařským stanovením.
Na druhé straně tělesné tekutiny, keré se obvykle zkoumají také in vivo mají měnlivé složení i fyzikální vlastnosti. Z tohoto důvodu není možno řadu imunologických reakcí oprostit úplně od nespecifických reakcí, které je možno nazvat vedlejšími reakcemi, nezávislými na reakci mezi antigenem a protilátkou. Částečným opatřením, vylučujícím některé tyto reakce je přidání kaolinu nebo podobného adsorpčního činidla nebo provedení extrakce, která někdy neutralizuje nespecifické faktory. Část těchto opatření je účinná, některé reakce však nelze pomocí těchto opatření ovlivnit a je tedy zapotřeby se přesvědčit při každé jednotlivé reakci mezi antigenem a protilátkou, což působí velké obtíže při praktickém použití reakcí tohoto typu.
V poslední době byla provedena celá rada různých sledování s cílem odstranit svrchu uvedené nevýhody dříve známých reakcí mezi antigenem a protilátkou, přičemž bylo zjištěno, že v průběhu reakce mezi antigenem a protilátkou v případě, že se reakce provádí se vzorkem, к němuž byl přidán polyanion, je možno zlepšit výtěžek látky, která má být zjištěna i přesnosti stanovení, takže jsou к dispozici přesnější hodnoty pro antigen nebo protilátku.
Předmětem vynálezu je tedy způsob sta novení reakce mezi antigenem a protilátkou, při němž se stanovovaný antigen nebo protilátka uvádí do reakce s odpovídající protilátkou nebo antigenem v reakční směsi, vyznačující se tím, že se stanovení reakce mezi antigenem a protilátkou provádí aglutinací, při níž se ke vzorku s obsahem antigenu nebo protilátky přidá přírodní nebo syntetický polymer s obsahem sulfonylových nebo karboxylových aniontů, rozpustný v reakčním prostředí.
Předmětem vynálezu je rovněž reakční činidlo pro stanovení reakce mezi antigenem a protilátkou, vyznačující se tím, že ve vodném reakčním prostředí pro reakci mezi antigenem a protilátkou obsahuje 0,001 až 0,5 procenta hmot, přírodního nebo syntetického polymeru se sulfonovými nebo karboxylovými anionty, rozpustného v reakčním prostředí, například heparinu nebo dextransulíátu.
Polyanionty, jichž je možno užít při provádění způsobu podle vynálezu jsou různé látky včetně přírodních nebo syntetických polymerů jako polysacharidů nebo polystyrenu s několikanásobným aniontem, například sulfonylovým zbytkem nebo karboxylem, přičemž tyto látky jsou rozpustné v reakčním prostředí, které je užito pro reakci mezi antigenem a protilátkou.
Specifickými příklady těchto polyaniontů jsou například síran dextranu, heparin, kyselina polystyrensulfonová, acetát ftalátu celulózy, kyseliny hyaluronová, sulfát kyseliny chondroitinsírové a podobně.
Při provádění způsobu podle vynálezu se vzorek s obsahem antigenu a protilátky uvede ve styk s polyaniontem a pak se provádí reakce mezi antigenem a protilátkou při použití odpovídající protilátky nebo antigenu v reakčním prostředí.
Anion je možno přidávat do reakčního prostředí tak, že se
i) reakce mezi antigenem a protilátkou provádí v prostředí, které obsahuje polyanion, nebo se ii) působí na vzorek v pevné nebo kapalné fázi s obsahem polyaniontů, přičemž vzorek s obsahem polyaniontů a antigenu nebo protilátky je možno podrobit reakci mezi' antigenem a protilátkou i po odstranění polyaniontu, obvykle se však provádí reakce se vzorkem, který polyanion ještě obsahuje.
Reakční prostředí, vhodné pro použití pro reakci mezi antigenem a protilátkou je zejména vodné prostředí, jako voda, roztok soli nebo pufru, tento roztok může obsahovat jednu nebo větší počet dalších přísad jako jsou stabilizátory, konzervační činidla, chelatační činidla, smáčedla a podobně.
