CN1833169A - 测量对象物测量器具、测量装置和测量方法 - Google Patents

测量对象物测量器具、测量装置和测量方法 Download PDF

Info

Publication number
CN1833169A
CN1833169A CNA2004800227397A CN200480022739A CN1833169A CN 1833169 A CN1833169 A CN 1833169A CN A2004800227397 A CNA2004800227397 A CN A2004800227397A CN 200480022739 A CN200480022739 A CN 200480022739A CN 1833169 A CN1833169 A CN 1833169A
Authority
CN
China
Prior art keywords
measuring object
object thing
test portion
binder
piezoelectric vibrator
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CNA2004800227397A
Other languages
English (en)
Inventor
三池彰
角田春树
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hitachi Chemical Diagnostics Systems Co Ltd
Original Assignee
Kyowa Medex Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Kyowa Medex Co Ltd filed Critical Kyowa Medex Co Ltd
Publication of CN1833169A publication Critical patent/CN1833169A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

根据本发明,提供一种测量对象物测量用器具和使用该器具的试料中的测量对象物的定量方法,该测量对象物测量用器具,在试料中的测量对象物可借助于展开液的毛细流而移动的支持体上具有试料添加部位(S)和检出部位(Q),其特征在于,该检出部位具有被2个电极夹着的压电振子,在该压电振子上预先固定了捕捉剂A(c1)或测量对象物类似物(c1’),在该支持体上具有可借助于展开液的毛细流而移动地保持了黏合剂(b1)的黏合剂保持部位(BR)。

