CN1351611A - 病毒感染的长效融合肽抑制剂 - Google Patents

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Abstract

具有抗病毒和抗融合活性的肽经修饰提供更高的稳定性和改进的体内半衰期。所选肽包括融合抑制剂DP178和DP107和有关的肽及其类似物。经修饰的肽能够与一种或多种血液组分,优选流动的血液组分形成共价键。

Description

病毒感染的长效融合肽抑制剂
发明领域
本发明涉及经修饰的肽，其是病毒活性的抑制剂和/或表现出抗融合特性。特别是，本发明涉及人免疫缺陷病毒(HIV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、人副流感病毒(HPV)、麻疹病毒(MeV)和猿猴免疫缺陷病毒(SIV)的经修饰的肽抑制剂，其在各个病毒感染的治疗中具有长效作用。本发明还涉及经修饰的肽和内源性载体的偶联物，特别是经修饰的肽和多种流动的血液成分、尤其是流动的内源性蛋白的偶联物。发明背景
虽然在正常细胞生物学过程中是寻常的，但膜融合活动也参与多种疾病状态，包括例如有包膜病毒进入细胞内。已知肽类能够阻止或中断膜融合相关性活动，包括例如抑制逆转录病毒传播给未感染细胞。譬如，合成肽DP-107和DP-178衍生自I型人免疫缺陷病毒(“HIV-1”)跨膜(“TM”)糖蛋白gp41的独立结构域，是HIV-1侵染和HIV诱导的细胞-细胞融合的有效抑制剂。
Lambert等在“副粘病毒融合(F)蛋白的保守区的肽是病毒融合的有效抑制剂”Proc.Natl.Acad.Science U.S.A.，March 5，1996，Vol.93(5)，pp.2186-91中公开了合成肽DP-107和DP-178(T-20)，它们衍生自I型人免疫缺陷病毒(HIV-1)跨膜(TM)蛋白gp41内的独立结构域，是HIV-1侵染和融合的有效抑制剂。利用计算机搜索策略(computerizedantiviral searching technology，C.A.S.T.)基于DP-107和DP-178(T20)的二级结构，Lambert等在其它融合病毒的糖蛋白内鉴定出类似于HIV-1gp41的DP-107和DP-178区的保守七重(复)结构域。由三种代表性副粘病毒呼吸道合胞病毒(RSV)、III型人副流感病毒(HPIV-3)和麻疹病毒(MV)衍生的抗病毒肽阻断同源病毒介导的合胞体形成且表现的EC50值在0.015-0.250μM范围内。此外，这些肽对于病毒的来源非常有选择性。
U.S.专利6,013,263、6,017,536和6,020,459在此全文引入作为参考，同样地公开了36个氨基酸的肽DP178，其相当于源自HIV-1分离物LAI(HIV-1LAI)的gp41的氨基酸638-673，和38个氨基酸的肽DP107，其相应于HIV-ILAI的gp41的氨基酸558-595，两者均表现出抗HIV-1活性。
尽管现有技术中公开的许多抗病毒或抗融合肽显示出有效的抗病毒和/或抗融合活性，但这些肽存在体内血浆半衰期短的缺陷，这主要归因于血清清除快和肽酶和蛋白酶的作用。因此极大地降低了所述肽的有效抗病毒活性。所以，需要一种延长现有抗病毒和/或抗融合肽的半衰期并使这些肽的体内作用时间更长久的方法。发明概述
本发明符合这些和其他的需求，并且涉及具有抗病毒活性和/或抗融合活性的经修饰的肽。这些经修饰的肽提供增强的体内稳定性且降低了对肽酶或蛋白酶降解的敏感性。因而这些经修饰的肽最大程度地减小了例如这些肽非常频繁或者甚至连续给药的需要。本发明的不同实施方式的产品可以用作例如对多种病毒感染的抵预和/或治疗，包括人免疫缺陷病毒(HIV)、人呼吸道合胞病毒(RSV)、人副流感病毒(HPV)、麻疹病毒(MeV)和猿猴免疫缺陷病毒(SIV)。参与病毒转染(例如肝炎、埃-巴二氏病毒和其他有关病毒)的其他肽的修饰也属于本发明的范围内。
本发明涉及具有抗病毒和/或抗融合活性的肽的化学上反应性修饰，因此这些经修饰的肽可以与血液组分上可利用的官能度(functionalitis)反应形成稳定的共价键。在本发明的一个实施方式中，所述的经修饰的肽含有与血液组分上的氨基、羟基或巯基反应形成稳定共价键的反应性基团。在本发明的另一实施方式中，反应性基团可以是与血液蛋白上的巯基反应的马来酰亚胺，所述的血液蛋白包括流动血液蛋白如白蛋白。
特别是，本发明涉及DP107和DP178肽及其类似物的化学反应性修饰，类似物包括含有源自其他(非HIV)病毒氨基酸序列的肽，其相应于产生DP107和DP178的HIV的gp41区并表现出抗病毒或抗融合活性。更特别地，其中这些肽可以对人呼吸道合胞病毒(RSV)、人副流感病毒(HPV)、麻疹病毒(MeV)和猿猴免疫缺陷病毒(SIV)具有抗病毒作用。本发明还涉及SEQ ID NO：1至SEQ ID NO：86的肽的化学反应性修饰。
本发明也涉及用于预防和/或治疗病毒感染的组合物，其中含有用所述反应性基团修饰的具有抗病毒活性的肽。更特别地，本发明涉及用于预防和/或治疗AIDS、人呼吸道合胞病毒(RSV)、人副流感病毒(HPV)、麻疹病毒(MeV)和猿猴免疫缺陷病毒(SIV)的组合物。附表简述
通过参考附表可以更好地理解本发明，其中：
表1列出了常见氨基酸及其单字母和三字母缩写，和常用的保护基。
表2表示DP178羧基端平截。
表3表示DP178氨基端平截。
表4表示DP107羧基端平截。
表5表示DP107氨基端平截。
表6表示HIV-2NIHZ DP178类似物羧基端平截。
表7表示HIV-2NIHZ DP178类似物氨基端平截。
表8表示RSV F2区DP107类似物羧基端平截。
表9表示RSV F2区DP107类似物氨基端平截。
表10表示RSV F1区DP178类似物羧基端平截。
表11表示RSV F1区DP178类似物氨基端平截。
表12表示HPV3 F1区DP178类似物羧基端平截。
表13表示HPV3 F1区DP178类似物氨基端平截。
表14表示HPV3 F1区DP107类似物羧基端平截。
表15表示HPV3 F1区DP107类似物氨基端平截。
表16表示典型的抗RSV肽。
表17表示典型的抗HPV3肽。
表18表示典型的抗SIV肽。
表19表示典型的抗MeV肽。序列表的简述
参考序列列表将更好地理解本发明，其中：
SEQ ID NO：1表示DP178的肽序列。
SEQ ID NO：2表示DP107的肽序列。
SEQ ID NO：3-9表示某些DP178类似物的肽序列。
SEQ ID NO：10-30表示相应于DP178和DP107的RSV F1区和F2区和典型的抗RSV肽的肽序列；
SEQ ID NO：3 1-62表示相应于DP178和DP107的HPIV3 F1区和典型的抗HPIV3肽的肽序列；
SEQ ID NO：63-73表示相应于DP178的SIM和典型的抗SIV肽的肽序列；且
SEQ ID NO：74-78表示相应于DP178的MeV和典型的抗MeV肽的肽序列。发明详述
为了确保完全理解本发明，提供下列定义：
抗病毒肽：在此所用的抗病毒肽将是指抑制细胞的病毒感染的肽，其通过例如抑制细胞-细胞融合或游离病毒感染。感染的途径可以包括膜融合，如同有包膜病毒情况中所出现的；或一些涉及病毒和细胞结构的其他融合活动。抑制特定病毒的病毒感染的肽可以相对于该特定病毒引用，例如抗HIV肽、抗RSV肽等。
抗融合肽：抗融合肽是指证实有能力抑制或降低两个或多个实体如病毒-细胞或细胞-细胞之间的膜融合活动的水平的肽，其相对于肽不存在下出现膜融合的水平而言。
HIV和抗HIV肽：导致获得性免疫缺陷综合征的人免疫缺陷病毒(HIV)是反转录病毒的慢病毒属的一员。HIV存在两种流行类型HIV-1和HIV-2，业已鉴定出其各自具有多种株。HIV以CD-4+细胞为靶向，而病毒的进入依赖于HIV蛋白gp41与CD-4+细胞表面受体的结合。抗HIV肽是指对HIV表现出抗病毒活性的肽，包括抑制游离病毒对CD-4+细胞的感染和/或抑制感染和未感染CD-4+细胞之间的HIV诱导的合胞体形成。
SIV和抗SIV肽：猿猴免疫缺陷病毒(SIV)是在易感猿猴子中引起获得性免疫缺陷综合征(AIDS)样疾病的慢病毒。抗SIV肽是对SIV表现出抗病毒活性的肽，包括抑制SIV对细胞的感染和抑制感染或未感染细胞之间合胞体形成。
RSV和抗RSV肽：呼吸道合胞病毒(RSV)是一种呼吸道病原体，对于婴儿和低龄儿童尤其危险，该病毒在他们中可以引起细支气管炎(细小气道的炎症)和肺炎。RSV是负义、单链RNA病毒且是病毒的副粘病毒科的成员。RSV的感染途径通常经过呼吸道即鼻、咽喉、气管、支气管和细支气管的粘膜。抗RSV肽是对RSV表现出抗病毒活性的肽，包括抑制游离RSV病毒的粘膜细胞感染以及感染和未感染细胞之间的合胞体形成。
HPV和抗HPV肽：人副流感病毒(HPIV或HPV)，如同RSV，是另一种导致呼吸道疾病的因素，而且如同RSV类病毒，是负义、单链RNA病毒，其是病毒的副粘病毒科的成员。存在四种已识别HIPV的血清型--HPIV-1、HPIV-2、HPIV-3和HPIV-4。HPIV-1是导致儿童中哮吼的原因，并且HPIV-1和HPIV-2皆引起上下呼吸道疾病。HPIV-3常常与细支气管炎和肺炎有关。抗HPV肽是对HPV表现出抗病毒活性的肽，包括抑制游离HPV病毒的感染和感染和未感染细胞之间合胞体形成。
MeV和抗MeV肽：麻疹病毒(VM或MeV)是一种有包膜负义、单链RNA病毒，属于病毒的副粘病毒科。如同RSV和HPV，MeV引起呼吸疾病，并且产生导致附加、机会性感染的免疫抑制。在一些情形中，MeV可以建立脑部的感染导致神经学上的(neurlogical)并发症。抗MeV肽是对MeV表现出抗病毒活性的肽，包括抑制游离MeV病毒的感染和感染与未感染之间的合胞体形成。
DP-178和DP178类似物：除非另外明确指出或记载，DP-178是指36个氨基酸DP-178肽，其相应于HIV-1分离物LAI(HIVLAI)的gp41糖蛋白的氨基酸残基638-673并且具有序列：YTSLIHSLIEESQNQQEKNEQELLELDKWASLWNWF(SEQ ID NO：1)及其平截、缺失和/或插入。DP178肽的平截可以包括3-36个氨基酸的肽。缺失包括从DP178肽去除一个或多个氨基酸残基，并且可以去除肽序列的一个邻接部分和多个部分。插入可以包括一个氨基酸残基或残基链，并且可以在DP178肽的羧基或氨基末端或在该肽的内部位置进行。
DP178肽类似物是肽，其氨基酸序列含有除HIV-1LAI之外的病毒的肽区的序列，其相应于产生DP178的gp41区，以及其平截、缺失或插入。所述的其他病毒可以包括但不限于其他HIV分离物如HIV-2NIHZ、呼吸道合胞病毒(RSV)、人副流感病毒(HPV)、猿猴免疫缺陷病毒(SIV)和麻疹病毒(MeV)。DP178类似物也是指那些通过ALLMOTI5、107×178×4和PLZIP搜索基元鉴定或识别的具有与DP178相似的结构和/或氨基酸基元的肽序列，其公开在美国专利6,013,263、6,017,536和6,020,459并且在此引入。DP178类似物进一步是指称作“DP178样”的肽，该术语在美国专利6,013,263、6,017,536和6,020,459中。
DP-107和DP107类似物：除非另外明确指出或记载，DP-107是指38个氨基酸的DP-107肽，其相应于HIV-1分离物LAI(HIVLAI)的gp41糖蛋白的氨基酸残基558-595并且具有序列：
NNLLRAIEAQQHLLQLTVWQIKQLQARILAVERYLKDQ(SEQ ID NO：2)及其平截、缺失和/或插入。DP107肽的平截可以含有3-38氨基酸的肽。缺失是包括从DP107肽去除一个或多个氨基酸残基，并且可以去除肽序列的一个邻接部分和多个部分。插入可以包括一个氨基酸残基或残基链，并且可以在DP107肽的羧基或氨基末端或在该肽的内部位置进行。
DP107肽类似物是肽，其氨基酸序列含有除HIV-1LAI之外的病毒的肽区的序列，其相应于产生DP107的gp41区，以及其平截、缺失或插入。所述的其他病毒可以包括但不限于其他HIV分离物如HIV-2NIHZ、呼吸道合胞病毒(RSV)、人副流感病毒(HPV)、猿猴免疫缺陷病毒(SIV)和麻疹病毒(MeV)。DP107类似物也是指那些通过ALLMOTI5、107×178×4和PLZIP搜索基元鉴定或识别的具有与DP107相似的结构和/或氨基酸基元的肽序列，其公开在美国专利6,013,263、6,017,536和6,020,459中。DP107类似物进一步是指称作“DP107样”的肽，该术语在美国专利6,013,263、6,017,536和6,020,459中定义。
反应性基团：反应性基团是能够形成共价键的化学基团。所述的反应性基团与DP-107或DP-178肽或其类似物或其他感兴趣的抗病毒或抗融合肽偶联或键合。反应性基团一般在含水环境中稳定，而且通常为羧基、磷酰基或适宜的酰基，或者是酯或混合酸酐，或亚胺酸酯(盐)，由此能够与位于流动血液组分上的靶向位点处的官能度如氨基、羟基或巯基形成共价键。对于绝大部分，所述的酯应包括酚类化合物，或是硫羟酸酯、烷基酯、磷酸酯等。
官能度：官能度是血液组分上的与经修饰的抗病毒肽上的反应性基团反应形成共价键的基团。官能度包括：键合酯反应性实体的羟基；与马来酰亚胺、亚胺酸酯和硫酯基反应的巯基；键合羧基、磷酰基或酰基的氨基；和与氨基键合的羧基。
血液组分：血液组分可以或固定或流动。固定的血液组分是非流动血液组分且包括组织、膜受体、间质蛋白、纤维蛋白、胶原、血小板、内皮细胞、上皮细胞及其相关的膜和膜受体、体细胞、骨骼肌和平滑肌细胞、神经元组分、骨细胞和破骨细胞以及全部机体组织，尤其是与循环和淋巴系统有关的组织。流动的血液组分是在任意延长的时间内不具有固定位点的血液组分，一般不超过5分钟，更经常是1分钟。这些血液组分与膜无关，而且长时间存在于血液内并以至少0.1μg/ml的最低浓度存在。流动的血液组分包括血清白蛋白、转铁蛋白、铁蛋白和免疫球蛋白如IgM和IgG。流动的血液组分的半衰期至少约12小时。
保护基：保护基是用来保护肽衍生物不发生自身反应的化学基团。多种保护基公开在本文和U.S.5,493,007(在此引入作为参考)中。此类保护基包括乙酰基、芴基甲氧基羰基(Fmoc)、叔丁氧基羰基(Boc)、苄氧基羰基(CBZ)等。具体的保护氨基酸列在表1中。
                              表1
                     天然氨基酸及其缩写
    名称   3个字母的缩写   1个字母的缩写   经修饰的氨基酸
  丙氨酸     Ala     A     Fmoc-Ala-OH
  精氨酸     Arg     R     Fmoc-Arg(Pbf)-OH
  天门冬酰胺     Asn     N     Fmoc-Asn(Trt)-OH
  天门冬氨酸     Asp     D     Asp(tBu)-OH
  半胱氨酸     Cys     C     Fmoc-Cys(Trt)
  谷氨酸     Glu     E     Fmoc-Glu(tBu)-OH
  谷氨酰胺     Gln     Q     Fmoc-Gln(Trt)-OH
  甘氨酸     Gly     G     Fmoc-Gly-OH
  组氨酸     His     H     Fmoc-His(Trt)-OH
  异亮氨酸     IIe     I     Fmoc-Ile-OH
  亮氨酸     Leu     L     Fmoc-Leu-OH
  赖氨酸     Lys     Z     Boc-Lys(Aloc)-OH
  赖氨酸     Lys     X     Fmoc-Lys(Aloc)-OH
  赖氨酸     Lys     K     Fmoc-Lys(Mtt)-OH
  蛋氨酸     Met     M     Fmoc-Met-OH
  苯丙氨酸     Phe     F     Fmoc-Phe-OH
  脯氨酸     Pro     P     Fmoc-Pro-OH
  丝氨酸     Ser     S     Fmoc-Ser(tBu)-OH
  苏氨酸     Thr     T     Fmoc-Thr(tBu)-OH
  色氨酸     Trp     W     Fmoc-Trp(Boc)-OH
  酪氨酸     Tyr     Y     Boc-Tyr(tBu)-OH
  缬氨酸     Val     V     Fmoc-Val-OH
连接基因：连接(间隔)基团是将反应性实体键合或相连于抗病毒或抗融合肽的化学基团。连接基团可以包括一个或多个烷基部分、烷氧基部分、链烯基部分、炔基部分或被烷基部分取代的氨基部分、环烷基部分、多环部分、芳基部分、多芳基部分、取代芳基部分、杂环部分和取代杂环部分；连接基团也可以含有聚乙氧基氨基酸，例如AEA((2-氨基)乙氧基乙酸)或优选的连接基团AEEA([2-(2-氨基)乙氧基)]乙氧基乙酸)。
敏感官能团-敏感官能团是代表抗病毒和/或抗融合肽上的潜在反应位点的基团。如果存在，可以选择敏感官能团作为连接体-反应性基团修饰的连接点。敏感官能团包括但不限于羧基、氨基、巯基和羟基。
经修饰的肽-经修饰的肽是已经通过连接反应性基团修饰的抗病毒和/或抗融合肽。所述的反应性基团可以通过连接基团与所述的肽连接，或任选地不采用连接基团。也可以考虑把一个或多个附加氨基酸引入所述的肽以便于反应性基团的连接。经修饰的肽可以体内给药使其在体内发生与血液组分的结合，或者首先使它们与体外血液组分结合并且将所得的偶联肽(如下定义)体内给药。
偶联肽-偶联肽是已经与血液组分通过经修饰的肽的反应性基团和血液组分的官能度之间的共价键、在可有可无的连接基团下偶联的经修饰的肽。本申请中所用的术语“偶联肽”可以更加具体地指特定的偶联肽，例如“偶联DP178”或“偶联DP107”。
鉴于上述定义，本发明具有现有抗病毒和抗融合肽的特性的优越性。可以利用所述的肽抑制的病毒包括但不限于例如在美国专利6,013,263、6,017,536和6,020,459的表V-VII和IX-XIV中所列病毒的所有毒株。这些病毒包括，例如：人反转录病毒，包括HIV-1、HIV-2；和人T淋巴细胞病毒(HTLV-I和HTLV-II)；和非人反转录病毒，包括牛造白细胞组织增生病毒、猫肉瘤病毒、猫白血病病毒、猿猴免疫缺陷病毒(SIV)、猿猴肉瘤病毒、猿猴白血病和绵羊进行性肺炎病毒。非反转录病毒也可以通过本发明的肽抑制，包括人呼吸道合胞病毒(RSV)、犬瘟热病毒、新城疫病毒、人副流感病毒(HPIV)、流感病毒、麻疹病毒(MeV)、埃-巴氏病毒、乙型肝炎病毒和猿猴Mason-Pfizer病毒。非有包膜病毒也可以用本发明的肽抑制，并且包括但不限于细小核糖核酸病毒如脊髓灰质炎病毒、甲型肝炎病毒、肠道病毒、埃可病毒、柯萨奇病毒、乳头多瘤空泡病毒如乳头状瘤病毒、细小病毒、腺病毒和呼肠孤病毒。
如实施例所述，HIV融合肽的作用机理已经在本申请背景部分中探讨，并且所述肽的抗病毒和抗融合特性业已很好地确立。相应于羧基末端胞外结构域序列的合成肽(例如，LAI毒株的B型HIV-1的氨基酸残基643-678或源自相似毒株的残基638-673以及残基558-595)已经显示出在非常低的浓度下抑制病毒介导的细胞-细胞融合。融合肽与天然病毒gp41的亮氨酸拉链结构区竞争，由此干扰病毒进入细胞的融合/感染。
本发明的重点在于利用DAC(药物活性复合物)技术、通过选择性地将肽偶联在蛋白载体上修饰选定的抗病毒和/或抗融合肽，赋予这种肽改进的生物利用度、延长的本申请和更良好的分布，但不改变肽的抗病毒特性。本发明选择(但不限于)的载体是白蛋白，通过其游离巯基与用马来酰亚胺基团修饰的抗病毒和/或抗融合肽偶联。
对HIV-1融合/感染的预防非常有效的若干肽序列业已公开在文献中。例如，肽DP178结合与融合有关的gp41的构象。因此在本发明的一个实施方式中，修饰DP178和DP178样肽。同样地，本发明的其他实施方式包括用于抗HIV的DP107和DP107样肽以及类似于在RSV、HPV、MeV和SIV病毒中发现的DP107和DP178的肽的修饰。
1.DP178和DP107
A.DP178肽
DP178肽相应于源自HIV-1LAI分离物的跨膜蛋白gp41的氨基酸残基638-673，并且具有36个氨基酸的序列(从氨基向羧基末端读取)：
NH2-YTSLIHSLIEESQNQQEKNEQELLELDKWASLWNWF-COOH(SEQ ID NO：1)
除了全长DP178的36聚体以外，本发明的肽包括含有3-36个氨基酸残基的DP178肽的平截(即，肽的大小范围是三肽至36聚多肽)，这些平截肽如表2和3所示。
此外DP178的氨基酸替换也属于本发明的范围内。HIV-1和HIV-2包膜蛋白在结构式上不同，但在HIV-1和HIV-2相应DP178的区域内存在明显的氨基酸保守性。该氨基酸保守性具有周期性，提示了一些结构和/或功能的保守性。因此，氨基酸替换的一种可能类型将包括那些预计稳定本发明的DP178肽的结构的氨基酸变化。利用在此所述的DP178和DP178类似物序列，所属领域普通技术人员可以很容易地编译DP178共有序列并由此确定代表优选氨基酸替换的保守性氨基酸残基。
氨基酸替换可以具有保守或非保守性。保守的氨基酸替换由用具有相似电荷、大小和/或疏水特性的氨基酸置换DP178肽序列的一个或多个氨基酸组成，例如谷氨酸(E)对天门冬氨酸(D)的氨基酸替换。非保守性替换由用具有相异电荷、大小和/或疏水特性的氨基酸置换DP178肽序列的一个或多个氨基酸组成，例如谷氨酸(E)对缬氨酸(V)的替换。
DP178的氨基酸插入可以由一个氨基酸残基或残基链组成。插入可以在DP178或DP178平截肽的羧基或氨基末端进行，并且可以在肽的内部位置进行。
所述的插入在长度上一般为2-15个氨基酸。值得考虑的是，在感兴趣肽的羧基或氨基末端进行的插入可以在更加宽的大小范围内，优选约2至约50个氨基酸。可以将一个或多个所述插入引入DP178或DP178平截中，只要这样的插入使所得的肽仍然可以通过上述107×178×4、ALLMOTI5或PLZIP搜索基元识别。
优选的氨基或羧基末端插入是长度范围在约2至约50个氨基酸残基内的肽，这些肽分别相应于实际DP178 gp41氨基酸序列氨基或羧基侧的gp41蛋白区域。所以，优选的氨基末端或羧基末端氨基酸插入将含有gp41氨基酸序列，该序列紧接于gp41蛋白的DP178区的氨基或羧基端。
DP178或DP178平截的缺失也属于本发明的范围内。所述的缺失由除去DP178或DP178样肽序列的一个或多个氨基酸组成，并且所得肽序列的长度的下限为4-6个氨基酸。
所述缺失可以包括肽序列的一个邻接部分或一个以上的不连续部分。可以将一个或多个这样的缺失引入DP178或DP178平截中，只要这些缺失得到的肽可以通过上述107×178×4、ALLMOTI5或PLZIP搜索基元识别。
B.DP107肽
DP107是一种38个氨基酸的肽，其具有有效的抗病毒活性，并且相应于源自HIV-1LAI分离物的跨膜蛋白gp41的氨基酸残基558-595，如下所示：
NH2-NNLLRAIEAQQHLLQLTVWQIKQLQARILAVERYLKDQ-COOH (SEQ ID NO：2)
除了全长DP107的38聚体以外，本发明的肽包括含有3-38个氨基酸残基的DP107肽的平截(即，肽的大小范围是三肽至38聚多肽)，这些平截肽如表4和5所示。
此外DP178的氨基酸替换也属于本发明的范围内。如同DP178,在HIV-1和HIV-2相应DP178的区域内也存在明显的氨基酸保守性。该氨基酸保守性具有周期性，提示了结构和/或功能的保守性。因此，氨基酸替换的一种可能类型包括那些预计稳定本发明的DP107肽的结构的氨基酸变化。利用在此所述的DP107和DP107类似物序列，所属领域普通技术人员可以很容易地编译DP107共有序列并由此确定代表优选氨基酸替换的保守性氨基酸残基。
氨基酸替换可以具有保守或非保守性。保守的氨基酸替换由用具有相似电荷、大小和/或疏水特性的氨基酸置换DP107肽序列的一个或多个氨基酸组成，例如谷氨酸(E)对天门冬氨酸(D)的氨基酸替换。非保守性替换由用具有相异电荷、大小和/或疏水特性的氨基酸置换DP107肽序列的一个或多个氨基酸组成，例如谷氨酸(E)对缬氨酸(V)的替换。
氨基酸插入可以由一个氨基酸残基或残基链组成。插入可以在DP107或DP107平截肽的羧基或氨基末端进行，并且可以在肽的内部位置进行。
所述的插入在长度上一般为2-15个氨基酸。值得考虑的是，在感兴趣肽的羧基或氨基末端进行的插入可以在更加宽的大小范围内，优选约2至约50个氨基酸。可以将一个或多个所述插入引入DP107或DP107平截中，只要这样的插入得到的肽仍然可以通过上述107×178×4、ALLMOTI5或PLZIP搜索基元识别。
优选的氨基或羧基末端插入是长度范围在约2至约50个氨基酸残基内的肽，分别相应于实际DP107 gp41氨基酸序列氨基或羧基侧的gp41蛋白区域。所以，优选的氨基末端或羧基末端氨基酸插入将含有gp41氨基酸序列，该序列紧接于gp41蛋白的DP107区的氨基或羧基端。
DP107或DP107平截的缺失也属于本发明的范围内。所述的缺失包括除去DP107或DP107样肽序列的一个或多个氨基酸，并且所得肽序列的长度的下限为4-6个氨基酸。
所述缺失可以包括肽序列的一个邻接部分或一个以上的不连续部分。可以将一个或多个这样的缺失引入DP107或DP107平截中，只要这些缺失得到的肽可以通过上述107×178×4、ALLMOTI5或PLZIP搜索基元识别。
DP107和DP107平截全面公开在美国专利5,656,480中，其在此全文引入作为参考。
2.DP107和DP178类似物
本发明的相应于上述DP178的类似物、DP178平截、DP107和DP107平截序列的肽可以在其它病毒中发现，包括例如非HIV-1有包膜病毒、非有包膜病毒和其它非病毒生物。
所述的DP178和DP107类似物可以例如相应于存在于有包膜病毒的跨膜(“TM”)蛋白中的肽序列，并且可以相应于存在于非包膜和非病毒生物中的肽序列。所述肽可以具有抗融合活性、抗病毒活性，最特别的是对发现其中天然序列的病毒具有特异性的抗病毒活性，或者可以表现出调节涉及卷曲螺旋结构的胞内过程的性能。
A.DP178类似物
DP178类似物是肽，其氨基酸序列含有例如其它(即非HIV-1)病毒的肽区的氨基酸序列，该氨基酸序列相应于产生DP178的gp41肽区。所述的病毒可以包括但不限于其它HIV-1分离物和HIV-2分离物。
衍生自其它(即非HIV-1LAI)HIV-1分离物的相应gp41肽区的DP178类似物可以包括，例如如下所示的肽序列：
NH2-YTNTIYTLLEESQNQQEKNEQELLELDKWASLWNWF-COOH(SEQ ID NO：3)
NH2-YTGIIYNLLEESQNQQEKNEQELLELDKWANLWNWF-COOH(SEQ ID NO：4)
NH2-YTSLIYSLLEKSQIQQEKNEQELLELDKWASLWNWF-COOH(SEQ ID NO：5)
SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：5的肽分别衍生自HIV-1SF2、HIV-1RF和HIV-1MN。其它DP178类似物包括衍生自HIV-2的那些，包括SEQ ID NO：6和SEQ ID NO：7的肽，它们分别衍生自HIV-2ROD和HIV-2NIHZ。其它有效的类似物包括SEQ ID NO：8和SEQ IDNO：9的肽，已经证实它们具有抗病毒活性。
在本发明中，优选DP178类似物表示那些其氨基酸序列相应于gp41蛋白的DP178区的肽；另外，也可以考虑本此处所述的肽含有长度范围在约2至约50个氨基酸残基内的氨基酸序列，该序列相应于实际DP178氨基酸序列氨基或羧基端的gp41区。
表6和表7表示HIV-2NIHZ DP178类似物的一些可能的平截，它们含有3至36氨基酸残基的肽(即肽大小范围是三肽至36聚多肽)。这些表中的肽序列是从氨基(左方)向羧基(右方)末端列出。
B.另外的DP178类似物和DP107类似物
DP178和DP107类似物是通过例如用一个或多个上述107×178×4、ALLMOTI5或PLZIP计算机辅助搜索策略进行识别和鉴定。这些搜索策略鉴别出预知具有类似于DP107和/或DP178的结构和/或氨基酸序列特征的附加肽区。
上述搜索策略全面公开在美国专利6,013,263、6,017,536和6,020,459的第9部分中的实施例中。虽然这种搜索策略部分基于由DP107和DP178演绎的基本氨基酸基元，但它不仅仅基于搜索基本氨基酸序列同源性，因为这种蛋白序列同源性存在于病毒的主要组群中，但不存在于各主要组群之间。譬如，基本氨基酸序列同源性在HIV-1的不同毒株的TM蛋白内或在猿猴免疫缺陷病毒(SIV)的不同分离物的TM蛋白内非常高。
公开在美国专利6,013,263、6,017,536和6,020,459中的计算机搜索策略成功地鉴别了类似于DP107或DP178的蛋白的区域。这种搜索策略被设计为与市售序列数据库包、优选PC/Gene一起使用。
在美国专利6,013,263、6,017,536和6,020,459中，设计了一系列的搜索基元107×178×4、ALLMOTI5和PLZIP基元，并且在从严到宽的严格范围内内工程化，其中优选107×178×4。经过上述搜索基元鉴定的序列，例如那些在美国专利6,013,263、6,017,536和6,020,459中的表V-XIV中和本申请引入作为参考的所列序列，潜在地具有抗融合(如抗病毒)活性，可以另外用于抗融合(如抗病毒)化合物的鉴定。
3.其它抗病毒肽
A.抗RSV肽
抗RSV肽包括由RSV中相应肽序列鉴定出的DP178和/或DP107类似物，其进一步鉴定能够抑制RSV的病毒感染。感兴趣的此类肽包括表16的肽和SEQ ID NO：10至SEQ ID NO：30的肽。特别感兴趣的是下列肽：
YTSVITIELSNIKENKCNGAKVKLIKQELDKYK  (SEQ ID NO：14)
TSVITIELSNIKENKCNGAKVKLIKQELDKYKN  (SEQ ID NO：15)
VITIELSNIKENKCNGAKVKLIKQELDKYKNAV  (SEQ ID NO：16)
IALLSTNKAVVSLSNGVSVLTSKVLDLKNYIDK  (SEQ ID NO：29)
SEQ ID NO：10的肽衍生自RSV的F2区，并且在美国专利6,103,236和6,020,459中利用相应于DP107和DP178肽的所述搜索基元(即“DP107/178样”)鉴定。SEQ ID NO：14至SEQ ID NO：16的肽分别具有SEQ ID NO：10中所含的氨基酸序列，并且各自已经显示出抗RSV活性，特别是在低于50μg/ml的浓度下抑制RSV感染和未感染Hep-2细胞之间的融合和合胞体形成。
