CN88100260A - 抗凝血剂肽 - Google Patents

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CN88100260A
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克尔斯蒂南斯基·约翰·L
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Abstract

本发明涉及可用作抗凝血剂的肽衍生物。

Description

本申请是1987年1月23日递交的006417号申请的后续部分。本发明涉及用作抗凝血剂的新的肽类。
抗凝血剂是治疗急性深部静脉血栓形成、肺栓塞、肢体的急性动脉栓塞形成、心肌梗塞和播散性血管内凝血的有用药剂。据信服用预防剂量的抗凝血剂可预防风湿性和动脉硬化性心脏病患者血管栓塞再发，并可预防外科的某些血栓栓塞性并发症。给予抗凝血剂亦可用于治疗冠状动脉和脑血管病。动脉血栓形成，特别是心肌和脑动脉的血栓形成是死亡的最重要的原因。
水蛭素是从水蛭腺中分离的有65个残基的多肽。其为一种抗凝血剂，一种凝血酶的特异性抑制剂。虽然水蛭素的效力相当强，但因为其量很有限、价格昂贵并且通常会引起象给予任何这种大小的外源蛋白一样的变态反应，所以似乎不可能将由水蛭提取物中分离的水蛭素用于临床。
申请人发现，水蛭素的一个特定区域，至少部分地与其抗凝血活性有关。已化学合成了这一区域，而且其某些类似物似乎可与凝血酶的识别位点结合，但不与酶的切割位点结合，这两个位点在空间上是分开的。合成的肽的结合可竞争性地阻止血纤维蛋白原与凝血酶的识别位点的结合，而这是血纤维蛋白产生和血凝块形成的先决条件。本发明的肽具有显著的抗凝血剂活性，并且它们的只与凝血酶的识别位点结合而不与其酶切位点结合的不寻常的能力使得人们考虑到抗凝血剂治疗在科学研究上的意义和治疗上的重要性。
结构通式为
X-A1-A2-A3-A4-A5-A6-A7-A8-A9-A10-Y
其中X是选自氢、一或两个有1至6个碳原子的烷基、一或两个有2至10个碳原子的酰基，苄氧羰基或叔丁氧基羰基的氨基末端残基;
A1是一个键或含有1至5个任何氨基酸残基的肽段;
A2是Phe、Sub Phe、β-（2-和3-噻吩基）丙氨酸、β-（2-和3-呋喃基）丙氨酸、β-（2-，3-和4-吡啶基）丙氨酸、β-（苯并噻吩-2-和3-基）丙氨酸、β-（1-和2-萘基）丙氨酸、Tyr或Trp;
A3是Glu或Asp;
A4是任何氨基酸;
A5是Ile、Val、Leu、Nle或Phe;
A6是Pro、Hyp、3，4-脱氢Pro、噻唑烷-4-羧酸酯、Sar、NMe Pgl或D-Ala;
A7是任何氨基酸;
A8是任何氨基酸;
A9是选自Tyr、Tyr（SO3H）、Trp、Phe、Leu、Nle、Ile、Val、Cha和Pro的亲脂性氨基酸或至少包含上述这些亲脂氨基酸之一的二肽;
A10是一个键或含1至5个任何氨基酸残基的肽片段;且
Y是选自OH、C1-C6烷氧基、氨基、一或二-（C1-C4）烷基取代的氨基，或苄氨基的羧基末端残基;
的肽衍生物为有用的抗凝血剂。
下面列出本说明书中所用的氨基酸的缩写符号：
Gly-甘氨酸
Ala-丙氨酸
Val-缬氨酸
Leu-亮氨酸
Ile-异亮氨酸
Pro-脯氨酸
Phe-苯丙氨酸
Trp-色氨酸
Met-蛋氨酸
Ser-丝氨酸
Thr-苏氨酸
Cys-半胱氨酸
Tyr-酪氨酸
Asn-天冬酰胺
Gln-谷氨酰胺
Asp-天冬氨酸
Glu-谷氨酸
Lys-赖氨酸
Arg-精氨酸
His-组氨酸
Nle-正亮氨酸
Hyp-羟脯氨酸
Cha-环己基丙氨酸
Orn-鸟氨酸
Glt-戊二酰基
Mal-马来酰基
Npa-β-（2-萘基）丙氨酸
3，4-脱氢Pro-3，4-氢脯氨酸
Tyr（SO3H）-酪氨酸硫酸酯
Pgl-苯甘氨酸
NMe    Pgl-N-甲基-苯甘氨酸
Sar-肌氨酸（N-甲基甘氨酸）
p    Sub    Phe-对位取代的苯丙氨酸
Sub    Phe-邻、间、或对位、一或二取代的苯丙氨酸
DAla-D-丙氨酸
Ac-乙酰基
Suc-琥珀酰基
pCl    Phe-对位-氯代-苯丙氨酸
pNO    Phe-对位-硝基-苯丙氨酸
所涉及的烷基和烷氧基的烷基部分包括直链、分支链或环烷基基团，如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、异戊基、仲戊基、环戊基、己基、异己基、环己基和环戊甲基。2至10个碳原子的酰基包括直链、分支链、环状的、饱和的和不饱和的、每个基团有1或2个羰基部分的酰基，如乙酰基、苯甲酰基、马来酰基、戊二酰基和琥珀酰基。囟素基团是氟基、氯基、溴基和碘基。
本文中所说的“任何氨基酸”包括天然存在的氨基酸以及肽化学工艺中制备天然存在的肽的类似物时所常用的“非蛋白质”α-氨基酸。天然存在的氨基酸是甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、丝氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、半胱氨酸、脯氨酸、组氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、谷氨酰胺、精氨酸、鸟氨酸和赖氨酸。“非蛋白质”α-氨基酸的例子有正亮氨酸、正缬氨酸、别异亮氨酸、高精氨酸、硫代脯氨酸、脱氢脯氨酸、羟脯氨酸（Hyp）、高丝氨酸、环己基甘氨酸（Chg）、α-氨基-正丁酸（Aba）、环己基丙氨酸（Cha）、氨基苯丁酸（Pba）、在苯基部分的邻、间或对位上有一个或两个下列基团：（C1-C4）烷基、（C1-C4）烷氧基、囟素或硝基取代的苯丙氨酸或被亚甲二氧基取代的苯丙氨酸、β-2-和3-噻吩丙氨酸、β-2-和3-呋喃丙氨酸、β-2-、3-和4-吡啶丙氨酸、β-（苯并噻吩-2-和3-基）丙氨酸、β-（1-和2-萘基）丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸的O-烷基化的衍生物、S-烷基化的半胱氨酸、酪氨酸的O-硫酸酯、3，5-二碘代酪氨酸和天然存在的氨基酸的D-异构体。