Pokud jde o pufr, je možno užít například pufr s glycinem, pufr s kyselinou fosforečnou, s kyselinou citrónovou, barbitialový pufr, tris-pufr s kyselinou chlorovodíkovou nebo s malátem, pufr s amoniakem a podobně.
2S7757
Ze stabilizátorů je možno užít například aminokyseliny, polypeptidy, bílkoviny a podobně, přičemž tyto látky je nutno volit tak, aby se neúčastnily imunologické reakce, užívají se obvykle v koncentraci 0,001 až 1, s výhodou 0,05 až 0,6 %.
Výhodným příkladem konzervačních látek je azid sodíku a merthiolát.
Výhodnými příklady chelatačních činidel jsou kyselina ethyle-ndiamintetraoctová, kyselina nitrilotrioctová, kyselina cyklohexandiamintetraoctová a podobně.
Ze smáčedel je vhodné použití smáčedel neiontového typu.
Reakční prostředí má pil v obvyklém rozmezí, používaném pro reakci mezi -antigenem a protilátkou, toto rozmezí je obvykle 5 až 10.
Koncentrace polyaniontu v. reakčním prostředí obvykle nepřevyšuje 5 hmot. %, s výhodou 0,001 až 0,5 hmot. %.
Při vyšší koncentraci polyaniontu může být reakce nestálá, zejména při použití některých systémů. Při nižší koncentraci se snižuje inhibiční účinek proti nespecifickým reakcím, které ruší stanovení, takže je pak nemožné získat přesné výsledky a zhoršuje se celková přesnost stanovení. Dochází totiž к tomu, že určité složky séra také reagují s odpovídajícím antigenem.
Antigeny, které je možno tímto způsobem stanovit, jsou například bílkoviny, polypep: tidy, steroidy, polysacharidy, tukové látky, pyly, prachy a hapteny. Pokud jde o protilátky, jde převážně o bílkoviny, které vznikly jako reakce na svrchu uvedené antigeny.
Způsob podle vynálezu je možno aplikovat na jakýkoliv známý způsob stanovení reakce mezi antigenem a protilátkou. Je možno je užít v případě, v. němž obě stanovené látky i reakční činidla jsou rozpustné v reakčním prostředí, je však možno tohoto způsobu užít také v případě, kdy reakční činidlo je vázáno na nosiči ve formě částic, který je prákticky nerozpustný v reakčním prostředí a je reakčním činidlem senzitizován. Specifickým příkladem reakcí mezi antigenem a protilátkou, které je možno zlepšit způsobem podle vynálezu, jsou radioimunologické reakce, aglutinace latexu při stanovení zákalu v infračerveném světle, imunologické stanovení pomocí enzymu, fluoroimunologické stanovení, imunonefelometrie, shlukování červených krvinek, aglutinace latexu a podobně. Způsob podle vynálezu je zvláště vhodný pro aglutinaci latexu ke stanovení zákalu v infračerveném světle, kdy je možno využít například pasivní aglutinace v reverzní fázi.
Způsobem podle vynálezu je možno zabránit nespecifickým reakcím, které jsou obvyklé při provádění reakcí mezi antigenem a protilátkou, takže je možno dosáhnout přesnějšího stanovení.
Vynález bude osvětlen následujícími příklady, všechna procentuální stanovení v příkladech jsou hmotnostní, není-li uvedeno jinak.
Příklad 1
Aglutinace latexu a stanovení zákalu v infračerveném světle.
