CN1476436A

CN1476436A - 用作hiv蛋白酶抑制剂的新化合物

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Publication number: CN1476436A
Application number: CNA018192890A
Authority: CN
Inventors: Ja; J·A·马丁; �Ф; S·雷德肖; S·斯沃洛; G·J·索马斯
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG
Priority date: 2000-11-22
Filing date: 2001-11-12
Publication date: 2004-02-18
Also published as: NO20032290L; BG107839A; NO20032290D0; RU2003117468A; BR0115566A; MXPA03004534A; RU2265016C2; GT200100233A; EP1339692A1; AR031763A1; CZ20031667A3; PA8533401A1; WO2002042277A1; CA2428459A1; SK7602003A3; GB0028483D0; HUP0303007A2; MA26966A1; KR20030060953A; AU2954602A

Abstract

本发明公开了通式(I)的化合物及其可药用盐：其中R¹是H、羟基或NHR²，其中R²是H、烷基、链烯基、链炔基、芳基烷基、杂环基烷基、环烷基、烷基羰基、环烷基羰基、芳基羰基、杂环基羰基、芳基烷基羰基、杂环基烷基羰基、烷氧基羰基、芳基烷氧基炭基、杂环基烷氧基羰基、芳基、杂环基、磺酰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂环基磺酰基或式(A)的基团：其中x是o或s，并且R⁷和R⁸彼此独立地是H、烷基、芳基、杂环基、芳基烷基、杂环基烷基，或者R⁷和R⁸与它们所连接的氮原子一起形成任选地含有另外的杂原子的饱和环，或者是基团(B)：其中当n=1时，Y表示N，R⁹是H或烷基且R¹⁰是H、烷基、芳基烷基、杂环基烷基、芳基、杂环基，或者R⁹和R¹⁰与它们所连接的杂原子一起形成杂环，R¹¹和R¹²彼此独立地是H或烷基，或者R¹¹和R¹²与它们所连接的碳原子一起形成环，R³、R⁴彼此独立地是烷基或者与它们所连接的碳原子一起形成碳环，R⁵是烷基、芳基烷基、杂环基烷基或者R⁴和R⁵与它们所连接的碳和硫原子一起形成杂环，并且R⁶是烷基、芳基烷基、杂环基烷基、烷氧基烷基、羟基烷基、氨基烷基、氟烷基，并且R¹³是H或者是无机或有机酯的残基，并且R¹⁵是芳基，条件是如果R³、R⁴和R⁵是甲基、R⁶是叔丁基、R¹³是H且R¹⁵是苯基，则R²不是苄氧基羰基并且不是2－喹啉羰基。式(I)化合物是HIV天冬氨酸蛋白酶的强效抑制剂并因此可用于治疗与HIV有关的疾病。

Description

用作HIV蛋白酶抑制剂的新化合物

本发明涉及新的HIV蛋白酶抑制剂或其前药、其生产方法、药物组合物以及所述化合物在医药中的用途。具体地讲，该化合物是羟乙基胺三肽模拟物，它可作为HIV天冬氨酸蛋白酶(HIV复制生命周期中所必需的一种酶)的抑制剂。因此，本发明的化合物可有利地用于治疗HIV感染，无论是单独使用还是与其它HIV病毒复制抑制剂或药物增效剂例如细胞色素P450抑制剂联合使用。

人免疫缺陷病毒HIV是获得性免疫缺陷综合征(艾滋病)的病因，该疾病是一种以免疫系统的破坏、特别是CD4⁺T细胞的破坏为特征的疾病，该疾病患者很容易发生机会感染。HIV感染还与前期艾滋病相关征候群(ARC，一种表现出持继的全身性淋巴结病、发烧和体重降低等症状的综合征)有关。

与其它逆转录病毒一样，HIV基因组编码称为gag和gag-pol的蛋白质前体，这些蛋白质前体由病毒蛋白酶加工形成蛋白酶、逆转录酶(RT)、内切核酸酶/整合酶以及病毒核心的成熟结构蛋白。中断该过程可以阻止正常的传染性病毒的产生。对于通过抑制病毒编码的酶来控制HIV，已进行了大量的尝试。具体地讲，针对抑制HIV蛋白酶已进行了很多尝试，并且HIV蛋白酶抑制剂(PI)沙奎那韦、利托那韦(ritonavir)、奈非那韦(nelfinavir)、茚地那韦(indinavir)、安普那韦(amprenavir)和罗匹那韦(lopinavir)已获准用于治疗HIV感染。由于在单一药物治疗过程中抗药性病毒的出现，目前的临床实践是将这些蛋白酶抑制剂用于联合疗法，特别是与RT抑制剂联合使用。

抗药性病毒的出现可以归因于由HIV逆转录酶引入的错误以及高的病毒复制速率。导致抗药性病毒的突变是自发的，但在可能导致选择压力的治疗开始前是无法检测到的，而此压力将造成比野生型群落有复制优势的病毒出现。就HIV蛋白酶抑制而言，导致抑制剂结合减弱而又保持足够的底物转换的突变的累积可以导致抗药性。虽然可以通过联合使用药物使抗药性的出现有所延迟，但仍需要更有效的对PI抗药性和多重PI抗药性病毒具有活性的HIV蛋白酶抑制剂。

因此，本发明的目的是提供新的化合物，该化合物是HIV天冬氨酸蛋白酶的强效抑制剂，因此表现出有效治疗HIV相关疾病的潜力。本发明的化合物还表现出对常用的蛋白酶抑制剂有抗药性的病毒的复制有抑制潜力。

该目的可以通过通式I的新化合物及其可药用盐来实现：

其中R¹是H、羟基或NHR²其中R²是H、烷基、链烯基、链炔基、芳基烷基、杂环基烷基、环烷基烷基羰基、环烷基羰基、芳基羰基、杂环基羰基、杂环基烷基羰基、芳基烷基羰基、烷氧基羰基、芳基烷氧基羰基、杂环基烷氧基羰基、芳基杂环基磺酰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂环基磺酰基或下式的基团

其中X是O或S，并且R⁷和R⁸彼此独立地是H、烷基、芳基、杂环基、芳基烷基、杂环基烷基或者R⁷和R⁸与它们所连接的氮原子一起形成任选地还含有别的杂原子的饱和的环，或者是如下基团：

其中当n＝0时，Y表示O或S且R¹⁰是H、烷基、芳基烷基、杂环基烷基、芳基、杂环基，或者当n＝1时，Y表示N，R⁹是H或烷基且R¹⁰是H、烷基、芳基烷基、杂环基烷基、芳基、杂环基，或者R⁹和R¹⁰与它们所连接的杂原子一起形成杂环，R¹¹和R¹²彼此独立地是H或烷基，或者R¹¹和R¹²与它们所连接的碳原子一起形成环，R³、R⁴彼此独立地是烷基或与它们所连接的碳原子一起形成碳环，R⁵是烷基、芳基烷基、杂环基烷基，或者R⁴和R⁵与它们所连接的碳和硫原子一起形成杂环，R⁶是烷基、芳基烷基、杂环基烷基、烷氧基烷基、羟基烷基、氨基烷基、氟烷基，R¹³是H或无机或有机酯的残基，R¹⁵是芳基，条件是如果R³、R⁴和R⁵是甲基，则R⁶是叔丁基，R¹³是H，如果R¹⁵是苯基，则R²不是苄氧基羰基并且不是2-喹啉羰基。

术语烷基定义了含有1至6个碳原子、优选1至4个碳原子的未取代的或取代的直链或支链烷基链。

术语链烯基定义了含有2至6个碳原子、优选2至4个碳原子的未取代的或取代的直链或支链链烯基链。

术语链炔基定义了含有2至6个碳原子、优选2至4个碳原子的未取代的或取代的直链或支链链炔基链。

因此，烷基优选表示甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基和叔丁基。

因此，链烯基优选是乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、异丙烯基和丁烯基及其异构体。

因此，链炔基优选是乙炔基、丙炔基及其异构体和丁炔基及其异构体。

适当的烷基、链烯基或链炔基的取代基可以选自如下基团中的一种或多种：芳基、杂环基、羧基、氰基、烷氧基、环烷基氧基、芳氧基、杂环基氧基、羟基、烷基羰基、环烷基羰基、芳基羰基、杂环基羰基、烷氧基羰基、环烷基氧基羰基、芳氧基羰基、杂环基氧基羰基、氨基羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、环烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、杂环基氨基羰基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、链烯基氨基、链炔基氨基、环烷基氨基、芳基氨基、杂环基氨基、烷基羰基氨基、二烷基羰基氨基、环烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、杂环基羰基氨基、烷氧基羰基氨基、环烷基氧基羰基氨基、芳氧基羰基氨基、杂环基氧基羰基氨基、烷基氨基羰基氨基、二烷基氨基羰基氨基、环烷基氨基羰基氨基、芳基氨基羰基氨基、杂环基氨基羰基氨基、烷基磺酰基氨基、环烷基磺酰基氨基、芳基磺酰基氨基、杂环基磺酰基氨基、硝基、烷基磺酰基、环烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂环基磺酰基、巯基、烷硫基、环烷基硫基、芳硫基、杂环基硫基或卤素。

在上面的存在NH基团的所有情况下，游离氢还可以被替代，优选用低级烷基替代。

环烷基是指含有3至8个碳原子、优选3至6个碳原子的未取代的或取代的环烷基基团，例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基或者金刚烷基，其还可以与任选地取代的饱和、部分不饱和或芳香族的单环、双环或三环杂环或碳环例如苯基苯并稠合(benz-fuse)。

术语芳基是指取代或未取代的苯基和萘基，两者还可以任选地与取代或未取代的饱和、部分不饱和或芳香族的单环、双环或三环杂环或碳环例如环己基或环戊基苯并稠合。

术语杂环基是指取代或未取代的饱和、部分不饱和或芳香族的单环、双环或三环杂环，该杂环含有一个或多个选自氮、氧和硫的杂原子并且还可以与取代或未取代的饱和、部分不饱和或芳香族的单环、双环或三环碳环或杂环苯并稠合。

适当的杂环的例子是噁唑基、异噁唑基、呋喃基、四氢呋喃基、1，3-二氧杂环戊基、二氢吡喃基、噻吩基、吡嗪基、异噻唑基、异喹啉基、吲哚基、吲唑基、喹啉基、二氢噁唑基、嘧啶基、苯并呋喃基、四唑基、吡咯烷酮基、(N-氧化)-吡啶基、吡咯基、三唑基例如1，2，4-三唑基、吡唑基、苯并三唑基、哌啶基、吗啉基、噻唑基、吡啶基、二氢噻唑基、咪唑烷基、吡唑啉基、苯并噻吩基、哌嗪基、咪唑基、噻二唑基例如1，2，3-噻二唑基和苯并噻唑基。

