CN1507354A - 通过给予整合蛋白αvβ3拮抗剂并与其它预防或治疗药剂配合来预防或者治疗炎性疾病或自身免疫疾病的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了运用组合治疗来防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状的方法。特别是，本发明提供了几种防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状的方法，包括对需要治疗的对象给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和至少一种其它的预防或治疗药剂。本发明还提供了几种组合物和制品，用于防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状。

Description

通过给予整合蛋白αvβ3拮抗剂并与 其它预防或治疗药剂配合来预防或者 治疗炎性疾病或自身免疫疾病的方法
1.序言
本发明提供了运用组合治疗来防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状的方法。特别是，本发明提供了几种防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状的方法，包括对需要治疗的患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和至少一种其它的预防或治疗药剂。本发明还提供了几种组合物和制品，用于防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状。
2.发明背景
发炎是一个通过它身体的白血细胞和化学物质保护我们的身体免受外来物质如细菌和病毒感染的过程。它通常以受影响的部位疼痛、肿胀、灼热和发红为特征。被称为细胞因子和前列腺素的化学物质控制此过程，这些化学物质以有序的和自我限制的级联过程被释放进入血液或受影响的组织中。化学物质的这种释放使受伤或感染部位的血流增加，并可能导致发红和灼热。某些化学物质可引起液体泄漏进入组织中而导致肿胀。这种防卫过程也可能刺激神经并引起疼痛。这些改变，当在相关的部位，在有限的时间内发生时对身体是有益的。
在自身免疫疾病和/或炎性疾病的情况下，免疫系统在没有外来物质要战斗的时候可触发发炎应答反应，并且通过对自身的错误攻击，身体的正常防卫性免疫系统对其自身的组织造成了损伤。
存在许多种不同的自身免疫病症，它们以不同的方式损害身体。例如，患有多发性硬化症的病人脑受损害，患有克罗恩症的病人消化道受损害，以及患有类风湿性关节炎的病人各种关节的滑膜、骨和软骨受损害。当自身免疫病症促使一类或几类身体组织破坏时，可能引起器官的异常生长或器官功能改变。自身免疫病症可能只损害一类器官或组织，或者也可能损害多种器官或组织。受自身免疫病症损害的器官和组织通常包括红血细胞，血管，结缔组织，内分泌腺(如甲状腺或胰腺)，肌肉，关节和皮肤。自身免疫病症的例子包括，但不局限于桥本氏甲状腺炎，恶性贫血，阿狄森症，I型糖尿病，类风湿性关节炎，系统性红斑狼疮，皮肌炎，干燥综合征，皮肌炎，红斑狼疮，多发性硬化症，自身免疫性内耳病，重症肌无力，莱特综合征，格雷夫斯病，自身免疫性肝炎，家族性腺瘤息肉和溃疡性结肠炎。
类风湿性关节炎(RA)和少年类风湿性关节炎是一类炎性关节炎，关节炎是描述关节内发炎的总称，某些类型但不是全部的关节炎是定向错误性发炎的结果。除了类风湿性关节炎之外，与炎症有关的其它类型关节炎还包括如下种类：牛皮癣关节炎，莱特综合征，关节强硬的脊柱炎病关节炎和痛风病关节炎。类风湿性关节炎是一类发生在身体双侧关节内的慢性关节炎(例如双手、双手腕或双膝关节)。这种对称性有助于区分类风湿性关节炎与其它类型的关节炎。除了损害关节之外，类风湿性关节炎还偶尔可能损害皮肤，眼睛，肺，心脏，血液或神经。
全世界约有1％的人群受类风湿性关节炎的损害，并可能致残。在美国有大约290万类风湿性关节炎病例。受损害的妇女比男人多2-3倍。发生类风湿性关节炎的一般年龄是25-50岁。少年类风湿性关节炎损害了71000年轻的美国人(18岁和小于18岁)，受损害的少女是男孩的6倍。
类风湿性关节炎是一种自身免疫病症，这种病症是身体的免疫系统不适当地将关节内分泌润滑液的滑膜看作外来物。炎症发生，并使关节内和其周围的软骨和组织受到损伤或被破坏。在严重的病例，这种炎症蔓延到其它的关节组织和环绕的软骨，这种情况下，炎症可能侵蚀或破坏骨和软骨，导致关节畸形。身体以瘢痕组织替代了受损伤的组织，导致关节内正常的间隙变窄，并使骨融合在一起。类风湿性关节炎引起关节僵硬，肿胀，伴有疲劳感，哮喘症，体重下降和发烧，并常常造成疼痛跛行。类风湿性关节炎的某些共同症状包括关节僵硬，起床活动强直的关节可能要持续1小时或更长的时间；特定的手指或手腕关节肿胀；关节周围的软组织肿胀，以及双侧关节肿胀。肿胀可以伴有或不伴有疼痛，并且可以是渐进式地恶化，或者在几年内维持相同的状态而不发展。对类风湿性关节炎的诊断是基于综合因素，包括：疼痛关节的特殊定位和对称性，早晨存在关节僵硬症状，皮肤下存在突起和节结(类风湿性节结)，显示类风湿性关节炎的X-射线检查结果，以及/或者被称为类风湿因子的血液检查阳性结果。许多患有类风湿性关节炎的人，但不是全部。在他们的血液中存在类风湿性因子抗体。在未患有类风湿性关节炎的人中也可能存在类风湿因子。其它一些疾病也可以引起在血液中产生类风湿因子。这就是为什么对类风湿性关节炎的诊断是基于综合几种因素，而不是仅仅基于血液中存在类风湿因子。
这种病的典型进程是一个持久的，但波动性的关节症状过程，大约10年之后90％的患者将显现出骨和软骨的结构损伤。小部分患者将出现完全消除症状的短急病症，而另一小部分患者将出现伴有许多关节畸形的非常严重的病症，并且这种疾病偶尔还会出现其它一些症状。皮炎过程导致对关节内骨和软骨的侵蚀或破坏。对于类风湿性关节炎存在一个自身免疫性周期：抗原持久地存在，T-细胞刺激作用，细胞因子分泌，滑膜细胞激活和关节破坏，这种疾病对病人和社会都具有重大的影响，引起明显的疼痛，功能受损害和无生活能力，以及护理病人的花费和工资消耗将损失数百万美元，(参见例如NIH website和NIAID website)。
对于关节炎目前可得到的治疗集中于用抗炎药物或免疫抑制药物减轻关节的炎症。治疗任何关节炎的第一路线通常是用抗炎剂如阿斯匹林、布洛芬，以及Cox-2抑制剂如celecoxib和rofecoxib。“第二路线药物”包括金，氨甲蝶呤和类固醇。虽然对于关节炎这些药物都是被良好确定的治疗方法，但是，仅靠这些治疗方式很少病人能恢复正常，对类风湿性关节炎发病机理认识的最新进展已导致以同抗细胞因子抗体或者同可溶性重组受体组合的方式使用氨甲蝶呤。例如，已经使用了对肿瘤坏死因子(TNF)-α的可溶性重组受体与氨甲蝶呤组合来治疗关节炎。但是以氨甲蝶呤和抗-TNF-α药剂如对TNF-α的可溶性重组受体组合治疗的病人只有大约50％显示出临床显著性好转。尽管经过治疗，对许多病人仍然无效。对于患类风湿性关节炎的病人依然存在困难的治疗结局。许多目前的治疗法具有高发生率的副作用，或者不能够完全阻止疾病发展。迄今还没有理想的治疗法，也不可能治愈。迫切需要能更有效地治疗类风湿性关节炎和其它自身免疫病症的新颖治疗法。
在此专利申请的第二节或其它任何部分对任何参考文献的引证或认同，都不要被解释为承认此参考文献作为现有技术对本发明是可利用的。
3.发明概述
本发明部分地是基于认识到整合蛋白αvβ3拮抗剂对特别是包括抗-TNF-α药剂和氨甲蝶呤的某些抗-发炎治疗药具有加强和协同作用。因此，本发明包括几种治疗方案，对于自身免疫疾病和/或炎性疾病，与目前通行的单一药剂治疗相比较它们可提供更好的预防和治疗效果。本发明提供了组合治疗法，用于对患者防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该组合治疗法包括对患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂以及一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂。特别是，本发明提供了组合治疗法，用于对患者防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该组合治疗法包括对患者给予整合蛋白αvβ3拮抗剂，优选地是VITAXINTM，以及给予至少一种其它的预防或治疗药剂，这种药剂具有与整合蛋白αvβ3拮抗剂不同的作用机制。
一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂的组合，比单独用二者治疗对患者可产生更好的预防或治疗效果。在某些实施方案中，对于患有自身免疫疾病或炎性疾病的患者，整合蛋白αvβ3拮抗剂和不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂的组合，比单独用二者治疗达到了提高二倍的预防或治疗效果，优选地是提高3倍，4倍，5倍，6倍，7倍，8倍，8倍，10倍，15倍或20倍。在其它的实施方案中，对于患有自身免疫疾病或炎性疾病的患者，整合蛋白αvβ3拮抗剂和不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂的组合，比单独用二者治疗达到了提高10％的预防或治疗效果，优选地是提高15％，20％，25％，30％，35％，40％，45％，50％，55％，60％，65％，70％，75％，80％，85％，90％，95％，100％，125％，150％或200％。在特定的实施方案中，对于患有与炎症有关的炎性疾病或自身免疫疾病的患者，整合蛋白αvβ3拮抗剂和不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂的组合，比单独用二者治疗达到了更强地减轻特定器官、组织或关节的炎症，增强达20％，优选地达25％，30％，35％，40％，45％，50％，55％，60％，65％，70％，75％，80％，85％，90％，95％或98％。在其它的实施方案中，对于患有自身免疫疾病或炎性疾病的患者，一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂的组合，具有比叠加的作用或协同性作用更多的作用。
对于患有自身免疫疾病或炎性疾病的患者，为了达到预防或治疗的效果，本发明的组合治疗法可使整合蛋白αvβ3拮抗剂的给药剂量降低，和/或使给予整合蛋白αvβ3拮抗剂的次数减少，优选地是给予VITAXINTM。对于患有自身免疫疾病或炎性疾病的患者，为了达到预防或治疗的效果，本发明的组合治疗法可使为防止或治疗自身免疫疾病或炎性疾病而用于与整合蛋白αvβ3拮抗剂联合的预防或治疗药剂的给药剂量降低，和/或使给予这种预防或治疗药剂的次数减少。本发明的组合治疗法可减少或避免一些不希望有的或有害的副作用，这些副作用是与对于自身免疫疾病或炎性疾病给予目前通常的单一药剂治疗和/或给予现有的组合治疗有关，减少或避免这些副作用又可增加病人对此治疗方案的配合。
本发明组合治疗法的预防或治疗药剂可以被同时相伴地给药或者连续相继地给药。本发明组合治疗的预防或治疗药剂也可以被循环地给药。为了减小对其中某种药剂抗性的发展，避免或减少某种药剂的副作用，和/或为了改善治疗效果，循环治疗包括在一段时间内给予第一种预防或治疗药剂，随后在一段时间内给予第两种预防或治疗药剂，并重复这种连续的给药过程，即循环。
本发明组合治疗的预防或治疗药剂可以对患者同时给药。用辞“同时”并不局限于在严格相同的时间给予预防或治疗药剂，而更确切的意思是按一个顺序，在某一时间间隔内对患者给予整合蛋白αvβ3拮抗剂和其它的药剂，以致整合蛋白αvβ3拮抗剂可以与其它药剂一起发挥作用，以便提供比按另外方式将它们给药时增加效果。例如，可以在相同的时间或者在不同的时间点以任何次序相继地给予每次预防或治疗药剂(例如VITAXINTM，抗-TNF-α抗体，或氨甲蝶呤)，但是，如果不是同时给药，也应该使他们在足够靠近的时间内给药，以便能提供所要求的治疗或预防效果。每种预防或治疗药剂可以以任何适当的形式，通过任何适合的途径被相继地给药。在各种不同的实施方案中，是在小于15分钟或小于30分钟的时间内给予预防或治疗药剂，或者相隔小于1小时，相隔大约1小时，相隔大约1-2小时，相隔大约2-3小时，相隔大约3-4小时，相隔大约4-5小时，相隔大约5-6小时，相隔大约6-7小时，相隔大约7-8小时，相隔大约8-9小时，相隔大约9-10小时，相隔大约10-11小时，相隔大约11-12小时，相隔不大于24小时或相隔不大于48小时。在优选的实施方案中，是在对病人的同一次随访中给予2种或2种以上的预防或治疗药剂。
这种组合治疗的预防或治疗药剂可以是在同一药物组合物内对患者给药。按另一种方式，本组合治疗的预防或治疗药剂也可以在各自的药物组合物内对患者同时给药。可以通过相同或不同的给药途径对患者给予这种预防或治疗药剂。
本发明提供了几种防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状的方法，这些方法包括对需要治疗的患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂，这种预防或治疗药剂是目前正在使用的，已经在使用的，或者是已知对防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状有效的。整合蛋白αvβ3拮抗剂的例子包括但不限于能阻滞抑制、减弱或中和整合蛋白αvβ3的功能活性和/或表达的蛋白质，多肽，肽，融合蛋白，抗体，抗体片段，大分子或小分子(小于10KD)。在特定的实施方案中，本发明提供了一种用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体或其片段。在优选的实施方案中，本发明提供了一种用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状的方法：该方法包括对需要治疗的患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是人类化的单克隆MEDI-522(以商标名VITAXINTM称呼)或其抗原结合片段。
自身免疫疾病的例子包括但不限于如下多种：斑秃、强直性脊柱炎、抗磷脂综合征、自身免疫阿狄森病、肾上腺自身免疫疾病、自身免疫溶血性贫血、自身免疫性肝炎、自身免疫性卵巢炎和睾丸炎、自身免疫性血小板减少症、贝切特病、大疱性类天疱疮、心肌病、口炎性腹泻-皮炎、慢性疲劳免疫功能失调综合征(CFIDS)、慢性发炎脱髓鞘多发性神经病、丘-施综合征、疤痕性类天疱疮、CREST综合征、冷凝集素病、克罗恩氏病、盘状狼疮、特发混合型冷球蛋白血症、肌纤维痛-肌纤维炎、肾小球肾炎、格雷夫斯病、格-巴综合征，桥本氏甲状腺炎、特发性肺间质纤维化、特发性血小板减少紫瘢(ITP)、IgA神经病、少年关节炎、口腔粘膜扁平苔藓、红斑狼疮、梅尼埃病、混合型结缔组织病、多发性硬化症、I型或免疫介导的糖尿病、重症肌无力、寻常性天疱疮、恶性贫血、结节性多动脉炎、多软骨炎、多腺体综合征、风湿性多肌痛、多发性肌炎和皮肌炎、原发性无γ球蛋白血症、原发胆汁性肝硬化、牛皮癣、牛皮癣关节炎、雷诺病、莱特氏综合征、类风湿性关节炎、结节病、硬皮病、斯耶格伦综合征、僵体综合征、系统性红斑狼疮、红斑狼疮、多发性大动脉炎、颞动脉炎/巨细胞动脉炎、溃疡性结肠炎、眼色素层炎，脉管炎例如疱疹样皮炎性血管炎、白癜风和Wegener氏肉芽肿。炎性疾病的例子包括但不限于哮喘、脑炎、炎性肠病、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、过敏症、败血性休克、肺纤维化、未分化的脊柱关节病、未分化的骨关节病、关节炎、炎性骨溶解，以及由慢性病毒感染和细菌感染引起的慢性炎症。如在此3.1节中所述，某些自身免疫疾病与发炎状态有关。因此，在被认为是自身免疫疾病和炎性疾病的病症之间存在重叠。所以，某些自身免疫疾病也可以称为炎性疾病。
本发明提供了几种防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状的方法，这些方法包括对需要治疗的患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种免疫调节剂。优选的情况下，免疫调节剂不能给予如下的自身免疫疾病或炎性疾病的患者：它的平均绝对淋巴细胞计数小于500个细胞/mm3，小于550个细胞/mm3，小于600个细胞/mm3，小于650个细胞/mm3，小于700个细胞/mm3，小于750个细胞/mm3，小于800个细胞/mm3，小于850个细胞/mm3，或小于900个细胞/mm3。因此，在优选的实施方案中，在对自身免疫疾病或炎性疾病的患者给予一种或几种剂量的一种或几种免疫调节剂之前，或者在给药之后，需要借助于本领域技术人员熟知的技术包括例如流式细胞仪或台盼兰计数法，对患者作绝对淋巴细胞计数测定。
免疫调节剂的例子包括但不限于如下种类：氨甲蝶呤，来氟米特，环磷酰胺，环孢多肽A，和大环内酯抗菌素(如FK506(藤霉素))，甲强的松龙(MP)，皮质类固醇，类固醇，霉酚酸莫非替克，雷帕霉素(sirolimus)，咪唑立宾，脱氧精胍菌素，布喹那，malononitriloamindes(如来氟米特)，T细胞受体调节剂，以及细胞因子受体调节剂。对有关T细胞受体调节剂和细胞因子受体调节剂的说明见3.1节。T细胞受体调节剂的例子包括但不限于抗-T细胞受体抗体(如抗-CD4单克隆抗体，抗-CD3单克隆抗体，抗-CD8单克隆抗体，抗-CD40配体单克隆抗体，抗-CD2单克隆抗体)以及CTLA4-免疫球蛋白。细胞因子受体调节剂的例子包括但不限于：可溶性细胞因子受体(如TNF-α受体的细胞外功能区或其片段，IL-1β受体的细胞外功能区或其片段，以及IL-6受体的细胞外功能区或其片段)，细胞因子或其片段(如白介素(IL)-2，IL-3，IL-4，IL-5，IL-6，IL-7，IL-8，IL-9，IL-10，IL-11，IL-12，IL-15，TNF-α，TNF-β，干扰素(IFN)-α，IFN-β，IFN-γ和GM-CSF)，抗-细胞因子受体抗体(如抗-IL-2受体抗体，抗-IL-4受体抗体，抗-IL-6受体抗体，抗-IL-10受体抗体，抗-IL-12受体抗体)，抗-细胞因子抗体(如抗-IFN受体抗体，抗-TNF-α抗体，抗-IL-1β抗体，抗IL-6抗体，以及抗-IL-12抗体)。
在特定的实施方案中，本发明提供了一种用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和预防或治疗有效剂量的一种或几种免疫调节剂。在另一实施方案中，本发明提供了一种用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和预防或治疗有效剂量的一种或几种免疫调节剂，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体或其片段。在优选的实施方案中，本发明提供了一种用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和预防或治疗有效剂量的一种或几种免疫调节剂，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是VITAXINTM，或者其抗原结合片段。在另一优选实施方案中，本发明提供了一种防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM或其抗原结合片段，以及预防或治疗有效剂量一种或几种免疫调节剂。
在特定的实施方案中，本发明提供了一种用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和预防或治疗有效剂量的氨甲蝶呤或环孢多肽。在另一实施方案中，本发明提供了一种用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM和预防或治疗有效剂量的氨甲蝶呤或环孢多肽。在另一实施方案中，本发明提供了一种用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，预防或治疗有效剂量的氨甲蝶呤，以及预防或治疗有效剂量的环孢多肽。
本发明提供了几种用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状的方法，这些方法包括对需要治疗的患者给予整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种CD2拮抗剂。特别是，本发明提供了一种用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM或者其抗原结合片段，以及一种或几种CD2拮抗剂。
本发明提供了几种用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状的方法，这些方法包括对需要治疗的患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种CD2结合分子(如可免疫特异性地结合于CD2多肽并直接或间接地介导外周血淋巴细胞消耗的肽、多肽、蛋白质、抗体(MEDI-507)，以及融合蛋白)。优选地，CD2结合分子不能给予如下的自身免疫疾病或炎性疾病的患者：它的绝对淋巴细胞计数小于500个细胞/mm3，小于550个细胞/mm3，小于600个细胞/mm3，小于650个细胞/mm3，小于700个细胞/mm3，小于750个细胞/mm3，小于800个细胞/mm3，小于850个细胞/mm3，或小于900个细胞/mm3。因此，在优选的实施方案中，在对自身免疫疾病或炎性疾病的患者给予一种或几种剂量的一种或几种CD2结合分子之前，或者在给药之后，需要借助于本领域技术人员熟知的技术包括例如流式细胞仪或台盼兰计数法，对患者作平均绝对淋巴细胞计数测定。
在特定的实施方案中，在对自身免疫疾病或炎性疾病的患者给予首剂一种或几种CD2结合分子之后，以及在给予一剂或连续几剂一种或几种CD2结合分子之前，检测被CD2结合分子结合的CD2多肽的百分数。在另一实施方案中，在对自身免疫疾病或炎性疾病的患者给予一剂或几剂CD2结合分子之后定期地(如每周，每2周，每3周，每4周，每5周，每8周，或每12周)检测被CD2结合分子结合的CD2多肽的百分数。优选的是，如果被CD2结合分子结合的CD2多肽的百分数小于80％，优选地是小于75％，小于70％，小于65％，小于50％，小于45％，小于40％，小于35％，小于30％，小于25％或小于20％，可对自身免疫疾病或炎性疾病的患者给予连续剂量的一种或几种CD2结合分子。可运用本领域技术人员熟知的技术或在此所述的技术来检测结合于CD2结合分子的CD2多肽的百分数。
在特定的实施方案中，本发明提供了一种用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种CD2结合分子。在另一实施方案中，本发明提供了一种用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种CD2结合分子，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体或其片段。在优选的实施方案中，本发明提供了一种用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和预防或治疗有效剂量的一种或几种CD2结合分子，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是VITAXINTM或其抗原结合片段。在另一优选的实施方案中，本发明提供了一种防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM或其抗原结合片段，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种CD2结合分子。
在另一实施方案中，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和预防或治疗有效剂量的一种或几种CD2结合分子，其中至少一种CD2结合分子是可溶性LFA-3多肽或LFA3TIP。在另一实施方案中，本发明提供了一种方法用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和预防或治疗有效剂量的一种或几种免疫调节剂，其中至少一种CD2结合分子是可免疫特异性地结合于CD2多肽的抗体或其片段。在优选的实施方案中，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和预防或治疗有效剂量的一种或几种免疫调节剂，其中至少一种CD2结合分子是MEDI-507或其抗原结合片段。
在另一实施方案中，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和预防或治疗有效剂量的一种或几种CD2结合分子，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体或其片段，并且其中至少一种CD2结合分子是可溶性LFA-3多肽或LFA3TIP。
在优选的实施方案中，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和预防或治疗有效剂量的一种或几种CD2结合分子，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是VITAXINTM或其抗原结合片段，并且其中至少一种CD2结合分子或其抗原结合片段。在另一实施方案中，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM或其抗原结合片段和预防或治疗有效剂量的一种或几种CD2结合分子，其中至少一种CD2结合分子或其抗原结合片段。还有在另一优选实施方案中，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM或其抗原结合片段，以及预防或治疗有效剂量的MEDI-507或其抗原结合片段。
本发明提供了几种防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种TNF-α拮抗剂。TNF-α拮抗剂的例子包括但不限于如下多种：抗体(如infliximab(REMICADETM，Centacor)，D2E7(Abbott Laboratories/Knoll制药公司，Mt.Olive N.J)，CDP571，也被称为HUMICADETM和CDP-870(Celltech/Pharmacia，Slough，U.K)，以及TN3-19.12(Williams等，1994，美国国家科学院学报91：2762-2766；Thorbecke等，1992，美国国家科学院学报89：7375-7379)，可溶性TNF-α受体(如STNF-R1(Amgen))，etanercept(ENBRELTM；Immunex)和它的大鼠同源物RENBRELTM，来自TNFrI，TNFrII的TNF-α的可溶性抑制剂(Kohno等，1990，美国国家科学院学报87：8331-8335)，以及TNF-αInh(Seckinger等，1990，关国国家科学院学报87：5188-5192)，IL-10，TNFR-IgG(Ashkenazi等，美国国家科学院学报88：10535-10539)，鼠产物TBP-1(Serono/Yeda)，疫苗CytoTAb(Protherics)，反义分子104838(ISIS)，肽RDP-58(SangStat)，酞谷酰亚胺(Celgene)，CDC-801(Celgene)，DPC-333(Dupont)，VX-745(Vertex)，AGIX-4207(Atlero Genics)，ITF-2357(Italfarmaco)，NPI-13021-31(Nereus)，SCIO-469(Scios)，TACE靶标(Immunix/AHP)，CLX-120500(Calyx)，Thiazolopyrim(Dynavax)，金诺芬(醋硫葡金)(SmithKline Beecham制药公司)，阿的平(盐酸米帕林)，替尼达普(Enablex)，黑色素(大规模生物学公司)，以及抗-p38 MAPK药剂(Uriach制品)。
在特定的实施方案中，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和预防或治疗有效剂量的一种或几种TNF-α拮抗剂。在另一实施方案中，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种TNF-α拮抗剂，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体或其片段。
在优选的实施方案中，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂以及预防或治疗有效剂量的一种或几种TNF-α拮抗剂，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是VITAXINTM或其抗原结合片段。在另一优选的实施方案中，本发明提供了一种防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM或其抗原结合片段，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种TNF-α拮抗剂。
在另一实施方案中，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和预防或治疗有效剂量的一种或几种TNF-α拮抗剂，其中至少一种TNF-α拮抗剂是可溶性TNF-α受体如etanercept(ENBRELTM，Immunex)或者其片段、衍生物或类似物，或者是可免疫特异性地结合于TNF-α的抗体如infliximab(REMICADETM，Centacor)，或者其衍生物，类似物或抗原结合片段。
在另一实施方案中，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂以及预防或治疗有效剂量的一种或几种TNF-α拮抗剂，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体或其片段，并且其中至少一种TNF-α拮抗剂是可溶性TNF-α受体如etanercept(ENBRELTM，Immunex)或者其片段、衍生物或类似物，或者是可免疫特异性地结合于TNF-α的抗体如infliximab(REMICADETM，Centacor)，或者其衍生物、类似物或抗原结合片段。
在优选的实施方案中，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种TNF-α拮抗剂，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是VITAXINTM或其抗原结合片段，并且其中至少一种TNF-α拮抗剂是可溶性TNF-α受体如etanercept(ENBRELTM，Immunex)或者其片段、衍生物或类似物，或者是可免疫特异性地结合于TNF-α的抗体如infliximab(REMICADETM，Centacor)，或者其衍生物、类似物或抗原结合片段。
本发明提供了几种防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种抗炎药剂。抗炎药剂的例子包括但不限于非类固醇抗炎药(如阿斯匹林，布洛芬，celecoxib(CELEBREXTM)，双氯酚酸钠(VOLTARENTM)，依托度酸(LODINETM)，非诺洛芬(NALFONTM)，消炎痛(INDOCINTM)，酮咯酸(TORADOLTM)，噁丙嗪(DAYPROTM)，萘丁美酮(RELAFENTM)，舒林酸(CLINORILTM)，托尔米丁(TOLECTINTM)，rofecoxib(VIOXXTM)，萘普生(甲氧萘丙酸)(ALEVETM，NAPROSyNTM)，酮洛芬(酮丙酸)(ACTRONTM)和萘普酮(RELAFENTM)以及类固醇抗炎药(例如糖皮质激素，地塞米松(DECADRONTM)，可的松，氢化可的松，强的松(DELTASONETM)，脱氢皮质甾醇，去炎松，抑氮磺胺吡啶，和eicosanoids如前列腺素，凝血噁烷和白三烯。
在特定的实施方案中，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和预防或治疗有效剂量的一种或几种抗炎药剂。在另一实施方案中，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和预防和治疗有效剂量的一种或几种抗炎药剂，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体或其片段。
在优选的实施方案中，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和预防或治疗有效剂量的一种或几种抗炎药剂，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是VITAXINTM或其抗原结合片段，在另一优选实施方案中，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM或其抗原结合片段，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种抗炎药剂。
本发明提供了几种防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，一种或几种TNF-α拮抗剂，以及一种或几种免疫调节剂。在特定的实施方案中，本发明提供了一种方法用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM，预防或治疗有效剂量的可溶性TNF-α受体(如entanercept)，以及预防或治疗有效剂量的氨甲蝶呤，在另一实施方案中本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM，预防或治疗有效剂量的可免疫特异性地结合于TNF-α的抗体(如infliximab或其抗原结合片段)，以及预防或治疗有效剂量的氨甲蝶呤。
本发明提供了几种防止、治疗、控制或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状的方法，该方法包括对患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，一种或几种TNF-α拮抗剂，以及一种或几种CD2结合分子。在特定的实施方案中，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM，预防或治疗有效剂量的可溶性TNF-α受体(如entanetcept)，以及预防或治疗有效剂量的MEDI-507或其抗原结合片段。在另一实施方案中。本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM，预防或治疗有效剂量的可免疫特异性地结合于TNF-α的抗体(如infliximab或其抗原结合片段)，以及预防或治疗有效剂量的MEDI-507或其抗原结合片段。
本发明提供了几种防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状的方法，该方法包括对患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，一种或几种TNF-α拮抗剂，以及一种或几种抗炎药剂。在特定的实施方案中，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM，预防或治疗有效剂量的可溶性TNF-α受体(如entanercept)，以及预防或治疗有效剂量的类固醇或非类固醇抗炎药。在另一实施方案中，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM，预防或治疗有效剂量的可免疫特异性地结合于TNF-α的抗体(如infliximab或其抗原结合片段)，以及预防或治疗有效剂量的类固醇或非类固醇抗炎药。
本发明提供了几种防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状的方法，该方法包括对患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，一种或几种TNF-α拮抗剂，一种或几种免疫调节剂，以及一种或几种抗炎药剂，在特定的实施方案中，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM，预防或治疗有效剂量的可溶性TNF-α受体(如entanercept)或可免疫特异性地结合于TNF-α的抗体(如infliximab或其抗原结合片段)，预防或治疗有效剂量的氨甲蝶呤，以及预防或治疗有效剂量的类固醇或非类固醇抗炎药。在另一实施方案中，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM，预防或治疗有效剂量的可溶性TNF-α受体(如entanercept)或可免疫特异性地结合于TNF-α的抗体(如infliximab或其抗原结合片段)，预防或治疗有效剂量的CD2结合分子(如MEDI-507或其抗原结合片段)，以及预防或治疗有效剂量的类固醇或非类固醇抗炎药。
本发明提供了几种防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状的方法，该方法包括对患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂以及编码一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂的一种或几种核酸分子。本发明还提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予编码一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂的一种或几种核酸分子，以及编码一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂的一种或几种核酸分子。本发明还进一步提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予编码一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂的一种或几种核酸分子，以及编码一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂的一种或几种核酸分子。
本发明提供了几种药物组合物，包含药剂学允许的载体，一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂。可按照本发明的方法将本发明的药物组合物用于防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状。优选地是，本发明的药物组合物是无菌的，并以适合于对自身免疫疾病或炎性疾病的患者特定给药方法的形式存在。
在一个实施方案中，该药物组合物包含药剂学允许的载体，一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及一种或几种免疫调节剂。在另一实施方案中，该药物组合物包含药剂学允许的载体，VITAXINTM以及一种或几种免疫调节剂。在另一实施方案中，该药物组合物包含药剂学允许的载体，VITAXINTM和氨甲蝶呤。
在特定的实施方案中，该药物组合物包含药剂学允许的载体，一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及一种或几种CD2结合分子，在另一实施方案中。该药物组合物包含药剂学允许的载体，VITAXINTM或其抗原结合片段，以及一种或几种CD2结合分子。在优选的实施方案中，该药物组合物包含药剂学允许的载体，VITAXINTM或其抗原结合片段，以及MEDI-507或其抗原结合片段。
在特定的实施方案中，该药物组合物包含药剂学允许的载体，一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及一种或几种TNF-α拮抗剂。在另一实施方案中，该药物组合物包含药剂学允许的载体，VITAXINTM或其抗原结合片段，以及一种或几种TNF-α拮抗剂。在优选的实施方案中，该药物组合物包含药剂学允许的载体，VITAXINTM或其抗原结合片段，以及可溶性TNF-α受体(如etanercept)或可免疫特异性结合于TNF-α的抗体。
在特定的实施方案中，该药物组合物包含药剂学允许的载体，一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及一种或几种抗炎药剂。在另一实施方案中，该药物组合物包含药剂学允许的载体，VITAXINTM或其抗原结合片段，以及一种或几种抗炎药剂。在优选的实施方案中，该药物组合物包含药剂学允许的载体，VITAXINTM或其抗原结合片段，以及类固醇或非类固醇抗炎药。
在一个实施方案中，该药物组合物包含药剂学允许的载体，一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，一种或几种免疫调节剂，以及一种或几种TNF-α拮抗剂。在另一实施方案中，该药物组合物包含药剂学允许的载体，一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，一种或几种CD2结合分子，以及一种或几种TNF-α拮抗剂。在另一实施方案中，该药物组合物包含药剂学允许的载体，一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，一种或几种抗炎药剂以及一种或几种TNF-α拮抗剂。按照这些实施方案，优选地至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是VITAXINTM或其抗原结合片段。
在此所述的组合物和方法对防止或治疗如下疾病特别有效：类风湿性关节炎，脊柱关节病(如牛皮癣关节炎，强直性脊柱炎，莱特综合征(a.k.a活动性关节炎)肠炎病相关的关节炎，和未分化的脊柱关节病)，牛皮癣，未分化的关节病，以及关节炎。可以按照本发明的组合物和方法治疗的牛皮癣类型的例子包括但不限于斑块状牛皮癣，脓疱状牛皮癣，红皮状牛皮癣，斑点状牛皮癣和反向牛皮癣。还可以将在此所述的组合物和方法应用于防止、治疗、控制或缓解与如下病症有关的一种或几种症状：炎性骨溶解，以不正常骨重吸收为特征的其它疾病，或者以骨丧失为特征的疾病(如骨质疏松症)在优选的实施方案中，在此所述的组合物和方法被用于为预防、治疗、控制或缓解与类风湿性关节炎有关的一种或几种症状的预防或治疗方案。在另一优选的实施方案中，在此所述的组合物和方法被用于为预防、治疗、控制或缓解与牛皮癣或牛皮癣关节炎有关的一种或几种症状的预防或治疗方案。在另一优选的实施方案中，在此所述的组合物和方法被用于为预防、治疗、控制或缓解骨质疏松症状的预防或治疗方案，此骨质疏松症是与类风湿性关节炎、牛皮癣关节炎或牛皮癣和少年慢性关节炎有关的。
本发明提供了一种制品，包括包装材料和包含在此包装材料内的，以适合于对患者给药的形式存在的本发明药物组合物。特别是，本发明提供了一种制品，包括包装材料和包含在此包装材料内的，以适合于对患者给药的形式存在的本发明药物组合物，其中该药物组合物包含一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂，以及药剂学允许的载体。本发明的制品还可以包括关于药物组合物的用途或用药方法的说明书，此说明书还可包含其它的信息资料：告戒医生、技术人员或病人如何适当地预防或治疗所述的疾病或异常。
在特定的实施方案中，该制品包括包装材料和包含在此包装材料内的，以适合于对患者给药的形式存在的药物组合物，其中该药物组合物包含整合蛋白αvβ3拮抗剂，抗炎药剂和药剂学允许的载体，在另一实施方案中，该制品包括包装材料和包含在此包装材料内的，以适合于对患者给药的形式存在的药物组合物，患者优选地是人，而最优选的是患有自身免疫疾病或炎性疾病的人，其中该药物组合物包含整合蛋白αvβ3拮抗剂，免疫调节剂和药剂学允许的载体
在另一实施方案中，该制品包括包装材料和包含在此包装材料内的，以适合于对患者给药的形式存在的药物组合物，患者优选地是人，而最优选的是患有自身免疫疾病或炎性疾病的人，其中该药物组合物包含整合蛋白αvβ3拮抗剂，CD2结合分子和药剂学允许的载体。在优选的实施方案中，该制品包括包装材料和包含在此包装材料内的，以适合于对人给药的形式存在的药物组合物，人优选地是患有自身免疫疾病或炎性疾病的人，其中该药物组合物包含VITAXINTM拮抗剂，MEDI-507和药剂学允许的载体。
在另一实施方案中，该制品包括包装材料和包含在此包装材料内的，以适合于对患者给药的形式存在的药物组合物，患者优选地是人，而最优选的是患有自身免疫疾病或炎性疾病的人，其中该药物组合物包含整合蛋白αvβ3拮抗剂，TNF-α拮抗剂和药剂学允许的载体。在优选的实施方案中，该制品包括包装材料和包含在此包装材料内的，以适合于对人给药的形式存在的药物组合物，人优选地是患有自身免疫疾病或炎性疾病的人，其中该药物组合物包含整合蛋白αvβ3拮抗剂，ENBRELTM或REMICADETM，以及药剂学允许的载体。
3.1术语
如在此使用的名词“附加的”和“联合”可与“协同”或“组合的”互换使用。
在此使用的名词“类似物”。从多肽的角度指的是一个多肽具有与第二个多肽相似或相同的功能，或者具有第二个多肽的相似或相同的结构，但不一定包含第二个多肽的相似或相同的氨基酸序列。一个肽具有相似的氨基酸序列指的是此多肽满足至少如下一个条件：(a)此多肽具有与第二个多肽的氨基酸序列相同的氨基酸序列达到至少30％，至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少99％；(b)此多肽由一个核苷酸序列编码，此核苷酸序列在严格条件下可与编码第二个多肽的至少5个、至少10个、至少15个、至少20个、至少25个、至少40个、至少50个、至少60个、至少70个、至少80个、至少90个、至少100个、至少125个、或至少150个、相邻氨基酸残基的核苷酸序列杂交，和(c)此多肽由一个核苷酸序列编码，此核苷酸序列与编码第二个多肽的核苷酸序列相同达到至少30％，至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少99％；一个多肽与第二个多肽具有相似的结构指的是此多肽与第二个多肽具有相似的二级、三级或四级结构，可借助于本领域技术人员熟知的方法测定多肽的结构，这些方法包括但不限于，肽测序法，χ-射线结晶分析，核磁共振，园二色性法，以及结晶分析电子显微镜。
为了确定二个氨基酸序列或二个核酸序列的同一性百分数，为最佳的比较目的序列被排列成直线(例如为了与第二个氨基酸序列或核酸序列最佳地对准，可将空隙插入第一个氨基酸序列或核酸序列的序列中)。然后在相应的氨基酸位置或核苷酸位置对氨基酸残基或核苷酸进行比较。当第一个序列中的某一位置被与第二个序列中相应位置相同的氨基酸残基或核苷酸占据，那么在此位置的分子是相同的，二个序列之间的同一性百分数是被序列均分的相同位置数的函数(即％同一性二重叠的相同位置数/位置总数×100％)。在一个实施方案中，二个序列是相同的长度。
还可以应用数学演绎法来确定二个序列之间的同一性百分数，被用于二个序列比较的数学演绎法的优选非限制性实例是Karlin和Altschul 1990，美国国家科学院学报87：2264-2268中的演绎法，并在例如Karlin和Altschul 1993，美国国家科学院学报90：5873-5877中被修改。这样一种演绎法还被合并编入Altschul等1990，分子生物学杂志215：403中的NBLAST和XBLAST程序。应用NBLAST核苷酸程序参数系统可进行BLAST核苷酸搜寻例如对于计分＝100，字码长＝12将得到与本发明的核酸分子同源的核苷酸序列。应用XBLAST程序参数系统可进行BLAST蛋白质搜寻，例如对于计分＝50，字码长＝3，将得到与本发明的蛋白质分子同源的氨基酸序列。为比较的目的为了获得空缺校准，如在Altschal等1997、核酸研究25：：3389-3402中所述的可使用空缺BLAST。按另一种方式，可应用PSI-BLAST进行反复搜寻，这样可测定分子间疏远的关系(Id)。当应用BLAST程序、空缺BLAST程序和PSI-BLAST程序时，可使用各程序中的缺省参数(例如XBLAST和NBLAST的)(见例如NCBI Website)。用于序列比较的数学演绎法的另一个优选非限制性实例是Myers和Miller，1988，CABIOS 4：11-17中的演绎法，这种演绎法已被合并编入ALIGN程序(版本2.0)，此程序是GCG序列校准软件包的一部分。当将ALIGN程序应用于比较氨基酸序列时，可使用PAM120加权残基表，空隙长度损失12和空隙损失4。
应用与上述类似的技术，可以确定具有或不具有允许空隙的二个序列之间的同一性百分数。在计算同一性百分数时，一般只计数确实相匹配的。
在此使用的名词“类似物”从蛋白质类似物的角度指的是，第二个有机或无机分子具有与第一个有机或无机分子相似或相同的功能，并且结构与第一个有机或无机分子相似。
在此使用的名词“拮抗剂”指的是任何一种蛋白质，多肽，肽，抗体，抗体片段，大分子或小分子(小于10KD)，它们能阻碍、抑制，降低或中和另一种分子的功能、活性和/或表达，在不同的实施方案中，拮抗剂相对于对照如磷酸缓冲盐水(PBS)降低另一种分子的功能、活性和/或表达达到至少10％，至少15％，至少20％，至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，至少99％。
在此使用的名词“抗体”指的是单克隆抗体，多特异性抗体，人抗体，人源化抗体，嵌合抗体，单链Fvs(ScFv)，单链抗体，Fab片段，F(ab′)片段，二硫键连接的Fvs(SdFv)，和抗独特型(抗-Id)抗体(包括如对本发明抗体的抗-Id抗体)，以及上述任何一种抗体的抗原表位结合片段。特别是，抗体包括免疫球蛋白分子和免疫球蛋白分子的免疫活性片段，即包含抗原结合位点的分子。免疫球蛋白分子可以是任何型(如IgG、IgE、IgM、IgD、IgA和IgY)，任何类(如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2)，或者任何亚类。
在此使用的名词“抗-TNF-α药剂”，“TNF-α拮抗剂”和类似的名词指的是任何一种蛋白质，多肽，肽，融合蛋白，抗体，抗体片段，大分子或小分子，它们能阻碍、降低、抑制或中和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的功能、活性和/或表达。TNF-α拮抗剂的例子包括但不限于REMICADETM和ENBRELTM。在不同的实施方案中，TNF-α拮抗剂相对于对照如磷酸缓冲盐水(PBS)降低TNF-α的功能、活性和/或表达达到至少10％，至少15％，至少20％，至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，至少99％。
在此使用的名词“CD2多肽”指的是CD2糖蛋白(a.k.a T11或LFA-2)或其片段。在优选的实施方案中，CD2多肽是由免疫细胞如T细胞和自然杀伤细胞(“NK”)表达的细胞表面的50-55KDa糖蛋白。CD2多肽可以来自任何物种。可在文献中或公共数据库中找到CD2多肽的核苷酸序列和/或氨基酸序列，或者应用本领域技术人员熟知的克隆和测序技术可以测定此核苷酸和/或氨基酸序列。例如，人CD2的核苷酸序列可在GenBank数据库中找到(见例如检索号XO6143，AH002740和M16445)。
在此使用的名词“细胞因子受体调节剂”指的是一种药剂，它能调节细胞因子受体的磷酸化，调节激活与细胞因子受体有关的信号转导途径，和/或调节特定蛋白如细胞因子的表达。这种药剂可能是直接或间接地调节细胞因子受体的磷酸化，调节激活与细胞因子受体有关的信号转导途径，和/或调节特定蛋白如细胞因子的表达。因此，细胞因子受体调节剂的例子包括但不限于可免疫特异性地结合于细胞因子受体或其片段的细胞因子，细胞因子片段，融合蛋白和抗体。细胞因子调节剂的进一步的例子包括但不限于可免疫特异性地结合于细胞因子或其片段的肽，多肽(如可溶性细胞因子受体)，融合蛋白和抗体。
在此使用的名词“皮肤病药剂”和类似的名词指的是有助于治疗皮肤疾病和障碍的药剂。优选地皮肤病药剂指的是用于防止、治疗或缓解皮肤病症的局部药剂，特别是与T细胞渗透作用提高，T细胞激活作用提高和/或异常抗原呈递有关的皮肤病症。在特别优选的实施方案中皮肤病药剂指的是用于防止、治疗或缓解牛皮癣或者其一种或几种症状的局部药剂。
在此使用的名词“衍生物”从多肽的角度指的是含有一种氨基酸序列的多肽，此序列已通过导入氨基酸残基的取代、缺失或添加发生了改变。在此使用的名词“衍生物”还指已被修饰的多肽，即通过将任何类型的分子共价结合于此多肽。例如但不作为限制，抗体可被修饰，如通过糖基化，乙酰化，乙二醇化，磷酸化，酰胺化，通过已知的保护基团/封闭基团衍生化，蛋白水解断开，连接于细胞配体或其它蛋白质等。应用本领域技术人员熟知的技术，通过化学修饰可产生衍生的多肽，包括但不限于特异性化学断开，乙酰化，甲酰化，衣霉素代谢合成等。另外，衍生的多肽还可能包含一个或几个非标准的氨基酸，多肽衍生物具有与产生它的多肽相似或相同的功能。
在此使用的名词“衍生物”从非蛋白质衍生物的角度指的是，第二个有机或无机分子是在第一个有机或无机分子的结构基础上形成的、有机分子衍生物包括但不限于例如通过添加或缺失羟基、甲基、乙基、羧基或胺基修饰的分子。有机分子还可以被酯化、烷基化和/或磷酸化。
在此使用的名词“异常”和“疾病”可互换地被用于指患者的一种病症。特别是名词“自身免疫病”可与名词“自身免疫疾病”互换地用于指患者的一种病症，此病症的特征是患者对它自身细胞、组织和/或器官的免疫反应引起了细胞、组织和/或器官的损伤。名词“炎症”可与名词炎性疾病互换地用于指患者以炎症为特征的一种病症，优选地是慢性炎症。自身免疫疾病可以与炎症有关或者与炎症无关。而且炎症可以是由自身免疫疾病引起或者不是由自身免疫疾病引起。因此，某些异常可能既具有自身免疫疾病又具有炎性疾病的特征。