μΐ séra normálního člověka s obsahem nejvýš 2 ^g/ml ai-fetoproteinu (AFP) se smísí s 50 μ\ roztoku s obsahem 1 ^g/ml AFP a pak se přidá 100 μΐ sérového albuminu skotu v roztoku chloridu sodného s obsahem dextransulfátu, čímž vzniká zkoumaný roztok. К 50 μΐ tohoto roztoku se přidá 50 μΐ latexového reakčního činidla, senzitizovaného protilátkou proti AFP a 200 ^1 pufru, načež so měří za stálého míchání změna zákalu při vlnové délce 940 nm. Hodnoty vzorku se odečítají na standardní křivce a vypočítá se přesnost měření. Výsledky jsou uvedeny v tabulce I a jsou srovnány s kontrolním vzorkem, který je prostý polyaniontu.
Jak je zřejmé z tabulky 1, je možno do sáhnout podstatného zlepšení přesnosti (P je nižší než 0,01) přidáním dextransulfátu do konečné koncentrace 0,1 %, vysoce zlepšen je také koeficient variace (CV). Výtěžek každého pokusu je relativní hodnota, vztažená na výtěžek, získaný při použití normálního séra, pokus byl prováděn na 10 vzorcích bez zákalu, jejichž hodnota byla pokládána za 100.
Příklad 2
Opakuje se postup z příkladu 1 s tím rozdílem, že se jako polyanion užije kyselina polystyrensulfonová do konečné koncentrace 0,2 %. Výsledky jsou rovněž uvedeny v tabulce 1, z níž je zřejmé, jak velkého zlepšení koeficientu variace bylo dosaženo.
Příklad 3
Opakuje se způsob podle příkladu 1 s tím rozdílem, že jako polyanion se užije heparin v koncové koncentraci 0,1 %. Jak je zřejmé z tabulky 1, i v tomto případě bylo dosaženo velkého zlepšení.
Příklad 4
Opakuje se postup z příkladu 1 s tím rozdílem, že se jako polyanion užije acetát ftalátu celulózy v koncové koncentraci 0,1 procenta. Jak je zřejmé z tabulky 1, také v tomto přípiadě bylo dosaženo zlepšení.
Tabulka 1
Výtěžek %
Kontrola bez Příklad 1 Příklad 2 Příklad 3 Příklad 4 polyaniontu dextransulfát kyselina heparin acetát polysty- ftalátu rensulfo- celulózy nová
237757
Číslo Vzorek Zákal
Hernolýza
| 1 | — |
| 2. | — |
| 3 | — |
| 4 | 4~~l· |
| 5 | — |
| 6 | — |
| 7 | — |
| 8 | — |
| 9 | — |
| 10 | — |
| 11 | — |
| 12 | 4-4- |
| 13 | 4- |
| 14 | 4- |
| 15 | — |
| 16 | 4- |
| 17 | — |
| 18 | 4- |
| 19 | -1-4-4- |
| 20 Průměr | — |
| Standardní odchylka CV (%] |
| 4-4-4- | 93,7 | 101,4 | 93,9 | 96,2 | 98,3 |
| 4- 4- Ή | 86,8 | 88,8 | 88,2 | 88,9 | 88,9 |
| 83,8 | 105,8 | 80,2 | 87,2 | 82,9 | |
| 4-4-4- | 88,0 | 96,5 | 90,0 | 92,2 | 93,2 |
| 4-4-4- | 76,7 | 86,6 | 80,3 | 82,3 | 85,2 |
| + | 84,6 | 98,1 | 85,2 | 87,8 | 91,2 |
| 4- | 90,7 | 103,3 | 93,4 | 93,5 | 98,5 |
| 4- | 85,9 | 103,0 | 86,8 | 85,9 | 91,7 |
| i- | 72,9 | 96,2 | 85,0 | 82,4 | 91,7 |
| 100,6 | 100,6 | 100,0 | 99,8 | 101,7 | |
| 4- | 105,1 | 100,4 | 89,9 | 100,2 | 111,2 |
| 4~ | 92,7 | 101,0 | 94,3 | 102,0 | 98,4 |
| 4- | 96,5 | 99,1 | • ‘97,8 | 100,0 | 101,2 |
| + | 92,4 | 97,5 | 95,2 | 99,0 | 101,2 |
| 4- | 100,0 | 100,2 | 97,5 | 102.0 | 101,5 |
| 4- | 79,6 | 93,1 | 80,4 | 85,0 | 88,4 |
| —. | 95,6 | 100,1 | 95,5 | 99,4 | 100,9 |
| — | 81,1 | 93,2 | 87,5 | 8'5,5 | 93,5 |
| — | 82,6 Q9 П | 85,5 ιης 1 | 83,7 Q7 9 | 87,0 1П9 Γ) | 86,0 QR П |
89,07 +8,39 9,42
Příklad 5
V tomto příkladu se uvádí výsledek přidání dextranusulfátu na shlukování červených krvinek, které může být v některých případech doprovázeno pseudoreakcí a v důsledku toho je reakce nesprávně odečtena.
