CN1889950A - 能酸化细胞质的尿刊酸用于预防或停止人体内细胞增殖的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及能酸化细胞质的尿刊酸或另外的药理学可接受药物用于生产药物组合物的用途，所述药物组合物抑制或停止人或动物的转化细胞或非转化细胞增殖，其中有效量的所述药物以本质上非解离的形式给予人或动物。本发明也涉及所述药物用作其它治疗活性药物的增强剂的用途。本发明也涉及药物组合物。

Description

能酸化细胞质的尿刊酸用于预防或停止人体内细胞增殖的用途
发明领域
本发明涉及尿刊酸或另外的药理学可接受药物的用途，它们用于酸化细胞质，随后预防或停止细胞增殖，尤其是人或动物中的肿瘤或其它转化或非转化的过度增殖细胞，以及通过阻滞细胞生长和增殖治疗或预防癌症和过度增殖性疾病。
发明背景
本文中用于说明本发明背景的出版物和其它资料，特别是提供实施方面的额外细节的案例，通过引用结合到本文中。
正常细胞和转化细胞中的许多细胞功能与细胞内pH的维持有关。某些研究者最近表明，通过能酸化细胞浆的药物可调节癌细胞的增殖活性(Cosentini et al.2001，Wahl et al.2002，Thangaraju et al.1999)。相似地，细胞内酸化激活凋亡或程序性细胞死亡级联(Gottlieb etal.1996，Matsuyama et al.2000)。推测酸化影响关键的凋亡酶如导致DNA片断化的酸性核酸内切酶和产生神经酰胺的酸性鞘磷脂酶(Gottlieb et al.1996)。因此认为控制细胞增殖活性和凋亡对于药理干预癌症是有前景的方法(Los等的综述，2003)。在瘤床中，为利于增殖，有活力的肿瘤细胞的细胞浆pH典型地维持在中性附近，而细胞外微环境被细胞代谢物酸化(Yamagata & Tannock 1996)。
发明概述
本发明的发明人展示了尿刊酸(UCA)迄今不为人所知的性质。他们令人惊讶地表明，UCA迁移至恶性细胞或非恶性细胞的细胞浆，所用的形式能在细胞浆中释放氢离子。随后，细胞浆被酸化(pH下降)，因此作为进一步的结果，正常或异常的细胞增殖活性被阻止。
因此，一方面，本发明涉及能酸化细胞浆的UCA或其它的药理学可接受药物生产药物组合物的用途，该药物组合物用于预防或停止人或动物中的细胞增殖，其中给予人或动物的基本非解离形式的有效量的UCA或其它药物。
另一方面，本发明涉及UCA或其它的药理学可接受药物的用途，它们用作另一种在治疗活性药物的增效剂。
第三方面，本发明涉及能酸化细胞浆的UCA或其它药理学可接受药物和药物可接受载体的药物组合物，该载体基本防止药物在细胞外pH值下解离。
附图简述
图1展示了喜树碱对细胞系的抗增殖效果。细胞与或不与2μM喜树碱(CPT)一起培养了44小时，pH为6.5或7.4。和增殖检测药物孵育2小时后，记录490nm处的吸光值。细胞培养密度为15,000个每150μl体积(K562，HT-1080，HK293)或75,000细胞每150μl体积(其它的细胞)。
图2展示了在2个人源皮肤黑素瘤细胞系中顺-UCA联合喜树碱和低pH的抗增殖效果。细胞与或不与2μM喜树碱(CPT)或10mM顺-UCA一起培养92小时，每种样品三份，细胞密度为15,000个每150μl。A，细胞取自pH为7.4的正常培养物，在pH6.5的环境中检测。B，细胞在低pH6.7的适应培养基中培养3天，再在pH6.5下检测。C，细胞在pH7.4下培养并检测。
图3展示了顺-UCA对A2058黑素瘤细胞增殖的浓度反应。在44小时的检测中测定了pH6.5下含有30μM-30mM顺-UCA和2μM喜树碱的增殖情况。呈现了增殖(A)和计算的抑制百分率数据(B)。
图4展示了添加的顺-UCA的抗增殖效果。三个细胞系和顺-UCA和/或1μM喜树碱在pH6.5的培养基中培养44小时，细胞密度为30,000个每孔(100μl)。空白孔包含所有的顺-UCA浓度但是不包含细胞，从相应的试验孔的吸光值中扣除它们的吸光值。
图5展示了用UCA处理的原位肿瘤细胞的胞内pH测定值。细胞用BCECF标记并置于含有或不含有各种浓度的顺-UCA的pH调节缓冲溶液中。左图，在高钾缓冲液中作为缓冲液pH函数的尼日利亚菌素处理细胞的BCECF荧光强度的标准曲线。右图，在含有或不含有各种浓度的顺-UCA的缓冲液中的细胞内pH值。在添加顺-UCA后所有的试验缓冲液pH调节至7.4(％)或6.5(+)。使用左侧相应的标准曲线计算结果。
发明详述
在优选的实施方案中，药物可接受的化合物是尿刊酸(UCA)，但是不限于此。任何其它药物可接受的，具有的解离常数是5.0-7.4、优选为6.0-7.3、最优选为约7.0，能在细胞内聚集的无毒酸或碱也有用。这种化合物可以是无机的或有机的，优选为含有如UCA一样杂环的有机药物，其杂环上结合了饱和的、或更优选不饱和的羧酸部分。杂环基团可以是，例如，咪唑(如UCA)或任何其它的杂环或多杂环基团，这些基团在细胞质pH下具有供给质子的能力，因此酸化细胞质。作为其它适合的杂环基团的实例，可以提及的有噻唑、噻吩、呋喃、唑、三唑、四唑、吡唑、吡啶、嘧啶和三嗪。