在此使用的名词“表位”指的是动物体内，优选地是哺乳动物，最优选的是人体内具有抗原活性或致免疫活性的多肽或蛋白质片段。具有致免疫活性的表位是在动物体内诱发抗体应答的多肽或蛋白质片段。具有抗原活性的表位是当借助于本领域熟知的方法如免疫检测法测定时，抗体可结合于它的多肽或蛋白质片段。抗原表位不需要一定是致免疫性的。
在此使用的名词“片段”指的是包含某一氨基酸序列的肽或多肽，此序列含有另一多肽氨基酸序列的至少5个相邻的氨基酸残基，至少10个相邻的氨基酸残基，至少15个相邻的氨基酸残基，至少20个相邻的氨基酸残基，至少25个相邻的氨基酸残基，至少40个相邻的氨基酸残基，至少50个相邻的氨基酸残基，至少60个相邻的氨基酸残基，至少70个相邻的氨基酸残基，至少80个相邻的氨基酸残基，至少90个相邻的氨基酸残基，至少100个相邻的氨基酸残基，至少125个相邻的氨基酸残基，至少150个相邻的氨基酸残基，至少175个相邻的氨基酸残基，至少200个相邻的氨基酸残基，或至少250个相邻的氨基酸残基。在特定的实施方案中，一个多肽的片段保留有此多肽的至少一种功能。
在此使用的名词“功能性片段”指的是包含某一氨基酸序列的肽或多肽，此序列含有第二个不同的多肽氨基酸序列的至少5个相邻的氨基酸残基，至少10个相邻的氨基酸残基，至少15个相邻的氨基酸残基，至少20个相邻的氨基酸残基，至少25个相邻的氨基酸残基，至少40个相邻的氨基酸残基，至少50个相邻的氨基酸残基，至少60个相邻的氨基酸残基，至少70个相邻的氨基酸残基，至少80个相邻的氨基酸残基，至少90个相邻的氨基酸残基，至少100个相邻的氨基酸残基，至少125个相邻的氨基酸残基，至少150个相邻的氨基酸残基，至少175个相邻的氨基酸残基，至少200个相邻的氨基酸残基，或至少250个相邻的氨基酸残基，其中该肽或多肽保留有此第二个不同多肽的至少一种功能。
在此使用的名词“融合蛋白”指的是一种多肽，它包含第一种蛋白质或者其功能性片段，类似物或衍生物的氨基酸序列，以及一种异源蛋白质的氨基酸序列(异源蛋白质即不同于第一种蛋白质或者其功能性片段、类似物或衍生物的第两种蛋白质或者其功能性片段、类似物或衍生物)。在一个实施方案中，融合蛋白包含与异源蛋白质、多肽或肽融合的预防或治疗药剂。按照此实施方案，此异源蛋白质，多肽或肽可以是或者不是一种不同类型的预防或治疗药剂。例如，可使具有免疫调节活性的两种不同的蛋白质、多肽或肽融合在一起形成一种融合蛋白。在某些实施方案中，融合蛋白包含具有整合蛋白αvβ3拮抗剂活性的蛋白质、多肽或肽，以及一个异源蛋白质、多肽或肽。在其它实施方案中，融合蛋白包含具有免疫调节活性的蛋白质、多肽或肽，以及一个异源蛋白质、多肽或肽。在其它的实施方案中，融合蛋白包含CD2结合分子和一个异源蛋白质、多肽或肽。在还有的其它实施方案中，融合蛋白包含具有TNF-α拮抗剂活性的蛋白质、多肽或肽，以及一个异源蛋白质、多肽或肽。在优选的实施方案中，相对于与异源蛋白质融合之前原有蛋白质、多肽或肽的活性，融合蛋白保留了或具有增强的整合蛋白αvβ3拮抗剂活性、免疫调节活性或TNF-α拮抗剂活性。
在此使用的名词“宿主细胞”指的是以核酸分子转染的特定目标细胞以及这种细胞的后代或可能的后代。这种细胞的后代与用此核酸分子转染的亲代细胞可能不完全相同，由于在以后的增殖过程或者在将此核酸分子整合进入此宿主细胞基因组的过程中可能发生突变或环境影响。
在此使用的名词“在严格条件下杂交”描述杂交和漂洗的条件，在此条件下相互至少60％(65％，70％，优选地75％)相同的核苷酸序列一般可保持相互杂交，这种严格条件是本领域技术人员熟知的，可在“分子生物学现代策略”，John Wiley和Sons，N.Y.(1989)6.3.1-6.3.6中找到。在一个非限制性实例中，严格杂交条件是在大约45℃，在6×氯化钠/柠檬酸钠(SSC)中杂交，随后在0.1×SSC，0.2％ SDS中大约68℃漂洗一次或几次。在优选的非限制性实例中，严格杂交条件是在6×SSC中大约45℃杂交，随后在0.2×SSC，0.1％ SDS中50-65℃漂洗一次或几次(在50℃，55℃，60℃或65℃漂洗一次或几次)。当然，本发明的核酸不包括仅仅在这些条件下与只由A或T核苷酸组成的核苷酸序列杂交的核酸分子。
在此使用的名词“免疫调节剂”及其变异物包括但不限于免疫调节剂，指的是可调节宿主免疫系统的药剂。在某些实施方案中，免疫调节剂是免疫抑制剂。在其它某些实施方案中，免疫调节剂是免疫刺激剂。按照本发明，用于本发明组合治疗的免疫调节剂不包括整合蛋白αvβ3拮抗剂。免疫调节剂包括但不限于小分子，肽，多肽，融合蛋白，抗体、无机分子，模拟分子和有机分子。在某些实施方案中，被用于本发明结合治疗的免疫调节剂是CD2结合分子。在其它实施方案中，用于本发明组合治疗的免疫调节剂不是CD2结合分子。在其它的实施方案中，用于本发明组合治疗的免疫调节剂是TNF-α拮抗剂。在其它实施方案中，用于本发明组合治疗的免疫调节剂不是TNF-α拮抗剂。在其它的实施方案中，用于本发明组合治疗的免疫调节剂是氨甲蝶呤。在还有的其它实施方案中，用于本发明组合治疗的免疫调节剂不是氨甲蝶呤。
在此使用的名词“免疫特异性地结合于抗原”和类似的名词，指的是可特异性地结合于一种抗原或片段，而不特异性地结合于其它抗原的肽、多肽、融合蛋白和抗体或其片段。可免疫特异性地结合于一种抗原的肽或多肽，当借助于例如免疫检测法，BIAcore或本领域已知的其它检测法测定时，也可能以较低的亲和性结合于其它的肽或多肽。可免疫特异性地结合于一种抗原的抗体或片段也可能与相关的抗原有交叉反应。优选的情况是，可免疫特异性地结合于一种抗原的抗体或片段与其它抗原没有交叉反应。在某些实施方案中，一种肽，多肽，或抗体可免疫特异性地结合于它的抗原，是一种细胞因子，细胞因子受体或T细胞受体。
在此使用的名词“免疫特异性地结合于CD2多肽”和类似的名词指的是，可特异性地结合于CD2多肽或其片段，而不特异性地结合于其它多肽的肽，多肽，融合蛋白和抗体或者其片段。当借助于例如免疫检测法，BIAcore或本领域已知的其它检测法测定时，可免疫特异性地结合于CD2多肽的肽或多肽也可能以较低的亲和性结合于其它的肽或多肽。可免疫特异性地结合于CD2多肽的抗体或片段也可能与相关的抗原有交叉反应。优选地是，可免疫特异性地结合于CD2多肽或其片段的抗体或片段与其它抗原没有交叉反应。例如可借助于免疫检测法，BIAcore或本领域技术人员已知的其它技术，鉴定可免疫特异性地结合于CD2多肽的抗体或片段。当应用实验技术如放射免疫检测法(RIA)和酶联免疫吸附检测法(ELISAs)测定时，如果一种抗体或其片段以比对任何交叉反应抗原较高的亲和性结合于CD2多肽，则认为此抗体或其片段可特异性地结合于CD2多肽。参见例如Paul编辑，1989，基础免疫学，第二版，Raven出版社，New York P332-336，关于抗体特异性的论述。
在此使用的名词“免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3”和类似的名词指的是，可特异性地结合于整合蛋白αvβ3多肽或整合蛋白αvβ3多肽的片段，而不特异性地结合于其它多肽的肽、多肽，融合蛋白和抗体或其片段。优选地是，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3多肽或其片段的抗体或片段与其它抗原没有交叉反应。例如可以借助于免疫检测法或其它本领域技术人员熟知的技术，鉴定了免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3多肽的抗体或片段。优选地是，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3多肽或其片段的抗体或片段只对抗整合蛋白αvβ3的活性，不明显地对抗其它整合蛋白的活性。
在此使用的名词“以组合形式”指的是使用一个以上的预防和/或治疗药剂。使用名词“以组合形式”不限制对患有自身免疫疾病或炎性疾病患者给予预防和/或治疗药剂的顺序。可在对患有自身免疫疾病或炎性疾病的患者给予第二个预防或治疗药剂之前(例如5分钟，15分钟，30分钟，45分钟，1小时，2小时，4小时，6小时，12小时，24小时，48小时，72小时，96小时，1周，2周，3周，4周，5周，6周，8周，或12周之前)，相伴同时，或者在其之后(例如5分钟，15分钟，30分钟，45分钟，1小时，2小时，4小时，6小时，12小时，24小时，48小时，72小时，96小时，1周，2周，3周，4周，5周，6周，8周，或12周之后)给予第一个预防或治疗药剂。
在此使用的“整合蛋白αvβ3拮抗剂，”和类似的名词指的是，能阻碍、抑制、降低、或中和整合蛋白αvβ3的功能、活性和/或表达的任何一种蛋白质，多肽，肽，融合蛋白，抗体，抗体片段，大分子或小分子(小于10KD)。整合蛋白αvβ3拮抗剂的优选的非限制性例子是VITAXINTM。在不同的实施方案中，相对于对照如PBS，整合蛋白αvβ3拮抗剂降低整合蛋白αvβ3的功能、活性和/或表达达到至少10％，至少15％，至少20％，至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少99％。
在此使用的名词“分离的”，从肽、多肽，融合蛋白或抗体的角度指的是一种肽，多肽，融合蛋白或抗体，它基本上没有从得到它的细胞或组织来源的细胞物质或污染蛋白质，或者当它被化学合成时基本上没有化学前体物或其它化学物质。措辞“基本上没有细胞物质”包括肽，多肽，融合蛋白或抗体的制备物，其中的肽，多肽，融合蛋白或抗体是从分离或重组产生它的细胞的细胞成分中分离出。因此，基本上没有细胞物质的肽，多肽，融合蛋白或抗体，包括具有少于大约30％，20％，10％或5％(以干重计算)异源性蛋白质(在此也被称为“污染蛋白质”)的肽，多肽，融合蛋白或抗体的制备物。当这种肽，多肽，融合蛋白或抗体被重组产生时，优选地它还基本上不含培养基，即培养基显示出小于此蛋白质制备物体积的大约20％，10％，或5％。当这种肽，多肽，融合蛋白或抗体通过化学合成产生时，优选地它基本上不含化学前体物或其它化学物质，即它是从合成这种肽，多肽，融合蛋白或抗体的过程中包含的化学前体物或其它化学物质中分离出。因此这种肽，多肽，融合蛋白或抗体的制备物可含有不同于所研究的此肽，多肽，融合蛋白或抗体的少于大约30％、20％、10％、5％(干重)的化学前体物或化合物。在优选的实施方案中，整合蛋白αvβ3是分离出的。在另一优选的实施方案中，免疫调节剂是分离出的，在还有另一个优选实施方案中，TNF-α拮抗剂是分离出的。
在此使用的名词“分离的”从核酸分子的角度指的是从存在于自然来源的其它核酸分子分离出的核酸分子。并且，当通过重组技术产生时，“分离的”核酸分子如cDNA分子可以基本上不含其它细胞物质或培养基，或者当被化学合成时，可基本上不含化学前体物或其它化学物质。在优选的实施方案中，编码整合蛋白αvβ3拮抗剂的核酸分子是分离出的。在另一优选实施方案中编码免疫调节剂的核酸分子是分离出的。在还有另一优选实施方案中，编码TNF-α拮抗剂的核酸分子是分离出的。
在此使用的名词“低耐受性”指的是一种状况，病人从治疗中遭受副作用，致使病人由于这种有害的副作用不能从治疗中受益和/或不能继续治疗。
在此使用的名词“控制”指的是患者从预防或治疗药剂得到的有益效果，但它不导致治愈此疾病。在某些实施方案中，为了“控制”某一疾病，对患者给予一种或几种预防或治疗药剂，以致防止了此疾病的发展或恶化。
在此使用的措词“轻度疾病”描述关节炎病人具有至少2个肿胀的关节，但具有不超过10个触痛的关节。
在此使用的名词“非应答性”和“顽固性”，描述用目前能得到的预防或治疗药剂对病人治疗炎性疾病或自身免疫疾病(例如单独用氨甲蝶呤或用抗-TNF-α药剂)，但这种治疗在临床上不足以消除与炎性疾病或自身免疫疾病有关的一种或几种症状，典型的情况是这种病人患有严重、顽固的活动性疾病，为缓解与它们的炎性疾病或自身免疫疾病有关的症状需要给予补充治疗。
在此使用的名词“核酸”和“核苷酸序列”包括DNA分子(如cDNA或基因组DNA)，RNA分子(如mRNA)，DNA和RNA分子的组合物，或杂交的DNA/RNA分子，以及DNA或RNA分子的类似物。可使用例如核苷酸类似物产生这种类似物，此核苷酸类似物包括但不限于次黄嘌呤核苷或三苯甲基化的碱基，这种类似物还可以包括含有被修饰骨干的DNA或RNA分子，这种修饰可将有益的特性给予这种分子，例如核酸酶抗性或增加跨越细胞膜的能力，此核酸或核苷酸序列可以是单链的，双链的，可能包含单链和双链的二个部分，还可能包含三链的部分，但优选地是双链DNA。
在此使用的名词“使更有效”指的是在通常或认可的剂量下增强预防或治疗药剂的效力。
在此使用的名词“预防药剂”指的是可用于防止自身免疫疾病或炎性疾病的任何药剂，在某些实施方案中，名词预防药剂指整合蛋白αvβ3拮抗剂(如VITAXINTM)，在某些其它的实施方案中，名词预防药剂不指整合蛋白αvβ3拮抗剂(如VITAXINTM)。优选地，预防药剂是对防止或阻碍自身免疫疾病或炎性疾病发展、发作或进行已知有效的，或者是已经用于或目前正在用于此目的的药剂。
在此使用的名词“防止”指的是由于对患者给予预防或治疗药剂，可防止自身免疫疾病或炎性疾病的一种或几种症状再发生或发作。
在此使用的名词“预防有效剂量”指的是此预防药剂的用药量足以导致防止某疾病的一种或几种症状的再发生或发作。
在此使用的名词“剂量方案”指的是定剂量和定时间给予一种或几种预防药剂的规范方式。
在此使用的名词“方案”包括给药时间表和给药规范。在此的方案是使用方法，并包括预防和治疗方案。
在此使用的名词“副作用”包括预防或治疗药剂的不希望有的和有害的作用。有害的作用通常是不希望有的，但不希望有的作用不一定是有害的。由预防或治疗药剂引起的有害副作用可能是有害的或不舒适的或危险的。由给予REMICADETM引起的副作用包括但不限于严重感染的危险和过敏性反应。其它的副作用的范围包括非特异性症状如发烧或寒栗，瘙痒或荨麻疹，以及心肺反应如胸痛、低血压、高血压或呼吸困难，还包括如肌痛和/或关节痛，发疹，面部、手或唇水肿，咽下困难，剧烈喉痛和头痛。还有其它的副作用包括但不限于腹胀，脾梗塞，脾大，头昏眼花，上行运动神经元损害，红斑狼疮综合征、类风湿性节块，耵聍分泌过多，腹痛，腹泻，胃溃疡，肠梗阻，肠穿孔，肠狭窄，噁心，胰腺炎，呕吐，背痛、骨折、腱异常或损伤，心衰，局部缺血性心肌衰弱，淋巴瘤，血小板减少，蜂窝组织炎，焦虑，心神不安，精神狂乱、抑郁，嗜睡，自杀倾向，哮喘，脓肿，细菌感染和败血症，由于ENBRELTM给药的副作用包括但不限于严重的感染危险和脓毒病，包括死亡。有害副作用的范围还包括严重的感染如肾盂肾炎，支气管炎，腐败性关节炎，腹部肿胀，蜂窝组织炎，骨髓炎，伤口感染，肺炎，脚脓肿，腿溃疡，腹泻，窦炎，败血症、头痛、噁心，鼻炎，晕眩，咽炎，咳嗽，无力，腹痛，发疹，周围水肿，呼吸异常，消化不良，窦炎，呕吐，口腔溃疡，秃发和Pheumonitis，还包括其它较少出现的有害副作用如心衰，心肌梗塞、局部缺血性心肌衰弱，大脑局部缺血，高血压，低血压，胆囊炎，胰腺炎，胃肠道出血，滑囊炎，抑郁，呼吸困难，深静脉血栓症，肺栓塞，肾小球膜肾病，多发性肌炎以及血栓静脉炎。由给予氨甲蝶呤引起的副作用包括但不限于可以致命的严重毒性反应如出人意料严重的骨髓抑制，胃肠毒性，肝毒性，长期使用后的肝纤维化和硬化，肺部病症，腹泻和溃疡性胃炎，恶性淋巴瘤和偶发的致命性严重皮肤反应。
在此使用的名词“小分子”和类似的名词包括但不限于肽，肽模拟物，氨基酸，氨基酸类似物，多核苷酸，多核苷酸类似物，核苷酸，核苷酸类似物，具有每克分子小于大约10000克分子量、小于大约5000克分子量、小于大约1000克分子量、小于大约500克分子量的有机或无机化合物(即包括异型有机化合物和有机金属化合物)，以及这些化合物的盐、酯，和其它药剂学允许的形式。
在此使用的名词“患者”和“病人”可互换地使用。在此使用的“患者”指的是动物，优选地是哺乳动物，包括非灵长目(如牛、猪、马、猫、犬、大鼠和小鼠)的灵长目(如猿如Cynomolgou猿和人)，更优选地是人。在一个实施方案中，患者不是免疫受损害的或免疫抑制的哺乳动物，优选地不是免疫受损害的或免疫抑制的人(如HIV病)。在另一实施方案中，患者不是具有淋巴细胞计数在大约500个细胞/mm3以下的哺乳动物，优选地是人。在另一实施方案中，患者是用一种或几种TNF-α拮抗剂治疗的或以前已经治疗的哺乳动物，优选地是人。在另一实施方案中，患者是用一种或几种TNF-α拮抗剂和氨甲蝶呤治疗的或以前已经治疗的哺乳动物，优选地是人。在另一实施方案中，患者是目前未用TNF-α拮抗剂或氨甲蝶呤治疗的哺乳动物，优选地是人。在还有另一实施方案中，患者是患有炎性疾病或自身免疫疾病，并用TNF-α拮抗剂、非类固醇抗炎药剂或氨甲蝶呤单独难以治疗的哺乳动物，优选地是人，在优选的实施方案中，患者是人。在另一实施方案中，患者是患有如下种疾病的人：类风湿性关节炎，脊柱关节病(如牛皮癣关节炎，强直性脊柱炎，莱特综合征(a.k.a活动性关节炎)。肠炎病相关的关节炎，或未分化的脊柱关节病)，未分化的关节病或牛皮癣。在优选的实施方案中，患者是患有类风湿性关节炎，牛皮癣关节炎，或牛皮癣的人。
在此使用的名词“协同的”指的是预防或治疗药剂的组合，它比任何二个或几个单独药剂的叠加作用更有效。预防或治疗药剂组合的协同作用使有可能对患有自身免疫疾病或炎性疾病的患者使用较低剂量的一种或几种该药剂，和/或给予该药剂较少的次数。使用较低剂量预防或治疗药剂和/或给予该药剂较少次数的能力，降低了对患者与给予该药剂有关的毒性，而不降低该药剂防止或治疗自身免疫疾病或炎性疾病的效果。此外，协同作用还可导致增强药剂防止或治疗自身免疫疾病或炎性疾病的效果。最后，预防或治疗药剂组合的协同作用还可能避免或降低与使用任何单独治疗有关的有害或不希望有的副作用。
在此使用的名词“T细胞受体调节剂”指的是一种药剂，它可调节T细胞受体的磷酸化，调节与T细胞受体有关的信号转导途径的激活，和/或调节特殊蛋白质如细胞因子的表达。这种药剂可直接或间接地调节T细胞受体的磷酸化、调节与T细胞受体有关的信号转导途径的激活，和/或调节特殊蛋白质如细胞因子的表达。因此，T细胞受体调节剂的例子包括但不限于可免疫特异性地结合于T细胞受体或其片段的肽、多肽、融合蛋白和抗体，进而，T细胞受体调节剂的例子包括但不限于可免疫特异性地结合于对T细胞受体或其片段配体的肽、多肽(如可溶性T细胞受体)，融合蛋白和抗体。
在此使用的名词“治疗药剂”指的是可用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病的一种或几种症状的任何药剂，在某些实施方案中，名词“治疗药剂”指整合蛋白αvβ3拮抗剂(如VITAXINTM)。在另一些实施方案中，名词“治疗药剂”指的不是整合蛋白αvβ3拮抗剂(如VITAXINTM)。优选的治疗药剂是对治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状已知是有效的，或者已经用于或正在用于这种治疗的药剂。
在此使用的名词“治疗有效剂量”指的是足以导致缓解疾病的一种或几种症状的治疗药剂给药量。就治疗牛皮癣而论，治疗有效剂量优选地指某一药剂的用药量降低人的牛皮癣面积和严重指数(PASI)计分达到至少20％，至少30％，至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，或至少85％。关于牛皮癣治疗的另一种情况是，治疗有效剂量优选地是指某一治疗药剂的用药量提高、人的总体评估计分达到至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％或至少95％。
在此使用的名词“治疗方案”指的是对给予一种或几种治疗药剂的定剂量和定时间规范。
在此使用的名词“治疗”指的是由给予一种或几种预防或治疗药剂引起的缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，在某些实施方案中，此名词指由对患有这种疾病的患者给予一种或几种预防或治疗药剂引起的减轻一个或几个关节肿胀，或者减轻与自身免疫疾病或炎性疾病有关的疼痛。在其它实施方案中，此名词指降低人的PASI计分。在其它实施方案中，此名词指提高人的总体评估计分。
4.附图说明
图1A-1B：抗体VITAXINTM可变区的核苷酸序列和推导的氨基酸序列。图1A显示出VITAXINTM重链可变区的核苷酸序列和推导的氨基酸序列(分别为SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8)。图1B显示出VITAXINTM轻链可变区的核苷酸和推导的氨基酸序列(分别为SEQ ID NO：9和SEQ ID NO：10)。
5.发明详述
本发明包括几种治疗方案，对于自身免疫疾病和/或炎性疾病，它们比目前的单药剂治疗可提供更好的预防和治疗表现。本发明提供了几种组合治疗法，用于对患者防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该组合治疗法包括对该患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂。特别是，本发明提供了几种组合治疗法，用于防止、治疗或缓解患者与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该组合治疗法包括对该患者给予整合蛋白αvβ3拮抗剂，优选地是VITAXINTM，以及至少一种与此整合蛋白αvβ3拮抗剂相比具有不同作用机制的其它预防或治疗药剂。
一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂的组合，比单独用二者治疗对病人可产生更好的预防或治疗效果。在某些实施方案中，对于患有自身免疫疾病或炎性疾病的患者，整合蛋白αvβ3拮抗剂和不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂的组合，比单独用二者治疗达到了提高预防或治疗效果20％，优选地25％，30％，35％，40％，45％，50％，55％，60％，65％，70％，75％，80％，85％，90％，95％或98％。在特定的实施方案中，对于患有与炎症有关的炎性疾病或自身免疫疾病的患者，整合蛋白αvβ3拮抗剂和不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂的组合，比单独用二者治疗达到了更强地减轻特定器官、组织或关节的炎症，增强达20％，优选地达25％，30％，35％，40％，45％，50％，55％，60％，65％，70％，75％，80％，85％，90％，95％或98％。在其它的实施方案中，对于患有自身免疫疾病或炎性疾病的患者，一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂的组合，具有比叠加的作用或协同性作用更多的作用。
对于患有自身免疫疾病或炎性疾病的患者，为了达到预防或治疗的效果，本发明的组合治疗法可使整合蛋白αvβ3拮抗剂的给药剂量降低，和/或使给予整合蛋白αvβ3拮抗剂的次数减少，优选地是给予VITAXINTM。对于患有自身免疫疾病或炎性疾病的患者，为了达到预防或治疗的效果，本发明的组合治疗法可使为防止或治疗自身免疫疾病或炎性疾病而用于与整合蛋白αvβ3拮抗剂联合的预防或治疗药剂的给药剂量降低，和/或使给予这种预防或治疗药剂的次数减少。本发明的组合治疗法可减少或避免一些不希望有的或有害的副作用，这些副作用与对于自身免疫疾病或炎性疾病给予通常的单一药剂治疗，和/或给予现有的组合治疗有关，减少或避免这些副作用又可增加病人对此治疗方案的配合。
本发明组合治疗法的预防或治疗药剂可以被相伴地、同时地或连续相继地给药。本发明组合治疗的预防或治疗药剂也可以被循环地给药。为了减小对其中某种药剂抗药性的发展，避免或减少某种药剂的副作用，和/或为了改善治疗效果，循环治疗包括在一段时间内给予第一种预防或治疗药剂，随后在一段时间内给予第两种预防或治疗药剂，并重复这种连续的给药过程，即循环。
本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂，这种预防或治疗药剂是目前正在使用的，已经在使用的，或者是已知对防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状有效的。关于预防或治疗药剂的非限制性例子参见第5.2节，可以将这种药剂与一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂联合对患者给药，用于防止、治疗、控制或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状。
本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病，或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种免疫调节剂。优选地，此免疫调节剂不能给予如下的自身免疫疾病或炎性疾病的患者，它的绝对淋巴细胞计数小于500个细胞/mm3，小于550个细胞/mm3，小于600个细胞/mm3，小于650个细胞/mm3，小于700个细胞/mm3，小于750个细胞/mm3，小于800个细胞/mm3，小于850个细胞/mm3，或小于900个细胞/mm3。
本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种CD2拮抗剂。特别是，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种VITAXINTM或其抗原结合片段，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种CD2拮抗剂。
本发明还提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种CD2结合分子(例如可免疫特异性地结合于CD2多肽并可直接或间接地介导外周血液淋巴细胞消耗的肽、多肽、蛋白质、抗体(MEDI-507)和融合蛋白。优选地，CD2结合分子不能给予如下的自身免疫疾病或炎性疾病的患者：它的绝对淋巴细胞计数小于500个细胞/mm3，小于550个细胞/mm3，小于600个细胞/mm3，小于650个细胞/mm3，小于700个细胞/mm3，小于750个细胞/mm3，小于800个细胞/mm3，小于850个细胞/mm3，或小于900个细胞/mm3。特别是本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM或其抗原结合片段，以及预防或治疗有效剂量的MEDI-507或其抗原结合片段。
本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种抗血管生成(anti-angionenic)药剂。特别是，本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM或其抗原结合片段，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种抗血管生成药剂。
本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种TNF-α拮抗剂。特别是本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM或其抗原结合片段，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种TNF-α拮抗剂。
本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种抗炎药剂。特别是，本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM或其抗原结合片段，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种抗炎药剂。
本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，一种或几种TNF-α拮抗剂，和一种或几种免疫调节剂。特别是，本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病，或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM，预防或治疗有效剂量的一种或几种TNF-α拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的氨甲蝶呤或环孢多肽。
本发明还提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，一种或几种TNF-α拮抗剂，以及一种或几种CD2结合分子。特别是，本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM，预防或治疗有效剂量的一种或几种TNF-α拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的MEDI-507或其抗原结合片段。
本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，一种或几种TNF-α拮抗剂，以及一种或几种抗炎药剂。特别是，本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM，预防或治疗有效剂量的一种或几种TNF-α拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的类固醇或非类固醇抗炎药。
本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，一种或几种TNF-α拮抗剂，一种或几种免疫调节剂，以及一种或几种抗炎药剂。特别是，本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM，预防或治疗有效剂量的一种或几种TNF-α拮抗剂，预防或治疗有效剂量的氨甲蝶呤，以及预防或治疗有效剂量的类固醇或非类固醇抗炎药。
本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂、预防或治疗有效剂量的一种或几种TNF-α拮抗剂、预防或治疗有效剂量的一种或几种CD2结合分子，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种抗炎药剂。特别是，本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解自身免疫疾病或炎性疾病或者它们的一种或几种症状，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM或其抗原结合片段，预防或治疗有效剂量的一种或几种TNF-α拮抗剂、预防或治疗有效剂量的MEDI-507或其抗原结合片段，以及预防或治疗有效剂量的类固醇或非类固醇抗炎药。
本发明提供了几种药物组合物，包含药剂学允许的载体，一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂。可将任何一种目前正在用于防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种症状，或者已被用于这种治疗或已知对这种治疗有效的预防或治疗药剂，与一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂组合，形成适合于对患者给药的药物组合物。5.2节提供了一些预防和/或治疗药剂的非限制性例子，这些药剂可与一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂组合，形成适合于对患者给药的药物组合物。可按照本发明的方法，将本发明的药物组合物用于防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状。优选地，本发明的药物组合物是无菌的，并以适合于对自身免疫疾病或炎性疾病的患者特定给药方法的形式存在。
在此所述的本发明组合物和方法对防止或治疗自身免疫疾病和/或炎性疾病是有效的。自身免疫疾病的例子包括但不限于：斑秃、强直性脊柱炎，抗磷脂综合征，自身免疫阿狄森病，肾上腺自身免疫疾病，自身免疫溶血性贫血，自身免疫性肝炎，自身免疫性卵巢炎和睾丸炎，自身免疫性血小板减少症，贝切特病，大疱性类天疱疮、心肌病，口炎性腹泻-皮炎、慢性疲劳免疫功能失调综合征(CFIDS)，慢性发炎脱髓鞘多发性神经病，丘-施综合征，疤痕性类天疱疮、CREST综合征，冷凝集素病，克罗恩氏病，盘状狼疮、特发混合型冷球蛋白血症，肌纤维痛-肌纤维炎，肾小球肾炎，格雷夫斯病，格-巴综合征，桥本氏甲状腺炎，特发性肺间质纤维化，特发性血小板减少紫癜(ITP)，IgA神经病，少年关节炎，口腔粘膜扁平苔癣，红斑狼疮，梅尼埃病，混合型结缔组织病，多发性硬化症，I型或免疫介导的糖尿病，重症肌无力，寻常性天疱疮、恶性贫血，结节性多动脉炎，多软骨炎，多腺体综合征，风湿性多肌痛，多发性肌炎和皮肌炎，原发性无r球蛋白血症，原发胆汁性肝硬化，牛皮癣，牛皮癣关节炎，雷诺病，莱特综合征，类风湿性关节炎，结节病，硬皮病，斯耶格伦综合征，僵体综合征，系统性红斑狼疮、红斑狼疮、多发性大动脉炎，颞动脉炎/巨细胞动脉炎，溃疡性结肠炎，眼色素层炎，脉管炎例如疱疹样皮炎性血管炎，白癜风和Wegener氏肉芽肿。炎性疾病的例子包括但不限于哮喘、脑炎，炎性肠病，慢性阻塞性肺疾病(COPD)，过敏症，败血性休克、肺纤维化、未分化的脊柱关节病，未分化的骨关节病，关节炎，炎性骨溶解，以及由慢性病毒感染和细菌感染引起的慢性炎症。可将本发明的组合物和方法与用于防止、控制或治疗上述疾病的一种或几种常规疗法一起使用。
在此所述的组合物和方法对防止或治疗如下疾病特别有效：类风湿性关节炎，脊柱关节病(如牛皮癣关节炎，强直性脊柱炎，莱特综合征(a.k.a活动性关节炎)。肠炎病相关的关节炎，以及未分化的脊柱关节病)，牛皮癣，未分化的关节病和关节炎。还可以将在此所述的组合物和方法用于防止、治疗、控制或缓解与如下病症有关的一种或几种症状：炎性骨裂解、以不正常骨重吸收为特征的其它病症或以骨丧失为特征的病症(如骨质疏松)。
本发明提供了一种制品，包括包装材料和包含在此包装材料内的，以适合于对患者给药的形式存在的本发明药物组合物。特别是，本发明提供了一种制品，包括包装材料和包含在此包装材料内的，以适合于对患者给药的形式存在的本发明药物组合物，其中该药物组合物包含一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂，以及药剂学允许的载体，本发明的制品还可以包括关于药物组合物的用途或用药方法的说明书，此说明书还可包含其它的信息资料：告戒医生、技术人员或病人如何适当地预防或治疗所述的疾病或异常。
5.1整合蛋白αvβ3拮抗剂
本领域技术人员熟知的任何整合蛋白αvβ3拮抗剂都可被用于本发明的方法和组合物。本发明包括将一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂用于本发明的组合物或方法。整合蛋白αvβ3拮抗剂的例子包括但不限于蛋白质药剂如非催化性金属蛋白酶片段，RGD肽，肽模拟物，融合蛋白，及双整合蛋白(disintegrin)或者其衍生物或类似物，和可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体，核酸分子，有机分子，以及无机分子。可被整合蛋白αvβ3识别的RGD肽的非限制性例子包括三黄素(Triflavin)。可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包括例如但不限于11D2(Searle)，LM609(Scripps)，以及VITAXINTM(MedImmune公司)。小分子拟肽整合蛋白αvβ3拮抗剂的非限制性例子包括S 836(Searle)和S 448(Searle)。双整合蛋白的例子包括但不限于Accutin。本发明还包括将在如下美国专利中所公开的任何整合蛋白αvβ3拮抗剂用于本发明的组合物和方法：5,149,780；5,196,511；5,204,445；5,262,520；5,306,620；5,478,725；5,498,694；5,523,209；5,578,704；5,589,570；5,652,109；5,652,110；5,693,612；5,705,481；5,767,071；5,770,565；5,780,426；5,817,457；5,830,678；5,849,692；5,955,572；5,985,278；6,048,861；6,090,944；6,096,707；6,130,231；6,153,628；6,160,099；和6,171,588，每个专利以其整体在此被引入作为参考。
在某些实施方案中，整合蛋白αvβ3拮抗剂是有机小分子。在其它一些实施方案中，整合蛋白αvβ3拮抗剂不是有机小分子。在优选实施方案中，整合蛋白αvβ3拮抗剂是可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体。在另一优选实施方案中，整合蛋白αvβ3拮抗剂是VITAXINTM，它的衍生物，类似物或它的抗原结合片段。
在优选的实施方案中，整合蛋白αvβ3拮抗剂可抑制或减少血管生成。
在优选的实施方案中，被用作整合蛋白αvβ3拮抗剂的蛋白质、多肽或肽(包括抗体和融合蛋白)是从与此蛋白质，多肽或肽的接受者相同的物种产生，这样就可减少对这些蛋白质、多肽或肽免疫应答的可能性。在另一优选的实施方案中，当患者是人时，用作整合蛋白αvβ3拮抗剂的蛋白质、多肽或肽是人的或人源化的。
按照本发明，可在给予一种或几种预防或治疗药剂之前，之后或与其同时对患有炎性疾病或自身免疫疾病的患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，这种预防或治疗药剂是已经用于预防或治疗该炎性疾病或自身免疫疾病的，或者是目前正在用于这种治疗或已知对这种治疗有效的。
按照本发明的方法，可对患有炎性疾病或自身免疫疾病的患者，给予编码起整合蛋白αvβ3拮抗剂作用的蛋白质，多肽或肽的核酸分子，或者给予起整合蛋白αvβ3拮抗剂作用的蛋白质、多肽或肽。更进一步地，按照本发明的方法，可对患有炎性疾病或自身免疫疾病的患者，给予编码起整合蛋白αvβ3拮抗剂作用的蛋白质，多肽或肽的衍生物、类似物，片段或变异体的核酸分子，或者给予起整合蛋白αvβ3拮抗剂作用的蛋白质，多肽或肽的衍生物、类似物，片段或变异体。优选地，这种衍生物、类似物、变异体和片段保留了此全长度野生型蛋白质、多肽或肽的整合蛋白αvβ3拮抗剂活性。
5.1.1.可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体
应该承认，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3并起拮抗剂作用的抗体是本领域已知的。已知的可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体，包括但不限于11D2(Searle)，LM 609(Scripps)，鼠单克隆LM 609(国际专利公告No WO 89/015155，在此被整体引入作为参考)，以及人源化的单克隆抗体MEDI-522(a.K.a.VITAXINTM，MedImmune公司，Gaithersburg，MD，Wu等，1998，PNAAS USA 95(11)：6037-6042；国际专利公告No WO90/33919和WO00/78815，以及美国专利No 5,753,230，在此它们被整体引入作为参考)。
可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体，包括但不限于单克隆抗体，多特异性抗体，人抗体，人源化抗体，嵌合抗体，单链Fvs(sdFv)，单链抗体，Fab片段；F(ab′)片段，二硫键连接的Fvs(scFv)，和抗独特型(抗-Id)抗体(包括如对本发明抗体的抗-Id抗体)，以及上述任何一种抗体的抗原表位结合片段。特别是，本发明的抗体包括免疫球蛋白分子和免疫球蛋白的免疫活性部分，即包含可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗原结合位点的分子。本发明的免疫球蛋白分子可以是免疫球蛋白分子的任何型(如IgG、IgE、IgM、IgD、IgA和IgY)，任何类(如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2)，或亚类。在优选的实施方案中，可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体是整合蛋白αvβ3拮抗剂，在另一优选的实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体能抑制或减少血管生成。
可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体可能是从任何动物来源的，包括鸟类和哺乳动物(如人，鼠、驴、绵羊、兔、山羊、豚鼠、骆驼、马或鸡)。优选地，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体是人或人源化的单克隆抗体。如在此使用的“人”抗体包括具有人免疫球蛋白氨基酸序列的抗体，并包括从人免疫球蛋白文库中或者从表达来自人基因的抗体的小鼠分离出的抗体。
可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体可以是单特异性的，双特异性的，三特异性的或是更多的多特异性的。多特异性抗体可以对整合蛋白αvβ3的不同抗原表位是特异性的，或者可以既对整合蛋白αvβ3的抗原表位是特异性的，又对异源抗原表位如异源多肽或固体支持材料是特异性的。见例如PCT公告WO 93/17715，WO 92/08802，WO 91/00360和WO 92/05793；Tutt等，免疫学杂志.147：60-69(1991)；美国专利Nos.4,474.893；4,714,681；4,925,648；5,573,920和5,601,819；以及Kostelny等免疫学杂志，148：1547-1553(1992)。
本发明提供了对整合蛋白αvβ3具高结合亲和性的抗体。在特定的实施方案中，可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体，具有结合速率常数或kon速率(抗体(Ab)+抗原(Ag)kon Ab-Ag)至少105M-1S-1，至少5×105M-1S-1，至少106M-1S-1，至少5×106M-1S-1，至少107M-1S-1，至少5×107M-1S-1或至少108M-1S-1。在优选的实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体具有kon至少2×105M-1S-1，至少5×105M-1S-1，至少106M-1S-1，至少5×106M-1S-1，至少107M-1S-1，至少5×107M-1S-1或至少108M-1S-1。
在另一实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体具有koff速率(抗体(Ab)+抗原(Ag)koffAb-Ag)小于10-1S-1，小于5×10-1S-1，小于10-2S-1，小于5×10-2S-1，小于10-3S-1，小于5×10-3S-1，小于10-4S-1，小于5×10-4S-1，小于10-5S-1，小于5×10-5S-1，小于10-6S-1，小于5×10-6S-1，小于10-7S-1，小于5×10-7S-1，小于10-8S-1，小于5×10-8S-1，小于10-9S-1，小于5×10-9S-1，或小于10-10S-1。在优选的实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体具有Koff小于5×10-4S-1，小于10-5S-1，小于5×10-5S-1，小于10-6S-1，小于5×10-6S-1，小于10-7S-1，小于5×10-7S-1，小于10-8S-1，小于5×10-8S-1，小于10-9S-1，小于5×10-9S-1，或小于10-10S-1。
在另一实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体具有亲和常数或Ka(kon/koff)至少102M-1，至少5×102M-1，至少103M-1，至少5×103M-1，至少104M-1，至少5×104M-1，至少105M-1，至少5×105M-1，至少106M-1，至少5×106M-1，至少107M-1，至少5×107M-1，至少108M-1，至少5×108M-1，至少109M-1，至少5×109M-1，至少1010M-1，至少5×1010M-1，至少1011M-1，至少5×1011M-1，至少1012M-1，至少5×1012M-1，至少1013M-1，至少5×1013M-1，至少1014M-1，至少5×1014M-1，至少1015M-1，或至少5×1015M-1。在还有另一实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体具有解离常数或Kd(koff/kon)小于10-2M，小于5×10-2M，小于10-3M，小于5×10-3M，小于10-4M，小于5×10-4M，小于10-5M，小于5×10-5M，小于10-6M，小于5×10-6M，小于10-7M，小于5×10-7M，小于10-8M，小于5×10-8M，小于10-9M，小于5×10-9M，小于10-10M，小于5×10-10M，小于10-11M，小于5×10-11M，小于10-12M，小于5×10-12M，小于10-13M，小于5×10-13M，小于10-14M，小于5×10-14M，小于10-15M，或小于5×10-15M。
在特定的实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体是LM609或其抗原结合片段(如LM609的一个或几个互补决定区(CDRs)。LM609具有已公开的氨基酸序列，如在国际专利公报No.WO89/05155中公布的(此专利被整体引入作为参考)，或者具有由保存在美国典型培养物保存中心(ATCC)(10801 Boulevard大学，Manassas，Virginia 20110-2209)的细胞系(检索号HB9537)产生的单克隆抗体的氨基酸序列。在另一实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体不是LM609或LM609的抗原结合片段。
在优选的实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体是VITAXINTM或其抗原结合片段(如VITAXINTM的一个或几个CDRs)。VITAXINTM被公开在例如如下专利中：国际专利公报No.WO98/33919和WO 00/78815，美国专利申请系列号09/339,922和美国专利No.5,753,230，在此它们都被整体引入作为参考。在另一实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体不是VITAXINTM或VITAXINTM的抗原结合片段。
本发明还提供了几个可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体，该抗体包含具有LM609或VITAXINTM可变重链(VH)区氨基酸序列的可变重链(“VH”)区。本发明还提供了几个可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体，该抗体包含一个VH CDR区，此VH CDR区具有列于表1中任何一种VH CDRs的氨基酸序列。
表1.LM609的CDR序列
CDR             序列           SEQ ID NO：
VH1             SYDMS          1
VH2             KVSSGGG        2
VH3             HNYGSFAY       3
VL1             QASQSISNHLH    4
VL2             YRSQSIS        5
VL3             QQSGSWPHT      6
在一个实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含具有SEQ ID NO：1氨基酸序列的VH CDR1。在另一实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的VH CDR2。在另一实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含具有SEQ ID NO：3氨基酸序列的VH CDR3。在优选的实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含具有SEQ ID NO：1氨基酸序列的VH CDR1，具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的VH CDR2，以及具有SEQ ID NO：3氨基酸序列的VHCDR3。
本发明还提供了几种可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体，该抗体包含具有LM609或VITAXINTM可变轻链(“VL”)区氨基酸序列的VL区。本发明还提供了几个可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体，该抗体包含一个VL CDR区，此VL CDR具有列于表1中任何一种VL CDRs的氨基酸序列。
在一个实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含具有SEQ ID NO：4氨基酸序列的VL CDR1。在另一实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含具有SEQ ID NO：5氨基酸序列的VL CDR2。在另一实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含具有SEQ ID NO：6氨基酸序列的VL CDR3。在优选的实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含具有SEQ ID NO：4氨基酸序列的VL CDR1，具有SEQ ID NO：5氨基酸序列的VL CDR2，以及具有SEQ ID NO：6氨基酸序列的VLCDR3。
本发明还提供了几种可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体，该抗体包含与在此公开的VL区或其它VL区结合的在此公开的VH区。本发明还进一步提供了几种可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体，该抗体包含与在此公开的VH区或其它VH区结合的在此公开的VL区。
本发明还提供了几种可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体，该抗体包含列于表1中的一个或几个VH CDR。和一个或几个VLCDR。特别是，本发明提供了可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体，该抗体包含VH CDR1和VL CDR1，VH CDR1和VL CDR2，VHCDR1和VL CDR3，VH CDR2和VL CDR1，VH CDR2和VL CDR2，VH CDR2和VL CDR3，VH CDR3和VL CDR1 VH CDR3和VL CDR2，VH CDR3和VL CDR3，或者列于表1中VH CDR和VL CDR的任何结合。
在一个实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含具有SEQ ID NO：1氨基酸序列的VH CDR1和具有SEQ 1D NO：4氨基酸序列的VL CDR1。在另一实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含具有SEQ ID NO：1氨基酸序列的VH CDR1和具有SEQ ID NO：5氨基酸序列的VL CDR2。在另一实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含具有SEQ ID NO：1氨基酸序列的VH CDR1和具有SEQ ID NO：6氨基酸序列的VLCDR3。
在另一实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的VH CDR2和具有SEQ ID NO：4氨基酸序列的VL CDR1。在另一实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的VH CDR2和具有SEQ ID NO：5氨基酸序列的VL CDR2。在另一实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的VH CDR2和具有SEQ ID NO：6氨基酸序列的VLCDR3。
在另一实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含具有SEQ ID NO：3氨基酸序列的VH CDR3和具有SEQ ID NO：4氨基酸序列的VL CDR1。在另一实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含具有SEQ ID NO：3氨基酸序列的VH CDR3和具有SEQ ID NO：5氨基酸序列的VL CDR2。在优选的实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含具有SEQ ID NO：3氨基酸序列的VH CDR3和具有SEQ ID NO：6氨基酸序列的VLCDR3。
本发明还提供了一种核酸分子，一般是被分离出的，它编码可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体。在特定的实施方案中，该分离出的核酸分子编码可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体，该抗体具有LM 609或VITAXINTM的氨基酸序列。
在一个实施方案中，此分离出的核酸分子编码可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体，该抗体含有具有LM 609或VITAXINTM VH区氨基酸序列的VH区。在另一实施方案中，此分离出的核酸分子编码可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体，该抗体包含一个VH区，它具有由以检索号HB9537保存于ATCC的细胞系产生的单克隆抗体VH区的氨基酸序列。在另一实施方案中，此分离的核酸分子编码可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体，该抗体包含具有列于表1中的VH CDR1氨基酸序列的VH CDR1。在另一实施方案中，此分离出的核酸分子编码可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体，该抗体包含具有列于表1中的VH CDR2氨基酸序列的VH CDR2。在还有另一实施方案中，此分离出的核酸分子编码可免疫特异性地结合于αvβ3的抗体，该抗体包含具有列于表1中的VH CDR3氨基酸序列的VH CDR3。
在一个实施方案中，此分离出的核酸分子编码可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体，该抗体包含具有LM 609或VITAXINTM VL区氨基酸序列的VL区。在另一实施方案中，该分离的核酸分子编码可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体，该抗体包含一个VL区，它具有由以检索号HB9537保存于ATCC的细胞系产生的单克隆抗体VL区的氨基酸序列。在另一实施方案中，此分离的核酸分子编码可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体，该抗体包含具有列于表1中的VL CDR1氨基酸序列的VL CDR1。在另一实施方案中，此分离出的核酸分子编码可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体，该抗体包含具有列于表1中的VL CDR2氨基酸序列的VL CDR2。在还有另一实施方案中，此分离出的核酸分子编码可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体，该抗体包含具有列于表1中VL CDR3氨基酸序列的VLCDR3。
在另一实施方案中，此分离的核酸分子编码可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体，该抗体包含具有LM 609或VITAXINTM VH区氨基酸序列的VH区，以及具有LM609或VITAXINTMVL区氨基酸序列的VL区。在另一实施方案中，此分离出的核酸分子编码可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体，该抗体包含VH CDR1和VLCDR1，VH CDR2和VL CDR2，VH CDR3和VL CDR3，或者具有列于表1中的氨基酸序列的它们的任何结合。
本发明还提供了几种可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体，该抗体包含在此所述的可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的VH区，VH CDRs，VL区或VL CDRs的衍生物。
可以应用本领域技术人员熟知的标准技术对编码本发明抗体的核苷酸序列导入突变，包括例如导致氨基酸取代的定点诱变和PCR介导的诱变。优选地此衍生物相对于原来的分子包含少于25个氨基酸取代，少于20个氨基酸取代，少于15个氨基酸取代，少于10个氨基酸取代，少于5个氨基酸取代，少于4个氨基酸取代，少于3个氨基酸取代，或少于2个氨基酸取代。在优选的实施方案中，在预测的一个或几个非必要氨基酸残基(即对抗体免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3不是决定性的氨基酸残基)造成了具有保守的氨基酸取代的衍生物。“保守的氨基酸取代”是以具有携带相似电荷侧链的氨基酸残基代替其中此氨基酸残基的取代。本领域已定义了具有携带相似电荷侧链的氨基酸残基种类。这些种类包括带有碱性侧链的氨基酸(如赖氨酸、精氨酸、组氨酸)，带有酸性侧链的氨基酸(如天冬氨酸，谷氨酸)，带有无电荷极性侧链的氨基酸(如甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、半胱氨酸)，带有非极性侧链的氨基酸(如丙氨酸，缬氨酸，亮氨酸，异亮氨酸，脯氨酸，苯丙氨酸，甲硫氨酸，色氨酸)，带有β-分支侧链的氨基酸(如苏氨酸，缬氨酸，异亮氨酸)，以及带有芳香族侧链的氨基酸(如酪氨酸，苯丙氨酸，色氨酸，组氨酸)。按另一种方式，可沿着全部或部分编码序列随机地导入突变，例如通过饱和诱变法，然后对形成的突变体筛选生物活性，以便鉴别保留有活性的突变体。诱变完成之后，可表达编码的抗体，并可测定此抗体的活性。
本发明提供了几种可免疫特异性的结合于整合蛋白αvβ3的抗体，该抗体包含LM609或VITAXINTM的氨基酸序列，此LM609或VITAXINTM在可变轻链(VL)区和/或可变重链(VH)区带有一个或几个氨基酸残基取代。本发明还提供了几个可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体，该抗体包含LM609或VITAXINTM的氨基酸序列，此LM609或VITAXINTM在一个或几个VL CDR和/或一个或几个VHCDR中带有一个或几个氨基酸残基取代。可在体外或体内检测通过在LM609或VITAXINTM的VH区、VH CDR，VL区和/或VL CDR内导入取代而产生的抗体，例如测定它结合于整合蛋白αvβ3的能力(借助于例如包括但不限于ELISA和BIAcore的免疫检测法)，或者测定它防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状的能力。
在特定的实施方案中，可免疫特异性的结合于整合蛋白αvβ3的抗体包括一种核苷酸序列，它可同编码由以检索号HB9537保存于ATCC的细胞系产生的单克隆抗体的核苷酸序列杂交，杂交是在严格条件下进行.，例如在大约45℃在6x氯化钠/柠檬酸钠(SSC)中同滤纸固定的DNA杂交，随后在大约50-65℃在0.2xSSC/0.1％SDS中漂洗一次或几次，杂交还可在高度严格条件下进行，例如在大约45℃在6xSSC同滤纸固定的核酸杂交，随后在大约68℃在0.1xSSC/0.2％SDS中漂洗一次或几次，或者杂交是在本领域技术人员熟知的其它的严格条件下进行，(见例如Ausubel，F.M等编辑，1989，“分子生物学的现代策略”卷1.Green Publishing Associates公司，以及John Wiley & Sons.公司New York p 6.3.1-6.3.6和2.10.3)。
在特定的实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包括一种核苷酸序列，它可同编码LM609或VITAXINTM的核苷酸序列杂交，杂交是在严格条件下进行。例如在大约45℃在6x氯化钠/柠檬酸钠(SSC)中同滤纸固定的DNA杂交，随后在大约50-65℃在0.2xSSC/0.1％SDS中漂洗一次或几次，杂交还可在高度严格条件下进行，例如在大约45℃在6xSSC中同滤纸固定的核酸杂交，随后在大约68℃在0.1xSSC/0.2％SDS中漂洗一次或几次，或者杂交是在本领域技术人员熟知的其它严格条件下进行(见例如Ausubel，F.M等编辑，1989，“分子生物学的现代策略”，卷1，Green Publishing Associates公司和John Wiley & Sons公司，New York.P-6.3.1-6.3.6和2.10.3)。
在特定的实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包括由一种核苷酸序列编码的VH区氨基酸序列或者VL区氨基酸序列，此核苷酸序列可同编码LM609或VITAXINTM的VH或VL区的核苷酸序列杂交，杂交是在严格条件下进行，例如在45℃在6x氯化钠/柠檬酸钠(SSC)中同滤纸固定的DNA杂交，随后在大约50-65℃在0.2xSSC/0.1％SDS中漂洗一次或几次，杂交还可在高度严格条件下进行，例如在大约45℃在6xSSC中同滤纸固定的核酸杂交，随后在大约68℃在0.1xSSC/0.2％SDS中漂洗一次或几次，或者杂交是在本领域技术人员熟知的其它严格条件下进行(见例如Ausubel，F.M等编辑，1989，“分子生物学的现代策略”，卷1，Green Publishing Associates公司和John Wiley & Sons公司，New York.p 6.3.1-6.3.6和2.10.3)。
在另一实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含由一种核苷酸序列编码的VH CDR氨基酸序列或者VL CDR氨基酸序列，此核苷酸序列可同编码列于表1中的任何一种VH CDR或VLCDR的核苷酸序列杂交，杂交是在严格条件下进行，例如在45℃在6x氯化钠/柠檬酸钠(SSC)中同滤纸固定的DNA杂交，随后在大约50-65℃在0.2xSSC/0.1％SDS中漂洗一次或几次，杂交还可在高度严格条件下进行。例如在大约45℃在6xSSC中同滤纸固定的核酸杂交，随后在大约68℃在0.1xSSC/0.2％SDS中漂洗一次或几次，或者杂交是在本领域技术人员熟知的其它严格条件下进行。
在另一实施方案中，可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含由一种核苷酸序列编码的VH CDR氨基酸序列或者VL CDR氨基酸序列，此核苷酸序列可同编码由以检索号HB9537保存于ATCC的细胞系产生的单克隆抗体的任何一种VH CDR和VL CDR的核苷酸序列杂交，杂交是在严格条件下进行，例如在大约45℃在6x氯化钠/柠檬酸钠(SSC)中同滤纸固定的DNA杂交，随后在大约50-65℃在0.2xSSC/0.1％SDS中漂洗一次或几次，杂交还可在高度严格条件下进行，例如在大约45℃在6xSSC中同滤纸固定的核酸杂交，随后在大约68C在0.1xSSC/0.2％SDS中漂洗一次或几次，或者杂交是在本领域技术人员熟知的其它严格条件下进行。
在另一实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含由一种核苷酸序列编码的VH CDR氨基酸序列和VL CDR氨基酸序列，此核苷酸序列可同编码列于表1中的任何一种VH CDR或VLCDR的核苷酸序列杂交，杂交是在严格条件下进行，例如在45℃在6x氯化钠/柠檬酸钠(SSC)中同滤纸固定的DNA杂交，随后在大约50-65℃在0.2xSSC/0.1％SDS中漂洗一次或几次，杂交还可在高度严格条件下进行，例如在大约45℃在6xSSC中同滤纸固定的核酸杂交，随后在大约68℃在0.1xSSC/0.2％SDS中漂洗一次或几次，或者杂交是在本领域技术人员熟知的其它严格条件下进行。
在另一实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含由一种核苷酸序列编码的VH CDR氨基酸序列或VL CDR氨基酸序列，此核苷酸序列可同编码由以检索号HB9537保存于ATCC的细胞系产生的单克隆抗体的核苷酸序列杂交，杂交是在严格条件下进行，例如在大约45℃在6x氯化钠/柠檬酸钠(SSC)中同滤纸固定的DNA杂交，随后在大约50-65℃在0.2xSSC/0.1％SDS中漂洗一次或几次，杂交还可在高度严格条件下进行，例如在大约45℃在6xSSC中同滤纸固定的核酸杂交，随后在大约68℃在0.1xSSC/0.2％SDS中漂洗一次或几次，或者杂交是在本领域技术人员熟知的其它严格条件下进行。
在特定的实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含一个氨基酸序列，此氨基酸序列至少35％、至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少99％等同于由以检索号HB9537保存于ATCC的细胞系产生的单克隆抗体的氨基酸序列。在另一实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含一种氨基酸序列，此氨基酸序列至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少99％等同于VITAXINTM的氨基酸序列。
在另一实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含一种VH区的氨基酸序列，此VH区至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少99％等同于VITAXINTM的VH区。在另一实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含一种VH区的氨基酸序列，此VH区至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少99％等同于由以检索号HB9537保存于ATCC的细胞系产生的单克隆抗体的VH区。
在另一实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含一种或几种VH CDR的氨基酸序列，此VH CDR至少35％、至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少99％等同于列于表1中的任何一种VH CDR。在另一实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含一种或几种VH CDR的氨基酸序列，此VH CDR至少35％、至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少99％等同于由以检索号HB9537保存于ATCC的细胞系产生的单克隆抗体的任何一种VH CDR。
在另一实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包括一种VL区氨基酸序列，此氨基酸序列至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少99％等同于VITAXINTM的VL区。在另一实施方案中，可免疫特异性地结合于整合蛋白αvβ3的抗体包括一种VL区氨基酸序列，此氨基酸序列至少3 5％、至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少99％等同于由以检索号HB9537保存于ATCC的细胞系产生的单克隆抗体的VL区。
在另一实施方案中，可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体包括一种或几种VL CDR氨基酸序列，此氨基酸序列至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少99％等同于在表1中列举的任何一种VL CDR。在另一实施方案中，可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体包括一种或几种VL CDR氨基酸序列，此氨基酸序列至少35％、至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少99％等同于由以检索号HB9537保存于ATCC的细胞系产生的单克隆抗体的任何一种VL CDR。
本发明包括同在此所述的抗体竞争结合于整合蛋白αvβ3的抗体。在特定的实施方案中，本发明包括同LM609或其抗原结合片段竞争结合于整合蛋白αvβ3的抗体。在优选实施方案中，本发明包括同VITAXINTM或其抗原结合片段竞争结合于整合蛋白αvβ3的抗体。
本发明还包括同LM609或VITAXINTM的VH区竞争结合于整合蛋白αvβ3的VH区。本发明还包括同LM609或VITAXINTM的VL区竞争结合于整合蛋白αvβ3的VL区。
本发明还包括同列于表1中的VH CDR竞争结合于整合蛋白αvβ3的VH CDRs，或者同由以检索号HB9537保存于ATCC的细胞系产生的单克隆抗体的VH CDR竞争结合于整合蛋白αvβ3的VH CDRs。本发明还包括同列于表1中的VL CDR竞争结合于整合蛋白αvβ3的VLCDRs，或者同由以检索号HB9537保存于ATCC的细胞系产生的单克隆抗体的VL CDR竞争结合于整合蛋白αvβ3的VL CDRs。
可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体包括被修饰的衍生物，即通过将任何类型的分子共价连接于此抗体。例如但不作为限制，此抗体衍生物包括已通过如下修饰的抗体：如糖基化，乙酰化，乙二醇化，磷酸化、酰胺化，通过已知的保护基团/封闭基团衍生化，蛋白水解断开，连接于细胞配体或其它蛋白质等。借助于已知的技术可实施任何数目的化学修饰，包括但不限于特异性化学断开，乙酰化，甲酰化，衣霉素代谢合成等。此外，此衍生物还可能包含一个或几个非标准的氨基酸。
本发明还提供了几种可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体，该抗体包含本领域技术人员已知的骨架区。优选地，本发明抗体的骨架区是人的。在特定的实施方案中，可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含VITAXINTM的骨架区。
本发明还包括几个可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体，该抗体包含在骨架区带有一个或几个突变(如一个或几个氨基酸取代)的VITAXINTM氨基酸序列。在某些实施方案中，可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体包含在VH区和/或VL区的骨架区内带有一个或几个氨基酸残基取代的VITAXINTM氨基酸序列。
本发明还包括可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体，该抗体包含在可变区或骨架区内带有一个或几个突变(如一个或几个氨基酸残基取代)的VITAXINTM氨基酸序列。
本发明还提供了几种融合蛋白，它包含一个可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体和一个异源多肽。优选地，与此抗体融合的异源多肽，对使抗体对准血小板、单核细胞，内皮细胞和/或B细胞是有用的。
5.1.1.1.具有延长了半衰期的可免疫特异性结合于
        整合蛋白αvβ3的抗体
本发明提供了几种可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体，此抗体在体内具有延长的半衰期。特别是，本发明提供了几种可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体，此抗体在动物体内，优选地是在哺乳动物体内，最优选地在人体内具有大于3天、大于7天、大于10天，优选地大于15天，大于25天，大于30天，大于35天，大于40天，大于45天，大于2个月，大于3个月，大于4个月或大于5个月的半衰期。
为了延长抗体(如单克隆抗体，单链抗体和Fab片段)在体内血清中的循环期，例如可以使惰性聚合物分子如高分子量的聚乙二醇(PEG)结合于此抗体，使用或不使用多官能度连接分子，通过使PEG位点特异性偶联于抗体的C-末端，或者通过存在于赖氨酸残基的ε-氨基偶联。将采用可导致生物活性最小损失的线形或支化聚合物衍生法。借助SDS-PAGE和质谱分析可以密切地监测偶联的程度，以便确保PEG分子适当地偶联于抗体。通过尺寸排阻色谱或离子交换色谱，可以使未反应的PEG与抗体-PEG偶联物分离。应用本领域技术人员熟知的方法，例如通过在此所述的免疫检测法，可检测PEG-衍生化抗体的结合活性以及体内的效力。
还可以通过将一个或几个氨基酸修饰(即取代，插入，或缺失)导入IgG恒定区或其FcRn结合片段(优选地是Fc片段或铰链-Fc区片段)来产生在体内具有延长半衰期的抗体；见例如，国际专利公报No.WO 98/23289，国际专利公报No.WO 97/34631和美国专利No.6,277,375，在此它们都被整体引入作为参考。
5.1.1.2.抗体偶联物
本发明包括被重组融合或化学偶联(包括共价和非共价偶联)于异源多肽(或其片段，优选地为此多肽的至少5个、至少10个，至少20个，至少30个，至少40个，至少50个，至少60个，至少70个，至少80个，至少90个或至少100个相邻的氨基酸)形成融合蛋白的，可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体或其抗原结合片段。这种融合不一定需要是直接的，但可以通过接头序列形成。例如，通过使抗体融合或偶联于对特定的细胞表面受体(如CD11C，CD14，CD17，CD19，CD25，CD36，CD41，CD42，CD51，CD61，CD70，和CD78)特异性的抗体，在体外或在体内此抗体可被用于使异源多肽对准特定的细胞类型(如血小板，内皮细胞，B细胞或单核细胞)。
本发明还包括为便于纯化而融合于标记序列如一种肽的，可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体或其抗原结合片段。在优选的实施方案，此标记氨基酸序列是一个6-组氨酸肽，例如在pQE载体(QIAGEN公司，9259 Eton Avenue，Chatsworth，CA，91311)中提供的标记，其中许多标记都可以买到。例如，如在Gentz等，1989，美国国家科学院学报86：821-824中所述的，6-组氨酸可对融合蛋白的纯化提供方便。对纯化有用的其它肽标记包括但不限于血凝素“HA”标记和“Flag”标记，HA标记相当于从流感血凝素蛋白得到的抗原表位(Wilson等，1984，细胞37：767)。
本发明进一步包括与具有潜在治疗效果的药剂偶联的，可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体或其抗原结合片段。可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体或其抗原结合片段，可被偶联于治疗药剂部分例如，细胞毒素如细胞抑制剂或杀细胞剂，具有潜在治疗效果的药剂，或者放射活性金属离子如α-放射体。细胞毒素或细胞毒性剂包括对细胞有害的任何一种药剂。细胞毒素或细胞毒性剂的例子包括但不限于：紫杉醇，细胞松驰素B，短杆菌肽D，溴乙啡啶，吐根素，丝裂霉素，依托泊苷，替诺泊苷，长春新碱，长春碱，秋水仙素，防霉素，道诺霉素，二羟炭疽菌素土卫四，米托蒽醌，光神霉素，放射菌素D，1-去氢睾丸酮，糖皮质激素，普鲁卡因，丁卡因，利多卡因，心得安和嘌呤霉素，以及它们的类似物或同源物。具有潜在治疗效果的药剂包括但不限于抗代谢物(如氨甲蝶呤，6-巯基嘌呤，6-硫鸟嘌呤，阿糖胞苷，5-氟尿嘧啶)，烷基化剂(如二氯甲基二乙胺，噻替派瘤可宁，美清仑，卡氮芥(BSNU)和环己亚硝脲(CCNU)，环磷酰胺，白消安，二溴甘露醇，链脲霉素，丝裂霉素C和顺式二氯肼铂(II)(DDP)顺氯氨钠)，蒽霉素(如柔红霉素C，以前称道诺霉素和阿霉素)，抗菌素(如更生霉素(以前称放射菌素)，博来霉素，光神霉素，和氨四霉素(AMC)，以及抗有丝分裂剂(如长春新碱和长春碱)。
并且，还可使可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体或其抗原结合片段偶联于可改变某一特定生物应答的治疗剂或药物。具有潜在治疗效果的药剂或药物部分不要被理解为局限于经典的化学治疗剂。例如，药物部分可以是具有所希望生物活性的蛋白质或多肽。这种蛋白质可包括例如毒素如相思豆毒素、篦麻毒素A，假单胞菌外毒素或白喉菌毒素；蛋白质如肿瘤坏死因子，干扰素-α(“IFN-α”)，干扰素-β(“IFN-β”)，神经生长因子(“NGF”)，血小板产生的生长因子(“PDGF”)，组织血浆酶原激活剂(“TPA”)；凋亡剂如TNF-α，TNF-β，AIM I(见国际专利公报No.WO 97/33899)，AIM II(见国际专利公报No.WO 97/34911)，Fas配体(Takahashi等.1994，免疫学杂志6：1567-1574)，以及VEGF(见国际专利公报No.WO 99/23105)，抗血栓形成剂或抗血管生成剂如angiostatin或endostatin；或者生物应答修饰剂例如淋巴因子(如白介素-1(“IL-1”)，IL-2，IL-6，IL-10，粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(“GM_CSF”)，和粒细胞集落刺激因子(“G_CSF”))，或者生长因子(如生长激素(“GH”))。
使这种治疗剂偶联于抗体的技术是熟知的，见例如Arnon等“肿瘤治疗中用于药物免疫靶定的单克隆抗体”，在“单克隆抗体和癌治疗”中，Reisfeld等(编辑)pp 243-56(Alan R.Liss公司，1985)；Hellstron等，“用于药物递送的抗体”，在“被控制的药物递送(第二版)中，Robinson等(编辑)。pp623-53(Marce Dekker公司1987)；Thorpe，“癌症治疗中细胞毒性剂的抗体载体：述评”，在“单克隆抗体84年：生物学和临床应用”中，Pinchere等(编辑)，pp475-506(1985)；“对癌症治疗中放射标记抗体治疗应用的分析，结果及未来展望”，在“用于癌检测和治疗的单克隆抗体”中，Baldwin等(编辑)。pp.306-16(Academic出版社，1985)；以及Thorpe等1982免疫学评论62：119-58。
还可以使可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体或其抗原结合片段偶联第二个抗体，形成抗体异偶联物，如Segal在美国专利No.4,676,980中所述，此专利在此被整体引入作为参考。
还可使可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体或其抗原结合片段附着于固体支持物，这对纯化细胞如血小板和内皮细胞特别有效。这种固体支持物包括但不限于玻璃，纤维素，聚丙烯酰胺，尼龙，聚苯乙烯，聚氯乙烯或聚丙烯。
5.2.用于与整合蛋白αvβ3拮抗剂组合的药剂
本发明提供了几种组合物，包含一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂，并且提供了几种用于防止、治疗或缓解与患者炎性疾病或自身免疫疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予一种或几种该组合物。治疗或预防药剂包括但不限于肽、多肽、融合蛋白，核酸分子，小分子，模拟药剂，合成药物，无机分子以及有机分子。按照在此所述的本发明，已知对防止、治疗或缓解与炎性疾病或自身免疫疾病有关的一种或几种症状有效的，或者已被用于或目前正在用于此目的的任何药剂都可用于与整合蛋白αvβ3拮抗剂组合。这种药剂的例子包括但不限于用于皮疹和肿胀的皮肤药剂(如光疗法(即紫外线B照射)，光化学疗法(如PUVA)以及局部药剂如软化剂，水杨酸，煤焦油，局部类固醇、局部皮质类固醇，局部维生素D3类似物(如代维尼克，tazarotene，和局部类维生素)，抗炎药剂(如皮质类固醇(如强的松和氢化可的松)，糖皮质激素，类固醇，非类固醇抗炎药物(如阿斯匹林，布洛芬，双氯芬酸和COX-2抑制剂)，β-激动剂，抗付交感种经药剂和甲基黄嘌呤)，免疫抑制剂(如有机小分子，T细胞受体调节剂，细胞因子受体调节剂，T细胞消耗剂，细胞因子拮抗剂，单核因子拮抗剂，淋巴细胞抑制剂，或抗癌剂)，金注射剂，磺胺甲基嘧啶，青霉胺，抗血管生成剂(如angiostatin，TNF-α拮抗剂(如抗TNF-α抗体)和endostatin，氨苯砜，补骨脂素(如甲氧明和三甲呋豆素)，抗疟药剂(如羟基氯喹)，抗病毒药剂和抗菌素(如红霉素和青霉素)。
5.2.1免疫调节剂
本领域技术人员熟知的任何一种免疫调节剂都可被用于本发明的方法和组合物。免疫调节剂可以影响患者免疫应答的一个或几个方面，或者所有的方面。免疫应答的诸方面包括但不限于炎症应答，补体级联，白细胞和淋巴细胞分化、增殖、和/或效应器功能，单核细胞和/或嗜碱性细胞的数目，以及在免疫系统细胞中的细胞通信。在本发明的某些实施方案中，免疫调节剂调节免疫应答的一个方面。在其他的实施方案中，免疫调节剂调节免疫应答的一个以上方面。在本发明的优选的实施方案中，对患者给予一种免疫调节剂可抑制或降低患者免疫应答能力的一个或几个方面。在本发明特定的实施方案中，免疫调节剂可抑制或压制患者的免疫应答。按照本发明，免疫调节剂不是整合蛋白αvβ3拮抗剂。在某些实施方案中，免疫调节剂不是抗炎药剂。在其它的实施方案中，免疫调节剂不是CD2拮抗剂。在其它实施方案中，免疫调节剂不是CD2结合分子。在还有其它的实施方案中，免疫调节剂不是MEDI-507。
可以选择免疫调节剂干扰T辅助细胞亚群(TH1或TH2)和B细胞之间的相互作用，以便抑制中和抗体形成。也可以选择免疫调节剂抑制TH1细胞和CTL之间的相互作用，以便减少发生CTL-介导的细胞杀灭。还可以选择免疫调节剂改变(例如抑制或压制)CD4+和/或CD8+T细胞的增殖，分化，活性和/或功能。例如，对T细胞特异性的抗体可以被用作耗尽CD4+和/或CD8+细胞的，或者改变它们的增殖、分化，活性和/或功能的免疫调节剂。
免疫调节剂的例子包括但不限于蛋白质作用剂如细胞因子、模拟肽和抗体(例如人抗体，人源化的抗体，嵌合抗体，单克隆抗体、多克隆抗体，Fvs、ScFvs、Fab或F(ab)2片段，或者抗原表位结合片段)，核酸分子(例如反义核酸分子和三重螺旋)，小分子、有机化合物和无机化合物。特别是，免疫调节剂包括但不限于氨甲蝶呤，来氟米特，环磷酰胺，环磷氮芥(环磷酰胺)，Immuran、环孢多肽A，二甲胺四环素，咪唑硫嘌呤，抗菌素(如FK506)，甲基强的松龙(MP)，皮质类固醇，类固醇，霉酚酸盐，雷帕霉素，脱氧精液蛋白，布喹那，二丙腈酰胺(如来氟米特)，T细胞受体调节剂，以及细胞因子受体调节剂。关于T细胞受体调节剂的细胞因子受体调节剂的说明详见3.1节。T细胞受体调节剂的例子包括但不限于抗-T细胞受体抗体(如抗-CD4抗体(例如CM-T412(Boeringet)，IDEC-CE9.1(IDEC和SKB)，mAB4162 W94，Orthoclone和OKTcdr4a(Janssen-Cilag))，抗-CD3抗体，抗-CD5抗体(例如抗-CD5篦麻毒蛋白-连接的免疫偶联物)抗-CD7抗体(如CHH-380(Novartis))，抗-CD8抗体，抗-CD40配体单克隆抗体，抗-CD52抗体(如CAMPATH1H(Ilex))，抗-CD2单克隆抗体)，以及CTLA4-免疫球蛋白。在特定的实施方案中，T细胞受体调节剂是CD2拮抗剂。在其它实施方案中，T细胞受体调节剂不是CD2拮抗剂。在另一实施方案中，T细胞受体调节剂是CD2结合分子，优选地是MEDI-507，在其它实施方案中，T细胞受体调节剂不是CD2结合分子。
细胞因子受体调节剂的例子包括但不限于：可溶性细胞因子受体(例如TNF-α受体的细胞外功能区或其片段，IL-1β受体的细胞外功能区或其片段，以及IL-6受体的细胞外功能区或其片段)，细胞因子或其片段(例如白介素(IL)-2，IL-3，IL-4，IL-5，IL-6，IL-7，IL-8，IL-9，IL-10，IL-11，IL-12，IL-15，TNF-α，TNF-β，干扰素(IFN)-α，IFN-β，IFN-γ，以及GM-CSF)，抗-细胞因子受体抗体(例如抗-IL-2受体抗体，抗-IL-4受体抗体，抗-IL-6受体抗体，抗-IL-10受体抗体，以及抗-IL-12受体抗体)，抗细胞因子抗体(例如抗-IFN受体抗体，抗-TNF-α抗体，抗-IL-1β抗体，抗-IL-6抗体，以及抗-IL-12抗体)。在特定的实施方案中，细胞因子受体调节剂是IL-4，IL-10或它们的片段。在另一实施方案中，细胞因子受体调节剂是抗-IL-1β抗体，抗-IL-6抗体，抗-IL-12受体抗体，抗-TNF-α抗体。在另一实施方案中，细胞因子受体调节剂是TNF-α受体的细胞外功能区或其片段。在某些实施方案中，细胞因子受体调节剂不是TNF-α拮抗剂。
在优选的实施方案中，被用作免疫调节剂的蛋白质，多肽或肽，是从与此蛋白质、多肽或肽的接受者相同的物种产生的，这样可减少对这些蛋白质、多肽或肽免疫应答的可能性。在另一优选的实施方案中，当患者是人时，被用作免疫调节剂的蛋白质、多肽或肽是人的或人源化的。
按照本发明，可在给予本发明治疗和/或预防药剂之前、之后或者与之相伴同时对患有炎性疾病或自身免疫病的患者给予一种或几种免疫调节剂。优选地，必要时为了降低或抑制免疫应答的一个或几个方面，可对患有炎性疾病或自身免疫病的患者给予一种或几种免疫调节剂。可以使用本领域技术人员熟知的任何技术对特定患者测定其免疫应答的一个或几个方面，并从而确定在必要时对该患者给予免疫调节剂。在优选的实施方案中，患者保持有绝对淋巴细胞计数为大约500个细胞/mm3，优选地是600个细胞/mm3，更优选地是700个细胞/mm3，最优选地是800个细胞/mm3。在另一优选的实施方案中，如果患者的绝对淋巴细胞计数是500个细胞/mm3或更少，550个细胞/mm3或更少，600个细胞/mm3或更少，650个细胞/mm3或更少，700个细胞/mm3或更少，750个细胞/mm3或更少，或者800个细胞/mm3或更少，则对此患有自身免疫疾病或炎性疾病的患者不给予免疫调节剂。
在优选的实施方案中，对患有炎性疾病或自身免疫病的患者给予一种或几种免疫调节剂，是为了暂时地降低或抑制其免疫应答的一个或几个方面。对免疫系统一个或几个方面这种暂时的抑制或降低可以持续几个小时，几天，几周或几个月。优选地，对免疫应答一个或几个方面的暂时抑制或降低可持续几小时(例如2小时，4小时，6小时，8小时，12小时，14小时，16小时，18小时，24小时，36小时，或48小时)，几天(例如3天，4天，5天，6天，7天，或14天)，或者几周(例如3周，4周，5周或6周)。暂时降低或抑制免疫应答的一个或几个方面，可提高整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防和/或治疗能力。
在本发明的一个实施方案中，按照本发明的方法，对患有炎性疾病或自身免疫病的患者给予了减少或耗尽T细胞(优选地是记忆T细胞)的免疫调节剂。见例如美国专利No.4,658,019。在本发明的另一实施方案中，按照本发明的方法，对患有炎性疾病或自身免疫病的患者给予了失活CD8+T细胞的免疫调节剂。在特定的实施方案中，抗-CD8抗体被用于减少或耗尽CD8+T细胞。
可干扰或阻碍对通过TH(T辅助)细胞激活B细胞所必需的相互作用，并因阻碍中和抗体产生的抗体，在本发明的方法中作为免疫调节剂是有效的。例如，通过T细胞激活B细胞需要发生某些相互作用(Durie等，今日免疫学15(9)：406-410(1994))，例如使T辅助细胞上的CD40配体结合于B细胞上的CD40抗原，以及使T细胞上的CD28和/或CTLA4配体结合于B细胞上的B7抗原。没有这二个相互作用，则不能激活B细胞诱发产生中和抗体。
CD40配体(CD40L)-CD40相互作用是阻碍免疫应答的理想作用点，因为它在T辅助细胞的激活和发挥功能中都有广泛的活性，以及它不存在过多的信号传递途径。因此，在本发明特定的实施方案中，在给予一种或几种免疫调节剂的时间，CD40L与CD40的相互作用被暂时阻断。通过以可阻碍TH细胞上CD40配体，并干扰TH细胞上CD40配体与B细胞上CD40抗原正常结合的药剂处理可达到此目的。可选择针对CD40配体的抗体(抗-CD40L)(可从Bristol-Myers Squibb公司购得，见例如1993年8月18日公布的欧州专利申请555,880)或者可溶性CD40分子，并按照本发明方法用作免疫调节剂。
在另一实施方案中，按照本发明的方法，将可降低或抑制CD4+T辅助细胞THO，TH1和/或TH2亚群的一种或几种生物活性(例如分化、增殖，和/或效应器功能)的免疫调节剂给予患有炎性疾病或自身免疫病的患者。这种免疫调节剂的一个例子是IL-4。IL-4在损耗TH1细胞功能时提高TH2的抗原特异性活性(见例如Yoketa等1986，美国国家科学院学报83：5894-5898；和美国专利No.5,017,691)。可影响T辅助细胞(特别是TH1和/或TH2细胞)生物活性(如增殖、分化和/或效应器功能)的免疫调节剂的其他例子包括但不限于IL-6，IL-10，IL-12和干扰素(IFN)-γ。
在另一实施方案中，按照本发明的方法对患有炎性疾病或自身免疫病的患者给予的免疫调节剂是阻止抗原呈现的细胞因子。在优选的实施方案中，被用于本发明方法的免疫调节剂是IL-10。IL-10还能降低或抑制涉及细菌清除的巨噬细胞功能。
按照本发明可使用的免疫调节剂的其它例子包括但不限于：皮质类固醇，硫唑嘌呤，霉酚酸莫非替克，环孢多肽A，氢化可的松，FK506，氨甲蝶呤，来氟米特，以及环磷酰胺。已经证明。环磷酰胺的短程给药可成功地中断CD4+和CD8+T细胞对腺病毒外壳蛋白的激活(Jooss等，1996.人类基因治疗7：1555-1566)，并在较大的给药剂量可阻止中和抗体形成。氢化可的松或环孢多肽A的治疗已被成功地用于降低对某些细胞因子的诱导，这些细胞因子可能包含在细菌感染的清除过程中。
按照本发明的方法，编码具有免疫调节剂活性的蛋白质、多肽或肽的核酸分子，或者具有免疫调节剂活性的蛋白质、多肽或肽都可以用于对患有炎性疾病或自身免疫病的患者给药。更进一步地，按照本发明的方法，编码具有免疫调节剂活性的蛋白质、多肽或肽的衍生物，类似物，片段或变异体的核酸分子，或者具有免疫调节剂活性的蛋白质、多肽或肽的衍生物、类似物，片段或变异体也可用于对患有炎性疾病或自身免疫病的患者给药。优选地，这种衍生物，类似物、变异体和片段保持有此全长度野生型蛋白质、多肽或肽的免疫调节剂活性。
借助于本领域熟知的或在此所述的任何技术，可以产生可用作免疫调节剂的蛋白质、多肽或肽。见例如Ausubel等(编辑)1999，“分子生物学的短程方案”，第四版，John Wiley & Sons.NY，16章，其中描述了产生蛋白质、多肽或肽的方法，此文献在此被整体引入作为参考。借助于例如在如下文献中所述的方法可以产生可被用作免疫调节剂的抗体；美国专利No.6 245,527以及在Harlow和Lane抗体：实验室手册、冷泉港实验室出版NY冷泉港，1988，在此它们被整体引入作为参考。优选地，被用于本发明组合物和方法的是可购买得到的，已知有免疫调节剂作用的药剂。借助于本领域技术人员熟知的任何一种技术，例如通过CTL检测体，增殖检测法以及免疫检测法(例如ELISA)，检测特定蛋白质如共刺激分子和细胞因子的表达，可在体外和/或体内测定药剂的免疫调节剂活性。
5.2.2.CD2拮抗剂
在某些实施方案中，CD2拮抗剂直接或间接地介导外周血淋巴细胞，优选地是T淋巴细胞和/或NK细胞的消耗。在其它实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员已知的体内或体外检测中，CD2拮抗剂抑制T细胞增殖达至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少98％。在其它实施方案中，CD2拮抗剂诱发T细胞的细胞溶解，在其它实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员已知的体内或体外检测中，CD2拮抗剂抑制T细胞增殖达至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少98％，并具诱导外周血T细胞细胞溶解。在还有的其它实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员已知的体内或体外检测中，CD2结合拮抗剂抑制T细胞激活达至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少98％。
在某些实施方案中，在本发明所述的(如ELISA)或本领域技术人员已知的体内或体外检测中，CD2拮抗剂抑制或降低CD2多肽与LFA-3之间的相互作用达至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少98％。在其它实施方案中，CD2拮抗剂不抑制CD2多肽与LFA-3之间的相互作用。在还有的其它实施方案中，CD2拮抗剂抑制CD2多肽与LFA-3之间的相互作用达到小于20％，小于15％，小于10％，或小于5％。
在某些实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，CD2拮抗剂不诱发或减少细胞因子表达和/或释放。在特定的实施方案中，CD2拮抗剂不引起给予CD2拮抗剂的患者血清中如下细胞因子浓度增加：例如干扰素-γ(IFN-γ)，白介素-2(IL-2)，白介素-4(IL-4)，白介素-6(IL-6)，白介素-9(IL-9)，白介素-12(IL-12)和白介素-15(IL-15)。在另一些实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员已知的体外或体内检测中，CD2拮抗剂可诱导细胞因子表达和/或释放。在特定的实施方案中，CD2拮抗剂引起给予CD2结合分子的患者血清中如下细胞因子浓度增加：例如IFN-γ，IL-2，IL-4，IL-6，IL-7，IL-9，IL-10和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。借助于本领域技术人员熟知的任何技术如包括ELISA的免疫检测法，可检测细胞因子的血清浓度。
在某些实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员已知的体内或体外检测中，CD2拮抗剂可诱导T-细胞无反应性。在另一些实施方案中，在本发明所述的或本领域已知的体内或体外检测中，CD2拮抗剂不诱导T细胞无反应性。在其它实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体外检测中，CD2拮抗剂可诱发出无抗原特异性应答或应答低下的状态，持续至少30分钟，至少1小时，至少2小时，至少6小时，至少12小时，至少24小时，至少2天，至少5天，至少7天，至少10天或更多时间。
在其它实施方案中，在本发明所述的或本领域熟知的体内或体外检测中，CD2拮抗剂可抑制T细胞激活达到至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少98％，并可抑制T细胞增殖达到至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少98％。
在某些实施方案中，CD2拮抗剂不是有机小分子。在其它实施方案中，CD2拮抗剂不是反义核酸分子或三重螺旋。在优选的实施方案中，CD2拮抗剂是CD2结合分子。
在优选的实施方案中，被用作CD2拮抗剂的蛋白质、多肽或肽(包括抗体或融合蛋白)，是从与此蛋白质，多肽或肽的接受者相同的物种产生的，这样可减少对这些蛋白质、多肽或肽免疫应答的可能性。在另一优选的实施方案中，当患者是人时，被用作CD2拮抗剂的蛋白质、多肽或肽是人的或人源化的。
按照本发明的方法，可对患有炎性疾病或自身免疫疾病的患者给予编码有CD2拮抗剂作用的蛋白质、多肽或肽的核酸分子，或者给予有CD2拮抗剂作用的蛋白质，多肽或肽。更进一步地，按照本发明的方法，还可对患有炎性疾病或自身免疫疾病的患者给予编码有CD2拮抗剂作用的蛋白质、多肽或肽的衍生物、类似物、片段或变异体的核酸分子，或者给予有CD2拮抗剂作用的蛋白质、多肽或肽的衍生物、类似物、片段或变异体。优选地，这种衍生物、类似物、变异体或片段保持有全长度野生型蛋白质、多肽或肽的CD2拮抗剂活性。
5.2.3.CD2结合分子
在此使用的名词“CD2结合分子”及类似的名词，指的是可免疫特异性结合于CD2多肽的，并可直接或间接地调节淋巴细胞，特别是外周血液T细胞活性或功能的生物活性分子。在特定的实施方案中，CD2结合分子直接或间接地介导淋巴细胞，特别是外周血液T细胞的消耗，优选地，此CD2结合分子可结合于CD2多肽，并优先介导消耗记忆T细胞(即CD45RO+T细胞)，而不是自然T细胞。在特定的实施方案中，CD2结合分子可免疫特异性地结合于由免疫细胞如T细胞或NK细胞表达的CD2多肽。在优选的实施方案中，CD2结合分子可免疫特异性地结合由T细胞如/或NK细胞表达的CD2多肽。可以借助于例如免疫检测或本领域技术人员熟知的其它技术鉴定CD2结合分子。CD2结合分子包括但不限于蛋白质、多肽、融合蛋白、小分子、模拟药剂、合成药物、有机分子、无机分子和抗体。
在一个实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员已知的体内或体外检测中，CD2结合分子通过抑制T细胞增殖达到至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少98％。来介导外周血液T细胞消耗。在另一实施方案中，CD2结合分子通过诱发T细胞的细胞溶解来介导外周血液T细胞的消耗。在还有另一实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员已知的体内或体外检测中，CD2结合分子通过抑制T细胞增殖达到至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少98％。并诱发外周血液T细胞细胞溶解来介导外周血液T细胞消耗。
在特定的实施方案中，CD2结合分子可免疫特异性地结合于CD2多肽，而不非特异性结合于其它多肽。在另一实施方案中，CD2结合分子可免疫特异性地结合于CD2多肽，并与其它抗原有交叉反应性。在优选的实施方案中，CD2结合分子可免疫特异性地结合于CD2多肽，并与其它抗原没有交叉反应。
在一个实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，CD2结合分子可抑制或减少CD2多肽与体内天然存在的CD2结合配偶体(例如LFA-3分子)之间的相互作用达到大约25％，30％，35％，40％，45％，50％，55％，60％，65％，70％，75％，80％，85％，90％，95％，或98％。在另一实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员已知的体内或体外检测中，CD2结合分子不抑制CD2多肽与体内天然存在的CD2结合配偶体(如LFA-3分子)之间的相互作用。在另一实施方案中，CD2结合分子抑制CD2多肽与LFA-3之间的相互作用达到小于20％，小于15％，小于10％，或小于5％。体内天然存在的CD2结合配偶体包括但不限于可结合于CD2多肽的肽、多肽和有机分子。优选地，体内天然存在的CD2结合分子可结合于CD2多肽的细胞外功能区或其片段。
在特定的实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员已知的体内或体外检测中，CD2结合分子可抑制T细胞激活达到至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少98％。
在另一实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，CD2结合分子不诱导或减少细胞因子表达和/或释放。在特定的实施方案中，CD2结合分子不引起给予CD2结合分子的患者血清中如下细胞因子的浓度增加：例如干扰素-γ(IFN-γ)，白介素-2(IL-2)，白介素-4(IL-4)，白介素-6(IL-6)，白介素-9(IL-9)，白介素-12(IL-12)和白介素-15(IL-15)。在另一实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员已知的体外或体内检测中，CD2结合分子可诱导细胞因子表达和/或释放。在特定的实施方案中，CD2结合分子可引起给予CD2结合分子的患者血清中如下细胞因子的浓度增加：例如IFN-γ，IL-2，IL-4，IL-6，IL-7，IL-9，IL-10，和肿瘤坏死因子-αTNF-α。借助于本领域技术人员熟知的任何技术例如包括ELISA的免疫检测法，可测定细胞因子的血清浓度。
在特定的实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员已知的体内或体外检测中，CD2结合分子可诱导T细胞无反应性。在另一实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员已知的体内或体外检测中，CD2结合分子不诱导T细胞无反应性。在另一实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体外检测中，CD2结合分子可诱发出无抗原特异性应答或应答低下的状态，持续至少30分钟，至少1小时，至少2小时，至少6小时，至少12小时，至少24小时，至少2天，至少5天，至少7天，至少10天，或更多时间。
在另一实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，CD2结合分子抑制T细胞激活达到至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少98％，并且抑制T细胞增殖达到至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少98％。
在一个实施方案中，CD2结合分子是可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体或其抗原结合片段。在优选的实施方案中，CD2结合分子是可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体或其抗原结合片段，此CD2多肽是由免疫细胞如T细胞或NK细胞表达的，在另一实施方案中，CD2结合分子是可免疫特异性结合于CD2多肽的肽，模拟药剂，无机分子或有机分子。在另一实施方案中，CD2结合分子是可免疫特异性结合于CD2多肽的LFA-3肽、多肽，衍生物或其类似物，在另一实施方案中，CD2结合分子是可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白。在优选的实施方案中，CD2结合分子是可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白，此CD2多肽是由免疫细胞如T细胞或NK细胞表达的。在某些实施方案中，CD2结合分子是有机小分子。在其它实施方案中，CD2结合分子不是有机分子。
5.2.3.1可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体
应该承认，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体是本领域已知的，可免疫特异性结合于CD2多肽的已知抗体的例子包括但不限于由细胞系UMCD2产生的鼠单克隆抗体(Ancell免疫学研究制品，Bayport.MN；Kozarsky等1993细胞免疫，150：235-246)，由细胞系RPA2.10产生的鼠单克隆抗体(Zymed Laboratorites公司San Francisco.CA；Rabinowitz等，临床免疫学和免疫治疗76(2)：148-154)，大鼠单克隆抗体LO-CD2b(国际专利公报No.WO 00/78814 A2)，大鼠单克隆抗体LO-CD2a/BTI-322(Latinne等1996，国际免疫学8(7)：1113-1119)，以及人源化单克隆抗体MEDI-507(MedImmune公司，Gaithersburg，MD；Branco等1999，移植68(10)：1588-1596)。
本发明提供了几种抗体，该抗体可免疫特异性结合于由免疫细胞如T细胞或NK细胞表达的CD2多肽，并且该抗体可调节淋巴细胞，优选地是外周血T-细胞的活性功能。在特定的实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体可直接或间接地介导淋巴细胞、优选地是外周血T-细胞的消耗。特别是，本发明提供了几种抗体，该抗体可免疫特异性结合于由T-细胞和/或NK细胞表达的CD2多肽，并且该抗体介导外周血T细胞的消耗。
在特定的实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体抑制或减少CD2多肽与LFA-3之间的相互作用达到大约25％，30％，35％，45％，50％，55％，60％，65％，70％，75％，80％，85％，90％，95％或98％。在另一实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体不抑制CD2多肽与LFA-3之间的相互作用。在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体抑制CD2多肽与LFA-3之间的相互作用达到小于20％，小于15％，小于10％，小于5％。
在特定的实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体抑制T-细胞激活达到至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少98％。
在另一实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体不诱导或减少细胞因子的表达和/或释放。在特定的实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体不诱导给予CD2结合分子的患者血清中如下细胞因子的浓度增加：例如IFN-γ，IL-2，IL-4，IL-6，IL-9，IL-12，和IL-15。在另一实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体可诱导细胞因子表达和/或释放。在特定的实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体可引起给予CD2结合分子的患者血清中如下细胞因子的浓度增加：IFN-γ，IL-2，IL-4，IL-6，IL-7，IL-9，IL-10和TNF-α。借助于本领域技术人员熟知的任何技术如ELISA，可测定细胞因子的血清浓度。
在另一实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体可诱导T细胞无反应性。在另一实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体不引起T细胞无反应性。在另一实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员熟知体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体可引发无抗原特异性应答或应答低下的状态，持续至少30分钟，至少1小时，至少2小时，至少6小时，至少12小时，至少24小时，至少2天，至少5天，至少7天，至少10天或更多时间。
在一个实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中、可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，通过抑制T细胞增殖达到至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少98％来介导外周血T-细胞消耗。在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，通过抑制T-细胞增殖和诱发T-细胞细胞溶解介导外周血T-细胞的消耗。在还有另一实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，通过抑制T细胞增殖达到至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少98％，并且通过诱导外周血T细胞细胞溶解来介导外周血T-细胞的消耗。
在另一实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体抑制T细胞激活达到至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少98％，并且抑制T细胞增殖达到至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少45％。至少50％，至少5 5％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少98％。
在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体Fc功能区、可结合于由免疫细胞如NK细胞，单核细胞和巨噬细胞表达的Fc受体(FcR)。在优选的实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体Fc功能区可结合于由免疫细胞如NK细胞、单核细胞和巨噬细胞表达的FcγRIII。在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体Fc功能区(例如Fc功能区的CH2和/或CH3区)可结合于由免疫细胞如NK细胞、单核细胞和巨噬细胞表达的FcR。
可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包括但不限于单克隆抗体，多特异性抗体，人抗体，人源化抗体，嵌合抗体，单链Fvs(scFv)，单链抗体，Fab片段，F(ab′)片段，二硫键连接的Fvs(sdFv)，和抗-独特型(抗-Id)抗体(包括例如针对本发明抗体的抗-Id抗体)，以及上述任何一种的抗原表位结合片段。特别是，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包括免疫球蛋白分子和免疫球蛋白分子的免疫活性部分，即包含可免疫特异性结合于CD2多肽的抗原结合位点的分子。本发明的免疫球蛋白分子可以是免疫球蛋白分子的任何型(例如IgG，IgE，IgM，IgD，IgA和IgY)，任何类(例如IgG1，IgG2，IgG3，IgG4，IgA1和IgA2)或任何亚类。在特定的实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽，并介导T细胞消耗的抗体，包含Fc功能区或其片段(例如Fc功能区的CH2，CH3和/或铰链区)。在特定的实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽，并介导T细胞消耗的抗体，包含可结合于由免疫细胞表达的FcR，优选地是FcγRIII的Fc功能区或其片段。
可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体可以是任何动物来源的，包括鸟类和哺乳动物(例如人，鼠，驴，绵羊，兔，山羊，豚鼠，骆驼，马或鸡)。优选地，本发明的抗体是人的或人源化的单克隆抗体。可免疫特异性结合于CD2多肽的人抗体包括具有人免疫球蛋白氨基酸序列的抗体，和从人免疫球蛋白文库中分离出的抗体或者是从小鼠分离出的抗体，此小鼠以人基因表达此抗体。
可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体可以单特异性的，双特异性的，三特异性的或是更多的多特异性的。多特异性抗体可以对CD2多肽的不同抗原表位是特异性的，或者可以既对CD2多肽的抗原表位是特异性的，又对异源抗原表位如异源多肽或固体支持材料是特异性的。见例如PCT公告WO 93/17715，WO 92/08802，WO 9I/00360，和WO92/05793，Tutt等免疫学杂志147：60-69(1991)，美国专利No4,474,893，4,714,681，4,925,648，5,573,920和5,601,819，以及Kostelny等免疫学杂志148：1547-1553(1992)。
本发明提供了对CD2多肽具有高结合亲和性的抗体，在特定的实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，具有结合速率常数或kon速率(抗体(Ab)+抗原(Ag)konAb-Ag)至少105M-1S-1，至少5×105M-1S-1，至少106M-1S-1，至少5×106M-1S-1，至少107M-1S-1，至少5×107M-1S-1，或至少108M-1S-1。在优选的实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体具有kon至少2×105M-1S-1，至少5×105M-1S-1，至少106M-1S-1，至少5×106M-1S-1，至少107M-1S-1，至少5×107M-1S-1或至少108M-1S-1。
在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体具有koff速率(抗体(Ab)+抗原(Ag)KoffAb-Ag)小于10-1S-1，小于5×10-1S-1，小于10-2S-1，小于5×10-2S-1，小于10-3S-1，小于5×10-3S-1，小于10-4S-1，小于5×10-4S-1，小于10-5S-1，小于5×10-5S-1，小于10-6S-1，小于5×10-6S-1，小于10-7S-1，小于5×10-7S-1，小于10-8S-1，小于5×10-8S-1，小于10-9S-1，小于5×10-9S-1，或小于10-10S-1。在优选的实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体具有koff小于5×10-4S-1，小于10-5S-1，小于10-6S-1，小于5×10-6S-1，小于10-7S-1，小于5×10-7S-1，小于10-8S-1，小于5×10-8S-1，小于10-9S-1，小于5×10-9S-1，或小于10-10S-1。
在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体具有亲和常数或Ka(kon/koff)至少102M-1，至少5×102M-1，至少103M-1，至少5×103M-1，至少104M-1，至少5×104M-1，至少105M-1，至少5×105M-1，至少106M-1，至少5×106M-1，至少107M-1，至少5×107M-1，至少108M-1，至少5×108M-1，至少109M-1，至少5×109M-1，至少1010M-1，至少5×1010M-1，至少1011M-1，至少5×1011M-1，至少1012M-1，至少5×1012M-1，至少1013M-1，至少5×1013M-1，至少1014M-1，至少5×1014M-1，至少1015M-1，或至少5×1015M-1。在还有另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体具有解离常数或Kd(koff/kon)小于10-2M，小于5×10-2M，小于10-3M，小于5×10-3M，小于10-4M，小于5×10-4M，小于10-5M，小于5×10-5M，小于10-6M，小于5×10-6M，小于10-7M，小于5×10-7M，小于10-8M，小于5×10-8M，小于10-9M，小于5×10-9M，小于10-10M，小于5×10-10M，小于10-11M，小于5×10-11M，小于10-12M，小于5×10-12M，小于10-13M，小于5×10-13M，小于10-14M，小于5×10-14M，小于10-15M，或小于5×10-15M。
在特定的实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体是LO-CD2a/BTI-322或其抗原结合片段，(例如LO-CD2a/BTI-322的一个或几个互补决定区(CDR)。LO-CD2a/BTI-322具有例如在美国专利No.5,730,979,5,817,311和5,951,983；以及美国专利申请序列号09/056,072和09/462,140中公开的氨基酸序列(这些专利都被整体引入作为参考)，或者具有一种单克隆抗体的氨基酸序列，此单克隆抗体是由以检索号HB 11423，1993年7月28日保存于美国典型培养物保存中心(ATCC)(10801，Boulevard大学，Manassas，virginia 20110-2209)的细胞系列产生的。在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体不是LO-CD2a/BTI-322或它的抗原结合片段。
在另一特定的实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体是LO-CD2b或其抗原结合片段(例如LO-CD2b的一个或几个CDRs)。LO-CD2b具有一种抗体的氨基酸序列，此抗体是由以检索号PTA-802，1999年6月22日保存于ATCC(10801，Boulevard大学，Manassas，Virginia 20110-2209)的细胞系产生的，或者具有在例如Dehoux等2000，移植69(12)：2622-2633和国际专利公报No.WO 00/78814(均被整体引入作为参考)中公开的抗体氨基酸序列。在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体不是LO-CD2b或它的抗原结合片段。
在优选的实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体是MEDI-507或其抗原结合片段(例如MEDI-507的一个或几个CDRs)，MEDI-507被公开于例如PCT专利公报No.WO 99/03502和美国专利申请系列号09/462,140中，在此它们均被整体引入作为参考)。在另一实施方案中，本发明的抗体不是MEDI-507或MEDI-507的抗原结合片段。
本发明还提供了几种可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体包含具有LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的可变重链(VH)区氨基酸序列的VH区。本发明还提供了几种可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体包含具有列于表2中的任何一种VH CDRs氨基酸序列的VH CDR。
表2.LO-CD2a/BTI-322的CDR序列
CDR            序列                  SEQ ID NO：
VH1            EYYMY                 11
VH2            RIDPEDGSIDYVEKFKK     12
VH3            GKFNYRFAY             13
VL1            RSSQSLLHSSGNTLNW      14
VL2            LVSKLES               15
VL3            MQFTHYPYT             16
在一个实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含具有SEQ ID NO：11氨基酸序列的VH CDR1。在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含具有SEQ ID NO：12氨基酸序列的VH CDR2。在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2  多肽的抗体包含具有SEQ ID NO：13氨基酸序列的VH CDR3。在优选的实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含具有SEQ ID NO：11氨基酸序列的VH CDR1，具有SEQ ID NO：12氨基酸序列的VHCDR2，以及具有SEQ ID NO：13氨基酸序列的VH CDR3。
本发明还提供了几种可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体包含具有LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的可变轻链(VL)区氨基酸序列的VL区。本发明还提供了几种可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体包含具有列于表2中的任何一种VL CDRs氨基酸序列的VL CDR。
在一个实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含具有SEQ ID NO：14氨基酸序列的VL CDR1。在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含具有SEQ ID NO：15氨基酸序列的VL CDR2。在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含具有SEQ ID NO：16氨基酸序列的VL CDR3。在优选的实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含具有SEQ ID NO：14氨基酸序列的VL CDR1，具有SEQ ID NO：15氨基酸序列的VL CDR2，以及具有SEQ ID NO：16氨基酸序列的VL CDR3。
本发明还提供了几种可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体包含与在此公开的VL区或其它VL区组合的在此公开的VH区。本发明还进一步提供了几种可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体包含与在此公开的VH区或其它VH区组合的在此公开的VL区。
本发明还提供了几种可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体包含列于表2中的一个或几个VH CDRs和一个或几个VL CDRs。特别是，本发明提供可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体包含VH CDR1和VL CDR1，VH CDR1和VL CDR2，VH CDR1和VLCDR3，VH CDR2和VL CDR1，VH CDR2和VL CDR2，VH CDR1和VL CDR3，VH CDR3和VL CDR1，VH CDR3和VL CDR2，VH CDR3和VL CDR3，或者列于表2中的VH CDRs和VL CDRs的任何组合。
在一个实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含具有SEQ ID NO：11氨基酸序列的VH CDR和具有SEQ ID NO：14氨基酸序列的VL CDR1。在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含具有SEQ ID NO：11氨基酸序列的VH CDR1和具有SEQ ID NO：15氨基酸序列的VL CDR2。在另一实施方案中，可免疫结合于CD2多肽的抗体包含具有SEQ ID NO：11氨基酸序列的VHCDR1和具有SEQ ID NO：16氨基酸序列的VL CDR3。
在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含具有SEQ ID NO：12氨基酸序列的VH CDR2和具有SEQ ID NO：14氨基酸序列的VL CDR1。在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含具有SEQ ID NO：12氨基酸序列的VH CDR2和具有SEQ ID NO：15氨基酸序列的VL CDR2。在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含具有SEQ ID NO：12氨基酸序列的VH CDR2和具有SEQ ID NO：16氨基酸序列的VL CDR3。
在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含具有SEQ ID No：13氨基酸序列的VH CDR3和具有SEQ ID NO：14氨基酸序列的VL CDR1。在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含具有SEQ ID NO：13氨基酸序列的VH CDR3和具有SEQ ID NO：15氨基酸序列的VL CDR2。在优选的实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含具有SEQ ID NO：13氨基酸序列的VH CDR3和具有SEQ ID NO：16氨基酸序列的VL CDR3。
本发明还提供了一种通常是被分离出的核酸分子，它编码可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体。在特定的实施方案中，该分离出的核酸分子编码可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体具有LO-CD2a/BTI-322，LO-CD2b或MEDI-507的氨基酸序列。
在一个实施方案中，该分离出的核酸分子编码可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体包含具有LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的VH区氨基酸序列的VH区。在另一实施方案中，该分离出的核酸分子编码可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体包含具有一种单克隆抗体的VH区氨基酸序列的VH区，该单克隆抗体是由以检索号HB11423保存于ATCC的细胞系产生的。在另一实施方案中，该分离出的核酸分子编码可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体包含具有列于表2中的VH CDR1氨基酸序列的VH CDR1。在另一实施方案中，该分离出的核酸分子编码可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体包含具有列于表2中的VH CDR2氨基酸序列的VHCDR2。在还有另一实施方案中，该分离的核酸分子编码可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体包含具有列于表2中的VH CDR3氨基酸序列的VH CDR3。
在一个实施方案中，该核酸分子编码可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体包含具有LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的VL区氨基酸序列的VL区。在另一实施方案中，该分离的核酸分子编码可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体包含具有一种单克隆抗体的VL区氨基酸序列的VL区，此单克隆抗体是由以检索号HB11423保存于ATCC的细胞系产生的。在另一实施方案中，该分离出的核酸分子编码可免疫结合于CD2多肽的抗体，该抗体包含具有列于表2中VL CDR1氨基酸序列的VL CDR1。在另一实施方案中，该分离出的核酸分子编码可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体包含具有列于表2中的VL CDR2氨基酸序列的VL CDR2。在还有另一实施方案中，该分离的核酸分子编码可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体包含具有列于表2中的VL CDR3氨基酸序列的VL CDR3。
在另一实施方案中，该分离出的核酸分子编码可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体包含具有LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的VH区氨基酸序列的VH区和具有LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的VL区氨基酸序列的VL区。在另一实施方案中，该分离的核酸分子编码可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体包含具有列于表2中的氨基酸序列的VH CDR1，VL CDR1，VH CDR2，VL CDR2，VH CDR3，VL CDR3或者它们的任何组合。
本发明还提供了几种可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体包含在此所述的，可免疫特异性结合于CD2多肽的VH区，VHCDRs，VL区或VL CDRs的衍生物，可应用本领域技术人员已知的标准技术将突变导入编码本发明抗体的核苷酸序列，包括例如导致氨基酸取代的定点诱变第PCR介导的诱变。优选地，此衍生物相对于原来的分子包含少于25个氨基酸取代，少于20个氨基酸取代，少于15个氨基酸取代，少于10个氨基酸取代，少于5个氨基酸取代，少于4个氨基酸取代，少于3个氨基酸取代，或少于2个氨基酸取代。在优选的实施方案中，在预定的一个或几个非必要氨基酸残基(即对抗体免疫特异性结合于CD2多肽不是决定性的氨基酸残基)造成了具有保守的氨基酸取代的衍生物。“保守的氨基酸取代”是以具有携带相似电荷侧链的氨基酸残基代替其中此氨基酸残基的取代。本领域已定义了具有携带相似电荷侧链的氨基酸残基种类。这些种类包括带有碱性侧链的氨基酸(如赖氨酸、精氨酸、组氨酸)，带有酸性侧链的氨基酸(如天冬氨酸、谷氨酸)，带有无电荷极性侧链的氨基酸(如甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、半胱氨酸)，带有非极性侧链的氨基酸(如丙氨酸，缬氨酸，亮氨酸，异亮氨酸，脯氨酸，苯丙氨酸，甲硫氨酸，色氨酸)。带有β-分支侧链的氨基酸(如苏氨酸，缬氨酸，异亮氨酸)，以及带有芳香族侧链的氨基酸(如酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸)。按另一种方式，可沿着全部或部分编码序列随机地导入突变，例如通过饱和诱变法，然后对形成的突变体筛选生物活性，以使鉴别保留有活性的突变体。诱变完成之后，可表达编码的抗体，并可测定此抗体的活性。
本发明提供了几种可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体包含LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的氨基酸序列，此LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507在可变轻链(VL)区和/或可变重链(VH)区带有一个或几个氨基酸取代。本发明还提供了几个可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体包含LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的氨基酸序列，此LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507在一个或几个VL CDRs和/或一个或几个VH CDRs中带有一个或几个氨基酸取代，可在体外或体内检测通过在LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的VH区、VH CDRs，VL区和/或VL CDRs内导入取代而产生的抗体，例如测定它结合于CD2多肽的能力，抑制T-细胞激活的能力，抑制T-细胞增殖的能力，或诱发T-细胞溶解的能力，或者防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状的能力。
在特定的实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包括一种核苷酸序列，它可同编码由以检索号HB11423保存于ATCC的细胞系产生的单克隆抗体的核苷酸序列杂交，杂交是在严格条件下进行，例如在大约45℃在6X氯化钠/柠檬酸钠(SSC)中同滤纸固定的DNA杂交，随后在大约50-65℃在0.2X SSC/0.1％SDS中漂洗一次或几次，杂交还可在高度严格条件下进行，例如在大约45℃在6X SSC同滤纸固定的核酸杂交，随后在大约68℃在0.1X SSC/0.2％SDS中漂洗一次或几次，或者杂交是在本领域技术人员熟知的其它严格条件下进行(见例如Ausubel F.M.等编辑，1989，“分子生物学的当前策略”卷1，Green Publishing Associates公司和John Wiley & Sons公司，NY.p6.3.1-6.3.6和2.10.3)。
在特定的实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包括一种核苷酸序列，它可同编码MEDI-507的核苷酸序列杂交，杂交是在严格条件下进行，例如在大约45℃在6X氯化钠/柠檬酸钠(SSC)中同滤纸固定的DNA杂交，随后在大约50-65℃在0.2X SSC/0.1％SDS中漂洗一次或几次，杂交还可在高度严格条件下进行，例如在大约45℃在6X SSC中同滤纸固定的核酸杂交，随后在大约68℃在0.1XSSC/0.2％SDS中漂洗一次或几次，或者杂交是在本领域技术人员已知的其它严格条件下进行(见例如Ausubel F.M.等编辑，1989，“分子生物学的现代策略”，卷1，绿色出版协会和John Wiley & Sons公司，NY.p6.3.1-6.3.6和2.10.3)。
在特定的实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含由一种核苷酸序列编码的VH区氨基酸序列或VL区氨基酸序列，此核苷酸序列可同编码LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的VH区或VL区的核苷酸序列杂交，杂交是在严格条件下进行，例如在大约45℃在6X氯化钠/柠檬酸钠(SSC)中同滤纸固定的DNA杂交，随后在大约50-65℃在0.2X SSC/0.1％SDS中漂洗一次或几次，杂交还可在高度严格条件下进行，例如在大约45℃在6X SSC中同滤纸固定的核酸杂交，随后在大约68℃在0.1X SSC/0.2％SDS中漂洗一次或几次，或者杂交是在本领域技术人员已知的其它严格条件下进行(见例如Ausubel F.M.等编辑，1989，“分子生物学的现代策略”，卷1，Green PublishingAssociates公司和John Wiley & Sons公司NY.p6.3.1-6.3.6和2.10.3)。
在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含由一种核苷酸序列编码的VH CDR氨基酸序列或者VL CDR氨基酸序列，此核苷酸序列可同编码列于表2中的任何一种VH CDR或VL CDR的核苷酸序列杂交，杂交是在严格条件下进行，例如在45℃在6X氯化钠/柠檬酸钠(SSC)中同滤纸固定的DNA杂交，随后在大约50-65℃在0.2X SSC/0.1％SDS中漂洗一次或几次，杂交还可在高度严格条件下进行，例如在大约45℃在6X SSC中同滤纸固定的核酸杂交，随后在大约68℃在0.1X SSC/0.2％SDS中漂洗一次或几次，或者杂交是在本领域技术人员已知的其它严格条件下进行。
在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含由一种核苷酸序列编码的VH CDR氨基酸序列或VL CDR氨基酸序列，此核苷酸序列可同编码由检索号HB11423保存于ATCC的细胞系列产生的单克隆抗体的任何一种VH CDR或VL CDR的核苷酸序列杂交，杂交是在严格条件下进行，例如在大约45℃在6X氯化钠/柠檬酸钠(SSC)中同滤纸固定的DNA杂交，随后在大约50-65℃在0.2XSSC/0.1％SDS中漂洗一次或几次，杂交还可在高度严格条件下进行，例如在大约45℃在6X SSC中同滤纸固定的核酸杂交，随后在大约68℃在0.1X SSC/0.2％SDS中漂洗一次或几次，或者杂交是在本领域技术人员熟知的其它严格条件下进行。
在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含由一种核苷酸序列编码的VH CDR氨基酸序列和VL CDR氨基酸序列，此核苷酸序列可同编码列于表2中任何一种VH CDR和VL CDR的核苷酸序列杂交，杂交是在严格条件下进行，例如在45℃在6X氯化钠/柠檬酸钠(SSC)中同滤纸固定的DNA杂交，随后在大约50-65℃在0.2X SSC/0.1％SDS中漂洗一次或几次。杂交还可在高度严格条件下进行，例如在大约45℃在6X SSC中同滤纸固定的核酸杂交，随后在大约68℃在0.1X SSC/0.2％SDS中漂洗一次或几次，或者杂交是在本领域技术人员已知的其它严格条件下进行。
在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含由一种核苷酸序列编码的VH CDR氨基酸序列和VL CDR氨基酸序列，此核苷酸序列可同编码由以检索号HB11423保存于ATCC的细胞系产生的单克隆抗体的核苷酸杂交，杂交是在严格条件下进行，例如在大约45℃在6X氯化钠/柠檬酸钠(SSC)中同滤纸固定的DNA杂交，随后在大约50-65℃在0.2X SSC/0.1％SDS中漂洗一次或几次，杂交还可在高度严格条件下进行，例如在大约45℃在6X SSC中同滤纸固定的核酸杂交，随后在大约68℃在0.1X SSC/0.2％SDS中漂洗一次或几次，或者杂交是在本领域技术人员已知的其它严格条件下进行。
在特定的实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含一个氨基酸序列，此氨基酸序列至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少99％等同于由以检索号HB11423保存于ATCC的细胞系产生的单克隆抗体的氨基酸序列。在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含一种氨基酸序列，此氨基酸序列至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少99％等同于MEDI-507的氨基酸序列。
在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含一种VH区的氨基酸序列，此VH区至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少99％等同于MEDI-507的VH区。在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含一种VH区的氨基酸序列，此VH区至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少99％等同于由以检索号HB11423保存于ATCC的细胞系产生的单克隆抗体的VH区。
在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含一种或几种VH CDR的氨基酸序列，此VH CDR至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少99％等同于列于表2中的任何一种VH CDR。在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含一种或几种VH CDR的氨基酸序列，此VH CDR至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少99％等同于由以检索号HB11423保存于ATCC的细胞系产生的单克隆抗体的任何一种VH CDR。
在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含一种VL区的氨基酸序列，此VL区至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少99％等同于MEDI-507的VL区。在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含一种VL区的氨基酸序列，此VL区至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少99％等同于由以检索号HB11423保存于ATCC的细胞系产生的单克隆抗体的VL区。
在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含一种或几种VL CDR的氨基酸序列，此VL CDR至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少99％等同于列于表2中的任何一种VL CDR。在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包含一种或几种VL CDR的氨基酸序列，此VL CDR至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少99％等同于由以检索号HB11423保存于ATCC的细胞系产生的单克隆抗体的任何一种VL CDR。
本发明包括与在此所述的抗体竞争结合于CD2多肽的抗体。在特定的实施方案中，本发明包括几种抗体，此抗体可用LO-CD2a/BTI-322或其抗原结合片段竞争结合于CD2多肽。在特定的实施方案，本发明包括几种抗体，此抗体可同LO-CD2b或其抗原结合片段竞争结合于CD2多肽。在优选的实施方案，本发明包括几种抗体，此抗体可同MEDI-507或其抗原结合片段竞争结合于CD2多肽。
本发明还包括几种VH区，此VH区可同LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的VH区竞争结合于CD2多肽。本发明还包括几种VL区，此VL区可同LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的VL区竞争结合于CD2多肽。
本发明还包括几种VH CDR，此VH CDR可同列于表2中的VHCDR竞争结合于CD2多肽，或者同由以检索号HB11423保存于ATCC的细胞系产生的单克隆抗体的VH CDR竞争结合于CD2多肽。本发明还包括几种VL CDR，此VL CDR可同列于表2中的VL CDR竞争结合于CD2多肽，或者同以检索号HB11423保存于ATCC的细胞系产生的单克隆抗体的VL CDR竞争结合于CD2多肽。
可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体包括被修饰的衍生物，即通过将任何类型的分子共价连接于此抗体。例如，但不作为限制，此抗体衍生物包括已通过如下修饰的抗体：如糖基化，乙酰化，乙二醇化，磷酸化，酰胺化，通过已知的保护基团/封闭基团衍生化，蛋白水解断开，连接于细胞配体或其它蛋白质等，借助于已知的技术可实施任何数目的化学修饰，包括但不限于特异性化学断开，乙酰化，甲酰化，衣霉素代谢合成等。此外，此衍生物还可能包含一个或几个非标准的氨基酸。
本发明还提供了几种可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体包含本领域技术人员已知的骨架区。优选地，本发明抗体的骨架区是人的，在特定的实施方案中，可免疫特异性结合了CD2多肽的抗体包含MEDI-507的骨架区。
本发明还包括几个可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体包含在骨架区带有突变(例如一个或几个氨基酸取代)的MEDI-507氨基酸序列。在某些实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体在VH区和/或VL区的骨架区内带有一个或几个氨基酸取代的MEDI-507氨基酸序列
本发明还包括几种可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体包含在可变区或骨架区内带有突变(例如一个或几个氨基酸取代)的MEDI-507氨基酸序列。
本发明还提供了几种融合蛋白，它包含一个可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体和一个异源多肽。优选地，与此抗体融合的异源多肽，对使抗体对准T细胞和/或NK细胞是有用的。
5.2.3.1.1具有延长了半衰期的可免疫特异性结合于
         CD2多肽的抗体
本发明提供了几种可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，该抗体在体内具有延长的半衰期。特别是，本发明提供了几种可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体，此抗体在动物体内，优选地是在哺乳动物体内，最优选地在人体内具有大于3天，大于7天，大于10天，优选地大于15天，大于25天，大于30天，大于35天，大于40天，大于45天，大于2个月，大于3个月，大于4个月，或大于5个月的半衰期。
为了延长抗体(如单克隆抗体，单链抗体和Fab片段)在体内血清中的循环期，例如可以使惰性聚合物分子如高分子量的聚乙二醇(PEG)结合于此抗体，使用或不使用多官能度连接分子，通过使PEG位点特异性偶联于抗体的C末端，或者通过存在于赖氨酸残基的ε-氨基偶联。将采用可导致生物活性最小损失的线形或支化聚合物衍生法，借助于SDS-PAGE和质谱分析可以密切地监测偶联的程度，以便确保PEG分子适当地偶联于抗体。通过尺寸排阻色谱或离子交换色谱，可以使未反应的PEG与抗体-PEG偶联物分离。应用本领域技术人员熟知的方法，例如通过在此所述的免疫检测法，可检测PEG衍生化抗体的结合活性以及体内的效力。
还可以通过将一个或几个氨基酸修饰(即取代，插入或缺失)导入IgG恒定区或其FcRn结合片段(优选地是Fc片段或铰链-FC区片段)来产生在体内具有延长半衰期的抗体。见例如国际专利公报No.WO98/23289，国际专利公报No.WO 97/34631和美国专利No.6,277,375，在此它们都被整体引入作为参考。
5.2.3.1.2抗体偶联物
本发明包括几种可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体或其抗原结合片段，此抗体或其抗原结合片段被重组融合或化学偶联(包括共价和非共价偶联)于一个异源多肽或其片段而形成融合蛋白(此异源多肽的片段优选地是此多肽的至少5个，至少10个，至少20个，至少30个，至少40个，至少50个，至少60个，至少70个，至少80个，至少90个或至少100个相邻的氨基酸)。这种融合不一定需要是直接的，但可以通过接头序列形成。例如，通过使抗体融合或偶联于对特定细胞表面受体例如CD4和CD8特异性的抗体，在体外或体内此抗体可被用于使异源多肽对准特定的细胞类型(如T细胞)。
本发明还包括为便于纯化而融合于标记序列如一种肽的，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体或其抗原结合片段。在优选的实施方案中，此标记氨基酸序列是一个6-组氨酸肽，例如在pQE载体(QIAGEN.公司，9259 Eton Avenue.Chatsworth.CA.91311)中提供的标记，其中许多标记都可买到。如在Gentz等1989，美国国家科学院学报86：821-824中所述的，例如6-组氨酸可以对融合蛋白的纯化提供方便。对纯化有用的其它肽标记包括但不限于血凝素“HA”标记和“Flag”标记，此“HA”标记相当于从流感血凝素蛋白得到的抗原表位(Wilson等1984细胞37：767)。
本发明还进一步包括与具有潜在治疗效果的药剂偶联的，可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体或其抗原结合片段。可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体或其抗原结合片段可被偶联于治疗药剂部分例如，细胞毒素如细胞抑制剂或杀细胞剂，具有潜在治疗效果的药剂，或者放射活性金属离子如α-放射体。细胞毒素或细胞毒性剂包括对细胞有害的任何一种药剂。细胞毒素或细胞毒性剂的例子包括但不限于：紫杉醇，细胞松驰素B，短杆菌肽D，溴乙啡啶，吐根素，丝裂霉素，依托泊苷，替诺泊苷，长春新碱，长春碱，秋水仙素，防霉素，道诺霉素，二羟炭疽菌素土卫四，米托蒽醌，光神霉素，放射菌素D，1-去氢睾丸酮，糖皮质激素，普鲁卡因，丁卡因，利多卡因，心得安和嘌呤霉素，以及它们的类似物或同源物。具有潜在治疗效果的药剂包括但不限于抗代谢物(如氨甲蝶呤，6-巯基嘌呤，6-硫鸟嘌呤，阿糖胞苷，5-氟尿嘧啶)，烷基化剂(如二氯甲基二乙胺，噻替派瘤可宁，美清仑，卡氮芥(BSNU)和环己亚硝脲(CCNU)，环磷酰胺，白消安，二溴甘露醇，链脲霉素，丝裂霉素C和顺式二氯肼铂(II)(DDP)顺氯氨钠)，蒽霉素(如柔红霉素C，以前称道诺霉素和阿霉素)，抗菌素(如更生霉素(以前称放射菌素)，博来霉素，光神霉素，和氨四霉素(AMC)，以及抗有丝分裂剂(如长春新碱和长春碱)。
并且，还可使可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体或其抗原结合片段偶联于可改变某一特定生物应答的治疗剂或药物。具有潜在治疗效果的药剂或药物不要被理解为局限于经典的化学治疗剂。例如，药物部分可以是具有所希望生物活性的蛋白质或多肽。这种蛋白质可包括例如毒素如相思豆毒素，篦麻毒素A，假单胞菌外毒素或白喉菌毒素；蛋白质如肿瘤坏死因子，干扰素-α(“IFN-α”)，干扰素-β(“IFN-β”)，神经生长因子(“NGF”)，血小板产生的生长因子(“PDGF”)，组织血浆酶原激活剂(“TPA”)；凋亡剂如TNF-α，TNF-β，AIM I(见国际专利公报No.WO 97/33899)，AIM II(见国际专利公报No.WO 97/34911)，Fas配体(Takahashi等.1994，免疫学杂志6：1567-1574)，以及VEGF(见国际专利公报No.WO99/23105)，抗血栓形成剂或抗血管生成剂如angiostatin或endostatin；或者生物应答修饰剂例如淋巴因子(如白介素-1(“IL-1”)，IL-2，IL-6，IL-10，粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(“GM_CSF”)，和粒细胞集落刺激因子(“G_CSF”))，或者生长因子(如生长激素(“GH”))。
使这种治疗剂偶联于抗体的技术是熟知的，见例如Arnon等“肿瘤治疗中用于药物免疫靶定的单克隆抗体”，在“单克隆抗体和癌治疗”中，Reisfeld等(编辑)pp 243-56(Alan R.Liss公司，1985)；Hellstron等，“用于药物递送的抗体”，在“被控制的药物递送(第二版)中，Robinson等(编辑)。pp623-53(Marce Dekker公司1987)；Thorpe，“癌症治疗中细胞毒性剂的抗体载体：述评”，在“单克隆抗体84年：生物学和临床应用”中，Pinchere等(编辑)，pp475-506(1985)；“对癌症治疗中放射标记抗体治疗应用的分析，结果及未来展望”，在“用于癌检测和治疗的单克隆抗体”中，Baldwin等(编辑)。pp.306-16(Academic出版社，1985)；以及Thorpe等1982免疫学评论62：119-58。
还可以使可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体或其抗原结合片段偶联于第二个抗体，形成抗体异偶联物，如Segal在美国专利No.4,676,980中所述，此专利在此被整体引入作为参考。
还可使可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体或抗原结合片段附着于固体支持物，这对纯化CD2+免疫细胞如T-细胞特别有效。这种固体支持物包括但不限于玻璃，纤维素，聚丙烯酰胺，尼龙，聚苯乙烯，聚氯乙烯或聚丙烯。
5.2.3.2.可免疫特异性结合于CD2多肽的LFA-3多肽
本发明包括可免疫特异性结合于CD2多肽的LFA-3蛋白、多肽、衍生物和其类似物，用于防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状。优选地，可免疫特异性结合于CD2结合分子的可溶性LFA-3多肽包含LFA-3的至少5个相邻的氨基酸残基，优选地是LFA的至少10个，至少20个，至少30个，至少40个，至少50个，至少60个，至少70个，至少80个，至少90个，或至少100个相邻的氨基酸残基。可以从任何物种产生可免疫特异性结合于CD2结合分子的可溶性LFA-3蛋白，多肽，衍生物和其类似物。
在文献或公共数据库可找到LFA-3的核苷酸序列和/或氨基酸序列，或者可应用本领域技术人员熟知的克隆技术和测序技术测定其核酸序列和/或氨基酸序列。例如，在GenBand数据库可找到人LFA-3的核苷酸序列和氨基酸序列(见例如检索号E12817和CAA29622)。
在特定的实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的可溶性LFA-3多肽构成天然存在的LFA-3的细胞外功能区，或者包括SEQ IDNO：17的氨基酸残基1-187。在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的可溶性LFA-3多肽包含LFA-3的细胞外功能区片段(例如SEQ ID NO：17的氨基酸残基1-92，氨基酸残基1-85，氨基酸残基1-80，氨基酸残基1-75，氨基酸残基1-70，氨基酸残基1-65，或氨基酸残基1-60)。
在特定的实施方案，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的可溶性LFA-3可抑制或降低CD2多肽与LFA-3之间的相互作用达到大约25％，30％，35％，45％，50％，55％，60％，65％，70％，75％，80％，85％，90％，95％或98％。在另一实施方案，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的可溶性LFA-3多肽不抑制CD2多肽与LFA-3之间的相互作用。在另一实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的可溶性LFA-3多肽抑制CD2多肽与LFA-3之间的相互作用达到小于20％，小于15％，小于10％，或小于5％。
在特定的实施方案，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的可溶性LFA-3多肽抑制T-细胞激活达到至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少98％。在另一实施方案，在本发明所述的或本领域技术人员熟知体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的可溶性LFA-3多肽抑制T-细胞增殖达到至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少98％。在另一实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的可溶性LFA-3多肽抑制T-细胞激活达到至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少98％，并且在本发明所述的或本领域技术人员熟知体内或体外检测中，抑制T细胞增殖达到至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少98％。
在另一实施方案，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的可溶性LFA-3多肽不诱导或减少细胞因子表达和/或释放。在特定的实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的可溶性LFA-3多肽不引起给予CD2结合分子的患者血清中如下细胞因子的浓度增加：例如IFN-γ，IL-2，IL-4，IL-6，IL-9，IL-12，和IL-15。在另一实施方案，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的可溶性LFA-3多肽可诱导细胞因子表达和/或释放。在特定的实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的可溶性LFA-3多肽可引起给予CD2结合分子的患者血清中如下细胞因子的浓度增加：例如IFN-γ，IL-2，IL-4，IL-6，IL-7，IL-9，IL-10和TNF-α。借助于本领域技术人员熟知的任何技术如ELISA，可检测细胞因子的血清浓度。
在另一实施方案，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的可溶性LFA-3多肽可诱发T-细胞无反应性。在另一实施方案，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的可溶性LFA-3多肽不诱发T细胞无反应性。在另一实施方案，在本发明所述的或本领域技术人员熟知体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的可溶性LFA-3多肽可引发无抗原特异性应答或应答低下的状态，持续至少30分钟，至少1小时，至少2小时，至少6小时，至少12小时，至少24小时，至少2天，至少5天，至少7天，至少10天或更多时间。
在特定的实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的可溶性LFA-3多肽可通过诱发T-细胞的细胞溶解来介导外周血T-细胞的消耗。在另一实施方案中，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的可溶性LFA-3多肽通过抑制T-细胞增殖达到至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少98％，并诱发外周血T细胞细胞溶解来介导外周血T-细胞的消耗。
本发明提供了几种可免疫特异性结合于CD2多肽的可溶性LFA-3多肽，它们在体内有延长的半衰期。特别是，本发明提供了几种可免疫特异性结合于CD2多肽的可溶性LFA-3多肽，它们在动物体内，优选地在哺乳动物体内，而最优选地是在人体内具有大于3天，大于7天，大于10天的半衰期，优选地是大于15天，大于25天，大于30天，大于35天，大于40天，大于45天，大于2个月，大于3个月，大于4个月，或大于5个月的半衰期。
为了延长可免疫特异性结合于CD2多肽的可溶性LFA-3多肽在体内血清中的循环期，例如可以使惰性聚合物分子如高分子量的聚乙二醇(PEG)结合于此可溶性LFA-3多肽，使用或不使用多官能度连接分子，通过使PEG位点特异性偶联于此可溶性LFA-3多肽的C末端，或者通过存在于赖氨酸残基的ε-氨基偶联。将采用可导致生物活性最小损失的线形或支化聚合物衍生法，借助于SDS-PAGE和质谱分析可以密切地监测偶联的程度，以便确保PEG分子适当地偶联于可溶性LFA-3多肽。通过尺寸排阻色谱或离子交换色谱，可以使未反应的PEG与LFA-3多肽-PEG偶联物分离。应用本领域技术人员熟知的方法例如在此所述的免疫检测法，可检测PEG-衍生化LFA-3多肽的结合活性，以及体内效果。
5.2.3.2.1 LFA-3偶联物
本发明还包括为便于纯化而融合于标记序列如一种肽的，可免疫特异性结合于CD2多肽的可溶性LFA-3肽和多肽。在优选的实施方案，此标记氨基酸序列是一个6-组氨酸肽，例如pQE载体(QIAGEN公司，9259 Eton Avenue.Chatsworth.CA，91311)中提供的标记，其中许多标记都可以买到。如在Gentz等1989，美国国家科学院学报86：821-824中所述的，例如6-组氨酸可以对可溶性LFA-3多肽的纯化提供方便。对纯化有用的其它肽标记包括但不限于血凝素“HA”标记和“Flag”标记，HA标记相当于从流感血凝素蛋白得到的抗原表位(Wilson等，1984，细胞37：767)。
本发明还进一步包括偶联于治疗药剂的，可免疫特异性结合于CD2多肽的可溶性LFA-3肽和多肽。可免疫特异性结合于CD2多肽的可溶性LFA-3多肽可被偶联于治疗药剂部分，例如细胞毒素如细胞抑制剂或杀细胞剂，具有潜在治疗效果的药剂，或者放射活性金属离子如α-放射体。细胞毒素或细胞毒性剂包括对细胞有害的任何一种药剂。细胞毒素或细胞毒性剂包括对细胞有害的任何一种药剂。细胞毒素或细胞毒性剂的例子包括但不限于：紫杉醇，细胞松驰素B，短杆菌肽D，溴乙啡啶，吐根素，丝裂霉素，依托泊苷，替诺泊苷，长春新碱，长春碱，秋水仙素，防霉素，道诺霉素，二羟炭疽菌素土卫四，米托蒽醌，光神霉素，放射菌素D，1-去氢睾丸酮，糖皮质激素，普鲁卡因，丁卡因，利多卡因，心得安和嘌呤霉素，以及它们的类似物或同源物。具有潜在治疗效果的药剂包括但不限于抗代谢物(如氨甲蝶呤，6-巯基嘌呤，6-硫鸟嘌呤，阿糖胞苷，5-氟尿嘧啶)，烷基化剂(如二氯甲基二乙胺，噻替派瘤可宁，美清仑，卡氮芥(BSNU)和环己亚硝脲(CCNU)，环磷酰胺，白消安，二溴甘露醇，链脲霉素，丝裂霉素C和顺式二氯肼铂(II)(DDP)顺氯氨钠)，蒽霉素(如柔红霉素C，以前称道诺霉素和阿霉素)，抗菌素(如更生霉素(以前称放射菌素)，博来霉素，光神霉素，和氨四霉素(AMC)，以及抗有丝分裂剂(如长春新碱和长春碱)。
并且，还可使可免疫特异性结合于CD2多肽的可溶性LFA-3多肽偶联于可改变某一特定生物应答的治疗剂或药物。具有潜在治疗效果的药剂或药物不要被理解为局限于经典的化学治疗剂。例如药物部分可以是具有所希望生物活性的蛋白质或多肽。这种蛋白质可包括例如毒素如相思豆毒素，蓖麻毒素A，假单胞菌外毒素或白喉菌毒素，蛋白质如肿瘤坏死因子，IFN-α，IFN-β，神经生长因子(NGF)，血小板产生的生长因子(PDGF)，组织血浆酶原激活剂(TPA)，凋亡剂如TNF-α，TNF-β，AIM I(见国际专利公报No.WO 97/33899)，AIM II(见国际专利公报No.WO 97/34911)，Fas配体(Takahashi等，1994免疫学杂志6：1567-1574)，以及VEGF(见国际专利公报No.WO99/23105)，抗血栓形成剂或抗血管生成剂如angiostatin或endostatin，或者生物应答修饰剂例如淋巴因子(如IL-1，IL-2，IL-6，IL-10，GM-CSF和G-CSF)，或者生长因子(如GH)。
5.2.3.3可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白
本发明提供了几种可免疫特异性结合于CD2多肽，并调节淋巴细胞，优选地是外周血T-细胞的活性或功能的融合蛋白，用于防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状。优选地，这种融合蛋白可直接或间接地介导淋巴细胞，特别是外周血T-细胞的消耗。特别是，本发明提供了几种由免疫细胞如T-细胞或NK细胞表达的，可免疫特异性结合于CD2多肽，并介导淋巴细胞，特别是外周血T-细胞消耗的融合蛋白。
在特定的实施方案，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白抑制或减少CD2多肽与LFA-3之间的相互作用达到大约25％，30％。35％，45％，50％，55％，60％，65％，70％，75％，80％，85％，90％，95％或98％。在另一实施方案，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白不抑制CD2多肽与LFA-3之间的相互作用。在另一实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白抑制CD2多肽与LFA-3之间的相互作用达到小于20％，小于15％，小于10％，或小于5％。
在另一实施方案，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白不诱导或减少细胞因子的表达和/或释放。在特定的实施方案可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白不引起给予CD2结合分子的患者血清中如下细胞因子浓度增加：例如IFN-γ，IL-2，IL-4，IL-6，IL-9，IL-12和IL-15。在另一实施方案，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白可诱导细胞因子表达和/或释放。在特定的实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白可引起给予CD2结合分子的患者血清中如下细胞因子的浓度增加：例如IFN-γ，IL-2，IL-4，IL-6，IL-7，IL-9，IL-10和TNF-α。借助于本领域技术人员熟知的任何一种技术如ELISA可检测细胞因子的血清浓度。
在另一实施方案，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白可诱发T-细胞无反应性。在另外的实施方案，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白不诱发T-细胞无反应性。在另一实施方案，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白诱发无抗原特异性应答或应答低下状态，持续至少30分钟，至少1小时，至少2小时，至少6小时，至少12小时，至少24小时，至少2天，至少5天，至少7天，至少10天或更长的时间。
在特定的实施方案，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白，通过抑制T-细胞增殖达到至少25％，至少30％，至少35，至少40％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少98％而介导外周血T-细胞的消耗。在优选的实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白通过诱发T-细胞的细胞溶解来介导外周血T-细胞的消耗。在另一优选实施方案，本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白通过抑制T-细胞增殖达到至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少98％，并且通过诱发外周血T-细胞细胞溶解而介导外周血T-细胞的消耗。
在另一实施方案，在本发明所述的或本领域技术人员熟知的体内或体外检测中，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白抑制T-细胞激活达到至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少98％，并抑制T-细胞增殖达到至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少98％。
在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白可结合于由免疫细胞如NK细胞，单核细胞和巨噬细胞表达的FCR。在优选的实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白可结合于由免疫细胞如NK细胞，单核细胞和巨噬细胞表达的FcrRIII。
在一个实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白包含融合于免疫球蛋白Fc功能区或其片段的生物活性分子。在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白包含融合于免疫球蛋白Fc功能区的CH2和/或CH3区的生物活性分子。在还有另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白，包含融合于免疫球蛋白Fc功能区的CH2，CH3和铰链区的生物活性分子。按照这些实施方案，该生物活性分子可免疫特异性地结合于CD2多肽。可免疫特异性结合于CD2多肽的生物活性分子包括但不限于肽、多肽、小分子、模拟药剂、合成药物、无机分子和有机分子，优选地，可免疫特异性结合于CD2多肽的生物活性分子是一种多肽，此多肽包含至少5个相邻的氨基酸残基，优选地是至少10个，至少20个，至少30个，至少40个，至少50个，至少60个，至少70个，至少80个，至少90个，或至少100个相邻的氨基酸残基，并且不同于免疫球蛋白分子或其片段的Fc功能区氨基酸序列。
在特定的实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白，包含融合于免疫球蛋白分子或其片段的Fc功能区的，可免疫特异性结合于CD2多肽的LFA-3或其片段。在另一实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白，包含融合于免疫球蛋白分子Fc功能区的CH2和/或CH3区的，可免疫特异性结合于CD2多肽的LFA-3或其片段。在另一实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白，包含融合于免疫球蛋白分子Fc功能区的CH2，CH3和铰链区的，可免疫特异性结合于CD2多肽的LFA-3或其片段。
在另一实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白，包含融合于免疫球蛋白分子或其片段Fc功能区的LFA-3的细胞外功能区片段(例如SEQ ID NO：17的氨基酸残基1-187)。在另一实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白，包含融合于免疫球蛋白分子Fc功能区的CH2和/或CH3区的LFA-3的细胞外功能区片段(例如SEQ ID NO：17的氨基酸残基1-187)。在另一实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白，包含融合于免疫球蛋白分子Fc功能区的CH2，CH3和铰链区的LFA-3的细胞外功能区片段(例如SEQ ID NO：17的氨基酸残基1-187)。
在另一实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白，包含融合于免疫球蛋白或其片段Fc功能区的LFA-3的细胞外功能区片段(例如SEQ ID NO：17的氨基酸残基1-92，氨基酸残基1-85，氨基酸残基1-80，氨基酸残基1-75，氨基酸残基1-70，氨基酸残基1-65，或氨基酸残基1-60)。在另一实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白，包含融合于免疫球蛋白Fc功能区的CH2和/或CH3区的LFA-3的细胞外功能区片段(例如SEQ ID NO：17的氨基酸残基1-92，氨基酸残基1-85，氨基酸残基1-80，氨基酸残基1-75，氨基酸残基1-70，氨基酸残基1-65，或氨基酸残基1-60)。在另一实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白，包含融合于免疫球蛋白分子Fc功能区的CH2，CH3和铰链区的LFA-3的细胞外功能区片段(例如SEQ ID NO：17的氨基酸残基1-92，氨基酸残基1-85，氨基酸残基1-80，氨基酸残基1-75，氨基酸残基1-70，氨基酸残基1-65或氨基酸残基1-60)。
在特定的实施方案，CD2结合分子是LFA-3TIP(Biogen公司，Cambridge.MA.)，在另一实施方案，CD2结合分子不是LFA-3TIP。
在另一实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白包含一个多肽，此多肽具有的氨基酸序列与融合于免疫球蛋白分子或其片段Fc功能区的LFA-3或其片段的氨基酸序列，至少35％。至少40％，45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少99％等同。在另一实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白包含一个多肽，此多肽具有的氨基酸序列与融合于免疫球蛋白分子Fc功能区的CH2和/或CH3区的LFA-3或其片段的氨基酸序列，至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少99％等同。在另一实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白包含一个多肽，此多肽具有的氨基酸序列与融合于免疫球蛋白分子Fc功能区的CH2，CH3和铰链区的LFA-3或其片段的氨基酸序列，至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少99％等同。
在另一实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白包含一个多肽，此多肽具有的氨基酸序列与融合于免疫球蛋白或其片段Fc功能区的LFA-3的细胞外功能区氨基酸序列(例如SEQ ID NO：17的氨基酸残基1-187)，至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少99％等同。在另一实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白包含一个多肽，此多肽具有的氨基酸序列与融合于免疫球蛋白分子Fc功能区的CH2和/或CH3区的LFA-3的细胞外功能区氨基酸序列(例如SEQ ID NO：17的氨基酸残基1-187)，至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少99％等同。在另一实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白包含一个多肽，此多肽具有的氨基酸序列与融合于免疫球蛋白分子Fc功能区的CH2，CH3和铰链区的LFA-3的细胞外功能区氨基酸序列(例如SEQ IDNO：17的氨基酸残基1-187)，至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少99％等同。
在另一实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白包含一个多肽，此多肽具有的氨基酸序列与融合于免疫球蛋白分子或其片段Fc功能区的LFA-3的细胞外功能区片段的氨基酸序列(例如SEQ IDNO：17的氨基酸残基1-92，氨基酸残基1-85，氨基酸残基1-80，氨基酸残基1-75，氨基酸残基1-70，氨基酸残基1-65，或氨基酸残基1-60)，至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少99％等同。
在另一实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白包含一个多肽，此多肽具有的氨基酸序列与融合于免疫球蛋白分子Fc功能区的CH2和/或CH3区的LFA-3的细胞外功能区片段的氨基酸序列(例如SEQ ID NO：17的氨基酸残基1-92，氨基酸残基1-85，氨基酸残基1-80，氨基酸残基1-75，氨基酸残基1-70，氨基酸残基1-65，或氨基酸残基1-60)，至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少99％等同。
在另一实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白包含一个多肽，此多肽具有的氨基酸序列与融合于免疫球蛋白分子Fc功能区的CH2，CH3和铰链区的LFA-3的细胞外功能区片段的氨基酸序列(例如SEQ ID NO：17的氨基酸残基1-92，氨基酸残基1-85，氨基酸残基1-80，氨基酸残基1-75，氨基酸残基1-70，氨基酸残基1-65或氨基酸残基1-60)，至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少99％等同。
本发明提供了几种可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白，它包含融合于一个多肽的免疫球蛋白分子或其片段的Fc功能区，此多肽是由可同编码LFA-3或其片段的核苷酸序列杂交的核酸分子编码的。
在特定的实施方案，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白包含融合于一个多肽的免疫球蛋白分子或其片段的Fc功能区，此多肽是由可同编码LFA-3或其片段的核苷酸序列杂交的核酸分子编码的，杂交是在严格条件下进行，例如在大约45℃在6×氯化钠/柠檬酸钠(SSC)中同滤纸固定的DNA杂交，随后在大约50-65℃在0.2×SSC/0.1％ SDS中漂洗一次或几次，杂交还可在高度严格条件下进行，例如在大约45℃在6×SSC中同滤纸固定的核酸杂交，随后在大约68℃在0.1×SSC/0.2％ SDS中漂洗一次或几次，或者杂交是在本领域技术人员已知的其它严格杂交条件下进行(见例如Ausubel.F.M等编辑，1989“分子生物学的当前策略“，卷1，Green Publishing  Associates公司和John Wiley & Sons公司，NY.p6.3.1-6.3.6和2.10.3)。
在另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白包含融合于一个多肽的免疫球蛋白分子或其片段的Fc功能区，此多肽是由可同编码LFA-3的细胞外功能区(例如SEQ ID NO：17的氨基酸残基1-187)的核苷酸序列杂交的核酸分子编码的，杂交是在严格条件下进行，例如在大约45℃在6×氯化钠/柠檬酸钠(SSC)中同滤纸固定的DNA杂交，随后在大约50-65℃在0.2×SSC/0.1％ SDS中漂洗一次或几次，杂交还可在高度严格条件下进行，例如在大约45℃在6×SSC中同滤纸固定的核酸杂交，随后在大约68℃在0.1×SSC/0.2％SDS中漂洗一次或几次，或者杂交是在本领域技术人员已知的其它严格杂交条件下进行(见例如Ausubel.F.M等编辑，1989“分子生物学的当前策略“，卷1，Green Publishing Associates公司和John Wiley& Sons公司，NY.p6.3.1-6.3.6和2.10.3)。
在还有另一实施方案中，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白包含融合于一个多肽的免疫球蛋白分子或其片段的Fc功能区，此多肽是由可同编码LFA-3的细胞外功能区片段的氨基酸序列(例如SEQID NO：17的氨基酸残基1-92，氨基酸残基1-85，氨基酸残基1-80，氨基酸残基1-75，氨基酸残基1-70，氨基酸残基1-65或氨基酸残基1-60)的核苷酸序列杂交的核酸分子编码的，杂交是在严格条件下进行，例如在大约45℃在6×氯化钠/柠檬酸钠(SSC)中同滤纸固定的DNA杂交，随后在大约50-65℃在0.2×SSC/0.1％ SDS中漂洗一次或几次，杂交还可在高度严格条件下进行，例如在大约45℃在6×SSC中同滤纸固定的核酸杂交，随后在大约68℃在0.1×SSC/0.2％ SDS中漂洗一次或几次，或者杂交是在本领域技术人员已知的其它严格杂交条件下进行(见例如Ausubel.F.M等编辑，1989“分子生物学的当前策略“，卷1，Green Publishing Associates公司和John Wiley & Sons公司，NY.p6.3.1-6.3.6和2.10.3)。
5.2.3.3.1融合蛋白偶联物
本发明还包括为便于纯化而融合于标记序列如一种肽的，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白。在优选的实施方案，此标记氨基酸序列是一个6-组氨酸肽，例如在pQE载体(QIAGEN.公司，9259 EtonAvenue.Chatsworth.CA.91311)中提供的标记，其中许多标记都可买到。如在Gentz等1989，美国国家科学院学报86：821-824中所述的，例如6-组氨酸可以对融合蛋白的纯化提供方便。对纯化有用的其它肽标记包括但不限于血凝素“HA”标记和“Flag”标记，此“HA”标记相当于从流感血凝素蛋白得到的抗原表位(Wilson等1984细胞37：767)。
本发明还进一步包括偶联于治疗药剂的，可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白。可免疫特异性结合于CD2多肽的融合蛋白可被偶联于治疗药剂部分，例如细胞毒素如细胞抑制剂或杀细胞剂，具有潜在治疗效果的药剂，或者放射活性金属离子如α-放射体。细胞毒素或细胞毒性剂包括对细胞有害的任何一种药剂。细胞毒素或细胞毒性剂的例子包括但不限于：紫杉醇，细胞松驰素B，短杆菌肽D，溴乙啡啶，吐根素，丝裂霉素，依托泊苷，替诺泊苷，长春新碱，长春碱，秋水仙素，防霉素，道诺霉素，二羟炭疽菌素土卫四，米托蒽醌，光神霉素，放射菌素D，1-去氢睾丸酮，糖皮质激素，普鲁卡因，丁卡因，利多卡因，心得安和嘌呤霉素，以及它们的类似物或同源物。具有潜在治疗效果的药剂包括但不限于抗代谢物(如氨甲蝶呤，6-巯基嘌呤，6-硫鸟嘌呤，阿糖胞苷，5-氟尿嘧啶)，烷基化剂(如二氯甲基二乙胺，噻替派瘤可宁，美清仑，卡氮芥(BSNU)和环己亚硝脲(CCNU)，环磷酰胺，白消安，二溴甘露醇，链脲霉素，丝裂霉素C和顺式二氯肼铂(II)(DDP)顺氯氨钠)，蒽霉素(如柔红霉素C，以前称道诺霉素和阿霉素)，抗菌素(如更生霉素(以前称放射菌素)，博来霉素，光神霉素，和氨四霉素(AMC)，以及抗有丝分裂剂(如长春新碱和长春碱)。
并且，还可使可免疫特异性结合于CD2多肽的融合抗体偶联于可改变某一特定生物应答的治疗剂或药物。具有潜在治疗效果的药剂或药物不要被理解为局限于经典的化学治疗剂。例如药物部分可以是具有所希望生物活性的蛋白质或多肽。这种蛋白质可包括例如毒素如相思豆毒素，蓖麻毒素A，假单胞菌外毒素或白喉菌毒素，蛋白质如肿瘤坏死因子，IFN-α，IFN-β，神经生长因子(NGF)，血小板产生的生长因子(PDGF)，组织血浆酶原激活剂(TPA)，凋亡剂如TNF-α，TNF-β，AIM I(见国际专利公报No.WO 97/33899)，AIM II(见国际专利公报No.WO 97/34911)，Fas配体(Takahashi等，1994免疫学杂志6：1567-1574)，以及VEGF(见国际专利公报No.WO99/23105)，抗血栓形成剂或抗血管生成剂如angiostatin或endostatin，或者生物应答修饰剂例如淋巴因子(如IL-1，IL-2，IL-6，IL-10，GM-CSF和G-CSF)，或者生长因子(如GH)。
5.2.4抗血管生成剂
本领域技术人员熟知的任何一种抗血管生成剂(anti-angiogenicagent)都可被用于本发明的组合物和方法。其非限制性例子包括可减少、抑制或中和血管生成的蛋白质，多肽，肽，融合蛋白，抗体(如人的，人源化的，嵌合的，单克隆，多克隆抗体，Fvs，ScFvs，Fab片段，F(ab)2片段，以及其抗原结合片段)例如可免疫特异性结合于TNF-α的抗体，还有核酸分子(如反义分子或三重螺旋)，有机分子，无机分子和小分子。特别是，抗血管生成剂的例子包括但不限于：endostatin，angiostatin，apomigren，抗血管生成抗凝血酶III，纤连蛋白的29KDa N-末端和40KDa C-末端蛋白水解片段，uPA受体拮抗剂，催乳激素的16KDa蛋白水解片段，血小板因子-4的7.8KDa蛋白水解片段，血小板因子-4的抗血管生成24氨基酸片段，被标定为13.40的抗血管生成因子，血小板反应蛋白I的抗血管生成22氨基酸肽片段，包含SPARC，RGD和NGR的肽中的抗血管生成20氨基酸肽片段，昆布氨酸，纤连蛋白，前胶原和EGF的抗血管生成小肽，整合蛋白αvβ3拮抗剂(如抗-整合蛋白αvβ3抗体)，酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)拮抗剂，碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)拮抗剂，血管内皮细胞生长因子(VEGF)拮抗剂，以及VEGF受体(VEGFR)拮抗剂(如抗VEGFR抗体)。
在本发明特定的实施方案，其抗血管生成剂是endostatin。天然存在的endostatin由胶原XVIII的C-末端大约180个氨基酸组成(编码胶原XVIII的二个剪接形式的cDNAs具有GenBank检索号AF 18081和AF 18082)。在本发明的另一实施方案，其抗血管生成剂是纤维蛋白溶酶原片段(在GenBank检索号NM_000301和A33096可找到纤维蛋白溶酶原的编码序列)。天然Angiostatin肽包括纤维蛋白溶酶原的四个Kringle功能区，Kringle 1-Kringle 4。已证明重组Kringle 1、2和3具有天然肽的抗血管生成特性，而Kringle 4不具有这种活性(Cao等1996，生物化学杂志271：29461-29467)。因此，该angiostatin肽包含选自Kringle 1，Kringle 2和Kringle 3的至少一个，优选地多于1个Kringle功能区。在特定的实施方案，其抗血管生成肽是人angiostatin分子的40KDa异构型，人angiostatin分子的42KDa异构型，人angiostatin分子的45KDa异构型，或者它们的组合。在另一实施方案，其抗血管生成剂是纤维蛋白溶酶原的Kringle 5功能区，与angiostatin相比它是更强的血管生成抑制剂(angiostatin包含Kringle功能区1-4)。在本发明的另一实施方案，其抗血管生成剂是抗凝血酶III。抗凝血酶III(在下文被称为抗凝血酶)包含将此蛋白质栓于血管壁的肝素结合功能区，以及与凝血酶相互作用的活性环部位。当使抗凝血酶结合于肝素时，此蛋白质发生形态改变，使其活性环可同凝血酶相互作用，导致通过凝血酶蛋白水解断开此环。这种蛋白水解断开事件将导致抗凝血酶的另一种形态改变，从而(i)改变凝血酶与抗凝血酶之间的相互作用界面，并且(ii)从肝素上释放此复合物(Carrell，1999，科学285：1861-1862，及其中的参考文献)。O″Reilly等(1999，科学285：1926-1928)已揭示，被断开的抗凝血酶具有强有力的抗血管生成活性。因此，在一个实施方案中，其抗血管生成剂是抗凝血酶的抗血管生成形式。在本发明的另一实施方案中，其抗血管生成剂是纤连蛋白的40KDa和/或29KDa蛋白水解片段。
在本发明的另一实施方案，其抗血管生成剂是尿激酶纤维蛋白溶酶原激活剂(uPA)受体拮抗剂。在一种实施方案中，其拮抗剂是uPA的优势阴性突变体(见例如Crowley等1993，美国国家科学院学报90：5021-5025)。在另一种实施方案中，其拮抗剂是一个肽拮抗剂或其融合蛋白(Goodson等1994，美国国家科学院学报91：7129-7133)。在还有另一实施方案中，其拮抗剂是优势阴性可溶的uPA受体(Min等，1996，癌研究56：2428-2433)。在本发明的另一实施方案，本发明的治疗分子是催乳激素或其生物活性片段的16KDa N-末端片段，它包含大约120个氨基酸(在GenBank检索号NM 000948可找到催乳激素的编码序列)。在本发明的另一实施方案，其抗血管生成剂是7.8KDa血小板因子-4片段。在本发明的另一实施方案中，本发明的治疗分子是相当于血小板因子-4的抗血管生成13氨基酸片段的小肽，被标定为13.40的抗血管生成因子，血小板反应蛋白I的抗血管生成22氨基酸肽片段，SPARC的抗血管生成20氨基酸肽片段，昆布氨酸，纤连蛋白，前胶原或EGF的抗血管生成小肽，或者是整合蛋白αvβ3或VEGF受体的小肽拮抗剂。在另一实施方案，此小肽包含RGD或NGR基元序列。在某些实施方案，其抗血管生成剂是TNF-α拮抗剂。在其它实施方案，其抗血管生成剂不是TNF-α拮抗剂。
5.2.5.TNF-α拮抗剂
本领域技术人员熟知的任何一种TNF-α拮抗剂都可以被用于本发明的组合物和方法。TNF-α拮抗剂的非限制性例子包括可阻断、减弱、抑制或中和TNF-α的功能、活性和/或表达的蛋白质，多肽，肽，融合蛋白，抗体(如人的，人源化的，嵌合的，单克隆，多克隆抗体，Fvs，ScFvs，Fab片段，F(ab)2片段，和它们的抗原结合片段)如可免疫特异性结合于TNF-α的抗体，核酸分子(如反义分子或三重螺旋)，有机分子，无机分子以及小分子。在不同的实施方案，TNF-α拮抗剂相对于对照如磷酸缓冲盐水(PBS)减弱TNF-α的功能、活性和/或表达达到至少10％，至少15％，至少20％，至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少99％。
可免疫特异性结合于TNF-α的抗体例子包括但不限于infliximab(REMICADETM；Centacor)，D2E7(Abbott Laboratories/Knoll制药公司，Mt.Olive.N.J.)，CDP571(也被称为HUMICADETM)和CDP-870(二者都是Celltech/Pharmacia制品，Slough.U.K.)，以及TN3-19.12(Williams等1994，美国国家科学院学报91：2762-2766，Thorbecke等1992，美国国家科学院学报89：7375-7379)。本发明还包括在如下美国专利中公开的，可免疫特异性结合于TNF-α的抗体在本发明组合物和方法中的用途：5,136,021；5,147,638；5,223,395；5,231,024；5,334,380；5,360,716；5,426,181；5,436,154；5,610,279；5,644,034；5,656,272；5,658,746；5,698,195；5,736,138；5,741,488；5,808,029；5,919,452；5,958,412；5,959,087；5,968,741；5,994,510；6,036,978；6,114,517以及6,171,787；在此它们都被整个引入作为参考。可溶性TNF-α受体的例子包括但不限于sTNF-R1(Amgen)，etanercept(ENBRELTM；Immunex)和它的大鼠同源物RENBRELTM，从TNFrI，TNFrII(Kohno等，1990，美国国家科学院学报87：8331-8335)和TNF-αInh(Seckinger等1990，美国国家科学院学报87：5188-5192)得到的TNF-α的可溶性抑制剂。
在一个实施方案中，用于本发明组合物和方法的TNF-α拮抗剂是可溶性TNF-α受体。在特定的实施方案，用于本发明组合物和方法的TNF-α拮抗剂是etanercept(ENBRELTM；Immunex)或者它的片段，衍生物或类似物。在另一实施方案，用于本发明组合物和方法的TNF-α拮抗剂是可免疫特异性结合于TNF-α的抗体。在特定的实施方案，用于本发明组合物和方法的TNF-α拮抗剂是infliximab(REMICADETM，Centacor)或者它的衍生物，类似物或抗原结合片段。
本发明涉及的其它TNF-α拮抗剂包括但不限于：IL-10，已知它阻断由干扰素-γ激活的巨噬细胞产生TNF-α(Oswald等1992；美国国家科学院学报89：8676-8680)，TNFR-IgG(Ashkenazi等1991，美国国家科学院学报88：10535-10539)，鼠产物TBP-1(Serono/Yeda)，疫苗Cyto TAb(Protherics)。反义分子104838(ISIS)，肽RDP-58(SangStat)，酞谷酰胺(Celgene)，CDC-801(Celgene)，DPC-333(Dupont)，VX-745(Vertex)，AGIX-4207(AtheroGenics)，ITF-2357(Italfarmaco)，NPI-13021-31(Nereus)，SCIO-469(Scios)，TACE靶标(Immunix/AHP)，CLX-120500(Calyx)，Thiazolopyrim(Dynavax)，金诺芬(醋硫葡金)(SmithKline Beecham制药公司)，阿的平(盐酸米帕林)，替尼达普(Enablex)，黑色素(大规模生物学公司)，以及抗-p38 MAPK药剂(Uriach制品)。
按照本发明的方法，可用编码具有TNF-α拮抗剂活性的蛋白质，多肽或肽的核酸分子，或者用具有TNF-α拮抗剂活性的蛋白质、多肽或肽对患有炎性疾病或自身免疫病的患者给药。进而，还可用编码具有TNF-α拮抗剂活性的蛋白质、多肽或肽的衍生物、类似物、片段或变异体的核酸，或者用具有TNF-α拮抗剂活性的蛋白质，多肽或肽的衍生物、类似物、片段或变异体对患有炎性疾病或自身免疫病的患者给药。优选地，这种衍生物、类似物、变异体和片段保留了其全长度野生型蛋白质、多肽或肽的TNF-α拮抗剂活性。
借助于本领域熟知的或在此所述的技术可以产生可被用作TNF-α拮抗剂的蛋白质，多肽或肽。还可以通过生物工程构建具有TNF-α拮抗剂活性的蛋白质，多肽或肽，这样，应用本领域熟知的或在此所述的技术可增加这种蛋白质、多肽或肽在体内的半衰期。优选地，是以可购买到的并已知起TNF-α拮抗剂作用的药剂用于本发明的组合物和方法。借助于本领域技术人员熟知的技术，可在体外和/或体内检测药剂的TNF-α拮抗剂活性。
5.2.6.抗炎药剂
抗炎药剂在治疗炎性疾病和自身免疫疾病中显示是成功的，并且是现在对这种病症的通常和标准的治疗法。本领域技术人员熟知的任何抗炎药剂都可被用于本发明的组合物和方法，抗炎药剂的非限制性例子包括非类固醇抗炎药物(NSAIDs)，类固醇抗炎药物，β-激动剂，抗胆碱能药剂以及甲基黄嘌呤。NSAIDs的例子包括但不限于：阿斯匹林，布洛芬，celecoxib(CELEBREXTM)，双氯酚酸钠(VOLTARENTM)，依托度酸(LODINETM)，非诺洛芬(NALFONTM)，消炎痛(INDOCINTM)，酮咯酸(TORADOLTM)，噁丙嗪(DAYPROTM)，萘丁美酮(RELAFENTM)，舒林酸(CLINORILTM)，托尔米丁(TOLECTINTM)，rofecoxib(VIOXXTM)，萘普生(甲氧萘丙酸)(ALEVETM，NAPROSYNTM)，酮洛芬(酮丙酸)(ACTRONTM)和萘普酮(RELAFENTM)。这种NSAIDs通过抑制环化加氧酶(如COX-1和/或COX-2)发挥功能。类固醇抗炎药的例子包括但不限于糖皮质激素，地塞米松(DECADROWTM)，可的松，氢化可的松，强的松(DELTASONETM)，脱氢皮质甾醇，去炎松，抑氮磺胺吡啶，以及eicosanoid如前列腺素、凝血噁烷和白三烯。
5.3.组合治疗法的预防和治疗用途
本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂以及一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂，该预防或治疗药剂是目前正用于防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状的，或者是已经用于这种治疗的或已知对这种治疗有效的药剂。5.2节中提供了一些预防或治疗药剂的非限制性例子，它们都可被用于与整合蛋白αvβ3拮抗剂组合，用于防止、治疗、控制或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状。
在特定的实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体或其片段。在优选的实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是人源化的单克隆MEDI-522(商品名为VITAXINTM)或其抗原结合片段。
可以按照本发明的方法防止、治疗或控制的自身免疫病症的例子包括但不限于：斑秃、强直性脊柱炎，抗磷脂综合征，自身免疫阿狄森病，肾上腺自身免疫疾病，自身免疫溶血性贫血，自身免疫性肝炎，自身免疫性卵巢炎和睾丸炎，自身免疫性血小板减少症，贝切特病，大疱性类天疱疮、心肌病，口炎性腹泻-皮炎、慢性疲劳免疫功能失调综合征(CFIDS)，慢性发炎脱髓鞘多发性神经病，丘-施综合征，疤痕性类天疱疮、CREST综合征，冷凝集素病，克罗恩氏病，盘状狼疮、特发混合型冷球蛋白血症，肌纤维痛-肌纤维炎，肾小球肾炎，格雷夫斯病，格-巴综合征，桥本氏甲状腺炎，特发性肺间质纤维化，特发性血小板减少紫癜(ITP)，IgA神经病，少年关节炎，口腔粘膜扁平苔癣，红斑狼疮，梅尼埃病，混合型结缔组织病，多发性硬化症，I型或免疫介导的糖尿病，重症肌无力，寻常性天疱疮、恶性贫血，结节性多动脉炎，多软骨炎，多腺体综合征，风湿性多肌痛，多发性肌炎和皮肌炎，原发性无r球蛋白血症，原发胆汁性肝硬化，牛皮癣，牛皮癣关节炎，雷诺病，莱特综合征，类风湿性关节炎，结节病，硬皮病，斯耶格伦综合征，僵体综合征，系统性红斑狼疮、红斑狼疮、多发性大动脉炎，颞动脉炎/巨细胞动脉炎，溃疡性结肠炎，眼色素层炎，脉管炎例如疱疹样皮炎性血管炎，白癜风和Wegener氏肉芽肿。按照本发明的方法可被防止、治疗或控制的炎性病症的例子包括但不限于：哮喘、脑炎、炎性肠病、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、过敏症、败血性休克、肺纤维化、未分化的脊柱关节病、未分化的骨关节病、关节炎、炎性骨溶解，以及由慢性病毒感染和细菌感染引起的慢性炎症。
本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂以及一种或几种免疫调节剂。优选地，免疫调节剂不能给予如下的患自身免疫疾病或炎性疾病的患者：它的绝对淋巴细胞计数小于500个细胞/mm3，小于550个细胞/mm3，小于600个细胞/mm3，小于650个细胞/mm3，小于700个细胞/mm3，小于750个细胞/mm3，小于800个细胞/mm3，小于850个细胞/mm3，或小于900个细胞/mm3。因此，在优选的实施方案，在对自身免疫疾病或炎性疾病的患者给予一种或几种剂量的一种或几种免疫调节剂之前，或者在给药之后，需借助于本领域技术人员熟知的技术，包括例如流式细胞仪或台盼兰计数法，对患者作绝对淋巴细胞计数测定。5.2节提供了可按照本发明的方法使用的免疫调节剂的非限制性例子。
在特定的实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种免疫调节剂。在另一实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种免疫调节剂，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体或其片段。在优选的实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种免疫调节剂，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是VITAXINTM或其抗原结合片段。在另一优选的实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM或其抗原结合片段，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种免疫调节剂。
在特定的实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的氨甲蝶呤或环孢多肽。在另一实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM，以及预防或治疗有效剂量的氨甲蝶呤或环孢多肽。在另一实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，预防或治疗有效剂量的氨甲蝶呤，以及预防或治疗有效剂量的环孢多肽。
本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种CD2结合分子(例如肽、多肽、蛋白质、抗体(MEDI-507)以及可免疫特异性结合于CD2多肽的，并直接或间接地介导外周血淋巴细胞消耗的融合蛋白)。优选地，CD2结合分子不能给予如下的患自身免疫疾病或炎性疾病的患小于600个细胞/mm3，小于650个细胞/mm3，小于700个细胞/mm3，小于750个细胞/mm3，小于800个细胞/mm3，小于850个细胞/mm3，或小于900个细胞/mm3。因此，在优选的实施方案，在对自身免疫疾病或炎性疾病患者给予一种或几种剂量的CD2结合分子之前或在给药之后，需借助于本领域技术人员熟知的技术包括例如流式细胞仪或台盼兰计数法，测定患者的绝对淋巴细胞计数。
在特定的实施方案，在对自身免疫疾病或炎性疾病的患者给予首剂一种或几种CD2结合分子之后，以及在随后的一次或几次给予一种或几种CD2结合分子之前，检测被CD2结合分子结合的CD2多肽的百分数。在另一实施方案，在对自身免疫疾病或炎性疾病的患者给予一种或几种CD2结合分子之后，定期地测定被CD2结合分子结合的CD2多肽的百分数(例如每周，每2周，每3周，每4周，每5周，每8周，或每12周测定一次)。优选地，如果被CD2结合分子结合的CD2多肽的百分数小于80％，优选地小于75％，小于70％，小于65％，小于50％，小于45％，小于40％，小于35％，小于30％，小于25％或小于20％，则可对自身免疫疾病或炎性疾病的患者给予随后剂量的一种或几种CD2结合分子。应用本领域技术人员熟知的或在此所述的技术可测定结合于CD2结合分子的CD2多肽的百分数。
在特定的实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种CD2结合分子。在另一实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种CD2结合分子，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体或其片段。在特定的实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种CD2结合分子，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是VITAXINTM或其抗原结合片段。在另一实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM或其抗原结合片段，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种CD2结合分子。
在另一实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种CD2结合分子，其中至少一种CD2结合分子是可溶性LFA-3多肽或LFA3TIP。在另一实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种免疫调节剂，其中至少一种CD2结合分子是可免疫特异性结合于CD2多肽的抗体或其片段。在优选的实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种免疫调节剂，其中至少一种CD2结合分子是MEDI-507或其抗原结合片段。
在另一实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种CD2结合分子，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体或其片段，并且其中至少一种CD2结合分子是可溶性LFA-3多肽或LFA3TIP。
在优选的实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种CD2结合分子，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是VITAXINTM或其抗原结合片段，并且其中至少一种CD2结合分子是MEDI-507或其抗原结合片段。在另一优选的实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM或其抗原结合片段，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种CD2结合分子，其中至少一种CD2结合分子是MEDI-507或其抗原结合片段。在还有另一优选实施方案中，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM或其抗原结合片段，以及预防或治疗有效剂量的MEDI-507或其抗原结合片段。
本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者炎性疾病或伴有炎症的自身免疫疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种TNF-α拮抗剂。5.2节提供了可按照本发明的方法使用的TNF-α拮抗剂的一些非限制性例子。
在特定的实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种TNF-α拮抗剂。在另一实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种TNF-α拮抗剂，其中至少一种整合蛋白αvβ3是可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体或其片段。
在优选的实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种TNF-α拮抗剂，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是VITAXINTM或其抗原结合片段。在另一优选的实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM或其抗原结合片段，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种TNF-α拮抗剂。
在另一实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种TNF-α拮抗剂，其中至少一种TNF-α拮抗剂是可溶性TNF-α受体如etanercept(ENBRELTM，Immunex)或其片段、衍生物或类似物，或者是可免疫特异性结合于TNF-α的抗体如infliximab(REMICADETM，Centacor)，或其衍生物、类似物或抗原结合片段。
在另一实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种TNF-α拮抗剂，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体或其片段，并且其中至少一种TNF-α拮抗剂是可溶性TNF-α受体如etanercept(ENBRELTM，Immunex)或其片段、衍生物或类似物，或者是可免疫特异性结合于TNF-α的抗体如infliximab(REMICADETM，Centacor)，或其衍生物、类似物或抗原结合片段。
在优选的实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种TNF-α拮抗剂，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是VITAXINTM或其抗原结合片段，并且其中至少一种TNF-α拮抗剂是可溶性TNF-α受体如etanercept(ENBRELTM，Immunex)或其片段、衍生物或类似物，或者是可免疫特异性结合于TNF-α的抗体如infliximab(REMICADETM，Centacor)，或其衍生物、类似物或抗原结合片段。
本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者炎性疾病或伴有炎症的自身免疫疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种抗炎药剂。5.2节提供了可按照本发明的方法使用的抗炎药剂的一些非限制性例子。
在特定的实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种抗炎药剂。在另一实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种抗炎药剂，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是可免疫特异性结合于整合蛋白αvβ3的抗体或其片段。
在优选的实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种抗炎药剂，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是VITAXINTM或其抗原结合片段。在另一优选的实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM或其抗原结合片段，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种抗炎药剂。
本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，一种或几种TNF-α拮抗剂，以及一种或几种免疫调节剂。在特定的实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM，预防或治疗有效剂量的可溶性TNF-α受体(例如entanercept)，以及预防或治疗有效剂量的氨甲蝶呤。在另一实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM，预防或治疗有效剂量的可免疫特异性结合于TNF-α的抗体(例如infliximab或其抗原结合片段)，以及预防或治疗有效剂量的氨甲蝶呤。
本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，一种或几种TNF-α拮抗剂，以及一种或几种CD2结合分子，在特定的实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM，预防或治疗有效剂量的可溶性TNF-α受体(例如entanercept)，以及预防或治疗有效剂量的MEDI-507或其抗原结合片段。在另一实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM，预防或治疗有效剂量的可免疫特异性结合于TNF-α的抗体(例如infliximab或其抗原结合片段)，以及预防或治疗有效剂量的MEDI-507或其抗原结合片段。
本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，一种或几种TNF-α拮抗剂，以及一种或几种抗炎药剂。在特定的实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM，预防或治疗有效剂量的可溶性TNF-α受体(例如entanercept)，以及预防或治疗有效剂量的类固醇或非类固醇抗炎药物。在另一实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM，预防或治疗有效剂量的可免疫特异性结合于TNF-α的抗体(例如infliximab或其抗原结合片段)，以及预防或治疗有效剂量的类固醇或非类固醇抗炎药物。
本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，一种或几种TNF-α拮抗剂，一种或几种免疫调节剂，以及一种或几种抗炎药剂。在特定的实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM，预防或治疗有效剂量的可溶性TNF-α受体(例如entanercept)，或可免疫特异性结合于TNF-α的抗体(例如infliximab或其抗原结合片段)，预防或治疗有效剂量的氨甲蝶呤，以及预防或治疗有效剂量的类固醇或非类固醇抗炎药物。在另一实施方案，本发明提供了一种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM，预防或治疗有效剂量的可溶性TNF-α受体(例如entanercept)，或可免疫特异性结合于TNF-α的抗体(例如infliximab或其抗原结合片段)，预防或治疗有效剂量的CD2结合分子(例如MEDI-507或其抗原结合片段)，以及预防或治疗有效剂量的类固醇或非类固醇抗炎药物。
本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂以及一种或几种编码不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的一种或几种预防或治疗剂的核酸分子。本发明还提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予编码一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂的一种或几种核酸分子，以及编码一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂的一种或几种核酸分子。本发明还进一步提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与患者自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，该方法包括对患者给予编码一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂的一种或几种核酸分子，以及编码一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂的一种或几种核酸分子。
本发明的方法对防止和治疗如下疾病特别有效：类风湿性关节炎，脊柱关节病(如牛皮癣关节炎，强直性脊柱炎，莱特综合征(a.k.a.活动性关节炎)，肠炎病相关的关节炎和未分化的脊柱关节病，牛皮癣，未分化的关节病，以及关节炎。还可将本发明的方法应用于防止、治疗、控制或缓解与如下病症有关的一种或几种症状：炎性骨溶解，以不正常骨重吸收为特征的其它异常，或者以骨丧失为特征的异常(如骨质疏松症)。
在优选的实施方案，本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与类风湿性关节炎、关节炎、牛皮癣关节炎或牛皮癣有关的一种或几种症状。在另一优选的实施方案，本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与牛皮癣或牛皮癣关节炎有关的一种或几种症状。在还有另一优选实施方案中，本发明提供了几种方法，用于防止、治疗、控制或缓解与类风湿性关节炎、牛皮癣关节炎或牛皮癣，以及少年慢性关节炎有关的骨质疏松症状。
本发明包括几种方法，用于治疗或缓解患者常规治疗法难以治疗的自身免疫疾病或炎性疾病的一种或几种症状。该方法包括对患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，或者包含一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂的药物组合物。本发明还包括几种方法，用于治疗或缓解患者以现有的单一药剂治疗法难以治疗的自身免疫疾病或炎性疾病的一种或几种症状，该方法包括对患者给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂。进而，本发明包括几种方法，用于治疗或缓解患者以现有的单一药剂治疗法难以治疗的自身免疫疾病或炎性疾病的一种或几种症状，该方法包括对患者给予包含一或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的药物组合物。
在特定的实施方案，本发明提供了几种方法用于治疗自身免疫疾病或炎性疾病，该方法包括对患者给予整合蛋白αvβ3拮抗剂和不同于αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂，此患者已经证明用其它的治疗法难以治疗而不再继续这些治疗了。在优选的实施方案，本发明提供了几种方法用于治疗类风湿性关节炎，关节炎，牛皮癣或牛皮癣关节炎，该方法包括对患者给予整合蛋白αvβ3拮抗剂和不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂，此患者已经证明用其它治疗法难以治疗而不再继续这些治疗了。
本发明提供了几种方法用于治疗自身免疫疾病或炎性疾病，该方法包括对正在用氨甲蝶呤的TNF-α拮抗剂治疗的患者给予整合蛋白αvβ3拮抗剂。其中的这些患者是患有持久、活动性疾病的患者(即难治的病人)，以及尽管用氨甲蝶呤和TNF-α拮抗剂治疗但仍有轻度活动性疾病的患者。本发明还提供了几种方法用于防止自身免疫疾病或炎性疾病的一种或几种症状复发，该方法包括对患者给予整合蛋白αvβ3拮抗剂，此患者已经在用氨甲蝶呤和TNF-α拮抗剂(如REMICADETM或ENBRELTM)治疗，并且已没有疾病活动性。
本发明提供了几种方法用于治疗自身免疫疾病或炎性疾病，该方法包括对正在服用氨甲蝶呤，而已不接受TNF-α拮抗剂治疗的患者给予整合蛋白αvβ3拮抗剂。其中的这些患者是没有疾病活动性的患者，有持久活动性疾病的患者，以及有轻度疾病活动性的患者。其中这些患者也是同时用其它预防和/或治疗药剂治疗，但没有用TNF-α拮抗剂治疗的患者。还有其中这些患者是正在用氨甲蝶呤单独治疗的患者。
本发明提供了几种治疗自身免疫疾病或炎性疾病的方法，该方法包括对正在用不同于氨甲蝶呤的预防或治疗药剂治疗的患者给予整合蛋白αvβ3拮抗剂。其中的这些患者是用TNF-α拮抗剂(例如REMICADETM或ENBRELTM)治疗的患者，以及没有用TNF-α拮抗剂但正用某些其它预防或治疗药剂治疗的患者。
本发明包括几种方法，用于对易患此类疾病的对象预防自身免疫疾病或炎性疾病，或者它们的一种或几种症状的发生，该方法包括对此对象给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂。在特定的实施方案，本发明提供了几种方法，用于对易患此类疾病的对象预防类风湿性关节炎，牛皮癣关节炎或牛皮癣，或者它们的一种或几种症状的发生，该方法包括对此对象给予一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂。
本发明包括几种方法，用于对易患此类疾病的对象预防自身免疫疾病或炎性疾病，或者它们的一种或几种症状的发生，该方法包括对此对象给予包含一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂的药物组合物。在特定的实施方案，本发明提供了几种方法，用于对易患此类疾病的对象预防类风湿性关节炎、牛皮癣关节炎或牛皮癣，或者它们的一种或几种症状的发生，该方法包括对此对象给予包含一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂和一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂的药物组合物。
5.4实施组合治疗的组合物和方法
本发明提供了几种组合物，用于治疗、预防和缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状。在特定的实施方案，该组合物包含一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂。在另一实施方案，该组合物包含编码一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂的一种或几种核酸分子。在另一实施方案，该组合物包含一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂以及一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂，该预防或治疗药剂是已知对防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状有效的，或者是已经用于或目前正在用于这种治疗的药剂。在另一实施方案，该组合物包含编码一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂的一种或几种核酸分子，以及一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂，该预防或治疗药剂是已知对防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状有效的，或者是已经用于或目前正在用于这种治疗的药剂。在另一实施方案，该组合物包含一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及编码一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂的一种或几种核酸分子，该预防或治疗药剂是已知对防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状有效的，或者已经用于或目前正在用于这种治疗的药剂。在还有另一实施方案，该组合物包含编码一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂的一种或几种核酸分子，以及编码一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂的一种或几种核酸分子，该预防或治疗药剂是已知对防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状有效的，或者是已经用于或目前正在用于这种治疗的药剂。
在特定的实施方案，该组合物包含一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及一种或几种免疫调节剂。在另一实施方案，该组合物包含VITA-XINTM以及一种或几种免疫调节剂。在另一实施方案，该组合物包含VITAXINTM和氨甲蝶呤。在另一实施方案，该组合物包含一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂以及一种或几种CD2拮抗剂。在另一实施方案，该组合物包含VITAXINTM和一种或几种CD2拮抗剂。在另一实施方案，该组合物包含一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂以及一种或几种CD2结合分子，在还有另一实施方案，该组合物包含VITAXINTM或其抗原结合片段，以及一种或几种CD2结合分子。在特定的实施方案，该组合物包含VITAXINTM或其抗原结合片段，以及MEDI-507或其抗原结合片段。
在特定的实施方案，该组合物包含一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂以及一种或几种抗血管生成剂。在另一实施方案，该组合物包含VITAXINTM或其抗原结合片段以及一种或几种抗血管生成剂。
在特定的实施方案，该组合物包含一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂以及一种或几种TNF-α拮抗剂。在另一实施方案，该组合物包含VITAXINTM或其抗原结合片段，以及一种或几种TNF-α拮抗剂。在优选的实施方案，该组合物包含VITAXINTM或其抗原结合片段，以及可溶性TNF-α受体(例如etanercept)或可免疫特异性结合于TNF-α的抗体。
在特定的实施方案，该组合物包含一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂以及一种或几种抗炎药剂。在另一实施方案，该组合物包含VITAXINTM或其抗原结合片段以及一种或几种抗炎药剂。在优选的实施方案，该组合物包含VITAXINTM或其抗原结合片段，以及类固醇或非类固醇抗炎药剂。
在一个实施方案，该组合物包含一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，一种或几种免疫调节剂，以及一种或几种TNF-α拮抗剂。在另一实施方案，该组合物包含一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，一种或几种CD2结合分子，以及一种或几种TNF-α拮抗剂。在另一实施方案，该组合物包含一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，一种或几种抗炎药剂，以及一种或几种TNF-α拮抗剂。按照这些实施方案，优选地至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是VITAXINTM或其抗原结合片段。
在优选的实施方案，本发明的组合物是一种药物组合物。这种组合物包含预防或治疗有效剂量的一种或几种预防或治疗药剂(例如整合蛋白αvβ3拮抗剂或者其它预防或治疗药剂)，以及药剂学允许的载体。在特定的实施方案，名词“药剂学允许的”意指是由联邦或州政府的管理机构核准，或者已列入美国药典或其它普遍认可的药典中，可用于动物，而更特别地是可用于人。名词“载体”指的是借助于它治疗药剂可以被给药的稀释剂，佐剂(例如完全和不完全的福氏佐剂)、赋形剂或媒介物。这种药剂载体可以是无菌液体，例如水和油，包括矿物油、动物、植物或合成来源的油，例如花生油、大豆油、矿物油和芝麻油等，当以静脉注射给予该药物组合物时，水是优选的载体，盐水溶液、葡萄糖水溶液和甘油溶液也可以被用作液体载体，特别是用作注射溶液。合适的药剂赋形剂包括淀粉，葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽、大米、面粉、白垩粉、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油、滑石粉、氯化钠、干脱脂牛奶、甘油、丙烯、乙二醇、水和乙醇等。如果需要该组合物还可以含有少量湿润剂或乳化剂，或者pH缓冲剂。这些组合物可以采取如下剂型：溶剂，混悬液、乳浊液、片剂、丸剂、胶囊剂、粉剂和缓释剂型等。口服剂型可以包含标准的载体如药品级的甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、纤维素、碳酸镁等。在Martin.E. W.的“Remington氏药剂学”中描述了适合的药剂学载体的例子。这种组合物将包含预防或治疗有效剂量的预防或治疗药剂，优选地是已纯化的形式，并与适量的载体在一起，以致提供适合于对病人给药的形式。剂型应该适合于给药方式。在优选的实施方案，该药物组合物是无菌的，并以适合于对患者给药的形式提供，患者优选地是动物，更优选地是哺乳动物，而最优选地是人。
在特定的实施方案，理想的可能是对需要治疗的局部区域给予本发明的药物组合物，通过如下非限制性途径可达到此目的：例如局部注入，注射，或者借助于植入，植入物可以是多孔或无孔材料或者是凝胶状材料，包括膜材料如Sialastic膜，或者纤维。优选地，当给予一种或几种预防或治疗药剂时，必须使用该预防或治疗药剂不会吸附于它的材料。
在另一实施方案，可以在一种媒介物内，特别是在脂质体内传送该组合物(见Lenger，科学249：1527-1533(1990)，Treat等，“在传染性疾病和癌症治疗中的脂质体”，Lopez-Berestein和Fidler(编辑)，Liss，NY.pp.353-365(1989)；Lopez-Berestein。同上，pp.317-327；一般应用见同上)。
在还有另一实施方案，还可以在被控制的释放系统或缓释系统中递送该组合物，在一个实施方案中，应用一种泵可达到控制释放或延缓释放的目的(见Langer，同上文；Sefton，1987，CRC Crit.Ref.Biomed.Eng.14：20；Buchwald等，1980，外科手术88：507；Saudek等，1989，N.Engl.J.Med.321：574)。在另一实施方案，使用聚合物材料可达到控制释放或延缓释放本发明的抗体或其片段的目的(见例如“控制释放的医学应用”，Langer和Wise(编辑)，CRC出版，Boca  Raton，Florida(1974)；被控制的药物生物有效度，药物制品设计和实施，Smolen和Ball(编辑)，Wiley，NY(1984)；Ranger和Peppas，1983，大分子科学述评及大分子化学杂志23：61；还见Levy等，科学.228：190；During等，1989，神经学年鉴25：351；Howard等，1989，神经外科杂志71：105)；美国专利No.5,679,377；5,916,597；5,912,015；5,989,463；5,128,326；PCT专利公报No.WO 99/15154，以及No.WO99/20253。用于缓释剂型的聚合物的例子包括但不限于：聚(甲基丙烯酸2-羟乙基酯)，聚(甲基丙烯酸甲酯)，聚(丙烯酸)，聚(乙烯-共-乙酸乙烯基酯)，聚(甲基丙烯酸酯)，聚乙交酯(PLG)，聚酸酐类，聚(N-乙烯吡咯烷酮)，聚(乙烯醇)，聚丙烯酰胺，聚(乙二醇)，聚丙交酯(PLA)，聚(丙交酯-共-乙交酯)(PLGA)，以及聚原酯。在优选的实施方案，用于缓释制剂中的聚合物是惰性的，不含可过滤出的杂质，贮存稳定，无菌，并可生物降解。在还有另一实施方案，可以将被控制的释放系统或缓释系统置于治疗靶标，即肺的附近，这样这需要全身给药剂量的一部分(见例如Goodson“控制释放在医学的应用”，同上，卷2，pp115-138(1984))。
在Langer的述评中论述了被控制的释放系统(1990，科学249：1527-1533)。可应用本领域技术人员已知的技术生产包含一种或几种本发明的抗体或其片段的缓释制剂。见例如美国专利No.4,526,938，PCT专利公报WO 91/05548，WO 96/20698，Ning等1996“使用缓释凝胶对人异源皮移植结肠癌的肿瘤内放射免疫治疗”，放射治疗与肿瘤学39：179-189：Song等，1995，“抗体介导的对准肺的长距离循环乳剂”、PDA制药科学的技术杂志50：372-397；Cleek等，1997，“bFGF抗体的可生物降解多聚物载体对心血管的应用”，Pro.Int′l.Symp.Control.Rel.Bioact.Mater.24：853-854，以及Lam等1997，“以微囊包裹的重组人源化单克隆抗体用于局部给药”，Proc.Int′l.Symp.Control.Rel.Bioact.Mater.24：759-760，在此均被整体引入作为参考。
在特定的实施方案，在本发明的组合物是编码一种或几种预防或治疗药剂的一种或几种核酸分子的情况下，可以通过如下方式将此核酸体内给药，以便促进它表达、编码预防或治疗药剂：通过将此核酸构建成适当的核酸表达载体的一部分，并以它给药，这样使它进入细胞内，例如通过使用反转录病毒载体(见美国专利No.4,980,286)，通过直接注射或应用微粒轰击技术(例如基因枪，Biolistic，Dupont)，或者以脂质或细胞表面受体或转染剂包裹，或者通过使它连接于类似盒状的肽而给药，已知此肽可进入细胞核(见例如Joliot等，1991，美国国家科学院学报88：1864-1868)，等等。另外，还可通过同源重组将核酸导入细胞内，并被编入宿主细胞的DNA内进行表达。
本发明的药物组合物被配制成与其预期的给药途径相一致。给药途径的例子包括但不限于非经肠道给药，例如静脉内给药，皮内给药，皮下给药，口腔给药(如口腔吸入)，鼻内给药，透皮(局部)给药，透粘膜给药，以及直肠给药。在特定的实施方案，该组合物按照常规程序被配制成适合于对人静脉内、皮下、肌内、口服、鼻内、或局部给药的药物组合物。在优选的实施方案，该药物组合物按照常规程序被配制用于对人皮下给药。一般情况下，用于静脉注射给药的组合物是无菌等渗的缓冲水溶液，必要时，该组合物还可以包含增溶剂和局部麻醉剂如利多卡因，以便减轻注射部位的疼痛。
如果本发明的组合物将被局部给药，该组合物可以被配制成如下形式：如软膏剂，乳膏剂，透皮贴剂，洗涤剂，凝胶剂，洗发剂，喷雾剂，气雾剂，溶液，乳剂，或者本领域技术人员熟知的其它形式。见例如“Remington氏制药学和药物剂型导论”第4版，Lea和Febiger、Philadelphia、PA(1985)，对于非喷雾的局部剂型，一般可采用含有载体或者一种或几种赋形剂的粘性液或半固体或固体形式，所含有的载体或赋形剂应适合于局部使用，并具有优选是大于水的动力学粘度。适合的剂型包括但不限于溶液、混悬液、乳剂、乳膏、软膏、粉剂、搽剂，和油膏等，如果需要可被灭菌或者掺入可影响各种特性如渗透压的辅助剂(例如防腐剂，稳定剂，湿润剂，缓冲剂或盐)。其它适合的局部剂型包括可喷雾的气雾制剂，其中的活性成分优选地是与固体或液体的惰性载体组合，与压缩的挥发性物质(例如气体推进剂如氟利昂)混合包装，或者包装在压缩瓶内。如果需要还可对药物组合物和剂型加入湿润剂。这些添加成分的例子是本领域熟知的。
如果本发明的组合物将被鼻内给药，可将该组合物配制成气雾剂，喷雾剂，雾或微滴剂型。特别是，使用适当的推进剂例如二氯二氟代甲烷，三氯氟代甲烷，二氯四氟代乙烷，二氧化碳或其它适合的气体，按照本发明使用的预防或治疗药剂可从压缩包内或雾化器中以气雾喷雾剂的形式方便地提供给药。在使用压缩气雾剂的情况下，通过提供定量分配阀门，可确定单位剂量。用于吸入剂或鼻吸剂中的例如明胶胶囊和弹射剂，可被配制含有该化合物和适当粉基质如乳糖或淀粉的粉剂混合物。
如果本发明的组合物将被口服给药，可将该组合物配制成口服剂型例如片剂，胶囊剂，扁囊剂，gelcaps，溶液和悬液等。借助于传统的方法，使用如下药剂学允许的赋形剂可以制备片剂和胶囊剂：例如粘合剂(如前明胶化的玉米淀粉，聚乙烯吡咯烷酮或羟丙基甲基纤维素)，填充剂(如乳糖，微晶纤维素或磷酸氢钙)，润滑剂(如硬脂酸镁，滑石粉或硅胶)，崩解剂(如马铃薯淀粉或羟乙酸淀粉钠)，或者湿润剂(如月桂基硫酸钠)。还可以借助于本领域熟知的方法给片剂包衣。用于口服给药的液体制剂可采取的剂型有例如溶液、糖浆剂或悬液剂，或者它们被提供为干制品，在使用前与水或其它适当的媒介物混合，借助于传统的方法，以如下药剂学允许的添加剂可制备这种液体制剂：悬浮剂(如山梨醇糖浆，纤维素衍生物或氢化的可食用脂)，乳化剂(如卵磷脂或阿拉伯胶)，非水赋形剂(如杏仁油，油酯，乙醇或分馏的植物油)，以及防腐剂(如甲基或丙基-对羟基苯甲酸盐或山梨酸)。这种制剂还可适当地含有缓冲盐，芳香剂，着色剂和甜味剂。用于口服的制剂可能适合配制成缓慢释放的，控制释放的或长效的预防或治疗药剂。
本发明的组合物可以被配制成通过注射如快速浓注或持续输注的非经肠道给药剂型。注射制剂可被提供为单位剂量的形式例如在安瓿中，或者多剂量的容器，并加入防腐剂。该组合物可以采取在油性或水性赋形剂中的悬液、溶液或乳液剂型，并可含有配制剂如悬浮剂，稳定剂和/或分散剂。按另一种方式，其活性成分可以是粉剂形式。使用前与适合的赋形剂如无菌无热原物质的水混合。
本发明的组合物还可以配制成直肠剂组合物，例如含有传统栓剂基质如可可缓冲剂或其它甘油酯的栓剂或滞留灌肠剂。
除了上述剂型之外，本发明的组合物还可配制成长效沉积制剂。可通过植入(例如皮下或肌植入)或通过肌肉注射给予这种长效作用制剂。因此，例如该组合物可用适合的多聚物或疏水材料配制(例如成为在适当油中的乳剂)，或者用离子交换树脂或少量可溶性衍生物如少量可溶性盐配制。
本发明的组合物可以被配制成中性或盐的形式。药剂学允许的盐包括与阴离子形成的盐，此阴离子包括例如从盐酸、磷酸、乙酸、草酸、酒石酸等获得的阴离子，以及还包括与阳离子形成的盐，此阳离子包括例如从钠、钾、铵、钙、氢氧化铁、异丙基胺、三乙基胺、2-乙氨基乙醇、组氨酸、普鲁卡因等获得的阳离子。
一般情况下，本发明组合物的成分可被分开提供，或者混合在一起以单位剂量的形式提供，例如制成冷冻干燥的粉末或无水浓缩物，被封装在密封的容器内，例如标明活性药剂含量的安瓿式小药囊。当本发明的组合物将通过输注给药时，可用装有无菌药品级的水或盐水的输注瓶配制它。当此组合物通过注射给药时，可提供用于注射的无菌水或盐水安瓿，这样可在注射给药之前将这些成分混合在一起。
特别是，本发明提供的一种或几种预防或治疗药剂，或者本发明的药物组合物，是被包装在密封的容器内，例如标有药剂含量的安瓿或小药囊内。在一个实施方案，本发明的一种或几种预防或治疗药剂，或者药物组合物是以冷冻干燥的无菌粉剂或者无水浓缩剂密封在容器内提供使用，例如可以用水或生理盐水重新配制成适当的浓度对患者给药。优选地，本发明的一种或几种预防或治疗药剂或者药物组合物，是以冷冻干燥的无菌粉剂提供使用，以至少5mg的单位剂量密封在容器内，更优选的是至少10mg，至少15mg，至少25mg，至少35mg，至少45mg，至少50mg，至少75mg，或至少100mg的单位剂量。冷冻的本发明预防或治疗药剂或者药物组合物应该在其原容器内贮存于2℃-8℃，并且，本发明的预防或治疗药剂或者药物组合物在被重新配制之后应该在1周内给药，优选地在5天内，在72小时内，在48小时之内，在24小时之内，在12小时之内，在6小时之内，在5小时之内，在3小时之内，或在1小时之内给药。在另一实施方案，本发明的一种或几种预防或治疗药剂或者药物组合物，是以液体的剂型提供使用，密封在标明药剂含量和浓度的容器内。优选地，该组合物的液体剂型是以至少0.25mg/ml的浓度密封在容器内提供使用，更优选的浓度是至少0.5mg/ml，至少1mg/ml，至少2.5mg/ml，至少5mg/ml，至少8mg/ml，至少10mg/ml，至少15mg/ml，至少25mg/ml，至少50mg/ml，至少75mg/ml，或至少100mg/ml。该液体剂型应该在其原容器内贮存于2℃-8℃。
在本发明的优选实施方案，REMICADETM是以无菌的冷冻粉剂提供使用，以10ml无菌注射用水重新配制，用于静脉内输注。每个一次性使用的REMICADETM药瓶内装有100mg infliximab，500mg蔗糖，0.5mg聚乙二醇80，2.2mg磷酸氢钠和6.1mg磷酸氢二钠。按照“医生办公桌参考手册”(第55版，2001)，重新配制的总给药量必须用0.9％氯化钠注射液(USP)进一步稀释至250ml，达到0.4mg/ml-4mg/ml的输注浓度范围。
在本发明的另一优选实施方案，ENBRELTM是以无菌，无防腐剂的冷冻粉剂提供使用，以所提供的1ml无菌注射用水USP(含有0.9％苯甲醇)重新配制后用于非经肠道给药。按照“医生办公桌参考手册”(第55版，2001)，每个一次性使用的ENBRELTM药瓶内装有25mgetanercept、40mg甘露醇、10mg蔗糖，以及1.2mg缓血酸胺。
在本发明的其它优选实施方案中，VITAXINTM被配制成1mg/ml，5mg/ml，10mg/ml，以及25mg/ml，用于静脉注射，被配制成5mg/ml，10mg/ml，80mg/ml，或100mg/ml，用于皮下注射重复给药。
在本发明的其它优选实施方案，氨甲蝶呤被配制成25mg/ml，并在药瓶内提供例如1ml，2ml和10ml供使用。用于注射给药的氨甲蝶呤包含分别与50mg和250mg氨甲蝶呤等价的氨甲蝾呤钠，并含有0.9％w/v苯甲醇作防腐剂，以及0.26％w/v氯化钠和注射用水。使用含有苯甲醇的防腐剂配方，氨甲蝶呤可通过肌内、静脉内和动脉内注射给药。使用无防腐剂配方的氨甲蝶呤可通过鞘内途径给药。在本发明的其它实施方案，氨甲蝶呤是以含有2.5mg氨甲蝶呤钠单位剂量的片剂被提供使用。
在还有其它的优选实施方案中，本发明提供的MEDI-507是被包装在密封的容器内，例如标有MEDI-507含量的安瓿或小药囊内。在另一实施方案，MEDI-507是冷冻干燥的无菌粉剂或者无水浓缩剂密封在容器内提供使用，例如可以用水或生理盐水重新配制成适当的浓度对患者给药。优选地，MEDI-507是以冷冻干燥的无菌粉剂提供使用，以至少5mg的单位剂量密封在容器内，更优选的是至少10mg，至少15mg，至少25mg，至少35mg，至少45mg，至少50mg，至少75mg，或至少100mg的单位剂量。在另一实施方案中，MEDI-507是以液体剂型被提供使用，密封在标有MEDI-507的含量和浓度的容器内。优选地，MEDI-507的液体剂型是以至少0.25mg/ml的浓度密封在容器内提供使用，更优选的浓度是至少0.5mg/ml，至少1mg/ml，至少2.5mg/ml，至少5mg/ml，至少8mg/ml，至少10mg/ml，至少15mg/ml，至少25mg/ml，至少50mg/ml，至少75mg/ml，或至少100mg/ml。
如果要求本组合物可被提供在药包或调剂装置内，其中可能包含一个或几个单位剂量形式的活性成分。例如这种药包可包括金属或塑料薄膜，如发泡剂药包。这种药包或调剂装置还可以伴随包括用药说明书。在某些优选的实施方案，这种药包或调剂装置包含一个或几个单位剂量形式，含有不多于25mg ENBREL，2.5mg氨甲蝶呤，100mgREMICADETM和5mg/ml的VITAXINTM。
一般来说，本发明组合物的成分是来自与这种组合物的接受者相同种来源的，或者相同种反应性的对象。因此，在优选的实施方案，是以人抗体或人源化的抗体用于对病人治疗或预防给药。
借助于标准的临床技术，可以确定对治疗、防止或缓解与炎性疾病或自身免疫疾病有关的一种或几种症状有效的本发明组合物的剂量。用于此配方中的精确剂量还将取决于给药途径、和病情的严重程度，并且应该根据主管医生的判断和每个病人的情况来决定。还可以根据从体外或动物模型试验系统得到的剂量-反应曲线推断出有效剂量。
对于本发明包括的抗体，蛋白质，多肽，肽和融合蛋白，对病人的给药剂量通常是按病人的体重0.0001mg/kg-100mg/kg。优选地，对病人的给药剂量是按病人的体重0.0001mg/kg-20mg/kg，0.0001mg/kg-10mg/kg，0.0001mg/kg-5mg/kg，0.0001mg/kg-2mg/kg，0.0001mg/kg-1mg/kg，0.0001mg/kg-0.75mg/kg，0.0001mg/kg-0.5mg/kg，0.0001mg/kg-0.25mg/kg，0.0001mg/kg-0.15mg/kg，0.0001mg/kg-0.10mg/kg，0.001mg/kg-0.5mg/kg，0.01mg/kg-0.25mg/kg，或0.01mg/kg-0.10mg/kg。由于对外源多肽的免疫应答反应，与其它动物种来源的抗体相比较，人抗体在人体内通常具有较长的半衰期。因此，用较低剂量的人抗体和较少的给药次数常常是可能的。进而，通过修饰例如脂化提高对抗体的吸水和组织渗透，也可以降低本发明抗体或其片段的给药剂量和次数。
在特定的实施方案，为了防止、治疗或缓解与病人自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，所给予的本发明组合物或者预防或治疗药剂的剂量，是按病人体重150μg/kg或更少，优选地是125μg/kg或更少，100μg/kg或更少，95μg/kg或更少，90μg/kg或更少，85μg/kg或更少，80μg/kg或更少，75μg/kg或更少，70μg/kg或更少，65μg/kg或更少，60μg/kg或更少，55μg/kg或更少，50μg/kg或更少，45μg/kg或更少，40μg/kg或更少，35μg/kg或更少，30μg/kg或更少，25μg/kg或更少，20μg/kg或更少，15μg/kg或更少，10μg/kg或更少，5μg/kg或更少，2.5μg/kg或更少，2μg/kg或更少，1.5μg/kg或更少，1μg/kg或更少，0.5μg/kg或更少。在另一实施方案，为了防止、治疗或缓解与病人自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，所给予的本发明组合物或者预防或治疗药剂的剂量是如下的单位剂量：0.1mg-20mg，0.1mg-15mg，0.1mg-12mg，0.1mg-10mg，0.1mg-8mg，0.1mg-7mg，0.1mg-5mg，0.1mg-2.5mg，0.25mg-20mg，0.25mg-15mg，0.25mg-12mg，0.25mg-10mg，0.25mg-8mg，0.25mg-7mg，0.25mg-5mg，0.5mg-2.5mg，1mg-20mg，1mg-15mg，1mg-12mg，1mg-10mg，1mg-8mg，1mg-7mg，1mg-5mg，或1mg-2.5mg。
在一个实施方案，推荐的ENBRELTM剂量是0.01-10mg/kg，优选的是0.1-10mg/kg，更优选的是0.1-5mg/kg，更加优选的是0.5-2mg/kg。在本发明的另一实施方案，推荐的ENBRELTM剂量是0.01-10mg/kg/周，更优选的是0.1-5mg/kg/周，更加优选的是0.5-2mg/kg/周。在最优选的实施方案，每周剂量不超过50mg/周。在优选的实施方案，ENBRELTM是通过皮下注射给药，每周2次。
在本发明的优选实施方案，ENBRELTM是以大约1mg-50mg的剂量给药，更优选的是大约10mg-40mg，最优选的是大约20mg-30mg。在某些实施方案中，是与每周给予如下剂量的ENBRELTM配合地给予整合蛋白αvβ3拮抗剂：0.1mg-1mg，1mg-5mg，5mg-10mg，10mg-15mg，15mg-20mg，20mg-25mg，25mg-30mg，30mg-35mg，35mg-40mg，40mg-45mg，45mg-50mg，50mg-60mg，60mg-65mg，65mg-70mg，70mg-75mg，75mg-80mg，80mg-85mg，85mg-90mg，90mg-95mg，95mg-100mg，100mg-105mg，105mg-110mg，110mg-115mg，或115mg-120mg。优选地是每周二次皮下注射给予ENBRELTM。优选地是相隔72-96小时注射给药。在一个实施方案中，注射给药是相隔36-132小时，优选地是相隔48-114小时，更优选地是相隔72-96小时，更加优选地是相隔大约84小时。在优选的实施方案，当单独给药时，ENBRELTM的给药剂量小于通常的剂量。见“医生办公桌参考手册”(第55版，2001)。因此，在优选的实施方案，整合蛋白αvβ3拮抗剂的给药是与给予不多于25mg ENBRELTM相配合。在优选的实施方案，每次给予ENBRELTM的剂量小于25mg，小于20mg，小于15mg，小于10mg，或小于5mg。按照本发明的方法，ENBRELTM的给药剂量是1mg，1mg-5mg，5mg-10mg，10mg-15mg，15mg-20mg，20mg-25mg，或25mg，每周二次。优选地，该整合蛋白αvβ3拮抗剂是VITAXINTM。
在本发明的其它实施方案，是与抗-TNF-α抗体相配合给予整合蛋白αvβ3拮抗剂。优选地此抗-TNF-α抗体是infliximab(REMICADETM)。在本发明的实施方案中，推荐的REMICADETM给药剂量是0.1-10mg/kg，较优选的是1-7mg/kg，更优选的是2-6mg/kg，而最优选的是3-5mg/kg。在最优选的实施方案，该剂量不超过3mg/kg。在某些优选的实施方案，是通过静脉输注给予REMICADETM，随后在首次输注后2周和6周补充给药一次，然后每8周给药一次。
在本发明优选的实施方案，是以大约1mg-600mg的剂量给予REMICADETM，更优选地是大约100mg-500mg，而最优选地是大约200mg-400mg。在本发明的某些实施方案，是与给予下列剂量的REMICADETM配合给予整合蛋白αvβ3拮抗剂：1mg-10mg，10mg-50mg，50mg-100mg，100mg-150mg，150mg-200mg，200mg-250mg，250mg-300mg，300mg-350mg，350mg-400mg，400mg-450mg，450mg-500mg，550mg-600mg，600mg-650mg，650mg-700mg，700mg-750mg，750mg-800mg，800mg-850mg，850mg-900mg，900mg-950mg，或950mg-1000mg，并在首次给药之后2周和6周各给药一次，然后每8周后给药一次。在优选的实施方案，当被单独给药时，REMICADETM的给药剂量比通常的剂量小。见“医生的办公桌参考手册”(第55版，2001)。因此，在优选的实施方案，是通过静脉输注给予不多于600mg的REMICADETM，随后在首次输注后的2周和6周各补充给药一次，然后每8周后给药一次。在其它的实施方案，补充给药是在1-12周给予，优选地是在4-12周给予，更优选地在6-12周给予，更加优选地在8-12周给予。整合蛋白αvβ3拮抗剂优选地是VITAXINTM。
在本发明的某些实施方案，是与单独给予氨甲蝶呤相配合，或者与给予其它预防和/或治疗药剂相配合给予整合蛋白αvβ3拮抗剂。在某些实施方案，推荐的氨甲蝶呤剂量是0.01-3mg/kg，较优选地是0.1-2mg/kg，最优选地是0.5-1mg/kg。在某些优选的实施方案，推荐的氨甲蝶呤剂量是0.01-3mg/kg/周，较优选地是0.1-2mg/kg/周，而最优选地是0.5-1mg/kg/周。在最优选的实施方案，其一周剂量不超过20g/周。
在优选的实施方案，氨甲蝶呤的给药剂量是大约0.01mg-70mg，优选地是大约1mg-60mg，最优选地是大约10mg-60mg。氨甲蝶呤的给药剂量是0.5mg-1mg，1mg-1.5mg，1.5mg-2mg，2mg-2.5mg，2.5mg-3mg，3mg-3.5mg，3.5mg-4mg，4mg-4.5mg，4.5mg-5mg，5mg-5.5mg，5.5mg-6mg，6mg-6.5mg，6.5mg-7mg，7mg-7.5mg，7.5mg-8mg，8mg-8.5mg，8.5mg-9mg，9mg-9.5mg，9.5mg-10mg，10mg-10.5mg，10.5mg-11mg，11mg-12mg，12mg-13mg，13mg-14mg，14mg-15mg，15mg-20mg，20mg-25mg，25mg-30mg，30mg-35mg，35mg-40mg，40mg-45mg，45mg-50mg，50mg-60mg，60mg-70mg，70mg-80mg。在优选的实施方案，当单独给药时，氨甲蝶呤的给药剂量小于通常的剂量。见“医生的办公桌参考手册”(第55版，2001)。因此，在本发明的优选实施方案，整合蛋白αvβ3拮抗剂的给药是与给予氨甲蝶呤相配合，同时口服或肌肉注射不大于57mg的氨甲蝶呤，每周一次，或者不大于2.5mg，每12小时一次，每周3次。在本发明比较优选的实施方案中，整合蛋白αvβ3拮抗剂的给药是与给予氨甲蝶呤相配合，同时口服或肌肉注射每周不大于20mg的氨甲蝶呤。在本发明的某些实施方案，氨甲蝶呤的给药可相隔6-12小时，相隔12-18小时，相隔18-24小时，相隔24-36小时，相隔36-48小时，相隔48-52小时，相隔52-60小时，相隔60-72小时，相隔72-84小时，相隔84-96小时，或相隔96-120小时。在本发明最优选的实施方案，整合蛋白αvβ3拮抗剂的给药是与给予氨甲蝶呤相配合，同时口服给予不大于15-20mg氨甲蝶呤，每周一次。在另一实施方案，氨甲蝶呤的给药每周不多于一次，每2周不多于1次，每3周不多于一次，或每月不多于一次。
在某些实施方案，VITAXINTM对患者的给药剂量是0.1-10mg/kg，优选地是1-9mg/kg，较优选地是2-8mg/kg，更优选地是3-7mg/kg，而最优选地是4-6mg/kg。在其它的优选实施方案中，VITAXINTM对患者的给药剂量是0.1-10mg/kg/周，优选地是1-9mg/kg/周，较优选地是2-8mg/kg/周，更优选地是3-7mg/kg/周，而最优选地是4-6mg/kg/周。
在其它的实施方案中，为了防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，对患者给予一次或几次MEDI-507200μg/kg或更少，150μg/kg或更少，优选地是125μg/kg或更少，100μg/kg或更少，95μg/kg或更少，90μg/kg或更少，85μg/kg或更少，80μg/kg或更少，75μg/kg或更少，70μg/kg或更少，65μg/kg或更少，60μg/kg或更少，55μg/kg或更少，50μg/kg或更少，45μg/kg或更少，40μg/kg或更少，35μg/kg或更少，30μg/kg或更少，25μg/kg或更少，20μg/kg或更少，15μg/kg或更少，10μg/kg或更少，5μg/kg或更少，2.5μg/kg或更少，2μg/kg或更少，1.5μg/kg或更少，1μg/kg或更少，0.5μg/kg或更少或0.4μg/kg或更少。优选地这种剂量是对自身免疫疾病或炎性疾病的患者静脉内给药。
在特定的实施方案，为了防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，对患者给予一次或几次MEDI-507单位剂量0.1mg-20mg，0.1mg-15mg，0.1mg-12mg，0.1mg-10mg，0.1mg-8mg，0.1mg-7mg，0.1mg-5mg，0.1mg-2.5mg，0.25mg-20mg，0.25mg-15mg，0.25mg-12mg，0.25mg-10mg，0.25mg-8mg，0.25mg-7mg，0.25mg-5mg，0.25mg-2.5mg，1mg-20mg，1mg-15mg，1mg-12mg，1mg-10mg，1mg-8mg，1mg-7mg，1mg-5mg，或1mg-2.5mg。在另一实施方案，为了防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状，对患者给予一次或几次MEDI-507单位剂量0.1mg，0.25mg，0.5mg，1mg，1.5mg，2mg，3mg，4mg，5mg，6mg，7mg，8mg，9mg，10mg，11mg，12mg，13mg，14mg，15mg，或16mg。优选地是，对自身免疫疾病或炎性疾病的患者皮下注射给予单位剂量的MEDI-507。
在另一实施方案，对患者给予了一次或几次预防或治疗有效剂量的MEDI-507，其中每次给予的预防或治疗有效剂量都不相同。在另一实施方案，对患者，优选地是人，给予了一次或几次预防或治疗有效剂量的MEDI-507，其中随着治疗的进展，使对患者给予的预防或治疗有效剂量MEDI-507逐渐增加例如0.01μg/kg，0.02μg/kg，0.04μg/kg，0.05μg/kg，0.06μg/kg，0.08μg/kg，0.1μg/kg，0.2μg/kg，0.25μg/kg，0.5μg/kg，0.75μg/kg，1μg/kg，1.5μg/kg，2μg/kg，4μg/kg，5μg/kg，10μg/kg，15μg/kg，20μg/kg，25μg/kg，30μg/kg，35μg/kg，40μg/kg，45μg/kg，50μg/kg，55μg/kg，60μg/kg，65μg/kg，70μg/kg，75μg/kg，80μg/kg，85μg/kg，90μg/kg，95μg/kg，100μg/kg或125μg/kg。
在另一实施方案，对患者，优选地是人，给予了一次或几次预防或治疗有效剂量的MEDI-507，其中随着治疗的进展，使对患者给予的预防或治疗有效剂量MEDI-507逐渐增加例如0.01μg/kg，0.02μg/kg，0.04μg/kg，0.05μg/kg，0.06μg/kg，0.08μg/kg，0.1μg/kg，0.2μg/kg，0.25μg/kg，0.5μg/kg，0.75μg/kg，1μg/kg，1.5μg/kg，2μg/kg，4μg/kg，5μg/kg，10μg/kg，15μg/kg，20μg/kg，25μg/kg，30μg/kg，35μg/kg，40μg/kg，45μg/kg，50μg/kg，55μg/kg，60μg/kg，65μg/kg，70μg/kg，75μg/kg，80μg/kg，85μg/kg，90μg/kg，95μg/kg，100μg/kg或125μg/kg。
在还有另一实施方案，对患者给予了一次或几次预防或治疗有效剂量的一种或几种免疫调节剂，其中对患者给予的预防或治疗有效剂量的该调节剂，使该患者的平均绝对淋巴细胞计数达到大约500个细胞/mm3到低于1500个细胞/mm3，优选地低于1400个细胞/mm3，低于1300个细胞/mm3，低于1250个细胞/mm3，低于1200个细胞/mm3，低于1100个细胞/mm3，或低于1000个细胞/mm3。在另一实施方案，对患者给予了预防或治疗有效剂量的一种或几种CD2结合分子，其中对患者给予的该剂量使平均绝对淋巴细胞计数达到大约500个细胞/mm3到低于1500个细胞/mm3，优选地低于1400个细胞/mm3，低于1300个细胞/mm3，低于1250个细胞/mm3，低于1200个细胞/mm3，低于1100个细胞/mm3或低于1000个细胞/mm3。在优选的实施方案，对患者给予了预防或治疗有效剂量的MEDI-507，其中对患者给予的MEDI-507的剂量，使患者平均绝对淋巴细胞计数达到大约500个细胞/mm3到低于1500个细胞/mm3，优选地低于1400个细胞/mm3，低于1300个细胞/mm3，低于1250个细胞/mm3，低于1200个细胞/mm3，低于1100个细胞/mm3或低于1000个细胞/mm3。
在其它的实施方案，对患者给予了一次或几次预防或治疗有效剂量的一种或几种CD2结合分子，其中所给予的预防或治疗有效剂量的CD2结合分子，使正被CD2结合分子结合的CD2多肽达到至少20％-25％，25％-30％，30％-35％，35％-40％，40％-45％，45％-50％，50％-55％，55％-60％，60％-65％，65％-70％，70％-75％，75％-80％，直至至少80％。在还有其它的实施方案中，对患者给予了一次或几次预防或治疗有效剂量的MEDI-507，其中所给予的预防或治疗有效剂量的MEDI-507，使正被CD2结合分子结合的CD2多肽达到至少20％-25％，25％-30％，30％-35％，35％-40％，40％-45％，45％-50％，50％-55％，55％-60％，60％-65％，65％-70％，70％-75％，75％-80％，直至至少80％。
5.4.1.基因治疗
在特定的实施方案，给予了几种核酸，它们含有编码一种或几种预防或治疗药剂的序列，以便通过基因治疗法治疗、防止或缓解与炎性病症或自身免疫病有关的一种或几种症状。基因治疗指的是通过对患者给予一种已表达的或可表达的核酸而实施的治疗。在本发明的此实施方案中，该核酸可产生它们编码的介导预防或治疗作用的预防或治疗药剂。
本领域可获得的任何一种基因治疗法都可以按照本发明被使用。下面的文献描述了几个例证性方法。
关于基因治疗法的一般述评见Goldspiel等1993，临床制药学12：488-505；Wu和Wu，1991。生物治疗3：87-95；Tolstoshev，1993药物、毒物学年评32：573-596；Mulligan、科学260：926-932(1993)；以及Morgan和Anderson，1993。生物化学年评62：191-217；May，1993，TIBTECH 11(5)：155-215。本领域普遍明了的可被使用的重组DNA技术见Ausubel等(编辑)，“分子生物学的当前策略”JohnWiley & Sons NY(1993)；以及Kriegler，基因治疗和表达，实验室手册，Stockton出版，NY(1990)。
在优选的情况下，本发明的组合物包含编码预防或治疗药剂的核酸，该核酸是可在适合的宿主内表达该预防或治疗药剂的表达载体的一部分。特别是，这种核酸具有可操作地连接于其抗体编码区的启动子。优选地是异源性启动。该启动子是可诱导的或组成的，并具有任选地组织特异性。在另一特定的实施方案，在被使用的核酸分子中，其预防或治疗药剂编码序列和任何其它所需要的序列，都位于可启动在基因组内所希望的位点同源重组的区域二侧，这样，为抗体编码核酸的染色体内表达作好了准备(Koller和Smithies，1989美国国家科学院学报86：8932-8935；Zijlstra等，1989，自然342：435-438)。在某些实施方案，该预防或治疗药剂是被表达的。在其它的实施方案，被表达的预防或治疗药剂是已知对防止、治疗或缓解与炎性疾病或自身免疫病有关的一种或几种症状有效的，或者是已经用于或目前正在用于这种治疗的药剂。在优选的实施方案，被表达的预防或治疗药剂是VITAXINTM。可以直接地将此核酸传递进入患者体内，在这种情况下，是使患者直接暴露于此核酸或携带核酸的载体，或者间接地传递，在此情况下，首先在体外以该核酸转化细胞，然后将细胞移植进入患者体内。这两种方法被分别称为体内基因治疗或从体外基因治疗。
在特定的实施方案，是直接体内给予这种核酸序列，在此它将表达产生所编码的产物。可借助于本领域已知的多种方法达到此目的，例如通过将它们构建成为适当核酸表达载体的一部分并以它给药这样使它们进入细胞内。例如通过用缺损的或弱化的反转录病毒或者其它病毒载体传染(见美国专利No.4,980,286)，或者通过直接注射裸DNA，或者通过应用微粒轰击法(如基因枪，Biolistic，Dupont)，或者通过携带含有此核酸序列的原位支架的基质(见例如欧洲专利No.EP0 741 785 B1和美国专利No.5,962,427)，或者用脂质或细胞表面受体或转染剂包被，包裹在脂质体、微粒或微囊内，或者通过使它们连接于已知将进入细胞核的肽然后以它们给药，或通过使它们连接于易遭受受体介导的细胞内后作用的配体，然后以它给药(见例如Wu和Wu.1987，生物化学杂志262：4429-4432)，(可以把它用于对准特异性表达此受体的细胞类型)。在另一实施方案，可以形成一种核酸-配体复合物，其中此配体含有将使该内体瓦解的fusogenic病毒肽，可使此核酸免受溶酶体降解作用。在还有另一实施方案中，通过靶定特异性受体可使该核酸在体内对准特异性吸收和表达的细胞(见例如PCT专利公报WO 92/06180；WO 92/22635；WO 92/20316；WO93/14188；WO 93/20221)。按另一种方式，通过同源重组可将此核酸导入细胞内，并掺入宿主细胞的DNA进行表达(Koller和Smithies.1989，美国国家科学院学报86：8932-8935；以及Zijlstra等，1989，自然342：435-438)。
在特定的实施方案，使用了含有编码预防或治疗药剂的核酸序列的病毒载体。例如，可使用反转录病毒载体(见Miller等1993，酶学方法：217：581-599)。这种反转录病毒载体含有为正确地包装此病毒基因组并整合进入宿主细胞DNA所必需的成分。将编码被用于基因治疗抗体的核酸序列克隆进入一种或几种载体，这有助于将此基因传递进入患者体内。对反转录病毒载体更详细的论述可参考Boesen等，1994，生物治疗6：291-302，它描述了使用反转录病毒载体将mdr 1基因传递进入造血干细胞，以便使此干细胞对化学治疗有较强的抗性。另一些阐述反转录病毒载体在基因治疗中用途的参考文献有：Clowes等1994，临床研究杂志93：644-651；Klein等1994，血液83：1467-1473；Salmons和Gunzberg，1993，人的基因治疗4：129-141；以及Grossman和Wilson，1993，遗传和发育的现代观点3：110-114。
腺病毒是可用于基因治疗的另一类病毒。对于将基因传递给呼吸上皮细胞腺病毒是特别有吸引力的媒介物。自然状况下，腺病毒可感染呼吸上皮细胞，并在此引起轻微的病症。基于腺病毒的传递系统的其它靶标是肝脏，中枢神经系统，内皮细胞和肌肉。腺病毒具有能够感染非分裂细胞的优点。Kozarsky和Wilson，1993，遗传和发育的现代观点3：499-503是关于以腺病毒为基础的基因治疗的述评。Bout等1994，人的基因治疗5：3-10中，证明了腺病毒载体将基因传递给猕猴呼吸上皮细胞的用途。关于腺病毒在基因治疗中用途的其它例子可参考Rosenfeld等，1991，科学252：431-434；Rosenfeld等1992，细胞68：143-155；Mastrangeli等，1993，临床研究杂志91：225-234。PCT专利公报WO 94/12649；以及Wang等，1995，基因治疗2：775-783。在优选的实施方案，使用了腺病毒载体。
腺相关病毒(AAV)也已被推荐用于基因治疗(Walsh等，1993，实验生物医学协会学报204：289-300；和美国专利No.5,436,146)。
基因治疗的另一途径涉及在组织培养中通过例如电穿孔法，脂染法，磷酸钙介导的转染，或病毒感染，将基因转移给细胞。转移方法通常包括将可选择的标志转移给细胞。然后对细胞进行选择，分离出已吸收和正在表达所转移基因的那些细胞。然后将这些细胞投递给患者。
在此实施方案中，先将此核酸导入细胞，然后体内给予此形成的重组细胞。借助于本领域已知的如下任何一种方法可完成这种导入过程，包括但不限于：转染，电穿孔、微注射，以含有此核酸序列的病毒或噬菌体载体感染，细胞融合，染色体介导的基因转移，微细胞介导的基因转移，原生皮球融合等。用于将外来基因导入细胞的许多技术是本领域已知的(见例如Loeffler和Behr，1993，酶学方法217：599-618；Cohen等，1993酶学方法，217：618-644；临床药物治疗29：69-92(1985))，并且只要接受细胞的必要发育和生理功能不被破坏就可按照本发明使用这些技术。这种技术应该提供核酸对细胞的稳定转移，以致此核酸可被细胞表达，并且优选地可被遗传，可被其子代细胞表达。
可以借助于本领域已知的多种方法将所形成的重组细胞投递给患者。重组血细胞(例如造血干细胞或祖细胞)优选地可被静脉注射给予。预计的细胞用量取决于所希望的作用和病人的状况等因素，可由本领域的技术人员确定。
为基因治疗的目的可以将核酸导入的细胞包括任何一种所希望的，可获得的细胞类型，包括但不限于：上皮细胞，内皮细胞，角质细胞，成纤维细胞，肌肉细胞，肝细胞，血细胞如T淋巴细胞，B淋巴细胞，自然杀伤(NK)细胞，单核细胞，巨噬细胞，嗜中性细胞，嗜酸性细胞，巨核细胞，颗粒细胞，各种干细胞或祖细胞，特别是例如从骨髓、脐带血、外周血、胎肝等得到的造血干细胞或祖细胞。
在优选的实施方案，用于基因治疗的细胞是患者自体的。
在重组细胞被用于基因治疗的实施方案中，是先将编码预防或治疗药剂的核酸序列导入细胞，以致它们能被该细胞或其后代表达，然后为预防或治疗目的而体内给予这种重组细胞。在特定的实施方案，使用的是干细胞或祖细胞，按照本发明的这种实施方案，任何一种可以被分离出并可在体外维持的干细胞和/或祖细胞，都有可能被使用(见例如PCT专利公报，WO 94/08598，Stemple和Anderson，1992，细胞71：973-985；Rheinwald，1980，细胞生物学方法21A：229；以及Pittelkow和Scott，1986，Mayo Clinic Proc 61：771)。
在特定的实施方案，为了基因治疗的目的被导入的核酸；含有可操作性地连接于其编码区的组成的，组织特异性的或者可诱导的启动子。在优选的实施方案，为了基因治疗的目的被导入的核酸，含有可操作性地连接于其编码区的可诱导性启动子，以致通过控制适当的转录诱导剂的存在或不存在，可控制此核酸的表达。
5.5.对组合治疗的预防或治疗效果的鉴定和验证
