CN1856311A - 作为抗癌剂的6-芳基-7-卤基-咪唑并[1,2-a]嘧啶 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及特定6-芳基-7-卤基-咪唑并[1,2-A]嘧啶或其医药上可接受的盐,和含有所述化合物或其医药上可接受的盐的组合物,其中所述化合物为抗癌剂,其适用于通过促进微管聚合来治疗哺乳动物中的癌症。本发明进一步涉及一种治疗或抑制哺乳动物中的癌肿瘤细胞生长和相关疾病的方法且进一步提供一种治疗或预防需要其的哺乳动物中的癌肿瘤的方法,所述癌肿瘤表现出多重抗药性(MDR)或由于MDR而具有抗性,所述方法包含向所述哺乳动物投以有效量的所述化合物或其医药上可接受的盐。
Description
技术领域
本发明涉及6-芳基-7-卤基-咪唑并[1,2-a]嘧啶化合物或其医药上可接受的盐,和含有所述化合物的组合物,其中所述化合物为适用于治疗哺乳动物中的癌症的抗癌剂。本发明的化合物适用于癌肿瘤的治疗或预防表现出多重抗药性(MDR)或由于MDR而具有抗性的癌肿瘤。另外,本发明的化合物适用于通过促进微管聚合来治疗或抑制需要其的哺乳动物中的癌肿瘤细胞的生长和相关疾病。
背景技术
如今所使用的大多数细胞抑制剂可抑制DNA生物合成的主要前体的形成或阻碍DNA聚合酶或干扰DNA的模板功能,这是由于DNA为开发用于化学治疗的治疗药物的首要目标。不幸的是,抑制DNA生物合成的主要前体的形成或阻碍DNA聚合酶或干扰DNA的模板功能也会影响正常组织。
抗微管药物为为一种主要类型的抗癌剂(Rowinsky,E.K.,and Tolcher,A.W.Antimicrotubule agents.In:V.T.Devita,Jr.,S.Hellman,and S.A.Rosenberg(编),CancerPrinciples and Practice,第6版,第431-452页.Philadelphia:Lippincott Williams andWilkins,2001)。其通过干扰细胞微管的功能,尤其是有丝分裂纺锤体的功能来起作用。正常纺锤体功能的破坏会导致细胞凋零死亡。
目前,存在主要三类已知的抗微管药剂。每一类都具有明显的β-微管蛋白结合区和对微管功能的明显作用。所述类型是:1)紫杉烷-位点试剂,其促进微管形成并稳定微管;2)长春花/肽位点试剂,其使微管不稳定且常常诱发异常聚合物或聚集体以高浓度形成;和3)秋水仙碱-位点试剂,其也使微管不稳定且通常不会诱发其他聚合物(Hamel,E.Antimitotic natural products and their interactions with tubulin.Med.Res.Rev.,16:207-231,1996)。所有三类位点的大多数配位体为天然产物或天然产物的半合成衍生物。
紫杉醇(Paclitaxel)和其半合成衍生物多烯紫杉醇(docetaxel)(Taxotere)干扰微管形成且稳定微管。紫杉醇(Taxol)是由西方(太平洋)紫杉、短叶红豆杉(Taxusbrevifolia)的树皮分离而来的双萜且是具有紫杉烷环系统的新颖类型治疗剂的代表。另外,其发现于Taxacae家族的其他成员中,包括在加拿大东部(eastern Canada)Gaspesia发现的加拿大紫杉(Taxus canadensis)和在欧洲发现的红豆杉(Taxus baccata),其针叶含有紫杉醇和类似物且因此提供紫杉醇和其衍生物的可更新的来源。在20世纪60年代首次测试粗萃取物且其活性成份是在1971分离出来且识别出化学结构(M.C.Wani等人,J.Am.Chem.Soc,
93,2325(1971))。另外,通过其他测试显示对于动物中的黑素瘤细胞、白血病、各种癌症、肉瘤和非霍奇金氏(non-Hodgkin)淋巴瘤以及许多实体肿瘤的广泛多种活性。紫杉醇和其类似物已通过部分合成自10-去乙酰基浆果赤霉素III(一种自紫杉针叶和嫩枝获得的前体)和通过总合成而产生(Holton等人,J.Am.Chem.Soc.116:1597-1601(1994)and Nicolaou等人,Nature 367:630-634(1994))。已证实紫杉醇具有抗肿瘤活性。更近来,显示紫杉醇的抗肿瘤活性是由于促进了微管聚合(Kumar,N.,J.Biol.Chem.256:10435-10441(1981);Rowinsky等人,J.Natl.Cancer Inst.,82:1247-1259(1990);and Schiff等人,Nature,277:665-667(1979))。现已在临床试验中证实紫杉醇对若干人类肿瘤有效(McGuire等人,Ann.Int.Med.,111:273-279(1989);Holmes,等人,J.Natl.Cancer Inst,83:1797-1805(1991);Kohn等人,J.Natl.Cancer Inst.,86:18-24(1994);and A.Bicker等人,Anti-Cancer Drugs,4,141-148(1993))。
临床使用两种紫杉烷-位点试剂(紫杉醇和多烯紫杉醇)和三种长春花/肽-位点试剂(长春碱(vinblastine)、长春新碱(vincristine)和长春瑞宾(vinorelbine))以治疗各种人类肿瘤。已证实紫杉烷比长春花生物碱在对抗实体肿瘤(例如,肺、乳房、卵巢)中具有更大效用,表明促进微管形成之试剂在临床上可能优于那些使微管不稳定的试剂。在治疗上不使用秋水仙碱-位点试剂。
虽然临床广泛使用紫杉醇和多烯紫杉醇,但这些药物具有若干产生改良试剂之需要的限制。首先,许多肿瘤具有固有抗性(例如结肠肿瘤)或在多个治疗循环之后变得有抗性,至少是部分由于位于癌细胞膜中之药物转运子(其将药物泵出细胞且由此降低其功效)之表现(Gottesman,M.M.Mechanisms of cancer drug resistance.Annu.Rev.Med.,53:615-627,2002)。这些转运子中之最著名的为P-糖蛋白。因此,存在对微管聚合具有紫杉烷样作用的新颖试剂的需要,所述新颖试剂非P-糖蛋白或其他所述泵的底物且因此将克服患者中紫杉烷抗性的这个原因
其次,紫杉醇和多烯紫杉醇具有较差水溶性且紫杉醇必须于Cremophor EL(一种载剂)中调配,所述载剂会引起严重的超敏反应(Li,C.L.,Newman,R.A.,and Wallace,S.Reformulating paclitaxel.Science&Medicine,Jan/Feb:38-47,1999)。在向患者投以紫杉醇之前通常以皮质激素和抗组胺剂对患者进行前驱用药以最小化这些毒性。因此,存在对微管聚合具有紫杉烷样作用的新颖试剂的需要,所述新颖试剂为高度水溶性且可在生理盐水或其他适合的非毒性载剂中投以。
再者,紫杉醇为具有高度复杂结构的天然产物且多烯紫杉醇为密切相关的半合成衍生物。因此,存在对通过合成易于可得的化合物的需要,所述化合物结构上不同于紫杉烷且具有对微管聚合的紫杉烷样作用。
因此,在本项技术中仍存在对用于癌症治疗的细胞毒性剂的需要。具体来说,存在对抑制或治疗肿瘤生长的细胞毒性剂的需要,所述细胞毒性剂具有类似于紫杉醇的作用且干扰微管形成过程。另外,在本项技术中存在对加速微管蛋白聚合并稳定装配好的微管的试剂的需要。
另外,提供新颖的化合物将为有利的,所述新颖的化合物提供一种通过投以具有紫杉醇样抗癌活性的化合物来治疗或抑制哺乳动物中细胞增殖、肿瘤生长和恶性肿瘤生长的方法。
另外,提供新颖的化合物将为有利的,所述新颖的化合物提供一种治疗或抑制表现多重抗药性(MDR)或由于MDR而具有抗性的癌肿瘤的方法。
另外,提供新颖的化合物将为有利的,所述新颖的化合物提供一种治疗或抑制哺乳动物中癌肿瘤生长的方法,所述癌肿瘤对化疗剂尤其是抗有丝分裂剂具有先天性或获得性抵抗力。
在本项技术中描述经取代的三唑并嘧啶在农业中作为杀菌剂的制备和用途且在美国专利第5,593,996号、第5,756,509号、第5,948,783号、第5,981,534号、第5,612,345号、第5,994,360号、第6,020,338号、第5,985,883号、第5,854,252号、第5,808,066号、第5,817,663号、第5,955,252号、第5,965,561号、第5,986,135号、第5,750,766号、第6,117,865号、第6,117,876号、第6,124,301号、第6,204,269号、第6,255,309号、第6,268,371号、第6,277,856号、第6,284,762号、第6,297,251号、第6,387,848号、美国专利申请公开案US2002/0045631A1、US2002/0061882A1、US20030055069A1和国际公开案:WO98/46607、WO98/46608、WO99/48893、WO99/41255、WO00/18227、WO01/35738A2、WO02/46195A1、WO02/067679A1、WO02/083676A1、EPO 834513A2、EPO 782997A2、EPO 550113B1、FR2784381A1、EPO 989130A1、WO98/41496、WO94/20501、EPO 945453A1、EPO 562615A1、EPO 562615B1、EPO 550113A2、EPO943241B1、EPO 988790B1中加以揭示且具有以下通式:
也已知具有以下结构式的三唑并嘧啶作为抗癌剂的用途:
其在WO02/02563A2中有描述。
已知在6位上不具有苯基取代基的5,7-二羟基咪唑并[1,2-a]嘧啶(R.P.Rao等人,J.Het.Chem.1021(1973))。也已知在6位上不具有苯基取代基的5,7-二氯咪唑并[1,2-a]嘧啶(G.R.Revankar,等人,J.Med.Chem.18,1253(1975))。
EP0,770,615提供一种合成下式的二卤唑并嘧啶(dihaloazolopyrimidine)的方法:
其中:
X1为氯或溴;
R为视情况经取代的苯基;
X、Y和Z为CR1或N且进一步描述具有以下结构式的5,7-二羟基-6-(2-氯-6-氟苯基)苯并咪唑并吡啶的合成:
JP2001043978中描述由以下通用结构表示的二氮吲哚嗪(diazaindolizine):
其中所述化合物适于用作场致发光元件。
WO03/022850A1中描述由以下通式表示的咪唑并[1,2-a]嘧啶:
其中所述化合物适用作杀菌剂。
本发明的化合物为一新颖类型的紫杉烷样试剂,其满足本文前述需要且以一显著方式不同于先前已知类型的抗微管化合物。本发明的化合物结合在β-微管蛋白的长春花位点上,其还具有许多类似于紫杉烷且与长春花位点试剂不同的性质。具体来说,在GTP存在下,本发明的化合物以类似于紫杉醇和多烯紫杉醇的方式以低的化合物:微管蛋白摩尔比提高富含微管相关蛋白(MAP)的微管蛋白的聚合。本发明化合物的代表性实例也诱发高度纯化的微管蛋白在GTP不存在下于适当的实验条件下聚合,一种为紫杉烷的标志的活性。本发明的化合物对于在培养中的许多人类癌细胞系具有潜在细胞毒性,所述癌细胞系包括过度表现细胞膜上转运子MDR(P-糖蛋白)、MRP和MXR的细胞系,因此使其在对抗抵抗紫杉醇和长春新碱的细胞系中有活性。
发明内容
根据本发明,提供由式(I)表示的化合物:
其中:
R1选自
和C6-C8环烷基;
R2为下式:
R3为H或C1-C3烷基;
R4为H或C1-C3烷基;或
当视情况R3与R4连接在一起时形成6到8元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以C1-C3烷基取代;
R5为H、C1-C3烷基或C1-C3氟烷基;
Y为式-O(CH2)nQ;
n为2、3或4的整数;
Q为-OH或-NR6R7;
R6和R7独立为H或C1-C3烷基;或
当R6和R7视情况与R6和R7各自所连接的氮原子连接在一起时形成4到6元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以R8取代;
R8为C1-C3烷基;
L1、L2、L3和L4各自独立为H、F、Cl、Br或CF3;
X为Cl或Br;
或其医药上可接受的盐。
本发明的一优选实施例为根据式(Ia)的化合物:
或其医药上可接受的盐。
本发明的一优选实施例为式(Ib)的化合物:
或其医药上可接受的盐。
本发明的另一优选实施例提供根据式(I)的化合物或其医药上可接受的盐,其中R2为下式:
包括其医药上可接受的盐的根据式(Ia)的本发明化合物的更优选群组为那些群组,其中:
R2为
n为3;
X为Cl或Br;
Y为式-O-(CH2)nQ;
R3为H或甲基;
R4为H;
Q为-NR6R7;
R5为CF3;
R6和R7各自独立为H或C1-C3烷基;或
当R6和R7视情况与R6和R7各自所连接的氮原子连接在一起时形成4到6元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以R8取代;
R8为C1-C3烷基;
L1和L4为F;
L2和L3为H;
或其医药上可接受的盐。
包括其医药上可接受的盐的根据式(Ib)的本发明化合物的更优选群组为选自以下亚群组a)和b)的那些群组:
a)
R2为
n为3;
X为Cl或Br;
Y为式-O-(CH2)nQ;
R3为H或甲基;
R4为H;
Q为-NR6R7;
R5为CF3;
R6和R7各自独立为H或C1-C3烷基;或
当R6和R7视情况与R6和R7各自所连接的氮原子连接在一起时形成4到6元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以R8取代;
R8为C1-C3烷基;
L1和L4为F;
L2和L3为H;
或其医药上可接受的盐和
b)
R2为
n为3;
X为Cl;
Y为式-O-(CH2)nQ;
Q为-NR6R7;
R4为H;
R6为甲基;
R7为H或甲基;
L1和L4为F;
L2和L3为H;
或其医药上可接受的盐。
包括其医药上可接受的盐的根据式(I)的本发明的优选化合物为其中R1为C6-C8环烷基的那些化合物:
包括其医药上可接受的盐的根据式(I)的本发明的更优选群组为以下亚群组:
R1为C6-C8环烷基;
R2为
n为3;
X为Cl;
Y为式-O-(CH2)nQ;
Q为-NR6R7;
R6为甲基;
R7为H或甲基;
L1和L4为F;
L2和L3为H;
或其医药上可接受的盐。
包括其医药上可接受的盐的根据式(Ia)的本发明化合物的最优选群组为以下那些群组:
R2为
X为Cl;
n为3;
Y为-O-(CH2)nQ;
Q为-NR6R7;
R3为H或甲基;
R4为H;
R5为CF3;
R6为甲基;
R7为H或甲基;
L1和L4为F;
L2和L3为H;
或其医药上可接受的盐。
定义