适当的环烷基、芳基、杂环基的取代基可以选自称作烷基的取代基，但是，烷基、链烯基和链炔基也是可以加入到选择中的取代基。

术语卤素表示氟、氯、溴和碘。

术语无机酯的残基表示式-SO₂OH的硫酸酯或式-PO(OH)₂的磷酸酯。

术语有机酯的残基定义为酰基基团，正如欧洲专利申请EP A1 0 594540中关于基团R₁的描述。

定义在R¹³中的有机酯的残基适宜是下式的基团：其中R¹⁴是烷基、链烯基、环烷基、芳基、芳基烷基杂环基、基团-CH₂(CH₂CH₂O)_mCH₃，其中m是0至10的整数，或者是氨基酸的羰基连接基团。

除了烷基和链烯基链可以含有最多20个碳原子以外，术语烷基、链烯基、环烷基、芳基、杂环基的意义与以上所述的相同。

术语“氨基酸的羰基连接基团”表示连接到下式的羰基上的、选自例如甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、丝氨酸、谷氨酰胺等的天然或非天然氨基酸的基团：

侧链中存在的任何官能团(即活性基团)都可以用本领域公知的保护基进行保护，例如见″Protective Groups in Organic Synthesis″，2Ed.，T.W.Greene和P.G.M.Wuts，John Wiley & Sons，New York，N.Y.，1991中所述。例如，氨基可以通过叔丁氧基羰基(BOC)、甲酰基、三苯甲基、苄氧羰基(Z)、9-芴基甲基氧基羰基(FMOC)、三氟乙酰基、2-(联苯基)异丙氧基羰基或异冰片基氧基羰基或者以苯二酰亚氨基的形式进行保护；或者羟基可以通过叔丁基二甲基甲硅烷基、四氢吡喃基、4-甲氧基苄基或苄基或乙酸酯等进行保护；或者羧基可以以酯例如甲基或苄基或叔丁基酯的形式进行保护。保护基可以保留在最终化合物中，或者任选地通过本领域已知的技术除去。

本发明的化合物的特征在于具有通式所示的固定立体化学性的核心结构。

本发明的化合物中的残基R¹至R¹⁵可以含有一个或多个不对称碳原子并因此可以以单一对映体、外消旋体和外消旋混合物、单个非对映体和非对映体混合物的形式出现。此外，当本发明的化合物含有烯属双键时，可以具有(E)或(Z)构型。另外，所有的手性中心可以是R或S构型。这些化合物的所有这些同分异构形式都包括在本发明内。

呈酸性的式(I)化合物可以与碱诸如碱金属氢氧化物例如氢氧化钠、氢氧化钾等、碱土金属氢氧化物例如氢氧化钙、氢氧化钡、氢氧化镁等、与有机碱例如N-乙基哌啶、二苄基胺等形成可药用盐。那些呈碱性的式(I)化合物可以与无机酸例如氢卤酸诸如盐酸和氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；以及与有机酸例如乙酸、酒石酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、苹果酸、水杨酸、柠檬酸、甲磺酸、对甲苯磺酸等形成可药用盐。所述盐的形成和分离可以按照本领域已知的方法进行。

优选的式(I)化合物是具有式II的化合物：

其中R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R¹³和R¹⁵如上所述。

在另一个优选的实施方案中，R³、R⁴和R⁵是甲基，R⁶是叔丁基或羟基叔丁基，R¹⁵是苯基。

在另一个优选的实施方案中，R²是烷基羰基、环烷基羰基、芳基羰基、杂环基羰基、杂环基烷基羰基或下式的基团其中当n＝0时，Y表示O或S，并且R¹⁰是烷基、芳基烷基、杂环基烷基、芳基、杂环基，或者当n＝1时，Y表示N，R⁹是H且R¹⁰是烷基、芳基烷基、杂环基烷基、芳基、杂环基，并且其中R¹¹和R¹²彼此独立地是H。

另外优选的是其中的R³、R⁴和R⁵是甲基、R⁶是叔丁基、R¹⁵是苯基且R²是烷基羰基、环烷基羰基、芳基羰基、杂环基羰基、杂环基烷基羰基或下式基团的化合物：

其中当n＝0时，Y表示O或S，并且R¹⁰是烷基，芳基烷基、杂环基烷基、芳基、杂环基或者当n＝1时，Y表示N，R⁹是H且R¹⁰是烷基、芳基烷基、杂环基烷基、芳基、杂环基，并且其中的R¹¹和R¹²彼此独立地是H。

另外优选的是其中的R³、R⁴、R⁵是甲基、R⁶是叔丁基、R¹⁵是苯基且R²是芳基羰基、杂环基羰基或下式基团的化合物，其中Y表示O、NH、S、CH₂且R¹⁰是芳基、杂环基。

在另一个优选的实施方案中，R¹³是H。

将其中R¹³是H的式I或II化合物的例子列举在如下表A中。表A

在另一个优选的实施方案中，R¹³是-SO₂OH、-PO(OH)₂或如下基团：其中R¹⁴是烷基、链烯基、环烷基、芳基、芳基烷基、杂环基、基团-CH₂(CH₂CH₂O)_mCH₃，其中m是0至10的整数，或者是氨基酸的羰基连接基团。

其中R¹³不是H的式I或II化合物的例子列举在如下表B中。表B

其它优选的式(I)化合物是具有式X的化合物：其中R³、R⁴、R⁵、R⁶、R¹³和R¹⁵如上所述并且R²⁰是杂环基。

更优选的式(X)化合物是其中的R³、R⁴和R⁵是甲基、R⁶是叔丁基、R¹³是H且R¹⁵是苯基的化合物。

该优选的式(X)化合物的例子如下。

·N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-[2-(3-吡啶基氧基)乙酰基]-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺

·N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-[2-(2-吡啶基氧基)乙酰基]L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺

·N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-[2-(6-甲基-3-吡啶基氧基)乙酰基]-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺

·N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-[2-(3-吡嗪基氧基)乙酰基]-L-缬氨酰基]氨基] 4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺

·2-(2-羟基-3-{3-甲磺酰基-3-甲基-2-[2-(嘧啶-2-基氧基)-乙酰基氨基]丁酰基氨基}-4-苯基-丁基)-十氢-异喹啉-3-甲酸叔丁基酰胺

最优选的化合物是：

N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-[2-(3-吡啶基氧基)乙酰基]-L-缬氨酰基]氨基]4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺及其可药用盐和酯。

本发明提供的羟乙基胺化合物是HIV天冬氨酸蛋白酶(HIV病毒复制生命周期中所必需的一种酶)的强效抑制剂或其前药。因此，它们是用于治疗HIV介导的疾病的治疗活性物质，并因此可以单独地或与其它治疗活性剂联合用作药物。

本发明提供的羟乙基胺化合物尤其可用于对抗HIV疾病状态诸如艾滋病。

其中R¹是NHR²的本发明式I化合物可以从式III化合物制备：

其中R³、R⁴、R⁵、R⁶和R¹⁵如上所述。

a)对于其中R¹是NHR²的式I化合物，其中R²是烷基羰基、环烷基羰基、芳基羰基、杂环基羰基、杂环基烷基羰基、芳基烷基羰基、烷氧基羰基、芳基烷氧基羰基、杂环基烷氧基羰基、磺酰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂环基磺酰基或下式的基团：其中R⁹、R¹⁰、R¹¹和R¹²如上所述，使式III化合物与适当的酸衍生物诸如酰卤、混合酸酐等发生反应。

或者，当n＝1，Y表示N，R⁹是H且R¹⁰是烷基、芳基烷基、杂环基烷基时，使式III化合物与N-保护的甘氨酸反应、去保护并在该方法的实施方案b)所述的还原条件下与醛或酮反应。

b)对于其中R¹是NHR²且R²是烷基、链烯基、链炔基、芳基烷基、杂环基烷基、环烷基的式I化合物，在还原条件下使式III化合物与醛或酮反应。

c)对于其中R¹是NHR²、且R²是下式的基团的式I化合物：

其中X、R⁷和R⁸具有前面所述的相同含义，使式III化合物与本领域所述用于形成脲和硫脲的试剂发生反应。

d)对于其中R¹是NHR²、且R²是杂环的式I化合物，按照本领域所述的形成杂环的方法使式III化合物发生反应。例如，在其中的R²是噻唑的情况下，通过利用方案1的Hansch合成将式III化合物转化成硫脲IV，然后使IV与需要的α-卤代酮或α-卤代醛发生反应。方案1

在所述的方案中，R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶和R¹⁵如前所述；R¹⁶是H、烷基、烷氧基羰基、芳基、杂环基；R¹⁷是H、烷基、芳基、杂环基；R¹⁸与R¹⁶相同并且R¹⁹与R¹⁷相同。Hal是选自氯、溴和碘的卤素原子。

e)对于其中R¹是NHR²、且R²是芳基的式I化合物，使式III化合物与芳基卤在本领域已知的过渡金属催化条件下反应。或者使化合物V去保护得到的氨基酸(方案3)与芳基卤在类似条件下反应，然后与式VI化合物偶合(方案3)。

f)对于其中R⁶是烷基、芳基烷基、杂环基烷基、烷氧基烷基、羟基烷基、氨基烷基、氟烷基的式I化合物，将式IVa化合物(方案2)与适当的胺在Lewis酸催化的条件下反应。方案2 在所述的方案中，R¹、R³、R⁴、R⁵、R⁶和R¹⁵如前所述。

g)对于其中R¹³是-SO₂OH、-PO(OH)₂或下式基团的式I化合物：其中R¹⁴如前所述，按照本领域所述的形成酯的方法，使其中R¹³是H的式I化合物与适当的活性酸衍生物或(氨基酸情况下)其氨基保护形式发生反应。

按照该方法的实施方案a)，能生成烷基羰基、环烷基羰基、芳基羰基、杂环基羰基、芳基烷基羰基、杂环基烷基羰基、烷氧基羰基、芳基烷氧基羰基、条环基烷氧基羰基、磺酰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基或杂环基磺酰基胺或下式的基团的适宜试剂是相应的酸或其反应性衍生物诸如相应的酰基卤(例如酰基氯)、酸酐、混合酸酐、活性酯等，其中R⁹、R¹⁰、R¹¹和R¹²如前所述。

式III与上述试剂的反应按照本领域所述的方法，例如关于有机化学的教科书诸如J.March(1992)″Advanced Organic Chemistry：Reactions，Mechanisms and Structure″，第4版，John Wiley & Sons中描述的方法进行。因此，当使用酸时，反应优选在缩合剂诸如N-乙基-N′(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDAC.HCl)存在下在羟基苯并三唑(HOBT)存在下进行。该反应适宜在惰性有机溶剂诸如四氢呋喃(THF)、二氯甲烷或二甲基甲酰胺中在-10℃至+25℃进行。当使用反应性衍生物时，反应可以在惰性溶剂诸如二氯甲烷或四氢呋喃中在有机碱(例如N-乙基吗啉、三乙基胺等)存在下在-10℃至25℃进行。

按照该方法的实施方案b)，式III化合物与醛或酮的反应可以按照本领域所述的醛和酮的还原氨基化方法进行。例如，可以查阅关于有机化学的教科书诸如J.March(1992)″Advanced Organic Chemistry：Reactions，Mechanisms and Structure″，第4版，John Wiley & Sons。因此，例如，可以按照A.F.Abdel-Magid等；Tetrahedron Letters 1990，31，5595所述的方法，适宜地利用三乙酰氧基硼氢化钠在惰性卤代溶剂诸如二氯乙烷中在乙酸存在下进行反应。

