JP2020500306A - 新生児Fc受容体の過剰発現により特徴づけられる腫瘍の同定と治療 - Google Patents
新生児Fc受容体の過剰発現により特徴づけられる腫瘍の同定と治療 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2020500306A JP2020500306A JP2019522970A JP2019522970A JP2020500306A JP 2020500306 A JP2020500306 A JP 2020500306A JP 2019522970 A JP2019522970 A JP 2019522970A JP 2019522970 A JP2019522970 A JP 2019522970A JP 2020500306 A JP2020500306 A JP 2020500306A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- fcrn
- cancer
- albumin
- binding agent
- level
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 102100026120 IgG receptor FcRn large subunit p51 Human genes 0.000 title claims abstract description 356
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 229
- 108010068617 neonatal Fc receptor Proteins 0.000 title description 19
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 title description 8
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 145
- 238000011503 in vivo imaging Methods 0.000 claims abstract description 10
- 101710177940 IgG receptor FcRn large subunit p51 Proteins 0.000 claims abstract 44
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 claims description 206
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 claims description 206
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 claims description 165
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 95
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 78
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 66
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 61
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 61
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 53
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 49
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 49
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 47
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 33
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 30
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 claims description 26
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 claims description 25
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 23
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims description 23
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 22
- -1 aptamers Chemical class 0.000 claims description 21
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 21
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 21
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 claims description 19
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 claims description 18
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 claims description 14
- 230000004927 fusion Effects 0.000 claims description 14
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 14
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 13
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 13
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 12
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 12
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 claims description 12
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 claims description 12
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 11
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 claims description 9
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 claims description 9
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 claims description 9
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 claims description 8
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 claims description 8
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 claims description 8
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 claims description 8
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 claims description 8
- RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N actinomycin D Natural products CC1OC(=O)C(C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)C2CCCN2C(=O)C(C(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)NC4C(=O)NC(C(N5CCCC5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)C(C(C)C)C(=O)OC4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 claims description 8
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 claims description 8
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 claims description 8
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 claims description 8
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 claims description 8
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 claims description 7
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 claims description 7
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 claims description 7
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 claims description 7
- 238000002603 single-photon emission computed tomography Methods 0.000 claims description 7
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 claims description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 claims description 6
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 claims description 6
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 claims description 6
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 claims description 5
- 208000005016 Intestinal Neoplasms Diseases 0.000 claims description 5
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 claims description 5
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 5
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 5
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 claims description 5
- 201000002313 intestinal cancer Diseases 0.000 claims description 5
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 claims description 5
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 claims description 5
- 229960004961 mechlorethamine Drugs 0.000 claims description 5
- HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N mechlorethamine Chemical compound ClCCN(C)CCCl HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 5
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 5
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 5
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 claims description 5
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 claims description 5
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 claims description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 claims description 4
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 claims description 4
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N Carmustine Chemical compound ClCCNC(=O)N(N=O)CCCl DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 108010092160 Dactinomycin Proteins 0.000 claims description 4
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 claims description 4
- 241001467552 Mycobacterium bovis BCG Species 0.000 claims description 4
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Progesterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 claims description 4
- NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N Tamoxifen Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(/CC)=C(C=1C=CC(OCCN(C)C)=CC=1)/C1=CC=CC=C1 NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N 0.000 claims description 4
- MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N Testostosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N 0.000 claims description 4
- RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N actinomycin D Chemical compound C[C@H]1OC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)N[C@@H]4C(=O)N[C@@H](C(N5CCC[C@H]5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)O[C@@H]4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N 0.000 claims description 4
- 229960000190 bacillus calmette–guérin vaccine Drugs 0.000 claims description 4
- 229960002092 busulfan Drugs 0.000 claims description 4
- 229960000640 dactinomycin Drugs 0.000 claims description 4
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 claims description 4
- 229960005420 etoposide Drugs 0.000 claims description 4
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 4
- YLMAHDNUQAMNNX-UHFFFAOYSA-N imatinib methanesulfonate Chemical compound CS(O)(=O)=O.C1CN(C)CCN1CC1=CC=C(C(=O)NC=2C=C(NC=3N=C(C=CN=3)C=3C=NC=CC=3)C(C)=CC=2)C=C1 YLMAHDNUQAMNNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N irinotecan Chemical compound C1=C2C(CC)=C3CN(C(C4=C([C@@](C(=O)OC4)(O)CC)C=4)=O)C=4C3=NC2=CC=C1OC(=O)N(CC1)CCC1N1CCCCC1 UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N 0.000 claims description 4
- SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N melphalan Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N 0.000 claims description 4
- WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N tioguanine Chemical compound N1C(N)=NC(=S)C2=C1N=CN2 WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N (E)-dacarbazine Chemical compound CN(C)\N=N\c1[nH]cnc1C(N)=O FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N 0.000 claims description 3
- LKJPYSCBVHEWIU-KRWDZBQOSA-N (R)-bicalutamide Chemical compound C([C@@](O)(C)C(=O)NC=1C=C(C(C#N)=CC=1)C(F)(F)F)S(=O)(=O)C1=CC=C(F)C=C1 LKJPYSCBVHEWIU-KRWDZBQOSA-N 0.000 claims description 3
- VSNHCAURESNICA-NJFSPNSNSA-N 1-oxidanylurea Chemical compound N[14C](=O)NO VSNHCAURESNICA-NJFSPNSNSA-N 0.000 claims description 3
- VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 17β-estradiol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 0.000 claims description 3
- ZCXUVYAZINUVJD-UKFBFLRUSA-N 2-deoxy-2-fluoro-alpha-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](F)[C@@H](O)[C@@H]1O ZCXUVYAZINUVJD-UKFBFLRUSA-N 0.000 claims description 3
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 claims description 3
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N Lomustine Chemical compound ClCCN(N=O)C(=O)NC1CCCCC1 GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 claims description 3
- 229960000997 bicalutamide Drugs 0.000 claims description 3
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000001733 follicular fluid Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 claims description 3
- 239000002324 mouth wash Substances 0.000 claims description 3
- 229940051866 mouthwash Drugs 0.000 claims description 3
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 claims description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims description 3
- 210000004910 pleural fluid Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000004915 pus Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims description 3
- BMKDZUISNHGIBY-ZETCQYMHSA-N (+)-dexrazoxane Chemical compound C([C@H](C)N1CC(=O)NC(=O)C1)N1CC(=O)NC(=O)C1 BMKDZUISNHGIBY-ZETCQYMHSA-N 0.000 claims description 2
- FPVKHBSQESCIEP-UHFFFAOYSA-N (8S)-3-(2-deoxy-beta-D-erythro-pentofuranosyl)-3,6,7,8-tetrahydroimidazo[4,5-d][1,3]diazepin-8-ol Natural products C1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NCC2O)=C2N=C1 FPVKHBSQESCIEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1H-isoindole-1,3(2H)-dione Chemical compound O=C1C2=CC=CC=C2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- NDMPLJNOPCLANR-UHFFFAOYSA-N 3,4-dihydroxy-15-(4-hydroxy-18-methoxycarbonyl-5,18-seco-ibogamin-18-yl)-16-methoxy-1-methyl-6,7-didehydro-aspidospermidine-3-carboxylic acid methyl ester Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 NDMPLJNOPCLANR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- AOJJSUZBOXZQNB-VTZDEGQISA-N 4'-epidoxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-VTZDEGQISA-N 0.000 claims description 2
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 102000015790 Asparaginase Human genes 0.000 claims description 2
- 108010024976 Asparaginase Proteins 0.000 claims description 2
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 claims description 2
- GAGWJHPBXLXJQN-UORFTKCHSA-N Capecitabine Chemical compound C1=C(F)C(NC(=O)OCCCCC)=NC(=O)N1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O1 GAGWJHPBXLXJQN-UORFTKCHSA-N 0.000 claims description 2
- GAGWJHPBXLXJQN-UHFFFAOYSA-N Capecitabine Natural products C1=C(F)C(NC(=O)OCCCCC)=NC(=O)N1C1C(O)C(O)C(C)O1 GAGWJHPBXLXJQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- JWBOIMRXGHLCPP-UHFFFAOYSA-N Chloditan Chemical compound C=1C=CC=C(Cl)C=1C(C(Cl)Cl)C1=CC=C(Cl)C=C1 JWBOIMRXGHLCPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- VWFCHDSQECPREK-LURJTMIESA-N Cidofovir Chemical compound NC=1C=CN(C[C@@H](CO)OCP(O)(O)=O)C(=O)N=1 VWFCHDSQECPREK-LURJTMIESA-N 0.000 claims description 2
- PTOAARAWEBMLNO-KVQBGUIXSA-N Cladribine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC(Cl)=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O1 PTOAARAWEBMLNO-KVQBGUIXSA-N 0.000 claims description 2
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 claims description 2
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 claims description 2
- ZBNZXTGUTAYRHI-UHFFFAOYSA-N Dasatinib Chemical compound C=1C(N2CCN(CCO)CC2)=NC(C)=NC=1NC(S1)=NC=C1C(=O)NC1=C(C)C=CC=C1Cl ZBNZXTGUTAYRHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- LTMHDMANZUZIPE-AMTYYWEZSA-N Digoxin Natural products O([C@H]1[C@H](C)O[C@H](O[C@@H]2C[C@@H]3[C@@](C)([C@@H]4[C@H]([C@]5(O)[C@](C)([C@H](O)C4)[C@H](C4=CC(=O)OC4)CC5)CC3)CC2)C[C@@H]1O)[C@H]1O[C@H](C)[C@@H](O[C@H]2O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](O)C2)[C@@H](O)C1 LTMHDMANZUZIPE-AMTYYWEZSA-N 0.000 claims description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 2
- HTIJFSOGRVMCQR-UHFFFAOYSA-N Epirubicin Natural products COc1cccc2C(=O)c3c(O)c4CC(O)(CC(OC5CC(N)C(=O)C(C)O5)c4c(O)c3C(=O)c12)C(=O)CO HTIJFSOGRVMCQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 102000006771 Gonadotropins Human genes 0.000 claims description 2
- 108010086677 Gonadotropins Proteins 0.000 claims description 2
- 108010069236 Goserelin Proteins 0.000 claims description 2
- BLCLNMBMMGCOAS-URPVMXJPSA-N Goserelin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](COC(C)(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NNC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 BLCLNMBMMGCOAS-URPVMXJPSA-N 0.000 claims description 2
- VSNHCAURESNICA-UHFFFAOYSA-N Hydroxyurea Chemical compound NC(=O)NO VSNHCAURESNICA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000002067 L01XE06 - Dasatinib Substances 0.000 claims description 2
- 229930192392 Mitomycin Natural products 0.000 claims description 2
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 claims description 2
- ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N N-debenzoyl-N-(tert-butoxycarbonyl)-10-deacetyltaxol Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=4C=CC=CC=4)C[C@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N 0.000 claims description 2
- 108010021717 Nafarelin Proteins 0.000 claims description 2
- 102400000050 Oxytocin Human genes 0.000 claims description 2
- XNOPRXBHLZRZKH-UHFFFAOYSA-N Oxytocin Natural products N1C(=O)C(N)CSSCC(C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C1CC1=CC=C(O)C=C1 XNOPRXBHLZRZKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 101800000989 Oxytocin Proteins 0.000 claims description 2
- IWUCXVSUMQZMFG-AFCXAGJDSA-N Ribavirin Chemical compound N1=C(C(=O)N)N=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 IWUCXVSUMQZMFG-AFCXAGJDSA-N 0.000 claims description 2
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 claims description 2
- QJJXYPPXXYFBGM-LFZNUXCKSA-N Tacrolimus Chemical compound C1C[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H]1\C=C(/C)[C@@H]1[C@H](C)[C@@H](O)CC(=O)[C@H](CC=C)/C=C(C)/C[C@H](C)C[C@H](OC)[C@H]([C@H](C[C@H]2C)OC)O[C@@]2(O)C(=O)C(=O)N2CCCC[C@H]2C(=O)O1 QJJXYPPXXYFBGM-LFZNUXCKSA-N 0.000 claims description 2
- 229940123237 Taxane Drugs 0.000 claims description 2
- BPEGJWRSRHCHSN-UHFFFAOYSA-N Temozolomide Chemical compound O=C1N(C)N=NC2=C(C(N)=O)N=CN21 BPEGJWRSRHCHSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- DPOPAJRDYZGTIR-UHFFFAOYSA-N Tetrazine Chemical compound C1=CN=NN=N1 DPOPAJRDYZGTIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- IVTVGDXNLFLDRM-HNNXBMFYSA-N Tomudex Chemical compound C=1C=C2NC(C)=NC(=O)C2=CC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)S1 IVTVGDXNLFLDRM-HNNXBMFYSA-N 0.000 claims description 2
- 108010050144 Triptorelin Pamoate Proteins 0.000 claims description 2
- WPVFJKSGQUFQAP-GKAPJAKFSA-N Valcyte Chemical compound N1C(N)=NC(=O)C2=C1N(COC(CO)COC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C=N2 WPVFJKSGQUFQAP-GKAPJAKFSA-N 0.000 claims description 2
- JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N Vinblastine Natural products O=C(O[C@H]1[C@](O)(C(=O)OC)[C@@H]2N(C)c3c(cc(c(OC)c3)[C@]3(C(=O)OC)c4[nH]c5c(c4CCN4C[C@](O)(CC)C[C@H](C3)C4)cccc5)[C@@]32[C@H]2[C@@]1(CC)C=CCN2CC3)C JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N 0.000 claims description 2
- 229940122803 Vinca alkaloid Drugs 0.000 claims description 2
- 108700025316 aldesleukin Proteins 0.000 claims description 2
- 229960005310 aldesleukin Drugs 0.000 claims description 2
- 229960000548 alemtuzumab Drugs 0.000 claims description 2
- 229940098174 alkeran Drugs 0.000 claims description 2
- 229960001220 amsacrine Drugs 0.000 claims description 2
- XCPGHVQEEXUHNC-UHFFFAOYSA-N amsacrine Chemical compound COC1=CC(NS(C)(=O)=O)=CC=C1NC1=C(C=CC=C2)C2=NC2=CC=CC=C12 XCPGHVQEEXUHNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960002932 anastrozole Drugs 0.000 claims description 2
- YBBLVLTVTVSKRW-UHFFFAOYSA-N anastrozole Chemical compound N#CC(C)(C)C1=CC(C(C)(C#N)C)=CC(CN2N=CN=C2)=C1 YBBLVLTVTVSKRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229940045799 anthracyclines and related substance Drugs 0.000 claims description 2
- NUZWLKWWNNJHPT-UHFFFAOYSA-N anthralin Chemical compound C1C2=CC=CC(O)=C2C(=O)C2=C1C=CC=C2O NUZWLKWWNNJHPT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000000340 anti-metabolite Effects 0.000 claims description 2
- 229940100197 antimetabolite Drugs 0.000 claims description 2
- 239000002256 antimetabolite Substances 0.000 claims description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 2
- 229960002594 arsenic trioxide Drugs 0.000 claims description 2
- 229960003272 asparaginase Drugs 0.000 claims description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-M asparaginate Chemical compound [O-]C(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 229960002170 azathioprine Drugs 0.000 claims description 2
- LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N azathioprine Chemical compound CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1SC1=NC=NC2=C1NC=N2 LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229940108502 bicnu Drugs 0.000 claims description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 claims description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 claims description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 claims description 2
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 claims description 2
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 claims description 2
- GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N bortezomib Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)B(O)O)NC(=O)C=1N=CC=NC=1)C1=CC=CC=C1 GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N 0.000 claims description 2
- 229960001467 bortezomib Drugs 0.000 claims description 2
- 229960004117 capecitabine Drugs 0.000 claims description 2
- 229960004562 carboplatin Drugs 0.000 claims description 2
- 229960005243 carmustine Drugs 0.000 claims description 2
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 claims description 2
- 229960000724 cidofovir Drugs 0.000 claims description 2
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 claims description 2
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 229960002436 cladribine Drugs 0.000 claims description 2
- 239000011280 coal tar Substances 0.000 claims description 2
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 claims description 2
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 claims description 2
- 229960000684 cytarabine Drugs 0.000 claims description 2
- POZRVZJJTULAOH-LHZXLZLDSA-N danazol Chemical compound C1[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@](CC4)(O)C#C)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=CC2=C1C=NO2 POZRVZJJTULAOH-LHZXLZLDSA-N 0.000 claims description 2
- 229960000766 danazol Drugs 0.000 claims description 2
- 229960002448 dasatinib Drugs 0.000 claims description 2
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 claims description 2
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 claims description 2
- 229960000605 dexrazoxane Drugs 0.000 claims description 2
- RGLYKWWBQGJZGM-ISLYRVAYSA-N diethylstilbestrol Chemical compound C=1C=C(O)C=CC=1C(/CC)=C(\CC)C1=CC=C(O)C=C1 RGLYKWWBQGJZGM-ISLYRVAYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960000452 diethylstilbestrol Drugs 0.000 claims description 2
- LTMHDMANZUZIPE-PUGKRICDSA-N digoxin Chemical compound C1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](C)O[C@@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@@H](O[C@@H]3C[C@@H]4[C@]([C@@H]5[C@H]([C@]6(CC[C@@H]([C@@]6(C)[C@H](O)C5)C=5COC(=O)C=5)O)CC4)(C)CC3)C[C@@H]2O)C)C[C@@H]1O LTMHDMANZUZIPE-PUGKRICDSA-N 0.000 claims description 2
- 229960005156 digoxin Drugs 0.000 claims description 2
- LTMHDMANZUZIPE-UHFFFAOYSA-N digoxine Natural products C1C(O)C(O)C(C)OC1OC1C(C)OC(OC2C(OC(OC3CC4C(C5C(C6(CCC(C6(C)C(O)C5)C=5COC(=O)C=5)O)CC4)(C)CC3)CC2O)C)CC1O LTMHDMANZUZIPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 2
- 229960002986 dinoprostone Drugs 0.000 claims description 2
- XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N dinoprostone Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1C\C=C/CCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N 0.000 claims description 2
- 229960002311 dithranol Drugs 0.000 claims description 2
- 229960003668 docetaxel Drugs 0.000 claims description 2
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 claims description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- JWJOTENAMICLJG-QWBYCMEYSA-N dutasteride Chemical compound O=C([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)N[C@@H]4CC3)C)CC[C@@]21C)NC1=CC(C(F)(F)F)=CC=C1C(F)(F)F JWJOTENAMICLJG-QWBYCMEYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960004199 dutasteride Drugs 0.000 claims description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 2
- 229960001904 epirubicin Drugs 0.000 claims description 2
- 229960005309 estradiol Drugs 0.000 claims description 2
- 229960000961 floxuridine Drugs 0.000 claims description 2
- ODKNJVUHOIMIIZ-RRKCRQDMSA-N floxuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(F)=C1 ODKNJVUHOIMIIZ-RRKCRQDMSA-N 0.000 claims description 2
- 229960000390 fludarabine Drugs 0.000 claims description 2
- GIUYCYHIANZCFB-FJFJXFQQSA-N fludarabine phosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC(F)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H]1O GIUYCYHIANZCFB-FJFJXFQQSA-N 0.000 claims description 2
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 claims description 2
- MKXKFYHWDHIYRV-UHFFFAOYSA-N flutamide Chemical compound CC(C)C(=O)NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C(C(F)(F)F)=C1 MKXKFYHWDHIYRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960002074 flutamide Drugs 0.000 claims description 2
- VVIAGPKUTFNRDU-ABLWVSNPSA-N folinic acid Chemical class C1NC=2NC(N)=NC(=O)C=2N(C=O)C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 VVIAGPKUTFNRDU-ABLWVSNPSA-N 0.000 claims description 2
- 229960004783 fotemustine Drugs 0.000 claims description 2
- YAKWPXVTIGTRJH-UHFFFAOYSA-N fotemustine Chemical compound CCOP(=O)(OCC)C(C)NC(=O)N(CCCl)N=O YAKWPXVTIGTRJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960002963 ganciclovir Drugs 0.000 claims description 2
- IRSCQMHQWWYFCW-UHFFFAOYSA-N ganciclovir Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2COC(CO)CO IRSCQMHQWWYFCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960005277 gemcitabine Drugs 0.000 claims description 2
- SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N gemcitabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1C(F)(F)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N 0.000 claims description 2
- 229960000578 gemtuzumab Drugs 0.000 claims description 2
- 239000002622 gonadotropin Substances 0.000 claims description 2
- 229960002913 goserelin Drugs 0.000 claims description 2
- 229940022353 herceptin Drugs 0.000 claims description 2
- VKYKSIONXSXAKP-UHFFFAOYSA-N hexamethylenetetramine Chemical compound C1N(C2)CN3CN1CN2C3 VKYKSIONXSXAKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229940125697 hormonal agent Drugs 0.000 claims description 2
- 229960001330 hydroxycarbamide Drugs 0.000 claims description 2
- 229960001101 ifosfamide Drugs 0.000 claims description 2
- HOMGKSMUEGBAAB-UHFFFAOYSA-N ifosfamide Chemical compound ClCCNP1(=O)OCCCN1CCCl HOMGKSMUEGBAAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960002411 imatinib Drugs 0.000 claims description 2
- 229960003685 imatinib mesylate Drugs 0.000 claims description 2
- 229960004768 irinotecan Drugs 0.000 claims description 2
- 229960000681 leflunomide Drugs 0.000 claims description 2
- VHOGYURTWQBHIL-UHFFFAOYSA-N leflunomide Chemical compound O1N=CC(C(=O)NC=2C=CC(=CC=2)C(F)(F)F)=C1C VHOGYURTWQBHIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960003881 letrozole Drugs 0.000 claims description 2
- HPJKCIUCZWXJDR-UHFFFAOYSA-N letrozole Chemical compound C1=CC(C#N)=CC=C1C(N1N=CN=C1)C1=CC=C(C#N)C=C1 HPJKCIUCZWXJDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- GFIJNRVAKGFPGQ-LIJARHBVSA-N leuprolide Chemical compound CCNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 GFIJNRVAKGFPGQ-LIJARHBVSA-N 0.000 claims description 2
- 229960004338 leuprorelin Drugs 0.000 claims description 2
- 229960002247 lomustine Drugs 0.000 claims description 2
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 claims description 2
- 229960004616 medroxyprogesterone Drugs 0.000 claims description 2
- FRQMUZJSZHZSGN-HBNHAYAOSA-N medroxyprogesterone Chemical compound C([C@@]12C)CC(=O)C=C1[C@@H](C)C[C@@H]1[C@@H]2CC[C@]2(C)[C@@](O)(C(C)=O)CC[C@H]21 FRQMUZJSZHZSGN-HBNHAYAOSA-N 0.000 claims description 2
- 229960001786 megestrol Drugs 0.000 claims description 2
- RQZAXGRLVPAYTJ-GQFGMJRRSA-N megestrol acetate Chemical compound C1=C(C)C2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@@](C(C)=O)(OC(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RQZAXGRLVPAYTJ-GQFGMJRRSA-N 0.000 claims description 2
- 229960001924 melphalan Drugs 0.000 claims description 2
- GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N mercaptopurine Chemical compound S=C1NC=NC2=C1NC=N2 GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960001428 mercaptopurine Drugs 0.000 claims description 2
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 claims description 2
- 208000037819 metastatic cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000011575 metastatic malignant neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 claims description 2
- CFCUWKMKBJTWLW-BKHRDMLASA-N mithramycin Chemical compound O([C@@H]1C[C@@H](O[C@H](C)[C@H]1O)OC=1C=C2C=C3C[C@H]([C@@H](C(=O)C3=C(O)C2=C(O)C=1C)O[C@@H]1O[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2O[C@H](C)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]3O[C@H](C)[C@@H](O)[C@@](C)(O)C3)C2)C1)[C@H](OC)C(=O)[C@@H](O)[C@@H](C)O)[C@H]1C[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O1 CFCUWKMKBJTWLW-BKHRDMLASA-N 0.000 claims description 2
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 claims description 2
- 229960000350 mitotane Drugs 0.000 claims description 2
- 229960001156 mitoxantrone Drugs 0.000 claims description 2
- KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N mitoxantrone Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC(O)=C2C(=O)C2=C1C(NCCNCCO)=CC=C2NCCNCCO KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- RTGDFNSFWBGLEC-SYZQJQIISA-N mycophenolate mofetil Chemical compound COC1=C(C)C=2COC(=O)C=2C(O)=C1C\C=C(/C)CCC(=O)OCCN1CCOCC1 RTGDFNSFWBGLEC-SYZQJQIISA-N 0.000 claims description 2
- 229960004866 mycophenolate mofetil Drugs 0.000 claims description 2
- 229960002333 nafarelin Drugs 0.000 claims description 2
- RWHUEXWOYVBUCI-ITQXDASVSA-N nafarelin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](CC=1C=C2C=CC=CC2=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 RWHUEXWOYVBUCI-ITQXDASVSA-N 0.000 claims description 2
- 239000002077 nanosphere Substances 0.000 claims description 2
- 229960001756 oxaliplatin Drugs 0.000 claims description 2
- DWAFYCQODLXJNR-BNTLRKBRSA-L oxaliplatin Chemical compound O1C(=O)C(=O)O[Pt]11N[C@@H]2CCCC[C@H]2N1 DWAFYCQODLXJNR-BNTLRKBRSA-L 0.000 claims description 2
- 229960001723 oxytocin Drugs 0.000 claims description 2
- XNOPRXBHLZRZKH-DSZYJQQASA-N oxytocin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](N)C(=O)N1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(N)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 XNOPRXBHLZRZKH-DSZYJQQASA-N 0.000 claims description 2
- 229940046231 pamidronate Drugs 0.000 claims description 2
- WRUUGTRCQOWXEG-UHFFFAOYSA-N pamidronate Chemical compound NCCC(O)(P(O)(O)=O)P(O)(O)=O WRUUGTRCQOWXEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- XDRYMKDFEDOLFX-UHFFFAOYSA-N pentamidine Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1OCCCCCOC1=CC=C(C(N)=N)C=C1 XDRYMKDFEDOLFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960004448 pentamidine Drugs 0.000 claims description 2
- 229960002340 pentostatin Drugs 0.000 claims description 2
- FPVKHBSQESCIEP-JQCXWYLXSA-N pentostatin Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(N=CNC[C@H]2O)=C2N=C1 FPVKHBSQESCIEP-JQCXWYLXSA-N 0.000 claims description 2
- 150000003058 platinum compounds Chemical class 0.000 claims description 2
- 229960003171 plicamycin Drugs 0.000 claims description 2
- CPTBDICYNRMXFX-UHFFFAOYSA-N procarbazine Chemical compound CNNCC1=CC=C(C(=O)NC(C)C)C=C1 CPTBDICYNRMXFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960000624 procarbazine Drugs 0.000 claims description 2
- 239000000186 progesterone Substances 0.000 claims description 2
- 229960003387 progesterone Drugs 0.000 claims description 2
- XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N prostaglandin E2 Natural products CCCCCC(O)C=CC1C(O)CC(=O)C1CC=CCCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000003230 pyrimidines Chemical class 0.000 claims description 2
- 229960004432 raltitrexed Drugs 0.000 claims description 2
- ZAHRKKWIAAJSAO-UHFFFAOYSA-N rapamycin Natural products COCC(O)C(=C/C(C)C(=O)CC(OC(=O)C1CCCCN1C(=O)C(=O)C2(O)OC(CC(OC)C(=CC=CC=CC(C)CC(C)C(=O)C)C)CCC2C)C(C)CC3CCC(O)C(C3)OC)C ZAHRKKWIAAJSAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960000329 ribavirin Drugs 0.000 claims description 2
- 229960004641 rituximab Drugs 0.000 claims description 2
- QFJCIRLUMZQUOT-HPLJOQBZSA-N sirolimus Chemical compound C1C[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H]1C[C@@H](C)[C@H]1OC(=O)[C@@H]2CCCCN2C(=O)C(=O)[C@](O)(O2)[C@H](C)CC[C@H]2C[C@H](OC)/C(C)=C/C=C/C=C/[C@@H](C)C[C@@H](C)C(=O)[C@H](OC)[C@H](O)/C(C)=C/[C@@H](C)C(=O)C1 QFJCIRLUMZQUOT-HPLJOQBZSA-N 0.000 claims description 2
- 229960002930 sirolimus Drugs 0.000 claims description 2
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 claims description 2
- 229960001052 streptozocin Drugs 0.000 claims description 2
- ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N streptozocin Chemical compound O=NN(C)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960001967 tacrolimus Drugs 0.000 claims description 2
- QJJXYPPXXYFBGM-SHYZHZOCSA-N tacrolimus Natural products CO[C@H]1C[C@H](CC[C@@H]1O)C=C(C)[C@H]2OC(=O)[C@H]3CCCCN3C(=O)C(=O)[C@@]4(O)O[C@@H]([C@H](C[C@H]4C)OC)[C@@H](C[C@H](C)CC(=C[C@@H](CC=C)C(=O)C[C@H](O)[C@H]2C)C)OC QJJXYPPXXYFBGM-SHYZHZOCSA-N 0.000 claims description 2
- 229960001603 tamoxifen Drugs 0.000 claims description 2
- DKPFODGZWDEEBT-QFIAKTPHSA-N taxane Chemical class C([C@]1(C)CCC[C@@H](C)[C@H]1C1)C[C@H]2[C@H](C)CC[C@@H]1C2(C)C DKPFODGZWDEEBT-QFIAKTPHSA-N 0.000 claims description 2
- 229960004964 temozolomide Drugs 0.000 claims description 2
- 229960001278 teniposide Drugs 0.000 claims description 2
- NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N teniposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@@H](OC[C@H]4O3)C=3SC=CC=3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N 0.000 claims description 2
- 229960003604 testosterone Drugs 0.000 claims description 2
- 229960003087 tioguanine Drugs 0.000 claims description 2
- 229960000303 topotecan Drugs 0.000 claims description 2
- UCFGDBYHRUNTLO-QHCPKHFHSA-N topotecan Chemical compound C1=C(O)C(CN(C)C)=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 UCFGDBYHRUNTLO-QHCPKHFHSA-N 0.000 claims description 2
- VSQQQLOSPVPRAZ-RRKCRQDMSA-N trifluridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(C(F)(F)F)=C1 VSQQQLOSPVPRAZ-RRKCRQDMSA-N 0.000 claims description 2
- 229960003962 trifluridine Drugs 0.000 claims description 2
- 229960001099 trimetrexate Drugs 0.000 claims description 2
- NOYPYLRCIDNJJB-UHFFFAOYSA-N trimetrexate Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=CC(NCC=2C(=C3C(N)=NC(N)=NC3=CC=2)C)=C1 NOYPYLRCIDNJJB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- VXKHXGOKWPXYNA-PGBVPBMZSA-N triptorelin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 VXKHXGOKWPXYNA-PGBVPBMZSA-N 0.000 claims description 2
- 229960004824 triptorelin Drugs 0.000 claims description 2
- 229960002149 valganciclovir Drugs 0.000 claims description 2
- 229960003048 vinblastine Drugs 0.000 claims description 2
- JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N vincaleukoblastine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 claims description 2
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 claims description 2
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960004355 vindesine Drugs 0.000 claims description 2
- UGGWPQSBPIFKDZ-KOTLKJBCSA-N vindesine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(N)=O)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1N=C1[C]2C=CC=C1 UGGWPQSBPIFKDZ-KOTLKJBCSA-N 0.000 claims description 2
- GBABOYUKABKIAF-GHYRFKGUSA-N vinorelbine Chemical compound C1N(CC=2C3=CC=CC=C3NC=22)CC(CC)=C[C@H]1C[C@]2(C(=O)OC)C1=CC([C@]23[C@H]([C@]([C@H](OC(C)=O)[C@]4(CC)C=CCN([C@H]34)CC2)(O)C(=O)OC)N2C)=C2C=C1OC GBABOYUKABKIAF-GHYRFKGUSA-N 0.000 claims description 2
- 229960002066 vinorelbine Drugs 0.000 claims description 2
- HBOMLICNUCNMMY-XLPZGREQSA-N zidovudine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](N=[N+]=[N-])C1 HBOMLICNUCNMMY-XLPZGREQSA-N 0.000 claims description 2
- 229960002555 zidovudine Drugs 0.000 claims description 2
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 claims 2
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 claims 2
- 229960004630 chlorambucil Drugs 0.000 claims 2
- JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N chlorambucil Chemical compound OC(=O)CCCC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 claims 2
- HJTAZXHBEBIQQX-UHFFFAOYSA-N 1,5-bis(chloromethyl)naphthalene Chemical compound C1=CC=C2C(CCl)=CC=CC2=C1CCl HJTAZXHBEBIQQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N Aziridine Chemical compound C1CN1 NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 102100021906 Cyclin-O Human genes 0.000 claims 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 101000897441 Homo sapiens Cyclin-O Proteins 0.000 claims 1
- XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N Idarubicin Chemical compound C1[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2C[C@@](O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N 0.000 claims 1
- XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N Idarubicin Natural products C1C(N)C(O)C(C)OC1OC1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2CC(O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- FOCVUCIESVLUNU-UHFFFAOYSA-N Thiotepa Chemical compound C1CN1P(N1CC1)(=S)N1CC1 FOCVUCIESVLUNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 claims 1
- 229940045985 antineoplastic platinum compound Drugs 0.000 claims 1
- GOLCXWYRSKYTSP-UHFFFAOYSA-N arsenic trioxide Inorganic materials O1[As]2O[As]1O2 GOLCXWYRSKYTSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- DVQHYTBCTGYNNN-UHFFFAOYSA-N azane;cyclobutane-1,1-dicarboxylic acid;platinum Chemical compound N.N.[Pt].OC(=O)C1(C(O)=O)CCC1 DVQHYTBCTGYNNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- YAYRGNWWLMLWJE-UHFFFAOYSA-L carboplatin Chemical compound O=C1O[Pt](N)(N)OC(=O)C11CCC1 YAYRGNWWLMLWJE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- 229960005395 cetuximab Drugs 0.000 claims 1
- 239000003534 dna topoisomerase inhibitor Substances 0.000 claims 1
- 229930182833 estradiol Natural products 0.000 claims 1
- 229960001842 estramustine Drugs 0.000 claims 1