SEQ ID NO：11的肽衍生自RSV的F1区，并且在美国专利6,103,236和6,020,459中利用相应于DP107的所述搜索基元(即“DP107样”)鉴定。SEQ ID NO：29含有SEQ ID NO：10中所含的氨基酸序列，并且同样地表现出抗RSV活性，特别是在低于50μg/ml的浓度下抑制RSV感染和未感染Hep-2细胞之间的融合和合胞体形成。
B.抗HPIV肽
抗HPIV肽包括由HPIV中相应肽序列鉴定的DP178和/或DP107类似物，并且其进一步鉴定为可以抑制HPIV的病毒感染。感兴趣的此类肽包括表17的肽和SEQ ID NO：31至SEQ ID NO：62的肽。特别感兴趣的是下列肽：
VEAKQARSDIEKLKEAIRDTNKAVQSVQSSIGNLI  (SEQ ID NO：52)
RSDIEKLKEAIRDTNKAVQSVQSSIGNLIVAIKSV  (SEQ ID NO：58)
NSVALDPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSNQKL  (SEQ ID NO：35)
ALDPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSNQKLDSI  (SEQ ID NO：38)
LDPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSNQKLDSIG  (SEQ ID NO：39)
DPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSNQKLDSIGN  (SEQ ID NO：40)
PIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSNQKLDSIGNW  (SEQ ID NO：41)
IDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSNQKLDSIGNWH  (SEQ ID NO：42)
 SEQ ID NO：31的肽衍生自HPIV-3的F1区，并且在美国专利6,103,236和6,020,459中利用相应DP107的所述搜索基元(即“DP107样”)鉴定。SEQ ID NO：52和SEQ ID NO：58的肽分别具有SEQ ID NO：30中所含的氨基酸序列，而且各自显示出抗HPIV-3活性，特别是在低于1μg/ml的浓度下抑制HPIV-3-感染的Hep-2细胞和未感染的CV-1W细胞之间的融合和合胞体形成。
SEQ ID NO：32的肽衍生自HPIV-3的F1区，并且在美国专利6,103,236和6,020,459中利用相应DP178的所述搜索基元(即“DP178样”)鉴定。SEQ ID NO：35和SEQ ID NO：38至SEQ IN NO：42的肽分别具有SEQ ID NO：32中所含的氨基酸序列，而且各自显示出抗HPIV-3活性，特别是在低于1μg/ml的浓度下抑制HPIV-3-感染的Hep-2细胞和未感染的CV-1W细胞之间的融合和合胞体形成。
C.抗MeV肽
抗MeV肽是由麻疹病毒(MeV)中相应肽序列鉴定出的DP178和/或DP107类似物，其进一步鉴定为可以抑制麻疹病毒的病毒性感染。特别感兴趣的此类肽包括表19的肽和SEQ ID NO：74至SEQ ID NO：86的肽。特别感兴趣的是下列肽：
HRIDLGPPISLERLDVGTNLGNAIAKLEAKELLE  (SEQ ID NO：77)
IDLGPPISLERLDVGTNLGNAIAKLEAKELLESS  (SEQ ID NO：79)
LGPPISLERLDVGTNLGNAIAKLEAKELLESSDQ  (SEQ ID NO：81)
PISLERLDVGTNLGNAIAKLEAKELLESSDQILR  (SEQ ID NO：84)
衍生自麻疹病毒的序列在美国专利6,103,236和6,020,459中利用相应DP178的所述搜索基元(即“DP178样”)鉴定。SEQ ID NO：77、SEQ ID NO：79、SEQ ID NO：81和SEQ ID NO：83的肽分别具有由此鉴定的氨基酸序列，并且各自显示出抗MeV活性，特别是在低于1μg/ml的浓度下抑制MeV感染的Hep2细胞和未感染的Vero细胞之间的融合和合胞体形成。
D.抗SIV肽
抗SIV肽是由SIV中相应肽序列鉴定出的DP178和/或DP107类似物，其进一步鉴定为可以抑制SIV的病毒性感染。感兴趣的此类肽包括表18的肽和SEQ ID NO：63至SEQ ID NO：73的肽。特别感兴趣的是下列肽：
WQEWERKVDFLEENITALLEEAQIQQEKNMYELQK(SEQ ID NO：64)
QEWERKVDFLEENITALLEEAQIQQEKNMYELQKL(SEQ ID NO：65)
EWERKVDFLEENITALLEEAQIQQEKNMYELQKLN(SEQ ID NO：66)
WERKVDFLEENITALLEEAQIQQEKNMYELQKLNS(SEQ ID NO：67)
ERKVDFLEENITALLEEAQIQQEKNMYELQKLNSW(SEQ ID NO：68)
RKVDFLEENITALLEEAQIQQEKNMYELQKLNSWD(SEQ ID NO：69)
KVDFLEENITALLEEAQIQQEKNMYELQKLNSWDV(SEQ ID NO：70)
VDFLEENITALLEEAQIQQEKNMYELQKLNSWDVF(SEQ ID NO：71)
DFLEENITALLEEAQIQQEKNMYELQKLNSWDVFG(SEQ ID NO：72)
FLEENITALLEEAQIQQEKNMYELQKLNSWDVFGN(SEQ ID NO：73)
衍生自SIV跨膜融合蛋白的序列在美国专利6,103,236和6,020,459中利用相应DP178的所述搜索序列(即“DP178样”)鉴定。SEQ ID NO：64至SEQ ID NO：73的肽分别具有由此鉴定的氨基酸序列，并且各自作为粗品肽显示出有效的抗SIV活性。
4.抗病毒和抗融合肽的修饰
本发明涉及具有抗病毒和/或抗融合活性的肽的修饰，包括DP-107和DP-178及其类似物的这种修饰。所述的经修饰的肽可以与血液组分上的可利用反应性官能度经共价键反应。本发明还涉及所述的修饰、与血液组分的结合及其应用方法。这些方法包括与给患者施用未偶联肽相比延长偶联抗病毒肽衍生物的有效治疗寿命。所述的经修饰的肽是设计成为DAC(药物亲和复合物)类型的肽，其含有抗病毒肽分子和连接基团以及能够与流动的血液蛋白的反应性官能度反应的反应性基团。通过与血液组分或蛋白反应，所述的经修饰的肽或DAC可以经血液传递至适当的位点或受体。
为了与蛋白上的官能度形成共价键，人们可以利用多种活性羧基、特别是酯作为反应性基团，其中羟基在经修饰的肽所需要的水平为生理可接受的。当这些反应性基团中采用多种不同的羟基时，最常见的将是N-羟基琥珀酰亚胺或(NHS)、N-羟基-磺基琥珀酰亚胺(磺基-NHS)。在本发明的优选实施方式中，蛋白质上的官能度是巯基且反应性基团是含马来酰亚胺基的基团，例如γ-马来酰亚胺-丁酰胺(butyralamide)(GMBA)和马来酰亚胺基(maleimido)丙酸(MPA)。
伯胺是NHS酯的主要靶向。蛋白质的N末端上存在的可用α-氨基与NHS酯反应。然而，蛋白质上的α-氨基也可以不是NHS偶联所需要的或可利用的。当5个氨基酸在其侧链中含氮时，只有赖氨酸的ε-胺明显地与NHS酯反应。当NHS酯与伯胺的偶联反应释放N-羟基琥珀酰亚胺时会形成酰胺键，如下图所示
Figure A0080767100261
在本发明的优选实施方式中，这种蛋白上的官能团应是巯基且化学上的反应性基团应是含马来酰亚胺基的基团，如MPA和GMBA(y-马来酰亚胺-丁酰胺)。当反应混合物的pH维持在6.5至7.4之间时马来酰亚胺基首选肽上的巯基。在pH 7.0下，马来酰亚胺基与巯基的反应的速率比与胺反应的速率快1000倍。马来酰亚胺基和巯基之间形成稳定的硫醚键，该硫醚键在生理条件下不能断裂，如下面路线所示。
A.特异性标记
更可取地，本发明的经修饰的肽被设计为特异性地与流动血液蛋白质上的巯基反应。此类反应适宜通过用马来酰亚胺键(例如，由GMBS、MPA或其它马来酰亚胺)修饰的肽与流动血液蛋白(如血清白蛋白或IgG)上的巯基之间的共价键来建立。
在某些环境下，采用马来酰亚胺的特异性标记提供了比用基团如NHS和磺基-NHS的流动蛋白的非特异性标记若干种更好的优越性。巯基在体内不如氨基酸丰富。所以，本发明的马来酰亚胺修饰的肽(即马来酰亚胺肽)应该与较少的蛋白共价键合。譬如，在白蛋白(最丰富的血液蛋白)中只存在一个巯基。因此，肽-马来酰亚胺-白蛋白偶联物将倾向于含有摩尔比约1∶1的肽和白蛋白。除白蛋白以外，IgG分子(II型)也具有游离巯基。由于IgG分子和血清白蛋白构成了血液中可溶性蛋白的绝大多数，因而它们也构成血液中多数的能够与马来酰亚胺修饰的肽共价结合的游离巯基。
此外，在含游离巯基的血液蛋白(包括IgG类)中，用马来酰亚胺特异性标记导致肽-马来酰亚胺-白蛋白偶联物的优先形成，这归因于白蛋白自身的独特特性。在多种物质中高度保守的白蛋白的唯一游离巯基位于氨基酸残基34(Cys34)上。目前业已证实，白蛋白的Cys34比位于其他含游离巯基的蛋白质上的游离巯基具有更高的反应性。这部分归因于白蛋白Cys34具有非常低的pK值5.5。该值比普通半胱氨酸残基的典型pK值低很多，所述的典型pK值一般为约8。由于这种低pK，在正常的生理条件下白蛋白的Cys34主要呈电离形式，这极大提高了其反应性。除了低的Cys34pK值以外，另一个提高Cys34的反应性的因素是其位置，它位于接近于白蛋白V区的一个环状结构的表面的裂隙内。这样的位置使Cys34非常容易被所有种类的配体利用，并且在Cys34作为游离基捕获物和游离巯基清除剂的生物作用中是一个非常重要的因素。这些特性令Cys34非常容易和马来酰亚胺-肽反应，并且反应速率的加快可以是马来酰亚胺-肽与其他含游离巯基蛋白的反应速率的1000倍。
肽-马来酰亚胺-白蛋白偶联物的另一优越性是重现性，这种重现性与在Cys34处特定的1∶1的肽负载到白蛋白上有关。其他技术如戊二醛、DCC、EDC和其他化学活化(如游离胺)缺乏这样的选择性。譬如，白蛋白含有52个赖氨酸残基，其中的25-30个位于白蛋白的表面并因此被偶联反应利用。活化这些赖氨酸残基，或者另外对肽修饰以通过这些赖氨酸残基偶联，得到异源偶联物群体。即使采用1∶1摩尔比的肽和白蛋白，产物将由多种偶联产物组成，一些含有0、1、2或更多肽/个白蛋白，并且各自具有随机在25-30个可利用赖氨酸位点的任意一个或多个位点上偶联的肽。由于可能存在多种组合形式，所以精确组合物和各偶联批次性质的特性记述变得困难，并且批次和批次之间的重现性几乎是不可能的，致使此类偶联物无法成为所期望的治疗剂。此外，虽然通过白蛋白的赖氨酸残基的偶联似乎应该至少具备每个白蛋白分子传递更多治疗剂的优点，但研究显示1∶1的治疗剂和白蛋白比例更加可取。在Stehle等的“负载率决定甲氨蝶呤-白蛋白偶联物在大鼠中的肿瘤靶向特性”Anti-Cancer Drugs，Vol.8，pp.677-685(1997)(该文献在此引入作为参考)中，作者报导抗癌氨甲蝶呤和经戊二醛偶联的白蛋白的1∶1比例产生最有希望的结果。这些偶联物优先被肿瘤细胞吸收，而携带5∶1至20∶1氨甲蝶呤分子的偶联物改变了HPLC分布并在体内迅速被肝脏摄取。由此假定在这些较高的比例下，白蛋白的构象改变削弱了其作为治疗载体的有效性。
通过控制马来酰亚胺-肽的体内给药，人们也可以控制体内白蛋白和IgG的特异性标记。在常规的给药中，所施用马来酰亚胺-肽的80-90％将标记白蛋白而不到5％标记IgG。也可以出现游离巯基如谷胱甘肽的痕量标记。此类特异性标记适合于体内应用，它能够精确计算所给药物的理论半衰期。
除了提供受控的体内特异性标记以外，马来酰亚胺-肽可以提供离体血清白蛋白和IgG的特异性标记。这种离体标记包括将马来酰亚胺-肽加入血液、血清或含有血清白蛋白和/或IgG的盐水溶液中。一旦出现与马来酰亚胺-肽离体偶联，可以将血液、血清或盐水溶液再次给予到患者血液中用于体内治疗。
与NHS-肽对照，马来酰亚胺-肽在水溶液和游离胺的存在下一般相当稳定。由于马来酰亚胺-肽只与游离巯基反应，通常不需要用保护基来防止马来酰亚胺-肽发生自身反应。此外，经修饰的肽的增强了的稳定性允许应用进一步的纯化步骤，例如利用HPLC制备非常纯的适合体内使用的产物。最后，增强了的化学稳定性为产物提供了更长的半衰期。
B.非特异性标记
本发明的抗病毒肽也可以被修饰用于血液组分的非特异性标记。对于非特异性标记，也采用与氨基键合，尤其是形成酰胺键。为了形成这种键，可以采用多种活性羧基、特别是酯作为化学反应性基团，其中羟基部分在所需水平下为生理上可接受的。虽然这些连接剂中可以采用多种不同的羟基，但最常用的是N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和N-羟基-磺基琥珀酰亚胺(磺基-NHS)。
其他可利用的连接剂公开在U.S.专利5,612,034中，其在此引入作为参考。
经修饰的肽的化学反应性基团可以与其在体内反应的不同位点包括：细胞，特别是血液红细胞(红细胞)和血小板；和蛋白质，例如免疫球蛋白，包括IgG和IgM、血清白蛋白、铁蛋白、甾类结合蛋白、转铁蛋白、甲状腺素结合蛋白、α-2-巨球蛋白等。那些与经修饰的肽反应且无法长时间存活的受体一般在约3天内从人体宿主中消除。基于在血液中的浓度，上述蛋白质(包括细胞的蛋白)在血流中至少保留3天，并且可以特别保留5天或更长时间(一般不超过60天，更常见不超过30天)作为半衰期。
首先，反应是与血液中的流动组分进行，特别是血液蛋白和细胞，更加特别是血液蛋白和红细胞。所谓“流动”是指在任何长时间内没有固定位点，一般不超过5分钟，更常为1分钟，虽然一些血液组分可能在长时间内相对静止。最初，应存在相对异源的官能化蛋白和细胞群体。然而，在多数情况中，上述群体在数天内将从起始群体发生实质性变化，这取决于官能化蛋白在血流中的半衰期。所以，通常是在约3天或更长时间内，IgG将变为血流中的主要官能化蛋白。
通常，在给药后5天，IgG、血清白蛋白和红细胞在血液中是血液偶联组分的至少约60mole％、通常至少约75mole％，并且IgG、IgM(基本在非常低的范围)和血清白蛋白是非细胞偶联组分的至少约50mole％、通常至少约75mole％、更常常是至少约80mole％。
通过给患者施用经修饰的肽可以在体内制得预期的非特异经修饰的肽与和血液组分的偶联物，该患者可以是人体或其他哺乳动物。给药可以采取快速浓注或通过输注长时间缓慢引入的形式、利用计量流量等进行。
如果希望，也可以通过把血液和本发明的经修饰的肽混合来离体制备目标偶联物，使经修饰的肽和血液组分上的反应性官能度共价键合，随后把偶联血液返回或施用给宿主。此外，上述制备也通过首先纯化各血液组分或有限数量的组分如红细胞、免疫球蛋白、血清白蛋白等来实现，并且把这些离体组分与化学反应性经修饰的肽结合。随后把官能化血液或血液组分返回给宿主，在体内提供目标治疗有效的偶联物。在离体操作中也可以对血液进行处理防止其凝集。
5.经修饰的抗病毒和抗融合肽的合成
A.肽合成
本发明的抗病毒和/或抗融合肽可以通过所属领域普通技术人员熟知的固相肽化学的标准方法合成。譬如，肽可以通过固相化学技术按照下面由Steward和Young(Steward，J.M.和Young，J.D.，《固相肽合成》(Solid Phase Peptide Synthesis)第2版，Pierce Chemical Company，Rockford，III.，(1984))所述方法、利用Applied Biosystem合成仪制备。同样地，可以合成多个肽片段，随后连接在一起形成更大的肽片段。这些合成肽片段也在特定位置进行氨基酸替换。
对于固相肽合成，有关多种技术的概述可以参见J.M.Stewart和J.D.Young，《固相肽合成》，W.H.Freeman Co.(San Francisco)，1963和J.Meienhofer，《激素蛋白和肽》(Hormonal Proteins and Peptide)vol 2，p.46，Academic Press(New York)，1973。经典的溶液合成法可参见G.Schroder和K.Lupke，《肽》(The Peptides)，Vol.1，AcacemicPress(New York)。一般地，这些方法包括一种或多种氨基酸或适当保护的氨基酸的顺序加入使肽链延长。通常情况下，第一个氨基酸的氨基或羧基被适宜的保护基保护。随后，该保护或衍生化的氨基酸连接在惰性固相载体上或在溶液中通过加入下一个在序列中具有互补(氨基或羧基)基团的适当保护的氨基酸且在适合形成酰胺键的条件下利用。随后从新加入的氨基酸残基上除去保护基并且加入下一个氨基酸(适当保护的)，并且如此继续。
当全部预期的氨基酸已经以适当的序列连接后，依次或同时脱除任何残留的保护基(和任何固相载体)，得到最终的多肽。通过对这种通用方法的简单改进，可以一次性地向延长中的链上添加一个以上的氨基酸，譬如，通过偶联(在不外消旋化手性中心的条件下)保护的三肽和适当保护的二肽，在脱保护后形成五肽。
特别优选的制备本发明化合物的方法包括固相肽合成法，其中用酸或碱敏感基团保护氨基酸的α-N-末端。这样的保护基应该具有对肽键形成的条件稳定的特性，同时易于脱除但不会破坏延长的肽链或不会使其中所含的任何手性中心外消旋化。适用的保护基是：9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)、叔丁氧基羰基(Boc)、苄氧基羰基(Cbz)、联苯基异丙氧基羰基、叔戊氧基羰基、异冰片基氧基羰基、α，α-二甲基-3，5-二甲氧基苄氧基羰基、邻硝基苯基亚磺酰基、2-氰基-叔丁氧基羰基等。9-芴基-甲氧基羰基(Fmoc)保护基特别适合本发明的肽的合成。其他优选的侧链保护基是：对于侧链氨基如赖氨酸和精氨酸来说，是2，2，5，7，8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基(pmc)、硝基、对甲苯磺酰基、4-甲氧基苯磺酰基、Cbz、Boc和金刚烷基氧基羰基；对于酪氨酸来说，苄基、邻溴苄氧基羰基、2，6-二氯苄基、异丙基、叔丁基(t-Bu)、环己基、环戊基和乙酰基(Ac)；对于丝氨酸，叔丁基、苄基和四氢吡喃基；对于组氨酸，三苯甲基、苄基、Cbz、对甲苯磺酰基和2，4-二硝基苯基；对于色氨酸，甲酰基；对于天门冬氨酸和谷氨酸，苄基和叔丁基；和对于半胱氨酸，三苯基甲基(三苯甲基)。
在固相肽合成法中，α-C-末端氨基酸连接在适当的固相载体或树脂上。上述合成适用的固相载体是那些对逐级缩合-脱保护反应的试剂和条件呈惰性且在所用介质内不溶解的物质。C-末端羧基肽的合成所优选的固相载体是4-羟基甲基苯氧基甲基-共聚(苯乙烯-1％二乙烯基苯)。α-C-末端酰胺肽的优选固相载体是Applied Biosystems(Foster City，Calif.)出售的4-(2′，4′-二甲氧基苯基-Fmoc-氨基甲基)苯氧基乙酰胺基乙基树脂。在可有可无的4-二甲基氨基吡啶(DMAP)、1-羟基苯并三唑(HOBT)、苯并三唑-1-基氧基-三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸盐(BOP)或双(2-氧代-3-噁唑烷基)氯化膦(BOPCI)下，α-C-末端氨基酸与树脂在N，N’-二环己基碳二亚胺(DCC)、N，N’-二异丙基碳二亚胺(DIC)或O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N′-四甲基脲-六氟磷酸盐(HBTU)介导下在10至50℃的温度内、于溶剂(如二氯甲烷或DMF)中偶联约1至约24小时。
当固相载体是4-(2′，4′-二甲氧基苯基-Fmoc-氨基甲基)苯氧基-乙酰胺基乙基树脂时，在与上述α-C-末端氨基酸偶联之前，Fmoc基用仲胺、优选哌啶裂解。与脱保护的4-(2′，4′-二甲氧基苯基-Fmoc-氨基甲基)苯氧基-乙酰胺基乙基树脂偶联的优选方法是在DMF中利用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N′-四甲基脲六氟-磷酸(HBTU，1当量)和1-羟基苯并三唑(HOBT，1当量)。成功保护的氨基酸的偶联可以在所属领域熟知的自动多肽合成仪中进行。在一个优选实施方式中，用Fmoc保护生长肽链的α-N-末端氨基酸。通过用仲胺、优选哌啶处理可以脱去生长肽链的α-N-末端侧的Fmoc保护基。随后将各种保护的氨基酸以约3倍摩尔过量引入，偶联反应适宜在DMF中进行。偶联剂一般是O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N′-四甲基脲六氟磷酸(HBTU，1当量)和1-羟基苯并三唑(HOBT，1当量)。
在固相合成结束时，树脂上多肽的脱除和脱保护或者连续进行或者在一个操作中进行。可以在同一操作中利用裂解剂处理树脂结合的多肽来完成多肽的脱除和脱保护，裂解剂包括苯硫基甲烷、水、乙烷二硫醇和三氟乙酸。在多肽的α-C-末端为烷酰胺的情况中，树脂用烷基胺通过氨解裂解。另外，肽可以通过酯基转移，例如用甲醇，随后通过氨解或直接酰胺基转移脱除。保护的肽可以在此时纯化，或者直接进行下一步。侧链保护基的脱除是利用上述混合裂解剂进行。完全脱保护的肽通过一系列采用下列任何或全部类型的色谱步骤进行纯化：弱碱性树脂(乙酸盐型)上的离子交换；未衍生聚苯乙烯-二乙烯基苯(例如Amberlite XAD)上的疏水吸附色谱；硅胶吸附色谱；羧甲基纤维素上的离子交换色谱；分配色谱，例如在Sephadex G-25、LH-20上或逆流分配；高效液体色谱(HPLC)，尤其是在辛基-或十八烷基甲硅烷基-硅胶键合相柱填充上的反相HPLC。
这些ITP的分子量利用快速原子轰击(FAB)质谱法测定。
1.N-末端保护基
如上所述，术语“N-保护基”是指那些用于保护氨基酸或肽的α-N-末端或保护氨基酸或肽的氨基在合成过程中不发生不期望反应的基团。常用的N-保护基公开在“有机合成中的保护基”(Protective Groupsin Organic Synthesis，John Wiley & Sons，New York(1981))，其在此引入作为参考。另外，保护基可以作为前药使用，其易于在体内通过例如酶促水解裂解释放出生物活性母体。α-N-保护基包括：低级链烷酰基(loweralkanoyl)，例如甲酰基、乙酰基(″Ac″)、丙酰基、新戊酰基、叔丁基乙酰基等；其他酰基，包括2-氯乙酰基、2-溴乙酰基、三氟乙酰基、三氯乙酰基、邻苯二甲酰基、邻硝基苯氧基乙酰基、-氯丁酰基、苯甲酰基、4-氯苯甲酰基、4-溴苯甲酰基、4-硝基苯甲酰基等；磺酰基，例如苯磺酰基、对甲苯磺酰基等；氨基甲酸酯形成基团，例如苄氧基羰基、对氯苄氧基羰基、对甲氧基苄氧基羰基、对硝基苄氧基羰基、2-硝基苄氧基羰基、对溴苄氧基羰基、3，4-二甲氧基苄氧基羰基、3，5-二甲氧基苄氧基羰基、2，4-二甲氧基苄氧基羰基、4-乙氧基苄氧基羰基、2-硝基-4，5-二甲氧基苄氧基羰基、3，4，5-三甲氧基苄氧基羰基、1-(对联苯基)-1-甲基乙氧基羰基、α，α-二甲基-3，5-二甲氧基苄氧基羰基、二苯甲基氧基羰基、叔丁氧基羰基(Boc)、二异丙基甲氧基羰基、异丙氧基羰基、乙氧基羰基、甲氧基羰基、烯丙氧基羰基、2，2，2-三氯乙氧基羰基、苯氧基羰基、4-硝基苯氧基羰基、芴基-9-甲氧基羰基、环戊基氧基羰基、金刚烷氧基羰基、环己基氧基羰基、苯基硫代羰基等；芳烷基，例如苄基、三苯甲基、苄氧基甲基、9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)等；和甲硅烷基，例如三甲基甲硅烷基等。
2.羧基保护基
如上所述，术语″羧基保护基″是指在进行涉及化合物的其他官能位点的反应时用于阻隔或保护羧酸官能度的羧酸保护酯或酰胺基。羧基保护基公开在Greene的“有机合成中的保护基”pp.152-186(1981)，其在此引入作为参考。此外，羧基保护基可以用作前药，由此羧基保护基可以易于在体内裂解，例如通过酶促水解，释放出生物活性母体。此类羧基保护基为所属领域技术人员熟知，它们业已广泛应用于青霉素和头孢菌素领域中的羧基保护，如U.S.专利3,840,556和3,719,667所述，其公开内容在此引入作为参考。典型的羧基保护基是：C1-C8低级烷基(例如甲基、乙基或叔丁基等)；芳烷基，例如苯乙基或苄基及其取代衍生物，例如烷氧基苄基或硝基苄基等；芳基链烯基，例如苯基乙烯基等；芳基及其取代衍生物，例如5-二氢茚基等；二烷基氨基烷基，例如二甲基氨基乙基等)；烷酰氧基烷基，例如乙酰氧基甲基、丁酰氧基甲基、戊酰氧基甲基、异丁酰氧基甲基、异戊酰氧基甲基、1-(丙酰氧基)-1-乙基、1-(新戊酰氧基)-1-乙基、1-甲基-1-(丙酰氧基)-1-乙基、新戊酰乙基甲基、丙酰氧基甲基等；环烷酰氧基烷基，例如环丙基羰氧基甲基、环丁基羰氧基甲基、环戊基羰氧基甲基、环己基羰氧基甲基等；芳酰氧基烷基，例如苯甲酰氧基甲基、苯甲酰氧基乙基等；芳烷基羰氧基烷基，例如苄基羰氧基甲基、2-苄基羰氧基乙基等；烷氧基羰基烷基或环烷氧基羰基烷基，例如甲氧基羰基甲基、环己氧基羰基甲基、1-甲氧基羰基-1-乙基等；烷氧基羰氧基烷基或环烷氧基羰氧基烷基，例如甲氧基羰氧基甲基、叔丁氧基羰氧基甲基、1-乙氧基羰氧基-1-乙基、1-环己氧基羰氧基-1-乙基等；芳氧基羰氧基烷基，例如2-(苯氧基羰氧基)乙基、2-(5-二氢茚基氧基羰氧基)乙基等；烷氧基烷基羰氧基烷基，例如2-(1-甲氧基-2-甲基丙-2-酰氧基)乙基等；芳烷氧基羰氧基烷基，例如2-(苄氧基羰基氧基)乙基等；芳基链烯基氧基羰氧基烷基，例如2-(3-苯基丙烯-2-基氧基羰氧基)乙基等；烷氧基羰基氨基烷基，例如叔丁氧基羰基氨基甲基等；烷基氨基羰基氨基烷基，例如甲基氨基羰基氨基甲基等；烷酰基氨基烷基，例如乙酰基氨基甲基等；杂环羰氧基烷基，例如4-甲基哌嗪基羰氧基甲基等；二烷基氨基羰基烷基，例如二甲基氨基羰基甲基、二乙基氨基羰基甲基等；(5-(低级烷基)-2-氧代-1，3-二氧杂环戊烯-4-基)烷基，例如(5-叔丁基-2-氧代-1，3-二氧杂环戊烯-4-基)甲基等；和(5-苯基-2-氧代-1，3-二氧杂环戊烯-4-基)烷基，例如(5-苯基-2-氧代-1，3-二氧杂环戊烯-4-基)甲基等。
代表性的酰胺羧基保护基是氨基羰基和低级烷基氨基羰基。
优选的本发明羧基保护化合物是其中保护的羧基是低级烷基、环烷基或芳烷基酯，譬如甲酯、乙酯、丙酯、异丙酯、丁酯、仲丁酯、异丁酯、戊酯、异戊酯、辛酯、环己酯、苯乙酯等；或烷酰氧基烷基、环烷酰氧基烷基、芳酰氧基烷基或芳烷基羰氧基烷基酯的化合物。优选的酰胺羧基保护基是低级烷基氨基羰基。譬如，天门冬氨酸可以在α-C-末端用酸不稳定基团(例如叔丁基)保护并在β-C-末端用氢化敏感基团(例如苄基)保护，随后在合成过程中选择性地脱保护。
B.肽的修饰
本发明制备经修饰的肽的方式可以根据含肽在内的不同因素的本质进行多种变化。合成方法的选择应简便，提供高收率并且能够得到高纯度的产物。通常，化学反应性基团应在合成的最后阶段产生，譬如，对于羧基，酯化生成活性酯。本发明制备经修饰的肽的具体方法如下所述。
特别是，首先测定所选择肽的抗病毒活性，随后仅在肽的N端、C端或内部用连接基团修饰。随后测定这种经修饰的肽-连接基团的抗病毒活性。如果抗病毒活性没有急剧降低(即降低小于10倍)，则利用其体内寿命测定该经修饰的肽-连接体的稳定性。如果稳定性没有改进达到预期的水平，则在另一位点修饰该肽，重复该过程直至获得预期的抗病毒水平和稳定性。
更具体地说，选择经受连接体和反应实体基团修饰的各肽应按照下列标准修饰：如果肽上的末端羧基可以利用且对抗病毒活性的保持没有决定性作用，同时肽上不存在其他敏感官能团，则选择该羧基作为连接体-反应基团修饰的连接点。如果末端羧基参与抗病毒活性，或如果没有羧基可以利用，则选择任何其他对保持抗病毒活性没有实质影响的敏感官能团作为连接体-反应实体修饰的连接点。如果在肽上存在若干个可利用的敏感官能团，保护基的联合形式应以一定方式应用，以使连接体/反应实体的加入和所有被保护敏感官能团的脱保护后，仍然能够保持抗病毒活性。如果肽上没有敏感官能团可利用，或者希望进行更简单的修饰途径，对于起始肽的修饰的合成实践应以能够维持抗病毒活性的方式进行。在这种情况中，修饰发生在肽的相反末端。
NHS衍生物可以由羧酸在肽中不存在其他敏感官能团的条件下合成。具体而言，这种肽在无水CH2Cl2和EDC中与N-羟基琥珀酰亚胺反应，产物通过层析或重结晶从适当的溶剂体系纯化得到NHS衍生物。
另外，NHS衍生物可以从含有氨基和/或巯基和羧酸的肽合成。当分子中存在游离氨基或巯基时，优选在加入NHS衍生物之前将这些敏感官能团保护起来。譬如，如果分子含有游离氨基，有必要在实施上述化学之前使胺转化为Fmoc或优选转化为tBoc保护的胺。胺官能度不是在NHS衍生物的制备之后脱保护。所以，这种方法只适用于那些不必释放其氨基产生预期抗病毒效应的化合物。如果需要释放氨基保持分子的原有特性，则不得不进行下面另一种化学。
此外，NHS衍生物可以从含有氨基或巯基但无羧酸的肽合成。当选择的分子不含有羧酸时，可以利用一组双官能连接体使分子转化为反应性NHS衍生物。譬如，将乙二醇-双(琥珀酰亚胺基琥珀酸酯)(EGS)和三乙胺溶于DMF中，向其中加入含游离氨基的分子(与EGS的比例适宜为10∶1)，产生单NHS衍生物。为了从巯基衍生分子制备NHS衍生物，可以利用存在于DMF中的N-[马来酰亚胺基丁酰氧基]琥珀酰亚胺酯(GMBS)和三乙胺。马来酰亚胺基与游离巯基反应，利用在硅胶上层析或通过HPLC可以从反应混合物纯化NHS衍生物。
NHS衍生物也可以从含有多个敏感官能团的肽合成。各种情况已经过分析且以不同的方式解决。然而，借助于大量市售的保护基和双官能连接体，本发明可以应用于任何肽，优选通过一个化学步骤来修饰所述肽(如上所述)，或两个步骤(如上所述包括敏感基团的在先保护)或三个步骤(保护、活化和脱保护)。只有在例外的情形中，需要利用多步(超过三个步骤)的合成把肽转化为活性NHS或马来酰亚胺衍生物。
马来酰亚胺衍生物也可以由含有游离氨基和游离羧酸的肽合成。为了从氨基衍生化分子制备马来酰亚胺衍生物，可以利用存在于DMF中的N-[γ-马来酰亚胺基丁酰氧基]琥珀酰亚胺酯(GMBS)和三乙胺。琥珀酰亚胺酯基与游离氨基反应，并且通过结晶或在硅胶上层析或HPLC可以从反应混合物中纯化马来酰亚胺衍生物。
最后，马来酰亚胺衍生物可以从含有多个其他敏感官能团且无游离羧酸的肽合成。当选择不含有羧酸的分子时，可以利用一组双官能交联剂把该分子转化为反应性NHS衍生物。譬如，通过游离胺和MPA的羧基的反应、利用HBTU/HOBt/DIEA活化，在DMF中马来酰亚胺基丙酸(MPA)可以和游离胺偶联生成马来酰亚胺衍生物。