按照该方法的实施方案c)，反应可以按照本领域已知的方法，例如关于有机化学的教科书诸如J.March(1992)″Advanced Organic Chemistry：Reactions，Mechanisms and Structure″，第4版，John Wiley & Sons中描述的方法进行。因此，例如对于其中X是O的化合物，反应可以通过式III化合物与氯甲酸对硝基苯基酯在无机碱诸如碳酸氢钠存在下的反应、然后通过与胺R⁷R⁸NH在有机碱诸如三乙胺存在下的反应来进行，其中R⁷和R⁸具有前面给出的含义。(例如，参见N.Choy等人.Org.Prep.Proced.Int.1996，28(2)，173-7)。反应适宜在惰性极性溶剂诸如乙腈中在0℃至25℃进行。当X是O或S且R⁷或R⁸中的一个是H时，反应适宜通过式III化合物与异氰酸酯(R⁷N＝C＝O或R⁸N＝C＝O)或异硫氰酸酯(R⁷N＝C＝S或R⁸N＝C＝S)的反应按照本领域所述的方法进行。

按照该方法的实施方案d)，反应可以按照关于杂环化学的教科书诸如T.L.Gilchrist(1992)″Heterocyclic Chemistry″，第2版，John Wiley和Sons中所述的方法进行。例如当R²是噻唑时，反应可以通过在适当的溶剂诸如烷醇(例如乙醇)中加热化合物IV和α-卤代羰基化合物的混合物来进行。化合物IV可以从化合物III按照已知方法，例如通过与异硫氰酸苯甲酰基酯在回流丙酮中反应、然后通过用无机碱诸如碳酸钾在极性有机溶剂和水的混合物中水解来简单地制备。(例如，参见N.M.Olken等，J.Med.Chem.1992，35，1137)。

按照该方法的实施方案e)，氨基酸(通过去保护衍生自式V化合物)与芳基卤例如溴苯的反应可以在铜盐例如碘化铜存在下在二甲基乙酰胺中进行。例如，参见D.Ma等，J.Amer.Chem.Soc 1998，120，12467。

按照该方法的实施方案f)，式IVa化合物与胺R⁶NH₂的反应可以利用本领域所述的方法、例如利用衍生自胺的试剂和铝衍生的Lewis酸例如三甲基铝在室温下在惰性溶剂诸如二氯甲烷或甲苯中进行。(例如，参见S.M.Weinreb等人，Tetrahedron Letters 1977，4171)。

按照该方法的实施方案g)，反应可以按照本领域已知的用于形成酯的方法进行，例如参见关于有机化学的教科书诸如J.March(1992)″Advanced Organic Chemistry：Reactions，Mechanisms and Structure″，第4版，John Wiley & Sons。例如反应适宜在室温下利用羧酸衍生物和肽偶联剂诸如EDAC.HCl在惰性溶剂诸如二氯甲烷中在催化剂4-二甲基氨基吡啶存在下进行。或者，可以在惰性溶剂中在催化剂吡啶和4-二甲基氨基吡啶存在下在0℃至25℃下使用酰卤。

在实施方案a-e中用作原料的式III化合物或者是已知的，或者可以按照方案3制备。因此，式V化合物与式VI化合物的反应可以按照肽化学中已知的方法进行以得到式VII化合物(参见J.Jones(1994)，″TheChemical Synthesis of Peptides″，Oxford University Press)。本文中所用的术语“氨基保护基”(Prot)是指在肽化学中使用的基团诸如叔丁氧基羰基(BOC)或9-芴基甲基氧基羰基(FMOC)。对于该反应，优选的氨基保护基(Prot)是9-芴基甲基氧基羰基。该反应优选通过式V化合物与氯甲酸酯(例如氯甲酸异丁基酯)在有机碱诸如N-乙基吗啉存在下反应生成随后与式VI化合物反应的混合酸酐来进行。该反应适宜在惰性溶剂诸如醚(例如二乙基醚、四氢呋喃等)或脂肪族卤代溶剂(例如二氯甲烷)中在低温下、适当地在约-10℃至5℃下进行。式VII化合物生成式III化合物的转化利用肽化学中使氨基酸的氨基去保护的已知方法进行。例如当氨基保护基是FMOC时，反应适宜通过式VII化合物与哌啶在二甲基甲酰胺或二氯甲烷中在室温下的反应来进行。方案3 在所述的方案中，R³、R⁴、R⁵、R⁶和R¹⁵的含义如前所述。

其中R³和R⁴是甲基的式V化合物可以按照方案4从青霉胺制备。方案4 在所述的方案中，R⁵如前所述。

这样，通过L-青霉胺与烷基卤R⁵X(其中R⁵具有前面给出的含义且X是卤素(例如溴))在无机碱诸如碳酸钾存在下的反应、然后与引入氨基酸保护基的试剂(例如FMOCONSu或BOC₂O)的反应生成了式VIII化合物。反应可以在室温下在水和有机溶剂优选二噁烷组成的混合溶剂中进行。按照已知方法优选通过与Oxone的反应(K.S.Webb，Tetrahedron Lett.1994，35(21)，3457-60)将式VIII化合物氧化成式Va化合物。

其它的式V化合物可以通过类似途径从本领域所述的青霉胺类似物制备。

式VI化合物可以按照本领域所述的已知方法例如EP 432695 A2制备。

其中R¹是羟基的式I化合物可以按照本领域所述的已知方法，例如A.N.Cook等人；J.Chem.Soc.1949，1022中的方法制备。例如，可以按照以上所述的方法进行氨基酸V的去保护、随后的重氮化、水解以及与式VI化合物的偶合，从而得到其中的R¹是羟基的式I化合物。

其中的R¹是H的式I化合物可以从式VI化合物和式IX化合物(方案5)按照与已描述的方法相类似的方式制备。式IX化合物可以从适当的丙烯酸和硫醇按照本领域所述的并概括在方案5中的方法制备(例如，参见G.Pattenden等人，J.Chem.Soc.，Perkin Trans.1，1992，(10)，1215-21)。方案5

在所述的方案中，R³、R⁴和R⁵如前所述。

在式V、VI、IX的原料及其反应性衍生物不是已知化合物或已知化合物的类似物的情况下，它们可以按照与已知化合物相类似的方式或者按照以下实施例的描述或者通过其类似方法制备。此外，实施方案a-g中所用的试剂通常是已知化合物。

引入下式基团所需的试剂是相应的羧酸或其活化的衍生物，其中R⁹、R¹⁰、R¹¹和R¹²如前所述，所述的羧酸或其衍生物本身是已知的化合物或者很容易通过与已知化合物类似的方法制得。例如，当n＝0，Y表示O或S且R¹⁰是芳基或杂环基时，所述试剂可以通过将适宜的醇(例如3-羟基吡啶)与溴乙酸叔丁酯在碱性条件下(例如氢化钠于二甲基甲酰胺中或碳酸钾于丙酮中)反应然后进行酸催化的脱保护(例如盐酸于乙醚中，氢溴酸于乙酸中或三氟乙酸于二氯甲烷中)来制备。类似地，当n＝1且Y表示N时，所述试剂可以通过类似的方法制备，其中用胺R⁹R¹⁰NH代替醇并且不加入碱。或者，可将甘氨酸叔丁酯用醛或酮在以上方法实施方案b)中描述的条件的类似条件下进行还原胺化，然后对羧基进行酸催化的脱保护(优选用HBr的乙酸溶液)。试验方法： HIV蛋白酶抑制试验

HIV蛋白酶抑制活性用Matayoshi等人的方法[Matayoshi E.D.等，(1990).Science.247.954-958]的改变形式进行评估。

粗品HIV-1蛋白酶从大肠杆菌pPTΔN制备。使培养物在30℃下、在添加了0.2％酪蛋白氨基酸、100μg/ml氨苄青霉素和25μg/ml硫胺素的M9培养基中生长直至OD₆₀₀＝0.5-0.6，然后使温度上升至42℃以诱导蛋白酶的表达。1.5小时后，收集细胞并将细胞沉积物于-70℃下保存备用。

通过将细胞在弗氏压碎器中破碎然后用30％饱和度的硫酸铵使酶沉淀来制备蛋白酶。

该试验基于分子内的荧光能量转移，其中使用猝灭的产荧光底物DABCYL-Ser.Gln.Asn.Tyr.Pro.Ile.Val.Gln.-EDANS，它的肽序列来自HIV-1蛋白酶的天然多肽加工位点之一。

将肽底物溶于光谱级二甲基亚砜(DMSO)得到500μM的储备溶液。将抑制剂溶于1∶9 DMSO：0.1％吐温20水溶液的混合物得到比所需的最终浓度浓20倍的抑制剂浓溶液。试验缓冲液含有0.1M乙酸钠pH4.7，8mMEDTA，0.2M NaCl。

将10μl HIV-1蛋白酶在1∶1 0.1％吐温：试验缓冲液的混合物中稀释(将浓度调整到能产生约20％的底物转换)然后加入到含有455μl试验缓冲液、25μl抑制剂溶液、10μl底物溶液的混合物中。

将试管在37℃下保温2小时，然后通过加入500μl 2∶1 DMSO：50mMTricine pH8.5的混合物终止反应。在荧光分光光度计上测定荧光，激发光波长λ＝340nm，发射光波长λ＝492nm。抗病毒测定方法

抗-HIV的抗病毒活性通过Pauwels等人的方法{Pauwels等人，1988，J Virol Methods 20：309-321}的改进形式来评价。该方法基于化合物保护HIV-感染的类T淋巴母细胞(MT4细胞)防止其发生感染所介导的细胞死亡的能力。测定的终点按培养物的细胞生存力被保留50％时的化合物的浓度(‘50％抑制浓度’，IC₅₀)来计算。培养物的细胞生存力通过可溶性黄色3-[4，5-二甲基噻唑-2-基]-2，5-二苯基四氮唑溴化物(MTT)的摄取及其向紫色的不溶性甲盐的还原来确定。溶解后，用分光光度法测量甲产物的量。

准备对数生长期的MT4细胞并用HIV-HXB2的野生型或定点突变株克隆以每个细胞约0.0001病毒感染单位的感染复数以200-500μl的总体积感染总共2×10⁶个细胞。将细胞与病毒在37℃下培养1小时，然后在0.01M磷酸缓冲盐水(pH7.2)中洗涤，然后重新悬浮在培养基中并与系列稀释的试验化合物一起培养。使用的培养基是不含酚红但补充有青霉素、链霉素、L-谷氨酰胺和10％胎牛血清的RPMI 1640(GM10)。