“亲脂氨基酸”包括Tyr、Phe、Leu、Nle、Ile、Val、His和Pro。
除甘氨酸以外的天然氨基酸均含有手性碳原子。除另外指出者外，本文所指的旋光活性氨基酸都是L-构型的。例如，A1或A10基团的任何氨基酸可以是D-或L-构型的。按照惯例，在书写肽的结构式时，将氨基末端写在链的左例，而将羧基末端写在链的右侧。
结构通式1的多肽可与任何无毒的有机或无机酸形成医药上可接受的盐。例如，可与之形成适当盐的无机酸包括盐酸、氢溴酸、硫酸和磷酸，以及酸式金属盐如正磷酸一氢钠及硫酸氢钾。可与之形成适当盐的有机酸包括一、二和三羧酸，如乙酸、羟基乙酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、马来酸、羟基马来酸、苯甲酸、羟基苯甲酸、苯乙酸、肉桂酸、水杨酸、2-苯氧基苯甲酸和磺酸如甲磺酸和2-羟基乙磺酸。羧基末端氨基酸部分的盐包括与适当无机或有机碱形成的无毒羧酸盐。举例说，这些盐包括碱金属如钠和钾的盐;碱土金属如钙和镁的盐;ⅢA族轻金属包括铝的盐;以及有机伯、仲和叔胺，如包括三乙胺在内的三烷基胺、普鲁卡因、二苄胺、1-次乙胺、N，N′-二苄基乙二胺、二氢松香胺、N-（低级）烷基哌啶及其他适当胺的盐。
正如化学化合物的任何同类基团一样，本发明的化合物也优先选用某些特定基团。申请人优选含下例基团的结构通式1的肽衍生物，即其中
X是氢、乙酰基或琥珀酰基。
另外还优选含下列基团的结构式1的化合物，其中
A1是-His-Asn-Asp-Gly-Asp-
-Asn-Asp-Gly-Asp-
-Asp-Gly-Asp-
-Gly-Asp-
-Asp-;
Thr-Pro-Lys-Pro-Gln-Ser-His-Asn-Asp-Gly-Asp;Thr-Pro-Asn-Pro-Glu-Ser-His-Asn-Asn-Gly-Asp;和Ser-His-Asn-Asp    O-Gly-Asp或仅为一个键。
A2最好是Phe、β-2-或3-噻吩丙氨酸、Tyr、Trp、Npa或pCl Phe;
A3是Glu;
A4是Glu、Asp、Pro或Ala;
A5是Ile、Leu;
A6是Pro、Sar、DAla、Hyp或NMe Pgl;
A7是Glu、Asp或Ala;
A8是Ala、Glu或Asp;
A9是Pro、Ala-Tyr、Ala-Cha、Tyr-Cha、Tyr-Leu、Ala-Phe、Tyr-Tyr;
A10是Glu、Asn、Asp-Glu、Pro、Gln、Ala、键、D-Lys、D-Asp或Orn;
Y是OH或NH2。
特别优选的是其中X为乙酰基，A1为Gly-Asp或Asp，或X为琥珀酰基、A1为一个键，且其中
A2是Phe、β-（2-噻吩丙氨酸）或Tyr;
A3是Glu;
A4是Glu或Pro;
A5是Ile;
A6是Pro
A7是Glu;
A8是Glu或Asp;
A9是Tyr-Leu、Ala-Tyr、Tyr-Tyr、Ala-Phe、Ala-Cha或Pro;
A10是Gln、Asp、Pro、一个键，Asp-Glu、D-Asp、D-Lys或D-Glu;
Y是OH或NH2的结构式Ⅰ的肽衍生物。
可按照本领域内熟悉的各种方法来制备本发明的蛋白质。这些方法包括固相序列合成和分段合成、基因克隆及这些技术的结合应用。可使用已建立的自动方法完成固相序列合成，如使用自动肽合成仪。该方法中是将α-氨基被保护的氨基酸结合到树脂支持物上。所用的树脂支持物可以是固相制备多肽工艺中常规使用的任何适宜的树脂，最好是已与0.5～3%二乙烯基苯交联的聚苯乙烯，并已经过氯代甲基化或羟甲基化，以提供与最初引入的α氨基被保护的氨基酸形成酯的部位。
Bodanszky等人（Chem.Ind.（London）38，1597-98（1966））描述了一种羟甲基树脂。一种氯代甲基化的树脂可由Bio    Rad    Laboratories公司（Richmond，California）购得，Stewart等人在“Solid    Phase    Peptide    Synthesis”一文（Freeman    &    Co.，San    Francisco，1969）（第一章，第1～6页）中介绍了这种树脂的制备方法。可按照Gisin所述的方法（Helv.Chem.Acta，56，1476（1973））使被保护的氨基酸结合于树脂上。与被保护的氨基酸结合的许多树脂是可以在市场上买到的。作为一个例子，为制备本发明的多肽-其中羧基末端是Thr残基，使用可结合叔丁氧基羰基（BOC）保护的Thr的苄化的、羟甲基化的苯乙酰氨甲基（PAM）树脂，这种树脂可从市场上买到。
将α-氨基被保护的氨基酸偶联到树脂支持物上之后，使用任何适当方法如使用溶于二氯甲烷中的三氟乙酸或仅用三氟乙酸，或溶于二噁烷中的盐酸除去保护基团。去保护作用是在0℃至室温下进行的。可使用用来除去特异性α-氨基保护基团的其他标准裂解试剂及条件。除去α-氨基保护基团之后，按要求的次序分步偶联其他氨基被保护的氨基酸。另外，可在与树脂支持的氨基酸序列偶联前，通过溶液方法偶联多个氨基酸集团。