Description

测量对象物测量器具、测量装置和测量方法
技术领域
本发明涉及用于测量生物试料、食品、土壤等分析对象试料中含有的测量对象物的器具、装置和方法。
背景技术
用于测量试料中的测量对象物的方法之一是免疫色层分析法(イムノクロマトグラフイ一)所涉及的测量法。免疫色层分析法可根据其测量原理分为流通型(フロ一スル一型)和横流型(ラテラルフロ一型),不过,近几年,横流型的免疫色层分析法成为主流。关于横流型的免疫色层分析法,例如有人报告了使用在同一平面上的由可借助于毛细流来互相连接的第1部分和第2部分构成的免疫色层分析法用装置的试料中的测量对象物的测量法(例如,参照特开平1-63865号公报,特开平10-73592号公报)。
此处,该第1部分是含有可移动地受到支撑的示迹器的试料添加部位,该示迹器例如由对以着色核糖体、着色聚合物空心颗粒等标识进行了标识的测量对象物具有特异性的配体构成,该第2部分是含有被固定化了的结合剂,可视地检出该不溶性小胞记号的存否的部位,该结合剂对测量对象物具有特异性,以在第2部分结合了的示迹器被可视化的量存在。
还有人报告了使用免疫色层分析法用装置的试料中的测量对象物的测量法(例如,特开平1-32169号公报),该免疫色层分析法用装置含有第1部分和第2部分,第1部分含有在准可溶性蛋白质的存在下含浸胶体粒子标识物质而干燥了的东西,第2部分含有测量对象物和胶体粒子标识物质结合所得的固定化试剂。
然而,这些方法都是可视地检出试料中的测量对象物的测量方法,因而专用于定性分析或半定量分析,不能适用于定量分析。因此,现有免疫色层分析法所涉及的测量,其应用范围限于妊娠判断等非常有限的范围(例如,参照特表平1-503174号公报)。
另一方面,使用水晶振子等压电振子的定量分析和定性分析是公知的。本方法是利用抗原-抗体间的互相作用、互补性核酸间的互相作用,在水晶振子上生成复合体,把与复合体生成伴随的质量变化作为水晶振子的振动数的变化来进行捕捉的方法。到现在为止,有人报告了例如使用在水晶振子上被固定化了的蛋白质A来检出试料中的IgG的方法(例如,参照「分析化学(Analytical Chemistry)」,美国化学会,1987年,第59卷,第23号,2760-2763页),使用在水晶振子上被固定化了的试样DNA来检出试料中的靶核酸的方法等(例如,参照特开平1-35269号公报)。
近几年,随着检验方法的迅速化、多样化的发展,从在被检者的近旁采取试料,直到测量结果的输出,这样进行的床边检验(ポイントオブケアテステイング)(POCT)盛行起来了,因而期盼可对应POCT的可定量分析的测量装置和测量方法的开发。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于对生物试料等试料中包含的测量对象物迅速且简便、精度很好地进行定量分析的器具、装置和方法。
本发明与以下的(1)~(35)有关。
(1)一种测量对象物测量用器具,在试料中的测量对象物可借助于展开液的毛细流而移动的支持体上具有试料添加部位(S)和检出部位(Q),其特征在于,该检出部位具有被2个电极夹着的压电振子,在该压电振子上预先固定了捕捉剂A(c1)或测量对象物类似物(c1’),在该支持体上具有保持了黏合剂(b1),使其可借助于展开液的毛细流而移动的黏合剂保持部位(BR)。
(2)上述(1)记载的器具,其中,该黏合剂保持部位设置在该试料添加部位和该检出部位之间。
(3)上述(1)记载的器具,其中,该黏合剂保持部位夹隔该检出部位而设置在该试料添加部位的相反侧。
(4)一种测量对象物测量用器具,在试料中的测量对象物可借助于展开液的毛细流而移动的支持体上具有试料添加部位(S)和检出部位(Q),其特征在于,该检出部位由被2个电极间夹着的压电振子构成,在该压电振子上预先固定了与测量对象物结合的捕捉剂A(c1),或是标识化测量对象物类似物或测量对象物和黏合剂的复合物,以及与测量对象物或测量对象物类似物和标识化黏合剂结合的捕捉剂B(c3),在该支持体上具有保持了黏合剂(b1),使其可借助于展开液的毛细流而移动的黏合剂保持部位(BR),而且在该支持体上具有在该黏合剂保持部位和检出部位之间固定了测量对象物类似物(b5),使其不会借助于展开液的毛细流而移动,或在该支持体上保持了测量对象物类似物(b5),使其可借助于展开液的毛细流而移动的测量对象物类似物固定部位(DF)或测量对象物类似物保持部位(DR)。
(5)上述(1)~(4)中的任意一种记载的器具,其中,黏合剂是被标识了的东西。
(6)一种测量对象物测量用器具,在试料中的测量对象物可借助于展开液的毛细流而移动的支持体上具有试料添加部位(S)和检出部位(Q),其特征在于,该检出部位具有被2个电极夹着的压电振子,在该压电振子上预先固定了黏合剂(c2),在该支持体上具有保持了测量对象物类似物(b2),使其可借助于展开液的毛细流而移动的测量对象物类似物保持部位(DR)。
(7)上述(6)记载的器具,其中,该测量对象物类似物保持部位设置在该试料添加部位和该检出部位之间。
(8)上述(6)记载的器具,其中,该测量对象物类似物保持部位夹隔该检出部位而设置在该试料添加部位的相反侧。
(9)一种测量对象物测量用器具,在试料中的测量对象物可借助于展开液的毛细流而移动的支持体上具有试料添加部位(S)和检出部位(Q),其特征在于,该检出部位由被2个电极间夹着的压电振子构成,在该压电振子上预先固定了捕捉剂B(c3),在该支持体上具有保持了测量对象物类似物(b2)和黏合剂(b3),使其可借助于展开液的毛细流而移动的测量对象物类似物保持部位(DR)和黏合剂保持部位(BR)。
(10)一种测量对象物测量用器具,在试料中的测量对象物可借助于展开液的毛细流而移动的支持体上具有试料添加部位(S)和检出部位(Q),其特征在于,该检出部位具有被2个电极间夹着的压电振子,在该压电振子上预先固定了与测量对象物结合的黏合剂(c2),在该支持体上具有保持了测量对象物类似物(b2),使其可借助于展开液的毛细流而移动的测量对象物类似物保持部位(DR),而且在该支持体上具有在该测量对象物类似物保持部位和检出部位之间的支持体中固定了黏合剂(b4),使其不会借助于展开液的毛细流而移动的黏合剂固定部位(BF)。
(11)上述(6)~(10)中的任意一种记载的器具,其中,测量对象物类似物是被标识了的东西。
(12)上述(5)或(11)记载的器具,其中,该标识是不溶性小胞体。
(13)上述(12)记载的器具,其中,该不溶性小胞体是金属胶体或胶乳。
(14)一种测量对象物测量用器具,在试料中的测量对象物可借助于展开液的毛细流而移动的支持体上具有试料添加部位(S)和检出部位(Q),其特征在于,该检出部位由被2个电极间夹着的压电振子构成,在该压电振子上固定了捕捉剂A(c1)、测量对象物类似物(c1′)、黏合剂(c2)或捕捉剂B(c3)。
(15)上述(1)~(14)中的任意一种记载的器具,其中,还含有展开液吸收部位(d)。
(16)上述(1)~(15)中的任意一种记载的器具,其中,在该检出部位,除了固定了捕捉剂A(c1)、测量对象物类似物(c1′)、黏合剂(c2)或捕捉剂B(c3)的被2个电极夹着的压电振子以外,还具有另一个被2个电极夹着的压电振子,该压电振子未固定捕捉剂A(c1)、测量对象物类似物(c1′)、黏合剂(c2)和捕捉剂B(c3)中的任何一种。
(17)上述(1)~(16)中的任意一种记载的器具,其中,该压电振子是水晶振子。
(18)一种测量对象物测量装置,具有:上述(1)~(17)中的任意一种记载的器具;与该器具的压电振子的电极连接,测量该压电振子的振动数的振动数测量电路;以及与该振动数测量电路连接,根据振动数来运算测量对象物浓度的浓度运算电路。
(19)一种试料中的测量对象物的定量方法,根据与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合而产生的该压电振子的振动数的变化,对试料中的测量对象物进行定量,其特征在于,在压电振子上预先固定了捕捉剂A(c1)或测量对象物类似物(c1′),采用试料中的测量对象物和黏合剂可借助于展开液的毛细流而移动的支持体,向该捕捉剂A或该测量对象物类似物供给试料和该黏合剂,使其与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合。
(20)上述(19)记载的定量方法,其中,借助于相同方向的毛细流对该捕捉剂A或该测量对象物类似物供给该试料和该黏合剂。
(21)上述(19)记载的定量方法,其中,借助于相反方向的毛细流对该捕捉剂A或该测量对象物类似物供给该试料和该黏合剂。
(22)一种试料中的测量对象物的定量方法,根据与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合而产生的该压电振子的振动数的变化,对试料中的测量对象物进行定量,其特征在于,在压电振子上预先固定了捕捉剂A(c1)或捕捉剂B(c3),采用固定了测量对象物类似物(b5),使其不会借助于展开液的毛细流而移动,而试料中的测量对象物和黏合剂(b1)可借助于展开液的毛细流而移动的支持体,向该捕捉剂A或捕捉剂B供给试料和该黏合剂,使其与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合。
(23)一种试料中的测量对象物的定量方法,根据与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合而产生的该压电振子的振动数的变化,对试料中的测量对象物进行定量,其特征在于,在压电振子上预先固定了捕捉剂A(c1)或捕捉剂B(c3),采用试料中的测量对象物、黏合剂(b1)和测量对象物类似物(b5)可借助于展开液的毛细流而移动的支持体,向该捕捉剂A或捕捉剂B供给试料、该黏合剂和该测量对象物类似物,使其与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合。
(24)上述(17)~(23)中的任意一种记载的方法,其中,黏合剂是被标识了的东西。
(25)一种试料中的测量对象物的定量方法,根据与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合而产生的该压电振子的振动数的变化,对试料中的测量对象物进行定量,其特征在于,在压电振子上预先固定了黏合剂(c2),采用试料中的测量对象物和测量对象物类似物(b2)可借助于展开液的毛细流而移动的支持体,向该黏合剂供给试料和该测量对象物类似物,使其与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合。
(26)上述(25)记载的定量方法,其中,借助于相同方向的毛细流对该黏合剂供给该试料和该测量对象物类似物。
(27)上述(25)记载的定量方法,其中,借助于相反方向的毛细流对该黏合剂供给该试料和该测量对象物类似物。
(28)一种试料中的测量对象物的定量方法,根据与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合而产生的该压电振子的振动数的变化,对试料中的测量对象物进行定量,其特征在于,在压电振子上预先固定了捕捉剂B(c3),采用试料中的测量对象物、测量对象物类似物(b2)和黏合剂(b3)可借助于展开液的毛细流而移动的支持体,向该捕捉剂B供给试料、该测量对象物类似物和该黏合剂,使其与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合。
(29)一种试料中的测量对象物的定量方法,根据与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合而产生的该压电振子的振动数的变化,对试料中的测量对象物进行定量,其特征在于,在压电振子上预先固定了黏合剂(c2),采用固定了黏合剂(b4),使其不会借助于展开液的毛细流而移动,而试料中的测量对象物和测量对象物类似物(b2)可借助于展开液的毛细流而移动的支持体,向该黏合剂供给试料和测量对象物类似物,使其与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合。
(30)上述(25)~(29)中的任意一种记载的方法,其中,测量对象物类似物是被标识了的东西。
(31)上述(24)或(30)记载的定量方法,其中,该标识是不溶性小胞体。
(32)上述(31)记载的定量方法,其中,该不溶性小胞体是金属胶体或胶乳。
(33)一种试料中的测量对象物的定量方法,根据与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合而产生的该压电振子的振动数的变化,对试料中的测量对象物进行定量,其特征在于,在压电振子上预先固定了捕捉剂A(c1),采用试料中的测量对象物可借助于展开液的毛细流而移动的支持体,向该捕捉剂A供给试料,使其与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合。
(34)上述(17)~(29)中的任意一种记载的方法,其中,再采用未固定捕捉剂A(c1)、测量对象物类似物(c1′)、黏合剂(c2)和捕捉剂B(c3)中的任何一种的第二压电振子,向捕捉剂A(c1)、测量对象物类似物(c1′)、黏合剂(c2)或捕捉剂B(c3)被固定化了第一压电振子和第二压电振子供给试料,作为对照来使用第二振动数。
(35)上述(19)~(34)中的任意一种记载的方法,其中,压电振子是水晶振子。
本发明的试料中的测量对象物测量用器具和试料中的测量对象物测量方法是免疫色层分析法用器具和使用了免疫色层分析法用器具的方法,其特征在于,作为检出器具和检出方法,分别利用了压电振子和使用它的检出方法。本发明的特征在于,使在设置在支持体上的试料添加部位添加了的试料借助于展开液的毛细流而在支持体上移动,最终在位于检出部位的压电振子上形成复合体,作为振动数的变化来检出复合体形成量。
在本发明中使用的试料没有特别限制,例如可以是全血、血浆、血清、脐带血、髓液、唾液、羊水、尿、汗、胰液、眼泪等生物试料及食品、土壤等。还有,在这些生物试料中添加水媒介或有机溶剂、上述水媒介和上述有机溶剂的混合溶剂等而稀释了的东西也可以作为试料来使用。
作为水媒介,只要能溶解生物试料,没有特别限制,例如可以是脱离子水、蒸馏水、缓冲液等,不过,优选的是缓冲液。缓冲液用的缓冲剂只要具有缓冲能力即可,没有特别的限定,可以是pH1~11的例如乳酸缓冲剂、柠檬酸缓冲剂、醋酸缓冲剂、琥珀酸缓冲剂、酞酸缓冲剂、磷酸缓冲剂、三乙醇胺缓冲剂、二乙醇胺缓冲剂、赖氨酸缓冲剂、巴比土酸缓冲剂、三(羟甲基)氨基甲烷缓冲剂、咪唑缓冲剂、苹果酸缓冲剂、草酸缓冲剂、甘氨酸缓冲剂、硼酸缓冲剂、碳酸缓冲剂、甘氨酸缓冲剂、古德(グツド)缓冲剂等。作为古德缓冲剂,例如可以是2-吗啉乙磺酸(MES)、双(2-羟乙基)亚氨基三(羟甲基)甲烷(Bis-Tris)、N-(2-乙酰胺)亚氨二醋酸(ADA)、哌嗪-N,N’-双(2-乙磺酸)(PIPES)、N-(2-乙酰氨基)-2-氨基乙磺酸(ACES)、3-吗啉基-2-羟基丙磺酸(MOPSO)、N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸(BES)、3-吗啉丙磺酸(MOPS)、N-[三(羟甲基)甲基]-2-氨基乙磺酸(TES)、2-[4-(2-羟乙基)-1-哌嗪]乙磺酸(HEPES)、3-[N,N-双(2-羟乙基)氨基]-2-羟基丙磺酸(DIPSO)、N-三(羟甲基)甲氨基-2-羟基丙磺酸(TAPSO)、哌嗪-N,N’-双(2-羟基乙磺酸)(POPSO)、3-[4-(2-羟乙基)-1-哌嗪]-2-羟基丙磺酸(HEPPSO)、3-[4-(2-羟乙基)-1-哌嗪]丙磺酸[(H)EPPS],N-[三(羟甲基)甲基]甘氨酸(Tricine)、N,N-双(2-羟乙基)甘氨酸(Bicine)、N-三(羟甲基)甲基-3-胺基丙磺酸(TAPS)、N-环己基-2-胺基乙磺酸(CHES)、N-环己基-3-氨基-2-羟基丙磺酸(CAPSO)、N-环己基-3-胺基丙磺酸(CAPS)等。缓冲液的浓度只要是适合测量的浓度即可,没有特别的限制,不过,优选的是0.001~2.0mol/L,更优选的是0.005~1.0mol/L,特别优选的是0.01~0.1mol/L。
作为有机溶剂,可以是乙腈、己烷、甲醇、乙醇、二氯甲烷、氯仿、丙酮、二甲基甲酰胺、二氧六圜和二甲基亚砜等。
还有,对于食品、土壤,经过预处理之后也可以作为试料来使用。此处,食品、土壤的预处理例如可以是上述水媒介或上述有机溶剂、上述水媒介和上述有机溶剂的混合溶剂等适当的溶剂所涉及的对食品、土壤中的成分的提取、化学修饰等。
作为化学修饰,例如可以是食品、土壤中的成分的化学试剂所涉及的构造变换等。
在本发明中作为测量对象物,只要是与特定的物质特异性地形成复合体的东西即可,没有特别的限制,例如可以是用酵素反应来测量的成分、用抗原抗体反应来测量的成分、通过其它特别的反应来测量的成分等。