- FRPJXPJMRWBBIH-RBRWEJTLSA-N estramustine Chemical compound ClCCN(CCCl)C(=O)OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 FRPJXPJMRWBBIH-RBRWEJTLSA-N 0.000 claims 1
- 229960000908 idarubicin Drugs 0.000 claims 1
- 229960004622 raloxifene Drugs 0.000 claims 1
- GZUITABIAKMVPG-UHFFFAOYSA-N raloxifene Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=C(C(=O)C=2C=CC(OCCN3CCCCC3)=CC=2)C2=CC=C(O)C=C2S1 GZUITABIAKMVPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 claims 1
- 229960001196 thiotepa Drugs 0.000 claims 1
- 229940044693 topoisomerase inhibitor Drugs 0.000 claims 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 abstract description 22
- 238000010586 diagram Methods 0.000 abstract 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 58
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 58
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 49
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 35
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 34
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 26
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 23
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 22
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 22
- 229910052721 tungsten Inorganic materials 0.000 description 22
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 21
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 21
- 229910052727 yttrium Inorganic materials 0.000 description 20
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 19
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 19
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 19
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 19
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 17
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 230000035508 accumulation Effects 0.000 description 15
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 15
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 15
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 15
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 15
- 230000029918 bioluminescence Effects 0.000 description 14
- 238000005415 bioluminescence Methods 0.000 description 14
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 14
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 14
- 239000012116 Alexa Fluor 680 Substances 0.000 description 13
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 13
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 13
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 12
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 12
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 11
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 10
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 10
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 10
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 10
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 9
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 9
- 239000012216 imaging agent Substances 0.000 description 9
- 239000000463 material Substances 0.000 description 9
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 8
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 8
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 8
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 8
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 8
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 8
- 229910052720 vanadium Inorganic materials 0.000 description 8
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 7
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 7
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 7
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 7
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 7
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 7
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 7
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 7
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 7
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 239000002981 blocking agent Substances 0.000 description 6
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 6
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 6
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 238000011160 research Methods 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 6
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 6
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 6
- 239000004277 Ferrous carbonate Substances 0.000 description 5
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 5
- 230000003444 anaesthetic effect Effects 0.000 description 5
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 5
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 5
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 5
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 4
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 4
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 4
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 4
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 4
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 4
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 4
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000012879 PET imaging Methods 0.000 description 4
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 4
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 4
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 4
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 4
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 4
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 4
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 4
- 208000026534 luminal B breast carcinoma Diseases 0.000 description 4
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 4
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 4
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 4
- QAPSNMNOIOSXSQ-YNEHKIRRSA-N 1-[(2r,4s,5r)-4-[tert-butyl(dimethyl)silyl]oxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-5-methylpyrimidine-2,4-dione Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O[Si](C)(C)C(C)(C)C)C1 QAPSNMNOIOSXSQ-YNEHKIRRSA-N 0.000 description 3
- 206010052360 Colorectal adenocarcinoma Diseases 0.000 description 3
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 3
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 3
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101000913079 Homo sapiens IgG receptor FcRn large subunit p51 Proteins 0.000 description 3
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 description 3
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 3
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 3
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 3
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 3
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 description 3
- 241000021375 Xenogenes Species 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 210000002469 basement membrane Anatomy 0.000 description 3
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 3
- 244000309464 bull Species 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 3
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 3
- 239000002872 contrast media Substances 0.000 description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 3
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 3
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 3
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 3
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 3
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 3
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 3
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 3
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 3
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 3
- 210000005222 synovial tissue Anatomy 0.000 description 3
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 3
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 3
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 3
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 3
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 3
- 239000012103 Alexa Fluor 488 Substances 0.000 description 2
- 239000012099 Alexa Fluor family Substances 0.000 description 2
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 2
- BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N Bilirubin Chemical compound N1C(=O)C(C)=C(C=C)\C1=C\C1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(CC2=C(C(C)=C(\C=C/3C(=C(C=C)C(=O)N\3)C)N2)CCC(O)=O)N1 BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N 0.000 description 2
- 241000282465 Canis Species 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- 208000030808 Clear cell renal carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 2
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 2
- 229910052688 Gadolinium Inorganic materials 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 102000005720 Glutathione transferase Human genes 0.000 description 2
- 108010070675 Glutathione transferase Proteins 0.000 description 2
- HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N Ibuprofen Chemical compound CC(C)CC1=CC=C(C(C)C(O)=O)C=C1 HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 2
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 2
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 2
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 2
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 2
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 2
- 229940124599 anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 2
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 2
- VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N azanide;cyclobutane-1,1-dicarboxylic acid;platinum(2+) Chemical compound [NH2-].[NH2-].[Pt+2].OC(=O)C1(C(O)=O)CCC1 VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 102000015736 beta 2-Microglobulin Human genes 0.000 description 2
- 108010081355 beta 2-Microglobulin Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 239000005082 bioluminescent agent Substances 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000000038 chest Anatomy 0.000 description 2
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 2
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 2
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 2
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical compound NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 2
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 102000015694 estrogen receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010038795 estrogen receptors Proteins 0.000 description 2
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- 238000002866 fluorescence resonance energy transfer Methods 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- UIWYJDYFSGRHKR-UHFFFAOYSA-N gadolinium atom Chemical compound [Gd] UIWYJDYFSGRHKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000762 glandular Effects 0.000 description 2
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 2
- 108091008039 hormone receptors Proteins 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 229960001680 ibuprofen Drugs 0.000 description 2
- 229940099472 immunoglobulin a Drugs 0.000 description 2
- 238000002991 immunohistochemical analysis Methods 0.000 description 2
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 2
- CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N indomethacin Chemical compound CC1=C(CC(O)=O)C2=CC(OC)=CC=C2N1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WTFXARWRTYJXII-UHFFFAOYSA-N iron(2+);iron(3+);oxygen(2-) Chemical compound [O-2].[O-2].[O-2].[O-2].[Fe+2].[Fe+3].[Fe+3] WTFXARWRTYJXII-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000005067 joint tissue Anatomy 0.000 description 2
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 2
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 2
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 239000000041 non-steroidal anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 2
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 2
- 238000012634 optical imaging Methods 0.000 description 2
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 238000012831 peritoneal equilibrium test Methods 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 229960002702 piroxicam Drugs 0.000 description 2
- QYSPLQLAKJAUJT-UHFFFAOYSA-N piroxicam Chemical compound OC=1C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)N(C)C=1C(=O)NC1=CC=CC=N1 QYSPLQLAKJAUJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 238000012636 positron electron tomography Methods 0.000 description 2
- 238000012877 positron emission topography Methods 0.000 description 2
- 102000003998 progesterone receptors Human genes 0.000 description 2
- 108090000468 progesterone receptors Proteins 0.000 description 2
- 239000002096 quantum dot Substances 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 2
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 2
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 230000036326 tumor accumulation Effects 0.000 description 2
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 2
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 2
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RDJGLLICXDHJDY-NSHDSACASA-N (2s)-2-(3-phenoxyphenyl)propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](C)C1=CC=CC(OC=2C=CC=CC=2)=C1 RDJGLLICXDHJDY-NSHDSACASA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- BSYNRYMUTXBXSQ-FOQJRBATSA-N 59096-14-9 Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1[14C](O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-FOQJRBATSA-N 0.000 description 1
- 206010049153 Allergic sinusitis Diseases 0.000 description 1
- 208000028185 Angioedema Diseases 0.000 description 1
- 241000490494 Arabis Species 0.000 description 1
- BFYIZQONLCFLEV-DAELLWKTSA-N Aromasine Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC(=C)C2=C1 BFYIZQONLCFLEV-DAELLWKTSA-N 0.000 description 1
- 206010003210 Arteriosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 206010003645 Atopy Diseases 0.000 description 1
- 108700020463 BRCA1 Proteins 0.000 description 1
- 102000036365 BRCA1 Human genes 0.000 description 1
- 101150072950 BRCA1 gene Proteins 0.000 description 1
- 235000009581 Balanites aegyptiaca Nutrition 0.000 description 1
- MNIPYSSQXLZQLJ-UHFFFAOYSA-N Biofenac Chemical compound OC(=O)COC(=O)CC1=CC=CC=C1NC1=C(Cl)C=CC=C1Cl MNIPYSSQXLZQLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 239000001736 Calcium glycerylphosphate Substances 0.000 description 1
- 101000693927 Canis lupus familiaris Albumin Proteins 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 1
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- XUIIKFGFIJCVMT-GFCCVEGCSA-N D-thyroxine Chemical compound IC1=CC(C[C@@H](N)C(O)=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 206010013700 Drug hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283074 Equus asinus Species 0.000 description 1
- 101000693911 Equus caballus Albumin Proteins 0.000 description 1
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 1
- 239000001116 FEMA 4028 Substances 0.000 description 1
- 101150050927 Fcgrt gene Proteins 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 208000004262 Food Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010016946 Food allergy Diseases 0.000 description 1
- 101000693916 Gallus gallus Albumin Proteins 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 102000008949 Histocompatibility Antigens Class I Human genes 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 1
- 241000282553 Macaca Species 0.000 description 1
- ZRVUJXDFFKFLMG-UHFFFAOYSA-N Meloxicam Chemical compound OC=1C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)N(C)C=1C(=O)NC1=NC=C(C)S1 ZRVUJXDFFKFLMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000930477 Mus musculus Albumin Proteins 0.000 description 1
- BLXXJMDCKKHMKV-UHFFFAOYSA-N Nabumetone Chemical compound C1=C(CCC(C)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 BLXXJMDCKKHMKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N Naproxen Natural products C1=C(C(C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000012868 Overgrowth Diseases 0.000 description 1
- 101000930455 Ovis aries Albumin Proteins 0.000 description 1
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 1
- 241000282577 Pan troglodytes Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N Phenolsulfonephthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DYUQAZSOFZSPHD-UHFFFAOYSA-N Phenylpropanol Chemical compound CCC(O)C1=CC=CC=C1 DYUQAZSOFZSPHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003993 Phosphatidylinositol 3-kinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000430 Phosphatidylinositol 3-kinases Proteins 0.000 description 1
- 101000930457 Rattus norvegicus Albumin Proteins 0.000 description 1
- 208000015634 Rectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010039085 Rhinitis allergic Diseases 0.000 description 1
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000006045 Spondylarthropathies Diseases 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 101000930463 Sus scrofa Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 1
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 1
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 1
- YCPOZVAOBBQLRI-WDSKDSINSA-N Treosulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OC[C@H](O)[C@@H](O)COS(C)(=O)=O YCPOZVAOBBQLRI-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 1
- 208000024780 Urticaria Diseases 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- IKWTVSLWAPBBKU-UHFFFAOYSA-N a1010_sial Chemical compound O=[As]O[As]=O IKWTVSLWAPBBKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004420 aceclofenac Drugs 0.000 description 1
- 229960004892 acemetacin Drugs 0.000 description 1
- FSQKKOOTNAMONP-UHFFFAOYSA-N acemetacin Chemical compound CC1=C(CC(=O)OCC(O)=O)C2=CC(OC)=CC=C2N1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 FSQKKOOTNAMONP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 201000010105 allergic rhinitis Diseases 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 239000001809 ammonium phosphatide Substances 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 229910000413 arsenic oxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000011775 arteriosclerosis disease Diseases 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N beta-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N 0.000 description 1