适用于每个被引入多肽序列中的氨基酸的α-氨基保护基团可以是本技术领域内已知的任何这类保护基团。可考虑使用的各类α-氨基保护基团有：（1）酰基型保护基团如：甲酰基、三氟乙酰基、邻苯二酰基、甲苯磺酰基、苯磺酰基、硝基苯亚磺酰基、三苯甲基亚磺酰基、间位硝基苯氧乙酰基和α-氯丁酰基;（2）芳族氨酯基型保护基团如：苄氧基羰基和取代的苄氧基羰基，如对位氯代苄氧基羰基、对位硝基苄氧基羰基、对位溴代苄氧基羰基、对位甲氧基苄氧基羰基、1-（对位-二苯基）-1-甲乙氧基羰基、α，α-二甲基-3，5-二甲氧基苄氧基羰基和二苯甲氧基羰基;（3）脂族氨酯基保护基团如叔丁氧基羰基（Boc）、二异丙基甲氧基羰基、异丙氧基羰基、乙氧基羰基和烯丙氧基羰基;（4）环烷基氨酯基型保护基团如：环戊氧基羰基、金刚烷氧基羰基和环己氧基羰基;（5）硫代氨酯基型保护基团如苯基硫代羰基;（6）烷基型保护基团如三苯甲基和苄基;（7）三烷基硅烷基团如三甲基硅烷。优选的α-氨基保护基团是叔丁氧基羰基。
对适当偶联剂的选择是一种工艺技巧。特别适宜的偶联剂（其中将被加上去的氨基酸是Gln、Asn或Arg）是N，N′-二异丙基碳化二亚胺和1-羟基苯并三唑。使用这些试剂可阻止腈和内酰胺形成。其他偶联剂是（1）碳化二亚胺类（如N，N′-二环己基碳化二亚胺和N-乙基-N′-（Y-二甲氨基丙基碳化二亚胺）;（2）氨腈类（如N，N-二苄基氨腈）;（3）烯酮亚胺;（4）异噁唑鎓盐（如N-乙基-5-苯基-异噁唑鎓-3′-磺酸盐;（5）环中含有1至4个氮的有芳族特性的单环含氮杂环酰胺，如咪唑烷、吡唑烷和1，2，4-三唑烷。适用的特异性杂环酰胺包括N，N′-羰基二咪唑和N，N′-羰基-二-1，2，4-三唑。（6）烷氧基化的乙炔（如乙氧基乙炔）;（7）与氨基酸的羧基部分形成混合酸酐的试剂（如乙基氯甲酸酯和异丁基氯甲酸酯）或将被结合的氨基酸的对称酸酐（如Boc-Ala-O-Ala-Boc）;（8）在一个环氮原子上具有一个羟基的含氮杂环化合物（如N-羟基苯邻二甲酰亚胺、N-羟基琥珀酰亚胺和1-羟基苯并三唑）。Kapoor（J.Pharm.Sci.，59    ppl-27（1970））描述了其他一些活化试剂及其在肽偶联中的应用。申请人优选使用对称酸酐作为除Arg、Asn和Gln以外所有氨基酸的偶联试剂。
将每种被保护的氨基酸或氨基酸序列以大约四倍过量引入固相反应器内，并在二甲基甲酰胺∶二氯甲烷（1∶1）的介质或单用二甲基甲酰胺或最好单用二氯甲烷的介质中进行偶联。在发生不完全偶联的情况下，在固相反应器中偶联下一个氨基酸之前，先重复偶联程序然后再除去α-氨基保护基团。按照E.Kaiser等人所述的方法（Analyt.Biochem.34，595（1970））通过茚三酮反应监测每一合成步骤中的偶联反应是否成功。
获得了预期的氨基酸序列之后，从树脂上除掉肽。这可通过水解过程，如用溶在稀氢氟酸中的二甲硫、对位-甲苯酚和甲苯硫酚的溶液处理结合了多肽的树脂完成的。
正如固相肽合成技术领域中人们熟知的，许多具有功能性的氨基酸在肽链制备期间需予以保护。有关合适的保护基团的使用和选择也是本技术领域中熟练技术人员所能够解决的，而且这将取决于被保护的氨基酸及肽链上其它被保护的氨基酸残基的序列。对侧链保护基的选择是很严格的，这种保护基在切断α-氨基主链的保护基时不会被同时除去。例如，适于保护赖氨酸的侧链保护基团是苄氧基羰基及经过取代了的苄氧基羰基，所说的取代基是选自于囟素（如氯代、溴代、氟代）和硝基（如2-氯代苄氧基羰基、对位-硝基苄氧基羰基、3，4-二氯代苄氧基羰基）、甲苯磺酰基、叔-戊氧基羰基、叔-丁氧基羰基和二异丙基甲氧基羰基。可使用乙酰基、苯甲酰基、叔丁基、三苯甲基、苄基、2，6-二氯苄基或苄氧基羰基基团保护苏氨酸和丝氨酸的醇羟基。优选的保护基是苄基。
可使用本领域内熟知的方法除去这些基团。一般是在肽链合成过程完成后除去保护基团，但亦可在任何适当时间除去保护基团。
根据患者血栓形成状态的严重程度以及所选用的肽衍生物等不同，本发明肽衍生物的抗凝血剂使用剂量为每天每公斤病人体重0.2mg至250mg。很容易确定用于特定患者的适当剂量。最好每天用1至4次，每剂给予5mg至100mg活性化合物。
抗凝血剂治疗的指兆为治疗和预防各种引起血栓形成的条件，特别是冠状动脉和脑血管疾病。本领域内有经验的医务人员很容易识别需要进行抗凝血治疗的病理状况。本文中所用的“患者”一词是指动物如灵长目动物（包括人）、羊、马、牛、猪、狗、猫、大鼠和小鼠。
虽然某些肽衍生物在口服给药后通过肠道时可保留其药理活性，但申请人还是优选非口服途径给药，如经皮下、静脉内，肌肉内或腹腔内，可以以储存注射植入物形式给药，或将含有本发明之肽衍生物的制剂制成气雾剂或干粉，用于粘膜部位如鼻、咽喉或支气管粘膜上。
为了胃肠道外途径给药，可将本发明的化合物加在含药用载体的医药上使用的稀释剂中（所用药用载体可以是无菌液体如水或油），加或不加表面活性剂及其他医药上使用的佐剂，制成化合物的溶液或悬浮液等可注射的药剂。可用于这些制剂中的油包括石油、动物油、植物油或合成的油脂，如花生油、大豆油和矿物油。一般说来，优选的液体载体为水、盐水，葡萄糖和相关糖的水溶液、乙醇和二元醇类如丙二醇或聚乙二醇，特别是可用于注射的溶液。
可以以允许有效成份持续释放的方式配制以储存注射或植入制剂形式给药的化合物。可将有效成份包裹在药丸或小园柱体内并作为储存注射剂或植入物植入皮下或肌肉内。可使用惰性材料如生物可降解的聚合物或合成的硅氧烷，如Dow-Corning公司制造的Silastic（一种硅橡胶）制成植入物。
下列非限定的实施例旨在进一步阐明本发明。
实施例1
H-Gly-Asp-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH的制备
