CS236458B2 - Reactive agent for lipase determination and method of its production - Google Patents
Reactive agent for lipase determination and method of its production Download PDFInfo
- Publication number
- CS236458B2 CS236458B2 CS799136A CS913679A CS236458B2 CS 236458 B2 CS236458 B2 CS 236458B2 CS 799136 A CS799136 A CS 799136A CS 913679 A CS913679 A CS 913679A CS 236458 B2 CS236458 B2 CS 236458B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- weight
- buffer
- reagent
- triglyceride
- sodium
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
- C12Q1/44—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase involving esterase
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/10—Composition for standardization, calibration, simulation, stabilization, preparation or preservation; processes of use in preparation for chemical testing
- Y10T436/107497—Preparation composition [e.g., lysing or precipitation, etc.]
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Vynález se týká činidla pro stanovení lipázy a způsobu jeho výroby, zvláště jde o činidlo, poráitelné při turbldimetrické·- stanovení,
Při diagnostice onemocnění slinivky břišní má zvláštní význam stanovení enzymu amrlázy [E.C. a lipázy ^.C. 3.1.1.3]] · Při akutním zánětu slinivky břišní dochází v průběhu někooika málo hodin k velkému vzestupu hladiny obou enzymů v krevním . séru. Při neporušené funkci ledvin se však amrláza vzhledem ke své nižší molekulové hmotnnosi ryclheji vylučuje, kdežto ' hladina lipázy v krevním séru zůstává delší dobu na zvýšených hodnotách. K diagnóze zánětu slinivky břišní je možno'dospět stanovením hladiny obou enzymů.
Lipáza štěpí primárně α-esterovou vazbu triglyceridů, většinou jde o estery alifatických kyselin s delš^ řetězcem, tyto trigLyceridy. jsou štěpeny na diglyceridy a volnou alifRtikkou kyselinu. Další přeměna na moonogycerid probíhá podstatně poiuleei.
Na rozddl od běžných, en^^Mtt.cky katalyzovaných - reakcí, které probbhaaí ve vodné fázi působí lipáza pouze na hranici olejových kapek'a vody· Tím se liší od esteráz, které reagují ve vodném prostředí. Kromě chem^kých parametrů je tedy kinetikp do velké míry ovlivňována také velikosti bloku subbsrátu.
Jsou známy titrimetrceké metody pro stanovení lipázy .Tyto ' metody se však provádějí jen . zřídka vzhledem k dlouhé reakční době, velkému objemu vzorku a velké pracnost.
Podstatnými nevýhodami metod stanovení jsou zejména dlouhé inkubační doby a velký objem vzorku, což je možno oddsrían.t poirtitm turbidimotrických metod, při nichž se sledu je vyjasnění emuuze triglyceridu a vody fot^onati^icky» Podstatným problémem těchto turbidimetriclých stanovení je však požadavek, že emulze muuí mít pokud možno ' stejnou velikost kapek. Tento požadavek má velký význam, protože kinetika reakce silně závisí na velikosti kapek triglyceridu. Z DAS δ. 19 61 983 je známa emulze olivového oleje, která je vhodná pro titrimetrické stanovemC účinnoosi lipázy. Tato emiHze se však nehodí pro stanovení turbidimetrckým způsobem, protože vzhledem k vysokému obsahu trig^yrceridů má při fotometrcekém stanovení příliš velkou absorppc. Při pokusu o ředění tohoto reakčního činidla, které by jinak umínilo turbidimetrické stanovení lipázy, se však mění parametry emulze do té míry, že stanovení není proveeitelné.
Vynález ai klade - za úkol navrhnout turbidimetrické, tj. nefelometrické stanovení účinnooti lipázy pomocí reakčního činidla, které se nachází v suché formě a je možno jej jednoduchým smísením s vodou převést v emulzi s reprodukovatelnou velikostí kapek. Vynález si rovněž klade za úkol navrhnout reakční činidlo, v němž by bylo možno velikost kapek v rekonstituované eimuzi řídit kv(anitativiími změnami složení tohoto reakčního činidla tak, aby tato velikost byla nezávislá na ^igl^eti^, který se- pouHje k výrobě reakčního činidla. Tímto opatřením je možno dosáhnout toho, aby nebylo nutno připravovat emuuzi bezprostředně před prováděním testu. Protože velikost reak&ií plochy do velké míry ovlivňuje kinetito reakce (Clin. Chem. 2Д. 522 až 553, - 1977), je zapotřebí zajittit zejména stálou plochu subasrátu, což je nožno provést zejména zachováním stálé velikosti kapek. Kwaita emudze je věak silně závislá také na způsobu výroby emuu.se, takže - cílen vynálezu je navrhnout činidlo, jehož velikost kapek by byla nezávislá i na pouuiií .různými osobam, takže by nedocházelo k podstatným odchylkám v naměřené účinnosti enzymu, činidlem podle vynálezu by tedy mělo být možno od i snadt všechny nevýhody známých postupů.
Předmětem vynálezu je tedy reakční činidlo pro stanovení lipázy v suchém stavu, rekoniSituovatelié přidáním vody na - emuuzi pro pooHtí při turbidiuetrikkéu stanovení s obsahem oleje jako tub8trátt, ochranného koloHu na bázi polyhydro^sloučenin, jako monommení nebo polymeení hexozy nebo pentozy o 1 až 10 pentťzových nebo hexozových jedn^tkách v mooelku.e a/nebo pevného polyethylenglykolu, ernugáton a aktivátoru, s výhodou chloridu sodného, chloridu vápenatého nebo Chloridu hořečnatého, v^^^^n^auuíícií se tím, že - sestává' z 0,2 až 10 % hmoonnstaích kapalného 20 až 90 % hmotnostních ochranného kolonu, 5 až 60 # hrnom)osních alkalické s^oi žlučové kyseliny, 0,001 až 0,1 % hmoonnosních kolipázy, 0,1 až 2,0 % h^nor^^o^]^dích konzervačního činidla, například azidu sodíku a popřípadě 5 až 20 % hmotti)tSních !uo0utiljf, 3 až 5 % hmoOnitSliíih pitfru, například trtc(^ydroJQmethyl)minouethanu, trS8(hyroαχmιtιUyιl)miitouetfahrУlosChorllu nebo kyseliny 2-(4-*(2hydlrtχyet]hl)piperazii-1-yi] e-thansolfsntvé o pH 6,0 až Ю,5 a 0,5 až 5 % huotnittních aktivátoru, například chloridu sodného nebo vápenatého.