如本文所用,术语“烷基”单独或组合意指含有1到3个,优选地1到2个碳原子的直链或支链烷基。所述基团的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、和其类似物。
氟烷基意指多达3个碳原子的烷基,其中各氢可独立地由氟原子置换。
术语碱金属氢化物包括氢化锂、氢化钾或氢化钠。
术语碱金属氢氧化物包括氢氧化锂、氢氧化钾或氢氧化钠。
术语碱金属碳酸盐包括碳酸锂、碳酸钾或碳酸钠。
如本文所用,苯基意指6元碳芳环。
如本文所用,环烷基意指具有6到8个碳原子的视情况以C1-C3烷基取代的饱和碳环单环。非限制性代表实例包括:环己基、环庚基和环辛基。
如本文所用,饱和杂环为具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子的视情况以C1-C3烷基取代的4到6元环。非限制性代表实例包括:吗啉、哌啶、吡咯烷、哌嗪和氮杂环丁烷。
如本文所用,术语t-BOC意指叔丁氧基羰基。
包括于本发明范畴中的为具有手性中心的式(I)化合物的(R)和(S)异构体和其消旋物。
本发明提供一种通过投以有效量的式(I)化合物和其医药上可接受的盐来治疗或抑制需要其的哺乳动物中癌肿瘤细胞生长和相关疾病的方法。
本发明也提供一种通过促进微管聚合而与微管蛋白和微管相互作用来治疗或抑制需要其的哺乳动物中癌肿瘤细胞生长和相关疾病的方法,所述方法包含向所述哺乳动物投以有效量的式(I)化合物和其医药上可接受的盐。
本发明进一步提供一种治疗或预防需要其的哺乳动物中表现多重抗药性(MDR)或由于MDR而具有抗性的肿瘤的方法,所述方法包含向所述哺乳动物投以有效量的所述化合物或其医药上可接受的盐。
本发明也提供一种通过将含有微管蛋白的系统与有效量的式(I)化合物或其医药上可接受的盐接触来促进所述含有微管蛋白的系统中微管蛋白聚合的方法。
此外,本发明提供一种稳定含有微管蛋白的系统中的微管的方法,其包含将所述含有微管蛋白的系统与有效量的式(I)化合物或其医药上可接受的盐接触。
此外,本发明提供一种治疗、抑制需要其的哺乳动物中肿瘤生长或根除肿瘤的方法,其中所述肿瘤对至少一种化疗剂具有抗性,所述方法包含向所述哺乳动物投以有效量的式(I)化合物和其医药上可接受的盐。
另外,本发明提供一种与医药上可接受的载剂组合或联合的式(I)化合物。具体来说,本发明提供一种医药组合物,其包含式(I)化合物和医药上可接受的载剂。
此外,本发明提供一种治疗、抑制需要其的哺乳动物中肿瘤生长或根除肿瘤的方法,其中所述肿瘤对至少一种化疗剂具有抗性,所述方法包含向所述哺乳动物投以有效量的式(I)化合物和其医药上可接受的盐。
本发明的化合物可含有不对称碳原子且某些本发明的化合物可含有一个或一个以上不对称中心且可因此产生立体异构体,诸如对映异构体和非对映异构体。本发明的立体异构体是根据Cahn-lngold-Prelog系统来命名。虽然显示与式(I)的立体化学无关,但本发明包括所有个别可能的立体异构体;以及R和S立体异构体的外消旋混合物和其他混合物(scalemic混合物,其为不等量对映异构体的混合物)和其医药上可接受的盐。包括于本发明范畴中的为具有手性中心的通式(I)化合物的(R)和(S)异构体和其消旋物。不管是否不含其他立体异构体或以任何比例与其他立体异构体混合,本发明涵盖化合物的所有立体异构体且因此包括(例如)对映异构体的外消旋混合物以及异构体的非对映异构体混合物。任何化合物的绝对构型可通过常规X射线结晶学来测定。
光学异构体可通过标准分离技术或对映异构体特殊合成以纯的形式获得。
尤其优选的为式(I)的异构体,其中R1为具有(S)构型的部分:
根据式(I)的本发明的尤其优选化合物为以下化合物或其医药上可接受的盐,其选自下列群组:
7-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2,6-二氟苯基}-N-(2,2,2-三氟乙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺,
3-[4-(7-氯-5-环庚基咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-基)-3,5-二氟苯氧基]-N,N-二甲基丙-1-胺,
7-氯-6-{4-[4-(二甲氨基)丁氧基]-2,6-二氟苯基}-N-(2,2,2-三氟乙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺,
N-{3-[4-(7-氯-5-环己基咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-基)-3,5-二氟苯氧基]丙基}-N,N-二甲胺,
7-氯-6-{2,6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-(-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺和
7-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2,6-二氟苯基}-N-(-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺。
根据式(Ia)的本发明的尤其优选化合物为以下化合物或其医药上可接受的盐,其选自以下群组:
7-氯-6-{2,6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺和
7-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2,6-二氟苯基}-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺。
根据式(Ib)的本发明的尤其优选化合物为以下化合物或其医药上可接受的盐,其选自以下群组:
7-氯-6-{2,6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺和
7-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2,6-二氟苯基}-N-[(1R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺。
也提供一种治疗或抑制需要其的哺乳动物中癌肿瘤细胞生长和相关疾病的方法,其包含投以有效量的式(II)的化合物:
其中:
R1选自
R2为下式:
R3为H或C1-C3烷基;
R4为H或C1-C3烷基;或
R3和R4视情况连接在一起形成6到8元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子且视情况以C1-C3烷基取代;
R5为H、C1-C3烷基或C1-C3氟烷基;
Y为H、F、Cl或式-O(CH2)nQ;
n为2、3或4的整数;
Q为-OH或-NR6R7;
R6和R7独立为H或C1-C3烷基;或
当R6和R7视情况与R6和R7各自所连接的氮原子连接在一起时形成4到6元饱和杂环,其具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以R8取代;
R8为C1-C3烷基;
L1、L2、L3和L4各自独立为H、F、Cl、Br或CF3;
X为Cl或Br;
或其医药上可接受的盐。
本发明的一优选实施例提供一种治疗或抑制需要其的哺乳动物中癌肿瘤细胞生长和相关疾病的方法,其包含投以有效量的根据式(IIa)的化合物:
或其医药上可接受的盐。
本发明的一优选实施例提供一种治疗或抑制需要其的哺乳动物中癌肿瘤细胞生长和相关疾病的方法,其包含投以有效量的根据式(IIb)的化合物:
或其医药上可接受的盐。
本发明的又一优选实施例提供一种治疗或抑制需要其的哺乳动物中癌肿瘤细胞生长和相关疾病的方法,其包含投以有效量的根据式(II)的化合物或其医药上可接受的盐,其中R1为C6-C8环烷基。
本发明的另一优选实施例提供一种治疗或抑制需要其的哺乳动物中癌肿瘤细胞生长和相关疾病的方法,其包含投以有效量的根据式(II)的化合物或其医药上可接受的盐,其中R2为下式:
本发明的一更优选实施例提供一种治疗或抑制需要其的哺乳动物中癌肿瘤细胞生长和相关疾病的方法,其包含投以有效量的根据式(II)的化合物,包括其医药上可接受盐,其中:
R2为
R3为H或C1-C3烷基;
R4为H;
R5为C1-C3氟烷基;
Y为F或-O(CH2)nQ;
n为3;
Q为-NR6R7;
R6和R7各自独立为H或C1-C3烷基;或
当R6和R7视情况与R6和R7各自所连接的氮原子连接在一起时形成4到6元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以R8取代;
R8为C1-C3烷基;
L1和L4各自为F;
L2和L3各自为H;
X为Cl;
或其医药上可接受的盐。
本发明的一更优选实施例提供一种治疗或抑制需要其的哺乳动物中癌肿瘤细胞生长和相关疾病的方法,其包含投以有效量的根据式(IIa)的化合物,包括其医药上可接受盐,其中:
R2为
R3为H或C1-C3烷基;
R4为H;
R5为C1-C3氟烷基;
Y为F或-O(CH2)nQ;
n为3;
Q为-NR6R7;
R6和R7各自独立为H或C1-C3烷基;或
当R6和R7视情况与R6和R7各自所连接的氮原子连接在一起时形成4到6元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以R8取代;
R8为C1-C3烷基;
L1和L4各自为F;
L2和L3各自为H;
X为Cl;
或其医药上可接受的盐。
本发明的一更优选实施例提供一种治疗或抑制需要其的哺乳动物中癌肿瘤细胞生长和相关疾病的方法,其包含投以有效量的根据式(II)的化合物,包括其医药上可接受盐,其中:
R1为C6-C8环烷基;
R2为
Y为F或-O(CH2)nQ;
n为3;
Q为-NR6R7;
R6和R7各自独立为H或C1-C3烷基;或
当R6和R7视情况与R6和R7各自所连接的氮原子连接在一起时形成4到6元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以R8取代;
R8为C1-C3烷基;
L1和L4各自为F;
L2和L3各自为H;
X为Cl;
或其医药上可接受的盐。
本发明的一更优选实施例提供一种治疗或抑制需要其的哺乳动物中癌肿瘤细胞生长和相关疾病的方法,其包含投以有效量的根据式(IIb)的化合物,包括其医药上可接受盐,其中:
R2为
R3为H或C1-C3烷基;
R4为H;
R5为C1-C3氟烷基;
Y为F或-O(CH2)nQ;
n为3;
Q为-NR6R7;
R6和R7各自独立为H或C1-C3烷基;或
当R6和R7视情况与R6和R7各自所连接的氮原子连接在一起时形成4到6元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以R8取代;
R8为C1-C3烷基;
L1和L4各自为F;
L2和L3各自为H;
X为Cl;
或其医药上可接受的盐。
本发明的一特定实施例提供一种治疗或抑制需要其的哺乳动物中癌肿瘤细胞生长和相关疾病的方法,其包含投以有效量的化合物或其医药上可接受的盐,其选自下列群组:
5-氮杂环庚烷-1-基-7-氯-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶,
7-氯-5-哌啶-1-基-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶,
7-氯-N-(2,2,2-三氟乙基)-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺,
7-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2,6-二氟苯基}-N-(2,2,2-三氟乙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺,
7-氯-5-环庚基-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶,
3-[4-(7-氯-5-环庚基咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-基)-3,5-二氟苯氧基]-N,N-二甲基丙-1-胺,
7-氯-6-{4-[4-(二甲氨基)丁氧基]-2,6-二氟苯基}-N-(2,2,2-三氟乙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺,
N-{3-[4-(7-氯-5-环己基咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-基)-3,5-二氟苯氧基]丙基}-N,N-二甲胺,
7-氯-6-{2,6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-(-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺和
7-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2,6-二氟苯基}-N-(-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺。
本发明的一特定实施例提供一种治疗或抑制需要其的哺乳动物中癌肿瘤细胞生长和相关疾病的方法,其包含投以有效量的根据式(IIa)的化合物或其医药上可接受的盐,其选自下列群组:
7-氯-6-{2,6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺和
7-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2,6-二氟苯基}-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺。
本发明的一特定实施例提供一种治疗或抑制需要其的哺乳动物中癌肿瘤细胞生长和相关疾病的方法,其包含投以有效量的根据式(IIb)的化合物或其医药上可接受的盐,其选自群组:
7-氯-6-{2,6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺和
7-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2,6-二氟苯基}-N-[(1R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺。
进一步提供一种通过使含有微管蛋白的系统与有效量的式(II)的化合物或其医药上可接受的盐接触来促进所述含有微管蛋白的系统中微管蛋白聚合的方法,其中:
其中:
R1选自:
和C6-C8环烷基;
R2为下式:
R3为H或C1-C3烷基;
R4为H或C1-C3烷基;或
R3和R4视情况连接在一起形成6到8元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以C1-C3烷基取代;
R5为H、C1-C3烷基或C1-C3氟烷基;
Y为H、F、Cl或式-O(CH2)nQ;
n为2、3或4的整数;
Q为-OH或-NR6R7;
R6和R7独立为H或C1-C3烷基;或
当R6和R7视情况与R6和R7各自所连接的氮原子连接在一起时形成4到6元饱和杂环,其具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以R8取代;
R8为C1-C3烷基;
L1、L2、L3和L4各自独立为H、F、Cl、Br或CF3;
X为Cl或Br;
或其医药上可接受的盐。
本发明的一优选实施例提供一种通过使含有微管蛋白的系统与有效量的下式(IIa)的化合物或其医药上可接受的盐接触来促进所述含有微管蛋白的系统中微管蛋白聚合的方法:
本发明的一优选实施例提供一种通过使含有微管蛋白的系统与有效量的下式(IIb)的化合物或其医药上可接受的盐接触来促进所述含有微管蛋白的系统中微管蛋白聚合的方法:
本发明的又一优选实施例提供一种通过使含有微管蛋白的系统与有效量的式(II)的化合物或其医药上可接受的盐接触来促进所述含有微管蛋白的系统中微管蛋白聚合的方法,其中R1为C6-C8环烷基。
本发明提供一种通过使含有微管蛋白的系统与有效量的式(II)的化合物或其医药上可接受的盐接触来促进所述含有微管蛋白的系统中微管蛋白聚合的方法,其中R2为下式:
本发明的一更优选实施例提供一种通过使含有微管蛋白的系统与有效量的包括其医药上可接受盐的式(IIa)的化合物接触来促进所述含有微管蛋白的系统中微管蛋白聚合的方法,其中:
R2为
R3为H或C1-C3烷基;
R4为H;
R5为C1-C3氟烷基;
Y为F或-O(CH2)nQ;
n为3;
Q为-NR6R7;
R6和R7各自独立为H或C1-C3烷基;或
当R6和R7视情况与R6和R7各自所连接的氮原子连接在一起时形成4到6元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以R8取代;
R8为C1-C3烷基;
L1和L4各自为F;
L2和L3各自为H;
X为Cl;
或其医药上可接受的盐。
本发明的一更优选实施例提供一种通过使含有微管蛋白的系统与有效量的包括其医药上可接受盐的式(II)的化合物接触来促进所述含有微管蛋白的系统中微管蛋白聚合的方法,其中:
R1为C6-C8环烷基;
R2为
Y为F或-O(CH2)nQ;
n为3;
Q为-NR6R7;
R6和R7各自独立为H或C1-C3烷基;或
当R6和R7视情况与R6和R7各自所连接的氮原子连接在一起时形成4到6元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以R8取代;
R8为C1-C3烷基;
L1和L4各自为F;
L2和L3各自为H;
X为Cl;
或其医药上可接受的盐。
本发明的一更优选实施例提供一种通过使含有微管蛋白的系统与有效量的包括其医药上可接受盐的式(IIb)的化合物接触来促进所述含有微管蛋白的系统中微管蛋白聚合的方法,其中:
R2为
R3为H或C1-C3烷基;
R4为H;
R5为C1-C3氟烷基;
Y为F或-O(CH2)nQ;
n为3;
Q为-NR6R7;
R6和R7各自独立为H或C1-C3烷基;或
当R6和R7视情况与R6和R7各自所连接的氮原子连接在一起时形成4到6元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以R8取代;
R8为C1-C3烷基;
L1和L4各自为F;
L2和L3各自为H;
X为Cl;
或其医药上可接受的盐。
本发明的一特定实施例提供一种通过使含有微管蛋白的系统与有效量的根据式(II)的化合物或其医药上可接受的盐接触来促进所述含有微管蛋白的系统中微管蛋白的方法,所述式(II)化合物选自群组:
5-氮杂环庚烷-1-基-7-氯-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶,
7-氯-5-哌啶-1-基-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶,
7-氯-N-(2,2,2-三氟乙基)-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺,
7-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2,6-二氟苯基}-N-(2,2,2-三氟乙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺,
7-氯-5-环庚基-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶,
3-[4-(7-氯-5-环庚基咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-基)-3,5-二氟苯氧基]-N,N-二甲基丙-1-胺,
7-氯-6-{4-[4-(二甲氨基)丁氧基]-2,6-二氟苯基}-N-(2,2,2-三氟乙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺,
N-{3-[4-(7-氯-5-环己基咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-基)-3,5-二氟苯氧基]丙基}-N,N-二甲胺,
7-氯-6-{2,6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-(-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺和
7-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2,6-二氟苯基}-N-(-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺。
本发明的一特定实施例提供一种通过使含有微管蛋白的系统与有效量的根据式(IIa)的化合物或其医药上可接受的盐接触来促进所述含有微管蛋白的系统中微管蛋白聚合的方法,所述式(IIa)化合物选自群组:
7-氯-6-{2,6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺和
7-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2,6-二氟苯基}-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺。
本发明的一特定实施例提供一种通过使含有微管蛋白的系统与有效量的根据式(IIb)的化合物或其医药上可接受的盐接触来促进所述含有微管蛋白的系统中微管蛋白聚合的方法,所述式(IIb)化合物选自群组:
7-氯-6-{2,6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺和
7-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2,6-二氟苯基}-N-[(1R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺。
本发明进一步提供一种稳定含有微管蛋白系统中的微管的方法,其包含使所述含有微管蛋白的系统与有效量的式(II)的化合物接触:
其中:
R1选自:
和C6-C8环烷基;
R2为下式:
R3为H或C1-C3烷基;
R4为H或C1-C3烷基;或
R3和R4视情况连接在一起形成6到8元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以C1-C3烷基取代;
R5为H、C1-C3烷基或C1-C3氟烷基;
Y为H、F、Cl或式-O(CH2)nQ;
n为2、3或4的整数;
Q为-OH或-NR6R7;
R6和R7独立为H或C1-C3烷基;或
当R6和R7视情况与R6和R7各自所连接的氮原子连接在一起时形成4到6元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以R8取代;
R8为C1-C3烷基;
L1、L2、L3和L4各自独立为H、F、Cl、Br或CF3;
X为Cl或Br;
或其医药上可接受的盐。
本发明的一优选实施例提供一种稳定含有微管蛋白系统中的微管的方法,其包含使所述含有微管蛋白的系统与有效量的式(IIa)的化合物:
或其医药上可接受的盐接触。
本发明的一优选实施例提供一种稳定含有微管蛋白系统中的微管的方法,其包含使所述含有微管蛋白的系统与有效量的式(IIb)的化合物:
或其医药上可接受的盐接触。
本发明的又一优选实施例提供一种通过投以有效量的式(II)化合物或其医药上可接受的盐来稳定需要其的哺乳动物中的微管的方法,其中R1为C6-C8环烷基。
本发明的另一优选实施例提供一种稳定含有微管蛋白系统中的微管的方法,其包含使所述含有微管蛋白的系统与有效量的式(II)的化合物或其医药上可接受的盐接触,其中R2为下式:
本发明的一更优选实施例提供一种稳定含有微管蛋白系统中的微管的方法,其包含使所述含有微管蛋白的系统与有效量的包括其医药上可接受盐的式(IIa)的化合物接触,其中:
R2为
R3为H或C1-C3烷基;
R4为H;
R5为C1-C3氟烷基;
Y为F或-O(CH2)nQ;
n为3;
Q为-NR6R7;
R6和R7各自独立为H或C1-C3烷基;或
当R6和R7视情况与R6和R7各自所连接的氮原子连接在一起时形成4到6元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以R8取代;
R8为C1-C3烷基;
L1和L4各自为F;
L2和L3各自为H;
X为Cl;
或其医药上可接受的盐。
本发明的一更优选实施例提供一种稳定含有微管蛋白系统中的微管的方法,其包含使所述含有微管蛋白的系统与有效量的包括其医药上可接受盐的式(II)的化合物接触,其中:
R1为C6-C8环烷基;
R2为
Y为F或-O(CH2)nQ;
n为3;
Q为-NR6R7;
R6和R7各自独立为H或C1-C3烷基;或
当R6和R7视情况与R6和R7各自所连接的氮原子连接在一起时形成4到6元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以R8取代;
R8为C1-C3烷基;
L1和L4各自为F;
L2和L3各自为H;
X为Cl;
或其医药上可接受的盐。
本发明的一更优选实施例提供一种稳定含有微管蛋白系统中的微管的方法,其包含使所述含有微管蛋白的系统与有效量的包括其医药上可接受盐的式(IIb)的化合物接触,其中:
R2为
R3为H或C1-C3烷基;
R4为H;
R5为C1-C3氟烷基;
Y为F或-O(CH2)nQ;
n为3;
Q为-NR6R7;
R6和R7各自独立为H或C1-C3烷基;或
当R6和R7视情况与R6和R7各自所连接的氮原子连接在一起时形成4到6元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以R8取代;
R8为C1-C3烷基;
L1和L4各自为F;
L2和L3各自为H;
X为Cl;
或其医药上可接受的盐。
本发明的一特定实施例提供一种稳定含有微管蛋白系统中的微管的方法,其包含使所述含有微管蛋白的系统与有效量的根据式(II)的化合物或根据式(II)的其医药上可接受的盐接触,根据式(II)的化合物选自下列群组:
5-氮杂环庚烷-1-基-7-氯-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶,
7-氯-5-哌啶-1-基-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶,
7-氯-N-(2,2,2-三氟乙基)-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺,
7-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2,6-二氟苯基}-N-(2,2,2-三氟乙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺,
7-氯-5-环庚基-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶,
3-[4-(7-氯-5-环庚基咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-基)-3,5-二氟苯氧基]-N,N-二甲基丙-1-胺,
7-氯-6-{4-[4-(二甲氨基)丁氧基]-2,6-二氟苯基}-N-(2,2,2-三氟乙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺,
N-{3-[4-(7-氯-5-环己基咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-基)-3,5-二氟苯氧基]丙基}-N,N-二甲胺,
7-氯-6-{2,6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-(-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺和
7-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2,6-二氟苯基]-N-(-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺。
本发明的一特定实施例提供一种稳定含有微管蛋白系统中的微管的方法,其包含使所述含有微管蛋白的系统与有效量的根据式(IIa)的化合物或其医药上可接受的盐接触,根据式(IIa)的化合物选自群组:
7-氯-6-{2,6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺和
7-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2,6-二氟苯基}-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺。