许多市售的其他杂双官能交联剂可以在必要时作为替代。大量双官能化合物可以用来连接实体。试剂的实例包括：叠氮基苯甲酰肼、N-[4-(对叠氮基水杨基氨基)丁基]-3′-[2′-吡啶基二硫代)丙酰胺)、双磺基琥珀酰亚胺基辛二酸盐、二甲基己二酰亚胺酯、二琥珀酰亚胺基酒石酸酯、N-y-马来酰亚胺基丁酰氧基琥珀酰亚胺酯、N-羟基磺基琥珀酰亚胺基-4-叠氮基苯甲酸酯、N-琥珀酰亚胺基[4-叠氮基苯基]-1，3′-二硫代丙酸酯、N-琥珀酰亚胺基[4-碘代乙酰基]氨基苯甲酸酯、戊二醛和琥珀酰亚胺基4-[N-马来酰亚胺基甲基]环己烷-1-甲酸酯。
6.经修饰的抗病毒肽的应用
本发明的经修饰抗病毒肽可以在患有病毒感染的患者的治疗中用作治疗剂，并且可以按照下面所述的方法和所属领域其它已知方法对患者给药。经修饰的肽的有效治疗剂量可以通过所属领域技术人员熟知的方法测定并且应考虑肽的潜在毒性。
经修饰的肽也可以预防性给予在先未感染个体。这有益于那些接触病毒的危险性高的个体情况，这可能出现在与那些携带高危病毒传染的已感染个体相接触的个体中。这尤其有利于那些已知的病毒(如HIV病毒)的治疗。例如，经修饰的抗HIV肽的预防性给药将有益于那些已经接触了HIV感染个体血液的保健工作者的情况，或在其它从事可能接触HIV病毒的高危活动的个体情况。
7.经修饰的抗病毒和抗融合肽的给药
通常，经修饰的肽在给药时应存在于生理可接受的介质中，例如去离子水、磷酸盐缓冲盐水(PBS)、盐水、含水乙醇或其它醇、血浆、蛋白性溶液、甘露糖醇、葡萄糖水、醇、植物油等。其它可以含有的添加剂包括：缓冲剂，其中介质一般被缓冲在约5至10的pH范围内，而缓冲剂的浓度一般约为50至250mM；盐，其中盐的浓度通常约为5至500mM；生理可接受稳定剂等。组合物可以被冷冻干燥以便常规储存和运输。
经修饰的肽多数是经非肠道给药如血管内(IV)、动脉内(IA)、肌肉内(IM)、皮下(SC)等。在适当情况中可以通过输液给药。在某些场合中，当官能团的反应相对缓慢时，可以通过口服、经鼻、直肠、透皮或气溶胶给药，由此偶联物的特性允许传递到血管系统。通常应采用单剂量注射，虽然如果需要时可以采用注射一次以上。经修饰的肽可以利用任何工具给药，包括注射器、套管针、插管等。
具体的给药方式应根据给药量、是否单剂量快速浓注或是连续给药等而改变。更加可取地，应血管内给药，引入的位点对于本发明而言并不重要，优选的位点是血流迅速的位置，例如静脉内，外周或中枢静脉。发现也可以利用其它途径，其中给药与缓释技术或保护性基质相结合。这样做的意图在于，使经修饰的肽有效分布在血液中，由此能够与血液组分反应。偶联物的浓度将变化多端，通常约为1pg/ml至50mg/ml。血管内给药的总量一般应在约0.1mg/ml至约10mg/ml、更常为约1mg/ml至约5mg/ml的范围内。
通过与长寿命血液组分如免疫球蛋白、血清白蛋白、红细胞和血小板结合，产生了多个优越性。所述肽的活性被延长到数天至数周。在这段时间内只需要给药一次。可以获得更高的特异性，因为活性化合物主要与大分子键合，由此似乎很少被吸收到细胞内干扰其它生理过程。
8.监测经修饰的肽的存在
为了监测经修饰的肽的存在可以监测哺乳动物宿主的血液一次或多次。通过采集一部分或宿主血液的样本，可以测定出是否已经有足够量的肽与长寿命血液组分键合转变为具有治疗活性，而且随后可以测定血液中肽化合物的水平。如果希望，还可以测定肽究竟与何种血液组分键合。这在采用非特异性经修饰的肽时非常重要。对于特异性马来酰亚胺-修饰的肽，计算血清白蛋白和IgG的半衰期会更加简单。
A.免疫测定
本发明的另一方面涉及测定抗病毒肽和/或类似物或其衍生物和偶联物在生物样本(例如血液)中的浓度的方法，该方法利用了对所述的肽、肽类似物或其衍生物和偶联物特异性的抗体；并且涉及此类抗体在与所述的肽、类似物和/或其衍生物或偶联物可能有关的毒性的治疗中的应用。这是有益的，因为所述肽提高了的体内稳定性和寿命可能在治疗中导致新的问题，包括中毒可能性的增加。
对特定肽、肽类似物或其衍生物具有特异性的单克隆或多克隆的抗治疗剂抗体的应用可以有助于解决此类问题。抗体可以产生或衍生自用特定肽、类似物或其衍生物免疫的宿主，或用试剂的免疫原性片段或用试剂的免疫决定簇相应的合成免疫原免疫的宿主。优选的抗体应对天然的、经修饰和偶联形式的肽具有高度的特异性和亲和力。此类抗体也可以用酶、荧光染料或放射性标记物进行标记。
用纯化的肽可以制备对经修饰的肽具有特异性的抗体，从而诱导肽特异性抗体。通过抗体的诱导，不但经过给动物注射后可以刺激免疫反应，而且在合成抗体或其它特异性结合分子的制备中也以进行类似步骤，例如筛选重组免疫球蛋白文库。单克隆和多克隆抗体都可以通过所属领域熟知的方法制备。
还可以利用抗肽抗体来治疗由经修饰的肽、其类似物或衍生物给药引起的中毒，并且可以离体或体内使用。离体方法包括利用固定在固相载体上的抗治疗剂抗体对中毒进行免疫透析治疗。体内方法包括以有效引发抗体-治疗剂复合物的清除的量施用抗治疗剂抗体。
通过在灭菌条件下令血液与抗体接触，用抗体可以除去患者离体血液中的经修饰的肽或其类似物或偶联物。譬如，抗体可以固定在柱基质上，患者血液从患者取出并且经过该基质。经修饰的肽、肽类似物、衍生物或偶联物将与该抗体结合，含有低浓度的肽、类似物、衍生物或偶联物的血液可以返回到患者循环系统中。通过调节压力和流量可以控制肽化合物的除去量。
所述的肽、类似物、衍生物和偶联物从患者血液的血浆组分中优先除去会受到影响，譬如，利用半透膜；或首先利用所属领域的已知方法将细胞组分与血浆组分分开，随后令血浆组分流经含有抗治疗剂抗体的基质。另外，肽偶联的血细胞(包括红细胞)的优先除去可以通过收集和浓缩患者血液中的血细胞并使这些细胞与固定的抗ITP抗体接触以排除患者血液的血清组分而受到影响。
抗治疗剂抗体可以经非肠道体内施用给接受所述肽、类似物、衍生物或偶联物治疗的患者。抗体将与肽化合物和偶联物结合。一旦结合，即使不是完全阻断，肽的活性也将受到阻碍，由此降低肽化合物在患者血流中的生物有效浓度并减轻有害的副作用。此外，结合的抗体-肽复合物将有助于患者血流中肽化合物和偶联物的清除。
全面描述的本发明现将通过下列非限定实施例举例说明。实施例1经修饰的DP178的制备--
YTSLIHSLIEESQNQQEKNEQELLELDKWASLWNWFK(MPA)-NH2的合成
在本实施例中，按照下面的合成路线合成和修饰DP178(SEQ IDNO：1)为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，DP178是HIV-1的有效抑制剂，并且能够抑制HIV-1感染和未感染细胞之间的细胞诱导的合胞体形成以及未感染细胞被无细胞HIV-1病毒的感染。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪(Symphony Peptide Synthesizer)和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Lys(Aloc)-OH，Fmoc-Phe-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Met-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-His(Boc)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。合成结束时，通过用3当量溶于5mL CHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(Varian Dynamax UVD II)得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。
DP-178C
Figure A0080767100441
实施例2经修饰的DP107的制备--
NNLLRAIEAQQHLLQLTVWQIKQLQARILAVERYLKDQK(MPA)NH2的合成
在本实施例中，按照下面的合成路线合成和修饰DP107(SEQ IDNO：2)为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，DP107表现出对HIV-1有效的抗病毒活性。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Lys(Aloc)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-His(Boc)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mL CHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(Varian Dynamax UVD II)得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。
DP-107C实施例3经修饰的抗RSV肽的制备(C末端1)
在本实施例中，按照下面的合成路线将肽
VITIELSNIKENKCNGAKVKLIKQELDKYKNAV(SEQ ID NO：16)修饰为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，天然序列(SEQ ID NO)抑制呼吸道合胞病毒(RSV)的病毒性感染，包括抑制RSV感染和未感染Hep-2细胞之间的融合和合胞体形成。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Lys(Aloc)-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Cys(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Val-OH.。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mL CHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(Varian Dynamax UVD II)得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。
Figure A0080767100481
实施例4经修饰的抗RSV肽的制备(T-N末端)
在本实施例中，按照下面的合成路线合成肽
VITIELSNIKENKCNGAKVKLIKQELDKYKNAV(SEQ ID NO：17)，其相应于SEQ ID NO：16的肽但半胱氨酸(C)被蛋氨酸(M)残基替换，并且修饰为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，天然序列(SEQ ID NO：16)抑制呼吸道合胞病毒(RSV)的病毒性感染，包括抑制RSV感染和未感染Hep-2细胞之间的融合和合胞体形成。
100tmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Val-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Met-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Val-OH.。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(Varian Dynamax UVD II)得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。
Figure A0080767100501
实施例5经修饰的抗RSV肽的制备
在本实施例中，按照下面的合成路线合成并修饰肽SEQ ID NO：14为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，SEQ ID NO：14抑制呼吸道合胞病毒(RSV)的病毒性感染，包括抑制RSV感染和未感染Hep-2细胞之间的融合和合胞体形成。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Lys(Aloc)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Cys(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mL CHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(Varian Dynamax UVD II)，得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。
Figure A0080767100521
实施例6(T-143)经修饰的抗RSV肽的制备
在本实施例中，按照下面的合成路线合成并修饰肽SEQ ID NO：15为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，SEQ ID NO：15抑制呼吸道合胞病毒(RSV)的病毒性感染，包括抑制RSV感染和未感染Hep-2细胞之间的融合和合胞体形成。
100μmole规模上的经修饰的肽类似物的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Lys(Aloc)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Cys(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH.。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mLCHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(Varian Dynamax UVD II)，得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。
Figure A0080767100541
实施例7经修饰的抗RSV肽的制备(C末端)
在本实施例中，按照下面的合成路线合成肽SEQ ID NO：17)，其相应于其相应于SEQ ID NO：16的肽但半胱氨酸(C)被蛋氨酸(M)残基替换，并且修饰为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，天然序列SEQ ID NO：16抑制呼吸道合胞病毒(RSV)的病毒性感染，包括抑制RSV感染和未感染Hep-2细胞之间的融合和合胞体形成。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Lys(Aloc)-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Met-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Val-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mL CHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(Varian Dynamax UVD II)得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。
Figure A0080767100561
实施例8经修饰的抗RSV肽的制备
在本实施例中，按照下面的合成路线合成并修饰肽SEQ ID NO：29为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，SEQ ID NO：29抑制呼吸道合胞病毒(RSV)的病毒性感染，包括抑制RSV感染和未感染Hep-2细胞之间的融合和合胞体形成。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Lys(Aloc)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Ile-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mLCHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(Varian Dynamax UVD II)，得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。
Figure A0080767100581
实施例9(T-173)经修饰的抗HPIV肽的制备
在本实施例中，按照下面的合成路线合成并修饰肽SEQ ID NO：52为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，SEQ ID NO：52抑制人副流感病毒3(HPIV3)的病毒性感染，包括抑制HPIV3感染Hep-2细胞和未感染CV-1W细胞之间的融合和合胞体形成。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Lys(Aloc)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Val-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mLCHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(Varian Dynamax UVD II)，得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。
Figure A0080767100601
实施例10经修饰的抗HPIV肽的制备
在本实施例中，按照下面的合成路线合成并修饰肽SEQ ID NO：58为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，SEQ ID NO：58抑制人副流感病毒3(HPIV3)的病毒性感染，包括抑制HPIV3感染Hep-2细胞和未感染CV-1W细胞之间的融合和合胞体形成。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Lys(Aloc)-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mLCHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(Varian Dynamax UVD II)，得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。实施例11经修饰的抗HPIV肽的制备
在本实施例中，按照下面的合成路线合成并修饰肽SEQ ID NO：35为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，SEQ ID NO：35抑制人副流感病毒3(HPIV3)的病毒性感染，包括抑制HPIV3感染Hep-2细胞和未感染CV-1W细胞之间的融合和合胞体形成。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Lys(Aloc)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Pro-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mL CHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(Varian Dynamax UVD II)，得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。
Figure A0080767100641
实施例12经修饰的抗HPIV肽的制备
在本实施例中，按照下面的合成路线合成并修饰肽SEQ ID NO：38为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，SEQ ID NO：38抑制人副流感病毒3(HPIV3)的病毒性感染，包括抑制HPIV3感染Hep-2细胞和未感染CV-1W细胞之间的融合和合胞体形成。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Lgu-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Pro-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ala-OH BOC-Lys(Aloc)-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mLCHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(Varian Dynamax UVD II)，得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。
Figure A0080767100661
实施例13经修饰的抗HPIV肽的制备
在本实施例中，按照下面的合成路线合成并修饰肽SEQ ID NO：39为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，SEQ ID NO：39抑制人副流感病毒3(HPIV3)的病毒性感染，包括抑制HPIV3感染Hep-2细胞和未感染CV-1W细胞之间的融合和合胞体形成。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Lys(Aloc)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Pro-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mLCHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(Varian Dynamax UVD II)，得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。实施例14经修饰的抗HPIV肽的制备
在本实施例中，按照下面的合成路线合成并修饰肽SEQ ID NO：40为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，SEQ ID NO：40抑制人副流感病毒3(HPIV3)的病毒性感染，包括抑制HPIV3感染Hep-2细胞和未感染CV-1W细胞之间的融合和合胞体形成。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Lys(Aloc)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Pro-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mLCHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(Varian Dynamax UVD II)，得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。
Figure A0080767100701
实施例15经修饰的抗HPIV肽的制备
在本实施例中，按照下面的合成路线合成并修饰肽SEQ ID NO：41为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，SEQ ID NO：41抑制人副流感病毒3(HPIV3)的病毒性感染，包括抑制HPIV3感染Hep-2细胞和未感染CV-1W细胞之间的融合和合胞体形成。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Pro-OH  Boc-Lys(Aloc)-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mLCHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(Varian Dynamax UVD II)，得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。
Figure A0080767100721
实施例16经修饰的抗HPIV肽的制备
在本实施例中，按照下面的合成路线合成并修饰肽SEQ ID NO：42为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，SEQ ID NO：42抑制人副流感病毒3(HPIV3)的病毒性感染，包括抑制HPIV3感染Hep-2细胞和未感染CV-1W细胞之间的融合和合胞体形成。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Lys(Aloc)-OH，Fmoc-His(Boc)-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mLCHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(Varian Dynamax UVD II)，得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。
Figure A0080767100741
实施例17经修饰的抗MeV肽的制备
在本实施例中，按照下面的合成路线合成并修饰肽SEQ ID NO：77为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，SEQ ID NO：77抑制麻疹病毒(MeV)的病毒性感染，包括抑制MeV感染和未感染Vero细胞之间的融合和合胞体形成。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Lys(Aloc)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Pro-OH，Fmoc-Pro-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-His(Boc)-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mL CHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(VarianDynamax UVD II)，得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。
Figure A0080767100761
实施例18经修饰的抗MeV肽的制备
在本实施例中，按照下面的合成路线合成并修饰肽SEQ ID NO：79为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，SEQ ID NO：79抑制麻疹病毒(MeV)的病毒性感染，包括抑制MeV感染和未感染Vero细胞之间的融合和合胞体形成。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Lys(Aloc)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Pro-OH，Fmoc-Pro-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mLCHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(Varian Dynamax UVD II)，得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。
Figure A0080767100781
实施例19经修饰的抗MeV肽的制备
在本实施例中，按照下面的合成路线合成并修饰肽SEQ ID NO：81为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，SEQ ID NO：79抑制麻疹病毒(MeV)的病毒性感染，包括抑制MeV感染和未感染Vero细胞之间的融合和合胞体形成。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Lys(Aloc)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Pro-OH，Fmoc-Pro-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Leu-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mL CHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(VarianDynamax UVD II)，得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。
Figure A0080767100801
实施例20经修饰的抗MeV肽的制备