作为通过酵素反应而被测量的生物成分,例如可以是葡萄糖、1,5-脱水山梨醇、糖白蛋白、血红蛋白A1c、岩藻糖、尿素、尿酸、氨、肌酸酐、总胆固醇、游离胆固醇、高密度脂蛋白中的胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白中的胆固醇(LDL-C)、超低密度脂蛋白中的胆固醇(VLDL-C)、残样脂蛋白中的胆固醇(RLP-C)、甘油三酸酯、磷脂、总蛋白、白蛋白、球蛋白、胆红素、胆汁酸、硅铝带酸、乳酸、丙酮酸、游离脂肪酸、甘油三酸酯、胺基代丙酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酸磷酸激酶(CPK)、磷酸激酶(PK)、淀粉酶、脂酶、胆碱酯酶、γ-谷氨酰转酞酶、亮氨酸氨酞酶、L-乳酸脱氢酵素(LDH)、醛缩酶、碱磷酸酶、酸磷酸酶、N-乙酰氨基葡萄糖酶、鸟嘌呤酶、单胺氧化酶等。
作为通过抗原抗体反应而被测量的成分,例如可以是IgG、IgM、IgA、IgE、阿朴蛋白AI、阿朴蛋白AII、阿朴蛋白B、阿朴蛋白E、风湿因子、D-二聚体、氧化LDL、糖化LDL、糖白蛋白、三典甲状腺胺酸(T3)、总四典甲状腺原胺酸(T4)、药剂(抗癫痫剂等)、C-反应性蛋白(CRP)、细胞分裂素类、α-甲胎蛋白(AFP)、癌胎儿性抗原(CEA)、CA19-9(糖链抗原(carbohydrate antigen)19-9)、CA15-3(糖蛋白抗原(carbohydrate antigen)15-3)、CA-125(糖链抗原(carbohydrateantigen)125)、PIVKA-II(异常凝血酶原II(Protein induced by vitamin Kabsence-II))、甲状旁腺荷尔蒙(PTH)、绒毛膜促性腺素激素(hCG)、甲状腺刺激荷尔蒙(TSH)、胰岛素、C-肽、雌激素、抗谷氨酸脱碳酸酵素(GAD)抗体、胃蛋白酶原、HBV抗原、抗B型肝炎病毒(HBV)抗体、C型肝炎病毒(HCV)抗原、抗HCV抗体、成人T细胞性白血病病毒1形式(HTLV-I)抗原、抗HTLV-I抗体、人免疫不全病毒(HIV)抗体、流行性感冒病毒抗原、抗流行性感冒病毒抗体、抗结核菌抗体、结核菌抗原(TBGL)、枝原体抗体、血红蛋白A1c、心房性钠利尿肽(ANP)、脑损伤性钠利尿肽(BNP)、肌钙蛋白T、肌钙蛋白I、肌酸磷酸激酶-MB(CK-MB)、肌红蛋白、H-FABP(人心脏原来脂肪酸结合蛋白)、霉毒类[脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON),雪腐镰刀菌烯醇(NIV),T-2毒素(T2)等]、内分泌搅乱物质类[双酚A,壬基苯酚,邻苯二甲酸二丁酯,多氯化联苯(PCB)类,二氧芑类,滴滴涕,丁蜗锡等]、大肠菌等菌类、蛋、奶、小麦、荞麦、花生等食物过敏物质及口那摇扁虱(コナヒヨウダニ)、头亚摇扁虱(トヤヒヨウダニ)等扁虱类等过敏物质、抗过敏物质抗体等。
作为通过其它特异性结合而被测量的成分,可以是核酸、植物凝血素等,例如可以是对ras等癌遗传基因、p53等癌抑制遗传基因等进行编码的DNA或RNA、肽核酸、适体、糖蛋白等。
在本发明的测量对象物测量器具中,试料添加部位(S)、支持体(e)和检出部位(Q)设置在基材上,可以根据需要而设置展开液添加部位(B)、展开液吸收部位(d)等。
本发明中的支持体(e)是通过展开液的毛细流来联结试料添加部位(S)和检出部位(Q)的东西,是根据需要,进一步联结添加含有或不含有黏合剂、标识化黏合剂、测量对象物类似物或标识化测量对象物类似物等的展开液的展开液添加部位(B)的东西,只要是使试料中的测量对象物可借助于展开液的毛细流而在试料添加部位和检出部位,根据需要,和展开液添加部位之间移动,并且可根据需要而使标识化黏合剂、标识化测量对象物类似物、黏合剂和测量对象物类似物与展开液一起移动地保持或固定的东西即可,没有特别限制。
作为试料添加部位(S)和支持体(e)的材质,可以相同或者不同,例如可以是玻璃纤维、纤维素、尼龙、交联葡聚糖、各种色层分析法用纸、硝化纤维素等,优选的是硝化纤维素。
作为展开液,例如可以是上述水媒介或有机溶剂等。
在本发明中,可与展开液一起移动地保持或固定在支持体上或者固定在水晶振子上的黏合剂,只要是与测量对象物特异性地结合的东西即可,没有特别限制,例如可以是由抗原和与该抗原特异性地结合的抗体或适体构成的组合中的任意一方要素、由糖类和对该糖类的植物凝血素构成的组合中的任意一方要素、由DNA和与该DNA互补性的DNA构成的组合中的任意一方要素。
在本发明中,作为固定在支持体或压电振子上或者使之与标识结合而保持在可与展开液一起移动的支持体上的测量对象物类似物,只要是对于黏合剂,与试料中的测量对象物竞争性地进行反应即可,没有特别限制,例如可以是含有对测量对象物本身、黏合剂的表位的物质等。
在本发明中,作为与黏合剂或测量对象物类似物结合的标识,只要是能作为振动数的变化量而检出压电振子上生成了的复合体即可,没有特别限制,不过,优选的是质量大的标识。作为质量大的标识,例如可以是不溶性小胞体等。作为不溶性小胞体,例如可以是金属胶体、胶乳等。作为金属胶体,例如可以是金胶体等。作为金胶体的粒子径,优选的是1~500nm,更优选的是10~100nm。作为胶乳的粒子径,优选的是1~2000nm,更优选的是50~500nm。
在本发明中,可与展开液一起移动地保持在支持体上的标识化黏合剂只要是与测量对象物特异性地结合,并且发送依赖于在压电振子上生成了的含有标识化黏合剂的复合体的量的信息即可,没有特别限制。在本发明中,可与展开液一起移动地保持在支持体上的标识化测量对象物类似物只要是与黏合剂特异性地结合,并且发送依赖于在压电振子上生成了的含有标识化测量对象物类似物的复合体的量的信息即可,没有特别限制。
黏合剂或测量对象物类似物和标识可以物理地结合,也可以化学地结合。作为物理的结合,例如可以是物理吸着等。作为化学结合,例如可以是共价结合、非共价结合等。作为非共价结合,例如可以是静电性结合、氢结合、疏水结合、配位结合等。作为使标识和黏合剂或测量对象物类似物通过共价结合而结合来调制标识化黏合剂的方法,例如可以是采用2价性的交联剂等交联剂,通过交联剂使标识和黏合剂结合的方法。
在本发明中,在试料中的测量对象物的检出部位使用的压电振子,只要是由具有压电效应的结晶构成的东西即可,没有特别限制,作为结晶,例如可以是水晶、罗谢尔盐、电子石等的结晶、钽酸锂(LiTaO2)、铌酸锂(LiNbO3)等氧化物单晶或氧化锌(ZnO)等,优选的是水晶。
优选的是,压电振子与适当的振动数测量电路联结,使得能通过显示等来检出压电振子的振动数,而且优选的是,与根据检出了的振动数的变化来运算测量对象物浓度的浓度运算电路联结。作为压电振子,只要是被电极夹着的压电振子即可,没有特别限制,作为水晶振子,例如可以采用由精工·东京电波或亿尼夏木(イニシアム)公司制的水晶振子构成的传感器芯片。
本发明的器具中具有固定了黏合剂、捕捉剂A、捕捉剂B或测量对象物类似物的第一压电振子,不过优选的是,除了第一压电振子之外,还具有对于黏合剂、捕捉剂A、捕捉剂B和测量对象物类似物全都不固定的第二压电振子的东西。
作为复合体,只要是与压电振子上的黏合剂、捕捉剂A、捕捉剂B或测量对象物类似物特异性地结合而形成的东西即可,例如可以是根据三明治法生成的复合体或根据竞争法生成的复合体等。作为复合体的具体方式,例如可以是具有捕捉剂A-测量对象物-标识化黏合剂的构成的复合体、测量对象物类似物-标识化黏合剂、黏合剂-标识化测量对象物类似物、捕捉剂B-黏合剂-标识化测量对象物类似物、捕捉剂B-标识化黏合剂-测量对象物、捕捉剂A-测量对象物等。
在本发明中,在压电振子上被固定化的捕捉剂A只要是与测量对象物结合,通过其自身、测量对象物和标识化黏合剂参与的三明治反应,能生成三明治型复合体(捕捉剂A-测量对象物-标识化黏合剂)即可,没有特别限制。标识化黏合剂上的测量对象物识别部位和捕捉剂A上的测量对象物识别部位可以相同,不过优选的是不同。作为捕捉剂A,例如可以是与作为测量对象物的抗原结合的抗体、与由作为测量对象物的单链DNA和互补性的被标识了的DNA结合而获得的双链DNA特异性地结合的物质或单链DNA等。
在本发明中,在压电振子上被固定化的捕捉剂B是与标识化测量对象物类似物或测量对象物和黏合剂的复合体,以及,测量对象物或测量对象物类似物和标识化黏合剂的复合体进行结合,不过,只要是不生成把测量对象物夹在中间的三明治型复合体即可,没有特别限制。作为捕捉剂B,例如可以是对与作为测量对象物的抗原结合的抗体的Fc区域进行识别的抗体等。
在压电振子上的黏合剂、捕捉剂A、捕捉剂B或测量对象物类似物的固定化,只要是捕捉剂A、捕捉剂B或测量对象物类似物被固定化,在借助于展开液的毛细流而移动出了支持体的液体通过压电振子时不移动即可,没有特别限制,可以物理地或化学地结合,作为物理的结合,例如可以是物理吸着等,作为化学的结合,例如可以是共价结合、氢结合、疏水结合、配位结合等。具体而言,可以是通过使巯化了的捕捉剂A、巯化了的捕捉剂B或巯化了的测量对象物类似物与压电振子上的金电极结合来进行固定化的方法。
在本发明中,可以在支持体上作为展开液添加部位来设置保持黏合剂或标识化黏合剂,或者测量对象物类似物或标识化测量对象物类似物的部位。作为用于展开液添加部位的材料,只要是使得试料中的测量对象物可借助于展开液的毛细流而在试料添加部位和支持体之间移动,并且可根据需要而使标识化黏合剂、标识化测量对象物类似物、黏合剂和测量对象物类似物与展开液一起移动地保持或固定的东西即可,没有特别限制。
作为展开液添加部位的材质,可以与试料添加部位和支持体的材质相同或不同,例如可以是玻璃纤维、纤维素、尼龙、交联葡聚糖、各种色层分析法用纸、硝化纤维素等,优选的是硝化纤维素。
在本发明中,为了吸收·保持含有不被在压电振子上被固定化了的黏合剂、捕捉剂A、捕捉剂B或测量对象物类似物捕捉的成分的展开液,可以在支持体上设置展开液吸收部位(d)。可以在展开液吸收部位使用吸水性高分子化合物。作为吸水性高分子化合物,例如可以是纤维素、玻璃纤维、棉花、聚氨基甲酸酯等。
振动数测量电路可以与本发明的测量对象测量器具的2个电极联结起来使用,只要是能检出压电振子的振动数的东西即可,没有特别限制,可以使用公知的东西。优选的是振动数测量电路中具有显示振动数的显示部,不过,也可以没有显示部。作为浓度运算电路,可以与该振动数测量电路联结起来使用,只要是依据用已知浓度的标准品获得振动数的数据,根据用未知浓度的试料获得的振动数来计算浓度的东西,没有特别限制,可以使用公知的东西。优选的是该浓度运算电路中具有显示振动数的显示部,不过,也可以没有显示部。
优选的是,振动数测量电路和浓度运算电路在本发明的测量对象物测量用器具内组装成一体,不过,也可以构成为独立于联结了振动数测量电路或浓度运算电路的振动数测量电路的部件。
作为振动数测量电路和浓度运算电路,可以是亿尼夏木公司制的阿飞尼可思(アフイニクス)Q中使用的恒温测量部和数据处理装置等。优选的是,在该运算电路中组装了表示结果的显示板。
使用了用于检量线制作的已知浓度的标准品的测量可以采用同一测量对象物测量用装置,时间序列地进行,不过优选的是,采用组合多个测量对象物测量用装置而构成的装置,同时进行试料中的测量对象物的测量和标准试料的测量。再有,在同一支持体上并置了2个压电振子的器具,一方压电振子采用固定了捕捉剂A(c1)、测量对象物类似物(c1′)、黏合剂(c2)或捕捉剂B(c3)的第一压电振子,另一方压电振子采用对于捕捉剂A(c1)、测量对象物类似物(c1′)、黏合剂(c2)和捕捉剂B(c3)全都没固定的第二压电振子,在根据第一压电振子的振动数的变化来求出试料中的测量对象物浓度时,扣除第二压电振子的振动数的变化来进行补正,这种方法是特别优选的。
作为测量试料中的测量对象物和标准品时的反应温度,只要是能进行特异性反应的条件即可,没有特别限制,不过,通常在0~100℃进行,优选的是10~60℃,更优选的是20~40℃。
本发明的测量对象物测量用装置中可以含有用于判别试料被确实添加了这一点的控制线。控制线通常使用免疫色层分析法中使用的东西,在支持体上和压电振子上都能形成,不过,优选的是在支持体上形成。作为控制线,可以是以下方式。在试料为生物试料的场合,可以是含有可移动地保持了在与白蛋白等蛋白质结合的2次抗体上结合了酵素、荧光物质、发光物质等功能性物质的功能性物质结合2次抗体的支持体上的部位和与生物试料中含有的白蛋白等蛋白质结合的1次抗体被固定化了的支持体上的部位的控制线。作为试料,生物试料被确实添加的话,试料中的白蛋白等蛋白质到达控制线,在该控制线上通过三明治反应而形成复合体(含有1次抗体、白蛋白等蛋白质和标识化2次抗体的复合体)。例如采用比色法、荧光法、发光法来检出该复合体中的功能性物质,就能确认试料添加的有无。
还有,在标识化黏合剂与试料在相同方向在支持体上移动,在压电振子上形成三明治型复合体的场合,例如可以是检出压电振子上未被捕捉的标识化黏合剂的控制线。作为这样的控制线,例如可以是在支持体上任意的位置固定了与标识化黏合剂结合的捕捉剂的控制线。试料被确实添加的话,未被压电振子捕捉的标识化黏合剂就被该控制线捕捉。用该控制线捕捉标识化黏合剂的话,由于标识化黏合剂中的标识(例如金胶体粒子、着色胶乳等),控制线就会着色,因而就能以目测来判定试料是否被添加了。控制线优选的是例如相对于检出部位设置在试料添加部位的相反侧的支持体上。
测量对象物、标识化测量对象物类似物和黏合剂的比率没有特别限制,不过,优选的是设定为0~1,000,000∶1∶1~1,000,000,更优选的是0~1,000∶1∶1~1,000。
以下,具体地说明本发明的试料中的测量对象物浓度测量用装置和测量方法。
图1是表示本发明的测量对象物测量用器具的具体方式的一个例子的概略图,图1(a)是俯视图,图1(b)是侧视图。
该器具在基材上设置了试料添加部位(S)、支持体(e)和具有被2个电极夹着的水晶振子的检出部位(Q),该试料添加部位、支持体和检出部位由上部盖子覆盖,可借助于展开液的毛细流而移动地被联结。在水晶振子上固定了捕捉剂A、测量对象物类似物、黏合剂或捕捉剂B。试料添加部位可以采用与支持体相同的素材,也可以不同。在试料添加部位,在上部盖子上,为能添加试料而设置了孔。基材的材质没有特别限制,不过,优选的是采用树脂。水晶振子的2个电极可与外部连接。
图2是表示本发明的测量对象物测量用器具的具体方式的一个例子的概略图,图2(a)是俯视图,图2(b)是侧视图。
该器具在基材上设置了试料添加部位(S)、展开液添加部位(B)、支持体(e)和具有被2个电极夹着的水晶振子的检出部位(Q),该试料添加部位、展开液添加部位、支持体和检出部位由上部盖子覆盖,可借助于展开液的毛细流而移动地被联结。另外,试料添加部位和展开液添加部位可以采用与支持体相同的素材,也可以不同。在试料添加部位,在上部盖子上,为能添加试料而设置了孔。还有,展开液添加部位可以设置孔,也可以不设置。还有,在展开液添加部位可以设置黏合剂不会借助于展开液的毛细流而移动地被固定在支持体上的黏合剂固定部位、黏合剂可借助于展开液的毛细流而移动地被保持的黏合剂保持部位、测量对象物类似物不会借助于展开液的毛细流而移动地被固定在支持体上的测量对象物类似物固定部位或测量对象物类似物可借助于展开液的毛细流而移动地被保持的测量对象物类似物保持部位。基材的材质没有特别限制,不过,优选的是采用树脂。
图3是表示本发明的测量对象物测量用器具的具体方式的一个例子的概略图,图3(a)是俯视图,图3(b)是侧视图。
该器具在基材上设置了试料添加部位(S)、展开液添加部位(B)、支持体(e)、具有被2个电极夹着的水晶振子的检出部位(Q)和展开液吸收部位(d),该试料添加部位、展开液添加部位、支持体、检出部位和展开液吸收部位由上部盖子覆盖,可借助于展开液的毛细流而移动地被联结。另外,试料添加部位和展开液添加部位可以采用与支持体相同的素材,也可以不同。在试料添加部位,在上部盖子上,为能添加试料而设置了孔。还有,展开液添加部位可以设置孔,也可以不设置。还有,在展开液添加部位可以设置黏合剂不会借助于展开液的毛细流而移动地被固定在支持体上的黏合剂固定部位、黏合剂可借助于展开液的毛细流而移动地被保持的黏合剂保持部位、测量对象物类似物不会借助于展开液的毛细流而移动地被固定在支持体上的测量对象物类似物固定部位或测量对象物类似物可借助于展开液的毛细流而移动地被保持的测量对象物类似物保持部位。基材的材质没有特别限制,不过,优选的是采用树脂。展开液吸收部位可以使用吸水性高分子化合物。作为吸水性高分子化合物,例如可以是纤维素、玻璃纤维、棉花、聚氨基甲酸酯等。
图4是表示本发明的测量对象物测量用器具的具体方式的一个例子的概略图,图4(a)是俯视图,图4(b)是侧视图。
该器具在基材上设置了试料添加部位(S)、展开液添加部位(B)、支持体(e)、具有被2个电极夹着的水晶振子的检出部位(Q)、展开液吸收部位(d)和控制线,该试料添加部位、展开液添加部位、支持体、检出部位、展开液吸收部位和控制线由上部盖子覆盖,可借助于展开液的毛细流而移动地被联结。另外,试料添加部位和展开液添加部位可以采用与支持体相同的素材,也可以不同。在试料添加部位,在上部盖子上,为能添加试料而设置了孔。还有,展开液添加部位可以设置孔,也可以不设置。还有,在展开液添加部位可以设置黏合剂不会借助于展开液的毛细流而移动地被固定在支持体上的黏合剂固定部位、黏合剂可借助于展开液的毛细流而移动地被保持的黏合剂保持部位、测量对象物类似物不会借助于展开液的毛细流而移动地被固定在支持体上的测量对象物类似物固定部位或测量对象物类似物可借助于展开液的毛细流而移动地被保持的测量对象物类似物保持部位。基材的材质没有特别限制,不过,优选的是采用树脂。展开液吸收部位可以使用吸水性高分子化合物。作为吸水性高分子化合物,例如可以是纤维素、玻璃纤维、棉花、聚氨基甲酸酯等。