以固相方法，使用0.1mM（0.66mM/g    Boc-Gln-PAM树脂）合成多肽。用2.0mM    Na-Boc-氨基酸（Peptides    International）完成双对称酸酐偶联，但在使用Boc-Gln时，其偶联是用DCC/HOBT方法完成的。所利用的侧链保护是：Asp（Chx）、Glu（Bzl）、Tyr（2-Br    Z）。完成合成过程后，用溶于二氯甲烷中的50%三氟乙酸除去Na-Boc保护。将树脂用二氯甲烷洗三次、用溶于二氯甲烷中的10%二异丙基乙胺洗三次进行中和、用二氯甲烷洗三次并在真空中干燥。用含2%苯甲醚的HF于0℃处理35分钟，使肽除去保护并从树脂上切割下来。于0℃在真空下除去HF，用乙醚沉淀肽，用30%乙酸水溶液从树脂中抽提肽并冻干。
在92×2.6cm Sephadex G-15柱上，5%乙酸水溶液中脱盐纯化肽并冻干之。在C18Vydac 218 T P1010（250×10mm）柱上，用24%乙腈（溶于0.1%三氟乙酸水溶液中），以5ml/分钟的流速进行制备高压液相色谱法（HPLC）。收集主要峰值部分并冻干，得到101mg预期的产物（基于最初树脂上的取代量，计得率为58%）。以HPLC和薄层层析法（TLC）检测产物的均质性。HPLC∶Vydac218 T P54（250×4.6mm）C18柱、2ml/分、to＝1.9分钟∶用溶于0.1%三氟乙酸中的15～40%乙腈（线性梯度为1%/分钟）洗脱的时间（HPLC）为14.4分钟。
TLC;〔Merck 5715 20×20cm硅胶60板（0.25mm厚）〕正丁醇/乙酸/水/吡啶（6∶1.2∶4.8∶6）（TCL I）Rf＝0.42;异丙醇/浓氢氧化铵/水（3∶1∶1）（TLC Ⅱ）Rf＝0.32;正丁醇/乙酸/水（4∶5∶5）（TLC Ⅲ）Rf＝0.70。FAB-MS∶（M+H）-1468.4±1mμ（计算值：1468.6）。氨基酸分析：（6N，HCl水解;24小时，106℃）。Asxl.03（1）;Glx 5.05（5）;Pro 1.03（1）;Gly1.00（1）;Ile 0.97（1）;Leu 1.01（1）;Tyr 0.93（1）;Phe 0.98（1）;NH31.06（1）。ε280＝1254。肽含量85%（重量）。
以同样方法制备下列实施例2～58的肽。
实施例2
Ac-Ser-His-Asn-Asp-Gly-Asp-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH
实施例3
H-Asn-Asp-Gly-Asp-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH
实施例4
H-Asp-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH
实施例5
H-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH
实施例6
H-Asp-Phe-Glu-Ala-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH
实施例7
H-Asp-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Ala-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH
实施例8
H-Asp-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Ala-OH
实施例9
H-Asp-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Glu-Leu-Ala-OH
实施例10
Ac-Asp-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gin-OH
实施例11
Ac-Gly-Asp-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH
实施例12
Suc-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH
实施例13
H-Asp-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-OH
实施例14
H-Gly-Asp-Tyr-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH
实施例15
H-Gly-Asp-Trp-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-
Tyr-Leu-Gln-OH
实施例16
H-Gly-Asp-pCl    Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH
实施例17
H-Gly-Asp-pNO2Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH
实施例18
H-Gly-Asp-Phe-Glu-Glu-Ile-Sar-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH
实施例19
H-Gly-Asp-Phe-Glu-Glu-Ile-DAla-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH
实施例20
H-Gly-Asp-Phe-Glu-Glu-Ile-Hyp-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH
实施例21
H-Gly-Asp-Phe-Glu-Glu-Ile-NMe    Pgl-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH
实施例22