Neočekávaně bylo prokázáno, že reakční - činidlo podle vynálezu má při své stejnoměrnou velikost kapek, a tím i reprodukova^ný pohyb sube^tu, čímž je možno zajistit vysokou reakční rychlost, což má velký význam pro praktické provádění turbiUmettického stanovení účinne^si enzymu.
Změnami kvanjitativiíht složení v rámci svrchu uvedeného rozmezí Je možno upravovat nezávisle na způsobu výroby velikoet kapek tekoittituovaié emulze. Počáteční extinkce je ovlivněna obsahem vychází se tedy z pravidla od určité požadované koncentrace triglyietilt a mn^sv! jedno tlivých složek se pak upravuje tak, aby výsledné ^eskč^^í činidlo mělo požadovanou velikost jednotlivých kapek.
Z trigtyceridů je možno poiužt přírodní i syntetické triglyceridy, jejichž zbytky alifatických kreslin -obeiúmjí 4 aí 22 uhlíkových atomů Jde například o triglyceridy, které obalují tři zbytky kyseliny •sslmí. Výhodné jeou triglyceridy s delším řetězce· nenasycenýcU kyselin, zejména triglyceridy, v nichž zbytky těchto kyselin obsedují 8 aí 20 ulicových atomU a 1 aí 8, s výhodou 1 aí 3 neziiULLíkových dvojných vazeb» Vzhlede· ke své snadné dostup-noos! je výhodné triglycerid, který obaluje tři . zbytky kyseliny olejové, vhodný je i olivový olej· Vhodné miožísví trigyceridu je 0,2 - aí 2,0 % hnotnootních·
Z ochranných koloidU je mošno Uít běžné - známé sloučeniny, například polyUyaro:χr81oučemny, sérový albuOn, polyviцylpyrolidoo, pevné polyetUyieooxidy a podobně. - Výhodné jsou polyUydr^^i^]Louč<^i^iny, zejména monoonry nebo polymery pentézy nebo hexózy o 1 aí 10 pentozovýcU nebo UexózžvýcU jednotkách v m^oi^lnuLo a/nebo pžtyetUУienlg>yk>l, který je při teplotě •staooti v pevném stavu. Výhodný· příklady vhodných polyUydroχytlouČenio jsou mamnt a dHší polyllkoUoty, oligotlcUarid glukózy, mannózy nebo •a.toUeptózy, potyethylengLykel se střední ooOekkuéirnt UooOnooSÍ 3 500 aí 7 000 apod· Dalším poiuitelrý· ochranný· koloidy jsou například almnoOy8tlioy jako Hanin, rostliímé pryže jako arabská guma apod. Výhodné minOísví ochranného koloidu nebe smšsi ochranných koloidU je 50 aí 70 * hmotnostech· N^íjvýhi^ťhněj^^í je směs polyHkoUolu a polyethylengLykolu.
Ze žlučových kyselin paddaí v úvahu známé žlučové kyseliny s povrchovou aktivitou, např. kyselina cholinová, taurocUolová, desooqreholová, taurodetoχrciul.tvá, glykodetoχychoLová a jejich •kalické mol, zejména sodné деИ. Výhodné m^c^ožst^lí těchto sloučenin je 10 až 15 · UooOnootních·
DHšío výmamný· podílen ^akčního činidla podle vynálezu je koHpása. Tato koli^páza má být prosta cizorodých Látek. Vhodné oxnOísví této složky je 0,003 aí 0,01 ' Uooouomnich %·
Z kžnБιм*VlČlníiU činidel se užívaj v činidle podle vynáLezu takové Látky, které n^c^o^liv^\ují enzymUckou účinnost lijázy. Zvláště vhodnými sLoučenina· jsou azidy iICiícdýcU kovU, zvláště ltidtod:íku. Je možno pouuít i další konzervační činidla, např. tUiozid a. dHší Látky s obsahem síry. Vhodné mnOísví konzervačního činidla je 0,2 aí 0,7 · U·Onoot·iU· čiHdlo podLe vynáLezu dále obepnula ještě močooinu, s výhodou v ο^Ηνί 10 aí % Uootnott·ch·
Z pufrU jsou vhodné všechny známé pufry, který· je možno v posCčo!· činidle podle vynáLezu udržet hodnotu pH 6,0 aí 10,5. Výhodné rozmezí -pH je 8,3 aí 9,5. Příkaadeo vhodných pufrU . mohou tyt tгeeUlwtol·lotlý- pufr, aietiloλtlgintvý piufr, trispufr, gooddpur» např. Uepesppur, který je zvláši vhodný jeko přísadě při iytfiiiztii, tapspufr a -bucln, Zvláště výhodný je trispufr. Výhodné mnOísví pufru je 3 až 10 % Umoncostních· Další·- aktivátore· mohou být -ionty vápiníku· - Protoíe tyto Látky mohou vytvářet s kyselinou aoto:χyihololou nerozpustné sloučeny, užívá se s výhodou za přítoonooti vápníku jako kyselina ílučová kyselina lauroaesžφeholžvá, - protoíe při povuiií této kyseliny je možno poiužt vyšší konceenraci vápníku a to aš v rozmezí 1 aš 5 - emOŮ.
Kromě svrchu zmíněných Hošek mUše reakční činiHo podle vynálezu v některých případech obžalovat inertní přísady, které uleU&uí jeho povuiií.
Reák&ní činiHo po<dLe vynálezu obžaluje také aktivátor pro li pásu. Aktivátory iipázy jsou zásadně známy Výhodnými aktivátory jsou cUnridy, zejména cU.orid sodný »avšak i HLší choridy kovU nebo kovU HkHicCýcU zemn, pokud netvoří nerozpustné sloučeniny o dHší· Bleška·, reakčního činidla podle vynálezu nebo se sI^oS^C^i^í vzorku.
Účinným aktivátor· Iiou i hOřečnaté ionty.
236456
Není zcela Jasné, jaký je mechanismus účinku jednotlivých - složek reakčního činidla poULe vynálezu· Je pravděpodobné, že kolipáaa brání ztrátč enzymu, k níž by - moULo dojít přL vysokém obsahu sooi kyseliny žlučové, - zejména desoiqrchhlátu, ta^^eso^cC^^^ nebo glykodesojqrchooátu· Kromě toho zlepšuje tato složka lineární průběh reakční křivky· Mšovina má patrně vliv na hranLční oblast me^i vodou - a lipidsa a stabilizuje tuto ernulii.