图5是表示本发明的测量对象物测量用器具的具体方式的一个例子的概略图,图5(a)是俯视图,图5(b)是侧视图。
该器具在基材上设置了试料添加部位(S)、展开液添加部位(B)、支持体(e)、具有被2个电极夹着的水晶振子的检出部位(Q)和展开液吸收部位(d),该试料添加部位、展开液添加部位、支持体、检出部位和展开液吸收部位由上部盖子覆盖,可借助于展开液的毛细流而移动地被联结。另外,试料添加部位和展开液添加部位可以采用与支持体相同的素材,也可以不同。在试料添加部位,在上部盖子上,为能添加试料而设置了孔。还有,展开液添加部位可以设置孔,也可以不设置。还有,在展开液添加部位可以设置黏合剂不会借助于展开液的毛细流而移动地被固定在支持体上的黏合剂固定部位、黏合剂可借助于展开液的毛细流而移动地被保持的黏合剂保持部位、测量对象物类似物不会借助于展开液的毛细流而移动地被固定在支持体上的测量对象物类似物固定部位或测量对象物类似物可借助于展开液的毛细流而移动地被保持的测量对象物类似物保持部位。基材的材质没有特别限制,不过,优选的是采用树脂。展开液吸收部位可以使用吸水性高分子化合物。作为吸水性高分子化合物,例如可以是纤维素、玻璃纤维、棉花、聚氨基甲酸酯等。设置了水晶振子插入空间,使得在检出部位插入的水晶振子可拆装。
图6是表示本发明的测量对象物测量用装置的具体方式的一个例子的概略图,图6(a)是俯视图,图6(b)是侧视图。
该装置在基材上设置了试料添加部位(S)、展开液添加部位(B)、支持体(e)、具有被2个电极夹着的水晶振子的检出部位(Q)和展开液吸收部位(d),该试料添加部位、展开液添加部位、支持体、检出部位和展开液吸收部位由上部盖子覆盖,可借助于展开液的毛细流而移动地被联结的器具通过该器具的水晶振子的电极而与具有振动数测量电路和浓度运算电路的振动数测量装置联结。
图7是表示本发明的测量对象物测量用装置的具体方式的一个例子的概略图,图7(a)是图7的外观俯视图,图7(b)是外观侧视图,图7(c)是除去了上部盖子的俯视图,图7(d)是除去了上部盖子的侧视图。
该装置在基材上设置了试料添加部位(S)、展开液添加部位(B)、支持体(e)、具有被2个电极夹着的水晶振子的检出部位(Q)和展开液吸收部位(d),该试料添加部位、展开液添加部位、支持体、检出部位和展开液吸收部位由上部盖子覆盖,可借助于展开液的毛细流而移动地被联结,在该器具的基材中,设置了具有振动数测量电路和浓度测量电路的振动数测量装置,该器具通过水晶振子的电极而与该装置联结。
图8示意地示例了试料添加部位(S)和展开液添加部位(B)的联结部。各个部件由可借助于展开液的毛细流而移动的不同的材质或同样的材质构成,例如可以配置成以第1方式、第2方式、第3方式、第4方式图示了的样态。
图9示意地示例了支持体(e)、检出部位(Q)和展开液吸收部位(d)的联结部。检出部位被压电振子插入,借助于上部盖子、支持体或压吸收性素材与压电振子的微小间隙,展开液就可借助于毛细流而从支持体移动到展开液吸收部位。吸收性素材可以与构成展开液吸收部位的素材相同。
图10是表示本发明的测量对象物测量用器具的具体方式的一个例子的俯视概略图。
该器具在基材上设置了试料添加部位(S)、展开液添加部位(B)、支持体(e)、具有被2个电极夹着的水晶振子的检出部位(Q)和展开液吸收部位(d),该试料添加部位、展开液添加部位、支持体、检出部位和展开液吸收部位由上部盖子覆盖,可借助于展开液的毛细流而移动地被联结。在该器具中,在检出部位,在水晶振子插入空间插入了两个水晶振子。
在该例子中,2个水晶振子相对于展开液的移动方向平行设置,不过,也可以对展开液的移动方向垂直设置2个水晶振子。
在一个水晶振子上固定了捕捉剂A(c1)、测量对象物类似物(c1′)、黏合剂(c2)或捕捉剂B(c3),而在另一个水晶振子上对于捕捉剂A(c1)、测量对象物类似物(c1′)、黏合剂(c2)和捕捉剂B(c3)都未固定。用该装置就能补正非特异性反应。
图11表示圆盘状地配置了1至n个的多个测量对象物测量器具而成的器具的例子。把试料和已知浓度的标准物质同时添加在试料添加部位,从而作成检量线,同时求出试料中的测量物质浓度。
图12表示长方形地配置了1至n个的多个测量对象物测量器具而成的器具的例子。把试料和已知浓度的标准物质同时添加在试料添加部位,从而作成检量线,同时求出试料中的测量物质浓度。
作为本发明的试料中的测量对象物测量用器具,例如可以有以下方式的方法。
作为测量对象物测量用器具的第1例(参照图13和图14),例如可以是设计成如下方式的试料中的测量对象物测量用器具:具有设置在含有测量对象物的试料可借助于展开液的毛细流而移动的支持体上的试料添加部位(S)、与测量对象物结合的黏合剂预先与标识结合而成并且可借助于展开液的毛细流而移动地保持在支持体上的标识化黏合剂(b1)以及与测量对象物结合的捕捉剂A(c1)被固定化了的压电振子或是测量对象物类似物(c1′)被固定化了的压电振子,试料和该标识化黏合剂借助于相同方向的毛细流而向在支持体上被固定在了压电振子上的捕捉剂A或测量对象物类似物移动。
优选的是,标识化黏合剂预先保持在支持体上的黏合剂保持部位(BR),不过,也可以是标识化黏合剂不保持在支持体上,而是作为配剂(キツト)而被供给的方式。还有,在该器具中,可以在试料添加部位和检出部位之间设置展开液添加部位。该标识化黏合剂可以根据需要而溶解于展开液,与试料一起或分别从试料添加部位,或从设置在试料添加部位和检出部之间的展开液添加部位,根据需要而溶解于展开液,与试料添加同时或在不同的时期添加使用。
此处,在压电振子上与测量对象物结合的捕捉剂A(c1)被固定化了的场合(参照图13),该器具可用于所有基于三明治测量法的原理的测量方法,在压电振子上与标识化黏合剂结合的测量对象物类似物(c1′)被固定化了的场合(参照图14),该装置可用于所有基于竞争测量法的原理的测量方法。另外,也可以使用未被标识的黏合剂,代替标识化黏合剂。
作为测量对象物测量用器具的第2例(参照图15和图16),例如可以是设计成如下方式的试料中的测量对象物测量用器具:具有设置在含有测量对象物的试料可借助于展开液的毛细流而移动的支持体上的试料添加部位(S)、与测量对象物结合的黏合剂预先与标识结合而成并且可借助于展开液的毛细流而移动地保持在支持体上的标识化黏合剂(b1)以及与测量对象物结合的捕捉剂A(c1)被固定化了的压电振子或是测量对象物类似物(c1′)被固定化了的压电振子,试料和该标识化黏合剂借助于相反方向的毛细流而向在支持体上被固定在了压电振子上的捕捉剂A或测量对象物类似物移动。
优选的是,标识化黏合剂预先保持在支持体上的黏合剂保持部位(BR),不过,也可以是标识化黏合剂不保持在支持体上,而是作为配剂而被供给的方式。还有,在该器具中,可以在试料添加部位和检出部位之间设置展开液添加部位。该标识化黏合剂可以根据需要而溶解于展开液,与试料一起或分别从试料添加部位,或从设置在试料添加部位和检出部之间的展开液添加部位,根据需要而溶解于展开液,与试料添加同时或在不同的时期添加使用。
此处,在压电振子上与测量对象物结合的捕捉剂A(c1)被固定化了的场合(参照图15),该器具可用于所有基于三明治测量法的原理的测量方法,在压电振子上与标识化黏合剂结合的测量对象物类似物(c1′)被固定化了的场合(参照图16),该装置可用于所有基于竞争测量法的原理的测量方法。另外,也可以使用未被标识的黏合剂,代替标识化黏合剂。
作为测量对象物测量用器具的第3例(参照图17或图18),例如可以是设计成如下方式的试料中的测量对象物测量用器具:具有设置在含有测量对象物的试料可借助于展开液的毛细流而移动的支持体上的试料添加部位(S)、与测量对象物结合的黏合剂预先与标识结合而成并且可借助于展开液的毛细流而移动地保持在支持体上的标识化黏合剂(b1)、与标识化黏合剂结合并且在支持体上被固定化了的或可移动地保持在支持体上的测量对象物类似物(b5)以及结合于与标识化黏合剂结合了的测量对象物的捕捉剂A(c1)被固定化了的压电振子,试料、该标识化黏合剂可借助于相同方向的毛细流在支持体上向被固定在了压电振子上的捕捉剂A或测量对象物类似物移动,并且,测量对象物类似物保持或固定在试料添加部位和检出部位之间的支持体上。
优选的是,测量对象物类似物固定在试料添加部位和检出部位之间的支持体上,标识化黏合剂预先保持在支持体上,不过,也可以是标识化黏合剂不保持在支持体上,而是作为配剂而被供给的方式。还有,在该器具中,可以在试料添加部位和检出部位之间设置展开液添加部位。该标识化黏合剂可以根据需要而溶解于展开液,与试料一起或分别从试料添加部位,或从设置在试料添加部位和黏合剂固定部位之间的展开液添加部位,根据需要而溶解于展开液,与试料添加同时或在不同的时期添加使用。
另外,也可以使用未被标识的黏合剂,代替标识化黏合剂。在该例子中,优选的是,测量对象物类似物(b5)和捕捉剂A(c1)是不产生特异性结合反应的组合。
作为测量对象物测量用器具的第4例(参照图19或图20),例如可以是设计成如下方式的试料中的测量对象物测量用器具:具有设置在含有测量对象物的试料可借助于展开液的毛细流而移动的支持体上的试料添加部位(S)、与测量对象物结合的黏合剂预先与标识结合而成并且可借助于展开液的毛细流而移动地保持在支持体上的标识化黏合剂(b1)、与标识化黏合剂结合并且在支持体上被固定化了的或可移动地保持在支持体上的测量对象物类似物(b5)以及与标识化黏合剂结合的捕捉剂B(c3)被固定化了的压电振子,试料、该标识化黏合剂可借助于相同方向的毛细流在支持体上向被固定在了压电振子上的捕捉剂B移动,并且,测量对象物类似物保持或固定在试料添加部位和检出部位之间的支持体上。
优选的是,测量对象物类似物固定在试料添加部位和检出部位之间的支持体上,标识化黏合剂预先保持在支持体上,不过,也可以是标识化黏合剂不保持在支持体上,而是作为配剂而被供给的方式。还有,在该器具中,可以在试料添加部位和测量对象物类似物的保持或固定部位之间设置展开液添加部位。该标识化黏合剂可以根据需要而溶解于展开液,与试料一起或分别从试料添加部位,或从设置在试料添加部位和黏合剂固定部位之间的展开液添加部位,根据需要而溶解于展开液,与试料添加同时或在不同的时期添加使用。
另外,也可以使用未被标识的黏合剂,代替标识化黏合剂。在该例子中,优选的是,测量对象物类似物(b5)和试料中的测量对象物是不同的物质的组合。
作为测量对象物测量用器具的第5例(参照图21),例如可以是设计成如下方式的试料中的测量对象物测量用器具:具有设置在含有测量对象物的试料可借助于展开液的毛细流而移动的支持体上的试料添加部位(S)、测量对象物类似物与标识结合而成并且可借助于毛细流而移动地保持在支持体上的标识化测量对象物类似物(b2)以及与测量对象物和标识化测量对象物类似物结合的捕捉剂(c2)被固定化了的压电振子,试料和标识化测量对象物类似物借助于相同方向的毛细流在支持体上向被固定在了压电振子上的捕捉剂移动。
优选的是,标识化测量对象物类似物预先保持在支持体上,不过,也可以是标识化测量对象物类似物不保持在支持体上,而是作为配剂而被供给的方式。还有,在该器具中,可以在试料添加部位和检出部位之间设置展开液添加部位。标识化测量对象物类似物可以根据需要而溶解于展开液,与试料一起或分别从试料添加部位,或从设置在试料添加部位和检出部之间的展开液添加部位,根据需要而溶解于展开液,与试料添加同时或在不同的时期添加使用。
作为测量对象物测量用器具的第6例(图22),例如可以是设计成如下方式的试料中的测量对象物测量用器具:具有设置在含有测量对象物的试料可借助于展开液的毛细流而移动的支持体上的试料添加部位(S)、测量对象物类似物与标识结合而成并且可借助于毛细流而移动地保持在支持体上的标识化测量对象物类似物(b2)以及与测量对象物和标识化测量对象物类似物结合的捕捉剂(c2)被固定化了的压电振子,试料和标识化测量对象物类似物借助于相反方向的毛细流在支持体上向被固定在了压电振子上的捕捉剂移动。
优选的是,标识化测量对象物类似物预先保持在相对于检出部位为试料添加部位的相反侧的支持体上,不过,也可以是标识化测量对象物类似物不保持在支持体上,而是分开的配剂的方式。还有,在该器具中,可以设置在相对于检出部位为试料添加部位的相反侧设置的展开液添加部位。在标识化测量对象物类似物预先保持在支持体上的场合,可以设置,也不可以设置展开液添加部位,不过,优选的是设置展开液添加部位。在该场合,可以从该展开液添加部位添加上述展开液,使该标识化测量对象物类似物向检出部位移动。在标识化测量对象物类似物未预先保持在支持体上的场合,设置展开液添加部位,标识化测量对象物类似物在与试料添加同时或在不同的时期从该展开液添加部位添加使用。
另外,也可以使用未被标识的黏合剂,代替标识化黏合剂。
作为测量对象物测量用器具的第7例(图23),例如可以是设计成如下方式的试料中的测量对象物测量用器具:具有设置在含有测量对象物的试料可借助于展开液的毛细流而移动的支持体上的试料添加部位(S)、测量对象物类似物与标识结合而成并且可借助于毛细流而移动地保持在支持体上的标识化测量对象物类似物(b2)、与测量对象物和测量对象物类似物结合而成并且可借助于毛细流而移动地保持在支持体上的黏合剂(b3)以及与标识化测量对象物类似物所结合了的黏合剂和测量对象物所结合了的黏合剂结合的捕捉剂B(c3)被固定化了的压电振子,试料、标识化测量对象物类似物和黏合剂借助于同一毛细流在支持体上向被固定在了压电振子上的捕捉剂B移动。
优选的是,标识化测量对象物类似物和黏合剂预先保持在支持体上,不过,也可以是从由标识化测量对象物类似物和黏合剂构成的群中选取的一个或二个不保持在支持体上,未被支持体保持的成分和该器具作为配剂被供给的方式。还有,在该器具中,可以在试料添加部位和检出部位之间设置展开液添加部位。标识化测量对象物类似物和黏合剂可以根据需要而溶解于展开液,与试料一起或分别从试料添加部位,或从设置在试料添加部位和检出部之间的展开液添加部位,根据需要而溶解于展开液,与试料添加同时或在不同的时期添加使用。
标识化测量对象物类似物被保持的部位和黏合剂被保持的部位只要位于试料添加部位和检出部位之间即可,可以是同一部位,也可以是不同部位。
作为测量对象物测量用器具的第8例(图24),例如可以是设计成如下方式的试料中的测量对象物测量用器具:具有设置在含有测量对象物的试料可借助于展开液的毛细流而移动的支持体上的试料添加部位(S)、测量对象物类似物与标识结合而成并且可借助于毛细流而移动地保持在支持体上的标识化测量对象物类似物(b2)、与测量对象物和测量对象物类似物结合并且在支持体上被固定化了的黏合剂(b4)以及与测量对象物和标识化测量对象物类似物结合的捕捉剂(c2)被固定化了的压电振子,试料和标识化测量对象物类似物借助于相同方向的毛细流在支持体上向被固定在了压电振子上的捕捉剂移动,并且,黏合剂固定在试料添加部位和检出部位之间的支持体上。
优选的是,黏合剂固定在试料添加部位和检出部位之间的支持体上,标识化测量对象物类似物预先保持在支持体上,不过,也可以是标识化测量对象物类似物不保持在支持体上,而是作为配剂而被供给的方式。还有,在该器具中,可以在试料添加部位和黏合剂固定部位之间设置展开液添加部位。标识化测量对象物类似物可以根据需要而溶解于展开液,与试料一起或分别从试料添加部位,或从设置在试料添加部位和黏合剂固定部位之间的展开液添加部位,根据需要而溶解于展开液,与试料添加同时或在不同的时期添加使用。
还有,在上述测量对象物测量器具的第1~8方式的各自中,如图10所示,也可以在检出部位并置2个压电振子,设置展开液吸收部位,如图4所示地设置控制线。
在检出部位具有2个压电振子的本发明的器具是特别优选的方式,在该场合,其特征在于,在一个压电振子上固定捕捉剂A(c1)、测量对象物类似物(c1′)、黏合剂(c2)或捕捉剂B(c3)中的任意一种,在另一压电振子上什么不固定。采用本器具能减少含有测量对象物的试料所产生的非特异性反应所引起的测量不正确,不会受到非特异性反应的影响,可进行正确的测量。
还有,控制线是用于确认目的反应发生了的部位,可以设置在支持体上的任意位置。在展开液吸收部位或支持体上的任意位置,例如使捕捉剂B固定,就能形成控制线。
在上述测量对象物测量器具的图13~24的例子中,如上所述,可以组装成联结了振动数测量电路或把振动数测量电路和浓度运算器联结起来的振动数测量电路的装置。
本发明的器具,其大小没有特别限制,不过,优选的是宽度0.01~30cm,长度0.1~30cm,厚度1~10,000μm,更优选的是宽度0.1~10cm,长度0.5~15cm,厚度10~1,000μm,特别优选的是宽度0.2~5cm,长度1.0~10cm,厚度50~500μm。
作为本发明的试料中的测量对象物的测量方法,例如可以是以下方式的方法。
作为测量方法的第1例(参照图13和图14),例如可以是包含以下工序的试料中的测量对象物的测量方法:(1)借助于相同方向的毛细流向在压电振子上被固定了的捕捉剂A(c1)或测量对象物类似物(c1′)供给试料中的测量对象物和与测量对象物结合的标识化黏合剂(b1)的工序;(2)使捕捉剂A和测量对象物类似物与标识化黏合剂和测量对象物反应,形成反应复合体的工序;(3)在反应开始后的任意时间测量压电振子的振动数的工序;以及(4)根据在(3)的工序中测量出的振动数和表示采用已知浓度的测量对象物作成了的振动数和浓度的关系的检量线,求出试料中的测量对象物的浓度的工序。