制备2mM试验化合物的二甲基亚砜(DMSO)溶液。重复4次，在GM10中制备4份平行的2-倍系列稀释液并将50μl放置在96-孔板中使其最终的浓度范围为625-1.22nm。然后将50l GM10和3.5×10⁴感染的细胞加到各孔中。也制备了不含细胞(空白)、含未感染的细胞(100％生存力；4个重复)和含有被感染细胞但不含化合物(病毒介导的细胞死亡的总数；4个重复)的对照培养物。然后将培养物在37℃、5％CO₂的潮湿空气中培养5天。

在0.01M磷酸缓冲盐水，pH7.2中制备5mg/mL MTT的新鲜溶液并向各个培养物中加入20微升。将培养物如上所述进一步培养2小时。通过上下抽吸进行混合并加入170微升在酸化的异丙醇中的Triton X-100(10％v/v在1∶250浓HCl/异丙醇混合物中的Triton X-100)，上下抽吸再次混合培养物。通过进一步混合使甲沉淀完全溶解后，在540nm和690nm波长处(690nm的读数被用作针对各孔之间伪差的空白值)测定培养物的吸光度(OD)。由下列方程式计算各个处理过的培养物的保护百分数：

然后通过将保护百分数对log₁₀药物浓度绘图得到IC₅₀值。

本发明化合物的IC₅₀通常在1nM至10000nM之间，优选在1nM至60nM的范围内。

一些代表性的活性数据如下表9中所示。表9

实施例号	酶抑制IC₅₀(nM)	抗病毒IC₅₀(nM)
实施例号	酶抑制IC₅₀(nM)	抗病毒IC₅₀(nM)	3	0.6	17
4	2.8	14	3	0.6	17
4	2.8	14	7	2.3	21
16	1.0	12	7	2.3	21
16	1.0	12	28	1.0	21
40	1.4	19	28	1.0	21
40	1.4	19	92	4.0	33
93	0.5	8	92	4.0	33
93	0.5	8	95	61.0	250
106	10.7	60	95	61.0	250
106	10.7	60	112	7.5	94
138	7.8	65	112	7.5	94
138	7.8	65	152	1.2	17
154	0.5	16	152	1.2	17
154	0.5	16	168	0.5	16
170	1.0	13	168	0.5	16

酶抑制IC₅₀值向上舍入到小数点后1位，抗病毒IC₅₀值向上舍入到最接近的整数。

本发明的化合物及其可药用酸加成盐可以例如以药物制剂的形式用作药物。药物制剂可以例如以片剂、包衣片、糖锭剂、硬和软明胶胶囊、溶液、乳液或者混悬液的形式经口服给药。但是，也可以例如以栓剂形式通过直肠给药，或者以注射液的形式非胃肠给药。

本发明的化合物及其可药用酸加成盐可以与药学上惰性的、无机或有机赋形剂一起加工制成片剂、包衣片、糖锭剂和硬明胶胶囊。可以将乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、硬脂酸或其盐等用作这类赋形剂，例如用于制备片剂、糖锭剂和硬明胶胶囊。

用于软明胶胶囊的适宜赋形剂是，例如植物油、蜡、脂肪、半固体和液体多元醇等。

用于生产溶液和糖浆的适宜赋形剂是，例如水、多元醇、蔗糖、转化糖、葡萄糖等。

用于注射液的适宜赋形剂是，例如水、醇类、多元醇、甘油、植物油等。

用于栓剂的适宜赋形剂是，例如天然的或硬化的油、蜡、脂肪、半液体或液体多元醇等。

此外，药物制剂可包含防腐剂、增溶剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂、甜味剂、着色剂、芳香剂、用于改变渗透压的盐、缓冲剂、掩蔽剂或者抗氧化剂。它们还可包含其它治疗学上有益的物质。

剂量可在较宽的限度内变化，并且在每个具体病例中，当然应适合于个体需求。一般地，在口服给药的情况下，每日剂量约为10至2500mg式I化合物/人应该是适当的，但需要时还可超过上述上限。

每日剂量可以以单次剂量或分次剂量的形式给药。该治疗可与一种或多种其它治疗活性物质的给药联合进行，并且其它治疗活性物质的给药可与式I化合物的给药并行或相继进行。因此，本文中所用的并行给药包括将联用的药物一起或先后给药。

实施例

质谱在电喷雾解离条件下在下列仪器之一上记录：a)、THERMOQUEST SSQ 7000[溶剂0.085％TFA的90％乙腈/水溶液；流速100微升/分钟；毛细管250℃；喷雾电压5KV；护套气体80psi]，或b)、LC-MS系统(液相色谱-质谱联用)THERMOQUEST 7000ELECTROSPRAY或MICROMASS PLATFORM ELECTROSPRAY[梯度：0.1％TFA的水溶液至0.085％TFA的乙腈溶液]。

对于是已知化合物的原料，其中的一些可购买自商业供应商。其它的已知原料及其类似物可以通过本领域已知的方法制备。下面提供了可购自商业供应商的化合物的例子，和有关其它化合物及其类似物的合成的引文。

用如下实施例举例说明本发明：

实施例1

2-[3(S)-[[N-苯甲酰基-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-N-苄基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺

将搅拌中的105mg(0.13mmol)N-叔丁基-2-[3(S)-[[N-[(9-芴基)甲氧基羰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺的4ml干燥二甲基甲酰胺溶液在室温下用0.4ml(4mmol)哌啶处理。2.5小时后，蒸除挥发性物质并将残余物用己烷研制得到胶状的N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺，将该胶状物溶于3ml二氯甲烷并冷却至0℃。加入0.035ml(0.26mmol)N-乙基吗啉(NEM)，随后加入0.016ml(0.13mmol)苯甲酰氯(Aldrich 24,054-0)。2小时后，将溶液用20ml二氯甲烷稀释并依次用10％柠檬酸水溶液、饱和的碳酸氢钠和盐水洗涤。将溶液用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到固体，将该固体进行硅胶色谱，用二氯甲烷/甲醇(37∶3)洗脱得到白色固体状产物60mg(67％)，mp 212-18℃，[M+H]⁺683.2。

原料的制备如下：

N-叔丁基-2-[3(S)-[[N-[(9-芴基)甲氧基羰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基] 氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺

(A)将搅拌中的596mg(4mmol)L-青霉胺(Aldrich 19,631-2)的40ml水/二噁烷(1∶1)溶液在室温下用11.04g(80mmol)碳酸钾处理，接着用710mg(5mmol)碘代甲烷处理，1小时后，用5.39g(20mmol)N-(9-芴基甲基氧基羰基)-氧基琥珀酰亚胺(Advanced Chemtech RC8015)处理。另外2小时后，蒸除挥发性物质并将残余物在水和乙醚之间进行分配。将溶液用2N盐酸酸化，用乙醚萃取，将合并的有机相用硫酸镁干燥。蒸发至干得到黄色泡沫，将该黄色泡沫进行硅胶色谱，用二氯甲烷/甲醇(9∶1)洗脱得到4.8g(78％)白色泡沫状N-[(9-芴基)甲氧基羰基]-3-(甲硫基)-L-缬氨酸，[M+H]⁺385.9。

(B)将剧烈搅拌中的从以上(A)得到的4.8g(12.4mmol)N-[(9-芴基)甲氧基羰基]-3-(甲硫基)-L-缬氨酸的36ml含有600mg(15mmol)氢氧化钠的水溶液用8.43g(99mmol)碳酸氢钠和12ml丙酮处理。滴加10.26g(16.68mmol)OXONE^(Aldrich 22,803-6)的36ml(0.0004M)EDTA溶液并将溶液剧烈搅拌2小时。然后加入6.3g焦亚硫酸钠的12.6ml水溶液并将溶液再搅拌15分钟。加入乙酸乙酯，将水相用6N盐酸酸化至pH2，用氯化钠饱和，用乙酸乙酯萃取。将合并的有机相依次用水和盐水洗涤，用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到黄色胶状物。用石油醚(bp 40-60℃)/乙醚研制得到乳油状固体，将其用乙醚进一步洗涤得到3.18g(61％)白色固体状的N-[(9-芴基)甲氧基羰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酸，mp 189-92℃，[M+H]⁺417.8。

C)将以上(B)得到的8.34g(20mmol)N-[(9-芴基)甲氧基羰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酸的干燥四氢呋喃溶液冷却至-10℃并加入2.8ml(20mmol)三乙基胺，随后加入2.6ml(20mmol)氯甲酸异丁基酯(Aldrich 17,798-9)。然后加入8.02g(20mmol)2-(3(S)-氨基-2(R)-羟基-4-苯基丁基)-N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺(按照已知方法例如Martin，Joseph Armstrong；Redshaw，Sally；EP 432695 A2制备)并将混合物在-10℃下再搅拌2小时，然后升温至室温过夜。蒸除挥发性物质并将残余物在100ml二氯甲烷和100ml 10％柠檬酸溶液之间进行分配。将水相用二氯甲烷萃取，将合并的有机相用饱和的碳酸氢钠和盐水洗涤，用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到固体，将该固体用乙醚研制，随后用乙醚/乙酸乙酯(10∶1)研制得到10.84g(68％)白色固体状的N-叔丁基-2-[3(S)-[[N-[(9-芴基)甲氧基羰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺，[M+H]⁺801.4。

实施例2

N-叔丁基-2-[3(S)-[[N-(N-乙基-N-甲基甘氨酰基)-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基] 氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺

将38mg(0.2mmol)N-乙基-N-甲基甘氨酸氢溴化物和116mg(0.2mmol)N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺的5ml二氯甲烷溶液在0℃下用28mg(0.2mmol)1-羟基-7-氮杂苯并三唑(HOAT)、0.05ml(0.4mmol)N-乙基吗啉(NEM)和38mg(0.2mmol)N-乙基-N′(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDAC.HCl)处理并使之升至室温过夜。将反应混合物用二氯甲烷稀释，用饱和的碳酸氢钠和盐水洗涤，用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到胶状物，将该胶状物进行硅胶色谱，用二氯甲烷/甲醇(19∶1)洗脱得到65mg白色泡沫状的N-叔丁基-2-[3(S)-[[N-(N-乙基-N-甲基甘氨酰基)-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺，[M+H]⁺678.4。

原料N-乙基-N-甲基甘氨酸氢溴化物(1∶1)的制备如下：

A)将搅拌中的0.6ml(7mmol)N-乙基甲基胺和0.97ml(7mmol)三乙基胺的7ml二氯甲烷溶液用1ml(7mmol)溴乙酸叔丁基酯(Aldrich 12,423-0)处理并搅拌过夜。蒸除挥发性物质，将残余物用乙酸乙酯研制并滤除固体。蒸除溶剂得到459mg黄色油状物，将其在室温下用2ml 45％氢溴酸的乙酸溶液处理并搅拌6小时。减压蒸除挥发性物质并将残余物用乙酸乙酯研制得到413mg白色固体状的N-乙基-N-甲基甘氨酸氢溴化物。

实施例3

N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-[2-(3-吡啶基氧基)乙酰基]-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺

按照与实施例2所述的相类似的方式制得实施例3，[M+H]⁺714.4，但用2-(3-吡啶基氧基)乙酸三氟乙酸盐作为原料。

原料2-(3-吡啶基氧基)乙酸三氟乙酸盐的制备如下：

A)将9.5g(0.1mol)3-羟基吡啶的50ml干燥二甲基甲酰胺溶液在0℃下分批用氢化钠的己烷浆液(通过用己烷洗涤4g氢化钠(60％于矿物油中的分散体)制得)处理。30分钟后，滴加19.4g(0.1mol)溴乙酸叔丁基酯并将溶液搅拌过夜。蒸除挥发性物质并将残余物在二氯甲烷和水之间进行分配。将有机相用水洗涤，用硫酸镁干燥并减压蒸发得到油状物，将该油状物进行硅胶色谱，用二氯甲烷洗脱得到8.9g绿褐色油状物。将该油状物溶于二氯甲烷，冷却至0℃并用18ml三氟乙酸处理，然后升温至室温过夜。蒸除挥发性物质，将残余物用乙醚研制得到9.2g浅褐色固体状的2-(3-吡啶基氧基)乙酸三氟乙酸盐。

实施例4

N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-(甲氧基羰基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺

将搅拌中的200mg(0.25mmol)N-叔丁基-2-[3(S)-[[N-[(9-芴基)甲氧基羰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺的5ml干燥二甲基甲酰胺溶液在室温下用0.63ml(6.3mmol)哌啶处理。2.5小时后，蒸除挥发性物质，将残余物用己烷研制得到胶状的N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺，将该胶状物溶于5ml二氯甲烷，用0.2ml(1.5mmol)N-乙基吗啉(NEM)和0.02ml(0.25mmol)氯甲酸甲基酯(Aldrich，M3,530-4)处理并搅拌过夜。补加0.02ml(0.25mmol)氯甲酸甲基酯并将反应液再搅拌3小时。将溶液用二氯甲烷稀释，然后用10％柠檬酸溶液、饱和碳酸氢钠和盐水洗涤。通过加入固体碳酸氢钠使此柠檬酸溶液呈碱性，然后用二氯甲烷萃取。将合并的有机相用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到残余物，将该残余物进行硅胶色谱，用二氯甲烷/甲醇(19∶1)洗脱然后用乙醚研制得到75mg白色固体状的N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-(甲氧基羰基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺，mp 190-194℃，[M+H]⁺637.4。

实施例5

2-[3(S)-[[N，3-二(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺

将搅拌中的200mg(0.25mmol)N-叔丁基-2-[3(S)-[[N-[(9-芴基)甲氧基羰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺的5ml干燥二甲基甲酰胺溶液在室温下用0.63ml(6.3mmol)哌啶处理。2.5小时后，蒸除挥发性物质，将残余物用己烷研制得到胶状的N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺，将该胶状物溶于5ml二氯甲烷并用0.12ml(1.5mmol)吡啶处理，随后用0.02ml(0.25mmol)甲磺酰基氯处理。2小时后，将溶液用二氯甲烷稀释，用饱和的碳酸氢钠和盐水洗涤，用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到胶状物，将该胶状物用乙醚研制然后进行硅胶色谱，用二氯甲烷/甲醇(19∶1)洗脱得到105mg白色固体状2-[3(S)-[[N，3-二(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺，mp 135-160℃泡沫，重新熔化230-235℃(分解)，[M+H]⁺657.2。

按照与实施例1所述的相类似的方式，还制得表1所示的化合物。实施例6、7、8、9、10从N-叔丁基-2-[3(S)-[[N-[(9-芴基)甲氧基羰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺制备。实施例11和12按照与实施例1相类似的方式制备，但是在A)部分中用碘代乙烷代替碘代甲烷。用作原料的酰基氯都购买自商业来源诸如Aldrich和Lancaster。表1

按照与实施例2和3所述的相类似的方式，用N-叔丁基-2-[3(S)-[[N-[(9-芴基)甲氧基羰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺作为原料制得表2中的化合物。

在表2中的化合物的合成中使用的其它试剂都购自商业来源诸如Aldrich、Lancaster和Maybridge Int.，或者利用本领域所述的方法或与本领域所述的相类似的方法来制备。

例如，苯氧基乙酸(实施例14)、3-糠酸(实施例28)、2-乙基-2-羟基丁酸(实施例23)和5-溴-2-糠酸(实施例32)购自Aldrich(cat.Nos.15,851-8；16,339-2；13,843-6；B6,740-6)，4，5-二甲基-2-糠酸(实施例33)和5-(三氟甲基)-2-糠酸(实施例34)购自Maybridge Int.(cat.Nos.BTB 08890；PC8012)，噻吩-3-甲酸(实施例68)和5-氯噻吩-2-甲酸(实施例36)购自Lancaster(cat.Nos.1089；5453)。

噻唑-5-甲酸(实施例69)按照WO97/14687所述的方法制备并且5-甲基-噻唑-2-甲酸(实施例61)以类似方法制备。2-甲基-噻唑-4-甲酸(实施例74)通过类似于W.R.Tully等人，J.Med.Chem；1991，34，2060的方法来制备。2-异丙氧基乙酸(实施例72)按照J.Chem.Soc.，1969，2698所述的方法制备。2-甲基-2-苯氧基丙酸(实施例80)按照罗马尼亚专利RO 69-61256所述的方法制备。

其它的芳氧基乙酸通过类似于Mertes等人，J.Heterocycl.Chem.，1968，5，281的方法或者通过用于制备2-(3-吡啶基氧基)乙酸三氟乙酸盐的实施例3A所述的方法来制备。类似地，2-(1-吡咯基)乙酸(实施例62)、吡唑-1-乙酸(实施例64)、1-吡咯烷基乙酸(实施例66)等通过类似于制备N-乙基-N-甲基甘氨酸氢溴化物的实施例2A所述的方法来制备。表2

按照与实施例4所述的相类似的方式，用N-叔丁基-2-[3(S)-[[N-[(9-芴基)甲氧基羰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺和可购买的氯甲酸酯作为原料制得表3中的化合物。表3

实施例92

N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[N-[2-(异丙基氨基)乙酰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺

将0.123g 2-[3(S)-[[N-[N-(苄基氧基羰基)-N-异丙基甘氨酰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺的30ml乙醇溶液用10％碳载钯处理并在氢气氛下氢化过夜。

滤出催化剂然后减压蒸除挥发性物质得到无色玻璃状物，将玻璃状物进行硅胶色谱，用二氯甲烷/甲醇(25∶1)洗脱，接着用二氯甲烷/甲醇(10∶1)洗脱得到油状物。将该油状物用石油醚/乙醚(bp 40-60℃)研制得到29mg白色固体状N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[N-[2-(异丙基氨基)乙酰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺，[M+H]⁺678.5。

原料的制备如下：

将1.04ml(7.6mmol)甘氨酸叔丁基酯和0.11ml(8.38mmol)丙酮的30ml乙醇溶液用10％碳载钯(Fluka)处理并在氢气氛下氢化过夜。滤出催化剂然后减压蒸除挥发性物质得到1.08g(82％)浑浊的流动油状物，将其在0℃下用7ml三氟乙酸处理并将其升至室温。5小时后，蒸除挥发性物质得到2.65g浅黄色油状物，将1.44g部分油状物在0℃下溶于10ml 2M氢氧化钠溶液并同时用0.89ml(6.23mmol)氯甲酸苄基酯和10ml 2M氢氧化钠溶液处理。将反应混合物温至室温过夜并用乙醚洗涤。将溶液酸化然后用乙酸乙酯萃取，将合并的有机相用水洗涤，用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到0.338g无色油状的N-(苄基氧基羰基)-N-异丙基甘氨酸。按照与实施例2所述的相类似的方式，使0.043g部分油状物与0.1g(1.73mmol)N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺反应得到0.123g黄色玻璃状的2-[3(S)-[[N-[N-(苄基氧基羰基)-N-异丙基甘氨酰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺。

实施例93

N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-(N-苯基甘氨酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺

按照与实施例92所述的相类似的方式，用N-苯基甘氨酸(Aldrich33,046-9)作为原料制得实施例93，[M+H]⁺712.5。

实施例94

N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-(N-甲基甘氨酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺

按照与实施例92所述的相类似的方式，用N-(苄基氧基羰基)肌氨酸(Bachem C-2570)作为原料，但省略了原料制备过程中的保护步骤，制得实施例94([M+H]⁺650.4)。

实施例95

N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-1-[2(R)-羟基-3(S)-[3-(甲磺酰基)丁酰氨基]-4-苯基丁基]-2(S)-哌嗪甲酰胺

按照与实施例2所述的相类似的方式，将3-(甲磺酰基)-3-甲基丁酸与2-(3(S)-氨基-2(R)-羟基-4-苯基丁基)-N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺反应得到白色固体状产物，mp 95-110℃(泡沫)，[M+H]⁺564.3。

原料3-(甲磺酰基)-3-甲基丁酸的制备如下：

将搅拌中的0.81g(6mmol)3-巯基-3-甲基丁酸(按照G.Pattenden等人，J.Chem.Soc.Perkin Trans.1，1992，10，1215-21所述的方法从3，3-二甲基丙烯酸(Aldrich D13,860-6)制备)的25ml二噁烷/水(3∶2)溶液用4.14g(30mmol)碳酸钾的5ml水溶液处理，随后用1.14g(8mmol)碘代甲烷处理。

4小时后，蒸除挥发性物质并加入水。将水相用乙醚萃取然后酸化。然后将酸化后的水相用乙醚萃取，将有机相用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到0.57g(64％)浅橙色油状的3-甲基-3-(甲硫基)丁酸。将该油状物溶于12ml含有188mg(4.63mmol)氢氧化钠的水中，然后用2.59g(31mmol)碳酸氢钠和4ml丙酮处理，随后用通过滴加方式溶于12ml 0.0004M EDTA溶液中的3.16g(5.13mmol)OXONE^(Aldrich 17,798-9)处理。2小时后，加入2g焦亚硫酸钠的4ml水溶液并将溶液搅拌15分钟。将溶液酸化至pH2并用乙酸乙酯萃取。将有机相用水和盐水洗涤，用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到585mg无色油状物，[M+H]⁺181(Cl^+ive)。

实施例96

2-[3(S)-[3-(乙磺酰基)-3-甲基丁酰氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺

按照与实施例2所述的相类似的方式，通过3-(乙磺酰基)-3-甲基丁酸与2-(3(S)-氨基-2(R)-羟基-4-苯基丁基)-N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺的反应，制得实施例96，[M+H]⁺578.2。

使用碘代乙烷代替碘代甲烷，按照与制备用作实施例95的原料的3-(甲磺酰基)-3-甲基丁酸时所述的相类似的方式制得原料3-(乙磺酰基)-3-甲基丁酸。

实施例97

2-[3(S)-[3-(苯磺酰基)-3-甲基丁酰氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺

按照与实施例2所述的相类似的方式，通过将3-(苄基磺酰基)-3-甲基丁酸与2-(3(S)-氨基-2(R)-羟基-4-苯基丁基)-N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺反应，制得实施例97，[M+H]⁺640。

原料3-(苄基磺酰基)-3-甲基丁酸按照与制备实施例95的原料所述的相类似的方式从3-(苄硫基)-3-甲基丁酸(G.Pattenden等人，J.Chem.Soc.，Perkin Trans.1，1992，10，1215-21)制得。