- 235000011175 beta-cyclodextrine Nutrition 0.000 description 1
- 229960004853 betadex Drugs 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 210000001136 chorion Anatomy 0.000 description 1
- 206010073251 clear cell renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 description 1
- 229960003901 dacarbazine Drugs 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 229960003529 diazepam Drugs 0.000 description 1
- AAOVKJBEBIDNHE-UHFFFAOYSA-N diazepam Chemical compound N=1CC(=O)N(C)C2=CC=C(Cl)C=C2C=1C1=CC=CC=C1 AAOVKJBEBIDNHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001259 diclofenac Drugs 0.000 description 1
- DCOPUUMXTXDBNB-UHFFFAOYSA-N diclofenac Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC=C1NC1=C(Cl)C=CC=C1Cl DCOPUUMXTXDBNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013024 dilution buffer Substances 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 201000005311 drug allergy Diseases 0.000 description 1
- 230000002497 edematous effect Effects 0.000 description 1
- 210000002310 elbow joint Anatomy 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 description 1
- 229960005293 etodolac Drugs 0.000 description 1
- XFBVBWWRPKNWHW-UHFFFAOYSA-N etodolac Chemical compound C1COC(CC)(CC(O)=O)C2=N[C]3C(CC)=CC=CC3=C21 XFBVBWWRPKNWHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000255 exemestane Drugs 0.000 description 1
- 229960001395 fenbufen Drugs 0.000 description 1
- ZPAKPRAICRBAOD-UHFFFAOYSA-N fenbufen Chemical compound C1=CC(C(=O)CCC(=O)O)=CC=C1C1=CC=CC=C1 ZPAKPRAICRBAOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001419 fenoprofen Drugs 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- DBEPLOCGEIEOCV-WSBQPABSSA-N finasteride Chemical compound N([C@@H]1CC2)C(=O)C=C[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H](C(=O)NC(C)(C)C)[C@@]2(C)CC1 DBEPLOCGEIEOCV-WSBQPABSSA-N 0.000 description 1
- 229960004039 finasteride Drugs 0.000 description 1
- 210000001145 finger joint Anatomy 0.000 description 1
- 238000002073 fluorescence micrograph Methods 0.000 description 1
- 238000001506 fluorescence spectroscopy Methods 0.000 description 1
- SYTBZMRGLBWNTM-UHFFFAOYSA-N flurbiprofen Chemical compound FC1=CC(C(C(O)=O)C)=CC=C1C1=CC=CC=C1 SYTBZMRGLBWNTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000020932 food allergy Nutrition 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000003209 gene knockout Methods 0.000 description 1
- 239000011544 gradient gel Substances 0.000 description 1
- 229940025294 hemin Drugs 0.000 description 1
- BTIJJDXEELBZFS-QDUVMHSLSA-K hemin Chemical compound CC1=C(CCC(O)=O)C(C=C2C(CCC(O)=O)=C(C)\C(N2[Fe](Cl)N23)=C\4)=N\C1=C/C2=C(C)C(C=C)=C3\C=C/1C(C)=C(C=C)C/4=N\1 BTIJJDXEELBZFS-QDUVMHSLSA-K 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 150000002433 hydrophilic molecules Chemical class 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000007901 in situ hybridization Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 229960000905 indomethacin Drugs 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 230000010039 intracellular degradation Effects 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- DKYWVDODHFEZIM-UHFFFAOYSA-N ketoprofen Chemical compound OC(=O)C(C)C1=CC=CC(C(=O)C=2C=CC=CC=2)=C1 DKYWVDODHFEZIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000991 ketoprofen Drugs 0.000 description 1
- 210000000629 knee joint Anatomy 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 239000012160 loading buffer Substances 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 229960002202 lornoxicam Drugs 0.000 description 1
- OXROWJKCGCOJDO-JLHYYAGUSA-N lornoxicam Chemical compound O=C1C=2SC(Cl)=CC=2S(=O)(=O)N(C)\C1=C(\O)NC1=CC=CC=N1 OXROWJKCGCOJDO-JLHYYAGUSA-N 0.000 description 1
- 208000026535 luminal A breast carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000026037 malignant tumor of neck Diseases 0.000 description 1
- 208000008585 mastocytosis Diseases 0.000 description 1
- 230000013011 mating Effects 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229960003464 mefenamic acid Drugs 0.000 description 1
- HYYBABOKPJLUIN-UHFFFAOYSA-N mefenamic acid Chemical compound CC1=CC=CC(NC=2C(=CC=CC=2)C(O)=O)=C1C HYYBABOKPJLUIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001929 meloxicam Drugs 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000009149 molecular binding Effects 0.000 description 1
- 229960003251 morniflumate Drugs 0.000 description 1
- LDXSPUSKBDTEKA-UHFFFAOYSA-N morniflumate Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=CC(NC=2C(=CC=CN=2)C(=O)OCCN2CCOCC2)=C1 LDXSPUSKBDTEKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 229960004270 nabumetone Drugs 0.000 description 1
- 229960002009 naproxen Drugs 0.000 description 1
- CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N naproxen Chemical compound C1=C([C@H](C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 1
- 229960000965 nimesulide Drugs 0.000 description 1
- HYWYRSMBCFDLJT-UHFFFAOYSA-N nimesulide Chemical compound CS(=O)(=O)NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1OC1=CC=CC=C1 HYWYRSMBCFDLJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002445 nipple Anatomy 0.000 description 1
- 201000011330 nonpapillary renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- QYSGYZVSCZSLHT-UHFFFAOYSA-N octafluoropropane Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F QYSGYZVSCZSLHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 1
- 230000005298 paramagnetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002907 paramagnetic material Substances 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 229960003531 phenolsulfonphthalein Drugs 0.000 description 1
- 229960002895 phenylbutazone Drugs 0.000 description 1
- VYMDGNCVAMGZFE-UHFFFAOYSA-N phenylbutazonum Chemical compound O=C1C(CCCC)C(=O)N(C=2C=CC=CC=2)N1C1=CC=CC=C1 VYMDGNCVAMGZFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 1
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 1
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 1
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 1
- 229960000825 proglumetacin Drugs 0.000 description 1
- PTXGHCGBYMQQIG-UHFFFAOYSA-N proglumetacin Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=O)NC(C(=O)N(CCC)CCC)CCC(=O)OCCCN(CC1)CCN1CCOC(=O)CC(C1=CC(OC)=CC=C11)=C(C)N1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 PTXGHCGBYMQQIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 238000002731 protein assay Methods 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 206010038038 rectal cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 description 1
- 201000001275 rectum cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000012502 risk assessment Methods 0.000 description 1
- 238000005096 rolling process Methods 0.000 description 1
- 239000012146 running buffer Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 239000001570 sorbitan monopalmitate Substances 0.000 description 1
- 239000001589 sorbitan tristearate Substances 0.000 description 1
- 201000005671 spondyloarthropathy Diseases 0.000 description 1
- 238000000528 statistical test Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 229960000894 sulindac Drugs 0.000 description 1
- MLKXDPUZXIRXEP-MFOYZWKCSA-N sulindac Chemical compound CC1=C(CC(O)=O)C2=CC(F)=CC=C2\C1=C/C1=CC=C(S(C)=O)C=C1 MLKXDPUZXIRXEP-MFOYZWKCSA-N 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 230000002522 swelling effect Effects 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 1
- 229960002871 tenoxicam Drugs 0.000 description 1
- WZWYJBNHTWCXIM-UHFFFAOYSA-N tenoxicam Chemical compound O=C1C=2SC=CC=2S(=O)(=O)N(C)C1=C(O)NC1=CC=CC=N1 WZWYJBNHTWCXIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003433 thalidomide Drugs 0.000 description 1
- 229940034208 thyroxine Drugs 0.000 description 1
- XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N thyroxine-binding globulin Natural products IC1=CC(CC([NH3+])C([O-])=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002905 tolfenamic acid Drugs 0.000 description 1
- YEZNLOUZAIOMLT-UHFFFAOYSA-N tolfenamic acid Chemical compound CC1=C(Cl)C=CC=C1NC1=CC=CC=C1C(O)=O YEZNLOUZAIOMLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001017 tolmetin Drugs 0.000 description 1
- UPSPUYADGBWSHF-UHFFFAOYSA-N tolmetin Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C(=O)C1=CC=C(CC(O)=O)N1C UPSPUYADGBWSHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XFCLJVABOIYOMF-QPLCGJKRSA-N toremifene Chemical compound C1=CC(OCCN(C)C)=CC=C1C(\C=1C=CC=CC=1)=C(\CCCl)C1=CC=CC=C1 XFCLJVABOIYOMF-QPLCGJKRSA-N 0.000 description 1
- 229960005026 toremifene Drugs 0.000 description 1
- 230000031998 transcytosis Effects 0.000 description 1
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 229960000575 trastuzumab Drugs 0.000 description 1
- 229960003181 treosulfan Drugs 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052722 tritium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011870 unpaired t-test Methods 0.000 description 1
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000003260 vortexing Methods 0.000 description 1
- 229960005080 warfarin Drugs 0.000 description 1
- PJVWKTKQMONHTI-UHFFFAOYSA-N warfarin Chemical compound OC=1C2=CC=CC=C2OC(=O)C=1C(CC(=O)C)C1=CC=CC=C1 PJVWKTKQMONHTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/38—Albumins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
- A61K47/643—Albumins, e.g. HSA, BSA, ovalbumin or a Keyhole Limpet Hemocyanin [KHL]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/005—Fluorescence in vivo characterised by the carrier molecule carrying the fluorescent agent
- A61K49/0056—Peptides, proteins, polyamino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
- A61K51/081—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins the protein being an albumin, e.g. human serum albumin [HSA], bovine serum albumin [BSA], ovalbumin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/566—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using specific carrier or receptor proteins as ligand binding reagents where possible specific carrier or receptor proteins are classified with their target compounds
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Oncology (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
第一態様では、本発明はFcRn受容体を過剰発現する癌型の同定に関する。第二態様では、前記癌型の治療に関する。別の態様では、本発明は炎症性疾患の亜型の同定とその治療に関する。追加の態様では、本発明はFcRn受容体を過剰発現する癌の生体内イメージングに関する。【選択図】 図1
Description
本発明は、Fc受容体を過剰発現する腫瘍の同定に関する。特に、本発明はそのような腫瘍亜型の治療に関する。更に、本発明は、FcRn受容体を過剰発現している組織、例えば腫瘍または炎症組織の生体内(in vivo)イメージングに関する。
ヒト血清アルブミン(HSA)は、血漿半減期約19日間を有する、多重リガンド結合部位をもつ天然の担体タンパク質であり、それはヒト新生児Fc受容体との相互作用により促進され、非常に魅力的な薬物送達(ドラッグデリバリー)技術として推奨される。HSAは哺乳類の血漿中に天然に見つかり、哺乳類において最も豊富なタンパク質である。それは血液の望ましい浸透圧を維持する上で重要な役割を担い、血流中の様々な物質の輸送においても重要な役割を果たしている。
新生児Fc受容体(FcRn)である「ブランベル(Brambell)」は、哺乳類の血清中の高レベルの免疫グロブリンイソタイプG(IgGs)とアルブミンを維持することに寄与する二官能性分子である。FcRnは、アルブミンとIgGをpH依存性機序により細胞内分解から救済し、それによってそれらの半減期を延長させることが認められている。野生型ヒト血清アルブミン(HSA)の血漿半減期はおよそ19日間であると知られている。
ドラッグデリバリー(DD)におけるアルブミンの使用は十分に記載されている。例えば治療薬をアルブミンに接合することができ(WO 2000/69902)または治療活性ポリペプチドをアルブミンに遺伝子融合し、キメラタンパク質として発現させることができ(WO 2001/79271およびWO 2003/59934)、または小型の酸性もしくは疎水性治療活性剤をアルブミンに可逆的に結合することができる(Kragh-Hansen他、2002, Biol. Pharm. Bull. 25, 695およびWO 2000/71079)。ほとんどまたは全くアルブミン結合性をもたない医薬上有用な化合物を、アルブミン結合性を有する成分に結合させることにより、そのような化合物にアルブミン可逆結合性を獲得させることもできる(Kurtzhals他、1997, J.PPharm. Sci. 86: 1365およびWO 2010/065959)。Kratz, 2008, J. Controlled Release 132, 171-183は、それらの技術全ての概説を提供する。ドラッグデリバリーにアルブミンを利用する利点は、治療薬の半減期の長期化および/または制御放出および/または選択的な組織もしくは臓器へのターゲティングである。
多数の天然アルブミン変異体が記載されている。Otagiri他、2009, Biol. Pharm. Bull. 32(4), 527-534は、77の既知アルブミン変異体を開示している。多数の他の天然変異体が同定されており、そのいくつかがFcRn結合について分析されている(Andersen他(2010), Clinical Biochemistry 43, 367-372; Galliano他(1993) Biochim. Biophys. Acta 1225, 27-32; Minchiotti他(1987) Biochim. Biophys. Acta 916, 411-418; Takahashi他(1987) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84, 4413-4417; Carlson他(1992). Proc. Nat. Acad. Sci. USA 89, 8225-8229; Peach, R.J. & Brennan, S.O. (1991) Biochim Biophys Acta.1097: 49-54)。マウスモデルにおける天然のヒトアルブミン変異体の半減期は、Iwao他(2007) B.B.A. Proteins and Proteomics 1774, 1582-1590中に記載された。更に、改変された結合親和性を有する改変型アルブミン変異体がWO 2011/051489, WO 2011/124718, WO 2012/059486, WO 2012/150319, WO 2011/103076, WO 2012/112188, WO 2013/075066, WO 2014/072481およびWO 2015/63611に記載されている。WO 2015/036579は、ドメインIIの中に1以上の(例えば数個の)変異を有するアルブミン変異体を開示している。要するに、幾つかのアルブミン変異体が当業者に公知である。
Cianga他(Human Immunology 64, 1152-1159 (2003))は、乳癌腫瘍細胞がFcRn受容体を発現することを開示している。
癌の亜型分類における目下の制約は、特定の亜型に最適化された治療プロトコルにより治療することができる関連する癌亜型の同定である。よって、癌を亜型分類するための改善方法が有利であり、そして特に、そのような癌亜型のより有効なおよび/または信頼できる治療プロトコルが有利であろう。
発明の概要
発明の概要
腎臓、肺、胎盤および腸のモデルとなるインビトロ(in vitro)システムにおける多種多様な極性化上皮細胞でのFcRn発現により、FcRn発現がIgGを双方向でトランスサイトーシスする能力を細胞に授けることを示した。FcRnが再生利用またはトランスサイトーシスに入るかどうかは、IgGとアルブミンの両方についてまだ依然として検討中であるが、本発明者らは患部組織上に過剰発現されたFcRnを治療計画のターゲットとすることができることを主張する。
上述したように、Cianga他は、乳癌腫瘍細胞がFcRn受容体を発現することを開示している。しかしながら、FcRn受容体の発現レベルが「維持される」(従って増加されない)ことを記載している。
本発明は、一態様において新たに同定された癌の亜型であって、FcRn受容体の上方制御(アップレギュレート)レベルを有する亜型に関する。癌細胞上の上方制御された接近可能な(例えば表面の)受容体の存在が、そのような亜型を、治療薬、診断薬またはイメージング剤(造影剤)に結合されたFcRn結合剤のための有望なターゲットにする。実施例1は、そのような亜型の同定を示す。実施例2〜4は、マウスへの静脈注射後の、ヒト異種移植片における改変型アルブミン変異体の蓄積/ターゲティングを示す。
本発明の目的は、癌亜型の同定方法の提供に関する。特に、本発明の目的は、上記で同定した癌亜型の治療プロトコルを提供することである。
本発明の更なる観点は、癌を亜型分類し、癌を病期診断し、そして/または癌を発症するリスクを予測する方法であって、
・生物学的試料(例えば以前に得られたもの)を対象から入手し;
・前記試料中のFcRnレベルを決定し;そして
・前記決定されたレベルを参照レベルと比較する
ことを含み、
ここで参照レベルと比較して前記試料中のFcRnのより高いレベルが、FcRnが上方制御された亜型/病期を示し;そして前記参照レベルと同じかまたはより低いレベルが、FcRnが正常の亜型/病期またはFcRnが下方制御された亜型/病期を示し;
そして/または
ここで参照レベルと比較して前記試料中のFcRnのより高いレベルが、癌を発症するリスクが高いことを示し;そして前記参照レベルと同じかまたはより低いレベルが、癌の発症の増加したリスクを示さない
方法に関する。
・生物学的試料(例えば以前に得られたもの)を対象から入手し;
・前記試料中のFcRnレベルを決定し;そして
・前記決定されたレベルを参照レベルと比較する
ことを含み、
ここで参照レベルと比較して前記試料中のFcRnのより高いレベルが、FcRnが上方制御された亜型/病期を示し;そして前記参照レベルと同じかまたはより低いレベルが、FcRnが正常の亜型/病期またはFcRnが下方制御された亜型/病期を示し;
そして/または
ここで参照レベルと比較して前記試料中のFcRnのより高いレベルが、癌を発症するリスクが高いことを示し;そして前記参照レベルと同じかまたはより低いレベルが、癌の発症の増加したリスクを示さない
方法に関する。
この方法はインビボ(生体内)またはインビトロ(生体外)、好ましくはインビトロで実施することができる。
好ましい態様では、該方法が乳癌または結腸直腸癌を亜型分類する方法であり、生物学的試料が乳癌標本または結腸癌標本であり、参照レベルと比較して前記標本中の高FcRnレベルが、FcRnが上方制御された亜型/病期を示し;そして前記参照レベルと同じかまたはより低いレベルが、FcRnが正常またはFcRnが下方制御された亜型を示す。別の好ましい実施形態では、前記方法が、FcRn結合剤による治療に感受性の、または高感受性の癌を亜型分類/同定するための方法である。
本発明の別の態様は、癌を亜型分類し、癌を病期診断し、そして/または癌を発症するリスクを予測することに用いられるFcRn結合剤を含む組成物であって、
参照レベルと比較して生物学的試料中のFcRnのより高いレベルが、FcRnが上方制御された亜型/病期を示し;そして前記参照レベルと同じかまたはより低いレベルが、FcRnが正常の亜型/病期またはFcRnが下方制御された亜型/病期を示し;
そして/または
ここで参照レベルと比較して前記試料中のFcRnのより高いレベルが癌を発症するリスクが高いことを示し;そして前記参照レベルと同じかまたはより低いレベルが、癌の発症の増加したリスクを示さない、組成物に関する。前記参照レベルと同等のまたは低いFcRnレベルは、癌を発症するリスクが低いこと、非常に低いこと、または実質的にゼロであることの指標であることができる。別の形で表現すれば、前記参照レベルと同等のまたはより低いレベルが正常の標本であることを示す。
参照レベルと比較して生物学的試料中のFcRnのより高いレベルが、FcRnが上方制御された亜型/病期を示し;そして前記参照レベルと同じかまたはより低いレベルが、FcRnが正常の亜型/病期またはFcRnが下方制御された亜型/病期を示し;
そして/または
ここで参照レベルと比較して前記試料中のFcRnのより高いレベルが癌を発症するリスクが高いことを示し;そして前記参照レベルと同じかまたはより低いレベルが、癌の発症の増加したリスクを示さない、組成物に関する。前記参照レベルと同等のまたは低いFcRnレベルは、癌を発症するリスクが低いこと、非常に低いこと、または実質的にゼロであることの指標であることができる。別の形で表現すれば、前記参照レベルと同等のまたはより低いレベルが正常の標本であることを示す。
好ましい態様では、該組成物は乳癌または直腸癌を亜型分類するための組成物であり、生物学的試料が乳癌標本または結腸直腸癌標本であり、そして前記参照レベルと比較して前記試料中のFcRnのより高いレベルが、FcRnが上方制御された亜型を示し;そして前記参照レベルと同等のまたは低いFcRnレベルが、FcRnが正常またはFcRnが下方制御された亜型を示す。別の好ましい実施形態では、前記組成物がFcRn結合剤による治療に感受性である癌を亜型分類/同定するための組成物である。
本発明の更に別の態様は、癌の治療に用いられる治療薬に結合されたFcRn結合剤を含む組成物であって、前記癌が、参照レベルと比較して上方制御されたFcRnレベルを有する。好ましくは前記癌が乳癌または結腸直腸癌である。
更に別に態様では、本発明は、対象における(FcRn陽性)癌の画像を取得する方法であって、次の工程:
a) 対象の動物またはヒトに、検出可能成分に連結されたFcRn結合剤を含む医薬上許容される組成物を投与し;
b) 前記対象の動物またはヒトをイメージングして、該対象中の検出可能成分に連結されたFcRn結合剤からの検出可能シグナルを同定し、それにより前記対象の動物またはヒトにおいて(FcRn陽性)癌の画像を取得し;
c) 前記検出可能シグナルの画像を作成し、それにより前記対象の動物またはヒトにおいて(FcRn陽性)癌の画像を取得する
を含む方法に関する。
a) 対象の動物またはヒトに、検出可能成分に連結されたFcRn結合剤を含む医薬上許容される組成物を投与し;
b) 前記対象の動物またはヒトをイメージングして、該対象中の検出可能成分に連結されたFcRn結合剤からの検出可能シグナルを同定し、それにより前記対象の動物またはヒトにおいて(FcRn陽性)癌の画像を取得し;
c) 前記検出可能シグナルの画像を作成し、それにより前記対象の動物またはヒトにおいて(FcRn陽性)癌の画像を取得する
を含む方法に関する。
本発明を下記に更に詳細に説明する。
発明の詳細な説明
定義
本発明を更に詳細に説明する前に、次の用語と表現法をまず定義することにする:
発明の詳細な説明
定義
本発明を更に詳細に説明する前に、次の用語と表現法をまず定義することにする:
結腸直腸癌
結腸直腸癌(CRC)は、大腸癌としても知られ、結腸または直腸(大腸の一部)からの癌の発生である。それは体の他の部位を侵略するまたは他の部位に広がる能力を有する細胞の異常増殖による。
乳癌
結腸直腸癌(CRC)は、大腸癌としても知られ、結腸または直腸(大腸の一部)からの癌の発生である。それは体の他の部位を侵略するまたは他の部位に広がる能力を有する細胞の異常増殖による。
乳癌
乳癌は、胸部から発症する癌である。乳癌の兆候としては、胸部のしこり、胸部の形状の変化、皮膚のえくぼ形成、乳頭から分泌する液、または皮膚のうろこ状の紅斑が挙げられる。乳癌亜型の例は、ルミナルB(Luminal B)亜型とトリプルネガティブ(Triple Negative)亜型である。ルミナルB型乳癌はホルモン受容体陽性(エストロゲン受容体および/またはプロゲステロン受容体陽性)であり、かつ高レベルKi-67を有するHER2陽性またはHER2陰性のいずれかである。ルミナルB型癌は一般にルミナルA型癌よりもわずかに速く増殖し、それらの予後はわずかに良くない。トリプルネガティブ(Triple Negative)型/基底細胞様乳癌は、ホルモン受容体陰性(エストロゲン受容体およびプロゲステロン受容体陰性)でHER2陰性である。この癌型はBRCA1遺伝子変異を有する女性により頻繁に見られる。
アルブミン
用語「アルブミン」は、ヒト血清アルブミン(HSA、配列番号1)と同一および/または非常に類似した三次元構造または1以上のHSAドメインを有し、かつHSAまたは関連する1以上のドメインに類似した性質を有するタンパク質を意味する。類似した三次元構造は、例えば、HSA構造である。アルブミンの主要な性質の例はi) 血漿体積を調節する能力(膨張活性)、ii) 約19日±5日の長期血漿半減期、iii) FcRnへの結合、iv) リガンド結合、例えば内因性分子、例えば酸性、親水性化合物、例えばビリルビン、脂肪酸、ヘミンおよびチロキシンの結合、v) 酸性または電気陰性を有する小有機化合物、例えばワルファリン、ジアゼパム、イブプロフェンおよびパクリタキセルのような薬剤の結合である。タンパク質または断片をアルブミンとして特徴づけるためにそれらの性質の全てを満たす必要はない。例えば、断片がある種のリガンドまたは有機化合物の結合に反応性であるドメインを含まない場合、そのような断片の変異体は、それらの性質のいずれも持たないと予想されるだろう。好ましくは、アルブミンは、配列番号1に対して少なくとも60%の配列同一性、例えば配列番号1に対して少なくとも65, 70, 75, 80, 85, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 98.2, 98.4, 98.6, 98.8, 99, 99.2, 99.4, 99.6または99.8%同一性を有する。配列同一性はWO 2015/036579に従って計算することができ、特に第11頁に記載されるようなNeedleman-Wunsch演算法を使うことにより計算することができる。
用語「アルブミン」は、ヒト血清アルブミン(HSA、配列番号1)と同一および/または非常に類似した三次元構造または1以上のHSAドメインを有し、かつHSAまたは関連する1以上のドメインに類似した性質を有するタンパク質を意味する。類似した三次元構造は、例えば、HSA構造である。アルブミンの主要な性質の例はi) 血漿体積を調節する能力(膨張活性)、ii) 約19日±5日の長期血漿半減期、iii) FcRnへの結合、iv) リガンド結合、例えば内因性分子、例えば酸性、親水性化合物、例えばビリルビン、脂肪酸、ヘミンおよびチロキシンの結合、v) 酸性または電気陰性を有する小有機化合物、例えばワルファリン、ジアゼパム、イブプロフェンおよびパクリタキセルのような薬剤の結合である。タンパク質または断片をアルブミンとして特徴づけるためにそれらの性質の全てを満たす必要はない。例えば、断片がある種のリガンドまたは有機化合物の結合に反応性であるドメインを含まない場合、そのような断片の変異体は、それらの性質のいずれも持たないと予想されるだろう。好ましくは、アルブミンは、配列番号1に対して少なくとも60%の配列同一性、例えば配列番号1に対して少なくとも65, 70, 75, 80, 85, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 98.2, 98.4, 98.6, 98.8, 99, 99.2, 99.4, 99.6または99.8%同一性を有する。配列同一性はWO 2015/036579に従って計算することができ、特に第11頁に記載されるようなNeedleman-Wunsch演算法を使うことにより計算することができる。
HSA変異体
用語「HSA変異体」または「変異体HSA」は、1つ以上の(数個の)位置に変異、すなわち置換、挿入および/または欠失を含む、ヒト血清アルブミンに由来するポリペプチドを意味する。置換は、1つの位置を占有するアミノ酸の、異なるアミノ酸による置き換えを意味する;欠失は1つの位置を占有するアミノ酸の除去を意味する;そして挿入は、1つの位置を占有するアミノ酸に隣接の1〜3アミノ酸を付加することを意味する。変異体はHASの機能性断片であってもよい。断片は、アルブミンに由来する1つの連続した配列からなるか、またはアルブミンの異なる部分から誘導された2以上の配列を含むことができる。本発明にかかる断片は、約100アミノ酸残基より大きいサイズを有し、好ましくは150アミノ酸残基より大きいサイズを有することができ、好ましくは150アミノ酸残基より大きいサイズ、より好ましくは300アミノ酸残基より大きいサイズ、更により好ましくは400アミノ酸残基より大きいサイズ、最も好ましくは500アミノ酸より大きいサイズを有することができる。