本发明的一特定实施例提供一种稳定含有微管蛋白系统中的微管的方法,其包含使所述含有微管蛋白的系统与有效量的根据式(IIb)的化合物或根据式(IIb)的其医药上可接受的盐接触,根据式(IIb)的化合物选自群组:
7-氯-6-{2,6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺和
7-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2,6-二氟苯基}-N-[(1R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺。
也提供一种治疗或预防需要其的哺乳动物中表现多重抗药性(MDR)或由于MDR而具有抗性的肿瘤的方法,所述方法包含向所述哺乳动物投以有效量的式(II)化合物:
其中:
R1选自:
和C6-C8环烷基;
R2为下式:
R3为H或C1-C3烷基;
R4为H或C1-C3烷基;或
R3和R4视情况连接在一起形成6到8元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以C1-C3烷基取代;
R5为H、C1-C3烷基或C1-C3氟烷基;
Y为H、F、Cl或式-O(CH2)nQ;
n为2、3或4的整数;
Q为-OH或-NR6R7;
R6和R7独立为H或C1-C3烷基;或
当R6和R7视情况与R6和R7各自所连接的氮原子连接在一起时形成4到6元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以R8取代;
R8为C1-C3烷基;
L1、L2、L3和L4各自独立为H、F、Cl、Br或CF3;
X为Cl或Br;
或其医药上可接受的盐。
本发明的一优选实施例提供一种治疗或预防需要其的哺乳动物中表现多重抗药性(MDR)或由于MDR而具有抗性的肿瘤的方法,所述方法包含投以有效量的式(IIa)化合物:
或其医药上可接受的盐。
本发明的一优选实施例提供一种治疗或预防需要其的哺乳动物中表现多重抗药性(MDR)或由于MDR而具有抗性的肿瘤的方法,所述方法包含投以有效量的式(IIb)化合物:
或其医药上可接受的盐。
本发明的又一优选实施例提供一种治疗或预防需要其的哺乳动物中表现多重抗药性(MDR)或由于MDR而具有抗性的肿瘤的方法,所述方法包含投以有效量的式(II)的化合物或其医药上可接受的盐,其中R1为C6-C8环烷基。
本发明的另一优选实施例提供一种治疗或预防需要其的哺乳动物中表现多重抗药性(MDR)或由于MDR而具有抗性的肿瘤的方法,所述方法包含投以有效量的式(II)的化合物或其医药上可接受的盐,其中R2为下式:
本发明的一更优选实施例提供一种治疗或预防需要其的哺乳动物中表现多重抗药性(MDR)或由于MDR而具有抗性的肿瘤的方法,所述方法包含投以有效量的包括其医药上可接受盐的式(IIa)的化合物,其中:
R2为
R3为H或C1-C3烷基;
R4为H;
R5为C1-C3氟烷基;
Y为F或-O(CH2)nQ;
n为3;
Q为-NR6R7;
R6和R7各自独立为H或C1-C3烷基;或
当R6和R7视情况与R6和R7各自所连接的氮原子连接在一起时形成4到6元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以R8取代;
R8为C1-C3烷基;
L1和L4各自为F;
L2和L3各自为H;
X为Cl;
或其医药上可接受的盐。
本发明的一更优选实施例提供一种治疗或预防需要其的哺乳动物中表现多重抗药性(MDR)或由于MDR而具有抗性的肿瘤的方法,所述方法包含投以有效量的包括其医药上可接受盐的式(II)的化合物,其中:
R1为C6-C8环烷基;
R2为
Y为F或-O(CH2)nQ;
n为3;
Q为-NR6R7;
R6和R7各自独立为H或C1-C3烷基;或
当R6和R7视情况与R6和R7各自所连接的氮原子连接在一起时形成4到6元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以R8取代;
R8为C1-C3烷基;
L1和L4各自为F;
L2和L3各自为H;
X为Cl;
或其医药上可接受的盐。
本发明的一更优选实施例提供一种治疗或预防需要其的哺乳动物中表现多重抗药性(MDR)或由于MDR而具有抗性的肿瘤的方法,所述方法包含投以有效量的包括其医药上可接受盐的根据式(IIb)的化合物,其中:
R2为
R3为H或C1-C3烷基;
R4为H;
R5为C1-C3氟烷基;
Y为F或-O(CH2)nQ;
n为3;
Q为-NR6R7;
R6和R7各自独立为H或C1-C3烷基;或
当R6和R7视情况与R6和R7各自所连接的氮原子连接在一起时形成4到6元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以R8取代;
R8为C1-C3烷基;
L1和L4各自为F;
L2和L3各自为H;
X为Cl;
或其医药上可接受的盐。
本发明的一特定实施例提供一种通过投以有效量的根据式(II)的化合物或其医药上可接受的盐来治疗或预防需要其的哺乳动物中表现多重抗药性(MDR)或由于MDR而具有抗性的肿瘤的方法,根据式(II)的化合物选自下列群组:
5-氮杂环庚烷-1-基-7-氯-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶,
7-氯-5-哌啶-1-基-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶,
7-氯-N-(2,2,2-三氟乙基)-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺,
7-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2,6-二氟苯基}-N-(2,2,2-三氟乙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺,
7-氯-5-环庚基-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶,
3-[4-(7-氯-5-环庚基咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-基)-3,5-二氟苯氧基]-N,N-二甲基丙-1-胺,
7-氯-6-{4-[4-(二甲氨基)丁氧基]-2,6-二氟苯基}-N-(2,2,2-三氟乙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺,
N-{3-[4-(7-氯-5-环己基咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-基)-3,5-二氟苯氧基]丙基}-N,N-二甲胺,
7-氯-6-{2,6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-(-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺和
7-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2,6-二氟苯基}-N-(-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺。
本发明的一特定实施例提供一种通过投以有效量的根据式(IIa)的化合物或其医药上可接受的盐来治疗或预防需要其的哺乳动物中表现多重抗药性(MDR)或由于MDR而具有抗性的肿瘤的方法,根据式(IIa)的化合物选自群组:
7-氯-6-{2,6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺和
7-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2,6-二氟苯基}-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺。
本发明的一特定实施例提供一种通过投以有效量的根据式(IIb)的化合物或其医药上可接受的盐来治疗或预防需要其的哺乳动物中表现多重抗药性(MDR)或由于MDR而具有抗性的肿瘤的方法,根据式(IIb)的化合物选自群组:
7-氯-6-{2,6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺和
7-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2,6-二氟苯基}-N-[(1R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺。
本发明额外提供一种治疗、抑制需要其的哺乳动物中肿瘤生长或根除肿瘤的方法,其中所述肿瘤对至少一种化疗剂具有抗性,所述方法包含向所述哺乳动物投以有效量的式(II)化合物和其医药上可接受的盐。
具体实施方式
本发明的化合物可由以下物质来制备:(a)市售的起始材料;(b)已知的起始材料,其可如文献程序中所述来制备;或(c)新颖中间物,其在本文的流程和实验程序中有所描述。
在适合于所用试剂和材料并适合于所实现的转化反应的溶剂中进行反应。有机合成领域的技术人员应了解分子中所呈现的各种官能基必须与所提出的化学转化反应一致。此可使判断合成步骤的顺序成为必要。必须适当地考虑对反应性官能基进行保护以避免不需要的副反应。
在起始材料上的取代基可与一些反应条件不相容。对于与反应条件不相容的取代基的所述限制将为所属领域的技术人员所熟知。适当时在惰性气氛下进行反应。
式(I)和式(II)的化合物,其中R1为
是通过流程1中所示的方法来制备,其中R2、R3、R4、R5和X如上文所定义。在高达190℃的温度下,在碱性条件下使用诸如三丁胺的叔胺使化合物(III,US6,156,925)与2-氨基咪唑(IV)反应以提供化合物(V)。以卤化剂POX3(其中X为Cl或Br)诸如氧氯化磷或氧溴化磷进行的卤化作用产生5,7-二卤化合物(VI)。在适合的溶剂诸如二甲亚砜或二甲基甲酰胺中以过量的胺(VII)置换5,7-二卤化合物(VI)的5-氯或5-溴来提供式(II)的化合物,其中R1为
流程I:
式(I)和式(II)的化合物,其中R1为
Y表示-O(CH2)nQ基团,或者可如流程II中所示通过在适合的溶剂中,在包括碱金属氢氧化物、碱金属碳酸盐和碱金属氢化物(例如,氢化钠)的强碱存在下,使(VIII)(其中置换L5,其为可除去的离去基,尤其是氟原子)与式(IX)的醇反应来制备。适合的溶剂包括非质子性溶剂,诸如二甲亚砜、二甲基甲酰胺和其类似物。在约0℃到约100℃范围内的温度下适当地进行反应以提供(X),式(I)和式(II)的化合物,其中Y表示-O(CH2)nQ基团。
流程II:
式(I)和式(II)的化合物(其中R1为C6-C8环烷基)可如流程III-VI中所示来制备。如流程III中所述,在二异丙基胺锂(LDA)存在下使酯(XI)与自相应羧酸制备而来的酰基氯(XII)(其中R1为C6-C8环烷基)反应以产生酮(XIII),其进一步在碱性条件下使用诸如三丁胺之叔胺在高达190℃的温度下与2-氨基咪唑(IV)反应以产生咪唑并[1,2-a]嘧啶-7-醇(XIV)。
流程III:
如流程IV中所示,在包括碱金属氢氧化物、碱金属碳酸盐和碱金属氢化物(例如,氢化钠)的强碱存在下在包括二甲亚砜、二甲基甲酰胺和其类似物的非质子性溶剂中使咪唑并[1,2-a]嘧啶-7-醇(XIV)与醇(XV)反应以产生醚(XVI)。在N,N-二乙基苯胺存在下使醚(XVI)与卤化剂POX3(其中X为Cl或Br)诸如氧氯化磷或氧溴化磷反应以供给化合物(XVII),其进一步与2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌(DDQ)反应以供给醚(XVIII),式(I)和式(II)的化合物,其中R1为C6-C8环烷基,Y为-O(CH2)nQ且Q为OH。
此外,咪唑并[1,2-a]嘧啶-7-醇(XIV)与卤化剂POX3(其中X为Cl或Br)诸如氧氯化磷或氧溴化磷反应以供给(XIX),式(II)的化合物,其中R1为C6-C8环烷基,且Y为F。
流程IV:
参考流程V,在包括碱金属氢氧化物、碱金属碳酸盐和碱金属氢化物(例如,氢化钠)的强碱存在下在包括二甲亚砜、二甲基甲酰胺和其类似物的非质子性溶剂存在下使咪唑并[1,2-a]嘧啶-7-醇(XIV)(其中R1为C6-C8环烷基)与氨基醇(XX)(其中R6和R7非H)反应以产生胺(XXI)。使胺(XXI)与卤化剂POX3(其中X为Cl或Br)诸如氧氯化磷或氧溴化磷反应以产生醚(XXII),式(I)和式(II)的化合物,其中R1为C6-C8环烷基,Y为-O(CH2)nQ,Q为NR6R7且R6和R7不是H。
流程V:
如流程VI中所示,在包括碱金属氢氧化物、碱金属碳酸盐和碱金属氢化物(例如,氢化钠)的强碱存在下在包括二甲亚砜、二甲基甲酰胺和其类似物的非质子性溶剂存在下使咪唑并[1,2-a]嘧啶-7-醇(XIV)(其中R1为C6-C8环烷基)与氨基醇(XXIII)(其中R6为H)反应以产生胺(XXIV)。通过与二碳酸二-叔丁基酯(t-Boc)2O的反应来保护胺(XXIV)的氮以供给经t-Boc保护的胺(XXV),其进一步与卤化剂POX3(其中X为Cl或Br)诸如氧氯化磷或氧溴化磷在N,N-二乙基苯胺存在下反应以供给卤化合物(XXVI)。卤化合物(XXVI)进一步与三氟乙酸(TFA)反应以供给胺(XXVII),式(I)和式(II)的化合物,其中R1为C6-C8环烷基,Y为-O(CH2)nQ,Q为NR6R7且R6为H。
流程VI:
应了解本发明涵盖所有结晶和水合形式的式(I)和式(II)的化合物和其医药上可接受的盐。本发明的化合物的医药上可接受的盐是由诸如以下的有机和无机医药上可接受的成盐酸衍生而来:乳酸、柠檬酸、乙酸、酒石酸、反丁烯二酸、琥珀酸、顺丁烯二酸、丙二酸、氢氯酸、氢溴酸、磷酸、硝酸、硫酸、甲磺酸、苯磺酸、L-天冬氨酸、R或S-扁桃酸、棕榈酸和类似已知的可接受的酸。其他盐为三氟乙酸盐(TFA)。氢氯酸盐、反丁烯二酸盐和琥珀酸盐尤其优选。
因此,本发明提供一种医药组合物,其包含与医药上可接受的载剂组合或联合的本发明的化合物。具体来说,本发明提供一种医药组合物,其包含有效量的本发明的化合物和医药上可接受的载剂。本发明的医药组合物包含式(I)或式(II)的化合物。
根据本文所述的标准药理试验程序的结果,本发明的化合物适于用作治疗、抑制或控制需要其的哺乳动物中的癌肿瘤细胞生长和相关疾病的试剂。本发明的化合物适于用作通过与微管蛋白和微管相互作用且促进微管聚合来治疗、抑制或控制需要其的哺乳动物中癌肿瘤细胞生长和相关疾病的试剂。本发明的化合物也适用于治疗或预防表现多重抗药性(MDR)或由于MDR而具有抗性的癌肿瘤。