作为本测量方法,例如可以是使用上述测量用器具的第1例的方法。
在本测量方法中,可以是使试料中的测量对象物与标识化黏合剂一起在支持体上借助于毛细流而移动,也可以是使试料中的测量对象物和标识化黏合剂具有时间差而移动。作为使试料中的测量对象物与标识化黏合剂一起在支持体上借助于毛细流而移动的方法,例如可以是在试料添加时已经保持了标识化黏合剂的支持体上添加试料的方法、在试料添加部位添加混合试料和标识化黏合剂所得的混合液的方法等。作为使试料中的测量对象物和标识化黏合剂具有时间差而移动的方法,例如可以是在试料添加部位添加试料之后,在相同部位添加标识化黏合剂的方法等。
在采用捕捉剂A被固定化了的压电振子的场合,在压电振子上形成含有捕捉剂A、测量对象物和标识化黏合剂的复合体。另一方面,在采用测量对象物类似物被固定化了的压电振子的场合,在压电振子上形成含有测量对象物类似物和标识化黏合剂的复合体。
测量复合体被固定化了的压电振子的振动数,另一方面,预先测量试料中的测量对象物与标识化黏合剂一起在支持体上借助于毛细流而移动之前的压电振子的振动数,算出测量出的2个振动数的差(扣除空白振动数)。
可以根据该扣除空白振动数和采用预先已知浓度的测量对象物的溶液而作成了的检量线(表示测量对象物的浓度和扣除空白振动数的关系的检量线),测量试料中的测量对象物浓度。
作为测量方法的第2例(参照图15和图16),例如可以是包含以下工序的试料中的测量对象物的测量方法:(1)测量对象物和标识化黏合剂借助于毛细流而在支持体上,向与结合了标识化黏合剂的测量对象物结合的捕捉剂A被固定化了的压电振子,或与标识化黏合剂结合的测量对象物类似物被固定化了的压电振子,在相反方向移动的工序;(2)在与结合了标识化黏合剂的测量对象物结合的捕捉剂A被固定化了的压电振子,或与标识化黏合剂结合的测量对象物类似物被固定化了的压电振子上,进行三明治反应或竞争反应的工序;(3)测量(2)的工序后的压电振子的振动数的工序;(4)根据在(3)的工序中测量出的振动数和采用已知浓度的测量对象物作成了的检量线,求出试料中的测量对象物的浓度的工序。
作为本测量方法,例如可以是使用了上述测量用器具的第2例的方法。
在本测量方法中,试料中的测量对象物在支持体上移动的方向和标识化黏合剂在支持体上移动的方向相反。优选的是,试料中的测量对象物和标识化黏合剂在压电振子上进行三明治反应或竞争反应的条件。作为这样的条件,例如可以是在标识化黏合剂预先保持在支持体上的场合,同时进行试料向试料添加部位的添加和展开液向展开液添加部位的添加的方式,在标识化黏合剂未预先保持在支持体上的场合,同时进行试料向试料添加部位的添加和标识化黏合剂含有溶液向展开液添加部位的添加的方式。
在采用捕捉剂A被固定化了的压电振子的场合,在压电振子上形成含有捕捉剂A、测量对象物和标识化黏合剂的复合体。另一方面,在采用测量对象物类似物被固定化了的压电振子的场合,在压电振子上形成含有测量对象物类似物和标识化黏合剂的复合体。
测量复合体被固定化了的压电振子的振动数。另一方面,预先测量试料中的测量对象物与标识化黏合剂一起在支持体上借助于毛细流而移动之前的压电振子的振动数,算出测量出的2个振动数的差(扣除空白振动数)。
可以根据该扣除空白振动数的差和采用预先已知浓度的测量对象物的溶液而作成了的检量线(表示测量对象物的浓度和扣除空白振动数的关系的检量线),测量试料中的测量对象物浓度。
作为测量方法的第3例(参照图17和图18),例如可以是包含以下工序的试料中的测量对象物的测量方法:(1)在支持体上,测量对象物和在支持体上被保持或固定化了的测量对象物类似物(b5)对标识化黏合剂(b1)进行竞争反应的工序;(2)在(1)的竞争反应中未被测量对象物类似物捕捉的成分,或被在支持体上可移动地被保持了的测量对象物类似物捕捉了的成分借助于毛细流而在支持体上移动,而且通过与测量对象物和测量对象物类似物结合的捕捉剂A(c1)被固定化了的压电振子的工序;(3)测量(2)的工序后的压电振子的振动数的工序;(4)根据在(3)的工序中测量出的振动数和采用已知浓度的测量对象物作成了的检量线,求出试料中的测量对象物的浓度的工序。
作为本测量方法,例如可以是使用了上述测量用器具的第3例的方法。
在本测量方法中,含有通过在支持体上的竞争反应而在支持体上未被捕捉的测量对象物和标识化黏合剂的复合体或含有测量对象物类似物和标识化黏合剂的复合体,在捕捉剂A被固定化了的压电振子上被捕捉。作为在支持体上的竞争反应的方式,在标识化黏合剂预先保持在支持体上(保持在试料添加部位和测量对象物类似物固定化部位之间的区域)场合,可以是在试料添加部位添加试料的方法等,在标识化黏合剂未预先保持在支持体上的场合,可以是在试料添加部位添加试料和标识化黏合剂的混合溶液的方法等。
在压电振子上,含有捕捉剂A、测量对象物和标识化黏合剂的复合体,或含有捕捉剂A、测量对象物类似物和标识化黏合剂的复合体被固定化。测量复合体被固定化了的压电振子的振动数,另一方面,预先测量竞争反应在支持体上发生之前的压电振子的振动数,算出测量出的2个振动数的差(扣除空白振动数)。
可以根据该扣除空白振动数的差和采用预先已知浓度的测量对象物的溶液而作成了的检量线(表示测量对象物的浓度和扣除空白振动数的关系的检量线),测量试料中的测量对象物浓度。在该例中,优选的是,测量对象物类似物(b5)和捕捉剂A(c1)是不产生特异性结合反应的组合。
作为测量方法的第4例(参照图19和图20),例如可以是包含以下工序的试料中的测量对象物的测量方法:(1)在支持体上,测量对象物和测量对象物类似物(b5)对标识化黏合剂(b1)进行竞争反应的工序;(2)在(1)的竞争反应中含有测量对象物和标识化黏合剂的复合体,或含有测量对象物类似物和标识化黏合剂的复合体借助于毛细流而在支持体上移动,而且通过与结合了测量对象物的黏合剂结合的捕捉剂B(c3)被固定化了的压电振子的工序;(3)测量(2)的工序后的压电振子的振动数的工序;(4)根据在(3)的工序中测量出的振动数和采用已知浓度的测量对象物作成了的检量线,求出试料中的测量对象物的浓度的工序。
作为本测量方法,例如可以是使用了上述测量用器具的第4例的方法。
在本测量方法中,含有通过在支持体上的竞争反应而在支持体上未被捕捉的测量对象物和标识化黏合剂的复合体在捕捉剂A被固定化了的压电振子上被捕捉。作为在支持体上的竞争反应的方式,在标识化黏合剂预先保持在支持体上(保持在试料添加部位和测量对象物类似物固定化部位之间的区域)场合,可以是在试料添加部位添加试料的方法等,在标识化黏合剂未预先保持在支持体上的场合,可以是在试料添加部位添加试料和标识化黏合剂的混合溶液的方法等。
在压电振子上,含有捕捉剂B、测量对象物和标识化黏合剂的复合体,或含有捕捉剂B、测量对象物类似物和标识化黏合剂的复合体被固定化。测量复合体被固定化了的压电振子的振动数,另一方面,预先测量竞争反应在支持体上发生之前的压电振子的振动数,算出测量出的2个振动数的差(扣除空白振动数)。
可以根据该扣除空白振动数和采用预先已知浓度的测量对象物的溶液而作成了的检量线(表示测量对象物的浓度和扣除空白振动数的关系的检量线),测量试料中的测量对象物浓度。在该例中,优选的是,含有测量对象物类似物(b5)和标识化黏合剂的复合体,与含有测量对象物和标识化黏合剂的复合体相比,是对捕捉剂B的反应性不同这样的组合。
作为测量方法的第5例(参照图21),例如可以是包含以下工序的试料中的测量对象物的测量方法:(1)试料中的测量对象物和标识化测量对象物类似物(b2)借助于毛细流而在支持体上移动的工序;(2)移动了的溶液再通过黏合剂(c2)被固定化了的压电振子的工序;(3)测量(2)的工序后的压电振子的振动数的工序;以及(4)根据在(3)的工序中测量出的振动数和采用已知浓度的测量对象物而作成了的检量线,测量试料中的测量对象物的浓度的工序。
作为本测量方法,例如可以是使用上述测量用器具的第5例的方法。
在本测量方法中,优选的是试料中的测量对象物和标识化测量对象物类似物在压电振子上进行竞争反应的条件。作为这样的条件,例如,在标识化测量对象物类似物预先保持在支持体上的场合,可以是向试料添加部位添加试料的方式,在标识化测量对象物类似物未预先保持在支持体上的场合,可以是在试料添加部位添加试料和标识化黏合剂的混合溶液的方式。
在压电振子上,形成含有测量对象物和黏合剂的复合体和含有标识化测量对象物类似物和黏合剂的复合体。测量这些复合体被固定化了的压电振子的振动数。另一方面,预先测量试料中的测量对象物与标识化测量对象物类似物一起在支持体上借助于毛细流而移动之前的压电振子的振动数,算出测量出的2个振动数的差(扣除空白振动数)。
此处,含有测量对象物和黏合剂的复合体所引起的振动数与含有标识化测量对象物类似物和黏合剂的复合体所引起的振动数相比,是极小的。试料中的测量对象物与标识化测量对象物类似物一起在支持体上借助于毛细流而移动之前的压电振子的振动数是一定的,因而对于扣除空白振动数,含有测量对象物和黏合剂的复合体所引起的扣除空白振动数与含有标识化测量对象物类似物和黏合剂的复合体所引起的扣除空白振动数相比,是非常小的。因此,可以认为,含有测量对象物和黏合剂的复合体和含有标识化测量对象物类似物和黏合剂的复合体被固定化了的压电振子所引起的扣除空白振动数与含有标识化测量对象物类似物和黏合剂的复合体被固定化了的压电振子所引起的扣除空白振动数大体上相等。
根据该扣除空白振动数的差和采用预先已知浓度的测量对象物的溶液而作成了的检量线(表示测量对象物的浓度和扣除空白振动数的关系的检量线),测量试料中的测量对象物浓度。
作为测量方法的第6例(参照图22),例如可以是包含以下工序的试料中的测量对象物的测量方法:(1)测量对象物和标识化测量对象物类似物(b2)借助于毛细流而在支持体上向与测量对象物和标识化测量对象物类似物结合的黏合剂(c2)被固定化了的压电振子,在互相相反方向移动的工序;(2)在黏合剂被固定化了的压电振子上,进行竞争反应的工序;(3)测量(2)的工序后的压电振子的振动数的工序;(4)根据在(3)的工序中测量出的振动数和采用已知浓度的测量对象物作成了的检量线,测量试料中的测量对象物的浓度的工序。
作为本测量方法,例如可以是使用上述测量用器具的第6例的方法。
在本测量方法中,试料中的测量对象物移动在支持体上移动的方向和标识化测量对象物类似物在支持体上移动的方向相反。优选的是,试料中的测量对象物和标识化测量对象物类似物在压电振子上进行竞争反应的条件。作为这样的条件,例如可以是,在标识化测量对象物类似物预先保持在支持体上的场合,同时进行试料向试料添加部位的添加和展开液向展开液添加部位的添加的方式,在标识化测量对象物类似物未预先保持在支持体上的场合,同时进行试料向试料添加部位的添加和标识化测量对象物类似物含有溶液向展开液添加部位的添加的方式。
在压电振子上,形成含有测量对象物和黏合剂的复合体和含有标识化测量对象物类似物和黏合剂的复合体。如上述的测量方法3中叙述的,可以认为,含有测量对象物和黏合剂的复合体和含有标识化测量对象物类似物和黏合剂的复合体被固定化了的压电振子所引起的扣除空白振动数与含有标识化测量对象物类似物和黏合剂的复合体被固定化了的压电振子所引起的扣除空白振动数大体上相等。
根据该扣除空白振动数的差和采用预先已知浓度的测量对象物的溶液而作成了的检量线(表示测量对象物的浓度和扣除空白振动数的关系的检量线),测量试料中的测量对象物浓度。
作为测量方法的第7例(参照图23),例如可以是包含以下工序的试料中的测量对象物的测量方法:(1)在支持体上,试料中的测量对象物与标识化测量对象物类似物(b2)对黏合剂(b3)进行竞争反应的工序;(2)在(1)的竞争反应中形成的反应生成物借助于毛细流在支持体上移动,而且通过与测量对象物所结合了的黏合剂和/或标识化测量对象物类似物所结合了的黏合剂结合的捕捉剂B(c3)被固定化了的压电振子的工序;(3)测量(2)的工序后的压电振子的振动数的工序;(4)根据在(3)的工序中测量出的振动数和采用已知浓度的测量对象物作成了的检量线,测量试料中的测量对象物的浓度的工序。
作为本测量方法,例如可以是使用上述测量用器具的第7例的方法。
在本测量方法中,含有通过在支持体上的竞争反应而形成了的测量对象物和黏合剂的复合体和含有标识化测量对象物类似物和黏合剂的复合体借助于毛细流在支持体上移动,在压电振子上这些复合体被捕捉剂B捕捉。作为在支持体上的竞争反应的方式,在标识化测量对象物类似物和黏合剂两者预先保持在支持体上的场合,可以是在该支持体上向试料添加部位添加试料的方法等,在只有标识化测量对象物类似物和黏合剂中的任意一方保持在支持体上的场合,可以是在该支持体上向支持体上的试料添加部位添加试料和另一方要素的混合溶液。还有,在标识化测量对象物类似物和黏合剂两者都未保持在支持体上的场合,可以是向支持体上的试料添加部位添加试料、标识化测量对象物类似物和黏合剂的混合溶液的方法。
在压电振子上,含有标识化测量对象物类似物、黏合剂和捕捉剂B的复合体和含有测量对象物、黏合剂和捕捉剂B的复合体被固定化。可以认为,与上述测量方法3的场合同样,含有标识化测量对象物类似物、黏合剂和捕捉剂B的复合体和含有测量对象物、黏合剂和捕捉剂B的复合体被固定化了的压电振子所引起的扣除空白振动数与含有标识化测量对象物类似物、黏合剂和捕捉剂B的复合体被固定化了的压电振子所引起的扣除空白振动数大体上相等。
根据该扣除空白振动数的差和采用预先已知浓度的测量对象物的溶液而作成了的检量线(表示测量对象物的浓度和扣除空白振动数的关系的检量线),测量试料中的测量对象物浓度。
作为测量方法的第8例(参照图24),例如可以是包含以下工序的试料中的测量对象物的测量方法:(1)支持体上,测量对象物和标识化测量对象物类似物(b2)对在支持体上被固定化了的黏合剂(b4)进行竞争反应的工序;(2)在(1)的竞争反应中未被黏合剂捕捉的成分借助于毛细流而在支持体上移动,而且通过黏合剂被固定化了的压电振子的工序;(3)测量(2)的工序后的压电振子的振动数的工序;(4)根据在(3)的工序中测量出的振动数和采用已知浓度的测量对象物作成了的检量线,测量试料中的测量对象物的浓度的工序。
作为本测量方法,例如可以是使用上述测量用器具的第8例的方法。
在本测量方法中,含有通过在支持体上的竞争反应而在支持体上未被捕捉的测量对象物和标识化测量对象物类似物的复合体在捕捉剂被固定化了的压电振子上被捕捉。作为在支持体上的竞争反应的方式,在标识化测量对象物类似物预先保持在支持体上(保持在试料添加部位和黏合剂固定化部位之间的区域)场合,可以是在试料添加部位添加试料的方法等,在标识化测量对象物类似物未预先保持在支持体上的场合,可以是在试料添加部位添加试料和标识化测量对象物类似物的混合溶液的方法等。
在压电振子上,形成含有标识化测量对象物类似物和黏合剂的复合体和含有测量对象物和黏合剂的复合体。如上述的测量方法3中叙述的,可以认为,含有标识化测量对象物类似物和黏合剂的复合体和含有测量对象物和黏合剂的复合体被固定化了的压电振子所引起的扣除空白振动数与含有标识化测量对象物类似物、黏合剂和捕捉剂B的复合体被固定化了的压电振子所引起的扣除空白振动数大体上相等。
根据该扣除空白振动数的差和采用预先已知浓度的测量对象物的溶液而作成了的检量线(表示测量对象物的浓度和扣除空白振动数的关系的检量线),测量试料中的测量对象物浓度。
还有,在上述测量方法的第1~8方式的各自中,如图10所示,也可以使用在检出部位并置了2个压电振子的装置、设置了展开液吸收部位的装置、设置了图4所示的控制线的装置进行测量。
使用在检出部位有2个压电振子的装置进行测量的方法是特别优选的方式,在该场合,使用在第一压电振子上固定捕捉剂A(c1)、测量对象物类似物(c1′)、黏合剂(c2)或捕捉剂B(c3)中的任意一种,在另外的第二压电振子上什么都不固定的压电振子。其特征在于,例如采用测量方法第1~8(参照图13~24)中的任意一种方法使试料向检出部位移动,开始了特异性反应之后,测量第一压电振子的振动数和第二压电振子的振动数,对照使用第二压电振子的振动数。可以根据第一振动数和第二振动数的差,根据用预先已知浓度的测量对象物获得的数据而作成的检量线,求出应该测量物质的浓度。采用本方法就减少含有测量对象物的试料所引起的非特异性反应所引起的测量的不正确,可不受非特异性反应的影响而进行更正确的测量。
还有,例如,在图4所示的支持体上设置了的控制线是用于确认目的反应发生了的部位,通过确认控制线的反应,就能判断确实发生了目的反应。在控制线上发生了反应这一点,例如可以通过标识,通过色调的变化来取得。
在上述测量方法的第1~8例中,如上所述,使用联结了振动数测量电路或联结振动数测量电路和浓度运算电路而成的振动数测量电路的装置,就能求出振动数或浓度。
以下,通过实施例更详细地说明本发明,不过,它们丝毫不限定本发明的范围。另外,在本实施例中,使用了下列厂家的试剂和设备。