用語「HSA変異体」または「変異体HSA」は、1つ以上の(数個の)位置に変異、すなわち置換、挿入および/または欠失を含む、ヒト血清アルブミンに由来するポリペプチドを意味する。置換は、1つの位置を占有するアミノ酸の、異なるアミノ酸による置き換えを意味する;欠失は1つの位置を占有するアミノ酸の除去を意味する;そして挿入は、1つの位置を占有するアミノ酸に隣接の1〜3アミノ酸を付加することを意味する。変異体はHASの機能性断片であってもよい。断片は、アルブミンに由来する1つの連続した配列からなるか、またはアルブミンの異なる部分から誘導された2以上の配列を含むことができる。本発明にかかる断片は、約100アミノ酸残基より大きいサイズを有し、好ましくは150アミノ酸残基より大きいサイズを有することができ、好ましくは150アミノ酸残基より大きいサイズ、より好ましくは300アミノ酸残基より大きいサイズ、更により好ましくは400アミノ酸残基より大きいサイズ、最も好ましくは500アミノ酸より大きいサイズを有することができる。
WT HSAに関して、変異体はFcRnに対して高い結合親和性を有するかまたは弱い結合親和性を有してもよい。好ましくは、FcRnはヒトFcRn(hFcRn)であり、より好ましくは可溶性ヒトFcRn(shFcRn)である。本発明に有用なアルブミン変異体の例は次のものである:
・HSA(配列番号1)に対して少なくとも70%同一性を有しかつ配列番号1のK537に相当する位置に変異を有するアルブミン、例えばHSA-K573P(高結合剤I)(HIB)(配列番号4)
・HSA(配列番号1)に対して少なくとも70%同一性を有しかつ配列番号1のE492、K537、K574およびQ580に相当する位置に変異を有するアルブミン、例えばHSA-E992G,K573P,K574HおよびQ580K(高結合剤II;HBII)(配列番号5)
・HSA(配列番号1)に対して少なくとも70%同一性を有しかつ配列番号1のK500に相当する位置に変異を有するアルブミン、例えばHSA-K500A(低結合剤;LB)(配列番号6)。
・HSA(配列番号1)に対して少なくとも70%同一性を有しかつ配列番号1のK537に相当する位置に変異を有するアルブミン、例えばHSA-K573P(高結合剤I)(HIB)(配列番号4)
・HSA(配列番号1)に対して少なくとも70%同一性を有しかつ配列番号1のE492、K537、K574およびQ580に相当する位置に変異を有するアルブミン、例えばHSA-E992G,K573P,K574HおよびQ580K(高結合剤II;HBII)(配列番号5)
・HSA(配列番号1)に対して少なくとも70%同一性を有しかつ配列番号1のK500に相当する位置に変異を有するアルブミン、例えばHSA-K500A(低結合剤;LB)(配列番号6)。
加えて、ある場合には空結合剤(null-binder)が有用である。一例は
・HSA(配列番号1)に対して少なくとも70%同一性を有しかつ配列番号1のK500とH464に相当する位置に変異を有するアルブミン、例えばHSA-K500A,H464Q(空結合剤)(配列番号7)
・HSA(配列番号1)に対して少なくとも70%同一性を有しかつ配列番号1のK500とH464に相当する位置に変異を有するアルブミン、例えばHSA-K500A,H464Q(空結合剤)(配列番号7)
実施例の項目で使用するアルブミン変異体の例は次のものである:
・HSA-K573P(高結合剤I)(HBI)(配列番号4)
・HSA−E492G,K573P,K574H,Q580K(高結合剤II)(HBII)(配列番号5)
・HSA-K500A(低結合剤)(LB)(配列番号6)
・HSA-K573P(高結合剤I)(HBI)(配列番号4)
・HSA−E492G,K573P,K574H,Q580K(高結合剤II)(HBII)(配列番号5)
・HSA-K500A(低結合剤)(LB)(配列番号6)
加えて、ある場合には空結合剤が関連しうる。一例は次のものである:
・HSA-K500A,H464Q(空結合剤)(配列番号7)
・HSA-K500A,H464Q(空結合剤)(配列番号7)
抗体
用語「抗体」または「抗体分子」は、完全抗体〔例えば免疫グロブリンG(IgG)、免疫グロブリンA(IgA)、免疫グロブリンE(IgE)、免疫グロブリンM(IgM)、または免疫グロブリンD(IgD)〕および抗体断片、例えばFab, F(ab’)2, Fab3, scFv, Fv, dsFv, ds-scFv, Fd, dAbs, TandAbs, ミニボディ、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、vHドメイン、vLドメイン、vHHドメイン、ナノボディ、アフィボディ、IgNAR可変単一ドメイン(v-NARドメイン)、それらの断片およびそれらの多量体、並びに二特異性抗体断片を含む。抗体はモノクローナル抗体(「mAb」)、ポリクローナル抗体およびキメラ抗体を含む。
用語「抗体」または「抗体分子」は、完全抗体〔例えば免疫グロブリンG(IgG)、免疫グロブリンA(IgA)、免疫グロブリンE(IgE)、免疫グロブリンM(IgM)、または免疫グロブリンD(IgD)〕および抗体断片、例えばFab, F(ab’)2, Fab3, scFv, Fv, dsFv, ds-scFv, Fd, dAbs, TandAbs, ミニボディ、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、vHドメイン、vLドメイン、vHHドメイン、ナノボディ、アフィボディ、IgNAR可変単一ドメイン(v-NARドメイン)、それらの断片およびそれらの多量体、並びに二特異性抗体断片を含む。抗体はモノクローナル抗体(「mAb」)、ポリクローナル抗体およびキメラ抗体を含む。
FcRn
新生児Fc受容体(FcRn)は、Brambell受容体としても知られ、それはヒトではFCGRT遺伝子によりコードされるタンパク質である。ヒト新生児Fc受容体は、β2−ミクログロブリン(配列番号3)と結合するFc受容体(配列番号2)を含む。Fc受容体はMHCクラスI分子と構造上類似している。よって、検出され、標的とされ、そして/またはイメージングされるFcRnは、好ましくはヒトFcRnである。
新生児Fc受容体(FcRn)は、Brambell受容体としても知られ、それはヒトではFCGRT遺伝子によりコードされるタンパク質である。ヒト新生児Fc受容体は、β2−ミクログロブリン(配列番号3)と結合するFc受容体(配列番号2)を含む。Fc受容体はMHCクラスI分子と構造上類似している。よって、検出され、標的とされ、そして/またはイメージングされるFcRnは、好ましくはヒトFcRnである。
哺乳類
用語「哺乳類」には、ヒト、家禽動物および家畜(例えばウシ、ヒツジ、ブタ、ウマ)並びに動物園の動物、スポーツ用動物(例えばイヌまたはウマ)またはペット動物(例えばイヌ、ネコ、ウサギ)が含まれる。好ましくは、哺乳類はヒトである。本発明の生物学的試料は好ましくはヒトから提供される。
用語「哺乳類」には、ヒト、家禽動物および家畜(例えばウシ、ヒツジ、ブタ、ウマ)並びに動物園の動物、スポーツ用動物(例えばイヌまたはウマ)またはペット動物(例えばイヌ、ネコ、ウサギ)が含まれる。好ましくは、哺乳類はヒトである。本発明の生物学的試料は好ましくはヒトから提供される。
参照レベル
本発明の範囲において、用語「参照(リファレンス)」は、他の値または特徴に対して比較することができる品質、量またはタイプに関する標準(例えば検量線)に関する。
本発明の範囲において、用語「参照(リファレンス)」は、他の値または特徴に対して比較することができる品質、量またはタイプに関する標準(例えば検量線)に関する。
本発明では、参照値は、FcRnの発現レベルでありうる。参照データのセットは、多数の標本についての参照値を集めることにより作ることができる。当業者に明確であるように、参照データのセットは、増加した数の参照値を含めることにより改善することができる。
本発明の1つの好ましい実施形態では、参照手段は内部参照手段および/または外部参照手段である。本範囲では、用語「内部参照手段」は、各々の測定のためにユーザーが直接取り扱わず、FcRnの濃度/レベルの測定用の装置の中に組み込まれており、それにより「最終結果」または「最終測定値」のみが提示される参照に関する。用語「最終結果」または「最終測定値」は、参照値を考慮に入れるときにユーザーに提供される結果に関する。本範囲では、用語「外部参照手段」は、「最終結果」を獲得する前に、FcRnの濃度/レベルを決定するためにユーザーが直接取り扱う参照である。本発明の更に別の態様では、外部参照手段は、ユーザーが測定シグナルを特定の参照手段と比較することができるような一覧表、図形および類似の参照手段からなる群より選ばれる。対象がFcRn過剰発現亜型を有するかどうかを決定するために、カットオフ値を確立しなければならない。このカットオフは、研究室、医師または各患者について症例ごとに(ケースバイケースで)確立してよい。カットオフレベルは、以下のものを含む多数の方法を使って確立することができる:百分位数、平均±標準偏差値;メジアン値の倍数;患者特異的リスクまたは当業者に既知の他の方法。
多変量判別分析および他のリスク評価は、市販のコンピュータプログラム統計学パッケージStatistical Analysis System(SAS Institute Inc.により製造・販売されている)あるいは当業者に既知である多変量統計分析の別法または他の統計ソフトウェアパッケージもしくはスクリーニングソフトウェアにより実装することができる。当業者に明白な通り、上記に論じた実施形態のいずれにおいても、カットオフレベルの変更は、各患者についての判別分析の結果を変更しうる。
FcRnの発現レベルを参照レベルに比較した時、それらは異なる(参照値より上または下)こともでき同一であることもできる。しかしながら、今日の検出技術を用いて、異なる結果であるか同一結果であるかの正確な定義は困難である。その理由は、異なる標本(試料)より得られる発現レベルにおいてノイズや変動があるためである。よって、2以上の発現レベルが異なるか同じかを評価するための通常の方法は統計分析を含む。
統計分析は、有意に異なる発現レベルと有意に同等の発現レベルの評価を可能にする。統計法は、関数/統計演算法を1組のデータに当てはめることを伴う。統計理論は、標本の一関数として統計を定義し、ここでその関数それ自体は標本の分布とは独立関係である。すなわち、該用語は、所定の標本についての関数と関数の値の両方に用いられる。汎用される統計的検定またはデータセットに適当される方法としては、t検定、f検定またはより高次の検定およびデータ比較法が挙げられる。そのような検定または方法の使用により、2以上の標本が有意に異なるか有意に同じかどうかの結論が可能になる。
有意性は、当業者に既知の標準的な統計方法により求めることができる。選択される参照レベルは、検定を実施する哺乳類に依存して変更することができる。選択される参照レベルは、当業界で既知のような別の特異性または感受性を所望する場合には変更することができる。
本明細書中で用いる場合、感受性とは、診断検査と同様に、正しく判定される実際に検査陽性である比率の尺度、すなわち、FcRnを過剰発現している哺乳類またはヒトの比率を指す。通常、検査の感度は、全数の中の真陽性の比率として説明することができる。本明細書中で用いる場合、特異性とは、正しく判定される、検査陰性の比率の尺度、すなわち標準と同じまたは低いFcRnレベルを有する哺乳類の比率を指す。理想的な診断検査は、100%特異性を有する試験、すなわち、FcRnを過剰発現する哺乳類のみを検出し、従って偽陽性結果が全くなく、かつ100%感受性を有する検査である。
いずれの検査でも、一般に各測定間にはトレードオフ(矛盾)がある。例えば、ある者が欠陥検査をしている製造設定において、ほぼ全ての不完全成分を同定する可能性を増加させるために(高感受性)、機能性成分を切り捨てるリスク(低特異性)を進んで受け入れるかもしれない。このトレード・オフは、受信者動作特性(ROC)曲線を使ってグラフ表示することができる。
よって、一実施形態では、本発明の亜型は、参照組織に比較して少なくとも2倍、例えば少なくとも4倍、例えば少なくとも6倍、例えば少なくとも10倍のFcRnの上方制御レベル(過剰発現)を有する。FcRn発現の好ましい測定方法は、実施例の項目において使用する方法である。
実施例の項目から分かるように、「カットオフ値」は、異なる発現レベルをいかに分類するかにも依存しうる。例えば図16において、FcRnの発現レベルは陰性、低、中、または高に分類される。しかしながら、別の分類法も当業者により選択することができる。
結合親和性
用語「結合親和性」は、一般にある分子(例えばIgGまたはアルブミン)の単一結合部位とそれの結合相手(例えば抗原またはFcRn)間の非共有結合的相互作用の合計の強度を指す。異なって指摘しない限り、本明細書中で用いる「結合親和性」とは、結合ペアの構成要素(例えばアルブミンとFcRn)間の1:1相互作用を反映する固有の結合親和性を指す。分子(X)のその結合相手に対する親和性は、一般に、koff/kon(kd/ka)平衡解離定数(KD)により表すことができる。結合親和性は当業者に既知の方法により測定することができる。好ましい方法は、例えば本明細書中に例示されるようなBiacore(GE Healthcare)機器を使った表面プラズモン共鳴(SPR)である。FcRnとアルブミンの内因性ペア(例えばHSA対hFcRn、イヌアルブミン対イヌFcRnなど)の結合親和性は一般に、0.2〜3.2マイクロモル(μM)である。
用語「結合親和性」は、一般にある分子(例えばIgGまたはアルブミン)の単一結合部位とそれの結合相手(例えば抗原またはFcRn)間の非共有結合的相互作用の合計の強度を指す。異なって指摘しない限り、本明細書中で用いる「結合親和性」とは、結合ペアの構成要素(例えばアルブミンとFcRn)間の1:1相互作用を反映する固有の結合親和性を指す。分子(X)のその結合相手に対する親和性は、一般に、koff/kon(kd/ka)平衡解離定数(KD)により表すことができる。結合親和性は当業者に既知の方法により測定することができる。好ましい方法は、例えば本明細書中に例示されるようなBiacore(GE Healthcare)機器を使った表面プラズモン共鳴(SPR)である。FcRnとアルブミンの内因性ペア(例えばHSA対hFcRn、イヌアルブミン対イヌFcRnなど)の結合親和性は一般に、0.2〜3.2マイクロモル(μM)である。
結合親和性は、(一例として)FcRn(例えばshFcRn)に対するKDが、HSAに対する対応するKDよりも低い(高親和性、すなわちより強い結合を有する)アルブミンまたは接合/融合体/会合体として表すことができる。よって、一実施形態では、本発明にかかる「FcRn結合剤」(例えばアルブミン、アルブミン変異体またはそれの接合/融合体/結合体)のKDは、FcRnに対するHSAの0.9×(倍)KD未満、より好ましくはFcRnに対するHSAの0.5×KD未満、より好ましくはFnRnに対するHSAの0.1×KD未満、更により好ましくはFcRnに対するHSAの0.05×KD未満、更により好ましくはFcRnに対するHSAの0.02×KD未満、更により好ましくはFcRnに対するHSAの0.01×KD未満、最も好ましくはFcRnに対するHSAの0.001×KD未満である(ここで×は「乗じる」を意味する)。好ましくは、「FcRn結合剤」は本発明のアルブミンまたはアルブミン変異体である。
あるいは、FcRnのKDは、対応するHSAのFcRnに対するKDよりも高い値(低い結合性)であってもよい。かくして、一実施形態では、「FcRn結合剤」のKDが、FcRnに対するHSAの2×KD超、更により好ましくはFcRnに対するHSAの2×KD超、より好ましくはFcRnに対するHSAの5×KD超、更により好ましくはFcRnに対するHSAの10×KD超、更により好ましくはFcRnに対するHSAの25×KD超、最も好ましくはFnRnに対するHSAの50×KD超である。好ましくは「FcRn結合剤」は本発明のアルブミンまたはアルブミン変異体である。
大部分の場合、FcRnに対して高結合親和性を有する変異体を本発明の態様に用いるのが好ましい。
KDを測定および/または比較する際、次のパラメータの1または複数(例えば数個)(好ましくは全部)を使用することができる:
機器:Biacore 3000機器(GE Healthcare)
フローセル:CM5センサーチップ
FcRn:ヒトFcRn、好ましくは可溶性ヒトFcRn、所望によりグルタチオンSトランスフェラーゼ(GST)またはヒスチジン(His)のようなタグ、最も好ましくはβ2-ミクログロブリンのC末端の6ヒスチジン残基のようなHisタグにカップリングされたもの。
FcRnの量:1200-2500 RU
機器:Biacore 3000機器(GE Healthcare)
フローセル:CM5センサーチップ
FcRn:ヒトFcRn、好ましくは可溶性ヒトFcRn、所望によりグルタチオンSトランスフェラーゼ(GST)またはヒスチジン(His)のようなタグ、最も好ましくはβ2-ミクログロブリンのC末端の6ヒスチジン残基のようなHisタグにカップリングされたもの。
FcRnの量:1200-2500 RU
カップリング化学:アミンカップリング化学(例えば機器の製造業者により提供されたプロトコルに記載の通り)。
カップリング法:カップリングは、10 mM酢酸ナトリウム pH 5.0 (GE Healthcare)中20μg/mLのタンパク質を注入することにより実施することができる。リン酸緩衝液(67 mMリン酸緩衝液、0.15 mM NaCl、0.005%Tween 20)をランニング緩衝液および希釈緩衝液として使用することができる。表面の再生はHBS−EP緩衝液(0.01 M HEPES、0.15 M NaCl、3 mM EDTA、0.005%界面活性剤P20)pH 7.4(Biacore AB)の注入を使って行うことができる。
検査分子(例えばHSAまたは変異体)の注入量:20〜0.032μM。
注入の流速:一定、例えば30μL/mL
注入温度:25℃
データ評価ソフトウェア:BIAevalution 4.1ソフトウェア(BIAcore AB)。
カップリング法:カップリングは、10 mM酢酸ナトリウム pH 5.0 (GE Healthcare)中20μg/mLのタンパク質を注入することにより実施することができる。リン酸緩衝液(67 mMリン酸緩衝液、0.15 mM NaCl、0.005%Tween 20)をランニング緩衝液および希釈緩衝液として使用することができる。表面の再生はHBS−EP緩衝液(0.01 M HEPES、0.15 M NaCl、3 mM EDTA、0.005%界面活性剤P20)pH 7.4(Biacore AB)の注入を使って行うことができる。
検査分子(例えばHSAまたは変異体)の注入量:20〜0.032μM。
注入の流速:一定、例えば30μL/mL
注入温度:25℃
データ評価ソフトウェア:BIAevalution 4.1ソフトウェア(BIAcore AB)。
pH依存性の尺度である「pH依存率」は、[pH 7.4での平衡]/[pH5.5での平衡]×100の反応率として評価した。
改変または修飾
アルブミンに関しての用語「改変」または「修飾」は、アルブミンのアミノ酸配列に無関係の分子を付加または除去することによりアルブミンを変更すること、例えば脂肪酸を除去することまたはパートナー分子を付加することを意味する。アルブミンは特に、パートナーの結合、融合または会合により改変することができる。アルブミンのアミノ酸配列(例えば配列番号1)への変更は「変異体」と呼称され、改変とはみなされない。
アルブミンに関しての用語「改変」または「修飾」は、アルブミンのアミノ酸配列に無関係の分子を付加または除去することによりアルブミンを変更すること、例えば脂肪酸を除去することまたはパートナー分子を付加することを意味する。アルブミンは特に、パートナーの結合、融合または会合により改変することができる。アルブミンのアミノ酸配列(例えば配列番号1)への変更は「変異体」と呼称され、改変とはみなされない。
接合(コンジュゲーション)
アルブミンに関連して下記に例示される用語「接合化(conjugated)」、「接合する(conjugate)」または「接合(conjugation)」は、有益な剤、例えば治療薬および/または診断薬のような接合相手に結合されている、WT HSAもしくは変異型HSAまたはそれの断片を言う。接合はアルブミンのN末端および/またはC末端に実施することができるが、その代わりにまたは加えて、アルブミン中の1以上の(例えば数個の)適当なアミノ酸位置に行うこともできる。特に、ジスルフィド結合に関与しないシステイン残基が接合に適当である。WO 2009/126920、WO 2010/059315およびWO 2010/092135(参考により本明細書に組み込まれる)公報は、接合に適当な追加のシステイン残基を有する変異型アルブミンを記載している。接合相手をアルブミンまたはその断片に接合する技術は、当業界で既知である。WO 2009/019314公報は、接合相手、例えば治療薬を、ポリペプチドに接合するのに適する技術の例を開示しており、その技術を本発明にも適用することができる。更に、WO 2009/019314公報の第37〜44頁(参考により本明細書に組み込まれる)は、トランスフェリンに接合することができる化合物や成分の例を開示しており、それらの化合物と成分を本発明のアルブミン変異体にも接合することができる。上記は、本発明に係るアルブミンとは異なる別のFcRn結合相手の場合でもそうであることを理解すべきである。
アルブミンに関連して下記に例示される用語「接合化(conjugated)」、「接合する(conjugate)」または「接合(conjugation)」は、有益な剤、例えば治療薬および/または診断薬のような接合相手に結合されている、WT HSAもしくは変異型HSAまたはそれの断片を言う。接合はアルブミンのN末端および/またはC末端に実施することができるが、その代わりにまたは加えて、アルブミン中の1以上の(例えば数個の)適当なアミノ酸位置に行うこともできる。特に、ジスルフィド結合に関与しないシステイン残基が接合に適当である。WO 2009/126920、WO 2010/059315およびWO 2010/092135(参考により本明細書に組み込まれる)公報は、接合に適当な追加のシステイン残基を有する変異型アルブミンを記載している。接合相手をアルブミンまたはその断片に接合する技術は、当業界で既知である。WO 2009/019314公報は、接合相手、例えば治療薬を、ポリペプチドに接合するのに適する技術の例を開示しており、その技術を本発明にも適用することができる。更に、WO 2009/019314公報の第37〜44頁(参考により本明細書に組み込まれる)は、トランスフェリンに接合することができる化合物や成分の例を開示しており、それらの化合物と成分を本発明のアルブミン変異体にも接合することができる。上記は、本発明に係るアルブミンとは異なる別のFcRn結合相手の場合でもそうであることを理解すべきである。
融合
アルブミンに関連して下記に記載する用語「融合した」または「融合体」は、有益な剤、例えば治療用ポリペプチドおよび/または診断用ポリペプチドのような融合相手に遺伝子的に融合されているWT HSAもしくは変異型HSAまたはそれの断片を指す。融合は通常、アルブミンのN末端もしくはC末端のいずれかに行われるが、時々両末端に行われる。融合は理論上、代替的にまたは付加的に、アルブミン分子の内部に行われ、その場合、アルブミンのドメイン間に融合相手を位置させることが好ましい。例えば、融合相手はドメインIとドメインIIの間および/またはドメインIIとドメインIIIの間に配置させることができる。アルブミンまたはその断片の融合に関する教示は当業界で公知であり、当業者はそのような教示を本発明にも適用できることを理解するだろう。WO 2001/79271の表1、WO 2001/79258の表1(第11頁)、WO 2001/79442の表1(第11頁)、WO 2001/79443の表1(第12頁)、WO 2001/79443の表1(第11頁)、WO 2003/060071の表1、WO 2003/59934の表1、WO 2005/003296の表1、WO 2007/021494の表1およびWO 2009/058322の表1(全ての表は参考により本明細書中に援用される)は、融合相手、例えば治療用ポリペプチドの例を含み、これらはアルブミンまたはその断片に融合させることができ、そしてそれらの例は本発明にも適用できる。上記は、本発明のアルブミンとは異なる別のFcRn結合相手の場合もそうであることを理解すべきである。
アルブミンに関連して下記に記載する用語「融合した」または「融合体」は、有益な剤、例えば治療用ポリペプチドおよび/または診断用ポリペプチドのような融合相手に遺伝子的に融合されているWT HSAもしくは変異型HSAまたはそれの断片を指す。融合は通常、アルブミンのN末端もしくはC末端のいずれかに行われるが、時々両末端に行われる。融合は理論上、代替的にまたは付加的に、アルブミン分子の内部に行われ、その場合、アルブミンのドメイン間に融合相手を位置させることが好ましい。例えば、融合相手はドメインIとドメインIIの間および/またはドメインIIとドメインIIIの間に配置させることができる。アルブミンまたはその断片の融合に関する教示は当業界で公知であり、当業者はそのような教示を本発明にも適用できることを理解するだろう。WO 2001/79271の表1、WO 2001/79258の表1(第11頁)、WO 2001/79442の表1(第11頁)、WO 2001/79443の表1(第12頁)、WO 2001/79443の表1(第11頁)、WO 2003/060071の表1、WO 2003/59934の表1、WO 2005/003296の表1、WO 2007/021494の表1およびWO 2009/058322の表1(全ての表は参考により本明細書中に援用される)は、融合相手、例えば治療用ポリペプチドの例を含み、これらはアルブミンまたはその断片に融合させることができ、そしてそれらの例は本発明にも適用できる。上記は、本発明のアルブミンとは異なる別のFcRn結合相手の場合もそうであることを理解すべきである。
会合
本項目でアルブミンに関連して例示される用語「会合した」、「会合する」または「会合」は、WT HSAもしくは変異型HSAまたはその断片と、非共有結合によりアルブミンまたはその断片に結合したまたは会合した会合相手、例えば治療薬および/または診断薬、とを含んでなる組成物を指す。そのような会合体の一例は、アルブミンと該アルブミンに疎水性相互作用により会合された脂質である。そのような会合体は当業界で既知であり、それらは周知の技術を使って調製することができる。アルブミンとの会合に適当である分子は公知であり、好ましくはそれらは酸性、親油性および/または電気陰性の特徴を有する。そのような分子の例は、Kragh-Hansen他、2002, Biol. Pharm. Bull. 25, 695の表1(参考により本明細書に援用される)に与えられている。更に、WO 2000/071079公報は、パクリタキセルとアルブミンとの会合を記載しており、パクリタキセルは本発明に包含される。
本項目でアルブミンに関連して例示される用語「会合した」、「会合する」または「会合」は、WT HSAもしくは変異型HSAまたはその断片と、非共有結合によりアルブミンまたはその断片に結合したまたは会合した会合相手、例えば治療薬および/または診断薬、とを含んでなる組成物を指す。そのような会合体の一例は、アルブミンと該アルブミンに疎水性相互作用により会合された脂質である。そのような会合体は当業界で既知であり、それらは周知の技術を使って調製することができる。アルブミンとの会合に適当である分子は公知であり、好ましくはそれらは酸性、親油性および/または電気陰性の特徴を有する。そのような分子の例は、Kragh-Hansen他、2002, Biol. Pharm. Bull. 25, 695の表1(参考により本明細書に援用される)に与えられている。更に、WO 2000/071079公報は、パクリタキセルとアルブミンとの会合を記載しており、パクリタキセルは本発明に包含される。
会合相手は、ミクロ粒子またはナノ粒子を通して治療薬および/または診断薬に会合されてもよく、その場合、治療薬および/または診断薬は前記粒子に付着されるかまたは中に封入される。上記は、本発明のアルブミンとは異なる別のFcRn結合相手の場合もそうであることを理解すべきである。
野性型(WT)
例えばアルブミンやFcRnに関連した用語「野生型(WT)」は、動物またはヒトにおいて天然に見つかるアルブミンまたはFcRnと同じアミノ酸配列(動物またはヒトの内因性遺伝子配列)を有するアルブミンまたはFcRnを指す。WTアルブミンまたはWT FcRnは、トランスジェニック動物の産生におけるような遺伝子ノックアウト/ノックインによる等のヒトの介入により作製される遺伝子変異を含まないと理解される。配列番号1はヒト(Homo sapiens)からの成熟WTアルブミンである。
例えばアルブミンやFcRnに関連した用語「野生型(WT)」は、動物またはヒトにおいて天然に見つかるアルブミンまたはFcRnと同じアミノ酸配列(動物またはヒトの内因性遺伝子配列)を有するアルブミンまたはFcRnを指す。WTアルブミンまたはWT FcRnは、トランスジェニック動物の産生におけるような遺伝子ノックアウト/ノックインによる等のヒトの介入により作製される遺伝子変異を含まないと理解される。配列番号1はヒト(Homo sapiens)からの成熟WTアルブミンである。
治療薬
用語「治療薬」、「治療用化合物」、「治療用分子」または「薬」は、相互に交換可能に用いられ、それらは化合物、化合物の混合物、あるいは生物学的巨大分子(例えばペプチド、タンパク質、脂質、核酸(例えばDNAやRNA)、ウイルス)または化合物と共同した生物学的巨大分子を指す。治療薬としては、病状を予防、改善または治癒させることができる剤が挙げられる。治療薬は精製、実質的に精製、または部分的に精製されることが可能である。本発明の「剤」は、放射線療法剤やワクチンも包含する。
用語「治療薬」、「治療用化合物」、「治療用分子」または「薬」は、相互に交換可能に用いられ、それらは化合物、化合物の混合物、あるいは生物学的巨大分子(例えばペプチド、タンパク質、脂質、核酸(例えばDNAやRNA)、ウイルス)または化合物と共同した生物学的巨大分子を指す。治療薬としては、病状を予防、改善または治癒させることができる剤が挙げられる。治療薬は精製、実質的に精製、または部分的に精製されることが可能である。本発明の「剤」は、放射線療法剤やワクチンも包含する。
試料(標本)
試料は限定されないが、組織切片または生検標本(バイオプシー)、例えば治療しようとする腫瘍の一部分であることができ、またはそれは正常組織の周辺部分であってよい。
試料は血液、排せつ物(糞便)、尿、胸膜液、胆汁、気管支液、洗口液、組織生検標本、腹水、膿、脳脊髄液、卵胞液、組織または粘液であることができるが、それに限定されない。試料はアッセイする前に処理することができる。例えば試料は希釈、濃縮または精製されてよく、そして/または少なくとも1つの化合物、例えば内部標準が試料に添加されてもよい。様々な試料を取り扱う方法は当業者に既知である。好ましくは、試料は組織生検標本である。更により好ましくは、試料は癌組織標本である。好ましくは試料はヒト由来である。
試料は限定されないが、組織切片または生検標本(バイオプシー)、例えば治療しようとする腫瘍の一部分であることができ、またはそれは正常組織の周辺部分であってよい。
試料は血液、排せつ物(糞便)、尿、胸膜液、胆汁、気管支液、洗口液、組織生検標本、腹水、膿、脳脊髄液、卵胞液、組織または粘液であることができるが、それに限定されない。試料はアッセイする前に処理することができる。例えば試料は希釈、濃縮または精製されてよく、そして/または少なくとも1つの化合物、例えば内部標準が試料に添加されてもよい。様々な試料を取り扱う方法は当業者に既知である。好ましくは、試料は組織生検標本である。更により好ましくは、試料は癌組織標本である。好ましくは試料はヒト由来である。
試料は本発明の方法の開始前に既に入手されていることを理解すべきである。よって、該方法は、試料を入手した対象との何ら相互作用なしに実施することができる。従って、該方法は生体外(インビトロ)で実施することができる。
癌の亜型分類、病期診断および癌を発症するリスクの予測の方法
本発明は、FcRn受容体の上方制御レベルを有する癌の亜型の同定に関する。発明者チームによるそのような亜型の意外な発見は、癌細胞表面上にある上方制御された接近可能な受容体の存在により、治療薬、診断薬またはイメージング薬(造影剤)に連結されたFcRn結合剤を使ったターゲティングが可能になるために、臨床的観点から重要であると考えられる。よって、第一の態様において、本発明は癌を亜型分類する、癌を病期診断する、および/または癌を発症するリスクを予測する方法に関し、該方法は
・対象から生物学的試料(以前に入手したもの)を提供し;
・前記試料中のFcRnレベルを測定し;そして
・前記測定レベルを参照レベルと比較する
ことを含み、ここで前記参照レベルと比較して前記試料中のFcRnレベルが高いことがFcRnが上方制御された亜型/病期を示し;そして前記参照レベルと同等または低いことがFcRnが正常の亜型/病期またはFcRnが下方制御された亜型/病期を示し;そして/または
ここで前記参照レベルと比較して前記試料中のFcRnレベルが高いことが、癌を発症するリスクが高いことを示し;そして前記参照レベルと同等または低いことが、癌を発症するリスクが高くないことを示す。別の方法で表現すれば、前記参照レベルと同じかまたはより低いレベルは正常試料であることを示す。実施例1では、上方制御されたFcRnレベルを有する癌型の例が示される。実施例2〜4では、マウスへの静脈注射後のヒト異種移植片中の改変型アルブミン高結合剤の蓄積/ターゲティングが示される。
本発明は、FcRn受容体の上方制御レベルを有する癌の亜型の同定に関する。発明者チームによるそのような亜型の意外な発見は、癌細胞表面上にある上方制御された接近可能な受容体の存在により、治療薬、診断薬またはイメージング薬(造影剤)に連結されたFcRn結合剤を使ったターゲティングが可能になるために、臨床的観点から重要であると考えられる。よって、第一の態様において、本発明は癌を亜型分類する、癌を病期診断する、および/または癌を発症するリスクを予測する方法に関し、該方法は
・対象から生物学的試料(以前に入手したもの)を提供し;
・前記試料中のFcRnレベルを測定し;そして
・前記測定レベルを参照レベルと比較する
ことを含み、ここで前記参照レベルと比較して前記試料中のFcRnレベルが高いことがFcRnが上方制御された亜型/病期を示し;そして前記参照レベルと同等または低いことがFcRnが正常の亜型/病期またはFcRnが下方制御された亜型/病期を示し;そして/または
ここで前記参照レベルと比較して前記試料中のFcRnレベルが高いことが、癌を発症するリスクが高いことを示し;そして前記参照レベルと同等または低いことが、癌を発症するリスクが高くないことを示す。別の方法で表現すれば、前記参照レベルと同じかまたはより低いレベルは正常試料であることを示す。実施例1では、上方制御されたFcRnレベルを有する癌型の例が示される。実施例2〜4では、マウスへの静脈注射後のヒト異種移植片中の改変型アルブミン高結合剤の蓄積/ターゲティングが示される。
理論に縛られることなく、より大きなコホートをスクリーニングすると、他の癌型においても同様な亜型が同定できると思われる。よって、本発明の方法は、そのような癌亜型の亜型分類およびその後の治療に関連する。
同定されたFcRn陽性(上方制御)亜型の1つの技術的利点は、そのような亜型が治療薬に連結されたFcRn結合剤で治療できる可能性があるということである。よって、一実施形態では、該方法は、FcRn結合剤による処置に感受性である癌を亜型分類する/同定するための方法である。更に別の実施形態では、参照レベルと比較して前記試料中のFcRnレベルが高いことが、FcRn結合剤による処置に対して(改善した)感受性である亜型/病期を示す。本文脈中、「改善」は、FcRnの発現が低い試料に比較して認知できるものである。
上述したように、FcRn上方制御は、別の癌型においても同定することができると考えられる。よって、一実施形態では、癌型が肺癌、膵臓癌、肝臓癌、腸癌、前立腺癌、膀胱癌、腎臓癌、卵巣癌、頸癌、腺癌、扁平上皮細胞癌、結腸直腸癌、乳癌および耳鼻咽喉癌から成る群より選択される。別の実施形態では、前記癌型は乳癌、結腸直腸癌、肺癌、膵臓癌、肝臓癌、腸癌、前立腺癌、膀胱癌、腎臓癌、例えば腎明細胞癌、卵巣癌、子宮頸癌、腺癌、扁平上皮細胞癌、頭頸部癌および耳鼻咽喉癌から成る群より選択される。実施例6は、対応する正常/健常組織に比較した様々な癌型における過剰発現を示す。
好ましい実施形態では、当該方法は乳癌または結腸直腸癌を亜型分類する方法であって、該方法は
・対象から生物学的乳癌試料または結腸直腸癌試料(以前に入手したもの)を提供し;
・前記試料中のFcRnレベルを測定し;そして
・前記測定レベルを参照レベルと比較する
ことを含み、ここで前記参照レベルと比較して前記試料中のFcRnレベルが高いことが、FcRnが上方制御された亜型を示し;そして前記参照レベルと同等または低いことが、FcRnが正常のまたはFcRnが下方制御された亜型を示す。
・対象から生物学的乳癌試料または結腸直腸癌試料(以前に入手したもの)を提供し;
・前記試料中のFcRnレベルを測定し;そして
・前記測定レベルを参照レベルと比較する
ことを含み、ここで前記参照レベルと比較して前記試料中のFcRnレベルが高いことが、FcRnが上方制御された亜型を示し;そして前記参照レベルと同等または低いことが、FcRnが正常のまたはFcRnが下方制御された亜型を示す。
上述したように、そのようなFcRnが上方制御された癌亜型は、例えばアルブミンで促進される治療(詳細は下記参照)に対してより感受性であると考えられる。よって、一実施形態では、該方法はFcRn結合剤による処置(例えば「アルブミン療法」)に対して感受性である癌を亜型分類/同定するための方法である。
実施例1において、FcRnが上方制御された亜型が乳癌組織で同定された。よって、一実施形態では、前記癌型が乳癌である。好ましくは、該方法が癌を亜型分類する方法である。更に別の実施形態では、乳癌がルミナルB(Luminal B)型乳癌またはトリプルネガティブ(Triple Negative)型/基底細胞様乳癌である。
実施例1において、FcRnが上方制御された亜型が結腸直腸癌組織においても同定された。よって、一実施形態では、前記癌型が結腸直腸癌である。好ましくは、該方法が癌を亜型分類する方法である。
癌組織は良性でも悪性でもよい。加えて、癌型は異なる病期診断プロトコルに従って病期診断することができる。一実施形態では、前記試料が転移性癌組織(非良性)、例えば転移性組織生検標本である。別の実施形態では、前記試料が良性癌組織(非悪性)、例えば組織生検標本である。病期は本発明による亜型と見なしてもよい。
本発明の参照レベルは、癌の診断/亜型分類/病期診断の技術分野の当業者により一般的に用いられる様々な種類の参照レベルから選択することができる。よって、一実施形態では、前記参照レベルは、同じ癌型の正常試料(非癌)のFcRnレベルまたは数個の正常試料の平均レベルである。更に別の実施形態では、前記正常試料は、前記生物学的試料と隣接する組織から、または前記生物学的試料から遠位の組織からのものである。
生物学的試料の源は、様々な起源から得ることができる。よって、追加の実施形態では、前記生物学的試料は組織生検標本、血液、排せつ物(糞便)、尿、胸膜液、胆汁、気管支液、洗口液、腹水、膿、脳脊髄液、卵胞液、組織および粘液から成る群より選択され、好ましくは組織生検である。実施例1において、癌組織標本/生検標本が試験される。
癌亜型分類に関連して、特定の試料が好ましい。よって、追加の実施形態では、生物学的試料が癌標本、例えば癌組織生検標本である。
FcRnレベルは様々な手段により決定/確証することができる。よって、一実施形態では、前記レベルはFcRn結合剤を用いて決定される(タンパク質レベル)。更に別の実施形態では、前記FcRn結合剤がWTアルブミン、アルブミン変異体、アルブミン結合剤、FcRn抗体、IgG類、ペプチドまたはタンパク質、および核酸、例えばアプタマーから成る群より選択され、好ましくは結合剤がアルブミンであり、より好ましくはアルブミン変異体である。更に好ましい実施形態では、前記アルブミン変異体が、アルブミンのWT型(配列番号1)よりも高い、FcRnへの結合親和性を有する。
WT HSAに比較して、変異体はFcRnに対する高い結合親和性を有してもよくまたはより弱いFcRn結合親和性を有してもよい。好ましくは、FcRnがヒトFcRn(hFcRn)であり、より好ましくは可溶性ヒトFcRn(shFcRn)である。アルブミン変異体は天然型変異体または組換え変異体であることができる。