药物可接受的化合物和载体混合，载体可以为一种单一成分，或更优选为两种或多种成分的混合物。一种成分适合的是缓冲剂它调节组合物的pH至想要的值。尤其当UCA的反式异构体反-UCA是活性成分时，优选将组合物的pH调节到4.0-6.1，更优选的是5.0至6.1。在该pH范围内，反-UCA仍然是非解离的。当UCA的顺式异构体顺-UCA是活性成分时，优选将组合物的pH调节到5.0-7.0，更优选的是6.0-7.0。在该pH范围内，顺-UCA仍然是非解离的。
根据一个实施方案，药物组合物也可包含另一种治疗活性药物，UCA增强它的效果。优选地，这种治疗活性药物是但不限于抗增殖药物或抗癌药物。
作为适合的调节pH至4.0-7.0的缓冲剂的实例，可以提及的有但不限于具有55mM氯化钠的50mM磷酸钠，含有25mM HEPES的细胞培养基，和补充了133mM氯化钠的10mM Pipes。
本发明的方法和组合物可用于通过细胞内酸化治疗或预防癌症和过度增殖性疾病。本文使用的术语细胞内酸化指提升真核细胞的细胞浆或亚细胞部件中的氢离子浓度。
可按照本发明治疗或预防的过度增殖性疾病是任何形式的癌症，例如，但不限于，脑癌、皮肤癌(例如黑素瘤)、膀胱癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌、头癌、颈癌、食道癌、前列腺癌、结直肠癌、肺癌、肾癌、妇科癌症(例如卵巢癌)或甲状腺癌；其它的上皮癌；各种器官的囊肿；由病毒感染引起的疣和疣样肿瘤；纤维肉瘤和它的转移物。在另一个实施方案中，本发明涉及治疗非癌性的过度增殖性疾病，例如皮肤或前列腺的良性增生(如良性前列腺肥大)、类风湿性关节炎中的粘液增生、炎性肠病、再狭窄、动脉粥样硬化、血栓、硬皮症或纤维化。最优选地是，本发明的方法和组合物的靶细胞是皮肤中构成实体瘤的细胞。
对于本发明的目的，药物可接受的药物可以通过各种途径全身或局部给予。适合的给药形式包括，例如，表皮剂型；瘤内注射剂(包括静脉内、肌内、皮内和皮下注射剂)；滑膜腔内注射剂；粘膜、表面、透皮、鼻腔、吸入或直肠剂型。特别适合的剂型是局部传递的剂型，如软膏、凝胶、乳膏、贴片、溶液、混悬液、洗液和乳剂形式的表面剂型。也可以采用靶向给药系统(如脂质体和纳米颗粒)结合前述给药形式，给予药物可接受的药物。
药物可接受的化合物的必需剂量随具体的待治疗疾病、疾病的严重程度、治疗期、给药途径和采用的具体化合物而变化。在表面剂型中药物可接受的化合物的量典型地在0.01％-50％的范围内，优选为0.1-10％。
将通过以下的非限定性实验部分阐明本发明。
实验部分
本研究的目的是研究一个假说，该假说认为UCA在适当的细胞外环境中进入转化细胞型，酸化它们的细胞质随后抑制细胞增殖。
在先前的公开(WO 2004/080456)中，我们证明了顺-UCA和反-UCA都迅速且不可逆地聚集在活的人多形核中性粒细胞中。没有UCA结合细胞内细胞器的迹象，也没有它能在细胞浆中代谢的迹象。当细胞外pH范围在6.1-7.0时，顺-UCA影响中性粒细胞的细胞内pH而反-UCA不影响。在这些条件下，顺-UCA仍然是非解离的而反-UCA(其pKa为6.1)大部分或完全解离，因此不能转运质子到细胞浆中。然而，当细胞外pH低于6.1时，如5.0-6.0，反-UCA也能作为质子载体引发细胞内酸化。为了清楚，这里的实验结果只展示了顺-UCA的效果，尽管在恰当的pH范围内用反-UCA也可以得到相似的结果。
已知细胞内酸化是许多细胞功能(如生长停滞)改变的先决条件。还已知转化细胞型如癌细胞系的生长(增殖)可被能引起细胞内酸化的药物抑制。这种化合物(通常是有机酸)的不良副反应或毒性妨碍了它们在癌症临床治疗中的使用。
方法
尿刊酸
反式-尿刊酸[反-UCA，3-(1H-咪唑-4-基)-2-丙酸，MW 138.14]购至Sigma(St.Louis，MO，USA)。如下用UV光异构化由反-UCA制得顺-UCA。反-UCA(138mg，1mmol)溶于水(500ml)。用固体氢氧化钾将溶液pH调至9.0，接着在氮气中在10℃下辐照4小时。光异构化在具有Hanau高压石英汞高压灯(500W，270-350nm)的降膜光反应器中进行。所得混合物(经HPLC分析，反/顺约为30/70)蒸发至干，残留物溶于12.5mM乙酸。该溶液调pH至9，在离子交换柱(25×2.3cm，200-400目，乙酸盐形式，Bio-Rad 1-x8)上进行层析，采用12.5mM(500ml)、25mM(500ml)和100mM(1000ml)乙酸连续洗脱。约1100ml后顺-UCA出现而反-UCA主要在1300ml洗脱体积以后出现。从级分中除去溶剂，接着用二乙醚洗涤，在五氧化二磷上65℃真空干燥，得到纯的反式异构体和顺式异构体。顺-UCA的产率为85mg(58％)，mp.176-178℃，经HPLC分析化学纯度大于99.5％。HPLC分析采用氨丙基固相柱Lichrosorb NH2，Hibar RT，250×4mM，5μm(Merck，Darmstadt，Germany)。洗脱液为乙腈和2％(w/v)乙酸与0.5％(w/v)乙酸铵的水溶液(pH约为5)的50％(v/v)化合物。在268nm下检测异构体，保留时间Tr(顺)为3.7min，Tr(反)为5.4min。
Cis-UCA直接溶于孵育缓冲液或培养基，浓度为30mM，过滤灭菌(0.2μm)，在每个实验开始前现稀释到需要的浓度。
喜树碱
通过将喜树碱(Sigma，MW 348.4)溶于去离子水制得该药物的储备液(1.4-2.1mg/ml)。用NaOH(1N)将溶液碱化，用沸水浴中加热进一步帮助解离。在生理盐水中制备稀释的储备液。实验的终浓度为20-2000nmol/l。
细胞系
早先描述了转化的肿瘤细胞系WM 266-4和A2058(皮肤黑素瘤)、HT-1080(上皮纤维肉瘤)、HeLa(子宫颈上皮腺癌)、HK293(肾脏上皮细胞)和人源的非转化细胞系HSF(来自男性健康志愿者的皮肤成纤维细胞)(Li et al.2003)。K562(慢性髓细胞性白血病)细胞购至美国典型培养物中心。
用湿度培养箱(37℃，5％CO2)，在添加了10％胎牛血清和抗生素的LMDM培养基(Invitrogen，Paisley，UK)中，将细胞维持在对数生长期。用0.25％胰蛋白酶-EDTA的PBS溶液收集贴壁细胞系5分钟用于实验，重悬于培养基并用培养基洗涤。活细胞计数后，将15,000-75,000个细胞转移至平底的96孔细胞培养板中(体积为100或150μl)。
增殖检测
用基于四唑衍生物的改进比色测定方法，在平底的96孔板中定量培养细胞系的增殖活性(CellTiter 96单水溶液细胞增殖测定，Promega)。细胞和喜树碱和/或顺-UCA培养20-92小时，然后加入增殖剂持续2小时，用读板仪测定490nm处的吸光度。孔的空白吸收值(含培养基但不含细胞)在比较分析之前扣除。
监控细胞内pH
顺-UCA存在下细胞系的胞内pH用对pH敏感的荧光染料2′，7′-双-(2-羧乙基)-5-(和-6)-羧基荧光素(BCECF，乙酰氧基甲基酯；Molecular Probes，Leiden，The Netherlands)通过流式细胞仪测定。两百万细胞在5ml DMEM培养基(Invitrogen，pH7.4，包含0.35μM BCECF)中37℃下孵育30分钟，用pH 7.4的磷酸钠缓冲液(50mM NaH2PO4/Na2HPO4，43mM NaCl)洗涤一次，重悬于0.3ml生理盐水。吸取20μl细胞悬浮液至流式细胞仪管。加入顺-UCA后将含有或不含有顺-UCA的磷酸钠缓冲液pH调整至6.5或7.4(用0.1N HCl/NaOH)，在管中加入该缓冲液使终体积为500μl。流式细胞仪分析在1小时内进行。
采用K+/H+离子载体尼日利亚菌素(Molecular Probes)在高钾缓冲液中绘制原位细胞内pH的标准曲线。在流式细胞仪管中将BCECF标记的细胞(于20μl生理盐水中)重悬于pH调整过的标准曲线缓冲液(480μl的50mM KH2PO4/K2HPO4，43mM KCl，pH6.2、6.5、6.8、7.2和7.5)中。在分析前(10-15分钟)将尼日利亚菌素储备液(10mM的甲醇溶液)用生理盐水按1∶10稀释，取5μl加入标准曲线细胞悬液。实验过程中细胞置于室温。通过参考尼日利亚菌素-夹(clamped)校正细胞，从BCECF荧光强度均值计算准确的细胞内pH值。每个细胞系单独同时绘制校正曲线。
结果
喜树碱展示的抗增殖作用在较低pH下增强
大多数细胞系的pH 7.4培养物的基础增殖比pH6.5的高。喜树碱(2μM)抑制所有细胞系的增殖，在pH6.5时展示更有效的抑制(图1)。
顺-UCA抑制癌细胞增殖且在pH6.5时增强喜树碱的抗增殖作用
基于我们以前对外周血中性粒细胞的观察，顺-UCA以它的非解离分子形式实现抑制作用，即，在细胞外pH6.1-7.0的范围内，我们在两个pH水平(pH6.5和pH7.4)上研究了顺-UCA对黑素瘤细胞系A2058和WM266-4的作用。当正常培养(pH7.4)的细胞在pH6.5的培养基中检测时，10mM顺-UCA自身显著地抑制细胞增殖，也增强喜树碱的抑制作用(图2A)。10mM顺-UCA对A2058细胞的独自抑制百分率是83％(p＝0.0028)，对WM266-4细胞的是36％(p＝0.0020)。在开始pH为6.5的试验培养期之前首先让细胞在pH6.7的培养条件下适应3天，细胞增殖的级数(order)相同(对于顺-UCA，分别是87％，p＝0.0056；28％，p＝0.090)(图2B)。在pH7.4下的抑制只有2-3％(图2C)。相似地，喜树碱的效果在较低pH下也较好(图2)。这些实验表明，当细胞外pH＜pKa或当分子的咪唑部分处于非解离形式时，顺-UCA作为抗增殖药物作用于肿瘤细胞。
细胞系在培养44小时后在pH6.5下检测，每100μl总体积中含有15,000个细胞，含有或不含有2μM喜树碱和10mM顺-UCA。在这些条件下，在大多数细胞系中顺-UCA独自显著地抑制细胞增殖(20-50％)且增强了喜树碱的抑制作用(表I)。为了进一步地界定顺-UCA的有效抗增殖浓度范围，在pH6.5下用浓度为30μM-30mM的顺-UCA测定了44小时测定中的增殖。黑素瘤细胞A2058的结果显示，为了产生可测量的抑制作用必需的顺-UCA最低浓度为3mM(图3)。表I在pH6.5顺-UCA(10mM)和喜树碱(CPT，2μM)抑制细胞系增殖。
  细胞系1   CPT   cis-UCA   CPT+cis-UCA
  HSFWM266-4A2058HK293HeLaK562HT-1080   37±0.4％2p＝0.0005681±1.1％p＝0.001684±3.3％p＝0.006956±1.0％p＝0.003578±1.6％p＝0.0004677±3.3％p＝0.001871±1.7％p＝0.00035   41±1.1％p＝0.005320±0.6％p＝0.04445±4.4％p＝0.03822±0.1％p＝0.01350±1.7％p＝0.003226±2.9％p＝0.01647±0.5％p＝0.0024   69±2.3％p＝0.0002080±3.4％p＝0.001289±1.0％p＝0.005455±3.3％p＝0.0008085±1.7％p＝0.0004279±18％p＝0.006979±4.1％p＝0.0018
1三个孔中每100μl 15,000个细胞培养44小时。
2平均抑制百分率±SD，和未处理的对照相比。
在进一步的实验中，为了界定添加的顺-UCA的抗增殖作用，采用了较低的喜树碱浓度(1μM)。在所有的三个被研究细胞系中，3mM或更高浓度的顺-UCA抑制了增殖(图4)。视细胞系而定，在1-10mM的范围内顺-UCA对喜树碱的累加效应是明显的。在顺-UCA的最大研究浓度(30mM)，单独含有顺-UCA的增殖总是与联合使用喜树碱在同一水平，比单独使用1μM喜树碱低(图4)。
顺-UCA降低转化细胞的细胞内pH
因为顺-UCA在细胞系中展示了抗增殖作用，我们接下来研究了是否顺-UCA在这些细胞中产生了细胞内酸化。我们之前表明顺-UCA在外周血中性粒细胞的细胞浆中高浓度聚集，当细胞外pH调整至7.0以下时降低细胞浆的pH。选择的转化细胞系用对pH敏感的荧光染料BCECF标记，置于pH调整缓冲液中，其含有或不含有各种浓度的顺-UCA。流式细胞仪分析表明，当细胞外pH保持在7.4时，随顺-UCA浓度的升高至30mM，A2058和HeLa细胞的胞内pH几乎维持不变。然而当细胞外缓冲液pH调整至6.5时，细胞内pH降低，在0.3-30mM的范围内呈现顺-UCA浓度依赖性的方式。当顺-UCA浓度最大时约降低了0.25个pH单位(图5)。这些A2058和HeLa细胞的数据表明，顺-UCA能酸化转化细胞的细胞浆。观察到的酸化很可能是顺-UCA抗增殖作用的起始事件。
结论
肿瘤细胞通过转化获得逃避细胞分裂的严格限制的能力。在这个多步骤的过程中，限制增殖的细胞内途径失活和激活促进增殖的细胞内途径是关键的事件。导致的转化细胞异常生长行为仍然是医学的主要挑战。因为癌细胞通常不遵守细胞周期进展与凋亡的正常细胞机制，实体瘤制造出异常的酸性的和低含氧量的微环境，药物治疗的效率经常差强人意，但是也为设计肿瘤选择性的药物提供了新颖的前景(Kozin et al.2001)。实体瘤组织的细胞趋于在细胞膜内外保持pH梯度；细胞浆pH接近于中性，而细胞外微环境则是酸性的，通常在pH6.7左右(Kozin et al.2001，Yamagata & Tannock 1996)。在低的细胞外pH，细胞对某些药物如喜树碱的摄取增加(Gabr et al.1997)，有效的抗增殖活性需要酸性的细胞内环境，因为分子结构的可逆转化(Burke & Mi 1993)。据显示，同时用能酸化细胞内环境的酸治疗可增强肿瘤细胞对喜树碱的化学敏感性(Cosentini et al.2001，Gabr et al.1997)。喜树碱自身在几个小时的时程内酸化白血病细胞的细胞浆，诱导凋亡(Goossens et al.2000)。补充的质子载体的细胞内酸化可增强喜树碱和相应药物的作用。相似地，烷基化药物和含铂药物与DNA的相互作用优选低pH的细胞内环境(Jahde et al.1989，Atema et al.1993)。
本实验中使用的顺-UCA的有效浓度在毫摩尔水平，主要在1-30mM之间。顺-UCA的天然定位是表皮的表面层，公布的该处总UCA浓度是0.5-8.9mM，视表皮的平均厚度而定(Laihia et al.1998)。因此可能这些浓度在维持固有的抗菌、抗增殖和抗炎酸性表面环境，以分别抵抗病原微生物、肿瘤和中性粒细胞聚集方面很重要(″acidmantle″，Ohman & Vahlquist 1994)。近来有分析提供了证据，认为在表皮的酸碱内环境稳定上UCA是主要的效应分子(Krien & Kermici2000)。在另一方面，其它的有机酸在相同的浓度范围内实验性地增强了喜树碱的抗增殖活性。例如，在体外，浓度为5-40mM的组蛋白脱乙酰基酶抑制剂丁酸苯酯和乙酸苯酯分别减少了结肠癌细胞增殖20-86％(Cosentini et al.2001)。
尽管还没有仔细研究，但是UCA的特征令其有希望成为有潜质的药理物质用于癌症干预。首先，UCA是皮肤中大量合成的天然分子，如上所述。UCA为人所知的时间超过120年，是数百篇生物医学出版物的主题。这些事实排除了关于令人吃惊的药理毒性或过敏可能性的疑虑。第二，顺-UCA是水溶性的，容易穿透到组织或细胞质中。第三，顺-UCA在哺乳动物中没有已知的代谢，因此没有可预见的可能代谢物的副作用。在体内皮肤中，反-UCA由组氨酸合成(Baden & Pathak 1967)。UV诱导的光异构化产生顺式异构体，再在汗液和尿液中排出。如果顺-UCA给药后发生非本意的光异构化回复至反-UCA，全身的反-UCA在肝脏以天然方式经多种无害的中间体代谢成为谷氨酸。皮肤内不存在内源性代谢。第四，顺-UCA的质子解离性质使之成为有潜质的癌症药物。UCA是弱的多元酸，具有两个质子供体部分(羧基和咪唑基)。一级pKa(顺-UCA上的羧基)是3.3(Roberts et al.1982)。因此实际上在pH＞4时所有顺-UCA分子上羧基都是去质子的。在生理相关的pH水平上，咪唑基的质子化状态独自决定了分子能否供出一个质子从而促进酸化。二级pKa(顺-UCA上的咪唑基)是7.0(Roberts et al.1982，Krien & Kermici 2000)。因此，顺-UCA的咪唑基仅在pH＜7.0质子化，当进入pH＞7.0的细胞质时作为质子供体。已指出癌细胞中酸化诱导的凋亡在细胞内pH接近6.5时最有效(Thangaraju et al.1999)。线粒体细胞色素C对胱天蛋白酶的激活对pH敏感，在体外最适pH范围为6.3-6.8(Matsuyama et al.2000)。这里呈现的数据表明在细胞外pH6.5时顺-UCA在活的癌细胞中具有有力的抗增殖活性，但在pH7.4时活性却有限。癌症药物的质子解离性质已经讨论过，但仅限于细胞摄入(Kozin et al.2001)。除了好的摄入特性，酸化肿瘤细胞的最佳药物的pKa值应该高于实际细胞外pH且低于细胞内稳态pH。在温和的酸性细胞外环境中，肿瘤细胞的增殖应该被顺-UCA诱导的细胞内酸化扼制。该观点也可以应用于增殖的其它情况，如类风湿性关节炎中的粘液成纤维细胞增殖。在药物治疗实体瘤或其它的可能增殖细胞的情况下，温和的酸性细胞外条件对于顺-UCA的使用是理想的。
总之，本研究展示的数据第一次令人惊讶的说明了UCA对癌细胞的抗增殖作用。该调节涉及UCA酸化细胞的细胞浆的性质。酸化性质基于UCA适宜的PKa，因此受限于接近或超过中性的细胞浆pH以及弱酸性的细胞外环境。这些pH条件通常普遍存在于实体瘤组织中。
通过以下非限定性的实施例进一步说明本发明。
本发明的制剂实施例
凝胶组合物1(％w/w)
顺式尿刊酸                0.1-10
Carbopol 974              1.5
丙二醇                    12.5
缓冲剂                     0.01-1
纯水加至                   100
凝胶组合物2(％w/w)
顺式尿刊酸                 0.1-10
Natrosol(羟乙基纤维素)     1.0
缓冲剂                     0.01-1
纯水加至                   100
乳膏组合物1(％w/w)
顺式尿刊酸                 0.1-10
丙二醇                     50
十八醇十六醇混合物         15
十二烷基硫酸钠             1
缓冲剂                     0.01-1
纯水加至                   100
乳膏组合物2(％w/w)
顺式尿刊酸                 0.1-10
十八醇十六醇混合物         6.75
丙二醇                     40
十二烷基硫酸钠             0.75
Poloxamer407               1
矿物油                     5
粘性凡士林                 12.5
缓冲剂                     0.01-1
纯水加至                   100
软膏组合物(％w/w)
顺式尿刊酸                0.1-10
矿物油                    5
缓冲剂                    0.01-1
凡士林加至                100
应该理解基，本发明的方法能结合到各种实施方案形式中，本文仅公开了其中的几种。对本领域的技术人员显而易见的是，存在其它的实施方案且不偏离本发明的精神。因此，描述的实施方案是说明性的，不应该被理解为限定性的。
参考文献
Anglin JH Jr，Batten WH.顺式尿刊酸的研究(Studies on cisurocanic acid).J Invest Dermatol 1968；50：463-6.
Atema A，Buurman KJ，Noteboom E，Smets LA.低pH对DNA-加合物形成和含铂药物毒性的加强(Potentiation ofDNA-adduct formationand cytotoxicity of platinum-containing drugs by low pH).Int J Cancer1993；54：166-72.
Baden HP，Pathak MA.皮肤中尿刊酸的代谢和功能(Themetabolism and function of urocanic acid in skin).J Invest Dermatol 1967；481：11-7.
Beissert S，Mohammad T，Torri H，Lonati A，Yan Z，Morrison H，Granstein RD.尿刊酸对肿瘤抗原提呈的调节(Regulation of tumorantigen presentation by urocanic acid).J Immunol 1997；159：92-6.
Burke TG，Mi Z.人血清白蛋白对喜树碱羧酸盐形式的优先结合(Preferential binding of the carboxylate form of camptothecin by humanserum albumin).Anal Biochem 1993；212：285-7.
Cosentini E，Haberl I，Pertschy P，Teleky B，Mallinger R，Baumgartner G，Wenzl E，Hamilton G.分化诱导物乙酸苯酯和丁酸苯酯在体外结肠癌细胞中通过细胞内酸化调节喜树碱的敏感性(Thedifferentiation inducers phenylacetate and phenylbutyrate modulatecamptothecin sensitivity in colon carcinoma cells in vitro by intracellularacidification).Int J Oncol 2001；19：1069-74.
El-Ghorr AA，Norval M.用尿刊酸异构体长期治疗小鼠的作用(The effect of chronic treatment of mice with urocanic acid isomers).Photochem Photobiol 1997；65：866-72.
Everett MA，Anglin JH Jr，Bever AT.紫外线诱导的皮肤生化改变(Ultraviolet induced biochemical alterations in skin).I.Urocanic acid.Arch Dermatol 1961；84：717-9.
Gabr A，Kuin A，Aalders M，El-Gawly H，Smets LA.喜树碱和托泊替康在正常和酸性pH下的细胞药动学和细胞毒性(Cellularpharmacokinetics and cytotoxicity of camptothecin and topotecan atnormal and acidic pH).Cancer Res 1997；57：4811-6.
Garssen J，Norval M，Crosby J，Dortant P，Van Loveren H.大鼠中尿刊酸在UVB-诱导的旋毛虫感染免疫抑制中的作用(The role ofurocanic acid in UVB-induced suppression of immunity to Trichinellaspiralis infection in the rat).Immunology 1999；96：298-306.
Gilmour JW，Vestey JP，George S，Norval M.光疗法和尿刊酸异构体对天然杀伤细胞功能的作用(Effect of phototherapy and urocanicacid isomers on natural killer cell function).J Invest Dermatol 1993；101：169-74.
Goossens JF，Henichart JP，Dassonneville L，Facompre M，Bailly C.白血病细胞中细胞内酸化和喜树碱-诱导凋亡之间的关系(Relationbetween intracellular acidification and camptothecin-induced apoptosis inleukemia cells).Eur J Pharm Sci 2000；10：125-31.
Gottlieb RA，Nordberg J，Skowronski E，B abior BM.Jurkat细胞中细胞内酸化先于某些药物诱导的凋亡(Apoptosis induced in Jurkat cellsby several agents is preceded by intracellular acidification).Proc NatlAcad Sci USA 1996；93：654-8.
Gruner S，Diezel W，Stoppe H，Oesterwitz H，Henke W.顺式尿刊酸对皮肤同种移植物排斥和急性移植物-抗宿主疾病的抑制(Inhibitionof skin allograft rejection and acute graft-versus-host disease by cis-urocanic acid).J Invest Dermatol 1992；98：459-62.
Holan V，Kuffova L，Zajicova A，Krulova M，Filipec M，Holler P，Jancarek A.尿刊酸增强活化CD4+T细胞中IL-10的产生(Urocanicacid enhances IL-10 production in activated CD4+T cells).J Immunol1998；161：3237-41.
Jahde E，Glusenkamp KH，Klunder I，Hulser DF，Tietze LF，Rajewsky MF.体外大鼠乳癌细胞中氢离子介导的双氯乙基化药物毒性的增强(Hydrogen ion-mediated enhancement of cytotoxicity of bis-chloroethylating drugs in rat mammary careinoma cells in vitro).CancerRes 1989；49：2965-72.
Kivisto K，Punnonen K，Toppari J，Leino L.尿刊酸抑制体外人中性粒细胞的活化(Urocanic acid suppresses the activation of humanneutrophils in vitro).Inflammation 1996；20：451-9.
Kozin SV，Shkarin P，Gerweck LE.肿瘤中细胞跨膜pH梯度增强特异性弱酸性化疗的毒性(The cell transmembrane pH gradient intumors enhances cytotoxicity of specific weak acid chemotherapeutics).Cancer Res 2001；61：4740-3.
Krien PM，Kermici M.人角质层中存在自调节酶过程的证据-尿刊酸的意外作用(Evidence for the existence of a self-regulated enzymaticprocess within the human stratum corneum-an unexpected role forurocanic acid).J Invest Dermatol 2000；115：414-20.
Laihia JK，Attila M，Neuvonen K，Pasanen P，Tuomisto L，JansenCT.尿刊酸结合GABA但不结合组胺(H1、H2或H3)受体(Urocanicacid binds to GABA but not to histamine(H1，H2，or H3)receptors).JInvest Dermatol 1998；111：705-6.
Li SP，Junttila MR，Han J，Kahari VM，Westermarck J.p38促分裂原活化蛋白激酶途径通过诱导促分裂原活化蛋白/细胞外信号调节激酶激酶1、2的脱磷酸作用抑制细胞存活(Mitogen-activated proteinkinase pathway suppresses cell survival by inducing dephosphorylation ofmitogen-activated protein/extracellular signal-regulated kinase kinasel，2).Cancer Res 2003；63：3473-7.
Los M，Burek CJ，Stroh C，Benedyk K，Hug H，Mackiewicz A.未来抗癌药物：作为药物设计目标的凋亡途径[综述](Anticancer drugs oftomorrow：apoptotic pathways as targets for drug design.[review])DrugDiscov Today 2003；8：67-77.
Matsuyama S，Llopis J，Deveraux QL，Tsien RY，Reed JC.线粒体内和细胞浆pH的改变：凋亡中调节胱天蛋白酶活化的早期事件(Changes in intramitochondrial and cytosolic pH：early events thatmodulate caspase activation during apoptosis).Nat Cell Biol 2000；2：318-25.
Moodycliffe AM，Bucana CD，Kripke ML，Norval M，Ullrich SE.顺式尿刊酸单克隆抗体对紫外线辐射后迟发过敏和接触过敏的抑制的差异性效果(Differential effects of a monoclonal antibody to cis-urocanic acid on the suppression of delayed and contact hypersensitivityfollowing ultraviolet irradiation).J Immunol 1996；157：2891-9.
Ohman H，Vahlquist A.人角质层和上表皮中pH梯度的体内研究(In vivo studies concerning a pH gradient in human stratum corneum andupper epidermis).Acta Derm Venereol.1994Sep；74(5)：375-9.
Roberts JD，Yu C，Flanagan C，Birdseye TR.4-取代咪唑的酸-碱和互变异构平衡的氮-15核磁共振研究及其与α-水解蛋白酶催化机制的关系(A nitrogen-15nuclear magnetic resonance study of the acid-baseand tautomeric equilibria of 4-substituted imidazoles and its relevance tothe catalytic mechanism of α-lytic protease).J Am Chem Soc 1982；104：3945-9.
Thangaraju M，Sharma K，Liu D，Shen SH，Srikant CB.凋亡中细胞内酸化和SHP-1的相互依赖性调节(Interdependent regulation ofintracellular acidification and SHP-1 in apoptosis).Cancer Res 1999；59：1649-54.
Wahl ML，Owen JA，Burd R，Herlands RA，Nogami SS，Rodeck U，Berd D，Leeper DB，Owen CS.人黑素瘤中细胞内pH的调节：潜在的治疗暗示(Regulation of intracellular pH in human melanoma：potentialtherapeutic implications).Mol Cancer Ther 2002；1：617-28.
Wille JJ，Kydonieus AF，Murphy GF.顺式尿刊酸诱导肥大细胞脱粒和预形成TNF-α的释放：UVB和顺式尿刊酸与接触过敏免疫抑制相关的可能机制(Cis-urocanic acid induces mast cell degranulation andrelease of preformed TNF-alpha：A possible mechanism linking UVB andcis-urocanic acid to immunosuppression of contact hypersensitivity).SkinPharmacol Appl Skin Physiol 1999；12：18-27.
Yamagata M，Tannock IF.抑制细胞内pH调节的药物长期给予：体外和抗肿瘤作用(The chronic administration of drugs that inhibit theregulation of intracellular pH：in vitro and anti-tumour effects).Br JCancer 1996；73：1328-34.

Claims (15)

1.一种能酸化细胞质的药物可接受药物用于生产药物组合物的用途，所述药物组合物用于预防或停止人或动物中的细胞增殖，其中有效量的所述药物以基本非解离的形式给予人或动物。
2.权利要求1的用途，其中所述药物的解离常数为5.0-7.4，优选为6.0-7.3；最优选为约7.0。
3.权利要求1或2的用途，其中所述药物是尿刊酸。
4.权利要求3的用途，其中所述药物是反式尿刊酸。
5.权利要求3的用途，其中所述药物是顺式尿刊酸。
6.权利要求1-5中任一项的用途，所述用途是治疗或预防可通过细胞内酸化诱导抑制或停止细胞增殖来治疗的疾病或紊乱。
7.权利要求6的用途，其中所述疾病或紊乱是局部的或全身的、非转化的或转化的过度增殖性疾病。
8.权利要求7的用途，其中所述疾病或紊乱是局部的或全身的癌症，选自脑癌、肺癌、皮肤癌、膀胱癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌、头癌、颈癌、肾癌、卵巢癌、前列腺癌、结直肠癌、食道癌、妇科癌症和甲状腺癌。
9.前述权利要求中任一项的用途，其中所述药物通过全身或局部给予，优选为局部给予，最优选为表面给予。
10.权利要求1-5中任一项定义的药物可接受药物的用途，所述药物用作另一种治疗活性剂的增强剂。
11.一种药物组合物，所述组合物包含能酸化细胞质的药物可接受药物作为活性剂，以及药物可接受的载体，所述载体基本防止药物在细胞外pH值下解离。
12.权利要求11的组合物，其中所述药物的解离常数为5.0-7.4，优选为6.0-7.3；最优选为约7.0。
13.权利要求11或12的组合物，其中所述药物是反式尿刊酸。
14.权利要求11或12的组合物，其中所述药物是顺式尿刊酸。
15.权利要求11-14中任一项的组合物，其中所述组合物额外地包含另一种治疗活性药物，优选为抗增殖药物或抗癌药物。
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Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FI20030379A0 (fi) * 2003-03-14 2003-03-14 Lasse Leino Uusi farmaseuttinen koostumus

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0467116B2 (de) 1990-06-29 2001-12-05 Gs Development Ab Dermatologische Zusammensetzungen mit einem Gehalt an cis-Urocaninsäure
US5455036A (en) * 1990-06-29 1995-10-03 Bode Chemie Method of using cis-urocaninic acid for topically treating psoriasis
DE4122497C2 (de) 1991-07-02 1998-03-26 Wogepharm Gmbh Verwendung von trans-Urokaninsäure bei der prophylaktischen Therapie der Psoriasis
US5843979A (en) 1993-02-25 1998-12-01 Bristol-Myers Squibb Company Transdermal treatment with mast cell degranulating agents for drug-induced hypersensitivity
CA2114968A1 (en) * 1993-02-25 1994-08-26 John Wille Transdermal treatment with mast cell degranulating agents for drug-induced hypersensitivity
GB9306473D0 (en) * 1993-03-29 1993-05-19 Bioglan Lab Ltd Pharmaceutically useful compounds
US5686100A (en) * 1994-11-22 1997-11-11 E.R. Squibb & Sons, Inc. Prophylactic and therapeutic treatment of skin sensitization and irritation
US5576013A (en) * 1995-03-21 1996-11-19 Eastern Virginia Medical School Treating vascular and neoplastic tissues
WO1997047355A1 (en) * 1996-06-12 1997-12-18 Alza Corporation Reduction of skin sensitization in electrotransport drug delivery
DE19638064C2 (de) * 1996-09-18 1998-08-20 Voith Turbo Kg Verfahren zur Steuerung von Schaltvorgängen bei einem Fahrzeuggetriebe
DE19817295A1 (de) * 1998-04-18 1999-10-21 Beiersdorf Ag Kosmetische oder dermatologische Zubereitungen mit einem Gehalt an unsymmetrisch substituiertenTriazinderivaten zum Erhalt des Urocaninsäurestatus der Haut
US6420378B1 (en) * 1999-10-15 2002-07-16 Supergen, Inc. Inhibition of abnormal cell proliferation with camptothecin and combinations including the same
JP2003530850A (ja) * 2000-04-14 2003-10-21 ユニバーシティー オブ サウス カロライナ リサーチ ファウンデーション 生物活性ヒスチジンアンモニアリアーゼのクローニング、過剰発現および治療用途
US6582734B1 (en) 2000-07-20 2003-06-24 Ecolab Inc. Antimicrobial composition useful for the treatment of bovine mastitis
US6541509B2 (en) * 2000-09-15 2003-04-01 Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University Method for treating neoplasia using combination chemotherapy
FI20030379A0 (fi) * 2003-03-14 2003-03-14 Lasse Leino Uusi farmaseuttinen koostumus

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ZA200602940B (en) 2007-07-25
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US20060189691A1 (en) 2006-08-24
AU2004296570A1 (en) 2005-06-23
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WO2005056007A1 (en) 2005-06-23
JP2007513927A (ja) 2007-05-31
ES2303113T3 (es) 2008-08-01
EP1691805A1 (en) 2006-08-23
US8338475B2 (en) 2012-12-25
CA2544720C (en) 2012-01-03

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