Vzorek s obsahem AFP se dvacetkrát zředí roztokem dextransulfátu ve fosfátovém pufru o pH 4, který se připravuje tak, že konečná koncentrace dextransulfátu je 0,001 procenta, přičemž 100 //1 takto zředěného vzorku se přidá к suspenzi ovčích červených krvinek, které byly senzitizovány protilátkou proti AFP. Výsledná směs se nechá stát 2 hodiny. U těch vzorků, které obsahovaly nejvýš 50 mg/1 AFP bylo možno pozo-
| 97,78 | 90,1 | 92,92 | 95,18 |
| +5,76 | +6,33 | +7,21 | +7,07 |
| 5,89 | 7,02 | 7,76 | 7,43 |
rovat shlukování prstencovitého tvaru, kdežto u vzorků, které obsahovaly alespoň 100 (Ug/1 AFP bylo možno pozorovat větší prstencovitou aglutinaci nebo zákal celého vzorku. V případě, že tentýž pokus byl prováděn se vzorky o známé koncentraci, došlo к menšímu počtu pseudoreakcí i v případě, že byly použity vysoce zakalené vzorky, takže je zřejmé, že uvedeným způsobem je možno usnadnit stanovení.
Vynález byl popsán v souvislosti s několika zvláštními provedeními, je však zřejmé, že je možno provést ještě řadu změn a modifikací, které budou stále spadat do oboru vynálezu.
Claims (5)
1. Způsob stanovení reakce mezi antigenem a protilátkou, při němž se stanovovaný antigen nebo protilátka uvádí do reakce s odpovídající protilátkou nebo antigenem v reakční směsi, vyznačující se tím, že se stanovení reakce mezi antigenem a protilátkou provádí aglutinací, při níž se ke vzorku s obsahem antigenu nebo protilátky přidá přírodní nebo syntetický polymer s obsahem sulfonylových nebo karboxylových a-niontů, rozpustný v reakčním prostředí.
2. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se jako přírodní nebo syntetický polymer s obsahem sulfonylových nebo karboxylových aniontů ke vzorku přidá dextransulfát.
3. Způsob podle bodů 1 a 2, vyznačující se tím, že se stanovení reakce mezi antigenem a protilátkou provádí pasivní aglutinací v reverzní fázi.
4. Reakční činidlo pro stanovení reakce mezi antigenem a protilátkou, vyznačující se tím, že ve vodném reakčním prostředí pro reakci mezi antigenem a protilátkou, obsahuje 0,001 až 0,5 hmot. % přírodního nebo syntetického polymeru se sulfonovými nebo karboxylovými anionty, rozpustného v reakčním prostředí, například heparinu nebo dextransulfátu.