在本实施例中，按照下面的合成路线合成并修饰肽SEQ ID NO：84为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，SEQ ID NO：84抑制麻疹病毒(MeV)的病毒性感染，包括抑制MeV感染和未感染Vero细胞之间的融合和合胞体形成。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Lys(Aloc)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Pro-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mL CHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用于冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约1 80分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(VarianDynamax UVD II)，得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。
Figure A0080767100821
实施例21经修饰的抗SIV肽的制备
在本实施例中，按照下面的合成路线合成并修饰SEQ ID NO：64为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，SEQ ID NO：64作为粗品肽表现出对猿猴免疫缺陷病毒(SIV)的抗病毒活性。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Lys(Aloc)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH，Fmoc-Met-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Phe-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mL CHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(VarianDynamax UVD II)，得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。
Figure A0080767100841
实施例22经修饰的抗SIV肽的制备
在本实施例中，按照下面的合成路线合成并修饰SEQ ID NO：65为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，SEQ ID NO：65作为粗品肽表现出对猿猴免疫缺陷病毒(SIV)的抗病毒活性。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Lys(Aloc)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH，Fmoc-Met-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Phe-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mLCHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(Varian Dynamax UVD II)，得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。
Figure A0080767100861
实施例23经修饰的抗SIV肽的制备
在本实施例中，按照下面的合成路线合成并修饰SEQ ID NO：66为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，SEQ ID NO：66作为粗品肽表现出对猿猴免疫缺陷病毒(SIV)的抗病毒活性。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH，Fmoc-Met-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Phe-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH  Boc-Lys(Aloc)-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mLCHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(Varian Dynamax UVD II)，得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。实施例24经修饰的抗SIV肽的制备
在本实施例中，按照下面的合成路线合成并修饰SEQ ID NO：67为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，SEQ ID NO：67作为粗品肽表现出对猿猴免疫缺陷病毒(SIV)的抗病毒活性。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Lys(Aloc)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH，Fmoc-Met-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Phe-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mLCHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(Varian Dynamax UVD II)，得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。实施例25经修饰的抗SIV肽的制备
在本实施例中，按照下面的合成路线合成并修饰SEQ ID NO：68为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，SEQ ID NO：68作为粗品肽表现出对猿猴免疫缺陷病毒(SIV)的抗病毒活性。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH，Fmoc-Met-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Phe-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH  Boc-Lys(Aloc)-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mLCHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(Varian Dynamax UVD II)，得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。
Figure A0080767100921
实施例26经修饰的抗SIV肽的制备
在本实施例中，按照下面的合成路线合成并修饰SEQ ID NO：69为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，SEQ ID NO：69作为粗品肽表现出对猿猴免疫缺陷病毒(SIV)的抗病毒活性。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Lys(Aloc)-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH，Fmoc-Met-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Phe-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mLCHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(Varian Dynamax UVD II)，得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。实施例27经修饰的抗SIV肽的制备
在本实施例中，按照下面的合成路线合成并修饰SEQ ID NO：70为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，SEQ ID NO：70作为粗品肽表现出对猿猴免疫缺陷病毒(SIV)的抗病毒活性。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Val-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH，Fmoc-Met-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Phe-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Boc-Lys(Aloc)-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mLCHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(Varian Dynamax UVD II)，得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。实施例28经修饰的抗SIV肽的制备
在本实施例中，按照下面的合成路线合成并修饰SEQ ID NO：71为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，SEQ ID NO：71作为粗品肽表现出对猿猴免疫缺陷病毒(SIV)的抗病毒活性。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Lys(Aloc)-OH，Fmoc-Phe-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH，Fmoc-Met-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Phe-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Val-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mLCHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(Varian Dynamax UVD II)，得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。实施例29经修饰的抗SIV肽的制备
在本实施例中，按照下面的合成路线合成并修饰SEQ ID NO：72为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，SEQ ID NO：72作为粗品肽表现出对猿猴免疫缺陷病毒(SIV)的抗病毒活性。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Lys(Aloc)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Phe-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH，Fmoc-Met-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Phe-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mLCHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(Varian Dynamax UVD II)，得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。
Figure A0080767101001
实施例30经修饰的抗SIV肽的制备
在本实施例中，按照下面的合成路线合成并修饰SEQ ID NO：73为含有连接体和马来酰亚胺基团。如美国专利6,013,236和6,020,459所述，SEQ ID NO：73作为粗品肽表现出对猿猴免疫缺陷病毒(SIV)的抗病毒活性。
100μmole规模上的经修饰的肽的固相肽合成是采用手动固相合成、协同肽合成仪和Fmoc保护Rink酰胺MBHA树脂进行。将下列保护的氨基酸顺序加入树脂：Fmoc-Lys(Aloc)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Phe-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Asp(tBu)-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH，Fmoc-Met-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Glu(tBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Phe-OH。把它们溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)并且按照序列用O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)活化。用存在于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的20％(V/V)哌啶溶液在20分钟内进行Fmoc保护基的脱除(步骤1)。通过用3当量溶于5mLCHCl3∶NMM∶HOAc(18∶1∶0.5)中的Pd(PPh3)4溶液处理树脂2小时手动完成Lys(Aloc)基的选择性脱保护(步骤2)。随后树脂用CHCl3(6×5mL)、20％存在于DCM中的HOAc(6×5mL)、DCM(6×5mL)和DMF(6×5mL)洗涤。此后再次自动合成以便添加3-马来酰亚胺基丙酸(步骤3)。每次偶联之间，树脂用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤3次并用异丙醇洗涤3次。用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂脱下肽，随后用干冰冷却的Et2O沉淀(步骤4)。产物通过制备反相HPLC、使用Varian(Rainin)的制备二元HPLC系统纯化：在约180分钟内30-55％B(含0.045％TFA的H2O(A)和含0.045％TFA的CH3CN(B))以9.5mL/分钟进行的梯度洗脱；使用Phenomenex Luna 10μ苯基-己基21mm×25cm柱和λ214和254nm的UV检测仪(Varian Dynamax UVD II)，得到预期的经修饰的肽(即DAC)，通过RP-HPLC测出肽的纯度＞95％。
虽然已经描述和例举了本发明的某些实施方式，但所属领域普通技术人员应理解本发明不受这些实施方式具体内容的限定，而由所附的权利要求书限定。
表2
                            DP178羧基端平截YTSYTSLYTSLIYTSLIHYTSLIHSYTSLIHSLYTSLIHSLIYTSLIHSLIEYTSLIHSLIEEYTSLIHSLIEESYTSLIHSLIEESQYTSLIHSLIEESQNYTSLIHSLIEESQNQYTSLJHSLJEESQNQQYTSLIHSLIEESQNQQEYTSLIHSLIEESQNQQEKYTSLIHSLIEESQNQQEKNYTSLIHSLIEESQNQQEKNEYTSLIHSLIEESQNQQEKNEQYTSLIHSLIEESQNQQEKNEQEYTSLIHSLIEESQNQQEKNEQELYTSLIHSLIEESQNQQEKNEQELLYTSLIHSLIEESQNQQEKNEQELLEYTSLIHSLIEESQNQQEKNEQELLELYTSLIHSLIEESQNQQEKNEQELLELDYTSLIHSLIEESQNQQEKNEQELLELDKYTSLIHSLIEESQNQQEKNEQELLELDKWYTSLIHSLIEESQNQQEKNEQELLELDKWAYTSLIHSLIEESQNQQEKNEQELLELDKWASYTSLIHSLIEESQNQQEKNEQELLELDKWASLYTSLIHSLIEESQNQQEKNEQELLELDKWASLWYTSLIHSLIEESQNQQEKNEQELLELDKWASLWNYTSLIHSLIEESQNQQEKNEQELLELDKWASLWNWYTSLIHSLIEESQNQQEKNEQELLELDKWASLWNWF采用表1的单字母氨基酸编码
                    表3
            DP178氨基端平截NWFWNWFLWNWFSLWNWFASLWNWFWASLWNWFKWASLWNWFDKWASLWNWFLDKWASLWNWFELDKWASLWNWFLELDKWASLWNWFLLELDKWASLWNWFELLELDKWASLWNWFQELLELDKWASLWNWFEQELLELDKWASLWNWFNEQELLELDKWASLWNWFKNEQELLELDKWASLWNWFEKNEQELLELDKWASLWNWFQEKNEQELLELDKWASLWNWFQQEKNEQELLELDKWASLWNWFNQQEKNEQELLELDKWASLWNWFQNQQEKNEQELLELDKWASLWNWFSQNQQEKNEQELLELDKWASLWNWFESQNQQEKNEQELLELDKWASLWNWFEESQNQQEKNEQELLELDKWASLWNWFIEESQNQQEKNEQELLELDKWASLWNWFLIEESQNQQEKNEQELLELDKWASLWNWFSLIEESQNQQEKNEQELLELDKWASLWNWFHSLIEESQNQQEKNEQELLELDKWASLWNWFIHSLIEESQNQQEKNEQELLELDKWASLWNWFLIHSLIEESQNQQEKNEQELLELDKWASLWNWFSLIHSLIEESQNQQEKNEQELLELDKWASLWNWFTSLIHSLIEESQNQQEKNEQELLELDKWASLWNWFYTSLIHSLIEESQNQQEKNEQELLELDKWASLWNWF采用表1的单字母氨基酸编码
                   表4
                DP107羧基端平截NNLNNLLNNLLRNNLLRANNLLRAINNLLRAIENNLLRAIEANNLLRAIEAQNNLLRAIEAQQNNLLRAIEAQQHNNLLRAIEAQQHLNNLLRAIEAQQHLLNNLLRAIEAQQHLLQNNLLRAIEAQQHLLQLNNLLRAIEAQQHLLQLTNNLLRAIEAQQHLLQLTVNNLLRAIEAQQHLLQLTVWNNLLRAIEAQQHLLQLTVWQNNLLRAIEAQQHLLQLTVWQINNLLRAIEAQQHLLQLTVWQIKNNLLRAIEAQQHLLQLTVWQIKQNNLLRAIEAQQHLLQLTVWQIKQLNNLLRAIEAQQHLLQLTVWQIKQLQNNLLRAIEAQQHLLQLTVWQIKQLQANNLLRAIEAQQHLLQLTVWQIKQLQARNNLLRAIEAQQHLLQLTVWQIKQLQARINNLLRAIEAQQHLLQLTVWQIKQLQARILNNLLRAIEAQQHLLQLTVWQIKQLQARILANNLLRAIEAQQHLLQLTVWQIKQLQARILAVNNLLRAIEAQQHLLQLTVWQIKQLQARILAVENNLLRAIEAQQHLLQLTVWQIKQLQARILAVERNNLLRAIEAQQHLLQLTVWQIKQLQARILAVERYNNLLRAIEAQQHLLQLTVWQIKQLQARILAVERYLNNLLRAIEAQQHLLQLTVWQIKQLQARILAVERYLKNNLLRAIEAQQHLLQLTVWQIKQLQARILAVERYLKDNNLLRAIEAQQHLLQLTVWQIKQLQARILAVERYLKDQ采用表1的单字母氨基酸编码
                           表5
                     DP107氨基端平截KDQLKDQYLKDQRYLKDQERYLKDQVERYLKDQAVERYLKDQLAVERYLKDQILAVERYLKDQRILAVERYLKDQARILAVERYLKDQQARILAVERYLKDQLQARILAVERYLKDQQLQARILAVERYLKDQKQLQARILAVERYLKDQIKQLQARILAVERYLKDQQIKQLQARILAVERYLKDQWQIKQLQARILAVERYLKDQVWQIKQLQARILAVERYLKDQTVWQIKQLQARILAVERYLKDQLTVWQIKQLQARILAVERYLKDQQLTVWQIKQLQARILAVERYLKDQLQLTVWQIKQLQARILAVERYLKDQLLQLTVWQIKQLQARILAVERYLKDQHLLQLTVWQIKQLQARILAVERYLKDQQHLLQLTVWQIKQLQARILAVERYLKDQQQHLLQLTVWQIKQLQARILAVERYLKDQAQQHLLQLTVWQIKQLQARILAVERYLKDQEAQQHLLQLTVWQIKQLQARILAVERYLKDQIEAQQHLLQLTVWQIKQLQARILAVERYLKDQAIEAQQHLLQLTVWQIKQLQARILAVERYLKDQRAIEAQQHLLQLTVWQIKQLQARILAVERYLKDQLRAIEAQQHLLQLTVWQIKQLQARILAVERYLKDQLLRAIEAQQHLLQLTVWQIKQLQARILAVERYLKDQNLLRAIEAQQHLLQLTVWQIKQLQARILAVERYLKDQNNLLRAIEAQQHLLQLTVWQIKQLQARILAVERYLKDQ采用表1的单字母氨基酸编码
                               表6
                    HIV-2NIHZ DP178类似物羧基端平截LEALEANLEANILEANISLEANISQLEANISQSLEANISQSLLEANISQSLELEANISQSLEQLEANISQSLEQALEANISQSLEQAQLEANISQSLEQAQILEANISQSLEQAQIQLEANISQSLEQAQIQQLEANISQSLEQAQIQQELEANISQSLEQAQIQQEKLEANISQSLEQAQIQQEKNLEANISQSLEQAQIQQEKNMLEANISQSLEQAQIQQEKNMYLEANISQSLEQAQIQQEKNMYELEANISQSLEQAQIQQEKNMYELLEANISQSLEQAQIQQEKNMYELQLEANISQSLEQAQIQQEKNMYELQKLEANISQSLEQAQIQQEKNMYELQKLLEANISQSLEQAQIQQEKNMYELQKLNLEANISQSLEQAQIQQEKNMYELQKLNSLEANISQSLEQAQIQQEKNMYELQKLNSWLEANISQSLEQAQIQQEKNMYELQKLNSWDLEANISQSLEQAQIQQEKNMYELQKLNSWDVLEANISQSLEQAQIQQEKNMYELQKLNSWDVFLEANISQSLEQAQIQQEKNMYELQKLNSWDVFTLEANISQSLEQAQIQQEKNMYELQKLNSWDVFTNLEANISQSLEQAQIQQEKNMYELQKLNSWDVFTNWLEANISQSLEQAQIQQEKNMYELQKLNSWDVFTNWL采用表1的单字母氨基酸编码
                        表7
             HIV-2NIHZ DP178类似物氨基端平截NWLTNWLFTNWLVFTNWLDVFTNWLWDVFTNWLSWDVFTNWLNSWDVFTNWLLNSWDVFTNWLKLNSWDVFTNWLQKLNSWDVFTNWLLQKLNSWDVFTNWLELQKLNSWDVFTNWLYELQKLNSWDVFTNWLMYELQKLNSWDVFTNWLNMYELQKLNSWDVFTNWLKNMYELQKLNSWDVFTNWLEKNMYELQKLNSWDVFTNWLQEKNMYELQKLNSWDVFTNWLQQEKNMYELQKLNSWDVFTNWLIQQEKNMYELQKLNSWDVFTNWLQIQQEKNMYELQKLNSWDVFTNWLAQIQQEKNMYELQKLNSWDVFTNWLQAQIQQEKNMYELQKLNSWDVFTNWLEQAQIQQEKNMYELQKLNSWDVFTNWLLEQAQIQQEKNMYELQKLNSWDVFTNWLSLEQAQIQQEKNMYELQKLNSWDVFTNWLQSLEQAQIQQEKNMYELQKLNSWDVFTNWLSQSLEQAQIQQEKNMYELQKLNSWDVFTNWLISQSLEQAQIQQEKNMYELQKLNSWDVFTNWLNISQSLEQAQIQQEKNMYELQKLNSWDVFTNWLANISQSLEQAQIQQEKNMYELQKLNSWDVFTNWLEANISQSLEQAQIQQEKNMYELQKLNSWDVFTNWLLEANISQSLEQAQIQQEKNMYELQKLNSWDVFTNWL采用表1的单字母氨基酸编码
                         表8
                 呼吸道合胞病毒(RSV)DP107
                     F2区类似物羧基端平截YTSYTSVYTSVIYTSVITYTSVITIYTSVITIEYTSVITIELYTSVITIELSYTSVITIELSNYTSVITIELSNIYTSVITIELSNIKYTSVITIELSNIKEYTSVITIELSNIKENYTSVITIELSNIKENKYTSVITIELSNIKENKCYTSVITIELSNIKENKCNYTSVITIELSNIKENKCNGYTSVITIELSNIKENKCNGTYTSVITIELSNIKENKCNGTDYTSVITIELSNIKENKCNGTDAYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQEYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTEYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQST采用表1的单字母氨基酸编码
                       表9
          呼吸道合胞病毒(RSV)DP107
              F2区类似物氨基端平截QSTMQSTLMQSTLLMQSTQLLMQSTLQLLMQSTELQLLMQSTTELQLLMQSTVTELQLLMQSTAVTELQLLMQSTNAVTELQLLMQSTKNAVTELQLLMQSTYKNAVTELQLLMQSTKYKNAVTELQLLMQSTDKYKNAVTELQLLMQSTLDKYKNAVTELQLLMQSTELDKYKNAVTELQLLMQSTQELDKYKNAVTELQLLMQSTKQELDKYKNAVTELQLLMQSTIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTNKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTLSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTTIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQST采用表1的单字母氨基酸编码
                      表10
         呼吸道合胞病毒(RSV)F1 DP178区
             类似物羧基端平截FYDFYDPFYDPLFYDPLVFYDPLVFFYDPLVFPFYDPLVFPSFYDPLVFPSDFYDPLVFPSDEFYDPLVFPSDEFFYDPLVFPSDEFDFYDPLVFPSDEFDAFYDPLVFPSDEFDASFYDPLVFPSDEFDASIFYDPLVFPSDEFDASISFYDPLVFPSDEFDASISQFYDPLVFPSDEFDASISQVFYDPLVFPSDEFDASISQVNFYDPLVFPSDEFDASISQVNEFYDPLVFPSDEFDASISQVNEKFYDPLVFPSDEFDASISQVNEKIFYDPLVFPSDEFDASISQVNEKINFYDPLVFPSDEFDASISQVNEKINQFYDPLVFPSDEFDASISQVNEKINQSFYDPLVFPSDEFDASISQVNEKINQSLFYDPLVFPSDEFDASISQVNEKINQSLAFYDPLVFPSDEFDASISQVNEKINQSLAFFYDPLVFPSDEFDASISQVNEKINQSLAFIFYDPLVFPSDEFDASISQVNEKINQSLAFIRFYDPLVFPSDEFDASISQVNEKINQSLAFIRKFYDPLVFPSDEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSFYDPLVFPSDEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDFYDPLVFPSDEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDEFYDPLVFPSDEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELFYDPLVFPSDEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELL采用表1的单字母氨基酸编码