抗人CRP·羊多克隆抗体(IgG;口思慕百(コスモバイオ)公司制),抗人CRP·鼠单克隆抗体(IgG;口思慕百公司制),抗人胰岛素·鼠单克隆抗体(IgG;口思慕百公司制),金胶体标识化抗人免疫球蛋白·羊多克隆抗体(IgG;大不列颠生物细胞国际公司制),CRP标准液(口思慕百公司制),硼酸(关东化学公司制),咪唑(关东化学公司制),三(羟甲基)氨基甲烷(以下记作三基(トリス))(关东化学公司制),2-亚氨硫赶盐酸盐(2-イミノチオラン塩酸塩)(关东化学公司制),吐温20(关东化学公司制),BSA(东方(オリエンタル)酵母公司制),聚苯乙烯微苏菲(ポリスチレンマイクロスフイア)DS02B(班古司(バングス)公司制),戊二醛(关东化学公司制),己烷(关东化学公司制),葡聚糖凝胶G-25列(亚麻暹罗生物科学公司制),微到撒(マイクロド一サ)(生物道特公司制),生物库安持(バイオジエツト?クアンチ)3000(生物道特公司制),水晶振子传感器芯片(27MHz)(亿尼夏木公司制),硝化纤维素膜片[AccuFlowG型(修来合&修诶路(シユライヒヤ一&シユエル)公司制);FF85(修来合&修诶路公司制)],吸收纸[300型,470型(修来合&修诶路公司制)]。
附图说明
图1是表示测量对象物测量用器具的一个例子的图。
图2是表示测量对象物测量用器具的一个例子的图。
图3是表示测量对象物测量用器具的一个例子的图。
图4是表示测量对象物测量用器具的一个例子的图。
图5是表示测量对象物测量用器具的一个例子的图。
图6是表示测量对象物测量用器具的一个例子的图。
图7是表示测量对象物测量用器具的一个例子的图。
图8是表示测量对象物测量用器具的试料添加部位和展开液添加部位的联结的例子的图。
图9是表示测量对象物测量用器具的支持体、检出部位和展开液吸收部位的联结的例子的图。
图10是表示图测量对象物测量用器具的一个例子的图。
图11是表示图测量对象物测量用器具的一个例子的图。
图12是表示图测量对象物测量用器具的一个例子的图。
图13是表示组装了捕捉剂A被固定化了的水晶振子的测量对象物测量用器具的第1例的示意图。
图14是表示组装了测量对象物类似物被固定化了的水晶振子的测量对象物测量用器具的第1例的示意图。
图15是表示组装了捕捉剂A被固定化了的水晶振子的测量对象物测量用器具的第2例的示意图。
图16是表示组装了测量对象物类似物被固定化了的水晶振子的测量对象物测量用器具的第2例的示意图。
图17是表示组装了捕捉剂A被固定化了的水晶振子的测量对象物测量用器具的第3例的示意图。
图18是表示组装了捕捉剂A被固定化了的水晶振子的测量对象物测量用器具的第3例的示意图。
图19是表示组装了捕捉剂B被固定化了的水晶振子的测量对象物测量用器具的第4例的示意图。
图20是表示组装了捕捉剂B被固定化了的水晶振子的测量对象物测量用器具的第4例的示意图。
图21是表示组装了捕捉剂被固定化了的水晶振子的测量对象物测量用器具的第5例的示意图。
图22是表示组装了捕捉剂被固定化了的水晶振子的测量对象物测量用器具的第6例的示意图。
图23是表示组装了捕捉剂B被固定化了的水晶振子的测量对象物测量用器具的第7例的示意图。
图24是表示组装了捕捉剂被固定化了的水晶振子的测量对象物测量用器具的第8例的示意图。
图25是表示在实施例1中制造出的测量对象物测量用器具的一个例子的图。
图26是表示使用了实施例1的测量对象物测量用器具的试料中的CRP浓度的测量所给出的试料中的CRP浓度和振动数的减少量的关系的检量线。
图27是表示在比较例1中使用了的现有型的免疫色层分析法器具的图。
图28是表示在实施例4中制造出的测量对象物测量用器具的一个例子的图。
符号说明
●测量对象物
黏合剂
标识
Figure A20048002273900513
标识化黏合剂
Figure A20048002273900514
测量对象物类似物
Figure A20048002273900515
标识化测量对象物类似物
捕捉剂A
Figure A20048002273900517
捕捉剂B
具体实施方式
实施例1CRP测量用器具
(1)抗人CRP·羊多克隆抗体(IgG)向水晶振子的固定
把抗人CRP·羊多克隆抗体(IgG)溶解于0.1mol/L的硼酸缓冲液(pH8.0)中,调制成2.0mg/mL的抗人CRP·羊多克隆抗体(IgG)的溶液。在该溶液(1.0mL)中添加1.0mg/mL的2-亚氨硫赶水溶液(0.3mL),在30℃下进行0.5小时反应之后,把所获得的反应混合物通过使用葡聚糖凝胶G-25的柱层析法进行分离[溶出溶剂:0.1mmol/L硼酸缓冲液(pH8.0)],获得0.2mg/mL的巯化了的抗人CRP·羊多克隆抗体(IgG)的硼酸缓冲液溶液。
用微到撒生物库安持3000向水晶振子传感器芯片(27MHz)的表面滴下该巯化了的抗人CRP·羊多克隆抗体(IgG)的硼酸缓冲液溶液,在室温下静置15小时,这样就在水晶振子中央的金电极上固定了抗人CRP·羊多克隆抗体(IgG)。
并且,用含有0.1%的吐温20(0.1%)、1%的牛血清白蛋白(以下记作BSA)的10mmol/L磷酸缓冲液(pH7.4)洗涤金电极,除去未反应的巯化了的抗人CRP·羊多克隆抗体(IgG)。
(2)聚苯乙烯微苏菲标识化抗人CRP·鼠单克隆抗体(IgG)的调制
在0.01mg/mL的抗人CRP·鼠单克隆抗体(IgG)的磷酸缓冲化生理食盐水(含有0.15mol/L氯化钠的pH7.2、10mmol/L磷酸缓冲液)(以下记作PBS)(1mL)中添加粒径0.5μm以下的聚苯乙烯微苏菲DS02B(班古司公司制)的0.5%水溶液(10mL),在37℃下静置2小时之后,在4℃,以12000rpm对混合物进行1小时离心分离。在除去浮层而获得的沉淀物[含有聚苯乙烯微苏菲标识化抗人CRP·鼠单克隆抗体(IgG)的沉淀物]中添加含有0.6% BSA的pH7.8、10mmol/L咪唑缓冲液(50mL),通过超声波处理使混合物分散,制成标识液。
(3)标识化黏合剂保持部件的作成
使(2)中调制成的标识液在室温下在硝化纤维素膜片(AccuFlowG型)中含浸1小时之后,使该膜片在室温、3mmHg以下进行真空干燥,制成保持了聚苯乙烯微苏菲标识化抗人CRP·鼠单克隆抗体(IgG)的标识化黏合剂保持部件。
(4)CRP测量用器具的制作
把由棉花(修来合&修诶路公司制)构成的试料添加用的试料添加用部件、在(3)中制成的标识化黏合剂保持部件、由硝化纤维素膜片(FF85)构成的支持体、在(1)中制成的抗人CRP·羊多克隆抗体(IgG)被固定化了的水晶振子和吸收纸300(修来合&修诶路公司制)所构成的展开液吸收部件分别配置在试料添加部位、展开液添加部位、支持体、检出部位和展开液吸收部位,制成图25所示的CRP测量用器具。
实施例2使用了CRP测量用器具的试料中的CRP浓度的测量
(1)检量线的制作
向图25的试料添加部位滴下了试料(5μL)。其次,从同部位,继续添加了pH7.5、10mmol/L三基缓冲液。该缓冲液一边稀释试料,一边到达微苏菲标识化抗人CRP·鼠单克隆抗体(IgG)结合了的保持部件,在此处试料中的CRP和微苏菲标识化抗人CRP·鼠单克隆抗体(IgG)进行反应。反应液借助于毛细流进一步在膜片上前进,到达水晶振子上的微小的空间而填满了空间。在该水晶振子上,CRP和微苏菲标识化抗人CRP·鼠单克隆抗体(IgG)的复合体与在水晶振子上被固定化了的抗人CRP·羊多克隆抗体(IgG)进行反应。与试料中的CRP浓度成比例,微苏菲标识化抗人CRP·鼠单克隆抗体(IgG)在水晶振子上被固定化。反应液被反应液吸收部件吸收之后,取出水晶振子,将其安装在阿飞尼可思Q(亿尼夏木公司制)上,在容器中加上pH7.5、10mmol/L三基缓冲液,5分后测量出振动数。
作为试料,分别使用了①仅pH7.5、10mmol/L三基缓冲液,②0.05μg/mL的CRP标准液,③0.1μg/mL的CRP标准液,④0.2μg/mL的CRP标准液,以及⑤0.4μg/mL的CRP标准液。按每种试料换掉水晶振子,测量了振动数。首先测量添加试料之前的振动数,接着测量仅添加①pH7.5、10mmol/L三基缓冲液(5μL),缓冲液被吸收垫吸收之后的振动数,算出了两振动数的差(把该振动数的差作为Δ1)。其次,代替①pH7.5、10mmol/L三基缓冲液(5μL),添加②~⑤的各试料(5μL),与①的场合同样,测量添加各试料之前的振动数和添加各试料,反应液被吸收垫吸收之后的振动数,算出了两振动数的差(把与各试料对应的振动数的差作为Δ2~Δ5)。第1表和图26表示从各振动数的差(Δ2~Δ5)中扣除了Δ1的值,即,扣除了空白振动数的减少量(-ΔF/Hz)和CRP浓度的关系。
第1表
  CRP浓度(μg/mL)   振动数的减少量(-ΔF/Hz)
  0.00   0
  0.05   48
  0.10   97
  0.20   194
  0.40   423
如第1表和图26所示,判明了采用实施例1CRP测量用器具,CRP在0.00~0.40μg/mL的范围,能得到良好的直线性。
(2)人血清中的CRP浓度的测量
作为试料,使用人血清代替CRP标准液,与(1)中的检量线制作的场合同样,测量振动数的变化量,根据(1)中制成的检量线,算出了该人血清中的CRP浓度,为0.092μg/mL。另一方面,采用作为CRP测量用配剂的艾克斯忒路(エクステル)CRP(协和麦底克斯(協和メデツクス)公司制)测量了该人血清中的CRP浓度,为0.094μg/mL。因此判明了,采用实施例1的CRP测量器具就能正确测量人血清中的CRP浓度。
比较例1与试料中的CRP浓度测量有关的实施例1的CRP测量器具和现有型免疫色层分析法用装置的比较
用图27所示的含有试料添加用的试料添加用部件、微苏菲标识化抗人CRP·鼠单克隆抗体(IgG)结合了的标识化黏合剂保持部件、由硝化纤维素膜片(FF85)构成的支持体、由抗人CRP·羊多克隆抗体(IgG)固定化部位和吸收纸300构成的展开液吸收部件的现有型的免疫色层分析法用器具,研究了试料中的CRP的检出界限。作为试料,分别使用了①仅pH7.5、10mmol/L三基缓冲液,②0.05μg/mL的CRP标准液,③0.1μg/mL的CRP标准液,④0.2μg/mL的CRP标准液,⑤0.4μg/mL的CRP标准液,以及⑥4.0μg/mL的CRP标准液。结果,只在⑥试料的场合,能以目测确认青线。因此判明了,与现有型的免疫色层分析法用装置相比,本发明的现有型的免疫色层分析法用装置能高灵敏度地测量试料中的CRP。
实施例3抗结核菌表面糖脂抗原抗体(抗TBGL抗体)用测量器具
把金胶体标识化抗人免疫球蛋白·鼠单克隆抗体(IgG)用含有0.15mol/L的浓度的氯化钠的pH7.4、10mmol/L的磷酸缓冲液稀释100倍,把该被稀释了的金胶体标识化抗体溶液作为标识液。使含浸了该标识液的吸收纸470型在3mmHg以下进行真空干燥,制成标识化黏合剂保持部件。
在水晶振子上含浸涂布以海藻糖机密口类特(トレハロ一スジミコレ一ト)为主要成分的结核菌表面糖脂抗原(TBGL)的0.1mg/mL己烷溶液,在3mmHg以下进行真空干燥后,用含有1%BSA的10mmol/L的磷酸缓冲液进行封阻,制成TBGL固定化水晶振子。
采用上述标识化黏合剂保持部件和TBGL固定化水晶振子,以与实施例1同样的方法,制成抗TBGL抗体测量用器具。采用该装置,把健常人(20岁以下)的血清、结核患者的血清以及遗传TBGL抗体的截止标准液(抗体值:2单位;协和麦底克斯公司制)作为试料,测量各试料中的振动数,算出试料添加前的振动数和测量出的振动数的差[振动数的减少量(-ΔF/Hz)],根据算出了的振动数,算出了健常人(20岁以下)的血清中包含的抗TBGL抗体的滴定率和结核患者的血清中包含的抗TBGL抗体的滴定率。第2表表示结果。
第2表
  振动数的减少量(-ΔF/Hz)   抗体值   判断
  截止标准液   2864   2   -
  健常人的血清   890   0.3   阴性
  结核患者血清   9317   3.2   阳性
如第2表所示,在健常人的血清中,抗TBGL抗体的滴定率在截止值以下,而在结核患者的血清中,抗TBGL抗体的滴定率在截止值以上。因此表明了,可以采用本发明的抗TBGL测量用器具进行结核的诊断。
实施例4胰岛素测量用器具
(1)含有金胶体标识化抗人胰岛素·鼠单克隆抗体(IgG)的标识化黏合剂保持部件的制作
把抗人胰岛素·鼠单克隆抗体(IgG)溶解于0.1mol/L的硼酸缓冲液(pH8.0)中,调制成2.0mg/mL的抗人胰岛素·鼠单克隆抗体(IgG)的溶液。在该溶液(1.0mL)中添加1.0mg/mL的2-亚氨硫赶水溶液(0.3mL),在30℃下进行0.5小时反应之后,把所获得的反应混合物通过使用葡聚糖凝胶G-25的柱层析法进行分离[溶出溶剂:0.1mmol/L硼酸缓冲液(pH8.0)],获得0.2mg/mL的巯化了的抗人胰岛素·鼠单克隆抗体(IgG)的硼酸缓冲液溶液。
在该巯化了的抗人胰岛素·鼠单克隆抗体(IgG)的硼酸缓冲液溶液(1mL)中添加粒径40nm的金胶体粒子10mL,在室温下使之反应10分钟,调制成金胶体粒子标识化抗人胰岛素·鼠单克隆抗体含有溶液。在该溶液中添加含有0.6%BSA的pH7.8、10mmol/L咪唑缓冲液(50mL),并且把对该混合溶液实施超声波处理后的东西作为标识液。使硝化纤维素膜片[AccuFlowG型]含浸了该标识液之后,在室温下按1小时,在3mmHg以下使该膜片进行真空干燥,制成保持了金胶体粒子标识化抗人胰岛素·鼠单克隆抗体的标识化黏合剂保持部件。
(2)胰岛素向硝化纤维素膜片的固定
在硝化纤维素膜片(FF85)的一定区域上,用生物库安持3000滴下1%戊二醛水溶液,在室温下干燥0.5小时之后,用生物库安持3000在同一区域上滴下了0.2mg/mL的胰岛素水溶液。在室温下反应2小时之后,用生物库安持3000在同一区域上滴下1%BSA的PBS溶液,制成胰岛素在硝化纤维素膜片上被固定化了的支持体。
(3)抗鼠IgG·羊多克隆抗体向水晶振子的固定
以与实施例1的(1)同样的方法,使抗鼠IgG·羊多克隆抗体巯化,进行了该巯化抗鼠IgG·羊多克隆抗体向水晶振子传感器芯片(27MHz)中央的金电极上的固定化。
(4)胰岛素测量用器
配置含有在(1)中制成的金胶体粒子标识化抗人胰岛素·鼠单克隆抗体(IgG)的标识化黏合剂保持部件、由在(2)中制成的胰岛素固定化硝化纤维素膜片构成的支持体、在(3)中制成的抗鼠IgG·羊多克隆抗体固定化水晶振子、由吸收纸300构成的展开液吸收部件,制成图28所示的胰岛素测量用免疫色层分析法用带,制成胰岛素测量用器具。
实施例5使用了胰岛素测量用器具的试料中的胰岛素的测量
在试料添加用部件上滴下了试料(5μL)。其次,从同孔继续添加了pH7.5、10mmol/L三基缓冲液。该缓冲液一边稀释试料,一边到达金胶体粒子标识化抗人胰岛素·鼠单克隆抗体(IgG)结合了的支持体,在此处与试料中的胰岛素金胶体粒子标识化抗人胰岛素·鼠单克隆抗体(IgG)进行反应。反应液借助于毛细流进一步在膜片上前进,与试料中的胰岛素未结合的金胶体粒子标识化抗人胰岛素·鼠单克隆抗体(IgG)在胰岛素固定化部位被捕捉。在该胰岛素固定部分的反应后,未被胰岛素固定部分固定化的胰岛素和金胶体粒子标识化抗人胰岛素·鼠单克隆抗体(IgG)的复合体借助于毛细流在水晶振子上移动,填满了水晶振子上的微小空间。该复合体在抗鼠IgG·羊多克隆抗体固定化水晶振子上被捕捉,反应液被吸收垫吸收。反应液被吸收垫吸收之后,取出水晶振子,将其安装在阿飞尼可思Q(亿尼夏木公司制)上,在容器中加上pH7.5、10mmol/L三基缓冲液,5分后测量了振动数。
作为试料,分别使用了①pH7.5、10mmol/L三基缓冲液和②300ng/mL的胰岛素标准液。按每种试料换掉水晶振子,测量了振动数。首先测量添加试料之前的振动数,接着测量添加①pH7.5、10mmol/L三基缓冲液(5μL),缓冲液被吸收垫吸收之后的振动数,算出了两振动数的差(把该振动数的差作为Δ1)。其次,代替①pH7.5、10mmol/L三基缓冲液(5μL),添加②的试料(5μL),与①的场合同样,测量添加各试料之前的振动数和添加各试料,反应液被吸收垫吸收之后的振动数,算出了两振动数的差(把与各试料对应的振动数的差作为Δ2)。从振动数的差(Δ2)中扣除了Δ1的值,即,扣除了空白的值为1375(-ΔF/Hz)。
其次,作为试料,使用糖尿病患者的血清代替胰岛素标准液(300ng/mL),进行了同样的测量,扣除了空白的值为577(-ΔF/Hz)。根据该值算出了该血清中的胰岛素浓度为126ng/mL。另一方面,采用作为胰岛素测量用配剂的开迷路密胰岛素(ケミルミインスリン)(拜耳医学公司制)测量了该血清中的胰岛素浓度,为125ng/mL。因此判明了,采用实施例4的器具能正确测量人血清中的胰岛素浓度。
实施例6检量线作成用带配剂的CRP测量用器具
准备6枚在实施例1中制成的CRP测量用器具,如图11所示,将其排列成放射状。在中心附近的各试料添加部位,例如,在器具1的添加部位添加被检液,与试料同量,在器具2~6的添加部位分别添加在实施例2中使用了的5种标准液,即①仅pH7.5、10mmol/L三基缓冲液,②0.05μg/mL的CRP标准液,③0.1μg/mL的CRP标准液,④0.2μg/mL的CRP标准液以及⑤0.4μg/mL的CRP标准液。与实施例2中的方法同样,根据扣除了器具2~6中的空白振动数的变化量,制作检量线,把扣除了器具1中的空白振动数的变化量适用于该检量线,就能测量该被检液中的CRP浓度。
工业实用性
本发明提供一种实现了高灵敏度定量分析的简便的免疫色层分析法测量用器具、装置和测量方法。