5. Reakční činidlo podle bodu 4, vyznačující se tím, že reakční prostředí je roztok pufru, například fosforečnanového pufru nebo pufru s glycinem.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56067333A JPS57182169A (en) | 1981-05-02 | 1981-05-02 | Measuring method for antigen-antibody reaction |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS312182A2 CS312182A2 (en) | 1987-09-17 |
| CS257757B2 true CS257757B2 (en) | 1988-06-15 |
Family
ID=13341982
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS823121A CS257757B2 (en) | 1981-05-02 | 1982-04-30 | Method of reaction determination between antigen and antibody and reaction agent for realization of this process |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4672045A (cs) |
| EP (1) | EP0064274B1 (cs) |
| JP (1) | JPS57182169A (cs) |
| KR (1) | KR880001533B1 (cs) |
| AT (1) | ATE12010T1 (cs) |
| AU (1) | AU559966B2 (cs) |
| CA (1) | CA1195925A (cs) |
| CS (1) | CS257757B2 (cs) |
| DD (1) | DD202178A5 (cs) |
| DE (1) | DE3262469D1 (cs) |
| DK (1) | DK158481C (cs) |
| ES (1) | ES511797A0 (cs) |
| HU (1) | HU188057B (cs) |
| IL (1) | IL65767A (cs) |
| NO (1) | NO159820C (cs) |
| PT (1) | PT74835B (cs) |
| SU (1) | SU1554782A3 (cs) |
| ZA (1) | ZA822726B (cs) |
Families Citing this family (25)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61241665A (ja) * | 1985-04-18 | 1986-10-27 | Toyobo Co Ltd | 安定化された固相試薬 |
| US5459078A (en) * | 1988-01-29 | 1995-10-17 | Abbott Laboratories | Methods and reagents for performing ion-capture digoxin assays |
| US5459080A (en) * | 1988-01-29 | 1995-10-17 | Abbott Laboratories | Ion-capture assays using a specific binding member conjugated to carboxymethylamylose |
| US5866322A (en) * | 1988-01-29 | 1999-02-02 | Abbott Laboratories | Method for performing Rubella assay |
| US5141853A (en) * | 1988-07-22 | 1992-08-25 | Abbott Laboratories | Determination of ammonia levels in a sample |
| JPH0750110B2 (ja) * | 1988-12-22 | 1995-05-31 | 積水化学工業株式会社 | 免疫測定法 |
| JPH0750108B2 (ja) * | 1988-12-26 | 1995-05-31 | 積水化学工業株式会社 | 免疫反応測定法 |
| CA2109924A1 (en) * | 1991-05-30 | 1992-12-10 | Janina Adamczyk | Reagents containing a nonspecific binding blocker in ion-capture binding assays |
| DE4328684A1 (de) * | 1993-08-26 | 1995-03-02 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren zur Bestimmung eines Analyten nach dem Agglutinationsprinzip |
| US5486479A (en) * | 1994-05-02 | 1996-01-23 | Mitsubishi Chemical Corporation | Buffer for immunoassay, kit including same and immunoassay method using said buffer |
| RU2170434C2 (ru) * | 1996-09-12 | 2001-07-10 | Мешандин Алексей Гаврилович | Способ агглютинационного иммунологического анализа |
| JP2003066047A (ja) * | 2001-06-14 | 2003-03-05 | Matsushita Electric Ind Co Ltd | 免疫反応測定方法及びそれに用いる免疫反応測定用試薬 |
| JP3871677B2 (ja) * | 2001-12-27 | 2007-01-24 | 松下電器産業株式会社 | 免疫反応測定方法及びそれに用いる免疫反応測定用試薬キット |
| DE60326717D1 (de) * | 2002-12-10 | 2009-04-30 | Panasonic Corp | Immunreaktionsmessverfahren |