                          表11
               呼吸道合胞病毒(RSV)F1 DP178区
                       类似物氨基端平截DELLSDELLKSDELLRKSDELLIRKSDELLFIRKSDELLAFIRKSDELLLAFIRKSDELLSLAFIRKSDELLQSLAFIRKSDELLNQSLAFIRKSDELLINQSLAFIRKSDELLKINQSLAFIRKSDELLEKINQSLAFIRKSDELLNEKINQSLAFIRKSDELLVNEKINQSLAFIRKSDELLQVNEKINQSLAFIRKSDELLSQVNEKINQSLAFIRKSDELLISQVNEKINQSLAFIRKSDELLSISQVNEKINQSLAFIRKSDELLASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLDEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLSDEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLPSDEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLFPSDEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLVFPSDEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLLVFPSDEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLPLVFPSDEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLDPLVFPSDEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLYDPLVFPSDEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELL采用表1的单字母氨基酸编码
                       表12
               人副流感病毒3(HPV3)F1区
                 DP178类似物羧基端平截ITLITLNITLNNITLNNSITLNNSVITLNNSVAITLNNSVALITLNNSVALDITLNNSVALDPITLNNSVALDPIITLNNSVALDPIDITLNNSVALDPIDIITLNNSVALDPIDISITLNNSVALDPIDISIITLNNSVALDPIDISIEITLNNSVALDPIDISIELITLNNSVALDPIDISIELNITLNNSVALDPIDISIELNKITLNNSVALDPIDISIELNKAITLNNSVALDPIDISIELNKAKITLNNSVALDPIDISIELNKAKSITLNNSVALDPIDISIELNKAKSDITLNNSVALDPIDISIELNKAKSDLITLNNSVALDPJDISIELNKAKSDLEITLNNSVALDPIDISIELNKAKSDLEEITLNNSVALDPIDISIELNKAKSDLEESITLNNSVALDPIDISIELNKAKSDLEESKITLNNSVALDPIDISIELNKAKSDLEESKEITLNNSVALDPIDISIELNKAKSDLEESKEWITLNNSVALDPIDISIELNKAKSDLEESKEWIITLNNSVALDPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRITLNNSVALDPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRITLNNSVALDPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRS采用表1的单字母氨基酸编码
                     表13
             人副流感病毒3(HPV3)F1区
               DP178类似物氨基端平截RRSIRRSWIRRSEWIRRSKEWIRRSSKEWIRRSESKEWIRRSEESKEWIRRSLEESKEWIRRSDLEESKEWIRRSSDLEESKEWIRRSKSDLEESKEWIRRSAKSDLEESKEWIRRSKAKSDLEESKEWIRRSNKAKSDLEESKEWIRRSLNKAKSDLEESKEWIRRSELNKAKSDLEESKEWIRRSIELNKAKSDLEESKEWIRRSSIELNKAKSDLEESKEWIRRSISIELNKAKSDLEESKEWIRRSDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSDPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSLDPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSALDPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSVALDPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSSVALDPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSNSVALDPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSNNSVALDPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSLNNSVALDPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSTLNNSVALDPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRS采用表1的单字母氨基酸编码
                          表14
                人副流感病毒3(HPV3)F1区
                  DP107类似物羧基端平截ALGALGVALGVAALGVATALGVATSALGVATSAALGVATSAQALGVATSAQIALGVATSAQITALGVATSAQITAALGVATSAQITAAALGVATSAQITAAVALGVATSAQITAAVAALGVATSAQITAAVALALGVATSAQITAAVALVALGVATSAQITAAVALVEALGVATSAQITAAVALVEAALGVATSAQITAAVALVEAKALGVATSAQITAAVALVEAKQALGVATSAQITAAVALVEAKQAALGVATSAQITAAVALVEAKQARALGVATSAQITAAVALVEAKQARSALGVATSAQITAAVALVEAKQARSDALGVATSAQITAAVALVEAKQARSDIALGVATSAQITAAVALVEAKQARSDIEALGVATSAQITAAVALVEAKQARSDIEKALGVATSAQITAAVALVEAKQARSDIEKLALGVATSAQITAAVALVEAKQARSDIEKLKALGVATSAQITAAVALVEAKQARSDIEKLKEALGVATSAQITAAVALVEAKQARSDIEKLKEAALGVATSAQITAAVALVEAKQARSDIEKLKEAIALGVATSAQITAAVALVEAKQARSDIEKLKEAIR采用表1的单字母氨基酸编码
                      表15
              人副流感病毒3(HPV3)F1区
                DP107类似物氨基端平截IRDAIRDEAIRDKEAIRDLKEAIRDKLKEAIRDEKLKEAIRDIEKLKEAIRDDIEKLKEAIRDSDIEKLKEAIRDRSDIEKLKEAIRDARSDIEKLKEAIRDQARSDIEKLKEAIRDKQARSDIEKLKEAIRDAKQARSDIEKLKEAIRDEAKQARSDIEKLKEAIRDVEAKQARSDIEKLKEAIRDLVEAKQARSDIEKLKEAIRDALVEAKQARSDIEKLKEAIRDVALVEAKQARSDIEKLKEAIRDAVALVEAKQARSDIEKLKEAIRDAAVALVEAKQARSDIEKLKEAIRDTAAVALVEAKQARSDIEKLKEAIRDITAAVALVEAKQARSDIEKLKEAIRDQITAAVALVEAKQARSDIEKLKEAIRDAQITAAVALVEAKQARSDIEKLKEAIRDSAQITAAVALVEAKQARSDIEKLKEAIRDTSAQITAAVALVEAKQARSDIEKLKEAIRDATSAQITAAVALVEAKQARSDIEKLKEAIRDVATSAQITAAVALVEAKQARSDIEKLKEAIRDGVATSAQITAAVALVEAKQARSDIEKLKEAIRDLGVATSAQITAAVALVEAKQARSDIEKLKEAIRD采用表1的单字母氨基酸编码
                       表16
               抗呼吸道合胞病毒(RSV)肽TSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVVAVSKVLHLEGEVNKIALLSTNKAVVSLSNGVSAVSKVLHLEGEVNKIALLSTNKAVVSLSNGVSVVSKVLHLEGEVNKIALLSTNKAVVSLSNGVSVLSKVLHLEGEVNKIALLSTNKAVVSLSNGVSVLTKVLHLEGEVNKIALLSTNKAVVSLSNGVSVLTSLEGEVNKIALLSTNKAVVSLSNGVSVLTSKVLDGEVNKIALLSTNKAVVSLSNGVSVLTSKVLDLKEVNKIALLSTNKAVVSLSNGVSVLTSKVLDLKNVNKIALLSTNKAVVSLSNGVSVLTSKVLDLKNYNKIALLSTNKAVVSLSNGVSVLTSKVLDLKNYIKIALLSTNKAVVSLSNGVSVLTSKVLDLKNYIDIALLSTNKAVVSLSNGVSVLTSKVLDLKNYIDKALLSTNKAVVSLSNGVSVLTSKVLDLKNYIDKQVAVSKVLHLEGEVNKIALLSTNKAVVSLSNGVSAVSKVLHLEGEVNKIALLSTNKAVVSLSNGVSVVSKVLHLEGEVNKIALLSTNKAVVSLSNGVSVLSKVLHLEGEVNKIALLSTNKAVVSLSNGVSVLTKVLHLEGEVNKIALLSTNKAVVSLSNGVSVLTSLEGEVNKIALLSTNKAVVSLSNGVSVLTSKVLDGEVNKIALLSTNKAVVSLSNGVSVLTSKVLDLKEVNKIALLSTNKAVVSLSNGVSVLTSKVLDLKNVNKIALLSTNKAVVSLSNGVSVLTSKVLDLKNYNKIALLSTNKAVVSLSNGVSVLTSKVLDLKNYIKIALLSTNKAVVSLSNGVSVLTSKVLDLKNYIDIALLSTNKAVVSLSNGVSVLTSKVLDLKNYIDKALLSTNKAVVSLSNGVSVLTSKVLDLKNYIDKQ采用表1的单字母氨基酸编码
                       表17
             抗人副流感病毒3(HPV3)肽TLNNSVALDPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSNLNNSVALDPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSNQNNSVALDPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSNQKNSVALDPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSNQKLSVALDPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSNQKLDVALDPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSNQKLDSALDPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSNQKLDSILDPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSNQKLDSIGDPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSNQKLDSIGNPIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSNQKLDSIGNWIDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSNQKLDSIGNWHDISIELNKAKSDLEESKEWIRRSNQKLDSIGNWHQISIELNKAKSDLEESKEWIRRSNQKLDSIGNWHQSSIELNKAKSDLEESKEWIRRSNQKLDSIGNWHQSSIELNKAKSDLEESKEWIRRSNQKLDSIGNWHQSSTELNKAKSDLEESKEWIRRSNQKLDSIGNWHQSSTTTAAVALVEAKQARSDIEKLKEAIRDTNKAVQSVQSAVALVEAKQARSDIEKLKEAIRDTNKAVQSVQSSILVEAKQARSDIEKLKEAIRDTNKAVQSVQSSIGNLVEAKQARSDIEKLKEAIRDTNKAVQSVQSSIGNLIEAKQARSDIEKLKEAIRDTNKAVQSVQSSIGNLIVAKQARSDIEKLKEAIRDTNKAVQSVQSSIGNLIVAKQARSDIEKLKEAIRDTNKAVQSVQSSIGNLIVAIQARSDIEKLKEAIRDTNKAVQSVQSSIGNLIVAIKARSDIEKLKEAIRDTNKAVQSVQSSIGNLIVAIKSRSDIEKLKEAIRDTNKAVQSVQSSIGNLIVAIKSVSDIEKLKEAIRDTNKAVQSVQSSIGNLIVAIKSVQKLKEAIRDTNKAVQSVQSSIGNLIVAIKSVQDYVNLKEAIRDTNKAVQSVQSSIGNLIVAIKSVQDYVNKAIRDTNKAVQSVQSSIGNLIVAIKSVQDYVNKEIV采用表1的单字母氨基酸编码
                     表18
              抗猿猴免疫缺陷病毒(SIV)肽WQEWERKVDFLEENITALLEEAQIQQEKNMYELQKQEWERKVDFLEENITALLEEAQIQQEKNMYELQKLEWERKVDFLEENITALLEEAQIQQEKNMYELQKLNWERKVDFLEENITALLEEAQIQQEKNMYELQKLNSERKVDFLEENITALLEEAQIQQEKNMYELQKLNSWRKVDFLEENITALLEEAQIQQEKNMYELQKLNSWDKVDFLEENITALLEEAQIQQEKNMYELQKLNSWDVVDFLEENITALLEEAQIQQEKNMYELQKLNSWDVFDFLEENITALLEEAQIQQEKNMYELQKLNSWDVFGFLEENITALLEEAQIQQEKNMYELQKLNSWDVFGN采用表1的单字母氨基酸编码
                      表19
               抗麻疹病毒(MeV)肽LHRIDLGPPISLERLDVGTNLGNAIAKLEAKELLHRIDLGPPISLERLDVGTNLGNAIAKLEAKELLERIDLGPPISLERLDVGTNLGNAIAKLEAKELLESIDLGPPISLERLDVGTNLGNAIAKLEAKELLESSDLGPPISLERLDVGTNLGNAIAKLEAKELLESSDLGPPISLERLDVGTNLGNAIAKLEAKELLESSDQGPPISLERLDVGTNLGNAIAKLEAKELLESSDQIPPISLERLDVGTNLGNAIAKLEAKELLESSDQILPISLERLDVGTNLGNAIAKLEAKELLESSDQILRSLERLDVGTNLGNAIAKLEAKELLESSDQILRSMLERLDVGTNLGNAIAKLEAKELLESSDQILRSMK采用表1的单字母氨基酸编码
                  序列表<110>康久化学公司<120>病毒感染的长效融合肽抑制剂<130>REDC-1510<140><141><150>US 60/134,406<151>1999-05-17<150>US 60/153，406<151>1999-09-10<160>86<170>PatentIn Ver.2.1<210>1<211>36<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>1Tyr Thr Ser Leu Ile His Ser Leu Ile Glu Glu Ser Gln Asn Gln Gln1               5                  10                  15Glu Lys Asn Glu Gln Glu Leu Leu Glu Leu Asp Lys Trp Ala Ser Leu
         20                  25                  30Trp Asn Trp Phe
     35<210>2<211>38<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>2Asn Asn Leu Leu Arg Ala Ile Glu Ala Gln Gln His Leu Leu Gln Leu1               5                  10                  15Thr Val Trp Gln Ile Lys Gln Leu Gln Ala Arg Ile Leu Ala Val Glu
         20                  25                  30Arg Tyr Leu Lys Asp Gln
     35<210>3<211>36<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>3Tyr Thr Asn Thr Ile Tyr Thr Leu Leu Glu Glu Ser Gln Asn Gln Gln1               5                  10                  15Glu Lys Asn Glu Gln Glu Leu Leu Glu Leu Asp Lys Trp Ala Ser Leu
         20                  25                  30Trp Asn Trp Phe
     35<210>4<211>36<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>4Tyr Thr Gly Ile Ile Tyr Asn Leu Leu Glu Glu Ser Gln Asn Gln Gln1               5                  10                  15Glu Lys Asn Glu Gln Glu Leu Leu Glu Leu Asp Lys Trp Ala Asn Leu
         20                  25                  30Trp Asn Trp Phe
     35<210>5<211>36<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>5Tyr Thr Ser Leu Ile Tyr Ser Leu Leu Glu Lys Ser Gln Thr Gln Gln1               5                  10                  15Glu Lys Asn Glu Gln Glu Leu Leu Glu Leu Asp Lys Trp Ala Ser Leu
         20                  25                  30Trp Asn Trp Phe
     35<210>6<211>36<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>6Leu Glu Ala Asn Ile Ser Lys Ser Leu Glu Gln Ala Gln Ile Gln Gln1               5                  10                  15Glu Lys Asn Met Tyr Glu Leu Gln Lys Leu Asn Ser Trp Asp Ile Phe
         20                  25                  30Gly Asn Trp Phe
     35<210>7<211>36<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>7Leu Glu Ala Asn Ile Ser Gln Ser Leu Glu Gln Ala Gln Ile Gln Gln1               5                  10                  15Glu Lys Asn Met Tyr Glu Leu Gln Lys Leu Asn Ser Trp Asp Val Phe
         20                  25                  30Thr Asn Trp Leu
     35<210>8<211>41<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>8Cys Gly Gly Asn Asn Leu Leu Arg Ala Ile Glu Ala Gln Gln His Leu1               5                  10                  15Leu Gln Leu Thr Val Trp Gly Ile Lys Gln Leu Gln Ala Arg Ile Leu
         20                  25                  30Ala Val Glu Arg Tyr Leu Lys Asp Gln
     35                  40<210>9<211>38<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>9Gln Gln Leu Leu Asp Val Val Lys Arg Gln Gln Glu Met Leu Arg Leu1               5                  10                  15Thr Val Trp Gly Thr Lys Asn Leu Gln Ala Arg Val Thr Ala Ile Glu
         20                  25                  30Lys Tyr Leu Lys Asp Gln
     35<210>10<211>46<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>10Tyr Thr Ser Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile Lys Glu Asn Lys1               5                  10                  15Cys Asn Gly Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys Gln Glu Leu Asp Lys Tyr
         20                  25                  30Lys Asn Ala Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu Met Gln Ser Thr
         35              40                  45<210>11<211>54<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>11Ala Ser Gly Val Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu Glu Gly Glu Val1               5                  10                  15Asn Lys Ile Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys Ala Val Val Ser Leu Ser
         20                  25                  30Asn Gly Val Ser Val Leu Thr Ser Lys Val Leu Asp Leu Lys Asn Tyr
     35                  40                  45Ile Asp Lys Gln Leu Leu
 50<210>12<211>53<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>12Gly Glu Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro Leu Val Phe Pro Ser Asp1               5                  10                  15Glu Phe Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn Glu Lys Ile Asn Gln Ser
         20                  25                  30Leu Ala Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu Leu His Asn Val Asn Ala
     35                  40                  45Gly Lys Ser Thr Thr
 50<210>13<211>48<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>13Tyr Thr Ser Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile Lys Glu Asn Lys1               5                  10                  15Cys Asn Gly Thr Asp Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys Gln Glu Leu Asp
         20                  25                  30Lys Tyr Lys Asn Ala Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu Met Gln Ser Thr
     35                  40                  45<210>14<211>34<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>14Tyr Thr Ser Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile Lys Glu Asn Lys1               5                  10                  15Cys Asn Gly Asp Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys Gln Glu Leu Asp Lys
         20                  25                  30Tyr Lys<210>15<211>34<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>15Thr Ser Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile Lys Glu Asn Lys Cys1               5                  10                  15Asn Gly Asp Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys Gln Glu Leu Asp Lys Tyr