Reakční činidlo podLe vynálezu se vyrábí ly!^:LL^i^i^acL emiuze, která 60 vyrábí běžným způsobem se svrchu uvedených složek· Až po lyoni-izaci se β výhodou přidává pf močovina a popříp· také část ochranného kundu nebo - aktivátor· Lyofilioovená dmU.sd se vyrábí běžný· způsobem, např· tak že se všechny její složky smísí a vodným rozpouštědlem, em^lg^J se běžným způsobem, např· působením ntrazvraku, zpracováním v ^Ση^ίη mlýnu a podobně s následným zmrazením na teplotu -40 °C za současného - sušení ve - vakuu za běžných pocdnínek, např· při tlaku 0,007 až 7 Pa·
Při Lyo^iLi^i^acL je nutno přidet sů kyseliny žlučové, kolipázu,- alespoň 20 hmootnost— ních * ochranného koledu, alespoň část konzervačního činidla a popřípadě aktivátor· Výhodný způsob výroby lyofilllavné^Oo činidla a vodné emú-se spočívá v tom, že se jednoUivé složky s výjimkou rozpučí ve vodě a do vyniklého roztoku se pak vstřikuje roztok ti^^certou v těkavém organickém rozpouštědle ve formě jemného paprsku ze stálého míchn· Z těkavých organických rozpouštědel jsou vhodné zejména alifatické alkoholy a ketony o 1 až 4 atomech uh.íku·
Zbbvaaící složky činidla podle vynálezu, zejména pufr, aolooV.tua, popříp· další poddl ochranného kundu, konzervační - činidle a aktivátor je možno přidat k lyo^:il^:^j^át^u bezprostředně po jeho výrobě k^fkoHv poozíší·
Jak již bylo svrchu uvedeno, je překvapující, že reakční činidlo podle vynálezu po rekonntttuci má změny extinkce za jednotku času, která jsou v podstatě nezávislé na extinkci výchozí dm^Дzd - a na výrobě reakčního činidla· Mimoto je extinkce rekonstruované em^uze poměrně stálá· žlučové kyseliny se před použitím s výhodou zbaví případných nečistot, např· produktů svého o^^c^ou^á^iFS^r^ní, a to např· extrakcí n-butanolem za alkalických ак^пек, pře krystalováním ze směsi alkoholu a acetonu apod·
Tyto pře^e^v^j^puj^í^lí vlastnosti reakčního činidla podle vynálezu je možno pottvrdi.m i stanovením velikosti jednotlivých kapek emu-ze před Lylfilizalí a po ní pomocí počítače· (Cotuter-Co^nte)· . Pomocí tohoto přístroje je možné zjistit procentišlní - rozdělení, částic o průměru 460 až 16 000 - nm v o^upech 100 až 1 000 nm· Při tomto měření bylo možno že rozdělení - velikosti kapek před LylfiLizalí se velmi - mění vzorek od vzorku, avšak po LylfiLizali a poppťp· po přimíšení dalších složek Trakčního činidla je poměrně velmi - stálé· Svrchu uvedeným způsobem vyrobená suchá - emulse zůstává stálá i v po^rně teplých podsínkáeh, např· při uchování 3 týdny při teplotě 35 °C> přičemž současně - se nemění ani velikost kapek· Většina kapek má průměr 500 až 1 000 nm· Jsou proto zvláště. vhodné pro fotone ttrické sledování vyjasněn zákalu při 340 nebo 365 na· Při velikosti kapek nižší než 340 nm jiš není možno sledovat odboiušvifaí kapek triglyceridu, oproti tomu větší kapty, spaddaící do svrchu uvedeného rozmezí jsou -ideálním substrátem pro lipázu, větší kapky jsou již příliš - veliké·
Další podstatnou výhodou reakčního činidla podle vynálezu je skutečnost, že postytuje stejné změny účinnooti za jednotku času u lddské i u vepřová ippásy se slinivky břišní·
Protože při tirrinetrlckéa stanovení je tedy možno užít obě tyto lipásy, je také možno užít ke knibraci standardu, který oblS1aou;Jd vepřovou Lijázu·
Dalěí podstatnou výhodou reakčního činidla podle vynálezu je skutečnost, Se chybí fáze lag. Je znáno, ie při turbidiaetrlekán stanovení lipázy dochází ai po určité době к reakci nultého řádu. Tento průběh reakce je věak pro stanovení účinnosti enzymu zcela běžná. [h. U· Bergmeyer, Grundlagen der enzynatischen Analyso, 1979, 58f^]. Doba, která uplyne až do počátku skutečné reakce se nazývá lag-fáze a odstranění této doby je výhodné.
Vynález bude osvětlen následujícími příklady v souvislosti s přiloženými výkresy, na nichž je graficky znázorněno rozdělení velikosti kapek v emulzích podle různých příkladů.
Na obr· 1 je znázorněno rozdělení velikosti kapek pro produkt z příkladu 2, na obr· 2 je znázorněno totéž rozdělení pro produkt s příkladu 7, na obr. 3 je znázorněno totéž rozdělení pro produkt z příkladu 8 (srovnávací příklad), na obr· 4 je znázorněn produkt z příkladu 9·
Na všech výkresech, tj· na obr· 1 ai 4, je na ose x znázorněna velikost kapek v nm, na ose у množství v objemových *· Plná Sára £ znamená vidy rozložení velikosti kapek u jednotlivých produktů po rekonstituci, čeřchovaná Sára Я znamená vidy rozložení velikosti kapek pro jednotlivé produkty po 3 týdnech po rekonstituci·
Příklad 1
0,06 g chloridu vápenatého, 22,72 g deaoiycholátu sodného, 25,35 g polyethylenglykolu a molekulovou hmotností 4 000, 1,1 g azidu sodíku, 0,0® g kolipásy a 50,8 dílů mannitu ae rozpustí v 1,0 litrech destilované vody· Do získaného roztoku se vhání za stálého míchání 1,42 g triglyceridu kyseliny olejové v roztoku ve 32 ml n-propanolu pod tlakem 2.105 Pa tryskou o průměru 1,5 nm. Takto získaná emulze triglyceridu kyseliny olejové se zmrazí na -40 °C a lyofílizujo·
8,95 g desoxycholátu sodného, 7,25 g trispufru, 1,20 g trispufru· ЯС1, 7,5 g póly» ethylenglykolu s molekulovou hmotností i 000, 1,97 g chloridu sodného, 16,2 g močoviny, 56,9 g mannitu se spolu za sucha smísí· 2 hmotnostní díly takto získané směsi s obsahem pufru se pak smísí s 1 hmotnostním dílen lyofilizátu v míchacím zařízení na homogenní reakční činidlo· >
Při stanovení lipázy se smísí 150 mg tohoto reakčního činidla a 2,5 ml vody, přidá se 0,1 ml vzorku a měření se provádí fotonotricky při 365 nn a teplotě 25 °C proti vodě· Vzorkem je např· krevní sérum, ěíáva z dvanáctníku, moč nebo giné tělesné tekutiny·
Správnost metody byla ověřena srovnáním s výsledky titrimetrického stanovení· Při sledování 60 vzorků lidského krevního séra s různou účinností lipázy byly získány následující výsledky:
Korelace: x Rickova metoda, у způsob s použitím reakčního činidla podle vynálezu· ϊ « 0,93·ζ-20, r 0,96·
Linearitu testu jo možno prokázat ai do 1 300 Rickových jednotek·
Jedna Rickova jednétka 1 jumol/FFA/ninuta « 1 U. FFA « uvolněná alifatická kyselina·
Příklad 2
500 g mannitu, 0,900 g polyethylenglykolu o molebn.érn haotnostl 4 000, 0,524 g deaojxrcholátu sodného, 1,5 mg kolipázy n 8 mg nzidu sodíku sn rozpustí v 50 mL destilované vody. K tomuto roztoku se přidá jemnou tryskou 150 mg triglyceridu kyseliny olejové v roztoku v 5,0 ol prepnnolu sn stálého oíchtaí. ZísWná eotú.se ee zm*azí nn teplotu -40 *C n pnk se lyofilizuje·
3,50 g m^ť^c^oiiny, 3,73 g desooqrchooátu sodného, 0,4 g chloridu sodného, 0,10 g nsidu sodíku, 2 mg uhiiCitenu vápenatého, 1,355 g trispufru n 0,200 g trispufru. HC1 se dAklndné pnmísí, přidá se lyofilizát n výsledná směs se snovu dŮkLndné promsí.