具体来说,当使含有微管蛋白的系统与有效量的式(I)或(II)化合物接触时会造成促进微管聚合且进一步稳定微管,且通过促进微管聚合和稳定微管,所述式(I)或(II)的化合物适于用作治疗、抑制或控制癌肿瘤细胞生长和相关疾病的试剂。此外,式(I)或(II)的化合物适于用作治疗或预防表现多重抗药性(MDR)或由于MDR而具有抗性的癌肿瘤。含有微管蛋白的系统可在肿瘤细胞中,由此通过投以有效量的本发明所述的化合物来抑制肿瘤性疾病。哺乳动物可受到治疗且具体来说为人类。另外,所述含有微管蛋白的系统可在患者中。在癌症治疗的状况下,相信许多诸如白血病、肺癌、结肠癌、甲状腺癌、卵巢癌、肾癌、前列腺癌和乳腺癌的瘤形成可通过有效地投以有效量的式(I)或(II)化合物而得到治疗。如本文所用,癌症意指所有类型的癌症、或赘生物或良性或恶性肿瘤。使用本文所提供的方法来治疗的优选癌症包括癌、肉瘤、淋巴瘤或白血病。癌意指良性或恶性上皮性肿瘤且包括(但不限于)乳癌、前列腺癌、非小细胞型肺癌(non-small lung carcinoma)、结肠癌、黑素瘤、卵巢癌或肾癌。优选的宿主为人类。
所采用的活性成份的有效剂量可根据所采用的特定化合物、投药模式和所治疗病症的严重性而变化。然而,通常当每天以每公斤体重约0.10到约100毫克范围内的量投以本发明的化合物时,获得满意结果。最佳结果的优选方案为每天每公斤体重约1毫克到约20毫克且采用所述单位剂量:在24小时的时期内向约70公斤体重的受检者投以总量约70毫克到约1400毫克的活性化合物。
可调整用于治疗哺乳动物的给药方案以提供最佳治疗反应。例如,可每天投以若干分次剂量或可如紧急的治疗情况所示按照例地减少剂量。一项明确的实践优势在于可以任何便利方式投以所述活性化合物,诸如通过经口、静脉内、肌肉内或皮下路径。
本发明的活性化合物可优选地(例如)与惰性稀释剂或与可吸收的食用载剂一起经口投以,或可将其封装于硬壳或软壳明胶胶囊中,或可将其压缩为片剂或可将其直接并入食物或膳食中。就经口治疗投药而言,可将所述活性化合物并入赋形剂中且以可吸收片剂、颊内片剂、锭剂、胶囊、酏剂、悬浮液、糖浆、糯米纸囊剂(wafer)和其类似物的形式来使用。所述组合物和制剂应含有至少0.1%的活性化合物。组合物和制剂的百分数当然可变化且可便利地介于约2%到约60%单位重量之间。在所述适用于治疗的组合物中的活性化合物的量应为如此:将获得适当的剂量。制备根据本发明的优选组合物或制剂以便口服单位剂型含有介于10与1000mg之间的活性化合物。
片剂、锭剂、丸剂、胶囊和其类似物也可含有以下:粘合剂,诸如黄蓍胶、阿拉伯胶、玉米淀粉或明胶;赋形剂,诸如磷酸二钙;崩解剂,诸如玉米淀粉、土豆淀粉、海藻酸和其类似物;润滑剂,诸如硬脂酸镁;和甜味剂,诸如蔗糖、乳糖或糖精,或可添加调味剂,诸如薄荷、冬青油或樱桃调味剂。当单位剂型为胶囊时,其可含有除了以上类型材料之外的液体载剂。各种其他材料可作为涂层呈现或否则可修改所述剂量单位的物理形式。例如,可能以虫胶、糖或其两者来涂覆的片剂、丸剂或胶囊。糖浆或酏剂可含有所述活性化合物、蔗糖作为甜味剂、对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯作为防腐剂、染料和调味剂诸如樱桃味或橙子味。当然,制备任何单位剂型所用的任何材料应为制药上纯的且所用量在大体上无毒。此外,可将所述活性化合物并入持续释放制剂和配方中。
这些活性化合物也可非经肠或经腹膜内投以。这些游离碱或医药上可接受盐形式的活性化合物溶液或悬浮液可在适当与诸如羟基丙基纤维素的表面活性剂混合的水中制备。可在甘油、液体聚乙二醇和于油中的其混合物中制备分散液。在通常的储存和使用条件下,这些制剂含有防腐剂以避免微生物生长。
适于注射使用的医药形式包括无菌水溶液或分散液和无菌粉末用于无菌注射溶液或分散液的临时制剂。在所有状况下,所述形式必须为无菌的且必须为流体且流动的程度可致容易注射性的存在。其在制造和储存条件下必须为稳定的且必须制备出能对抗诸如细菌和真菌的微生物的污染行为的形式。所述载剂可为溶剂或分散介质,其含有例如水、乙醇、多元醇(例如,甘油、丙二醇和液体聚乙二醇)、其适合的混合物和植物油。
静脉内投药为本发明化合物的优选投药方式。就静脉内投药而言,非限制性适合的载剂的实例包括生理盐水、抑菌水、乳化剂(Cremophor)ELTM(BASF,Parsippany,N.J.)或磷酸盐缓冲盐水(PBS)。所述组合物必须为无菌的且应为流体且流动的程度可致容易注射性的存在。其在制造和储存条件下必须为稳定的且必须制备出能对抗诸如细菌和真菌的微生物的污染行为的形式。所述载剂可为溶剂或分散介质,其含有例如水、乙醇、多元醇(例如,甘油、丙二醇和液体聚乙二醇和其类似物)、和其适合的混合物。微生物行为的预防可通过各种抗细菌和抗真菌剂实现,所述试剂为例如对羟基苯甲酸酯类、氯丁醇、苯酚、抗坏血酸、硫柳汞和其类似物。在许多状况下,最好在组合物中包括等渗剂,例如糖、诸如甘露糖醇、山梨糖醇的多元醇、氯化钠。可通过在组合物中包括延迟吸收的试剂诸如单硬脂酸铝和明胶来实现可注射组合物的延长吸收。
如根据本发明所用,术语提供有效量的化合物意指直接投以所述化合物或投以前药、衍生物或类似物,其将在体内形成有效量的化合物。
除了以上效用之外,本发明的一些化合物适用于制备本发明的其他化合物。
在若干标准药理试验程序中评价本发明的实例,所述程序显示本发明的化合物具有作为微管聚合促进剂的显著活性且为抗肿瘤剂。根据标准药理试验程序中所显示的活性,本发明的化合物因此适用作抗癌剂。相关癌症选自由以下各疾病组成的群组:乳癌、结肠癌、肺癌、前列腺癌、黑素瘤、上皮癌、白血病、肾癌、膀胱癌、口腔癌、喉癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、胰腺癌、肝癌、皮肤癌和脑瘤。具体来说,本发明的化合物具有类似于紫杉醇的作用。所用试验程序和所获得的结果显示如下。
标准药理试验程序
材料和方法
细胞培养基和试剂
培养基为含有L-谷氨酰胺的RPMI-1640,其补充有10%热失活胎牛血清、100单位/mL青霉素和100μg/mL链霉素(Gibco,Grand Island,NY)。含有约70%微管蛋白和30%MAP(#ML113)的富含微管相关蛋白(MAP)的微管蛋白和高度纯化的微管蛋白(>99%纯度,#TL238),两者都来自牛脑,是由Cytoskeleton,Inc.,Denver,CO获得。PEM缓冲液(80mM哌嗪-N,N′-双[2-乙磺酸],pH6.9、1mM乙二醇-双(β-氨基乙醚)-N,N,N′,N′-四乙酸、1mM氯化镁)和5′-三磷酸鸟苷(GTP)也是由细胞骨架获得。[3H]紫杉醇,比活性14.7Ci/mmol是由Moravek Biochemicals(Brea,CA)购得。[3H]长春碱,比活性9.60Ci/mmol和MicroSpin G-50管柱是由Amersham Biosciences(Piscataway,NJ)获得。[3H]秋水仙碱,比活性76.5Ci/mmol是由New England Nuclear(Boston,MA)获得。其他试剂是由Sigma(St.Louis,MO)获得。
细胞系
除非另外指出,否则人类癌细胞系是由美国菌种保藏中心(American Type CultureCollection)(Rockville,MD)获得。下列药物敏感性亲本细胞系和其衍生的药物抵抗性对应物是由以下所列出的起源获得:(a)S1(来自人类结肠癌系LS174T的亚克隆的亲本系)和衍生的S1-M1-3.2(本文中称为S1-M1),其表达MXR药物转运蛋白且是由Dr.L.Greenberger,Wyeth Research(Rabindran,S.K.,He,H.,Singh,M.,Brown,E.,Collins,K.I.,Annable,T.,and Greenberger,L.M.Reversal of a novel multidrug resistance mechanismin human colon carcinoma cells by fumitremorgin C.Cancer Res.,58:5850-5858,1998)提供;(b)亲本HL-60人类早幼粒细胞白血病系和衍生的HL-60/ADR,其表达MRP1药物转运蛋白且是由Dr.M.Center,University of Kansas(McGrath,T.,and Center,M.S.Adriamycin resistance in HL60 cells in the absence of detectable P-glycoprotein.Biochern.Biophys.Res.Commun.,145:1171-1176,1987),经由Dr.L.Greenberger,Wyeth Research来提供;和(c)亲本KB-3-1(本文中称为KB,由人类表皮状癌克隆而来)和衍生的系KB-8-5与KB-V1,其表达中等和极高含量的MDR1(P-糖蛋白)药物转运蛋白,其分别由Dr.M.Gottesman,National Cancer Institute(Shen,D.W.,Cardarelli,C,Hwang,J.,Cornwell,M.,Richert,N.,Ishii,S.,Pastan,I.,and Gottesman,M.M.Multiple drug-resistanthuman KB carcinoma cells independently selected for high-level resistance to colchicine,adriamycin,or vinblastine show changes in expression of specific proteins.J.Biol.Chem.,261:7762-7770,1986)经由Dr.L.Greenberger,Wyeth Research来提供。
细胞毒性标准药理试验程序
使用两种不同的标准细胞毒性分析:“MTS”分析和“SRB”分析。
MTS分析是以试剂盒形式由Promega(Madison,WI;CellTiter 96 AQueousNon-Radioactive Cell Proliferation Assay)购得,其是基于通过活细胞而非死细胞将四唑鎓盐,MTS(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑鎓,内盐)转化成水溶性有色甲臢,通过分光光度测定法来检测甲臢。测试9种浓度的化合物以测定IC50值。就试验程序而言,将细胞通过胰蛋白酶作用(或者,在非粘附细胞的状况下通过简单再悬浮作用)来采集、洗涤、计数且在200μL培养基中以每孔1000个细胞分配到96-孔平底微量滴定板的孔中。此外,独立板上的一行孔接受如上的细胞(“时间0”板)。在37℃下于空气中湿润的5%CO2中培养所有板历时约24小时。
第二天,将试验用化合物稀释且添加到孔中。使化合物溶解于10mg/ml的DMSO中。就各化合物而言,于DMSO中制备9个连续2倍稀释液。将DMSO中的10μL各稀释液转移到100μL的培养基混合孔中,且接着将5μL此稀释液一式四份转移到含有细胞的孔中。各化合物的最终高浓度一般为1-5μM。将板移回到培养器中历时3天。在将药物添加到实验板中之时,在“时间0”板上进行MTS分析。以此给出“时间0MTS值”,其与添加药物时每孔的活细胞数有关。
在培养试验化合物3天之后(总共5天),在实验板的所有孔上进行MTS分析。将一式四份样品孔的吸收值取平均值且除以“时间0”值的平均值。将不含药物的对照孔的平均值除以“时间0”值的平均值后得到MTS得色量的最大相对增加,此是由于在培养最后3天期间的细胞生长。将具有高药物浓度的对照孔的平均值除以“时间0”值后得到细胞全部被杀死的最小相对得色量。将每个化合物的9个值相对于浓度绘出曲线图,且将产生介于最大与最小中间的相对得色量的浓度取作IC50值。最有效的化合物具有最低IC50值。
根据以前所报道的方法进行SRB标准细胞毒性分析(Discafani,C.M.,Carroll,M.L,Floyd Jr.,M.B.F.,Hollander,I.J.,Husain,Z.,Johnson,B.D.,Kitchen,D.,May,M.K.,Malo,M.S.,Minnick Jr.,A.A.,Nilakantan,R.,Shen,R.,Wang Y-F.,Wissner,A.,Greenberger,L.M.Irreversible inhibition of epidermal growth factor receptor tyrosinekinase with in vivo activity by N-[4-[3-bromophenyl)amino]-6-quinaxolinyl]-2-butynamide(CL-387,785).Biochem.Pharmacol.,57;917-925,1999)。简单来说,在第1天早上将细胞涂于100μL培养基中96孔平底微量滴定板上且使其粘附到板上历时2-6小时。将化合物连续稀释到培养基中作为2X原料且将100μL这些原料一式两份添加到细胞中。将化合物与细胞一起培养3天。在培养期结束时,如前所述(Skehan,P.,Storeng,R.,Scudiero,D.,Monks,A.,McMahon,J.,Vistica,D.,Warren,J.T.,Bokesch,H.,Kenney,S.,Boyd.M.R.New colorimetric cytotoxicity assay for anticancer-drug screening.J.Natl.Cancer Inst,82:1107-1112,1990)在具有一些变更的情况下执行测量蛋白质含量的磺酰罗丹明B(sulforhodamine)(SRB)分析,其是作为细胞存活的一项评估。将培养基自板中轻轻倒出且以每孔200μL冷的不含血清的培养基来置换,所述培养基含有最终浓度为10%的三氯乙酸。将板在4℃下培养1小时,于冷的蒸馏水中洗涤5次,且风干过夜。将经固定的细胞以每孔80μL于1%冰乙酸中所制备的0.04%SRB溶液染色10分钟。将染色溶液倒出,将板于1%冰乙酸中洗涤5次,且接着风干直到完全干燥。将经染色的细胞产物溶解于每孔150μL 10mM Trizma碱中伴随摇动20分钟。在Victor V多标记培养板读出器(Perkin Elmer,Gaithersburg,MD)上读取吸收度。
微管蛋白聚合标准药理试验程序
完成此程序的两个变更,一是使用富含MAP的微管蛋白且另一是使用纯的微管蛋白。