         20                  25                  30Lys Asn<210>16<211>34<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>16Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile Lys Glu Asn Lys Cys Asn Gly1               5                  10                  15Asp Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn
         20                  25                  30Ala Val<210>17<211>34<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>17Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile Lys Glu Asn Lys Met Asn Gly1               5                  10                  15Asp Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn
         20                  25                  30Ala Val<210>18<211>33<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>18Val Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile1               5                  10                  15Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val
         20                      25              30Ser<210>19<211>33<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>19Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Ala1               5                  10                  15Leu Leu Ser Thr Asn Lys Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser
         20                  25                 30Val<210>20<211>33<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>20Val Ser Lys Val Leu His Leu Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Ala Leu1               5                  10                  15Leu Ser Thr Asn Lys Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val
         20                  25                  30Leu<210>21<211>33<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>21Ser Lys Val Leu His Leu Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Ala Leu Leu1               5                  10                  15Ser Thr Asn Lys Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Leu
         20                  25                  30Thr<210>22<211>33<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>22Lys Val Leu His Leu Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Ala Leu Leu Ser1               5                  10              15Thr Asn Lys Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Leu Thr
         20                  25                  30Ser<210>23<211>33<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>23Leu Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys Ala1               5                  10                  15Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Leu Thr Ser Lys Val Leu
         20                  25                  30Asp<210>24<211>33<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>24Gly Glu Val Asn Lys Ile Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys Ala Val Val1               5                  10                  15Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Leu Thr Ser Lys Val Leu Asp Leu
         20                  25                  30Lys<210>25<211>33<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>25Glu Val Asn Lys Ile Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys Ala Val Val Ser1               5                  10                  15Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Leu Thr Ser Lys Val Leu Asp Leu Lys
         20                  25                  30Asn<210>26<211>33<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>26Val Asn Lys Ile Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys Ala Val Val Ser Leu1               5                  10                  15Ser Asn Gly Val Ser Val Leu Thr Ser Lys Val Leu Asp Leu Lys Asn
         20                  25                  30Tyr<210>27<211>33<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>27Asn Lys Ile Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys Ala Val Val Ser Leu Ser1               5                  10                  15Asn Gly Val Ser Val Leu Thr Ser Lys Val Leu Asp Leu Lys Asn Tyr
         20                  25                  30Ile<210>28<211>33<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>28Lys Ile Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys Ala Val Val Ser Leu Ser Asn1               5                  10                  15Gly Val Ser Val Leu Thr Ser Lys Val Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile
         20                  25                  30Asp<210>29<211>33<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>29Ile Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly1               5                  10                  15Val Ser Val Leu Thr Ser Lys Val Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp
         20                  25                  30Lys<210>30<211>33<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>30Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val1               5                  10                  15Ser Val Leu Thr Ser Lys Val Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp Lys
         20                  25                  30Gln<210>31<211>70<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>31Gly Thr Ile Ala Leu Gly Val Ala Thr Ser Ala Gln Ile Thr Ala Ala1               5                  10                  15Val Ala Leu Val Glu Ala Lys Gln Ala Arg Ser Asp Ile Glu Lys Leu
         20                  25                  30Lys Glu Ala Ile Arg Asp Thr Asn Lys Ala Val Gln Ser Val Gln Ser
     35                  40                  45Ser Ile Gly Asn Leu Ile Val Ala Ile Lys Ser Val Gln Asp Tyr Val
 50                  55                  60Asn Lys Glu Ile Val Pro65                  70<210>32<211>56<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>32Tyr Thr Pro Asn Asp Ile Thr Leu Asn Asn Ser Val Ala Leu Asp Pro1               5                  10                  15Ile Asp Ile Ser Ile Glu Leu Asn Lys Ala Lys Ser Asp Leu Glu Glu
         20                  25                  30Ser Lys Glu Trp Ile Arg Arg Ser Asn Gln Lys Leu Asp Ser Ile Gly
     35                  40                  45Asn Trp His Gln Ser Ser Thr Thr
 50                  55<210>33<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>33Thr Leu Asn Asn Ser Val Ala Leu Asp Pro Ile Asp Ile Ser Ile Glu1               5                  10                  15Leu Asn Lys Ala Lys Ser Asp Leu Glu Glu Ser Lys Glu Trp Ile Arg
         20                  25                  30Arg Ser Asn
     35<210>34<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>34Leu Asn Asn Ser Val Ala Leu Asp Pro Ile Asp Ile Ser Ile Glu Leu1               5                  10                  15Asn Lys Ala Lys Ser Asp Leu Glu Glu Ser Lys Glu Trp Ile Arg Arg
         20              25                      30Ser Asn Gln
     35<210>35<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>35Asn Asn Ser Val Ala Leu Asp Pro Ile Asp Ile Ser Ile Glu Leu Asn1               5                  10                  15Lys Ala Lys Ser Asp Leu Glu Glu Ser Lys Glu Trp Ile Arg Arg Ser
         20                  25                  30Asn Gln Lys
     35<210>36<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>36Asn Ser Val Ala Leu Asp Pro Ile Asp Ile Ser Ile Glu Leu Asn Lys1               5                  10                  15Ala Lys Ser Asp Leu Glu Glu Ser Lys Glu Trp Ile Arg Arg Ser Asn
         20                  25                  30Gln Lys Leu
     35<210>37<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>37Ser Val Ala Leu Asp Pro Ile Asp Ile Ser Ile Glu Leu Asn Lys Ala1               5                  10                  15Lys Ser Asp Leu Glu Glu Ser Lys Glu Trp Ile Arg Arg Ser Asn Gln
         20                  25                  30Lys Leu Asp
     35<210>38<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>38Val Ala Leu Asp Pro Ile Asp Ile Ser Ile Glu Leu Asn Lys Ala Lys1               5                  10                  15Ser Asp Leu Glu Glu Ser Lys Glu Trp Ile Arg Arg Ser Asn Gln Lys
         20                  25                  30Leu Asp Ser
     35<210>39<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>39Ala Leu Asp Pro Ile Asp Ile Ser Ile Glu Leu Asn Lys Ala Lys Ser1               5                  10                  15Asp Leu Glu Glu Ser Lys Glu Trp Ile Arg Arg Ser Asn Gln Lys Leu
         20                  25                  30Asp Ser Ile
     35<210>40<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>40Leu Asp Pro Ile Asp Ile Ser Ile Glu Leu Asn Lys Ala Lys Ser Asp1               5                  10                  15Leu Glu Glu Ser Lys Glu Trp Ile Arg Arg Ser Asn Gln Lys Leu Asp
         20                  25                  30Ser Ile Gly
     35<210>41<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>41Asp Pro Ile Asp Ile Ser Ile Glu Leu Asn Lys Ala Lys Ser Asp Leu1               5                  10                  15Glu Glu Ser Lys Glu Trp Ile Arg Arg Ser Asn Gln Lys Leu Asp Ser
         20              25                      30Ile Gly Asn
     35<210>42<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>42Pro Ile Asp Ile Ser Ile Glu Leu Asn Lys Ala Lys Ser Asp Leu Glu1               5                  10                  15Glu Ser Lys Glu Trp Ile Arg Arg Ser Asn Gln Lys Leu Asp Ser Ile
         20                  25                  30Gly Asn Trp
     35<210>43<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>43Ile Asp Ile Ser Ile Glu Leu Asn Lys Ala Lys Ser Asp Leu Glu Glu1               5                  10                  15Ser Lys Glu Trp Ile Arg Arg Ser Asn Gln Lys Leu Asp Ser Ile Gly
         20                  25                  30Asn Trp His
     35<210>44<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>44Asp Ile Ser Ile Glu Leu Asn Lys Ala Lys Ser Asp Leu Glu Glu Ser1               5                  10                  15Lys Glu Trp Ile Arg Arg Ser Asn Gln Lys Leu Asp Ser Ile Gly Asn
         20                  25                  30Trp His Gln
     35<210>45<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>45Ile Ser Ile Glu Leu Asn Lys Ala Lys Ser Asp Leu Glu Glu Ser Lys1               5                  10                  15Glu Trp Ile Arg Arg Ser Asn Gln Lys Leu Asp Ser Ile Gly Asn Trp
         20                  25                  30His Gln Ser
     35<210>46<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>46Ser Ile Glu Leu Asn Lys Ala Lys Ser Asp Leu Glu Glu Ser Lys Glu1               5                  10                  15Trp Ile Arg Arg Ser Asn Gln Lys Leu Asp Ser Ile Gly Asn Trp His
         20                  25                  30Gln Ser Ser
     35<210>47<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>47Ile Glu Leu Asn Lys Ala Lys Ser Asp Leu Glu Glu Ser Lys Glu Trp1               5                  10                  15Ile Arg Arg Ser Asn Gln Lys Leu Asp Ser Ile Gly Asn Trp His Gln
         20                  25                  30Ser Ser Thr
    35<210>48<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>48Glu Leu Asn Lys Ala Lys Ser Asp Leu Glu Glu Ser Lys Glu Trp Ile1               5                  10                  15Arg Arg Ser Asn Gln Lys Leu Asp Ser Ile Gly Asn Trp His Gln Ser
         20                  25                  30Ser Thr Thr
     35<210>49<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>49Thr Ala Ala Val Ala Leu Val Glu Ala Lys Gln Ala Arg Ser Asp Ile1               5                  10                  15Glu Lys Leu Lys Glu Ala Ile Arg Asp Thr Asn Lys Ala Val Gln Ser
         20                  25                  30Val Gln Ser
     35<210>50<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>50Ala Val Ala Leu Val Glu Ala Lys Gln Ala Arg Ser Asp Ile Glu Lys1               5                  10                  15Leu Lys Glu Ala Ile Arg Asp Thr Asn Lys Ala Val Gln Ser Val Gln
         20                  25                  30Ser Ser Ile
     35<210>51<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>51Leu Val Glu Ala Lys Gln Ala Arg Ser Asp Ile Glu Lys Leu Lys Glu1               5                  10                  15Ala Ile Arg Asp Thr Asn Lys Ala Val Gln Ser Val Gln Ser Ser Ile
         20                  25                  30Gly Asn Leu
     35<210>52<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>52Val Glu Ala Lys Gln Ala Arg Ser Asp Ile Glu Lys Leu Lys Glu Ala1               5                  10                  15Ile Arg Asp Thr Asn Lys Ala Val Gln Ser Val Gln Ser Ser Ile Gly
         20                  25                  30Asn Leu Ile
     35<210>53<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>53Glu Ala Lys Gln Ala Arg Ser Asp Ile Glu Lys Leu Lys Glu Ala Ile1               5                  10                  15Arg Asp Thr Asn Lys Ala Val Gln Ser Val Gln Ser Ser Ile Gly Asn
         20                  25                  30Leu Ile Val
     35<210>54<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>54Ala Lys Gln Ala Arg Ser Asp Ile Glu Lys Leu Lys Glu Ala Ile Arg1               5                  10                 15Asp Thr Asn Lys Ala Val Gln Ser Val Gln Ser Ser Ile Gly Asn Leu
         20                  25                  30Ile Val Ala
     35<210>55<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>55Lys Gln Ala Arg Ser Asp Ile Glu Lys Leu Lys Glu Ala Ile Arg Asp1               5                  10                  15Thr Asn Lys Ala Val Gln Ser Val Gln Ser Ser Ile Gly Asn Leu Ile