Tímto způsobem se získá 8,219 g výsledné híss, která obt^iO^iuJe následující mrnoství jednotných složek:
| Mnrnnt polyet0yleiglyisl | 1,500 g ‘ 0,900 g |
Celkem 2,4 g 29,2 Omolnostních %
| deso:ιqг¢holát sodný iolipáza ezid sodíku trispwfr trispufr.HCl | 4,254 g “ 51,7 hoolnistnícO % 1.5 mg 9 mg 1,355 g 0,200 g |
Celkem 1,555 g 18,9 hmoonostintch %
| močovinu | 3,5 g 412,5 01olniotníc0 %· |
mg této sbísí se rozpučí v 2,5 m. destilovcné vody n přidá se 200 дй vzorku (sérum) о^вшС se provádí při 340 nm n teplotě 25 nebo 30 °C - f^ol^om^e^iricky proti vodě nebo vzduchu. Z rozdílu extinkce zn minutu se stěnoví úCinnost lipázy.
Rozd^ení velikosti knpek po ^^χϋηηοί i po 3 týdnech uchovávání při teplotě 35 °C po ns p^Ž^CttsCi je znázorněno nn obr. 1.
P ř í k 1 nd - 3
8,41 g nlbuminu z hovězího sérn, 12,2 g desi^uq^c^l^c^oLátu sodného, 0,02 g nsidu sodíku n 0,034 g kelipásy se rozpust ve 100 mL destilované vody· Zn stálého míchání se přidá vstřikováním pod tlekem roztok 3,5 g triglyceridu kyseliny olejové v 7 m. propanolu. Tnkto vzniklá emulze se zmazí nn -40 °C n lyofH^zuje.
17,4 ю^Пи, 4 g poSyettyle!igykolu v pevném stnvi. 7 g aoOcoiLnrt 7,47 g
Látu sodného, 0,82 g cHLoridu sodného, 0,2 g ssíUu sodíku, 2,71 g trispufru n 0,4 g - trispifu.HCl se umele n dŮtLe^dně promís. Přidá se rozdrcená suchá emUse n výsledná směs se znovu důklndně prosísí.
mg tekto získaného prášilvité0o renkCního Cinidln se přidá ke 2 mL vody n po rozpuštění se přidá ještě 100 /Л vzorku (séra). Reakce se provádí - fotooetriciy při 340 ( 36*5) nm.
Příkl ad 4
8,41 slaninu, 1,22 g desooQrcholátu sodného, 9,02 g azidu sodíku a 0,034 g kolipázy se rozpustí ve 100 OL destilované vody. Za stálého míchání se přidá pod tlikeem roztok
3,5 g triglyceridu kyseliny olejové v 7 mL propanslu. Vzniklá emulze se zarazí na teplotu -40 °C a - pak se liofilizuje.
17,4 a marnitu, 4 g poLyethyl^^iglykolu v pevném stavu, 7 g močnim, 7,47 g desoxycholátusodného, 0,82 g ChLoridu sodného, 0,2 g azidu sodíku, 2,71'g triapufru a 0,4 g trispufru.HCl se umele a dŮkLataě pnmísí· Pak se přidá rozdrcená suchá emulze a směs se znovu prumísí.
eg takto získcného pískovitého reakčního činidla se smísí se 2 m. destilované vody a po rozpuštění se přidá 100 /uL vzorku (sérum). Měření se provádí f ^(metricky při 340 (365) nm.
Příklad 5
4,205 g polyethylenglykolu o molekulové ^воШо^! 4 000, 4,205 g albuminu z hovězího séra, 1,22 g deso^c^t^c^ol^^tu sodného, 0,02 g azidu sodíku a 0,034 g kolipázy se rozpustí ve 100 ml destilované vody. Pak se za stálého míchání přidá pod tlakem roztok 3,5 g triglyceridu kyseliny oLejové v 7 ml propaoolu. Takto vzniklá emulze se zmrazí na teplotu -40 °C a pak se lyofLlizuje.
17,4 g mearnitu, 4 g polyethyrenglykolu o molekulové ^0^0^1 4 00(0, 7 g meloli]nr,
7,47 g desojqrchooátu sodného, 0,82 chLoridu sodného, 0,2 g azidu sodíku, 2,71 g trispufru a 0,4 g tris-pufru.HCl se umele a důkladně prumísí. Pak se přidá suchá emulze a směs se znovu homogeerně prosísí.
mg pískovitého činidla se smísí se 2 ml destilované vody a po rozpukaní se přidá 100/U1 vzorku (sérum). Mření se provádí fotometricky při 340 (365) nm.
Příklad 6
6,73 g polyethylenglykolu (polywachs 4 000), 1,68 g póly vinylpyrrlli donu, 1,22 g deto:qrcholátu sodného, 0,02 g azidu sodíku a 0,034 g kolipázy se rozpustí ve 100 mL destilované vody» - Za stálého míchání se pak pod tlikcem přidá roztok 3,5 g trigtyceridu kyseliny olejová v 7 íL propnolu. Takto vzínLklá suspenze se pak zmazí na teplotu -40 °G a lyofilizuje.