アルブミン変異体は、WO 2011/124718(参考により本明細書中に援用される)に開示されたような、アルブミンドメインIIIまたはその変異体と、少なくとも1つの(例えば数個の)追加のアルブミンドメインまたはその断片、例えば第二のアルブミンドメインIIIまたはその変異体と、を含むまたはから成っていてもいなくてもよい。適当であるのは、アルブミン変異体は少なくとも1つの(例えば数個の)アルブミンドメインIIIまたはその変異体または断片を含むかまたはから成り、ここで前記少なくとも1つの(例えば数個の)アルブミンドメインIIIは、WO 2011/051489中に開示されるような(参考として本明細書中に援用される)次の位置:573, 500, 550, 417, 440, 464, 490, 492, 493, 494, 495, 496, 499, 501, 503, 504, 505, 506, 510, 535, 536, 537, 538, 540, 541, 542, 574, 575, 577, 578, 579, 580, 581, 582および584から選択された配列番号1中の位置に相当する位置に1つ以上の(例えば数個の)置換を含む。適当な置換としては、次のもの:K573Y, W, P, H, F, V, I, T, N, S, G, M, C, A, E, Q, R, L, D, K500E, G, D, A, S, C, P, H, F, N, W, T, M, Y, V, Q, L, I, R, Q417A, H440A, H464Q, E492G, D494N,Q,A, E495Q,A, T496A, D494E+Q417H, D494N+T496A, E492G+V493P, P499A, E501A,Q, N503H,K, H510Q, H535Q, K536A, P537A, K538A, K541G,D, D550E,N, E492G+K573P,A,またはE492G/N503H/K573Pから選択された配列番号1中の位置に相当する位置に1つ以上の(例えば数個の)置換を含む。
アルブミン変異体は、WO 2014/072481(参考として本明細書中に援用される)に開示されるように、配列番号1中の次の位置:(a) 492と580;(b) 492と574;(c) 492と550;(d) 550と573;(e) 550と574;(f) 550と580に相当する位置から選択された2以上の(複数の)位置に変更を含むことができる。
アルブミン変異体は、(i) ヒトアルブミン変異体である第一のアルブミンを含むN末端領域であって、C末端の2〜30アミノ酸を除くヒトアルブミン変異体の全アミノ酸を含む前記第一のアルブミンのN末端と;(ii) 第二のアルブミンのC末端領域であって、マカクアルブミン、マウスアルブミン、ウサギアルブミン、ヒツジアルブミン、ヒトアルブミン、ヤギアルブミン、チンパンジーアルブミン、ハムスターアルブミン、モルモットアルブミン、ラットアルブミン、ウシアルブミン、ウマアルブミン、ロバアルブミン、イヌアルブミン、ニワトリアルブミンもしくはブタアルブミン、またはその変異体から選択され、前記第二のアルブミンまたはアルブミン変異体のC末端の2〜30アミノ酸を含む前記第二のアルブミンまたはアルブミン変異体のC末端領域、とを含んで成り、ここで前記ポリペプチドが(i) WO 2012/059486(参考として本明細書中に援用される)中に開示されたようなヒトアルブミン変異体と比較して改変された血漿中半減期および/または(ii) 前記ヒトアルブミン変異体と比較して改変された結合親和性を有する。
アルブミン変異体は、配列番号1の成熟ヒトアルブミンポリペプチド配列のドメインI中に1以上の(例えば数個の)変異;および配列番号1の成熟ヒトアルブミンポリペプチド配列のドメインIII中に1以上の(例えば数個の)変異を含んでもよく、ここで前記1以上の(例えば数個の)変異は、WO 2013/135896(参考として本明細書中に援用される)に開示されるように、該ポリぺプチドをFcRnに対して改変された結合親和性を有するようにする。好ましくは、ドメインI中の変異が、配列番号1の78〜120位のいずれかに相当する位置、例えば78〜88位のいずれかから;および/または105〜120位のいずれかから選択され、そしてドメインIII中の変異が配列番号1の位置:425, 505, 510, 512, 524, 527, 531, 534, 569, 573, 575位のいずれかから選択される。適当であるのは、位置78〜120位または425, 505, 510, 512, 524, 527, 531, 534, 569, 573および/または575位に相当する位置の変異が置換であり;そして前記変異が所望により(i) 83N, KまたはS;(ii) 111D,G,H,R,QまたはE;または(iii) 573P,Y,W,H,F,T,IまたはVから選択された置換である。
当該アルブミン変異体はWO 2015/036579公報(参考として本明細書中に援用される)に開示されるように、配列番号1中の位置:349, 342, 381, 345, 384, 198, 206, 340, 341, 343, 344, 352, 382, 348および/または383に相当する位置からなる群より選択された配列番号1の成熟ヒトアルブミンポリペプチド配列のドメインII中に1以上の(例えば数個の)変異を含んでもよく、ここで前記1以上の(例えば数個の)変異が、該アルブミン変異体に(i) 改変された血漿中半減期および/または(ii)FcRnへの改変された結合親和性を有するようにする。好ましくは、349, 342, 381, 345, 384, 198, 206, 340, 341, 343, 344, 352, 382, 348および/または383に相当する位置の変異が置換であり;そして該変異が場合により、(1) 349F,W,Y,H,P,KまたはQ、好ましくはF;(ii) 342Y,W,F,H,T,N,Q,A,C,I,L,P,V,好ましくはY;(iii) 381GまたはA、好ましくはG;あるいは(iv) 345E,H,IまたはQ、から選択された置換である。
アルブミン変異体は、配列番号1のV418, T420, V424, E505およびV547に相当する1つ以上の(数個の)位置に変異、例えば置換を含む、アルブミンの変異体ドメインIIIまたはその断片を含むことができる。それらの変異体は、WO 2013/075066公報(参考により本明細書中に援用される)に開示されている。置換は、V418, T420, V424, E505およびV547に相当する位置のうちの1または2箇所以上(複数、例えば2,3,4または5箇所)であることができ;例えば、V418M, T420A, V424I, E505(R/K/G)およびV547Aから選択された1以上の(例えば数個の)置換であることができる。特定の実施形態では、アルブミンが置換V418M, T420AおよびE505R;またはV418M, T420A, E505GおよびV547Aを含む。該アルブミンはN429, M446, A449, T467およびA552から選択された位置に1つ以上の(例えば数個の)追加の置換、例えばN429D, M446V, A449V, T467MおよびA552Tから選択された置換を含んでもよい。
アルブミン変異体は、WO 2011/103076公報(参照により本明細書中に援用さ得る)に開示されるように、該ポリペプチドのFcRn親和性と血清半減期の一方または両方を増加させるために1〜18個のアミノ酸置換を含む、アルブミンの変異体ドメインIIIまたはその断片を含むことができる。置換は、配列番号1の381, 383, 391, 401, 402, 407, 411, 413, 414, 415, 416, 424, 426, 434, 442, 445, 447, 450, 454, 455, 456, 457, 459, 463, 495, 506, 508, 509, 511, 512, 515, 516, 517, 519, 521, 523, 524, 525, 526, 527, 531, 535, 538, 539, 541, 557, 561, 566または569位に相当する位置のいずれか1つ以上(例えば数個)の位置にあることができる。
適当な置換は、下記のものから選択することができる:
適当な置換は、下記のものから選択することができる:
アルブミン変異体は、配列番号1の次の位置に相当する位置にアミノ酸置換を含む、アルブミンの変異体ドメインIIIまたはその断片を含むことができる:(a)残基383と413;(b) 残基401と523;(c) 残基407と447;(d) 残基407と447と539;(e) 残基407と509;(f) 残基407と526;(g) 残基411と535;(h) 残基414と456;(i) 残基415と569;(j) 残基426と526;(k) 残基442と450と459;(l) 残基463と508;(m) 残基508と519と525;(n) 残基509と527;(o) 残基523と538;(p) 残基526と557;(q) 残基541と561;(r) 残基463と523;(s) 残基508と523;(t) 残基508と524;(u) 残基463と508と523;(v) 残基463と508と524;(w) 残基508と523と524;(x) 残基463と508と523と524;(y) 残基463と524;(z) 残基523と524;および(aa) 残基463と523と524;ここでこれらの置換は、WO 2012/112188公報(参照として本明細書中に援用される)に記載の通り、該ポリペプチドのFcRn親和性および血清半減期の一方または両方を増大させる。適当な置換は(a) L463C,F,G,H,I,N,SまたはQ;(b) T508C,E,I,K,RまたはS;(c) I523A,C,D,E,F,G,H,I,K,L,M,N,P,Q,R,S,T,V,WまたはY; (d) K524A,F,G,H,I,L,M,Q,TまたはV;(e) L463FまたはN;(f) T508RまたはS;(g) I523D,E,F,G,KまたはR;および(h) K524Lから選択することができる。
アルブミン変異体は配列番号1中の位置V418, T420, V424, E505, V547, K573に相当する位置から成る群より選択された配列番号1の成熟ヒトアルブミンポリペプチド配列中に1以上の(例えば数個の)変異を含むことができ;ここで前記1以上の(数個の)変異が該アルブミン変異体を(i) 改変された血漿半減期および/または(ii) 改変されたFcRn結合親和性を有するようにする。
アルブミン変異体は、次の群から選択された配列番号1の成熟ヒトアルブミンポリペプチド配列中に1以上の(例えば数個の)変異を含んでもよい:配列番号1中の、V381位、好ましくはV381NまたはQ;E383位、好ましくはE383A,G,I,LまたはV;N391位、好ましくはN391A,G,IまたはV;Y401位、好ましくはY401DまたはE;K402位、好ましくはK402A,G,I,LまたはV;L407位、好ましくはL407F,N,Q,WまたはY;Y411位、好ましくはY411QまたはN;K413位、好ましくはK413C,SまたはT;K414位、好ましくはK414SまたはT;V415位、好ましくはV415C,SまたはT;Q416位、好ましくはQ416HまたはP;V424位、好ましくはV424A,G,I,L,NまたはQ;V426位、好ましくはV426D,E,HまたはP;G434位、好ましくはG434C,SまたはT;E442位、好ましくはE442KまたはR;R445位、好ましくはR445F, WまたはY;P447位、好ましくはP447SまたはT;E450位、好ましくはE450DまたはE;S454位、好ましくはS454C,MまたはT;V455位、好ましくはV455NまたはQ;V456位、好ましくはV456NまたはQ;L457位、好ましくはL457F,WまたはY;Q459位、好ましくはQ459KまたはR;L463位、好ましくはL463NまたはQ;E495位、好ましくはE495D;T506位、好ましくはT506F,WまたはY;T508位、好ましくはT508K,RまたはS;F509位、好ましくはF509C,I,L,M,V,WまたはY;A511位、好ましくはA511F,WまたはY;D512位、好ましくはD512F,WまたはY;T515位、好ましくはT515C,H,N,P,QまたはS;L516位、好ましくはL516F,S,T,WまたはY;S517位、好ましくはS517C,F,M,T,WまたはY;K519位、好ましくはK519A,G,I,LまたはV;R521位、好ましくはR521F,WまたはY;I523位、好ましくはI523A,D,E,F,G,K,L,N,Q,R,V,WまたはY;K524位、好ましくはK524A,G,I,LまたはV;K525位、好ましくはK525A,G,I,LまたはV;Q526位、好ましくはQ526C,M,S,TまたはY;T527位、好ましくはT527F,WまたはY;E531位、好ましくはE531A,G,I,LまたはV;H535位、好ましくはH535D,EまたはP;K538位、好ましくはK538F,WまたはY;A539位、好ましくはA539I,LまたはV;K541位、好ましくはK541F,WまたはY;K557位、好ましくはK557A,G,I,LまたはV;A561位、好ましくはA561F,WまたはY;T566位、好ましくはT566F,WまたはY;A569位、好ましくはA569HまたはP;ここで、前記1以上の(例えば数個の)変異は、アルブミン変異体を(i) 改変された血漿半減期および/または(ii) 改変されたFcRnへの結合親和性を有するようにする。
アルブミン変異体は、配列番号1中のV547位、好ましくはV457A;K573位、好ましくはK573PまたはY;I523位、好ましくはI523AまたはG;T527位、好ましくはT527M;K500位、好ましくはK500A;またはE505位、好ましくはE505Qに相当する位置から成る群より選択された、配列番号1の成熟アルブミンポリペプチド配列中に1以上の(例えば数個の)変異を含むことができる;ここで前記1以上の(数個の)変異が該アルブミン変異体を(i) 改変された血漿半減期および/または(ii) 改変されたFcRn結合親和性を有するようにする。
アルブミン変異体は、配列番号1の成熟ヒトアルブミンポリペプチド配列中に、配列番号1の573, 523, 527または505位に相当する位置から成る群から選択された1以上の(例えば数個の)変異を含んでもよい:好ましくは、K573Y;I523G;I523A;T527M;E505Q;もしくはK573P;例えばK573YとI523G;K573YとI523GとT527M;K573YとE505QとT527M;K573YとT527M;K573PとI523G;K573PとI523GとT527M;K573PとE505QとT527M;K573PとT527M;V547A;V547AとK573P;V547AとE505QとK573PとT527M;またはK500AとH510Q。
第一の結合剤は様々な方法で検出することができ、例えば第一の結合剤に結合する第二の結合剤を使ったサンドイッチアッセイを利用することにより検出することができる。当業者は、表面分子を検出する様々な方法を知っている。
一実施形態では、結合剤は検出可能標識を含む。更に別の実施形態では、検出可能標識が放射性同位体、検出可能生成物をもたらす酵素、蛍光団(フルオロフォア)、化学発光化合物、磁性粒子、ミクロ粒子、ミクロスフェア、ナノ粒子、ナノスフェア、ビオチン、ストレプトアビジンおよびジゴキシンから選ばれる。
ある場合には、FcRnレベルはFcRnの発現レベル(RNA)から推定することもできる。よって、一実施形態では、FcRnレベルが試料中のFcRnのRNAレベルを測定することにより決定される。非限定的方法の例は、PCR(ポリメラーゼ連鎖反応)、qPCR(定量的PCR)、FISH(蛍光in situハイブリダイゼーション)、RCA(ローリングサークル型増幅)等である。
ある実施形態では、本発明の方法が、必要とする対象に、該対象がFcRnが上方制御された癌亜型を有すると考えられる場合に、本発明に従って定義されるような(癌治療用の)組成物を投与するおよび/または処方するおよび/または投与を推奨することを更に含む。
癌の亜型分類、病期診断および発症リスクの予測に用いられる組成物
本発明の第二の態様は、癌の亜型分類、癌の病期診断および/または癌の発症リスクの予測に用いられる、FcRn結合剤を含む組成物であって、
ここで参照レベルと比較して生物学的試料中のFcRnのより高いレベルが、FcRnが上方制御された亜型/病期を示し;前記参照レベルと同等もしくは低いレベルが、FcRnが正常の亜型/病期を示し;そして/または
前記参照レベルと比較して前記試料中のFcRnのより高いレベルが癌の発症リスクが高いことを示し;そして前記参照レベルと同等もしくは低いレベルが癌の発症リスクが高いことを示さない
ことを特徴とする組成物に関する。
本発明の第二の態様は、癌の亜型分類、癌の病期診断および/または癌の発症リスクの予測に用いられる、FcRn結合剤を含む組成物であって、
ここで参照レベルと比較して生物学的試料中のFcRnのより高いレベルが、FcRnが上方制御された亜型/病期を示し;前記参照レベルと同等もしくは低いレベルが、FcRnが正常の亜型/病期を示し;そして/または
前記参照レベルと比較して前記試料中のFcRnのより高いレベルが癌の発症リスクが高いことを示し;そして前記参照レベルと同等もしくは低いレベルが癌の発症リスクが高いことを示さない
ことを特徴とする組成物に関する。
本発明の第一態様の実施形態は、この第二態様と相互に交換可能に組み合わせることができる。
好ましい実施形態では、該組成物は結腸直腸癌または乳癌の亜型分類(診断)に用いられ、ここで参照レベルと比較して前記試料中のFcRnのより高いレベルが、FcRnが上方制御された亜型を示し;そして前記参照レベルと同等もしくは低いレベルが、FcRnが正常の亜型を示す。
上述した通り、一実施形態では、該組成物は、FcRn結合剤による治療に対して感受性の癌を亜型分類/同定するための組成物である。更に別の実施形態では、参照レベルと比較して前記試料中のFcRnのレベルが高いことがFcRn結合剤による治療に対して感受性である亜型/病期を示す。
癌の治療
上述したように、発明チームは驚くべきことに、高レベルのFcRn受容体を発現する癌亜型を同定した。そのような亜型は、FcRn結合剤を使った治療のための関連する亜型と考えられる。
上述したように、発明チームは驚くべきことに、高レベルのFcRn受容体を発現する癌亜型を同定した。そのような亜型は、FcRn結合剤を使った治療のための関連する亜型と考えられる。
よって、本発明の第三の態様は、癌の治療、予防または緩和に用いられる、治療薬に結合させたFcRn結合剤を含む組成物であって、前記癌が参照レベルと比較してFcRnの上方制御レベルを有する前記組成物に関する。別の形で表現すれば、本発明は、FcRnを過剰発現する癌の治療、予防または緩和に用いられる、治療薬に結合されたFcRn結合剤を含む組成物に関する。別の実施形態では、前記癌型が乳癌、結腸直腸癌、肺癌、膵臓癌、肝臓癌、腸癌、前立腺癌、膀胱癌、腎臓癌、例えば腎明細胞癌、卵巣癌、頸癌、腺癌、扁平上皮細胞癌、頭頸部癌、および耳鼻咽喉癌から成る群より選択される。実施例6は、対応する正常健常組織に比較した様々な癌型における過剰発現を示す。実施例8は、FcRn高結合剤がFcRn発現細胞に結合すること(および/または該細胞により取り込まれること)を示し、一方でFcRnがノックダウンされた細胞(FcRn陰性細胞)はずっと低い結合/取り込みを有する。別の実施形態では、前記癌が乳癌および/または結腸直腸癌である。マウスへの静脈注射後のヒト異種移植片中の改変型アルブミン高結合剤の蓄積/ターゲティングが実施例2〜4と7に示される。ここで、Alexa Fluor(登録商標)680で標識されたアルブミン変異体を、薬剤および/またはイメージング剤に連結されたFcRn結合剤のターゲティング/蓄積の確証のためのin vivoモデル系として使用した。
FcRn結合剤は様々な方法で治療薬に連結させることができる。例えば、一実施形態では、FcRn結合剤が融合、接合または会合により治療薬に連結される。
更に別の実施形態では、前記FcRn結合剤はWTアルブミン、アルブミン変異体、FcRn抗体、IgG類、ペプチドまたはタンパク質、および核酸、例えばアプタマー、から成る群より選択され、好ましくは結合剤はアルブミンであり、さらにより好ましくはアルブミン変異体である。更に別の実施形態では、変異体HSAは、野生型と比較して1以上の(例えば数個の)改善された薬物動態的性質を有し、例えば変更された半減期、例えば増加または減少した半減期を有する。更に別の実施形態では、変異体HSAが、野生型HSAに比較してFcRnへの高い結合性および/または長い半減期を有する。
一実施形態では、前記アルブミン変異体が、野生型のアルブミン(配列番号1)よりも高いFcRn結合親和性を有する。好ましい実施形態では、該変異体が配列番号4または配列番号5である。
様々な治療薬をFcRn結合剤に融合/接合/会合させることができる。例えば、一実施形態では、前記治療薬が放射性核種、抗癌剤、例えばアクチノマイシンD、アルデスロイキン、アレムツズマブ、アルカンスルホネート、アルケラン、アムサクリン、アナストロゾール、アントラシクリン、代謝拮抗物質、Ara-C、三酸化ヒ素、アスパラギナーゼ、アザチオプリン、ゲラン桿菌(Bacillus Calmette-Guerin:BCG)、ビカルタミド(Bicalutamide)、BiCNU、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、ブスルファン、ブスルファン、カペシタビン、カルボプラチン、カルボプラチナム、カルムスチン、CCNU、セツキシマブ、クロラムブシル、クロラムフェニコール、絨毛膜、シクロスポリン、シドフォビル、シスプラチン、クラドリビン、コールタール含有製品、コルチシン、CPT-11、シクロホスファミド、シタラビン、シトシンアラビノシド、シトキサン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダナゾール、ダサチニブ、ダウノルビシン、デクスラゾキサン(Dexrazoxane)、ジエチルスチルベストロール、ジノプロストン、ジトラノール含有製品、ドセタキセル、ドキソルビシン、DTIC、デュタステリド、エピルビシン、エストラジオール、エストラムスチン、エチレンイミン、エトポシド、エキセメスタン、フィナステリド、フロクスウリジン、フルダラビン、フルオロウラシル、フルタミド、フォリン酸類似体、フォテムスチン、ガンシクロビル、ゲムシタビン、ゲムツズマブ、ゴナドトロピン、ゴセレリン、ヘルセプチン、ヘキサメチルアミン、ホルモン剤、ヒドロキシカルバミド、ヒドロキシウレア、イダルビシン、イホスファミド、イマチニブメシル酸塩、インターフェロン含有製品(ペグインターフェロンを含む)、イリノテカン、レフルノミド、レトロゾール、リュープロレリン酢酸塩、ロムスチン、メクロレタミン、メクロレタミン、メドロキシプロゲステロン、メゲストロール、メルファラン、メノトロピン、メルカプトプリン、メトトレキサート、メフェプリストン、マイトマイシン、ミトタン、ミトキサントロン、メトトレキサート(MTX)、ミコフェノール酸モフェチル、ナファレリン、ナイトロジェンマスタード、ノトロソウレア、オストロゲン含有製品、オキサリプラチン、オキシトシン、パクリタキセル、パミドロネート、ペンタミジン、ペントスタチン、白金化合物、プリカマイシン、ポドフィリン、プロカルバジン、プロゲステロン含有製品、プリン類似体、ピリミジン類似体、ラロキシフェン、ラルチトレキセド、リババリン、リツキシマブ、シロリムス、ステロイド、STI-571、ストレプトゾシン、シントシノン、シントメトリン、タクロリムス、タモキシフェン、タキサン、テモゾロミド、テニポシド、テストステロン、テトラジン、タリドミド、チオグアニン、チオテパ、トムデックス、トポイソメラーゼ阻害剤、トポテカン、トレミフェン、トラスツズマブ、トレオスルファン、トリフルリジン、トリメトレキサート、トリプトレリン、バルガンシクロビル、ビダラジン、ビンブラスチン、ビンカアルカロイド、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビン、VP-16、キセロダおよびジドブジンから成る群より選択される。
更に別の実施形態では、FcRn結合剤は下記に詳述するようなイメージング剤と更に連結される。
癌の生体内イメージング
上述した通り、本発明者らは、驚くべきことに同じ型の正常組織に比較して高レベルのFcRnを発現する癌亜型を同定した。そのような亜型は検出可能な成分に連結されたFcRnターゲティング剤/結合剤を使って生体内でイメージングすることができる。
上述した通り、本発明者らは、驚くべきことに同じ型の正常組織に比較して高レベルのFcRnを発現する癌亜型を同定した。そのような亜型は検出可能な成分に連結されたFcRnターゲティング剤/結合剤を使って生体内でイメージングすることができる。
よって、本発明の更なる態様は、癌の生体内イメージングに用いられる検出可能成分(イメージング成分)に連結されたFcRn結合剤を含む組成物であって、前記癌が参照レベルと比較して上方制御されたレベルのFcRnを有することを特徴とする組成物に関する。別の形で表現すれば、本発明は、FcRnを過剰発現している癌の生体内イメージングに用いられる、イメージング剤に連結されたFcRn結合剤を含有する組成物に関する。実施例3,4および7(および対応する図4〜14+17)はマウスのイメージングデータを提供する。
ここで、より特定の態様では、本発明は対象における(FcRn陽性/FcRn上方制御)癌の生体内画像を取得する方法であって、該方法は次の工程:
a) 対象動物またはヒトに、検出可能成分に連結されたFcRn結合剤を含む医薬上許容される組成物を投与し;
b) 前記対象動物またはヒトをイメージングして、該対象において検出可能成分に連結されたFcRn結合剤からの検出可能シグナルを同定し;そして
c) 前記検出可能シグナルの画像を作成し、それにより対象動物またはヒトにおける(FcRn陽性/FcRn上方制御)癌の画像を取得する
を含む。
a) 対象動物またはヒトに、検出可能成分に連結されたFcRn結合剤を含む医薬上許容される組成物を投与し;
b) 前記対象動物またはヒトをイメージングして、該対象において検出可能成分に連結されたFcRn結合剤からの検出可能シグナルを同定し;そして
c) 前記検出可能シグナルの画像を作成し、それにより対象動物またはヒトにおける(FcRn陽性/FcRn上方制御)癌の画像を取得する
を含む。
更なる態様では、本発明は、対象における(FcRn陽性)癌の診断/イメージング法に用いられる、前記検出可能成分に連結されたFcRn結合剤に関し、前記方法が
a) 対象に前記検出可能成分に連結されたFcRn結合剤を投与し;そして
b) 前記対象をイメージングし、(FcRn陽性/FcRn上方制御)癌に結合している検出可能成分に連結した前記FcRn結合剤を検出する
ことを含む。
a) 対象に前記検出可能成分に連結されたFcRn結合剤を投与し;そして
b) 前記対象をイメージングし、(FcRn陽性/FcRn上方制御)癌に結合している検出可能成分に連結した前記FcRn結合剤を検出する
ことを含む。
特定の実施形態では、それはPETまたはSPECTに有用なイメージング用の放射性検出可能成分であってよい。別の実施形態では、それは例えば光学的イメージングまたはMRIイメージングに有用な非放射性検出可能成分であってよい。
様々な放射性標識組成物が、SPECTおよびPETイメージング用の様々な抗原の部位特異的ターゲティングのために開発されている。一般的理論は、特定抗原に対して高特異性を有するペプチドおよび/またはタンパク質に(陽電子)放射核種を取り付け、SPECTおよびPETイメージングを使って発現レベルを可視化しそして定量することを伴う。この研究分野は、腫瘍診断、病期診断および治療経過観察のための特定の適用性を有することが示されている。一実施形態では、放射性核種は11C、15O、18F標識フルデオキシグルコース、64Cu、68Ga、66Ga、60Cu、61Cu、62Cu、89Zr、124I、76Br、86Y、94mTc、131I、G67Ga、111In、123Iおよび99mTcからなる群より選ばれる。
一実施形態では、MRIに特に適当な、ガドリニウムキレートのような常磁性粒子、および超常磁性酸化鉄粒子を使用することができる。一実施形態では、光学的イメージングに特に適当な、量子ドット、蛍光および生物発光剤、並びにFRET分子を使用できる。
他の実施形態では、生体内で可視化することのできる癌は、肺癌、膵臓癌、肝臓癌、腸癌、前立腺癌、膀胱癌、腎臓癌、例えば腎明細胞癌、卵巣癌、頸癌、腺癌、扁平上皮細胞癌、結腸直腸癌、乳癌、頭頸部癌、および耳鼻咽喉癌からなる群より選ばれる。
他の実施形態では、対象がヒトまたは動物、好ましくはヒトである。
好ましくは、FcRn結合剤は、本明細書中に記載されるような高結合性アルブミンである。
好ましくは、FcRn結合剤は、本明細書中に記載されるような高結合性アルブミンである。
上記に様々な態様で記載した通り、本発明の組成物は、例えば癌を治療するためまたは癌をイメージングするために使用することができる。事実、それらの態様は、組成物を治療とイメージングに(同時に)使用できることを意味する、「セラノスティクス(治療と診断の組み合わせ)」と呼ばれるものに組み合わせることができる。よって、一態様では、本発明は1つ以上のセラノスティクス剤に連結されたFcRn結合剤を含む組成物に関する。これは、様々な剤をFcRn結合性分子と連結させることにより、例えば検出可能成分+治療薬を連結することにより達成することができる。よって、一実施形態では、FcRn結合性分子が、検出可能成分と治療薬の両方を含む。更なる実施形態では、検出可能成分と治療薬が同一分子であり、例えば放射性核種である。セラノスティクスは、個別化医療の分野の中でも特に新しい分野である。
炎症性疾患の亜型の同定
FcRnを過剰発現する癌亜型の同定の他に、本発明者らのチームは炎症性疾患の中にもそのような亜型を同定した。そのような亜型は、臨床的見地から重要と考えられる。何故なら、炎症性細胞および/または損傷細胞上の、上方制御された接近可能な(表面の)受容体の存在ゆえに、治療薬、診断薬またはイメージング剤(造影剤)に連結されたFcRn結合剤を使用する注目のターゲットになるからである。実施例5は、炎症性疾患(慢性関節リウマチ(RA))におけるFcRnの存在を示す。
FcRnを過剰発現する癌亜型の同定の他に、本発明者らのチームは炎症性疾患の中にもそのような亜型を同定した。そのような亜型は、臨床的見地から重要と考えられる。何故なら、炎症性細胞および/または損傷細胞上の、上方制御された接近可能な(表面の)受容体の存在ゆえに、治療薬、診断薬またはイメージング剤(造影剤)に連結されたFcRn結合剤を使用する注目のターゲットになるからである。実施例5は、炎症性疾患(慢性関節リウマチ(RA))におけるFcRnの存在を示す。
よって、本発明の一態様は、炎症性疾患を亜型分類する方法であって、
・生物学的試料(例えば以前に得られたもの)を対象から入手し;
・前記試料中のFcRnレベルを決定し;そして
・前記決定されたレベルを参照レベルと比較する
ことを含み、
ここで参照レベルと比較して前記試料中のFcRnの高レベルが、FcRnが上方制御された亜型を示し;そして前記参照レベルと同じかまたはより低いレベルが、FcRnが正常の亜型またはFcRnが下方制御された亜型を示す
方法に関する。
・生物学的試料(例えば以前に得られたもの)を対象から入手し;
・前記試料中のFcRnレベルを決定し;そして
・前記決定されたレベルを参照レベルと比較する
ことを含み、
ここで参照レベルと比較して前記試料中のFcRnの高レベルが、FcRnが上方制御された亜型を示し;そして前記参照レベルと同じかまたはより低いレベルが、FcRnが正常の亜型またはFcRnが下方制御された亜型を示す
方法に関する。
一実施形態では、前記試料が生検標本、例えば関節生検標本、例えば膝関節、肘関節または指関節からのからなる群より選択される。より好ましい実施形態では、組織が滑膜組織である。より特別な実施形態では、組織が滑膜表面組織である。
ある実施形態では、本発明に係る方法は更に、対象がFcRnが上方制御された炎症疾患亜型を有すると考えられる場合、必要とする患者に、本発明に従って定義されるような組成物(例えば炎症性疾患の治療用の組成物)を投与することおよび/または処方することおよび/または投与を推奨することを更に含む。
炎症性疾患を亜型分類または病期診断するのに用いられる組成物
本発明の更なる態様は、炎症性疾患の亜型分類または病期診断に用いられるFcRn結合剤を含む組成物であって、参照レベルと比較して生物学的試料中のFcRnの高レベルが、FcRnが上方制御された亜型/病期を示し;そして前記参照レベルと同等またはそれより低いレベルが、FcRnが正常の亜型/病期を示すことを特徴とする組成物に関する。
本発明の上記の態様の実施形態は本態様と相互に交換可能に組み合わせることができることに留意すべきである。
本発明の更なる態様は、炎症性疾患の亜型分類または病期診断に用いられるFcRn結合剤を含む組成物であって、参照レベルと比較して生物学的試料中のFcRnの高レベルが、FcRnが上方制御された亜型/病期を示し;そして前記参照レベルと同等またはそれより低いレベルが、FcRnが正常の亜型/病期を示すことを特徴とする組成物に関する。
本発明の上記の態様の実施形態は本態様と相互に交換可能に組み合わせることができることに留意すべきである。
炎症性疾患の治療
上述したように、接近可能なFcRn受容体を発現している(例えば表面上に発現している)炎症性疾患亜型が同定された。そのような亜型は、FcRn結合剤を使用する治療に関連のある亜型と考えられる。
上述したように、接近可能なFcRn受容体を発現している(例えば表面上に発現している)炎症性疾患亜型が同定された。そのような亜型は、FcRn結合剤を使用する治療に関連のある亜型と考えられる。
よって、本発明の更なる態様は、抗炎症薬に連結されたFcRn結合剤を含む、例えば炎症性疾患の治療用の組成物であって、ここで前記炎症性疾患がFcRn受容体の上方制御レベルを有することを特徴とする組成物に関する。
一実施形態では、前記炎症性疾患または障害が、関節炎、喘息、潰瘍性結腸炎、炎症性腸症候群、アレルギー、アレルギー性鼻炎/副鼻腔炎、皮膚アレルギー、蕁麻疹、血管性浮腫、アトピー性皮膚炎、食物アレルギー、薬物アレルギー、昆虫アレルギー、肥満細胞症、変形性関節症、関節リウマチ、脊椎関節症、炎症を原因とする心血管疾患、動脈硬化症、移植片拒絶反応、および移植片対宿主病から成る群より選択され、好ましくは関節炎である。
更に別の実施形態では、前記抗炎症薬がNSAID(非ステロイド系抗炎症薬)剤、例えばロルノキシカム、ジクロフェナク、ニメスリド、イブプロフェン、ピロキシカム、ピロキシカム(ベタシクロデキストリン)、ナプロキセン、ケトプロフェン、テノキシカム、アセクロフェナク、インドメタシン、ナブメトン、アセメタシン、モルニフルメート、メロキシカム、フルビプロフェン、チアプロフェン酸、プログルメタシン、メフェナム酸、フェンブフェン、エトドラク、トルフェナム酸、スリンダク、フェニルブタゾン、フェノプロフェン、トルメチン、アセチルサリチル酸、デクスイブプロフェン、サイトカイン遮断薬、例えばTNFα、および医薬上許容される塩、複合体および/またはプロドラッグ、並びにそれらの混合物から成る群より選択される。
更に別の実施形態では、本発明に従って用いられる組成物は、医薬上許容される担体および/または希釈剤を更に含んでもよい。
炎症性疾患、例えば関節リウマチの生体内イメージング
上述した通り、本発明者らは驚くべきことに、同じ型の正常組織に比較して高レベルのFcRn受容体を発現している炎症性疾患(例えば関節リウマチ)亜型も同定した。そのような亜型は、検出可能成分に連結されたFcRn結合剤を使って生体内でイメージングすることができる。
上述した通り、本発明者らは驚くべきことに、同じ型の正常組織に比較して高レベルのFcRn受容体を発現している炎症性疾患(例えば関節リウマチ)亜型も同定した。そのような亜型は、検出可能成分に連結されたFcRn結合剤を使って生体内でイメージングすることができる。
よって、本発明の更なる態様は、炎症性疾患、例えば関節リウマチの生体内イメージングに用いられる、検出可能成分(イメージング成分)に連結されたFcRn結合剤を含む組成物であって、前記炎症性疾患(例えば関節リウマチ)が参照レベルと比較して上方制御されたFcRnレベルを有することを特徴とする組成物に関する。別の形で表現すれば、本発明は、FcRnを過剰発現している炎症性疾患(例えば関節リウマチ)の生体内イメージング用の、イメージング剤に連結されたFcRn結合剤を含む組成物に関する。
より特定の態様では、本発明は、対象においてFcRn陽性(および/またはFcRn上方制御)炎症性疾患、例えば関節リウマチの画像を取得する方法であって、該方法は次の工程:
a) 対象動物またはヒトに、検出可能成分に連結されたFcRn結合剤を含む医薬上許容される組成物を投与し;
b) 前記対象動物またはヒトをイメージングして、該対象において検出可能成分に連結されたFcRn結合剤からの検出可能シグナルを同定し;そして
c) 前記検出可能シグナルの画像を作成し、それにより前記対象動物またはヒトにおけるFcRn陽性(および/またはFcRn上方制御)炎症性疾患の画像を取得する
を含む。
a) 対象動物またはヒトに、検出可能成分に連結されたFcRn結合剤を含む医薬上許容される組成物を投与し;
b) 前記対象動物またはヒトをイメージングして、該対象において検出可能成分に連結されたFcRn結合剤からの検出可能シグナルを同定し;そして
c) 前記検出可能シグナルの画像を作成し、それにより前記対象動物またはヒトにおけるFcRn陽性(および/またはFcRn上方制御)炎症性疾患の画像を取得する
を含む。
更なる態様では、本発明は、対象におけるFcRn陽性(および/またはFcRn上方制御)炎症性疾患、例えば関節リウマチの診断/イメージング法に用いられる、検出可能成分に連結されたFcRn結合剤に関し、前記方法が
a) 対象に前記検出可能成分に連結されたFcRn結合剤を投与し;そして
b) 前記対象をイメージングし、前記(FcRn陽性/上方制御)炎症性疾患に結合した、前記検出可能成分に連結されたFcRn結合剤を検出する
ことを含む。
a) 対象に前記検出可能成分に連結されたFcRn結合剤を投与し;そして
b) 前記対象をイメージングし、前記(FcRn陽性/上方制御)炎症性疾患に結合した、前記検出可能成分に連結されたFcRn結合剤を検出する
ことを含む。
特定の実施形態では、それはPETまたはSPECTに有用なイメージング用の放射性検出可能成分であってよい。別の実施形態では、それは例えば光学的またはMRIイメージングに有用な非放射性検出可能成分であってよい。
様々な放射性標識組成物が、SPECTおよびPETイメージング用の様々な抗原の部位特異的ターゲティングのために開発されている。一般的理論は、特定抗原に対する高特異性を有するペプチドおよび/またはタンパク質に(陽電子)放射核種を取り付け、SPECTおよびPETイメージングを使って発現レベルを可視化しそして定量することを伴う。この研究分野は、腫瘍診断、病期診断および治療経過観察のための特有の適用性が示されている。一実施形態では、放射性核種は11C、15O、18F標識フルデオキシグルコース、64Cu、68Ga、66Ga、60Cu、61Cu、62Cu、89Zr、124I、76Br、86Y、94mTc、131I、G67Ga、111In、123Iおよび99mTcからなる群より選ばれる。
一実施形態では、MRIに特に適当な、ガドリニウムキレートのような常磁性物質、および超常磁性酸化鉄粒子を使用することができる。一実施形態では、光学的イメージングに特に適当な、量子ドット、蛍光および生物発光剤、並びにFRET分子を使用できる。
本発明の態様の1つに関して記載された実施形態や特徴は、本発明の別の態様にも当てはまることに留意すべきである。
本出願明細書に引用された全ての特許および非特許参考文献は、その全内容が参照により本明細書に援用される。
本出願明細書に引用された全ての特許および非特許参考文献は、その全内容が参照により本明細書に援用される。
本発明を特定の実施形態に関連して記載してきたが、決して提示された例に限定されると解釈してはならない。本発明の範囲は添付の特許請求の範囲に照らして解釈すべきである。特許請求の範囲では、用語「含んでいる」または「含む」は、他の可能な構成要素または工程を排除しない。また、「a」または「an」(ある1つの)等のような参照の言及は、複数を除外するものであると見なしてはならない。更に、他の請求項に言及される個々の特徴はおそらく有利に組み合わせることができ、他の請求項におけるそれらの個々の特徴の言及は、特徴の組み合わせが可能・有利であるということを排除しない。
本発明を以下の非限定例により更に詳細に説明する。
本発明を以下の非限定例により更に詳細に説明する。
実施例1:患者の生検標本におけるFcRn発現
研究目的
癌組織と健常組織においてFcRnレベルを同定すること。
研究目的
癌組織と健常組織においてFcRnレベルを同定すること。
材料と方法
材料
2種類の癌型を調べた(癌型あたり5標本)。それらは結腸癌と乳癌であった。健全な隣接組織を対照(コントロール)として使用した。ヒト癌組織標本は、デンマーク国オルフス市8000にあるオルフス大学病院の病理学研究所(The Pathology Institute, Aarhus University Hospital)により提供された。
材料
2種類の癌型を調べた(癌型あたり5標本)。それらは結腸癌と乳癌であった。健全な隣接組織を対照(コントロール)として使用した。ヒト癌組織標本は、デンマーク国オルフス市8000にあるオルフス大学病院の病理学研究所(The Pathology Institute, Aarhus University Hospital)により提供された。
ヒト癌組織標本の免疫組織化学的分析