| US20060257926A1 (en) * | 2003-03-31 | 2006-11-16 | Tadashi Yamazaki | Immuno-nephelometry of lipoprotein (a) and reagent therefor |
| JP4580180B2 (ja) * | 2004-02-26 | 2010-11-10 | デンカ生研株式会社 | 免疫測定法用測定値低下抑制剤及びそれを用いた免疫測定法 |
| JP5238190B2 (ja) * | 2007-05-24 | 2013-07-17 | 株式会社ビーエル | ヒアルロン酸存在下における免疫測定法及びそれに用いられる物 |
| JP2010127827A (ja) * | 2008-11-28 | 2010-06-10 | Abbott Japan Co Ltd | 非特異的相互作用抑制剤及びその診断測定系への応用 |
| JP5535601B2 (ja) * | 2009-12-01 | 2014-07-02 | デンカ生研株式会社 | 免疫測定法用測定値低下抑制剤及びそれを用いた免疫測定法 |
| JP6116268B2 (ja) * | 2013-01-31 | 2017-04-19 | デンカ生研株式会社 | 生体粘膜由来検体測定イムノアッセイにおいて偽陰性を抑制する方法 |
| JP6675834B2 (ja) * | 2015-05-21 | 2020-04-08 | デンカ生研株式会社 | イムノクロマト試験片及びそれを用いたイムノクロマト法 |
| JP6651794B2 (ja) * | 2015-11-05 | 2020-02-19 | 富士レビオ株式会社 | 心筋トロポニンｉ測定試薬及び方法 |
| CN109073641B (zh) * | 2016-04-13 | 2022-03-11 | 美迪恩斯生命科技株式会社 | 使用硫酸化多糖类的免疫学测定法 |
| JP7606506B2 (ja) * | 2020-03-31 | 2024-12-25 | 富士レビオ株式会社 | 血中アミロイドβの免疫測定方法及びそのためのキット |
| CN113030470B (zh) * | 2021-02-24 | 2022-03-18 | 江西英大生物技术有限公司 | 肌酸激酶同工酶测定试剂盒 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4148869A (en) * | 1975-03-06 | 1979-04-10 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Immunological reagent and method of using same |
| US4162192A (en) * | 1978-09-28 | 1979-07-24 | Juridical Foundation | Method for purification of HBs antigen |
| US4223005A (en) * | 1979-02-15 | 1980-09-16 | University Of Illinois Foundation | Antibody coated bacteria |
-
1981
- 1981-05-02 JP JP56067333A patent/JPS57182169A/ja active Granted
-
1982
- 1982-04-19 AU AU82823/82A patent/AU559966B2/en not_active Expired
- 1982-04-21 ZA ZA822726A patent/ZA822726B/xx unknown
- 1982-04-28 DK DK190682A patent/DK158481C/da active
- 1982-04-28 DE DE8282103639T patent/DE3262469D1/de not_active Expired
- 1982-04-28 AT AT82103639T patent/ATE12010T1/de not_active IP Right Cessation
- 1982-04-28 KR KR8201863A patent/KR880001533B1/ko not_active Expired
- 1982-04-28 EP EP82103639A patent/EP0064274B1/en not_active Expired
- 1982-04-29 IL IL65767A patent/IL65767A/xx not_active IP Right Cessation
- 1982-04-29 ES ES511797A patent/ES511797A0/es active Granted
- 1982-04-30 PT PT74835A patent/PT74835B/pt not_active IP Right Cessation
- 1982-04-30 CS CS823121A patent/CS257757B2/cs unknown
- 1982-04-30 HU HU821359A patent/HU188057B/hu not_active IP Right Cessation
- 1982-04-30 NO NO821444A patent/NO159820C/no unknown
- 1982-04-30 DD DD82239478A patent/DD202178A5/de not_active IP Right Cessation
- 1982-05-03 CA CA000402117A patent/CA1195925A/en not_active Expired
- 1982-05-03 SU SU823430145A patent/SU1554782A3/ru active
-
1984
- 1984-10-09 US US06/658,456 patent/US4672045A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6367864B2 (cs) | 1988-12-27 |
| DD202178A5 (de) | 1983-08-31 |
| EP0064274A1 (en) | 1982-11-10 |
| SU1554782A3 (ru) | 1990-03-30 |
| KR880001533B1 (ko) | 1988-08-19 |
| CA1195925A (en) | 1985-10-29 |
| NO159820B (no) | 1988-10-31 |
| DK190682A (da) | 1982-11-03 |
| ES8302313A1 (es) | 1983-02-01 |
| EP0064274B1 (en) | 1985-02-27 |