17,4 g auoiiltu, 4 g pooyethrlengLykalu, 7 g mc^o^č^oiinr, 7,47 g deaoxxchooátu sodného, 0,82 g chloridu sodného, 0,2 g azidu sodíku, 2,71 g trispufru a 9,4 trispufru.HCl se umele a důkladně ^^m^±8^sí. Přidá se rozdrcená suchá emtuLze a směs se znovu prosísí.
mg tohoto píí^vitého činidla se přidá do 2 - mL destilované vody a po rozpuštění se přidá jeStě lOO/ul vzorku (sérum). Stanovení se provádí íotometricky při 340 (365) nm.
Příkl^a^d 7
Srovnávací příklad, směs obsahuje ppíliě malé ^ο^^ί kyseliny žlučné.
4,69 g marnitu, 4,69 g polyeth^íLen^í^koLu (Poljreasch 4 000J, 0,38 g deso:xy<cho.átu sodného, 0,02 g azidu sodíku^ 0,034 g koli^pázy se rozpučí ve 100 mL vody.
Za stálého míchání a pod tlakem se pak přidá do tohoto roztoku roztok 3,5 g trigtyceridu kyseliny olejoí v 7 mL propaoolu. ^sicaná emiUze se zmr^a^lí na teplotu -40 °C a pak se lyofilizuje.
17,4 g ooarnntu, 4 g polyethylenglykolu o molekulové hmotnosti 4 000, 7 g močovin»
7,47 g desosxchhtétu sodného, 0,82 g clh.oridu sodného, 0,2 g azidu soddku, 2,71 g trispufur a 0,4 g trtspuftnuHCl se umele a důkladné se proiísí. Pak te přidá rozdrcené suchá eodze a aoés se znovu důkladné prorníst.
mg takto získaného práSkovitého reakčního činidla se přidá do 2 ol íestioovaoé vody a po rozpuštění se přidá 100/ůL vzorku (sérum). Reakce se provádí fot^«tricky při vlnové délce 340 (365) na.
»
Rozddlení velikosti jednotlivých kapek (sterým způsobem jako v příkladu 2) je znázorněno na obr· 2.
Příklade .
Srovnávací příklad
3,76 g manniiu, 5,63 g polyethdenglykolu o molekulové Οοο^ο^Ι 4 000, 0,19 g íeto]qyhh)0átu sodného, 0,02 g azidu sodíku a 0,034 g kolipázy se rozpust ve 100 OL destilované vody· Za stálého míchání se pak přidá roztok 3,5 g triglyceridu kyseliny olejové a v 7 OL propanolu pod tXia)eeo« Takto vzniklá emulze se zmrazí na teplotu -40 °C a lyol^^Ll^i^z^uje.
17.4 g osanntu, 4 g polyethcleoglckolu o molekulové OmoVnotli 4 000, 7 g mo0ovilnc,
7,47 g de8ooychotétu sodného, 0,82 g chloridu sodné ho, 0,2 g azidu sod diku, -2,71 g trispdTru a 0,4 g trispufru.HCl se umole a důkladné promles.- Pak se přidá rozdrcená suchá emulze a aoěs se znovu proBÍas.
mg tohoto práSkovitého reakOního činidla se přidá ke 2 OL destilované vody a po rozpuštění se přidá jeStě lOO/UL vzorku (sérum). Reakce se provádí při 340 (365) na.
Κοζάβ^οαί velikosti kapek se míří stejtýí způsobem jako v příkladu 2 a je znázorněno na obr. 3.
Příklad 9
8,88 g marnUu, 0,86 g desotycholátu sodného, 0,1 g azidu sodíku a 0,034 g kolipázy se se rozpussí ve 100 OL íe8titované vody. Za stálého míchání se pak pod tlakem přidá roztok
2,5 g ^igl^e^^u tyysliny otejtié v 7 m0 přepsanou· νζηϋΐύ етоЛге se znoraí na teplotu -40 °C a lctfiliíuje.
22.4 g oamnntu, 4 g polclt0cllOglyktlu o molekuLové hmo0notSi 4 000, 2 g moOoviLic,
7,47 g deзovycho0átu sodného, 0,82 g dhoridu sodného, 0(,2 g azidu soddku, 2,71 g tris- - . pufru a 0,4 g triapuftuuHCl se umole a důkladně promíss. Pak se přidá rozdrcená suchá emulze a směs se znovu důkladně promís!.
mg tohoto préSkovitého r^eakOního činidla se přidá ke 2 OL destilované vody a po rozpuštění se přidá jeStě 100 /UL vzorku (sérum). Reakce se provádí ftttoílricky při 340 (365) nm. t
Rozddlení velikost.! jedno tlivých kapek se provádí stejně jako v příkladu 2 a je znázorněno na obr. 4.