ヒト組織をホルマリン固定し、パラフィン包埋した(FFPE)。FFPEヒト組織切片をTissue Clearキシレン代替品(Tek/Sakura Finetek社製)で処理し、スライドを脱パラフィンした。次に、エタノール溶液を100%から75%に徐々に減らすことによりスライドを再水和し、最後に冷水道水に移した。
ヒト組織をホルマリン固定し、パラフィン包埋した(FFPE)。FFPEヒト組織切片をTissue Clearキシレン代替品(Tek/Sakura Finetek社製)で処理し、スライドを脱パラフィンした。次に、エタノール溶液を100%から75%に徐々に減らすことによりスライドを再水和し、最後に冷水道水に移した。
抗原回復は、クエン酸緩衝液pH 6.0中で800 Wで8分間マイクロ波オーブン中で加熱し、次いで560 Wで14分間×2回加熱し、最後に20分間冷ますことにより行った。
染色手順はAutostainer Link 48装置(Dako社)上で実施した。タンパク質ブロッキング剤(Dako社)を使ってスライドをブロックし、次いで一次ポリクローナル・ウサギ抗ヒトFCGRT抗体(HPA012122、Sigma社)を使って1:200希釈で染色した。
染色手順はAutostainer Link 48装置(Dako社)上で実施した。タンパク質ブロッキング剤(Dako社)を使ってスライドをブロックし、次いで一次ポリクローナル・ウサギ抗ヒトFCGRT抗体(HPA012122、Sigma社)を使って1:200希釈で染色した。
可視化には、Dako EnVisionTM(商標)(キットK8023)検出システムを使用した。このシステムは、過酸化水素を含む内因性ペルオキシダーゼブロッキング剤(EnVisionTM FLEX Peroxydase-blocking Reagent, SM801)、西洋わさびペルオキシダーゼ(HRP)およびウサギ免疫グロブリンに対するヤギ第二抗体が連結されたポリマー(EnVisionTM FLEX/HRP, SM802)、DAB色原体(EnvisionTM FLEX DAB+Chromogen, DM827)および最後にヘマトキシリン(EnVisionTM FLEX Hematoxylin, K8008)を含んだ。
結果
図1に与えた結果は、対応する健常組織に比較して高いFcRn発現レベルを示すと同定された乳癌亜型と結腸癌亜型の代表例を示す。
図1に与えた結果は、対応する健常組織に比較して高いFcRn発現レベルを示すと同定された乳癌亜型と結腸癌亜型の代表例を示す。
結論
FcRn受容体を過剰発現している乳癌と結腸癌が存在することが発見された。そのような亜型が同定されたため、FcRn受容体はそれらの特定の亜型のターゲット癌療法のための結合剤としても使用することができると思われる。
FcRn受容体を過剰発現している乳癌と結腸癌が存在することが発見された。そのような亜型が同定されたため、FcRn受容体はそれらの特定の亜型のターゲット癌療法のための結合剤としても使用することができると思われる。
実施例2:マウスにおけるヒト癌細胞系異種移植片でのFcRn発現
研究目的
マウスにおけるヒト癌異種移植片でのFcRn過剰発現の同定
研究目的
マウスにおけるヒト癌異種移植片でのFcRn過剰発現の同定
材料と方法
癌モデル
・PXBC-3膵臓癌細胞
・HT-29ヒト結腸直腸腺癌細胞
・MCF-7ヒト乳癌細胞
癌モデル
・PXBC-3膵臓癌細胞
・HT-29ヒト結腸直腸腺癌細胞
・MCF-7ヒト乳癌細胞
結果
図2に与えた結果は、PXBC-3膵臓癌細胞に比較した、ヒト結腸直腸腺癌細胞(HT-29)とヒト乳癌細胞(MCF-7)における高いFcRn発現を示す。
図2に与えた結果は、PXBC-3膵臓癌細胞に比較した、ヒト結腸直腸腺癌細胞(HT-29)とヒト乳癌細胞(MCF-7)における高いFcRn発現を示す。
結論
FcRnを過剰発現する癌がマウス異種移植片において同定され、それは生体内FcRn結合剤試験または癌治療に利用することができる。
FcRnを過剰発現する癌がマウス異種移植片において同定され、それは生体内FcRn結合剤試験または癌治療に利用することができる。
実施例3:マウスへの静脈内注射後のヒト異種移植片における改変型アルブミン高結合剤の蓄積/ターゲティング
研究目的
アルブミン変異体の生体内分布と半減期および腫瘍蓄積を調べること。
アルブミン変異体の生体内分布と半減期および腫瘍蓄積を調べること。
材料と方法
アルブミン変異体
Alexa Fluor 680で標識された改変アルブミン変異体はAlbumedix Ltd. (ノッティンガム、UK)より提供された。
・HSA-K573P (高結合剤I)(HBI)(配列番号4)
・HSA-K500A(低結合剤)(LB)(配列番号6)
アルブミン変異体
Alexa Fluor 680で標識された改変アルブミン変異体はAlbumedix Ltd. (ノッティンガム、UK)より提供された。
・HSA-K573P (高結合剤I)(HBI)(配列番号4)
・HSA-K500A(低結合剤)(LB)(配列番号6)
生体内試験
全ての動物実験は、オルフス大学の生物臨床医学衛生研究所(the Institute of Biomedicine at Health)の動物施設内で実施した。全ての実験は、デンマーク国実験動物調査団(Danish Experimental Animal Inspectorate)により承認された。
全ての動物実験は、オルフス大学の生物臨床医学衛生研究所(the Institute of Biomedicine at Health)の動物施設内で実施した。全ての実験は、デンマーク国実験動物調査団(Danish Experimental Animal Inspectorate)により承認された。
細胞培養
ルシフェラーゼを発現する乳癌細胞系のヒト癌細胞系(MDA-MB-231/Luc)を本実験に使用した。細胞を、10%ウシ胎仔血清(FBS)(Gibco, Life Technologies, #10270-106)、0.1 mM MEM非必須アミノ酸(Gibco, Life Technologies, #11140-035)、2 mM L-グルタミン(Lonza, #BE17-605E)および1%ペニシリンとストレプトマイシン(Gibco, Life Technologies, #15140-122)を含むDMEM(4500 mg/L D-グルコース、L-グルタミン)(Gibco, Life Technologies, #41965-039)中に維持した。
ルシフェラーゼを発現する乳癌細胞系のヒト癌細胞系(MDA-MB-231/Luc)を本実験に使用した。細胞を、10%ウシ胎仔血清(FBS)(Gibco, Life Technologies, #10270-106)、0.1 mM MEM非必須アミノ酸(Gibco, Life Technologies, #11140-035)、2 mM L-グルタミン(Lonza, #BE17-605E)および1%ペニシリンとストレプトマイシン(Gibco, Life Technologies, #15140-122)を含むDMEM(4500 mg/L D-グルコース、L-グルタミン)(Gibco, Life Technologies, #41965-039)中に維持した。
腫瘍異種移植片の生物発光
乳癌MDA-MB231/Luc細胞〔PBSとマトリゲル(Matrigel)のゲルトレックス(GeltrexTM;LDEV不含有の成長因子低減基底膜抽出物(Gibco, Life Technologies))の1:1溶液400μL中の4×106細胞〕を、各マウス(11週齢、雌、Balb/cAnRj-Foxn1-nu、Janvier)の右脇腹に皮下注射した。腫瘍細胞の接種のための麻酔薬としてイソフルランを使用した。可視できるまで(11日間)腫瘍を増殖させた後、それらのマウスを各群(処置群N=4、対照群N=3)でほぼ同じ総腫瘍体積を有する4つの群に無作為に割り付けた。処置群には10 mg/kgの蛍光アルブミン、対照群には150μLのPBSを使って処置を行った。処置後各日において、腫瘍の最大縦径(長さ)と幅径を使ったキャリパー測定により腫瘍の大きさを測定した。腫瘍体積は次の式により算出した:
腫瘍体積=1/2(長さ×幅2)。
乳癌MDA-MB231/Luc細胞〔PBSとマトリゲル(Matrigel)のゲルトレックス(GeltrexTM;LDEV不含有の成長因子低減基底膜抽出物(Gibco, Life Technologies))の1:1溶液400μL中の4×106細胞〕を、各マウス(11週齢、雌、Balb/cAnRj-Foxn1-nu、Janvier)の右脇腹に皮下注射した。腫瘍細胞の接種のための麻酔薬としてイソフルランを使用した。可視できるまで(11日間)腫瘍を増殖させた後、それらのマウスを各群(処置群N=4、対照群N=3)でほぼ同じ総腫瘍体積を有する4つの群に無作為に割り付けた。処置群には10 mg/kgの蛍光アルブミン、対照群には150μLのPBSを使って処置を行った。処置後各日において、腫瘍の最大縦径(長さ)と幅径を使ったキャリパー測定により腫瘍の大きさを測定した。腫瘍体積は次の式により算出した:
腫瘍体積=1/2(長さ×幅2)。
実験期間の終わりに、マウスを麻酔下で頸椎脱臼により犠牲にし、腫瘍と臓器を回収した。血液と臓器をIVIS(登録商標)Spectrum Bioimager (PerkinElmer, Waltham, MA)を使って分析した。スペクトル・アンミキシングを使ってバックグラウンド自家蛍光を削除し、続いてLiving Imageソフトウェア、バージョン4.3.1 (PerkinElmer)を使ってデータ解析を行った。
腫瘍、肝臓および腎臓をRNA単離のため急速凍結(snap freeze)させ、免疫組織化学的試験用に保存するため中性緩衝化ホルマリン液(10%)中で固定した。72時間後、一連の段階的エタノール浴を使って水を置換することにより組織を脱水し、次いでワックス(蝋)で浸潤させた。浸潤組織をワックスブロック中に包埋した。
生物発光データのイメージングと定量
マウス体重1kgあたり300 mgでルシフェリン(D-ルシフェリン、Caliper Life Sciences, Hopkinton, MA)を皮下注射した後、マウスを3.5%イソフルランで麻酔した。D-ルシフェリン注射の10分後、Xenogen IVIS Spectrumイメージングプラットフォーム(PerkinElmer、MA)を使って、3.5%イソフルラン麻酔薬を連続的に投与しながら全身スキャンを行った。関連のある領域に渡って関心領域(ROI)を手動で選択した。測定された強度を1ROIの中の表面放射輝度(photons/sec/cm2/sr)(sr=ステラジアン)として与えた。
マウス体重1kgあたり300 mgでルシフェリン(D-ルシフェリン、Caliper Life Sciences, Hopkinton, MA)を皮下注射した後、マウスを3.5%イソフルランで麻酔した。D-ルシフェリン注射の10分後、Xenogen IVIS Spectrumイメージングプラットフォーム(PerkinElmer、MA)を使って、3.5%イソフルラン麻酔薬を連続的に投与しながら全身スキャンを行った。関連のある領域に渡って関心領域(ROI)を手動で選択した。測定された強度を1ROIの中の表面放射輝度(photons/sec/cm2/sr)(sr=ステラジアン)として与えた。
実験の終了は、D-ルシフェリン注射の10分後の頸椎脱臼により行い、生体外(ex vivo)生物発光の評価を可能にした。着目の腫瘍と臓器を回収し、IVISスキャナーを使って40分間生体外イメージングした。
アルブミン注射と試料調製
Alexa Fluor 680標識アルブミン変異体を、マウスの尾静脈に2 mg/mLで静注した。注射後、舌から(1分目の試料)並びに、尾に切り目を付けることにより4時間、24時間、48時間および72時間目に、ヘパリン被覆毛細管(HirschmannR(登録商標)Laborgerate GmbH & Co.)中に血液試料を採取した。それらの試料を遠心管に移し、遠心分離して血清から血液細胞を分画した。試料はスキャンを実施するまで4℃で保存した。
Alexa Fluor 680標識アルブミン変異体を、マウスの尾静脈に2 mg/mLで静注した。注射後、舌から(1分目の試料)並びに、尾に切り目を付けることにより4時間、24時間、48時間および72時間目に、ヘパリン被覆毛細管(HirschmannR(登録商標)Laborgerate GmbH & Co.)中に血液試料を採取した。それらの試料を遠心管に移し、遠心分離して血清から血液細胞を分画した。試料はスキャンを実施するまで4℃で保存した。
結果
図3Aに描写した結果は、アルブミン変異体の半減期と、対応する指数傾向曲線を示す。傾向曲線は、低結合剤の場合は最も急勾配であり、高結合剤の場合はより水平であると観察され、高結合剤では半減期がより長いことを意味する。この結果は、全てのアルブミン型についての計算半減期値に関する図3Bにおいても示される。最長の半減期は高結合剤の場合に観察された。
図3Aに描写した結果は、アルブミン変異体の半減期と、対応する指数傾向曲線を示す。傾向曲線は、低結合剤の場合は最も急勾配であり、高結合剤の場合はより水平であると観察され、高結合剤では半減期がより長いことを意味する。この結果は、全てのアルブミン型についての計算半減期値に関する図3Bにおいても示される。最長の半減期は高結合剤の場合に観察された。
図4に示される結果は、臓器と腫瘍の生体外での蛍光強度を示し、全組織と腫瘍が選択される。最高の蛍光強度は、全てのアルブミン変異体について、他の臓器に比較して腫瘍に観察された。
代わりの比較法では、全臓器と腫瘍について一定の関心領域(ROI)が選択され、その結果が図5に示される。ここでは臓器に比較して腫瘍にアルブミン変異体が蓄積することが明らかに観察され、高結合剤を使用した場合に最高の程度に蓄積することが観察された。
図6は、生物発光を測定することによる腫瘍の局在化を示し(上のパネル)、これはスペクトル・アンミキシング後の蛍光により測定されたアルブミン変異体の存在(下のパネル)と一致し、腫瘍におけるアルブミン変異体の蓄積の可視的表示(ビジュアル表示)を与える。
図7に与えられる結果は、腫瘍の重量に対して調整されたアルブミン変異体の蛍光強度を示す。腫瘍は壊死と浮腫組織から成ることがあるので、図8に示される生物発光を利用して、ルシフェラーゼを発現している生存腫瘍細胞に対する調整を行った。ここでは、他のアルブミン変異体よりも多く、高結合剤ルブミン変異体が蓄積することが観察される。
結論
腫瘍における最大の蓄積は、生物発光を利用して生存腫瘍細胞について補正すると、高結合剤ルブミン変異体を使った場合に観察される。
腫瘍における最大の蓄積は、生物発光を利用して生存腫瘍細胞について補正すると、高結合剤ルブミン変異体を使った場合に観察される。
実施例4
マウスにおける静脈内注射後のヒト異種移植片での改変型アルブミン高結合剤の蓄積/ターゲティング。異種移植片モデル2:乳癌異種移植片(無蛍光細胞)
マウスにおける静脈内注射後のヒト異種移植片での改変型アルブミン高結合剤の蓄積/ターゲティング。異種移植片モデル2:乳癌異種移植片(無蛍光細胞)
研究目的
無蛍光の腫瘍異種移植片におけるアルブミンの生体内分布と半減期を調べること。
無蛍光の腫瘍異種移植片におけるアルブミンの生体内分布と半減期を調べること。
材料と方法
アルブミン変異体
Alexa Fluor 680標識改変型アルブミン変異体はAlbumedix Ltd.より提供された。
・HSA-E492G, K573P, K574H, Q580K(高結合剤II)(HBII)(配列番号5)
・HSA-K500A(低結合剤)(LB)(配列番号6)
アルブミン変異体
Alexa Fluor 680標識改変型アルブミン変異体はAlbumedix Ltd.より提供された。
・HSA-E492G, K573P, K574H, Q580K(高結合剤II)(HBII)(配列番号5)
・HSA-K500A(低結合剤)(LB)(配列番号6)
生体内試験
全ての動物実験は、オルフス大学の生物臨床医学衛生研究所(the Institute of Biomedicine at Health)の動物施設内で実施した。全ての実験は、デンマーク国実験動物調査団(Danish Experimental Animal Inspectorate)により承認された。
全ての動物実験は、オルフス大学の生物臨床医学衛生研究所(the Institute of Biomedicine at Health)の動物施設内で実施した。全ての実験は、デンマーク国実験動物調査団(Danish Experimental Animal Inspectorate)により承認された。
細胞培養
ヒト乳癌細胞系MCF-7を、5%CO2を有する加湿空気雰囲気下で37℃にて培養した。MCF-7細胞を、10%ウシ胎仔血清(Gibco, Life Technologies, #10270-106)、1%ペニシリン/ストレプトマイシン(Gibco, Life Technologies, #15140-122)および10μg/mLインシュリン(Sigma, #I9278)が補足されたDMEM(Gibco, Life Technologies, #61965-026)培地中で増殖させた。
ヒト乳癌細胞系MCF-7を、5%CO2を有する加湿空気雰囲気下で37℃にて培養した。MCF-7細胞を、10%ウシ胎仔血清(Gibco, Life Technologies, #10270-106)、1%ペニシリン/ストレプトマイシン(Gibco, Life Technologies, #15140-122)および10μg/mLインシュリン(Sigma, #I9278)が補足されたDMEM(Gibco, Life Technologies, #61965-026)培地中で増殖させた。
ヒト腫瘍異種移植片
細胞接種の3日前に、β-エストラジオールペレット(0.5 mg、60日リリース;Innovative Research of America, Sarasota, FL, USA)をマウスの頸部に皮下移植し、腫瘍成長を維持した。MCF-7細胞〔PBSとマトリゲル(Matrigel)のゲルトレックス(GeltrexTM;LDEV不含有の成長因子低減基底膜抽出物(Gibco, Life Technologies))との1:1溶液400μL中の7.5×106細胞〕を、各マウス(11〜16週齢、雌、Balb/cAnRj-Foxn1-nu、Janvier)の右脇腹に皮下注射した。ペレットの導入と腫瘍細胞の接種のために麻酔薬としてイソフルランを使用した。腫瘍の大きさは、一週間に2〜3回、長さと幅のキャリパー測定により測定し、腫瘍体積を算出した。15日間の腫瘍増殖後にアルブミン変異体の注射を行った。予め、各群がほぼ同じ総腫瘍体積(腫瘍体積=n/6×L×W2)を有するようにマウスを無作為に割り付けることにより、マウスを異なる処置群に割り当てた(HBII、N=7;WT、N=6;LB、N=6;PBS、N=3)。
細胞接種の3日前に、β-エストラジオールペレット(0.5 mg、60日リリース;Innovative Research of America, Sarasota, FL, USA)をマウスの頸部に皮下移植し、腫瘍成長を維持した。MCF-7細胞〔PBSとマトリゲル(Matrigel)のゲルトレックス(GeltrexTM;LDEV不含有の成長因子低減基底膜抽出物(Gibco, Life Technologies))との1:1溶液400μL中の7.5×106細胞〕を、各マウス(11〜16週齢、雌、Balb/cAnRj-Foxn1-nu、Janvier)の右脇腹に皮下注射した。ペレットの導入と腫瘍細胞の接種のために麻酔薬としてイソフルランを使用した。腫瘍の大きさは、一週間に2〜3回、長さと幅のキャリパー測定により測定し、腫瘍体積を算出した。15日間の腫瘍増殖後にアルブミン変異体の注射を行った。予め、各群がほぼ同じ総腫瘍体積(腫瘍体積=n/6×L×W2)を有するようにマウスを無作為に割り付けることにより、マウスを異なる処置群に割り当てた(HBII、N=7;WT、N=6;LB、N=6;PBS、N=3)。
マウスの頸椎脱臼により実験を終了し、臓器と腫瘍を回収し、IVISスキャナーを使ってスキャンし、RNA単離のために急速凍結させ、そして/または組織学検査のため10%中性緩衝化生理食塩水中に保存した。
アルブミン注射と試料調製
Alexa Fluor 680標識アルブミン変異体を、マウスの尾静脈に2 mg/mLで静注した。注射後、舌から(1分目の試料)並びに、尾に切り目を付けることにより4時間、24時間、48時間および72時間目に、ヘパリン被覆毛細管(HirschmannR(登録商標)Laborgerate GmbH & Co.)中に血液試料を採取した。それらの試料を遠心管に移し、遠心分離して血清から血液細胞を分画した。試料はスキャンを実施するまで4℃で保存した。
Alexa Fluor 680標識アルブミン変異体を、マウスの尾静脈に2 mg/mLで静注した。注射後、舌から(1分目の試料)並びに、尾に切り目を付けることにより4時間、24時間、48時間および72時間目に、ヘパリン被覆毛細管(HirschmannR(登録商標)Laborgerate GmbH & Co.)中に血液試料を採取した。それらの試料を遠心管に移し、遠心分離して血清から血液細胞を分画した。試料はスキャンを実施するまで4℃で保存した。
蛍光データのイメージングと定量
マウスを3.5%イソフルランで連続麻酔し、Xenogen IVIS Spectrumイメージングプラットフォーム(PerkinElmer、MA)を使って全身スキャンを行った。臓器と腫瘍をIVISスキャナー中で生体外スキャンした。1つの励起波長(ex: 675 nm)を使って4つの異なる発光波長(発光: 720 nm、740 nm、760 nm、780 nm)でスペクトル・アンミキシングを実施した。
マウスを3.5%イソフルランで連続麻酔し、Xenogen IVIS Spectrumイメージングプラットフォーム(PerkinElmer、MA)を使って全身スキャンを行った。臓器と腫瘍をIVISスキャナー中で生体外スキャンした。1つの励起波長(ex: 675 nm)を使って4つの異なる発光波長(発光: 720 nm、740 nm、760 nm、780 nm)でスペクトル・アンミキシングを実施した。
比較用にLiving Image 4.3.1ソフトウェアを使って画像をグループとしてロードし、関連のある領域に渡って関心領域(ROI)を手動で選択した。測定された強度を表面平均放射輝度(photons/sec/cm2/sr)として与えた。自家蛍光が非常に低かったため、4時間目と21時間目の全身スキャンにはスペクトル・アンミキシングを実施しなかった。代わりにスキャンの励起波長:675 nmと発光波長:720 nmを使用した。
結果
図9Aに描写した結果は、アルブミン変異体の半減期と、対応する指数傾向曲線を示す。傾向曲線は、低結合剤の場合は最も急勾配であり、高結合剤の場合はより水平であると観察され、高結合剤では半減期がより長いことを意味する。
図9Aに描写した結果は、アルブミン変異体の半減期と、対応する指数傾向曲線を示す。傾向曲線は、低結合剤の場合は最も急勾配であり、高結合剤の場合はより水平であると観察され、高結合剤では半減期がより長いことを意味する。
図9Bの結果は、24時間までの半減期の初期段階を示す。高結合剤と野生型が低結合剤よりもずっと水平状態になる。
24〜72時間の半減期の後期段階が図9Cに示され、この図は、傾向曲線がそれほど急勾配でないため高結合剤IIが野生型や低結合剤に比較して長い半減期を有することを示す。
図9Dの表は、全てのアルブミン変異体についての計算半減期値を要約し、これは全時間範囲(R2<0.95)と初期(R2<0.96)の両者に比較して後期の傾向曲線がより良好な適合(R2値が約0.99)が観察されることを示す。高結合剤IIは、後期の場合約23時間という最高の半減期を示す。従って、高結合剤IIの半減期が最大であるので、それらのアルブミン変異体は生体内で期待通りに挙動し、よって本研究に有用である。
図10は、様々な臓器と腫瘍におけるアルブミン変異体の蛍光強度を示す。この図から全てのアルブミン変異体が腫瘍に蓄積し、高結合剤IIが最大の程度に蓄積することが観察される。
図11は、腫瘍の蛍光の結果のみを示し、高結合剤IIで最大量が観察されることを示す。
図12は、腫瘍重量について調整しそして一定の大きさの関心領域(ROI)を有する時の結果を示し、これは図11と同じパターン、すなわち高結合剤IIにより腫瘍中に最大の蓄積が存在することを示す。
図11は、腫瘍の蛍光の結果のみを示し、高結合剤IIで最大量が観察されることを示す。
図12は、腫瘍重量について調整しそして一定の大きさの関心領域(ROI)を有する時の結果を示し、これは図11と同じパターン、すなわち高結合剤IIにより腫瘍中に最大の蓄積が存在することを示す。
図13では、関心領域として腫瘍全体が選択されたが、これはパターンに顕著な影響を及ぼさなかった。同様に、高結合剤IIが同程度に蓄積する。
図14Aは、投与21時間後のマウスにおける蛍光アルブミンの分布の視覚的印象を与える。この図ではそれらが全て容易に可視化されている。
図14Bは、72時間後のアルブミン変異体分布を示し、全てのアルブミン変異体について腫瘍部位の周辺にまだ蛍光強度が観察される。
図14Aは、投与21時間後のマウスにおける蛍光アルブミンの分布の視覚的印象を与える。この図ではそれらが全て容易に可視化されている。
図14Bは、72時間後のアルブミン変異体分布を示し、全てのアルブミン変異体について腫瘍部位の周辺にまだ蛍光強度が観察される。
結論
これらの結果は、アルブミンFcRn高結合剤変異体による腫瘍中への最大蓄積が、FcRnにより指令される蓄積であることの示唆であることを示す。
これらの結果は、アルブミンFcRn高結合剤変異体による腫瘍中への最大蓄積が、FcRnにより指令される蓄積であることの示唆であることを示す。
実施例5
目的
炎症性疾患のFcRnを発現する亜型の同定
目的
炎症性疾患のFcRnを発現する亜型の同定
材料と方法
4例の関節リウマチ標本を分析した。
ヒト関節リウマチ組織標本は、デンマーク国オルフス市8000にあるオルフス大学の生物臨床医学部により提供された。
4例の関節リウマチ標本を分析した。
ヒト関節リウマチ組織標本は、デンマーク国オルフス市8000にあるオルフス大学の生物臨床医学部により提供された。
ヒト組織標本の免疫組織化学分析
ヒト組織をホルマリン固定し、パラフィン包埋した(FFPE)。FFPEヒト組織片をTissue Clearキシレン代替品(Tek/Sakura Finetek社)で処理し、スライドを脱パラフィンした。次に、エタノール溶液を100%から75%に漸減することによりスライドを再水和し、最後に冷水道水流水に移した。
ヒト組織をホルマリン固定し、パラフィン包埋した(FFPE)。FFPEヒト組織片をTissue Clearキシレン代替品(Tek/Sakura Finetek社)で処理し、スライドを脱パラフィンした。次に、エタノール溶液を100%から75%に漸減することによりスライドを再水和し、最後に冷水道水流水に移した。
抗原回復は、クエン酸緩衝液pH 6.0中で800 Wで8分間マイクロ波オーブン中で加熱し、次いで560 Wで14分間×2回加熱し、最後に20分間冷ますことにより行った。
染色手順はAutostainer Link 48装置(Dako社)上で実施した。タンパク質ブロッキング剤(Dako社)を使ってスライドをブロックし、一次ポリクローナルウサギ抗ヒトFCGRT抗体(HPA012122、Sigma社)を使って1:200希釈で染色した。
染色手順はAutostainer Link 48装置(Dako社)上で実施した。タンパク質ブロッキング剤(Dako社)を使ってスライドをブロックし、一次ポリクローナルウサギ抗ヒトFCGRT抗体(HPA012122、Sigma社)を使って1:200希釈で染色した。
可視化には、Dako EnVisionTM(商標)FLEX(キットK8023)検出システムを使用した。このシステムは、過酸化水素を含む内因性ペルオキシダーゼブロッキング剤(EnVisionTM FLEX Peroxydase-blocking Reagent, SM801)、HRPおよびウサギ免疫グロブリンに対するヤギ第二抗体が連結されたポリマー(EnVisionTM FLEX/HRP, SM802)、DAB色原体(EnvisionTM FLEX DAB+Chromogen, DM827)および最後にヘマトキシリン(EnVisionTM FLEX Hematoxylin, K8008)を含んだ。
結果
図15に与えられる結果は、関節リウマチ標本の代表例を示し、関節/滑膜組織における高レベルのFcRn発現を示すことが同定された。
図15に与えられる結果は、関節リウマチ標本の代表例を示し、関節/滑膜組織における高レベルのFcRn発現を示すことが同定された。
結論
FcRn受容体が関節リウマチ標本の関節/滑膜組織中で発現されることがわかった。
FcRn受容体が関節リウマチ標本の関節/滑膜組織中で発現されることがわかった。
実施例6
患者の癌生検組織および近隣の正常な健常組織におけるFcRn発現
研究目的
正常な健常組織に比較した多数の癌型におけるFcRn発現の検出
患者の癌生検組織および近隣の正常な健常組織におけるFcRn発現
研究目的
正常な健常組織に比較した多数の癌型におけるFcRn発現の検出
次の癌型を調べた:
・結腸直腸癌(51例)
・乳癌(ルミナルB型(26例)とトリプルネガティブ型(51例))
・腎臓癌(腎明細胞癌(41例))
・膵臓癌(47例)
・頸癌(4例)
・頭頸部癌(10例)
・肺癌(非小細胞肺癌(11例))
・卵巣癌(33例)
・膀胱癌(36例)
標本の数がカッコ内に示される。
・結腸直腸癌(51例)
・乳癌(ルミナルB型(26例)とトリプルネガティブ型(51例))
・腎臓癌(腎明細胞癌(41例))
・膵臓癌(47例)
・頸癌(4例)
・頭頸部癌(10例)
・肺癌(非小細胞肺癌(11例))
・卵巣癌(33例)
・膀胱癌(36例)
標本の数がカッコ内に示される。
材料と方法
ヒト癌組織標本の免疫組織学的分析
ヒト組織をホルマリン固定し、パラフィン包埋した(FFPE)。FFPEヒト組織片をTissue Clearキシレン代替品(Tek/Sakura Finetek社製)で処理し、スライドを脱パラフィンした。次に、エタノール溶液を100%から75%に徐々に減らすことによりスライドを再水和し、最後に冷水道水に移した。
ヒト癌組織標本の免疫組織学的分析
ヒト組織をホルマリン固定し、パラフィン包埋した(FFPE)。FFPEヒト組織片をTissue Clearキシレン代替品(Tek/Sakura Finetek社製)で処理し、スライドを脱パラフィンした。次に、エタノール溶液を100%から75%に徐々に減らすことによりスライドを再水和し、最後に冷水道水に移した。
抗原回復は、クエン酸緩衝液pH 6.0中で800 Wで8分間マイクロ波オーブン中で加熱し、次いで560 Wで14分間×2回加熱し、最後に20分間冷ますことにより行った。
染色手順はAutostainer Link 48装置(Dako社)上で実施した。タンパク質ブロッキング剤(Dako社)を使ってスライドをブロックし、一次ポリクローナル・ウサギ抗ヒトFCGRT抗体(HPA012122、Sigma社)を使って1:200希釈で染色した。
染色手順はAutostainer Link 48装置(Dako社)上で実施した。タンパク質ブロッキング剤(Dako社)を使ってスライドをブロックし、一次ポリクローナル・ウサギ抗ヒトFCGRT抗体(HPA012122、Sigma社)を使って1:200希釈で染色した。
可視化には、Dako EnVisionTM(商標)(キットK8023)検出システムを使用した。このシステムは、過酸化水素を含む内因性ペルオキシダーゼブロック剤(EnVisionTM FLEX Peroxydase-blicking Reagent, SM801)、西洋わさびペルオキシダーゼ(HRP)およびウサギ免疫グロブリンに対するヤギ第二抗体が連結されたポリマー(EnVisionTM FLEX/HRP, SM802)、DAB色原体(EnvisionTM FLEX DAB+Chromogen, DM827)および最後にヘマトキシリン(EnVisionTM FLEX Hematoxylin, K8008)を含んだ。
スコア評価
標本をFcRn発現レベルに基づいて病理学者によりグループ分けし、4つの群に分類した(陰性、低、中および高)。
標本をFcRn発現レベルに基づいて病理学者によりグループ分けし、4つの群に分類した(陰性、低、中および高)。
結果
図16A〜Jに与えられた結果は、次の癌型について、対応する健常組織に比較して高いFcRn発現レベルを示す:結腸直腸癌、乳癌亜型ルミナルA型とトリプルネガティブ型、腎臓癌、膵臓癌、頸癌、頭頸部癌、肺癌(非小細胞肺癌)、卵巣癌および膀胱癌。
図16A〜Jに与えられた結果は、次の癌型について、対応する健常組織に比較して高いFcRn発現レベルを示す:結腸直腸癌、乳癌亜型ルミナルA型とトリプルネガティブ型、腎臓癌、膵臓癌、頸癌、頭頸部癌、肺癌(非小細胞肺癌)、卵巣癌および膀胱癌。
結論
結腸直腸癌、乳癌、腎臓癌(腎明細胞癌)、膵臓癌、膀胱癌、頸癌、頭頸部癌、肺癌(非小細胞肺癌)および卵巣癌において、FcRn受容体を過剰発現する(健常/正常組織に比較して)亜型が存在することが発見された。
結腸直腸癌、乳癌、腎臓癌(腎明細胞癌)、膵臓癌、膀胱癌、頸癌、頭頸部癌、肺癌(非小細胞肺癌)および卵巣癌において、FcRn受容体を過剰発現する(健常/正常組織に比較して)亜型が存在することが発見された。
そのような亜型が同定された時、FcRn受容体は、それらの特定の亜型のターゲット癌治療のための結合剤として使用することができると思われる。
同様に、本明細書に記載のアルブミンのようなFcRn結合剤に、イメージング剤を連結させることにより、FcRn受容体を癌の生体内イメージング用の結合成分として使用することができる。
更に、FcRn受容体は、本明細書に記載のアルブミンのようなFcRn結合剤に、イメージング剤と治療薬を結合させることにより、癌の生体内イメージングと治療用途のための統合型結合成分として使用することができる。
同様に、本明細書に記載のアルブミンのようなFcRn結合剤に、イメージング剤を連結させることにより、FcRn受容体を癌の生体内イメージング用の結合成分として使用することができる。
更に、FcRn受容体は、本明細書に記載のアルブミンのようなFcRn結合剤に、イメージング剤と治療薬を結合させることにより、癌の生体内イメージングと治療用途のための統合型結合成分として使用することができる。
実施例7
マウスへの静注後のヒト異種移植片における改変型アルブミン高結合剤の蓄積/ターゲティング
研究目的
アルブミン変異体の腫瘍蓄積を調べること。
マウスへの静注後のヒト異種移植片における改変型アルブミン高結合剤の蓄積/ターゲティング
研究目的
アルブミン変異体の腫瘍蓄積を調べること。
材料と方法
アルブミン変異体:
Alexa Fluor 680標識改変型アルブミン変異体はAlbumedix Ltd. (Nottingham, UK)により提供された。
・HSA-K573P(高結合剤I)(HBI)(配列番号4)
・HSA-K500A(低結合剤)(LB)(配列番号6)
アルブミン変異体:
Alexa Fluor 680標識改変型アルブミン変異体はAlbumedix Ltd. (Nottingham, UK)により提供された。
・HSA-K573P(高結合剤I)(HBI)(配列番号4)
・HSA-K500A(低結合剤)(LB)(配列番号6)
生体内試験:
全ての動物実験は、オルフス大学の生物臨床医学衛生研究所(the Institute of Biomedicine at Health)の動物施設内で実施した。全ての実験は、デンマーク国実験動物調査団(Danish Experimental Animal Inspectorate)により承認された。
全ての動物実験は、オルフス大学の生物臨床医学衛生研究所(the Institute of Biomedicine at Health)の動物施設内で実施した。全ての実験は、デンマーク国実験動物調査団(Danish Experimental Animal Inspectorate)により承認された。
細胞培養:
ルシフェラーゼ発現乳癌細胞系であるヒト癌細胞系(MDA-MB-231/Luc)を本実験に使用した。細胞を10%ウシ胎仔血清(FBS)(Gibco, Life Technologies, #10270-106)、0.1 mM 35 MEM 非必須アミノ酸(Gibco, Life Technologies, #11140-035)、2 mM L-グルタミン(Lonza, BE17-605E)および1%ペニシリン/ストレプトマイシン(Gibco, Life Technologies, #15140-122)が補足されたDMEM(4500 mg/mL D-グルコース、L-グルタミン)(Gibco, Life Technologies, #41965-039)培地中に維持した。
ルシフェラーゼ発現乳癌細胞系であるヒト癌細胞系(MDA-MB-231/Luc)を本実験に使用した。細胞を10%ウシ胎仔血清(FBS)(Gibco, Life Technologies, #10270-106)、0.1 mM 35 MEM 非必須アミノ酸(Gibco, Life Technologies, #11140-035)、2 mM L-グルタミン(Lonza, BE17-605E)および1%ペニシリン/ストレプトマイシン(Gibco, Life Technologies, #15140-122)が補足されたDMEM(4500 mg/mL D-グルコース、L-グルタミン)(Gibco, Life Technologies, #41965-039)培地中に維持した。
生物発光性腫瘍異種移植片
乳癌MDA-MB231/Luc細胞〔PBSとマトリゲル(Matrigel)であるゲルトレックス(GeltrexTM;LDEV不含有の成長因子低減基底膜抽出物(Gibco, Life Technologies))との1:1溶液400μL中の4×106細胞〕を、各マウス(11週齢、雌、Balb/cAnRj-Foxn1-nu、Janvier)の右脇腹に皮下注射した。腫瘍細胞の接種のために麻酔薬としてイソフルランを使用した。腫瘍を可視できるまで(11日間)増殖させた後、各群がほぼ同じ総腫瘍体積を有する4つの群(処置群N=4、対照群N=3)にマウスを無作為に割り付けた。処置は、処置群では10 mg/kg蛍光アルブミン、対照群では150μL PBSを使って行った。処置後各日において、腫瘍の最大縦径(長さ)と幅径を使ったキャリパー測定により、腫瘍の大きさを測定した。腫瘍体積は次の式により算出した:
腫瘍体積=1/2(長さ×幅2)。
乳癌MDA-MB231/Luc細胞〔PBSとマトリゲル(Matrigel)であるゲルトレックス(GeltrexTM;LDEV不含有の成長因子低減基底膜抽出物(Gibco, Life Technologies))との1:1溶液400μL中の4×106細胞〕を、各マウス(11週齢、雌、Balb/cAnRj-Foxn1-nu、Janvier)の右脇腹に皮下注射した。腫瘍細胞の接種のために麻酔薬としてイソフルランを使用した。腫瘍を可視できるまで(11日間)増殖させた後、各群がほぼ同じ総腫瘍体積を有する4つの群(処置群N=4、対照群N=3)にマウスを無作為に割り付けた。処置は、処置群では10 mg/kg蛍光アルブミン、対照群では150μL PBSを使って行った。処置後各日において、腫瘍の最大縦径(長さ)と幅径を使ったキャリパー測定により、腫瘍の大きさを測定した。腫瘍体積は次の式により算出した:
腫瘍体積=1/2(長さ×幅2)。
実験期間の終わりに、マウスを麻酔下で頸椎脱臼により犠牲にし、腫瘍と臓器を回収した。血液と臓器をIVIS(登録商標)Spectrum Bioimager (PerkinElmer, Waltham, MA)を使って分析した。スペクトル・アンミキシングを使ってバックグラウンド自家蛍光を除去し、続いてLiving Imageソフトウェア、バージョン4.3.1 (PerkinElmer)を使ってデータ解析を行った。
腫瘍、肝臓および腎臓をRNA単離のため急速凍結(snap freeze)させ、免疫組織化学的研究用に保存するため中性緩衝化ホルマリン液(10%)中で固定した。72時間後、一連の段階的エタノール浴を使って水を置換することにより組織を脱水し、次いでワックス(蝋)で浸潤させた。浸潤組織をワックスブロック中に包埋した。
生物発光データのイメージングと定量
マウス体重1kgあたり300 mgでルシフェリン(D-ルシフェリン、Caliper Life Sciences, Hopkinton, MA)を皮下注射した後、マウスを3.5%イソフルランで麻酔した。D-ルシフェリン注射の10分後、Xenogen IVIS Spectrumイメージングプラットフォーム(PerkinElmer、MA)を使って、3.5%イソフルラン麻酔薬を連続的に投与しながら全身スキャンを行った。関連のある領域に渡って関心領域(ROI)を手動で選択した。測定された強度を1ROIの中の表面放射輝度(photons/s/cm2/sr)(sr=ステラジアン)として与えた。
マウス体重1kgあたり300 mgでルシフェリン(D-ルシフェリン、Caliper Life Sciences, Hopkinton, MA)を皮下注射した後、マウスを3.5%イソフルランで麻酔した。D-ルシフェリン注射の10分後、Xenogen IVIS Spectrumイメージングプラットフォーム(PerkinElmer、MA)を使って、3.5%イソフルラン麻酔薬を連続的に投与しながら全身スキャンを行った。関連のある領域に渡って関心領域(ROI)を手動で選択した。測定された強度を1ROIの中の表面放射輝度(photons/s/cm2/sr)(sr=ステラジアン)として与えた。