| DK158481C (da) | 1990-10-08 |
| PT74835B (en) | 1983-10-28 |
| DE3262469D1 (en) | 1985-04-04 |
| AU559966B2 (en) | 1987-03-26 |
| NO159820C (no) | 1989-02-08 |
| NO821444L (no) | 1982-11-03 |
| ES511797A0 (es) | 1983-02-01 |
| CS312182A2 (en) | 1987-09-17 |
| ATE12010T1 (de) | 1985-03-15 |
| DK158481B (da) | 1990-05-21 |
| US4672045A (en) | 1987-06-09 |
| HU188057B (en) | 1986-03-28 |
| ZA822726B (en) | 1983-11-30 |
| JPS57182169A (en) | 1982-11-09 |
| AU8282382A (en) | 1982-07-01 |
| IL65767A (en) | 1985-06-30 |
| KR830010384A (ko) | 1983-12-30 |
| PT74835A (en) | 1982-05-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CS257757B2 (en) | Method of reaction determination between antigen and antibody and reaction agent for realization of this process | |
| DE68918166T2 (de) | Spezifische Bindungszusammensetzung mit einem Protein oder einem Kohlenhydrat mit Nieder-pI und ein diagnostischer Testsatz und Verfahren zur Anwendung. | |
| CA1139203A (en) | Method and reagent for counteracting lipemic interference | |
| JP5031208B2 (ja) | アッセイ | |
| EP0008432B1 (de) | Immunologisches Bestimmungsverfahren | |
| EP0008682A1 (de) | Mit einem Proteinmaterial beschichteter Latex, Verfahren zur Herstellung dieses Latex, immunologisches Reagenz enthaltend diesen Latex, Verfahren zur Herstellung dieses Reagenzes, Verwendung dieses Reagenzes, Bestimmungsverfahren unter Verwendung dieses Reagenzes und Reagenziengarnitur enthaltend dieses Reagenz | |
| EP0163393A2 (en) | A method of performing an agglutination immunoassay | |
| EP0328413A2 (en) | Sodium decyl sulfate wash solution, test kit and method for the determination of an immunological ligand | |
| CA1168580A (en) | Immunological reagent for the detection of tubes of the rheumatoid factor in a biological specimen and process for preparing this novel reagent | |
| JP4197393B2 (ja) | ＩｇＡ腎症の検査法 | |
| DE69412940T2 (de) | Verfahren und zusammensetzung zur verminderung der effekte von endogener alkalischer phosphatase | |
| JPH10160734A (ja) | イムノアッセイ用較正／対照用配合物 | |
| EP0379133B1 (de) | Verwendung von zweiwertigen Kationen in immunchemischen Tests | |
| KR900002840B1 (ko) | 안정화된 효소 결합체 조성물 | |
| DE69510668T2 (de) | Verfahren zum nachweis von endprodukten der fortgeschrittenen glykosylierung von hämoglobin | |
| EP0554657B1 (de) | Verfahren zur Bestimmung von Antigenen oder Antikörpern in Gegenwart eines Immunkomplexes | |
| US6514716B1 (en) | Detection of the end-position sialic acid groups of the human transferrin molecule | |
| JP2007212343A (ja) | 抗原の測定法およびそれに用いるキット | |
| EP0100395B1 (en) | Reagent for determination of human urine kallikrein | |
| JPS6022295B2 (ja) | 赤血球凝集試験用水性溶媒 | |
| US5360717A (en) | Agent, for immunochemical assays, containing amine oxides | |
| CS252455B2 (en) | Method of streptolysin's o antibodies continuous determination in whole blood sample | |
| EP0713094A1 (de) | Heterogener Immunoassay mittels präzipitierbarer Festphase | |
| JPH0743385B2 (ja) | 梅毒抗原の製造法 | |
| JP2000346841A (ja) | Ｐｉｖｋａ−ｉｉの測定方法 |