Příklad 10
V 1 000 ni destilované vody se rozpustí 75 g marnitu, 25 g'polyethylonglykolu o molekulové haotnooti 4 000, 20 g taurodesoiqrchooátu, 55 smolu HEPESf^pufru o * 6,8, 0,3 g chloridu vápenatého a 9 ng kolipázy.*K tonuto roztoku se za nícháni přidá 1 g triglyceridu kyseliny olejové. Tato eotu.se se rozdélí do Lahviček po 1 OL a LjořiLisuje
Lyooilizát se rozpustí v 2,0 nL destilované vody. Přidá ae 100/ul séra a lipáza se stanoví fotonetricky při 340 nebo 365 no·
Po skladování Lyofiliíátu při 4 °C a 35 ' °C není možno po 3 -týdnech po rozpuštění v ^dos^ocTa^ vodl pozorovat žádný rozdíl ani v počáteční extinkci ani v průběhu pokusu·
HEPES » kyselina 2-(4-22-lydr oxy e tíh!)piperezin-(1)]ethanesufonevá
Příklad 11
0,06 g chLoridu hořečnatého (0,28 % tamo.), 4,6 g desojhchooátu sodného (18.4 Ž hrno»), 9,0 g nelttOtittázy· 0,8 g azidu ^1ки€(3,7 % h^oot, 0,02 - g kelipázy se rozpučí' v 500 OL destilované vody· V tomto roztoku se rozpustí 1,5 g triolenu v roztoku ve 32 íL n-propanolu za stálého nícháini pod tlakem 0,2 MPa· Takto získaná emu-ze se zmrazí * na -40 °C a vysuMí se l^filt^ací·
3,6 g trt8¢Уyreox;m|ettylaoínnooetOpnu, 0,6 g hydrocihoridu trt8(Уyιreoyott0yl)βmintoethanu, 1,1 g cWoridu sodného (5,05 9 hrno·),' 1,1 g močoviny (5,05 · hmot) se smísí zatucOs. Jeden díl takto získané .* práškované smísí se homogenní prooísí s jedním díleo lyo^^iL^i^s^át^u. 150 mg reakční soOsí se smísí k provedená lipézového testu s 2,5 mL voty, přidá se 0,1 1 vzorku (sérum, dvantetníková šláva apod·) - *a odečítání* * se provádí fetonetricky při 340 nebo 365 na pH 25, 30 nebo 37 °C. Shora uvedená % hmoo· se vztahují na výslednou reakční soša. -
Příklad 12
0,01 g dh-^^i^du draselného, 3,0 g •ο^ο^οΙο^^ sodného (18,15 % 0,2 g polyttOyltnglyktlu (1,21 % Ome.)· * 0,2 g azidu sodíku, 0,02 g keliiázy· 8,0 g xylosy se rozpuisí v 500 mL destilované vody. V tomto roztoku se * pod tlíkeo 0,2 MPa sa stálého míchání rozpučí 7,1 g triolelnu (10,25 % hmot·) ve 32 OL n-prtpanolu· Takto získaná emu.ze se zmi^s^jí na -40 °C a suší se Lyefilizací·
2,49 g trts(УddtoχymeOУyl)olintmttOanu· 0,4 g 0ydroetOLeridu trta(УddtoзyottOyl)aoinooethanu, 0,1 g chLoridu sodného, 0,5 g močoviny (3,02 % ieant·) se zasucha prwOít·- - Jeden díl této smísí se homogenně promís! s Jedním dílem lyeiilizátu· 150 g reakční mOií se emisí k provedení lPpáйovéOt testu s 2,5 OL vody, přidá se 0,1 1 vzorku (séra, dvaшfctníktvá šlávy apod·) a oílí se ietenetricky při 340 nebo 365 nn při teplotě 25, 30 nebo 37 °V.
Údaje v % Οοο^ se vztahují na výslednou reakční směs.
P ř í k 1 * a d 13
0,03 g cMoridu vápenatého, 2,0 % de8O3hch(>oátu sodného, 3,0 sérového albuminu,
0,1 g azidu sodíku, 0,01 g kolipázy, 31,2 g glukózy, se rozpustí v 500 OL destilované voty.
Do tohoto roztoku se víaí pod tlrteo 0,2 MPa za stálého míchání 1,5 g trieleinu v roztoku ve 32 mL n-pr^anolu. Talcte zíraná emůze se zoí^s^Jí na -4° °C a ./of tHsuje.
236458 10
40,0 g deaojqrcholátu, 2,6 g trisíhydroxmettyDm^nmethanu (2,6 % Ouolt), 0,4 g Oydrochloridu trisOhydíoxooitOyDoiLinomitOanu, (0,4 % Onol.), 0,5 g clOLiridu stdnéOt (0,5 % Ornol.), 1,0 g moloviny se zasucOa imisi. Jeden díl této práškované smis i i· homogenně smísí i jedním dílem lyifiLiaátu) 150 g reakční smis i a· k testu na líiázu sUsí 3 2,5-ol' vity, přidá se 0)1Ί vzorku (seium, duodennání šláva) a mOří se > fitioetnicky při 340 nebi 365 nm při 25, 30.nebi 37 °C) Hrno1· % ae vztahují na výslednou reakční smšs«
Claims (5)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZU1) Reakční činidlo pro stanovení lipázy v suchém stavu, rekinatituivatelné přidáni vidy na emulzi pri poiuiií při turbldimitrCckém atanivení a ibsaOieo oleje jako subsSrátu, ibOrannéOi kiliidu na bázi polyOydnoy sloučenin, jako monornorní nebi polymorní Oex°zy neto pentozy i 1 ai 10 pentdzovýcO nebo OexozivýcO jednotWcO v ooiekiHe a/nebi pevnéOi ioiyethylioglykoll, emuugátoru a aktivátoru,. a výOodiu cO-tridu ao^i^i^ho, chloridu vápenatéOi nebi chloridu OořečmatéOi, vyznaču^cí ae tím, ie , sestává z 0,2 ai 10 % OiooinoiinícO kapalnéOo triglyceridu, 20 ai 90 % O^oit^c^iit^ícO icOrannéOi kiliidu, 5 ai 60 % haolnooanícO alkalické soli ilučivé kyseliny, 0,001 ai 0,1 ' % O^oit^oo^t^rícO kolipázy, 0,1 ai 2,0 % hoolnolinícO kinzervačníOi činidla, např. aaidu sodíku a popřípadě 5 ai 20 % h^olnolinícO rn^i^č^iviny, 3 ai 5 % OmoinniinícO pufru, např.a^i.noi^e^e^]^ía^u, tr^hydíoy^ettyUundnouetoantydrochtoridu nebi kyseliny 2-£4-(2^-^Oydri°^etOyl)piperazin-1«-yl] etOansulfonivé i pH 6,0 ai 10,5 a 0,5 ai 5 % O^oitic^itt^lÍcO ^^^ог^ např. chloridu sodnéOi nebi vápenatéOi)
- 2) Reakční činidli podle bodu 1, vyznačuje! ae tío, ie zbytek alifatceké kyseliny v triglyceridu obaluje ai 20 uOLÍkivýcO atomů a 1 ai 8 ϋΐ^^ο^^ vazeb*3* Reakční činidli pidle bidu 1 a ' 2, vyznačuj cí ae tím, ie ibsdOuje 0,2 ai 2,0 % O^oit^c^iit^dÍcO triglyceridu·
- 4) Reakční činidliOmelnolSnícO icOrannéOi bidu 1 ai 3, yyznaačuící podle kiliidu, např) mannitu ae tím, ie ai pidle bidů 1 nostnícO soli ilučivé kyseliny.5* Reakční činidli ai4, význaačuící ae tío, ie ibsíOOuje ai % Ouol6) Reakční činidli 01OdlnolSníc0 kolipázy) pidle bidů -1 ai5, vyznaačuící ae tío, ie obsahuje0,003 ai0,01 «
- 7) ReeacSnX činidli OmolnooanícO moččiinny» pidle bidu ai6, vymaačuící as tm, ie ibsdOuje10 ai