H-Gly-Asp-Phe-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Asp-Ala-Tyr-Asp-Glu-OH
实施例23
H-Ser-His-Asn-Asp-Gly-Asp-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH
实施例24
H-Gly-Asp-Phe-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Asp-Ala-Tyr-Pro-NH2
实施例25
Suc-Phe-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Asp-Ala-Tyr-Pro-NH2
实施例26
H-Asp-Phe-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Tyr-Gln-OH
实施例27
H-Asp-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Tyr-Gln-OH
实施例28
H-Asp-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Asp-Ala-Tyr-Gln-OH
实施例29
Suc-Phe-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Pro-NH2
实施例30
H-Gly-Asp-β-（2-噻吩基）丙氨酰-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH
实施例31
H-Gly-Ala-邻位-甲基酪氨酰-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH
实施例32
Suc-Phe-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Pro-OH
实施例33
H-Asp-Phe-Glu-Ile-Pro-Glu-Ala-Tyr-Leu-Gln-OH
实施例34
H-Asp-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Leu-Gln-OH
实施例35
H-Gly-Asp-Phe-Glu-Glu-Leu-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH
实施例36
H-Gly-Asp-Phe-Glu-Glu-Val-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH
实施例37
H-Gly-Asp-Phe-Glu-Glu-Phe-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH
实施例38
H-Asp-Phe-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH
实施例39
Suc-Phe-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH
实施例40
H-Gly-Asp-Phe-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Asp-Ala-Tyr-Glu-OH
实施例41
H-Gly-Asp-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Asp-Ala-Phe-Asp-Glu-OH
实施例42
Ac-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Orn-NH2
实施例43
H-Gly-Asp-Phe-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Tyr-Glu-OH
实施例44
H-Asp-Phe-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Tyr-Gln-OH
实施例45
Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Phe-Lys-NH2
实施例46
Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Phe-D-Lys-NH2
实施例47
Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Phe-Orn-NH2
实施例48
Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Tyr-Lys-NH2
实施例49
Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Phe-Lys-OH
实施例50
Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-His-Lys-OH
实施例51
Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Cha-Lys-NH2
实施例52
Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Leu-Phe-Lys-NH2
实施例53
Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Pro-Gln-Glu-Ala-Phe-Lys-NH2