         20                  25                  30Val Ala Ile
     35<210>56<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>56Gln Ala Arg Ser Asp Ile Glu Lys Leu Lys Glu Ala Ile Arg Asp Thr1               5                  10                  15Asn Lys Ala Val Gln Ser Val Gln Ser Ser Ile Gly Asn Leu Ile Val
         20                  25                  30Ala Ile Lys
     35<210>57<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>57Ala Arg Ser Asp Ile Glu Lys Leu Lys Glu Ala Ile Arg Asp Thr Asn1               5                  10                  15Lys Ala Val Gln Ser Val Gln Ser Ser Ile Gly Asn Leu Ile Val Ala
         20              25                      30Ile Lys Ser
     35<210>58<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>58Arg Ser Asp Ile Glu Lys Leu Lys Glu Ala Ile Arg Asp Thr Asn Lys1               5                  10                  15Ala Val Gln Ser Val Gln Ser Ser Ile Gly Asn Leu Ile Val Ala Ile
         20                  25                  30Lys Ser Val
     35<210>59<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>59Ser Asp Ile Glu Lys Leu Lys Glu Ala Ile Arg Asp Thr Asn Lys Ala1               5                  10                  15Val Gln Ser Val Gln Ser Ser Ile Gly Asn Leu Ile Val Ala Ile Lys
         20                  25                  30Ser Val Gln
     35<210>60<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>60Lys Leu Lys Glu Ala Ile Arg Asp Thr Asn Lys Ala Val Gln Ser Val1               5                  10                  15Gln Ser Ser Ile Gly Asn Leu Ile Val Ala Ile Lys Ser Val Gln Asp
         20                  25                  30Tyr Val Asn
     35<210>61<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>61Leu Lys Glu Ala Ile Arg Asp Thr Asn Lys Ala Val Gln Ser Val Gln1               5                  10                  15Ser Ser Ile Gly Asn Leu Ile Val Ala Ile Lys Ser Val Gln Asp Tyr
         20                  25                  30Val Asn Lys
     35<210>62<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>62Ala Ile Arg Asp Thr Asn Lys Ala Val Gln Ser Val Gln Ser Ser Ile1               5                  10                  15Gly Asn Leu Ile Val Ala Ile Lys Ser Val Gln Asp Tyr Val Asn Lys
         20                  25                  30Glu Ile Val
     35<210>63<211>47<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>63Thr Trp Gln Glu Trp Glu Arg Lys Val Asp Phe Leu Glu Glu Asn Ile1               5                  10                  15Thr Ala Leu Leu Glu Glu Ala Gln Ile Gln Gln Glu Lys Asn Met Tyr
         20                  25                  30Glu Leu Gln Lys Leu Asn Ser Trp Asp Val Phe Gly Asn Trp Phe
     35                  40                  45<210>64<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>64Trp Gln Glu Trp Glu Arg Lys Val Asp Phe Leu Glu Glu Asn Ile Thr1               5                  10                  15Ala Leu Leu Glu Glu Ala Gln Ile Gln Gln Glu Lys Asn Met Tyr Glu
         20                  25                  30Leu Gln Lys
     35<210>65<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>65Gln Glu Trp Glu Arg Lys Val Asp Phe Leu Glu Glu Asn Ile Thr Ala1               5                  10                  15Leu Leu Glu Glu Ala Gln Ile Gln Gln Glu Lys Asn Met Tyr Glu Leu
         20                  25                  30Gln Lys Leu
     35<210>66<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>66Glu Trp Glu Arg Lys Val Asp Phe Leu Glu Glu Asn Ile Thr Ala Leu1               5                  10                  15Leu Glu Glu Ala Gln Ile Gln Gln Glu Lys Asn Met Tyr Glu Leu Gln
         20                  25                  30Lys Leu Asn
     35<210>67<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>67Trp Glu Arg Lys Val Asp Phe Leu Glu Glu Asn Ile Thr Ala Leu Leu1               5                  10                  15Glu Glu Ala Gln Ile Gln Gln Glu Lys Asn Met Tyr Glu Leu Gln Lys
         20                  25                  30Leu Asn Ser
     35<210>68<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>68Glu Arg Lys Val Asp Phe Leu Glu Glu Asn Ile Thr Ala Leu Leu Glu1               5                  10                  15Glu Ala Gln Ile Gln Gln Glu Lys Asn Met Tyr Glu Leu Gln Lys Leu
         20                  25                  30Asn Ser Trp
     35<210>69<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>69Arg Lys Val Asp Phe Leu Glu Glu Asn Ile Thr Ala Leu Leu Glu Glu1               5                  10                  15Ala Gln Ile Gln Gln Glu Lys Asn Met Tyr Glu Leu Gln Lys Leu Asn
         20                  25                  30Ser Trp Asp
     35<210>70<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>70Lys Val Asp Phe Leu Glu Glu Asn Ile Thr Ala Leu Leu Glu Glu Ala1               5                  10                  15Gln Ile Gln Gln Glu Lys Asn Met Tyr Glu Leu Gln Lys Leu Asn Ser
         20                  25                  30Trp Asp Val
     35<210>71<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>71Val Asp Phe Leu Glu Glu Asn Ile Thr Ala Leu Leu Glu Glu Ala Gln1               5                  10                  15Ile Gln Gln Glu Lys Asn Met Tyr Glu Leu Gln Lys Leu Asn Ser Trp
         20                  25                  30Asp Val Phe
     35<210>72<21l>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>72Asp Phe Leu Glu Glu Asn Ile Thr Ala Leu Leu Glu Glu Ala Gln Ile1               5                  10                  15Gln Gln Glu Lys Asn Met Tyr Glu Leu Gln Lys Leu Asn Ser Trp Asp
         20                  25                  30Val Phe Gly
     35<210>73<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>73Phe Leu Glu Glu Asn Ile Thr Ala Leu Leu Glu Glu Ala Gln Ile Gln1               5                  10                  15Gln Glu Lys Asn Met Tyr Glu Leu Gln Lys Leu Asn Ser Trp Asp Val
         20                  25                  30Phe Gly Asn
     35<210>74<211>35<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>74Pro Asp Ala Val Tyr Leu His Arg Ile Asp Leu Gly Pro Pro IIe Ser1               5                  10                  15Leu Glu Arg Leu Asp Val Gly Thr Asn Leu Gly Asn Ala Ile Ala Lys
         20                  25                  30Leu Glu Asp
     35<210>75<211>34<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>75Leu Glu Arg Leu Asp Val Gly Thr Asn Leu Gly Asn Ala Ile Ala Lys1               5                  10                  15Leu Glu Ala Lys Glu Leu Leu Glu Ser Ser Asp Gln Ile Leu Arg Ser
         20                  25                  30Met Lys<210>76<211>34<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>76Leu His Arg Ile Asp Leu Gly Pro Pro Ile Ser Leu Glu Arg Leu Asp1               5                  10                  15Val Gly Thr Asn Leu Gly Asn Ala Ile Ala Lys Leu Glu Ala Lys Glu
         20                  25                  30Leu Leu<210>77<211>34<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>77His Arg Ile Asp Leu Gly Pro Pro Ile Ser Leu Glu Arg Leu Asp Val1               5                  10                  15Gly Thr Asn Leu Gly Asn Ala Ile Ala Lys Leu Glu Ala Lys Glu Leu
         20                  25                  30Leu Glu<210>78<211>34<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>78Arg Ile Asp Leu Gly Pro Pro Ile Ser Leu Glu Arg Leu Asp Val Gly1               5                  10                  15Thr Asn Leu Gly Asn Ala Ile Ala Lys Leu Glu Ala Lys Glu Leu Leu
         20                  25                  30Glu Ser<210>79<211>34<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>79Ile Asp Leu Gly Pro Pro Ile Ser Leu Glu Arg Leu Asp Val Gly Thr1               5                  10                  15Asn Leu Gly Asn Ala Ile Ala Lys Leu Glu Ala Lys Glu Leu Leu Glu
         20                  25                  30Ser Ser<210>80<211>34<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>80Asp Leu Gly Pro Pro Ile Ser Leu Glu Arg Leu Asp Val Gly Thr Asn1               5                  10                 15Leu Gly Asn Ala Ile Ala Lys Leu Glu Ala Lys Glu Leu Leu Glu Ser
         20                  25                  30Ser Asp<210>81<211>34<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>81Leu Gly Pro Pro Ile Ser Leu Glu Arg Leu Asp Val Gly Thr Asn Leu1               5                  10                  15Gly Asn Ala Ile Ala Lys Leu Glu Ala Lys Glu Leu Leu Glu Ser Ser
         20                  25                  30Asp Gln<210>82<211>34<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>82Gly Pro Pro Ile Ser Leu Glu Arg Leu Asp Val Gly Thr Asn Leu Gly1               5                  10                  15Asn Ala Ile Ala Lys Leu Glu Ala Lys Glu Leu Leu Glu Ser Ser Asp
         20                  25                  30Gln Ile<210>83<211>34<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>83Pro Pro Ile Ser Leu Glu Arg Leu Asp Val Gly Thr Asn Leu Gly Asn1               5                  10                  15Ala Ile Ala Lys Leu Glu Ala Lys Glu Leu Leu Glu Ser Ser Asp Gln
         20                  25                  30Ile Leu<210>84<211>34<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>84Pro Ile Ser Leu Glu Arg Leu Asp Val Gly Thr Asn Leu Gly Asn Ala1               5                  10                  15Ile Ala Lys Leu Glu Ala Lys Glu Leu Leu Glu Ser Ser Asp Gln Ile
         20                  25                  30Leu Arg<210>85<211>34<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>85Ser Leu Glu Arg Leu Asp Val Gly Thr Asn Leu Gly Asn Ala Ile Ala1               5                  10                  15Lys Leu Glu Ala Lys Glu Leu Leu Glu Ser Ser Asp Gln Ile Leu Arg
         20                  25                  30Ser Met<210>86<211>34<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工序列描述：合成肽<400>86Leu Glu Arg Leu Asp Val Gly Thr Asn Leu Gly Asn Ala Ile Ala Lys1               5                  10                  15Leu Glu Ala Lys Glu Leu Leu Glu Ser Ser Asp Gln Ile Leu Arg Ser
         20                  25                  30Met Lys

Claims (30)

1.经修饰的抗病毒肽，含有：
具有抗病毒活性的肽，和
与血液组分上的氨基、羟基或巯基反应形成稳定共价键的反应性基团。
2.权利要求1的经修饰的肽，其中所述反应性基团是琥珀酰亚胺基或马来酰亚胺基。
3.权利要求1的经修饰的肽，其中所述反应性基团是与血液蛋白上的巯基反应的马来酰亚胺基。
4.权利要求1的经修饰的肽，其中所述肽是DP178或DP107或其类似物。
5.权利要求1的经修饰的肽，其中所述肽对人免疫缺陷病毒(HIV)显示出抗病毒活性。
6.权利要求5的经修饰的肽，其中所述肽选自由SEQ ID NO：1至SEQ ID NO：9组成的组。
7.权利要求5的经修饰的肽，其中所述肽是DP178或DP107。
8.权利要求1的经修饰的肽，其中所述肽对人呼吸道合胞病毒(RSV)显示出抗病毒活性。
9.权利要求8的经修饰的肽，其中所述肽选自由SEQ ID NO：10至SEQ ID NO：30组成的组。
10.权利要求8的经修饰的肽，其中所述肽选自由SEQ ID NO：14至SEQ ID NO：17和SEQ ID NO：29组成的组。
11.权利要求1的经修饰的肽，其中所述肽对人副流感病毒(HPIV)显示出抗病毒活性。
12.权利要求11的经修饰的肽，其中所述肽选自由SEQ ID NO：31至SEQ ID NO：62组成的组。
13.权利要求11的经修饰的肽，其中所述肽选自由SEQ IDNO：35、SEQ ID NO：38至SEQ ID NO：42、SEQ ID NO：52和SEQ IDNO：58组成的组。
14.权利要求1的经修饰的肽，其中所述肽对麻疹病毒(MeV)显示出抗病毒活性。
15.权利要求14的经修饰的肽，其中所述肽选自由SEQ ID NO：74至SEQ ID NO：86组成的组。
16.权利要求14的经修饰的肽，其中所述肽选自由SEQ IDNO：77、SEQ ID NO：79、SEQ ID NO：81和SEQ ID NO：84组成的组。
17.权利要求1的经修饰的肽，其中所述肽对猿猴免疫缺陷病毒(SIV)显示出抗病毒活性。
18.权利要求17的经修饰的肽，其中所述肽选自由SEQ ID NO：63至SEQ ID NO：73组成的组。
19.一种用于预防和/或治疗获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的组合物，所述组合物含有对人免疫缺陷病毒(HIV)具有抗病毒活性的肽，所述肽被反应性基团修饰，所述反应性基团与血液组分上的氨基、羟基或巯基反应形成稳定的共价键。
20.权利要求19的组合物，其中所述反应性基团是与血液蛋白上的巯基反应的马来酰亚胺基。
21.权利要求20的组合物，其中所述肽是DP178或DP107或其类似物。
22.一种用于预防和/或治疗人呼吸道合胞病毒(RSV)感染的组合物，所述组合物含有对RSV具有抗病毒活性的肽，所述肽被反应性基团修饰，所述反应性基团与血液组分上的氨基、羟基或巯基反应形成稳定共价键。
23.权利要求22的组合物，其中所述反应性基团是与血液蛋白上的巯基反应的马来酰亚胺基。
24.权利要求23的组合物，其中所述肽选自由SEQ ID NO：14至SEQ ID NO：17和SEQ ID NO：29组成的组。
25.一种用于预防和/或治疗人副流感病毒(HPIV)感染的组合物，所述组合物含有对人副流感病毒(HPIV)表现出抗病毒活性的肽，所述肽被反应性基团修饰，所述的反应性基团与血液组分上的氨基、羟基或巯基反应形成稳定的共价键。
26.权利要求25的组合物，其中所述反应性基团是与血液蛋白上的巯基反应的马来酰亚胺基。
27.权利要求26的组合物，其中所述肽选自由SEQ ID NO：35、SEQ ID NO：38至SEQ ID NO：42、SEQ ID NO：52和SEQ ID NO：58组成的组。
28.一种用于预防和/或治疗麻疹病毒(MeV)感染的组合物，所述组合物含有对麻疹病毒(MeV)表现出抗病毒活性的肽，所述肽被反应性基团修饰，所述的反应性基团与血液组分上的氨基、羟基或巯基反应形成稳定的共价键。
29.权利要求28的组合物，其中所述反应性基团是与血液蛋白上的巯基反应的马来酰亚胺基。
30.权利要求29的组合物，其中所述肽选自由SEQ ID NO：77、SEQ ID NO：79、SEQ ID NO：81和SEQ ID NO：84组成的组。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1327897C (zh) * 2002-09-24 2007-07-25 重庆前沿生物技术有限公司 Hiv感染的肽衍生物融合抑制剂
CN100366633C (zh) * 2006-04-18 2008-02-06 河北师范大学 棕点湍蛙抗病毒多肽及其在制药中的应用
CN103977394A (zh) * 2009-07-17 2014-08-13 翰林大学校产学协力团 包含脂质体包胶的寡核苷酸和表位的免疫刺激性组合物
CN111303245A (zh) * 2020-02-21 2020-06-19 成都奥达生物科技有限公司 一种抗合胞病毒膜融合抑制剂

Families Citing this family (62)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20090175821A1 (en) * 1999-05-17 2009-07-09 Bridon Dominique P Modified therapeutic peptides with extended half-lives in vivo
US6887470B1 (en) 1999-09-10 2005-05-03 Conjuchem, Inc. Protection of endogenous therapeutic peptides from peptidase activity through conjugation to blood components
US7582301B1 (en) 1999-05-17 2009-09-01 Conjuchem Biotechnologies, Inc. Long-lasting antiviral fusion inhibitor peptide conjugates comprising albumin and human immunodeficiency virus (HIV) peptides
US7601691B2 (en) 1999-05-17 2009-10-13 Conjuchem Biotechnologies Inc. Anti-obesity agents
US6514500B1 (en) * 1999-10-15 2003-02-04 Conjuchem, Inc. Long lasting synthetic glucagon like peptide {GLP-!}
US20040266673A1 (en) * 2002-07-31 2004-12-30 Peter Bakis Long lasting natriuretic peptide derivatives
ES2209885T3 (es) 1999-05-17 2004-07-01 Conjuchem, Inc. Peptidos insulinotropicos de larga duracion.