- 8) Reakční činidli nostnícO pufru) pidle bidu ai7, ^znaačuící se tím, ie ibsdOuje3 ai 10 % Omot9) Reakční činidli ibsahuje pufr a kysaeiniu 2-[4-(2-Oydrl:ιoУethyLpipiiazznn,|-yϊ] itOsosulfonlvlu, ptfr s kyselinu K-trif(tydriχymei^hl)uetlhfl-3-ιminipripaosulfinivlu, piuf s N,N-bis-(2--Oydrl:χret^hl)glycioea, puf s trSsOhydíoxuneOlyl^oDniomeOOumeu, treeOannoaaoinovýApiďr nebi dioetOanilaminový piuf*) pidle bidu ai8, vyznaačuící ae tím, ieЮ) Způsob výroby reakčníOi činidla pidle bidů 1 ai 9, vyznačuje! se tím, 'ie se vidná •ioUz· triglyceridu a obsado. tyseli^ Hušové, kolipázy, alespin 10 % ^о^ооСю!^ icOrannéOi kiliidu, kinzervačníOi činidla a popřípadě aktivátoru ^оНШф a k lyolflizátu ae přidá puďr, 5 ai 20 hnl0nooatoích % močoviny a popřípadě 10 ai 80 O^oltic^iat^rícO % icOrannéOi koloidu, konzervační činidla a popřípadě další aktivátor)11. Způsob podle bodu 10, vyznačující se tím, že se do roztoku ochranného koloidu, soli kyseliny žlučové, kolipázy a popřípadě konzervačního činidla a aktivátoru vstřikuje za míchání ve formě jemného paprsku roztok triglyceridu v těkavém organickém rozpouštědle, např· v alifatickém alkoholu nebo ketonu.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE2904305A DE2904305C2 (de) | 1979-02-05 | 1979-02-05 | Reagens zur Lipasebestimmung und Verfahren zu seiner Herstellung |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS236458B2 true CS236458B2 (en) | 1985-05-15 |
Family
ID=6062202
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS799136A CS236458B2 (en) | 1979-02-05 | 1979-12-26 | Reactive agent for lipase determination and method of its production |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4343897A (cs) |
| EP (1) | EP0014252B1 (cs) |
| JP (1) | JPS55104900A (cs) |
| AR (1) | AR219647A1 (cs) |
| AT (1) | ATE2227T1 (cs) |
| AU (1) | AU515131B2 (cs) |
| CA (1) | CA1139201A (cs) |
| CS (1) | CS236458B2 (cs) |
| DD (1) | DD148830A5 (cs) |
| DE (2) | DE2904305C2 (cs) |
| DK (1) | DK158526C (cs) |
| ES (1) | ES487676A1 (cs) |
| FI (1) | FI69640C (cs) |
| HU (1) | HU181539B (cs) |
| IE (1) | IE49039B1 (cs) |
| IL (1) | IL59132A (cs) |
| SU (1) | SU1367867A3 (cs) |
| ZA (1) | ZA80630B (cs) |
Families Citing this family (22)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0021572A1 (en) * | 1979-06-04 | 1981-01-07 | American Hospital Supply Corporation | A substrate for use in a turbidimetric assay for lipase and a method for making this substrate |
| US4806469A (en) * | 1982-09-20 | 1989-02-21 | The Dow Chemical Company | Process for the determination of lipase activity |
| EP0134291B1 (de) * | 1983-09-07 | 1986-08-13 | American Hospital Supply Corporation | Rekonstituierbares Trockenreagenz für diagnostische Zwecke und Verfahren zu seiner Herstellung |
| DE3413118A1 (de) * | 1984-04-06 | 1985-10-24 | Miles Laboratories, Inc., Elkhart, Ind. | Analysenverfahren und mittel zum nachweis esterolytischer und/oder proteolytischer enzyme |
| DE3516001A1 (de) * | 1985-05-03 | 1986-11-06 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Lipasefarbtest |
| DE3618049A1 (de) * | 1986-05-28 | 1987-12-03 | Miles Lab | Verfahren zur herstellung von reagenzschichten die hydrophobe reagenzien enthalten |
| US5158872A (en) * | 1986-10-07 | 1992-10-27 | Hoechst Celanese Corporation | Aromatic substituted glycoside |
| US4963479A (en) * | 1986-10-07 | 1990-10-16 | Hoechst Celanese Corporation | Reagent system for an alpha-amylase assay containing aromatic substituted glycoside |
| DE3719196A1 (de) * | 1987-06-09 | 1988-12-29 | Behringwerke Ag | Verwendung von polyinylpyrrolidon (pvp) zur truebungsminderung von seren, kontrollseren enthaltend pvp und verfahren zu deren herstellung |
| ES2034037T3 (es) * | 1987-07-01 | 1993-04-01 | Abbott Laboratories | Un metodo turbidimetrico mejorado para la determinacion de lipasa en suero. |
| FR2619219A1 (fr) * | 1987-08-07 | 1989-02-10 | Strasbourg I Louis Pasteur Uni | Reactif sec pour la determination de la lipase pancreatique, procede de preparation dudit reactif sec et reactif sec et reactif sous forme d'emulsion obtenu par reconstitution du reactif sec. |
| JP2711332B2 (ja) * | 1988-04-15 | 1998-02-10 | 株式会社ヤトロン | 非水溶性物質の透明な水溶液が得られる凍結乾燥品の製造方法 |
| US5378609A (en) * | 1988-12-28 | 1995-01-03 | Ivan E. Modrovich | Lipase single reagent system |
| US5248598A (en) * | 1989-05-25 | 1993-09-28 | Ivan E. Modrovich | Lipase single reagent system |
| US6117682A (en) * | 1993-04-27 | 2000-09-12 | Dexsil Corporation | Method for detecting hydrocarbons in water |
| US5756357A (en) * | 1993-04-27 | 1998-05-26 | Dexsil Corporation | Method for detecting hydrocarbons in soil |
| US5679574A (en) * | 1995-01-09 | 1997-10-21 | Ensys Environmental Products, Inc. | Quantitative test for oils, crude oil, hydrocarbon, or other contaminants in soil and a kit for performing the same |
| US5759445A (en) * | 1995-05-24 | 1998-06-02 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Lipid-dispersed solution and process for producing the same |
| EP0949336A1 (en) * | 1998-03-20 | 1999-10-13 | Unilever Plc | Process for identification of organic material |
| FR2881139A1 (fr) * | 2005-01-26 | 2006-07-28 | Agronomique Inst Nat Rech | Composition pour la lyophilisation de proteines |
| JP5081680B2 (ja) * | 2008-03-25 | 2012-11-28 | 富士フイルム株式会社 | リパーゼ測定用乾式分析要素 |