将富含MAP的微管蛋白溶解于含有浓度为1.3mg/mL的1mM GTP(GPEM缓冲液)的冰冷PEM缓冲液中。在使用前即刻在Eppendorf型号5415C微型离心机(Brinkmann Instruments,Westbury,NY)中以最高速度离心溶液历时10分钟。将微管蛋白溶液添加到已含有相关化合物的1/2-区96-孔培养板(Costar No.3696,Corning,Inc.,Corning,NY)中。以在每孔110μL体积中0.3μM的最终浓度测试一式两份的每个化合物。在所有孔中的最终DMSO浓度为0.3%。一式四份完成仅接受化合物溶剂的对照反应。将培养板置于24℃恒温的SpectraMax Plus培养板读出器(Molecular Devices Corp.Sunnyvale,CA)中且每分钟测定每个孔在340nm下的吸收度历时60分钟,此为由于微管蛋白聚合物形成而产生的混浊度外观的量度。将每个孔在时间0时的吸收度减去各自随后的那个孔的吸收度读数,且接着将两份取平均值。
用于纯微管蛋白的程序相类似,除了以下变化之外:将纯微管蛋白溶于冷的PEM缓冲液中,所述缓冲液含有10%甘油且不添加浓度为1.5到1.8mg/mL(15到18μM)的GTP。在离心之后将上层清液分配到已含有化合物的1/2-区96孔培养板上。以24.3μM的最终浓度测试一式两份的每个化合物。将培养板读出器设于恒温35℃
竞争性结合标准药理试验程序
通过竞争性抑制方法来研究本发明的实例与高度纯化微管蛋白的结合。αβ-微管蛋白杂二聚体含有三种主要类型微管活性药剂的结合位点:紫杉烷、长春花/肽-位点试剂、和秋水仙碱-位点试剂。为了研究在长春花/肽位点和秋水仙碱位点的可能的竞争,在不利于聚合反应的条件下完成培养,这是由于长春碱和秋水仙碱择优结合于非聚合的杂二聚体。另一方面,为了研究在紫杉烷位点的可能的竞争,使用聚合的微管蛋白(微管),这是由于紫杉醇择优结合于微管。
将高度纯化的微管蛋白溶于不含GTP的PEM缓冲液中且以1.0到1.3mg/ml(10到13μM)的最终浓度来使用。向微管蛋白溶液的等分试样中添加100μM最终浓度的各种竞争剂(一式四份),和分别以100nM或50nM最终浓度的[3H]长春碱或[3H]秋水仙碱。在24℃下培养这些溶液历时1小时且接着施加到MicroSpin G-50管柱中,将所述管柱在Eppendorf 5415C微型离心机中在3000rpm下离心2分钟。将各管柱流出物的等分试样(含有微管蛋白和结合放射性配体)与闪烁流体混合且在液体闪烁分光计中计数。对照物包括不含竞争剂的样品,和含有未标记的长春新碱、秋水仙碱或紫杉醇的样品。一式四份取平均值,且将竞争剂抑制放射性配体结合的能力表示为在不存在任何竞争剂的情况下对照物结合的百分数。
就与[3H]紫杉醇竞争而言,将高度纯化的微管蛋白溶解于含有0.75M谷氨酸和25μM二脱氧-GTP的PEM缓冲液中;最终蛋白质浓度为0.25到0.35mg/mL(2.5到3.5μM)。这些条件促进短的稳定微管聚合物的快速形成(Hamel,E.,del Campo,A.A.,and Lin,CM.Stability of tubulin polymers formed with dideoxyguanosine nucleotides in the presence andabsence of microtubule-associated proteins.J.Biol.Chem.,259:2501-2508,1984)。将此溶液于37℃下培养30分钟以使微管形成。接着将[3H]紫杉醇(最终浓度为2.1μM,1.2Ci/mmol)和竞争剂(最终浓度为20μM,除了5μM用于未标记的紫杉醇外)添加到聚合微管蛋白溶液的等分试样中且在37℃下又继续培养30分钟。对照物包括不含竞争剂的样品,和含有未标记的长春新碱、秋水仙碱或紫杉醇的样品。接着在室温下将反应物在Eppendorf 5415C微型离心机中以最高速度离心20分钟以使微管蛋白质成丸状。将各上层清液的一式三份的等分试样与闪烁流体混合且在液体闪烁分光计中计数。自上层清液中的放射性的量和经测量的总起始放射性计算[3H]紫杉醇结合到丸状微管蛋白质的量。将各竞争剂抑制放射性配体结合到丸状蛋白质的能力表示为不含任何竞争剂的对照物的百分数。
结果
1.细胞毒性标准药理试验程序
1.1.用COLO 205细胞
COLO 205为人类结肠癌细胞系,将其用于本发明的实例和若干参考化合物的对照试验(表1)。此细胞系对于紫杉醇和长春新碱敏感。
表1
用COLO 205细胞进行的MTS细胞毒性标准药理试验程序中的本发明实例和参考化合物的活性1
实例或参考化合物 | IC50(nM) | SD | n |
1 | 259 | 74 | 3 |
2 | 396 | 8 | 2 |
3 | 742 | 385 | 2 |
4 | 88 | 26 | 2 |
5 | 207 | 111 | 2 |
6 | 45 | 17 | 3 |
紫杉醇 | 3.3 | 1.0 | 20 |
长春新碱 | 2.6 | 0.5 | 7 |
1IC50值和标准偏差来自独立实验的所示数字。
1.2.用KB、KB-8-5和KB-V1细胞
KB系表达不同量的P-糖蛋白(MDR1)膜泵,所述泵产生对包括紫杉醇和长春新碱的许多细胞毒性化合物作用的抵抗。亲本KB系不表达P-糖蛋白,KB-8-5表达中等含量的蛋白质,且KB-V1表达极高含量。P-糖蛋白识别并输出潜在的细胞毒性剂的能力可由IC50值在这些系中的变化来推断(Loganzo,F.,Discafani,CM.,Annable,T.,Beyer,C,Musto,S.,Hari,M.,Tan,X.,Hardy,C,Hernandez,R.,Baxter,M.,Singanallore,T.,Khafizova,G,Poruchynsky,M.S.,Fojo,T.,Nieman,J.A.,Ayral-Kaloustian,S.,Zask,A.,Andersen,R.J.,和Greenberger,L.M.HTI-286,a synthetic analogue of the tripeptidehemiasterlin.is a potent antimicrotubule agent that circumvents P-glycoprotein-mediatedresistance in vitro and in vivo.Cancer Res.,63:1838-1845,2003)。若由P-糖蛋白识别出了一种化合物,则其IC50值将在由KB到KB-8-5到KB-V1的顺序上实质上增加(几百倍);若未识别出化合物,则其在所有三种系中将具有类似的IC50值(3倍或更少的差异)。例如,如表2所示,KB-8-5细胞对紫杉醇(19倍)、长春新碱(11倍)、秋水仙碱(3.4倍)和阿霉素(doxorubicin)(3.0倍)具有中等抗性。相反,本发明的实例6显示IC50值的1.4-倍变化。此外,在SRB细胞毒性分析程序中所测试的实例4(表3)具有2.5的比率,相比于紫杉醇而言比率为16。
可以KB-V1系来测定化合物与P-糖蛋白的甚至微弱的相互作用,KB-Vl系表达比一般自多种肿瘤于临床样品中所发现的更高含量的此蛋白质(Goldstein,L.J.,Galski,H.,Fojo,T.,Willingham,M.,Lai,S.L,Gazdar,A.,Pirker,R.,Green,A.,Crist,W.,Brodeur,G.M.,Lieber,M.,Cossman,J.,Gottesman,M.M.,and Pastan,I.Expression of a multidrugresistance gene in human cells.J.Natl.Cancer Inst.(Bethesda),81:116-124,1989)。KB-V1细胞对紫杉醇(>345倍)、长春新碱(>156倍)、秋水仙碱(116倍)、米托蒽醌(mitoxantrone)(77-fold)和阿霉素(>130倍)具有高度抗性。与亲本KB系相比,本发明的实例6显示IC50的4.6倍变化(表2)。此表明实例6几乎不能由P-糖蛋白识别且因此其克服P-糖蛋白介导的对杀细胞的抵抗。在SRB细胞毒性分析程序中所测试的实例4(表3)具有的比率为99,相比于相同分析中的紫杉醇而言比率>1,360,这表明虽然实例4与实例6相比显示由P-糖蛋白的更好识别,但是其同样不如紫杉醇中的识别。
表2
在用KB、KB-8.5和KB-VI进行的MTS细胞毒性标准药理试验程序中的本发明实例6和参考化合物的活性
实例或参考化合物 | IC50(nM)1 | 比率2 | |||
KB | KB 8.5 | KB VI | 8.5/KB | VI/KB | |
6 | 44 | 63 | 204 | 1.4 | 4.6 |
紫杉醇 | 2.9 | 56 | >1,000 | 19 | >345 |
长春新碱 | 6.4 | 72 | >1,000 | 11 | >156 |
秋水仙碱 | 18 | 59 | 2,038 | 3.4 | 116 |
喜树碱 | 24 | 33 | 39 | 1.4 | 1.6 |
米托蒽醌 | 25 | 27 | 1,927 | 1.1 | 77 |
阿霉素 | 23 | 70 | >3,000 | 3.0 | >130 |
1IC50值为两个独立实验的平均值。
2比率=KB8.5或KB VI细胞的IC50/KB细胞的IC50。比率为约1表明无抵抗。
表3
用KB、KB-8.5和KB-VI细胞进行的SRB细胞毒性标准药理试验程序中的本发明实例4和紫杉醇的活性
实例或参考化合物 | IC50 | 比率2 | |||
KB | KB8.5 | KB VI | 8.5/KB | VI/KB | |
4 | 24 | 59 | 2387 | 2.5 | 99 |
紫杉醇 | 2.2 | 34 | >3000 | 16 | >1360 |
1IC50值为两个独立实验的平均值。
2比率=KB8.5或KB VI细胞的IC50/KB细胞的IC50。比率为约1表明无抵抗。
1.3.用HL-60和HL-60/ADR细胞
HL-60/ADR细胞过度表达多药物抗性蛋白MRP1,其介导对某些化疗剂的抵抗(Gottesman,M.M.,Fojo,T.,and Bates,S.E.Multidrug resistance in cancer:role ofATP-dependent transporters.Nature Rev.Cancer,2:48-58,2002)。将本发明实例6和参考化合物对HL-60/ADR的IC50值与对敏感性亲本HL-60系的值相比较。表4中所示的结果表明尽管HL-60/ADR细胞显示对长春新碱(8.2倍)、秋水仙碱(7.4倍)、米托蒽醌(17倍)和阿霉素(93倍)的抵抗,而这些细胞对实例6未显示抵抗。此表明实例6不能由MRP1所识别且因此克服通过此转运子所介导的细胞抵抗。
表4
用HL-60和HL-60/ADR细胞进行的MTS细胞毒性标准药理试验程序中的本发明实例6和参考化合物的活性
实例或参考化合物 | IC50(nM)1 | 比率2 | |
HL-60 | HL-60/ADR | ||
6 | 53 | 29 | 0.55 |
紫杉醇 | 5.7 | 6.4 | 1.1 |
长春新碱 | 2.5 | 20 | 8.2 |
秋水仙碱 | 9.3 | 69 | 7.4 |
喜树碱 | 12 | 17 | 1.4 |
米托蒽醌 | 9.5 | 161 | 17 |
阿霉素 | 23 | 2,085 | 93 |
1IC50值为两个独立实验的平均值。
2比率=HL-60/ADR细胞的IC50/HL-60细胞的IC50。比率为约1表明无抵抗。
1.4.用S1和S1-M1细胞
S1-M1细胞过度表达MXR转运子,其介导对某些化疗剂的抵抗(Gottesman,M.M.,Fojo,T.,and Bates,S.E.Miltidrug resistance in cancer:role of ATP-dependent transporters.Nature Rev.Cancer,2:48-58,2002)。将本发明的实例6和参考化合物对S1-M1的IC50值与对敏感性亲本S1系的值相比较。表5中所示的结果表明尽管S1-M1细胞显示对米托蒽醌、(>300倍)和阿霉素(74倍)的抵抗,而其对实例6未显示出抵抗。此表明实例6不能由MXR所识别且因此克服通过此转运子所介导的细胞抵抗。
表5
用S1和S1-M1细胞进行的MTS细胞毒性标准药理试验程序中的本发明实例6和参考化合物的活性
实例或参考化合物 | IC50(nM)1 | 比率2 | |
S1 | S1-M1 | ||
6 | 63 | 68 | 1.1 |
紫杉醇 | 8.1 | 4.4 | 0.54 |
长春新碱 | 5.6 | 4.6 | 0.82 |
秋水仙碱 | 18 | 60 | 3.3 |
喜树碱 | 8.9 | 17 | 1.9 |
米托蒽醌 | 10 | >3,000 | >300 |
阿霉素 | 34 | 2,517 | 74 |
1IC50值为两个独立实验的平均值。
2比率=S1-M1细胞的IC50/S1细胞的IC50。比率为约1表明无抵抗。
2.化合物对富含MAP和纯的微管蛋白聚合的活体外作用
在此分析中,用富含MAP的微管蛋白进行的对照反应显示特征为三相的S形吸收曲线:第一,在无吸收度变化发生的停滞相;第二,其中吸收度增加的聚合相;和第三,其中吸收度达到最大且极少或无进一步变化发生的平坦相。诸如紫杉醇和多烯紫杉醇的聚合反应增强剂会缩短或消除停滞相,增加聚合相的速度且常会增加平坦相的高度。诸如长春新碱和秋水仙碱的聚合反应抑制剂会减缓或阻止吸收度增加。本发明的实例6对聚合反应具有紫杉烷样作用。此已在表6中通过将各样品在20分钟时的平均A340除以在20分钟时的对照物A340以得到相对于对照物的倍数增强而定量表示出来。紫杉醇和多烯紫杉醇分别显示1.8和5.4的增强因子。本发明的实例6具有1.7的增强因子。相反,长春新碱具有0.5的增强因子,这是由于其部分抑制富含MAP的微管蛋白的聚合反应。
表6
在用富含MAP的微管蛋白进行的微管蛋白聚合标准药理试验程序中的本发明的实例6和参考化合物的活性
实例或参考化合物 | A340化合物A340对照物 |
6 | 1.7 |
紫杉醇 | 1.8 |
多烯紫杉醇 | 5.4 |
长春新碱 | 0.5 |
对照物 | 1.0 |
不含添加的GTP的纯微管蛋白在对照反应中未显示出聚合。多烯紫杉醇和紫杉醇能够在这些条件下诱发纯微管蛋白的聚合反应。本发明的实例6也以类似于多烯紫杉醇的方式诱发不含GTP的纯微管蛋白的聚合反应。表7显示在开始反应之后就单一化合物浓度而言在4个时间点的平均吸收度。在此浓度(24.3μM)下,多烯紫杉醇和实例6引起在反应的第一个5分钟到平坦相之内吸收度的快速增加。微管去稳定剂长春新碱和秋水仙碱在此分析中未显示出活性。
表7
在用纯微管蛋白进行的微管蛋白聚合标准药理试验程序中的本发明的实例6和参考化合物的活性