CA2436399A1 (en) 2001-02-16 2002-08-29 Conjuchem Inc. Long lasting glucagon-like peptide 2 (glp-2) for the treatment of gastrointestinal diseases and disorders
DE60229677D1 (de) 2001-05-31 2008-12-11 Conjuchem Biotechnologies Inc Langwirkende Fusionspeptidinhibitoren gegen HIV-Infektion
CN1255548C (zh) 2001-06-15 2006-05-10 霍夫曼-拉罗奇有限公司 gp41片段的乙酰化
US7556813B2 (en) * 2002-09-27 2009-07-07 Trimeris, Inc. Antiviral peptide-polymer conjugate comprising a polymer covalently attached to two or more synthetic HIV gp41 HR1 and/or HR2 peptides
CA2443365C (en) * 2002-11-19 2010-01-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Methods for the recombinant production of antifusogenic peptides
JP4838722B2 (ja) 2003-10-24 2011-12-14 ゲンシア コーポレーション ポリヌクレオチドを送達する方法、及び送達用組成物
US8507277B2 (en) 2003-10-24 2013-08-13 Gencia Corporation Nonviral vectors for delivering polynucleotides
US20090123468A1 (en) 2003-10-24 2009-05-14 Gencia Corporation Transducible polypeptides for modifying metabolism
US8062891B2 (en) 2003-10-24 2011-11-22 Gencia Corporation Nonviral vectors for delivering polynucleotides to plants
US8133733B2 (en) 2003-10-24 2012-03-13 Gencia Corporation Nonviral vectors for delivering polynucleotides to target tissues
DE602005014969D1 (de) * 2004-04-23 2009-07-30 Conjuchem Biotechnologies Inc Verfahren zur aufreinigung von albumin-konjugaten
US7723063B2 (en) * 2004-04-28 2010-05-25 Intrinsic Lifesciences Methods for measuring levels of bioactive human hepcidin
WO2005108418A1 (en) * 2004-05-06 2005-11-17 Conjuchem Biotechnologies Inc. Compounds for specific viral target
WO2007053946A1 (en) * 2005-11-09 2007-05-18 Conjuchem Biotechnologies Inc. Method of treating diabetes and/or obesity with reduced nausea side effects using an insulinotropic peptide conjugated to albumin
MX2008008076A (es) * 2005-12-22 2008-11-28 Conjuchem Biotechnologies Inc Procesos para la produccion de conjugados preformados de albumina y un agente terapeutico.
CN101002945B (zh) 2006-01-20 2012-09-05 清华大学 一种用于肿瘤治疗的新型复合物
CN100475270C (zh) 2006-01-20 2009-04-08 清华大学 一种治疗肿瘤的药物及其应用
CA2651793C (en) 2006-02-02 2015-07-07 Trimeris, Inc. Hiv fusion inhibitor peptides with improved biological properties
TW200817438A (en) 2006-08-17 2008-04-16 Hoffmann La Roche A conjugate of an antibody against CCR5 and an antifusogenic peptide
KR101105610B1 (ko) 2006-08-17 2012-01-18 에프. 호프만-라 로슈 아게 Ｃｃｒ５ 에 대한 항체 및 항푸소제닉 펩타이드의 컨쥬게이트
US20090099074A1 (en) * 2007-01-10 2009-04-16 Conjuchem Biotechnologies Inc. Modulating food intake
US20090088378A1 (en) * 2007-01-12 2009-04-02 Omar Quraishi Long lasting inhibitors of viral infection
US20090143288A1 (en) 2007-03-13 2009-06-04 Roche Palo Alto Llc Peptide-complement conjugates
US20090088377A1 (en) * 2007-05-16 2009-04-02 Conjuchem Biotechnologies, Inc. Cysteic acid derivatives of anti-viral peptides
AR067584A1 (es) 2007-07-20 2009-10-14 Hoffmann La Roche Un conjugado de un anticuerpo contra la cd4 y peptidos antifusogenicos
CA2695830A1 (en) 2007-08-08 2009-02-12 Novozymes Biopharma Dk A/S Transferrin variants and conjugates
EP2036980A1 (de) * 2007-09-14 2009-03-18 Gruber, Jens Herabregulation der Genexpression mittels Nukleinsäure-beladener virusähnlicher Partikel
WO2009075859A2 (en) * 2007-12-11 2009-06-18 Conjuchem Biotechnologies Inc. Formulation of insulinotropic peptide conjugates
EP3243835B1 (en) 2009-02-11 2024-04-10 Albumedix Ltd Albumin variants and conjugates
CA2776241A1 (en) 2009-10-30 2011-05-05 Novozymes Biopharma Dk A/S Albumin variants
WO2011124718A1 (en) 2010-04-09 2011-10-13 Novozymes A/S Albumin derivatives and variants
CN103108884A (zh) 2010-09-14 2013-05-15 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 Serpin-finger融合多肽
US20130225496A1 (en) 2010-11-01 2013-08-29 Novozymes Biopharma Dk A/S Albumin Variants
GB2491006A (en) 2011-05-05 2012-11-21 Novozymes Biopharma Uk Ltd Albumin variants
WO2013039861A2 (en) 2011-09-12 2013-03-21 modeRNA Therapeutics Engineered nucleic acids and methods of use thereof
EP2780364A2 (en) 2011-11-18 2014-09-24 Eleven Biotherapeutics, Inc. Proteins with improved half-life and other properties
US9944691B2 (en) 2012-03-16 2018-04-17 Albumedix A/S Albumin variants
CA2868391A1 (en) 2012-04-02 2013-10-10 Stephane Bancel Polynucleotides comprising n1-methyl-pseudouridine and methods for preparing the same
WO2013151664A1 (en) 2012-04-02 2013-10-10 modeRNA Therapeutics Modified polynucleotides for the production of proteins
WO2013150532A1 (en) 2012-04-04 2013-10-10 Yeda Research And Development Co. Ltd. Lipopeptide conjugates comprising sphingolipid and hiv gp41 derived peptides
US20140128326A1 (en) 2012-11-08 2014-05-08 Novozymes Biopharma Dk A/S Albumin variants
CN105007722A (zh) 2013-02-16 2015-10-28 诺维信生物制药丹麦公司 药代动力学动物模型
WO2014165452A1 (en) * 2013-04-03 2014-10-09 The Regents Of The University Of California Compositions and methods for inhibiting viral activity
JP6306700B2 (ja) 2013-11-01 2018-04-04 ユニバーシティ オブ オスロＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｏｓｌｏ アルブミン改変体及びその使用
CN103864921B (zh) * 2014-01-16 2017-12-26 苏州大学 双重靶向治疗癌症的叶酸‑阿霉素免疫制剂及其制备方法
WO2015140591A1 (en) 2014-03-21 2015-09-24 Nordlandssykehuset Hf Anti-cd14 antibodies and uses thereof
WO2015164615A1 (en) 2014-04-24 2015-10-29 University Of Oslo Anti-gluten antibodies and uses thereof
BR112018003179A2 (pt) 2015-08-20 2018-09-25 Albumedix As conjugados e variantes de albumina
US11168131B2 (en) 2015-11-10 2021-11-09 Visterra, Inc. Antibody molecule-drug conjugates and uses thereof
JP2020500306A (ja) 2016-11-04 2020-01-09 オーフス ウニベルシテット 新生児Ｆｃ受容体の過剰発現により特徴づけられる腫瘍の同定と治療
WO2018096396A1 (en) 2016-11-22 2018-05-31 University Of Oslo Albumin variants and uses thereof
KR102697723B1 (ko) 2017-01-18 2024-08-21 비스테라, 인크. 항체 분자-약물 접합체 및 이의 용도
WO2021203024A1 (en) 2020-04-03 2021-10-07 Visterra, Inc. Antibody molecule-drug conjugates and uses thereof
WO2021211303A1 (en) * 2020-04-14 2021-10-21 Contrafect Corporation Antiviral, bacteriophage-derived polypeptides and their use against viruses
EP4442251A1 (en) 2023-04-05 2024-10-09 Albumedix Ltd Formulations and uses thereof

Family Cites Families (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3719667A (en) 1970-08-24 1973-03-06 Lilly Co Eli Epimerization of 6-acylamido and 6-imido penicillin sulfoxide esters
US3840556A (en) 1971-05-28 1974-10-08 Lilly Co Eli Penicillin conversion by halogen electrophiles and anti-bacterials derived thereby
US4652629A (en) * 1985-07-03 1987-03-24 The Salk Institute For Biological Studies Synthetic peptide-based anti-rabies compositions and methods
US5116944A (en) * 1989-12-29 1992-05-26 Neorx Corporation Conjugates having improved characteristics for in vivo administration
US5612034A (en) 1990-10-03 1997-03-18 Redcell, Inc. Super-globuling for in vivo extended lifetimes
WO1992017492A1 (en) 1991-04-05 1992-10-15 Genentech, Inc. PLATELET AGGREGATION INHIBITORS HAVING HIGH SPECIFICITY FOR GP IIbIII¿a?
FR2686899B1 (fr) * 1992-01-31 1995-09-01 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouveaux polypeptides biologiquement actifs, leur preparation et compositions pharmaceutiques les contenant.
WO1994002505A1 (en) 1992-07-20 1994-02-03 Duke University Compounds which inhibit hiv replication
GB9316895D0 (en) * 1993-08-13 1993-09-29 Guy S And St Thomas Hospitals Hepatoselective insulin analogues
EP0602290B1 (en) 1992-12-04 1999-08-25 ConjuChem, Inc. Antibody-conjugated Hepatitis B surface antigen and use thereof
US5614487A (en) * 1993-05-28 1997-03-25 Genentech, Inc. Sustained release pharmaceutical composition
US5464933A (en) * 1993-06-07 1995-11-07 Duke University Synthetic peptide inhibitors of HIV transmission
US6479055B1 (en) 1993-06-07 2002-11-12 Trimeris, Inc. Methods for inhibition of membrane fusion-associated events, including respiratory syncytial virus transmission
US6518013B1 (en) * 1993-06-07 2003-02-11 Trimeris, Inc. Methods for the inhibition of epstein-barr virus transmission employing anti-viral peptides capable of abrogating viral fusion and transmission
US6017536A (en) 1993-06-07 2000-01-25 Trimeris, Inc. Simian immunodeficiency virus peptides with antifusogenic and antiviral activities
US6342225B1 (en) * 1993-08-13 2002-01-29 Deutshces Wollforschungsinstitut Pharmaceutical active conjugates
JP3871713B2 (ja) 1995-05-10 2007-01-24 協和醗酵工業株式会社 新規毒素複合体
US6576636B2 (en) * 1996-05-22 2003-06-10 Protarga, Inc. Method of treating a liver disorder with fatty acid-antiviral agent conjugates
JP4086936B2 (ja) 1996-10-03 2008-05-14 株式会社ブリヂストン ダミーウェハ
US6150088A (en) * 1997-04-17 2000-11-21 Whitehead Institute For Biomedical Research Core structure of gp41 from the HIV envelope glycoprotein
DE69806066T2 (de) 1997-11-07 2003-02-06 Conjuchem, Inc. Affinitätsmarkierer für menschliches serum albumin
EP1007561B1 (en) 1997-11-07 2002-04-17 Conjuchem, Inc. Novel conjugates of opioids and endogenous carriers
US6107489A (en) * 1998-03-17 2000-08-22 Conjuchem, Inc. Extended lifetimes in vivo renin inhibitors
WO1999048536A2 (en) 1998-03-23 1999-09-30 Conjuchem, Inc. Delivery of long lasting therapeutic agents by forming covalent attachments in vivo
US6258782B1 (en) * 1998-05-20 2001-07-10 Trimeris, Inc. Hybrid polypeptides with enhanced pharmacokinetic properties
US20030190740A1 (en) * 1998-10-13 2003-10-09 The University Of Georgia Research Foundation, Inc Stabilized bioactive peptides and methods of identification, synthesis, and use
BR9914519A (pt) * 1998-10-13 2001-07-03 Univ Georgia Res Found Peptìdios bioativos estabilizados e métodos de identificação, sìntese e uso
US20090175821A1 (en) * 1999-05-17 2009-07-09 Bridon Dominique P Modified therapeutic peptides with extended half-lives in vivo
US7582301B1 (en) 1999-05-17 2009-09-01 Conjuchem Biotechnologies, Inc. Long-lasting antiviral fusion inhibitor peptide conjugates comprising albumin and human immunodeficiency virus (HIV) peptides
DE19926154A1 (de) 1999-06-09 2000-12-14 Ktb Tumorforschungs Gmbh Verfahren zur Herstellung einer injizierbaren Arzneimittelzubereitung
DE19926475A1 (de) 1999-06-10 2000-12-14 Ktb Tumorforschungs Gmbh Träger-Pharmaka-Konjugate
US7090851B1 (en) 1999-09-10 2006-08-15 Conjuchem Inc. Long lasting fusion peptide inhibitors of viral infection
DE60229677D1 (de) 2001-05-31 2008-12-11 Conjuchem Biotechnologies Inc Langwirkende Fusionspeptidinhibitoren gegen HIV-Infektion
DE602005014969D1 (de) * 2004-04-23 2009-07-30 Conjuchem Biotechnologies Inc Verfahren zur aufreinigung von albumin-konjugaten
WO2005108418A1 (en) 2004-05-06 2005-11-17 Conjuchem Biotechnologies Inc. Compounds for specific viral target

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1327897C (zh) * 2002-09-24 2007-07-25 重庆前沿生物技术有限公司 Hiv感染的肽衍生物融合抑制剂
CN100366633C (zh) * 2006-04-18 2008-02-06 河北师范大学 棕点湍蛙抗病毒多肽及其在制药中的应用
CN103977394A (zh) * 2009-07-17 2014-08-13 翰林大学校产学协力团 包含脂质体包胶的寡核苷酸和表位的免疫刺激性组合物
CN103977394B (zh) * 2009-07-17 2016-03-09 翰林大学校产学协力团 包含脂质体包胶的寡核苷酸和表位的免疫刺激性组合物
CN111303245A (zh) * 2020-02-21 2020-06-19 成都奥达生物科技有限公司 一种抗合胞病毒膜融合抑制剂
WO2021164677A1 (zh) * 2020-02-21 2021-08-26 成都奥达生物科技有限公司 一种抗合胞病毒膜融合抑制剂
CN111303245B (zh) * 2020-02-21 2023-06-27 成都奥达生物科技有限公司 一种抗合胞病毒膜融合抑制剂

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