| CN112858687B (zh) * | 2020-12-30 | 2023-09-15 | 宁波职业技术学院 | 一种血清淀粉样蛋白a检测试剂及其制备方法 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3527674A (en) * | 1966-06-30 | 1970-09-08 | Calbiochem | Reagent material and method for urea assay |
| US3917515A (en) * | 1974-03-13 | 1975-11-04 | Jack M Goldberg | Serum lipase method and medium |
| US3898130A (en) * | 1974-03-18 | 1975-08-05 | American Hospital Supply Corp | Rapid enzymatic hydrolysis of triglycerides |
| US4115313A (en) * | 1974-10-08 | 1978-09-19 | Irving Lyon | Bile acid emulsions |
| GB1530238A (en) * | 1976-05-04 | 1978-10-25 | Du Pont | Method of determining lipase activity using a triglyceride reagent and method for preparing that reagent |
-
1979
- 1979-02-05 DE DE2904305A patent/DE2904305C2/de not_active Expired
- 1979-12-13 EP EP79105154A patent/EP0014252B1/de not_active Expired
- 1979-12-13 DE DE7979105154T patent/DE2964508D1/de not_active Expired
- 1979-12-13 AR AR279278A patent/AR219647A1/es active
- 1979-12-13 AT AT79105154T patent/ATE2227T1/de not_active IP Right Cessation
- 1979-12-26 CS CS799136A patent/CS236458B2/cs unknown
-
1980
- 1980-01-02 CA CA000342938A patent/CA1139201A/en not_active Expired
- 1980-01-02 DK DK001380A patent/DK158526C/da not_active IP Right Cessation
- 1980-01-07 IE IE20/80A patent/IE49039B1/en not_active IP Right Cessation
- 1980-01-14 ES ES487676A patent/ES487676A1/es not_active Expired
- 1980-01-15 IL IL59132A patent/IL59132A/xx not_active IP Right Cessation
- 1980-01-23 SU SU802872054A patent/SU1367867A3/ru active
- 1980-01-23 FI FI800199A patent/FI69640C/fi not_active IP Right Cessation
- 1980-01-28 US US06/115,864 patent/US4343897A/en not_active Expired - Lifetime
- 1980-01-29 DD DD80218712A patent/DD148830A5/de not_active IP Right Cessation
- 1980-02-01 AU AU55125/80A patent/AU515131B2/en not_active Ceased
- 1980-02-04 HU HU80249A patent/HU181539B/hu not_active IP Right Cessation
- 1980-02-04 ZA ZA00800630A patent/ZA80630B/xx unknown
- 1980-02-05 JP JP1215580A patent/JPS55104900A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IE49039B1 (en) | 1985-07-10 |
| SU1367867A3 (ru) | 1988-01-15 |
| HU181539B (en) | 1983-10-28 |
| ES487676A1 (es) | 1980-06-16 |
| IL59132A0 (en) | 1980-05-30 |
| ATE2227T1 (de) | 1983-01-15 |
| FI69640B (fi) | 1985-11-29 |
| US4343897A (en) | 1982-08-10 |
| ZA80630B (en) | 1981-02-25 |
| DE2904305B1 (de) | 1980-08-14 |
| DD148830A5 (de) | 1981-06-10 |
| DK158526B (da) | 1990-05-28 |
| JPS55104900A (en) | 1980-08-11 |
| AU515131B2 (en) | 1981-03-19 |
| FI800199A (fi) | 1980-08-06 |
| IE800020L (en) | 1980-08-05 |
| DK158526C (da) | 1990-10-29 |
| IL59132A (en) | 1983-10-31 |
| EP0014252A1 (de) | 1980-08-20 |
| AU5512580A (en) | 1981-01-29 |
| DK1380A (da) | 1980-08-06 |
| DE2904305C2 (de) | 1981-07-02 |
| DE2964508D1 (en) | 1983-02-17 |
| CA1139201A (en) | 1983-01-11 |
| EP0014252B1 (de) | 1983-01-12 |
| FI69640C (fi) | 1986-03-10 |
| JPS5728275B2 (cs) | 1982-06-15 |
| AR219647A1 (es) | 1980-08-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CS236458B2 (en) | Reactive agent for lipase determination and method of its production | |
| Halestrap | Pyruvate and ketone-body transport across the mitochondrial membrane. Exchange properties, pH-dependence and mechanism of the carrier | |
| CN100593117C (zh) | 血红蛋白测定 | |
| CA2431235C (en) | Deicing solution | |
| JPH08504220A (ja) | チキソトロピー液体洗剤組成物の製法 | |
| PL190140B1 (pl) | Zastosowanie kompleksowych lipidów jako dodatków stabilizujących przeciw zmniejszaniu lipolitycznejaktywności pod wpływem wilgoci w rozpuszczalnych w wodzie preparatach farmaceutycznych mieszanin enzymów trawiennych, rozpuszczalne w wodzie preparaty farmaceutyczne mieszanin enzymów trawiennych oraz zestaw do wytwarzania wodnych roztworów enzymów trawiennych | |
| PT822972E (pt) | Composicao aquosa e utilizacao de um agente que melhora a capacidade de humidificacao | |
| MIYAZAKI et al. | Interaction of drugs with bile components. I. Effects of bile salts on the dissolution behavior of indomethacin and phenylbutazone | |
| JPS61254197A (ja) | リパ−ゼ基質、及びリパ−ゼの視覚的測定法及び測定試薬 | |
| EP0873180B1 (fr) | Granules redispersables dans l'eau comprenant une matiere active sous forme liquide | |
| CA2424656A1 (en) | Composition and method for stable injectable liquids | |
| US20080233196A1 (en) | Injectable sterile pharmaceutical composition with piperacillin sodium and tazobactam sodium as active principles | |
| US3446599A (en) | Method and composition for the detection of urobilinogen in fluids | |
| EP3178927B1 (en) | Protein-stabilizing agent and protein-stabilizing method | |
| US5378609A (en) | Lipase single reagent system | |
| JP2700501B2 (ja) | リパーゼ定量用単一試薬系およびその製造方法 | |
| EP0021572A1 (en) | A substrate for use in a turbidimetric assay for lipase and a method for making this substrate | |
| CA2616426C (en) | Enhancement of vanadium-containing phosphatase inhibitors | |
| Schifreen et al. | An investigation of the kinetic characteristics of the lipase from Candida cylindracea for its potential in triglyceride analysis | |
| JPH10213582A (ja) | 生体試料の濁りの除去方法 | |
| JPH10191972A (ja) | Ａｔｐ加水分解酵素の安定化方法 | |
| EP0926235A2 (en) | Method of stabilizing trypsin | |
| CN116832720A (zh) | 一种发光免疫检测的冻干微球及其制备方法 | |
| JP2741031B2 (ja) | アミラーゼ測定方法 | |
| JP2004501611A (ja) | ヌクレアーゼ及びホスファターゼを含有する安定組成物 |