实施例98

N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[3(S)-[[N-[2-(四氢-2(RS)- 甲基-1，1-二氧代-2-噻吩基)乙酰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)- 羟基-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺(非对映体的混合物)

按照与实施例2所述的相类似的方式，通过将四氢-2(RS)-甲基-2-噻吩乙酸S，S-二氧化物与2-(3(S)-氨基-2(R)-羟基-4-苯基丁基)-N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺反应，制得实施例98，[M+H]⁺576.3。

原料四氢-2(RS)-甲基-2-噻吩乙酸S，S-二氧化物按照与制备实施例95的原料所述的相类似的方式从四氢-2-甲基-噻吩乙酸(R.A.Bunce等人，J.Org.Chem.1992，57(6)，1727-33)制得。

实施例99

N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[2(R)-羟基 -3-(甲磺酰基)-3-甲基丁酰氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺

按照与实施例2所述的相类似的方式，通过将2(R)-羟基-3-(甲磺酰基)-3-甲基丁酸与2-(3(S)-氨基-2(R)-羟基-4-苯基丁基)-N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺反应，制得实施例99，[M+H]⁺580.4。

原料2(R)-羟基-3-(甲磺酰基)-3-甲基丁酸的制备如下：

将搅拌中的从实施例1的(B)部分得到的2.25g(5.3mmol)被保护的氨基酸的20ml干燥二甲基甲酰胺溶液用1.1ml(11mmol)哌啶处理。1小时后，蒸除挥发性物质并将残余物用乙醚研制，随后用乙酸乙酯研制得到1g胶状物，将该胶状物溶于8ml 10％v/v硫酸并加热至50℃。滴加1.3g硝酸钠的3ml水溶液，30分钟后补加0.7g硝酸钠的2ml水溶液。将反应混合物冷却并用乙酸乙酯萃取，将合并的有机相用水和盐水洗涤，用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到200mg胶状的2(R)-羟基-3-(甲磺酰基)-3-甲基丁酸。

实施例100

N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[N-(二甲基氨基甲酰基)-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺

将搅拌中的0.4g(0.5mmol)N-叔丁基-2-[3(S)-[[N-[(9-芴基)甲氧基羰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺的10ml干燥二甲基甲酰胺溶液在室温下用1ml(10mmol)哌啶处理。1小时后，蒸除挥发性物质并将残余物用己烷研制得到胶状的N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺，将该胶状物溶于5ml乙腈并用100mg(0.5mmol)氯甲酸对硝基苯基酯(Aldrich 16,021-0)处理，随后用84mg(1mmol)固体碳酸氢钠处理。15分钟后，加入0.25ml 2M二甲基胺的四氢呋喃溶液(Aldrich39,195-6)和0.14ml三乙胺，将反应混合物搅拌2小时。减压蒸除挥发性物质，将残余物在水和二氯甲烷之间进行分配，将水相用二氯甲烷萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到油状物，将该油状物进行硅胶色谱，用二氯甲烷/甲醇(19∶1)洗脱得到62mg(20％)白色固体状的N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[N-(二甲基氨基甲酰基)-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基] 4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺，[M+H]⁺650.4。

按照与实施例100所述的相类似的方式，用N-叔丁基2-[3(S)-[[N-[(9-芴基)甲氧基羰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺作为原料还制备了表4中所示的化合物。在表4中的化合物的合成中所用的其它试剂都购买自商业来源诸如Aldrich和Lancaster。表4

实施例110

N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[N-异丙基-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺

将搅拌中的0.4g(0.5mmol)N-叔丁基-2-[3(S)-[[N-[(9-芴基)甲氧基羰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺的10ml干燥二甲基甲酰胺溶液在室温下用1ml(10mmol)哌啶处理。1小时后，蒸除挥发性物质并将残余物用己烷研制得到胶状的N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺，将该胶状物溶于8ml二氯乙烷并在氮气下用0.037ml(0.5mmol)丙酮、0.028ml(0.5mmol)冰乙酸和160mg(0.75mmol)三乙酰氧基硼氢化钠处理。将反应混合物搅拌过夜然后蒸除挥发性物质。将残余物在二氯甲烷和水之间进行分配然后用二氯甲烷萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到胶状物，将该胶状物进行硅胶色谱，用乙酸乙酯/己烷(4∶1)洗脱，然后用己烷研制得到127mg(41％)白色固体状N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[N-异丙基-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺。[M+H]⁺621.3。

按照与实施例110所述的相类似的方式，用N-叔丁基-2-[3(S)-[[N-[(9-芴基)甲氧基羰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺作为原料，还制备了表5中所示的化合物。在表5中的化合物的合成中所用的其它试剂都得自商业来源诸如Aldrich、Lancaster和Maybridge Int，例如，糠醛(实施例114)和2-氟苯甲醛(实施例116)购买自Aldrich，cat.nos.(31,991-0)，(F480-7)，4(5)-甲酰基-2-甲基咪唑(实施例134)购买自Maybridge Int.(SB01361)。表5

实施例137

N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-(2-噻唑基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺

将搅拌中的255mg(0.4mmol)N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-(硫代氨基甲酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺的5ml乙醇溶液用0.1ml氯乙醛(50％水溶液)处理并加热回流4小时。蒸除挥发性物质，将残余物在二氯甲烷和饱和的碳酸氢钠水溶液之间进行分配。将水相用二氯甲烷萃取，将合并的有机相用盐水洗涤，用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到固体，将该固体进行硅胶色谱，用二氯甲烷/甲醇(19∶1)洗脱得到100mg(38％)白色固体状的N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-(2-噻唑基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺，[M+H]⁺662.2。

原料N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-(硫代氨基甲酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺的制备如下：

(A)将搅拌中的1.6g(2mmol)N-叔丁基-2-[3(S)-[[N-[(9-芴基)甲氧基羰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺的40ml干燥二甲基甲酰胺溶液在室温下用4ml(40mmol)哌啶处理。1小时后，蒸除挥发性物质，将残余物用己烷研制得到胶状的N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺，将该胶状物溶于5ml丙酮然后用0.28ml(2.1mmol)异硫氰酸苯甲酰基酯(Aldrich 26,165-3)处理。将搅拌的反应混合物加热回流4小时然后冷却。减压蒸除挥发性物质，将残余物用己烷研制得到胶状物，然后将该胶状物进行硅胶色谱，用乙酸乙酯/己烷(2∶1)洗脱得到765mg(52％)浅黄褐色泡沫状2-[3(S)-[[N-(苯甲酰基硫代氨基甲酰基)-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺，[M+H]⁺742.3，将其与另一批物质混合并用于下一步骤。

(B)将搅拌中的从以上(A)得到的850mg(1.15mmol)2-[3(S)-[[N-(苯甲酰基硫代氨基甲酰基)-3-(甲磺酰基)L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺的6ml甲醇/丙酮(1∶1)溶液用115mg(1.15mmol)碳酸氢钾和0.5ml水处理。5小时后，加入1ml乙酸并将混合物再搅拌10分钟。

减压蒸除挥发性物质，然后通过用乙醇进行反复重新蒸发来除去残留的水而得到胶状油状物，将该油状物进行硅胶色谱，用二氯甲烷/甲醇(19∶1)洗脱得到710mg(97％)白色泡沫状N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-(硫代氨基甲酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺，[M+H]⁺638。

按照与实施例137所述的相类似的方式，用N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-(硫代氨基甲酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺作为原料还制备了表6中所示的化合物。其它试剂均得自商业来源。表6

实施例143

N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[N-[4-(羟基甲基)-2-噻唑基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺

将搅拌中的73mg(0.1mmol)2-[3(S)-[[N-[4-(乙酰氧基甲基)-2-噻唑基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺(实施例141)的7ml甲醇/水(5∶2)溶液用700mg碳酸钾处理。1.5小时后，蒸除挥发性物质并将残余物在乙酸乙酯和水之间进行分配。将水相用乙酸乙酯萃取，将合并的有机相用盐水洗涤，用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到胶状物，将该胶状物进行硅胶色谱，用二氯甲烷/甲醇(40∶3)洗脱得到32mg(48％)固体状N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[N-[4-(羟基甲基)-2-噻唑基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺，mp126℃，[M+H]⁺692。

实施例144

N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[3(S)-[2(R)-(2，3-二氢-2-氧代-1H-咪唑-2-基)-3-(甲磺酰基)-3-甲基丁酰氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺

将搅拌中的0.578g(1mmol)N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺的溶液溶于20ml乙腈中并用201mg(1mmol)氯甲酸对硝基苯基酯处理，随后用168mg(21mmol)碳酸氢钠处理。15分钟后，加入0.11ml氨基乙醛缩二甲醇(Lancaster 7520)和0.28ml(2mmol)三乙基胺，将反应混合物搅拌2小时。减压蒸除挥发性物质并将残余物在水和二氯甲烷之间进行分配。将水相用二氯甲烷萃取，将合并的有机相用盐水洗涤，用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到黄色胶状物，将该胶状物用己烷研制，随后用乙酸乙酯研制得到466mg(66％)乳油状固体，mp 228-30℃，[M+H]⁺710。将420mg(0.59mmol)该固体溶于20ml丙酮并用5ml 10％盐酸溶液处理，然后搅拌过夜。将溶液用饱和的碳酸氢钠溶液处理并部分地蒸发。将溶液用二氯甲烷萃取，将合并的有机相用盐水洗涤，用硫酸镁干燥并蒸发得到乳油状固体，将该固体进行硅胶色谱，用二氯甲烷/甲醇(38∶1)洗脱得到50mg(13％)白色固体状的N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[3(S)-[2(R)-(2，3-二氢-2-氧代-1H-咪唑-2-基)-3-(甲磺酰基)-3-甲基丁酰氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺，[M+H]⁺646。

实施例145

N-苄基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-(甲氧基羰基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺

将0.13ml(1.2mmol)苄基胺的5ml二氯甲烷溶液用0.6ml三甲基铝(2M于甲苯中的溶液)处理并室温搅拌15分钟。滴加68mg内酯N1-[1(S)-(1，3，4，6，6a(S)，7，8，9，10，10a(S)，11，11a(S)-十二氢-1-氧代-1，4-噁嗪并[4，3-b]异喹啉-3(R)-基)-2-苯基乙基]-3-(甲磺酰基)-N2-(甲氧基羰基)-L-缬氨酰胺溶于5ml二氯甲烷中的溶液，然后加入5ml甲苯并将溶液搅拌过夜。滴加稀盐酸然后将溶液用二氯甲烷萃取。将合并的有机相用稀盐酸和盐水洗涤，用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到残余物，将该残余物用二氯甲烷/己烷结晶得到15mg白色固体状的N-苄基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-(甲氧基羰基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺，[M+H]⁺671。

原料N1-[1(S)-(1，3，4，6，6a(S)，7，8，9，10，10a(S)，11，11a(S)-十二氢-1-氧代-1，4-噁嗪并[(4，3-b]异喹啉-3(R)-基)-2-苯基乙基]-3-(甲磺酰基)-N2-(甲氧基羰基)-L-缬氨酰胺的制备如下：