优选地在用于人之前，在体外对本发明药物组合物或者预防或治疗药剂的几个方面进行测定，在细胞培养系统中，以及在动物模型生物体内例如啮齿动物模型系统中，测定其所要求的治疗活性，例如，可用于确定是否有必要给予特定药物组合物的试验包括细胞培养试验，其中使病人的组织样品生长在培养基中，并使其暴露于药物组合物或者与之接触，然后观察这种组合物对组织样品的作用。该组织样品可通过活组织检查从病人取得。通过这种测定有可能鉴别对每个病人治疗最有效的预防或治疗分子。在各种特定的实施方案中，可用与自身免疫疾病或炎性疾病有关的代表性细胞类型(如T细胞)进行体外试验，以便测定本发明的药物组合物对这种细胞类型是否具有所希望的效果。
组合的预防和/或治疗药剂在用于人之前，可在适当的动物模型系统中进行试验。这种动物模型系统包括但不限于大鼠、小鼠、鸡、牛、猴、猪、犬和兔等。本领域熟知的任何动物系统都可使用。在本发明的特定实施方案，组合的预防和/或治疗药剂是小鼠模型系统中进行测定。对于本领域的技术人员，这种模型系统是广泛使用的和熟知的。该预防和/或治疗药剂可被重复地给药。给药程序的几个方面都可能改变。所说的几方面包括给予此预防和/或治疗药剂的目前通常的方式，以及这些药剂是否被分开给予或作为混合物给予。
通过应用本领域已知的和如下文献中所描述的关节炎的各种实验动物模型，可以测定本发明组合治疗的抗炎活性：Crofford L.J.和WilderR.L，“动物的关节炎和自身免疫性”，在“关节炎和类似的病症：风湿病学教科书”中，McCarty等(编辑)，第30章(Lee和Febiger，1993)。关节炎和自身免疫性风湿病的实验性和自然发生的动物模型，也可被用于测定本发明组合治疗的抗炎活性。下面是被提供作为非限制性实例的某些测定法。
本领域已知的并广泛使用的关节炎或发炎病的基本动物模型包括：佐剂诱发的大鼠关节炎模型，胶原诱导的大鼠和小鼠关节炎模型，以及胶原诱导的大鼠、兔和仓鼠关节炎模型，对所有这些模型在如下文献中均有描述：Crofford.L.J.和Wilder R.L，“动物的关节炎和自身免疫性”，在“关节炎和类似的病症：风湿病学教科书”中，McCarty等(编辑)，第30章(Lee和Febiger，1993)，在此被整体引入作为参考。
使用角叉藻聚糖诱导的大鼠关节炎模型也可以测定本发明组合治疗剂的抗炎活性。角叉藻聚糖诱导的关节炎也已在研究慢性关节炎和炎症中用于兔、犬和猪。为了确定治疗效果，使用了定量组织形态检测法。在Hansra P.等“角叉藻聚糖诱导的大鼠关节炎”，炎症24(2)：141-155，(2000)中论述了使用这种角叉藻聚糖诱导的关节炎模型的方法。通常使用的还有如本领域已知的和描述的酵母多糖诱导的动物炎症模型。
应用在Winter.C.A等“以角叉藻聚糖诱导的大鼠后脚爪水肿作为抗炎药物的检测模型”，实验生物医学协会学报111，544-547(1962)中所述的方法并经修改，通过检测对角叉藻聚糖诱导的大鼠后脚爪水肿的抑制作用，也可以测定本发明组合治疗剂的抗炎活性。这种检测法已被用作对绝大多数NSAIDs抗炎活性的体内初步筛选，并认为可预测对人的效果。以相对于给予赋形剂的对照组，对待测组后脚爪重量增加的抑制作用百分数表示待测预防或治疗药剂的抗炎活性。
在本发明的特定实施方案，在此采用的实验动物模型是佐剂诱导的大鼠关节炎模型，为了确定本发明组合治疗剂的抗炎活性，可测定相对于对照组的体重。被测定的组合治疗剂可包括但不限于，含有任何一种与VITAXINTM同种功能的整合蛋白αvβ3拮抗剂，TNF-α抑制剂，以及化学治疗药剂的组合物。组合治疗剂中起TNF-α抑制剂作用的RENBRELTM，ENBRELTM的大鼠同种物，也可以用大鼠模型测定。
按另一种方式，使用检测骨损失的实验法也可以测定本发明组合治疗剂的效果。为获得骨形成的动力学参数，动物模型如卵巢切除诱发的骨吸收小鼠、大鼠和兔模型是本领域已知的。应用例如Yositake等或Yamamoto等所述的方法，通过微机X射线断层分析和骨组织形态学测量分析可在体内测定骨体积。Yoshitake等，“Osteopontin缺损小鼠对卵巢切除诱发的骨吸收具有抗性”国家科学院学报96：8156-8160，(1999)；Yamamoto等，整合蛋白配体Echistatin阻止卵巢切除的小鼠和大鼠的骨丧失，内分泌学139(3)：1411：1419。(1998)，在此二者均被整体引入作为参考。
此外，炎性肠病的动物模型也可用于测定本发明组合治疗剂的效果(Kim等1992，Scand.J.Gastroentrol.27：529-537；Strober，1985，Dig.Dis.Sci.30(12增刊)：3S-10S)，溃疡性Cholitis和Crohn氏病是人的炎性肠病也可对动物诱发这种病。下列化学物质给动物口服给药可诱炎性肠病；硫酸化多糖，包括但不限于支链淀粉，角叉藻，支链淀粉的硫酸盐和葡聚糖硫酸盐，或者化学刺激物，包括但不限于三硝基苯磺酸(TNBS)和乙酸。
哮喘动物模型也可用于测定本发明组合治疗剂的效果。这种模型的一个例子是采用鼠的转移模型。其中空气变态反应原对TH1或TH2接受小鼠的激动作用，导致TH效应器细胞迁移至通气道，并且与强烈的嗜中性(TH1)和嗜酸性(TH2)肺粘膜发炎反应有关(Cohn等1997，实验医学杂志，186：1737-1747)。
自身免疫疾病动物模型也可用于测定本发明组合治疗剂的效果。已经建立了自身免疫疾病如I型糖尿病，甲状腺自身免疫性，系统性红斑狼疮，以及肾小球肾炎的动物模型(Flanders等1999，自身免疫性29：235-246；Krogh等，1999，生物化学81：511-515；Foster，1999，Semin.Nephrol，19：12-24)。
并且，本领域技术人员已知的有关检测法，都可用于评价在此公开的组合治疗剂对自身免疫病和/或炎性病症的预防和/或治疗效果。
应用本领域技术人员已知的标准技术；可监测/测定本发明组合治疗剂对外周血淋巴细胞计数的影响。通过如下步骤可对患者测定外周血淋巴细胞计数：例如先从患者获得外周血液样品，再借助于例如Ficoll-Hypaque(Pharmacia)梯度离心将淋巴细胞从其它外周血成分如血浆中分离出，然后应用台盼兰染色法计数淋巴细胞。通过如下操作可对患者测定外周血T细胞计数：例如应用Ficoll-Hypaque(Pharmacia)梯度离心将淋巴细胞从外周血的其它成分如血浆中分离出，用针对T细胞抗原如CD3，CD4和CD8的，并偶联于FITC或藻红蛋白的抗体标记T细胞，然后借助于FACS测定T细胞的数目。应用本领域技术人员已知的标准技术，可以在给予一次或几次CD2结合分子和/或一次或几次一种或几种其它预防或治疗药剂之前或之后，或者既在给药之前又在给药之后，测定由被CD2结合分子结合的外周血T-细胞表达的CD2多肽的百分数。通过如下步骤可以测定由被CD2结合分子结合的外周血T-细胞表达的CD2多肽的百分数；例如先从患者获得外周血液样品；借助于例如Ficoll-Hy paque(Pharmacia)梯度离心将淋巴细胞从外周血的其它成分如血浆中分离出；然后用偶联于FITC的抗-CD2结合分子抗体以及针对T-细胞抗原如CD3、CD4或CD8的，偶联于藻红蛋白的抗体标记T-细胞，最后使用FACS测定用抗-CD2结合分子抗体标记的T-细胞的数目，与用针对T-细胞抗原的抗体标记的T-细胞数目相比较。
借助于标准的药剂学程序在培养细胞或实验动物中可以测定本发明预防和/或治疗药剂的毒性和/或效果，例如测定LD50(使群体50％致死的剂量)以ED50(对50％群体治疗有效的剂量)。毒性作用与治疗作用之间的剂量比是治疗指数，可被表示为LD50/ED50之比。显示出较大治疗指数的预防和/或治疗药剂是优选的。当可能使用显示出毒付作用的预防和/或治疗药剂时，应该仔细设计给药系统，致使这些药剂靶定受影响的组织部位，目的是使对未受影响的细胞的可能损伤降到最小，因此减少付作用。
从细胞培养实验和动物研究获得的数据，可被用于制订这些预防和/或治疗药剂用于人的剂量范围。优选地是将这些药剂的剂量置于包括ED50的无毒性或具微小毒性的循环浓度范围之内。根据采用的剂型和给药的途径，剂量可在此范围内改变。对于在本发明方法中使用的任何药剂，开始都可以从细胞培养实验测定其治疗有效剂量。如在细胞培养实验中所测定的，也可根据动物模型制订达到包括IC50的血浆循环浓度范围的剂量(IC50即对症状达到半数最大抑制作用的待测化合物的浓度)。这些信息可被用于更准确地确定对人的有效剂量。例如，借助于高效液相色谱技术可以检测在血浆中的浓度水平。
5.6.产生抗体的方法
可以借助于本领域已知的方法产生可免疫特异性结合于抗原的抗体，如抗体的合成，特别是通过化学合成，或者优选地通过重组表达技术。
对抗原具有免疫特异性的多克隆抗体可通过本领域熟知的各种不同程序产生。例如，可将人抗原给予各种不同的宿主动物，包括但不限于兔，小鼠，大鼠等，用于诱导产生含有对该人抗原特异性的多克隆抗体的血清。可根据宿主的种类使用各种不同的佐剂来增强免疫应答反应，佐剂包括但不限于福氏佐剂(完全和不完全佐剂)；无机凝胶如氢氧化铝；表面活性剂如溶血卵磷脂；Pluronic多元醇；聚阴离子，肽，油乳状液，匙孔契合血兰蛋白(Keyhole limpet hemo.cyanins)，二硝基酚，以及可能对人运用的佐剂如BCG(卡介苗)和短小棒状杆菌。这些佐剂也是本领域熟知的。
可应用本领域已知的多种不同技术制备单克隆抗体，包括应用杂交瘤技术，重组技术和噬菌体呈现技术或者它们的组合形式。例如，应用杂交瘤技术可产生单克隆抗体，此技术是本领域已知的并可参阅例如Harlow等，“抗体：实验室手册”(冷泉港实验室出版社，第二版1988)；Hammerling等单克隆抗体和T细胞杂交瘤563-681(Elsevier.N.Y.1981)(此参考文献均被整体引入作为参考)。在此使用的名词“单克隆抗体”不限于通过杂交瘤技术产生的抗体。此名词“单克隆抗体”指的是从单个克隆，包括任何真核细胞克隆，原核细胞克隆或噬菌体克隆产生的抗体，不是产生此抗体的方法。
应用杂交瘤技术产生和筛选特异性抗体的方法是本领域熟知的常规方法。简单地说，可先用非鼠抗原免疫小鼠，一旦免疫应答可被测出，例如在小鼠血清中可检测出对此抗原特异性的抗体、就可取出小鼠的脾并分离出脾细胞。然后通过熟知的技术使此脾细胞与任何一种适合的骨髓瘤细胞融合，例如来自可从ATCC获得的细胞系SP20的细胞，通过有限稀释法筛选并克隆杂交瘤。然后借助于本领域已知的方法检测此杂交瘤克隆，找出可分泌能够结合本发明多肽的抗体的细胞。通过以阳性杂交瘤克隆免疫小鼠，可以产生通常含有高浓度抗体的胶水液。
因此，本发明提供了几种产生单克隆抗体的方法以及用此方法产生的抗体，包括培养杂交瘤细胞和筛选本发明的抗体，其中优选地此杂交瘤是由与骨髓瘤细胞融合的脾细胞产生的，而此脾细胞是从用非鼠抗原免疫的小鼠体内分离出，然后对由融合形成的杂交瘤筛选出可分泌能够结合此抗原的抗体的杂交瘤克隆。
可特异性识别特定抗原表位的抗体片段，也可借助于本领域技术人员已知的技术产生。例如，通过蛋白水解断开免疫球蛋白分子可产生本发明的Fab片段和F(ab′)片段，例如用木瓜蛋白酶(产生Fab片段)或用胃蛋白酶(产生F(ab′)2片段)。F(ab′)2片段包括可变区，轻链恒定区和重链的CH1功能区。并且，还可以应用本领域已知的各种不同的噬菌体呈现法(Phage display methods)。
在噬菌体呈现法中，功能性抗体的功能区呈现在携带有编码此功能区的多核苷酸序列的噬菌体颗粒的表面。特别是，编码VH和VL功能区的DNA序列从动物的cDNA文库被扩增(例如人和鼠受影响组织的cDNA文库)。借助于PCR，使编码VH和VL功能区的DNA与scFv接头重组在一起，然后被克隆进入噬菌粒载体。此载体被电穿孔进入E.coli(大肠杆菌)，并用辅助噬菌体感染此E.coli。用于这些方法的噬菌体是包含fd和M13的典型丝状噬菌体，并且此VH和VL功能区通常被重组融合于噬菌体的基因III或基因VIII。用抗原可以选择或鉴别表达可结合特定抗原的抗原结合功能区的噬菌体，例如应用标记的抗原或者应用被固定或被捕获在固体表面或小珠上的抗原。可用于制备本发明抗体的噬菌体呈现法实例包括在如下文献中公开的方法：Brimkman等1995，免疫学方法杂志182：41-50；Ames等1995，免疫学方法杂志184：177-186；Kettleborough等，1994，欧洲免疫学杂志24：952-958；Persic等1997，基因(187：9-18；Burton等，1994，免疫学进展57：191-280；PCT专利申请No.PCT/GB91/01 134；PCT专利公报No.WO 90/02809，WO 91/10737，WO 92/01047，WO92/18619，WO 93/11236，WO 95/15982，WO 95/20401和WO 97/13844；以及美国专利No.5,698,426；5,223,409；5,403,484；5,580,717；5,427,908；5,750,753；5,821,047；5,571,698；5,427,908；5,516,637；5,780,225；5,658,727；5,733,743和5,969,108，在此以上各文献均被整体引入作为参考。
如上述参考文献中所述，在噬菌体选择之后，可分离出来自噬菌体的抗体编码区并用于产生全抗体，包括人抗体，或者产生任何其它需要的抗原结合片段，然后在任何希望的宿主内表达，包括如下所述的哺乳动物细胞，昆虫细胞，植物细胞，酵母菌和细菌。应用本领域已知的方法如下面文献中公开的方法，也可以采用重组产生Fab，Fab′和F(ab′)2片段的技术：PCT专利公报No.WO 92/22324；Mnllinax等1992生物技术12(6)：864-869；Sawai等，1995，AJRI 34：26-34；以及Better等，1988，科学240：1041-1043(这些参考文献均被整体引入作为参考)。
为了产生全抗体，可使用包括VH或VL核苷酸序列，限制位点和保护此限制位点的侧翼序列的PCR引物，在scFv克隆中扩增此VH或VL序列。应用本领域技术人员已知的克隆技术，可将PCR扩增的VH功能区克隆进入表达VH恒定区例如人γ-4恒定区的载体，并将PCR扩增的VL功能区克隆进入表达VL恒定区例如人κ或λ恒定区的载体。优选地，用于表达此VH或VL功能区的载体包含EF-1α启动子，分泌信号序列，可变功能区克隆位点，恒定功能区，以及选择标记如新霉素。还可将VH和VL功能区克隆进入一种表达必需恒定区的载体中。然后应用本领域技术人员已知的技术，将重链转变载体和轻链转变载体共转染进入细胞系，以便产生表达全长度抗体如IgG的稳定的或短暂的细胞系。
对于某些应用，包括在体内将抗体用于人和在体外的检测试验，优选地是使用人抗体或嵌合抗体。完全的人抗体对于治疗人患者是特别理想的，可借助于本领域已知的多种方法制备人抗体，包括上述应用从人免疫球蛋白序列产生的抗体文库的噬菌体呈现法。也见美国专利No.4,444,887和4,716,111；以及PCT专利公报WO 98/46645，WO98/50433，WO 98/24893，WO 98/16654，WO 96/34096，WO 96/33735，以及WO 91/10741，在此均被整体引入作为参考。
还可以应用转基因小鼠产生人抗体，这种小鼠不能表达功能的内源性免疫球蛋白，但它们可以表达人免疫球蛋白基因。例如，可随机地将人重链和轻链免疫球蛋白基因交合物导入小鼠胚胎干细胞，或者通过同源重组导入。按另一种方式，除了人重链和轻链基因之外，还可将人可变区、恒定区和高变区(D区)导入小鼠胚胎干细胞。通过同源重组，可使小鼠重链和轻链免疫球蛋白基因单独地，或者在导入人免疫球蛋白基因座的同时变成无功能。特别是JH区的纯合缺失可阻止内源性抗体产生。使此被修饰的胚胎干细胞扩展并微注射进入胚泡以便产生嵌合小鼠。然后饲养这种嵌合的小鼠使其产生可表达人抗体的纯合的后代。按常规方式用被选择的抗原如本发明多肽的全部或部分片段免疫此转基因小鼠。应用常规的杂交瘤技术，可从被免疫的转基因小鼠得到针对此抗原的单克隆抗体。包含在转基因小鼠内的人免疫球蛋白转基因在B细胞分化过程中被重新安排，并随后遭受分类转换和体细胞突变。因此，应用这种技术，有可能产生有治疗效果的IgG，IgA，IgM和IgE抗体。为纵览这种用于产生人抗体的技术，参见Lenberg和Huszar 1995，国际免疫学述评13：65-93。关于这种用于产生人抗体和人单克隆抗体的技术，以及产生这种抗体的策略的详细论述可参见例如PCT专利公报No.WO 98/24893，WO 96/34096和WO 96/33735，以及美国专利No.5,413,923；5,625,126；5,633,425；5,569,825；5,661,016；5,545,806；5,814,318；和5,939,598。在此均被整体引入作为参考。此外，一些公司如Abgenix公司(Freemont.CA)和Genpharm(Sen Jost.CA)可参与应用类似于上述的技术，提供针对所选择抗原的人抗体。
嵌合抗体是一种其中抗体的不同部分来源于不同的免疫球蛋白分子的抗体分子，例如具有来源于人抗体的可变区和非人免疫球蛋白恒定区的抗体。产生嵌合抗体的方法是本领域已知的，可参见例如Morrison，1985，科学229：1202；Oi等，1986。生物技术4：214；Gillies等，1989，免疫学方法杂志125：191-202；以及美国专利No.5,807,715，4,816,567，和4,816,397；在此均被整体引入作为参考。应用本领域已知的如下各种技术，可以产生包含一种或几种来自人的CDR和来自非人免疫球蛋白分子的骨架区的嵌合抗体：例如CDR-移植技术(EP239,400，PCT专利公报No.WO 91/09967，以及美国专利No.5,225,539；5,530,101，和5,585,089)，表面修饰或表面重修技术(EP 592,106，EP519,596；Padlan 1991，分子免疫学28(4/5)：489-498；Studnicka等1994，蛋白质工程7(6)：805-814；以及Roguska等，1994，PNAS91：969-973)，以及链重排技术(美国专利No.5,565,332)。在优选的实施方案，嵌合抗体包含具有列于表1或表2中的任何一种CDR3氨基酸序列的人CDR3，以及非人骨架区。为了改变，优选地是提高抗原结合能力，通常以来源于CDR供给者抗体的相应残基取代骨架区内的骨架残基。借助于本领域熟知的方法可鉴别这些骨架取代，例如，通过模拟CDR与骨架残基的相互作用来鉴别对抗原结合重要的骨架残基，并且通过序列比较来鉴别在特殊位置的异常骨架残基。(见例如Queen等，美国专利No.5,585,089；以及Riechmann等1988，自然332：323，在此均被整体引入作为参考)。
进而，应用本领域技术人员熟知的技术，可免疫特异性结合于某一抗原(例如CD2多肽)的抗体又可以被用于产生“模仿”抗原的抗-独特型抗体(见例如Greenspan & Bana 1989，FASEB J.7(5)：437-444，以及Nissinoff，1991，免疫学杂志147(8)：2429-2438)。
5.6.1编码抗体的多核苷酸序列
本发明提供了几种多核苷酸，它包含编码可免疫特异性结合于某一抗原的抗体或其片段的核苷酸序列。本发明还包括几种多核苷酸，此多核苷酸在例如前面规定的高度严格，中度严格或低度严格杂交条件下，可同编码本发明某一抗体的多核苷酸杂交。
借助于本领域已知的方法可获得这种多核苷酸，并可确定此多核苷酸的核苷酸序列。例如从文献或从数据库如Genbank可获得对某一所需抗原具有免疫特异性的抗体的核苷酸序列。因为VITAXINTM的氨基酸序列是已知的，所以应用本领域熟知的方法可以确定编码这种抗体的核苷酸序列，也就是说，以这种方式装配已知编码特定氨基酸的核苷酸密码子，可产生编码此抗体的核酸。可从化学合成寡核苷酸开始来装配编码该抗体的这种多核苷酸(如在Kutmeier等1994，生物技术17：242中所述)，简单地说，这种方法包括合成含有编码此抗体的序列各部分的重叠寡核苷酸，退火并连接这些寡核苷酸，然后借助于PCR扩增此连接的寡核苷酸。
按另一种方式，编码某一抗体的多核苷酸还可从适合来源的核酸产生。如果不能获得含有编码特定抗体的核酸的克隆，但是此抗体分子的序列是已知的，那末，应用可同其序列3′和5′末端杂交的合成引物通过PCR扩增，或者应用对此特定基因序列特异性的寡核苷酸探针通过克隆鉴别，例如来自cDNA文库的，可编码此抗体的cDNA克隆，可化学合成或从适合的来源获得编码此免疫球蛋白的核酸(适合的来源包括例如抗体cDNA文库，或由表达此抗体的组织或细胞如被选择表达本发明某一抗体的杂交瘤细胞产生的cDNA文库，或者还包括从这种细胞分离出的核酸，优选地是polyA+RNA)。然后，应用本领域熟知的方法，可将通过PCR产生的被扩增核酸克隆进入可复制的克隆载体。
一旦抗体的核苷酸序列被确定，就可应用本领域熟知的调整核苷酸序列的方法，调整此抗体的核苷酸序列，例如重组DNA技术，定点诱变和PCR等技术(见例如在Sambrook等1990，分子克隆，实验室手册，第2版，冷泉港实验室、冷泉港、N.Y，以及Ausubel等编辑，1998，分子生物学的当前策略，John Wiley & Sons.NY.在此二者均被整体引入作为参考)，以便产生具有不同氨基酸序列的抗体，例如形成氨基酸取代、缺失和/或插入。
在特定的实施方案，应用常规的重组DNA技术已将一种或几种CDR插入骨架区内。骨架区可能天然地存在共有骨架区，而优选地是人骨架区(见例如Chothia等1998，分子生物学杂志278：457-479，关于人骨架区的列表)。优选地是，由组合骨架区的CDR形成的多核苷酸可编码特异性结合特定抗原的抗体。如上所述，可优选地在骨架区内形成一个或几个氨基酸取代，并且优选地此氨基酸取代可增强抗体对其抗原的结合。此外，这种方法还可用于形成参与链内二硫键的一个或几个可变区半胱氨酸残基的氨基酸取代或缺失，而产生缺乏一个或几个链内二硫键的抗体分子。多核苷酸的其它一些改变也包括在本发明范围之内，并也是本领域技术人员已知的。
5.6.2.抗体的重组表达
重组表达了免疫特异性结合于某一抗原的抗体，需要构建含有编码此抗体的多核苷酸的表达载体。一旦得到了编码本发明抗体分子的多核苷酸，就可以应用本领域熟知的技术，通过重组DNA构建用于产生该抗体分子的载体。见例如美国专利No.6,331,415，在此被整体引入作为参考。在此将简述通过表达含有抗体编码核苷酸序列的多核苷酸制备蛋白质的方法。可用本领域技术人员熟知的方法构建含有抗体编码序列以及适合的转录和翻译控制信号的表达载体。这些方法包括例如体外重组DNA技术，合成技术和体内基因重组技术。因此，本发明提供了几种可复制的载体，它包含可操作地连接于启动子的核苷酸序列，此核苷酸序列编码本发明的抗体分子，抗体的重链或轻链，抗体的重链或轻链可变功能区或其一部分，或者重链或轻链CDR。这种载体还可能包含编码抗体分子恒定区的核苷酸序列(见例如PCT专利公报，WO 86/05807；PCT专利公报WO 89/01036，以及美国专利No.5,122,464)，并且可将抗体的可变功能区克隆进成这种载体，用于表达全部重链、全部轻链、或者全部重链和轻链。
借助于常规技术将此表达载体转移给宿主细胞，然后借助于常规技术培养此转染的细胞以便产生本发明的抗体。因此，本发明包括几种含有可操作地连接于异源性启动子的多核苷酸的宿主细胞，此多核苷酸编码本发明的抗体或其片段，或者其重链或轻链，或其一部分，或者本发明的单链抗体。在优选的实施方案，为了表达双链抗体，可使编码重链和轻链的载体在宿主细胞内共用表达，用于表达完整的免疫球蛋白分子，下面将详述。
多种宿主表达载体系统可用于表达本发明的抗体分子(见例如美国专利No.5,807,715)。这样的宿主表达系统相当于一种媒介物，通过它可产生所需要的编码序列并随后可被纯化，但是还相当于一种细胞，当以适合的核苷酸编码序列转化或转染之后，可原位表达本发明的抗体分子。这些表达系统包括但不限于微生物，例如以含有抗体编码序列的重组噬菌体DNA、质粒DNA或粘粒DNA表达载体转化的细菌(如大肠杆菌和枯草杆菌)；以含有抗体编码序列的重组酵母菌表达载体转化的酵母菌(如Saccharomyces Pichia)；以含有抗体编码序列的重组病毒表达载体(如杆状病毒)感染的昆虫细胞系统；以含有抗体编码序列的重组病毒表达载体(如花椰菜花叶病毒(CaMV)烟草花叶病毒(TMV)感染的，或者以含有抗体编码序列的重组质粒表达载体(如Ti质粒)转化的植物细胞系统；或者包含重组表达构建物的哺乳动物细胞(如COS，CHO，BHK，293，NSO和3T3细胞)，此构建物含有来源于哺乳动物细胞基因组的启动子(如金属硫蛋白启动子)或来源于哺乳动物病毒的启动子(如腺病毒晚期启动子，痘苗病毒7.5K启动子)。用于表达重组抗体的细胞优选地是细菌细胞如E.coli，而更优选的是真核细胞，特别是为了表达整个重组抗体分子。例如，哺乳动物细胞如中国仓鼠卵巢细胞(CHO)，当与载体如来自人巨细胞病毒的主要中间早期基因启动子成分连接时，是抗体的有效表达系统(Foecking)等，1986，基因45：101，和Cockett等1990，生物/技术8：2)。在特定的实施方案，对编码可免疫特异性结合一种或几种抗原的抗体的核苷酸序列的表达，是由组成启动子、可诱导启动子或组织特异性启动子调控的。
对于细菌表达系统，对许多表达载体的有益选择取决于打算赋予被表达抗体分子的用途。例如，当要产生大量的这种蛋白质，用于形成抗体分子的药物组合物时，理想的载体是它能指导表达容易被纯化的高浓度融合蛋白产物。这载体包括但不限于E.coli表达载体pUR278(Ruther等，1983，EMBO 12：1791)，在其中，抗体编码序列可被单独连接进入载体具有lac Z编码区的结构框内，这样可导致产生融合蛋白，还包括PIN载体等(Inouye和Inouye，1985，核酸研究13：3101-3109；Van Heeke和Schuster 1989，生物化学杂志24：5503-5509)。pGEX载体也可被用于表达外源多肽，作为带有谷胱甘肽5-转移酶(GST)的融合蛋白。一般情况下，这种融合蛋白是可溶性的，通过吸附或结合于谷胱甘肽琼脂糖基质微珠，然后在有游离谷胱甘肽存在的情况下洗脱，可容易地从裂解的细胞中被纯化。此pGEX载体被设计包含凝血酶因子或Xa蛋白酶断裂位点，这样就可从GST部分释放出克隆的靶标基因产物。
在昆虫表达系统，Autographa californica nuclear polyhedrosis病毒(AcNPV)被用作表达外源基因的载体。此病毒生长在Spodopterafrugiperda细胞内。可将抗体编码序列单独克隆进入此病毒的非必要区(例如多角体蛋白基因)，并置于AcNPV的启动子(如多角体蛋白启动子)的控制下。
对于哺乳动物宿主细胞，许多基于病毒的表达系统都可被利用。在用腺病毒作表达载体的情况下，可使所需要的抗体编码序列连接于腺病毒转录/翻译控制复合体如晚期启动子和已分裂前导序列。然后通过在体外或体内重组，将这种嵌合基因插入腺病毒基因组。在此病毒基因组非必需区(如E1或E3区)的插入，将导致形成可在被感染的宿主内存活并能表达此抗体分子的重组病毒。(见例如Lagan和Shenk，1984.美国国家科学院学报81：355-359)。为了有效地翻译被插入的抗体编码序列，可能还需要特异性的起始信号。这些信号包括ATG起始密码子和邻近的序列。而且，此起始密码子必须处于带有所需编码序列读框的时相，以便确保对整个插入片段的翻译。这些外源性翻译控制信号和起始密码子各种不同来源的，天然的和合成的。通过包含适当的转录增强子成分和转录终止子等，可提高表达的效率(见例如Bittner等，1987，酶学方法153：51-544)。
此外，还可选择宿主细胞株，选择了调节插入序列表达的，或者能以所需要的特定方式修饰和加工处理基因产物的细胞株。对蛋白质产物的这种修饰(如糖基化)和加工(如断开)，对于蛋白质的功能是重要的。不同的宿主细胞具有其特征性的和特定的机制，用于对蛋白质和基因产物进行翻译后的加工和修饰。可以选择适合的细胞系或宿主系统，以便确保对所表达的外源性蛋白质进行正确的修饰和加工，为此可使用真核宿主细胞，它们具有用于适当加工初级转录物、糖基化和磷酸化基因产物的细胞机构。这种哺乳动物宿主细胞包括但不限于：CHO、VERY、BHK、Hela，COS、MDCK、293、3T3、W138、BT483、Hs578T、HTB2、BT20和T47D，NSO(一种内源性不产生任何免疫球蛋白链的鼠骨髓瘤细胞系)、CRL7030以及HsS78Bst细胞。
为了长时间，高产率地产生重组蛋白质，稳定的表达是优选的。例如，可工程构建可稳定地表达抗体分子的细胞系。不是使用含有病毒复制起点的表达载体，而是以受适合的表达控制成份(例如启动子，增强子，序列，转录终止子和聚腺苷酸化位点等)和可选择性标志控制的DNA转化宿主细胞。在导入外源DNA之后，使构建的细胞在富养分的培养基内生长1-2天，然后转换在选择性培养基内。重组质内的可选择性标志赋予细胞对选择的抗性，并使细胞能稳定地将此质粒整合进入它们的染色体，并生长形成集落，此集落又可被克隆并扩展成为细胞系。这种方法可优选地被用于构建表达抗体分子的细胞系。这种构建的细胞系，对筛选和评价可直接或间接地与抗体分子相互作用的组合物特别有用。
许多选择系统可被使用，包括但不限于：单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(Wigler等1977，细胞11：223)，次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶基因(Szybalska和Szybalski，1992。美国国家科学院学报48：202)，以及腺嘌呤磷酸核糖转移酶基因(Lowy等1980，细胞22：8-17)，这些基因可分别用于tk、hgprt或aprt-细胞。还可以用抗代谢物抗性作为选择如下基因的基础：dhfr赋予对氨甲蝶呤的抗性(Wigler等1980，美国国家科学院学报77：357；O′Hare等1981，美国国家科学院学报78：1527)；gpt赋予对霉酚酸的抗性(Mulligan和Berg，1981，美国国家科学院学报，78：2072)；neo赋予对氨基甙G-418的抗性(Wu和Wu 1991，生物治疗3：87-95；Tolstoshev，1993，药理毒理学年评32：573-596；Mulligan，1993，科学260：926-932，以及Morgan和Anderon，1993，生物化学年评62：191-217；May，1993，TIB TECH 11(5)：155-215)；以及hygro赋予对潮霉素的抗性(Santerre等，1984，基因30：147)。重组DNA技术的本领域周知的方法可被常规地用于选择所需要的重组克隆，在下列文献中描述了这些方法，例如Ausubel等(编辑)“分子生物学的现代策略”，John wiley和Sons.NY(1993)；Kriegler，“基因的转移和表达”，实验室手册，Stockton出版，NY(1990)，12章和13章，Dracopoli等(编辑)，“人类遗传学现代策略”John wiley和Sons.NY.(1994)；Colberre-Garapin等1981分子生物学杂志150：1，在此均被整体引入作为参考。
通过载体扩增可增加抗体分子的表达水平(有关述评见Bebbington和Hentschel，在DNA克隆过程中，将基于基因扩增的载体用于在哺乳动物细胞内表达被克隆的基因，卷3，Academic出版社，NY(1987)。如果表达抗体的载体系统中的标志是可扩增的，那么，增加存在于宿主细胞培养物中抑制剂的浓度，将增加标志基因的拷贝数，因为被扩增的区域与抗体基因有关，所以抗体的产量也将增加(crouse等1983，分子细胞生物学3：257)。
可用二个本发明的表达载体共同转染宿主细胞，第一个载体编码重链来源的多肽，第二个载体编码轻链来源的多肽。这二个载体可含有使其能够同等表达重链和轻链多肽的相同的可选择性标志。按另一种方式，也可使用编码，并能表达重链和轻链多肽的单一载体。在这种情况下，应该把轻链放置在重链之前，以避免过量的有毒游离重链(Proudfoot 1986.自然322：52；和Kohler，1980美国国家科学院学报77：2197)。重链和轻链的编码序列可含有cDNA或基因组DNA。
一旦通过重组表达产生了本发明的抗体分子，就可借助于本领域已知的用于纯化免疫球蛋白分子的任何一种方法纯化它，例如通过色谱(如离子交换色谱；亲和色谱，特别是通过在蛋白A之后对特异性抗原的亲和性；以及尺寸排阻柱色谱)，离心，差示溶解度，或者借助于任何其它的用于纯化蛋白质的标准技术。并且，为了便于纯化，还可以使本发明的抗体或其片段与在此所述的，或本领域已知的其它异源性多肽序列融合。
5.7产生多肽和融合蛋白的方法
借助于标准的重组DNA技术或者借助于蛋白质合成技术如使用肽合成仪，可以产生多肽和融合蛋白。例如，借助于包括自动DNA合成仪的常规技术，可以合成编码多肽或融合蛋白的核酸分子。按另一种方式，使用锚着引物可以完成基因片段的PCR扩增，此引物导致产生二个连续基因片段之间的互补突出，随后将此基因片段退火，重复扩增产生嵌合的基因序列(见例如“分子生物学的现代策略”，Ausubel等(编辑)John wiley和Sons(1992)。而且，可将编码生物活性分子的核酸克隆进入含有Fc功能区或其片段的表达载体中，以致使该生物活性分子在读框内被连接于Fc功能区或Fc功能区片段。
用于使多肽融合或偶联于抗体恒定区的方法是本领域已知的，见例如美国专利No.5,336,603,5,622,929；5,359,046；5,349,053，5,447,851；5,723,125；5,783,181；5,908,626；5,844,095，以及5,112,946；欧洲专利EP 307,434；EP367,166；EP394,827；PCT专利公报WO 91/06570，WO96/04388，WO 96/22024，WO 97/34631，以及WO 99/04813；Ashkenazi等，1991，美国国家科学院学报88：10535-10539；Traunecker等，1988，自然331：84-86；Zheng等.1995，免疫学杂志154：5590-5600；以及Vil等1992，美国国家科学院学报89：11337-11341，在此均被整体引入作为参考。
编码生物活性分子和Fc功能区或其片段的核苷酸序列可从本领域技术人员能得到的信息资料获得(即从Genbank，文献获得，或者借助于常规的克隆技术获得)。可以将编码多肽或融合蛋白的核苷酸序列插入适合的表达载体，即含有为转录和翻译插入的蛋白质编码序列所必须成分的载体。各种不同的宿主载体系统都可用于本发明表达此蛋白质编码序列。这种载体系统包括但不限于：以病毒(如痘苗病毒和腺病毒等)感染的哺乳动物细胞系统；以病毒(如杆状病毒)感染的昆虫细胞系统；微生物如含有酵母菌载体的酵母菌；或者以噬菌体，DNA，质粒DNA，或粘粒DNA转化的细菌。载体的表达成分在它们的强度和特异性是不同的。取决于所采用的宿主载体系统，多种适合的转录和翻译成分中的任何一种都可使用。
通过本领域已知任何一种启动子或增强子都可控制多肽或融合蛋白质的表达。可用于控制编码融合蛋白的基因表达的启动子包括但不限于：SV40早期启动子(Bernoist和Chambon，1981，自然290：304-310)，包含在Rous肉瘤病毒的3′长末端重复序列中的启动子(Yamamoto，等1980，细胞22：787-797)，疱疹胸苷激霉启动子(Wagner等1981，美国国家科学院学报78：1441-1445)，金属硫蛋白基因调节序列(Brinster等，1982，自然296：39-42)，四环素(Tet)启动子(Gossen等，1995，美国国家科学院学报89：5547-5551)；原核细胞表达载体如β-内酰胺酶启动子(Villa-Kamaroff等1978，美国国家科学院学报75：3727-3731)，或者tac启动子(DeBoer.等，1983，美国国家科学院学报80：21-25；也见“来自重组细菌的有用蛋白质”，科学的美国人1980，242：74-94)；含有胭脂碱合成酶启动子区的植物表达载体(Herrera等，1981.核酸研究9：2871)和光合作用酶核酮糖二磷酸羧化酶的启动子(Herrerea Estrelle等1984.自然310：115-120)；来自酵母菌或其它真菌的启动子成分如Gal 4启动子，ADC(醇脱氢酶)启动子，PGK(磷酸甘油激酶)启动子、碱性磷酸酶启动子，以及下面的表现出组织特异性并已用于转基因动物的动物转录控制区：在胰腺腺泡细胞内有活性的弹性蛋白酶I基因控制区(Swift等1984，细胞38：639-646；Ornitz等，1986冷泉港Symp.Quant.Biol 50：399-409；MacDonald，1987肝脏学7：425-515)；在胰腺β-细胞内有活性的胰岛素基因控制区(Hanahan.1985，自然315：115-122)；在淋巴样细胞内有活性的免疫球蛋白基因控制区(Grosschedl等1984，细胞38：647-658；Adames等1985，自然318：533-538；Alexander等1987，分子细胞生物学7：1436-1444)：在睾丸细胞、乳房细胞、淋巴样细胞和肥大细胞内有活性的小鼠乳房肿瘤病毒控制区(Leder等，1986，细胞45：485-495)；在肝脏内有活性的白蛋白基因控制区(Pinkert等1987，基因与发育1：268-276)；在肝脏内有活性的α-胎蛋白基因控制区(Krumlanf等1985.分子细胞生物学5：1639-1648)；(Hammer等1987，科学235：53-58)；在肝脏内有活性的α1-抗胰蛋白酶基因控制区(Kelsey等1987，基因与发育1：161-171)，在髓样细胞内有活性的β-珠蛋白基因控制区(Mogram等1985，自然315：338-340，Kollias等1986，细胞46：89-94)；在胞少突神经胶质细胞内有活性的髓鞘质基质蛋白基因控制区(Readhead等1987，细胞48：703-712)；在骨骼肌内有活性的肌球蛋白轻链-2基因控制区(Sani.1985，自然314：283-286)；在神经细胞内有活性的神经元特异性烯醇酶(NSE)(Morelli等1999Gen.Virol.80：571-83)；在神经细胞内有活性的脑来源的神经营养因子(BDNF)基因控制区(Tabuchi等1998，生物化学及生物物理比较研究253：818-823)；在星形细胞内有活性的神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)启动子(Gomes等1999，Brez.医学生物学研究杂志32(5)：619-631；Morelli等1999，Gen.Virol 80：571-83)，以及在下丘脑内有活性的促性腺释放的激素基因控制区(Mason等1986，科学234：1372-1378)。
在特定的实施方案，多肽或融合蛋白的表达是受组成启动子调节。在另一实施方案，多肽或融合蛋白的表达是受可诱导启动子调节。在另一实施方案，多肽或融合蛋白的表达是受组织特异性启动子调节。
在特定的实施方案，所使用的载体含有可操作地连接于多肽或融合蛋白编码核酸的启动子，一个或几个复制起点，以及任选地一个或几个可选择性标志(如抗菌素抗性基因)。
对于哺乳动物宿主细胞，有许多基于病毒的表达系统可被利用。在以腺病毒用作表达载体的情况下，可使多肽或融合蛋白编码序列连接于腺病毒转录/翻译控制复合体，例如晚期启动子和三分裂前导序列。然后通过在体外或体内重组可将这种嵌合基因插入腺病毒基因组。对病毒基因组非必要区(如E1或E3区)的插入，将导致形成可在被感染的宿主内存活并能够表达抗体分子的重组病毒(例如见Logan和Shenk 1984，美国国家科学院学报81：355-359)。为了有效率地翻译被插入融合蛋白编码序列，还可能需要特异性起始信号。这种信号包括ATG起始密码子和邻近的序列。而且，此起始密码子必须处于带有所需要编码读框的时相，以便确保翻译整个插入片段。这些外源性翻译控制信号和起始密码子可以是各种不同来源的，天然的或合成的。通过使其含有适合的转录增强子成分和转录终止子等，可提高表达的效率。(见Bitter等，1987，酶学方法153：51-544)。
借助于三种普通的方法，可以鉴别含有编码多肽或融合蛋白的基因插入片段的表达载体：(a)核酸杂交法，(b)存在或不存在“标记”基因的功能，以及(c)表达被插入的序列。在另一种方法，应用探针通过核酸杂交，可以检测在表达载体内编码多肽或融合蛋白基因的存在，此探针含有分别与插入的编码多肽或融合蛋白的基因同源的序列。在第两种方法，根据载体内存在或不存在由插入编码多肽或融合蛋白的核苷酸序列所引起的某些“标记”基因功能(例如胸苷激酶活性，对抗菌素的抗性，转化的表型，和杆状病毒内闭合体形成等)，可以鉴别和选择出重组载体/宿主系统。例如，如果编码融合蛋白的核苷酸序列被插入载体的标记基因序列中，那么，根据存在此标记基因功能就可以鉴别出含有编码此融合蛋白的基因插入片段的重组体。在第三种方法，通过检测由重组体表达的基因产物(如融合蛋白)，可以鉴别重组表达载体。这种检测可以根据例如，在体外检测系统中此融合蛋白的物理的或功能性的特征，例如与抗生物活性分子抗体的结合。
此外，还可选择能调节被插入序列表达的，或者能以所要求的特定方式修饰或加工处理基因产物的宿主细胞株。存在某些诱导物时，来自某些启动子的表达可以提高，因此，可以控制基因工程融合蛋白的表达。而且，不同的宿主细胞具有用于翻译以及翻译后加工和修饰(如蛋白质的糖基化和磷酸化)的特征性的和特定的机制。可以选择适合的细胞系或宿主系统，以便确保对所表达的外源蛋白质进行所要求的修饰和加工。例如，在细菌系统中的表达将产生非糖基化的产物，而在酵母菌内的表达将产生糖基化产物。可使用真核宿主细胞，这宿主细胞具有用于适当地加工初级转录物，糖基化和磷酸化基因产物的细胞机制。这种哺乳动物宿主细胞包括但不限于：CHO，VERY，BHK，Hela，COS，MDCK，293，3T3，W138，NS0，特别是神经细胞系例如SK-N-AS，SK-N-FI，SK-N-DZ人成神经细胞瘤(Sugimoto等1984国际癌研究杂志73：51-57)，SK-N-SH人成神经细胞瘤(生物化学和生物物理学报1982 704：450-460)，Daoy人小脑成神经管细胞瘤(He等1992，癌研究52：1144-1148)，DBTRG-05MG成神经胶质瘤细胞(Kruse等1992，在体外的细胞发育生物学28A：609-614)，IMR-32人成神经细胞瘤(癌研究1970，30：2110-2118)，1321N1人星型细胞瘤(美国国家科学院学报1977，74：4816)，MOG-G-CCM人星形细胞瘤(英国癌研究杂志1984，49：269)，U87MG人成神经胶质瘤(Olopade等1992，癌研究52：2523-2529)，C6大鼠神经胶质瘤细胞(Benda等1968，科学161：370-371)，神经-2a小鼠成神经细胞瘤(美国国家科学院学报，1970，65：129-136)，NB41A3小鼠成神经细胞瘤(美国国家科学院学报1962，48：1184-1190)，SCP绵羊脉终膜丛(Bolin等1994，病毒学方法杂志48：211-221)，G355-5，PG-4猫正常星形细胞(Haapala等1985，病毒学杂志53：827-833)，Mpf彐貂脑(Trowbridge等1982，在体外18：952-960)，以及正常细胞系例如CTX TNA2大鼠正常大脑皮层(Radany等.1992，美国国家科学院学报89：6467-6471)，如CRL7030和Hs578Bst。而且，不同的载体/宿主表达系统对加工反应可能有不同程度的影响。
为了长时间高产率地产生重组蛋白质，稳定的表达是优选的。例如，可以工程构建稳定地表达多肽或融合蛋白的细胞系。不是使用含有病毒复制起点的表达载体，而足以受适当的表达控制成分(如启动子、增强子、序列、转录终止子和聚腺苷酸化位点等)以及可选择性标记控制的DNA转化宿主细胞。在导入此外源DNA之后，使工程构建的细胞在富含养分的培养基中生长1-2天，然后转换至选择性培养基中。重组质粒中的可选择性标记赋予细胞对选择的抗性，并使细胞能稳定地将此质粒整合进入它们的染色体并生长形成细胞集落，这种集落又可以被克隆并扩展成为细胞系。这种方法可有益地用于工程构建表达可免疫特异性结合于CD2多肽的多肽或融合蛋白的细胞系。这种过程构建的细胞系对筛选和评价某些化合物特别有用，这种化合物能影响可免疫特异性结合于CD2多肽的多肽或融合蛋白的活性。
许多选择系统可被使用，包括但不限于：单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(Wigler等，1977，细胞11：223)，次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶基因(Szybalska和Szybalski，1962.美国国家科学院学报48：2026)，以及腺嘌呤磷酸核糖转移酶基因(Lowy等，1980，细胞22：817)，它们可分别用于tk，hgprt-或aprt细胞。抗代谢物抗性也可以被用作选择如下基因的基础：dhfr赋予对氨甲蝶呤的抗性(Wigler等，1980美国国家科学院学报77：3567；O′Hare等1981，美国国家科学院学报78：1527)，gpt赋予对霉酚酸的抗性(Mulligan和Berg 1981，美国国家科学院学报78-2072)；neo赋予对氨基甙G-418的抗性(Colberre-Garapin等，1981，分子生物学杂志150：1)；以及hygro赋予对潮霉素的抗性(Santerre等，1984，基因，30：147)。
一旦通过重组表达产生了本发明的多肽或融合蛋白，就可借助于本领域已知的用于纯化蛋白质的任何一种方法进行纯化，例如通过色谱(如离子交换色谱，亲和色谱，特别是通过在蛋白A之后对特异性抗原的亲和性，以及尺寸排阻拄色谱)，离心，差示溶解度、或者借助于任何其它的用于纯化蛋白质的标准技术。
5.8.制品
本发明还包括完成了包装和贴商标的药剂制品。本发明提供了一种制品，包括包装材料和包含在此包装材料内的，以适合于对患者给药的形式存在的本发明的药物组合物。特别是，本发明提供了一种制品，包括包装材料和包含在此包装材料内的，以适合于对患者给药的形式存在的本发明药物组合物，其中该药物组合物包含一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，一种或几种不同于整合蛋白αvβ3拮抗剂的预防或治疗药剂，以及药剂学允许的载体。
在特定的实施方案中，该制品包括包装材料和包含在此包装材料内的，以适合于对患者给药的形式存在的药物组合物，其中该药物组合物包含整合蛋白αvβ3拮抗剂，抗炎药剂和药剂学允许的载体。在另一实施方案中，该制品包括包装材料和包含在此包装材料内的，以适合于对患者给药的形式存在的药物组合物，患者优选地是人，而最优选的是患有自身免疫疾病或炎性疾病的人，其中该药物组合物包含整合蛋白αvβ3拮抗剂，免疫调节剂和药剂学允许的载体。
在另一实施方案中，该制品包括包装材料和包含在此包装材料内的，以适合于对患者给药的形式存在的药物组合物，患者优选地是人，而最优选的是患有自身免疫疾病或炎性疾病的人，其中该药物组合物包含整合蛋白αvβ3拮抗剂，CD2结合分子和药剂学允许的载体。在优选的实施方案中，该制品包括包装材料和包含在此包装材料内的，以适合于对人给药的形式存在的药物组合物，人优选地是患有自身免疫疾病或炎性疾病的人，其中该药剂结合物包含VITAXINTM拮抗剂，MEDI-507和药剂学允许的载体。
在另一实施方案中，该制品包括包装材料和包含在此包装材料内的，以适合于对患者给药的形式存在的药物组合物，患者优选地是人，而最优选的是患有自身免疫疾病或炎性疾病的人，其中该药物组合物包含整合蛋白αvβ3拮抗剂，TNF-α拮抗剂和药剂学允许的载体。在优选的实施方案，该制品包括包装材料和包含在此包装材料内的，以适合于对人给药的形式存在的药物组合物，人优选地是患有自身免疫疾病或炎性疾病的人，其中该药物组合物包含整合蛋白αvβ3拮抗剂，ENBRELTM或REMICADETM，以及药剂学允许的载体。
像任何药剂制品一样，本发明制品的包装材料和容器被设计能保护制品在贮存和装运中的稳定性。更具体地说，本发明提供了一种制品，包括包装材料，以及包含在此包装材料内的至少一个单位剂量形式的一种药剂，此包装材料包括例如药盒，小瓶、小管、小药瓶、容器、喷雾器，吹药器，静脉注射袋和药袋等。本发明还提供了一种制品，包括包装材料，以及包含在此包装材料内的至少一个单位剂量形式的每种药剂，此包装材料包括例如药盒，小瓶、小管、小药瓶、容器、喷雾器、吹药器，静脉注射袋和药袋等。本发明进一步提供了一种制品，包括包装材料，以及包含在此包装材料内的至少一个单位剂量形式的每种药剂，此包装材料包括例如药盒、小瓶、小管、小药瓶、容器、喷雾器、吹药器静脉注射袋和药袋等。这种制品包括被密封在适当的容器如玻璃小药瓶或其它容器内的适当的单位剂量形式。在适合于非经肠道给药的剂形情况下，其活性成分是无菌的并适合于作为特定的游离溶液给药。换句话说，本发明包括注射液和冷冻干燥粉剂，二者都是无菌的，后者适合于在临注射之前再配制。按另一种方式，此单位剂量形式也可以是适于口服、透皮、局部或粘膜给药的固体。在选优的实施方案，此单位剂量形式适合于静脉内、肌肉内或皮下给药。因此，本发明包括适合于各种给药途径的溶液，优选地是无菌溶液。
本发明的制品还可包括关于药物组合物的用途或用药方法的说明书，说明书还可包括其它的信息资料：告戒医生、技术人员和病人如何适当地预防或治疗所述的疾病或异常。换句话说，该制品包括方法指南，指示或建议给药方案，包括但不限于具体的剂量、监测措施、总淋巴细胞和T一细胞计数，以及其它监测信息。
本发明还提供在信息资料中指出可借助于本发明的方法减少或避免的付作用，此信息资料被封装在用于防止、治疗或缓解与炎性疾病或自身免疫疾病有关的一种或几种症状的制品内。可通过本发明的方法减少或避免的付作用包括但不限于生命体征异常(发烧、心动过速，心动过缓，高血压、低血压)，血液学病征(贫血，淋巴细胞减少，白细胞减少，血小板减少)，头痛、寒傈、眩晕、恶心、无力、背痛、肠痛(肠部压迫感)，腹泻、肌肉痛、疼痛、瘙痒、牛皮癣、鼻炎、出汗、注射部位反应以及血管舒张。因为按照本发明使用的某些预防或治疗药剂具有免疫抑制作用，所以，长时间的免疫抑制可能增加感染的危险：包括可能的感染，长时间和持续的免疫抑制还可能导致增加发生某些类型癌症的危险性。
并且，信息资料中还可以指出，外源性蛋白质也可能导致变态反应，包括过敏症或胞嘧啶释放综合征，此信息资料被封装在用于防止、治疗或缓解与自身免疫疾病或炎性疾病有关的一种或几种症状的制品内。该信息资料应该指出，变态反应可能只表现出轻微的瘙痒皮疹，或者它们也可能是严重的如红皮病，Stevens-Johnson综合征，脉管炎或过敏症。该信息资料还应该指出，过敏性反应(过敏症)是严重的，并且偶尔可能是致命的超敏感性反应。当任何一种外源性蛋白质被注射进入体内时就可能发生包括过敏症的变态反应。变态反应的范围可包括从轻微的表现如荨麻疹或皮疹，到致死性的全身反应。过敏性反应在暴露(给药)后立即发生，通常是在10分之内。病人可能经受感觉异常，低血压，咽喉水肿、精神状态改变，面部或咽部血管性水肿、呼吸道梗阻，支气管痉挛、荨麻疹、瘙痒、血清病、关节炎、变态反应性肾炎、肾小球肾炎、颞关节炎，或嗜酸性细胞增多。
该信息资料还可以指出，细胞因子释放综合征是一种短暂地与给予某些激活性抗-T细胞抗体有关的急性临床综合征。已将细胞因子释放综合征的原因归咎于由激活的淋巴细胞或单抗细胞释放的细胞因子。细胞因子释放综合征的临床表现包括从比较频繁报告的轻度自我限制性的，流感状病症，到比较少报告的严重的威胁生命的休克状反应，这种反应可能包括严重的心血管症状，肺部症状和中枢神经系统症状。这种综合征典型地在给药后大约30-60分钟开始(但也可能较迟发生)、可能持续几小时。这种复合性症状的出现率和严重性通常是第一次给药时最高。随着每次继续给药，该综合征的出现率和严重性趋于减少。增加给药剂量或间断后恢复用药可导致综合征重新出现。如上面所述，本发明包括几种治疗或预防性方法，借助于这种方法可避免或减少在此所述的一种或几种付作用。
提供下面的实施例仅作为对本发明的说明，而不是对本发明范围的限制。
6.实施例：对类风湿性关节炎病人的治疗
设计逐渐提高剂量的I期临床研究方案，检测商标包装的VITAXINTM对活动性类风湿性关节炎病人的药物动力学和安全性。对包括手、腕、膝或踝关节在内存在至少2个肿胀关节的定义为活动性类风湿性关节炎。这些类风湿性关节炎病人目前正接受氨甲蝶呤的治疗，补充或者未补充给予抗风湿药剂如etanercept，Infliximab，抑氨磺胺吡啶或羟基氯喹。对目前正接受以非类固醇抗炎药或强的松(≤10mg/日)稳定剂量治疗的病人，允许他们继续这些药物治疗。对于目前正接受以环孢多肽A、来氟米特或金盐治疗的病人，在开始给予VITAXINTM之前至少4周停止给予这些药物。
对病人iv给药一次，4周之后每周以相同的剂量重复iv给药，持续12周对病人进行分析。VITAXINTM的安全性和疾病活动性的可能改变.在持续26周iv给药后也进行了评价。对不同组的病人进行相似的治疗和评估，但接受1mg/kg、2mg/kg、4mg/kg或8mg/kg不同的剂量。
VITAXINTM被配制成5mg/ml和10mg/ml用于iv注射。需要一种80mg/ml的配方用于反复皮下注射给药。
通过计数触痛和肿胀的关节，病人和医生对疼痛和疾病的活动性进行总体记分，以及ESR/CRP，对疾病活动性的改变进行评价。通过对手、腕和脚的X-射线定量记分(Sharp法)，检测关节结构损害的进展情况。应用健康评价询问(HAQ)评价功能状态的改变，并且以SF-36评价生命质量的改变。
可按照1999年6月24日提交申请的美国专利序列号09/339,922中公开的方法制备和配制VITAXINTTM，在此整体引入此专利文献作为参考。
本发明并不限制在这些例证性实施方案的范围之内，它们只是为了说明本发明的某些单独方面。其实，除了在此所述的内容之外，本发明的各种修改形式，根据前面的描述对于本领域的技术人员将是显而易见的。打算将这些修改形式归入所附权利要求的范围之内。
将在此引证的所有专利，专利申请和非专利文献，以相同的程度整体被引入作为参考，好像每个单独的专利，专利申请或非专利文献被特别地单独指出在此被引入作为参考一样。
                      序列表
                      序列表
<110>免疫医疗公司
<120>通过给予整合蛋白αvβ3拮抗剂并与其它预防或治疗药剂配合来
     预防或者治疗炎性疾病或自身免疫疾病的方法
<130>10271-053-228
<150>US 60/273,098
<151>2001-03-02
<150>US 60/316,321
<151>2001-08-31
<160>17
<170>Patent In version 3.1
<210>1
<211>5
<212>PRT
<213>小鼠(Mus sp.)
<400>1
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<210>2
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<212>PRT
<213>小鼠
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<213>小鼠
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<210>4
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<213>小鼠
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<211>11
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<213>小鼠
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<210>6
<211>9
<212>PRT
<213>小鼠
<400>6
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1               5
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<211>351
<212>DNA
<213>小鼠
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(351)
<223>
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Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
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tcc cat aga ctc tcc tgt gca gcc tct gga ttc acc ttc agt agc tat       96
Ser His Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
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gac atg tct tgg gtt cgc cag gct ccg ggc aag ggt ctg gag tgg gtc      144
Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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gca aaa gtt agt agt ggt ggt ggt agc acc atc ata tta gac act gtg      192
Ala Lys Val Ser Ser Gly Gly Gly Ser Thr Ile Ile Leu Asp Thr Val
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ctg caa atg aac tct ctg aga gcc gag gac aca gcc gtg tat tac tgt      288
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gca aga cat aac tac ggc agt ttt gct tac tgg ggc caa ggg act aca      336
Ala Arg His Asn Tyr Gly Ser Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr
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Val Thr Val Ser Ser
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<210>8
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<212>PRT
<213>小鼠
<400>8
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Ser His Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
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<210>9
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<213>小鼠
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(321)
<223>
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gag att gtg cta act cag tct cca gcc acc ctg tct ctc agc cca gga        48
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
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cta cac tgg tat caa caa agg cct ggt caa gcc cca agg ctt ctc atc       144
Leu His Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
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agt gga tca ggg aca gat ttc acc ctc act atc tcc agt ctg gag cct       240
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65                  70                  75                  80
gaa gat ttt gca gtc tat tac tgt caa cag agt ggc agc tgg cct cac       288
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acg ttc gga ggg ggg acc aag gtg gaa att aag                           321
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<212>PRT
<213>小鼠
<400>10
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
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<211>5
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1               5
<210>12
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<213>小鼠
<400>12
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Lys
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<213>小鼠
<400>13
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1               5
<210>14
<211>16
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<213>小鼠
<400>14
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Leu Val Ser Lys Leu Glu Ser
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<213>小鼠
<400>16
Met Gln Phe Thr His Tyr Pro Tyr Thr
1               5
<210>17
<211>347
<212>PRT
<213>小鼠
<400>17
Met Val Ala Gly Ser Asp Ala Gly Arg Ala Leu Gly Val Leu Ser Val
1               5                   10                  15
Val Cys Leu Leu His Cys Phe Gly Phe Ile Ser Cys Phe Ser Gln Gln
            20                  25                  30
Ile Tyr Gly Val Val Tyr Gly Asn Val Thr Phe His Val Pro Ser Asn
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Val Pro Leu Lys Glu Val Leu Trp Lys Lys Gln Lys Asp Lys Val Ala
    50                  55                  60
Glu Leu Glu Asn Ser Glu Phe Arg Ala Phe Ser Ser Phe Lys Asn Arg
65                  70                  75                  80
Val Tyr Leu Asp Thr Val Ser Gly Ser Leu Thr Ile Tyr Asn Leu Thr
                85                  90                  95
Ser Ser Asp Glu Asp Glu Tyr Glu Met Glu Ser Pro Asn Ile Thr Asp
            100                 105                 110
Thr Met Lys Phe Phe Leu Tyr Val Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro
        115                 120                 125
Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro
    130                 135                 140
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
145                 150                 155                 160
Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn
                165                 170                 175
Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg
            180                 185                 190
Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val
        195                 200                 205
Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser
    210                 215                 220
Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys
225                 230                 235                 240
Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp
                245                 250                 255

Claims (77)

1.一种治疗或缓解炎性疾病或自身免疫疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种免疫调节剂。
2.一种治疗或缓解炎性疾病或自身免疫疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM或其抗原结合片段，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种免疫调节剂。
3.一种治疗或缓解炎性疾病或自身免疫疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种抗炎药剂。
4.一种治疗或缓解炎性疾病或自身免疫疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM或其抗原结合片段，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种抗炎药剂。
5.一种治疗或缓解炎性疾病或自身免疫疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种TNF-α拮抗剂。
6.一种治疗或缓解炎性疾病或自身免疫疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM或其抗原结合片段，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种TNF-α拮抗剂。
7.一种治疗或缓解炎性疾病或自身免疫疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种CD2结合分子。
8.一种治疗或缓解炎性疾病或自身免疫疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM或其抗原结合片段，以及预防或治疗有效剂量的一种或几种CD2结合分子。
9.权利要求1或2的方法，其中至少一种免疫调节剂是有机小分子。
10.权利要求1或2的方法，其中至少一种免疫调节剂是T细胞受体调节剂或者细胞因子受体调节剂。
11.权利要求9的方法，其中的有机小分子是氨甲蝶呤，来氟米特，环磷酰胺，环孢多肽A，FK506，霉酚酸莫非替克，雷帕霉素，咪唑立宾，脱氧精胍菌素，布喹那，malononitriloamide，类固醇或皮质类固醇。
12.权利要求10的方法，其中的T细胞受体调节剂是可免疫特异性结合于T细胞受体的抗体、肽或融合蛋白。
13.权利要求12的方法，其中可免疫特异性结合于T-细胞受体的抗体是单克隆抗体或其抗原结合片段。
14.权利要求13的方法，其中的单克隆抗体是人或人源化的单克隆抗体。
15.权利要求13的方法，其中的单克隆抗体是抗-CD2单克隆抗体，抗-CD4单克隆抗体，抗-CD8单克隆抗体，或抗-CD40单克隆抗体。
16.权利要求12的方法，其中的融合蛋白是CTLA4-Ig。
17.权利要求10的方法，其中的细胞因子受体调节剂是可免疫特异性结合于细胞因子受体的细胞因子，细胞因子片段，融合蛋白或抗体。
18.权利要求10的方法，其中的细胞因子受体调节剂是可免疫特异性结合于细胞因子的肽、多肽、融合蛋白或抗体。
19.权利要求17的方法，其中可免疫特异性结合于细胞因子受体的抗体是单克隆抗体或其抗原结合片段。
20.权利要求19的方法，其中的单克隆抗体是人或人源化的单克隆抗体。
21.权利要求17的方法，其中的抗体是抗-IL-2受体抗体和抗-IL-12受体抗体。
22.权利要求18的方法，其中可免疫特异性结合于细胞因子的抗体是单克隆抗体或其抗原结合片段。
23.权利要求22的方法，其中的单克隆抗体是人或人源化的单克隆抗体。
24.权利要求18的方法，其中的抗体是抗-TNF-α抗体，抗-IL-1β抗体，或抗-IL-6抗体。
25.权利要求17的方法，其中的细胞因子是IL-4或IL-10。
26.权利要求18的方法，其中的多肽是可免疫特异性结合于细胞因子的细胞因子受体的片段。
27.权利要求26的方法，其中该片段是TNF-α受体的细胞外功能区的一部分。
28.权利要求3或4的方法，其中至少一种抗炎药剂是非类固醇抗炎药物。
29.权利要求28的方法，其中的非类固醇抗炎药物是阿斯匹林、布洛芬、双氯芬酸、萘丁美酮、萘普生、或酮洛芬。
30.权利要求5或6的方法，其中的TNF-α拮抗剂是ENBRELTM或REMICADETM。
31.权利要求5或6的方法，还进一步包括对患者给予预防或治疗有效剂量的氨甲蝶呤。
32.权利要求7或8的方法，其中的CD2结合分子是可免疫特异性结合于CD2多肽的肽、多肽、融合蛋白或抗体。
33.权利要求32的方法，其中的融合蛋白是LFA-3TIP。
34.权利要求7或8的方法，还进一步包括对患者给予预防或治疗有效剂量的非类固醇抗炎药物。
35.权利要求34的方法，其中的非类固醇抗炎药物是阿斯匹林、布洛芬、双氯芬酸、萘丁美酮、萘普生、或酮洛芬。
36.权利要求7或8的方法，还进一步包括对患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种不同于CD2结合分子的免疫调节剂。
37.一种治疗或缓解炎性疾病或自身免疫疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种整合蛋白αvβ3拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的MEDI-507或其抗原结合片段。
38.一种治疗或缓解炎性疾病或自身免疫疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM或其抗原结合片段，以及预防或治疗有效剂量的MEDI-507或其抗原结合片段。
39.权利要求37或38的方法，还进一步包括对患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种TNF-α拮抗剂。
40.权利要求37或38的方法，进一步包括对患者给予预防或治疗有效剂量的氨甲蝶呤。
41.权利要求37或38的方法，进一步包括对患者给予预防或治疗有效剂量的一种或几种TNF-α拮抗剂，以及预防或治疗有效剂量的氨甲蝶呤。
42.权利要求37或38的方法，进一步包括对患者给予预防或治疗有效剂量的非类固醇抗炎药物。
43.权利要求39的方法，其中至少一种TNF-α拮抗剂是ENBRELTM或REMICADETM。
44.权利要求1，3，5，7或37之一的方法，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是抗-整合蛋白αvβ3抗体。
45.权利要求44的方法，其中的抗-整合蛋白αvβ3抗体是单克隆抗体或其抗原结合片段。
46.权利要求45的方法，其中的单克隆抗体是人或人源化的单克隆抗体。
47.权利要求1、2、3、4、5、6、7、8、37或38之一的方法，其中的炎性疾病是哮喘、脑炎、炎性肠病、慢性阻塞性肺疾病(COPD)，关节炎、或过敏症。
48.权利要求1、2、3、4、7、8、37或3 8之一的方法，其中的自身免疫疾病是类风湿性关节炎，牛皮癣关节炎，强直性脊柱炎，莱特综合征，炎性肠病相关的关节炎，未分化的脊柱关节病，牛皮癣，或未分化的关节病。
49.权利要求1、2、3、4、5、6、7、8、37或38之一的方法，其中的患者是人。
50.权利要求5、6、7、8、37或38之一的方法，其中的患者是用一种或几种TNF-α拮抗剂治疗的病人，或者是以前已经用这种桔抗剂治疗的病人。
51.权利要求5、6、7、8、37或38之一的方法，其中的患者是用一种或几种TNF-α拮抗剂和氨甲蝶呤治疗的，或者是以前已经用这两种药剂治疗的病人。
52.权利要求5、6、7、8、37或38之一的方法，其中的患者是目前未用TNF-α拮抗剂或氨甲蝶呤治疗的病人。
53.权利要求5、6、7、8、37或38之一的方法，其中的患者是难以用TNF-α拮抗剂、非类固醇抗炎药剂或氨甲蝶呤单独治疗的炎性疾病病人。
54.权利要求2、4、6、8或38之一的方法，其中是以VITAXINTM或其抗原结合片段对患者口服、局部、静脉注射，肌肉注射或皮下注射给药。
55.权利要求37或38的方法，其中是以MEDI-507或其抗原结合片段对患者口服、局部、静脉注射、肌肉注射或皮下注射给药。
56.权利要求1、3、5、7或37之一的方法，其中的整合蛋白αvβ3拮抗剂不是有机小分子。
57.权利要求1、3、5、7或37之一的方法，其中至少一种整合蛋白αvβ3拮抗剂是有机小分子。
58.权利要求7或8的方法，其中的CD2结合分子不是有机小分子。
59.权利要求7或8的方法，其中至少一种CD2结合分子是有机小分子。
60.一种治疗或缓解炎性疾病或自身免疫疾病或者它们的一种或几种症状的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予预防或治疗有效剂量的VITAXINTM或其抗原结合片段，预防或治疗有效剂量的REMICADETM或ENBRELTM，以及预防或治疗有效剂量的氨甲蝶呤。
61.权利要求60的方法，其中VITAXINTM或其抗原结合片段对患者的给药剂量是大约0.1mg/kg-10mg/kg。
62.权利要求60的方法，其中REMICADETM对患者的给药剂量是大约0.1mg/kg-10mg/kg。
63.权利要求60的方法，其中ENBRELTM对患者的给药剂量是大约0.01mg/kg-10mg/kg。
64.权利要求60的方法，其中氨甲蝶呤对患者的给药剂量是大约0.01mg/kg-3mg/kg。
65.一种药物组合物，包含整合蛋白αvβ3拮抗剂、TNF-α拮抗剂、以及药剂学允许的载体。
66.一种药物组合物，包含整合蛋白αvβ3拮抗剂、CD2结合分子，以及药剂学允许的载体。
67.权利要求65的组合物，进一步包含氨甲蝶呤。
68.权利要求65或67的组合物，其中的整合蛋白αvβ3拮抗剂是VITAXINTM或其抗原结合片段。
69.权利要求65的组合物，其中的TNF-α拮抗剂是REMICADETM或ENBRELTM。
70.权利要求66的组合物，其中的CD2结合分子是LFA3TIP，MEDI-507，或者MEDI-507的抗原结合片段。
71.权利要求65或66的组合物，其中的整合蛋白αvβ3拮抗剂不是有机小分子。
72.权利要求65或66的组合物，其中的整合蛋白αvβ3拮抗剂是有机小分子。
73.权利要求66的组合物，其中的CD2结合分子不是有机小分子。
74.权利要求66的组合物，其中的CD2结合分子是有机小分子。
75.一种药物组合物，包含VITAXINTM或其抗原结合片段，MEDI-507或其抗原结合片段，以及药剂学允许的载体。
76.一种制品，包括包装材料，以及包含在此包装材料内的，以适合于对人给药的形式存在的药物组合物，其中该药物组合物包含VITAXINTM或其抗原结合片段，MEDI-507或其抗原结合片段，以及药剂学允许的载体。
77.权利要求76的制品，进一步包括包含在此包装材料内的说明书，它提供了用于预防或治疗炎性疾病或自身免疫疾病的建议给药方案。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102827281A (zh) * 2012-08-03 2012-12-19 无锡傲锐东源生物科技有限公司 抗cd2蛋白单克隆抗体及其用途

Families Citing this family (57)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6303321B1 (en) 1999-02-11 2001-10-16 North Shore-Long Island Jewish Research Institute Methods for diagnosing sepsis
EP1113497A3 (en) * 1999-12-29 2006-01-25 Texas Instruments Incorporated Semiconductor package with conductor impedance selected during assembly
US7304034B2 (en) 2001-05-15 2007-12-04 The Feinstein Institute For Medical Research Use of HMGB fragments as anti-inflammatory agents
EP1549141A4 (en) 2002-09-27 2008-06-25 Bioenvision Inc METHOD AND COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF AUTOIMMUNE DISEASES USING CLOFARABIN
WO2004028463A2 (en) * 2002-09-27 2004-04-08 Bioenvision, Inc. Methods and compositions for the treatment of lupus using clofarabine
AU2004207002A1 (en) * 2003-01-30 2004-08-12 Medimmune, Inc. Uses of integrin alphavbeta3 antagonists
US20080025989A1 (en) 2003-02-20 2008-01-31 Seattle Genetics, Inc. Anti-cd70 antibody-drug conjugates and their use for the treatment of cancer and immune disorders
US7662387B2 (en) 2003-02-20 2010-02-16 Seattle Genetics Anti-cd70 antibody-drug conjugates and their use for the treatment of cancer and immune disorders
KR20120035234A (ko) * 2003-04-11 2012-04-13 메디뮨 엘엘씨 재조합 ｉｌ?９ 항체 및 그의 용도
US7696169B2 (en) 2003-06-06 2010-04-13 The Feinstein Institute For Medical Research Inhibitors of the interaction between HMGB polypeptides and toll-like receptor 2 as anti-inflammatory agents
EP1668035A2 (en) 2003-09-11 2006-06-14 Critical Therapeutics, Inc. Monoclonal antibodies against hmgb1
KR101191068B1 (ko) * 2003-10-01 2012-10-15 메르크 파텐트 게엠베하 항섬유제로서의 알파ｖ베타3 및 알파ｖ베타6 인테그린길항제
US20050095246A1 (en) * 2003-10-24 2005-05-05 Medtronic, Inc. Techniques to treat neurological disorders by attenuating the production of pro-inflammatory mediators
WO2005058961A2 (en) 2003-12-12 2005-06-30 Amgen Inc. Antibodies specific for human galanin, and uses thereof
MY162179A (en) 2004-04-01 2017-05-31 Elan Pharm Inc Steroid sparing agents and methods of using same
US7691379B2 (en) 2004-04-12 2010-04-06 Medimmune, Llc Anti-IL-9 antibody formulations
US7351739B2 (en) 2004-04-30 2008-04-01 Wellgen, Inc. Bioactive compounds and methods of uses thereof
WO2005112970A2 (en) 2004-05-12 2005-12-01 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Use of gelsolin to treat infections
US7470521B2 (en) 2004-07-20 2008-12-30 Critical Therapeutics, Inc. RAGE protein derivatives
WO2006034334A2 (en) * 2004-09-21 2006-03-30 University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education Peptide analogs capable of enhancing stimulation of a glioma-specific ctl response
CA2583208C (en) * 2004-10-15 2015-08-25 Seattle Genetics, Inc. Anti-cd70 antibody and its use for the treatment and prevention of cancer and immune disorders
US8337838B2 (en) * 2004-10-15 2012-12-25 Seattle Genetics, Inc. Anti-CD70 antibody and its use for the treatment and prevention of cancer and immune disorders
BRPI0518205A (pt) * 2004-10-19 2008-11-04 Aventis Pharma Inc uso de (4'-trifluorometilfenil)-amida de ácido (z)-2-ciano-3-hidróxi-but-2-enóico para o tratamento de doença inflamatória do intestino
US20060253100A1 (en) 2004-10-22 2006-11-09 Medtronic, Inc. Systems and Methods to Treat Pain Locally
EP2422811A2 (en) 2004-10-27 2012-02-29 MedImmune, LLC Modulation of antibody specificity by tailoring the affinity to cognate antigens
ES2856881T3 (es) 2005-04-11 2021-09-28 Horizon Pharma Rheumatology Llc Formas variantes de urato oxidasa y su uso
GB0512225D0 (en) * 2005-06-16 2005-07-27 Univ Sheffield Immunoglobulin molecules
EP1899376A2 (en) 2005-06-16 2008-03-19 The Feinstein Institute for Medical Research Antibodies against hmgb1 and fragments thereof
EP1893647A2 (en) 2005-06-23 2008-03-05 MedImmune, Inc. Antibody formulations having optimized aggregation and fragmentation profiles
EP1948235B1 (en) 2005-11-01 2013-08-28 AbbVie Biotechnology Ltd Methods for determining efficacy of adalimumab in subjects having ankylosing spondylitis using ctx-ii and mmp3 as biomarkers
PL3279663T3 (pl) * 2006-03-15 2022-01-10 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Zastosowanie gelsoliny do diagnozowania i leczenia chorób zapalnych
WO2007143174A2 (en) * 2006-06-01 2007-12-13 The Regents Of The University Of California Combination therapy method and formulation
EP2043603A4 (en) 2006-07-11 2010-10-27 Arubor Corp PREVENTION AND THERAPY OF RHINOSINUSITIS WITH PROINFLAMMATORY CYTOKINHERMERS
DE102006033837A1 (de) * 2006-07-21 2008-01-31 Medac Gesellschaft für klinische Spezialpräparate m.b.H Konzentrierte Methotrexat-Lösungen
MX2009001110A (es) * 2006-08-03 2009-05-11 Vaccinex Inc Anticuerpos monoclonales anti-il-6 y usos de los mismos.
HUE048024T2 (hu) 2006-08-10 2020-05-28 Roy C Levitt Anakinra bronchiolitis obliterans szindróma kezelésében való alkalmazásra
EP3207941B3 (en) 2006-09-07 2020-08-19 Scott & White Memorial Hospital Methods and compositions based on diphtheria toxin-interleukin-3 conjugates
DK2250280T3 (en) 2008-01-25 2015-03-09 Gen Hospital Corp THERAPEUTIC USES OF gelsolin in renal failure
USRE48948E1 (en) 2008-04-18 2022-03-01 Warsaw Orthopedic, Inc. Clonidine compounds in a biodegradable polymer
WO2010042433A1 (en) 2008-10-06 2010-04-15 Bristol-Myers Squibb Company Combination of cd137 antibody and ctla-4 antibody for the treatment of proliferative diseases
US20100239632A1 (en) 2009-03-23 2010-09-23 Warsaw Orthopedic, Inc. Drug depots for treatment of pain and inflammation in sinus and nasal cavities or cardiac tissue
AU2010265964B2 (en) 2009-06-25 2014-09-18 Horizon Therapeutics Usa, Inc. Methods and kits for predicting infusion reaction risk and antibody-mediated loss of response by monitoring serum uric acid during PEGylated uricase therapy
US20110150856A1 (en) * 2009-12-21 2011-06-23 Sarah Bacus Compositions and methods for treatment of vitiligo
EP2608799B1 (en) 2010-08-24 2018-12-12 University of Pittsburgh - Of the Commonwealth System of Higher Education Interleukin-13 receptor alpha 2 peptide-based brain cancer vaccines
CN103429620B (zh) 2010-11-05 2018-03-06 酵活有限公司 在Fc结构域中具有突变的稳定异源二聚的抗体设计
PT2773671T (pt) 2011-11-04 2021-12-14 Zymeworks Inc Geração de anticorpo heterodimérico estável com mutações no domínio fc
ES2699817T3 (es) 2012-03-19 2019-02-12 Stemline Therapeutics Inc Métodos para tratar y controlar el estado de un cáncer
AU2013258834B2 (en) 2012-05-10 2017-09-07 Zymeworks Bc Inc. Heteromultimer constructs of immunoglobulin heavy chains with mutations in the Fc domain
EP4321218A3 (en) 2012-05-16 2024-04-24 Stemline Therapeutics, Inc. Cancer stem cell targeted cancer vaccines
US20160324944A1 (en) * 2013-12-29 2016-11-10 Franco Venanzi Methods and compositions relating to p62/SQSTM1 for the treatment and prevention of inflammation-associated diseases
US20160066601A1 (en) * 2014-09-06 2016-03-10 Ashley G. Herr Edible 3d printer filament
US20200237881A1 (en) * 2019-01-30 2020-07-30 Horizon Pharma Rheumatology Llc Reducing immunogenicity to pegloticase
EP3573658A4 (en) 2017-01-30 2021-07-21 Janssen Biotech, Inc. ANTI-TNF ANTIBODIES, COMPOSITIONS, AND METHODS FOR TREATMENT OF ACTIVE PSORIATIC ARTHRITIS
WO2020198731A2 (en) 2019-03-28 2020-10-01 Danisco Us Inc Engineered antibodies
US20230071196A1 (en) * 2019-05-21 2023-03-09 Novartis Ag Variant cd58 domains and uses thereof
CN113874073A (zh) 2019-05-23 2021-12-31 詹森生物科技公司 用针对IL-23和TNFα的抗体的联合疗法治疗炎性肠病的方法
US20230203191A1 (en) 2020-03-30 2023-06-29 Danisco Us Inc Engineered antibodies

Family Cites Families (67)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4658019A (en) * 1979-04-26 1987-04-14 Ortho Pharmaceutical Corporation Complement-fixing monoclonal antibody to human T cells
US5851526A (en) * 1985-04-19 1998-12-22 Ludwig Institute For Cancer Research Methods of treating colon cancer utilizing tumor-specific antibodies
US5017691A (en) * 1986-07-03 1991-05-21 Schering Corporation Mammalian interleukin-4
DE3631229A1 (de) * 1986-09-13 1988-03-24 Basf Ag Monoklonale antikoerper gegen humanen tumornekrosefaktor (tnf) und deren verwendung
US5306620A (en) * 1987-07-08 1994-04-26 The Scripps Research Institute Antibodies that bind to a ligand-induced binding site on integrin and induce integrin activation
US5204445A (en) * 1988-10-03 1993-04-20 The Scripps Research Institute Peptides and antibodies that inhibit integrin-ligand binding
US5149780A (en) * 1988-10-03 1992-09-22 The Scripps Research Institute Peptides and antibodies that inhibit integrin-ligand binding
US5360716A (en) * 1988-10-24 1994-11-01 Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. Human tumor necrosis factor αspecific monoclonal antibody and method for detecting human tumor necrosis factor α
US5223395A (en) * 1988-12-01 1993-06-29 Centocor, Inc. Immunometric assays for tumor necrosis factor-alpha and methods for preventing the loss of biological activity of tumor necrosis factor-alpha in biological samples
US5147638A (en) * 1988-12-30 1992-09-15 Oklahoma Medical Research Foundation Inhibition of tumor growth by blockade of the protein C system
US5498694A (en) * 1989-05-25 1996-03-12 La Jolla Cancer Research Foundation Peptides of the cytoplasmic domain of integrin
US5644034A (en) * 1989-08-07 1997-07-01 Peptide Technology Ltd. Tumour necrosis factor binding ligands
US5959087A (en) * 1989-08-07 1999-09-28 Peptide Technology, Ltd. Tumour necrosis factor binding ligands
EP0417563B1 (de) * 1989-09-12 2000-07-05 F. Hoffmann-La Roche Ag TNF-bindende Proteine
US5196511A (en) * 1989-12-01 1993-03-23 The Scripps Research Institute Peptides and antibodies that inhibit integrin-ligand binding
US5262520A (en) * 1989-12-01 1993-11-16 The Scripps Research Institute Peptides and antibodies that inhibit integrin-ligand binding
US5136021A (en) * 1990-02-27 1992-08-04 Health Research, Inc. TNF-inhibitory protein and a method of production
DE4006269A1 (de) * 1990-02-28 1991-08-29 Max Planck Gesellschaft Antikoerper gegen den tumor-nekrosefaktor-rezeptor
US5830678A (en) * 1990-10-30 1998-11-03 Fred Hutchinson Cancer Research Center Method for identifying a target peptide that modulates the binding of epinectin ligand to integrin receptors
US5994510A (en) * 1990-12-21 1999-11-30 Celltech Therapeutics Limited Recombinant antibodies specific for TNFα
GB9028123D0 (en) * 1990-12-28 1991-02-13 Erba Carlo Spa Monoclonal antibodies against human tumor necrosis factor alpha
JPH06506195A (ja) * 1991-01-14 1994-07-14 ニューヨーク　ユニバシテイ サイトカイン誘導タンパク質、ｔｓｇ−１４、そのためのｄｎａコード化およびその使用
DE69219913T2 (de) * 1991-01-15 1997-09-11 Bayer Ag Ergänzung von Oberflächenrezeptoren
MX9203138A (es) * 1991-03-12 1992-09-01 Biogen Inc Dominio de enlace cd2-de antigeno 3 (lfa-3) asociado con funcion linfositos.
US5547853A (en) * 1991-03-12 1996-08-20 Biogen, Inc. CD2-binding domain of lymphocyte function associated antigen 3
US5698195A (en) * 1991-03-18 1997-12-16 New York University Medical Center Methods of treating rheumatoid arthritis using chimeric anti-TNF antibodies
US5656272A (en) * 1991-03-18 1997-08-12 New York University Medical Center Methods of treating TNF-α-mediated Crohn's disease using chimeric anti-TNF antibodies
US5919452A (en) * 1991-03-18 1999-07-06 New York University Methods of treating TNFα-mediated disease using chimeric anti-TNF antibodies
US5310874A (en) * 1991-05-03 1994-05-10 The Scripps Research Institute Integrin α subunit cytoplasmic domain polypeptides and antibodies
US5334380A (en) * 1991-09-27 1994-08-02 Board Of Regents, The University Of Texas System Anti-endotoxin, interleukin-1 receptor antagonist and anti-tumor necrosis factor antibody with arginine-free formulations for the treatment of hypotension
US6162432A (en) * 1991-10-07 2000-12-19 Biogen, Inc. Method of prophylaxis or treatment of antigen presenting cell driven skin conditions using inhibitors of the CD2/LFA-3 interaction
US5578704A (en) * 1992-04-03 1996-11-26 Genentech, Inc. Antibody to osteoclast alphavbeta3 ntegrin
US5478725A (en) * 1992-06-12 1995-12-26 University Of Pennsylvania αv β3 integrin as a predictor of endometriosis
US6270766B1 (en) * 1992-10-08 2001-08-07 The Kennedy Institute Of Rheumatology Anti-TNF antibodies and methotrexate in the treatment of arthritis and crohn's disease
AU5152293A (en) * 1992-10-08 1994-05-09 Kennedy Institute Of Rheumatology, The Treatment of autoimmune and inflammatory disorders
US5705481A (en) * 1992-11-06 1998-01-06 Merck Patent Gesellschaft Mit Beschrankter Haftung Cyclopeptides
US5951983A (en) * 1993-03-05 1999-09-14 Universite Catholique De Louvain Methods of inhibiting T cell mediated immune responses with humanized LO-CD2A-specific antibodies
US5817311A (en) * 1993-03-05 1998-10-06 Universite Catholique De Louvain Methods of inhibiting T-cell medicated immune responses with LO-CD2a-specific antibodies
US5730979A (en) * 1993-03-05 1998-03-24 Universite Catholique Delouvain LO-CD2a antibody and uses thereof for inhibiting T cell activation and proliferation
DE4310643A1 (de) * 1993-04-01 1994-10-06 Merck Patent Gmbh Cyclische Adhäsionsinhibitoren
US5523209A (en) * 1994-03-14 1996-06-04 The Scripps Research Institute Methods for identifying inhibitors of integrin activation
US5753230A (en) * 1994-03-18 1998-05-19 The Scripps Research Institute Methods and compositions useful for inhibition of angiogenesis
US5770565A (en) * 1994-04-13 1998-06-23 La Jolla Cancer Research Center Peptides for reducing or inhibiting bone resorption
DE4415310A1 (de) * 1994-04-30 1995-11-02 Merck Patent Gmbh Cyclopeptide
JPH10503179A (ja) * 1994-06-24 1998-03-24 イミュネックス・コーポレーション 放出制御性ポリペプチド組成物および炎症性腸疾患の治療方法
DK0719859T3 (da) * 1994-12-20 2003-10-20 Merck Patent Gmbh Anti-alfa V-integrin monoklonalt antistof
US5780426A (en) * 1995-06-07 1998-07-14 Ixsys, Incorporated Fivemer cyclic peptide inhibitors of diseases involving αv β3
US5767071A (en) * 1995-06-07 1998-06-16 Ixsys Incorporated Sevenmer cyclic peptide inhibitors of diseases involving αv β3
US5817750A (en) * 1995-08-28 1998-10-06 La Jolla Cancer Research Foundation Structural mimics of RGD-binding sites
US5817457A (en) * 1996-02-07 1998-10-06 Ma Bioservices, Inc. Methods and kits for detecting viral reverse transcriptase activity in a sample using an acidic pH or an elevated temperature
US6130231A (en) * 1996-11-27 2000-10-10 Dupont Pharmaceuticals Integrin receptor antagonists
US6590079B2 (en) * 1997-01-30 2003-07-08 Ixsys, Incorporated Anti-αvβ3 recombinant human antibodies, nucleic acids encoding same
US20010011125A1 (en) * 1997-01-30 2001-08-02 William D. Huse Anti-alpha v beta 3 recombinant human antibodies, nucleic acids encoding same and methods of use
US6596850B1 (en) * 1998-01-30 2003-07-22 Ixsys, Incorporated Anti-αv3β3 recombinant human antibodies, nucleic acids encoding same
US5968741A (en) * 1997-04-11 1999-10-19 Cedars-Sinai Medical Center Methods of diagnosing a medically resistant clinical subtype of ulcerative colitis
AU6954398A (en) * 1997-04-11 1998-11-11 G.D. Searle & Co. Antagonistic anti-avb3 integrin antibodies
US6171787B1 (en) * 1997-06-26 2001-01-09 Abbott Laboratories Member of the TNF family useful for treatment and diagnosis of disease
US6096707A (en) * 1997-07-11 2000-08-01 Biotie Therapies Ltd. Integrin binding peptide and use thereof
WO1999026945A1 (en) * 1997-11-26 1999-06-03 Du Pont Pharmaceuticals Company 1,3,4-THIADIAZOLES AND 1,3,4-OXADIAZOLES AS αvβ3 ANTAGONISTS
US6048861A (en) * 1997-12-17 2000-04-11 Merck & Co., Inc. Integrin receptor antagonists
WO2000009503A1 (en) * 1998-08-13 2000-02-24 Merck & Co., Inc. Integrin receptor antagonists
US6160099A (en) * 1998-11-24 2000-12-12 Jonak; Zdenka Ludmila Anti-human αv β3 and αv β5 antibodies
SI1156823T1 (sl) * 1999-02-12 2009-02-28 Scripps Research Inst Postopki za zdravljenje tumorjev in metastaz z uporabo kombinacije antiangiogenikov in imunoterapij
JP2001029067A (ja) * 1999-05-14 2001-02-06 Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd 抗原特異的細胞傷害抑制性細胞の誘導方法
US6531580B1 (en) * 1999-06-24 2003-03-11 Ixsys, Inc. Anti-αvβ3 recombinant human antibodies and nucleic acids encoding same
ES2299436T3 (es) * 1999-10-06 2008-06-01 ABBOTT GMBH &amp; CO. KG Composicion que comprende un inhibidor de tnf-alfa y un antagonista de receptor de integrina alfavbeta3.
ATE403437T1 (de) * 1999-12-14 2008-08-15 Genentech Inc Lfa-1 antagonisten und tnf-alpha antagonisten zur behandlung von rheumatoiden arthritis

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102827281A (zh) * 2012-08-03 2012-12-19 无锡傲锐东源生物科技有限公司 抗cd2蛋白单克隆抗体及其用途
CN102827281B (zh) * 2012-08-03 2014-05-28 无锡傲锐东源生物科技有限公司 抗cd2蛋白单克隆抗体及其用途

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