实施例54
Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Phe-Glu-OH
实施例55
Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Phe-Gln-PH
实施例56
Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Cba-Asp-OH
实施例57
H-Gly-Asp-Phe-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Asp-Ala-Tyr-D-Asp-OH
实施例58
Ac-HV-l45-65
实施例2-58的肽具有下列性质：
Figure 88100260_IMG1
Figure 88100260_IMG2
Figure 88100260_IMG3
Figure 88100260_IMG4
Figure 88100260_IMG5
Figure 88100260_IMG6
＊（M+Na）
Figure 88100260_IMG7
＊（M+Na）
Figure 88100260_IMG8

Claims (27)

1、具有下列结构通式的肽衍生物
X-A1-A2-A3-A4-A5-A6-A7-A8-A9-A10-Y
其中X是氢、一或两个有1至6个碳原子的烷基或一个或两个有2至10个碳原子的酰基；
A1是一个键或含有1至11个任何氨基酸残基的肽；
A2是Phe、Sub Phe、β-(2-和3-噻吩基)丙氨酸、β-(2-和3-呋喃基)丙氨基、β-(2-，3-和4-吡啶基)丙氨基、β-(苯并噻吩-2-和3-基)丙氨酸、β-(1-和2-萘基)丙氨酸、Tyr或Trp；
A3是Glu或Asp；
A4是任何氨基酸；
A5是Ile、Val、Leu、Nle或Phe；
A6是Pro、Hyp、3，4-脱氢Pro、噻唑烷-4-羧酸酯、Sar、NMe Pgl或D-Ala；
A7是任何氨基酸；
A8是任何氨基酸；
A9是选自Tyr、Trp、Phe、Leu、Nle、Ile、Val、Cha和Pro的亲脂性氨基酸或至少包含上述这些亲脂氨基酸之一的二肽；
A10是一个键或含1至5个任何氨基酸残基的肽片段；且
Y是选自OH、(C1-C6)烷氧基、氨基、一或二-(C1-C4)烷基取代的氨基的羧基末端残基。
2、根据权利要求1的肽衍生物，其中A2是Phe、β-（2-或3-噻吩基）丙氨酸或Tyr。
3、根据权利要求1的肽衍生物，其中A3是Glu。
4、根据权利要求1的肽衍生物，其中A4是Glu、Ala或Pro。
5、根据权利要求1的肽衍生物，其中A5是Ile。
6、根据权利要求1的肽衍生物，其中A6是Pro。
7、根据权利要求1的肽衍生物，其中A7是Glu或Ala。
8、根据权利要求1的肽衍生物，其中A8是Glu或Asp。
9、根据权利要求1的肽衍生物，其中A9是Tyr-Leu、Ala-Tyr或Ala-Cha。
10、根据权利要求1的肽衍生物，其中A10是Gln、Asp、Pro、键、Asn、Asn-Glu、Glu、Ala、D-Lys、Lys、D-Asp、D-Glu或Orn。
11、根据权利要求1的肽衍生物，其中X是H、乙酰基或琥珀酰基。
12、根据权利要求1的肽衍生物，其中Y是OH或NH2。
13、根据权利要求1的肽衍生物，其中A1是-Ser-His-、Asn-Asp-Gly-Asp、Asn-Asp-Gly-Asp、Asp-Gly-Asp、Gly-Asp、Asp或键。
14、根据权利要求1的肽衍生物，其中A是Thr-Pro-Lys-Pro-Gln-Ser-His-Asn-Asp-Gly-Asp。
15、根据权利要求1的肽衍生物，其中A是Thr-Pro-Asn-Pro-Glu-Ser-His-Asn-Gly-Asp。
16、根据权利要求1的肽衍生物，其中
X是H、A1是-Gly-Asp-、A2是Phe、A3是Glu、A4是Glu、A5是Ile、A6是Pro、A7是Glu、A8是Glu、A9是Tyr-Leu、A10是Gln，Y是OH。
17、根据权利要求1的肽衍生物，其中
X是Suc、A1是键、A2是Phe、A3是Gly、A4是Glu、A5是Ile、A6是Pro、A7是Glu、A8是Glu、A9是Tyr-Leu、A10是Gln、Y是OH。
18、根据权利要求1的肽衍生物，其中
X是H、A1是Gly-Asp、A2是Phe、A3是Glu、A4是Pro、A5是Ile、A6是Pro、A7是Glu、A8是Asp、A9是Ala-Tyr、A10是Asp-Glu、Y是OH。
19、根据权利要求1的肽衍生物，其中
X是Suc、A1是键、A2是Phe、A3是Glu、A4是Pro、A5是Ile、A6是Pro、A7是Glu、A8是Glu、A9是Tyr-Leu、A10是Pro、Y是NH2。
20、根据权利要求1的肽衍生物，其为Suc-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH。
21、根据权利要求1的肽衍生物，其为Suc-Phe-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH。
22、根据权利要求1的肽衍生物，其为Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Phe-D-Lys-NH2。
23、根据权利要求1的肽衍生物，其为Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Tyr-Lys-NH2。
24、根据权利要求1的肽衍生物，其为Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Phe-Glu-OH。
25、根据权利要求1的肽衍生物，其为Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Phe-Gln-OH。
26、根据权利要求1的肽衍生物，其为Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Cha-Asp-OH。
27、降低患者体内血凝固能力的方法，其包括给予抗血液凝固有效量的权利要求1～26中任一项的肽衍生物及医药上可接受的载体。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102757479A (zh) * 2012-05-09 2012-10-31 北京林业大学 高活性降血压肽及其制备方法

Families Citing this family (32)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5789540A (en) * 1987-01-23 1998-08-04 Merrell Pharmaceuticals Inc. Anticoagulant peptides
US6005071A (en) * 1987-01-23 1999-12-21 Merrell Pharmaceuticals Inc. Anticoagulant peptides
US5192745A (en) * 1987-05-21 1993-03-09 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Cyclic anticoagulant peptides
US5236898A (en) * 1987-05-21 1993-08-17 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Cyclic anticoagulant peptides
US5256559A (en) * 1988-03-04 1993-10-26 Biogen, Inc. Methods and compositions for inhibiting platelet aggregation
NZ228995A (en) * 1988-05-10 1992-03-26 Merrell Dow Pharma Hirudin peptide derivatives and pharmaceutical compositions
WO1990006128A1 (en) * 1988-12-05 1990-06-14 Biogen, Inc. Methods and compositions for inhibiting platelet aggregation
ZA899247B (en) * 1988-12-07 1990-09-26 Merrell Dow Pharma Anticoagulant peptides
US5232912A (en) * 1988-12-07 1993-08-03 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Anticoagulant peptides
US5240913A (en) * 1989-08-18 1993-08-31 Biogen, Inc. Inhibitors of thrombin
US5196404B1 (en) * 1989-08-18 1996-09-10 Biogen Inc Inhibitors of thrombin
CA2026376C (en) * 1989-10-03 2002-01-01 John L. Krstenansky Anticoagulant peptides
ZA907743B (en) * 1989-10-03 1991-07-31 Merrell Dow Pharma Radiolabeled anticoagulant peptides
US5192747A (en) * 1989-10-03 1993-03-09 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Anticoagulant peptides
CA2035917C (en) * 1990-02-13 2001-10-02 John L. Krstenansky Stabilized sulfonate, sulfate, phosphonate and phosphate derivatives of hirudin
DE4005591A1 (de) * 1990-02-22 1991-09-05 Behringwerke Ag Die blutgerinnung inhibierende peptide, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung
US6060451A (en) * 1990-06-15 2000-05-09 The National Research Council Of Canada Thrombin inhibitors based on the amino acid sequence of hirudin
KR100195424B1 (ko) * 1990-07-24 1999-06-15 슈테펜엘.네스비트 항응고성 펩티드
ZA915658B (en) * 1990-07-24 1992-05-27 Merrell Dow Pharma Analogs of hirudin having antiplatelet activity