実験の終了は、D-ルシフェリン注射の10分後の頸椎脱臼により行い、生体外(ex vivo)生物発光の評価を可能にした。着目の腫瘍と臓器を回収し、IVISスキャナーを使って40分間生体外イメージングした。
アルブミン注射と試料調製
Alexa Fluor 680標識アルブミン変異体を、マウスの尾静脈に2 mg/mLで静注した。注射後、舌から(1分目の試料)並びに、尾に切り目を付けることにより4時間、24時間、48時間および72時間目に、ヘパリン被覆毛細管(HirschmannR(登録商標)Laborgerate GmbH & Co.)中に血液試料を採取した。それらの試料を遠心管に移し、遠心分離して血清から血液細胞を分画した。試料はスキャンを実施するまで4℃で保存した。
Alexa Fluor 680標識アルブミン変異体を、マウスの尾静脈に2 mg/mLで静注した。注射後、舌から(1分目の試料)並びに、尾に切り目を付けることにより4時間、24時間、48時間および72時間目に、ヘパリン被覆毛細管(HirschmannR(登録商標)Laborgerate GmbH & Co.)中に血液試料を採取した。それらの試料を遠心管に移し、遠心分離して血清から血液細胞を分画した。試料はスキャンを実施するまで4℃で保存した。
結果
図17の上のパネルは、蛍光アルブミン変異体HBIが、腫瘍部位においてWT変異体よりも大量の蓄積を示すことを表す(PBS対照は全く蛍光を示さない)。図17の下のパネルは、ルシフェリン-D注射後のMDAMB231/Luc細胞の細胞性生物発光を示し、PBS、WTおよびHBI処置群の各マウスについての生存腫瘍細胞を描写する。
図17の結果は、高結合性アルブミン変異体が腫瘍部位に高度に結合すること、および蛍光が腫瘍細胞の生物発光と同一場所に局在化されることを示す。
図17の上のパネルは、蛍光アルブミン変異体HBIが、腫瘍部位においてWT変異体よりも大量の蓄積を示すことを表す(PBS対照は全く蛍光を示さない)。図17の下のパネルは、ルシフェリン-D注射後のMDAMB231/Luc細胞の細胞性生物発光を示し、PBS、WTおよびHBI処置群の各マウスについての生存腫瘍細胞を描写する。
図17の結果は、高結合性アルブミン変異体が腫瘍部位に高度に結合すること、および蛍光が腫瘍細胞の生物発光と同一場所に局在化されることを示す。
結論
高結合剤アルブミン変異体を用いた場合に腫瘍における高度のターゲティング/蓄積が観察される。これは、標識されたFcRn結合剤(例えばアルブミン高結合剤)が生体内でのFcRn過剰発現を可視化するために使用できることを明白に示す。
高結合剤アルブミン変異体を用いた場合に腫瘍における高度のターゲティング/蓄積が観察される。これは、標識されたFcRn結合剤(例えばアルブミン高結合剤)が生体内でのFcRn過剰発現を可視化するために使用できることを明白に示す。
実施例8
結腸直腸細胞系への蛍光アルブミン変異体のフローサイトメトリーによる細胞結合/取り込みの分析
結腸直腸細胞系への蛍光アルブミン変異体のフローサイトメトリーによる細胞結合/取り込みの分析
研究目的
実験前にHT-29 WTおよびHT-29ノックアウト細胞をウェルプレート(24ウェルまたは48ウェル)中に播種し、周密性に達するまで維持した。細胞を、5%CO2を含む加湿雰囲気下で、1.0 M MES溶液を使って、フェノールレッド不含有のハンクス平衡塩類溶液(HBSS)中のAlexa488で標識された8μM蛍光アルブミンで37℃にて2時間処理した。試料溶液を取り出し、氷冷HBSSを使って3回洗浄を行った。トリプシン処理により細胞を収集し、4℃にて300×gで5分間遠心分離し、ついで再洗浄し、1%ウシ血清アルブミン(BSA)と0.1%NaN3を含む滅菌濾過済PBS 400μL中に再懸濁した。試料をGalliosフローサイトメーター(Beckman Coulter社製)を使って、488 nmレーザーと525/40 nmフィルター(FL1)を用いて分析した。データ処理はKaluza 1.2ソフトウェア(Beckman Coulter)を使って実施した。
実験前にHT-29 WTおよびHT-29ノックアウト細胞をウェルプレート(24ウェルまたは48ウェル)中に播種し、周密性に達するまで維持した。細胞を、5%CO2を含む加湿雰囲気下で、1.0 M MES溶液を使って、フェノールレッド不含有のハンクス平衡塩類溶液(HBSS)中のAlexa488で標識された8μM蛍光アルブミンで37℃にて2時間処理した。試料溶液を取り出し、氷冷HBSSを使って3回洗浄を行った。トリプシン処理により細胞を収集し、4℃にて300×gで5分間遠心分離し、ついで再洗浄し、1%ウシ血清アルブミン(BSA)と0.1%NaN3を含む滅菌濾過済PBS 400μL中に再懸濁した。試料をGalliosフローサイトメーター(Beckman Coulter社製)を使って、488 nmレーザーと525/40 nmフィルター(FL1)を用いて分析した。データ処理はKaluza 1.2ソフトウェア(Beckman Coulter)を使って実施した。
結果
図18に示された結果は、FcRn高結合剤が、FcRnを発現している細胞系に結合する(および/または取り込まれる)ことを明らかに示し、一方でFcRnノックアウト(KO)細胞系への結合はずっと少ない。このことは、高結合性変異体によるFcRn発現細胞中への選択的結合/取り込みを証明する。
図18に示された結果は、FcRn高結合剤が、FcRnを発現している細胞系に結合する(および/または取り込まれる)ことを明らかに示し、一方でFcRnノックアウト(KO)細胞系への結合はずっと少ない。このことは、高結合性変異体によるFcRn発現細胞中への選択的結合/取り込みを証明する。
図中の挿入部分は、Ht-29 FcRnノックアウト(KO)細胞系に全くFcRn発現が検出されないこと、およびHT-29 WT細胞系がFcRn陽性であることを証明するウエスタンブロットを示す。
結論
これらの結果は、薬剤に連結されたFcRn結合剤を、FcRnを過剰発現している癌を選択的にターゲティングするのに利用できることを証明する。連結された蛍光分子は、そのような薬剤のモデルとして機能する。
これらの結果は、薬剤に連結されたFcRn結合剤を、FcRnを過剰発現している癌を選択的にターゲティングするのに利用できることを証明する。連結された蛍光分子は、そのような薬剤のモデルとして機能する。
実施例9
MDAMB231/LucおよびHT-29細胞系におけるFcRn発現のウエスタンブロット検出
研究目的
MDAMB231/LucおよびHT-29細胞系におけるFcRn発現の検出
MDAMB231/LucおよびHT-29細胞系におけるFcRn発現のウエスタンブロット検出
研究目的
MDAMB231/LucおよびHT-29細胞系におけるFcRn発現の検出
材料と方法
ウエスタンブロット
細胞の収穫は、HALT(カタログ#78438、Thermo Fisher Scientific)を含む冷PBSを使って行い、細胞をかき取り、2500 rpmで8分間遠心分離した。セラミックビーズと混合した0.1%SDSを含むPI3キナーゼ緩衝液を使って、4℃で30分間振盪し、次いで間に規則的な渦動攪拌しながら室温で30分間振盪することにより、細胞を均質化した。試料を13300 rpmで20分間遠心分離し、上清を更なる分析まで-80℃に維持した。Micro BCATM Protein Assay Kit(カタログ#23235, Thermo Scientific)を使ってタンパク質濃度測定を実施した。各試料10μgを加熱せずにLaemmliローディング緩衝液中に調製した。ウエスタンブロットは、4-15%のCriterion Stain-Free勾配ゲル(Bio-Rad, Hercules, Ca, USA)を使って行い、Bio-Rad Chemidoc MPイメージ装置を使って2分間紫外線(UV)暴露により可視化した。Trans-Blot Turbo装置(Bio-Rad)を使って、タンパク質を0.2μm PVDF膜(Trans-Blot Turbo, Bio-Rad, Hercules, CA, USA)に移行した。その膜の全タンパク質定量用にStain-Freeゲル写真を撮影し、ImageLab 4.1ソフトウェア(Bio-Rad)を使って測定した。TBS-T(0.01 M Tris, 0.15 M NaClおよび0.1%Tween 20)中の1%BSAを使って室温で1時間、膜をブロックした。一次抗体を1%BSAと0.01%アジ化ナトリウム中に希釈し、膜を4℃で一晩インキュベートした。使用した一次抗体は、1:500希釈されたAnti-FCGRT(HPA012122, Sigma Aldrich)であった。膜をTBS-T中で3回洗浄し、1:10000希釈された二次抗体のヤギ抗ウサギIgG-HRP(sc-2054, Santa Cruz Biotechnology)と共に室温で1.5時間インキュベートした。次いで膜をTBS-T中で3回洗浄し、Clarity Western ECL基質(Bio-Rad)と共にインキュベートし、ChemiDoc MPイメージ装置を使ってバンドを可視化し、そしてImageLab 4.1ソフトウェアを使って解析した。適当なローディング量の調節は、膜からの全タンパク質分析に基づいた(データは示していない)。
ウエスタンブロット
細胞の収穫は、HALT(カタログ#78438、Thermo Fisher Scientific)を含む冷PBSを使って行い、細胞をかき取り、2500 rpmで8分間遠心分離した。セラミックビーズと混合した0.1%SDSを含むPI3キナーゼ緩衝液を使って、4℃で30分間振盪し、次いで間に規則的な渦動攪拌しながら室温で30分間振盪することにより、細胞を均質化した。試料を13300 rpmで20分間遠心分離し、上清を更なる分析まで-80℃に維持した。Micro BCATM Protein Assay Kit(カタログ#23235, Thermo Scientific)を使ってタンパク質濃度測定を実施した。各試料10μgを加熱せずにLaemmliローディング緩衝液中に調製した。ウエスタンブロットは、4-15%のCriterion Stain-Free勾配ゲル(Bio-Rad, Hercules, Ca, USA)を使って行い、Bio-Rad Chemidoc MPイメージ装置を使って2分間紫外線(UV)暴露により可視化した。Trans-Blot Turbo装置(Bio-Rad)を使って、タンパク質を0.2μm PVDF膜(Trans-Blot Turbo, Bio-Rad, Hercules, CA, USA)に移行した。その膜の全タンパク質定量用にStain-Freeゲル写真を撮影し、ImageLab 4.1ソフトウェア(Bio-Rad)を使って測定した。TBS-T(0.01 M Tris, 0.15 M NaClおよび0.1%Tween 20)中の1%BSAを使って室温で1時間、膜をブロックした。一次抗体を1%BSAと0.01%アジ化ナトリウム中に希釈し、膜を4℃で一晩インキュベートした。使用した一次抗体は、1:500希釈されたAnti-FCGRT(HPA012122, Sigma Aldrich)であった。膜をTBS-T中で3回洗浄し、1:10000希釈された二次抗体のヤギ抗ウサギIgG-HRP(sc-2054, Santa Cruz Biotechnology)と共に室温で1.5時間インキュベートした。次いで膜をTBS-T中で3回洗浄し、Clarity Western ECL基質(Bio-Rad)と共にインキュベートし、ChemiDoc MPイメージ装置を使ってバンドを可視化し、そしてImageLab 4.1ソフトウェアを使って解析した。適当なローディング量の調節は、膜からの全タンパク質分析に基づいた(データは示していない)。
結果
図19に与えた結果は、MDAMB231/LucとHT-29細胞系がFcRnを発現していることを示す。
図19に与えた結果は、MDAMB231/LucとHT-29細胞系がFcRnを発現していることを示す。
結論
MDAMB231/Luc細胞系とHT-29細胞系は、マウス異種移植片の作製のために、および生体内FcRn結合剤実験または癌治療を実施するために有用な細胞系である。
MDAMB231/Luc細胞系とHT-29細胞系は、マウス異種移植片の作製のために、および生体内FcRn結合剤実験または癌治療を実施するために有用な細胞系である。
Claims (34)
- 癌を亜型分類し、癌を病期診断し、そして/または癌を発症するリスクを予測する方法であって、
a) 対象由来の生物学的試料を提供し;
b) 前記試料中のFcRnレベルを決定し;そして
c) 前記決定されたレベルを参照レベルと比較する
ことを含み、
ここで参照レベルと比較して前記試料中のFcRnのより高いレベルが、FcRnが上方制御された亜型/病期を示し;そして前記参照レベルと同じかまたはより低いレベルが、FcRnが正常の亜型/病期またはFcRnが下方制御された亜型/病期を示し;
そして/または
ここで参照レベルと比較して前記試料中のFcRnのより高いレベルが、癌を発症するリスクが高いことを示し;そして前記参照レベルと同じかまたはより低いレベルが、癌の発症の増加したリスクを示さない、
前記方法。 - FcRn結合剤による処置に対して感受性である癌を亜型分類/同定するための、請求項1に記載の方法。
- 前記参照レベルと比較して前記試料中のFcRnのより高いレベルが、FcRn結合剤による処置に対して感受性である亜型/病期を示す、請求項1または2に記載の方法。
- 前記癌型が、乳癌、結腸直腸癌、肺癌、膵臓癌、肝臓癌、腸癌、前立腺癌、膀胱癌、腎臓癌、腎明細胞癌、卵巣癌、頸癌、腺癌、扁平上皮細胞癌、頭頸部癌および耳鼻咽喉癌から成る群より選択される、請求項1〜3のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法が、乳癌または結腸直腸癌を亜型分類するための方法であって、
1) 対象由来の乳癌試料または結腸直腸癌試料を提供し;
2) 前記試料中のFcRnレベルを測定し;
3) 前記測定されたレベルを参照レベルと比較する
ことを含み、
ここで前記参照レベルと比較して前記試料中のFcRnのより高いレベルが、FcRnが上方制御された亜型を示し;そして前記参照レベルと同じかまたはより低いレベルが、FcRnが正常のまたはFcRnが下方制御された亜型を示す、
請求項1〜4のいずれか一項に記載の方法。 - 前記癌型が乳癌である、請求項1〜5のいずれか一項に記載の方法。
- 前記癌型が結腸直腸癌である、請求項1〜6のいずれか一項に記載の方法。
- 前記試料が転移性癌組織、例えば転移性組織生検標本である、請求項1〜7のいずれか一項に記載の方法。
- 前記参照レベルが、同型の1つの正常試料(非癌性)のFcRnレベルであるかまたは複数の正常試料からの平均レベルである、請求項1〜8のいずれか一項に記載の方法。
- 前記正常試料が前記生物学的試料の近隣組織に由来するか、または前記生物学的試料から遠位の組織に由来するものである、請求項9に記載の方法。
- 前記生物学的試料が、組織生検材料、血液、排せつ物(糞便)、尿、胸膜液、唾液、胆汁、気管支液、洗口液、腹水、膿、脳脊髄液、卵胞液、組織および粘液から成る群より選択される、請求項1〜10のいずれか一項に記載の方法。
- 前記生物学的試料が癌標本、例えば癌組織生検標本である、請求項1〜11のいずれか一項に記載の方法。
- 前記レベルがFcRn結合剤を用いて決定される、請求項1〜12のいずれか一項に記載の方法。
- 前記FcRn結合剤がWTアルブミン、アルブミン変異体、FcRn抗体、IgG類、ペプチドまたはタンパク質、および核酸、例えばアプタマーから成る群より選択され、好ましくは結合剤がアルブミンであり、より好ましくはアルブミン変異体である、請求項13に記載の方法。
- 前記アルブミン変異体が、アルブミンのWT型(配列番号1)よりも高いFcRnへの結合親和性を有する、請求項14に記載の方法。
- 前記結合剤が検出可能な標識を含む、請求項13〜15のいずれか一項に記載の方法。
- 前記検出可能な標識が放射性同位体、検出可能生成物をもたらす酵素、フルオロフォア、化学発光化合物、磁性粒子、ミクロ粒子、ミクロスフェア、ナノ粒子、ナノスフェア、ビオチン、ストレプトアビジンおよびジゴキシンから選ばれる、請求項16に記載の方法。
- 癌を亜型分類し、癌を病期診断し、そして/または癌を発症するリスクを予測することに使用するためのFcRn結合剤を含む組成物であって、
参照レベルと比較して生物学的試料中のFcRnのより高いレベルが、FcRnが上方制御された亜型/病期を示し;そして前記参照レベルと同じかまたはより低いレベルが、FcRnが正常の亜型/病期またはFcRnが下方制御された亜型/病期を示し;
そして/または
参照レベルと比較して前記試料中のFcRnのより高いレベルが、癌を発症するリスクが高いことを示し;そして前記参照レベルと同じかまたはより低いレベルが、癌の発症の増加したリスクを示さない、
前記組成物。 - FcRn結合剤による処置に対して感受性である癌を亜型分類/同定するための、請求項18に記載の組成物。
- 前記参照レベルと比較して前記試料中のFcRnのより高いレベルが、FcRn結合剤による処置に対して感受性である亜型/病期を示す、請求項18または19に記載の組成物。
- 前記組成物が、結腸直腸癌または乳癌の亜型分類のために使用され、
ここで前記参照レベルと比較して前記試料中のFcRnのより高いレベルが、FcRnが上方制御された亜型/病期を示し;そして前記参照レベルと同じかまたはより低いレベルが、FcRnが正常の亜型を示す、請求項18〜20のいずれか一項に記載の組成物。 - FcRnを過剰発現している癌の治療に使用するための、治療薬に連結されたFcRn結合剤を含む組成物。
- 前記癌が乳癌および/または結腸直腸癌である、請求項22に記載の使用のための組成物。
- 前記FcRn結合剤が融合、接合または会合により治療薬に連結される、請求項22〜24のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
- 前記FcRn結合剤が、WTアルブミン、アルブミン変異体、FcRn抗体、IgG類、ペプチドまたはタンパク質、および核酸、例えばアプタマーから成る群より選択され、好ましくは結合剤がアルブミンであり、より好ましくはアルブミン変異体である、請求項22〜24のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
- 前記変異型HSAが、野生型HSAに比較して改善された1つ以上の薬物動態特性を有する、請求項25に記載の使用のための組成物。
- 前記変異型HSAが、野生型HSAよりも長い半減期を有する、請求項25〜26のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
- 前記アルブミン変異体が、WT型のアルブミンよりも高いFcRnに対する結合親和性を有する、請求項25〜27のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
- 前記アルブミン変異体が配列番号4と5から成る群より選択される、請求項22〜28のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
- 前記治療薬が、放射性核種、抗癌剤、例えばアクチノマイシンD、アルデスロイキン、アレムツズマブ、アルカンスルホネート、アルケラン、アムサクリン、アナストロゾール、アントラシクリン、代謝拮抗物質、Ara-C、三酸化ヒ素、アスパラギナーゼ、アザチオプリン、ゲラン桿菌(Bacillus Calmette-Guerin:BCG)、ビカルタミド(Bicalutamide)、BiCNU、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、ブスルファン、ブスルファン、カペシタビン、カルボプラチン、カルボプラチナム、カルムスチン、CCNU、セツキシマブ、クロラムブシル、クロラムフェニコール、絨毛膜、シクロスポリン、シドフォビル、シスプラチン、クラドリビン、コールタール含有製品、コルチシン、CPT-11、シクロホスファミド、シタラビン、シトシンアラビノシド、シトキサン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダナゾール、ダサチニブ、ダウノルビシン、デクスラゾキサン、ジエチルスチルベストロール、ジノプロストン、ジトラノール含有製品、ドセタキセル、ドキソルビシン、DTIC、デュタステリド、エピルビシン、エストラジオール、エストラムスチン、エチレンイミン、エトポシド、エキセメスタン、フィナステリド、フロクスウリジン、フルダラビン、フルオロウラシル、フルタミド、フォリン酸類似体、フォテムスチン、ガンシクロビル、ゲムシタビン、ゲムツズマブ、ゴナドトロピン、ゴセレリン、ヘルセプチン、ヘキサメチルアミン、ホルモン剤、ヒドロキシカルバミド、ヒドロキシウレア、イダルビシン、イホスファミド、イマチニブメシル酸塩、インターフェロン含有製品(ペグインターフェロンを含む)、イリノテカン、レフルノミド、レトロゾール、リュープロレリン酢酸塩、ロムスチン、メクロレタミン、メドロキシプロゲステロン、メゲストロール、メルファラン、メノトロピン、メルカプトプリン、メトトレキサート、メフェプリストン、マイトマイシン、ミトタン、ミトキサントロン、メトトレキサート(MTX)、ミコフェノール酸モフェチル、ナファレリン、ナイトロジェンマスタード、ノトロソウレア、オストロゲン含有製品、オキサリプラチン、オキシトシン、パクリタキセル、パミドロネート、ペンタミジン、ペントスタチン、白金化合物、プリカマイシン、ポドフィリン、プロカルバジン、プロゲステロン含有製品、プリン類似体、ピリミジン類似体、ラロキシフェン、ラルチトレキセド、リババリン、リツキシマブ、シロリムス、ステロイド、STI-571、ストレプトゾシン、シントシノン、シントメトリン、タクロリムス、タモキシフェン、タキサン、テモゾロミド、テニポシド、テストステロン、テトラジン、タリドミド、チオグアニン、チオテパ、トムデックス、トポイソメラーゼ阻害剤、トポテカン、トレミフェン、トラスツズマブ、トレオスルファン、トリフルリジン、トリメトレキサート、トリプトレリン、バルガンシクロビル、ビダラジン、ビンブラスチン、ビンカアルカロイド、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビン、VP-16、キセロダおよびジドブジンから成る群より選択される、請求項22〜29のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
- 医薬上許容される担体および/または希釈剤を更に含む、請求項18〜30のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
- 対象におけるFcRnが上方制御された癌の生体内イメージング方法に使用するための、検出可能成分に連結されたFcRn結合剤を含む組成物であって、前記方法が
a) 前記対象に、前記検出可能成分に連結されたFcRn結合剤を投与し;そして
b) 前記対象をイメージングし、FcRnが上方制御された癌に結合している前記検出可能成分に連結されたFcRn結合剤を検出する
ことを含む、前記組成物。 - 前記検出可能成分が、PETまたはSPECTを使ったイメージングに適当な放射性検出可能成分であるか、または例えば光学的もしくはMRIを使ったイメージングに有用な非放射性検出可能成分である、請求項32に記載の使用のための組成物。
- 前記検出可能成分が、11C、15O、18F標識フルデオキシグルコース、64Cu、68Ga、66Ga、60Cu、61Cu、62Cu、89Zr、124I、76Br、86Y、94mTc、131I、G67Ga、111In、123Iおよび99mTcからなる群より選択される放射性核種である、請求項32または33に記載の使用のための組成物。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DKPA201670870 | 2016-11-04 | ||
DKPA201670870 | 2016-11-04 | ||
PCT/DK2017/050363 WO2018082758A1 (en) | 2016-11-04 | 2017-11-03 | Identification and treatment of tumors characterized by an overexpression of the neonatal fc receptor |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2020500306A true JP2020500306A (ja) | 2020-01-09 |
Family
ID=61074260
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019522970A Pending JP2020500306A (ja) | 2016-11-04 | 2017-11-03 | 新生児Fc受容体の過剰発現により特徴づけられる腫瘍の同定と治療 |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20210333279A1 (ja) |
EP (1) | EP3535585A1 (ja) |
JP (1) | JP2020500306A (ja) |
CN (1) | CN110337590A (ja) |
WO (1) | WO2018082758A1 (ja) |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2015164605A1 (en) * | 2014-04-25 | 2015-10-29 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Compositions and methods for treating subjects with immune-mediated diseases |
JP2016121139A (ja) * | 2010-12-30 | 2016-07-07 | 武田薬品工業株式会社 | 結合抗cd38抗体 |
Family Cites Families (27)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1264840B1 (en) | 1999-05-17 | 2009-09-23 | ConjuChem Biotechnologies Inc. | Long lasting fusion peptide inhibitors of viral infection |
CA2371912C (en) | 1999-05-21 | 2010-02-16 | American Bioscience, Inc. | Protein stabilized pharmacologically active agents, methods for the preparation thereof and methods for the use thereof |
ATE362374T1 (de) * | 1999-09-03 | 2007-06-15 | Amgen Inc | Verfahren und zusammensetzungen zur prevention oder behandlung von krebs und von krebs assoziertem knochenverlust |
CA2405557C (en) | 2000-04-12 | 2013-09-24 | Human Genome Sciences, Inc. | Albumin fusion proteins |
US20080194481A1 (en) | 2001-12-21 | 2008-08-14 | Human Genome Sciences, Inc. | Albumin Fusion Proteins |
AU2002364587A1 (en) | 2001-12-21 | 2003-07-30 | Human Genome Sciences, Inc. | Albumin fusion proteins |
EP2261250B1 (en) | 2001-12-21 | 2015-07-01 | Human Genome Sciences, Inc. | GCSF-Albumin fusion proteins |
EP1594530A4 (en) | 2003-01-22 | 2006-10-11 | Human Genome Sciences Inc | HYBRID PROTEINS OF ALBUMIN |
EP1924596A4 (en) | 2005-08-12 | 2009-07-29 | Human Genome Sciences Inc | ALBUM INFUSION PROTEINS |
US20110124576A1 (en) | 2007-08-08 | 2011-05-26 | Novozymes A/S | Transferrin Variants and Conjugates |
EP2860260A1 (en) | 2008-04-11 | 2015-04-15 | Merrimack Pharmaceuticals, Inc. | Human serum albumin linkers and conjugates thereof |
CN102282168A (zh) | 2008-11-18 | 2011-12-14 | 梅里麦克制药股份有限公司 | 人血清白蛋白接头以及其结合物 |
CA2745899C (en) | 2008-12-05 | 2015-04-28 | Vuong Trieu | Albumin binding peptide-mediated disease targeting |
EP2396347B1 (en) | 2009-02-11 | 2017-04-12 | Albumedix A/S | Albumin variants and conjugates |
AU2010311332B2 (en) | 2009-10-30 | 2015-04-23 | Albumedix Ltd. | Albumin variants |
KR20130020765A (ko) | 2010-02-16 | 2013-02-28 | 메디뮨 엘엘씨 | Hsa-관련 조성물 및 사용방법 |
JP5969458B2 (ja) | 2010-04-09 | 2016-08-17 | アルブミディクス アクティーゼルスカブ | アルブミン誘導体及び変異体 |
US20130225496A1 (en) | 2010-11-01 | 2013-08-29 | Novozymes Biopharma Dk A/S | Albumin Variants |
EP2675471A4 (en) | 2011-02-15 | 2015-01-28 | Medimmune Llc | HSA-RELATED COMPOSITIONS AND USE PROCESSES |
WO2012150319A1 (en) | 2011-05-05 | 2012-11-08 | Novozymes Biopharma Dk A/S | Albumin variants |
WO2013075066A2 (en) | 2011-11-18 | 2013-05-23 | Eleven Biotherapeutics, Inc. | Proteins with improved half-life and other properties |
MX2014010278A (es) | 2012-03-16 | 2015-03-05 | Novozymes Biopharma Dk As | Variantes de albumina. |
EP2912467A4 (en) * | 2012-10-26 | 2016-04-20 | Univ Queensland | METHODS FOR CLASSIFYING TUMORS AND USES THEREOF |
MX2015005363A (es) | 2012-11-08 | 2015-11-06 | Novozymes Biopharma Dk As | Variantes de albumina. |
EP3044232A1 (en) | 2013-09-13 | 2016-07-20 | Novozymes Biopharma DK A/S | Albumin variants |
WO2015063611A2 (en) | 2013-11-01 | 2015-05-07 | University Of Oslo | Albumin variants and uses thereof |
WO2017013214A1 (en) * | 2015-07-23 | 2017-01-26 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Methods for predicting the survival time and treatment responsiveness of a patient suffering from a solid cancer |
-
2017
- 2017-11-03 EP EP17835928.7A patent/EP3535585A1/en not_active Withdrawn
- 2017-11-03 WO PCT/DK2017/050363 patent/WO2018082758A1/en unknown
- 2017-11-03 JP JP2019522970A patent/JP2020500306A/ja active Pending
- 2017-11-03 US US16/346,491 patent/US20210333279A1/en not_active Abandoned
- 2017-11-03 CN CN201780075118.2A patent/CN110337590A/zh active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2016121139A (ja) * | 2010-12-30 | 2016-07-07 | 武田薬品工業株式会社 | 結合抗cd38抗体 |
WO2015164605A1 (en) * | 2014-04-25 | 2015-10-29 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Compositions and methods for treating subjects with immune-mediated diseases |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
BAKER, K. ET AL.: "Neonatal Fc Receptor Expression in Dendritic Cells Mediates Protective Immunity against Colorectal C", IMMUNITY, vol. 39, JPN6021039205, 12 December 2013 (2013-12-12), pages 1095 - 1107, XP055245735, ISSN: 0004608372, DOI: 10.1016/j.immuni.2013.11.003 * |
DALLONEAU, E. ET AL: "Downregulation of the neonatal Fc receptor expression in non-small cell lung cancer tissue associate", ONCOTARGET, vol. 7, no. 34, JPN6021039203, 15 June 2016 (2016-06-15), pages 54415 - 54429, ISSN: 0004608371 * |
QIN, J. ET AL.: "Oral delivery of anti-MDM2 inhibitor SP141-loaded FcRn-targeted nanoparticles to treat breast cancer", JOURNAL OF CONTROLLED RELEASE, vol. 237, JPN6021039207, 10 September 2016 (2016-09-10), pages 101 - 114, ISSN: 0004608373 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP3535585A1 (en) | 2019-09-11 |
US20210333279A1 (en) | 2021-10-28 |
CN110337590A (zh) | 2019-10-15 |
WO2018082758A1 (en) | 2018-05-11 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6672383B2 (ja) | 間葉及び上皮間葉形質転換循環腫瘍細胞のための特異的検出ツール | |
Paoloni et al. | Launching a novel preclinical infrastructure: comparative oncology trials consortium directed therapeutic targeting of TNFα to cancer vasculature | |
CN104080806B (zh) | 识别Tau的磷酸化特异抗体 | |
CN101454673B (zh) | Sparc及其使用方法 | |
CN1980699B (zh) | 利用白蛋白-结合蛋白作为靶标的治疗方法 | |
CN104781278B (zh) | 针对tau的抗体 | |
JP2017525354A (ja) | 高親和性pd−1薬剤とその使用方法 | |
CN106550593A (zh) | 用于黑素瘤的抗‑dll3抗体和药物缀合物 | |
CN106459188A (zh) | 针对磷酸化tau蛋白的骆驼科单结构域抗体以及生产其缀合物的方法 | |
Deuschle et al. | Anticalin® proteins: from bench to bedside | |
CN102827287A (zh) | 用于诊断和治疗癌症的组合物和方法 | |
WO2017087826A1 (en) | Systems, methods, and compositions for imaging androgen receptor axis activity in carcinoma, and related therapeutic compositions and methods | |
Vats et al. | Multimodal imaging of pancreatic beta cells in vivo by targeting transmembrane protein 27 (TMEM27) | |
WO2024061128A1 (zh) | 盘状结构域受体2在诊断神经退行性疾病中的应用及相关的计算机可读介质 | |
Kallenberg et al. | A humanized antibody against LRG1 that inhibits angiogenesis and reduces retinal vascular leakage | |
WO2019221062A1 (ja) | 薬剤評価方法 | |
Su et al. | Selection of single domain anti-transferrin receptor antibodies for blood-brain barrier transcytosis using a neurotensin based assay and histological assessment of target engagement in a mouse model of Alzheimer’s related amyloid-beta pathology | |
JP7291797B2 (ja) | ヒト化抗体およびその使用方法 | |
WO2024056075A1 (zh) | 盘状结构域受体2在诊断胶质瘤中的应用及相关的计算机可读介质 | |
CN110740756A (zh) | 针对b细胞成熟抗原(bcma)的纳米颗粒 | |
JPWO2018164262A1 (ja) | 治療有効性の予測方法 | |
US10758612B2 (en) | Antibodies to tumor associated complex N-glycans with terminal GlcNAcβ residues and methods of use thereof | |
JP2020500306A (ja) | 新生児Fc受容体の過剰発現により特徴づけられる腫瘍の同定と治療 | |
JP2014522813A (ja) | 膵β細胞バイオマーカーに特異的に結合する分子 | |
CN114585647A (zh) | 抗grp78抗体及其使用方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20201026 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20210922 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20211005 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20220510 |