实例或参考化合物 | 在以下时间点的A340 | ||||
0min | 5min | 10min | 15min | 20min | |
6 | 0 | 0.15 | 0.19 | 0.19 | 0.19 |
多烯紫杉醇 | 0 | 0.20 | 0.20 | 0.20 | 0.20 |
长春新碱 | 0 | 0.01 | 0.01 | 0 | 0 |
秋水仙碱 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
对照物 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
化合物与微管蛋白的结合
本发明的化合物所结合的在高度纯化的牛脑微管蛋白上的位点是由用放射性配体进行的[3H]长春碱、[3H]秋水仙碱和[3H]紫杉醇的竞争性抑制研究来确定。表8中所示的结果表明实例6抑制[3H]长春碱与微管蛋白杂二聚体的结合(17%对照),但却不抑制[3H]秋水仙碱与微管蛋白杂二聚体或[3H]紫杉醇与微管的结合。此为一个强有力的证据:此实例结合于微管蛋白的长春花/肽位点而非秋水仙碱或紫杉烷位点。在所测试的对照化合物中,长春新碱抑制[3H]长春碱结合而不抑制[3H]秋水仙碱,且秋水仙碱抑制[3H]秋水仙碱结合而不抑制[3H]长春碱。长春新碱和秋水仙碱也表现出抑制[3H]紫杉醇与微管的结合;然而,这不是由于结合竞争性而是由于[3H]紫杉醇所结合的微管的解聚反应。显而易见,本发明的实例6并不减少[3H]紫杉醇与微管的结合,这表明其不与[3H]紫杉醇竞争结合且不解聚[3H]紫杉醇所结合的微管。
表8
在竞争性结合标准药理试验程序中的本发明实例6和参考化合物的活性1
竞争剂 | 放射性配体 | |||||
[3H]长春碱 | [3H]秋水仙碱 | [3H]紫杉醇 | ||||
平均2 | SD2 | 平均2 | SD2 | 平均3 SD3 | ||
对照物 | 100 | 100 | 100 | |||
实例6 | 17 | 1.7 | 84 | 3.5 | 92 | 6.5 |
长春新碱 | 5 | 1.0 | 99 | 7.9 | 22 | 0.9 |
秋水仙碱 | 125 | 12.6 | 6 | 1.9 | 19 | 0.2 |
紫杉醇 | 92 | 7.8 | 93 | 12.3 | 35 | 1.6 |
1结果表示为在无竞争剂情况下对照物结合的百分数。
2数据来自1(4个同样的样品)或2(8个同样的样品)个独立实验。
2数据来自1到4个独立实验(3到12个同样的样品)。
本发明的化合物显示对于培养中的多人类癌细胞系的有效细胞毒性,所述细胞系包括由于药物转运子过度表达而对紫杉醇和长春新碱具有抗性的细胞系。所述化合物以类似于紫杉烷而不同于诸如长春花属生物碱和秋水仙碱的解聚物的抑制作用的方式提高富含MAP的微管蛋白聚合反应的初始速率。其也在GTP不存在时诱发纯微管蛋白的聚合反应。本发明的化合物结合到微管蛋白的长春花/肽位点。
以下实例进一步说明本发明。然而,应了解,本发明不仅受限于以下所给出的特定实例。
实例1
制备5-氮杂环庚烷-1-基-7-氯-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶
步骤A:5,7-二氯-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶
将2-(2,4,6-三氟苯基)丙二酸二乙酯(US 6,156,925)(870mg,3.0mmol)、2-氨基咪唑(Hel.Acta.Chim.76,2066(1993))(274mg,3.3mmol)和1.0ml三丁胺的混合物于氮气氛中在160℃下搅拌0.5小时且冷却到室温。将混合物溶解于乙酸乙酯中且将有机层以1.0N氢氯酸(×3)和饱和氯化钠洗涤,经硫酸镁干燥且浓缩。将残余物溶解于乙酸乙酯中(5ml)且向此溶液中添加己烷(50ml)。将沉淀物通过过滤收集,以己烷洗涤以产生呈棕黄色固体的6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5,7-二醇(180mg)。MS:m/z 279.9(M-H)。
将6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5,7-二醇(180mg)于1ml氧氯化磷中的混合物于回流中加热6小时。将过量的氧氯化磷于真空中移除且将所得残余物溶解于二氯甲烷中。将有机层以水洗,经硫酸镁干燥且浓缩。将残余物经由硅胶层析,以己烷中的10%乙酸乙酯到己烷中的33%乙酸乙酯的梯度洗提。浓缩以提供呈白色固体的5,7-二氯-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶(62mg)。MS:m/z 318.0(M+H)。
步骤B:5-氮杂环庚烷-1-基-7-氯-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶
将5,7-二氯-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶(16mg,0.05mmol)和环己亚胺(100mg,1.0mmol)于1ml二氯甲烷中的溶液于室温下搅拌16小时。将有机溶液以0.1N氢氯酸和饱和氯化钠洗涤,经硫酸镁干燥且浓缩。将残余物经由硅胶层析,以己烷中的20%乙酸乙酯到己烷中的50%乙酸乙酯的梯度洗提。浓缩以提供呈黄色固体的5-氮杂环庚烷-1-基-7-氯-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶(15mg,熔点106-108℃)。MS:m/z 381.0(M+H)。
类似于实例1来合成实例2。
实例2
7-氯-5-哌啶-1-基-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶;MS:m/z 367.3(M+H)
实例3
制备7-氯-N-(2,2,2-三氟乙基)-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺;
将5,7-二氯-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶(16mg,0.05mmol)和2,2,2-三氟乙胺(200mg,2.0mmol)于1mL N,N-二甲基甲酰胺中的溶液在室温下搅拌16小时。添加饱和氯化钠溶液,且以乙酸乙酯萃取产物。将有机溶液以饱和氯化钠洗涤,经硫酸镁干燥且浓缩。将残余物经由硅胶层析,以己烷中的20%乙酸乙酯到己烷中的50%乙酸乙酯的梯度洗提。浓缩以提供呈白色固体的7-氯-N-(2,2,2-三氟乙基)-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺(16mg,熔点155-157℃)。MS:m/z 381.0(M+H)。
实例4
制备7-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2,6-二氟苯基}-N-(2,2,2-三氟乙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺;
在室温下向7-氯-N-(2,2,2-三氟乙基)-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺(19mg,0.05mmol)和3-二甲氨基-1-丙醇(51mg,0.5mmol)于0.5ml二甲亚砜中的溶液中添加氢化钠(于矿物油中60%,20mg,0.5mmol)。将混合物于50℃下加热30分钟,且冷却到室温。添加饱和氯化钠溶液,且以乙酸乙酯萃取产物。将有机溶液以饱和氯化钠洗涤(×3),经硫酸镁干燥且浓缩。将残余物经由硅胶层析,以乙酸乙酯中到乙酸乙酯中的30%甲醇梯度洗提。浓缩以提供呈棕黄色固体的7-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2,6-二氟苯基}-N-(2,2,2-三氟乙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺(12mg。熔点52-55℃)。MS:m/z 464.3(M+H)。
实例5
7-氯-5-环庚基-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶
步骤A:3-环庚基-3-氧代-2-(2,4,6-三氟苯基)丙酸乙酯
于50℃下将2,4,6-三氟苯基乙酸(570mg,3.0mmol)、碘乙烷(1.56g,10mmol)和碳酸钾(1.38g,10mmol)于5mL二甲亚砜中的混合物搅拌3小时,且冷却到室温。将混合物在二乙醚和水之间分溶。将有机层以水和饱和氯化钠洗涤,经硫酸镁干燥且经由酸式硅酸镁(magnesol)过滤。浓缩滤液以产生呈淡黄色油状的2,4,6-三氟苯基乙酸乙酯(581mg,2.66mmol)。
将环庚烷羧酸(5.0g,35.2mmol)于25mL亚硫酰二氯中的混合物回流1小时,且浓缩。将由此获得的粗环庚烷羧酸氯化物直接用于下一步骤中。
将三氟苯基乙酸乙酯(436mg,2.0mmol)于3mL四氢呋喃中的溶液冷却到-78℃,且逐滴添加二异丙基胺锂(2.0M于庚烷/四氢呋喃/乙苯中,1.0mL,2.0mmol)并伴随搅拌。将混合物于-78℃下搅拌1小时,且逐滴添加环庚烷羧酸氯化物(321mg,2.0mmol)。将混合物温到室温且以2mL 1.0N氢氯酸来酸化。以乙酸乙酯萃取产物。将有机层以饱和氯化钠洗涤,经硫酸镁干燥且浓缩。将残余物经由硅胶层析,以己烷到于己烷中的10%乙酸乙酯梯度洗提。浓缩以提供呈无色油状的3-环庚基-3-氧代-2-(2,4,6-三氟苯基)丙酸乙酯(410mg)。MS:m/z 341.2(M-H)。
步骤B:7-氯-5-环庚基-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶;
于160℃下将3-环庚基-3-氧代-2-(2,4,6-三氟苯基)丙酸乙酯(342mg,1.0mmol)、2-氨基咪唑(Helv.Acta.Chim.76,2066(1993))(83mg,1.0mmol)和0.5mL三丁胺的混合物于氮气氛下搅拌1.5小时且冷却到室温。将混合物溶解于乙酸乙酯中且将有机层以1.0N氢氯酸(×2)和饱和氯化钠洗涤,经硫酸镁干燥且浓缩以产生呈黑色油状的粗5-环庚基-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-7-醇(294mg)。
将以上5-环庚基-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-7-醇(294mg)于2mL氧氯化磷中的混合物于回流中加热6小时。于真空中移除过量的氧氯化磷,且将所得残余物溶解于二氯甲烷中。将有机层以水洗涤,经硫酸镁干燥且浓缩。将残余物经由硅胶层析,以己烷中的10%乙酸乙酯到己烷中的33%乙酸乙酯的梯度洗提。浓缩以提供呈白色固体的7-氯-5-环庚基-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶(24mg)。MS:m/z 380.2(M+H)。
实例6
3-[4-(7-氯-5-环庚基咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-基)-3,5-三氟苯氧基]-N,N-二甲基丙-1-胺;
于160℃下将3-环庚基-3-氧代-2-(2,4,6-三氟苯基)丙酸乙酯(342mg,1.0mmol)、2-氨基咪唑(Hel.Acta.Chim.76,2066(1993))(83mg,1.0mmol)和0.5mL三丁胺的混合物于氮气氛中搅拌1.5小时且冷却到室温。将混合物溶解于乙酸乙酯中且将有机层以1.0N氢氯酸(×2)和饱和氯化钠洗涤,经硫酸镁干燥且浓缩以产生呈黑色油状的粗5-环庚基-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-7-醇。
在室温下向上述5-环庚基-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-7-醇和3-二甲氨基-1-丙醇(206mg,2.0mmol)于3.0ml二甲亚砜中的溶液中添加氢化钠(60%于矿物油中,80mg,2.0mmol)。将混合物于40℃下加热2小时且冷却到室温。添加饱和氯化钠溶液,且以乙酸乙酯萃取产物。将有机溶液以饱和氯化钠(×3)洗涤,经硫酸镁干燥且浓缩。向残余物中添加5mL氧氯化磷和2ml N,N-二乙基苯胺,且将混合物于110℃下加热1小时。于真空中移除过量的氧氯化磷,且将所得残余物在乙酸乙酯和5%碳酸钠溶液之间分溶。将有机层以饱和氯化钠洗涤,经硫酸镁干燥且浓缩。将残余物经由硅胶层析,以乙酸乙酯到乙酸乙酯中的20%甲醇的梯度洗提。浓缩以提供呈棕色油状的3-[4-(7-氯-5-环庚基咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-基)-3,5-三氟苯氧基]-N,N-二甲基丙-1-胺(24mg)。MS:m/z 463.3(M+H)。
在US 6.156,925中2-(2,4,6-三氟苯基)丙二酸二乙酯。如Helv.Acta.Chim.76,2066(1993)中所述来制备2-氨基咪唑。
Claims (58)
1.一种由式(I)表示的化合物:
其中:
R1选自
和C6-C8环烷基;
R2为下式:
R3为H或C1-C3烷基;
R4为H或C1-C3烷基;或
当R3和R4视情况连接在一起时形成6到8元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以C1-C3烷基取代;
R5为H、C1-C3烷基或C1-C3氟烷基;
Y为式-O(CH2)nQ;
n为2、3或4的整数;
Q为-OH或-NR6R7;
R6和R7独立为H或C1-C3烷基;或
当R6和R7视情况与R6和R7各自所连接的氮原子连接在一起时形成4到6元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以R8取代;
R8为C1-C3烷基;
L1、L2、L3和L4各自独立为H、F、Cl、Br或CF3;
X为Cl或Br;
或其医药上可接受的盐。
3.根据权利要求1或2所述的化合物,其中n为3。
4.根据权利要求1到3中任一权利要求所述的化合物,其中Q为-NR6R7。
5.根据权利要求4所述的化合物,其中R6为甲基且R7为H或甲基。
6.根据权利要求1到5中任一权利要求所述的化合物,其中L1和L4为F。
7.根据权利要求1到6中任一权利要求所述的化合物,其中L2和L3为H。
8.根据权利要求1到7中任一权利要求所述的化合物,其中X为Cl。
9.根据权利要求1到8中任一权利要求所述的化合物,其中R3为H或甲基。
10.根据权利要求1到9中任一权利要求所述的化合物,其中R4为H。
11.根据权利要求1到10中任一权利要求所述的化合物,其中R5为CF3。
12.根据权利要求1到11中任一权利要求所述的化合物,其中式(I)是由下式(Ia)来表示:
14.根据权利要求13所述的化合物,其中:
R2为
X为Cl;
n为3;
Y为-O(CH2)nQ;
Q为-NR6R7;
R3为H或甲基;
R4为H;
R5为CF3;
R6为甲基;
R7为H或甲基;
L1和L4为F;
L2和L3为H;
或其医药上可接受的盐。
15.根据权利要求1到11中任一权利要求所述的化合物,其中式(I)是由下式(Ib)来表示:
或其医药上可接受的盐。
18.根据权利要求1到8中任一权利要求所述的化合物,其中R1为C6-C8环烷基,或其医药上可接受的盐。
20.根据权利要求1所述的化合物,其选自下列群组:
7-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2,6-二氟苯基}-N-(2,2,2-三氟乙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺,
3-[4-(7-氯-5-环庚基咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-基)-3,5-二氟苯氧基]-N,N-二甲基丙-1-胺,
7-氯-6-{4-[4-(二甲氨基)丁氧基]-2,6-二氟苯基}-N-(2,2,2-三氟乙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺,
N-{3-[4-(7-氯-5-环己基咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-基)-3,5-二氟苯氧基]丙基}-N,N-二甲胺,
7-氯-6-{2,6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-(2,2,2-三氟-1-甲基乙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺和
7-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2,6-二氟苯基}-N-(2,2,2-三氟-1-甲基乙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺;
或其医药上可接受的盐。
21.根据权利要求4所述的化合物,其选自下列群组:
7-氯-6-{2,6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺和
7-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2,6-二氟苯基}-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺或其医药上可接受的盐。
22.根据权利要求1所述的化合物,其选自下列群组:
7-氯-6-{2,6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺和
7-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2,6-二氟苯基}-N-[(1R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺或其医药上可接受的盐。
23.一种通过投以有效量的根据权利要求1到22中任一权利要求所述的式(I)的化合物或其医药上可接受的盐来治疗或抑制需要其的哺乳动物中癌肿瘤细胞生长和相关疾病的方法。
24.一种促进含有微管蛋白系统中的微管蛋白聚合的方法,其包含使所述含有微管蛋白的系统与有效量的根据权利要求1到22中任一权利要求所述的式(I)的化合物或其医药上可接受的盐接触。
25.一种使含有微管蛋白的系统中的微管稳定的方法,其包含使所述含有微管蛋白的系统与有效量的根据权利要求1到22中任一权利要求所述的式(I)的化合物或其医药上可接受的盐接触。
26.一种治疗或预防需要其的哺乳动物中表现多重抗药性(MDR)或由于MDR而具有抗性的肿瘤的方法,所述方法包含向所述哺乳动物投以有效量的根据权利要求1到22中任一权利要求所述的式(I)的化合物或其医药上可接受的盐。
27.一种医药组合物,其包含根据权利要求1到22中任一权利要求所述的化合物或其医药上可接受的盐连同医药上可接受的载剂。
28.一种治疗或抑制需要其的哺乳动物中癌肿瘤细胞生长和相关疾病的方法,其包含投以有效量的式(II)的化合物:
其中:
R1选自
和C6-C8环烷基;
R2为下式:
R3为H或C1-C3烷基;
R4为H或C1-C3烷基;或
R3和R4视情况连接在一起形成6到8元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以C1-C3烷基取代;
R5为H、C1-C3烷基或C1-C3氟烷基;
Y为H、F、Cl或式-O(CH2)nQ;
n为2、3或4的整数;
Q为-OH或-NR6R7;
R6和R7独立为H或C1-C3烷基;或
当R6和R7视情况与R6和R7各自所连接的氮原子连接在一起时形成4到6元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以R8取代;
R8为C1-C3烷基;
L1、L2、L3和L4各自独立为H、F、Cl、Br或CF3;
X为Cl或Br;
或其医药上可接受的盐。
29.一种促进含有微管蛋白的系统中的微管蛋白聚合的方法,其包含使所述含有微管蛋白的系统与有效量的根据权利要求28所定义的式(II)的化合物或其医药上可接受的盐接触。
30.一种促进含有微管蛋白的系统中的微管蛋白聚合的方法,其包含使所述含有微管蛋白的系统与有效量的根据权利要求28所定义的式(II)的化合物或其医药上可接受的盐接触。
31.一种治疗或预防需要其的哺乳动物中表现多重抗药性(MDR)或由于MDR而具有抗性的肿瘤的方法,其包含投以有效量的根据权利要求28所定义的式(II)的化合物或其医药上可接受的盐。
32.一种治疗、抑制需要其的哺乳动物中肿瘤生长或根除肿瘤的方法,其中所述肿瘤对至少一种化疗剂具有抗性,所述方法包含向所述哺乳动物提供有效量的根据权利要求28所定义的式(II)的化合物或其医药上可接受的盐。
33.根据权利要求28到32中任一权利要求所述的方法,其中R2为下式:
或投以其医药上可接受的盐。
34.根据权利要求28到33中任一权利要求所述的方法,其中n为3。
35.根据权利要求28到34中任一权利要求所述的方法,其中Q为-NR6R7。
36.根据权利要求28到35中任一权利要求所述的方法,其中R6为甲基且R7为H或甲基。
37.根据权利要求28到36中任一权利要求所述的方法,其中L1和L4为F。
38.根据权利要求28到37中任一权利要求所述的方法,其中L1和L4为H。
39.根据权利要求28到38中任一权利要求所述的方法,其中X为Cl。
40.根据权利要求28到39中任一权利要求所述的方法,其中R3为H或甲基。
41.根据权利要求28到40中任一权利要求所述的方法,其中R4为H。
42.根据权利要求28到41中任一权利要求所述的方法,其中R5为CF3。
43.根据权利要求28到42中任一权利要求所述的方法,其中式(I)是由下式(Ia)表示:
45.根据权利要求28到38中任一权利要求所述的方法,其中R1为C6-C8环烷基或投以其医药上可接受的盐。
47.根据权利要求28到41中任一权利要求所述的方法,其中式(II)是由式(IIb)来表示:
或投以医药上可接受的盐。
49.根据权利要求28到32中任一权利要求所述的方法,其中所述化合物选自下列群组:
5-氮杂环庚烷-1-基-7-氯-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶,
7-氯-5-哌啶-1-基-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶,
7-氯-N-(2,2,2-三氟乙基)-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-5-胺,和
7-氯-5-环庚基-6-(2,4,6-三氟苯基)咪唑并[1,2-a]嘧啶,
或其医药上可接受的盐。
50.一种医药组合物,其包含式(II)的化合物:
其中:
R1选自
R2为下式:
R3为H或C1-C3烷基;
R4为H或C1-C3烷基;或
R3和R4视情况连接在一起形成6到8元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以C1-C3烷基取代;
R5为H、C1-C3烷基或C1-C3氟烷基;
Y为H、F、Cl;
n为2、3或4的整数;
Q为-OH或-NR6R7;
R6和R7独立为H或C1-C3烷基;或
当R6和R7视情况与R6和R7各自所连接的氮原子连接在一起时形成4到6元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以R8取代:
R8为C1-C3烷基;
L1、L2、L3和L4各自独立为H、F、Cl、Br或CF3;
X为Cl或Br;
或其医药上可接受的盐连同医药上可接受的载剂。
51.一种制备式(I)的化合物的方法:
其中:
R1选自
R2为下式:
R3为H或C1-C3烷基;
R4为H或C1-C3烷基;或
R3和R4视情况连接在一起形成6到8元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以C1-C3烷基取代;
R5为H、C1-C3烷基或C1-C3氟烷基;
Y为式-O(CH2)nQ;
n为2、3或4的整数;
Q为-OH或-NR6R7;
R6和R7独立为H或C1-C3烷基;或
当R6和R7视情况与R6和R7各自所连接的氮原子连接在一起时形成4到6元饱和杂环,其具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以R8取代;
R8为C1-C3烷基;
L1、L2、L3和L4各自独立为H、F、Cl、Br或CF3;
X为Cl或Br;
或其医药上可接受的盐,
所述方法包含使下式的化合物:
其中L5为离去基,在强碱存在下视情况在非质子性溶剂存在下与其中Y为O的式HY-(CH2)nNR6R7的化合物反应以得到式(I)的化合物。
52.根据权利要求51所述的方法,其中所述离去基为F。
53.根据权利要求51或52所述的方法,其中所述强碱选自碱金属氢氧化物、碱金属碳酸盐和碱金属氢化物。
54.根据权利要求51到53中任一权利要求所述的方法,其中所述非质子性溶剂选自二甲亚砜和二甲基甲酰胺。
55.一种制备下式(I)的化合物的方法:
其中:
R1为C6-C8环烷基;
R2为
Y为式-O(CH2)nQ;
n为2、3或4的整数;
Q为-NR6R7;
R6和R7独立为H或C1-C3烷基;或
当R6和R7视情况与R6和R7各自所连接的氮原子连接在一起时形成4到6元饱和杂环,该杂环具有1-2个氮原子、0-1个氧原子和0-1个硫原子,且视情况以R8取代;
R8为C1-C3烷基;
L1、L2、L3和L4各自独立为H、F、Cl、Br或CF3;
X为Cl或Br;
或其医药上可接受的盐,
所述方法包含以下步骤:
a)使下式的酯:
其中L5为离去基,在叔胺存在下在非质子性溶剂中与2-氨基咪唑反应以提供式(V)的化合物:
b)使化合物(V)与式HO(CH2)nQ的醇在强碱存在下在溶剂中反应以得到化合物(VI):
c)以POX3卤化化合物(VI)以得到式(I)的化合物:
其中:
R1为C6-C8环烷基;
L1和L4各自独立为H、F、Cl、Br或CF3;
L2和L3各自为H;
X为Cl或Br;
Q为-NR6R7。
56.根据权利要求55所述的方法,其中所述碱选自碱金属氢氧化物、碱金属碳酸盐和碱金属氢化物。
57.根据权利要求55或56所述的方法,其中所述溶剂选自二甲亚砜和二甲基甲酰胺。
58.一种治疗、抑制需要其的哺乳动物中的肿瘤生长或根除肿瘤的方法,其中所述肿瘤对至少一种化疗剂具有抗性,所述方法包含向所述哺乳动物提供有效量的根据权利要求1到22中任一权利要求所述的化合物。
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US6117876A (en) | 1997-04-14 | 2000-09-12 | American Cyanamid Company | Fungicidal trifluorophenyl-triazolopyrimidines |
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WO1999048893A1 (en) | 1998-03-23 | 1999-09-30 | American Cyanamid Company | Fungicidal 6-(2-halo-4-alkoxyphenyl)-triazolopyrimidines |
US6284762B1 (en) | 1998-03-23 | 2001-09-04 | American Cyanamid Company | Fungicidal 6-(2-halo-4-alkoxyphenyl)-triazolopyrimidines |
US5981534A (en) | 1998-09-25 | 1999-11-09 | American Cyanamid Company | Fungicidal 6-(2,6-difluoro-4-alkoxyphenyl)-triazolopyrimidines |
US6268371B1 (en) | 1998-09-10 | 2001-07-31 | American Cyanamid Co. | Fungicidal mixtures |
US6117865A (en) | 1998-09-10 | 2000-09-12 | American Cyanamid Company | Fungicidal trifluorophenyl-triazolopyrimidines |
JP2000103790A (ja) | 1998-09-25 | 2000-04-11 | American Cyanamid Co | 殺菌・殺カビ性のトリハロフェニル―トリアゾロピリミジン類 |
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