(A)将按照已知方法例如Martin，Joseph Armstrong；Redshaw，Sally，EP 432695 A2制备的23.8g(0.1M)N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺在100ml 6N盐酸中形成悬浮液并搅拌回流23小时。将反应混合物蒸发至干得到23.1g白色固体，将该固体溶于200ml水并用30ml 4N氢氧化钠溶液处理。将溶液冷却至4℃并在剧烈搅拌下同时加入15.5ml(0.11mol)氯甲酸苄基酯和4.4g(0.11mol)氢氧化钠的15ml水溶液。将反应液继续搅拌1小时，通过加入4N氢氧化钠将pH调节至pH9，然后升温至室温。再过2小时后，将溶液用水稀释并用己烷萃取。将水相用浓盐酸酸化并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机相用水和盐水洗涤，用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到29.6g胶状物，将该胶状物溶于300ml乙酸乙酯并在剧烈搅拌下滴加10.7ml(0.093mol)环己基胺。补加200ml乙酸乙酯并将混合物搅拌过夜，然后过滤得到28.9g固体，将该固体与另一批10.4g同种物质相混合并在400ml乙酸乙酯和250ml 2N盐酸之间进行分配。将有机相用水和盐水洗涤，用硫酸镁干燥并蒸发得到胶状物。将搅拌中的胶状物的50ml二氯甲烷溶液用41.3g(0.18mol)三氯乙亚胺酸叔丁基酯(Aldrich)的400ml环己烷溶液处理，随后用1.9ml三氟化硼二乙基醚合物(Fluka)处理。将混合物搅拌过夜然后加入碳酸氢钠，30分钟后将溶液过滤。蒸除挥发性物质得到胶状物，将该胶状物溶于500ml乙酸乙酯，用2N碳酸钠、水和盐水洗涤，用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到28g胶状物。将18.8g该胶状物的500ml乙醇溶液用1.9g 5％碳载钯(Fluka)氢化。滤出催化剂，减压蒸除挥发性物质得到白色固体，将该白色固体在300ml甲基叔丁基醚和250ml饱和的碳酸氢钠溶液之间进行分配。将有机相用水和盐水洗涤，用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到10g(0.042mol)浅黄色胶状物，将该胶状物溶于200ml乙醇。加入12.43g(0.042mol)2(S)-[1(S)-(苄基氧基甲酰氨基)-2-苯基乙基]环氧乙烷(按照已知方法(EP 346847 A2)制备)并将混合物加热回流10小时。蒸除挥发性物质并将残余物进行硅胶色谱，用乙酸乙酯/己烷(1∶2)洗脱得到19.5g乳油状固体，将1.072g(2.0mmol)该固体溶于5ml冰乙酸，然后用10ml 45％溴化氢的乙酸溶液处理并搅拌1.5小时。将挥发物几乎蒸发至干，过滤固体，用冰乙酸洗涤，随后用乙醚洗涤。将固体在乙酸乙酯和碳酸钠水溶液之间进行分配，将有机相用水和盐水洗涤，用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到493mg白色泡沫状3(R)-(1(S)-氨基-2-苯基乙基)-3，4，6a(S)，7，8，9，10，10a(S)，11，11a(S)-十氢-1，4-噁嗪并[4，3-b]异喹啉-1(6H)-酮氢溴化物，[M+H]⁺329.0。

(B)将搅拌中的以上实施例1(B)得到的417mg(1mmol)N-[(9-芴基)甲氧基羰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酸的5ml四氢呋喃悬浮液用115mg(1mmol)N-乙基吗啉(NEM)处理并在氮气氛下冷却至0℃。加入0.13ml(1mmol)氯甲酸异丁基酯并将反应混合物搅拌15分钟。加入295mg(0.9mmol)以上(A)得到的3(R)-(1(S)-氨基-2-苯基乙基)-3，4，6a(S)，7，8，9，10，10a(S)，11，11a(S)-十氢-1，4-噁嗪并[4，3-b]异喹啉-1(6H)-酮氢溴化物的5ml四氢呋喃溶液并将溶液升温至室温过夜。将溶液在乙酸乙酯和水之间进行分配，将有机相用10％柠檬酸溶液、碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到黄色胶状物。将该胶状物进行硅胶色谱，用乙酸乙酯/己烷(1∶1)洗脱得到281mg产物，[M+H]⁺729，将该产物溶于5ml二氯甲烷并用1ml哌啶处理，然后室温搅拌2小时。将溶液用己烷洗涤，过滤并减压蒸发滤液。将残余物进行硅胶色谱，用二氯甲烷/甲醇(19∶1)洗脱然后用乙醚/己烷结晶得到120mg(0.24mmol)白色固体，[M+H]⁺506，将该白色固体溶于4ml二噁烷/水(1∶1)并用66mg碳酸钾和0.19ml氯甲酸甲基酯处理。将溶液搅拌过夜然后在乙酸乙酯和水之间进行分配。将有机相用碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到68mg白色固体状的N1-[1(S)-(1，3，4，6，6a(S)，7，8，9，10，10a(S)，11，11a(S)-十二氢-1-氧代-1，4-噁嗪并[4，3-b]异喹啉-3(R)-基)-2-苯基乙基]-3-(甲磺酰基)-N2-(甲氧基羰基)-L-缬氨酰胺，[M+H]⁺564。

实施例146

N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-(异丁酰氧基)-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-[(3-吡啶基)羰基]-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺

将0.15g(0.21mmol)N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-[(3-吡啶基)羰基]-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺(实施例7)的1ml吡啶溶液在0℃下用0.092ml(0.21mmol)异丁酰氯处理并升温至室温过夜。蒸除挥发性物质并将残余物在二氯甲烷和饱和的碳酸氢钠溶液之间进行分配。将有机相用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到胶状物，将该胶状物进行硅胶色谱，用二氯甲烷/甲醇(25∶1)洗脱，用乙醚/石油醚bp 40-60℃研制得到83mg白色固体状的N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-(异丁酰氧基)-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-[(3-吡啶基)羰基]-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺，[M+H]⁺754.5。

实施例147

N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-(异丁酰氧基)-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-[2-(3-吡啶基氧基)乙酰基]-L-缬氨酰基]氨基]-4- 苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺

将搅拌中的190mg(2.66mmol)N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-[2-(3-吡啶基氧基)乙酰基]-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺(实施例3)和26mg(2.66mmol)异丁酸的3ml二氯甲烷溶液用36mg(2.92mmol)4-(二甲基氨基)吡啶(DMAP)和56mg(2.92mmol)EDAC.HCl处理并放置在室温下过夜。补加26mg异丁酸、36mg DMAP和56mg EDAC.HCl并将反应液再搅拌2小时。将溶液用二氯甲烷稀释，将有机相用饱和的碳酸氢钠溶液和盐水洗涤，用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到无色玻璃状物，将该玻璃状物进行硅胶色谱，用二氯甲烷/甲醇(97∶3)洗脱得到153mg白色泡沫状的N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-(异丁酰氧基)-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-[2-(3-吡啶基氧基)乙酰基]-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺，[M+H]⁺784.6。

实施例148

N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-[(3- 吡啶基)羰基]-L-缬氨酰基]氨基] 4-苯基-2(R)-(L-缬氨酰氧基)丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺

将搅拌中的150mg(2.19mmol)N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-[(3-吡啶基)羰基]-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺(实施例7)、61mg(2.41mmol)苄氧羰基-L-缬氨酸(BACHEM C-2805)和33mg(2.41mmol)HOBT的2ml二氯甲烷溶液用0.026ml(2.1mmol)NEM和46mg(2.41mmol)EDAC.HCl处理。在11天内，每日补加等份的苄氧羰基-L-缬氨酸、HOBT、NEM和EDAC.HCl。将溶液用二氯甲烷稀释，用饱和的碳酸氢钠溶液和盐水洗涤，用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到橙色胶状物，将该胶状物进行硅胶色谱，用二氯甲烷/甲醇(97∶3)洗脱得到137mg米白色泡沫。将该泡沫溶于20ml乙醇并用10％碳载钯处理，然后在氢气氛下氢化1小时。滤出催化剂，减压蒸除挥发性物质得到白色固体，将该白色固体进行硅胶色谱，用二氯甲烷/甲醇(47∶2)洗脱，然后用乙醚/石油醚bp 40-60℃研制得到14mg白色固体状的N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-[(3-吡啶基)羰基]-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基-2(R)-(L-缬氨酰氧基)丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺，[M+H]⁺783.5。

实施例149

N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[3(S)-[[N-[(2-吲哚基)羰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-[4-(吗啉代甲基)苯甲酰氧基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺

按照类似于实施例157的方式，用N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-N-[(2-吲哚基)羰基]-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺(实施例86)和4-(吗啉代甲基)苯甲酸(按照H.Bundgaard等人，J.Med.Chem.1989，32，2503所述的方法制备)作为原料制得实施例159，[M+H]⁺925.6。

实施例150

N-叔丁基-2-[3(S)-[[N-(3-氰基苯甲酰基)-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-[2-[2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基]乙酰氧基]-4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺

按照类似于实施例147的方式，用N-叔丁基-2-[3(S)-[[N-(3-氰基苯甲酰基)-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺(实施例39)和2-[2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基]乙酸(Aldrich 40，7000-3)作为原料制得实施例160，[M+H]⁺868.5。

实施例151

N-叔丁基-2-[2(R)-(3-羧基丙酰氧基)-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-[(3-吡啶基) 羰基]-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)- 异喹啉甲酰胺

将68mg(0.1mmol)N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-[(3-吡啶基)羰基]-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺(实施例7)的10ml四氢呋喃溶液用10mg(1mmol)琥珀酸酐(Aldrich 23,960-0)处理并加热回流过夜。减压蒸除挥发性物质，将残余物进行硅胶色谱，用二氯甲烷/甲醇(19∶1)洗脱得到53mg泡沫状的N-叔丁基-2-[2(R)-(3-羧基丙酰氧基)-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-[(3-吡啶基)羰基]-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺，[M+H]⁺784.5。

实施例152

N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-[2-(2-吡啶基氧基)乙酰基]-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基-3(S)-异喹啉甲酰胺

按照与实施例2所述的相类似的方式制得实施例152，[M+H]⁺714，但使用了2-(2-吡啶基氧基)乙酸作为原料。

原料2-(2-吡啶基氧基)乙酸通过本领域所述的方法来制备。例如如下方法：Hill和Mc Graw，J.Org.Chem.，1949，14，783-787和Maas等人，Red.Trav.Chim.Pays-Bas，1955，74，175-179。

实施例153

N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-[2-(6-甲基-3-吡啶基氧基)乙酰基]-L-缬氨酰基]氨基l-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺

按照与实施例2所述的相类似的方式制得实施例153，[M+H]⁺728，但是用2-(6-甲基-3-吡啶基氧基)乙酸氢溴化物作为原料。

原料2-(6-甲基-3-吡啶基氧基)乙酸氢溴化物的制备如下：

在氮气氛下，将1.09g(0.01mol)3-羟基-6-甲基吡啶于0℃加入到搅拌中的440mg氢化钠(60％于矿物油中的分散体)的20ml干燥二甲基甲酰胺悬浮液中。冒泡停止后，滴加1.94g(0.01mol)溴乙酸叔丁基酯并将溶液搅拌过夜。蒸除挥发性物质然后将残余物在二氯甲烷和10％柠檬酸溶液之间进行分配。将有机相用饱和的碳酸氢钠和盐水洗涤。将合并的有机相用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到1.8g胶状物，[M+H]⁺224，将该胶状物在0℃下用3ml 45％氢溴酸的乙酸溶液处理。加入5ml乙酸并将悬浮液搅拌过夜。蒸除挥发性物质并将残余物用石油醚bp 40-60℃研制得到1.5g浅黄褐色固体状的2-(6-甲基-3-吡啶基氧基)乙酸氢溴化物。

实施例154

N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[[3-(甲磺酰基)-N-[2-(3-吡嗪基氧基)乙酰基]-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺

按照与实施例2所述的相类似的方式制得实施例154，[M+H]⁺715，但是其中用2-(3-吡嗪基氧基)乙酸三氟乙酸盐作为原料。

原料2-(3-吡嗪基氧基)乙酸三氟乙酸盐的制备如下：

将搅拌中的88mg(2.2mmol)氢化钠(60％于矿物油中的分散体)的5ml干燥二甲基甲酰胺悬浮液在-5℃下在氮气氛下用264mg(2mmol)羟乙酸叔丁基酯处理。10分钟后，加入298mg(2mmol)3，6-二氯哒嗪(Aldrich D7,320-0)并将溶液升温至室温然后搅拌过夜。减压蒸除挥发性物质，将残余物进行硅胶色谱，用乙酸乙酯/己烷(1∶2)洗脱得到210mg胶状物，将该胶状物溶于20ml乙醇，然后用10％碳载钯(Fluka)处理并在氢气氛下氢化过夜。滤出催化剂，减压蒸除挥发性物质得到胶状物，将该胶状物进行硅胶色谱，用乙酸乙酯/己烷(1∶2)洗脱，然后用乙酸乙酯洗脱得到50mg胶状物，[M+H+MeCN]⁺252。将该胶状物溶于2ml二氯甲烷并用1ml三氟乙酸处理。10分钟后，蒸除挥发性物质，将残余物用甲苯研制然后重新蒸发得到胶状物，将该胶状物进一步用石油醚bp40-60℃研制得到2-(3-吡嗪基氧基)乙酸三氟乙酸盐。

实施例155

N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-2-[2(R)-羟基-3(S)-[3-(甲磺酰基)-N-[2-(2-嘧啶基氧基)乙酰基]-L-缬氨酰基]氨基]-4-苯基丁基]-3(S)-异喹啉甲酰胺

按照与实施例2所述的相类似的方式制得实施例155，[M+H]⁺715，但是用2-(嘧啶-2-基氧基)乙酸三氟乙酸盐作为原料。

原料2-(嘧啶-2-基氧基)乙酸三氟乙酸盐的制备如下：

将搅拌中的88mg(2.2mmol)氢化钠(60％于矿物油中的分散体)的5ml干燥二甲基甲酰胺悬浮液在-5℃下在氮气氛下用264mg(2mmol)羟乙酸叔丁基酯处理。30分钟后，加入318mg(2mmol)2-溴嘧啶并将溶液升温至室温，搅拌过夜。蒸除挥发性物质，将残余物在二氯甲烷和10％柠檬酸溶液之间进行分配。将有机相用饱和的碳酸氢钠和盐水洗涤。将合并的有机相用硫酸镁干燥然后减压蒸发得到360mg胶状物。将该胶状物进行硅胶色谱，用乙酸乙酯/己烷(1∶1)洗脱得到105mg胶状物，将该胶状物溶于3ml二氯甲烷并用1.5ml三氟乙酸处理。1.5小时后，蒸除挥发性物质，将残余物用甲苯研制然后重新蒸发得到胶状物，将该胶状物进一步用石油醚bp40-60℃研制得到60mg白色固体状的2-(嘧啶-2-基氧基)乙酸三氟乙酸盐。

实施例156

N-叔丁基-2-[3(S)-[N-[2-(3-氟苯氧基)乙酰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺

按照与实施例3所述的相类似的方式制得实施例156，[M+H]⁺731.6mp197-199℃，但是用3-氟苯酚作为原料代替3-羟基吡啶。

实施例157

N-叔丁基-2-[3(S)-[[N-[2-(4-氟苯氧基)-乙酰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺

按照与实施例3所述的相类似的方式制得实施例157，[M+H]⁺731，但是用4-氟苯酚作为原料代替3-羟基吡啶。

按照与实施例2和3所述的相类似的方式，用N-叔丁基-2-[3(S)-[[N-[(9-芴基)甲氧基羰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺作为原料制得表7中的化合物。

在表7中的化合物的合成中所用的其它试剂都得自商业来源诸如Aldrich、Lancaster和Maybridge Int.，或者是利用本领域所述的方法或与本领域所述的相类似的方法制得。表7

按照与实施例100所述的相类似的方式，用N-叔丁基-2-[3(S)-[[N-[(9-芴基)甲氧基羰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺作为原料，还制备了表8中所示的化合物。在表8中的化合物的合成中所用的其它试剂都得自商业来源诸如Aldrich和Lancaster，或者是利用本领域所述的方法或与本领域所述的相类似的方法制得。表8

实施例172

N-叔丁基-2-[3(S)-[[N-[2-(4-氟苄基氨基)乙酰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺

按照与实施例121所述的相类似的方式，用4-氟苯甲醛和N-叔丁基-2-[3(S)-[[N-甘氨酰基-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺作为原料，制得实施例172，[M+H]⁺744。

原料N-叔丁基-2-[3(S)-[[N-甘氨酰基-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基-4-苯基丁基]-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)-异喹啉甲酰胺可以按照与制备实施例94时所述的相类似的方法使用原料N-(苄基氧基羰基)甘氨酸制得。

实施例173

2-[3(S)-[[N-[2-(苄基氨基)乙酰基]-3-(甲磺酰基)-L-缬氨酰基]氨基]-2(R)-羟基4-苯基丁基]-N-叔丁基-1，2，3，4，4a(S)，5，6，7，8，8a(S)-十氢-3(S)- 异喹啉甲酰胺

按照与实施例172所述的相类似的方式制得实施例173，[M+H]⁺726，但是其中用苯甲醛作为原料代替4-氟苯甲醛。

Claims

1、式I化合物及其可药用盐：

其中R¹是H、羟基或NHR²，其中R²是H、烷基、链烯基、链炔基、芳基烷基、杂环基烷基、环烷基、烷基羰基、环烷基羰基、芳基羰基、杂环基羰基、芳基烷基羰基、杂环基烷基羰基、烷氧基羰基、芳基烷氧基羰基、杂环基烷氧基羰基、芳基、杂环基、磺酰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂环基磺酰基或下式的基团：其中X是O或S，并且R⁷和R⁸彼此独立地是H、烷基、芳基、杂环基、芳基烷基、杂环基烷基，或者R⁷和R⁸与它们所连接的氮原子一起形成任选地含有另外的杂原子的饱和环，或者是下面的基团：其中当n＝0时，Y表示O或S，并且R¹⁰是H、烷基、芳基烷基、杂环基烷基、芳基、杂环基，或者当n＝1时，Y表示N，R⁹是H或烷基且R¹⁰是H、烷基、芳基烷基、杂环基烷基、芳基、杂环基，或者R⁹和R¹⁰与它们所连接的杂原子一起形成杂环，R¹¹和R¹²彼此独立地是H或烷基，或者R¹¹和R¹²与它们所连接的碳原子一起形成环，R³、R⁴彼此独立地是烷基或者与它们所连接的碳原子一起形成碳环，R⁵是烷基、芳基烷基、杂环基烷基或者R⁴和R⁵与它们所连接的碳和硫原子一起形成杂环，并且R⁶是烷基、芳基烷基、杂环基烷基、烷氧基烷基、羟基烷基、氨基烷基、氟烷基，并且R¹³是H或者是无机或有机酯的残基，并且R¹⁵是芳基，条件是如果R³、R⁴和R⁵是甲基、R⁶是叔丁基、R¹³是H且R¹⁵是苯基，则R²不是苄氧基羰基并且不是2-喹啉羰基。

2、式I化合物及其可药用盐：

其中R¹是H、羟基或NHR²，其中R²是H、烷基、链烯基、链炔基、芳基烷基、杂环基烷基、环烷基、烷基羰基、环烷基羰基、芳基羰基、杂环基羰基、芳基烷基羰基、条环基烷基羰基、烷氧基羰基、芳基烷氧基羰基、杂环基烷氧基羰基、芳基、杂环基、磺酰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂环基磺酰基或下式的基团：其中X是O或S，并且R⁷和R⁸彼此独立地是H、烷基、芳基、杂环基、芳基烷基、杂环基烷基，或者R⁷和R⁸与它们所连接的氮原子一起形成任选地含有另外的杂原子的饱和环，或者是下面的基团：其中当n＝0时，Y表示O或S，并且R¹⁰是H、烷基、芳基、杂环基，或者当n＝1时，Y表示N，R⁹是H或烷基且R¹⁰是H、烷基、芳基、杂环基，或者R⁹和R¹⁰与它们所连接的杂原子一起形成杂环，R¹¹和R¹²彼此独立地是H或烷基，或者R¹¹和R¹²与它们所连接的碳原子一起形成环，R³、R⁴彼此独立地是烷基或者与它们所连接的碳原子一起形成碳环，R⁵是烷基、芳基烷基、杂环基烷基，或者R⁴和R⁵与它们所连接的碳和硫原子一起形成杂环，并且R⁶是烷基、芳基烷基、杂环基烷基、烷氧基烷基、羟基烷基、氨基烷基、氟烷基，并且R¹³是H或者是无机或有机酯的残基，并且R¹⁵是芳基，条件是如果R³、R⁴和R⁵是甲基、R⁶是叔丁基、R¹³是H且R¹⁵是苯基，则R²不是苄氧基羰基并且不是2-喹啉羰基。

3、权利要求1或2所述的化合物，其具有下式II：

其中R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R¹³和R¹⁵如上所述。

4、权利要求1或3所述的化合物，其中R³、R⁴和R⁵是甲基，R⁶是叔丁基或/和R¹⁵是苯基。

5、权利要求1至4所述的化合物，其中R²是烷基羰基、环烷基羰基、芳基羰基、杂环基羰基、杂环基烷基羰基或下式的基团：其中当n＝0时，Y表示O或S，并且R¹⁰是烷基、芳基烷基、杂环基烷基、芳基、杂环基，或者当n＝1时，Y表示N，R⁹是H且R¹⁰是烷基、芳基烷基、杂环基烷基、芳基或杂环基，并且其中R¹¹和R¹²彼此独立地是H。