US5574012A (en) * 1990-07-24 1996-11-12 Merrell Pharmaceuticals Inc. Analogs of hirudin having anti-platelet activity
US5242810A (en) * 1990-12-07 1993-09-07 Biogen, Inc. Bifunctional inhibitors of thrombin and platelet activation
DE4103649A1 (de) * 1991-02-07 1992-08-13 Basf Ag Neue antikoagulatorisch wirksame peptide
EP0531537B1 (en) * 1991-03-05 1996-09-11 Japan Energy Corporation Hirudin analogue or salt thereof, production thereof, and anticoagulant containing the same as active ingredient
US5767235A (en) * 1991-03-05 1998-06-16 Nippon Mining Company Limited Anticoagulant hirudin variants and methods for their production
IT1250689B (it) * 1991-07-22 1995-04-21 Marco Gerna Analoghi dell'irudina e procedimento per la loro preparazione
JPH06510527A (ja) * 1991-07-31 1994-11-24 アンステイテユ・パストウール Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍのメロゾイトによる赤血球侵入を抑制することがそれ自体可能な抗体をｉｎ　ｖｉｖｏで誘導し得るポリペプチド、関連生成物及びワクチン組成物の製造のためのその適用
DK0702696T3 (da) * 1993-06-11 2003-11-17 Merrell Pharma Inc Trifunktionelle antithrombin- og antiblodpladepeptider
GB9426038D0 (en) 1994-12-22 1995-02-22 Iaf Biochem Int Low molecular weight bicyclic thrombin inhibitors
US6057314A (en) * 1995-12-21 2000-05-02 Biochem Pharma Inc. Low molecular weight bicyclic thrombin inhibitors
US5831003A (en) * 1996-06-28 1998-11-03 Bayer Corporation Peptides which bind to prothrombin and thrombin
GB0209249D0 (en) * 2002-04-23 2002-06-05 Evolutec Ltd Anticoagulants
GB0711779D0 (en) 2007-06-18 2007-07-25 Univ Singapore Thrombin inhibitor

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3445517C2 (de) * 1984-12-13 1993-11-18 Ciba Geigy Für ein Hirudin-ähnliches Protein codierende DNA-Sequenz und Verfahren zur Herstellung eines Hirudin-ähnlichen Proteins
DE3445532A1 (de) * 1984-12-13 1986-06-19 Plantorgan Werk Heinrich G.E. Christensen, KG, 2903 Bad Zwischenahn Hirudin-pa, desulfatohirudine-pa, verfahren zur herstellung und pharmazeutische mittel, die diese wirkstoffe enthalten
DE3506992A1 (de) * 1985-02-27 1986-08-28 Plantorgan Werk Heinrich G.E. Christensen, KG, 2903 Bad Zwischenahn Modifizierte hirudine, verfahren zu deren herstellung und pharmazeutische mittel, die diese wirkstoffe enthalten
MY101203A (en) * 1985-12-12 1991-08-17 Ucp Gen Pharma Ag Production of thrombin iinhibitors.

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102757479A (zh) * 2012-05-09 2012-10-31 北京林业大学 高活性降血压肽及其制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
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