Claims (35)

1.一种测量对象物测量用器具,在试料中的测量对象物可借助于展开液的毛细流而移动的支持体上具有试料添加部位(S)和检出部位(Q),其特征在于,该检出部位具有被2个电极夹着的压电振子,在该压电振子上预先固定了捕捉剂A(c1)或测量对象物类似物(c1’),在该支持体上具有保持了黏合剂(b1),使其可借助于展开液的毛细流而移动的黏合剂保持部位(BR)。
2.根据权利要求1所述的器具,其中,该黏合剂保持部位设置在该试料添加部位和该检出部位之间。
3.根据权利要求1所述的器具,其中,该黏合剂保持部位夹隔该检出部位而设置在该试料添加部位的相反侧。
4.一种测量对象物测量用器具,在试料中的测量对象物可借助于展开液的毛细流而移动的支持体上具有试料添加部位(S)和检出部位(Q),其特征在于,该检出部位由被2个电极间夹着的压电振子构成,在该压电振子上预先固定了与测量对象物结合的捕捉剂A(c1),或是标识化测量对象物或测量对象物和黏合剂的复合物,以及与测量对象物或测量对象物类似物和标识化黏合剂的复合体结合的捕捉剂B(c3),在该支持体上具有保持了黏合剂(b1),使其可借助于展开液的毛细流而移动的黏合剂保持部位(BR),而且在该支持体上具有在该黏合剂保持部位和检出部位之间固定了测量对象物类似物(b5),使其不会借助于展开液的毛细流而移动,或在该支持体上保持了测量对象物类似物(b5),使其可借助于展开液的毛细流而移动的测量对象物类似物固定部位(DF)或测量对象物类似物保持部位(DR)。
5.根据权利要求1~4中任意一项所述的器具,其中,黏合剂是被标识了的东西。
6.一种测量对象物测量用器具,在试料中的测量对象物可借助于展开液的毛细流而移动的支持体上具有试料添加部位(S)和检出部位(Q),其特征在于,该检出部位具有被2个电极夹着的压电振子,在该压电振子上预先固定了黏合剂(c2),在该支持体上具有保持了测量对象物类似物(b2),使其可借助于展开液的毛细流而移动的测量对象物类似物保持部位(DR)。
7.根据权利要求6所述的器具,其中,该测量对象物类似物保持部位设置在该试料添加部位和该检出部位之间。
8.根据权利要求6所述的器具,其中,该测量对象物类似物保持部位夹隔该检出部位而设置在该试料添加部位的相反侧。
9.一种测量对象物测量用器具,在试料中的测量对象物可借助于展开液的毛细流而移动的支持体上具有试料添加部位(S)和检出部位(Q),其特征在于,该检出部位由被2个电极间夹着的压电振子构成,在该压电振子上预先固定了捕捉剂B(c3),在该支持体上具有保持了测量对象物类似物(b2)和黏合剂(b3),使其可借助于展开液的毛细流而移动的测量对象物类似物保持部位(DR)和黏合剂保持部位(BR)。
10.一种测量对象物测量用器具,在试料中的测量对象物可借助于展开液的毛细流而移动的支持体上具有试料添加部位(S)和检出部位(Q),其特征在于,该检出部位具有被2个电极间夹着的压电振子,在该压电振子上预先固定了与测量对象物结合的黏合剂(c2),在该支持体上具有保持了测量对象物类似物(b2),使其可借助于展开液的毛细流而移动的测量对象物类似物保持部位(DR),而且在该支持体上具有在该测量对象物类似物保持部位和检出部位之间的支持体中固定了黏合剂(b4),使其不会借助于展开液的毛细流而移动的黏合剂固定部位(BF)。
11.根据权利要求6~10中任意一项所述的器具,其中,测量对象物类似物是被标识了的东西。
12.根据权利要求5或11所述的器具,中,该标识是不溶性小胞体。
13.根据权利要求12所述的器具,其中,该不溶性小胞体是金属胶体或胶乳。
14.一种测量对象物测量用器具,在试料中的测量对象物可借助于展开液的毛细流而移动的支持体上具有试料添加部位(S)和检出部位(Q),其特征在于,该检出部位由被2个电极间夹着的压电振子构成,在该压电振子上固定了捕捉剂A(c1)、测量对象物类似物(c1′)、黏合剂(c2)或捕捉剂B(c3)。
15.根据权利要求1~14中任意一项所述的器具,其中,还含有展开液吸收部位(d)。
16.根据权利要求1~15中任意一项所述的器具,其中,在该检出部位,除了固定了捕捉剂A(c1)、测量对象物类似物(c1′)、黏合剂(c2)或捕捉剂B(c3)的被2个电极夹着的压电振子以外,还具有另一个被2个电极夹着的压电振子,该压电振子未固定捕捉剂A(c1)、测量对象物类似物(c1′)、黏合剂(c2)和捕捉剂B(c3)中的任何一种。
17.根据权利要求1~16中任意一项所述的器具,其中,该压电振子是水晶振子。
18.一种测量对象物测量装置,具有:权利要求1~17中任意一项所述的器具;与该器具的压电振子的电极连接,测量该压电振子的振动数的振动数测量电路;以及与该振动数测量电路连接,根据振动数来运算测量对象物浓度的浓度运算电路。
19.一种试料中的测量对象物的定量方法,根据与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合而产生的该压电振子的振动数的变化,对试料中的测量对象物进行定量,其特征在于,在压电振子上预先固定了捕捉剂A(c1)或测量对象物类似物(c1′),采用试料中的测量对象物和黏合剂可借助于展开液的毛细流而移动的支持体,向该捕捉剂A或该测量对象物类似物供给试料和该黏合剂,使其与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合。
20.根据权利要求19所述的定量方法,其中,借助于相同方向的毛细流对该捕捉剂A或该测量对象物类似物供给该试料和该黏合剂。
21.根据权利要求19所述的定量方法,其中,借助于相反方向的毛细流对该捕捉剂A或该测量对象物类似物供给该试料和该黏合剂。
22.一种试料中的测量对象物的定量方法,根据与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合而产生的该压电振子的振动数的变化,对试料中的测量对象物进行定量,其特征在于,在压电振子上预先固定了捕捉剂A(c1)或捕捉剂B(c3),采用固定了测量对象物类似物(b5),使其不会借助于展开液的毛细流而移动,而试料中的测量对象物和黏合剂(b1)可借助于展开液的毛细流而移动的支持体,向该捕捉剂A或捕捉剂B供给试料和该黏合剂,使其与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合。
23.一种试料中的测量对象物的定量方法,根据与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合而产生的该压电振子的振动数的变化,对试料中的测量对象物进行定量,其特征在于,在压电振子上预先固定了捕捉剂A(c1)或捕捉剂B(c3),采用试料中的测量对象物、黏合剂(b1)和测量对象物类似物(b5)可借助于展开液的毛细流而移动的支持体,向该捕捉剂A或捕捉剂B供给试料、该黏合剂和该测量对象物类似物,使其与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合。
24.根据权利要求17~23中任意一项所述的方法,其中,黏合剂是被标识了的东西。
25.一种试料中的测量对象物的定量方法,根据与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合而产生的该压电振子的振动数的变化,对试料中的测量对象物进行定量,其特征在于,在压电振子上预先固定了黏合剂(c2),采用试料中的测量对象物和测量对象物类似物(b2)可借助于展开液的毛细流而移动的支持体,向该黏合剂供给试料和该测量对象物类似物,使其与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合。
26.根据权利要求25所述的定量方法,其中,借助于相同方向的毛细流对该黏合剂供给该试料和该测量对象物类似物。
27.根据权利要求25所述的定量方法,其中,借助于相反方向的毛细流对该黏合剂供给该试料和该测量对象物类似物。
28.一种试料中的测量对象物的定量方法,根据与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合而产生的该压电振子的振动数的变化,对试料中的测量对象物进行定量,其特征在于,在压电振子上预先固定了捕捉剂B(c3),采用试料中的测量对象物、测量对象物类似物(b2)和黏合剂(b3)可借助于展开液的毛细流而移动的支持体,向该捕捉剂B供给试料、该测量对象物类似物和该黏合剂,使其与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合。
29.一种试料中的测量对象物的定量方法,根据与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合而产生的该压电振子的振动数的变化,对试料中的测量对象物进行定量,其特征在于,在压电振子上预先固定了黏合剂(c2),采用固定了黏合剂(b4),使其不会借助于展开液的毛细流而移动,而试料中的测量对象物和测量对象物类似物(b2)可借助于展开液的毛细流而移动的支持体,向该黏合剂供给试料和测量对象物类似物,使其与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合。
30.根据权利要求25~29中任意一项所述的方法,其中,测量对象物类似物是被标识了的东西。
31.根据权利要求24或30所述的定量方法,其中,该标识是不溶性小胞体。
32.根据权利要求31所述的定量方法,其中,该不溶性小胞体是金属胶体或胶乳。
33.一种试料中的测量对象物的定量方法,根据与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合而产生的该压电振子的振动数的变化,对试料中的测量对象物进行定量,其特征在于,在压电振子上预先固定了捕捉剂A(c1),采用试料中的测量对象物可借助于展开液的毛细流而移动的支持体,向该捕捉剂A供给试料,使其与在压电振子上被固定了的物质特异性地结合。
34.根据权利要求17~29中任意一项所述的方法,其中,再采用未固定捕捉剂A(c1)、测量对象物类似物(c1′)、黏合剂(c2)和捕捉剂B(c3)中的任何一种的第二压电振子,向捕捉剂A(c1)、测量对象物类似物(c1′)、黏合剂(c2)或捕捉剂B(c3)被固定化了第一压电振子和第二压电振子供给试料,作为对照来使用第二振动数。
35.根据权利要求19~34中任意一项所述的方法,其中,压电振子是水晶振子。
CNA2004800227397A 2003-08-11 2004-08-11 测量对象物测量器具、测量装置和测量方法 Pending CN1833169A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2003207184 2003-08-11
JP207184/2003 2003-08-11

