CN1864725A - 虎眼万年青活性提取物的制备方法及用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种用大孔树脂提取虎眼万年青(Ornithogalum Caudatum Ait)皂苷的制备方法，以及其在制备治疗肝癌、肺癌、胃癌、乳腺癌等癌病药物中的应用。这种提取物的生产工艺方便、简单、实际可行，能最有效地获得虎眼万年青中极有抗癌潜力的皂苷有效部位。为肝癌、肺癌、胃癌、乳腺癌、等癌病的治疗发现新的高效低毒的天然治疗药物，具有重要的社会价值、经济价值和广阔的应用前景。
Description
本发明涉及一种植物虎眼万年青(Ornithogalum Caudatum Ait)的皂苷的提取物的制备方法，以及在治疗肝癌、胃癌、肺癌、胆管癌、乳腺癌、卵巢癌、淋巴癌、直肠癌的抗癌药用途及抗病毒，抗感染方面的用途。
本发明使用的虎眼万年青(Ornithogalum Caudatum Ait)是多年生百合科植物。该植物原产南部非洲，上世纪中叶自朝鲜传入中国东北地区。民间多有使用虎眼万年青用于抗炎消毒，治疗肝病、肝癌、胆囊炎症的经验。从该属植物中曾分离得到有抑制淋巴细胞增生作用的胆甾烷苷类和22-高23降胆甾烷苷类成分，黄芩苷和大黄素价醚，有丰富的甾体皂苷。今年来研究表明，广泛存在与动物细胞摸、植物和微生物细胞壁中的多糖类物质能提高机体免疫功能，它不仅能促进T细胞、B细胞、MΦ细胞等免疫细胞的功能，还能促进细胞因子的生成。从虎眼万年青中分离出的皂甙OSW-1对肺癌、乳腺癌有明显的抗癌活性。体外抗P338淋巴细胞白血病活性结果表明，OSW-1是常见抗癌药物喜树碱、阿霉素、紫杉醇抗癌活性的10～100倍，并已由中国科学院上海有机所邓邵江合成成功。虎眼万年青不同成分进行的体外抑瘤实验证明，虎眼万年青总皂甙、总多糖和总生物碱均显示出不同程度的抑制肿瘤细胞生长的作用。虎眼万年青多糖抑制肿瘤的实验对小鼠体液免、细胞免疫的实验，流式细胞术客观的对T淋巴细胞亚群的变进行的检验，利用RT-PCR方法检测虎眼万年青多糖系列对细胞中细胞因子IL-2 mRNA表达水平的影响，在细胞和分子水平上虎眼万年青多糖表现出增强免疫的调节作用表明，多糖化合物主要是通过对免疫功能的较强的调节作用，从而表现出具有一定的抗衰老、抗病毒和抗肿瘤的作用。研究表明虎眼万年青多糖系列在促进巨噬细胞吞噬功能的非特异性免疫活性的基础上，使巨噬细胞处理和传递抗原的能力增强，提高了抗体的水平。同时虎眼万年青多糖系列还能增强小鼠T、B淋巴细胞的转化、提高NK细胞细胞毒活性、促进小鼠脾细胞产生白细胞介素2(IL-2)。IL-2是促进细胞毒T细胞(CTL)和自然杀伤细胞(NK)细胞的增殖与分化的重要调节因子。虎眼万年青多糖系列还能促进T细胞的增殖反应的分泌，有利于增强细胞毒T细胞和NK的杀瘤效应。T淋巴细胞亚群是构成机体免疫防御系统的重要因素。T淋巴细胞中辅助性T细胞CD4和抑制性T细胞CD8两个主要亚群，这两类细胞互相变化、调整可以维持机体内的免疫平衡。CD4具有调节免疫反应的活性，辅助B细胞产生抗体，分泌细胞因子的作用，而CD8则有免疫抑制和细胞毒性的作用。虎眼万年青多糖系列能不同程度地使CD3、CD4、CD4/CD8生高而使CD8下降，进一步证实了虎眼万年青多糖系列对辅助性T细胞(Th)的增强作用及对抑制性T细胞(Ts)的降低作用，推测辅助性T细胞(Th)可能是其主要的原发刺激细胞。不同虎眼万年青多糖浓度能在一定程度上促进IL-2 mRNA表达量，从基因水平上有进一步证实了虎眼万年青多糖系列对IL-2生成的影响，推断虎眼万年青多糖系列有促进小鼠免疫功能的作用。参考文献见“虎眼万年青多糖对小鼠免疫功能的调节作用”，“中国免疫学杂志”2002年第18期，p799-803；“虎眼万年青多糖增强非特异性免疫和体液免疫的作用”，“吉林大学学报(医学版)，第28卷，第三期，2002年，p232-234；
OSW-1作用于肿瘤细胞与其细胞毒性关系的构效关系部分机理解释
OSW-1的化学结构式见下图：
首先，OSW-1分子中的载体核部位是产生其生物活性的主要源泉，其中A/B非极性双环平面和A环上的3βOH羟基的生化活性角色非常重要。其极性与非极性部位的拓扑学特征与肿瘤细胞膜壁的电子分布“高”“低”密度相匹配。在化学结构上细胞膜的主体组成物质胆固醇的结构与OSW-1相似，使OSW-1能够轻易进入到细胞膜，其中的二糖苷的生物活性角色尚待得到进一步的解释。进入细胞膜后，E-环氧碳烯离子(E-carbenium ions)成为活性药效基团中间体OSW-1的构效学研究表明，结合高活性中间体结构物：E-环氧碳烯离子(E-carbenium ions)的生成机理
经过充分的构效关系理论与试验证明，OSW-1在脱掉糖基和水后生成对应有高度细胞毒性反应的活性的中间体E-环(见图)。参考文献见：Bioorganic & Medicinal Chemistry，9(1999)419-429；Bioorganic& Medicinal Chemistry，7(1997)633-636。
对于长白山区虎眼万年青(Ornithogalum Caudatum Ait)专门的化学成分研究，曾有抑制淋巴细胞增生作用的胆甾烷苷类多糖被发现，最近又有三新的甾体物质被发现，它们是：(25S，23S，24S)-螺甾-Δ-烯-1β，3β，23，24-四醇-1-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)[β-D-吡喃木塘基-(1→3)]-α-L-吡喃阿拉伯糖苷是新被发现的化合物被命名为虎眼万年青苷。另外两个被新分离出的已知化合物为：海柯皂苷元-3-O-{β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-[β-D-吡喃木塘基-(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)-β-D-吡喃半乳糖苷}；第三个被新分离出的已知化合物为β-谷甾醇。参考文献见：药学学报2000，35(1)：32～36
这三个新分离出的化合物的结构式为：
皂苷，多糖类物质等活性成分是虎眼万年青的主要组成部分。本工艺提取的主要特征是采取D型非极性大孔的方法成功用于虎眼万年青中皂苷的富集纯化。虎眼万年青皂苷，多糖类物质有同于其它皂苷，多糖类物质的共同特性就是糖基和苷元与糖基连接成苷后都有较大的极性，一般能溶于水和醇，特别适合大孔树脂的富集和提纯。常规法用正丁醇萃取而得到粗总皂苷，存在有机溶剂消耗多，正丁醇沸点较高，溶剂回收困难，萃取易乳化，色素等其它大分子杂质去除不完全等缺点。
中国专利01138727公开了一种用乙醇回流提取的方法，该方法是对虎眼万年青总的水溶性物质和脂溶性物质的提取。在虎眼万年青的所有有效成分中，正如前面所综述的，虎眼万年青总皂苷是最重要的有效部位，尤其是OSW-1、虎眼万年青皂苷等起着极其重要肿瘤抑制作用。大孔树脂提取方法首先使皂苷成份得到富集，使之与其它无机盐类物质、低分子有机化合物及其它有机大分子得到分离。它具有选择性好，吸附量大，解吸容易、机械强度高、耐污染、流体阻力小、可以反复使用、再生比较容易等优点。
在D型非极性大孔的方法中草药皂苷的富集纯化已有很多成功的案例。如蔡雄等用D101大孔树脂纯化人参总皂苷，纯化前人参总皂苷含量为14.9，纯化后为60.2％，洗脱率为90％以上。唐弟光用D101大孔树脂提取三七总皂苷所进行的成功的工艺研究，将总皂苷含量8。78％的三七粉末用乙醇提取后，回收乙醇，加水制成0.5克/毫升的(生药/药液)溶液，通过D-101大孔吸附树脂，水洗后用50％乙醇洗涤脱色后，减压回收乙醇，最后制得三七总皂苷，提取率88％以上，含量91.34％。
虎眼万年青提取实施。
因虎眼万年青中含有的黄芩苷较为易得且含量在易测出范围，故以黄芩苷作为虎眼万年青总皂苷提取标志物进行定性定量测定。
仪器与材料
日本岛津LC-6A液相色谱仪，SPD-6A型紫外检测器；SB3200型超声清洗器；Mettler Ae240型1/10万电子天平；岛津UV-2201PC紫外分光光度计。
大孔吸附树脂：HPD100，HPD300，HPD400，HPD500，HPD600，HPD700，HPD800由河北沧州宝恩化工有限公司购得D-101，LSA-10，LSA20，XDA-1型树脂由西按蓝深公司购得。
对照品黄芩苷(baicalin)批号08232004。
色谱条件：色谱柱：Phenomenex C18(416mm×250mm，5Lm)；流动相∶甲醇∶水∶磷酸(50∶50∶0102)；流速：018mL min；检验波长：277nm。
对照品对照品黄芩苷溶液制备：
精密称取经五氧化二磷干燥至恒重的黄芩苷对照品82186mg，置100mL棕色量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀即得。
供试品溶液的置备：取提取物同对照品对照品黄芩苷溶液制备。
线性关系考察：精密称取经五氧化二磷干燥至恒重的黄芩苷对照品8910mg，置25mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀即可。精密称取015，110，210，321，421，510mL分别置10mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀即得。分别精密吸取上述溶液各10LL，注入液相色谱仪，测定样品相关吸收峰，以峰面积为横坐标，进样量为纵坐标制标准曲线，得方程Y＝0.0106x+158.4r＝0.99998.，线性范围：01203-2103Lg。
测定方法：分别精密吸取对照品与供试液溶液各10LL，注入液相色谱仪。测定样品相关吸收峰。
精密度测定：取同一供试品溶液，连续自动进样5次，计算黄芩苷峰面积，其RSD＝01368％。
稳定性试验：取同一供试品溶液，于配制后0，1，2，4，6，24h依法测定。黄芩苷峰面积RSD＝2869％。
大孔树脂预处理：以95％乙醇溶液浸泡树脂24h，充分膨胀后装入层系析柱中，用95％乙醇洗脱，直到流出液在试管中加水稀释不浑浊为止，再用蒸馏水冲至无乙醇状态，备用。
适用树脂的筛选：采用静态吸附法，采用测定吸附残液和解吸液的指标成分浓度筛选最合适的树脂。量取大孔型树脂40mL置锥型瓶中，分别加入浓度为0.5g/mL上柱样品液，浸渍24h(每隔8h振摇一次)，滤过。100mL蒸馏水洗涤树脂，洗涤液与滤液合并，测定吸附残液中的指标成分浓度评价吸附效果。向树脂中加入60％乙醇，浸渍24h(没隔8h振摇一次)，滤过。用乙醇50mL洗涤树脂，洗涤液与滤液合并作为样品溶液测定解吸液中的指标成分浓度，评价解吸效果。结果见表1
表1不同型号大孔吸附树脂对黄芩苷的静态吸附和解吸效果
| 吸附指标 | 树脂型号 | |||||||
| HPD100 | HPD300 | HPD400 | HPD500 | HPD600 | HPD700 | HPD800 | D101 | |
| 吸附量mg/mL | 20118 | 22135 | 19148 | 16140 | 16132 | 19190 | 19182 | 22175 |
| 解吸量mg/mL | 8137 | 11129 | 10102 | 9147 | 8195 | 10188 | 1102 | 11910 |
| 解吸率％ | 4044 | 5027 | 5275 | 5667 | 5079 | 5309 | 0574 | 5370 |
表1显示，HPD300、D101树脂对黄芩的吸附量最高，因此都可作为虎眼万年青工艺的适用树脂型号。
乙醇洗脱浓度的确定：称取少于层吸柱中HPD300型树脂吸附量的虎眼万年青生药提取液Ot1适量，加到装有HPD300型树脂的层吸柱上，先用水洗，然后依次用10％，30％，60％，75％，95％乙醇溶液进行梯度解吸，分段收集吸液。测定解吸液中的指标成分浓度，绘制解吸曲线。发现采用10％，30％，60％乙醇梯度洗脱，解吸液中都有较高的黄芩苷含量，表明可以用10％，30％，60％乙醇梯度洗脱达到回收洗脱解吸的所有虎眼万年青皂苷的目的。
具体实施案例：取100千克虎眼万年青鲜品，洗净，首先分别用2倍量80％与20％的乙醇各回流提取一次，每次2小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，滤液继续浓缩至生药量达到0.5g/mL。选用D101大孔树脂100千克做预处理：以95％乙醇溶液浸泡树脂24h，充分膨胀后装入层系析柱中，用95％乙醇洗脱，直到流出液在试管中加水稀释不浑浊为止，再用蒸馏水冲至无乙醇状态，备用。将浓缩好的滤液以每小时两倍量树脂体积(2BV，下同)速度上于已准备好的D101大孔树脂柱。用4BV蒸馏水洗至五色。再用2，4，6BV70％的乙醇洗脱。收集洗脱液浓缩除去乙醇，浓缩液做喷物干燥得干粉0.9503千克。
虎眼万年青大孔树脂提取物抗肿瘤实验研究
目的：探讨虎眼万年青(Ornithogalum Caudatum Ait)提取物对体外培养的肿瘤细胞生长的抑制作用。
方法：采用肿瘤细胞体外培养技术，观察虎眼万年青(OrnithogalumCaudatum Ait)提取物组(Op1，Op2，Op3，Od1，Od2，Od3)对体外培养的人肝癌细胞株(Q3)人胃癌细胞株(M GC2803)、人宫颈癌细胞株(Hela)、小鼠肺腺瘤细胞株(SPC2A21)细胞存活及蛋白合成影响。以大鼠肝细胞(BRL)为正常对照细胞株，同时设立空白对照、阴性对照及溶剂对照。受试物与细胞共培养24h，观察细胞存活量及活细胞蛋白含量的变化。采用系统定性测试方法，对虎眼万年青(Ornithogalum Caudatum Ait)提取物抗癌活性进行测定。
试验结果如下：
表2虎眼万年青(Ornithogalum Caudatum Ait)提取物组对不同细胞株的存活影响
| 提取物10-1kgL | 细胞株 | ||||
| BRL | M GC 2803 | SPC2A 21 | Hela | Q3 | |
| 空白 | 0.331±0.011 | 0.363±0.032 | 0.550±0.043 | 0.273±0.024 | 0.356±0.030 |
| Op1 | 0.293±0.010 | 0.053±0.004 | 0.076±0.005 | 0.049±0.004 | 0.043±0.006 |
| Op2 | 0.265±0.009 | 0.055±0.006 | 0.075±0.004 | 0.050±0.003 | 0.053±0.005 |
| Op3 | 0.268±0.013 | 0.060±0.003 | 0.063±0.007 | 0.053±0.005 | 0.048±0.003 |
| Od1 | 0.333±0.010 | 0.062±0.007 | 0.073±0.006 | 0.051±0.004 | 0.047±0.008 |
| Od2 | 0.327±0.014 | 0.057±0.003 | 0.061±0.003 | 0.049±0.003 | 0.050±0.004 |
| Od3 | 0.283±0.012 | 0.061±0.005 | 0.074±0.008 | 0.052±0.002 | 0.049±0.009 |
表3虎眼万年青(Ornithogalum Caudatum Ait)提取物组对不同细胞株的蛋白合成影响
| 提取物10-1kgL | 细胞株 | ||||
| BRL | M GC 2803 | SPC2A 21 | Hela | Q3 | |
| 空白 | 0.339±0.084 | 0.393±0.009 | 0.354±0.041 | 0.373±0.024 | 0.358±0.056 |
| Op1 | 0.401±0.031 | 0.164±0.014 | 0.186±0.025 | 0.169±0.023 | 0.163±0.015 |
| Op2 | 0.369±0.059 | 0.178±0.016 | 0.159±0.023 | 0.167±0.028 | 0.162±0.013 |
| Op3 | 0.408±0.013 | 0.162±0.013 | 0.149±0.020 | 0.157±0.020 | 0.155±0.014 |
| Od1 | 0.403±0.010 | 0.173±0.017 | 0.162±0.024 | 0.159±0.021 | 0.147±0.016 |
| Od2 | 0.437±0.014 | 0.169±0.018 | 0170±0.003 | 0.160±0.023 | 0.167±0.017 |
| Od3 | 0.425±0.012 | 0.159±0.015 | 0.164±0.008 | 0.158±0.024 | 0.159±0.019 |
结论，以上实验结果表明，虎眼万年青(Ornithogalum CaudatumAit)提取物在10-1kg浓度下，对各类型肿瘤细胞的生长及有效蛋白合成均有明显抑制作用，而对正常肝细胞的存活量无影响，且可促进肝细胞的蛋白的合成。抗肿瘤作用可能与其抑制肿瘤细胞生长及蛋白合成有关。
Claims (13)
1.一种虎眼万年青(Ornithogalum Caudatum Ait)皂苷提取物以至少含有下列物质为主要特征：万年青苷A、B(rhodexin A，B)，铃兰毒苷(convallatoxin)，肥皂草苷(saponarin)，黄芩苷，腺嘌呤核苷，胡萝卜甙，豆甾醇3-O-β-D-葡萄糖苷，槲皮素3-O-β-D-葡萄糖苷，山奈酚3-O-β-D-葡萄糖苷，芦丁，山奈酚3-O-β-芸香糖苷，(25S，23S，24S)-螺甾-Δ-烯-1β，3β，23，24-四醇-1-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)[β-D-吡喃木塘基-(1→3)]-α-L-吡喃阿拉伯糖苷，海柯皂苷元-3-O-{β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-[β-D-吡喃木塘基-(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)-β-D-吡喃半乳糖苷。
2.权利要求一中所述提取物的制备工艺，其特征在于首先以下面方式的任何一种进行预加工处理：
a)将虎眼万年青鲜品洗净干燥脱水至半干或全干，用0-95％的乙醇水溶液加热提取数次，合并提取液，减压浓缩，过滤除掉不溶物，得浓缩提取液O1；
b)将虎眼万年青鲜品洗净切碎，用0-95％的乙醇水溶液加热提取数次，合并提取液，减压浓缩除去乙醇，过滤除掉不溶物，得浓缩提取液O2；
c)将虎眼万年青鲜品洗净后高效粉碎以进行鲜汁与固体物质分离，过滤得滤液L1，药渣用0-95％的乙醇水溶液加热提取数次，合并提取液，减压浓缩，过滤除掉不溶物得滤液L2，滤液L1与滤液L2合并得提取液O3。
3.权利要求将二中所提到的提取液O1、O2与O3的任何一种，通过大孔吸附树脂柱，大孔吸附树脂的孔径类型为：6～26nm，比表面积为：250～1200m2/g，粒径：0.3～1.25nm。
4.权利要求大孔吸附树脂洗脱液，采用10-95％的乙醇多次洗脱。对通过大孔吸附树脂的权利二、三中提到的O1、O2与O3的任何一种所通过的吸附柱进行洗脱。洗脱液各合并后减压浓缩去除乙醇，浓缩后的流出液Ot1、Ot2与Ot3。
5.权利要求对权利四中的Ot1、Ot2与Ot3进行喷物干燥得喷雾粉Op1、Op2与Op3。
6.权利要求对权利四中的Ot1、Ot2与Ot3进行低温真空冻干干燥得冻干粉Od1、Od2与Od3。
7.权利要求对五、六中得到的任何一种提取粉Op1、Op2、Op3、Od1、Od2与Od3均有可用于治疗肝癌的药物的用途。
8.权利要求对五、六中得到的任何一种提取粉Op1、Op2、Op3、Od1、Od2与Od3均有可用于治疗胃癌的药物的用途。
9.权利要求对五、六中得到的任何一种提取粉Op1、Op2、Op3、Od1、Od2与Od3均有可用于治疗肺癌的药物的用途。
10.权利要求对五、六中得到的任何一种提取粉Op1、Op2、Op3、Od1、Od2与Od3均有可用于治疗胆管癌的药物的用途。
11.权利要求对五、六中得到的任何一种提取粉Op1、Op2、Op3、Od1、Od2与Od3均有可用于治疗妇科癌如乳腺癌、卵巢癌的药物的用途。
12.根据权利要求七至十一中任一项所述的用途，其特征在于所述虎眼万年青的提取物的给药途径包括口服、经皮、静脉或肌肉。
13.根据权利要求七至十二中任一项所述的用途，其特征在于所述虎眼万年青的提取物制成胶囊剂、片剂时口服用量为2～800mg/kg体重/次。制成注射剂时的用量是2～500mg/kg体重/次。
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| CN104666778A (zh) * | 2015-02-09 | 2015-06-03 | 巫军 | 一种虎眼万年青皂苷的提取方法 |
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| CN109810202A (zh) * | 2018-12-28 | 2019-05-28 | 温州医科大学 | 白花虎眼万年青多糖的制备方法、在制备治疗抗肠道肿瘤药物或促进益生菌生长的应用 |
-
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Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101972385A (zh) * | 2010-05-20 | 2011-02-16 | 修正药业集团股份有限公司 | 虎眼万年青总黄酮的制备方法及在抗肿瘤和抗炎止痛药物中的应用 |
| CN101972385B (zh) * | 2010-05-20 | 2013-04-24 | 吉林修正药业新药开发有限公司 | 虎眼万年青总黄酮的制备方法及在抗肿瘤和抗炎止痛药物中的应用 |
| CN104666778A (zh) * | 2015-02-09 | 2015-06-03 | 巫军 | 一种虎眼万年青皂苷的提取方法 |
| CN104666778B (zh) * | 2015-02-09 | 2016-05-18 | 宁波保税区欣诺生物技术有限公司 | 一种虎眼万年青皂苷的提取方法 |
| CN105012327A (zh) * | 2015-07-08 | 2015-11-04 | 三峡大学 | 甾体皂苷rce-4在制备预防或治疗肿瘤的药物中的用途 |
| CN109810202A (zh) * | 2018-12-28 | 2019-05-28 | 温州医科大学 | 白花虎眼万年青多糖的制备方法、在制备治疗抗肠道肿瘤药物或促进益生菌生长的应用 |
| CN109810202B (zh) * | 2018-12-28 | 2021-01-05 | 温州医科大学 | 白花虎眼万年青多糖的制备方法、在制备治疗抗肠道肿瘤药物或促进益生菌生长的应用 |
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