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN1833169A true CN1833169A (zh) 2006-09-13

Family

ID=34131410

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNA2004800227397A Pending CN1833169A (zh) 2003-08-11 2004-08-11 测量对象物测量器具、测量装置和测量方法

Country Status (5)

Country Link
US (1) US20070031286A1 (zh)
EP (1) EP1662257A4 (zh)
JP (1) JPWO2005015217A1 (zh)
CN (1) CN1833169A (zh)
WO (1) WO2005015217A1 (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102388312A (zh) * 2009-04-09 2012-03-21 爱科来株式会社 分析方法、样品分析用具、防止样品液逆流的方法和防止背景上升的方法
CN103782175A (zh) * 2011-09-13 2014-05-07 奥林巴斯株式会社 胰腺病标记物的检出方法

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4587903B2 (ja) * 2005-07-29 2010-11-24 シチズンホールディングス株式会社 測定器具及びこれを用いた測定用キット、測定方法並びに測定装置
ES2553153T3 (es) 2005-12-14 2015-12-04 Denka Seiken Co., Ltd. Detección inmunocromatográfica de Staphylococcus multirresistente y kit de diagnóstico
JP2007322310A (ja) * 2006-06-02 2007-12-13 Nippon Kayaku Co Ltd 検体中の分析対象物質の検出あるいは測定方法
EP2309264A4 (en) 2008-06-06 2011-11-23 Univ Toyama Nat Univ Corp FLU VIRUS DETECTION DEVICE
WO2014054729A1 (ja) * 2012-10-03 2014-04-10 オリンパス株式会社 肝臓・胆道疾患マーカーの検出方法
WO2014100715A2 (en) * 2012-12-21 2014-06-26 Ehrenkranz Joel R L Supplements and monitoring systems for dosing of the supplements
EP3030582A4 (en) * 2013-08-07 2017-05-17 Astute Medical, Inc. Assays for timp2 having improved performance in biological samples
JP6600861B2 (ja) * 2015-04-08 2019-11-06 株式会社パートナーファーム 固相反応チップ及びこれを用いた測定方法
EP3606554A4 (en) 2017-04-05 2020-12-09 Astute Medical, Inc. ASSAYS FOR TIMP2 WITH IMPROVED EFFICIENCY IN BIOLOGICAL SAMPLES

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH08511621A (ja) * 1993-06-09 1996-12-03 クイデル コーポレイション 抗原特異的1段階検定
JPH07225233A (ja) * 1994-02-15 1995-08-22 Kyowa Medex Co Ltd 水晶発振子を用いる免疫測定法
US5728590A (en) * 1994-07-29 1998-03-17 Nanoprobes, Inc. Small organometallic probes
WO1999028734A1 (en) * 1997-12-02 1999-06-10 Smith Allan L Mass and heat flow measurement sensor
JP2002122597A (ja) * 2000-08-09 2002-04-26 Mitsubishi Chemicals Corp 測定対象物の測定用チップ,測定対象物の測定装置及び測定対象物の測定方法
JP3598334B2 (ja) * 2001-04-16 2004-12-08 独立行政法人産業技術総合研究所 水晶振動子を利用した測定試薬及び測定方法

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102388312A (zh) * 2009-04-09 2012-03-21 爱科来株式会社 分析方法、样品分析用具、防止样品液逆流的方法和防止背景上升的方法
CN102388312B (zh) * 2009-04-09 2014-08-20 爱科来株式会社 分析方法、样品分析用具、防止样品液逆流的方法和防止背景上升的方法
US9903863B2 (en) 2009-04-09 2018-02-27 Arkray, Inc. Method for analyzing, sample analysis tool, method for preventing flow of sample solution in undesired direction, and method for preventing increase in background
CN103782175A (zh) * 2011-09-13 2014-05-07 奥林巴斯株式会社 胰腺病标记物的检出方法

Also Published As

Publication number Publication date
EP1662257A1 (en) 2006-05-31
WO2005015217A1 (ja) 2005-02-17
JPWO2005015217A1 (ja) 2006-10-05
US20070031286A1 (en) 2007-02-08
EP1662257A4 (en) 2007-12-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1287154C (zh) 用于检测或者测定病毒的方法
CN1227532C (zh) 高灵敏度的免疫检测方法
CN1192097C (zh) 多阵列、多特异性的电化学发光检验
CN1969189A (zh) 非特异性反应被抑制的免疫学测定方法和试剂
CN1833169A (zh) 测量对象物测量器具、测量装置和测量方法
CN1163753C (zh) 测定抗体的方法及抗体测定装置
CN101065497A (zh) 用于亲和分离的微泡
CN1297820C (zh) 一种蛋白质组分析方法
CN1217189C (zh) 测定全血样品中白细胞个数的方法
CN1142868A (zh) 具有用于调节施加试剂的屏障的测定装置
CN1053682A (zh) 连续多步免疫测定若干生物样品中至少一种生物物质的自动测定仪器方法及使用所述仪器的试剂
CN1137316A (zh) 阻断流分析装置
CN101031798A (zh) 侧向流系统和测定
CN101031802A (zh) 使用盒的检测装置
CN1215333C (zh) 凝聚免疫分析法及其试剂
CN1519563A (zh) 分析化验装置和方法
CN101035429A (zh) 定量侧向流系统和测定
CN86103610A (zh) 免疫复合物的检测方法和步骤
CN1610831A (zh) 通过检测肿瘤发生和转移相关蛋白的糖基化变化诊断癌症的方法及使用其诊断癌症的试剂盒
CN1806053A (zh) 对蛋白的结构同工型特异的配体的鉴定方法
CN1934133A (zh) 抗a型流感病毒单克隆抗体及使用该抗体的免疫测定器具
Takahashi et al. Production of isotopically labeled heterologous proteins in non-E. coli prokaryotic and eukaryotic cells
CN100344971C (zh) 一种检测动物源性食品中磺胺类药物残留的酶联免疫试剂盒
CN1877330A (zh) 丙型肝炎病毒核心抗原酶联免疫诊断试剂盒及其制备方法
CN1500140A (zh) 用于测试多种待分析物的装置及方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication