CN1333078C - 来自嗜热棒状杆菌的氨基酸生物合成途径的抗热酶的基因 - Google Patents

来自嗜热棒状杆菌的氨基酸生物合成途径的抗热酶的基因 Download PDF

Info

Publication number
CN1333078C
CN1333078C CNB008160813A CN00816081A CN1333078C CN 1333078 C CN1333078 C CN 1333078C CN B008160813 A CNB008160813 A CN B008160813A CN 00816081 A CN00816081 A CN 00816081A CN 1333078 C CN1333078 C CN 1333078C
Authority
CN
China
Prior art keywords
ala
gly
leu
val
glu
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CNB008160813A
Other languages
English (en)
Other versions
CN1391612A (zh
Inventor
平野圣子
野中源
松崎友美
秋好直树
中村佳苗
木村英一郎
大住刚
松井和彦
河原义雄
仓桥修
中松亘
杉本慎一
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Ajinomoto Co Inc
Original Assignee
Ajinomoto Co Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ajinomoto Co Inc filed Critical Ajinomoto Co Inc
Publication of CN1391612A publication Critical patent/CN1391612A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN1333078C publication Critical patent/CN1333078C/zh
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y108/00—Oxidoreductases acting on sulfur groups as donors (1.8)
    • C12Y108/01—Oxidoreductases acting on sulfur groups as donors (1.8) with NAD+ or NADP+ as acceptor (1.8.1)
    • C12Y108/01004—Dihydrolipoyl dehydrogenase (1.8.1.4), i.e. lipoamide-dehydrogenase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
    • C07K14/34—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Corynebacterium (G)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
    • C12N9/0006—Oxidoreductases (1.) acting on CH-OH groups as donors (1.1)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
    • C12N9/0008—Oxidoreductases (1.) acting on the aldehyde or oxo group of donors (1.2)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
    • C12N9/0051—Oxidoreductases (1.) acting on a sulfur group of donors (1.8)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/10—Transferases (2.)
    • C12N9/12—Transferases (2.) transferring phosphorus containing groups, e.g. kinases (2.7)
    • C12N9/1205—Phosphotransferases with an alcohol group as acceptor (2.7.1), e.g. protein kinases
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2405—Glucanases
    • C12N9/2408—Glucanases acting on alpha -1,4-glucosidic bonds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/88—Lyases (4.)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y101/00—Oxidoreductases acting on the CH-OH group of donors (1.1)
    • C12Y101/01—Oxidoreductases acting on the CH-OH group of donors (1.1) with NAD+ or NADP+ as acceptor (1.1.1)
    • C12Y101/01041—Isocitrate dehydrogenase (NAD+) (1.1.1.41)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y102/00—Oxidoreductases acting on the aldehyde or oxo group of donors (1.2)
    • C12Y102/01—Oxidoreductases acting on the aldehyde or oxo group of donors (1.2) with NAD+ or NADP+ as acceptor (1.2.1)
    • C12Y102/01051—Pyruvate dehydrogenase (NADP+) (1.2.1.51)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y102/00—Oxidoreductases acting on the aldehyde or oxo group of donors (1.2)
    • C12Y102/04—Oxidoreductases acting on the aldehyde or oxo group of donors (1.2) with a disulfide as acceptor (1.2.4)
    • C12Y102/04002—Oxoglutarate dehydrogenase (succinyl-transferring) (1.2.4.2), i.e. alpha-ketoglutarat dehydrogenase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y104/00—Oxidoreductases acting on the CH-NH2 group of donors (1.4)
    • C12Y104/01—Oxidoreductases acting on the CH-NH2 group of donors (1.4) with NAD+ or NADP+ as acceptor (1.4.1)
    • C12Y104/01004—Glutamate dehydrogenase (NADP+) (1.4.1.4)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y203/00—Acyltransferases (2.3)
    • C12Y203/03—Acyl groups converted into alkyl on transfer (2.3.3)
    • C12Y203/03001—Citrate (Si)-synthase (2.3.3.1)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y207/00—Transferases transferring phosphorus-containing groups (2.7)
    • C12Y207/01—Phosphotransferases with an alcohol group as acceptor (2.7.1)
    • C12Y207/01011—6-Phosphofructokinase (2.7.1.11)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12Y302/01026—Beta-fructofuranosidase (3.2.1.26), i.e. invertase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y401/00—Carbon-carbon lyases (4.1)
    • C12Y401/01—Carboxy-lyases (4.1.1)
    • C12Y401/01031—Phosphoenolpyruvate carboxylase (4.1.1.31)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y401/00—Carbon-carbon lyases (4.1)
    • C12Y401/03—Oxo-acid-lyases (4.1.3)
    • C12Y401/03001—Isocitrate lyase (4.1.3.1)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y402/00—Carbon-oxygen lyases (4.2)
    • C12Y402/01—Hydro-lyases (4.2.1)
    • C12Y402/01003—Aconitate hydratase (4.2.1.3)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y604/00—Ligases forming carbon-carbon bonds (6.4)
    • C12Y604/01—Ligases forming carbon-carbon bonds (6.4.1)
    • C12Y604/01001—Pyruvate carboxylase (6.4.1.1)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y604/00—Ligases forming carbon-carbon bonds (6.4)
    • C12Y604/01—Ligases forming carbon-carbon bonds (6.4.1)
    • C12Y604/01002—Acetyl-CoA carboxylase (6.4.1.2)

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

基于在多种微生物中所观察到的已知基因序列在氨基酸水平的保守区域，设计了一些复合引物组合，该已知基因对应于一种来自于Corynebacterium thermoaminogenes的编码L-氨基酸生物合成途径的酶的基因，在优选的情况下该酶在比谷氨酸棒状杆菌更高的温度下发挥功能。通过使用这些引物并且使用Corynebacteriumthermoaminogenes的染色体DNA作为模板进行了PCR。可用于获得扩增片段的引物被用作为引物，以进行从Corynebacteriumthermoaminogenes的染色体DNA质粒文库中选择含有一种靶DNA片段的克隆的筛选。

Description

来自嗜热棒状杆菌的氨基酸生物合成途径的抗热酶的基因
技术领域
本发明涉及到抗热酶的基因，特别是涉及到Corynebacteriumthermoaminogenes的L-氨基酸，例如L-谷氨酸的生物合成和吸收系统的基因，该菌类为一种嗜热棒状杆菌。
背景工艺
诸如L-谷氨酸这样的L-氨基酸的生产的当今主流为利用棒状杆菌的发酵生产。关于L-氨基酸的发酵生产，已经通过培育具有优良产量的菌株以及开发发酵工艺来尽力降低成本。尽管对于实现成本降低的传统努力主要针对于获得高产率，除了作为发酵成本所涉及因素的原材料之外，对在培养期间所产生的发酵热量进行冷却的能量也不可忽视。这就是说，考虑到用于发酵的为普通的微生物，由于微生物自身在发酵期间所产生的发酵热量会引起温度的升高并且发酵所需的酶由此可能会失活或者生产性细菌可能会因此而被杀死。因此，在发酵期间对培养基的冷却是必需的。由此，为降低冷却成本，多年以来一直在进行对高温发酵的研究。进一步，如果高温发酵成为可能，反应的速度也可能会提高。但是，对于L-氨基酸发酵，有效的高温培养迄今为止尚未实现。
Corynebacterium thermoaminogenes为一种归类于棒状细菌的细菌，它类似于谷氨酸棒状杆菌(乳发酵短杆菌(Brevibacteriumlactofermentum))，该菌株通常被用于L-氨基酸的发酵。然而，据显示其最佳生长温度为37-43℃，该温度高于谷氨酸棒状杆菌的最佳生长温度，即30-35℃，并且对于L-谷氨酸生产该最佳温度为42-45℃，该温度明显地偏向高温区域(Japanese Patent Laid-open(Kokai)No.63-240779/1988)。
与此同时，用于通过向其中引入一种L-氨基酸合成系统酶来增强棒状杆菌属和短杆菌属的L-氨基酸生产能力的工艺已被开发，该酶来自大肠杆菌或者谷氨酸棒状杆菌。这样的酶的例子包括，例如，柠檬酸合成酶(日本专利出版物(Kokoku)No.7-121228/1995)，该酶为L-谷氨酸生物合成途径的一种酶，这样的例子还包括谷氨酸脱氢酶(Japanese Patent Laid-open No.61-268185/1986)、异柠檬酸脱氢酶、乌头酸水合酶(Japanese Patent Laid-open No.63-214189)等等。
但是，任何来自嗜热棒状杆菌的L-氨基酸合成酶以及编码它们的基因均未被报道。
发明披露
本发明的一个目的为提供编码来自Corynebacteriumthermoaminogenes的酶的基因，在优选的情况下提供在高于谷氨酸棒状杆菌的对应温度下发挥功能的酶。
本发明的发明者进行了广泛的研究以期达到上述的目的。其结果，他们成功地分离了编码Corynebacterium thermoaminogenes的氨基酸生物合成途径的酶的基因或者编码参与细胞摄入氨基酸的蛋白的基因，并且由此实现了本发明。
简而言之，本发明提供了以下的方面。
(1)一种蛋白质，该蛋白质具有SEQ ID NO：2的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：2的氨基酸序列，该蛋白质具有异柠檬酸裂合酶活性并且在50℃下进行5分钟的热处理后表现出30％或者更高的残余活性。
(2)一种蛋白质，该蛋白质具有SEQ ID NO：4的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：4的氨基酸序列，该蛋白质涉及到来自Corynebacteriumthermoaminogenes的脂酰辅酶A羧化酶活性。
(3)一种蛋白质，该蛋白质具有SEQ ID NO：6的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：6的氨基酸序列，该蛋白质具有来自Corynebacteriumthermoaminogenes的DtsR活性。
(4)一种蛋白质，该蛋白质具有SEQ ID NO：8的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：8的氨基酸序列，该蛋白质具有来自Corynebacteriumthermoaminogenes的DtsR活性。
(5)一种蛋白质，该蛋白质具有SEQ ID NO：10的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：10的氨基酸序列，该蛋白质在60℃所表现出的磷酸果糖激酶活性同在30℃相比与之等效或者比后者水平更高。
(6)一种蛋白质，该蛋白质具有SEQ ID NO：94的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：94的氨基酸序列，该蛋白质具有赋予Corynebacteriumthermoaminogenes蔗糖同化能力的活性。
(7)一种蛋白质，该蛋白质具有SEQ ID NOS：17-20的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NOS：17-20的氨基酸序列，该蛋白质具有的功能涉及到谷氨酸的摄取并且它来自于Corynebacteriumthermoaminogenes。
(8)一种蛋白质，该蛋白质具有SEQ ID NO：22的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：22的氨基酸序列，该蛋白质具有来自Corynebacteriumthermoaminogenes的丙酮酸脱氢酶活性。
(9)一种蛋白质，该蛋白质具有SEQ ID NO：24的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：24的氨基酸序列，该蛋白质具有来自Corynebacteriumthermoaminogenes的丙酮酸羧化酶活性。
(10)一种蛋白质，该蛋白质具有SEQ ID NO：26的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：26的氨基酸序列，该蛋白质具有磷酸烯醇丙酮酸羧化酶活性并且在45℃下进行5分钟的热处理后表现出50％或者更高的残余活性。
(11)一种蛋白质，该蛋白质具有SEQ ID NO：28的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：28的氨基酸序列，该蛋白质具有顺乌头酸酶活性并且在50℃下进行3分钟的热处理后表现出30％或者更高的残余活性。
(12)一种蛋白质，该蛋白质具有SEQ ID NO：30的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：30的氨基酸序列，该蛋白质具有异柠檬酸脱氢酶活性并且在45℃下进行10分钟的热处理后表现出50％或者更高的残余活性。
(13)一种蛋白质，该蛋白质具有SEQ ID NO：32的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：32的氨基酸序列，该蛋白质具有来自Corynebacterium thermoaminogenes的二氢硫辛酰胺脱氢酶活性。
(14)一种蛋白质，该蛋白质具有SEQ ID NO：34的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：34的氨基酸序列，该蛋白质具有2-酮戊二酸脱氢酶活性并且在50℃下进行10分钟的热处理后表现出30％或者更高的残余活性。
(15)一种蛋白质，该蛋白质具有SEQ ID NO：80的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：80的氨基酸序列，该蛋白质在42℃所表现出的谷氨酸脱氢酶活性同在37℃相比与之等效或者比后者水平更高。
(16)一种蛋白质，该蛋白质具有SEQ ID NO：90的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：90的氨基酸序列，该蛋白质在37℃所表现出的柠檬酸合成酶活性同在23℃相比与之等效或者比后者水平更高。
(17)一种DNA，该DNA编码的蛋白质具有SEQ ID NO：2的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：2的氨基酸序列，并且该蛋白质具有异柠檬酸裂合酶活性。
(18)(17)中的DNA，该DNA为下列的(a1)或者(b1)中所定义的DNA：
(a1)一种含有序列表中的SEQ ID NO：1的核苷酸序列的DNA，
(b1)一种DNA，该DNA同序列表中的SEQ ID NO：1的核苷酸序列或者同基于该核苷酸序列的引物可在严格的条件下杂交，并且该DNA编码一种具有异柠檬酸裂合酶活性的蛋白质。
(19)一种DNA，该DNA编码的蛋白质具有SEQ ID NO：4的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：4的氨基酸序列，并且该蛋白质涉及到脂酰辅酶A羧化酶活性。
(20)(19)中的DNA，该DNA为下列的(a2)或者(b2)中所定义的DNA：
(a2)一种含有序列表中的SEQ ID NO：3的核苷酸序列的DNA，
(b2)一种DNA，该DNA同序列表中的SEQ ID NO：3的核苷酸序列或者同基于该核苷酸序列的引物可在严格的条件下杂交，并且该DNA编码一种涉及到脂酰辅酶A羧化酶活性的蛋白质。
(21)一种DNA，该DNA编码的蛋白质具有S EQ ID NO：6的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：6的氨基酸序列，并且该蛋白质具有DtsR活性。
(22)(21)中的DNA，该DNA为下列的(a3)或者(b3)中所定义的DNA：
(a3)一种含有序列表中的SEQ ID NO：5的核苷酸序列的DNA，
(b3)一种DNA，该DNA同序列表中的SEQ ID NO：5的核苷酸序列或者同基于该核苷酸序列的引物可在严格的条件下杂交，并且该DNA编码一种具有DtsR活性的蛋白质。
(23)一种DNA，该DNA编码的蛋白质具有SEQ ID NO：8的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：8的氨基酸序列，并且该蛋白质具有DtsR活性。
(24)(23)中的DNA，该DNA为下列的(a4)或者(b4)中所定义的DNA：
(a4)一种含有序列表中的SEQ ID NO：7的核苷酸序列的DNA，
(b4)一种DNA，该DNA同序列表中的SEQ ID NO：7的核苷酸序列或者同基于该核苷酸序列的引物可在严格的条件下杂交，并且该DNA编码一种具有DtsR活性的蛋白质。
(25)一种DNA，该DNA编码的蛋白质具有SEQID NO：10的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：10的氨基酸序列，并且该蛋白质具有磷酸果糖激酶活性。
(26)(25)中的DNA，该DNA为下列的(a5)或者(b5)中所定义的DNA：
(a5)一种含有序列表中的SEQ ID NO：9的核苷酸序列的DNA，
(b5)一种DNA，该DNA同序列表中的SEQ ID NO：9的核苷酸序列或者同基于该核苷酸序列的引物可在严格的条件下杂交，并且该DNA编码一种具有磷酸果糖激酶活性的蛋白质。
(27)一种DNA，该DNA编码的蛋白质具有SEQ ID NO：93的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：93的氨基酸序列，并且该蛋白质具有蔗糖酶(invertase)活性。
(28)(27)中的DNA，该DNA为下列的(a6)或者(b6)中所定义的DNA：
(a6)一种含有序列表中的SEQ ID NO：93的核苷酸序列的DNA，
(b6)一种DNA，该DNA同序列表中的SEQ ID NO：93的核苷酸序列或者同基于该核苷酸序列的引物可在严格的条件下杂交，并且该DNA编码一种具有蔗糖酶活性的蛋白质。
(29)一种DNA，该DNA编码的蛋白质具有SEQ ID NOS：17-20的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NOS：17-20的氨基酸序列，并且该蛋白质具有参与谷氨酸摄入的功能。
(30)(29)中的DNA，该DNA为下列的(a7)或者(b7)中所定义的DNA：
(a7)一种含有序列表中的SEQ ID NO：16的核苷酸序列的DNA，
(b7)一种DNA，该DNA同序列表中的SEQ ID NO：16的核苷酸序列或者同基于该核苷酸序列的引物可在严格的条件下杂交，并且该DNA编码一种具有参与谷氨酸摄入的功能的蛋白质。
(31)一种DNA，该DNA编码的蛋白质具有SEQ ID NO：22的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：22的氨基酸序列，并且该蛋白质具有丙酮酸脱氢酶活性。
(32)(31)中的DNA，该DNA为下列的(a8)或者(b8)中所定义的DNA：
(a8)一种含有序列表中的SEQ ID NO：21的核苷酸序列的DNA，
(b8)一种DNA，该DNA同序列表中的SEQ ID NO：21的核苷酸序列或者同基于该核苷酸序列的引物可在严格的条件下杂交，并且该DNA编码一种具有丙酮酸脱氢酶活性的蛋白质。
(33)一种DNA，该DNA编码的蛋白质具有SEQ ID NO：24的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：24的氨基酸序列，并且该蛋白质具有丙酮酸羧化酶活性。
(34)(33)中的DNA，该DNA为下列的(a9)或者(b9)中所定义的DNA：
(a9)一种含有序列表中的SEQ ID NO：23的核苷酸序列的DNA，
(b9)一种DNA，该DNA同序列表中的SEQ ID NO：23的核苷酸序列或者同基于该核苷酸序列的引物可在严格的条件下杂交，并且该DNA编码一种具有丙酮酸羧化酶活性的蛋白质。
(35)一种DNA，该DNA编码的蛋白质具有SEQ ID NO：26的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：26的氨基酸序列，并且该蛋白质具有磷酸烯醇丙酮酸羧化酶活性。
(36)(35)中的DNA，该DNA为下列的(a10)或者(b10)中所定义的DNA：
(a10)一种含有序列表中的SEQ ID NO：25的核苷酸序列的DNA，
(b10)一种DNA，该DNA同序列表中的SEQ ID NO：25的核苷酸序列或者同基于该核苷酸序列的引物可在严格的条件下杂交，并且该DNA编码一种具有磷酸烯醇丙酮酸羧化酶活性的蛋白质。
(37)一种DNA，该DNA编码的蛋白质具有SEQ ID NO：28的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：28的氨基酸序列，并且该蛋白质具有顺乌头酸酶活性。
(38)(37)中的DNA，该DNA为下列的(a11)或者(b11)中所定义的DNA：
(a11)一种含有序列表中的SEQ ID NO：27的核苷酸序列的DNA，
(b11)一种DNA，该DNA同序列表中的SEQ ID NO：27的核苷酸序列或者同基于该核苷酸序列的引物可在严格的条件下杂交，并且该DNA编码一种具有顺乌头酸酶活性的蛋白质。
(39)一种DNA，该DNA编码的蛋白质具有SEQ ID NO：30的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：30的氨基酸序列，并且该蛋白质具有异柠檬酸脱氢酶活性。
(40)(39)中的DNA，该DNA为下列的(a12)或者(b12)中所定义的DNA：
(a12)一种含有序列表中的SEQ ID NO：27的核苷酸序列的DNA，
(b12)一种DNA，该DNA同序列表中的SEQ ID NO：27的核苷酸序列或者同基于该核苷酸序列的引物可在严格的条件下杂交，并且该DNA编码一种具有异柠檬酸脱氢酶活性的蛋白质。
(41)一种DNA，该DNA编码的蛋白质具有SEQ ID NO：32的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：32的氨基酸序列，并且该蛋白质具有二氢硫辛酰胺脱氢酶活性。
(42)(41)中的DNA，该DNA为下列的(a13)或者(b13)中所定义的DNA：
(a13)一种含有序列表中的SEQ ID NO：31的核苷酸序列的DNA，
(b13)一种DNA，该DNA同序列表中的SEQ ID NO：31的核苷酸序列或者同基于该核苷酸序列的引物可在严格的条件下杂交，并且该DNA编码一种具有二氢硫辛酰胺脱氢酶活性的蛋白质。
(43)一种DNA，该DNA编码的蛋白质具有SEQ ID NO：34的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：34的氨基酸序列，并且该蛋白质具有2-酮戊二酸脱氢酶活性。
(44)(43)中的DNA，该DNA为下列的(a14)或者(b14)中所定义的DNA：
(a14)一种含有序列表中的SEQ ID NO：33的核苷酸序列的DNA，
(b14)一种DNA，该DNA同序列表中的SEQ ID NO：33的核苷酸序列或者同基于该核苷酸序列的引物可在严格的条件下杂交，并且该DNA编码一种具有2-酮戊二酸脱氢酶活性的蛋白质。
(45)一种DNA，该DNA编码的蛋白质具有SEQ ID NO：80的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：80的氨基酸序列，并且该蛋白质在42℃所表现出的谷氨酸脱氢酶活性同在37℃相比与之等效或者比后者水平更高。
(46)(45)中的DNA，该DNA为下列的(a15)或者(b15)中所定义的DNA：
(a15)一种含有序列表中的SEQ ID NO：79的核苷酸序列的DNA，
(b15)一种DNA，该DNA同序列表中的SEQ ID NO：79的核苷酸序列或者同基于该核苷酸序列的引物可在严格的条件下杂交，并且该DNA编码的蛋白质在42℃所表现出的谷氨酸脱氢酶活性同在37℃相比与之等效或者比后者水平更高。
(47)一种DNA，该DNA编码的蛋白质具有SEQ ID NO：90的氨基酸序列或者为具有一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：90的氨基酸序列，并且该蛋白质在37℃所表现出的柠檬酸合成酶活性同在23℃相比与之等效或者比后者水平更高。
(48)(47)中的DNA，该DNA为下列的(a16)或者(b16)中所定义的DNA：
(a15)一种含有序列表中的SEQ ID NO：89的核苷酸序列的DNA，
(b15)一种DNA，该DNA同序列表中的SEQ ID NO：89的核苷酸序列或者同基于该核苷酸序列的引物可在严格的条件下杂交，并且该DNA编码的蛋白质在37℃所表现出的柠檬酸合成酶活性同在23℃相比与之等效或者比后者水平更高。
(49)一种用于产生L-氨基酸的方法，该方法包括培养一种微生物体以在培养基中产生和积累L-氨基酸，并且从该培养基中收集L-氨基酸，该微生物体中引入了(17)到(48)中任意一种的DNA。
术语“本发明的DNA”在此后被用于指上述的DNA之一或者全部。
在后文中将对本发明进行详细解释。
表1所示为本发明的DNA的核苷酸序列，基因的名称以及本发明的DNA所编码的蛋白质。
    核苷酸序列   基因名称     编码蛋白(缩写)
 SEQ  ID NO：1SEQ  ID NO：3SEQ  ID NO：5SEQ  ID NO：7SEQ  ID NO：9SEQ  ID NO：11、13、15、 93SEQ  ID NO：16SEQ  ID NO：21SEQ  ID NO：23SEQ  ID NO：25SEQ  ID NO：27SEQ  ID NO：29SEQ  ID NO：31SEQ  ID NO：33SEQ  ID NO：79SEQ  ID NO：89  aceAaccBCdtsR1dtsR2pfkscrBgluABCDpdhApcppcacnicdlpdodhAgdhgltA 异柠檬酸裂合酶(ICL)脂酰辅酶A羧化酶BC亚基DTSR1蛋白DTSR2蛋白磷酸果糖激酶蔗糖酶谷氨酸摄入系统丙酮酸脱氢酶丙酮酸羧化酶磷酸烯醇丙酮酸羧化酶顺乌头酸酶异柠檬酸脱氢酶二氢硫辛酰胺脱氢酶2-酮戊二酸脱氢酶谷氨酸脱氢酶柠檬酸合成酶
SEQ ID NOS：3、23、25、31和33的开放读码框架(ORF)以及SEQ ID NO：16的第四个ORF均由GTG开始。尽管由这些GTG所编码的氨基酸在序列表中被示为缬氨酸，但它们有可能为甲硫氨酸。
SEQ ID NO：16的序列含有4个ORF，它们从5’末端按顺序对应于gluA、gluB、giuC和gluD。
上述的DNA序列分离自Corynebacterium thermoaminogenesAJ12310菌株(FERM BP-1542)的染色体DNA。然而，在SEQ ID NOS：11和13中所示的DNA序列分别分离自Corynebacteriumthermoaminogenes AJ12340菌株(FERM BP-1539)和AJ12309菌株(FERM BP-1541)，它们分别具有蔗糖酶活性以及蔗糖同化特性，这是因为AJ12310菌株不具有蔗糖酶活性以及蔗糖同化特性，并且分离自该菌株的scrB基因不具有任何开放读码框架。
Corynebacterium thermoaminogenes AJ12310菌株(亦称为YS-314菌株)以及AJ12309菌株(亦称为YS-155菌株)于1987年3月13日保存于National Institute of Bioscience and Human-Technology，Agency of Industrial Science and Technology，Ministry of International Trade and Industry(1-3，Higashi1-chome，Tsukubashi，Ibaraki-ken，Japan，邮编：305-8566)并且分别被分配以保存号FERM P-9246和FERM P-9245。随后，它们于1987年10月27日根据布达佩斯协定移送至国际保存(internationaldespositon)并且分别被分配以保存号FERM BP-1542和FERM BP-1541。
AJ12340菌株(亦称为YS-40菌株)于1987年3月10日保存于National Institute of Bioscience and Human-Technology，Agencyof Industrial Science and Technology，Ministry ofInternational Trade and Industry(1-3，Higashi 1-chome，Tsukubashi，Ibaraki-ken，Japan，邮编：305-8566)并且被分配以保存号FERM P-9277。随后，它于1987年10月27日根据布达佩斯协定移送至国际保存并且分别被分配以保存号FERM BP-1539。
SEQ ID NOS：11、13和15中所示的核苷酸序列为scrB的部分序列，并且SEQ ID NOS：11和13编码在SEQ ID NOS：12和14中所示的蔗糖酶的部分氨基酸序列。
含有一种靶基因的一个部分片段的DNA序列，可通过对已经报道的多种微生物中的该靶基因的核苷酸序列进行比较，以对高度保守的核苷酸序列进行选择，并且使用基于该区域的核苷酸序列而设计的引物以及使用Corynebacterium thermoaminogenes的染色体DNA作为模板进行PCR反应而获得，这样的微生物的例子如乳发酵短杆菌。进一步，通过使用所获得的DNA片段或者基于该片段序列而制备的探针进行杂交而对Corynebacterium thermoaminogenes的染色体DNA文库进行筛选，可以获得含有全长的该基因的DNA片段。一种含有该全长基因的DNA片段也可以通过使用所获得的该基因的部分片段进行基因组步移而获得。该基因组步移可通过使用一种商业化的试剂盒而进行，例如Takara LA PCR体外克隆试剂盒(Takara Shuro制造)。
例如，编码谷氨酸脱氢酶的DNA(后文中该DNA亦称为“gdh”，该酶亦称为“GDH”)的部分序列可通过PCR(聚合酶链反应)而从Corynebacterium thermoaminogenes，例如，从Corynebacteriumthermoaminogenes AJ12310菌株中获得，该PCR使用染色体DNA作为模板并且使用具有序列表中的SEQ ID NOS：77和78中的核苷酸序列的引物而进行。进一步，完整的gdh基因可通过使用所获得的部分片段进行的基因组步移来获得。
进一步，编码柠檬酸合成酶的DNA(后文中该DNA亦称为“gltA”，该酶亦称为“CS”)的部分序列可通过PCR(聚合酶链反应)而从Corynebacterium thermoaminogenes，例如，从Corynebacteriumthermoaminogenes AJ12310菌株中获得，该PCR使用染色体DNA作为模板并且使用具有序列表中的SEQ ID NOS：83和84中的核苷酸序列的引物而进行。进一步，完整的gltA基因可通过使用所获得的部分片段进行的基因组步移来获得。
上述的引物的核苷酸序列基于一种区域中的核苷酸序列进行设计，所述的区域含有多种微生物已经报道的gdh基因或者gltA基因中的高度保守的核苷酸序列，该区域通过对这些基因进行比较而发现。
对于编码其它酶的DNA序列，编码这些酶的部分片段可使用在表1中提及的引物以类似的方式获得，并且全长的该基因可通过使用所获得的该部分片段而获得。
尽管本发明的DNA可根据上述方法而获得，但该DNA还可以从Corynebacterium thermoaminogenes的一个染色体DNA文库中通过使用一种寡核苷酸作为探针而获得，该寡核苷酸的制备基于本发明的DNA的核苷酸序列。
用于染色体DNA的制备的方法、染色体DNA文库的结构、杂交、PCR、质粒DNA的制备、DNA的消化和连接、转化等等的描述见Sambrook，J.，Fritsch，E.F.，Maniatis，T.，Molecular Cloning，ColdSpring Harbor Laboratory Press，1.21(1989)。进一步，基因组步移可通过使用商业化的试剂盒而进行，例如Takara LA PCR体外克隆试剂盒(Takara Shuro制造)。
用于获得本发明的DNA的具体方法将在下文中进行解释。
首先，以一种适当的内切酶，例如Sau3AI，对Corynebacteriumthermoaminogenes的染色体DNA进行消化，并且通过琼脂糖凝胶电泳进行分离以获得一种约4到6kb的DNA片段。将所获得的DNA片段插入克隆载体，例如pHSG399，并且以所获得的重组质粒对大肠杆菌进行转化以产生染色体DNA的质粒文库。
另外，生产一些引物以用于通过PCR从质粒文库中选择含有靶基因的克隆。这些引物的设计基于来自多种微生物体的对应于目的基因的保守氨基酸区域。在这些引物的设计中，一些引物组出于棒状杆菌的密码子使用性的考虑而进行设计。
随后，为检测所产生引物的合理性，使用这些引物并且使用Corynebacterium thermoaminogenes的染色体DNA作为模板而进行了PCR。进一步，使用可获得扩增片段的引物作为筛选引物并且使用由该质粒文库中制备的重组质粒作为模板来进行PCR，以对含有靶DNA片段的克隆进行选择。这一操作过程的快速进行可通过对每个含有数十个转化子菌株的批次进行初级筛选，并且对获得了扩增片段的批次进行菌落PCR来进行次级筛选而完成。所扩增基因的片段长度示于表2到7。
通过从根据上法所选出的转化子中制备重组DNA、使用双脱氧终止法测定该插入片段的核苷酸序列并且以该核苷酸序列同已知基因序列进行比较，来证实是否根据上述方法所选出的转化子含有该靶基因。
当所获得的DNA片段含有该靶基因的一部分时，通过基因组步移来获得被缺失的部分。
本发明的DNA可能编码一个含有一个或者多个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的蛋白质，只要所编码的蛋白质具有其原功能便可。“多个”所指的数量可根据蛋白质三维结构中的位置或者氨基酸残基的种类而变化。但是，在通常的情况下这样的一种蛋白质优选地表现出同蛋白质全部氨基酸序列具有30到40％或更多的同源性，在更优选的情况下为55到65％或更多。更具体的情况下，术语“多个”所示的数目为2到数百，在优选的情况下为2到数十，更优选的情况下为2到10。
核苷酸和氨基酸序列的分析通过，例如，由Lipman和Peason所开发出的方法来进行(Science，227，1435-1441，1985)，该方法使用商业化的软件进行，例如Genetyx-Mac计算机程序(SoftwareDevelopment Co.，Tokyo，Japan)。
GDH可能同组成GDH的全部氨基酸序列表现出40％到80％或更多的同源性，在优选的情况下为80到90％或更多，并且在42℃下表现出同在37℃下等同或者更高的活性。在这一情况下，该术语“多个”指的数量为2到30，在优选的情况下为2到50，更优选的情况下为2到10。
CS可能同组成CS的全部氨基酸序列表现出40％到80％或更多的同源性，在优选的情况下为80到90％或更多，并且在37℃下表现出同在23℃下等同或者更高的活性。在这一情况下，该术语“多个”指的数量为2到300，在优选的情况下为2到50，更优选的情况下为2到10。
一种编码与上述源蛋白质基本相同的蛋白的DNA，可通过例如，通过诸如定点突变这样的方法对核苷酸进行修饰以使一个特定位置的一个或多个氨基酸残基参与替换、缺失、插入、添加或者反转来获得。上述的经修饰的DNA还可能通过传统的已知突变处理来获得。该突变处理包括一种用于在体外处理编码靶基因的DNA的方法，例如，以羟胺进行，还包括一种以紫外照射或者通常用于突变处理的突变试剂处理携带有编码靶基因的DNA的微生物的方法，例如，处理属于大肠杆菌属的细菌，该突变试剂的例子如N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(NTG)和亚硝酸。
上述的核苷酸的替换、缺失、插入、添加或反转还包括由于Corynebacterium thermoaminogenes的菌株差异所造成的突变体或变体等。
一种编码与上述源蛋白质基本相同的蛋白的DNA，可通过在适当的细胞中表达有突变的DNA并检测该被表达产物蛋白的活性或功能而获得。该编码与源蛋白质基本相同的蛋白的DNA还可通过，例如，从编码具有突变的蛋白质的DNA中或从携带该DNA的细胞中分离一种可同具有某种核苷酸序列的DNA或者探针在严格条件下杂交的DNA来进行，该核苷酸序列为在表1中所提及的序列号的序列或其编码区域，该探针基于该核苷酸序列而设计，所分离的DNA编码的蛋白质具有该蛋白质原初具有的功能。该活性在优选的情况下对于GDH指42℃下的酶活性或者对于CS指37℃下的酶活性。
通过使用适当的引物而进行的PCR，上述的探针可从任意一个具有表1所示的序列号的核苷酸序列的DNA中或者具有任一该核苷酸序列的DNA制备。
“严格条件”在此处指的是一种条件，在该条件下形成所谓的特异性杂交体并且不能形成非特异性杂交体。使用任何数值来清楚地表述该条件都是很困难的。但是，例如，该严格条件包括一种条件，在该条件下具有高同源性的DNA，例如具有不低于50％的同源性的DNA之间可以互相杂交，并且在该条件下所具有的同源性低于上值的DNA之间不能杂交。或者，严格条件的例子为一种条件，在该条件下DNA的相互杂交所处的盐浓度对应于Southern杂交的普通洗涤条件，即，60℃、1×SSC、0.1％的SDS，在优选的情况下为0.1×SSC、0.1％的SDS。
可在上述条件下进行杂交的基因，包括在其中产生了终止密码子的基因以及由于活性位点的突变而无活性的基因。但是，这样的基因可以通过将其同商业化的活性表达载体相连接并且测量其活性或功能而被简单的除去。
对应于本发明的各DNA的蛋白质可通过在适当的宿主-载体系统中表达该DNA而产生。
作为用于基因表达的宿主，多种原核细胞可被提及，包括乳发酵短杆菌(谷氨酸棒状杆菌)、诸如Corynebacterium thermoaminogenes这样的棒状杆菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等等，以及多种真核细胞，包括酿酒酵母、动物细胞和植物细胞。这些细胞中，原核细胞，特别是棒状杆菌和大肠杆菌是优选的。
如果本发明的DNA同一种可在大肠杆菌和/或棒状杆菌细胞中自行复制的载体DNA连接而形成了重组DNA，并且该重组子DNA被引入了一种大肠杆菌细胞，随后的步骤便会变得简单。在大肠杆菌细胞中自行复制的载体在优选的情况下为一种可在宿主细胞中自行复制的质粒载体，该质粒载体的例子包括pUC19、pUC18、pBR322、pHSG299、pHSG399、pHSG398、RSF1010等。
作为可在棒状杆菌细胞中自行复制的载体，可提及的有pAM330(参考Japanese Patent Laid-open No.58-67699/1983)、pHM1519(参考Japanese Patent Laid-open No.58-77895/1983)等。而且，如果将具有制造可在棒状杆菌细胞中自行复制的质粒的能力的DNA片段从这些质粒中取出并插入上述用于大肠杆菌的载体中，所产生的载体可被用作为所谓的穿梭载体，该载体在大肠杆菌和棒状杆菌中均可自行复制。
这样的穿梭载体的例子包括下文提及的载体。所示的还有携带这些载体的微生物以及括号中的这些微生物在国际保存库(internationaldepositories)中的获取号。
pAJ655   大肠杆菌AJ11882(FERM BP-136)
         谷氨酸棒状杆菌SR8201(ATCC39135)
pAJ1844  大肠杆菌AJ11883(FERM BP-137)
         谷氨酸棒状杆菌SR8202(ATCC39136)
pAJ611   大肠杆菌AJ11884(FERM BP-138)
pAJ3148  谷氨酸棒状杆菌SR8203(ATCC39137)
pAJ440   枯草芽孢杆菌AJ11901(FREM BP-140)
pHC4     大肠杆菌AJ12617(FERM BP-3532)
为了通过将本发明的DNA同在棒状杆菌中具有功能的载体进行连接而制备重组DNA，以一种限制性酶消化该载体，该限制性酶提供一种对应于本发明的DNA的末端的末端。该连接一般通过使用诸如T4 DNA连接酶这样的连接酶而完成。
为将上述的重组DNA引入一种诸如棒状杆菌这样的宿主，任何迄今为止已被报道的已知转化方法均可被应用。例如，可以使用一种方法对受体细胞进行氯化钙处理从而提高其对DNA的通透性，该方法已经针对大肠杆菌K-12进行了报道(Mandel，M.and Higa，A.，J.Mol.Biol.，52，159(1970))，还可使用一种方法来从处于生长期的细胞中制备感受态细胞，随后将该DNA引入其中，该方法已经针对枯草芽孢杆菌进行了报道(Duncan，C.H.，Wilson，G.A.and Young，F.E.，Gene，1，153(1977))。除这些方法之外，还可使用一种方法来将DNA受体细胞制成原生质体或者原生质球，它们易于摄取重组DNA，随后将该重组DNA引入这些细胞，该方法已知可应用于枯草芽孢杆菌、放线菌和酵母(Chang，S.and Choen，S.N.，Molec.Gen.Genet.，168，111(1979)；Bibb，M.J.，Ward，J.M.and Hopwood，O.A.，Nature，274，398(1978)；Hinnen，A.，Hicks，J.B.and Fink，G.R.，Proc.Natl.Sci.USA，75，1929(1978))。棒状杆菌的转化可通过电脉冲方法有效地进行(参考Japanese Patent Laid-openNo.2-207791)。
关于诸如Corynebacterium thermoamonogenes这样的嗜热棒状杆菌的转化，通过用一种可以改变宿主细胞的细胞壁的结构的试剂对细胞进行处理，并且对一种含有DNA和这些细胞壁已经改变的细胞的溶液应用电脉冲来有效地完成。上述的试剂可以改变细胞壁的结构，使得在对一种含有经该试剂处理的细胞以及DNA的溶液进行电脉冲时，这些细胞能够摄入DNA(在下文中亦称为“细胞壁处理试剂”)。这样的试剂的例子包括抑制细菌细胞壁的正常合成的试剂，还包括对细菌细胞壁进行裂解的试剂。它们的具体例子包括溶菌酶、青霉素G、甘氨酸等。
这些细胞壁处理试剂均可单独使用，或者其中两种或者更多种可联合使用。上述试剂中溶菌酶和青霉素G较为优选，并且溶菌酶特别地优选。
进一步，Corynebacterium thermoamonogenes的转化还可通过对含有DNA和经物理方法进行了细胞壁弱化的细胞进行电脉冲来完成，这样的物理方法的例子如超声(FEMS Microbiology Letters，151，135-138(1987))。
为有效地表达本发明的DNA中所含有的基因，可在该宿主细胞中发挥功能的启动子如lac、trp和PL可以连接于该基因编码区域的上游。如果使用含有一种启动子的载体作为该载体，各基因、载体和启动子的连接可一步完成。
可以如上所述而生产的本发明的蛋白质，可根据需要从细胞抽提物或者培养基中纯化，该纯化通过常规的方法进行，例如，离子交换层析、凝胶过滤层析、吸附层析、盐析和溶解沉淀。
预期本发明的蛋白在热稳定性上十分优秀或者同谷氨酸棒状杆菌等的相应蛋白相比较在高温下表现出更高的活性。例如，乳发酵短杆菌的GDH在37℃附近表现出最高的活性，并且该活性在42℃附近明显地降低。但是，本发明的GDH在42℃下所表现出的GDH活性等于或者高于37℃下的活性。在一个优选的实施方案中，本发明的GDH在42℃附近表现出最大活性并且甚至在45℃下还表现出活性。
GDH活性的测量可通过，例如，将该酶加入至100mM Tris-HCl(pH8.0)、20mM NH4Cl、10mM α-酮戊二酸、0.25mM NADPH并且测定在340nm下的吸收的变化来进行(Molecular Microbiology 6，317-326(1992))。
进一步，乳发酵短杆菌的CS在23℃附近表现出最高的CS活性，并且该活性在33℃附近明显降低。与之相反，本发明的CS在37℃下所表现出的CS活性等于或者高于23℃下的活性。在一个优选的实施方案中，本发明的CS表现出随反应温度提高的活性直至约37℃，并且甚至在40℃下仍表现出同37℃下的活性相比约40％的活性。
CS活性的测量可通过，例如，在Enzymol.，13，3-11(1969)中所描述的方法来进行。
进一步，本发明的其它蛋白典型的具有以下的特征。异柠檬酸裂合酶在50℃下处理5分钟后具有30％或者更多的残余活性。磷酸果糖激酶在60℃下的活性等于或者高于在30℃下的活性。磷酸肌醇丙酮酸羧化酶在45℃下处理5分钟后具有50％或者更高的残余活性。顺乌头酸酶在50℃下处理3分钟后具有30％或者更高的残余活性。异柠檬酸脱氢酶在45℃下处理10分钟后具有50％或者更高的残余活性。2-酮戊二酸脱氢酶在50℃下处理10分钟后具有30％或者更高的残余活性。
本发明的蛋白质还可从诸如Corynebacteriumthermoaminogenes AJ12310菌株这样的Corynebacteriumthermoaminogenes的细胞抽提物中，以各自活性作为指数使用纯化酶的常规方法来获得，例如，离子交换层析、凝胶过滤层析、吸附层析、盐析和溶解沉淀。
在本发明的DNA中，pfk、pdhA、pc、ppc、acn、icd、gdh和gltA(这些DNA所编码的酶的名称见表1)可被引入L-氨基酸生产菌中，例如棒状杆菌，以增强它们的L-氨基酸生产能力。引入了本发明的DNA的棒状杆菌还被预期能够在高于通常温度下生产L-氨基酸。这些L-氨基酸包括L-谷氨酸、L-天冬氨酸、L-赖氨酸、L-精氨酸、L-脯氨酸、L-谷氨酰胺等等。
例如，预期引入了gdh基因或者gltA基因的L-谷氨酸生产菌，例如棒状杆菌能够在高于通常温度下生产L-谷氨酸。进一步，尽管乳发酵短杆菌的CS可能在通常的培养温度下，例如在31.5℃下不能发挥全部功能，但是通过引入本发明的gltA基因该活性可被增强。
进一步，dtsR1和dtsR2是编码赋予棒状杆菌表面活性剂抗性的蛋白质(DTSR蛋白)的基因，这些基因受到破坏的产L-谷氨酸棒状杆菌会产生大量的L-谷氨酸，甚至在存在的生物素的量足以使野生型菌株基本不能产生L-谷氨酸的情况下仍是如此。进一步，如果具有L-赖氨酸生产能力的产L-谷氨酸棒状杆菌的dtsR1和dtsR2基因被扩增，则该细菌被赋予一种生产显著数量的L-赖氨酸的能力(WO95/23224，Japanese Patent Laid-open(Kokai)No.10-234371/1998)。
SrcB基因可被用于改善棒状杆菌以用于生产L-氨基酸，该生产通过在含有蔗糖的培养基中使用棒状杆菌来进行。
通过缺失产L-谷氨酸棒状杆菌等的aceA、accBC、lpd或odhA，它们的L-谷氨酸产量可获得提高。进一步，gluABCD为L-谷氨酸摄取系统的一种基因簇，并且通过缺失产L-谷氨酸棒状杆菌的gluA、gluB、gluC和gluD的其中一种到四种，积累于培养基中的L-谷氨酸的量可获得提高。本发明的aceA、accBC、lpd、odhA和gluABCD可被用于在染色体上破坏这些基因。
用于通过利用引入了本发明DNA的微生物来生产L-氨基酸的培养基可为通常的培养基，该培养基含有碳源、氮源、无机离子和其它所需的有机微量营养物。作为碳源，可以使糖类，例如葡萄糖、乳糖、半乳糖、果糖、蔗糖、blackstrap糖蜜以及淀粉水解物；醇类，例如乙醇和肌醇；或者有机酸，例如乙酸、延胡索酸、柠檬酸和琥珀酸。
作为氮源，可以使用无机铵盐，例如硫酸铵、柠檬酸铵、氯化铵、磷酸铵和乙酸铵、氨，有机氮源，例如蛋白胨、肉类抽提物、酵母抽提物、玉米浆和大豆水解物、氨气、氨水等等。
作为无机离子(或无机离子源)，所添加的为少量的磷酸钾、硫酸镁、铁离子、锰离子等等。对于有机微量营养物，添加所需的物质较为理想，例如所需的适量维生素B1、酵母抽提物等等。
在优选的情况下，培养在通气的条件下进行，该通气通过16到72小时的振荡、搅拌等而进行通气。培养的温度被控制在30℃到47℃之间，并且培养期间pH被控制在5到9。对于培养温度，培养可在适于未引入本发明的DNA的微生物的培养温度或比之更高的温度下进行。为进行pH的调节可以使用无机或者有机酸或碱物质、氨水等等。
L-氨基酸从发酵肉汤中的收集可通过已知方法的综合使用而完成，例如利用离子交换树脂、沉淀、结晶等等基于L-氨基酸的类型的工艺。
图表的简要解释
图1所示为来自Corynebacterium thermoaminogenes AJ12310菌株和乳发酵短杆菌2256菌株的谷氨酸脱氢酶的活性随温度的变化。
图2所示为来自该AJ12310菌株和2256菌株的谷氨酸脱氢酶的热稳定性。
图3所示为来自该AJ12310菌株和2256菌株的柠檬酸合成酶的活性随温度的变化。
图4所示为来自该AJ12310菌株和2256菌株的柠檬酸合成酶的热稳定性。
图5所示为来自该AJ12310菌株和2256菌株的异柠檬酸裂合酶的活性随温度的变化。
图6所示为来自该AJ12310菌株和2256菌株的异柠檬酸裂合酶的热稳定性。
图7所示为来自该AJ12310菌株和2256菌株的磷酸果糖激酶的活性随温度的变化。
图8所示为来自该AJ12310菌株和2256菌株的磷酸果糖激酶的热稳定性。
图9所示为来自该AJ12310菌株和2256菌株的磷酸烯醇丙酮酸羧化酶的活性随温度的变化。
图10所示为来自该AJ12310菌株和2256菌株的磷酸烯醇丙酮酸羧化酶的热稳定性。
图11所示为来自该AJ12310菌株和2256菌株的顺乌头酸酶的活性随温度的变化。
图12所示为来自该AJ12310菌株和2256菌株的顺乌头酸酶的热稳定性。
图13所示为来自该AJ12310菌株和2256菌株的异柠檬酸脱氢酶的活性随温度的变化。
图14所示为来自该AJ12310菌株和2256菌株的异柠檬酸脱氢酶的热稳定性。
图15所示为来自该AJ12310菌株和2256菌株的2-酮戊二酸脱氢酶的热稳定性。
图16所示为携带scrB基因的质粒pSCR155的结构。
图17所示为携带pdhA基因的质粒pPDHA-2的结构。
图18所示为一种pdhA基因扩增菌株的L-谷氨酸的产量：(a)37℃(b)44℃。
图19所示为携带icd基因的质粒pICD-4的结构。
图20所示为一种icd基因扩增菌株的L-谷氨酸的产量：(a)37℃(b)44℃。
图21所示为质粒pHSG299YGDH和pYGDH的结构。
图22所示为质粒pHSG299YCS和pYCS的结构。
实施本发明的最佳模式
在下文中，本发明将参考随后的实施例进行进一步具体地说明。
实施例1
<1>Corynebacterium thermoaminogenes的质粒库的产生
在CM2B液体培养基(1g/dl的酵母抽提物(产自Difco)、1g/dl的多蛋白胨(产自Nippon Seiyaku)、0.5g/dl的NaCl、10μg/dl的生物素，pH7.0(以KOH进行调节))中37℃下对Corynebacteriumthermoaminogenes AJ12310菌株进行15个小时的培养，并且使用一种染色体DNA抽提试剂盒(细菌基因组DNA纯化试剂盒)(AdvancedGenetic Technologies生产)从10ml的培养基中制备其染色体DNA。所获得DNA以限制性酶Sau3AI进行部分消化，并且用于0.8％琼脂糖凝胶电泳以进行DNA的分离。随后，从胶中切出对应于约4到6kb的DNA片段的一条带，并且通过使用一种DNA凝胶抽提试剂盒(GIBCOBRL，ConcertTM快速凝胶抽提系统)获得该目的大小的DNA片段。
以BamHI对质粒pHSG399进行完全消化，并且通过使用碱性磷酸酶(CIAP；Takara Shuzo制造)对其末端进行去磷酸化。通过使用由Takara Shuzo生产的DNA连接试剂盒对这一载体和上述的染色体DNA进行连接，并以所获得的重组载体对大肠杆菌JM109进行转化。转化子的选择在含有30μg/ml氯霉素、0.04mg/ml的IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)以及0.04mg/ml的X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)的LB琼脂培养基(含有1.5g/dl琼脂)上进行，获得了约4000个白色菌落。
<2>用于各基因的扩增的引物的设计
对用于通过PCR从以上获得的质粒文库中选择含有各靶基因的克隆的引物进行了设计。这些靶基因在上文提及。
这些引物基于棒状杆菌的已知基因序列进行设计，即，基于同其它微生物的对应基因进行比较时所观察到的在氨基酸水平上的保守区域的序列进行设计。考虑到棒状杆菌的密码子使用性，对每个基因设计了复合的引物组。
为检测所制备的引物的特征，使用这些引物以及使用Corynebacterium thermoaminogenes AJ12310菌株的染色体DNA作为模板进行PCR以扩增各基因片段。其结果，当使用表2到7中上排所示的引物，并在这些表中标识为“用于获得部分片段的PCR条件”的条件下进行PCR时，对于所有的基因均观察到了扩增片段。引物序列后的括号内的数字为该引物在序列表中的序列号。这些引物被用作为上述的筛选的引物。
表2
    基因  aceA  accBC  dtsR1
5’→3’引物3’→5’引物 CCTCTGCCCAGCGAACTCCG(35)CTGCCTTGAACTCACGGTTC(36) CATCCACCCCGGCTACGGCT(37)CGGTGACTGGGTGTTCCACC(38) ACGGCCCAGCCCTGACCGAC(39)AGCAGCGCCCATGACGGCGA(40)
用于获得部分片段的PCR条件和用于筛选的PCR条件 94℃，5分钟98℃，5秒66℃，2秒，30个循环Z-Taq 94℃，5分钟98℃，5秒66℃，2秒，30个循环Z-Taq 94℃，5分钟98℃，5秒66℃，2秒，30个循环Z-Taq
菌落PCR条件 94℃，7分钟91℃，30秒55℃，1秒72℃，2.5分钟，30个循环Ex-Taq 94℃，7分钟91℃，30秒55℃，1秒72℃，2.5分钟，30个循环Ex-Taq 94℃，7分钟91℃，30秒55℃，1秒72℃，2.5分钟，30个循环Ex-Taq
被扩增片段     824bp 673bp 805bp
表3
基因 dtsR2  pfk  scrB
5’→3’引物3’→5’引物 ACGGCCCAGCCCTGACCGAC(41)AGCAGCGCCCATGACGGCGA(42) CGTCATCCGAGGAATCGTCC(43)CGTGGCGGCCCATGACCTCC(44) GGNCGHYTBAAYGAYCC(45)GGRCAYTCCCACATRTANCC(46)
用于获得部分片段的PCR条件和用于筛选的PCR条件 94℃，5分钟98℃，5秒66℃，2秒，30个循环Z-Taq 94℃，5分钟98℃，5秒66℃，2秒，30个循环Z-Taq 94℃，5分钟98℃，5秒50℃，10秒72℃，20秒，40个循环Z-Taq
菌落PCR条件 94℃，7分钟91℃，30秒55℃，1秒72℃，2.5分钟，30个循环Ex-Taq 94℃，7分钟91℃，30秒55℃，1秒72℃，2.5分钟，30个循环Ex-Taq 94℃，7分钟91℃，30秒55℃，1秒72℃，2.5分钟，30个循环Ex-Taq
被扩增片段 805bp 472bp 500bp
表4
    基因     gluABCD pdbA
5’→3’引物3’→5’引物 CCATCCGGATCCGGCAAGTC(47)AATCCCATCTCGTGGGTAAC(48) ACTGTGTCCATGGGTCTTGGCCC(49)CGCTGGAATCCGAACATCGA(50)
用于获得部分片段的PCR条件 94℃，5分钟98℃，5秒50℃，10秒72℃，20秒，30个循环Z-Taq 94℃，5分钟98℃，5秒50℃，10秒72℃，20秒，30个循环Z-Taq
被扩增片段 500bp 1200bp
用于筛选的PCR条件以及菌落PCR条件 94℃，5分钟91℃，30秒55℃，1秒72℃，2分钟，30个循环Ex-Taq 94℃，5分钟91℃，30秒55℃，1秒72℃，2分钟，30个循环Ex-Taq
表5
    基因 pc ppc
5’→3’引物3’→5’引物 GGCGCAACCTACGACGTTGCAATGCG(51)TGGCCGCCTGGGATCTCGTG(52) GGTTCCTGGATTGGTGGAGA(53)CCGCCATCCTTGTTGGAATC(54)
用于获得部分片段的PCR条件 94℃，5分钟98℃，5秒55℃，80秒，30个循环Z-Taq 94℃，5分钟98℃，5秒50℃，5秒72℃，10秒，30个循环Z-Taq
被扩增片段 781bp 71000bp
用于筛选的PCR条件 94℃，5分钟98℃，5秒55℃，80秒，30个循环Z-Taq 94℃，5分钟98℃，5秒50℃，5秒72℃，10秒，30个循环Z-Taq
菌落PCR条件 94℃，5分钟98℃，5秒50℃，5秒72℃，10秒，50个循环Z-Taq 94℃，5分钟98℃，5秒50℃，10秒72℃，20秒，50个循环Z-Taq
表6
    基因 acn icd lpd
5’→3’引物3’→5’引物 GTIGGIACIGAYTCSCATAC(55)GCIGGAGAIATGTGRTCIGT(56) GACATTTCACTCGCTGGACG(57)CCGTACTCTTCAGCCTTCTG(58) ATCATCGCAACCGGTTC(59)CGTCACCGATGGCGTAAAT(60)
用于获得部分片段的PCR条件 94℃，1分钟96℃，20秒45℃，1分钟68℃，2分钟，30个循环EX-Taq 94℃，5分钟98℃，5秒55℃，80秒，30个循环Z-Taq 94℃，5分钟98℃，5秒50℃，10秒72℃，20秒，30个循环Z-Taq
被扩增片段 1500bp 1500bp 500bp
用于筛选的PCR条件以及菌落PCR条件测序PCR5’→3’引物3’→5’引物 同上 同上 94℃，5分钟94℃，30秒57℃，1分钟72℃，1分钟，30个循环EX-TaqTACGAGGAGCAGATCCTCAA(63)TTGACGCCGGTGTTCTCCAG(64)
LA克隆(N’)3’→5’引物 S1：GGTGAAGCTAAGTAGTTAGC(65)S2：AGCTACTAAACCTGCACC(66) S1：CCGTACTCTTCAGCCTTCTG(67)S2：TCGTCCTTGTTCCACATC(68) S1：ATCATCGCAACCGGTTC(69)S2：TACGAGGAGCAGATCCTCAA(70)
LA克隆(C’)5’→3’引物 S1：GCTAACTACTTAGCTTCACC(71)S2：GAACCAGGAACTATTGAACC(72) S1：TCCGATGTCATCATCGAC(73)S2：TCCGATGTCATCATCGAC(73)
限制性酶 PstI(N’)HindIII(C’) SalI(N’)PstI(C’) HindIII
LA克隆的条件    N’94℃，1分钟94℃，30秒57℃，2分钟72℃，2分钟，30个循环LA-TaqC’94℃，1分钟94℃，30秒57℃，2分钟72℃，2.5分钟，30个循环LA-Taq 94℃，1分钟94℃，30秒57℃，2分钟72℃，2.5分钟，30个循环LA-Taq 94℃，1分钟94℃，30秒57℃，2分钟72℃，1分钟，30个循环LA-Taq
表7
    基因 odhA
5’→3’引物3’→5’引物 ACACCGTGGTCGCCTCAACG(61)TGCTAACCCGTCCCACCTGG(62)
用于获得部分片段的PCR条件 94℃，5分钟98℃，2秒68℃，2秒，30个循环Z-Taq
被扩增片段 1306bp
LA克隆(N’)5’→3’引物 S1：GTACATATTGTCGTTAGAACGCGTAATACGACTCA(75)S2：CGTTAGAACGCGTAATACGACTCACTATAGGGAGA(76)
限制性酶 XbaI
LA克隆的条件 第一次 94℃，1分钟55℃，2分钟72℃，1分钟，30个循环LA-Taq
第二次 94℃，1分钟第三次 98℃，20秒68℃，15分钟，30个循环72℃，10分钟LA-Taq
<3>通过PCR对质粒文库进行筛选
通过PCR从质粒文库中选出含有一种靶基因的克隆。从各质粒文库中挑出60个菌落，并且在两个LB琼脂培养基平板上进行复制。以各平板的60个菌落进行组合，接种入含有4ml LB液体培养基的测试试管中并且培养15个小时。随后，分别通过使用Promega生产的质粒DNA抽提试剂盒获得质粒混合物。通过使用这一质粒混合物作为模板并且使用针对个靶基因而制备的筛选引物，在各表中的“用于筛选的PCR条件”下进行PCR以选出一种克隆，从该克隆中可获得一种DNA片段，该片段的大小与使用染色体DNA作为模板所扩增的DNA相同。
通过使用一种Perkin-Elmer生产的BigDyedye终止体循环测序试剂盒(terminator cycles equencing kit)来测定所扩增的DNA片段的核苷酸序列，并且对其同已知基因信息的同源性进行研究以确定是否获得了该靶基因。
对于lpd，由于以<2>中生产的引物扩增不出任何DNA片段，所以基于所测定的核苷酸序列而制备了其它的筛选引物。
<4>通过菌落PCR进行的对携带靶基因的克隆的选择
通过使用一种平板而进行了菌落PCR以选择含有该基因片段的克隆，该平板为质粒混合物的来源，对此已经证实了靶基因的扩增。该菌落PCR以表2-7所示的条件进行。
质粒DNA选自一种被选定的转化子，并且对被插入DNA片段的核苷酸序列进行了测定。当该靶基因的全长并未被插入该被插入DNA片段中，并且上游区域、下游区域或两者均被缺失时，基于被测定的核苷酸序列而制备了引物，利用这些引物通过使用Takara LA PCR体外克隆试剂盒(Takara Shuzo)获得了含有全长的靶基因核苷酸序列的基因片段。随后测定了其核苷酸序列。
LA PCR克隆的纲要如下。产生两种引物，这两种引物各具有该被插入DNA片段的两个区域之一。以多种限制性酶对Corynebacteriumthermoaminogenes AJ12310菌株的染色体DNA进行消化，并且与一种对应于各限制性酶的盒式引物进行连接。通过使用这样的DNA作为模板，用一种对应于远离该缺失区域位置的引物(S1)和一种对应于所制备的引物中的盒式引物之外位置的引物(C1)进行PCR。随后，用一种对应于接近该缺失区域的位置的引物(S2)和一种对应于所制备的引物中的盒式引物之内的位置的引物(C2)进行PCR。通过这一途径而获得了一种含有该缺失区域的DNA片段。通过将所获得的该DNA片段同已经获得的DNA片段进行连接而获得了一种含有该靶基因的全长DNA片段。由于该盒的5’末端没有磷酸基团，在该DNA片段的3’末端和该盒的5’末端的连接位置可能形成一种缺刻。因此，在第一次PCR中从C1引物开始的的DNA的合成终止于这一连接位置，并且由此而不能进行非特异性的扩增。因此可以达到特异性的扩增。
表2-7所示为用于LA PCR克隆的引物和反应条件。在这些表中，以“(N’)”提到的引物为用于基因上游缺失部分的克隆的引物，以“(C’)”提到的引物为用于基因下游缺失部分的克隆的引物。根据LA PCR克隆试剂盒附带的指导进行两次PCR。在这些表中所提及的引物中，用于第一次反应的引物(S1)在上排中显示，用于第二次反应的引物(S2)在下排中显示。
如上所述所获得的含有各基因的DNA片段的核苷酸序列用与上文相同的手段进行测定。这些核苷酸序列和可由这些核苷酸序列编码的氨基酸序列见SEQ ID NOS：1-3 4。以这些序列号所示的序列在此后提及的序列表解释中加以概述。
对于scrB，没有发现任何开放读码框架。由于Corynebacteriumthermoaminogenes AJ12310菌株不具有蔗糖酶活性并且不具有任何蔗糖同化特征，从具有蔗糖同化特征的Corynebacteriumthermoaminogenes AJ12340和AJ12309中以类似方式获得了ScrB基因。其结果，从这两个菌株中均获得了具有开放读码框架的DNA片段。
实施例2：gdh知gltA基因的获得
<1>Corynebacterium thermoaminogenes的GDH活性的研究
Corynebacterium thermoaminogenes的野生型菌株AJ12310细胞在CM-2B琼脂培养基上生长(1g/dl的酵母抽提物(产自Difco)、1g/dl的多蛋白胨(产自Nippon Seiyaku)、0.5g/dl的NaCl、10μg/dl的生物素，KOH调节至pH 7.0)。将这些细胞接种于一个含有20ml烧瓶培养基的500-ml体积的烧瓶中并且在37℃下培养17个小时(直到剩余的糖达到约1g/dl)，该烧瓶培养基中含有以下组合物。
类似地，乳发酵短杆菌2256菌株(ATCC13869)的细胞在CM-2B琼脂培养基上31.5℃下培养17个小时。
[烧瓶培养基]
葡萄糖            3g/dl
KH2PO4            0.1g/dl
MgSO4·H2O        0.04g/dl
FeSO4·7H2O       1mg/dl
MnSO4·4H2O       1mg/dl
维生素B1-HCl      200μg/L
生物素            50μg/L
(NH4)2SO4         1.5g/dl
大豆蛋白水解溶液  48mg/dl
(Memeno(T-N))
CaCO3(Official regent)  5g/dl(分开灭菌)
pH8.0(KOH调节)
以1000rpm对约1ml的上述培养基进行1分钟的离心以除去CaCO3，并且以200mM的K-磷酸缓冲液(pH6.9)对细胞进行洗涤并且悬浮于300μl的相同缓冲液中。对所获得的细胞悬浮物进行5分钟的超声以破碎细胞，在1000rpm下离心30分钟以获得粗级酶溶液的上清。
使用上述的粗级酶溶液检测GDH活性的最佳反应温度和热稳定性。GDH活性的测量通过将该粗级酶溶液加至一种反应混合物(100mMTris-HCl(pH8.0)，20mM的NH4Cl，10mM的α-酮戊二酸钠，0.25mMNADPH)中并测量340nm下的吸收变化而进行。该粗级酶溶液的蛋白质含量通过Bradford方法(Bio-Rad蛋白质分析试剂盒)使用牛血清白蛋白作为标准通过对595nm吸收的测量而进行定量。该吸收通过使用HITACHI U-2000(Hitachi生产)而进行。
图1所示为在不同的反应温度下测得的GDH活性。尽管ATCC13869菌株在37℃附近表现出最高的GDH特异活性并且该活性在42℃附近明显降低，但是AJ12310菌株在42℃附近表现出最高的特异活性并且它甚至在45℃还表现出活性。
随即对GDH的热稳定性进行了测试。在反应之前，在65℃下放置粗级酶溶液0到30分钟，并且随后在30℃下测量该酶活性。结果见图2。从这些结果清晰可见，尽管ATCC13865菌株的GDH被5分钟的热处理所失活，AJ12310菌株的GDH甚至在30分钟的热处理后依然维持。另外，AJ12310菌株的粗级酶溶液甚至在65℃下处理90分钟后在GDH活性方面基本不表现出变化(数据未出示)。
<2>Corynebacterium thermoaminogenes的GCS活性的检测
使用粗级酶溶液检测CS的最佳反应温度和热稳定性，该粗级酶溶液以同实施例1相同的方式从Corynebacterium thermoaminogenesAJ12310菌株和乳发酵短杆菌ATCC13869菌株的细胞中制备。CS活性的测量通过将各粗级酶溶液加至一种反应混合物(100mM Tris-HCl(pH8.0)，0.1mM的DTNB(5，5’-dithiobis-(2-nitrobenzoicacid))，200mM的L-谷氨酸钠，0.3mM脂酰辅酶A)中并测量412nm处的吸收变化而进行。
图3所示为在不同的反应温度下测得的CS活性。ATCC13869菌株在23℃附近表现出最高的CS比活性并且该活性在33℃附近明显降低。但是，AJ12310菌株直至37℃附近仍然表现出依赖于反应温度的高度活性，并且它甚至在40℃还表现出相对于37℃下约40％的活性。
随后对CS的热稳定性进行了检测。在反应之前，将该粗级酶溶液在35-55℃下放置5分钟并且随后在30℃下测量该酶的活性。结果见图4。ATCC13869菌株的CS可被35-40℃的热处理灭活，而AJ12310菌株的CS甚至在50℃下处理后仍然维持约40％的活性。
<3>Corynebacterium thermoaminogenes的ghd基因的获得
对已经报道的多种微生物的gdh基因的核苷酸序列进行了比较。选中了一个含有高度保守的核苷酸序列的区域，并且基于该区域的核苷酸序列制备了具有SEQ ID NOS：77和78所示的核苷酸序列的引物。
通过使用从Corynebacterium thermoaminogenes AJ12310菌株中制备的染色体DNA作为模板以及上述的引物进行PCR，该染色体DNA使用细菌基因组DNA纯化试剂盒(Advanced Genetic Technologies制造)进行制备。基于所获得的DNA片段，通过使用Takara LA PGR体外克隆试剂盒进行了基因组步移以获得完整的gdh基因。结果见SEQID NO：79。进一步，从这一核苷酸序列推导出的氨基酸序列见SEQ IDNO：80。
以类似的方式获得乳发酵短杆菌ATCC13869菌株的gdh基因，并且测定其核苷酸序列。结果见SEQ ID NO：81。由这一核苷酸序列所编码的氨基酸序列见SEQ ID NO：82。
对如上所述测定的Corynebacterium thermoaminogenes AJ12310菌株和乳发酵短杆菌ATCC13869菌株gdh基因的核苷酸序列和GDH的氨基酸序列，以及已知的谷氨酸棒状杆菌(C.glutamicum)ATCC13032的gdh基因和GDH氨基酸序列(Molecular Microbiology 6，317-326(1992))的同源性进行了研究。结果见表8(核苷酸序列)和表9(氨基酸序列)。
表8：不同的gdh基因的核苷酸序列的同源性
  ATCC13869   ATCC13032     AJ12310
ATCC13869   -   94.5％     82.4％
ATCC13032   -   -     78.1％
AJ12310   -   -     -
表9：不同的GDH的氨基酸序列的同源性
  ATCC13869   ATCC13032     AJ12310
ATCC13869   -   90.8％     91.7％
ATCC13032   -   -     83.4％
AJ12310   -   -     -
<4>Corynebacterium thermoaminogenes的gltA基因的获得
对已经报道的多种微生物的gltA基因的核苷酸序列进行了比较。选中了一个含有高度保守的核苷酸序列的区域并且基于该区域的核苷酸序列制备了具有SEQ ID NOS：83和84所示的核苷酸序列的引物。
通过使用从Corynebacterium thermoaminogenes AJ12310菌株(FERM BP-1542)中制备的染色体DNA作为模板以及上述的引物7和8进行PCR，该染色体DNA使用细菌基因组DNA纯化试剂盒(AdvancedGenetic Technologies制造)进行制备，并且对约0.9kb的被扩增的核苷酸序列进行了测定。
根据所获得的谷氨酸棒状杆菌的gltA基因的核苷酸序列(Microbiol.，140，1817-1828(1994))而制备了SEQ ID NOS：85、86、87和88的引物。以类似于上文的方式使用AJ12310的染色体DNA作为模板并且使用SEQ ID NOS：85、86、87和88的引物进行PCR，对被扩增的DNA片段的核苷酸序列进行鉴定以测定该gltA基因的完整核苷酸序列。结果见SEQ ID NO：89。进一步，由这一核苷酸序列而预期的氨基酸序列见SEQ ID NO：90。
以类似的方式获得乳发酵短杆菌2256菌株的gltA基因并且测定其核苷酸序列。结果见SEQ ID NO：91。这一核苷酸序列所编码的氨基酸序列见SEQ ID NO：92。
对如上所述测定的Corynebacterium thermoaminogenes AJ12310菌株和乳发酵短杆菌ATCC13869菌株gltA基因的核苷酸序列和CS的氨基酸序列，以及已知的谷氨酸棒状杆菌(C.glutamicum)ATCC13032的gltA基因和CS氨基酸序列(Microbiol.，140，1817-1828(1994))的同源性进行了研究。结果见表10(核苷酸序列)和表11(氨基酸序列)。
表10：不同的gltA基因的核苷酸序列的同源性
  ATCC13869     ATCC13032     AJ12310
ATCC13869   -     99.5％     85.7％
ATCC13032   -     -     85.6％
AJ12310   -     -     -
表11：不同的CS的氨基酸序列的同源性
  ATCC13869     ATCC13032     AJ12310
ATCC13869   -     99.3％     92.1％
ATCC13032   -     -     92.1％
AJ12310   -     -     -
实施例3：Corynebacterium thermoaminogenes的scrB基因的获得
由于scrB基因片段如实施例1所示从Corynebacteriumthermoaminogenes AJ12309菌株的中获得，对基因的全序列的获得进行了尝试。首先，使用在SEQ ID NO：45和SEQ ID NO：46中所示的引物，以与实施例1相同的方式获得了一个部分片段。这些引物基于乳发酵短杆菌2256菌株的scrB序列(Japanese Patent Laid-openNo.08-196280/1996)进行合成。
另外，通过使用细菌基因组DNA纯化试剂盒(Advanced GeneticTechnologies Corp.)从AJ12309菌株中制备了染色体DNA。向0.5μg的该染色体DNA、50pmol的各种上述引物、4μl的dNTP混合物(每种2.5mM)、5μl的10×Z-Taq缓冲液(Taraka Shuzo)以及2U的Z-Taq(Taraka Shuzo)中加入无菌水以制备总体积为50μl的PCR反应缓冲液。使用上述的反应混合物以及热循环仪GeneAmp PCR系统9600(PE)进行PCR  扩增出约600bp的scrB部分片段，该PCR所用的循环为98℃下进行5秒钟的变性，在50℃下进行10秒钟的结合并且在72℃下进行20秒钟的延伸反应，该过程重复循环30次。
随后，通过使用LA PCR体外克隆试剂盒(Takara Shuzo)来测定scrB的全序列。所有这些过程均根据该LA PCR体外克隆试剂盒所附带的方案而进行。根据所获得的部分序列而合成了在SEQ ID NOS：97、98、99和100中出示的序列。为进行用于对上游区域进行测序的第一个PCR反应，而使用了SEQ ID NOS：95和97所示的引物以及作为模板的AJ12309菌株染色体DNA，该染色体DNA经EcoT14I消化。为进行第二个PCR反应而使用了SEQ ID NOS：96和98所示的的引物。为进行用于对下游区域进行测序的第一个PCR反应而使用了SEQ IDNOS：95和99所示的引物以及作为模板的AJ12309菌株染色体DNA，该染色体DNA经SalI(Takara Shuzo)消化。为进行第二个PCR反应而使用了SEQ ID NOS：96和100所示的的引物。通过上述的步骤，对含有scrB的ORF的1656bp全长序列进行了测定。这一核苷酸序列示于SEQ ID NO：93，所推定的氨基酸序列见SEQ ID NO：94。
实施例4：异柠檬酸裂合酶、磷酸果糖激酶、磷酸烯醇丙酮酸羧化酶、 顺乌头酸酶、异柠檬酸脱氢酶以及2-酮戊二酸脱氢酶的热稳定性的检 测
对下列来自Corynebacterium thermoaminogenes的酶的热稳定性进行了检测。在本实施例中，蛋白质浓度使用牛血清白蛋白作为标准蛋白通过Bradford方法(所使用的为Bio-Rad蛋白质分析试剂盒)进行测量。进一步，除非另外说明，吸光度的测量通过使用HITACHIU-2000(Hitachi)来进行。
<1>异柠檬酸裂合酶
对来自Corynebacterium thermoaminogenes AJ12310菌株的异柠檬酸裂合酶(此后亦称为“ICL”)以及乳发酵短杆菌2256(ATCC13869)菌株的ICL的活性的热稳定性进行了测定。为进行活性测量，所使用的细胞在含有表2中提及的组合物的培养基中的培养，在所有碳源完全耗尽之前终止。该活性测量的方法在Dieter J.Reinscheid et al.，J.Bacteriol.，176(12)，3474(1994)中有所描述。具体地，以50mM的Tris缓冲液(pH7.3)洗涤这些细胞，在相同的缓冲液中进行悬浮，并且通过超声进行破碎(所使用的为KUBOTA制造的INSONATOR 201M，200W，5分钟)。超声之后，对悬浮物进行离心(13000×g，30分钟)来除去未破碎的细胞以制备粗级酶溶液。
将该粗级酶溶液加至一个反应系统，并且通过Hitachi分光光度计U-3210来测定不同温度下(30、40、50、60或70℃)的340nm处的吸收，该反应系统含有50mM MOPS-NaOH(pH 7.3)、5mM二硫苏糖醇、15mM MgCl2、1mM EDTA、5mM D-苏型-异柠檬酸、0.2mM NADH以及18U的LDH(乳酸脱氢酶)。不同反应温度测量结果见图5。进一步，在50℃下对粗级酶溶液进行预处理(预处理时间：5分钟或者15分钟)并且在37℃下对其活性进行测量。结果见图6。
其结果，AJ12310菌株的ICL在60℃下表现出最大活性，而2256菌株的ICL在约50℃下表现出最大活性。进一步，经5分钟的预处理后2256菌株的ICL完全失活，而AJ12310菌株的ICL经预处理5分钟之后保留了一半的活力。由此而证实了AJ12310菌株的ICL在高温下的稳定性。
表12用于ICL活性测量的培养基的组成
 组分     浓度
 (NH4)2SO4     5g/l
 脲     5g/l
 KH2PO4     0.5g/l
 K2HPO4     0.5g/l
 MOPS     20.9g/l
 MgSO4·7H2O     0.25g/l
 CaCl2·7H2O     10mM
 CuSO4·7H2O     0.2mg/l
 生物素     0.2mg/l
 MnSO4·7H2O     10mg/l
 FeSO4·7H2O     10mg/l
 ZnSO4·7H2O     1mg/l
 乙酸     4％
<2>磷酸果糖激酶
对来自Corynebacterium thermoaminogenes AJ12310菌株的磷酸果糖激酶(此后亦称为“PKF”)以及乳发酵短杆菌2256菌株的PKF的活性的热稳定性进行了测定。为进行活性测量，所使用的细胞在含有表13中提及的组合物的培养基中的培养，在所有的糖完全耗尽之前终止。该活性测量的方法在Michiko Mori et al.，Agric.Biol.Chem.，51(10)，2671(1994)中有所描述。具体地，以0.1M的Tris缓冲液(pH 7.5)洗涤这些细胞，在相同的缓冲液中进行悬浮，并且通过超声进行破碎(所使用的为KUBOTA制造的INSONATOR 201M，200W，5分钟)。超声之后，对悬浮物进行离心(13000×g，30分钟)来除去未破碎的细胞以制备粗级酶溶液。
将该粗级酶溶液加至一个反应系统，并且通过Hitachi分光光度计U-3210来测定不同温度下(30、40、50、60或70℃)的340nm处的吸收，该反应系统含有100mMTris缓冲液(pH7.5)、0.2mM NADH、10mM MgCl2、2mM NH4Cl、10mM KCl、0.2mM磷酸烯醇式丙酮酸、6.4mM果糖-6-磷酸、1mM ATP以及4μg的LDH/PK(丙酮酸激酶)。不同反应温度下的测量结果见图7。进一步，在50℃下对该粗级酶溶液进行预处理(预处理时间：1、3、5分钟或者10分钟)并且在37℃下对其活性进行测量。结果见图8。
其结果，AJ12310菌株的PKF在约50℃下表现出最大活性，而2256菌株的PKF在约30℃下表现出最大活性。由此而证实了AJ12310菌株的PKF活性的最佳温度处于高温区域。
表13用于PKF活性测量的培养基的组成
    组分     浓度
    多蛋白胨     20g/l
    酵母抽提物     20g/l
    氯化钠     5g/l
    葡萄糖     20g/l
<3>磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶
对来自Corynebacterium thermoaminogenes AJ12310菌株的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(此后亦称为“PEPC”)以及乳发酵短杆菌2256菌株的PEPC的活性的热稳定性进行了测定。
将在CM2-B琼脂培养基上生长的AJ12310菌株细胞接种于一个含有20ml烧瓶培养基(8g/dl的葡萄糖、0.1g/dl的KH2PO4、0.04g/dl的MgSO4·H2O、1mg/dl的FeSO4·7H2O、5mg/dl的MnSO4·4H2O、3g/dl的(NH4)2SO4、48mg/dl的TN(大豆蛋白水解溶液)、200μg/L的维生素B1、300μg/L的生物素、50μl/l的GD-113(消泡剂)、5g/dl的CaCO3(official regent，分开灭菌)，pH8.0(以KOH调节))的500-ml体积的烧瓶中并且在37℃下培养。2256菌株细胞在CM-2B琼脂培养基上在31.5℃下进行类似地培养。
上述令细胞生长至对数培养期的培养肉汤在1000rpm下离心1分钟以除去CaCO3，并且以洗涤缓冲液(100mM Tris/HCl pH8.0，10mMDTT，20％甘油)洗涤这些细胞3次，超声破碎细胞并且以15krpm离心10分钟以除去细胞碎片。上清以60krpm进行1小时的进一步离心以获得上清的粗级酶溶液。
通过使用上述的粗级酶溶液对PEPC活性的最佳反应温度和热稳定性进行检测。PEPC活性的测量通过将粗级酶溶液加至一种反应混合物(100mM Tris/H2SO4(pH 8.5)、5mM磷酸烯醇式丙酮酸、10mM KHCO3、0.1mM乙酰辅酶A、0.15mM的NADH、10mM MgSO4、10U的苹果酸脱氢酶、0.1mM DTT)并且在800μl反应体积中测量340nm处的吸收变化来进行。
图9所示为在不同反应温度下测定的PEPC活性。2256菌株的活性在40℃下明显地减少，而AJ12310菌株甚至在40℃下基本不表现出活性的降低。
随后对PEPC的热稳定性进行了检测。在反应之前将该粗级酶溶液在45℃下放置0-20分钟，并且随后在20℃下测量该酶活性。结果见图10。从结果清晰可见，2256菌株的PEPC活性在经过10分钟的热处理后基本丧失，AJ12310菌株的PEPC甚至在热处理20分钟后仍然保持。
这些结果显示了AJ12310菌株的PEPC在高温下的稳定性。
<4>顺乌头酸酶
测定了来自Corynebacterium thermoaminogenes AJ12310菌株的顺乌头酸酶(此后亦称为“ACN”)以及乳发酵短杆菌2256菌株的ACN，以及其热稳定性。
将在CM2-B琼脂培养基上生长的AJ12310菌株细胞接种于一个含有20ml烧瓶培养基的500-ml体积的烧瓶中并且在37℃下培养，该烧瓶培养基含有的组分与<3>中提及的组分相同。2256菌株细胞在CM-2B琼脂培养基上在31.5℃下进行类似地培养。
上述令细胞生长至对数培养期的培养肉汤在1000rpm下离心1分钟以除去CaCO3，并且以50mM Tris/HCl pH8.0洗涤这些细胞3次，超声破碎细胞并且以15krpm离心10分钟以获得上清的粗级酶溶液。
通过使用上述的粗级酶溶液对ACN活性的最佳反应温度和热稳定性进行检测。ACN活性的测量通过将粗级酶溶液加至一种反应混合物(20mM Tris/HCl(pH 7.5)、50mM NaCl、20mM异柠檬酸三钠)并且在800μl反应体积中测量240nm处的吸收变化来进行。
图11所示为在不同反应温度下测定的ACN活性。同2256菌株相比较，AJ12310菌株在高温之下表现出更高的活性。
随后对ACN的热稳定性进行了检测。在反应之前将该粗级酶溶液在50℃下放置0-15分钟，并且随后在30℃下测量该酶活性。结果见图12。从结果清晰可见，同2256菌株相比较，AJ12310的ACN表现出较少的由于热处理所造成活性降低。
这些结果显示了AJ12310菌株的ACN在高温下的稳定性。
<5>异柠檬酸脱氢酶
对来自Corynebacterium thermoaminogenes AJ12310菌株的异柠檬酸脱氢酶(此后亦称为“ICDH”)以及乳发酵短杆菌2256菌株的ICDH的活性的热稳定性进行了测定。
将在CM2-B琼脂培养基上生长的AJ12310菌株细胞接种于一个含有20ml烧瓶培养基的500-ml体积的烧瓶中并且在37℃下培养，该烧瓶培养基含有的组分与<3>中提及的组分相同。2256菌株细胞在CM-2B琼脂培养基上31.5℃下进行类似地培养。
上述令细胞生长至对数培养期的培养肉汤在1000rpm下离心1分钟以除去CaCO3，并且以50mM Tris/HCl pH 7.5洗涤这些细胞3次，超声破碎细胞并且以15krpm离心10分钟以获得上清的粗级酶溶液。
通过使用上述的粗级酶溶液对ICDH活性的最佳反应温度和热稳定性进行检测。ICDH活性的测量通过将粗级酶溶液加至一种反应混合物(35mM Tris/HCl、0.35mM EDTA(pH 7.5)、1.5mM MnSO4、0.1mM NADP、1.3mM异柠檬酸三钠)并且在800μl反应体积中测量340nm处的吸收变化来进行。
图13所示为在不同反应温度下测定的ICDH活性。2256菌株的活性在70℃下明显地减少，而AJ12310菌株甚至在70℃下基本观察不到活性的降低。
随后对ICDH的热稳定性进行了检测。在反应之前将该粗级酶溶液在45℃下放置0-15分钟，并且随后在30℃下测量该酶活性。结果见图14。从结果清晰可见，对于2256菌株，经过15分钟的热处理后仅仅观察到15％的残余活性，而对于AJ12310菌株可观察到60％的残余活性。
这些结果显示了AJ12310菌株的ICDH在高温下的稳定性。
<6>2-酮戊二酸脱氢酶
对来自Corynebacterium thermoaminogenes AJ12310菌株的2-酮戊二酸脱氢酶(此后亦称为“ODHC”)以及乳发酵短杆菌2256菌株的ODHC进行了测试并对其热稳定性进行了测定。
为进行活性测量，所使用的细胞在含有表14中提及的组合物的培养基中的培养，在所有糖完全耗尽之前终止。该活性测量的方法在Isamu Shiio et al.，Agric.Biol.Chem.，44(8)，1897(1987)中有所描述。具体地，以0.2％的氯化钾洗涤这些细胞，在100mMTES-NaOH(pH7.5)，30％的甘油溶液中进行悬浮，并且通过超声进行破碎(所使用的为KUBOTA制造的INSONATOR 201M，200W，5分钟)。超声之后，对悬浮物进行离心(13000×g，30分钟)来除去未破碎的细胞，并且使用同样缓冲液和Sephadex-G25进行凝胶过滤以制备粗级酶溶液。
将该粗级酶溶液加至一个反应系统，并且通过Hitachi分光光度计U-3210来测定不同温度下(30、40、50、60或70℃)的365nm下的吸收，该反应系统含有100mM TES-NaOH(pH 7.7)、5mM MgCl2、0.2mM辅酶A、0.3mM脱羧辅酶、1mMα-酮戊二酸、3mM L-半胱氨酸以及1mM的乙酰吡啶-腺嘌呤二核苷酸。不同反应温度测量结果见图5。进一步，在50℃下对粗级酶溶液进行预处理(预处理时间：5分钟或者15分钟)并且在37℃下对其活性进行测量。结果见图15。
其结果，经10分钟的预处理后2256菌株的ODHC完全失活，而AJ12310菌株的ODHC活性基本保持恒定并不因预热时间不同而变化，并且由此而证实了该菌株的ODHC在高温下的稳定性。
表14用于ODHC活性测量的培养基的组成
 组分     浓度
 葡萄糖     80g/l
 KH2PO4     1g/l
 MgSO4·7H2O     0.4g/l
 FeSO4·7H2O     0.01g/l
 MnSO4·7H2O     0.05g/l
 (NH4)2SO4     30g/l
大豆蛋白水解物     480mg/l
盐酸硫胺素     200μg/l
生物素     300μg/l
实施例5：以srcB基因进行的基因转移所造成的蔗糖同化能力的获得
由于Corynebacterium thermoaminogenes AJ12310菌株不具有蔗糖酶活性以及蔗糖同化能力，因此对是否能够通过将AJ12309菌株的scrB基因转移至该菌株中而将蔗糖同化能力赋予该菌株进行了探索。
<1>携带来自Corynebacterium thermoaminogenes AJ12309菌株的scrB的质粒的产生
为获得一个scrB基因片段，根据SEQ ID NOS：93的核苷酸序列合成了SEQ ID NOS：101和102中所示的引物，这些引物的两个末端均同SmaI序列进行连接。将无菌水加至0.5μg 12309菌株的染色体DNA、上述寡核苷酸各50pmol、4μl的dNTP混合物(各2.5mM)、5μl的10×Pyrobest缓冲液(Takara Shuzo)以及2U的Pyrobest聚合酶(Taraka Shuzo)以制备成总体积50μl的反应混合物。使用上述的反应混合物以及热循环仪GeneAmp PCR系统9600(PE)进行PCR，扩增出约1.7kbp含有scrB ORF的片段，该PCR所用的循环为98℃下进行10秒钟的变性，在55℃下进行30秒钟的结合并且在72℃下进行2分钟的延伸反应，该过程重复循环30次。
随后，以SmaI(Takara Shuzo)消化上述的扩增片段，并且与含有一个去磷酸化的复制起点的质粒pSAC4进行连接以制备pSCR155，该复制起点可在棒状杆菌中发挥作用，该质粒已经经过SmaI的消化。图16所示为pSCR155的结构。pSAC4按下列步骤产生。为使大肠杆菌载体pHSG399(Takara Shuzo)能够在棒状杆菌中自行复制，向其中引入了来自能够在棒状杆菌自行复制的质粒pHM1519(Miwa，k.et al.，Agri c.Biol.Chem.，48(1984)2901-2903)的复制起点(JapanesePatent Laid-open No.5-7491/1993)。具体地，以限制性酶BamHI和KpnI消化pHM1519，并且通过使用Takara Shuzo所生产的平末端化试剂盒将所获得的含有复制起点的片段平末端化，并且通过使用一种SalI连接物(Takara Shuzo制造)将该片段插入pHSG399的SalI位点以获得pSAC4。
<2>携带scrB基因的质粒向AJ12310菌株的转移
向Corynebacterium thermoaminogenes AJ12309菌株中引入上文中生产的pSCR155和携带有来自乳发酵短杆菌的scrB基因的质粒pSSM30BS(Japanese Patent Laid-open No.08-196280/1996)。该转化根据以下程序进行。将细胞接种于含有20％的蔗糖的CM-2B培养基中，接种量应使该培养基的OD660为0.1，并且在37℃下振荡培养直至OD660成为0.3。向该培养基内加入浓度为100μg/ml的溶菌酶，并且这些细胞被进一步培养2小时。以20％的蔗糖洗涤这些细胞3次，悬浮于20％的蔗糖中，加入从大肠杆菌JM110中收集的质粒，充分混合并且对其使用电脉冲(18KV/cm，300毫秒)以引入这些DNA。在含有20％的蔗糖的CM-2B培养基中使这些细胞进行过夜恢复培养之后，在含有5μg/ml氯霉素的CM-2B培养基上对转化子进行选择。具体地，转化通过电脉冲方法进行(Japanese Patent Laid-open No.12-204236/2000)，转化子的选择在含有5μg/ml氯霉素的CM2B培养基上37℃下进行。其结果，未获得任何携带含有来自乳发酵短杆菌的scrB基因的质粒pSSM30BS的转化子，而只获得携带含有来自Corynebacterium thermoaminogenes的scrB基因的质粒pSCR155的转化子。这一菌株被命名为AJ12310/pSCR155。
<3>对使用蔗糖作为碳源进行的AJ12310/pSCR155菌株的培养的评估
将上文制备的AJ12310/pSCR155接种于一种含有表15所示的组分的培养基中，并且在37℃下振荡培养22小时。在培养之后测量吸收值(OD)和残余的糖(RS)。结果见表16。其结果，经过证实，AJ12310菌株不能同化蔗糖并且因此不能进行生长，而引入了scrB基因的菌株AJ12310/pSCR155菌株变得能够同化蔗糖。
表15培养基组成
培养基组分     浓度
 蔗糖     60g/l
 KH2PO4     1g/l
 MgSO4·7H2O     0.4g/l
 FeSO4·7H2O     0.01g/l
 MnSO4·7H2O     0.01g/l
 (NH4)2SO4     30g/l
 大豆蛋白水解物     480mg/l
 盐酸硫胺素     200μg/l
 生物素     300μg/l
表16蔗糖培养结果
    OD(×51)     RS(g/l)
    2256     1.292     0.00
    AJ12310     0.058     60.00
    AJ12310/pSCR155     1.571     0.84
实施例6：通过pdhA基因扩增的菌株进行的L-谷氨酸的生产
<1>携带pdhA的质粒pPDHA-2的结构
通过对质粒文库的筛选而获得了来自Corynebacteriumthermoaminogenes AJ12309菌株的pdhA基因。具体地，使用质粒文库混合物作为模板以实施例1的表4所示的条件进行PCR，并且选出了一个克隆p21A，从该克隆中扩增出了一个DNA片段，该片段的大小与以染色体DNA作为模板进行的PCR所获得DNA片段相同。对这一质粒的DNA序列进行测定以确认全长的pdhA包含于其中。
以XbaI和KpnI对p21A进行消化以切割成一个含有全长pdhA基因和启动子区域的4kb的DNA片段。将这一含有pdhA基因的DNA片段插入pHSG299(Takara Shuzo)的Xba I和KpnI位点。随后，以XbaI消化该质粒，并且将一个通过以XbaI消化pXK4而获得的片段插入其中以制备pPDHA-2。pPDHA-2的制备过程见图17。一种DNA连接试剂盒Ver.2(Takara Shuzo)被用于连接反应，大肠杆菌JM109菌株(Takara Shuzo)被用作为遗传操作的宿主。上述的pXK4按如下过程产生。用限制性酶BamHI和KpnI对一种棒状杆菌和大肠杆菌的穿梭质粒pHK4(Japanese Patent Laid-open No.5-7491/1993)进行消化，以获得一种含有复制起点的DNA片段，并且通过使用一种DNA平末端化试剂盒(平末端化试剂盒由Takara Shuzo制造)对所获得的片段进行平末端化，将其同一种XbaI连接头(由Takara Shuzo制造)进行连接并且插入pHSG299的XbaI位点以获得质粒pKX4。
<2>携带pdhA基因的质粒向AJ12310菌株中的转移
将上文生产的质粒pPDHA-2引入Corynebacteriumthermoaminogenes AJ12309菌株以制备一种可进行pdhA基因扩增的菌株。该转化以同实施例5相同的方式进行，并且在含有25μg/ml的卡那霉素的CM-2B培养基上对转化子进行选择以获得AJ12310/pPDHA-2菌株。
<3>用pdhA扩增的菌株进行的L-谷氨酸的生产
AJ12310菌株和上文获得的pdhA基因扩增的菌株AJ12310/pPDHA-2菌株均在CN-2B培养基上生长，将它们接种于一个500-ml体积的烧瓶中并且在37℃下进行振荡培养直至葡萄糖完全耗尽，该烧瓶含有20ml用于育种培养烧瓶的培养基，该培养基见表17。以2ml该培养物肉汤接种于一个500ml体积烧瓶中并且在37℃和44℃下作为主要培养物进行培养，该烧瓶含有20ml用于主要培养烧瓶的培养基，该培养基见表17。持续进行主要培养直至葡萄糖完全耗尽。培养之后测量该培养基的OD以及L-谷氨酸的积累量以测定该基因扩增在细胞生长和谷氨酸生产中的作用。OD的测量通过使用HITACHIU-2000分光光度计(Hitachi)来进行，L-谷氨酸含量的测量通过使用AS-210谷氨酸分析仪(Asahi Chemical Industry)来进行。结果见图18。
pdhA基因扩增的菌株，即AJ12310/pPDHA-2菌株，同Aj12310菌株相比较表现出L-谷氨酸积累增加并且表现出OD的增加，因此表明该pdhA基因对于L-谷氨酸的产生是有效的。
表17用于pdhA基因扩增的菌株的评测的培养基
培养基组成   育种培养基   主要培养基
 蔗糖     30g/l     60g/l
 KH2PO4     1g/l     1g/l
 MgSO4·7H2O     0.4g/l     0.4g/l
 FeSO4·7H2O     0.01g/l     0.01g/l
 MnSO4·7H2O     0.01g/l     0.01g/l
 (NH4)2SO4     15g/l     30g/l
 大豆蛋白水解物     480mg/l     480mg/l
 盐酸硫胺素     200μ/l     200μg/l
 生物素     10μg/l
 AZ-20R(消泡剂)     20μg/l     20μg/l
 CaCO3(分开灭菌)     50g/L     50g/L
 pH8.0(以KOH进行调节)
实施例7：用icd基因扩增的菌株进行的L-谷氨酸的生产
<1>携带来自Corynebacterium thermoaminogenes AJ12310菌株的icd的质粒pICD-4的结构
根据SEQ ID NO：29所示的AJ12310菌株的icd基因序列合成了一些引物，这些引物见SEQ ID NO：103和SEQ ID NO：104。将一个BglII位点引入这两种引物的5’末端。另外，通过使用基因组DNA纯化试剂盒(Edge Biosystems)来制备Corynebacteriumthermoaminogenes AJ12310菌株的基因组DNA。将无菌水加至作为模板的该染色体DNA、上述引物各100pmol、8μl的dNTP混合物(各2.5mM)、10μl的10×Pyrobest缓冲液II(Takara Shuzo)以及2.5U的Pyrobest聚合酶(Taraka Shuzo)，制备成总体积100μl的反应混合物。使用上述的反应混合物以及热循环仪TP240(Taraka Shuzo)进行PCR以扩增出约3.3kb的含有icd基因及其启动子的DNA片段，该PCR所用的循环为98℃下进行10秒钟的变性，在55℃下进行1分钟的结合并且在72℃下进行4分钟的延伸反应，该过程重复循环30次。
随后，以BglII消化这一含有icd基因的DNA片段并且在BamHI位点同pHSG299(Taraka Shuzo)进行连接。随后以XbaI对这一质粒进行处理，并且将一种通过以XbaI消化pXK4而获得的片段插入该质粒中以结构pICD-4。pICD-4的结构程序见图19。一种DNA连接试剂盒Ver.2(Takara Shuzo)被用于连接反应，大肠杆菌JM109菌株(Takara Shuzo)被用作为遗传操作的宿主。
<2>携带icd基因的质粒向AJ12310菌株中的转移
将上文所产生的质粒pICD-4引入Corynebacteriumthermoaminogenes AJ12310菌株以制备一种icd基因扩增的菌株。该转化以与实施例5相同的方式进行，并且在含有25μg/ml的卡那霉素的CM-2B培养基上对转化子进行选择以获得AJ12310/pICD-4菌株。
<3>通过icd扩增菌株进行的L-谷氨酸的生产
通过实施例6所描述的培养方法对AJ12310菌株和其icd扩增菌株AJ12310/pICD-4进行培养评估。结果见图20。icd扩增菌株AJ12310/pICD-4菌株同AJ12310菌株相比较，表现出L-谷氨酸积累增加以及OD的提高，由此表明icd基因的扩增对于L-谷氨酸的生产是有效的。
实施例8：用gdh基因扩增菌株进行的L-谷氨酸的生产
<1>携带来自Corynebacterium thermoaminogenes AJ12310菌株的gdh的质粒结构
根据SEQ ID NO：79所示的AJ12310菌株的gdh基因序列合成了一些引物，这些引物见SEQ ID NO：105和SEQ ID NO：106。另外，通过使用细菌基因组DNA纯化试剂盒(Advanced GeneticTechnologies Corp.)制备AJ12310菌株的基因组DNA。将无菌水加至0.5μg作为模板的该染色体DNA、上述引物各10pmol、8μl的dNTP混合物(各2.5mM)、5μl的10×LA Taq缓冲液(Takara Shuzo)以及2U的LA Taq(Taraka Shuzo)，制备成总体积50μl的反应混合物。使用上述的反应混合物以及热循环仪TP240(Taraka Shuzo)进行PCR以扩增出约2kb的含有gdh基因及其启动子的DNA片段，该PCR所用的循环为94℃下进行30秒钟的变性，在55℃下进行1秒种的结合并且在72℃下进行3分钟的延伸反应，该过程重复循环30次。PstI(Takara Shuzo)消化所获得的扩增片段，将其与经过PstI完全消化的pHSG299(Takara Shuzo)混合并同其进行连接。Takara Shuzo生产的一种DNA连接试剂盒Ver.2被用于连接反应。连接之后，以连接产物对大肠杆菌JM109的感受态细胞(Takara Shuzo出产)进行转化，涂布于含有10μg/ml的I PTG(异丙基-β-D-硫代牛乳糖苷)、40μg/ml的X-Gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)以及40μg/ml的氯霉素的L培养基平板上(10g/l的细菌蛋白胨、5g/l的细菌酵母抽提物、5g/l的NaCl、15g/l的琼脂，pH7.2)，并且进行过夜培养。挑选出现的白色菌落并且进行单菌落分离以获得转化子。
通过碱法从转化子中制备质粒(由日本生物科学和生物工程学会编辑的生物工程实验课本，p.105，Baifukan，1992)并且制作其限制性内切图谱。具有与图21所示的图谱等同的限制性图谱的质粒被命名为pHSG299YGDH。
将一种在棒状杆菌中发挥作用的复制起点引入pHSG299YGDH。具体地，以一种限制性酶XbaI消化pXC4以获得一种含有来自pHM1519的复制起点的片段，并且将该片段同经过XbaI完全消化的pHSG299YGDH进行混合并且同其进行连接。以上述途径制备质粒并且将具有与图21所示的图谱等同的限制性图谱的质粒命名为pYGDH。除了使用pHSG399(Cmr)代替pHSG299之外，pXC4的结构方式与实施例6中提及的pXK4的结构相同。
<2>携带gdh基因的质粒向AJ12310中的转移
将上文所产生的质粒引入Corynebacterium thermoaminogenesAJ12310菌株以制备一种可进行gdh基因扩增的菌株。该转化以与实施例5相同的方式进行，并且在31℃下在含有25μg/ml的卡那霉素的CM-2B培养基上对转化子进行选择以获得AJ12310/pYGDH菌株。
<3>通过gdh扩增菌株进行的的L-谷氨酸的生产
分别将在CM-2B培养基上生长的AJ12310菌株和上文获得的gdh扩增菌株AJ12310/pYGDH接种于500ml体积的烧瓶中并且在37℃下进行振荡培养直至葡萄糖被耗尽，该烧瓶中含有20ml用于育种培养的培养基，该培养基见表18。以2ml该培养物肉汤接种于一个500ml体积烧瓶中并且在37℃和44℃下作为主要培养物而培养，该烧瓶含有20ml用于主要培养烧瓶的培养基，该培养基见表19。持续进行主要培养直至葡萄糖完全耗尽。培养完成之后测量该培养基的OD620以及L-谷氨酸的积累量，以测定该基因扩增在细胞形成和谷氨酸生产中的作用。OD的测量通过使用HITACHIU-2000分光光度计(Hitachi)来进行，L-谷氨酸含量的测量通过使用AS-210谷氨酸分析仪(Asahi ChemicalIndustry)来进行。
表18用于育种培养的培养基的组成
 培养基组成     浓度
 蔗糖     30g/l
 硫酸铵     15g/l
 KH2PO4     1g/l
 MgSO4·7H2O     0.4g/l
 FeSO4·7H2O     0.01g/l
 MnSO4·7H2O     0.01g/l
 大豆蛋白水解物     0.48g/l
 盐酸硫胺素     200μg/l
 生物素     10μg/l
 AZ-20R     0.02ml/l
 CaCO3(分开灭菌)     1g/L
 pH 8.0(以KOH进行调节)
表19用于主要培养的培养基的组成
 培养基组成     浓度
 蔗糖     60g/l
 硫酸铵     30g/l
 KH2PO4     1g/l
 MgSO4·7H2O     0.4g/l
 FeSO4·7H2O     0.01g/l
 MnSO4·7H2O     0.01g/l
 大豆蛋白水解物     0.48g/l
 盐酸硫胺素     200μg/l
 生物素     10μg/l
 AZ-20R     0.02ml/l
 CaCO3(分开灭菌)     1g/L
 pH8.0(以KOH进行调节)
培养的结果见表20和21。在37℃下，该gdh扩增菌株同亲本菌株AJ12310相比较表现出较高的糖类消耗速率、较为良好的生长以及获得较高的OD。进一步，L-谷氨酸积累和产率被显著地提高，即，在37％下提高5-7％。在44℃下产率也被提高，获得的OD也有所增加。在另一方面，在gdh扩增菌株中已经证实α-酮戊二酸的积累有所减少。这些结果表明gdh基因的扩增对于L-谷氨酸的产率的改善和副产物的减少是有效的。
表20可进行gdh扩增的菌株的培养结果(37℃)
    OD620(51×)   L-Glu的积累(g/dl)   L-Glu产率(％)     α-KG(mg/dl)
    AJ12310     0.58     1.74     30.7     53.9
    AJ12310/PYGDH     0.65     2.23     39.3     4.1
表21 gdh扩增菌株的培养结果(44℃)
    OD620(51×)   L-Glu的积累(g/dl)    L-Glu产率(％)
    AJ12310     0.63     1.70     26.7
    AJ12310/PYGDH     0.71     1.79     27.8
实施例9：通过gltA基因扩增的菌株进行的L-谷氨酸生产
<1>来自Corynebacterium thermoaminogenes的携带gltA基因的质粒的结构
根据SEQ ID NO：89所示的AJ12310菌株的gltA基因序列合成了一些引物，这些引物见SEQ ID NO：107和SEQ ID NO：108。
另外，通过使用细菌基因组DNA纯化试剂盒(Advanced GeneticTechnologies Corp.)来制备AJ12310菌株的基因组DNA。将无菌水加至0.5μg作为模板的该染色体DNA、上述引物各10pmol、8μl的dNTP混合物(各2.5mM)、10μl的10×Pyrobest-Taq缓冲液(Takara Shuzo)以及2U的Pyrobest Taq(Taraka Shuzo)，制备成总体积100μl的反应混合物。使用上述的反应混合物以及热循环仪TP240(TarakaShuzo)进行PCR以扩增出约2kb的含有gltA基因及其启动子的DNA片段，该PCR所用的循环为94℃下进行30秒钟的变性，在45℃下进行30秒种的结合并且在72℃下进行3分钟的延伸反应，该过程重复循环30次。以KpnI(Takara Shuzo)消化所获得的扩增片段，将其与经过KpnI完全消化的pHSG299(Takara Shuzo)混合并同其进行连接。Takara Shuzo生产的一种DNA连接试剂盒Ver.2被用于连接反应。连接之后，以连接产物对大肠杆菌JM109的感受态细胞(Takara Shuzo出产)进行转化，涂布于含有10μg/ml的IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)、40μg/ml的X-Gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)以及40μg/ml的氯霉素的L培养基平板上(10g/l的细菌蛋白胨、5g/l的细菌酵母抽提物、5g/l的NaCl、15g/l的琼脂，pH 7.2)，并且进行过夜培养。挑选出现的白色菌落并且进行单菌落分离以获得转化子。
通过碱法从转化子中制备质粒(由日本生物科学和生物工程学会编辑的生物工程实验课本，p.105，Baifukan，1992)并且制作其限制性内切图谱。具有与图22所示的图谱等同的限制性图谱的质粒被命名为pHSG299YCS。
将一种在棒状杆菌中可以复制的复制起点引入pHSG299YCS。具体地，以一种限制性酶XbaI消化pXC4以获得一种含有来自pHM1519的复制起点的片段，并且将该片段同经过XbaI完全消化的pHSG299YCS进行混合并且同其进行连接。以上述途径制备质粒并且将具有与图22所示的图谱等同的限制性图谱的质粒命名为pYCS。
<2>携带gltA基因的质粒向AJ12310中的转移
将上文所产生的质粒引入Corynebacterium thermoaminogenesAJ12310菌株以制备一种gltA基因扩增的菌株。该转化以与实施例5相同的方式进行，并且在含有25μg/ml的卡那霉素的CM-2B培养基上对转化子进行选择以获得AJ12310/pYCS菌株。
<3>通过gltA扩增菌株进行的的L-谷氨酸的生产
分别将在CM-2B培养基上生长的AJ12310菌株和上文获得的gltA扩增菌株AJ12310/pYCS以与实施例8相同的方式进行培养。培养的结果见表22和表23。在培养温度37℃和44℃下，CS增强的菌株与其亲代菌株相比较表现出谷氨酸积累增加。进一步，该gltA扩增菌株表现出L-天冬氨酸和L-赖氨酸的积累的降低，它们合成自草酰乙酸。
这些结果表明gltA基因的扩增对于L-谷氨酸的产率的改善和副产物的减少是有效的。
表22可进行gltA扩增的菌株的培养结果(37℃)
  L-Glu积累(g/dl)   产率(％)    L-Asp积累(g/dl)    L-Lys积累(g/dl)
 AJ12310     1.79     31.9     11.8     11.0
 AJ12310/pYCS     2.04     36.5     8.1     7.3
表23可进行gltA扩增的菌株的培养结果(44℃)
   L-Glu积累(g/dl)     产率(％)    L-Asp积累(g/dl)    L-Lys积累(g/dl)
 AJ12310     1.79     31.9     11.8     11.0
 AJ12310/pYCS     2.04     36.5     8.1     7.3
[序列表说明]
SEQ ID NO：1：aceA，核苷酸序列
SEQ ID NO：2：aceA，氨基酸序列
SEQ ID NO：3：accBC，核苷酸序列
SEQ ID NO：4：accBC，氨基酸序列
SEQ ID NO：5：dtsR1，核苷酸序列
SEQ ID NO：6：dtsR1，氨基酸序列
SEQ ID NO：7：dtsR2，核苷酸序列
SEQ ID NO：8：dtsR2，氨基酸序列
SEQ ID NO：9：pfk，核苷酸序列
SEQ ID NO：10：pfk，氨基酸序列
SEQ ID NO：11：scrB(AJ12340)，核苷酸序列
SEQ ID NO：12：scrB(AJ12340)，氨基酸序列
SEQ ID NO：13：scrB(AJ12309)，核苷酸序列
SEQ ID NO：14：scrB(AJ12309)，氨基酸序列
SEQ ID NO：15：scrB(AJ12310)，核苷酸序列
SEQ ID NO：16：gluABCD，核苷酸序列
SEQ ID NO：17：gluABCD，氨基酸序列
SEQ ID NO：18：gluABCD，氨基酸序列
SEQ ID NO：19：gluABCD，氨基酸序列
SEQ ID NO：20：gluABCD，氨基酸序列
SEQ ID NO：21：pdhA，核苷酸序列
SEQ ID NO：22：pdhA，氨基酸序列
SEQ ID NO：23：pc，核苷酸序列
SEQ ID NO：24：pc，氨基酸序列
SEQ ID NO：25：ppc，核苷酸序列
SEQ ID NO：26：ppc，氨基酸序列
SEQ ID NO：27：acn，核苷酸序列
SEQ ID NO：28：acn，氨基酸序列
SEQ ID NO：29：icd，核苷酸序列
SEQ ID NO：30：icd，氨基酸序列
SEQ ID NO：31：lpd，核苷酸序列
SEQ ID NO：32：lpd，氨基酸序列
SEQ ID NO：33：odhA，核苷酸序列
SEQ ID NO：34：odhA，氨基酸序列
SEQ ID NO：79：gdh(AJ12310)，核苷酸序列
SEQ ID NO：80：gdh(AJ12310)，氨基酸序列
SEQ ID NO：81：gdh(2256)，核苷酸序列
SEQ ID NO：82：gdh(2256)，氨基酸序列
SEQ ID NO：89：gltA(AJ12310)，核苷酸序列
SEQ ID NO：90：gltA(AJ12310)，氨基酸序列
SEQ ID NO：91：gltA(2256)，核苷酸序列
SEQ ID NO：92：gltA(2256)，氨基酸序列
SEQ ID NO：93：scrB(AJ12309)，核苷酸序列
SEQ ID NO：94：scrB(AJ12309)，氨基酸序列
工业应用
根据本发明，编码来自Corynebacterium thermoaminogenes的氨基酸生物合成途径酶的基因或者编码氨基酸向细胞内摄入的蛋白质的基因。
本发明的基因可被用于上述酶或者蛋白质的生产或者氨基酸生产细菌的育种。
序列表
<110>Ajinomoto Co.，Inc.
<120>来自棒状嗜热细菌的氨基酸生物合成途径的酶的基团
<130>B691SMOP1072
<140>
<141>2000-10-04
<150>JP11-282716
<151>1999-10-04
<150>JP11-311147
<151>1999-11-01
<150>JP2000-120687
<151>2000-04-21
<160>108
<170>PatentIn Ver.2.0
<210>1
<211>1980
<212>DNA
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<220>
<221>CDS
<222>(577)..(1869)
<400>1
tgcattccac cgacggtcac gcgttcggtc ttgtcagcgg cgtcaatctg ctgatggttc 60
atgcaaagct ccttcgaagc aagagatcgg gtgtgtgcgg gcacctatcg ggggaagccc 120
tcgctgcgcc ccagggggag ctggcgatgt gaccaggtta agtgataacc atcaccttgc 180
caatgggttt gcgaacttta ccgtgacgct acccccgctt ttgtttgatc acaccagctc 240
gaaggctgtc gcttttccga agatgcacgt gaagtggcaa atccttgcca cccgaggttt 300
tcccagtaca aacgtactag tgatgaggat cacggggaac attgtggaga ttgcactttg 360
caatatttgc aaaaggggtg actacccccg cgcaaaactt aaaaacccaa atccgttgac 420
ggacccatgc ccgatgaagc aatgtgtgaa gcacgccacc ggaacacagg ttgtggatca 480
ctcaccatga tgtgggggat tcgcatcaca cagtgtgcag ggcggcacct ctaccgaatg 540
cgccttacag cagcaccaag aagaagtgac tcttag atg tca aac gtt gga acg   594
                                    Met Ser Asn Val Gly Thr
                                      1               5
cca cgt acc gca cag gaa atc cag cag gat tgg gac acc aac cca cgc    642
Pro Arg Thr Ala Gln Glu Ile Gln Gln Asp Trp Asp Thr Asn Pro Arg
             10                  15                  20
tgg aac gga atc acc cgc gac tac acc gct gag cag gta gct gag ctc    690
Trp Asn Gly Ile Thr Arg Asp Tyr Thr Ala Glu Gln Val Ala Glu Leu
         25                  30                  35
cag ggc agc gtc gtc gag gag cac acc ctc gca aag cgc ggc gcc gag    738
Gln Gly Ser Val Val Glu Glu His Thr Leu Ala Lys Arg Gly Ala Glu
     40                  45                  50
atc ctg tgg gat gca gtt tcc gca gag ggc gac gac tac atc aac gca    786
Ile Leu Trp Asp Ala Val Ser Ala Glu Gly Asp Asp Tyr Ile Asn Ala
 55                  60                  65                  70
ctg ggc gcc ctt acc ggt aac cag gct gtc cag cag gtc cgt gcc ggc    834
Leu Gly Ala Leu Thr Gly Asn Gln Ala Val Gln Gln Val Arg Ala Gly
                 75                  80                  85
ctg aag gct gtc tac ctc tcc ggc tgg cag gtc gca ggt gac gcc aac    882
Leu Lys Ala Val Tyr Leu Ser Gly Trp Gln Val Ala Gly Asp Ala Asn
             90                 95                  100
ctc gcc ggt cac acc tac ccc gac cag tcc ctg tac ccg gcg aac tcc    930
Leu Ala Gly His Thr TyrPro Asp Gln Ser Leu Tyr Pro Ala Asn Ser
        105                110                 115
gtc ccg aac gtt gtc cgt cgc atc aac aac gca ctg ctg cgc gcc gat    978
Val Pro Asn Val Val Arg Arg Ile Asn Asn Ala Leu Leu Arg Ala Asp
    120                 125                 130
gag atc gca cgc gtc gag ggt gac acc tcc gtc gac aac tgg ctc gtc    1026
Glu Ile Ala Arg Val Glu Gly Asp Thr Ser Val Asp Asn Trp Leu Val
135                 140                 145                 150
ccg atc gtc gcc gac ggc gag gcc ggc ttc ggt ggc gcc ctc aac gtc    1074
Pro Ile Val Ala Asp Gly Glu Ala Gly Phe Gly Gly Ala Leu Asn Val
                155                 160                 165
tac gag ctc cag aag ggc atg atc acc gct ggt gcc gca ggc acc cac    1122
Tyr Glu Leu Gln Lys Gly Met Ile Thr Ala Gly Ala Ala Gly Thr His
            170                 175                 180
tgg gag gat cag ctc gct tcc gag aag aag tgt ggc cac ctc ggt ggc    1170
Trp Glu Asp Gln Leu Ala Ser Glu Lys Lys Cys Gly His Leu Gly Gly
        185                 190                 195
aag gtc ctc atc ccg acc cag cag cac atc cgc acc ctg aac tcc gcc    1218
Lys Val Leu Ile Pro Thr Gln Gln His Ile Arg Thr Leu Asn Ser Ala
    200                 205                 210
cgc ctg gca gct gac gtg gcc aac acc ccg acc gtc gtc atc gcc cgc    1266
Arg Leu Ala Ala Asp Val Ala Asn Thr Pro Thr Val Val Ile Ala Arg
215                 220                 225                 230
acc gac gca gag gcc gcc acc ctg atc acc tct gat gtt gat gag cgc    1314
Thr Asp Ala Glu Ala Ala Thr Leu Ile Thr Ser Asp Val Asp Glu Arg
                235                 240                 245
gac cgc cca ttc atc acc ggc gag cgc acc gcc gag ggc tac tac cac    1362
Asp Arg Pro Phe Ile Thr Gly Glu Arg Thr Ala Glu Gly Tyr Tyr His
            250                 255                 260
gtc aag ccg ggt ctc gag ccc tgc atc gca cgt gcg aag tcc tac gct    1410
Val Lys Pro Gly Leu Glu Pro Cys Ile Ala Arg Ala Lys Ser Tyr Ala
        265                 270                 275
ccc tac gca gac atg atc tgg atg gag acc ggc acc cct gac ctc gag    1458
Pro Tyr Ala Asp Met Ile Trp Met Glu Thr Gly Thr Pro Asp Leu Glu
    280                 285                 290
ctg gcc aag aag ttc gcc gag ggc gtc cgc agc gag ttc ccg gac cag    1506
Leu Ala Lys Lys Phe Ala Glu Gly Val Arg Ser Glu Phe Pro Asp Gln
295                 300                 305                 310
ctg ctg tcc tac aac tgc tcc ccg tcc ttc aac tgg tct gca cac ctc    1554
Leu Leu Ser Tyr Asn Cys Ser Pro Ser Phe Asn Trp Ser Ala His Leu
                315                 320                 325
gag gcc gac gag atc gct aag ttc cag aag gaa ctg ggt gcc atg ggc    1602
Glu Ala Asp Glu Ile Ala Lys Phe Gln Lys Glu Leu Gly Ala Met Gly
            330                 335                 340
ttc aag ttc cag ttc atc acc ctg gct ggc ttc cac tcc ctc aac tac    1650
Phe Lys Phe Gln Phe Ile Thr Leu Ala Gly Phe His Ser Leu Asn Tyr
        345                 350                 355
ggt atg ttc gac ctg gct tac ggc tac gcc cgt gaa ggc atg ccc gcc    1698
Gly Met Phe Asp Leu Ala Tyr Gly Tyr Ala Arg Glu Gly Met Pro Ala
    360                 365                 370
ttc gtc gac ctg cag aac cgt gag ttc aag gca gct gag gag cgc ggc    1746
Phe Val Asp Leu Gln Asn Arg Glu Phe Lys Ala Ala Glu Glu Arg Gly
375                 380                 385                 390
ttc acc gcc gtc aag cac cag cgt gag gtc ggc gcc ggc tac ttc gac    1794
Phe Thr Ala Val Lys His Gln Arg Glu Val Gly Ala Gly Tyr Phe Asp
                395                 400                 405
acc atc gcc acc acc gtt gac ccg aac tcc tcc acc acc gcg ctg aag    1842
Thr Ile Ala Thr Thr Val Asp Pro Asn Ser Ser Thr Thr Ala Leu Lys
            4l0                 415                 420
ggt tcc acc gag gaa tgc cag ttc cac taggaaccac ctgatgcggt          1889
Gly Ser Thr Glu Glu Cys Gln Phe His
        425                 430
gccgtatggc ctgacggcac cgcccctccc tttgcactcc agtactcctt tgtgcacatc  1949
ggccatctcc acaccgcgcg ccccgccacc t                                 1980
<210>2
<211>431
<212>PRT
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<400>2
Met Ser Asn Val Gly Thr Pro Arg Thr Ala Gln Glu Ile Gln Gln Asp
  1               5                  10                  15
Trp Asp Thr Asn Pro Arg Trp Asn Gly Ile Thr Arg Asp Tyr Thr Ala
             20                  25                  30
Glu Gln Val Ala Glu Leu Gln Gly Ser Val Val Glu Glu His Thr Leu
         35                  40                  45
Ala Lys Arg Gly Ala Glu Ile Leu Trp Asp Ala Val Ser Ala Glu Gly
     50                  55                  60
Asp Asp Tyr Ile Asn Ala Leu Gly Ala Leu Thr Gly Asn Gln Ala Val
 65                  70                  75                  80
Gln Gln Val Arg Ala Gly Leu Lys Ala Val Tyr Leu Ser Gly Trp Gln
                 85                  90                  95
Val Ala Gly Asp Ala Asn Leu Ala Gly His Thr Tyr Pro Asp Gln Ser
            100                 105                 110
Leu Tyr Pro Ala Asn Ser Val Pro Asn Val Val Arg Arg Ile Asn Asn
        115                 120                 125
Ala Leu Leu Arg Ala Asp Glu Ile Ala Arg Val Glu Gly Asp Thr Ser
    130                 135                 140
Val Asp Asn Trp Leu Val Pro Ile Val Ala Asp Gly Glu Ala Gly Phe
145                 150                 155                 160
Gly Gly Ala Leu Asn Val Tyr Glu Leu Gln Lys Gly Met Ile Thr Ala
                165                 l70                 175
Gly Ala Ala Gly Thr His Trp Glu Asp Gln Leu Ala Ser Glu Lys Lys
            180                 185                 190
Cys Gly His Leu Gly Gly Lys Val Leu Ile Pro Thr Gln Gln His Ile
        195                 200                 205
Arg Thr Leu Asn Ser Ala Arg Leu Ala Ala Asp Val Ala Asn Thr Pro
    210                 215                 220
Thr Val Val Ile Ala Arg Thr Asp Ala Glu Ala Ala Thr Leu Ile Thr
225                 230                 235                 240
Ser Asp Val Asp Glu Arg Asp Arg Pro Phe Ile Thr Gly Glu Arg Thr
                245                 250                 255
Ala Glu Gly Tyr Tyr His Val Lys Pro Gly Leu Glu Pro Cys Ile Ala
            260                 265                 270
Arg Ala Lys Ser Tyr Ala Pro Tyr Ala Asp Met Ile Trp Met Glu Thr
        275                 280                 285
Gly Thr Pro Asp Leu Glu Leu Ala Lys Lys Phe Ala Glu Gly Val Arg
    290                 295                 300
Ser Glu Phe Pro Asp Gln Leu Leu Ser Tyr Asn Cys Ser Pro Ser Phe
305                 310                 315                 320
Asn Trp Ser Ala His Leu Glu Ala Asp Glu Ile Ala Lys Phe Gln Lys
                325                 330                 335
Glu Leu Gly Ala Met Gly Phe Lys Phe Gln Phe Ile Thr Leu Ala Gly
            340                 345                 350
Phe His Ser Leu Asn Tyr Gly Met Phe Asp Leu Ala Tyr Gly Tyr Ala
        355                 360                 365
Arg Glu Gly Met Pr0 Ala Phe Val Asp Leu Gln Asn Arg Glu Phe Lys
    370                 375                 380
Ala Ala Glu Glu Arg Gly Phe Thr Ala Val Lys His Gln Arg Glu Val
385                 390                 395                 400
Gly Ala Gly Tyr Phe Asp Thr Ile Ala Thr Thr Val Asp Pro Asn Ser
                405                 410                 415
Ser Thr Thr Ala Leu Lys Gly Ser Thr Glu Glu Cys Gln Phe His
            420                 425                 430
<210>3
<211>2381
<212>DNA
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<220>
<221>CDS
<222>(577)..(2349)
<400>3
agcaggccgt gttgccgaac ggcaacttcc gcagccgcaa ggagatcgag gaggtgtact  60
cgcacctcaa ccctgccgag gacaccgtgg tgtactgccg cgtgggtgac cgcgcggccc  120
acacctggtt cgtgttgaag tacctgctgg ggtttgaaaa cgtccgcaac tatgacggtt  180
cctggtccga gtggggcaac atggtgcgca tgcccatcgt ccagggtgat gagccgggct  240
cactctagtc accccggggt cacctccctg gtcacccccg taccctcccg ggtacacccc  300
ggggacgggg tgtgacctgg atctcccctg catgtggaca ccgggaaact ttgcctggga  360
aatgaccatc cagtaccgta atgcgggtat gttaacgcgg tcacagggta caccagaatc  420
cggatcgtct aaccccctta gcgggattcg ctaaaagatc accgagttag tgtgcaagaa  480
taatgctgat cgcaggggca ctgtcatacg ctgtcatgca gtcaatgaac agtgcggtgc  540
tctgtcgtga agaaaatcaa aaccaggagg gtttta gtg tca gtc gag acc agg    594
                                        Val Ser Val Glu Thr Arg
                                          1               5
aag atc acc aag gta ctt gtc gcc aac cgt ggt gaa atc gca atc cgt    642
Lys Ile Thr Lys Val Leu Val Ala Asn Arg Gly Glu Ile Ala Ile Arg
             10                  15                  20
gtt ttc cgc gca gca cgg gat gaa ggc atc gcc tct gtc gcc gtc tac    690
Val Phe Arg Ala Ala Arg Asp Glu Gly Ile Ala Ser Val Ala Val Tyr
         25                  30                  35
gcg gag ccg gac gca gat gcc cct ttc gtc gag tat gcc gat gag gcc    738
Ala Glu Pro Asp Ala Asp Ala Pro Phe Val Glu Tyr Ala Asp Glu Ala
     40                  45                  50
ttc gca ctc ggt ggc cag act tcc gca gag tcc tac ctc gtc att gac    786
Phe Ala Leu Gly Gly Gln Thr Ser Ala Glu Ser Tyr Leu Val Ile Asp
 55                  60                  65                  70
aag atc att gac gca gca cgc aag tcc ggt gca gac get gtc cac ccc    834
Lys Ile Ile Asp Ala Ala Arg Lys Ser Gly Ala Asp Ala Val His Pro
                 75                  80                  85
ggc tac ggc ttc ctc gcc gag aac gcc gat ttc gct gaa gct gtc atc    882
Gly Tyr Gly Phe Leu Ala Glu Asn Ala Asp Phe Ala Glu Ala Val Ile
             90                  95                 100
aac gag ggc ctg atc tgg atc gga cca tcc cct gag tcc atc cgt  tcc    930
Asn Glu Gly Leu Ile Trp Ile Gly Pro Ser Pro Glu Ser Ile Arg Ser
        105                 110                 115
ctc ggt gac aag gtc acc gca cgc cac atc gcc aac aac gcc aac gca    978
Leu Gly Asp Lys Val Thr Ala Arg His Ile Ala Asn Asn Ala Asn Ala
    120                 125                 130
ccg atg gca ccg ggc acc aag gag cct gtc aag gac gcc gct gag gtt    1026
Pro Met Ala Pro Gly Thr Lys Glu Pro Val Lys Asp Ala Ala Glu Val
135                 140                 145                 150
gtc gcc ttc gcc gag gag ttc ggt ctc ccc atc gcc atc aag gct gcc    1074
Val Ala Phe Ala Glu Glu Phe Gly Leu Pro Ile Ala Ile Lys Ala Ala
                155                 160                 165
ttc ggt ggc ggc gga cgt ggc atg aag gtc gcc tac gag atg gac gag    1122
Phe Gly Gly Gly Gly Arg Gly Met Lys Val Ala Tyr Glu Met Asp Glu
            170                 175                 180
gtc gcc gac ctc ttc gaa tcc gcc acc cgt gag gcc acc gcc gcc ttc    1170
Val Ala Asp Leu Phe Glu Ser Ala Thr Arg Glu Ala Thr Ala Ala Phe
       185                  190                 195
ggt cgt ggt gag tgc ttc gtg gag cgc tac ctg gac aag gcc cgc cac    1218
Gly Arg Gly Glu Cys Phe Val Glu Arg Tyr Leu Asp Lys Ala Arg His
    200                 205                 210
gtc gag gca cag gtc atc gcc gac aag cac ggc aac gtt gtg gtc gcc    1266
Val Glu Ala Gln Val Ile Ala Asp Lys His Gly Asn Val Val Val Ala
 215                220                 225                 230
ggt acc cgt gac tgc tcc ctg cag cgt cgt ttc cag aag ctc gtc gag    1314
Gly Thr Arg Asp Cys Ser Leu Gln Arg Arg Phe Gln Lys Leu Val Glu
                235                 240                 245
gag gca ccg gca ccg ttc ctc acc gat gag cag cgt gac cgc atc cac    1362
Glu Ala Pro Ala Pro Phe Leu Thr Asp Glu Gln Arg Asp Arg Ile His
            250                 255                 260
tcc tcc gcc aag gct atc tgc cgc gag gcc ggt tac tac ggt gcc ggc    1410
Ser Ser Ala Lys Ala Ile Cys Arg Glu Ala Gly Tyr Tyr Gly Ala Gly
        265                 270                 275
acc gtg gag tac ctg gtc ggt tcc gac gga ctg atc tcc ttc ctg gag    1458
Thr Val Glu Tyr Leu Val Gly Ser Asp Gly Leu Ile Ser phe Leu Glu
    280                 285                 290
gtc aac acc cgc ctg cag gtg gag cac ccc gtc acc gag gag acc acc    1506
Val Asn Thr Arg Leu Gln Val Glu His Pro Val Thr Glu Glu Thr Thr
295                 300                 305                 310
ggc atc gac ctg gtg cgc gag atg ttc cgc atc gcc gag ggc gcc gag    1554
Gly Ile Asp Leu Val Arg Glu Met Phe Arg Ile Ala Glu Gly Ala Glu
                315                 320                 325
ctc tcc atc aag gag gac ccg acc cca cgc ggc cac gcc ttc gag ttc    1602
Leu Ser Ile Lys Glu Asp Pro Thr Pro Arg Gly His Ala Phe Glu Phe
            330                 335                 340
cgc atc aac ggc gag gac gca ggc tcc aac ttc atg ccc gca ccg ggc    1650
Arg Ile Asn Gly Glu Asp Ala Gly Ser Asn Phe Met Pro Ala Pro Gly
        345                 350                 355
aag atc acc cgc tac cgt gag ccc gcc ggc ccg ggt gtc cgc atg gac    1698
Lys Ile Thr Arg Tyr Arg Glu Pro Ala Gly Pro Gly Val Arg Met Asp
    360                 365                 370
tcc ggc gtt gtc gag ggt tcc gag atc tcc ggc cag ttc gac tcc atg    1746
Ser Gly Val Val Glu Gly Ser Glu Ile Ser Gly Gln Phe Asp Ser Met
375                 380                 385                 390
ctg gcc aag ctg atc gtc tgg ggc cag acc cgt gag cag gcc ctg gag    1794
Leu Ala Lys Leu Ile Val Trp Gly Gln Thr Arg Glu Gln Ala Leu Glu
                395                 400                 405
cgt tcc cgt cgt gcg ctc ggc gag tac atc gtc gag ggc atg ccg acc    1842
Arg Ser Arg Arg Ala Leu Gly Glu Tyr Ile Val Glu Gly Met Pro Thr
            410                 415                 420
gtc atc ccg ttc cac tcc cac atc gtc tcc aac ccg gca ttc gtc ggt    1890
Val Ile Pro Phe His Ser His Ile Val Ser Asn Pro Ala Phe Val Gly
        425                 430                 435
gac ggc gag ggc ttc gag gtc tac acc aag tgg atc gag gag gtc tgg    1938
Asp Gly Glu Gly Phe Glu Val Tyr Thr Lys Trp Ile Glu Glu Val Trp
    440                 445                 450
gac aac ccg atc gag ccg ttc gtc gat gca gcc gac ctc gac gac gag    1986
Asp Asn pro Ile Glu Pro Phe Val Asp Ala Ala Asp Leu Asp Asp Glu
455                 460                 465                 470
gag aag acc ccg tcg cag aag gtc atc gtc gag atc gac ggc cgc cgc    2034
Glu Lys Thr Pro Ser Gln Lys Val Ile Val Glu Ile Asp Gly Arg Arg
                475                 480                 485
gtc gag gtg gct ctc ccg ggc gac ctc gct ctc ggc ggt ggc gca ggt    2082
Val Glu Val Ala Leu Pro Gly Asp Leu Ala Leu Gly Gly Gly Ala Gly
            490                 495                 500
gcc gcc aag aag aag ccg aag aag cgt cgc gca ggt ggc gcc aag gcc    2130
Ala Ala Lys Lys Lys Pro Lys Lys Arg Arg Ala Gly Gly Ala Lys Ala
        505                 510                 515
ggt gtc tcc ggt gac tcc gtc gca gcc ccg atg cag ggc acc gtc atc    2178
Gly Val Ser Gly Asp Ser Val Ala Ala Pro Met Gln Gly Thr Val Ile
    520                 525                 530
aag gtc aac gtt gag gac ggc gcc gag gtc tcc gag ggt gac acc gtc    2226
Lys Val Asn Val Glu Asp Gly Ala Glu Val Ser Glu Gly Asp Thr Val
535                 540                 545                 550
gtg gtt ctc gag gcc atg aag atg gag aac ccg gtc aag gcc cac aag    2274
Val Val Leu Glu Ala Met Lys Met Glu Asn Pro Val Lys Ala His Lys
                555                 560                 565
tcc ggt acc gtc tcc ggt ctg acc atc gcc gcg ggt gag ggc gtg acc    2322
Ser Gly Thr Val Ser Gly Leu Thr Ile Ala Ala Gly Glu Gly Val Thr
            570                 575                 580
aag ggt cag gtt ctc ctg gag atc aag taatcccttc agggaacaga          2369
Lys Gly Gln Val Leu Leu Glu Ile Lys
        585                 590
cagccctgtt ct                                                      2381
<210>4
<211>591
<212>PRT
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<400>4
Val Ser Val Glu Thr Arg Lys Ile Thr Lys Val Leu Val Ala Asn Arg
  1               5                  10                  15
Gly Glu Ile Ala Ile Arg Val Phe Arg Ala Ala Arg Asp Glu Gly Ile
             20                  25                  30
Ala Ser Val Ala Val Tyr Ala Glu Pro Asp Ala Asp Ala Pro Phe Val
         35                  40                  45
Glu Tyr Ala Asp Glu Ala Phe Ala Leu Gly Gly Gln Thr Ser Ala Glu
     50                  55                  60
Ser Tyr Leu Val Ile Asp Lys Ile Ile Asp Ala Ala Arg Lys Ser Gly
 65                  70                  75                  80
Ala Asp Ala Val His Pro Gly Tyr Gly Phe Leu Ala Glu Asn Ala Asp
                 85                  90                  95
Phe Ala Glu Ala Val Ile Asn Glu Gly Leu Ile Trp Ile Gly Pro Ser
            100                 105                 110
Pro Glu Ser Ile Arg Ser Leu Gly Asp Lys Val Thr Ala Arg His Ile
        115                 120                 125
Ala Asn Asn Ala Asn Ala Pro Met Ala Pro Gly Thr Lys Glu Pro Val
    130                 135                 140
Lys Asp Ala Ala Glu Val Val Ala Phe Ala Glu Glu Phe Gly Leu Pro
145                 150                 155                 160
Ile Ala Ile Lys Ala Ala Phe Gly Gly Gly Gly Arg Gly Met Lys Val
                165                 170                 175
Ala Tyr Glu Met Asp Glu Val Ala Asp Leu Phe Glu Ser Ala Thr Arg
            180                 185                 190
Glu Ala Thr Ala Ala Phe Gly Arg Gly Glu Cys Phe Val Glu Arg Tyr
        195                 200                 205
Leu Asp Lys Ala Arg His Val Glu Ala Gln Val Ile Ala Asp Lys His
    210                215                  220
Gly Asn Val Val Val Ala Gly Thr Arg Asp Cys Ser Leu Gln Arg Arg
225                 230                 235                 240
Phe Gln Lys Leu Val Glu Glu Ala Pro Ala Pro Phe Leu Thr Asp Glu
                245                 250                 255
Gln Arg Asp Arg Ile His Ser Ser Ala Lys Ala Ile Cys Arg Glu Ala
            260                 265                 270
Gly Tyr Tyr Gly Ala Gly Thr Val Glu Tyr Leu Val Gly Ser Asp Gly
        275                 280                 285
Leu Ile Ser Phe Leu Glu Val Asn Thr Arg Leu Gln Val Glu His Pro
    290                 295                 300
Val Thr Glu Glu Thr Thr Gly Ile Asp Leu Val Arg Glu Met Phe Arg
305                 310                 315                 320
Ile Ala Glu Gly Ala Glu Leu Ser Ile Lys Glu Asp Pro Thr Pro Arg
                325                 330                 335
Gly His Ala Phe Glu Phe Arg Ile Asn Gly Glu Asp Ala Gly Ser Asn
            340                 345                 350
Phe Met Pro Ala Pro Gly Lys Ile Thr Arg Tyr Arg Glu Pro Ala Gly
        355                 360                 365
Pro Gly Val Arg Met Asp Ser Gly Val Val Glu Gly Ser Glu Ile Ser
    370                 375                 380
Gly Gln Phe Asp Ser Met Leu Ala Lys Leu Ile Val Trp Gly Gln Thr
385                 390                 395                 400
Arg Glu Gln Ala Leu Glu Arg Ser Arg Arg Ala Leu Gly Glu Tyr Ile
                405                 410                 415
Val Glu Gly Met Pro Thr Val Ile Pro Phe His Ser His Ile Val Ser
            420                 425                 430
Asn Pro Ala Phe Val Gly Asp Gly Glu Gly Phe Glu Val Tyr Thr Lys
        435                 440                 445
Trp Ile Glu Glu Val Trp Asp Asn Pro Ile Glu Pro Phe Val Asp Ala
    450                 455                 460
Ala Asp Leu Asp Asp Glu Glu Lys Thr Pro Ser Gln Lys Val Ile Val
465                 470                 475                 480
Glu Ile Asp Gly Arg Arg Val Glu Val Ala Leu Pro Gly Asp Leu Ala
                485                 490                 495
Leu Gly Gly Gly Ala Gly Ala Ala Lys Lys Lys Pro Lys Lys Arg Arg
            500                 505                 510
Ala Gly Gly Ala Lys Ala Gly Val Ser Gly Asp Ser Val Ala Ala Pro
        515                 520                 525
Met Gln Gly Thr Val Ile Lys Val Asn Val Glu Asp Gly Ala Glu Val
    530                 535                 540
Ser Glu Gly Asp Thr Val Val Val Leu Glu Ala Met Lys Met Glu Asn
545                 550                 555                 560
Pro Val Lys Ala His Lys Ser Gly Thr Val Ser Gly Leu Thr Ile Ala
                565                 570                 575
Ala Gly Glu Gly Val Thr Lys Gly Gln Val Leu Leu Glu Ile Lys
            580                 585                 590
<210>5
<211>2128
<212>DNA
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<220>
<221>CDS
<222>(339)..(1967)
<400>5
gctgtcattc cgaccacatt cgccccggga tccgggctcc accacctccc ggacccatgc 60
cccatacctg cggaaaccac gggaaacacg ggaaaaaccg atctcattca gaccggcggg 120
atccacctgt ggaacagtca gcggcgcggc catggagggc agcgacaggt gacgtccgag 180
cacccggttc cccaccgtgg acacggcatt gatccgacac ggtggggata gtttcatgct 240
gaaaaactat cgctgtgcag ggaggatccg gaatgtgacc tatttcatgg agaaatgatt 300
gtggacgata cccccgggta cggctaccat tccaaaac atg acc att tcc tca cct 356
                                          Met Thr Ile Ser Ser Pro
                                            1               5
ttg att gac gtc gct aac ctg cca gac atc aac acc acc gcc ggc aag    404
Leu Ile Asp Val Ala Asn Leu Pro Asp Ile Asn Thr Thr Ala Gly Lys
             10                  15                  20
atc gcc gac ctg aag gcc cgc cgg gcg gaa gcc cac ttc ccc atg ggt    452
Ile Ala Asp Leu Lys Ala Arg Arg Ala Glu Ala His Phe Pro Met Gly
         25                  30                  35
gaa aag gcc gta gag aag gtc cac gcg gcc aac cgc ctc acc gcg cgc    500
Glu Lys Ala Val Glu Lys Val His Ala Ala Asn Arg Leu Thr Ala Arg
     40                 45                   50
gaa cga ctt gac tac ctg ctc gat gaa ggc tcc ttc atc gaa acc gat    548
Glu Arg Leu Asp Tyr Leu Leu Asp Glu Gly Ser Phe Ile Glu Thr Asp
55                   60                  65                  70
cag ctc gca cgc cac cgc acc acc gcg ttc ggc ctg ggc aac aag cga    596
Gln Leu Ala Arg His Arg Thr Thr Ala Phe Gly Leu Gly Asn Lys Arg
                 75                  80                  85
ccg gcc acc gac ggc atc gtc acc ggc tgg ggc acc atc gac ggc cgc    644
Pro Ala Thr Asp Gly Ile Val Thr Gly Trp Gly Thr Ile Asp Gly Arg
             90                  95                 100
gag gtc tgc atc ttc tcc cag gac ggc acc gtc ttc ggt ggc gca ctc    692
Glu Val Cys Ile Phe Ser Gln Asp Gly Thr Val Phe Gly Gly Ala Leu
        105                 110                 115
ggt gag gtc tac ggc gag aag atg atc aag atc atg gag ctg gcc atc    740
Gly Glu Val Tyr Gly Glu Lys Met Ile Lys Ile Met Glu Leu Ala Ile
    120                 125                 130
gac acc ggc cgc cca ctc atc ggc ctg tac gag ggt gca ggt gcc cgc    788
Asp Thr Gly Arg Pro Leu Ile Gly Leu Tyr Glu Gly Ala Gly Ala Arg
135                 140                 145                 150
atc cag gac ggt gcg gtc tcc ctc gac ttc atc tcc cag acc ttc tat    836
Ile Gln Asp Gly Ala Val Ser Leu Asp Phe Ile Ser Gln Thr Phe Tyr
                155                 160                 165
cag aac atc cag gcc tcc ggc gtg atc ccg cag atc tcc gtg atc atg    884
Gln Asn Ile Gln Ala Ser Gly Val Ile Pro Gln Ile Ser Val Ile Met
            170                 175                 180
ggt gcc tgc gcc ggt ggc aac gcc tac ggc ccg gcc ctg acc gac ttc    932
Gly Ala Cys Ala Gly Gly Asn Ala Tyr Gly Pro Ala Leu Thr Asp Phe
        185                 190                 195
gtg gtc atg gtg gac aag acc tcg aag atg ttc gtc acc ggc ccc gat    980
Val Val Met Val Asp Lys Thr Ser Lys Met Phe Val Thr Gly Pro Asp
    200                 205                 210
gtg atc aag acc gtc acc ggc gag gag atc acc cag gag gag ctc ggc    1028
Val Ile Lys Thr Val Thr Gly Glu Glu Ile Thr Gln Glu Glu Leu Gly
215                 220                 225                 230
gga gca acc acc cac atg gtc acc gcc ggc aac tcc cac tac acc gtc    1076
Gly Ala Thr Thr His Met Val Thr Ala Gly Asn Ser His Tyr Thr Val
                235                 240                 245
gcc acc gat gag gag gcc ctc gac tgg gtc cag gac ctc atc tcc ttc    1124
Ala Thr Asp Glu Glu Ala Leu Asp Trp Val Gln Asp Leu Ile Ser Phe
            250                 255                 260
ctg ccc tcc aac aat cgc tcc tac gcc ccg gtg gag gag ttc gac gag    1172
Leu Pro Ser Asn Asn Arg Ser Tyr Ala Pro Val Glu Glu Phe Asp Glu
        265                 270                 275
gag gac ggt ggc atc gcc gag aac atc acc gcc gat gac ctg aag ctg    1220
Glu Asp Gly Gly Ile Ala Glu Asn Ile Thr Ala Asp Asp Leu Lys Leu
    280                 285                 290
gat gag atc atc ccg gat tcc gcc acc gtg ccc tat gat gtc cgc gac    1268
Asp Glu Ile Ile Pro Asp Ser Ala Thr Val Pro Tyr Asp Val Arg Asp
295                 300                 305                 310
gtc atc cag tgc ctg acc gac gac ggt gag tac ctg gag atc cag gcc    1316
Val Ile Gln Cys Leu Thr Asp Asp Gly Glu Tyr Leu Glu Ile Gln Ala
                315                 320                 325
gac cga gcc gag aat gtc gtc atc gcc ttc ggc cgc atc gag ggc cag    1364
Asp Arg Ala Glu Asn Val Val Ile Ala Phe Gly Arg Ile Glu Gly Gln
            330                 335                 340
tcc gtc ggt ttc gtc gcc aac cag ccg acc cag ttc gcc ggc tgc ctg    1412
Ser Val Gly Phe Val Ala Asn Gln Pro Thr Gln Phe Ala Gly Cys Leu
        345                 350                 355
gac atc gac tcc tcc gag aag gca gcc cgc ttc gtc cgc acc tgc gat    1460
Asp Ile Asp Ser Ser Glu Lys Ala Ala Arg Phe Val Arg Thr Cys Asp
    360                 365                 370
gcc ttc aac atc ccg atc gtc atg ctt gtc gac gtc ccc ggc ttc ctc    1508
Ala Phe Asn Ile Pro Ile Val Met Leu Val Asp Val Pro Gly Phe Leu
375                 380                 385                 390
ccc ggt gcc ggc cag gag tac ggc ggc atc ctg cgt cgt ggc gcc aaa    1556
Pro Gly Ala Gly Gln Glu Tyr Gly Gly Ile Leu Arg Arg Gly Ala Lys
                395                 400                 405
ctg ctc tac gcc tac ggt gag gcc acc gtc ccg aag atc acc gtg acc    1604
Leu Leu Tyr Ala Tyr Gly Glu Ala Thr Val Pro Lys Ile Thr Val Thr
            410                 415                 420
atg cgc aag gcc tac ggc ggt gcg tac tgt gtc atg gga tcc aag ggt    1652
Met Arg Lys Ala Tyr Gly Gly Ala Tyr Cys Val Met Gly Ser Lys Gly
        425                 430                 435
ctg ggc gca gac atc aac ctg gcc tgg ccg acc gcg cag atc gcc gtc    1700
Leu Gly Ala Asp Ile Asn Leu Ala Trp Pro Thr Ala Gln Ile Ala Val
    440                 445                 450
atg ggt gcc gcc ggc gcg gtc cag ttc atc tac cgc aag gag ctc atg    1748
Met Gly Ala Ala Gly Ala Val Gln Phe Ile Tyr Arg Lys Glu Leu Met
455                 460                 465                 470
gcc gct gat gcc aag ggc ctg gac acc gtc gcc ctg gcc cag tcc ttc    1796
Ala Ala Asp Ala Lys Gly Leu Asp Thr Val Ala Leu Ala Gln Ser Phe
                475                 480                 485
gag cgt gag tac gag gac cac atg ctc aac ccg tac ctg gcg gcc gag    1844
Glu Arg Glu Tyr Glu Asp His Met Leu Asn Pro Tyr Leu Ala Ala Glu
            490                 495                 500
cgt ggc ctc atc gac gcg gtg atc ctg ccg tcc gag acc cgt ggc cag    1892
Arg Gly Leu Ile Asp Ala Val Ile Leu Pro Ser Glu Thr Arg Gly Gln
        505                 510                 515
atc gca cgc aac ctg cgt ctg ctc aag cac aag aat gtc tcc cgc cct    1940
Ile Ala Arg Asn Leu Arg Leu Leu Lys His Lys Asn Val Ser Arg Pro
    520                 525                 530
gcc cgc aag cac ggc aac atg cca ctg taagcacccg ggaccacccc          1987
Ala Arg Lys His Gly Asn Met Pro Leu
535                 540
ctacgcccgc acccacggcc ctttgctggc aggtgcgggc gctgtgcgtt ttccgcgcct  2047
gccgacgccc ggccccctgc cctgtgatgc gatctgcgga tgtgatctgc gcccgcgcca  2107
actcccctgg ttgaaccctg c                                            2128
<210>6
<211>543
<212>PRT
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<400>6
Met Thr Ile Ser Ser Pro Leu Ile Asp Val Ala Asn Leu Pro Asp Ile
  1               5                  10                  15
Asn Thr Thr Ala Gly Lys Ile Ala Asp Leu Lys Ala Arg Arg Ala Glu
             20                  25                  30
Ala His Phe Pro Met Gly Glu Lys Ala Val Glu Lys Val His Ala Ala
         35                  40                  45
Asn Arg Leu Thr Ala Arg Glu Arg Leu Asp Tyr Leu Leu Asp Glu Gly
     50                  55                  60
Ser Phe Ile Glu Thr Asp Gln Leu Ala Arg His Arg Thr Thr Ala Phe
 65                  70                  75                  80
Gly Leu Gly Asn Lys Arg Pro Ala Thr Asp Gly Ile Val Thr Gly Trp
                 85                  90                  95
Gly Thr Ile Asp Gly Arg Glu Val Cys Ile Phe Ser Gln Asp Gly Thr
            100                 105                 110
Val Phe Gly Gly Ala Leu Gly Glu Val Tyr Gly Glu Lys Met Ile Lys
        115                 120                 125
Ile Met Glu Leu Ala Ile Asp Thr Gly Arg Pro Leu Ile Gly Leu Tyr
    130                 135                 140
Glu Gly Ala Gly Ala Arg Ile Gln Asp Gly Ala Val Ser Leu Asp Phe
145                 150                 155                 160
Ile Ser Gln Thr Phe Tyr Gln Asn Ile Gln Ala Ser Gly Val Ile Pro
                165                 170                 175
Gln Ile Ser Val Ile Met Gly Ala Cys Ala Gly Gly Asn Ala Tyr Gly
            180                 185                 190
Pro Ala Leu Thr Asp Phe Val Val Met Val Asp Lys Thr Ser Lys Met
        195                 200                 205
Phe Val Thr Gly Pro Asp Val Ile Lys Thr Val Thr Gly Glu Glu Ile
    210                 215                 220
Thr Gln Glu Glu Leu Gly Gly Ala Thr Thr His Met Val Thr Ala Gly
225                 230                 235                 240
Asn Ser His Tyr Thr Val Ala Thr Asp Glu Glu Ala Leu Asp Trp Val
                245                 250                 255
Gln Asp Leu Ile Ser Phe Leu Pro Ser Asn Asn Arg Ser Tyr Ala Pro
            260                 265                 270
Val Glu Glu Phe Asp Glu Glu Asp Gly Gly Ile Ala Glu Asn Ile Thr
        275                 280                 285
Ala Asp Asp Leu Lys Leu Asp Glu Ile Ile Pro Asp Ser Ala Thr Val
    290                 295                 300
Pro Tyr Asp Val Arg Asp Val Ile Cln Cys Leu Thr Asp Asp Gly Glu
305                 310                 315                 320
Tyr Leu Glu Ile Gln Ala Asp Arg Ala Glu Asn Val Val Ile Ala Phe
                325                 330                 335
Gly Arg Ile Glu Gly Gln Ser Val Gly Phe Val Ala Asn Gln Pro Thr
            340                 345                 350
Gln Phe Ala Gly Cys Leu Asp Ile Asp Ser Ser Glu Lys Ala Ala Arg
        355                 360                 365
Phe Val Arg Thr Cys Asp Ala Phe Asn Ile Pro Ile Val Met Leu Val
    370                 375                 380
Asp Val Pro Gly Phe Leu Pro Gly Ala Gly Gln Glu Tyr Gly Gly Ile
385                 390                 395                 400
Leu Arg Arg Gly Ala Lys Leu Leu Tyr Ala Tyr Gly Glu Ala Thr Val
                405                 410                 415
Pro Lys Ile Thr Val Thr Met Arg Lys Ala Tyr Gly Gly Ala Tyr Cys
            420                 425                 430
Val Met Gly Ser Lys Gly Leu Gly Ala Asp Ile Asn Leu Ala Trp Pro
        435                 440                 445
Thr Ala Gln Ile Ala Val Met Gly Ala Ala Gly Ala Val Gln Phe Ile
    450                 455                 460
Tyr Arg Lys Glu Leu Met Ala Ala Asp Ala Lys Gly Leu Asp Thr Val
465                 470                 475                 480
Ala Leu Ala Gln Ser Phe Glu Arg Glu Tyr Glu Asp His Met Leu Asn
                485                 490                 495
Pro Tyr Leu Ala Ala Glu Arg Gly Leu Ile Asp Ala Val Ile Leu Pro
            500                 505                 510
Ser Glu Thr Arg Gly Gln Ile Ala Arg Asn Leu Arg Leu Leu Lys His
        515                 520                 525
Lys Asn Val Ser Arg Pro Ala Arg Lys His Gly Asn Met Pro Leu
    530                 535                 540
<210>7
<211>2076
<212>DNA
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<220>
<221>CDS
<222>(412)..(2022)
<400>7
acgcccggcc ccctgccctg tgatgcgatc tgcggatgtg atctgcgccc gcgccaactc 60
ccctggttga accctgccac ataccctgag tcgcacctgg gtggggtcac tttccacctc 120
acggggggga ggaggtcaca taggccatac gctgcacttt tgatgaagtg tgggcagatc 180
gaccgggcaa atctgggaaa taaggggcct ggtgaactag cattcccctt agcgaagggt 240
gagcatcgcg gaccccgcga tgtcccaacc ggtcgtaaat tcatgtgccg ccacagtccc 300
ctcaccaggg gatcggaacc agcccagcct gattccggcg tgacggacct caccgtgaac 360
aagtccccgc attactcaca gaactcacac caggatttag actaagaaac c atg act  417
                                                         Met Thr
                                                           1
gca gca acg aca gca cct gat ctg acc acc acc gcc ggc aaa ctc gcg   465
Ala Ala Thr Thr Ala Pro Asp Leu Thr Thr Thr Ala Gly Lys Leu Ala
          5                  10                  15
gat ctc cgc gcc cgc ctt tcc gag acc cag gcc ccc atg ggt cag gcc   513
Asp Leu Arg Ala Arg Leu Ser Glu Thr Gln Ala Pro Met Gly Gln Ala
     20                  25                  30
tcc gtg gag aag gtg cac gag gca ggg aag aag acc gca cgc gag cgc   56l
Ser Val Glu Lys Val His Glu Ala Gly Lys Lys Thr Ala Arg Glu Arg
 35                  40                  45                  50
atc gag tac ctg ctc gat gag ggc tcc ttc gtt gag gtc gat gcc ctc   609
Ile Glu Tyr Leu Leu Asp Glu Gly Ser Phe Val Glu Val Asp Ala Leu
                 55                  60                  65
gcc cgc cac cgt tcc aag aac ttc ggc ctg gac tcc aag cgc ccg gtc   657
Ala Arg His Arg Ser Lys Asn Phe Gly Leu Asp Ser Lys Arg Pro Val
             70                  75                  80
acc gac ggt gtg gtc acc ggt tac ggc acc atc gac gga cgc aag gtc   705
Thr Asp Gly Val Val Thr Gly Tyr Gly Thr Ile Asp Gly Arg Lys Val
         85                  90                  95
tgc gtc ttc tcc cag gac ggc gct atc ttc ggc ggt gcc ctc ggt gag   753
Cys Val Phe Ser Gln Asp Gly Ala Ile Phe Gly Gly Ala Leu Gly Glu
    100                 105                 110
gtc tac ggc gag aag atc gtc aag atc atg gac ctg gcc atc aag acc   801
Val Tyr Gly Glu Lys Ile Val Lys Ile Met Asp Leu Ala Ile Lys Thr
115                 120                 125                 130
ggt gtc ccc ctc atc ggc atc aac gag ggc gcc ggc gcc cgc atc cag   849
Gly Val Pro Leu Ile Gly Ile Asn Glu Gly Ala Gly Ala Arg Ile Gln
                135                 140                 145
gaa ggc gtt gtc tcc ctg ggc ctg tac tcc cag atc ttc tac cgc aac   897
Glu Gly Val Val Ser Leu Gly Leu Tyr Ser Gln Ile Phe Tyr Arg Asn
            150                 155                 160
acc cag gca tcc ggt gtc atc cca cag atc tcc ctc atc atg ggt gcc   945
Thr Gln Ala Ser Gly Val Ile Pro Gln Ile Ser Leu Ile Met Gly Ala
        165                 170                 175
tgc gcc ggt ggc cat gtg tac tcc cccgcc ctg acc gac ttc atc atc    993
Cys Ala Gly Gly His Val Tyr Ser Pro Ala Leu Thr Asp Phe Ile Ile
    180                 185                 190
atg gtg gac aag acc tcc aag atg ttc atc acc ggc ccc gac gtg atc    1041
Met Val Asp Lys Thr Ser Lys Met Phe Ile Thr Gly Pro Asp Val Ile
195                 200                 205                 210
aag acc gtc acc ggc gag gag gtc acc cag gag gaa ctg ggt ggt gcc    1089
Lys Thr Val Thr Gly Glu Glu Val Thr Gln Glu Glu Leu Gly Gly Ala
                215                  220                 225
tac acc cac atg gcc cag tcc ggc acc tcg cac tac acc gca gcc gat    1137
Tyr Thr His Met Ala Gln Ser Gly Thr Ser His Tyr Thr Ala Ala Asp
            230                 235                 240
gac tcc gat gcc ctc gac tgg gtc cgt gag ctg gtc agc tac ctg ccg    1185
Asp Ser Asp Ala Leu Asp Trp Val Arg Glu Leu Val Ser Tyr Leu Pro
        245                 250                 255
tcc aac aac cgt gcg gag acc cca cgc cag gac gcc gac atc atg gtg    1233
Ser Asn Asn Arg Ala Glu Thr Pro Arg Gln Asp Ala Asp Ile Met Val
    260                 265                 270
ggc tcc atc aag gag aac atc acc gag acc gac ctc gaa ctc gac acc    1281
Gly Ser Ile Lys Glu Asn Ile Thr Glu Thr Asp Leu Glu Leu Asp Thr
275                 280                 285                 290
ctg atc ccg gat tcc ccg aac cag ccg tac gac atg aag gac gtc atc    1329
Leu Ile Pro Asp Ser Pro Asn Gln Pro Tyr Asp Met Lys Asp Val Ile
                295                 300                 305
acc cgc atc gtc gat gat gcc gag ttc ttc gag atc cag gag ggt tac    1377
Thr Arg Ile Val Asp Asp Ala Glu Phe Phe Glu Ile Gln Glu Gly Tyr
            310                 315                 320
gcc gag aac atc atc tgc ggt ttc gcc cgc gtc gag ggt cgt gcc gtg    1425
Ala Glu Asn Ile Ile Cys Gly Phe Ala Arg Val Glu Gly Arg Ala Val
        325                 330                 335
ggt atc gtg gcc aac cag ccg atg cag ttc gcc ggc tgc ctg gac atc    1473
Gly Ile Val Ala Asn Gln Pro Met Gln Phe Ala Gly Cys Leu Asp Ile
    340                 345                 350
aag gca tcc gag aag gcc gcc cgc ttc atc cgc acc tgt gac gcc ttc    1521
Lys Ala Ser Glu Lys Ala Ala Arg Phe Ile Arg Thr Cys Asp Ala Phe
355                 360                 365                 370
aac atc ccg atc atc gag ctt gtc gac gtc cca ggc ttc ctc ccg ggc    1569
Asn Ile Pro Ile Ile Glu Leu Val Asp Val Pro Gly Phe Leu Pro Gly
                375                 380                 385
acc aac cag gag ttc gac ggc atc atc cgt cgc ggc gcg aag ctg ctc    1617
Thr Asn Gln Glu Phe Asp Gly Ile Ile Arg Arg Gly Ala Lys Leu Leu
            390                 395                 400
tac gcc tac gcc gag gcc acc gtc ggc aag atc acc gtg atc acc cgc    1665
Tyr Ala Tyr Ala Glu Ala Thr Va1 Gly Lys Ile Thr Val Ile Thr Arg
        405                 410                 415
aag tcc tac ggc ggt gcc tac tgc gtg atg ggc tcc aag gac atg ggt    1713
Lys Ser Tyr Gly Gly Ala Tyr Cys Val Met Gly Ser Lys Asp Met Gly
    420                 425                 430
gcg gac ctc gtc ttc gca tgg ccc acc gcg cag atc gcc gtc atg ggt    1761
Ala Asp Leu Val phe Ala Trp Pro Thr Ala Gln Ile Ala Val Met Gly
435                 440                 445                 450
gcc tcc ggt gcc gtc ggc ttc atc tac cgc aag gag ctc aag cag gct    1809
Ala Ser Gly Ala Val Gly Phe Ile Tyr Arg Lys Glu Leu Lys Gln Ala
                455                 460                 465
gca gcg gcc ggc gag gat gtc acc gcg ctg atg aag aag tac gag cag    1857
Ala Ala Ala Gly Glu Asp Val Thr Ala Leu Met Lys Lys Tyr Glu Gln
            470                 475                 480
gag tac gag gag acc ctg gtc aac ccg tac atg gct gca gag cgt ggc    1905
Glu Tyr Glu Glu Thr Leu Val Asn Pro Tyr Met Ala Ala Glu Arg Gly
        485                 490                 495
tac gtc gac gcc gtc atc cca cca tcc gag acc cgt ggt cag atc atc    1953
Tyr Val Asp Ala Val Ile Pro Pro Ser Glu Thr Arg Gly Gln Ile Ile
    500                 505                 510
gag ggt ctg cgt ctg ctc gac cgc aag gtg gtc aac gtc ccg gcc aag    2001
Glu Gly Leu Arg Leu Leu Asp Arg Lys Val Val Asn Val Pro Ala Lys
515                 520                 525                 530
aag cac ggt aac atc ccg ctg taaaccgtct  tcccctccgg caccacgccg      2052
Lys His Gly Asn Ile Pro Leu
                535
gagaaggctt tgtccgcagc tgtc                                         2076
<210>8
<211>537
<212>PRT
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<400>8
Met Thr Ala Ala Thr Thr Ala Pro Asp Leu Thr Thr Thr Ala Gly Lys
  1               5                  10                  15
Leu Ala Asp Leu Arg Ala Arg Leu Ser Glu Thr Gln Ala Pro Met Gly
             20                  25                  30
Gln Ala Ser Val Glu Lys Val His Glu Ala Gly Lys Lys Thr Ala Arg
         35                  40                  45
Glu Arg Ile Glu Tyr Leu Leu Asp Glu Gly Ser Phe Val Glu Val Asp
     50                  55                  60
Ala Leu Ala Arg His Arg Ser Lys Asn Phe Gly Leu Asp Ser Lys Arg
 65                  70                  75                  80
Pro Val Thr Asp Gly Val Val Thr Gly Tyr Gly Thr Ile Asp Gly Arg
                 85                      90              95
Lys Val Cys Val Phe Ser Gln Asp Gly Ala Ile Phe Gly Gly Ala Leu
            100                 105                 110
Gly Glu Val Tyr Gly Glu Lys Ile Val Lys Ile Met Asp Leu Ala Ile
        115                 120                 125
Lys Thr Gly Val Pro Leu Ile Gly Ile Asn Glu Gly Ala Gly Ala Arg
    130                 135                 140
Ile Gln Glu Gly Val Val Ser Leu Gly Leu Tyr Ser Gln Ile Phe Tyr
145                 150                 155                 160
Arg Asn Thr Gln Ala Ser Gly Val Ile Pro Gln Ile Ser Leu Ile Met
                165                 170                 175
Gly Ala Cys Ala Gly Gly His Val Tyr Ser Pro Ala Leu Thr Asp Phe
            180                 185                 190
Ile Ile Met Val Asp Lys Thr Ser Lys Met Phe Ile Thr Gly Pro Asp
       195                  200                 205
Val Ile Lys Thr Val Thr Gly Glu Glu Val Thr Gln Glu Glu Leu Gly
    210                 215                 220
Gly Ala Tyr Thr His Met Ala Gln Ser Gly Thr Ser His Tyr Thr Ala
225                 230                 235                 240
Ala Asp Asp Ser Asp Ala Leu Asp Trp Val Arg Glu Leu Val Ser Tyr
                245                 250                 255
Leu Pro Ser Asn Asn Arg Ala Glu Thr Pro Arg Gln Asp Ala Asp Ile
            260                 265                 270
Met Val Gly Ser Ile Lys Glu Asn Ile Thr Glu Thr Asp Leu Glu Leu
        275                 280                 285
Asp Thr Leu Ile Pro Asp Ser Pro Asn Gln Pro Tyr Asp Met Lys Asp
    290                 295                 300
Val Ile Thr Arg Ile Val Asp Asp Ala Glu Phe Phe Glu Ile Gln Glu
305                 310                 315                 320
Gly Tyr Ala Glu Asn Ile Ile Cys Gly Phe Ala Arg Val Glu Gly Arg
                325                 330                 335
Ala Val Gly Ile Val Ala Asn Gln Pro Met Gln Phe Ala Gly Cys Leu
            340                 345                 350
Asp Ile Lys Ala Ser Glu Lys Ala Ala Arg Phe Ile Arg Thr Cys Asp
        355                 360                 365
Ala Phe Asn Ile Pro Ile Ile Glu Leu Val Asp Val Pro Gly Phe Leu
    370                 375                 380
Pro Gly Thr Asn Gln Glu Phe Asp Gly Ile Ile Arg Arg Gly Ala Lys
385                 390                 395                 400
Leu Leu Tyr Ala Tyr Ala Glu Ala Thr Val Gly Lys Ile Thr Val Ile
                405                 410                 415
Thr Arg Lys Ser Tyr Gly Gly Ala Tyr Cys Val Met Gly Ser Lys Asp
            420                 425                 430
Met Gly Ala Asp Leu Val Phe Ala Trp Pro Thr Ala Gln Ile Ala Val
        435                 440                 445
Met Gly Ala Ser Gly Ala Val Gly Phe Ile Tyr Arg Lys Glu Leu Lys
    450                 455                 460
Gln Ala Ala Ala Ala Gly Glu Asp Val Thr Ala Leu Met Lys Lys Tyr
465                 470                 475                 480
Glu Gln Glu Tyr Glu Glu Thr Leu Val Asn Pro Tyr Met Ala Ala Glu
                485                 490                 495
Arg Gly Tyr Val Asp Ala Val Ile Pro Pro Ser Glu Thr Arg Gly Gln
            500                 505                 5l0
Ile Ile Glu Gly Leu Arg Leu Leu Asp Arg Lys Val Val Asn Val Pro
        515                 520                 525
Ala Lys Lys His Gly Asn Ile Pro Leu
    530                 535
<210>9
<211>1643
<212>DNA
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<220>
<221>CDS
<222>(326)..(1363)
<400>9
agcgcgccgg cagccaccag tgggatcgtg cccagcggac ggatgccgga ttcacggcgg 60
tcagccaccc gccgatgaga cctgcagcga caacggtggc ggtgctgacc tggtcagcgt 120
ctttgagttt catatccatg tcagacagtc taaccactct ctccgacgcg tccgaacatg 180
ctggggtggc ggacaccatg tccgttcggg cgttgccccg acgggggaaa atcgcaggca 240
gatgtgtccg atgtgggata aacccaccgg ttcgggcgtg tcttcgggat caatggcaca 300
gcattaaccg tgtggggggt ttaat atg gga gcc atg cga att gcc act ctc   352
                            Met Gly Ala Met Arg Ile Ala Thr Leu
                              l               5
acg tca ggc ggc gac tgc ccc gga ctc aat gct gtc atc agg gga atc   400
Thr Ser Gly Gly Asp Cys Pro Gly Leu Asn Ala Val Ile Arg Gly Ile
 10                  15              20                      25
gtc cgt acc gca agt aat gaa ttc ggt tcc acc gtc gtg ggt tat cag   448
Va1 Arg Thr Ala Ser Asn Glu Phe Gly Ser Thr Val Val Gly Tyr Gln
                 30              35                      40
gac ggc tgg gag ggc ctg ctg gcg gac cga cgt gtt cag ctc tat gac   496
Asp Gly Trp Glu Gly Leu Leu Ala Asp Arg Arg Val Gln Leu Tyr Asp
             45              50                      55
gat gag gac atc gac cgc atc ctg ctc cgc ggt gga aca atc ctg ggc   544
Asp Glu Asp Ile Asp Arg Ile Leu Leu Arg Gly Gly Thr Ile Leu Gly
         60              65                      70
acc ggt cgt ctc cac ccc gac aag ttc aga gcc gga atc gac cag gtc   592
Thr Gly Arg Leu His Pro Asp Lys Phe Arg Ala Gly lle Asp Gln Val
     75                   80                  85
aag gcg aat ctc gcc gat gcg gga att gac gca ctc atc ccg atc ggt    640
Lys Ala Asn Leu Ala Asp Ala Gly Ile Asp Ala Leu Ile Pro Ile Gly
 90                  95                 100                 105
ggc gag ggc acc ctc aag gga gcg aag tgg ctc gcc gac aac ggc atc    688
Gly Glu Gly Thr Leu Lys Gly Ala Lys Trp Leu Ala Asp Asn Gly Ile
                110                 115                 120
ccc gtg gtc ggt gtc ccg aaa acc atc gac aat gat gtc aac ggc acg    736
Pro Val Val Gly Val Pro Lys Thr Ile Asp Asn Asp Val Asn Gly Thr
            125                 l30                 135
gat ttc acc ttc ggt ttc gat tcc gcg gtc tct gtg gcc acc gac gcc    784
Asp Phe Thr Phe Gly Phe Asp Ser Ala Val Ser Val Ala Thr Asp Ala
        140                 145                 150
atc gac cgg ctg cac acc acg gcg gaa tcc cac aac cgt gtg atg atc    832
Ile Asp Arg Leu His Thr Thr Ala Glu Ser His Asn Arg Val Met Ile
    155                 160                 165
gtc gag gtc atg ggc cgc cac gtc ggt tgg atc gca ctg cat gcc ggc    880
Val Glu Val Met Gly Arg His Val Gly Trp Ile Ala Leu His Ala Gly
170                 175                 180                 185
atg gcc ggt gga gcc cac tac acc gtc atc ccc gag gtg ccc ttc gac    928
Met Ala Gly Gly Ala His Tyr Thr Val Ile Pro Glu Val Pro Phe Asp
                190                 195                 200
atc tcg gag atc tgc aag cgt atg gaa cgt cgc ttc cag atg ggg gag    976
Ile Ser Glu Ile Cys Lys Arg Met Glu Arg Arg Phe Gln Met Gly Glu
            205                 210                 215
aag tac ggc atc atc gtc gtc gcg gag ggt gcc ctg ccc aag gag gga    1024
Lys Tyr Gly Ile Ile Val Val Ala Glu Gly Ala Leu Pro Lys Glu Gly
        220                 225                 230
acc atg gag ctg cgt gag ggg gag gtg gat cag ttc ggt cac aag acc    1072
Thr Met Glu Leu Arg Glu Gly Glu Val Asp Gln Phe Gly His Lys Thr
    235                 240                 245
ttc acc ggc atc ggc cag cag atc gcc gac gag gtg cac agg cgt ctg    1120
Phe Thr Gly Ile Gly Gln Gln Ile Ala Asp Glu Val His Arg Arg Leu
250                 255                 260                 265
ggt cat gat gtc cgc acc acg gtc ctg ggc cat atc cag cgt ggt ggc    1168
Gly His Asp Val Arg Thr Thr Val Leu Gly His Ile Gln Arg Gly Gly
                270                 275                 280
acc ccc acc gcc ttc gac cgt gtc ctg gcc acc cgg tac ggt gtc cgc    1216
Thr Pro Thr Ala Phe Asp Arg Val Leu Ala Thr Arg Tyr Gly Val Arg
            285                 290                 295
gcc gcg cgt gcc tgc cac gag ggt cag ttc aac acc gtg gtc gcg ctc    1264
Ala Ala Arg Ala Cys His Glu Gly Gln Phe Asn Thr Val Val Ala Leu
        300                 305                 310
aag ggg gag cgc atc cgg atg atc tcc ttc gat gag gcc gtg ggc acc    1312
Lys Gly Glu Arg Ile Arg Met Ile Ser Phe Asp Glu Ala Val Gly Thr
    315                 320                 325
ctg aag aag gtg ccg atg gaa cgc tgg gtg acc gcc cag gct atg ttc    1360
Leu Lys Lys Val Pro Met Glu Arg Trp Val Thr Ala Gln Ala Met Phe
330                 335                 340                 345
ggt tagtcaggcc gcattcccgg ttccgcgccc gcggggccgg gttttttcat         1413
Gly
gccccggaac acatcggtat gaaatcgtga tatgcattac ttgacgggga agtgggggat  1473
ccgtcacctc gcgttgtcca actacagccc gcagcgcctg cgggaattct tcgagcaatc  1533
cgccgattcc ccggcccgtc ccgtcgccgt ccaaccgcag tacaatctgc tggcccgccg  1593
ggattatgag accggtatcc gcccggtcgt ggacgagttc ggtcccgcgg             1643
<210>10
<211>346
<212>PRT
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<400>10
Met Gly Ala Met Arg Ile Ala Thr Leu Thr Ser Gly Gly Asp Cys Pro
  1               5                  10                  15
Gly Leu Asn Ala Val Ile Arg Gly Ile Val Arg Thr Ala Ser Asn Glu
             20                  25                  30
Phe Gly Ser Thr Val Val Gly Tyr Gln Asp Gly Trp Glu Gly Leu Leu
         35                  40                  45
Ala Asp Arg Arg Val Gln Leu Tyr Asp Asp Glu Asp Ile Asp Arg Ile
     50                  55                  60
Leu Leu Arg Gly Gly Thr Ile Leu Gly Thr Gly Arg Leu His Pro Asp
 65                  70                  75                  80
Lys Phe Arg Ala Gly Ile Asp Gln Val Lys Ala Asn Leu Ala Asp Ala
                 85                 90                   95
Gly Ile Asp Ala Leu Ile Pro Ile Gly Gly Glu Gly Thr Leu Lys Gly
            100                 105                 110
Ala Lys Trp Leu Ala Asp Asn Gly Ile Pro Val Val Gly Val Pro Lys
        115                 120                 125
Thr Ile Asp Asn Asp Val Asn Gly Thr Asp Phe Thr Phe Gly Phe Asp
    130                 135                 140
Ser Ala Val Ser Val Ala Thr Asp Ala Ile Asp Arg Leu His Thr Thr
145                 150                 155                 160
Ala Glu Ser His Asn Arg Val Met Ile Val Glu Val Met Gly Arg His
                165                 170                 175
Val Gly Trp Ile Ala Leu His Ala Gly Met Ala Gly Gly Ala His Tyr
            180                 185                 190
Thr Val Ile Pro Glu Val Pro Phe Asp Ile Ser Glu Ile Cys Lys Arg
        195                 200                 205
Met Glu Arg Arg Phe Gln Met Gly Glu Lys Tyr Gly Ile Ile Val Val
    210                 215                 220
Ala Glu Gly Ala Leu Pro Lys Glu Gly Thr Met Glu Leu Arg Glu Gly
225                 230                 235                 240
Glu Val Asp Gln Phe Gly His Lys Thr Phe Thr Gly Ile Gly Gln Gln
                245                 250                 255
Ile Ala Asp Glu Val His Arg Arg Leu Gly His Asp Val Arg Thr Thr
            260                 265                 270
Val Leu Gly His Ile Gln Arg Gly Gly Thr Pro Thr Ala Phe Asp Arg
        275                 280                 285
Val Leu Ala Thr Arg Tyr Gly Val Arg Ala Ala Arg Ala Cys His Glu
    290                 295                 300
Gly Gln Phe Asn Thr Val Val Ala Leu Lys Gly Glu Arg Ile Arg Met
305                 310                 315                 320
Ile Ser Phe Asp Glu Ala Val Gly Thr Leu Lys Lys Val Pro Met Glu
                325                 330                 335
Arg Trp Val Thr Ala Gln Ala Met Phe Gly
            340                 345
<210>11
<211>498
<212>DNA
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(498)
<400>11
tac tac cag cac gat cca ggt ttc ccc ttc gca cca aag cgc acc ggt    48
Tyr Tyr Gln His Asp Pro Gly Phe Pro Phe Ala Pro Lys Arg Thr Gly
  1               5                  10                  15
tgg gct cac acc acc acg ccg ttg acc gga ccg cag cga ttg cag tgg    96
Trp Ala His Thr Thr Thr Pro Leu Thr Gly Pro Gln Arg Leu Gln Trp
             20                  25                  30
acg cac ctg ccc gat gct ctt tac ccg gat gta tcc tat gac ctg gat    144
Thr His Leu Pro Asp Ala Leu Tyr Pro Asp Val Ser Tyr Asp Leu Asp
         35                  40                  45
gga tgc tat tcc ggc gga gcc gta ttt tct gac ggc acg ctt aaa ctt    192
Gly Cys Tyr Ser Gly Gly Ala Val Phe Ser Asp Gly Thr Leu Lys Leu
    50                   55                  60
ttc tac acc ggc aac cga aaa att gac ggc aag cgc cgc gcc acc caa    240
Phe Tyr Thr Gly Asn Arg Lys Ile Asp Gly Lys Arg Arg Ala Thr Gln
 65                  70                  75                  80
aac ctc gtc gaa gtc gag gac cca act ggg ctg atg ggc ggc att cat    288
Asn Leu Val Glu Val Glu Asp Pro Thr Gly Leu Met Gly Gly Ile His
                 85                  90                  95
cgc cgc tcg cct aaa aat ccg ctt atc gac gga ccc gcc agc ggt ttt    336
Arg Arg Ser Pro Lys Asn Pro Leu Ile Asp Gly Pro Ala Ser Gly Phe
            100                 105                 110
acg ccc cac tac cgc gat ccc atg atc agc cct gat ggg gat ggt tgg    384
Thr Pro His Tyr Arg Asp Pro Met Ile Ser Pro Asp Gly Asp Gly Trp
        115                 120                 125
aag atg gtt ctt ggg gct cag cgc gaa aac ctc acc ggt gca gcg gtt    432
Lys Met Val Leu Gly Ala Gln Arg Glu Asn Leu Thr Gly Ala Ala Val
    130                 135                 140
cta tac cgc tcg gca gat ctt gaa aac tgg gaa ttc tcc ggt gaa atc    480
Leu Tyr Arg Ser Ala Asp Leu Glu Asn Trp Glu Phe Ser Gly Glu Ile
145                 150                 155                 160
acc ttt gac ctc agc gac                                            498
Thr Phe Asp Leu Ser Asp
               165
<210>12
<211>166
<212>PRT
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<400>12
Tyr Tyr Gln His Asp Pro Gly Phe Pro Phe Ala Pro Lys Arg Thr Gly
  1               5                  10                  15
Trp Ala His Thr Thr Thr Pro Leu Thr Gly Pro Gln Arg Leu Gln Trp
             20                  25                  30
Thr His Leu Pro Asp Ala Leu Tyr Pro Asp Val Ser Tyr Asp Leu Asp
         35                  40                  45
Gly Cys Tyr Ser Gly Gly Ala Val Phe Ser Asp Gly Thr Leu Lys Leu
     50                  55                  60
Phe Tyr Thr Gly Asn Arg Lys Ile Asp Gly Lys Arg Arg Ala Thr Gln
 65                  70                  75                  80
Asn Leu Val Glu Val Glu Asp Pro Thr Gly Leu Met Gly Gly Ile His
                 85                  90                  95
Arg Arg Ser Pro Lys Asn Pro Leu Ile Asp Gly Pro Ala Ser Gly Phe
            100                 105                 110
Thr Pro His Tyr Arg Asp Pro Met Ile Ser Pro Asp Gly Asp Gly Trp
        115                 120                 125
Lys Met Val Leu Gly Ala Gln Arg Glu Asn Leu Thr Gly Ala Ala Val
    130                 135                 140
Leu Tyr Arg Ser Ala Asp Leu Glu Asn Trp Glu Phe Ser Gly Glu Ile
145                 150             155                 160
Thr Phe Asp Leu Ser Asp
                165
<210>13
<211>479
<212>DNA
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(477)
<400>13
tac tac cag cac gat cca ggt ttc ccc ttc gca cca aag cgc acc ggc    48
Tyr Tyr Gln His Asp Pro Gly Phe Pro Phe Ala Pro Lys Arg Thr Gly
  1               5                  10                  15
tgg gct cac acc acc acg ccg ttg acc gga ccg cag cga ttg cag tgg    96
Trp Ala His Thr Thr Thr Pro Leu Thr Gly Pro Gln Arg Leu Gln Trp
         20                      25                  30
acg cac ctg ccc gac gct ctt tac ccg gat gca tcc tat gac ctg gat    144
Thr His Leu Pro Asp Ala Leu Tyr Pro Asp Ala Ser Tyr Asp Leu Asp
     35                      40                  45
gga tgc tat tcc ggt gga gcc gta ttt act gac ggc aca ctt aaa ctt    192
Gly Cys Tyr Ser Gly Gly Ala Val Phe Thr Asp Gly Thr Leu Lys Leu
 50                      55                  60
ttc tac acc ggc aac cta aaa att gac ggc aag cgc cgc gcc acc caa    240
Phe Tyr Thr Gly Asn Leu Lys Ile Asp Gly Lys Arg Arg Ala Thr Gln
 65                  70                  75                  80
aac ctc gtc gaa gtc gag gac cca act ggg ctg atg ggc ggc att cat    288
Asn Leu Val Glu Val Glu Asp Pro Thr Gly Leu Met Gly Gly Ile His
                 85                  90                  95
cgc cgt tcg cct aaa aat ccg ctt atc gac gga ccc gcc agc ggt ttc    336
Arg Arg Ser Pro Lys Asn Pro Leu Ile Asp Gly Pro Ala Ser Gly Phe
            100                 105                 110
aca ccc cat tac cgc gat ccc atg atc agc cct gat ggt gat ggt tgg    384
Thr Pro His Tyr Arg Asp Pro Met Ile Ser Pro Asp Gly Asp Gly Trp
        115                 120                 125
aaa atg gtt ctt ggg gcc caa cgc gaa aac ctc acc ggt gca gcg gtt    432
Lys Met Val Leu Gly Ala Gln Arg Glu Asn Leu Thr Gly Ala Ala Val
    130                 135                 140
cta tac cgc tcg aca gat ctt gaa aac tgg gaa ttc tcc ggt gaa at     479
Leu Tyr Arg Ser Thr Asp Leu Glu Asn Trp Glu Phe Ser Gly Glu
145                 150                 155
<210>14
<211>159
<212>PRT
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<400>14
Tyr Tyr Gln His Asp Pro Gly Phe Pro Phe Ala Pro Lys Arg Thr Gly
  1               5                  10                  15
Trp Ala His Thr Thr Thr Pro Leu Thr Gly Pro Gln Arg Leu Gln Trp
             20                  25                  30
Thr His Leu Pro Asp Ala Leu Tyr Pro Asp Ala Ser Tyr Asp Leu Asp
         35                  40                  45
Gly Cys Tyr Ser Gly Gly Ala Val Phe Thr Asp Gly Thr Leu Lys Leu
     50                  55                  60
Phe Tyr Thr Gly Asn Leu Lys Ile Asp Gly Lys Arg Arg Ala Thr Gln
 65                  70                  75                  80
Asn Leu Val Glu Val Glu Asp Pro Thr Gly Leu Met Gly Gly Ile His
                 85                  90                  95
Arg Arg Ser Pro Lys Asn Pro Leu Ile Asp Gly Pro Ala Ser Gly Phe
            100                 105                 110
Thr Pro His Tyr Arg Asp Pro Met Ile Ser Pro Asp Gly Asp Gly Trp
        115                 120                 125
Lys Met Val Leu Gly Ala Gln Arg Glu Asn Leu Thr Gly Ala Ala Val
    130                 135                 140
Leu Tyr Arg Ser Thr Asp Leu Glu Asn Trp Glu Phe Ser Gly Glu
145                 150                 155
<210>15
<211>490
<212>DNA
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<400>15
attttaatgg atattatcta tattttatca atattatcct tatgcacctg aatggggacc 60
aatgcattgg ggacacgcac gtagtaaaga tttagttcat tgggaaacat taccgattgc 120
tttagaacct ggagatgaag aagaaaaatg gttgtttctc tggtacaggt atagtcaaag 180
atgataagtt gtatttattt tatacaggtc accattatta taatgacgat gatcccgatc 240
atttttggca aaatcaaaat atggcttata gtgaagatgg cattcatttt caaaaatata 300
aacaaaatgc aatcattcct accccacctg aagataatac acatcacttc agagatccaa 360
aggtatggga acatccatgg cttattatta catgatagta ggtagtcaaa atgatagaga 420
attaggacgt attatcttat atcgttctga ggatttatag aggggaattc tggtcctgag 480
atcaat ccaa                                                       490
<210>16
<211>4254
<212>DNA
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<220>
<221>CDS
<222>(637)..(1362)
<220>
<221>CDS
<222>(1434)..(2315)
<220>
<221>CDS
<222>(2432)..(3115)
<220>
<221>CDS
<222>(3235)..(4065)
<400>16
tcacggcgcg cagattaccc agtgtgccgt agagacgctg atcggcattc tcacgcaccg 60
cgcaggtgtt gaagacgatg agatcagggg tgtcaccctc ccccgccgcg gtgtaaccgg 120
cctcctcgag cagaccggag agacgctcgg aatcgtggac gttcatctgg cagccgaagg 180
tacgcacctc ataggtgcgg gcagtggtgc cctcccggtt cccccgcgcc gggagggtgt 240
cggcggggtg gtccgggtgg gatggatggg tgttcatctg gtgggtatca atctgctgcg 300
tcacgggagg taattgtatc ggccgcgggc accctgacat aaacgtccga tccagaggaa 360
cgcaaccccg tggagtgtcg cagccatgca ggttgggcaa caccgtaacg gaacctagca 420
gagtggtagg attgacttca cattctttac ctattgagct attgataaaa tccgggcgga 480
aatggaaatc acccccacaa atcaccccaa ctgacctgtg gaaagggcga gaaatccagg 540
gaaattcatt tcaaaatgga ctcaatcaca ggatttaccc cacatgaccc aacattcctt 600
tatgctatcc ccatgacgca gaccacaaat cacccg atg atc aag atg acg ggg   654
                                        Met Ile Lys Met Thr Gly
                                          1               5
gtg cag aag ttc ttc gat gac ttc cag gcc ctg acc gat atc aat ctt   702
Val Gln Lys Phe Phe Asp Asp Phe Gln Ala Leu Thr Asp Ile Asn Leu
             10                  15                  20
gag gtc ccc gcg gga cag gtc gtt gtt gtt ctc ggc ccg tcc ggt tcc   750
Glu Val Pro Ala Gly Gln Val Val Val Val Leu Gly Pro Ser Gly Ser
         25                  30                  35
gga aag tcg acg ctg tgc cgc acc atc aac cgc ctc gaa acc atc gag   798
Gly Lys Ser Thr Leu Cys Arg Thr Ile Asn Arg Leu Glu Thr Ile Glu
     40                  45                  50
gag gga acc atc gag atc gat gga aaa ctg ctt ccg gag gag ggc aag   846
Glu Gly Thr Ile Glu Ile Asp Gly Lys Leu Leu Pro Glu Glu Gly Lys
 55                  60                  65                  70
gac ctg gcc aag atc cgt gcc gac gtg ggc atg gtg ttc cag tct ttc    894
Asp Leu Ala Lys Ile Arg Ala Asp Val Gly Met Val Phe Gln Ser Phe
                 75                  80                  85
aac ctc ttc ccc cac ctc acc atc aag gac aat gtc acc ctc ggc ccg    942
Asn Leu Phe Pro His Leu Thr Ile Lys Asp Asn Val Thr Leu Gly Pro
             90                  95                 100
atg aag gtc cgg aag atg aag aag tcc gag gcc aat gag gtg gcc atg    990
Met Lys Val Arg Lys Met Lys Lys Ser Glu Ala Asn Glu Val Ala Met
        105                 110                 115
aag ctg ttg gaa cgc gtc ggc atc gcc aac cag gcc gag aaa tac ccg    1038
Lys Leu Leu Glu Arg Val Gly Ile Ala Asn Gln Ala Glu Lys Tyr Pro
    120                 125                 130
gca cag ctc tcg ggc ggg cag cag cag cgc gtg gcc atc gcc cgc gca    1086
Ala Gln Leu Ser Gly Gly Gln Gln Gln Arg Val Ala Ile Ala Arg Ala
135                 140                 145                 150
ctg gcg atg aac ccc aag atc atg ctt ttc gac gaa cca acc tcc gcc    1134
Leu Ala Met Asn Pro Lys Ile Met Leu Phe Asp Glu Pro Thr Ser Ala
                155                 160                 165
ctc gac ccc gag atg gtc aac gag gtt ctg gac gtc atg gcg agt ctg    1182
Leu Asp Pro Glu Met Val Asn Glu Val Leu Asp Val Met Ala Ser Leu
            170                 175                 180
gcc aag gaa ggc atg acc atg gtg tgt gtc acc cac gag atg ggt ttc    1230
Ala Lys Glu Gly Met Thr Met Val Cys Val Thr His Glu Met Gly Phe
        185                 190                 195
gca cgc agg gcc gca gac cgt gtg ctg ttc atg tct gac ggc gcc atc    1278
Ala Arg Arg Ala Ala Asp Arg Val Leu Phe Met Ser Asp Gly Ala Ile
    200                 205                 210
gtc gag gac tcc gac ccg gag acc ttc ttc acc aat cca caa acc gac    1326
Val Glu Asp Ser Asp Pro Glu Thr Phe Phe Thr Asn Pro Gln Thr Asp
215                 220                  225                230
cgg gcg aag gat ttc ctg ggc aag atc ctc gcc cac tgacctcccc         1372
Arg Ala Lys Asp Phe Leu Gly Lys Ile Leu Ala His
                235                 240
tcactctgtg tccaactccc ccgctggcca aaatcagcga ccatgaccaa caggagcatc  1432
a atg tcg cac aaa cgc atg ttc acc cgt ctc gcc gca gcc acc agc gca  1481
Met Ser His Lys Arg Met Phe Thr Arg Leu Ala Ala Ala Thr Ser Ala
        245                 250                 255
gct gtt ctc gcc ggc atc acc ctc acc gcc tgt ggt gat tcc gag ggt    1529
Ala Val Leu Ala Gly Ile Thr Leu Thr Ala Cys Gly Asp Ser Glu Gly
    260                 265                 270
ggt gac ggt ctg ctc gcc gcc atc gaa aat ggc aat gtc acc atc ggc    1577
Gly Asp Gly Leu Leu Ala Ala Ile Glu Asn Gly Asn Val Thr Ile Gly
275                 280                 285                 290
acc aag tac gat cag ccg ggt ctg gga ctg cgt aac ccg gac aat tcc    1625
Thr Lys Tyr Asp Gln Pro Gly Leu Gly Leu Arg Asn Pro Asp Asn Ser
                295                 300                 305
atg agc gga ctg gat gtc gac gtc gcg cag tac gtg gtc aac tcc atc    1673
Met Ser Gly Leu Asp Val Asp Val Ala Gln Tyr Val Val Asn Ser Ile
            310                 315                 320
gcc gat gac aac ggt tgg gat cac ccc acc gtg gaa tgg cgc gag acc    1721
Ala Asp Asp Asn Gly Trp Asp His Pro Thr Val Glu Trp Arg Glu Thr
        325                 330                 335
ccc tcc gcc cag cgc gag acc ctc atc cag aac ggt gag gtg gat atg    1769
Pro Ser Ala Gln Arg Glu Thr Leu Ile Gln Asn Gly Glu Val Asp Met
    340                 345                 350
atc gcc gca acc tac tcc atc aac ccc gga cgc tcc gaa tcg gtg aac    1817
Ile Ala Ala Thr Tyr Ser Ile Asn Pro Gly Arg Ser Glu Ser Val Asn
355                 360                 365                 370
ttc ggt gga cca tac ctc ctc acc cac cag gcc ctc ctg gtc cgc gag    1865
Phe Gly Gly Pro Tyr Leu Leu Thr His Gln Ala Leu Leu Val Arg Glu
                375                 380                 385
gac gat gac cgc atc cag acc ctc gag gac ctc gat gac ggc ctg atc    1913
Asp Asp Asp Arg Ile Gln Thr Leu Glu Asp Leu Asp Asp Gly Leu Ile
            390                 395                 400
ctg tgt tcc gtt acc gga tcc acc ccc gcc cag aag gtc aag gat gtc    1961
Leu Cys Ser Val Thr Gly Ser Thr Pro Ala Gln Lys Val Lys Asp Val
        405                 410                 415
ctc ccc ggc gtc cag ctg cag gaa tac gac acc tac tcc tcc tgt gtg    2009
Leu Pro Gly Val Gln Leu Gln Glu Tyr Asp Thr Tyr Ser Ser Cys Val
    420                 425                 430
gag gca ctg agc cag ggc aac gtc gat gca atg acc acc gac gcc acc    2057
Glu Ala Leu Ser Gln Gly Asn Val Asp Ala Met Thr Thr Asp Ala Thr
435                 440                 445                 450
atc ctc ttc ggc tac gcg cag cag cgc gaa ggt gaa ttc cgc gtc gtg    2105
Ile Leu Phe Gly Tyr Ala Gln Gln Arg Glu Gly Glu Phe Arg Val Val
                455                 460                 465
gag atg gaa cag gac ggc gag ccg ttc acc aat gag tac tac ggc atc    2153
Glu Met Glu Gln Asp Gly Glu Pro Phe Thr Asn Glu Tyr Tyr Gly Ile
            470                 475                 480
ggt atc acc aag gat gac acc gaa gcc acc gat gcg atc aac gca gcg    2201
Gly Ile Thr Lys Asp Asp Thr Glu Ala Thr Asp Ala Ile Asn Ala Ala
        485                 490                 495
ttg gag cgt atg tac gcc gac ggt tcc ttc cag cgt ttc ctc acc gag    2249
Leu Glu Arg Met Tyr Ala Asp Gly Ser Phe Gln Arg Phe Leu Thr Glu
    500                 505                 510
aac ctc ggc gag gat tcc cag gtt gtc cag gag ggc acc ccg ggt gac    2297
Asn Leu Gly Glu Asp Ser Gln Val Val Gln Glu Gly Thr Pro Gly Asp
515                 520                 525                530
ctc tcc ttc ctg gac gag tgacctgacg gggccgaacg cccgatgagc          2345
Leu Ser Phe Leu Asp Glu
                535
atgcgtggcc cccgcatccc ggggtgccac gcatcatcac tttcaccact gatcccctac 2405
cgttccttac cgaggagaaa ttcccc atg agt aca tta tgg gcg gat ctg ggt  2458
                             Met Ser Thr Leu Trp Ala Asp Leu Gly
                                         540                 545
ccg tca ctc cta ccc gca ttc tgg gtg aca atc caa ctc acc gtc tat   2506
Pro Ser Leu Leu Pro Ala Phe Trp Val Thr Ile Gln Leu Thr Val Tyr
                550                 555                 560
tcc gcc atc gga tcc atg atc ctc ggt acc atc ctc acc gcc atg agg   2554
Ser Ala Ile Gly Ser Met Ile Leu Gly Thr Ile Leu Thr Ala Met Arg
            565                 570                 575
gtg tcc ccg gtg aag atc ctg cgc agc ata tcc acc gcc tac atc aac   2602
Val Ser Pro Val Lys Ile Leu Arg Ser Ile Ser Thr Ala Tyr Ile Asn
        580                 585                 590
acg gtc cgt aac acc cca ctg acc ctg gtg atc ctg ttc tgt tcc ttc    2650
Thr Val Arg Asn Thr Pro Leu Thr Leu Val Ile Leu Phe Cys Ser Phe
    595                 600                 605
ggc ctg tat cag aat ctc ggt ctc acc ctc gcc ggt cgc gac agt tcc    2698
Gly Leu Tyr Gln Asn Leu Gly Leu Thr Leu Ala Gly Arg Asp Ser Ser
610                 615                 620                 625
acc ttt ctg gcc gat aac aac ttc cgg ctc gcg gtg ctc gga ttc atc    2746
Thr Phe Leu Ala Asp Asn Asn Phe Arg Leu Ala Val Leu Gly Phe Ile
                630                 635                 640
ctg tac acc tcc gcc ttc gtt gcg gaa tca ctc cgg tca ggc atc aac    2794
Leu Tyr Thr Ser Ala Phe Val Ala Glu Ser Leu Arg Ser Gly Ile Asn
            645                 650                 655
acc gtg cac ttc ggg cag gcg gag gcc gcc cgg tcg ctg gga ctc ggt    2842
Thr Val His Phe Gly Gln Ala Glu Ala Ala Arg Ser Leu Gly Leu Gly
        660                 665                 670
ttc agt gac atc ttc cgg tcc atc atc ttc ccc cag gcg gtg cgt gcc    2890
Phe Ser Asp Ile Phe Arg Ser Ile Ile Phe Pro Gln Ala Val Arg Ala
    675                 680                 685
gcc atc atc ccg ctg ggc aac acc ctc atc gcc ctg acc aag aac acc    2938
Ala Ile Ile Pro Leu Gly Asn Thr Leu Ile Ala Leu Thr Lys Asn Thr
690                 695                 700                 705
acg atc gcg tcc gtg atc ggc gtc ggt gag gcc tcg ctg ctg atg aag    2986
Thr Ile Ala Ser Val Ile Gly Val Gly Glu Ala Ser Leu Leu Met Lys
                710                  715                720
tcc acg att gaa aat cat gcc aac atg ctc ttc gtc gtg ttc gcc atc    3034
Ser Thr Ile Glu Asn His Ala Asn Met Leu Phe Val Val Phe Ala Ile
            725                 730                 735
ttc gcc gtc ggc ttc atg atc ctc acc ctc ccc atg ggc ctg ggg ctt    3082
Phe Ala Val Gly Phe Met Ile Leu Thr Leu Pro Met Gly Leu Gly Leu
        740                 745                 750
gga aaa ctc gct gag aaa atg gcg gtg aag aaa taatgtcctc ctccgtacgc  3135
Gly Lys Leu Ala Glu Lys Met Ala Val Lys Lys
    755                 760
gcaacagtcc tctacgacgc ccccggcccc cggggacgca ggtccaacac catcatcacc  3195
atcgccacca ccctggtggc agtggccgtc ctgttctgg gtg ggc agt gtt ctc     3249
                                           Val Gly Ser Val Leu
                                           765
cag gaa aac ggc cag ttg gac ggc gac aaa tgg acc ccg ttc ctc gat    3297
Gln Glu Asn Gly Gln Leu Asp Gly Asp Lys Trp Thr Pro Phe Leu Asp
770                 775                 780                 785
ccc cag acc tgg acc acc tat ctt ctg ccc ggc ctg tgg gga acc ctg    3345
Pro Gln Thr Trp Thr Thr Tyr Leu Leu Pro Gly Leu Trp Gly Thr Leu
                790                 795                  800
aag gca gcg gtg gcc tcc atc ctt ctc gcg ctg atc atg ggc acc ctg    3393
Lys Ala Ala Val Ala Ser Ile Leu Leu Ala Leu Ile Met Gly Thr Leu
            805                 810                 815
ctc ggg ctc gga cgc atc tcc gaa atc cgg ctc ctg cgc tgg ttc tgc    3441
Leu Gly Leu Gly Arg Ile Ser Glu Ile Arg Leu Leu Arg Trp Phe Cys
        820                 825                 830
ggg atc atc atc gag acc ttc cgt gcc atc ccg gtg ctg atc ctc atg    3489
Gly Ile Ile Ile Glu Thr Phe Arg Ala Ile Pro Val Leu Ile Leu Met
    835                 840                 845
atc ttc gcc tat cag ttg ttc gcc cgt tac cag ctc gtt cca tca cgc    3537
Ile Phe Ala Tyr Gln Leu Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Val Pro Ser Arg
850                 855                 860                 865
cag ctg gcc ttc gcc gcg gtg gtc ttc ggt ctc acc atg tac aac ggc    3585
Gln Leu Ala Phe Ala Ala Val Val Phe Gly Leu Thr Met Tyr Asn Gly
                870                 875                 880
tcc gtc atc gcc gag atc ctt aga tcg ggt atc gcc tcc ctg ccg aag    3633
Ser Val Ile Ala Glu Ile Leu Arg Ser Gly Ile Ala Ser Leu Pro Lys
            885                 890                 895
gga cag cgt gag gcg gcg atc gcc ctg ggc atg tca acc cgc cag acc    3681
Gly Gln Arg Glu Ala Ala Ile Ala Leu Gly Met Ser Thr Arg Gln Thr
        900                 905                 910
acc tgg tcg atc ctg ctc ccc cag gcg gtg gca gcg atg ctg ccc gcc    3729
Thr Trp Ser Ile Leu Leu Pro Gln Ala Val Ala Ala Met Leu Pro Ala
    915                 920                 925
ctg atc gcg cag atg gtc atc gcg ctg aag gac tcc gcc ctc ggt tac    3777
Leu Ile Ala Gln Met Val Ile Ala Leu Lys Asp Ser Ala Leu Gly Tyr
930                 935                 940                 945
cag atc ggt tat atc gag gtg gta cgc tcc ggt atc cag tcc gca tcc    3825
Gln Ile Gly Tyr Ile Glu Val Val Arg Ser Gly Ile Gln Ser Ala Ser
                950                 955                 960
gtc aac cgg aac tac ctg gct gcc ctc gcg gtg gtc gcg gtc atc atg    3873
Val Asn Arg Asn Tyr Leu Ala Ala Leu Ala Val Val Ala Val Ile Met
            965                 970                 975
atc ctg atc aac ttc gca ctg acc gca ctg gca gag cgt atc cag cgt    3921
Ile Leu Ile Asn Phe Ala Leu Thr Ala Leu Ala Glu Arg Ile Gln Arg
        980                 985                 990
cag ctg cgt gcc gga cgt gcc cgc agg aac att gtg gca aag gtg ccc    3969
Gln Leu Arg Ala Gly Arg Ala Arg Arg Asn Ile Val Ala Lys Val Pro
    995                 1000                1005
gag gaa ccc gat cag ggc ctg gat acc aag gac aat gtg aac gtg gat    4017
Glu Glu Pro Asp Gln Gly Leu Asp Thr Lys Asp Asn Val Asn Val Asp
1010               1015                1020                1025
tgg cac gat ccc gat tac aag gaa gtc aaa cac ccg gga ccg tca ttc    4065
Trp His Asp Pro Asp Tyr Lys Glu Val Lys His Pro Gly Pro Ser Phe
                1030                1035                1040
tgacaggtcc ctggatcccc gctgcggtca ggaggcgggt gcaacaatga agtccggctg  4125
cccagatgtc tggggcagcc ggactttgtg gcagatcaat gctgactgag gtcctcgatg  4185
cgctcatcga gagcctcccg ggccaggtcc atcgacatac ccgcggggaa tccacgacgg  4245
gcaagt gct                                                         4254
<210>17
<211>242
<212>PRT
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<400>17
Met Ile Lys Met Thr Gly Val Gln Lys Phe Phe Asp Asp Phe Gln Ala
  1               5                  10                  15
Leu Thr Asp Ile Asn Leu Glu Val Pro Ala Gly Gln Val Val Val Val
             20                  25                  30
Leu Gly Pro Ser Gly Ser Gly Lys Ser Thr Leu Cys Arg Thr Ile Asn
        35                   40                  45
Arg Leu Glu Thr Ile Glu Glu Gly Thr Ile Glu Ile Asp Gly Lys Leu
     50                  55                  60
Leu Pro Glu Glu Gly Lys Asp Leu Ala Lys Ile Arg Ala Asp Val Gly
 65                  70                  75                  80
Met Val Phe Gln Ser Phe Asn Leu Phe Pro His Leu Thr Ile Lys Asp
                 85                  90                  95
Asn Val Thr Leu Gly Pro Met Lys Val Arg Lys Met Lys Lys Ser Glu
           100                  105                 110
Ala Asn Glu Val Ala Met Lys Leu Leu Glu Arg Val Gly Ile Ala Asn
        115                 120                 125
Gln Ala Glu Lys Tyr Pro Ala Gln Leu Ser Gly Gly Gln Gln Gln Arg
    130                 135                 140
Val Ala Ile Ala Arg Ala Leu Ala Met Asn Pro Lys Ile Met Leu Phe
145                 150                 155                 160
Asp Glu Pro Thr Ser Ala Leu Asp Pro Glu Met Val Asn Glu Val Leu
                165                 170                 175
Asp Val Met Ala Ser Leu Ala Lys Glu Gly Met Thr Met Val Cys Val
            180                 185                 190
Thr His Glu Met Gly Phe Ala Arg Arg Ala Ala Asp Arg Val Leu Phe
        195                 200                 205
Met Ser Asp Gly Ala Ile Val Glu Asp Ser Asp Pro Glu Thr Phe Phe
    210                 215                 220
Thr Asn Pro Gln Thr Asp Arg Ala Lys Asp Phe Leu Gly Lys Ile Leu
225                 230                 235                 240
Ala His
<210>18
<211>294
<212>PRT
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<400>18
Met Ser His Lys Arg Met Phe Thr Arg Leu Ala Ala Ala Thr Ser Ala
  1               5                  10                  15
Ala Val Leu Ala Gly Ile Thr Leu Thr Ala Cys Gly Asp Ser Glu Gly
             20                  25                  30
Gly Asp Gly Leu Leu Ala Ala Ile Glu Asn Gly Asn Val Thr Ile Gly
         35                  40                  45
Thr Lys Tyr Asp Gln Pro Gly Leu Gly Leu Arg Asn Pro Asp Asn Ser
    50                  55                   60
Met Ser Gly Leu Asp Val Asp Val Ala Gln Tyr Val Val Asn Ser Ile
 65                  70                  75                  80
Ala Asp Asp Asn Gly Trp Asp His Pro Thr Val Glu Trp Arg Glu Thr
                85                   90                  95
Pro Ser Ala Gln Arg Glu Thr Leu Ile Gln Asn Gly Glu Val Asp Met
            100                 105                 110
Ile Ala Ala Thr Tyr Ser Ile Asn Pro Gly Arg Ser Glu Ser Val Asn
        115                 120                 125
Phe Gly Gly Pro Tyr Leu Leu Thr His Gln Ala Leu Leu Val Arg Glu
    130                 135                 140
Asp Asp Asp Arg Ile Gln Thr Leu Glu Asp Leu Asp Asp Gly Leu Ile
145                 150                 155                 160
Leu Cys Ser Val Thr Gly Ser Thr Pro Ala Gln Lys Val Lys Asp Val
                165                 170                 175
Leu Pro Gly Val Gln Leu Gln Glu Tyr Asp Thr Tyr Ser Ser Cys Val
            180                 185                 190
Glu Ala Leu Ser Gln Gly Asn Val Asp Ala Met Thr Thr Asp Ala Thr
        195                 200                 205
Ile Leu Phe Gly Tyr Ala Gln Gln Arg Glu Gly Glu Phe Arg Val Val
    210                 215                 220
Glu Met Glu Gln Asp Gly Glu Pro Phe Thr Asn Glu Tyr Tyr Gly Ile
225                 230                 235                 240
Gly Ile Thr Lys Asp Asp Thr Glu Ala Thr Asp Ala Ile Asn Ala Ala
                245                 250                 255
Leu Glu Arg Met Tyr Ala Asp Gly Ser Phe Gln Arg Phe Leu Thr Glu
            260                 265                 270
Asn Leu Gly Glu Asp Ser Gln Val Val Gln Glu Gly Thr Pro Gly Asp
        275                 280                 285
Leu Ser Phe Leu Asp Glu
    290
<210>19
<211>228
<212>PRT
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<400>19
Met Ser Thr Leu Trp Ala Asp Leu Gly Pro Ser Leu Leu Pro Ala Phe
  1               5                  10                  15
Trp Val Thr Ile Gln Leu Thr Val Tyr Ser Ala Ile Gly Ser Met Ile
             20                  25                  30
Leu Gly Thr Ile Leu Thr Ala Met Arg Val Ser Pro Val Lys Ile Leu
         35                  40                  45
Arg Ser Ile Ser Thr Ala Tyr Ile Asn Thr Val Arg Asn Thr Pro Leu
    50                   55                  60
Thr Leu Val Ile Leu Phe Cys Ser Phe Gly Leu Tyr Gln Asn Leu Gly
 65                  70                  75                  80
Leu Thr Leu Ala Gly Arg Asp Ser Ser Thr Phe Leu Ala Asp Asn Asn
                 85                  90                  95
Phe Arg Leu Ala Val Leu Gly Phe Ile Leu Tyr Thr Ser Ala Phe Val
            100                 105                 110
Ala Glu Ser Leu Arg Ser Gly Ile Asn Thr Val His Phe Gly Gln Ala
        115                 120                 125
Glu Ala Ala Arg Ser Leu Gly Leu Gly Phe Ser Asp Ile Phe Arg Ser
    130                 135                 140
Ile Ile Phe Pro Gln Ala Val Arg Ala Ala Ile Ile Pro Leu Gly Asn
145                 150                 155                 160
Thr Leu Ile Ala Leu Thr Lys Asn Thr Thr Ile Ala Ser Val Ile Gly
                165                 170                 175
Val Gly Glu Ala Ser Leu Leu Met Lys Ser Thr Ile Glu Asn His Ala
            180                 185                 190
Asn Met Leu Phe Val Val Phe Ala Ile Phe Ala Val Gly Phe Met Ile
        195                 200                 205
Leu Thr Leu Pro Met Gly Leu Gly Leu Gly Lys Leu Ala Glu Lys Met
    210                 215                 220
Ala Val Lys Lys
225
<210>20
<211>277
<212>PRT
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<400>20
Val Gly Ser Val Leu Gln Glu Asn Gly Gln Leu Asp Gly Asp Lys Trp
  1               5                  10                  15
Thr Pro Phe Leu Asp Pro Gln Thr Trp Thr Thr Tyr Leu Leu Pro Gly
             20                  25                  30
Leu Trp Gly Thr Leu Lys Ala Ala Val Ala Ser Ile Leu Leu Ala Leu
         35                  40                  45
Ile Met Gly Thr Leu Leu Gly Leu Gly Arg Ile Ser Glu Ile Arg Leu
     50                  55                  60
Leu Arg Trp Phe Cys Gly Ile Ile Ile Glu Thr Phe Arg Ala Ile Pro
 65                 70                   75                  80
Val Leu Ile Leu Met Ile Phe Ala Tyr Gln Leu Phe Ala Arg Tyr Gln
                 85                  90                  95
Leu Val Pro Ser Arg Gln Leu Ala Phe Ala Ala Val Val Phe Gly Leu
            100                 105                 110
Thr Met Tyr Asn Gly Ser Val Ile Ala Glu Ile Leu Arg Ser Gly Ile
        115                 120                 125
Ala Ser Leu Pro Lys Gly Gln Arg Glu Ala Ala Ile Ala Leu Gly Met
    130                 135                 140
Ser Thr Arg Gln Thr Thr Trp Ser Ile Leu Leu Pro Gln Ala Val Ala
145                 150                 155                 160
Ala Met Leu Pro Ala Leu Ile Ala Gln Met Val Ile Ala Leu Lys Asp
                165                 170                 175
Ser Ala Leu Gly Tyr Gln Ile Gly Tyr Ile Glu Val Val Arg Ser Gly
            180                 185                 190
Ile Gln Ser Ala Ser Val Asn Arg Asn Tyr Leu Ala Ala Leu Ala Val
        195                 200                 205
Val Ala Val Ile Met Ile Leu Ile Asn Phe Ala Leu Thr Ala Leu Ala
    210                 215                 220
Glu Arg Ile Gln Arg Gln Leu Arg Ala Gly Arg Ala Arg Arg Asn Ile
225                 230                 235                 240
Val Ala Lys Val Pro Glu Glu Pro Asp Gln Gly Leu Asp Thr Lys Asp
                245                 250                 255
Asn Val Asn Val Asp Trp His Asp Pro Asp Tyr Lys Glu Val Lys His
            260                 265                 270
Pro Gly Pro Ser Phe
        275
<210>21
<2ll>3598
<212>DNA
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<220>
<221>CDS
<222>(454)..(3222)
<400>21
agcacggcca aacatgagag aaacttcaca ttttgaattt cccctttcct gcatatggaa 60
aaccgccggt gacacccctg ccatttgggc agctcccccc acctcaccat gtccacattt 120
tccataatgt ggcctgtaac acccttgggc tcaaggcttc cacgccccac cgggaccctc 180
atcagcaggt gaaacagacc ctcctgcaat gctttgttaa aaagaaccgc cctttgtgcg 240
tatccttgtg tcaattgtgc gcgcactgcc accagctttc ctcaggattg aacacggtcg 300
ggaaatcctc cccggatacc ctgcacgccc cacctcccac accgacaccg gcggggaggg 360
ccgggcacgt tttcagctgc gggtgatgga agcggtcgcc ggtcccccgg tcgcataaac 420
gaaatgaaaa acattccaac aggaggtgtg gaa atg gcc gat caa gca aaa ctt  474
                                     Met Ala Asp Gln Ala Lys Leu
                                       1               5
ggt ggc aaa ccc aca gat gac acc aac ttc gcg atg atc cgt gat ggc   522
Gly Gly Lys Pro Thr Asp Asp Thr Asn Phe Ala Met Ile Arg Asp Gly
         10                  15                  20
gtt gca tct tat ttg aac gac tcc gac ccg gag gag acc aag gag tgg    570
Val Ala Ser Tyr Leu Asn Asp Ser Asp Pro Glu Glu Thr Lys Glu Trp
     25                  30                  35
atg gac tcc cta gac ggt cta ctg cag gat tcc tct ccg gag cgc gcc    618
Met Asp Ser Leu Asp Gly Leu Leu Gln Asp Ser Ser Pro Glu Arg Ala
 40                  45                  50                  55
cgt tac ctg atg ctg cgc ctg ctg gag cgg gca tcc gcc aag cgt gtc    666
Arg Tyr Leu Met Leu Arg Leu Leu Glu Arg Ala Ser Ala Lys Arg Val
                 60                  65                  70
cca ctg ccc ccg atg acg tcc acc gat tac gtc aac acc atc ccc aca    714
Pro Leu Pro Pro Met Thr Ser Thr Asp Tyr Val Asn Thr Ile Pro Thr
             75                  80                  85
tcc atg gag ccc gat ttc ccg ggt gat gag gag atg gag aag cgc tac    762
Ser Met Glu Pro Asp Phe Pro Gly Asp Glu Glu Met Glu Lys Arg Tyr
         90                  95                 100
cgc cgc tgg atg cgc tgg aac gcc gcc atc atg gtg cac cgt gcc cag    810
Arg Arg Trp Met Arg Trp Asn Ala Ala Ile Met Val His Arg Ala Gln
    105                 110                 115
cgc ccg gga atc ggt gtg ggt ggg cac atc tcc acc tac gcc ggc gcc    858
Arg Pro Gly Ile Gly Val Gly Gly His Ile Ser Thr Tyr Ala Gly Ala
120                 125                 130                 135
gcc cca ctc tac gag gtc ggt ttc aac cac ttc ttc cgc ggc aag gac    906
Ala Pro Leu Tyr Glu Val Gly Phe Asn His Phe Phe Arg Gly Lys Asp
                140                 145                 150
cac ccg ggt ggc ggt gac cag gtc ttc ttc cag ggt cac gcc tcc ccg    954
His Pro Gly Gly Gly Asp Gln Val Phe Phe Gln Gly His Ala Ser Pro
            155                 160                 165
ggc atg tac gcc cgc gcc ttc ctc gag ggc cgt ctc acc gag agc gat    1002
Gly Met Tyr Ala Arg Ala Phe Leu Glu Gly Arg Leu Thr Glu Ser Asp
        170                 175                 180
ctg gac agc ttc cgc cag gag gtc tcc tac gaa ggt ggt ggc atc ccg    1050
Leu Asp Ser Phe Arg Gln Glu Val Ser Tyr Glu Gly Gly Gly Ile Pro
    185                 190                 195
tcc tac ccg cac ccg cac ggc atg ccg gac ttc tgg gag ttc ccg acc    1098
Ser Tyr Pro His Pro His Gly Met Pro Asp Phe Trp Glu Phe Pro Thr
200                 205                 210                 215
gtg tcc atg ggc ctc ggg ccc atg gat gcc atc tac cag gcg cgc ttc    1146
Val Ser Met Gly Leu Gly Pro Met Asp Ala Ile Tyr Gln Ala Arg Phe
                220                 225                 230
aac cgc tac ctg cac aac cgt ggc atc aag gac acc tcg gag cag cac    1194
Asn Arg Tyr Leu His Asn Arg Gly Ile Lys Asp Thr Ser Glu Gln His
            235                 240                 245
gtc tgg gca ttc ctc ggt gac ggc gag atg gat gag ccg gag tcc cgt    1242
Val Trp Ala Phe Leu Gly Asp Gly Glu Met Asp Glu Pro Glu Ser Arg
        250                 255                 260
ggt ctc atc cac cag gct gcg ctg aac aac ctg gac aac ctc acc ttc    1290
Gly Leu Ile His Gln Ala Ala Leu Asn Asn Leu Asp Asn Leu Thr Phe
    265                 270                 275
gtg atc aac tgc aac ctg cag cgt ctt gat ggc ccg gtc cgc ggt aac    1338
Val Ile Asn Cys Asn Leu Gln Arg Leu Asp Gly Pro Val Arg Gly Asn
280                 285                 290                 295
acc aag atc atc cag gaa ctc gag tcc ttc ttc cgt ggt gcc ggc tgg    1386
Thr Lys Ile Ile Gln Glu Leu Glu Ser Phe Phe Arg Gly Ala Gly Trp
                300                 305                 310
tcc gtc atc aag gtc atc tgg ggc cgt gag tgg gat gaa ctg ctg gag    1434
Ser Val Ile Lys Val Ile Trp Gly Arg Glu Trp Asp Glu Leu Leu Glu
            315                 320                 325
aag gac cag gac ggt gct ctt gtc gag gtc atg aac aac acc tcc gac    1482
Lys Asp Gln Asp Gly Ala Leu Val Glu Val Met Asn Asn Thr Ser Asp
        330                 335                 340
ggt gac tac cag acc ttc aag gcc aat gac ggt gcc tac gtc cgt gag    1530
Gly Asp Tyr Gln Thr Phe Lys Ala Asn Asp Gly Ala Tyr Val Arg Glu
    345                 350                 355
cac ttc ttc ggc cgt gac ccc cgc acc ctc aag ctc gtc gag gac atg    1578
His Phe Phe Gly Arg Asp Pro Arg Thr Leu Lys Leu Val Glu Asp Met
360                 365                 370                 375
acc gac gag gag atc tgg aag ctg ccc cgt ggt ggc cat gac tac cgt    1626
Thr Asp Glu Glu Ile Trp Lys Leu Pro Arg Gly Gly His Asp Tyr Arg
                380                 385                 390
aag gtc tac gcc gcc tac aag cgt gcg ctg gag acc aag gac cgc ccg    1674
Lys Val Tyr Ala Ala Tyr Lys Arg Ala Leu Glu Thr Lys Asp Arg Pro
            395                 400                 405
acc gtc att ctc gcc cat acc atc aag ggc tac ggc ctg ggc cac aac    1722
Thr Val Ile Leu Ala His Thr Ile Lys Gly Tyr Gly Leu Gly His Asn
        410                 415                 420
ttc gag ggc cgc aac gcg acc cac cag atg aag aag ctg acc ctg gat    1770
Phe Glu Gly Arg Asn Ala Thr His Gln Met Lys Lys Leu Thr Leu Asp
    425                 430                 435
gac ctg aag ctg ttc cgt gac aag cag ggt ctg ccc atc acc gat gag    1818
Asp Leu Lys Leu Phe Arg Asp Lys Gln Gly Leu Pro Ile Thr Asp Glu
440                 445                 450                 455
gag ctg gag aag gat ccc tac ctg cct ccg tac tac cac ccg ggt gag    1866
Glu Leu Glu Lys Asp Pro Tyr Leu Pro Pro Tyr Tyr His Pro Gly Glu
                460                 465                 470
gac gca ccg gag atc aag tac atg aag gag cgt cgc cag gcg ctc ggt    1914
Asp Ala Pro Glu Ile Lys Tyr Met Lys Glu Arg Arg Gln Ala Leu Gly
            475                 480                 485
ggt ttc ctg ccg gag cgc cgt gag aag tac gag cca ctg cag gtt ccc    1962
Gly Phe Leu Pro Glu Arg Arg Glu Lys Tyr Glu Pro Leu Gln Val Pro
        490                 495                 500
ccg ctg gac aag ctg cgg tcc gtg cgc aag ggt tcc ggc aag cag cag    2010
Pro Leu Asp Lys Leu Arg Ser Val Arg Lys Gly Ser Gly Lys Gln Gln
    505                 510                 515
gtg gcc acc acc atg gcc acg gtg cgt acc ttc aag gaa ctc atg cgg    2058
Val Ala Thr Thr Met Ala Thr Val Arg Thr Phe Lys Glu Leu Met Arg
520                 525                 530                 535
gac aag aac ctg gcc gac cgc ttg gtc ccg atc atc ccg gat gag gcc    2106
Asp Lys Asn Leu Ala Asp Arg Leu Val pro Ile Ile pro Asp Glu Ala
                540                 545                 550
cgc acc ttc ggc ctg gac tcc tgg ttc ccg acc ctg aaa atc tac aac    2154
Arg Thr Phe Gly Leu Asp Ser Trp Phe Pro Thr Leu Lys Ile Tyr Asn
            555                 560                 565
ccg cac ggt cag aac tac gtg ccg gtc gac cat gac ctc atg ctg tcc    2202
Pro His Gly Gln Asn Tyr Val Pro Val Asp His Asp Leu Met Leu Ser
        570                 575                 580
tac cgt gag gcc aag gac ggc cag atc ctg cat gag ggc atc aac gag    2250
Tyr Arg Glu Ala Lys Asp Gly Gln Ile Leu His Glu Gly Ile Asn Glu
    585                 590                 595
gcc ggt tcc gtg gca tcg ttt atc gcc gcc gga acc tcc tac gcc acc    2298
Ala Gly Ser Val Ala Ser Phe Ile Ala Ala Gly Thr Ser Tyr Ala Thr
600                 605                 610                 615
cat ggc gag gcc atg atc ccg ctg tac atc ttc tac tcg atg ttc ggc    2346
His Gly Glu Ala Met Ile Pro Leu Tyr Ile Phe Tyr Ser Met Phe Gly
                620                 625                 630
ttc cag cgc acc ggt gac ggc atc tgg gcc gca gcc gac cag atg acg    2394
Phe Gln Arg Thr Gly Asp Gly Ile Trp Ala Ala Ala Asp Gln Met Thr
            635                 640                 645
cgt ggt ttc ctc ctg ggc gcc acc gcc ggt cgc acc acc ctg acc ggt    2442
Arg Gly Phe Leu Leu Gly Ala Thr Ala Gly Arg Thr Thr Leu Thr Gly
        650                 655                 660
gag ggc ctc cag cac atg gat ggc cac tcc ccg atc ctg gcc tcc acc    2490
Glu Gly Leu Gln His Met Asp Gly His Ser Pro Ile Leu Ala Ser Thr
    665                 670                 675
aac ccc ggt gtg gag acc tat gac ccg gcg ttc tcc tac gag atc gcg    2538
Asn Pro Gly Val Glu Thr Tyr Asp Pro Ala Phe Ser Tyr Glu Ile Ala
 680                685                 690                 695
cac ctg gtc cac cgc ggc atc gac cgc atg tac gga ccg ggc aag ggt    2586
His Leu Val His Arg Gly Ile Asp Arg Met Tyr Gly Pro Gly Lys Gly
                700                 705                 710
gag aat gtc atc tac tac ctc acc atc  tac aac gag cca acc ccg cag    2634
Glu Asn Val Ile Tyr Tyr Leu Thr Ile Tyr Asn Glu Pro Thr Pro Gln
            715                 720                 725
ccg gct gag cct gag gat ctg gac gtc gag ggc ctg cac aag ggc atc    2682
Pro Ala Glu Pro Glu Asp Leu Asp Val Glu Gly Leu His Lys Gly Ile
        730                 735                 740
tac ctc tac gac aag gcc gcc gag ggt gag ggc cat gag gcc tcg atc    2730
Tyr Leu Tyr Asp Lys Ala Ala Glu Gly Glu Gly His Glu Ala Ser Ile
    745                 750                 755
ctg gcc tcc ggc atc ggc atg cag tgg gca ctg cgc gcc cgt gac atc    2778
Leu Ala Ser Gly Ile Gly Met Gln Trp Ala Leu Arg Ala Arg Asp Ile
 760                765                 770                 775
ctc gcc gag gat tac ggc atc cgt gcc aac atc ttc tcc gcc acc tcg    2826
Leu Ala Glu Asp Tyr Gly Ile Arg Ala Asn Ile Phe Ser Ala Thr Ser
                780                 785                 790
tgg gtg gag ctg gcc cgc gac ggt gcc cgc cgt aac ctg gag gcg ctg    2874
Trp Val Glu Leu Ala Arg Asp Gly Ala Arg Arg Asn Leu Glu Ala Leu
            795                 800                 805
cgc aac ccg ggt gcg gat gtc ggt gag gca ttc gtg acc acc cag ctg    2922
Arg Asn Pro Gly Ala Asp Val Gly Glu Ala Phe Val Thr Thr Gln Leu
        810                 815                 820
aag aag ggt tcc ggc ccc tac gtc gcg gtg tcc gac ttc gcg acc gac    2970
Lys Lys Gly Ser Gly Pro Tyr Val Ala Val Ser Asp Phe Ala Thr Asp
    825                 830                 835
ctg ccg aac cag atc cgc gag tgg gtt ccc ggt gac tac atc gtc ctc    3018
Leu Pro Asn Gln Ile Arg Glu Trp Val Pro Gly Asp Tyr Ile Val Leu
840                 845                 850                 855
ggt gcc gac ggc ttc ggt ttc tcc gat acc cgt ccg gca gcc cgt cgt    3066
Gly Ala Asp Gly Phe Gly Phe Ser Asp Thr Arg Pro Ala Ala Arg Arg
                860                 865                 870
tac ttc aac atc gac gcc gag tcc atc gtc gtg gcg gtc ctg cgc ggc    3114
Tyr Phe Asn Ile Asp Ala Glu Ser Ile Val Val Ala Val Leu Arg Gly
            875                 880                 885
ctg gtc cgc gag ggt gtc atc gat gcc tcc gtg gcg gcg cac gcg gct    3162
Leu Val Arg Glu Gly Val Ile Asp Ala Ser Val Ala Ala His Ala Ala
        890                 895                 900
gag aag tac aag ctg tcc gac ccg acg gca cca cag gtc gat ccg gac    3210
Glu Lys Tyr Lys Leu Ser Asp Pro Thr Ala Pro Gln Val Asp Pro Asp
    905                 910                 915
gca ccg atc gag tagacctgct tgtcgacgaa aaacaccccc gccccctcac        3262
Ala Pro Ile Glu
920
atgatgaggg gggcgggggt gtgctcgttt acggcgggta caggggggta tcagcccagc  3322
atcgccttat cggagagcgt cgcgcccttg atcttggcga attcctgcag cagatcccgc  3382
acggtgagct tctgcttcac ctctgcgctg gcctcataga cgatccgtcc ctcgtgcatc  3442
atgatgaggc ggttacccag gcggatagcc tgttccatgt tgtgggtgac catgagggtg  3502
gtcagtttgc cgtcctcgac gatcttctcg gtcagggtgg tgaccagttc ggctcgctgg  3562
gggtccaggg cggcggtgtg ttcgtcgaga agcatg                            3598
<210>22
<211>923
<212>PRT
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<400>22
Met Ala Asp Gln Ala Lys Leu Gly Gly Lys Pro Thr Asp Asp Thr Asn
  1               5                  10                  15
Phe Ala Met Ile Arg Asp Gly Val Ala Ser Tyr Leu Asn Asp Ser Asp
             20                  25                  30
Pro Glu Glu Thr Lys Glu Trp Met Asp Ser Leu Asp Gly Leu Leu Gln
         35                  40                  45
Asp Ser Ser Pro Glu Arg Ala Arg Tyr Leu Met Leu Arg Leu Leu Glu
     50                  55                  60
Arg Ala Ser Ala Lys Arg Val Pro Leu Pro Pro Met Thr Ser Thr Asp
 65                  70                  75                  80
Tyr Val Asn Thr Ile Pro Thr Ser Met Glu Pro Asp Phe Pro Gly Asp
                 85                  90                  95
Glu Glu Met Glu Lys Arg Tyr Arg Arg Trp Met Arg Trp Asn Ala Ala
            100                 105                 110
Ile Met Val His Arg Ala Gln Arg Pro Gly Ile Gly Val Gly Gly His
        115                 120                 125
Ile Ser Thr Tyr Ala Gly Ala Ala Pro Leu Tyr Glu Val Gly Phe Asn
    130                 135                 140
His Phe Phe Arg Gly Lys Asp His Pro Gly Gly Gly Asp Gln Val Phe
145                 150                 155                 160
Phe Gln Gly His Ala Ser Pro Gly Met Tyr Ala Arg Ala Phe Leu Glu
                165                  170                175
Gly Arg Leu Thr Glu Ser Asp Leu Asp Ser Phe Arg Gln Glu Val Ser
            180                 185                 190
Tyr Glu Gly Gly Gly Ile Pro Ser Tyr Pro His Pro His Gly Met Pro
        195                 200                 205
Asp Phe Trp Glu Phe Pro Thr Val Ser Met Gly Leu Gly Pro Met Asp
    210                 215                 220
Ala Ile Tyr Gln Ala Arg Phe Asn Arg Tyr Leu His Asn Arg Gly Ile
225                 230                 235                 240
Lys Asp Thr Ser Glu Gln His Va1 Trp Ala Phe Leu Gly Asp Gly Glu
                245                 250                 255
Met Asp Glu Pro Glu Ser Arg Gly Leu Ile His Gln Ala Ala Leu Asn
            260                 265                 270
Asn Leu Asp Asn Leu Thr Phe Val Ile Asn Cys Asn Leu Gln Arg Leu
        275                 280                 285
Asp Gly Pro Val Arg Gly Asn Thr Lys Ile Ile Gln Glu Leu Glu Ser
    290                 295                 300
Phe Phe Arg Gly Ala Gly Trp Ser Val Ile Lys Val Ile Trp Gly Arg
305                 310                 315                 320
Glu Trp Asp Glu Leu Leu Glu Lys Asp Gln Asp Gly Ala Leu Val Glu
                325                 330                 335
Val Met Asn Asn Thr Ser Asp Gly Asp Tyr Gln Thr Phe Lys Ala Asn
            340                 345                 350
Asp Gly Ala Tyr Val Arg Glu His Phe Phe Gly Arg Asp Pro Arg Thr
        355                 360                 365
Leu Lys Leu Val Glu Asp Met Thr Asp Glu Glu Ile Trp Lys Leu Pro
    370                 375                 380
Arg Gly Gly His Asp Tyr Arg Lys Val Tyr Ala Ala Tyr Lys Arg Ala
385                 390                 395                 400
Leu Glu Thr Lys Asp Arg Pro Thr Val Ile Leu Ala His Thr Ile Lys
                405                 410                 415
Gly Tyr Gly Leu Gly His Asn Phe Glu Gly Arg Asn Ala Thr His Gln
            420                 425                 430
Met Lys Lys Leu Thr Leu Asp Asp Leu Lys Leu Phe Arg Asp Lys Gln
        435                 440                 445
Gly Leu Pro Ile Thr Asp Glu Glu Leu Glu Lys Asp Pro Tyr Leu Pro
    450                 455                 460
Pro Tyr Tyr His Pro Gly Glu Asp Ala Pro Glu Ile Lys Tyr Met Lys
465                 470                 475                 480
Glu Arg Arg Gln Ala Leu Gly Gly Phe Leu Pro Glu Arg Arg Glu Lys
                485                 490                 495
Tyr Glu Pro Leu Gln Val Pro Pro Leu Asp Lys Leu Arg Ser Val Arg
            500                 505                 510
Lys Gly Ser Gly Lys Gln Gln Val Ala Thr Thr Met Ala Thr Val Arg
        515                 520                 525
Thr Phe Lys Glu Leu Met Arg Asp Lys Asn Leu Ala Asp Arg Leu Val
    530                 535                 540
Pro Ile Ile Pro Asp Glu Ala Arg Thr Phe Gly Leu Asp Ser Trp Phe
545                 550                 555                 560
Pro Thr Leu Lys Ile Tyr Asn Pro His Gly Gln Asn Tyr Val Pro Val
                565                 570                 575
Asp His Asp Leu Met Leu Ser Tyr Arg Glu Ala Lys Asp Gly Gln Ile
            580                 585                 590
Leu His Glu Gly Ile Asn Glu Ala Gly Ser Val Ala Ser Phe Ile Ala
        595                 600                 605
Ala Gly Thr Ser Tyr Ala Thr His Gly Glu Ala Met Ile Pro Leu Tyr
    610                 615                 620
Ile Phe Tyr Ser Met Phe Gly Phe Gln Arg Thr Gly Asp Gly Ile Trp
625                 630                 635                 640
Ala Ala Ala Asp Gln Met Thr Arg Gly Phe Leu Leu Gly Ala Thr Ala
                645                 650                 655
Gly Arg Thr Thr Leu Thr Gly Glu Gly Leu Gln His Met Asp Gly His
            660                 665                 670
Ser Pro Ile Leu Ala Ser Thr Asn Pro Gly Val Glu Thr Tyr Asp Pro
        675                 680                 685
Ala Phe Ser Tyr Glu Ile Ala His Leu Val His Arg Gly Ile Asp Arg
    690                 695                 700
Met Tyr Gly Pro Gly Lys Gly Glu Asn Val Ile Tyr Tyr Leu Thr Ile
705                 710                 715                 720
Tyr Asn Glu Pro Thr Pro Gln Pro Ala Glu Pro Glu Asp Leu Asp Val
                725                  730                735
Glu Gly Leu His Lys Gly Ile Tyr Leu Tyr Asp Lys Ala Ala Glu Gly
            740                 745                 750
Glu Gly His Glu Ala Ser Ile Leu Ala Ser Gly Ile Gly Met Gln Trp
        755                 760                 765
Ala Leu Arg Ala Arg Asp Ile Leu Ala Glu Asp Tyr Gly Ile Arg Ala
    770                 775                 780
Asn Ile Phe Ser Ala Thr Ser Trp Val Glu Leu Ala Arg Asp Gly Ala
785                 790                 795                 800
Arg Arg Asn Leu Glu Ala Leu Arg Asn Pro Gly Ala Asp Val Gly Glu
                805                 810                 815
Ala Phe Val Thr Thr Gln Leu Lys Lys Gly Ser Gly Pro Tyr Val Ala
            820                 825                  830
Val Ser Asp Phe Ala Thr Asp Leu Pro Asn Gln Ile Arg Glu Trp Val
        835                 840                 845
Pro Gly Asp Tyr Ile Val Leu Gly Ala Asp Gly Phe Gly Phe Ser Asp
    850                 855                 860
Thr Arg Pro Ala Ala Arg Arg Tyr Phe Asn Ile Asp Ala Glu Ser Ile
865                 870                 875                 880
Val Val Ala Val Leu Arg Gly Leu Val Arg Glu Gly Val Ile Asp Ala
                885                 890                 895
Ser Val Ala Ala His Ala Ala Glu Lys Tyr Lys Leu Ser Asp Pro Thr
            900                 905                 910
Ala Pro Gln Val Asp Pro Asp Ala Pro Ile Glu
        915                 920
<210>23
<211>4013
<212>DNA
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<220>
<221>CDS
<222>(319)..(3735)
<400>23
gtcctttttg caaattctgc aaagtgggta gaggtcagat gtcagcaggt cggtccgatt 60
tctgtaggaa agtggagccg ttgggggcaa cattaacctt ccccctggga tgtagctaaa 120
cggcaatggg ggtctcgggc ggggggcatt cttttcacgg caaggtggtg aaattccgca 180
ggtcactccc cggccggcgg tagagaacgg agcgaaaacg gaaagcaata cgtggttttc 240
cggactggcc gttacgatgt tctgaagagt gactgccatc acccaacagg ctggtcctcg 300
tcgaaaggaa caaaaact gtg gtt aca aca aca ccc tcc acg ctg ccg gcg   351
                    Val Val Thr Thr Thr Pro Ser Thr Leu Pro Ala
                      1               5                 10
ttc aaa aag atc ctg gtg gcc aac cga ggt gaa atc gcg gtg cga gca    399
Phe Lys Lys Ile Leu Val Ala Asn Arg Gly Glu Ile Ala Val Arg Ala
             15                  20                  25
ttc cgc gcc gcc tac gag acc ggg gcc gca acc gtg gcc atc tac ccc    447
Phe Arg Ala Ala Tyr Glu Thr Gly Ala Ala Thr Val Ala Ile Tyr Pro
         30                  35                  40
cgg gag gac cgt ggc tcc ttc cac cgc tcc ttc gcc tcc gag gcg gtg    495
Arg Glu Asp Arg Gly Ser Phe His Arg Ser Phe Ala Ser Glu Ala Val
     45                  50                  55
agg atc gga acc gag ggc tca ccc gtc aag gcg tac ctc gat att gat    543
Arg Ile Gly Thr Glu Gly Ser Pro Val Lys Ala Tyr Leu Asp Ile Asp
 60                 65                   70                  75
gag atc atc aac gcc gcc aag aag gtg aaa gcg gac gcg gtc tac ccg    591
Glu Ile Ile Asn Ala Ala Lys Lys Val Lys Ala Asp Ala Val Tyr Pro
                 80                  85                  90
ggg tat ggt ttc ctt tcg gaa aat gce cag ctc gcg cgt gaa tgc gcg    639
Gly Tyr Gly Phe Leu Ser Glu Asn Ala Gln Leu Ala Arg Glu Cys Ala
             95                 100                 105
gag aac ggc att acc ttc atc ggt ccc acc ccg gag gtg ctc gac ctc    687
Glu Asn Gly Ile Thr Phe Ile Gly Pro Thr Pro Glu Val Leu Asp Leu
        110                 115                 120
acg ggc gac aag tcc aag gct gtg tcc gcc gcg aag aag gcc ggg ctg    735
Thr Gly Asp Lys Ser Lys Ala Val Ser Ala Ala Lys Lys Ala Gly Leu
    125                 130                 135
ccg gtg ctg gcg gaa tcc acc ccc agc acc gac atc gat gag atc gtc    783
Pro Val Leu Ala Glu Ser Thr Pro Ser Thr Asp Ile Asp Glu Ile Val
140                 145                 150                 155
aag agt gcc gag ggg cag acc tac ccg atc ttc gtc aag gcc gtc gca    831
Lys Ser Ala Glu Gly Gln Thr Tyr Pro Ile Phe Val Lys Ala Val Ala
                160                 165                 170
ggt ggt ggc ggg cgt ggt atg cgg ttc gtc gag aag ccc gag gac ctg    879
Gly Gly Gly Gly Arg Gly Met Arg Phe Val Glu Lys Pro Glu Asp Leu
            175                 180                 185
cgt gag ctg gcc agg gag gcc tcc cgc gag gcg gag gcc gct ttc ggt    927
Arg Glu Leu Ala Arg Glu Ala Ser Arg Glu Ala Glu Ala Ala Phe Gly
        190                 195                 200
gac gga tcc gtc tac gtc gaa cgg gcc gtg atc aaa ccc cag cac atc    975
Asp Gly Ser Val Tyr Val Glu Arg Ala Val Ile Lys Pro Gln His Ile
    205                 2l0                 215
gag gtg cag atc ctc ggt gat cac acc ggc gat gtc atc cac ctg tat    1023
Glu Val Gln Ile Leu Gly Asp His Thr Gly Asp Val Ile His Leu Tyr
220                 225                 230                 235
gaa cgc gac tgt tcc ctg cag cgc cgc cac cag aag gtc gtg gag atc    1071
Glu Arg Asp Cys Ser Leu Gln Arg Arg His Gln Lys Val Val Glu Ile
                240                 245                 250
gca cct gcc cag cac ctc gac ccg gag ctg cgc gac cgc atc tgt gcc    1119
Ala Pro Ala Gln His Leu Asp Pro Glu Leu Arg Asp Arg Ile Cys Ala
            255                 260                 265
gat gcc gtg aag ttc tgc aaa tcc atc gga tac cag ggc gcc ggc acc    1167
Asp Ala Val Lys Phe Cys Lys Ser Ile Gly Tyr Gln Gly Ala Gly Thr
        270                 275                 280
gtg gag ttc ctc gtc gac gag gcg ggc aac cac gtc ttc att gag atg    1215
Val Glu Phe Leu Val Asp Glu Ala Gly Asn His Val Phe Ile Glu Met
    285                 290                 295
aac ccc cgc atc cag gtg gaa cac acc gtg acc gag gag gtc acc tcc    1263
Asn Pro Arg Ile Gln Val Glu His Thr Val Thr Glu Glu Val Thr Ser
300                 305                 310                 315
gtc gac ctg gtc aag gcg cag atg cac ctg gcc gcc ggt gcc acc ctg    1311
Val Asp Leu Val Lys Ala Gln Met His Leu Ala Ala Gly Ala Thr Leu
                320                 325                 330
aag gaa ctg ggc ctg acc cag gac aag atc acc acc cac ggt gcc gcc    1359
Lys Glu Leu Gly Leu Thr Gln Asp Lys Ile Thr Thr His Gly Ala Ala
            335                 340                 345
ctg cag tgc cgc atc acc acg gag gac ccg tcc aac aac ttc cgg ccc    1407
Leu Gln Cys Arg Ile Thr Thr Glu Asp Pro Ser Asn Asn Phe Arg Pro
        350                 355                 360
gac acc ggt gtg atc acc gcc tac cgc tcc ccg ggt ggt gcg ggt gtg    1455
Asp Thr Gly Val Ile Thr Ala Tyr Arg Ser Pro Gly Gly Ala Gly Val
    365                 370                 375
cgt ctc gac ggc gca gcc cag ctc ggc ggc gag atc acc gca cat ttc    1503
Arg Leu Asp Gly Ala Ala Gln Leu Gly Gly Glu Ile Thr Ala His Phe
380                 385                 390                 395
gat tcc atg ctg gtc aag atg acc tgc cgc ggt tcc gat ttc gag acc    1551
Asp Ser Met Leu Val Lys Met Thr Cys Arg Gly Ser Asp Phe Glu Thr
                400                 405                 410
gcc gtg tcc cga gcc cag cgc gcc ctg gcg gag ttc aac  gtc tcc ggc    1599
Ala Val Ser Arg Ala Gln Arg Ala Leu Ala Glu Phe Asn Val Ser Gly
            415                 420                 425
gtg gcc acc aac atc ggc ttc ctg cgt gcg ctg ctg cgc gag gaa gac    1647
Val Ala Thr Asn Ile Gly Phe Leu Arg Ala Leu Leu Arg Glu Glu Asp
        430                 435                 440
ttc acc aag agg cgc atc gac acc ggc ttc atc ggc tcc cac cag cac    1695
Phe Thr Lys Arg Arg Ile Asp Thr Gly Phe Ile Gly Ser His Gln His
    445                 450                 455
ctg ctc cag gcc cca ccg gcc gac gat gag cag ggg cgg atc ctg gaa    1743
Leu Leu Gln Ala Pro Pro Ala Asp Asp Glu Gln Gly Arg Ile Leu Glu
 460                465                 470                 475
tac ctg gcg gat gtc acc gtg aac aaa ccc cac ggt gaa cgc ccc gag    1791
Tyr Leu Ala Asp Val Thr Val Asn Lys Pro His Gly Glu Arg Pro Glu
                480                 485                 490
aca gcc cgt ccg ata gag aag ctg ccc gag gtg gag aac atc ccg ctg    1839
Thr Ala Arg Pro Ile Glu Lys Leu Pro Glu Val Glu Asn Ile Pro Leu
            495                 500                 505
cca cgc ggc tcc cgc gac cgc ctg aag cag ctc ggc ccg gag ggt ttc    1887
Pro Arg Gly Ser Arg Asp Arg Leu Lys Glu Leu Gly Pro Glu Gly Phe
        510                 515                 520
gcc cgc gat ctg cgc gaa cag gat gcc ctg gcc gtc acc gac acc acc    1935
Ala Arg Asp Leu Arg Glu Gln Asp Ala Leu Ala Val Thr Asp Thr Thr
    525                 530                 535
ttc cgc gat gcc cac cag tcc ctc ctg gcc acc cgc gtg cgc tcc ttc    1983
Phe Arg Asp Ala His Gln Ser Leu Leu Ala Thr Arg Val Arg Ser Phe
540                 545                 550                 555
gcg ctg acc ccg gcg gcg cgc gcc gtc gca aag ctc acc ccc gag ctg    2031
Ala Leu Thr Pro Ala Ala Arg Ala Val Ala Lys Leu Thr Pro Glu Leu
                560                 565                 570
ctg tcg gtg gag gcc tgg ggc ggt gcc acc tac gac gtg gcc atg cgc    2079
Leu Ser Val Glu Ala Trp Gly Gly Ala Thr Tyr Asp Val Ala Met Arg
            575                 580                 585
ttc ctc ttc gag gat ccg tgg gca cgc ctg gat gag ctg cgt gag gcg    2127
Phe Leu Phe Glu Asp Pro Trp Ala Arg Leu Asp Glu Leu Arg Glu Ala
        590                 595                 600
atg ccg aat gtg aac atc cag atg ctg ctg cgt ggt cgc aac acc gtc    2175
Met Pro Asn Val Asn Ile Gln Met Leu Leu Arg Gly Arg Asn Thr Val
    605                 610                 615
ggg tac acc ccg tac ccc gat tcg gtg tgc cgc gcg ttt gtg cag gag    2223
Gly Tyr Thr Pro Tyr Pro Asp Ser Val Cys Arg Ala Phe Val Gln Glu
620                 625                 630                 635
gcc gcc aag tcc ggt gtg gac atc ttc cgc atc ttc gac gcg ctc aac    2271
Ala Ala Lys Ser Gly Val Asp Ile Phe Arg Ile Phe Asp Ala Leu Asn
                640                 645                 650
gac atc tcc cag atg cgc ccg gcc atc gac gcc gtc ctg gag acc ggc    2319
Asp Ile Ser Gln Met Arg Pro Ala Ile Asp Ala Val Leu Glu Thr Gly
            655                 660                 665
acc agt gtt gcc gag gtc gcc atg gcg tac tcc ggt gac ctg tcc aat    2367
Thr Ser Val Ala Glu Val Ala Met Ala Tyr Ser Gly Asp Leu Ser Asn
        670                 675                 680
ccg ggg gag aag ctc tac acc ctg gac tac tac ctg aac ctg gcc gag    2415
Pro Gly Glu Lys Leu Tyr Thr Leu Asp Tyr Tyr Leu Asn Leu Ala Glu
    685                 690                 695
cag atc gtc gac tcc ggt gca cac atc ctg gcc atc aag gac atg gcc    2463
Gln Ile Val Asp Ser Gly Ala His Ile Leu Ala Ile Lys Asp Met Ala
700                 705                 710                 715
ggc ctg ctg cgc cgc gcc gcg gcg ccc aaa ctg gtc acc gcc ctg cgc    2511
Gly Leu Leu Arg Arg Ala Ala Ala Pro Lys Leu Val Thr Ala Leu Arg
                720                 725                 730
cgt gaa ttc gac ctg ccc gtg cat gtc cac acc cac gac acc gcc ggc    2559
Arg Glu Phe Asp Leu Pro Val His Val His Thr His Asp Thr Ala Gly
            735                 740                 745
ggt cag ctg gcc acc tac ctg gcc gcc gcc aac gcc ggg gcc gat gcc    2607
Gly Gln Leu Ala Thr Tyr Leu Ala Ala Ala Asn Ala Gly Ala Asp Ala
        750                 755                 760
gtc gac gcc gcc tcc gca ccc ctg tcc ggt acc acc tcc cag ccg tcg    2655
Val Asp Ala Ala Ser Ala Pro Leu Ser Gly Thr Thr Ser Gln Pro Ser
    765                 770                 775
atg tcc gct ctg gtt gcc gcg ttt gcg cac acc cga cgc gac acc ggc    2703
Met Ser Ala Leu Val Ala Ala Phe Ala His Thr Arg Arg Asp Thr Gly
780                 785                 790                 795
ctc aac ctg cag gcc gtc tcc gac ctg gaa ccg tac tgg gag gcg gtc    2751
Leu Asn Leu Gln Ala Val Ser Asp Leu Glu Pro Tyr Trp Glu Ala Val
                800                 805                 810
cgc gga ctg tac ctg ccg ttt gaa tcc ggc acc ccg ggc ccg acc gga    2799
Arg Gly Leu Tyr Leu Pro Phe Glu Ser Gly Thr Pro Gly Pro Thr Gly
            815                 820                 825
cgc gtt tac cgc cac gag atc ccc ggc ggt cag ctg tcc aac ctg cgt    2847
Arg Val Tyr Arg His Glu Ile Pro Gly Gly Gln Leu Ser Asn Leu Arg
        830                 835                 840
gcc cag gcc gtt gca ctg ggt ctg gcc gac cgc ttc gag ctc atc gag    2895
Ala Gln Ala Val Ala Leu Gly Leu Ala Asp Arg Phe Glu Leu Ile Glu
    845                 850                 855
gac tac tac gcg gcc gtc aac gag atg ctg ggt cgt ccg acc aag gtc    2943
Asp Tyr Tyr Ala Ala Val Asn Glu Met Leu Gly Arg Pro Thr Lys Val
860                 865                 870                 875
acc ccg tcc tcc aag gtt gtc ggt gac ctc gca ctg cac ctc gtc ggt    299l
Thr Pro Ser Ser Lys Val Val Gly Asp Leu Ala Leu His Leu Val Gly
                880                 885                 890
gcc ggt gtg agc ccg gag gat ttc gcc gcc gat ccg cag aag tac gac    3039
Ala Gly Val Ser Pro Glu Asp Phe Ala Ala Asp Pro Gln Lys Tyr Asp
            895                 900                 905
atc ccc gat tcg gtc atc gcc ttc ctc cgc ggc gaa ctg ggt acc cct    3087
Ile Pro Asp Ser Val Ile Ala Phe Leu Arg Gly Glu Leu Gly Thr Pro
        910                 915                 920
ccc ggt ggc tgg ccc gaa ccg ctg cgc acc cgt gca ctc gag ggt cgc    3135
Pro Gly Gly Trp Pro Glu Pro Leu Arg Thr Arg Ala Leu Glu Gly Arg
    925                 930                 935
tcc cag ggt aag gcc ccg ctg gcg gag atc ccc gcc gag gag cag gcc    3183
Ser Gln Gly Lys Ala Pro Leu Ala Glu Ile Pro Ala Glu Glu Gln Ala
940                 945                 950                 955
cac ctg gat tcc gat gat tcc gcg gag cgt cgc ggc acc ctc aac cgc    3231
His Leu Asp Ser Asp Asp Ser Ala Glu Arg Arg Gly Thr Leu Asn Arg
                960                 965                 970
ctg ctg ttc ccg aag ccg acc gag gag ttc ctt gag cac cgt cgc cgc    3279
Leu Leu Phe Pro Lys Pro Thr Glu Glu Phe Leu Glu His Arg Arg Arg
            975                 980                 985
ttc ggc aac acc tcc gcc ctg gat gac cgc gag ttc ttc tac ggc ttg    3327
Phe Gly Asn Thr Ser Ala Leu Asp Asp Arg Glu Phe Phe Tyr Gly Leu
        990                 995                 1000
aag gag gga cgt gag gag ctg atc cga ctg acc ggt gtg tcc acc ccg    3375
Lys Glu Gly Arg Glu Glu Leu Ile Arg Leu Thr Gly Val Ser Thr Pro
   1005                1010                1015
atg gtg gtc cgc ctg gat gcg gtg tcc gaa ccg gat gac aaa ggc atg    3423
Met Val Val Arg Leu Asp Ala Val Ser Glu Pro Asp Asp Lys Gly Met
1020               1025                1030                1035
cgc aac gtg gtg gtc aac gtc aac ggc cag atc cgc ccg atc aag gtg    3471
Arg Asn Val Val Val Asn Val Asn Gly Gln Ile Arg Pro Ile Lys Val
               1040                1045                1050
cgc gac cgt tcc gtg gag tcc gtc acc gcc acc gcg gag aag gcc gat    3519
Arg Asp Arg Ser Val Glu Ser Val Thr Ala Thr Ala Glu Lys Ala Asp
           1055                1060                1065
gcc acc aac aag ggc cat gtc gcc gca cca ttc gcc ggt gtg gtc acc    3567
Ala Thr Asn Lys Gly His Val Ala Ala Pro Phe Ala Gly Val Val Thr
       1070                1075                1080
gtg acc gtc gcc gag ggt gat gag atc aag gct ggc gac gcc gtg gcc    3615
Val Thr Val Ala Glu Gly Asp Glu Ile Lys Ala Gly Asp Ala Val Ala
   1085                1090                1095
atc att gag gcc atg aag atg gag gcc acc atc acc gcg cct gtc gac    3663
Ile Ile Glu Ala Met Lys Met Glu Ala Thr Ile Thr Ala Pro Val Asp
1100               1105                1110                1115
ggt gtc atc gac cgc gtc gtg gtg ccc gcc gcc acc aag gtc gag ggc    3711
Gly Val Ile Asp Arg Val Val Val Pro Ala Ala Thr Lys Val Glu Gly
               1120                1125                1130
ggc gac ctc atc gtg gtc gtg tcc tagcgactga gagccacaac ccgtcccggg   3765
Gly Asp Leu Ile Val Val Val Ser
           1135
tgccttgtta tcaacctccc cctgatgatg ttctcagggg gaggctctac gtacctcacc  3825
gtgacggtgc atgtatatcg tcctgctgga gagaatgctc caggtaggaa cgccaaccac  3885
cccactccgt gatgtcccgt gctgatccca ggcaggccgg ttggaaagaa aaaccagtga  3945
tggaacggcc atcggacagc gagacggaac caagcgtcat cggctccggt agagcggtga  4005
ggagcctg                                                           4013
<210>24
<211>1139
<212>PRT
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<400>24
Val Val Thr Thr Thr Pro Ser Thr Leu Pro Ala Phe Lys Lys Ile Leu
  1               5                  10                  15
Val Ala Asn Arg Gly Glu Ile Ala Val Arg Ala Phe Arg Ala Ala Tyr
             20                  25                  30
Glu Thr Gly Ala Ala Thr Val Ala Ile Tyr Pro Arg Glu Asp Arg Gly
        35                   40                  45
Ser Phe His Arg Ser Phe Ala Ser Glu Ala Val Arg Ile Gly Thr Glu
    50                   55                  60
Gly Ser Pro Val Lys Ala Tyr Leu Asp Ile Asp Glu Ile Ile Asn Ala
 65                  70                  75                  80
Ala Lys Lys Val Lys Ala Asp Ala Val Tyr Pro Gly Tyr Gly Phe Leu
                 85                  90                  95
Ser Glu Asn Ala Gln Leu Ala Arg Glu Cys Ala Glu Asn Gly Ile Thr
            100                 105                 110
Phe Ile Gly Pro Thr Pro Glu Val Leu Asp Leu Thr Gly Asp Lys Ser
        115                 120                 125
Lys Ala Val Ser Ala Ala Lys Lys Ala Gly Leu Pro Val Leu Ala Glu
    130                 135                 140
Ser Thr Pro Ser Thr Asp Ile Asp Glu Ile Val Lys Ser Ala Glu Gly
145                 150                 155                 160
Gln Thr Tyr Pro Ile Phe Val Lys Ala Val Ala Gly Gly Gly Gly Arg
                165                 170                 175
Gly Met Arg Phe Val Glu Lys Pro Glu Asp Leu Arg Glu Leu Ala Arg
            180                 185                 190
Glu Ala Ser Arg Glu Ala Glu Ala Ala Phe Gly Asp Gly Ser Val Tyr
        195                 200                 205
Val Glu Arg Ala Val Ile Lys Pro Gln His Ile Glu Val Gln Ile Leu
    2l0                 215                 220
Gly Asp His Thr Gly Asp Val Ile His Leu Tyr Glu Arg Asp Cys Ser
225                 230                 235                 240
Leu Gln Arg Arg His Gln Lys Val Val Glu Ile Ala Pro Ala Gln His
                245                 250                 255
Leu Asp Pro Glu Leu Arg Asp Arg Ile Cys Ala Asp Ala Val Lys Phe
            260                 265                 270
Cys Lys Ser Ile Gly Tyr Gln Gly Ala Gly Thr Val Glu Phe Leu Val
        275                 280                 285
Asp Glu Ala Gly Asn His Val Phe Ile Glu Met Asn Pro Arg Ile Gln
    290                 295                 300
Val Glu His Thr Val Thr Glu Glu Val Thr Ser Val Asp Leu Val Lys
305                 310                 315                 320
Ala Gln Met His Leu Ala Ala Gly Ala Thr Leu Lys Glu Leu Gly Leu
                325                 330                 335
Thr Gln Asp Lys Ile Thr Thr His Gly Ala Ala Leu Gln Cys Arg Ile
            340                 345                 350
Thr Thr Glu Asp Pro Ser Asn Asn Phe Arg pro Asp Thr Gly Val Ile
        355                 360                 365
Thr Ala Tyr Arg Ser Pro Gly Gly Ala Gly Val Arg Leu Asp Gly Ala
    370                 375                 380
Ala Gln Leu Gly Gly Glu Ile Thr Ala His Phe Asp Ser Met Leu Val
385                 390                 395                 400
Lys Met Thr Cys Arg Gly Ser Asp Phe Glu Thr Ala Val Ser Arg Ala
                405                 410                 415
Gln Arg Ala Leu Ala Glu Phe Asn Val Ser Gly Val Ala Thr Asn lle
            420                 425                 430
Gly Phe Leu Arg Ala Leu Leu Arg Glu Glu Asp Phe Thr Lys Arg Arg
        435                 440                 445
Ile Asp Thr Gly Phe Ile Gly Ser His Gln His Leu Leu Gln Ala Pro
    450                 455                 460
Pro Ala Asp Asp Glu Gln Gly Arg Ile Leu Glu Tyr Leu Ala Asp Val
465                 470                 475                 480
Thr Val Asn Lys Pro His Gly Glu Arg Pro Glu Thr Ala Arg Pro Ile
                485                 490                 495
Glu Lys Leu Pro Glu Val Glu Asn Ile Pro Leu Pro Arg Gly Ser Arg
            500                 505                 510
Asp Arg Leu Lys Gln Leu Gly Pro Glu Gly Phe Ala Arg Asp Leu Arg
        515                 520                 525
Glu Gln Asp Ala Leu Ala Val Thr Asp Thr Thr Phe Arg Asp Ala His
    530                 535                 540
Gln Ser Leu Leu Ala Thr Arg Val Arg Ser Phe Ala Leu Thr Pro Ala
545                 550                 555                 560
Ala Arg Ala Val Ala Lys Leu Thr Pro Glu Leu Leu Ser Val Glu Ala
                565                 570                 575
Trp Gly Gly Ala Thr Tyr Asp Val Ala Met Arg Phe Leu Phe Glu Asp
            580                 585                 590
Pro Trp Ala Arg Leu Asp Glu Leu Arg Glu Ala Met Pro Asn Val Asn
        595                 600                 605
Ile Gln Met Leu Leu Arg Gly Arg Asn Thr Val Gly Tyr Thr Pro Tyr
    610                 615                 620
Pro Asp Ser Val Cys Arg Ala Phe Val Gln Glu Ala Ala Lys Ser Gly
625                 630                 635                 640
Val Asp Ile Phe Arg Ile Phe Asp Ala Leu Asn Asp Ile Ser Gln Met
                645                 650                 655
Arg Pro Ala Ile Asp Ala Val Leu Glu Thr Gly Thr Ser Val Ala Glu
            660                 665                 670
Val Ala Met Ala Tyr Ser Gly Asp Leu Ser Asn Pro Gly Glu Lys Leu
        675                 680                 685
Tyr Thr Leu Asp Tyr Tyr Leu Asn Leu Ala Glu Gln Ile Val Asp Ser
    690                 695                 700
Gly Ala His Ile Leu Ala Ile Lys Asp Met Ala Gly Leu Leu Arg Arg
705                 710                 715                 720
Ala Ala Ala Pro Lys Leu Val Thr Ala Leu Arg Arg Glu Phe Asp Leu
                725                 730                 735
Pro Val His Val His Thr His Asp Thr Ala Gly Gly Gln Leu Ala Thr
            740                 745                 750
Tyr Leu Ala Ala Ala Asn Ala Gly Ala Asp Ala Val Asp Ala Ala Ser
        755                 760                 765
Ala Pro Leu Ser Gly Thr Thr Ser Gln Pro Ser Met Ser Ala Leu Val
    770                 775                 780
Ala Ala Phe Ala His Thr Arg Arg Asp Thr Gly Leu Asn Leu Gln Ala
785                 790                 795                 800
Val Ser Asp Leu Glu Pro Tyr Trp Glu Ala Val Arg Gly Leu Tyr Leu
                805                 810                 815
Pro Phe Glu Ser Gly Thr Pro Gly Pro Thr Gly Arg Val Tyr Arg His
            820                 825                 830
Glu Ile Pro Gly Gly Gln Leu Ser Asn Leu Arg Ala Gln Ala Val Ala
        835                 840                 845
Leu Gly Leu Ala Asp Arg Phe Glu Leu Ile Glu Asp Tyr Tyr Ala Ala
    850                 855                 860
Val Asn Glu Met Leu Gly Arg Pro Thr Lys Val Thr Pro Ser Ser Lys
865                 870                 875                 880
Val Val Gly Asp Leu Ala Leu His Leu Val Gly Ala Gly Val Ser Pro
                885                 890                 895
Glu Asp Phe Ala Ala Asp Pro Gln Lys Tyr Asp Ile Pro Asp Ser Val
            900                 905                 910
Ile Ala Phe Leu Arg Gly Glu Leu Gly Thr Pro Pro Gly Gly Trp Pro
        915                 920                 925
Glu Pro Leu Arg Thr Arg Ala Leu Glu Gly Arg Ser Gln Gly Lys Ala
    930                 935                 940
Pro Leu Ala Glu Ile Pro Ala Glu Glu Gln Ala His Leu Asp Ser Asp
945                 950                 955                 960
Asp Ser Ala Glu Arg Arg Gly Thr Leu Asn Arg Leu Leu Phe Pro Lys
                965                 970                 975
Pro Thr Glu Glu Phe Leu Glu His Arg Arg Arg Phe Gly Asn Thr Ser
            980                 985                 990
Ala Leu Asp Asp Arg Glu Phe Phe Tyr Gly Leu Lys Glu Gly Arg Glu
        995                1000                1005
Glu Leu Ile Arg Leu Thr Gly Val Ser Thr Pro Met Val Val Arg Leu
   1010               1015                 1020
Asp Ala Val Ser Glu Pro Asp Asp Lys Gly Met Arg Asn Val Val Val
025                1030                1035                1040
Asn Val Asn Gly Gln Ile Arg Pro Ile Lys Val Arg Asp Arg Ser Val
               1045                1050                1055
Glu Ser Val Thr Ala Thr Ala Glu Lys Ala Asp Ala Thr Asn Lys Gly
           1060                1065                1070
His Val Ala Ala Pro Phe Ala Gly Val Val Thr Val Thr Val Ala Glu
       1075                1080                1085
Gly Asp Glu Ile Lys Ala Gly Asp Ala Val Ala Ile Ile Glu Ala Met
   1090                1095                1100
Lys Met Glu Ala Thr Ile Thr Ala Pro Val Asp Gly Val Ile Asp Arg
105                1110                1115                1120
Val Va1 Val Pro Ala Ala Thr Lys Val Glu Gly Gly Asp Leu Ile Val
               1125                1130                1135
Val Val Ser
<210>25
<211>3306
<212>DNA
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<220>
<221>CDS
<222>(64)..(2820)
<400>25
gatcaaccta agccaggaga atccggcggg cggtttctac ttctacagga gctgaacccc  60
acc gtg aat gaa ctt ctc cgt gac gat atc cgt tat ctc ggc cgg atc    108
    Val Asn Glu Leu Leu Arg Asp Asp Ile Arg Tyr Leu Gly Arg Ile
      1               5                  10                  15
ctg ggc gag gtg atc tcc gag cag gag ggc cac cat gtc tte gaa ctg    156
Leu Gly Glu Val Ile Ser Glu Gln Glu Gly His His Val Phe Glu Leu
                 20                 25                   30
gtt gaa cgc gcc cgc cgg acc tcc ttc gac atc gcc aag gga cgc gcg    204
Val Glu Arg Ala Arg Arg Thr Ser Phe Asp Ile Ala Lys Gly Arg Ala
             35                  40                  45
gag atg gac agt ctg gtg gag gtg ttc gct ggc atc gac ccg gag gac    252
Glu Met Asp Ser Leu Val Glu Val Phe Ala Gly Ile Asp Pro Glu Asp
         50                  55                  60
gcc acg ccc gtg gcc cga gcc ttc acc cat ttc gcc ctg ttg gcc aac    300
Ala Thr Pro Val Ala Arg Ala Phe Thr His Phe Ala Leu Leu Ala Asn
     65                  70                  75
ctc gcg gag gat ttg cat gac gca gcc cag cgg gaa cag gcc ctg aac    348
Leu Ala Glu Asp Leu His Asp Ala Ala Gln Arg Glu Gln Ala Leu Asn
 80                  85                  90                  95
tcg ggt gag ccc gcg ccg gac agc acc ctc gag gcc acc tgg gtg aaa    396
Ser Gly Glu Pro Ala Pro Asp Ser Thr Leu Glu Ala Thr Trp Val Lys
                100                 105                 110
ctg gat gat gcc ggg gtg ggc agc ggt gag gtc gcc gcg gtg atc cgc    444
Leu Asp Asp Ala Gly Val Gly Ser Gly Glu Val Ala Ala Val Ile Arg
            115                 120                 125
aat gcg ctc gtc gcc ccg gtg ctc acc gcg cac ccg acg gaa acc cga    492
Asn Ala Leu Val Ala Pro Val Leu Thr Ala His Pro Thr Glu Thr Arg
        130                 135                 140
cgt cgt acc gtg ttc gac gcg cag aag cac atc acc gcc ctg atg gag    540
Arg Arg Thr Val Phe Asp Ala Gln Lys His Ile Thr Ala Leu Met Glu
    145                 150                 155
gaa cgc cac ctc ctc ctg gcg ctg ccc acg cat gcc cgg acc cag tcc    588
Glu Arg His Leu Leu Leu Ala Leu Pro Thr His Ala Arg Thr Gln Ser
160                 165                 170                 175
aag ctg gat gac atc gag cgc aac atc cgg cga cgg atc acg atc ctg    636
Lys Leu Asp Asp Ile Glu Arg Asn Ile Arg Arg Arg Ile Thr Ile Leu
                180                 185                 190
tgg cag acg gcc ctc atc cgt gtg gcc cgt ccc cgc atc gag gat gag    684
Trp Gln Thr Ala Leu Ile Arg Val Ala Arg Pro Arg Ile Glu Asp Glu
            195                 200                 205
gtc gag gtt gga ctg cgc tac tac aag ctc agc ctg ttg gcc gag atc    732
Val Glu Val Gly Leu Arg Tyr Tyr Lys Leu Ser Leu Leu Ala Glu Ile
        210                 215                 220
ccc cgc atc aat cat gat gtg acc gtg gaa ctg gcc cgg cgt ttc ggc    780
Pro Arg Ile Asn His Asp Val Thr Val Glu Leu Ala Arg Arg Phe Gly
   225                  230                 235
ggg gat atc ccc acc acg gcg atg gtc agg ccg gga tcc tgg atc ggc    828
Gly Asp Ile Pro Thr Thr Ala Met Val Arg Pro Gly Ser Trp Ile Gly
240                 245                 250                 255
ggg gac cat gat ggc aac ccc ttc gtc acc gcg gag act gtc acc tac    876
Gly Asp His Asp Gly Asn Pro Phe Val Thr Ala Glu Thr Val Thr Tyr
                260                 265                 270
gcc acc cat cgg gcc gcg gag acc gtg ctc aag tac tac gtc aag caa    924
Ala Thr His Arg Ala Ala Glu Thr Val Leu Lys Tyr Tyr Val Lys Gln
            275                 280                 285
ctg cac gcc ctg gaa cac gaa ctc agt ctc tcc  gac cgg atg aac gtc   972
Leu His Ala Leu Glu His Glu Leu Ser Leu Ser Asp Arg Met Asn Val
        290                 295                 300
atc agc gat gag ctg cgt gtg ctt gcc gat gcc ggc cag aat gac atg    1020
Ile Ser Asp Glu Leu Arg Val Leu Ala Asp Ala Gly Gln Asn Asp Met
    305                 310                 315
ccc agc cgg gtt gat gaa ccc tac cgg cgg gcc atc cac ggc atg cgt    1068
Pro Ser Arg Val Asp Glu Pro Tyr Arg Arg Ala Ile His Gly Met Arg
320                 325                 330                 335
ggc cgg atg ctg gcc acc acg gcc gcc ctg atc ggt gag gag gcg gtc    1116
Gly Arg Met Leu Ala Thr Thr Ala Ala Leu Ile Gly Glu Glu Ala Val
                340                 345                 350
gag ggc acc tgg ttc aag acc ttc acg ccc tat acc gat acc cac gag    1164
Glu Gly Thr Trp Phe Lys Thr Phe Thr Pro Tyr Thr Asp Thr His Glu
            355                 360                 365
ttc aaa cgc gac ctc gat atc gtg gat ggt tcc ctg aga atg tcc cgg    1212
Phe Lys Arg Asp Leu Asp Ile Val Asp Gly Ser Leu Arg Met Ser Arg
        370                 375                 380
gat gac atc atc gcc gat gac cgt ctg gcc atg ctg cgc tcg gcc ctg    1260
Asp Asp Ile Ile Ala Asp Asp Arg Leu Ala Met Leu Arg Ser Ala Leu
    385                 390                 395
gac agc ttc ggg ttc aac ctc tac tcc ctg gat ctg cgc cag aat tcc    1308
Asp Ser Phe Gly Phe Asn Leu Tyr Ser Leu Asp Leu Arg Gln Asn Ser
400                 405                 410                 415
gac ggt ttc gag gat gtc ctc acc gaa ttg ttc gcc acc gcc cag acc    1356
Asp Gly Phe Glu Asp Val Leu Thr Glu Leu Phe Ala Thr Ala Gln Thr
                420                 425                 430
gag aag aac tac cgc ggg ttg acg gag gcg gag aag ctg gac ctg ctg    1404
Glu Lys Asn Tyr Arg Gly Leu Thr Glu Ala Glu Lys Leu Asp Leu Leu
            435                 440                 445
atc cgc gaa ctg agc aca ccc cgc ccg ctc atc ccg cac ggg gac ccg    1452
Ile Arg Glu Leu Ser Thr Pro Arg Pro Leu Ile Pro His Gly Asp Pro
        450                 455                 460
gac tac tcc gag gcc acc aac cgt gaa ctg ggg att ttt tcg aag gcc    1500
Asp Tyr Ser Glu Ala Thr Asn Arg Glu Leu Gly Ile Phe Ser Lys Ala
    465                 470                 475
gcg gag gcc gtg cgt aaa ttc ggt cct ctc atg gtg ccg cac tgc atc    1548
Ala Glu Ala Val Arg Lys Phe Gly Pro Leu Met Val Pro His Cys Ile
480                 485                 490                 495
atc tcc atg gcc tct tcc gtc acg gac atc ctc gaa ccg atg gtg ctg    1596
Ile Ser Met Ala Ser Ser Val Thr Asp Ile Leu Glu Pro Met Val Leu
                500                 505                 510
ctc aag gag ttc ggt ctg atc cgg gcc aac ggg aag aac ccg acg ggc    1644
Leu Lys Glu Phe Gly Leu Ile Arg Ala Asn Gly Lys Asn Pro Thr Gly
            515                 520                 525
agc gtc gac gtg atc ccg ctg ttc gag acg atc gat gac ctc cag cgt    1692
Ser Val Asp Val Ile Pro Leu Phe Glu Thr Ile Asp Asp Leu Gln Arg
        530                 535                 540
ggc gcg ggc atc ctg gag gaa ttg tgg gac atc gac ctc tac cgc aat    1740
Gly Ala Gly Ile Leu Glu Glu Leu Trp Asp Ile Asp Leu Tyr Arg Asn
    545                 550                 555
tac ctt gag cag cgg gac aac gtc cag gag gtc atg ctg ggg tat tcc    1788
Tyr Leu Glu Gln Arg Asp Asn Val Gln Glu Val Met Leu Gly Tyr Ser
560                 565                 570                 575
gac tcc aac aag gac ggc ggg tac ttc gcc gcc aac tgg gcg ctt tac    1836
Asp Ser Asn Lys Asp Gly Gly Tyr Phe Ala Ala Asn Trp Ala Leu Tyr
                580                 585                 590
gac gcg gag tta cgc ctg gtc gaa cta tgc cgg ggc cgt aat gtc aag    1884
Asp Ala Glu Leu Arg Leu Val Glu Leu Cys Arg Gly Arg Asn Val Lys
            595                 600                 605
ctc cgt ctc ttc cac ggt cgt ggt ggc acg gtg ggt cgt ggc ggt ggc    1932
Leu Arg Leu Phe His Gly Arg Gly Gly Thr Val Gly Arg Gly Gly Gly
        610                 615                 620
ccc tcc tat gat gcg atc ctg gcc cag ccc aag ggc gcg gtc cgg ggt    1980
Pro Ser Tyr Asp Ala Ile Leu Ala Gln Pro Lys Gly Ala Val Arg Gly
    625                 630                 635
gcg gtg cgg gtg act gaa cag ggc gag atc atc tcc gcg aag tac ggt    2028
Ala Val Arg Val Thr Glu Gln Gly Glu Ile Ile Ser Ala Lys Tyr Gly
640                 645                 650                 655
aac ccg gat acg gca cgc cgc aac ctt gag gcc ctg gtg tcc gcg acg    2076
Asn Pro Asp Thr Ala Arg Arg Asn Leu Glu Ala Leu Val Ser Ala Thr
                660                 665                 670
ctg gag gca tcg ctt ctg gat gat gtg gaa ctg ccc aat cgg gaa cgc    2124
Leu Glu Ala Ser Leu Leu Asp Asp Val Glu Leu Pro Asn Arg Glu Arg
            675                 680                 685
gcg cac cag atc atg ggg gag atc tcg gag ttg agc ttc cgc agg tac    2172
Ala His Gln Ile Met Gly Glu Ile Ser Glu Leu Ser Phe Arg Arg Tyr
        690                 695                 700
tca tca ctg gtc cat gag gat ccc gga ttc atc cag tac ttc acc cag    2220
Ser Ser Leu Val His Glu Asp Pro Gly Phe Ile Gln Tyr Phe Thr Gln
    705                 710                 715
tcc acc ccc ctg cag gag atc gga tcc ctc aac atc ggt tcc cga ccc    2268
Ser Thr Pro Leu Gln Glu Ile Gly Ser Leu Asn Ile Gly Ser Arg Pro
 720                725                 730                 735
tcc tca cgt aaa cag acc aac acg gtg gag gat ctg cgt gcc atc ccg    2316
Ser Ser Arg Lys Gln Thr Asn Thr Val Glu Asp Leu Arg Ala Ile Pro
                740                 745                 750
tgg gtg ctc agc tgg tcc cag tcc cgt gtc atg ctg ccg ggc tgg ttc    2364
Trp Val Leu Ser Trp Ser Gln Ser Arg Val Met Leu Pro Gly Trp Phe
            755                 760                 765
ggt gtg ggt acc gca ctg cgt gag tgg atc ggt gag ggg gag ggg gct    2412
Gly Val Gly Thr Ala Leu Arg Glu Trp Ile Gly Glu Gly Glu Gly Ala
        770                 775                 780
gcg gag cgc atc gcg gag ctg cag gaa ctc aac cgg tgc tgg ccg ttc    2460
Ala Glu Arg Ile Ala Glu Leu Gln Glu Leu Asn Arg Cys Trp Pro Phe
    785                 790                 795
ttc acc tcg gtg ctg gac aac atg gcc cag gtg atg agc aag gcg gaa    2508
Phe Thr Ser Val Leu Asp Asn Met Ala Gln Val Met Ser Lys Ala Glu
800                 805                 810                 815
ctg cgc ctg gcc agg ttg tac gcc gat ctc atc ccg gat cgc gag gtg    2556
Leu Arg Leu Ala Arg Leu Tyr Ala Asp Leu Ile Pro Asp Arg Glu Val
                820                 825                 830
gcg gac cgg atc tat gag acc atc ttc ggg gag tat ttc ctg acc aag    2604
Ala Asp Arg Ile Tyr Glu Thr Ile Phe Gly Glu Tyr Phe Leu Thr Lys
            835                 840                 845
gag atg ttc tgc acc atc acc ggt tcc cag gac ctg ctc gat gac aac    2652
Glu Met Phe Cys Thr Ile Thr Gly Ser Gln Asp Leu Leu Asp Asp Asn
        850                 855                 860
ccg gcg ctg gcg cga tcg gtg cgc agt cgg ttc ccg tac ctg ctg ccg    2700
Pro Ala Leu Ala Arg Ser Val Arg Ser Arg Phe Pro Tyr Leu Leu Pro
    865                 870                 875
ctc aat gtc atc cag gtg gag atg atg cgc cgg tac cgg tcc ggt gat    2748
Leu Asn Val Ile Gln Val Glu Met Met Arg Arg Tyr Arg Ser Gly Asp
880                 885                 890                 895
gag ggc acg gct gtc cca cgt aat atc cgc ctg acc atg aat gga ttg    2796
Glu Gly Thr Ala Val Pro Arg Asn Ile Arg Leu Thr Met Asn Gly Leu
                900                 905                 910
tcc acg gcc ctg cgc aac tcg ggt tagggcgcca gacgccccgg gaacccgcac   2850
Ser Thr Ala Leu Arg Asn Ser Gly
            915
cctgtgtata ctgtctaaag ttgcccggtg tcatccgggc gtgatggata gacaacttaa  2910
cggcaaagga ttctccccac atggcactga cgcttcaaat cgtcctcgtt ctcgccagcg  2970
tgctcatgac ggtcttcgtc ctgctgcaca agggtaaggg cggaggtctg tcaagcctct  3030
tcggtggtgg cgtccagtcc aacctctccg gttccacggt ggtggagaag aacctggacc  3090
gcgtcaccat cctgaccgca gtcatctggt tgatctgcat tgtcgcgctc aacctcatcc  3150
aggcgtactc ctagcacctg atctttcaag gcctgccctt cggggcaggc cttttttgca  3210
ttctccaggt gatgtccatc acccaccggt tttaaactat tgaccgatag aaacacctgc  3270
actaggt tat ctgttatgca atagaaaata gtgcat                           3306
<210>26
<211>919
<212>PRT
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<400>26
Val Asn Glu Leu Leu Arg Asp Asp Ile Arg Tyr Leu Gly Arg Ile Leu
  1               5                  10                  15
Gly Glu Val Ile Ser Glu Gln Glu Gly His His Val Phe Glu Leu Val
             20                  25                  30
Glu Arg Ala Arg Arg Thr Ser Phe Asp Ile Ala Lys Gly Arg Ala Glu
         35                  40                  45
Met Asp Ser Leu Val Glu Val Phe Ala Gly Ile Asp Pro Glu Asp Ala
     50                  55                  60
Thr Pro Val Ala Arg Ala Phe Thr His Phe Ala Leu Leu Ala Asn Leu
 65                  70                  75                  80
Ala Glu Asp Leu His Asp Ala Ala Gln Arg Glu Gln Ala Leu Asn Ser
                 85                  90                  95
Gly Glu Pro Ala Pro Asp Ser Thr Leu Glu Ala Thr Trp Val Lys Leu
            100                 105                 110
Asp Asp Ala Gly Val Gly Ser Gly Glu Val Ala Ala Val Ile Arg Asn
        115                 120                 125
Ala Leu Val Ala Pro Val Leu Thr Ala His Pro Thr Glu Thr Arg Arg
    130                 135                 140
Arg Thr Val Phe Asp Ala Gln Lys His Ile Thr Ala Leu Met Glu Glu
145                 150                 155                 160
Arg His Leu Leu Leu Ala Leu Pro Thr His Ala Arg Thr Gln Ser Lys
                165                 170                 175
Leu Asp Asp Ile Glu Arg Asn Ile Arg Arg Arg Ile Thr Ile Leu Trp
            180                 185                 190
Gln Thr Ala Leu Ile Arg Val Ala Arg Pro Arg Ile Glu Asp Glu Val
        195                 200                 205
Glu Val Gly Leu Arg Tyr Tyr Lys Leu Ser Leu Leu Ala Glu Ile Pro
    210                 215                 220
Arg Ile Asn His Asp Val Thr Val Glu Leu Ala Arg Arg Phe Gly Gly
225                 230                 235                 240
Asp Ile Pro Thr Thr Ala Met Val Arg Pro Gly Ser Trp Ile Gly Gly
                245                 250                 255
Asp His Asp Gly Asn Pro Phe Val Thr Ala Glu Thr Val Thr Tyr Ala
            260                 265                 270
Thr His Arg Ala Ala Glu Thr Val Leu Lys Tyr Tyr Val Lys Gln Leu
        275                 280                 285
His Ala Leu Glu His Glu Leu Ser Leu Ser Asp Arg Met Asn Val Ile
    290                 295                 300
Ser Asp Glu Leu Arg Val Leu Ala Asp Ala Gly Gln Asn Asp Met Pro
305                 310                 315                 320
Ser Arg Val Asp Glu Pro Tyr Arg Arg Ala Ile His Gly Met Arg Gly
                325                 330                 335
Arg Met Leu Ala Thr Thr Ala Ala Leu Ile Gly Glu Glu Ala Val Glu
            340                 345                 350
Gly Thr Trp Phe Lys Thr Phe Thr Pro Tyr Thr Asp Thr His Glu Phe
        355                 360                 365
Lys Arg Asp Leu Asp Ile Val Asp Gly Ser Leu Arg Met Ser Arg Asp
    370                 375                 380
Asp Ile Ile Ala Asp Asp Arg Leu Ala Met Leu Arg Ser Ala Leu Asp
385                 390                 395                 400
Ser Phe Gly Phe Asn Leu Tyr Ser Leu Asp Leu Arg Gln Asn Ser Asp
                405                 410                 415
Gly Phe Glu Asp Val Leu Thr Glu Leu Phe Ala Thr Ala Gln Thr Glu
            420                 425                 430
Lys Asn Tyr Arg Gly Leu Thr Glu Ala Glu Lys Leu Asp Leu Leu Ile
        435                 440                 445
Arg Glu Leu Ser Thr Pro Arg Pro Leu Ile Pro His Gly Asp Pro Asp
    450                 455                 460
Tyr Ser Glu Ala Thr Asn Arg Glu Leu Gly Ile Phe Ser Lys Ala Ala
465                 470                 475                 480
Glu Ala Val Arg Lys Phe Gly Pro Leu Met Val Pro His Cys Ile Ile
                485                 490                 495
Ser Met Ala Ser Ser Val Thr Asp Ile Leu Glu Pro Met Val Leu Leu
           500                  505                 510
Lys Glu Phe Gly Leu Ile Arg Ala Asn Gly Lys Asn Pro Thr Gly Ser
        515                 520                 525
Val Asp Val Ile Pro Leu Phe Glu Thr Ile Asp Asp Leu Gln Arg Gly
    530                 535                 540
Ala Gly Ile Leu Glu Glu Leu Trp Asp Ile Asp Leu Tyr Arg Asn Tyr
545                 550                 555                 560
Leu Glu Gln Arg Asp Asn Val Gln Glu Val Met Leu Gly Tyr Ser Asp
                565                 570                 575
Ser Asn Lys Asp Gly Gly Tyr Phe Ala Ala Asn Trp Ala Leu Tyr Asp
            580                 585                 590
Ala Glu Leu Arg Leu Val Glu Leu Cys Arg Gly Arg Asn Val Lys Leu
        595                 600                 605
Arg Leu Phe His Gly Arg Gly Gly Thr Val Gly Arg Gly Gly Gly Pro
    610                 615                 620
Ser Tyr Asp Ala Ile Leu Ala Gln Pro Lys Gly Ala Val Arg Gly Ala
625                 630                 635                 640
Val Arg Val Thr Glu Gln Gly Glu Ile Ile Ser Ala Lys Tyr Gly Asn
                645                 650                 655
Pro Asp Thr Ala Arg Arg Asn Leu Glu Ala Leu Val Ser Ala Thr Leu
            660                 665                 670
Glu Ala Ser Leu Leu Asp Asp Val Glu Leu Pro Asn Arg Glu Arg Ala
        675                 680                 685
His Gln Ile Met Gly Glu Ile Ser Glu Leu Ser Phe Arg Arg Tyr Ser
    690                 695                 700
Ser Leu Val His Glu Asp Pro Gly Phe Ile Gln Tyr Phe Thr Gln Ser
705                 710                 715                 720
Thr Pro Leu Gln Glu Ile Gly Ser Leu Asn Ile Gly Ser Arg Pro Ser
                725                 730                 735
Ser Arg Lys Gln Thr Asn Thr Val Glu Asp Leu Arg Ala Ile Pro Trp
            740                 745                 750
Val Leu Ser Trp Ser Gln Ser Arg Val Met Leu Pro Gly Trp Phe Gly
        755                 760                 765
Val Gly Thr Ala Leu Arg Glu Trp Ile Gly Glu Gly Glu Gly Ala Ala
    770                 775                 780
Glu Arg Ile Ala Glu Leu Gln Glu Leu Asn Arg Cys Trp Pro Phe Phe
785                 790                 795                 800
Thr Ser Val Leu Asp Asn Met Ala Gln Val Met Ser Lys Ala Glu Leu
                805                 810                 815
Arg Leu Ala Arg Leu Tyr Ala Asp Leu Ile Pro Asp Arg Glu Val Ala
            820                 825                 830
Asp Arg Ile Tyr Glu Thr Ile Phe Gly Glu Tyr Phe Leu Thr Lys Glu
        835                 840                 845
Met Phe Cys Thr Ile Thr Gly Ser Gln Asp Leu Leu Asp Asp Asn Pro
    850                 855                 860
Ala Leu Ala Arg Ser Val Arg Ser Arg Phe Pro Tyr Leu Leu Pro Leu
865                 870                 875                 880
Asn Val Ile Gln Val Glu Met Met Arg Arg Tyr Arg Ser Gly Asp Glu
                885                 890                 895
Gly Thr Ala Val Pro Arg Asn Ile Arg Leu Thr Met Asn Gly Leu Ser
            900                 905                 910
Thr Ala Leu Arg Asn Ser Gly
        915
<210>27
<211>3907
<212>DNA
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<220>
<221>CDS
<222>(686)..(3388)
<400>27
attacttcag ctgactcagc aacattcgta ttaggtatgc aaacaacatt tggttcgtta  60
aatccaagta gtatggttaa agtaacttgg ggtattgctc aagcacttat cgcctttgta  120
ttattattag ctggtggcgg agatggaact aaagctctca acgcaattca gagtgccgct  180
attattagtg cgtttccatt ctcctttgtc gtcatattaa tgatgatcag tttctacaaa  240
gatgctaata aagaacgtaa attcttagga ttaacattaa cgcctaataa acacagatta  300
gaagaatacg ttaaatatca acaagaggat tacgaatctg atattttaga aaaacgtgaa  360
tctagacgta atcgtgaaag agaagaataa ttgaatgaaa tatctactat aatggtgggt  420
ttaaagctat caacaatttt gttgatagct atttttatgt ttcaaacata taaatattat  480
ttacttgcga ttgataacca ttctcaatta ataaaaataa cttatagtac aaatgcgtta  540
taataagttt tacttatact acctgattaa aaatgcgaaa tgaaaaatga cccctttata  600
tacctataca gttgtgttcg aaaacatata ataatacaat ttaactaagg catataaata  660
tatagaaatt caagggggat atcaa atg gct tct aat ttt aaa gaa aca gcg    712
                            Met Ala Ser Asn Phe Lys Glu Thr Ala
                              1               5
aag aaa caa ttt gat tta aat ggc caa tca tac acg tac tat gat tta    760
Lys Lys Gln Phe Asp Leu Asn Gly Gln Ser Tyr Thr Tyr Tyr Asp Leu
 10                  15                  20                  25
aaa tca tta gaa gaa caa ggt tta act aaa att tca aag tta cct tat    808
Lys Ser Leu Glu Glu Gln Gly Leu Thr Lys Ile Ser Lys Leu Pro Tyr
                 30                  35                  40
tca atc cgt gta tta cta gaa tca gtg tta cgt cag gaa gat gat ttt    856
Ser Ile Arg Val Leu Leu Glu Ser Val Leu Arg Gln Glu Asp Asp Phe
             45                  50                  55
gta att act gat gat cac att aaa caa tta gca gaa ttt ggc aaa aaa    904
Val Ile Thr Asp Asp His Ile Lys Gln Leu Ala Glu Phe Gly Lys Lys
         60                  65                  70
ggt aac gaa ggt gaa gta cct ttc aaa cca tct cga gtt att tta caa    952
Gly Asn Glu Gly Glu Val Pro Phe Lys Pro Ser Arg Val Ile Leu Gln
     75                  80                  85
gac ttc act ggt gta cca gca gta gtt gac tta gcg tct tta cgt aaa    1000
Asp Phe Thr Gly Val Pro Ala Val Val Asp Leu Ala Ser Leu Arg Lys
 90                  95                 100                 105
gca atg aat gat gtt ggt ggg gat att aat aaa att aac cct gaa gta    1048
Ala Met Asn Asp Val Gly Gly Asp Ile Asn Lys Ile Asn Pro Glu Val
                110                 115                 120
cca gtt gac tta gtt att gac cac tct gta caa gta gat agt tat gct    1096
Pro Val Asp Leu Val Ile Asp His Ser Val Gln Val Asp Ser Tyr Ala
            125                 130                 135
aat cca gat gca tta caa cgt aac atg aaa tta gaa ttt gaa cgt aac    1144
Asn Pro Asp Ala Leu Gln Arg Asn Met Lys Leu Glu Phe Glu Arg Asn
        140                 145                 150
tat gaa cgt tac caa ttc tta aac tgg gca aca aaa gca ttt gat aac    1192
Tyr Glu Arg Tyr Gln Phe Leu Asn Trp Ala Thr Lys Ala Phe Asp Asn
    155                 160                 165
tat aat gca gta cca cct gct aca ggt att gtc cac caa gta aac tta    1240
Tyr Asn Ala Val Pro Pro Ala Thr Gly Ile Val His Gln Val Asn Leu
170                 175                 180                 185
gaa tac tta gcg aat gtt gta cat gtt cgt gac gtt gac gga gaa caa    1288
Glu Tyr Leu Ala Asn Val Val His Val Arg Asp Val Asp Gly Glu Gln
                190                 195                 200
act gct ttc cca gat aca tta gtt ggt act gac tca cat act aca atg    1336
Thr Ala Phe Pro Asp Thr Leu Val Gly Thr Asp Ser His Thr Thr Met
            205                 210                 215
att aac ggt att ggt gta tta ggt tgg ggt gtc ggc ggt atc gaa gct    1384
Ile Asn Gly Ile Gly Val Leu Gly Trp Gly Val Gly Gly Ile Glu Ala
        220                 225                 230
gaa gca ggt atg tta gga caa cca tca tac ttc cca att cca gaa gtt    1432
Glu Ala Gly Met Leu Gly Gln Pro Ser Tyr Phe Pro Ile Pro Glu Val
    235                 240                 245
att ggt gtt aaa tta agt aat gaa tta cca caa ggt tca aca gca act    1480
Ile Gly Val Lys Leu Ser Asn Glu Leu Pro Gln Gly Ser Thr Ala Thr
250                 255                 260                 265
gac tta gca tta cgt gta act gaa gag tta cgt aaa cgt ggt gta gta    1528
Asp Leu Ala Leu Arg Val Thr Glu Glu Leu Arg Lys Arg Gly Val Val
                270                 275                 280
ggt aaa ttc gtt gag ttc ttt ggt cct ggt gta aca aac tta cca tta    1576
Gly Lys Phe Val Glu Phe Phe Gly Pro Gly Val Thr Asn Leu Pro Leu
            285                 290                 295
gct gac cgt gca aca att gcg aac atg gcg cct gaa tat ggt gca act    1624
Ala Asp Arg Ala Thr Ile Ala Asn Met Ala Pro Glu Tyr Gly Ala Thr
        300                 305                 310
tgt ggt ttc ttc cca gtt gat gaa gaa tca ctt aaa tac atg aaa tta    1672
Cys Gly Phe Phe Pro Val Asp Glu Glu Ser Leu Lys Tyr Met Lys Leu
    3l5                 320                 325
act ggt cgt aaa gat gat cat att gca cta gta aaa gaa tat tta caa    1720
Thr Gly Arg Lys Asp Asp His Ile Ala Leu Val Lys Glu Tyr Leu Gln
330                 335                 340                 345
caa aat aat atg ttc ttc caa gtt gaa aat gaa gat cct gaa tat act    1768
Gln Asn Asn Met Phe Phe Gln Val Glu Asn Glu Asp Pro Glu Tyr Thr
                350                 355                 360
gaa gtg att gat tta gat tta tct aca gtt caa gct tct tta tca ggt    1816
Glu Val Ile Asp Leu Asp Leu Ser Thr Val Gln Ala Ser Leu Ser Gly
            365                 370                 375
cca aaa cgt cca caa gat tta atc ttc tta agt gac atg aaa act gaa    1864
Pro Lys Arg Pro Gln Asp Leu Ile Phe Leu Ser Asp Met Lys Thr Glu
        380                 385                 390
ttc gaa aaa tca gtt aca gca cca gct ggt aac caa ggt cac ggt tta    1912
Phe Glu Lys Ser Val Thr Ala Pro Ala Gly Asn Gln Gly His Gly Leu
    395                 400                 405
gat gaa agt gaa ttt gat aag aaa gca gaa atc aaa ttt aat gat ggt    1960
Asp Glu Ser Glu Phe Asp Lys Lys Ala Glu Ile Lys Phe Asn Asp Gly
410                 415                 420                 425
aga act tca act atg aag act ggt gat gtt gcg att gca gcg att aca    2008
Arg Thr Ser Thr Met Lys Thr Gly Asp Val Ala Ile Ala Ala Ile Thr
                430                 435                 440
tca tgt aca aat aca tct aac cct tac gtt atg tta ggt gca ggt tta    2056
Ser Cys Thr Asn Thr Ser Asn Pro Tyr Val Met Leu Gly Ala Gly Leu
            445                 450                 455
gta gct aaa aaa gca att gaa aaa ggc tta aaa gta cct gat tat gta    2104
Val Ala Lys Lys Ala Ile Glu Lys Gly Leu Lys Val Pro Asp Tyr Val
        460                 465                 470
aaa act tca tta gca cca ggt tca aaa gtt gtt act gga tat tta aga    2152
Lys Thr Ser Leu Ala Pro Gly Ser Lys Val Val Thr Gly Tyr Leu Arg
    475                 480                 485
gat tca ggt tta caa gaa tat ctt gat gac tta ggt ttc aac tta gtt    2200
Asp Ser Gly Leu Gln Glu Tyr Leu Asp Asp Leu Gly Phe Asn Leu Val
490                 495                 500                 505
ggt tat ggt tgt aca act tgt atc ggt aac tca ggt cca tta tta cct    2248
Gly Tyr Gly Cys Thr Thr Cys Ile Gly Asn Ser Gly Pro Leu Leu Pro
                510                 515                 520
gaa att gaa aaa gca gta gct gac gaa gat tta tta gta act tct gta    2296
Glu Ile Glu Lys Ala Val Ala Asp Glu Asp Leu Leu Val Thr Ser Val
            525                 530                 535
ctt tct ggt aac cgt aac ttt gaa ggt cgt atc cat ccg tta gtt aaa    2344
Leu Ser Gly Asn Arg Asn Phe Glu Gly Arg Ile His Pro Leu Val Lys
        540                 545                 550
gct aac tac tta gct tca cca caa tta gtt gta gct tat gca tta gct    2392
Ala Asn Tyr Leu Ala Ser Pro Gln Leu Val Val Ala Tyr Ala Leu Ala
    555                 560                 565
gga acg gtt gat atc gat tta cac aat gaa cct atc ggt aaa ggt aaa    2440
Gly Thr Val Asp Ile Asp Leu His Asn Glu Pro Ile Gly Lys Gly Lys
570                 575                 580                 585
gat ggc gaa gat gta tac ctt aaa gat atc tgg cca agt atc aaa gaa    2488
Asp Gly Glu Asp Val Tyr Leu Lys Asp Ile Trp Pro Ser Ile Lys Glu
                590                 595                 600
gtt gca gac act gtt gat agt gtc gta acg cca gaa tta ttc tta gaa    2536
Val Ala Asp Thr Val Asp Ser Val Val Thr Pro Glu Leu Phe Leu Glu
             605                610                 615
gaa tat gca aat gta tac gaa aat aat gaa atg tgg aat gaa atc gac    2584
Glu Tyr Ala Asn Val Tyr Glu Asn Asn Glu Met Trp Asn Glu Ile Asp
        620                 625                 630
gtt act gac gca cca tta tat gat ttc gat cca aat tca act tat att    2632
Val Thr Asp Ala Pro Leu Tyr Asp Phe Asp Pro Asn Ser Thr Tyr Ile
    635                 640                 645
caa aat cca tca ttc ttc caa ggt tta tct aaa gaa cca gga act att    2680
Gln Asn Pro Ser Phe Phe Gln Gly Leu Ser Lys Glu Pro Gly Thr Ile
650                 655                 660                 665
gaa cca tta aaa gat tta cgt att atg ggt aaa ttt ggt gat tca gtt    2728
Glu Pro Leu Lys Asp Leu Arg Ile Met Gly Lys Phe Gly Asp Ser Val
                670                 675                 680
aca act gac cac att tct cca gca ggt gcg atc ggt aaa gat aca cca    2776
Thr Thr Asp His Ile Ser Pro Ala Gly Ala Ile Gly Lys Asp Thr Pro
            685                 690                 695
gca ggt aaa tat tta tta gac cat gat gtt cca att aga gaa ttt aac    2824
Ala Gly Lys Tyr Leu Leu Asp His Asp Val Pro Ile Arg Glu Phe Asn
        700                 705                 710
tct tat ggt tca aga cgt ggt aac cat gaa gta atg gta cgt ggt act    2872
Ser Tyr Gly Ser Arg Arg Gly Asn His Glu Val Met Val Arg Gly Thr
    715                 720                 725
ttc gct aat atc cgt att aaa aac caa tta gca cca ggc act gaa ggt    2920
Phe Ala Asn Ile Arg Ile Lys Asn Gln Leu Ala Pro Gly Thr Glu Gly
730                 735                 740                 745
gga ttt aca aca tat tgg cct aca gaa gaa atc atg cct atc tat gat    2968
Gly Phe Thr Thr Tyr Trp Pro Thr Glu Glu Ile Met Pro Ile Tyr Asp
                750                 755                 760
gca gct atg aga tac aaa gaa aat ggt act ggt tta gct gtt tta gct    3016
Ala Ala Met Arg Tyr Lys Glu Asn Gly Thr Gly Leu Ala Val Leu Ala
            765                 770                 775
ggt aat gat tac ggt atg ggt tca tct cgt gac tgg gca gct aaa ggt    3064
Gly Asn Asp Tyr Gly Met Gly Ser Ser Arg Asp Trp Ala Ala Lys Gly
        780                 785                 790
act aac tta tta ggt gtt aaa act gtt att gca caa agt tat gaa cgt    3112
Thr Asn Leu Leu Gly Val Lys Thr Val Ile Ala Gln Ser Tyr Glu Arg
    795                 800                 805
atc cat cgt tca aac tta gta atg atg ggt gta tta cca tta caa ttt    3160
Ile His Arg Ser Asn Leu Val Met Met Gly Val Leu Pro Leu Gln Phe
810                 815                 820                 825
aaa caa ggt gag tca gct gat tct cta ggt tta gaa ggt aaa gaa gaa    3208
Lys Gln Gly Glu Ser Ala Asp Ser Leu Gly Leu Glu Gly Lys Glu Glu
                830                 835                 840
att tct gta gat atc gat gaa aat gtt aaa cca cat gat tta gta act    3256
Ile Ser Val Asp Ile Asp Glu Asn Val Lys Pro His Asp Leu Val Thr
            845                 850                 855
gtt cat gct aaa aaa gaa aac gga gaa gtt gtt gat ttt gaa gca atg    3304
Val His Ala Lys Lys Glu Asn Gly Glu Val Val Asp Phe Glu Ala Met
        860                 865                 870
gtt cgt ttc gat tca tta gta gaa tta gat tat tat cgt cat ggt ggt    3352
Val Arg Phe Asp Ser Leu Val Glu Leu Asp Tyr Tyr Arg His Gly Gly
    875                 880                 885
atc tta caa atg gta tta aga aac aaa tta gct caa taatcacaat         3398
Ile Leu Gln Met Val Leu Arg Asn Lys Leu Ala Gln
890                 895                 900
gtgacttttg acagtgctaa cgtttaggtt agcactgttt ttttatgcta aactatatat  3458
gtaatgttaa tagttaagga aggattggac ttaaatgatt tatagtttga ctgaaattga  3518
accaagatat caagagacag ataaaatggg cgtgatttat catggcaatt atgcaacatg  3578
gtttgaagta gcgcgtacag attacattag aaaactagga tttagttatg ctgatatgga  3638
aaagcaaggg atcatttctc cagttacaga cttaaatatc aaatataaaa aatcaatttt  3698
ttatcctgaa aaagtaacca ttaaaacatg ggtggaaaaa tattcaagat tacgttctgt  3758
gtatagatat gaaattttta atgaacaggg agaacttgca actacaggtt atactgagtt  3818
aatttgtatg aaagctgata cctttagacc aattagatta gatcgttatt tctcagattg  3878
gcatgaaacc tatagtaaag ttgaagctt                                    3907
<210>28
<211>901
<212>PRT
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<400>28
Met Ala Ser Asn Phe Lys Glu Thr Ala Lys Lys Gln Phe Asp Leu Asn
  1               5                  10                  15
Gly Gln Ser Tyr Thr Tyr Tyr Asp Leu Lys Ser Leu Glu Glu Gln Gly
             20                  25                  30
Leu Thr Lys Ile Ser Lys Leu Pro Tyr Ser Ile Arg Val Leu Leu Glu
         35                  40                  45
Ser Val Leu Arg Gln Glu Asp Asp Phe Val Ile Thr Asp Asp His Ile
     50                  55                  60
Lys Gln Leu Ala Glu Phe Gly Lys Lys Gly Asn Glu Gly Glu Val Pro
 65                  70                  75                  80
Phe Lys Pro Ser Arg Val Ile Leu Gln Asp Phe Thr Gly Val Pro Ala
                 85                  90                  95
Val Val Asp Leu Ala Ser Leu Arg Lys Ala Met Asn Asp Val Gly Gly
            100                 105                 110
Asp Ile Asn Lys Ile Asn Pro Glu Val Pro Val Asp Leu Val Ile Asp
        115                 120                 125
His Ser Val Gln Val Asp Ser Tyr Ala Asn Pro Asp Ala Leu Gln Arg
    130                 135                 140
Asn Met Lys Leu Glu Phe Glu Arg Asn Tyr Glu Arg Tyr Gln Phe Leu
145                 150                 155                 160
Asn Trp Ala Thr Lys Ala Phe Asp Asn Tyr Asn Ala Val Pro Pro Ala
                165                 170                 175
Thr Gly Ile Val His Gln Val Asn Leu Glu Tyr Leu Ala Asn Val Va1
            180                 185                 190
His Val Arg Asp Val Asp Gly Glu Gln Thr Ala Phe Pro Asp Thr Leu
        195                 200                 205
Val Gly Thr Asp Ser His Thr Thr Met Ile Asn Gly Ile Gly Val Leu
    210                 215                 220
Gly Trp Gly Val Gly Gly Ile Glu Ala Glu Ala Gly Met Leu Gly Gln
225                 230                 235                 240
Pro Ser Tyr Phe Pro Ile Pro Glu Val Ile Gly Val Lys Leu Ser Asn
                245                 250                 255
Glu Leu Pro Gln Gly Ser Thr Ala Thr Asp Leu Ala Leu Arg Val Thr
            260                 265                 270
Glu Glu Leu Arg Lys Arg Gly Val Val Gly Lys Phe Val Glu Phe Phe
        275                 280                 285
Gly Pro Gly Val Thr Asn Leu Pro Leu Ala Asp Arg Ala Thr Ile Ala
    290                 295                 300
Asn Met Ala Pro Glu Tyr Gly Ala Thr Cys Gly Phe Phe Pro Val Asp
305                 310                 315                 320
Glu Glu Ser Leu Lys Tyr Met Lys Leu Thr Gly Arg Lys Asp Asp His
                325                 330                 335
Ile Ala Leu Val Lys Glu Tyr Leu Gln Gln Asn Asn Met Phe Phe Gln
            340                 345                 350
Val Glu Asn Glu Asp Pro Glu Tyr Thr Glu Val Ile Asp Leu Asp Leu
        355                 360                 365
Ser Thr Val Gln Ala Ser Leu Ser Gly Pro Lys Arg Pro Gln Asp Leu
    370                 375                 380
Ile Phe Leu Ser Asp Met Lys Thr Glu Phe Glu Lys Ser Val Thr Ala
385                 390                 395                 400
Pro Ala Gly Asn Gln Gly His Gly Leu Asp Glu Ser Glu Phe Asp Lys
                405                 410                 415
Lys Ala Glu Ile Lys Phe Asn Asp Gly Arg Thr Ser Thr Met Lys Thr
            420                 425                 430
Gly Asp Val Ala Ile Ala Ala Ile Thr Ser Cys Thr Asn Thr Ser Asn
        435                 440                 445
Pro Tyr Val Met Leu Gly Ala Gly Leu Val Ala Lys Lys Ala Ile Glu
    450                 455                 460
Lys Gly Leu Lys Val Pro Asp Tyr Val Lys Thr Ser Leu Ala Pro Gly
465                 470                 475                 480
Ser Lys Val Val Thr Gly Tyr Leu Arg Asp Ser Gly Leu Gln Glu Tyr
                485                 490                 495
Leu Asp Asp Leu Gly Phe Asn Leu Val Gly Tyr Gly Cys Thr Thr Cys
            500                 505                 510
Ile Gly Asn Ser Gly Pro Leu Leu Pro Glu Ile Glu Lys Ala Val Ala
        515                 520                 525
Asp Glu Asp Leu Leu Val Thr Ser Val Leu Ser Gly Asn Arg Asn Phe
    530                 535                 540
Glu Gly Arg Ile His Pro Leu Val Lys Ala Asn Tyr Leu Ala Ser Pro
545                 550                 555                 560
Gln Leu Val Val Ala Tyr Ala Leu Ala Gly Thr Val Asp Ile Asp Leu
                565                 570                 575
His Asn Glu Pro Ile Gly Lys Gly Lys Asp Gly Glu Asp Val Tyr Leu
            580                 585                 590
Lys Asp Ile Trp Pro Ser Ile Lys Glu Val Ala Asp Thr Val Asp Ser
        595                 600                 605
Val Val Thr Pro Glu Leu Phe Leu Glu Glu Tyr Ala Asn Val Tyr Glu
    6l0                 615                 620
Asn Asn Glu Met Trp Asn Glu Ile Asp Val Thr Asp Ala Pro Leu Tyr
625                 630                 635                 640
Asp Phe Asp Pro Asn Ser Thr Tyr Ile Gln Asn Pro Ser Phe Phe Gln
                645                 650                 655
Gly Leu Ser Lys Glu Pro Gly Thr Ile Glu Pro Leu Lys Asp Leu Arg
            660                 665                 670
Ile Met Gly Lys Phe Gly Asp Ser Val Thr Thr Asp His Ile Ser Pro
        675                 680                 685
Ala Gly Ala Ile Gly Lys Asp Thr Pro Ala Gly Lys Tyr Leu Leu Asp
    690                 695                 700
His Asp Val Pro Ile Arg Glu Phe Asn Ser Tyr Gly Ser Arg Arg Gly
705                 710                 715                 720
Asn His Glu Val Met Val Arg Gly Thr Phe Ala Asn Ile Arg Ile Lys
                725                 730                 735
Asn Gln Leu Ala Pro Gly Thr Glu Gly Gly Phe Thr Thr Tyr Trp Pro
            740                 745                 750
Thr Glu Glu Ile Met Pro Ile Tyr Asp Ala Ala Met Arg Tyr Lys Glu
        755                 760                 765
Asn Gly Thr Gly Leu Ala Val Leu Ala Gly Asn Asp Tyr Gly Met Gly
    770                 775                 780
Ser Ser Arg Asp Trp Ala Ala Lys Gly Thr Asn Leu Leu Gly Val Lys
785                 790                 795                 800
Thr Val Ile Ala Gln Ser Tyr Glu Arg Ile His Arg Ser Asn Leu Val
                805                 810                 815
Met Met Gly Val Leu Pro Leu Gln Phe Lys Gln Gly Glu Ser Ala Asp
            820                 825                 830
Ser Leu Gly Leu Glu Gly Lys Glu Glu Ile Ser Val Asp Ile Asp Glu
        835                 840                 845
Asn Val Lys Pro His Asp Leu Val Thr Val His Ala Lys Lys Glu Asn
    850                 855                 860
Gly Glu Val Val Asp Phe Glu Ala Met Val Arg Phe Asp Ser Leu Val
865                 870                 875                 880
Glu Leu Asp Tyr Tyr Arg His Gly Gly Ile Leu Gln Met Val Leu Arg
                885                 890                 895
Asn Lys Leu Ala Gln
           900
<210>29
<211>3006
<212>DNA
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<220>
<221>CDS
<222>(328)..(2514)
<400>29
gtcgacgacg aaccccccac cgccgaacca gccgccgatc tggtgtggga gacacccggg  60
ttctcctccc tgggtgaaca ggtgccacaa ccccgtccca acaggcacac ctaccactgg  120
atcgccgggg agagcagcat ggtcacacgc ctgcggcgtg ccctggtgaa ggatcacggc  180
ctggacagat cgcaggtggc attcatgggt tattggaggc agggagtggc catgaggggt  240
tgatatcgct tccctgaggg tccgcaggcg tgcctcaccc tgtattcttg atagttgaac  300
aaaagagccc acataacaag gagactc atg gct aag atc atc tgg acc cgc acc  354
                              Met Ala Lys Ile Ile Trp Thr Arg Thr
                                l               5
gac gaa gca ccg ctg ctc gcg acc  tac tcg ctg aag ccg gtc gtc gag   402
Asp Glu Ala Pro Leu Leu Ala Thr Tyr Ser Leu Lys Pro Val Val Glu
  10                 15                  20                  25
gct ttc gcc gcc acc gcg ggc atc gag gtg gag acc cgc gat atc tct    450
Ala Phe Ala Ala Thr Ala Gly Ile Glu Val Glu Thr Arg Asp Ile Ser
                 30                  35                  40
ctc gcc ggt cgc atc ctc gca cag ttc gcg gac cag ctc ccc gag gag    498
Leu Ala Gly Arg Ile Leu Ala Gln Phe Ala Asp Gln Leu Pro Glu Glu
            45                   50                  55
cag aag gtc tcc gac gcc ctc gcc gag ctc ggc gaa ctg gct aag acc    546
Gln Lys Val Ser Asp Ala Leu Ala Glu Leu Gly Glu Leu Ala Lys Thr
         60                  65                  70
ccc gaa gcc aac atc atc aag ctt ccc aac atc tcc gca tcc gta ccg    594
Pro Glu Ala Asn Ile Ile Lys Leu Pro Asn Ile Ser Ala Ser Val Pro
    75                   80                  85
cag ctc aag gct gcc gta aag gaa ctg cag gaa cag ggc tac gac ctg    642
Gln Leu Lys Ala Ala Val Lys Glu Leu Gln Glu Gln Gly Tyr Asp Leu
 90                  95                 100                 105
ccc gag tac gag gat gcc aag gac cgc tac gcc gct gtc atc ggc tcc    690
Pro Glu Tyr Glu Asp Ala Lys Asp Arg Tyr Ala Ala Val Ile Gly Ser
                110                 115                 120
aac gtc aac ccg gtc ctg cgc gag ggc aac tcc gac cgc cgc gca ccg    738
Asn Val Asn Pro Val Leu Arg Glu Gly Asn Ser Asp Arg Arg Ala Pro
            125                 130                 135
gtg gcc gtg aag aac ttc gtg aag aag ttc ccc cac cgc atg ggc gag    786
Val Ala Val Lys Asn Phe Val Lys Lys Phe Pro His Arg Met Gly Glu
        140                 145                 150
tgg tcc gcc gac tcc aag acc aac gtt gcc acc atg ggt gcc gac gac    834
Trp Ser Ala Asp Ser Lys Thr Asn Val Ala Thr Met Gly Ala Asp Asp
    155                 160                 165
ttc cgc agc aat gag aag tcc gtg atc atg gac gag gcc gac acc gtg    882
Phe Arg Ser Asn Glu Lys Ser Val Ile Met Asp Glu Ala Asp Thr Val
170                 175                 180                 185
gtg atc aag cat gtc gcc gcc gac ggc acc gag acc gtg ctc aag gac    930
Val Ile Lys His Val Ala Ala Asp Gly Thr Glu Thr Val Leu Lys Asp
                190                 195                 200
agc ctc ccc ctg ctc aag ggt gag gtc atc gac ggc acc ttc atc tcc    978
Ser Leu Pro Leu Leu Lys Gly Glu Val Ile Asp Gly Thr Phe Ile Ser
            205                 210                 215
gcc aag gca ctg gac gcc ttc ctg ctc gac cag gtc aaa cgc gcc aag    1026
Ala Lys Ala Leu Asp Ala Phe Leu Leu Asp Gln Val Lys Arg Ala Lys
        220                 225                 230
gag gag ggc atc ctc ttc tcc gcc cac atg aag gcc acc atg atg aag    1074
Glu Glu Gly Ile Leu Phe Ser Ala His Met Lys Ala Thr Met Met Lys
    235                 240                 245
gtc tcc gac ccg atc atc ttc ggc cac atc gtc cgc gcc tac ttc gcc    1122
Val Ser Asp Pro Ile Ile Phe Gly His Ile Val Arg Ala Tyr Phe Ala
250                 255                 260                 265
gat gtc tac gca cag tac ggt gag cag ctg ctc gcc gcc ggc ctc aac    1170
Asp Val Tyr Ala Gln Tyr Gly Glu Gln Leu Leu Ala Ala Gly Leu Asn
                270                 275                 280
ggt gag aac ggt ctc gcc gcc atc tac gcc ggc ctg gac aag ctg gac    1218
Gly Glu Asn Gly Leu Ala Ala Ile Tyr Ala Gly Leu Asp Lys Leu Asp
            285                 290                 295
aac ggt gcc gag atc aag gca gcc ttc gac aag ggc ctg gaa gag ggc    1266
Asn Gly Ala Glu Ile Lys Ala Ala Phe Asp Lys Gly Leu Glu Glu Gly
        300                 305                 310
ccc gac ctg gcc atg gtg aac tcc gcc aag ggc atc acc aac ctg cat    1314
Pro Asp Leu Ala Met Val Asn Ser Ala Lys Gly Ile Thr Asn Leu His
    315                 320                 325
gtg ccc tcc gat gtc atc atc gac gcc tcc atg ccc gcc atg atc cgc    1362
Val Pro Ser Asp Val Ile Ile Asp Ala Ser Met Pro Ala Met Ile Arg
330                 335                 340                 345
acc tcc ggc aag atg tgg aac aag gac gac cag acc cag gat gcc ctg    1410
Thr Ser Gly Lys Met Trp Asn Lys Asp Asp Gln Thr Gln Asp Ala Leu
                350                 355                 360
gct gtc atc ccg gac tcc tcc tac gcc ggt gtc tac cag acc gtc atc    1458
Ala Val Ile Pro Asp Ser Ser Tyr Ala Gly Val Tyr Gln Thr Val Ile
            365                 370                  375
gag gac tgc cgc aag aat ggc gcc ttc gat ccg acc acc atg ggc acc    1506
Glu Asp Cys Arg Lys Asn Gly Ala Phc Asp Pro Thr Thr Met Gly Thr
        380                 385                 390
gtc ccc aac gtc ggt ctg atg gca cag aag gcc gag gag tac ggc tcc    1554
Val Pro Asn Val Gly Leu Met Ala Gln Lys Ala Glu Glu Tyr Gly Ser
    395                 400                 405
cac gac aag acc ttc cgt atc gag gcc gac ggc aag gta cag gtc gtc    1602
His Asp Lys Thr Phe Arg Ile Glu Ala Asp Gly Lys Val Gln Val Val
410                 415                 420                 425
gcc tcc aac ggt gat gtc ctc atc gag cac gac gtg gag aag ggc gac    1650
Ala Ser Asn Gly Asp Val Leu Ile Glu His Asp Val Glu Lys Gly Asp
                430                 435                 440
atc tgg cgc gcc tgc cag acc aag gac gcc ccg atc cag gac tgg gtc    1698
Ile Trp Arg Ala Cys Gln Thr Lys Asp Ala Pro Ile Gln Asp Trp Val
            445                 450                 455
aag ctg gct gtc aac cgc gca cgt ctc tcc ggc atg ccc gct gtg ttc    1746
Lys Leu Ala Val Asn Arg Ala Arg Leu Ser Gly Met Pro Ala Val Phe
        460                 465                 470
tgg ctg gat ccc gcc cgc gca cac gac cgc aac ctg acc aca ctg gtg    1794
Trp Leu Asp Pro Ala Arg Ala His Asp Arg Asn Leu Thr Thr Leu Val
    475                 480                 485
gag aag tac ctg gca gac cac gac acc gag ggc ctg gac atc cag atc    1842
Glu Lys Tyr Leu Ala Asp His Asp Thr Glu Gly Leu Asp Ile Gln Ile
490                495                  500                 505
ctc tcc ccc gtc gag gcc acc cag cac gcc atc gac cgc atc cgc cgc    1890
Leu Ser Pro Val Glu Ala Thr Gln His Ala Ile Asp ArgIle Arg Arg
                510                 515                520
ggc gag gac acc atc tcc gtc acc ggt aac gtc ctg cgt gac tac aac    1938
Gly Glu Asp Thr Ile Ser Val Thr Gly Asn Val Leu Arg Asp Tyr Asn
            525                 530                 535
acc gac ctc ttc ccg atc ctc gag ctg ggc acc tcc gcc aag atg ctc    1986
Thr Asp Leu Phe Pro Ile Leu Glu Leu Gly Thr Ser Ala Lys Met Leu
        540                 545                 550
tcc gtc gtg cca ctg atg gcc ggc ggt gga ctc ttc gag acc ggt gcc    2034
Ser Val Val Pro Leu Met Ala Gly Gly Gly Leu Phe Glu Thr Gly Ala
    555                 560                 565
ggt ggc tcc gcc ccg aag cac gtc cag cag gtc atc gag gaa aac cac    2082
Gly Gly Ser Ala Pro Lys His Val Gln Gln Val Ile Glu Glu Asn His
570                 575                 580                 585
ctg cgc tgg gat tcc ctc ggt gag ttc ctg gcc ctg gcc gag tcc ttc    2130
Leu Arg Trp Asp Ser Leu Gly Glu Phe Leu Ala Leu Ala Glu Ser Phe
                590                 595                 600
cgc cac gag ctc aac acc cgc aac aac acc aag gcc ggt gtc ctc gcc    2178
Arg His Glu Leu Asn Thr Arg Asn Asn Thr Lys Ala Gly Val Leu Ala
            605                 610                 615
gat gcc ctg gac cgt gcg acc gag aag ctc ctc aac gag gag aag tcc    2226
Asp Ala Leu Asp Arg Ala Thr Glu Lys Leu Leu Asn Glu Glu Lys Ser
        620                 625                 630
ccg tcc cgc aag gtc ggc gag atc gac aac cgt ggt tcc cac ttc tgg    2274
Pro Ser Arg Lys Val Gly Glu Ile Asp Asn Arg Gly Ser His Phe Trp
    635                 640                 645
ctg gcc acc tac tgg gcc gat gaa ctg gcc aac cag acc gag gac gcc    2322
Leu Ala Thr Tyr Trp Ala Asp Glu Leu Ala Asn Gln Thr Glu Asp Ala
650                 655                 660                 665
gag ctg gct gag acc ttc gcc cct gtc gcc gag gcc ctg aac aac cag    2370
Glu Leu Ala Glu Thr Phe Ala Pro Val Ala Glu Ala Leu Asn Asn Gln
                670                 675                 680
gct gcc gac atc gac gca gca ctc atc ggt gag cag ggc aag cct gtc    2418
Ala Ala Asp Ile Asp Ala Ala Leu Ile Gly Glu Gln Gly Lys Pro Val
            685                 690                 695
gac ctg ggt ggc tac tac gca ccc tcc gat gag aag acc tcc gcg atc    2466
Asp Leu Gly Gly Tyr Tyr Ala Pro Ser Asp Glu Lys Thr Ser Ala Ile
        700                 705                 710
atg cgc ccg gtg gcc gca ttc aac gag atc atc gac tcc ctg aag aag    2514
Met Arg Pro Val Ala Ala Phe Asn Glu Ile Ile Asp Ser Leu Lys Lys
    715                 720                 725
taaccccttc tccggagccg acagccgacg gccacgctcc cccgcccacg ggggatcgtg  2574
gccgtcggcc gtttctggca ctggagtgaa cacttcggtg ataatggtga gatgaacagc  2634
ccccgtgtcc ccgccatcct gtccgccgtt tccgccgtgg gtctgatcgc tgcgctgggc  2694
acccccgttg ccgtcgcaga caccatcacc gcggacaccg accgggaaac ctgcgtggcc  2754
agccagaatg acaactccag cgtgatcagg ttctgggatg acctggaggc cgatgtccgt  2814
gagcagcgcc tgaccgaact ggatgcacag gaccccggcc tcaagaacga catcgaggcc  2874
ttcatcgccg aggacccggt agccccctcc gcagccgatc tccagagacg gctggatgca  2934
aatgacgccg gtgagggcct ggccatgctg ctacctgaat cccgcaccga ccccgaggtg  2994
gtggacctgc ag                                                      3006
<210>30
<211>729
<212>PRT
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<400>30
Met Ala Lys Ile Ile Trp Thr Arg Thr Asp Glu Ala Pro Leu Leu Ala
  1               5                  10                  15
Thr Tyr Ser Leu Lys Pro Val Val Glu Ala Phe Ala Ala Thr Ala Gly
             20                  25                  30
Ile Glu Val Glu Thr Arg Asp Ile Ser Leu Ala Gly Arg Ile Leu Ala
         35                  40                  45
Gln Phe Ala Asp Gln Leu Pro Glu Glu Gln Lys Val Ser Asp Ala Leu
     50                  55                  60
Ala Glu Leu Gly Glu Leu Ala Lys Thr Pro Glu Ala Asn Ile Ile Lys
 65                  70                  75                  80
Leu Pro Asn Ile Ser Ala Ser Val Pro Gln Leu Lys Ala Ala Val Lys
                 85                  90                  95
Glu Leu Gln Glu Gln Gly Tyr Asp Leu Pro Glu Tyr Glu Asp Ala Lys
            100                 105                 110
Asp Arg Tyr Ala Ala Val Ile Gly Ser Asn Val Asn Pro Val Leu Arg
        115                 120                 125
Glu Gly Asn Ser Asp Arg Arg Ala Pro Val Ala Val Lys Asn Phe Val
    130                 135                 140
Lys Lys Phe Pro His Arg Met Gly Glu Trp Ser Ala Asp Ser Lys Thr
145                150                  155                 160
Asn Val Ala Thr Met Gly Ala Asp Asp Phe Arg Ser Asn Glu Lys Ser
                165                 170                 175
Val Ile Met Asp Glu Ala Asp Thr Val Val Ile Lys His Val Ala Ala
            180                 185                 190
Asp Gly Thr Glu Thr Val Leu Lys Asp Ser Leu Pro Leu Leu Lys Gly
        195                 200                 205
Glu Val Ile Asp Gly Thr Phe Ile Ser Ala Lys Ala Leu Asp Ala Phe
    210                 215                 220
Leu Leu Asp Gln Val Lys Arg Ala Lys Glu Glu Gly Ile Leu Phe Ser
225                 230                 235                 240
Ala His Met Lys Ala Thr Met Met Lys Val Ser Asp Pro Ile Ile Phe
                245                 250                 255
Gly His Ile Val Arg Ala Tyr Phe Ala Asp Val Tyr Ala Gln Tyr Gly
            260                 265                  270
Glu Gln Leu Leu Ala Ala Gly Leu Asn Gly Glu Asn Gly Leu Ala Ala
        275                 280                 285
Ile Tyr Ala Gly Leu Asp Lys Leu Asp Asn Gly Ala Glu Ile Lys Ala
    290                 295                 300
Ala Phe Asp Lys Gly Leu Glu Glu Gly Pro Asp Leu Ala Met Val Asn
305                 310                 315                 320
Ser Ala Lys Gly Ile Thr Asn Leu His Val Pro Ser Asp Val Ile Ile
                325                 330                 335
Asp Ala Ser Met Pro Ala Met Ile Arg Thr Ser Gly Lys Met Trp Asn
            340                 345                 350
Lys Asp Asp Gln Thr Gln Asp Ala Leu Ala Val Ile Pro Asp Ser Ser
        355                 360                 365
Tyr Ala Gly Val Tyr Gln Thr Val Ile Glu Asp Cys Arg Lys Asn Gly
    370                 375                 380
Ala Phe Asp Pro Thr Thr Met Gly Thr Val Pro Asn Val Gly Leu Met
385                 390                 395                 400
Ala Gln Lys Ala Glu Glu Tyr Gly Ser His Asp Lys Thr Phe Arg Ile
                405                 410                 415
Glu Ala Asp Gly Lys Val Gln Val Val Ala Ser Asn Gly Asp Val Leu
            420                 425                 430
Ile Glu His Asp Val Glu Lys Gly Asp Ile Trp Arg Ala Cys Gln Thr
        435                 440                 445
Lys Asp Ala Pro Ile Gln Asp Trp Val Lys Leu Ala Val Asn Arg Ala
    450                 455                 460
Arg Leu Ser Gly Met Pro Ala Val Phe Trp Leu Asp Pro Ala Arg Ala
465                 470                 475                 480
His Asp Arg Asn Leu Thr Thr Leu Val Glu Lys Tyr Leu Ala Asp His
                485                 490                 495
Asp Thr Glu Gly Leu Asp Ile Gln Ile Leu Ser Pro Val Glu Ala Thr
            500                 505                 510
Gln His Ala Ile Asp Arg Ile Arg Arg Gly Glu Asp Thr Ile Ser Val
        515                 520                 525
Thr Gly Asn Val Leu Arg Asp Tyr Asn Thr Asp Leu Phe Pro Ile Leu
    530                 535                 540
Glu Leu Gly Thr Ser Ala Lys Met Leu Ser Val Val Pro Leu Met Ala
545                 550                 555                 560
Gly Gly Gly Leu Phe Glu Thr Gly Ala Gly Gly Ser Ala Pro Lys His
                565                 570                 575
Val Gln Gln Val Ile Glu Glu Asn His Leu Arg Trp Asp Ser Leu Gly
            580                 585                 590
Glu Phe Leu Ala Leu Ala Glu Ser Phe Arg His Glu Leu Asn Thr Arg
        595                 600                 605
Asn Asn Thr Lys Ala Gly Val Leu Ala Asp Ala Leu Asp Arg Ala Thr
    610                 615                 620
Glu Lys Leu Leu Asn Glu Glu Lys Ser Pro Ser Arg Lys Val Gly Glu
625                 630                 635                 640
Ile Asp Asn Arg Gly Ser His Phe Trp Leu Ala Thr Tyr Trp Ala Asp
                645                 650                 655
Glu Leu Ala Asn Gln Thr Glu Asp Ala Glu Leu Ala Glu Thr Phe Ala
            660                 665                 670
Pro Val Ala Glu Ala Leu Asn Asn Gln Ala Ala Asp Ile Asp Ala Ala
        675                 680                 685
Leu Ile Gly Glu Gln Gly Lys Pro Val Asp Leu Gly Gly Tyr Tyr Ala
    690                 695                 700
Pro Ser Asp Glu Lys Thr Ser Ala Ile Met Arg Pro Val Ala Ala Phe
705                 710                 715                 720
Asn Glu Ile Ile Asp Ser Leu Lys Lys
                725
<210>31
<211>2322
<212>DNA
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<220>
<221>CDS
<222>(806)..(2212)
<400>31
ggtaccccca cgtaccctag gccatcacag caatttttac atcggatatt ttaggtgtgc  60
tcataacgtc cttatgaatt tcgcagttat tagttattta aatagagaat caaactccga  120
cctagcctct gccgatgcta aaagtcagct gaccccttgg ggcgcttcat ttgaaactgc  180
gaccaagctc atgaatgcgc gaaagcattt ccattataag ggtaagctgt aagaatagtg  240
ggagaaaatg ttcagtcgtg ttctaactca cttgagaaat tccatttttc tgggcttctc  300
tcaaatagat taagtggccc gtatgctgga tttctagaat atttagaagc gcgccaactc  360
atgattatgt attgtataag cctcaaagac cgaatagatt actaacattt aagtggacca  420
gagcgttaga agctttgtag agtgctcatt ccttgctgac ggcaagggtt tcctaccatg  480
agatagatcg gcagatagtt ggtttgtaaa aatttttaag gacggtccgc aatgtcaatt  540
cttgaacaga tcatcttctt catcaacacc atcttgggtt atggtctgca cgctggttct  600
tccgcttcca gcaacctttc tcacacgatc ggcctgttct aggcctaatt ggtaataagg  660
ctgtgtaaca gtcgcccgcg tgattgtgtc tttttaggcg cccgcgcggg cgattttcgg  720
ttttcatctt ttttaaattg agtttggaag atcaagtgcc cccggatgca cgacaatgct  780
atgccgaaca cgtattgttg aaatc gtg act gaa cat tat gac gta gta gta    832
                            Val Thr Glu His Tyr Asp Val Val Val
                              1               5
ctc gga gct ggc ccc ggt ggc tat gtc tcc gcc atc cgc gcc gcg cag    880
Leu Gly Ala Gly Pro Gly Gly Tyr Val Ser Ala Ile Arg Ala Ala Gln
 10                  15                  20                  25
ctc ggt aag aaa gtt gcg gtt atc gag aag cag tac tgg gga ggt gtc    928
Leu Gly Lys Lys Val Ala Val Ile Glu Lys Gln Tyr Trp Gly Gly Val
                 30                  35                  40
tgc ctg aat gtg ggt tgt atc cca tct aag gcg ttg atc aag aac gct    976
Cys Leu Asn Val Gly Cys Ile Pro Ser Lys Ala Leu Ile Lys Asn Ala
             45                  50                  55
gag atc gcc cac atc ttc aac cat gag aag aag acc ttc ggc atc aac    1024
Glu Ile Ala His Ile Phe Asn His Glu Lys Lys Thr Phe Gly Ile Asn
         60                  65                  70
ggc gag gtc acc ttc aac tac gag gat gcc cac aag cgt tcc cgt ggt    1072
Gly Glu Val Thr Phe Asn Tyr Glu Asp Ala His Lys Arg Ser Arg Gly
     75                  80                  85
gtc tcc gac aag atc gtc ggc ggt gtt cac tac ttg atg aag aag aac    1120
Val Ser Asp Lys Ile Val Gly Gly Val His Tyr Leu Met Lys Lys Asn
 90                  95                 100                 105
aag atc acc gag atc gac ggt ttc ggc acc ttc aag gat gcc aag acc    1168
Lys Ile Thr Glu Ile Asp Gly Phe Gly Thr Phe Lys Asp Ala Lys Thr
                110                 115                 120
atc gag gtg acc gat ggt aag gat gcc ggc aag acc gtc acc ttc gat    1216
Ile Glu Val Thr Asp Gly Lys Asp Ala Gly Lys Thr Val Thr Phe Asp
            125                 130                 135
gac tgc atc atc gcc acc ggt tcc gtg gtc aac tcc ctc cgt ggt gtt    1264
Asp Cys Ile Ile Ala Thr Gly Ser Val Val Asn Ser Leu Arg Gly Val
        140                 145                 150
gag ttc tcc gag aac gtg gtc tcc tac gag gag cag atc ctc aac ccg    1312
Glu Phe Ser Glu Asn Val Val Ser Tyr Glu Glu Gln Ile Leu Asn Pro
    155                 160                 165
gtg gcg cct aag aag atg gtc atc gtc ggt ggc ggc gcc atc ggt atg    1360
Val Ala Pro Lys Lys Met Val Ile Val Gly Gly Gly Ala Ile Gly Met
170                 175                 180                 185
gaa ttc gcc tac gtt ctg ggc aac tac ggt gtg gac gta acc ctc atc    1408
Glu Phe Ala Tyr Val Leu Gly Asn Tyr Gly Val Asp Val Thr Leu Ile
                190                 195                 200
gag ttc atg gac cgc gtt ctg ccg aac gag gat cca gag gtg tcc aag    1456
Glu Phe Met Asp Arg Val Leu Pro Asn Glu Asp Pro Glu Val Ser Lys
            205                 210                 215
gtt atc gcc aag gcc tac aag aag atg ggc atc aag ctc ctc ccg ggc    1504
Val Ile Ala Lys Ala Tyr Lys Lys Met Gly Ile Lys Leu Leu Pro Gly
        220                 225                 230
cac gca acc acc gcg gtg cgc gac aat ggc gat tcc gtt gag gtc gat    1552
His Ala Thr Thr Ala Val Arg Asp Asn Gly Asp Ser Val Glu Val Asp
    235                 240                 245
tac cag aag aag ggc tcg gac aag acc gag acc atc acc gtc gac cgt    1600
Tyr Gln Lys Lys Gly Ser Asp Lys Thr Glu Thr Ile Thr Val Asp Arg
250                 255                 260                 265
gtt ctt atc tcc gtc ggc ttc cgc cca cgc gtc gag ggc ttc ggc ctg    1648
Val Leu Ile Ser Val Gly Phe Arg Pro Arg Val Glu Gly Phe Gly Leu
                270                 275                 280
gag aac acc ggc gtc aag ctc acc gaa cgc ggt gcc atc gac att gat    1696
Glu Asn Thr Gly Val Lys Leu Thr Glu Arg Gly Ala Ile Asp Ile Asp
            285                 290                 295
gag cat atg cgc acc aac gtc gac ggc atc tac gcc atc ggt gac gtc    1744
Glu His Met Arg Thr Asn Val Asp Gly Ile Tyr Ala Ile Gly Asp Val
        300                 305                  310
acc gcc aag ctg cag ctg gca cac gtc gcc gag gca cag ggc att gtc    1792
Thr Ala Lys Leu Gln Leu Ala His Val Ala Glu Ala Gln Gly Ile Val
    315                 320                 325
gcc gcc gag aca ctc gcc ggc gca gaa acc cag acc ctg ggc gac tac    1840
Ala Ala Glu Thr Leu Ala Gly Ala Glu Thr Gln Thr Leu Gly Asp Tyr
330                 335                 340                 345
atg atg atg ccg cgt gcc acc ttc tgc aac cca cag gtt gcc tcc ttc    1888
Met Met Met Pro Arg Ala Thr Phe Cys Asn Pro Gln Val Ala Ser Phe
                350                 355                 360
ggt tac acc gag gag cag gcc aag gag aag tgg ccg gat cga gag atc    1936
Gly Tyr Thr Glu Glu Gln Ala Lys Glu Lys Trp Pro Asp Arg Glu Ile
            365                 370                 375
aag gtg tcc tcc ttc ccg ttc tcc gcg aac ggc aag gcc gtc ggc ctg    1984
Lys Val Ser Ser Phe Pro Phe Ser Ala Asn Gly Lys Ala Val Gly Leu
        380                 385                 390
gct gag acc gat ggt ttc gcc aag atc gtc gcc gac gct gag ttc ggt    2032
Ala Glu Thr Asp Gly Phe Ala Lys Ile Val Ala Asp Ala Glu Phe Gly
    395                 400                 405
gaa ctg ctg ggt ggc cac att gtc ggt gcc aac gcc tcc gag ctg ctc    2080
Glu Leu Leu Gly Gly His Ile Val Gly Ala Asn Ala Ser Glu Leu Leu
410                 415                 420                 425
aac gag ctg gtg ctg gcc cag aac tgg gat ctc acc acc gag gag atc    2128
Asn Glu Leu Val Leu Ala Gln Asn Trp Asp Leu Thr Thr Glu Glu Ile
                430                 435                 440
agc cgc agc gtc cac atc cac ccg acc ctg tcg gag gct gtc aag gaa    2176
Ser Arg Ser Val His Ile His Pro Thr Leu Ser Glu Ala Val Lys Glu
            445                 450                 455
gct gcc cac ggc gtc aac ggc cac atg atc aac ttc taaatcccgt         2222
Ala Ala His Gly Val Asn Gly His Met Ile Asn Phe
        460                 465
cagacaaatg caaatcccct caccgatggc atatcggtga ggggattttc tcatgcacgt  2282
aaaatcataa tccatggcaa ggaaagtcga caacagcgcc                        2322
<210>32
<211>469
<212>PRT
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<400>32
Val Thr Glu His Tyr Asp Val Val Val Leu Gly Ala Gly Pro Gly Gly
  1               5                  10                  15
Tyr Val Ser Ala Ile Arg Ala Ala Gln Leu Gly Lys Lys Val Ala Val
             20                  25                  30
Ile Glu Lys Gln Tyr Trp Gly Gly Val Cys Leu Asn Val Gly Cys Ile
         35                  40                  45
Pro Ser Lys Ala Leu Ile Lys Asn Ala Glu Ile Ala His Ile Phe Asn
    50                   55                  60
His Glu Lys Lys Thr Phe Gly Ile Asn Gly Glu Val Thr Phe Asn Tyr
 65                  70                  75                  80
Glu Asp Ala His Lys Arg Ser Arg Gly Val Ser Asp Lys Ile Val Gly
                 85                  90                  95
Gly Val His Tyr Leu Met Lys Lys Asn Lys Ile Thr Glu Ile Asp Gly
            100                 105                 110
Phe Gly Thr Phe Lys Asp Ala Lys Thr Ile Glu Val Thr Asp Gly Lys
        115                 120                 125
Asp Ala Gly Lys Thr Val Thr Phe Asp Asp Cys Ile Ile Ala Thr Gly
    130                 135                 140
Ser Val Val Asn Ser Leu Arg Gly Val Glu Phe Ser Glu Asn Val Val
145                 150                 155                 160
Ser Tyr Glu Glu Gln Ile Leu Asn Pro Val Ala Pro LVs LVs Met Val
                165                 170                 175
Ile Val Gly Gly Gly Ala Ile Gly Met Glu Phe Ala Tyr Val Leu Gly
            180                 185                 190
Asn Tyr Gly Val Asp Val Thr Leu Tle Glu Phe Met Asp Arg Val Leu
        195                 200                 205
Pro Asn Glu Asp Pro Glu Val Ser Lys Val Ile Ala Lys Ala Tyr Lys
    210                 215                 220
Lys Met Gly Ile Lys Leu Leu Pro Gly His Ala Thr Thr Ala Val Arg
225                 230                 235                 240
Asp Asn Gly Asp Ser Val Glu Val Asp Tyr Gln Lys Lys Gly Ser Asp
                245                 250                 255
Lys Thr Glu Thr Ile Thr Val Asp Arg Val Leu Ile Ser Val Gly Phe
            260                 265                 270
Arg Pro Arg Val Glu Gly Phe Gly Leu Glu Asn Thr Gly Val Lys Leu
        275                 280                 285
Thr Glu Arg Gly Ala Ile Asp Ile Asp Glu His Met Arg Thr Asn Val
    290                 295                 300
Asp Gly Ile Tyr Ala Ile Gly Asp Val Thr Ala Lys Leu Gln Leu Ala
305                 310                 315                 320
His Val Ala Glu Ala Gln Gly Ile Val Ala Ala Glu Thr Leu Ala Gly
                325                 330                 335
Ala Glu Thr Gln Thr Leu Gly Asp Tyr Met Met Met Pro Arg Ala Thr
            340                 345                 350
Phe Cys Asn Pro Gln Val Ala Ser Phe Gly Tyr Thr Glu Glu Gln Ala
        355                 360                 365
Lys Glu Lys Trp Pro Asp Arg Glu Ile Lys Val Ser Ser Phe Pro Phe
    370                 375                 380
Ser Ala Asn Gly Lys Ala Val Gly Leu Ala Glu Thr Asp Gly Phe Ala
385                 390                 395                 400
Lys Ile Val Ala Asp Ala Glu Phe Gly Glu Leu Leu Gly Gly His Ile
                405                 410                 415
Val Gly Ala Asn Ala Ser Glu Leu Leu Asn Glu Leu Val Leu Ala Gln
            420                 425                 430
Asn Trp Asp Leu Thr Thr Glu Glu Ile Ser Arg Ser Val His Ile His
        435                 440                 445
Pro Thr Leu Ser Glu Ala Val Lys Glu Ala Ala His Gly Val Asn Gly
    450                 455                 460
His Met Ile Asn Phe
465
<210>33
<211>4096
<212>DNA
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<220>
<221>CDS
<222>(250)..(3951)
<400>33
ccggatcatc gtggttgacg ggggacgtat catcgaggat ggttcccacg atgaacttct  60
gggagcgaat ggaacctacg caacaatgtg gcatttagta gggtgacagg atattttagg  120
aaagacttgt taccaaaagg tgctaatact ggggtgctag gtccccgcga ccggaaccag  180
cgttacagtg gataaaataa agcccattta gaaccctcaa caagcaagga aaagaggcga  240
gtacctgcc gtg agc agc gct agt act ttc ggc cag aac gcg tgg ctg gtg  291
          Val Ser Ser Ala Ser Thr Phe Gly Gln Asn Ala Trp Leu Val
            1               5                  10
gat gag atg ttc cag cag ttc aag aag gac ccc cag tcc gtg gac aag    339
Asp Glu Met Phe Gln Gln Phe Lys Lys Asp Pro Gln Ser Val Asp Lys
 15                  20                  25                  30
gaa tgg aga gag ctc ttc gag tct cag ggg ggt ccc cag gct gaa aag    387
Glu Trp Arg Glu Leu Phe Glu Ser Gln Gly Gly Pro Gln Ala Glu Lys
                 35                  40                  45
gct acc ccc gcc acc ccc gaa gcc aag aag gca gct tcg tcg cag tcc    435
Ala Thr Pro Ala Thr Pro Glu Ala Lys Lys Ala Ala Ser Ser Gln Ser
             50                  55                  60
tca act tcc gga cag tcc acc gcc aag gct gcc cct gcc gcc aag acc    483
Ser Thr Ser Gly Gln Ser Thr Ala Lys Ala Ala Pro Ala Ala Lys Thr
         65                  70                  75
gca ccg gcc tct gcg cca gcc aag gct gcc cct gtt aag caa aac cag    53l
Ala Pro Ala Ser Ala Pro Ala Lys Ala Ala Pro Val Lys Gln Asn Gln
     80                  85                  90
gcg tcc aag cct gcc aag aag gcc aag gag tcc ccc ctg tcc aag cca    579
Ala Ser Lys Pro Ala Lys Lys Ala Lys Glu Ser Pro Leu Ser Lys Pro
 95                 100                 105                 110
gct gcc atg cct gag ccg gga acc acc cca ctc agg ggc atc ttc aag    627
Ala Ala Met Pro Glu Pro Gly Thr Thr pro Leu Arg Gly Ile Phe Lys
                115                 120                 125
tcc atc gcc aag aac atg gac ctc tcc ctc gag gtg ccc acc gcc acc    675
Ser Ile Ala Lys Asn Met Asp Leu Ser Leu Glu Val Pro Thr Ala Thr
            130                 135                  140
tcc gtc cgc gac atg ccc gcg cgc ctc atg ttcgag aac cgc gcc atg    723
Ser Val Arg Asp Met Pro Ala Arg Leu Met Phe Glu Asn Arg Ala Met
        145                 150                 155
gtc aac gac cag ctc aag cgc acc cgt ggc ggc aag atc tcc ttc acc    771
Val Asn Asp Gln Leu Lys Arg Thr Arg Gly Gly Lys Ile Ser Phe Thr
    160                 165                 170
cac atc atc ggc tac gcc atg gtg aag gct gtc atg gca cac ccg gac    819
His Ile Ile Gly Tyr Ala Met Val LVs Ala Val Met Ala His Pro Asp
175                 180                 185                 190
atg aac aac tcc tat gac atc gtc gac ggc aag ccg tcc ctg gtc gtc    867
Met Asn Asn Ser Tyr Asp Ile Val Asp Gly Lys Pro Ser Leu Val Val
                195                 200                 205
ccg gag cac atc aac ctc ggc ctg gcc atc gac ctc ccc cag aag gac    915
Pro Glu His Ile Asn Leu GLy Leu Ala Ile Asp Leu Pro Gln Lys Asp
            210                 215                 220
ggc tcc cgt gcc ctc gtg gtc gcc gcc atc aag gaa acc gag aag atg    963
Gly Ser Arg Ala Leu Val Val Ala Ala Ile Lys Glu Thr Glu Lys Met
        225                 230                 235
acc ttc tcc cag ttc ctg gag gcc tat gag gac gtt gtg gca cgc tcc    1011
Thr Phe Ser Gln Phe Leu Glu Ala Tyr Glu Asp Val Val Ala Arg Ser
    240                 245                 250
cgc gtc ggc aag ctc acc atg gat gac tac cag ggt gtc acc atc tcc    1059
Arg Val Gly Lys Leu Thr Met Asp Asp Tyr Gln Gly Val Thr Ile Ser
255                 260                 265                 270
ttg acc aac ccg ggt ggc atc ggt acc cgc cac tcc atc ccg cgt ctg    1107
Leu Thr Asn Pro Gly Gly Ile Gly Thr Arg His Ser Ile Pro Arg Leu
                275                 280                 285
acc aag ggc cag ggc acc atc atc ggt gtc ggt tcc atg gac tac ccg    1155
Thr Lys Gly Gln Gly Thr Ile Ile Gly Val Gly Ser Met Asp Tyr Pro
            290                 295                 300
gcc gag ttc cag ggt gcc tcc gag gac cgt ctc gcc gag ctc ggt gtg    1203
Ala Glu Phe Gln Gly Ala Ser Glu Asp Arg Leu Ala Glu Leu Gly Val
        305                 310                 315
ggc aag ctc gtc acc atc acc tcc acc tac gat cac cgc gtc atc cag    1251
Gly Lys Leu Val Thr Ile Thr Ser Thr Tyr Asp His Arg Val Ile Gln
    320                 325                 330
ggc gcg gaa tcc ggt gag ttc ctg cgc acc atg tcc cag ctg ctc gtg    1299
Gly Ala Glu Ser Gly Glu Phe Leu Arg Thr Met Ser Gln Leu Leu Val
335                 340                 345                 350
gac gat gcg ttc tgg gat cac atc ttc gag gag atg aac gtt ccc tac    1347
Asp Asp Ala Phe Trp Asp His Ile Phe Glu Glu Met Asn Val Pro Tyr
                355                 360                 365
acc ccg atg cgc tgg gca cag gac ctg ccc aac acc ggt gtg gac aag    1395
Thr Pro Met Arg Trp Ala Gln Asp Leu Pro Asn Thr Gly Val Asp Lys
            370                 375                 380
aac acc cgt gtc atg cag ctc atc gag gcc tac cgc tcc cgc ggt cac    1443
Asn Thr Arg Val Met Gln Leu Ile Glu Ala Tyr Arg Ser Arg Gly His
        385                 390                 395
ctc atc gcc gac acc aac cca ctg ccc tgg gtc cag ccc ggc atg ccc    1491
Leu Ile Ala Asp Thr Asn Pro Leu Pro Trp Val Gln Pro Gly Met Pro
    400                 405                 410
gtc ccg gat cac cgt gac ctc gac atc gag acc cac ggc ctg acc ctg    1539
Val Pro Asp His Arg Asp Leu Asp Ile Glu Thr His Gly Leu Thr Leu
415                 420                 425                 430
tgg gat ctg gac cgt acc ttc cac gtc ggt ggt ttc ggt ggc aag gag    1587
Trp Asp Leu Asp Arg Thr Phe His Val Gly Gly Phe Gly Gly Lys Glu
                435                 440                 445
acc atg acc ctg cgc gag gtg ctc agc cgc ctc cgc gcc gcc tac acc    1635
Thr Met Thr Leu Arg Glu Val Leu Ser Arg Leu Arg Ala Ala Tyr Thr
            450                 455                 460
ctc aag gtc ggc tcc gag tac acc cac atc ctc gac cgc gat gag cgc    1683
Leu Lys Val Gly Ser Glu Tyr Thr His Ile Leu Asp Arg Asp Glu Arg
        465                 470                 475
acc tgg ctg cag gac cgc ctc gag gcc ggt atg ccc aag ccc acc gcc    1731
Thr Trp Leu Gln Asp Arg Leu Glu Ala Gly Met Pro Lys Pro Thr Ala
    480                 485                 490
gcc gag cag aag tac atc ctg cag aag ctc aac gcc gcc gag gca ttc    1779
Ala Glu Gln Lys Tyr Ile Leu Gln Lys Leu Asn Ala Ala Glu Ala Phe
495                 500                 505                 510
gag aac ttc ctg cag acc aag tac gtc ggc cag aag cgt ttc tcc ctc    1827
Glu Asn Phe Leu Gln Thr Lys Tyr Val Gly Gln Lys Arg Phe Ser Leu
                515                 520                 525
gag ggt gcc gag tca ctg atc ccg ctg atg gac tcc gcc atc gac acc    1875
Glu Gly Ala Glu Ser Leu Ile Pro Leu Met Asp Ser Ala Ile Asp Thr
            530                 535                 540
gcc gca ggc cag ggc ctt gac gag gtc gtc atc ggc atg ccc cac cgt    1923
Ala Ala Gly Gln Gly Leu Asp Glu Val Val Ile Gly Met Pro His Arg
        545                 550                 555
ggt cgc ctc aac gtg ctg ttc aac atc gtc ggc aag cca ctg gcc tcg    1971
Gly Arg Leu Asn Val Leu Phe Asn Ile Val Gly Lys Pro Leu Ala Ser
    560                 565                 570
atc ttc aac gag ttc gag ggc cag atg gag cag ggc cag atc ggt ggc    2019
Ile Phe Asn Glu Phe Glu Gly Gln Met Glu Gln Gly Gln Ile Gly Gly
575                 580                 585                 590
tcc ggt gac gtg aag tac cac ctc ggt tcc gag ggc acc cac ctg cag    2067
Ser Gly Asp Val Lys Tyr His Leu Gly Ser Glu Gly Thr His Leu Gln
                595                 600                 605
atg ttc ggc gac ggc gag atc aag gtc tcc ctc acc gcc aac ccc tcc    2115
Met Phe Gly Asp Gly Glu Ile Lys Val Ser Leu Thr Ala Asn Pro Ser
            610                 615                 620
cac ctc gag gcc gtc aac ccg gtc gtg gag ggc atc gtc cgc gcc aag    2163
His Leu Glu Ala Val Asn Pro Val Val Glu Gly Ile Val Arg Ala Lys
        625                 630                 635
cag gac atc ctg gac aag ggc ccg gac ggc tac acc gtc gtc ccg ctg    2211
Gln Asp Ile Leu Asp Lys Gly Pro Asp Gly Tyr Thr Val Val Pro Leu
    640                 645                 650
ctg ctc cac ggt gac gcc gcc ttc gcc ggc ctg ggc atc gtg ccc gag    2259
Leu Leu His Gly Asp Ala Ala Phe Ala Gly Leu Gly Ile Val Pro Glu
655                 660                 665                 670
acc atc aac ctc gca gcc ctg cgt ggt tac gat gtc ggt ggc acc atc    2307
Thr Ile Asn Leu Ala Ala Leu Arg Gly Tyr Asp Val Gly Gly Thr Ile
                675                 680                 685
cac atc gtg gtc aac aac cag atc ggc ttc acc acc acc ccg gac tcc    2355
His Ile Val Val Asn Asn Gln Ile Gly Phe Thr Thr Thr Pro Asp Ser
            690                 695                 700
agc cgt tcc atg cac tac gcc acc gac tgc gcc aag gcc ttc ggt tgc    2403
Ser Arg Ser Met His Tyr Ala Thr Asp Cys Ala Lys Ala Phe Gly Cys
        705                 710                 715
ccg gtg ttc cac gtc aac ggt gac gac ccc gag gct gtg gtc tgg gtc    2451
Pro Val Phe His Val Asn Gly Asp Asp Pro Glu Ala Val Val Trp Val
    720                 725                 730
ggc cag ctg gcc acc gag tac cgt cgc cgc ttc ggc aag gat gtc ttc    2499
Gly Gln Leu Ala Thr Glu Tyr Arg Arg Arg Phe Gly Lys Asp Val Phe
735                 740                 745                 750
atc gac ctc atc tgc tac cgc ctg cgc ggc cac aac gag gct gat gac    2547
Ile Asp Leu Ile Cys Tyr Arg Leu Arg Gly His Asn Glu Ala Asp Asp
                755                 760                 765
cca tcc atg acc cag ccg aag atg tac gag ctg atc acc ggc cgc gac    2595
Pro Ser Met Thr Gln Pro Lys Met Tyr Glu Leu Ile Thr Gly Arg Asp
            770                 775                 780
tcc gtg cgt gcc acc tac acc gag gac ctc ctc ggc cgt ggt gac ctc    2643
Ser Val Arg Ala Thr Tyr Thr Glu Asp Leu Leu Gly Arg Gly Asp Leu
        785                 790                 795
tcc ccc gag gac gcc gag gcc gtt gtc cgc gac ttc cac gac cag atg    2691
Ser Pro Glu Asp Ala Glu Ala Val Val Arg Asp Phe His Asp Gln Met
    800                 805                 810
gaa tcc gtg ttc aac gag gtc aag gaa gcc ggc aag aag cag cct gat    2739
Glu Ser Val Phe Asn Glu Val Lys Glu Ala Gly Lys Lys Gln Pro Asp
815                 820                 825                 830
gag cag acc ggc atc acc ggt tcc cag gaa ctg acc cgt ggc ctg gac    2787
Glu Gln Thr Gly Ile Thr Gly Ser Gln Glu Leu Thr Arg Gly Leu Asp
                835                 840                 845
acc aac atc acc cgc gag gaa ctg gtc gaa ctc ggc cag gcc ttc gtc    2835
Thr Asn Ile Thr Arg Glu Glu Leu Val Glu Leu Gly Gln Ala Phe Val
            850                 855                 860
aac acc cca gag ggc ttc acc tac cac cca cgt gtg gca ccg gtg gcc    2883
Asn Thr Pro Glu Gly Phe Thr Tyr His Pro Arg Val Ala Pro Val Ala
        865                 870                 875
aag aag cgt gcc gag tcc gtc acc gag ggt ggc atc gac tgg gca tgg    2931
Lys Lys Arg Ala Glu Ser Val Thr Glu Gly Gly Ile Asp Trp Ala Trp
    880                 885                 890
ggc gag ctc atc gcc ttc ggc tcc ctg gcc acc tcc ggc agg ctg gtc    2979
Gly Glu Leu Ile Ala Phe Gly Ser Leu Ala Thr Ser Gly Arg Leu Val
895                 900                 905                 910
cgc ctc gcc ggt gag gat tcc cgc cgt ggt acc ttc acc cag cgt cac    3027
Arg Leu Ala Gly Glu Asp Ser Arg Arg Gly Thr Phe Thr Gln Arg His
                915                 920                 925
gcc gtg gcc atc gac ccg aac acc gcc gag gag ttc aac ccg ctc cac    3075
Ala Val Ala Ile Asp Pro Asn Thr Ala Glu Glu Phe Asn Pro Leu His
            930                 935                 940
gag ctg gca cag gcc aag ggc ggc ggc aag ttc ctc gtc tac aac tcc    3123
Glu Leu Ala Gln Ala Lys Gly Gly Gly Lys Phe Leu Val Tyr Asn Ser
        945                 950                 955
gcg ctg acc gag tac gcg ggt atg ggc ttc gaa tac ggc tac tcc gtg    317l
Ala Leu Thr Glu Tyr Ala Gly Met Gly Phe Glu Tyr Gly Tyr Ser Val
    960                 965                 970
ggc aac ccg gac gcc gtg gtg tcc tgg gag gca cag ttc ggt gac ttc    3219
Gly Asn Pro Asp Ala Val Val Ser Trp Glu Ala Gln Phe Gly Asp Phe
975                 980                 985                 990
gcc aac ggt gca cag acc atc atc gat gag tac atc tcc tcc ggt gag    3267
Ala Asn Gly Ala Gln Thr Ile Ile Asp Glu Tyr Ile Ser Ser Gly Glu
                995                1000                1005
gcc aag tgg ggc cag acc tcc tcg gtc atc ctg ctg ctg ccc cac ggt    3315
Ala Lys Trp Gly Gln Thr Ser Ser Val Ile Leu Leu Leu Pro His Gly
           1010                1015                1020
tac gag ggc cag ggt ccg gac cac tcc tcc gca cgc atc gag cgt ttc    3363
Tyr Glu Gly Gln Gly Pro Asp His Ser Ser Ala Arg Ile Glu Arg Phe
       1025                1030                1035
ctg cag ctg tgc gcc gag ggt tcc atg acc atc gcc cag ccg acc acc    3411
Leu Gln Leu Cys Ala Glu Gly Ser Met Thr Ile Ala Gln Pro Thr Thr
   1040                1045                1050
ccg gcg aac tac ttc cac ctg ctg cgt cgt cac gca ctg ggc aag atg    3459
Pro Ala Asn Tyr Phe His Leu Leu Arg Arg His Ala Leu Gly Lys Met
1055               1060                1065                1070
aag cgc ccg ctg gtc gtc ttc acc ccg aag tcc atg ctg cgc aac aag    3507
Lys Arg Pro Leu Val Val Phe Thr Pro Lys Ser Met Leu Arg Asn Lys
               1075                1080                1085
gcc gcc acc tcc gct ccg gag gag ttc acc gag gtc acc cgc ttc aag    3555
Ala Ala Thr Ser Ala Pro Glu Glu Phe Thr Glu Val Thr Arg Phe Lys
           1090                1095                1100
tcc gtg atc gac gat ccg aac gtg gcg gat gcc tcc aag gtg aag aag    3603
Ser Val Ile Asp Asp Pro Asn Val Ala Asp Ala Ser Lys Val Lys Lys
       1105                1110                1115
atc atg ctg tgc tcc ggc aag atc tac tac gaa ctg gcc aag cgc aag    3651
Ile Met Leu Cys Ser Gly Lys Ile Tyr Tyr Glu Leu Ala Lys Arg Lys
   1120                1125                1130
gag aag gac aac cgc gac gac atc gcg atc gtg cgc atc gag atg ctg    3699
Glu Lys Asp Asn Arg Asp Asp Ile Ala Ile Val Arg Ile Glu Met Leu
1135               1140                1145                1150
cac ccg atc ccg ttc aac cgt ctg cgc gac gcc ttc gac ggc tac ccc    3747
His Pro Ile Pro Phe Asn Arg Leu Arg Asp Ala Phe Asp Gly Tyr Pro
               1155                1160                1165
aac gcc gag gag atc ctg ttc gtt cag gae gag ccg gca aac cag ggt    3795
Asn Ala Glu Glu Ile Leu Phe Val Gln Asp Glu Pro Ala Asn Gln Gly
           1170                1175                1180
gcc tgg ccg ttc tac cag gag cac ctg ccc aac ctc atc gag ggc atg    3843
Ala Trp Pro Phe Tyr Gln Glu His Leu Pro Asn Leu Ile Glu Gly Met
       1185                1190                1195
ctc ccg atg cgt cgc atc tcg cgc cgt tcc cag tcc tcg act gcg acc    3891
Leu Pro Met Arg Arg Ile Ser Arg Arg Ser Gln Ser Ser Thr Ala Thr
    1200               1205                1210
ggt atc gcg aag gtg cac acc atc gag cag cag aag ctg ctg gat gat    3939
Gly Ile Ala Lys Val His Thr Ile Glu Gln Gln Lys Leu Leu Asp Asp
1215               1220                1225                1230
gcg ttc aac gca taaacgttaa tacagcggtt gataccttga accccgccgc        3991
Ala Phe Asn Ala
accctttaga tgcgggcggg gttttgcttt gcctgcatag gcgataatat tcatatacac  4051
ccatcacgtt taagttctgc atttggatcg tgcgagcatc ccggt                  4096
<210>34
<211>1234
<212>PRT
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<400>34
Val Ser Ser Ala Ser Thr Phe Gly Gln Asn Ala Trp Leu Val Asp Glu
  1               5                  10                      15
Met Phe Gln Gln Phe Lys Lys Asp Pro Gln Ser Val Asp Lys Glu Trp
             20                  25                      30
Arg Glu Leu Phe Glu Ser Gln Gly Gly Pro Gln Ala Glu Lys Ala Thr
         35                  40                      45
Pro Ala Thr Pro Glu Ala Lys Lys Ala Ala Ser Ser Gln Ser Ser Thr
     50                  55                  60
Ser Gly Gln Ser Thr Ala Lys Ala Ala Pro Ala Ala Lys Thr Ala Pro
 65                  70                  75                  80
Ala Ser Ala Pro Ala Lys Ala Ala Pro Val Lys Gln Asn Gln Ala Ser
                 85                  90                  95
Lys Pro Ala Lys Lys Ala Lys Glu Ser Pro Leu Ser Lys Pro Ala Ala
            100                 105                 110
Met Pro Glu Pro Gly Thr Thr Pro Leu Arg Gly Ile Phe Lys Ser Ile
        115                 120                 125
Ala Lys Asn Met Asp Leu Ser Leu Glu Val Pro Thr Ala Thr Ser Val
    130                 135                 140
Arg Asp Met Pro Ala Arg Leu Met Phe Glu Asn Arg Ala Met Val Asn
145                 150                 155                 160
Asp Gln Leu Lys Arg Thr Arg Gly Gly Lys Ile Ser Phe Thr His Ile
                165                 170                 175
Ile Gly Tyr Ala Met Val Lys Ala Val Met Ala His Pro Asp Met Asn
            180                 185                 190
Asn Ser Tyr Asp Ile Val Asp Gly Lys Pro Ser Leu Val Val Pro Glu
        195                 200                 205
His Ile Asn Leu Gly Leu Ala Ile Asp Leu Pro Gln Lys Asp Gly Ser
    210                 215                 220
Arg Ala Leu Val Val Ala Ala Ile Lys Glu Thr Glu Lys Met Thr Phe
225                 230                 235                 240
Ser Gln Phe Leu Glu Ala Tyr Glu Asp Val Val Ala Arg Ser Arg Val
                245                 250                 255
Gly Lys Leu Thr Met Asp Asp Tyr Gln Gly Val Thr Ile Ser Leu Thr
            260                 265                 270
Asn Pro Gly Gly Ile Gly Thr Arg His Ser Ile Pro Arg Leu Thr Lys
        275                 280                 285
Gly Gln Gly Thr Ile Ile Gly Val Gly Ser Met Asp Tyr Pro Ala Glu
    290                 295                 300
Phe Gln Gly Ala Ser Glu Asp Arg Leu Ala Glu Leu Gly Val Gly Lys
305                 310                 315                 320
Leu Val Thr Ile Thr Ser Thr Tyr Asp His Arg Val Ile Gln Gly Ala
                325                 330                 335
Glu Ser Gly Glu Phe Leu Arg Thr Met Ser Gln Leu Leu Val Asp Asp
            340                 345                 350
Ala Phe Trp Asp His Ile Phe Glu Glu Met Asn Val Pro Tyr Thr Pro
        355                 360                 365
Met Arg Trp Ala Gln Asp Leu Pro Asn Thr Gly Val Asp Lys Asn Thr
    370                 375                 380
Arg Val Met Gln Leu Ile Glu Ala Tyr Arg Ser Arg Gly His Leu Ile
385                 390                 395                 400
Ala Asp Thr Asn Pro Leu Pro Trp Val Gln Pro Gly Met Pro Val Pro
                405                 410                 415
Asp His Arg Asp Leu Asp Ile Glu Thr His Gly Leu Thr Leu Trp Asp
            420                 425                 430
Leu Asp Arg Thr Phe His Val Gly Gly Phe Gly Gly Lys Glu Thr Met
        435                 440                 445
Thr Leu Arg Glu Val Leu Ser Arg Leu Arg Ala Ala Tyr Thr Leu Lys
    450                 455                 460
Val Gly Ser Glu Tyr Thr His Ile Leu Asp Arg Asp Glu Arg Thr Trp
465                 470                 475                 480
Leu Gln Asp Arg Leu Glu Ala Gly Met Pro Lys Pro Thr Ala Ala Glu
                485                 490                 495
Gln Lys Tyr Ile Leu Gln Lys Leu Asn Ala Ala Glu Ala Phe Glu Asn
            500                 505                 510
Phe Leu Gln Thr Lys Tyr Val Gly Gln Lys Arg Phe Ser Leu Glu Gly
        515                 520                 525
Ala Glu Ser Leu Ile Pro Leu Met Asp Ser Ala Ile Asp Thr Ala Ala
    530                 535                 540
Gly Gln Gly Leu Asp Glu Val Val Ile Gly Met Pro His Arg Gly Arg
545                 550                 555                 560
Leu Asn Val Leu Phe Asn Ile Val Gly Lys Pro Leu Ala Ser Ile Phe
                565                 570                 575
Asn Glu Phe Glu Gly Gln Met Glu Gln Gly Gln Ile Gly Gly Ser Gly
            580                 585                 590
Asp Val Lys Tyr His Leu Gly Ser Glu Gly Thr His Leu Gln Met Phe
        595                 600                 605
Gly Asp Gly Glu Ile Lys Val Ser Leu Thr Ala Asn Pro Ser His Leu
    610                 615                 620
Glu Ala Val Asn Pro Val Val Glu Gly Ile Val Arg Ala Lys Gln Asp
625                 630                 635                 640
Ile Leu Asp Lys Gly Pro Asp Gly Tyr Thr Val Val Pro Leu Leu Leu
                645                 650                 655
His Gly Asp Ala Ala Phe Ala Gly Leu Gly Ile Val Pro Glu Thr Ile
            660                 665                 670
Asn Leu Ala Ala Leu Arg Gly Tyr Asp Val Gly Gly Thr Ile His Ile
        675                 680                 685
Val Val Asn Asn Gln Ile Gly Phe Thr Thr Thr Pro Asp Ser Ser Arg
    690                 695                 700
Ser Met His Tyr Ala Thr Asp Cys Ala Lys Ala Phe Gly Cys Pro Val
705                 710                 715                 720
Phe His Val Asn Gly Asp Asp Pro Glu Ala Val Val Trp Val Gly Gln
                725                 730                 735
Leu Ala Thr Glu Tyr Arg Arg Arg Phe Gly Lys Asp Val Phe Ile Asp
            740                 745                 750
Leu Ile Cys Tyr Arg Leu Arg Gly His Asn Glu Ala Asp Asp Pro Ser
        755                 760                 765
Met Thr Gln Pro Lys Met Tyr Glu Leu Ile Thr Gly Arg Asp Ser Val
    770                 775                 780
Arg Ala Thr Tyr Thr Glu Asp Leu Leu Gly Arg Gly Asp Leu Ser Pro
785                 790                 795                 800
Glu Asp Ala Glu Ala Val Val Arg Asp Phe His Asp Gln Met Glu Ser
                805                 810                 815
Val Phe Asn Glu Val Lys Glu Ala Gly Lys Lys Gln Pro Asp Glu Gln
            820                 825                 830
Thr Gly Ile Thr Gly Ser Gln Glu Leu Thr Arg Gly Leu Asp Thr Asn
        835                 840                 845
Ile Thr Arg Glu Glu Leu Val Glu Leu Gly Gln Ala Phe Val Asn Thr
    850                 855                 860
Pro Glu Gly Phe Thr Tyr His Pro Arg Val Ala Pro Val Ala Lys Lys
865                 870                 875                 880
Arg Ala Clu Ser Val Thr Glu Gly Gly Ile Asp Trp Ala Trp Gly Glu
                885                 890                 895
Leu Ile Ala Phe Gly Ser Leu Ala Thr Ser Gly Arg Leu Val Arg Leu
            900                 905                 910
Ala Gly Glu Asp Ser Arg Arg Gly Thr Phe Thr Gln Arg His Ala Val
        915                 920                 925
Ala Ile Asp Pro Asn Thr Ala Glu Glu Phe Asn Pro Leu His Glu Leu
    930                 935                 940
Ala Gln Ala Lys Gly Gly Gly Lys Phe Leu Val Tyr Asn Ser Ala Leu
945                 950                 955                 960
Thr Glu Tyr Ala Gly Met Gly Phe Glu Tyr Gly Tyr Ser Val Gly Asn
                965                 970                 975
Pro Asp Ala Val Val Ser Trp Glu Ala Gln Phe Gly Asp Phe Ala Asn
            980                 985                 990
Gly Ala Gln Thr Ile Ile Asp Glu Tyr Ile Ser Ser Gly Glu Ala Lys
        995                1000                1005
Trp Gly Gln Thr Ser Ser Val Ile Leu Leu Leu Pro His Gly Tyr Glu
   1010                1015                1020
Gly Gln Gly Pro Asp His Ser Ser Ala Arg Ile Glu Arg Phe Leu Gln
025                1030                1035                1040
Leu Cys Ala Glu Gly Ser Met Thr Ile Ala Gln Pro Thr Thr Pro Ala
               1045                1050                1055
Asn Tyr Phe His Leu Leu Arg Arg His Ala Leu Gly Lys Met Lys Arg
           1060                1065                1070
Pro Leu Val Val Phe Thr Pro Lys Ser Met Leu Arg Asn Lys Ala Ala
       1075                1080                1085
Thr Ser Ala Pro Glu Glu Phe Thr Glu Val Thr Arg Phe Lys Ser Val
   1090                1095                1100
Ile Asp Asp Pro Asn Val Ala Asp Ala Ser Lys Val Lys Lys Ile Met
105                1110                1115                1120
Leu Cys Ser Gly Lys Ile Tyr Tyr Glu Leu Ala Lys Arg Lys Glu Lys
               1125                1130                1135
Asp Asn Arg Asp Asp Ile Ala Ile Val Arg Ile Glu Met Leu His Pro
           1140                1145                1150
Ile Pro Phe Asn Arg Leu Arg Asp Ala Phe Asp Gly Tyr Pro Asn Ala
       1155                1160                1165
Glu Glu Ile Leu Phe Val Gln Asp Glu Pro Ala Asn Gln Gly Ala Trp
   1170                1175                1180
Pro Phe Tyr Gln Glu His Leu Pro Asn Leu Ile Glu Gly Met Leu Pro
185                1190                1195                1200
Met Arg Arg Ile Ser Arg Arg Ser Gln Ser Set Thr Ala Thr Gly Ile
               1205                1210                1215
Ala Lys Val His Thr Ile Glu Gln Gln Lys Leu Leu Asp Asp Ala Phe
           1220                1225                1230
Ash Ala
<210>35
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：aceA的引物
<400>35
cctctaccca gcgaactccg                          20
<210>36
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：aceA的引物
<400>36
ctgccttgaa ctcacggttc                          20
<210>37
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：accBC的引物
<400>37
catccacccc ggctacggct                                20
<210>38
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：accBC的引物
<400>38
cggtgactgg gtgttccacc                               20
<210>39
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：dtsR1的引物
<400>39
acggcccagc cctgaccgac                              20
<210>40
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：dtsR1的引物
<400>40
agcagcgccc atgacggcga                             20
<210>41
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：dtsR2的引物
<400>41
acggcccagc cctgaccgac                                  20
<210>42
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：dtsR2的引物
<400>42
agcagcgccc atgacggcga                                  20
<210>43
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：pfk的引物
<400>43
cgtcatccga ggaatcgtcc                                 20
<210>44
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：pfk的引物
<400>44
cgtggcggcc catgacctcc                                 21
<210>45
<211>17
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：scrB的引物
<220>
<221>不确定
<222>(3)
<223>n＝a or g or c or t
<400>45
ggncghytba aygaycc                                    17
<210>46
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：scrB的引物
<220>
<221>不确定
<222>(18)
<223>n＝a or g or c or t
<400>46
ggrcaytccc acatrtancc                                20
<210>47
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：gluABCD的引物
<400>47
ccatccggat ccggcaagtc                                20
<210>48
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：gluABCD的引物
<400>48
aatcccatct cgtgggtaac                                      20
<210>49
<211>23
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：pdhA的引物
<400>49
actgtgtcca tgggtcttgg ccc                                  23
<210>50
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：pdhA的引物
<400>50
 cgctggaatccgaacatcga                                      20
<210>51
<211>26
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：pc的引物
<400>51
 ggcgcaacct acgacgttgc aatgcg                              26
<210>52
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：pc的引物
<400>52
tggccgcctg ggatctcgtg                              20
<210>53
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：ppc的引物
<400>53
ggttcctgga ttggtggaga                             20
<210>54
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：ppc的引物
<400>54
 ccgccatcct tgttggaatc                            20
<210>55
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：acn的引物
<220>
<221>不确定
<222>(3，6，9)
<223>n＝次黄苷
<400>55
 gtnggnacng aytcscatac                           20
<210>56
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：acn的引物
<220>
<221>不确定
<222>(3，9，18)
<223>n＝次黄苷
<400>56
gcnggagana tgtgrtcngt                            20
<210>57
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：icd的引物
<400>57
gacatttcac tcgctggacg                            20
<210>58
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：icd的引物
<400>58
ccgtactctt cagccttctg                             20
<210>59
<211>17
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：lpd的引物
<400>59
atcatcgcaa ccggttc                               17
<210>60
<211>19
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：lpd的引物
<400>60
cgtcaccgat ggcgtaaat                              19
<210>61
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：odhA的引物
<400>61
acaccgtggt cgcctcaacg                              20
<210>62
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：odhA的引物
<400>62
tgctaacccg tcccacctgg                              20
<210>63
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：lpd筛选PCR的引物
<400>63
tacgaggagc agatcctcaa                                 20
<210>64
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：lpd筛选PCR的引物
<400>64
ttgacgccgg tgttctccag                                20
<210>65
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：acn LA克隆的引物
<400>65
ggtgaagcta agtagttagc                               20
<210>66
<211>18
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：acn LA克隆的引物
<400>66
 agctactaaa cctgcacc                               18
<210>67
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：icd LA克隆的引物
<400>67
ccgtactctt cagccttctg                              67
<210>68
<211>18
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：icd LA克隆的引物
<400>68
tcgtccttgt tccacatc                                18
<210>69
<211>17
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：lpd LA克隆的引物
<400>69
 atcatcgcaa ccggt tc                               17
<210>70
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：lpd LA克隆的引物
<400>70
 tacgaggagc agatcctcaa                            20
<210>71
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：acn LA克隆的引物
<400>71
gctaactact tagcttcacc                                  20
<210>72
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：acn LA克隆的引物
<400>72
gaaccaggaa ctattgaacc                                 20
<210>73
<211>18
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：icd LA克隆的引物
<400>73
tccgatgtca tcatcgac                                  18
<210>74
<211>18
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：icd LA克隆的引物
<400>74
atgtggaaca aggacgac                                  18
<210>75
<211>35
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：odhA LA克隆的引物
<400>75
gtacatattg tcgttagaac gcgtaatacg actca              35
<210>76
<211>35
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：odhA LA克隆的引物
<400>76
cgttagaacg cgtaatacga ctcactatag ggaga              35
<210>77
<211>32
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：gdh基因扩增引物
<400>77
 gcgcctgcag gtccgagggt gtgcgttcgg ca                32
<210>78
<211>32
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：gdh基因扩增引物
<400>78
 gcgcctgcag ccaccagga tgccctcaacc ag                32
<210>79
<211>1344
<212>DNA
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1341)
<400>79
atg act gta gat gag cag gtc tcc aac tac tac gac atg ctg ctg aag    48
Met Thr Val Asp Glu Gln Val Ser Asn Tyr Tyr Asp Met Leu Leu Lys
  1               5                  10                  15
cgc aac gcc ggg gaa cct gag ttc cac cag gct gtc gcg gag gtt ctc    96
Arg Asn Ala Gly Glu Pro Glu Phe His Gln Ala Val Ala Glu Val Leu
             20                  25                  30
gaa tct ctg aag atc gtc ctg gag aag gac ccg cac tac gcc gac tac    144
Glu Ser Leu Lys Ile Val Leu Glu Lys Asp Pro His Tyr Ala Asp Tyr
         35                  40                  45
ggt ctg atc cag cgt ctc tgc gaa ccg gaa cgc cag ctg atc ttc cgt    192
Gly Leu Ile Gln Arg Leu Cys Glu Pro Glu Arg Gln Leu Ile Phe Arg
     50                  55                  60
gtg ccc tgg gtg gat gac aac ggt cag gtg cac gtc aac cgt ggt ttc    240
Val Pro Trp Val Asp Asp Asn Gly Gln Val His Val Asn Arg Gly Phe
 65                  70                  75                  80
cgt gtc cag ttc aac tcc gca ctc ggc ccg tac aag ggt ggt ctg cgt    288
Arg Val Gln Phe Asn Ser Ala Leu Gly Pro Tyr Lys Gly Gly Leu Arg
                 85                  90                  95
ttc cac ccc tcc gtc aac ctc ggc atc gtc aag ttc ctc ggc ttc gag    336
Phe His Pro Ser Val Asn Leu Gly Ile Val Lys Phe Leu Gly Phe Glu
            100                 105                 110
cag atc ttc aag aac tcc ctc acc ggt ctg ccg atc ggt ggc ggc aag    384
Gln Ile Phe Lys Asn Ser Leu Thr Gly Leu Pro Ile Gly Gly Gly Lys
        115                 120                 125
ggt ggt tcc gac ttc gac ccg aag ggc aag tcc gag ctg gag atc atg    432
Gly Gly Ser Asp Phe Asp Pro Lys Gly Lys Ser Glu Leu Glu Ile Met
    130                 135                 140
cgc ttc tgc cag tcc ttc atg acc gag ctg cac cgc cac atc ggc gag    480
Arg Phe Cys Gln Ser Phe Met Thr Glu Leu His Arg His Ile Gly Glu
145                 150                 155                 160
tac cgg gat gtc ccg gcc ggt gac atc gga gtc ggt ggc cgc gag atc    528
Tyr Arg Asp Val Pro Ala Gly Asp Ile Gly Val Gly Gly Arg Glu Ile
                165                 170                 175
ggt tac ctc ttc ggc cac tac cgc cgt ctg gcc aac cag cac gag tcc    576
Gly Tyr Leu Phe Gly His Tyr Arg Arg Leu Ala Asn Gln His Glu Ser
            180                 185                 190
ggt gtg ctc acc ggc aag ggc ctg acc tgg ggt ggt tcc ctg gtc cgc    624
Gly Val Leu Thr Gly Lys Gly Leu Thr Trp Gly Gly Ser Leu Val Arg
        195                 200                 205
acc gag gcc acc ggc ttc ggc acc gtc tac ttc gtc cag gag atg atc    672
Thr Glu Ala Thr Gly Phe Gly Thr Val Tyr Phe Val Gln Glu Met Ile
    210                 215                 220
aag gcg gaa ggg gag acc ctc gag ggc aag aag gtc atc gtc tcc ggt    720
Lys Ala Glu Gly Glu Thr Leu Glu Gly Lys Lys Val Ile Val Ser Gly
225                 230                 235                 240
tcc ggc aac gtg gcc acc tac gcc atc cag aag gtg cag gaa ctg ggt    768
Ser Gly Asn Val Ala Thr Tyr Ala Ile Gln Lys Val Gln Glu Leu Gly
                245                 250                 255
gcg gtt gtg gtc ggc ttc tcc gac tcc agc ggc tgg gtc tcc acc ccg    816
Ala Val Val Val Gly Phe Ser Asp Ser Ser Gly Trp Val Ser Thr Pro
            260                 265                 270
aac ggt gtt gac gtg gcc aag ctg cgt gag atc aag gag gtc cgt cgt    864
Asn Gly Val Asp Val Ala Lys Leu Arg Glu Ile Lys Glu Val Arg Arg
        275                 280                 285
gca cgc gtg tcc tcc tac gcc gac gag gtg gag ggt gcg gag tac cac    912
Ala Arg Val Ser Ser Tyr Ala Asp Glu Val Glu Gly Ala Glu Tyr His
    290                 295                 300
acc gac ggc tcc atc tgg gat ctg acc gcc gac atc gcg ctg ccc tgc    960
Thr Asp Gly Ser Ile Trp Asp Leu Thr Ala Asp Ile Ala Leu Pro Cys
305                 310                 315                 320
gcc acc cag aac gaa ctg gac ggc gac aac gcc cgc acc ctc gcg gac    1008
Ala Thr Gln Asn Glu Leu Asp Gly Asp Asn Ala Arg Thr Leu Ala Asp
                325                 330                 335
aac ggc tgc cgc ttc gtg gcg gag ggc gcc aac atg ccc tcc acc ccc    1056
Asn Gly Cys Arg Phe Val Ala Glu Gly Ala Asn Met Pro Ser Thr Pro
            340                 345                 350
gag gcc atc gac gtc ttc cgt gag cgt ggt gtt ctc ttc ggg ccg ggc    1104
Glu Ala Ile Asp Val Phe Arg Glu Arg Gly Val Leu Phe Gly Pro Gly
        355                 360                 365
aag gct gcc aac gcc ggt ggc gtg gcc acc tcc gcc ctg gag atg cag    1152
Lys Ala Ala Asn Ala Gly Gly Val Ala Thr Ser Ala Leu Glu Met Gln
    370                 375                 380
cag aac gcc tcc cgt gat tcc tgg agc ttc gag tac acc gat gag cgt    1200
Gln Asn Ala Ser Arg Asp Ser Trp Ser Phe Glu Tyr Thr Asp Glu Arg
385                 390                 395                 400
ctc cac cgc atc atg aag aac atc ttc aag tcc tgc gcc gat acc gcc    1248
Leu His Arg Ile Met Lys Asn Ile Phe Lys Ser Cys Ala Asp Thr Ala
                405                 410                 415
aag gag tac ggc cac gag aag aac tac gtg gtc ggt gcg aac atc gcc    1296
Lys Glu Tyr Gly His Glu Lys Asn Tyr Val Val Gly Ala Asn Ile Ala
            420                 425                 430
gga ttc aag aag gtc gct gac gcc atg ctc gcc cag ggt gtc atc taa    1344
Gly Phe Lys Lys Val Ala Asp Ala Met Leu Ala Gln Gly Val Ile
        435                 440                 445
<210>80
<211>447
<212>PRT
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<400>80
Met Thr Val Asp Glu Gln Val Ser Asn Tyr Tyr Asp Met Leu Leu Lys
  1               5                  10                  15
Arg Asn Ala Gly Glu Pro Glu Phe His Gln Ala Val Ala Glu Val Leu
             20                  25                  30
Glu Ser Leu Lys Ile Val Leu Glu Lys Asp Pro His Tyr Ala Asp Tyr
         35                  40                  45
Gly Leu Ile Gln Arg Leu Cys Glu Pro Glu Arg Gln Leu Ile Phe Arg
     50                  55                  60
Val Pro Trp Val Asp Asp Asn Gly Gln Val His Val Asn Arg Gly Phe
 65                  70                  75                  80
Arg Val Gln Phe Asn Ser Ala Leu Gly Pro Tyr Lys Gly Gly Leu Arg
                 85                  90                  95
Phe His Pro Ser Val Asn Leu Gly Ile Val Lys Phe Leu Gly Phe Glu
            100                 105                 110
Gln Ile Phe Lys Asn Ser Leu Thr Gly Leu Pro Ile Gly Gly Gly Lys
        115                 120                 125
Gly Gly Ser Asp Phe Asp Pro Lys Gly Lys Ser Glu Leu Glu Ile Met
    130                 135                 140
Arg Phe Cys Gln Ser Phe Met Thr Glu Leu His Arg His Ile Gly Glu
145                 150                 155                 160
Tyr Arg Asp Val Pro Ala Gly Asp Ile Gly Val Gly Gly Arg Glu Ile
                165                 170                 175
Gly Tyr Leu Phe Gly His Tyr Arg Arg Leu Ala Asn Gln His Glu Ser
            180                 185                 190
Gly Val Leu Thr Gly Lys Gly Leu Thr Trp Gly Gly Ser Leu Val Arg
        195                 200                 205
Thr Glu Ala Thr Gly Phe Gly Thr Val Tyr Phe Val Gln Glu Met Ile
    210                 215                 220
Lys Ala Glu Gly Glu Thr Leu Glu Gly Lys Lys Val Ile Val Ser Gly
225                 230                 235                 240
Ser Gly Asn Val Ala Thr Tyr Ala Ile Gln Lys Val Gln Glu Leu Gly
                245                 250                 255
Ala Val Val Val Gly Phe Ser Asp Ser Ser Gly Trp Val Ser Thr Pro
            260                 265                 270
Asn Gly Val Asp Val Ala Lys Leu Arg Glu Ile Lys Glu Val Arg Arg
        275                 280                 285
Ala Arg Val Ser Ser Tyr Ala Asp Glu Mal Glu Gly Ala Glu Tyr His
    290                 295                 300
Thr Asp Gly Ser Ile Trp Asp Leu Thr Ala Asp Ile Ala Leu Pro Cys
305                 310                 315                 320
Ala Thr Gln Asn Glu Leu Asp Gly Asp Asn Ala Arg Thr Leu Ala Asp
                325                 330                 335
Asn Gly Cys Arg Phe Val Ala Glu Gly Ala Asn Met Pro Ser Thr Pro
            340                 345                 350
Glu Ala Ile Asp Val Phe Arg Glu Arg Gly Val Leu Phe Gly Pro Gly
        355                 360                 365
Lys Ala Ala Asn Ala Gly Gly Val Ala Thr Ser Ala Leu Glu Met Gln
    370                 375                 380
Gln Asn Ala Ser Arg Asp Ser Trp Ser Phe Glu Tyr Thr Asp Glu Arg
385                 390                 395                400
Leu His Arg Ile Met Lys Asn Ile Phe Lys Ser Cys Ala Asp Thr Ala
                405                 410                 415
Lys Glu Tyr Gly His Glu Lys Asn Tyr ValVal Gly Ala Asn Ile Ala
            420                 425                430
Gly Phe Lys Lys Val Ala Asp Ala Met Leu Ala Gln Gly Val Ile
        435                 440                 445
<210>81
<211>1344
<212>DNA
<213>乳发酵短杆菌(Brevibacterium lactofermentum)
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1341)
<400>81
atg aca gtt gat gag cag gtc tct aac tat tac gac atg ctt ctg aag    48
Met Thr Val Asp Glu Gln Val Ser Asn Tyr Tyr Asp Met Leu Leu Lys
  1               5                  10                  15
cgc aat gct ggc gag cct gaa ttt cac cag gca gtg gca gag gtt ttg    96
Arg Asn Ala Gly Glu Pro Glu Phe His Gln Ala Val Ala Glu Val Leu
             20                  25                  30
gaa tct ttg aag atc gtc ctg gaa aag gac cct cat tac gct gat tac    144
Glu Ser Leu Lys Ile Val Leu Glu Lys Asp Pro His Tyr Ala Asp Tyr
         35                  40                  45
ggt ctc atc cag cgc ctg tgc gag cct gag cgt cag ctc atc ttc cgt  192
Gly Leu Ile Gln Arg Leu Cys Glu Pro Glu Arg Gln Leu Ile Phe Arg
     50                  55                  60
gtg cct tgg gtt gat gac cag ggc cag gtc cac gtc aac cgt ggt ttc    240
Val Pro Trp Val Asp Asp Gln Gly Gln Val His Val Asn Arg Gly Phe
65                   70                  75                  80
cgc gtg cag ttc aac tct gca ctt gga cca tac aag ggc ggc ctg cgc    288
Arg Val Gln Phe Asn Ser Ala Leu Gly Pro Tyr Lys Gly Gly Leu Arg
                 85                  90                  95
ttc cac cca tct gta aac ctg ggc att gtg aag ttc ctg ggc ttt gag    336
Phe His Pro Ser Val Asn Leu Gly Ile Val Lys Phe Leu Gly Phe Glu
            100                 105                 110
cag atc ttt aaa aac tcc cta acc ggc ctg cca atc ggt ggt ggc aag    384
Gln Ile Phe Lys Asn Ser Leu Thr Gly Leu Pro Ile Gly Gly Gly Lys
        115                 120                 125
ggt gga tcc gac ttc gac cct aag ggc aag tcc gat ctg gaa atc atg    432
Gly Gly Ser Asp Phe Asp Pro Lys Gly Lys Ser Asp Leu Glu Ile Met
    130                 135                 140
cgt ttc tgc cag tcc ttc atg acc gag ctg cac cgc cac atc ggt gag    480
Arg Phe Cys Gln Ser Phe Met Thr Glu Leu His Arg His Ile Gly Glu
145                 150                 155                 160
tac cgc gac gtt cct gca ggt gac atc gga gtt ggt ggc cgc gag atc    528
Tyr Arg Asp Val Pro Ala Gly Asp Ile Gly Val Gly Gly Arg Glu Ile
                165                 170                 175
ggt tac ctg ttt ggc cac tac cgt cgc atg gct aac cag cac gag tcc    576
Gly Tyr Leu Phe Gly His Tyr Arg Arg Met Ala Asn Gln His Glu Ser
            180                 185                 190
ggc gtt ttg ace ggt aag ggc ctg acc tgg ggt gga tcc ctg gtc cgc    624
Gly Val Leu Thr Gly Lys Gly Leu Thr Trp Gly Gly Ser Leu Val Arg
        195                 200                 205
acc gag gca act ggc tac ggc tgc gtt tac ttc gtg agt gaa atg atc    672
Thr Glu Ala Thr Gly Tyr Gly Cys Val Tyr Phe Val Ser Glu Met Ile
    210                 215                 220
aag gct aag ggc gag agc atc agc ggc cag aag atc atc gtt tcc ggt    720
Lys Ala Lys Gly Glu Ser Ile Ser Gly Gln Lys Ile Ile Val Ser Gly
225                 230                 235                 240
tcc ggc aac gta gca acc tac gcg att gaa aag gct cag gaa ctc ggc    768
Ser Gly Asn Val Ala Thr Tyr Ala Ile Glu Lys Ala Gln Glu Leu Gly
                245                 250                 255
gca acc gtt att ggt ttc tcc gat tcc agc ggt tgg gtt cat acc cct    816
Ala Thr Val Ile Gly Phe Ser Asp Ser Ser Gly Trp Val His Thr Pro
            260                 265                 270
aac ggc gtt gac gtg gct aag ctc cgc gaa atc aag gaa gtt cgc cgc    864
Asn Gly Val Asp Val Ala Lys Leu Arg Glu Ile Lys Glu Val Arg Arg
        275                 280                 285
gca cgc gta tcc gtg tac gcc gac gaa att gaa ggc gca acc tac cac    912
Ala Arg Val Ser Val Tyr Ala Asp Glu Ile Glu Gly Ala Thr Tyr His
    290                 295                 300
acc gac ggt tcc atc tgg gat ctc aag tgc gat atc gct ctt cct tgt  960
Thr Asp Gly Ser Ile Trp Asp Leu Lys Cys Asp Ile Ala Leu Pro Cys
305                 310                 315                 320
gca act cag aac gag ctc aac ggc gag aac gct aag act ctt gca gac  1008
Ala Thr Gln Asn Glu Leu Asn Gly Glu Asn Ala Lys Thr Leu Ala Asp
                325                 330                 335
aac ggc tgc cgt ttc gtt gct gaa ggc gcg aac atg cct tcc acc cct  1056
Asn Gly Cys Arg Phe Val Ala Glu Gly Ala Asn Met Pro Ser Thr Pro
            340                 345                 350
gag gct gtt gag gtc ttc cgt gag cgc gac ate cgc ttc gga cca ggc  1104
Glu Ala Val Glu Val Phe Arg Glu Arg Asp Ile Arg Phe Gly Pro Gly
        355                 360                 365
aag gca gct aac gct ggt ggc gtt gca acc tcc gct ctg gag atg cag  1152
Lys Ala Ala Asn Ala Gly Gly Val Ala Thr Ser Ala Leu Glu Met Gln
    370                 375                 380
cag aac gct tcg cgc gat tcc tgg agc ttc gag tac acc gac gag cgc  1200
Gln Asn Ala Ser Arg Asp Ser Trp Ser Phe Glu Tyr Thr Asp Glu Arg
385                 390                 395                 400
ctc cag gtg atc atg aag aac atc ttc aag acc tgt gca gag acc gca  1248
Leu Gln Val Ile Met Lys Asn Ile Phe Lys Thr Cys Ala Glu Thr Ala
                405                 410                 415
gca gag tat gga cac gag aac gat tac gtt gtc ggc gct aac att gct  1296
Ala Glu Tyr Gly His Glu Asn Asp Tyr Val Val Gly Ala Asn Ile Ala
            420                 425                 430
ggc ttt aag aag gta gct gac gcg atg ctg gca cag ggc gtc atc taa  1344
Gly Phe Lys Lys Val Ala Asp Ala Met Leu Ala Gln Gly Val Ile
        435                 440                 445
<210>82
<211>447
<212>PRT
<213>乳发酵短杆菌(Brevibacterium lactofermentum)
<400>82
Met Thr Val Asp Glu Gln Val Ser Asn Tyr Tyr Asp Met Leu Leu Lys
  1               5                  10                  15
Arg Asn Ala Gly Glu Pro Glu Phe His Gln Ala Val Ala Glu Val Leu
             20                  25                  30
Glu Ser Leu Lys Ile Val Leu Glu Lys Asp Pro His Tyr Ala Asp Tyr
         35                  40                  45
Gly Leu Ile Gln Arg Leu Cys Glu Pro Glu Arg Gln Leu Ile Phe Arg
     50                  55                  60
Val Pro Trp Val Asp Asp Gln Gly Gln Val His Val Asn Arg Gly Phe
65                   70                  75                  80
Arg Val Gln Phe Asn Ser Ala Leu Gly Pro Tyr Lys Gly Gly Leu Arg
                 85                  90                  95
Phe His Pro Ser Val Asn Leu Gly Ile Val Lys Phe Leu Gly Phe Glu
            100                 105                 110
Gln Ile Phe Lys Asn Ser Leu Thr Gly Leu Pro Ile Gly Gly Gly Lys
        115                 120                 125
Gly Gly Ser Asp Phe Asp Pro Lys Gly Lys Ser Asp Leu Glu Ile Met
    130                 135                 140
Arg Phe Cys Gln Ser Phe Met Thr Glu Leu His Arg His Ile Gly Glu
145                 150                 155                 160
Tyr Arg Asp Val Pro Ala Gly Asp Ile Gly Val Gly Gly Arg Glu Ile
                165                 170                 175
Gly Tyr Leu Phe Gly His Tyr Arg Arg Met Ala Asn Gln His Glu Ser
            180                 185                 190
Gly Val Leu Thr Gly Lys Gly Leu Thr Trp Gly Gly Ser Leu Val Arg
        195                 200                 205
Thr Glu Ala Thr Gly Tyr Gly Cys Val Tyr Phe Val Ser Glu Met Ile
    210                 215                 220
Lys Ala Lys Gly Glu Ser Ile Ser Gly Gln Lys Ile Ile Val Ser Gly
225                 230                 235                 240
Ser Gly Asn Val Ala Thr Tyr Ala Ile Glu Lys Ala Gln Glu Leu Gly
                245                 250                 255
Ala Thr Val Ile Gly Phe Ser Asp Ser Ser Gly Trp Val His Thr Pro
            260                 265                 270
Asn Gly Val Asp Val Ala Lys Leu Arg Glu Ile Lys Glu Val Arg Arg
        275                 280                 285
Ala Arg Val Ser Val Tyr Ala Asp Glu Ile Glu Gly Ala Thr Tyr His
    290                 295                 300
Thr Asp Gly Ser Ile Trp Asp Leu Lys Cys Asp Ile Ala Leu Pro Cys
305                 310                 315                 320
Ala Thr Gln Asn Glu Leu Asn Gly Glu Asn Ala Lys Thr Leu Ala Asp
                325                 330                 335
Asn Gly Cys Arg Phe Val Ala Glu Gly Ala Asn Met Pro Ser Thr Pro
            340                 345                 350
Glu Ala Val Glu Val Phe Arg Glu Arg Asp Ile Arg Phe Gly Pro Gly
        355                 360                 365
Lys Ala Ala Asn Ala Gly Gly Val Ala Thr Ser Ala Leu Glu Met Gln
    370                 375                 380
Gln Asn Ala Ser Arg Asp Ser Trp Ser Phe Glu Tyr Thr Asp Glu Arg
385                 390                 395                 400
Leu Gln Val Ile Met Lys Asn Ile Phe Lys Thr Cys Ala Glu Thr Ala
                405                 410                 415
Ala Glu Tyr Gly His Glu Asn Asp Tyr Val Val Gly Ala Asn Ile Ala
            420                 425                 430
Gly Phe Lys Lys Val Ala Asp Ala Met Leu Ala Gln Gly Val Ile
        435                 440                 445
<210>83
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：gltA基因扩增引物
<220>
<221>misc_feature
<222>(9)
<223>n＝次黄苷
<400>83
 aagatcacnt acatcgaygg                             20
<210>84
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：gltA基因扩增引物
<400>84
tagaagtcta cgttcgggta                              20
<210>85
<211>21
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：gltA基因扩增引物
<400>85
gtcgacaata gcctgaatct g                            21
<210>86
<211>21
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：gltA基因扩增引物
<400>86
cggtggaacc ggtgctgaca t                              21
<210>87
<211>21
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：gltA基因扩增引物
<400>87
 gggtgggga attcggtcatg t                             21
<210>88
<211>21
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：gltA基因扩增引物
<400>88
 tgtcgtagcc gcggtagcgc a                            21
<210>89
<211>1293
<212>DNA
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1290)
<400>89
gtg gct tct gat aac aac aag gct gta ctg cac tac cct ggc ggc gaa    48
Val Ala Ser Asp Asn Asn Lys Ala Val Leu His Tyr Pro Gly Gly Glu
  1               5                  10                      15
ttc gag atg ggc atc aag cag gcc acc gag ggt aac tcc ggt gtc atc    96
Phe Glu Met Gly Ile Lys Gln Ala Thr Glu Gly Asn Ser Gly Val Ile
                 20              25                      30
ctg ggt aag atg ctg tcg gaa acc ggt ctg gtc acc ttc gac ccc ggt    144
Leu Gly Lys Met Leu Ser Glu Thr Gly Leu Val Thr Phe Asp Pro Gly
             35              40                      45
tat gtc agc acc ggt tcc acc gaa tcc aag atc acc tac atc gat ggt    192
Tyr Val Ser Thr Gly Ser Thr Glu Ser Lys Ile Thr Tyr Ile Asp Gly
         50             55                       60
gat gca ggc atc ctg cgc tac cgc ggc tac gac att gcg gat ctg gcc    240
Asp Ala Gly Ile Leu Arg Tyr Arg Gly Tyr Asp Ile Ala Asp Leu Ala
 65                  70                      75              80
gaa aat gcc acc ttc aat gag gtc tcc tac ctc ctg atc aag ggt gag    288
Glu Asn Ala Thr Phe Asn Glu Val Ser Tyr Leu Leu Ile Lys Gly Glu
                 85                      90              95
ctc ccg acc ccg gaa gag ctc cac aag ttc aac gac gag att cgt cac    336
Leu Pro Thr Pro Glu Glu Leu His Lys Phe Asn Asp Glu Ile Arg His
            100                     105             110
cac acc ctg ctg gac gag gac ttc aag tcc cag ttc aat gtc ttc cct    384
His Thr Leu Leu Asp Glu Asp Phe Lys Ser Gln Phe Asn Val Phe Pro
        115                     120             125
cgc gat gcc cac ccg atg gcc acc ctg gcc tcc tcg gtt aac atc ctc    432
Arg Asp Ala His Pro Met Ala Thr Leu Ala Ser Ser Val Asn Ile Leu
    130                     135             140
tcc acc tac tac cag gat cag ctg gat ccc ctg gat gag gct cag ctg    480
Ser Thr Tyr Tyr Gln Asp Gln Leu Asp Pro Leu Asp Glu Ala Gln Leu
145                     150             155                 160
gac aag gca acc gtc cgc ctg atg gcg aag gtt ccg atg ctg gct gca    528
Asp Lys Ala Thr Val Arg Leu Met Ala Lys Val Pro Met Leu Ala Ala
                    165             170                 175
tac gca cac cgt gcc cgc aag ggt gcg ccg tac atg tac ccg gac aac    576
Tyr Ala His Arg Ala Arg Lys Gly Ala Pro Tyr Met Tyr Pro Asp Asn
                180             185                 190
tcc ctc aat gcc cgt gag aac ttc ctg cgc atg atg ttc ggt tac ccg    624
Ser Leu Asn Ala Arg Glu Asn Phe Leu Arg Met Met Phe Gly Tyr Pro
            195             200                 205
acc gag ccg tac gag gtt gat ccg atc atg gtc aaa gcc ctc gac aag    672
Thr Glu Pro Tyr Glu Val Asp Pro Ile Met Val Lys Ala Leu Asp Lys
    210                 215                 220
ctg ctc atc ctg cac gca gac cac gag cag aac tgc tec acc tcc act    720
Leu Leu Ile Leu His Ala Asp His Glu Gln Asn Cys Ser Thr Ser Thr
225                 230                 235                 240
gtc cgc atg atc ggc tcc gcg cag gcg aac atg ttc gtc tcc atc gcc    768
Val Arg Met Ile Gly Ser Ala Gln Ala Asn Met Phe Val Ser Ile Ala
                245                 250                 255
ggc ggc atc aac gca ctc tcc ggc ccg ctg cac ggt ggc gcc aac cag    816
Gly Gly Ile Asn Ala Leu Ser Gly Pro Leu His Gly Gly Ala Asn Gln
            260                 265                 270
gct gtc ctc gag atg ctc gag gag atc gca gcc aac ggc ggc gac gca    864
Ala Val Leu Glu Met Leu Glu Glu Ile Ala Ala Asn Gly Gly Asp Ala
        275                 280                 285
acc gac ttc atg aac cgc gtg aag aac aag gag aag ggt gtc cgc ctc    912
Thr Asp Phe Met Asn Arg Val Lys Asn Lys Glu Lys Gly Val Arg Leu
    290                 295                 300
atg ggc ttc gga cac cgc gtc tac aag aac tac gat ccg cgt gca gcc    960
Met Gly Phe Gly His Arg Val Tyr Lys Asn Tyr Asp Pro Arg Ala Ala
305                 310                 315                 320
atc gtc aag gac acc gcc cac gag atc ctc gag cac ctc ggt ggc gac    1008
Ile Val Lys Asp Thr Ala His Glu Ile Leu Glu His Leu Gly Gly Asp
                325                 330                 335
cca ctg ctg gat ctg gct ctc aag ctg gaa gaa atc gca ctc aac gac    1056
Pro Leu Leu Asp Leu Ala Leu Lys Leu Glu Glu Ile Ala Leu Asn Asp
            340                 345                 350
gat tac ttc atc tcc cgc aag ctg tac ccg aac gtg gac ttc tac acc    1104
Asp Tyr Phe Ile Ser Arg Lys Leu Tyr Pro Asn Val Asp Phe Tyr Thr
        355                 360                 365
ggc ctg atc tac cgc gcc atg ggc ttc ccg acg gac ttc ttc acc gtc    1152
Gly Leu Ile Tyr Arg Ala Met Gly Phe Pro Thr Asp Phe Phe Thr Val
    370                 375                 380
ctg ttc gcc atc ggc cgc ctc ccg ggc tgg atc gcc cac tac cgc gag    1200
Leu Phe Ala Ile Gly Arg Leu Pro Gly Trp Ile Ala His Tyr Arg Glu
385                 390                 395                 400
cag ctc gcc gat ccg ggc gcc aag atc aac cgt cct cgc cag atc tac    1248
Gln Leu Ala Asp Pro Gly Ala Lys Ile Asn Arg Pro Arg Gln Ile Tyr
                405                 410                 415
acc ggt gag acc gca cgc aag atc atc ccc cgc gaa gag cgc tag        1293
Thr Gly Glu Thr Ala Arg Lys Ile Ile Pro Arg Glu Glu Arg
            420                 425                 430
<210>90
<211>430
<212>PRT
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<400>90
Val Ala Ser Asp Asn Asn Lys Ala Val Leu His Tyr Pro Gly Gly Glu
  1               5                  10                  15
Phe Glu Met Gly Ile Lys Gln Ala Thr Glu Gly Asn Ser Gly Val Ile
             20                  25                  30
Leu Gly Lys Met Leu Ser Glu Thr Gly Leu Val Thr Phe Asp Pro Gly
         35                  40                  45
Tyr Val Ser Thr Gly Ser Thr Glu Ser Lys Ile Thr Tyr Ile Asp Gly
     50                  55                  60
Asp Ala Gly Ile Leu Arg Tyr Arg Gly Tyr Asp Ile Ala Asp Leu Ala
 65                  70                  75                  80
Glu Asn Ala Thr Phe Asn Glu Val Ser Tyr Leu Leu Ile Lys Gly Glu
                 85                  90                  95
Leu Pro Thr Pro Glu Glu Leu His Lys Phe Asn Asp Glu Ile Arg His
            100                 105                 110
His Thr Leu Leu Asp Glu Asp Phe Lys Ser Gln Phe Asn Val Phe Pro
        115                 120                 125
Arg Asp Ala His Pro Met Ala Thr Leu Ala Ser Ser Val Asn Ile Leu
    130                 135                 140
Ser Thr Tyr Tyr Gln Asp Gln Leu Asp Pro Leu Asp Glu Ala Gln Leu
145                 150                 155                 160
Asp Lys Ala Thr Val Arg Leu Met Ala Lys Val Pro Met Leu Ala Ala
                165                 170                 175
Tyr Ala His Arg Ala Arg Lys Gly Ala Pro Tyr Met Tyr Pro Asp Asn
            180                 185                 190
Ser Leu Asn Ala Arg Glu Asn Phe Leu Arg Met Met Phe Gly Tyr Pro
        195                 200                 205
Thr Glu Pro Tyr Glu Val Asp Pro Ile Met Val Lys Ala Leu Asp Lys
    210                 215                 220
Leu Leu Ile Leu His Ala Asp His Glu Gln Asn Cys Ser Thr Ser Thr
225                 230                 235                 240
Val Arg Met Ile Gly Ser Ala Gln Ala Asn Met Phe Val Ser Ile Ala
                245                 250                 255
Gly Gly Ile Asn Ala Leu Ser Gly Pro Leu His Gly Gly Ala Asn Gln
            260                 265                 270
Ala Val Leu Glu Met Leu Glu Glu Ile Ala Ala Asn Gly Gly Asp Ala
        275                 280                 285
Thr Asp Phe Met Asn Arg Val Lys Asn Lys Glu Lys Gly Val Arg Leu
    290                 295                 300
Met Gly Phe Gly His Arg Val Tyr Lys Asn Tyr Asp Pro Arg Ala Ala
305                 310                 311                 320
Ile Val Lys Asp Thr Ala His Glu Ile Leu Glu His Leu Gly Gly Asp
                325                 330                 335
Pro Leu Leu Asp Leu Ala Leu Lys Leu Glu Glu Ile Ala Leu Asn Asp
            340                 345                 350
Asp Tyr Phe Ile Ser Arg Lys Leu Tyr Pro Asn Val Asp Phe Tyr Thr
        355                 360                 365
Gly Leu Ile Tyr Arg Ala Met Gly Phe Pro Thr Asp Phe Phe Thr Val
    370                 375                 380
Leu Phe Ala Ile Gly Arg Leu Pro Gly Trp Ile Ala His Tyr Arg Glu
385                 390                 395                 400
Gln Leu Ala Asp Pro Gly Ala Lys Ile Asn Arg Pro Arg Gln Ile Tyr
                405                 410                 415
Thr Gly Glu Thr Ala Arg Lys Ile Ile Pro Arg Glu Glu Arg
            420                 425                 430
<210>91
<211>1314
<212>DNA
<213>乳发酵短杆菌(Brevibacterium lactofermentum)
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1311)
<400>91
atg ttt gaa agg gat atc gtg gct act gat aac aac aag gct gtc crg  48
Met Phe Glu Arg Asp Ile Val Ala Thr Asp Asn Asn Lys Ala Val Leu
  1               5                  10                  15
cac tac ccc ggt ggc gag ttc gaa atg gac atc atc gag gct tct gag  96
His Tyr Pro Gly Gly Glu Phe Glu Met Asp Ile Ile Glu Ala Ser Glu
             20                  25                  30
ggt aac aac ggt gtt gtc ctg ggc aag atg ctg tct gag act gga ctg  144
Gly Asn Asn Gly Val Val Leu Gly Lys Met Leu Ser Glu Thr Gly Leu
         35                 40                   45
atc act ttt gac cca ggt tat gtg agc act ggc tcc acc gag tcg aag  192
Ile Thr Phe Asp Pro Gly Tyr Val Ser Thr Gly Ser Thr Glu Ser Lys
     50                  55                  60
atc acc tac atc gat ggc gat gcg gga atc ctg cgt tac cgc ggc tat  240
Ile Thr Tyr Ile Asp Gly Asp Ala Gly Ile Leu Arg Tyr Arg Gly Tyr
 65                  70                  75                  80
gac atc gct gat ctg gct gag aat gcc acc ttc aac gag gtt tct tac  288
Asp Ile Ala Asp Leu Ala Glu Asn Ala Thr Phe Asn Glu Val Ser Tyr
                 85                  90                  95
cta ctt atc aac ggt gaa cta cca acc cca gat gag ctt cac aag ttt  336
Leu Leu Ile Asn Gly Glu Leu Pro Thr Pro Asp Glu Leu His Lys Phe
            100                 105                 110
aac gac gag att cgc cac cac acc ctt ctg gac gag gac ttc aag tcc    384
Asn Asp Glu Ile Arg His His Thr Leu Leu Asp Glu Asp Phe Lys Ser
        115                 120                 125
cag ttc aac gtg ttc cca cgc gac gct cac cca atg gca acc ttg gct    432
Gln Phe Asn yal Phe Pro Arg Asp Ala His Pro Met Ala Thr Leu Ala
    130                 135                 140
tcc tcg gtt aac att ttg tct acc tac tac cag gat cag ctg aac cca    480
Ser Ser Val Asn Ile Leu Ser Thr Tyr Tyr Gln Asp Gln Leu Asn Pro
145                 150                 155                 160
ctc gat gag gca cag ctt gat aag gca acc gtt cgc ctc atg gca aag    528
Leu Asp Glu Ala Gln Leu Asp Lys Ala Thr Val Arg Leu Met Ala Lys
                165                 170                 175
gtt cca atg ctg gct gcg tac gca cac cgc gca cgc aag ggt gct cct    576
Val Pro Met Leu Ala Ala Tyr Ala His Arg Ala Arg Lys Gly Ala Pro
            180                 185                 190
tac atg tac cca gac aac tcc ctc aac gcg cgt gag aac ttc ctg cgc    624
Tyr Met Tyr Pro Asp Asn Ser Leu Asn Ala Arg Glu Asn Phe Leu Arg
        195                 200                 205
atg atg ttc ggt tac cca acc gag cca tac gag atc gac cca atc atg    672
Met Met Phe Gly Tyr Pro Thr Glu Pro Tyr Glu Ile Asp Pro Ile Met
    210                 215                 220
gtc aag gct ctg gac aag ctg ctc atc ctg cac gct gac cac gag cag    720
Val Lys Ala Leu Asp Lys Leu Leu Ile Leu His Ala Asp His Glu Gln
225                 230                 235                 240
aac tgc tcc acc tcc acc gtt cgt atg atc ggt tcc gca cag gcc aac    768
Asn Cys Ser Thr Ser Thr Val Arg Met Ile Gly Ser Ala Gln Ala Asn
                245                 250                 255
atg ttt gtc tcc atc gct ggt ggc atc aac gct ctg tcc ggc cca ctg    816
Met Phe Val Ser Ile Ala Gly Gly Ile Asn Ala Leu Ser Gly Pro Leu
            260                 265                 270
cac ggt ggc gca aac cag gct gtt ctg gag atg ctc gaa gac atc aag    864
His Gly Gly Ala Asn Gln Ala Val Leu Glu Met Leu Glu Asp Ile Lys
        275                 280                 285
aac aac cac ggt ggc gac gca acc gcg ttc atg aac aag gtc aag aac    912
Asn Asn His Gly Gly Asp Ala Thr Ala Phe Met Asn Lys Val Lys Asn
    290                 295                 300
aag gaa gac ggc gtc cgc ctc atg ggc ttc gga cac cgc gtt tac aag    960
Lys Glu Asp Gly Val Arg Leu Met Gly Phe Gly His Arg Val Tyr Lys
305                 310                 315                 320
aac tac gat cca cgt gca gca atc gtc aag gag acc gca cac gag atc    1008
Asn Tyr Asp Pro Arg Ala Ala Ile Val Lys Glu Thr Ala His Glu Ile
                325                 330                 335
ctc gag cac ctc ggt ggc gac gat ctt ctg gat ctg gca atc aag ctg    1056
Leu Glu His Leu Gly Gly Asp Asp Leu Leu Asp Leu Ala Ile Lys Leu
            340                 345                 350
gaa gaa att gca ctg gct gat gat tac ttc atc tcc cgc aag ctc tac  1104
Glu Glu Ile Ala Leu Ala Asp Asp Tyr Phe Ile Ser Arg Lys Leu Tyr
        355                 360                 365
ccg aac gta gac ttc tac acc ggc ctg atc tac cgc gca atg ggc ttc  1152
Pro Asn Val Asp Phe Tyr Thr Gly Leu Ile Tyr Arg Ala Met Gly Phe
    370                 375                 380
cca act gac ttc ttc acc gta ttg ttc gca atc ggt cgt ctg cca gga  1200
Pro Thr Asp Phe Phe Thr Val Leu Phe Ala Ile Gly Arg Leu Pro Gly
385                 390                 395                 400
tgg atc gct cac tac cgc gag cag ctc ggt gca gca ggc aac aag atc  1248
Trp Ile Ala His Tyr Arg Glu Gln Leu Gly Ala Ala Gly Asn Lys Ile
                405                 410                 415
aac cgc cca cgc cag gtc tac acc ggc aag gaa tcc cgc aag ttg gtt  1296
Asn Arg Pro Arg Gln Val Tyr Thr Gly Lys Glu Ser Arg Lys Leu Val
            420                 425                 430
cct cgc gag gag cgc taa                                          1314
Pro Arg Glu Glu Arg
        435
<210>92
<211>437
<212>PRT
<213>乳发酵短杆菌(Brevibacterium lactofermentum)
<400>92
Met Phe Glu Arg Asp Ile Val Ala Thr Asp Asn Asn Lys Ala Val Leu
  1               5                  10                  15
His Tyr Pro Gly Gly Glu Phe Glu Met Asp Ile Ile Glu Ala Ser Glu
             20                  25                  30
Gly Asn Asn Gly Val Val Leu Gly Lys Met Leu Ser Glu Thr Gly Leu
         35                  40                  45
Ile Thr Phe Asp Pro Gly Tyr Val Ser Thr Gly Ser Thr Glu Ser Lys
     50                  55                  60
Ile Thr Tyr Ile Asp Gly Asp Ala Gly Ile Leu Arg Tyr Arg Gly Tyr
65                   70                  75                  80
Asp Ile Ala Asp Leu Ala Glu Asn Ala Thr Phe Asn Glu Val Ser Tyr
                 85                  90                  95
Leu Leu Ile Ash Gly Glu Leu Pro Thr Pro Asp Glu Leu His Lys Phe
            100                 105                 110
Asn Asp Glu lle Arg His His Thr Leu Leu Asp Glu Asp Phe Lys Ser
        115                 120                 125
Gln Phe Asn Val Phe Pro Arg Asp Ala His Pro Met Ala Thr Leu Ala
    130                135                 140
Ser Ser Val Asn Ile Leu Ser Thr Tyr Tyr Gln Asp Gln Leu Asn Pro
145                 150                 155                 160
Leu Asp Glu Ala Gln Leu Asp Lys Ala Thr Val Arg Leu Met Ala Lys
                165                 170                 175
Val Pro Met Leu Ala Ala Tyr Ala His Arg Ala Arg Lys Gly Ala Pro
            180                 185                 190
Tyr Met Tyr Pro Asp Asn Ser Leu Asn Ala Arg Glu Asn Phe Leu Arg
        195                 200                 205
Met Met Phe Gly Tyr Pro Thr Glu Pro Tyr Glu Ile Asp Pro Ile Met
    210                 215                 220
Val Lys Ala Leu Asp Lys Leu Leu Ile Leu His Ala Asp His Glu Gln
225                 230                 235                 240
Asn Cys Ser Thr Ser Thr Val Arg Met Ile Gly Ser Ala Gln Ala Asn
                245                 250                 255
Met Phe Val Ser Ile Ala Gly Gly Ile Asn Ala Leu Ser Gly Pro Leu
            260                 265                 270
His Gly Gly Ala Asn Gln Ala Val Leu Glu Met Leu Glu Asp Ile Lys
        275                 280                 285
Asn Asn His Gly Gly Asp Ala Thr Ala Phe Met Asn Lys Val Lys Asn
    290                 295                 300
Lys Glu Asp Gly Val Arg Leu Met Gly Phe Gly His Arg Val Tyr Lys
305                 310                 315                 320
Asn Tyr Asp Pro Arg Ala Ala Ile Val Lys Glu Thr Ala His Glu Ile
                325                 330                 335
Leu Glu His Leu Gly Gly Asp Asp Leu Leu Asp Leu Ala Ile Lys Leu
            340                 345                 350
Glu Glu Ile Ala Leu Ala Asp Asp Tyr Phe Ile Ser Arg Lys Leu Tyr
        355                 360                 365
Pro Asn Val Asp Phe Tyr Thr Gly Leu Ile Tyr Arg Ala Met Gly Phe
    370                 375                 380
Pro Thr Asp Phe Phe Thr Val Leu Phe Ala Ile Gly Arg Leu Pro Gly
385                 390                 395                 400
Trp Ile Ala His Tyr Arg Glu Gln Leu Gly Ala Ala Gly Asn Lys Ile
                405                 4l0                 4l5
Asn Arg Pro Arg Gln Val Tyr Thr Gly Lys Glu Ser Arg Lys Leu Val
            420                 425                 430
Pro Arg Glu Glu Arg
        435
<210>93
<211>1656
<212>DNA
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<220>
<221>CDS
<222>(309)..(1595)
<400>93
acgcccgatt cttcaacact atcgaagagg tcccaaccca cgcgttgacc cagggcttgg  60
gtactttgtc ccgcgcgcaa aatatcgtgt tggtggcaac tggccaagga aaagcagaca  120
gccatccgcg gaactgtgga aggtccagtg actgcttctt gcccaggttc cattctgcaa  180
atgcacaaca acgccaccat catcgttgat gaagcagcag catccaagct gaaaaatgct  240
gaccattacc gtctcatgga gcaattaaag ctgcgctaga aacaaaaagg aaagtactgt  300
gtggggct atg cac aca gaa ctt tcc agt ttg cgc cct gcg tac cat gtg   350
         Met His Thr Glu Leu Ser Ser Leu Arg Pro Ala Tyr His Val
           1               5                  10
act cct ccg cag ggc aga ctc aat gat ccc aat gga atg tac gtc gat    398
Thr Pro Pro Gln Gly Arg Leu Asn Asp Pro Asn Gly Met Tyr Val Asp
 15                  20                  25                  30
gga gat acc ctc cac gtc tac tac cag cac gat cca ggt ttc ccc ttc    446
Gly Asp Thr Leu His Val Tyr Tyr Gln His Asp Pro Gly Phe Pro Phe
                 35                  40                  45
gca cca aag cgc acc ggt tgg gct cac acc acc acg ccg ttg acc gga    494
Ala Pro Lys Arg Thr Gly Trp Ala His Thr Thr Thr Pro Leu Thr Gly
             50                  55                  60
ccg cag cga ttg cag tgg acg cac ctg ccc gat gct ctt tac ccg gat    542
Pro Gln Arg Leu Gln Trp Thr His Leu Pro Asp Ala Leu Tyr Pro Asp
         65                  70                  75
gta tcc tat gac ctg gat gga tgc tat tcc ggc gga gcc gta ttt tct    590
Val Ser Tyr Asp Leu Asp Gly Cys Tyr Ser Gly Gly Ala Val Phe Ser
    80                  85                  90
gac ggc acg ctt aaa ctt ttc tac acc ggc aac cga aaa att gac ggc    638
Asp Gly Thr Leu Lys Leu Phe Tyr Thr Gly Asn Arg Lys Ile Asp Gly
 95                 100                 105                 110
aag cgc cgc gcc acc caa aac ctc gtc gaa gtc gag gac cca act ggg   686
Lys Arg Arg Ala Thr Gln Asn Leu Val Glu Val Glu Asp Pro Thr Gly
                115                 120                 125
ctg atg ggc ggc att cat cgc cgc tcg cct aaa aat ccg ctt atc gac    734
Leu Met Gly Gly Ile His Arg Arg Ser Pro Lys Asn Pro Leu Ile Asp
            130                 135                 140
gga ccc gcc agc ggt ttt acg ccc cac tac cgc gat ccc atg atc agc    782
Gly Pro Ala Ser Gly Phe Thr Pro His Tyr Arg Asp Pro Met Ile Ser
        145                 150                 155
cct gat ggg gat ggt tgg aag atg gtt ctt ggg gct cag cgc gaa aac    830
Pro Asp Gly Asp Gly Trp Lys Met Val Leu Gly Ala Gln Arg Glu Asn
    160                 165                 170
ctc acc ggt gca gcg gtt cta tac cgc tcg gca gat ctt gaa aac tgg    878
Leu Thr Gly Ala Ala Val Leu Tyr Arg Ser Ala Asp Leu Glu Asn Trp
175                 180                 185                 190
gaa ttc tcc ggt gaa atc acc ttt gac ctc agc gac gca caa cct ggt    926
Glu Phe Ser Gly Glu Ile Thr Phe Asp Leu Ser Asp Ala Gln Pro Gly
                195                 200                 205
tct gcc cct gat ctc gtt cct ggc ggc tac atg tgg gaa tgc ccc aac    974
Ser Ala Pro Asp Leu Val Pro Gly Gly Tyr Met Trp Glu Cys Pro Asn
            210                 215                 220
ctt ttt acg ctt cgc gat gaa aaa acc ggc gaa gac ctc gat gtg ctg    1022
Leu Phe Thr Leu Arg Asp Glu Lys Thr Gly Glu Asp Leu Asp Val Leu
        225                 230                 235
att ttc tgt cca caa gga ttg gac cgt atc gat gat gag gtt act cac    1070
Ile Phe Cys Pro Gln Gly Leu Asp Arg Ile Asp Asp Glu Val Thr His
    240                 245                 250
tac gca agc tct gac cag tgc gga tat gtc gtc ggc aag ctt gaa gaa    1118
Tyr Ala Ser Ser Asp Gln Cys Gly Tyr Val Val Gly Lys Leu Glu Glu
255                 260                 265                 270
acg acc ttc cgt gtc ctg cga gga ttc agc gag ctg gat ttc ggt cat    1166
Thr Thr Phe Arg Val Leu Arg Gly Phe Ser Glu Leu Asp Phe Gly His
                275                 280                 285
gaa ttc tac gcg ccg cag gtt gca gtc aac ggt tcc gat gcc tgg ctt    1214
Glu Phe Tyr Ala Pro Gln Val Ala Val Asn Gly Ser Asp Ala Trp Leu
            290                 295                 300
gtg ggc tgg atg gga ttg cct gca cag gat gat cac cca aca gtt gcg    1262
Val Gly Trp Met Gly Leu Pro Ala Gln Asp Asp His Pro Thr Val Ala
        305                 310                 315
cag gaa gga tgg gtg cac tgc ctg acc gtt cct cgc agg ctt cat ttg    1310
Gln Glu Gly Trp Val His Cys Leu Thr Val Pro Arg Arg Leu His Leu
    320                 325                 330
cgt aac cat gcg atc tat caa gag ctt ctt ctc cca gaa ggg gag tcg    1358
Arg Asn His Ala Ile Tyr Gln Glu Leu Leu Leu Pro Glu Gly Glu Ser
335                 340                 345                 350
ggg gta act aga tct gta tta ggt tct gaa cct gtc cga gta gac atc    1406
Gly Val Thr Arg Ser Val Leu Gly Ser Glu Pro Val Arg Val Asp Ile
                355                 360                 365
cga gac aat gtt tcc ctc gag tgg gat ggt gtc cgg ttg tct gtg gat    1454
Arg Asp Asn Val Ser Leu Glu Trp Asp Gly Val Arg Leu Ser Val Asp
            370                 375                 380
cgc gat ggc gat cgt cgt gta gct gaa gta aaa cct ggc gaa tta gtg    1502
Arg Asp Gly Asp Arg Arg Val Ala Glu Val Lys Pro Gly Glu Leu Val
        385                 390                 395
atc gcg gac gat aat aca gcg att gag ata aca gca ggt cat ggc cag    1550
Ile Ala Asp Asp Asn Thr Ala Ile Glu Ile Thr Ala Gly His Gly Gln
    400                 405                 410
gtt tcc ttc gct ttc cgc acc ttc aaa ggt gac act att gag aga       1595
Val Ser Phe Ala Phe Arg Thr Phe Lys Gly Asp Thr Ile Glu Arg
415                 420                 425
taagtcataa aaaagggcct tctgtggcgg attgtacaaa tacttcgcaa aateccttga 1655
t                                                                 1656
<210>94
<211>429
<212>PRT
<213>Corynebacterium thermoaminogenes
<400>94
Met His Thr Glu Leu Ser Ser Leu Arg Pro Ala Tyr His Val Thr Pro
  1               5                  10                  15
Pro Gln Gly Arg Leu Asn Asp Pro Asn Gly Met Tyr Val Asp Gly Asp
             20                  25                  30
Thr Leu His Val Tyr Tyr Gln His Asp Pro Gly Phe Pro Phe Ala Pro
         35                  40                  45
Lys Arg Thr Gly Trp Ala His Thr Thr Thr Pro Leu Thr Gly Pro Gln
    50                   55                  60
Arg Leu Gln Trp Thr His Leu Pro Asp Ala Leu Tyr Pro Asp Val Ser
 65                  70                  75                  80
Tyr Asp Leu Asp Gly Cys Tyr Ser Gly Gly Ala Val Phe Ser Asp Gly
                 85                  90                  95
Thr Leu Lys Leu Phe Tyr Thr Gly Asn Arg Lys Ile Asp Gly Lys Arg
            100                 105                 110
Arg Ala Thr Gln Asn Leu Val Glu Val Glu Asp Pro Thr Gly Leu Met
        115                 120                 125
Gly Gly Ile His Arg Arg Ser Pro Lys Asn Pro Leu Ile Asp Gly Pro
    130                 135                 140
Ala Ser Gly Phe Thr Pro His Tyr Arg Asp Pro Met Ile Ser Pro Asp
145                 150                 155                 160
Gly Asp Gly Trp Lys Met Val Leu Gly Ala Gln Arg Glu Asn Leu Thr
                165                 170                 175
Gly Ala Ala Val Leu Tyr Arg Ser Ala Asp Leu Glu Asn Trp Glu Phe
            180                 185                 190
Ser Gly Glu Ile Thr Phe Asp Leu Ser Asp Ala Gln Pro Gly Ser Ala
        195                 200                 205
Pro Asp Leu Val Pro Gly Gly Tyr Met Trp Glu Cys Pro Asn Leu Phe
    210                 215                 220
Thr  Leu Arg Asp Glu Lys Thr Gly Glu Asp Leu Asp Val Leu Ile Phe
225                  230                 235                 240
Cys Pro Gln Gly Leu Asp Arg Ile Asp Asp Glu Val Thr His Tyr Ala
                245                 250                 255
Ser Ser Asp Gln Cys Gly Tyr Val Val Gly Lys Leu Glu Glu Thr Thr
            260                 265                 270
Phe Arg Val Leu Arg Gly Phe Ser Glu Leu Asp Phe Gly His Glu Phe
        275                 280                 285
Tyr Ala Pro Gln Val Ala Val Asn Gly Ser Asp Ala Trp Leu Val Gly
    290                 295                 300
Trp Met Gly Leu Pro Ala Gln Asp Asp His Pro Thr Val Ala Gln Glu
305                 310                 315                 320
Gly Trp Val His Cys Leu Thr Val Pro Arg Arg Leu His Leu Arg Asn
                325                 330                 335
His Ala Ile Tyr Gln Glu Leu Leu Leu Pro Glu Gly Glu Ser Gly Val
            340                 345                 350
Thr Arg Ser Val Leu Gly Ser Glu Pro Val Arg Val Asp Ile Arg Asp
        355                 360                 365
Asn Val Ser Leu Glu Trp Asp Gly Val Arg Leu Ser Val Asp Arg Asp
    370                 375                 380
Gly Asp Arg Arg Val Ala Glu Val Lys Pro Gly Glu Leu Val Ile Ala
385                 390                 395                 400
Asp Asp Asn Thr Ala Ile Glu Ile Thr Ala Gly His Gly Gln Val Ser
                405                 410                 415
Phe Ala Phe Arg Thr Phe Lys Gly Asp Thr Ile Glu Arg
            420                 425
<210>95
<211>35
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：scrB基因扩增引物
<400>95
gtacatat tgtcgttagaac gcgtaatacg actca                  35
<210>96
<211>35
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：scrB基因扩增引物
<400>96
cgttagaacg cgtaatacga ctcactatag ggaga                      35
<210>97
<211>30
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：scrB LA克隆引物
<400>97
gtaaagagcg tcgggcaggt gcgtccactg                           30
<210>98
<211>30
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：scrB LA克隆引物
<400>98
ggtgtgagcc cagccggtgc gctttggtgc                           30
<210>99
<211>30
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：scrB LA克隆引物
<400>99
atcagccctg atggtgatgg ttggaaaatg                          30
<210>100
<211>30
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：scrB基因LA克隆引物
<400>100
ggtgcagcgg ttctataccg ctcgacagat                         30
<210>101
<211>32
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：scrB基因扩增引物
<400>101
ggcccgggac gcccgattct tcaacactat cg                      32
<210>102
<211>32
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：scrB基因扩增引物
<400>102
ggcccgggga tcaagggatt ttgcgaagta tt                      32
<210>103
<211>30
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：icd基因扩增引物
<400>103
gaagatctct atgaccagcg catcaagctg                         30
<210>104
<211>30
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：icd基因扩增引物
<400>104
gaagatctgg tcatcccaga acctgatcac                               30
<210>105
<211>32
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：gdh基因扩增引物
<400>105
gcgcctgcag gtccgagggt gtgcgttcgg ca                            32
<210>106
<211>32
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：gdh基因扩增引物
<400>106
gcgcctgcag gcaccaggat gccctcaacc ag                           32
<210>107
<211>30
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：gltA基因扩增引物
<400>107
ggggtaccga tcactataac cccacagcac                                30
<210>108
<211>30
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列的描述：gltA基因扩增引物
<400>108
ggggtaccct ggctgatctg aactaggcgc                                 30

Claims (7)

1.一种蛋白质，该蛋白质具有序列表中SEQ ID NO：80的氨基酸序列。
2.一种蛋白质，该蛋白质具有包含有1-10个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：80的氨基酸序列，该蛋白质在42℃下所表现出的谷氨酸脱氢酶活性与37℃下的活性相同或者比后者更高。
3.一种DNA，该DNA编码具有SEQ ID NO：80的氨基酸序列的蛋白质。
4.一种DNA，该DNA编码具有包含有1-10个氨基酸残基的替换、缺失、插入、添加或者反转的SEQ ID NO：80的氨基酸序列的蛋白质，该蛋白质在42℃下所表现出的谷氨酸脱氢酶活性与37℃下的活性相同或者比后者更高。
5.权利要求3的DNA，该DNA包含序列表中SEQ ID NO：79的核苷酸序列。
6.权利要求4的DNA，该DNA可在60℃、1×SSC、0.1％SDS的条件下与序列表中SEQ ID NO：79的核苷酸序列或基于该核苷酸序列制备的引物杂交，并编码一种蛋白质，该蛋白质在42℃下所表现出的谷氨酸脱氢酶活性与37℃下的活性相同或者比后者更高。
7.一种用于生产L-谷氨酸的方法，该方法包括在一种培养基中培养一种微生物，在该培养基中产生并且积累L-谷氨酸，以及从该培养基中收集该L-谷氨酸，该微生物中引入了权利要求3到6中任意一种的DNA。
CNB008160813A 1999-10-04 2000-10-04 来自嗜热棒状杆菌的氨基酸生物合成途径的抗热酶的基因 Expired - Fee Related CN1333078C (zh)

Applications Claiming Priority (9)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP28271699 1999-10-04
JP282716/1999 1999-10-04
JP282716/99 1999-10-04
JP311147/99 1999-11-01
JP311147/1999 1999-11-01
JP31114799 1999-11-01
JP120687/2000 2000-04-21
JP120687/00 2000-04-21
JP2000120687 2000-04-21

Related Child Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2007101096317A Division CN101096661B (zh) 1999-10-04 2000-10-04 来自嗜热棒状杆菌的氨基酸生物合成途径的抗热酶的基因
CNA2007101096336A Division CN101096662A (zh) 1999-10-04 2000-10-04 来自嗜热棒状杆菌的氨基酸生物合成途径的抗热酶的基因

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1391612A CN1391612A (zh) 2003-01-15
CN1333078C true CN1333078C (zh) 2007-08-22

Family

ID=27336960

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2007101096317A Expired - Fee Related CN101096661B (zh) 1999-10-04 2000-10-04 来自嗜热棒状杆菌的氨基酸生物合成途径的抗热酶的基因
CNA2007101096336A Pending CN101096662A (zh) 1999-10-04 2000-10-04 来自嗜热棒状杆菌的氨基酸生物合成途径的抗热酶的基因
CNB008160813A Expired - Fee Related CN1333078C (zh) 1999-10-04 2000-10-04 来自嗜热棒状杆菌的氨基酸生物合成途径的抗热酶的基因

Family Applications Before (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2007101096317A Expired - Fee Related CN101096661B (zh) 1999-10-04 2000-10-04 来自嗜热棒状杆菌的氨基酸生物合成途径的抗热酶的基因
CNA2007101096336A Pending CN101096662A (zh) 1999-10-04 2000-10-04 来自嗜热棒状杆菌的氨基酸生物合成途径的抗热酶的基因

Country Status (12)

Country Link
US (3) US6995250B1 (zh)
EP (3) EP1219712B1 (zh)
JP (1) JP4337298B2 (zh)
KR (1) KR20020042703A (zh)
CN (3) CN101096661B (zh)
AT (3) ATE450613T1 (zh)
AU (1) AU781863B2 (zh)
BR (1) BR0014496A (zh)
DE (3) DE60038967D1 (zh)
PE (1) PE20010711A1 (zh)
TW (3) TWI289604B (zh)
WO (1) WO2001025447A1 (zh)

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU756507B2 (en) * 1998-03-18 2003-01-16 Ajinomoto Co., Inc. L-glutamic acid-producing bacterium and method for producing L-glutamic acid
JP4427878B2 (ja) 1999-08-20 2010-03-10 味の素株式会社 析出を伴う発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法
EP1106622A3 (de) * 1999-11-23 2004-01-02 Degussa AG Neue für das pfkA-Gen codierende Nukleotidsequenzen
DE10011922A1 (de) 1999-11-23 2001-05-31 Degussa Neue für das pfkA-Gen codierende Nukleotidsequenzen
AU2002213146B2 (en) * 2000-10-13 2006-02-16 Archer-Daniels-Midland Company Feedback-resistant pyruvate carboxylase gene from corynebacterium
JP4599726B2 (ja) 2001-02-20 2010-12-15 味の素株式会社 Ｌ−グルタミン酸の製造法
BR0304860A (pt) * 2002-11-11 2004-08-31 Ajinomoto Kk Método para produzir uma substância alvo pela utilização de uma-bactéria pertencente ao gênero escherichia
US7205132B2 (en) * 2004-09-10 2007-04-17 Ajinomoto Co., Inc. L-glutamic acid-producing microorganism and a method for producing L-glutamic acid
US9725701B2 (en) 2013-03-15 2017-08-08 Iowa Corn Promotion Board Prokarytoic-type isocitrate dehydrogenase and its application for improving nitrogen utilization in transgenic plants
KR101776375B1 (ko) * 2015-03-18 2017-09-08 씨제이제일제당 (주) 피루브산 디하이드로게나아제 변이체, 이를 포함하는 미생물 및 이를 이용한 l-아미노산 생산 방법
CN106544298B (zh) * 2016-10-27 2020-03-24 广东省微生物研究所 一种芽胞杆菌感受态细胞的制备方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0556782A (ja) * 1991-09-02 1993-03-09 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd 遺伝子発現調節ｄｎａ
WO1995023224A1 (fr) * 1994-02-24 1995-08-31 Ajinomoto Co., Inc. Nouveau gene tire de corynebacterium et son utilisation
JPH08196280A (ja) * 1995-01-30 1996-08-06 Ajinomoto Co Inc コリネホルム細菌由来のシュクラーゼ遺伝子とその利用
WO1996032484A2 (en) * 1995-04-14 1996-10-17 Arch Development Corporation ACETYL-CoA CARBOXYLASE COMPOSITIONS AND METHODS OF USE

Family Cites Families (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6696561B1 (en) 1909-07-09 2004-02-24 Basf Aktiengesellschaft Corynebacterium glutamicum genes encoding proteins involved in membrane synthesis and membrane transport
JPS61268185A (ja) 1984-12-27 1986-11-27 Asahi Chem Ind Co Ltd グルタミン酸デヒドロゲナ−ゼ産生遺伝子を含むｄｎａ断片
JPH07121228B2 (ja) 1986-11-07 1995-12-25 協和醗酵工業株式会社 Ｌ−グルタミン酸およびｌ−プロリンの製造法
JP2520895B2 (ja) 1987-03-04 1996-07-31 旭化成工業株式会社 Ｌ―グルタミン酸の製造方法
US5250434A (en) 1987-03-27 1993-10-05 Ajinomoto Co., Inc. Microorganisms for production of glutamic acid
GB2223754B (en) * 1988-09-12 1992-07-22 Degussa Dna encoding phosphoenolpyruvate carboxylase
JP2990735B2 (ja) * 1990-04-20 1999-12-13 味の素株式会社 Ｌ―リジンの発酵的製造法
FR2671800B1 (fr) 1991-01-17 1993-03-12 Rhone Poulenc Rorer Sa Derive de la 5h-pyrrolo[3,4-b]pyrazine optiquement actif, sa preparation et les compositions pharmaceutiques qui le contiennent.
CA2108564A1 (en) * 1991-04-16 1992-10-17 Kevin A. Ward Gene expression cassette containing non-coding sequence of growth hormone gene
EP0551506A1 (fr) 1991-07-30 1993-07-21 Orsan Systeme d'expression et de secretion de proteines utilisables en particulier chez les corynebacteries
JP3298135B2 (ja) * 1992-03-04 2002-07-02 味の素株式会社 コリネホルム細菌由来のシュークラーゼ遺伝子
US5539092A (en) * 1992-10-02 1996-07-23 Arch Development Corporation Cyanobacterial and plant acetyl-CoA carboxylase
JPH0763383A (ja) 1993-08-27 1995-03-07 Toshiba Corp 換気扇
JPH07121227A (ja) 1993-10-20 1995-05-12 Fanuc Ltd 非対称型加減速フィルタ
ES2160167T3 (es) 1994-06-14 2001-11-01 Ajinomoto Kk Gen de alfa-cetoglutarato-deshidrogenasa.
JPH0866189A (ja) * 1994-08-31 1996-03-12 Mitsubishi Chem Corp 新規ｄｎａ断片
JPH1087A (ja) * 1996-06-17 1998-01-06 Ajinomoto Co Inc 発酵法による目的物質の製造法
JP4075087B2 (ja) 1996-12-05 2008-04-16 味の素株式会社 Ｌ−リジンの製造法
JP3767066B2 (ja) * 1997-02-25 2006-04-19 味の素株式会社 新規遺伝子
SK284235B6 (en) * 1997-10-04 2004-11-03 Forschungszentrum Juelich Gmbh Method for microbial production of amino acids of the aspartate and/or glutamate family and agents which can be used in the said method
JPH11196887A (ja) 1998-01-16 1999-07-27 Mitsubishi Chemical Corp ホスホエノールピルビン酸カルボキシラーゼ遺伝子組み換え菌体による有機酸の製造法
JP7121227B2 (ja) * 2017-06-29 2022-08-18 三菱マテリアル株式会社 熱電変換材料、及び、熱電変換材料の製造方法
CN112105919B (zh) * 2018-06-08 2023-08-22 株式会社岛津制作所 荧光x射线分析装置以及荧光x射线分析方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0556782A (ja) * 1991-09-02 1993-03-09 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd 遺伝子発現調節ｄｎａ
WO1995023224A1 (fr) * 1994-02-24 1995-08-31 Ajinomoto Co., Inc. Nouveau gene tire de corynebacterium et son utilisation
JPH08196280A (ja) * 1995-01-30 1996-08-06 Ajinomoto Co Inc コリネホルム細菌由来のシュクラーゼ遺伝子とその利用
WO1996032484A2 (en) * 1995-04-14 1996-10-17 Arch Development Corporation ACETYL-CoA CARBOXYLASE COMPOSITIONS AND METHODS OF USE

Also Published As

Publication number Publication date
CN101096662A (zh) 2008-01-02
JP4337298B2 (ja) 2009-09-30
DE60038967D1 (en) 2008-07-03
TW200734460A (en) 2007-09-16
CN101096661A (zh) 2008-01-02
ATE450612T1 (de) 2009-12-15
TW200734459A (en) 2007-09-16
ATE396272T1 (de) 2008-06-15
CN101096661B (zh) 2011-10-19
KR20020042703A (ko) 2002-06-05
CN1391612A (zh) 2003-01-15
EP1219712A4 (en) 2004-06-02
US20050176127A1 (en) 2005-08-11
EP1710313A1 (en) 2006-10-11
AU781863B2 (en) 2005-06-16
US6995250B1 (en) 2006-02-07
DE60043464D1 (de) 2010-01-14
EP1710313B1 (en) 2009-12-02
ATE450613T1 (de) 2009-12-15
EP1712632A3 (en) 2006-10-25
PE20010711A1 (es) 2001-07-09
US7183403B2 (en) 2007-02-27
TWI289604B (en) 2007-11-11
EP1219712A1 (en) 2002-07-03
WO2001025447A1 (fr) 2001-04-12
EP1219712B1 (en) 2008-05-21
EP1712632A2 (en) 2006-10-18
US20050239176A1 (en) 2005-10-27
DE60043465D1 (de) 2010-01-14
BR0014496A (pt) 2002-08-20
EP1712632B1 (en) 2009-12-02
US7125977B2 (en) 2006-10-24
AU7556100A (en) 2001-05-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US7183403B2 (en) Genes for heat resistant enzymes of amino acid biosynthetic pathway derived from thermophilic coryneform bacteria
US7211421B2 (en) Gene encoding dihydrodipicolinate reductase from Bacillus methanolicus
JP3783065B2 (ja) Ｌ−リジンの製造法
US7262035B2 (en) Method for producing L-glutamine by fermentation and L-glutamine producing bacterium
Taguchi et al. D-lactate dehydrogenase is a member of the D-isomer-specific 2-hydroxyacid dehydrogenase family. Cloning, sequencing, and expression in Escherichia coli of the D-lactate dehydrogenase gene of Lactobacillus plantarum
RU2294370C2 (ru) Способ получения спирта с использованием микроорганизма
CN1316011C (zh) 生产l－谷氨酰胺的方法和生产l－谷氨酰胺的细菌
JP4254103B2 (ja) シュークロースｐｔｓエンザイムｉｉをコードするｄｎａ
US6255086B1 (en) Carbamoyl-phosphate synthetase gene of coryneform bacteria and method for producing L-arginine
CN101200742A (zh) 编码青霉素结合蛋白的基因和生产l-谷氨酸的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20070822

Termination date: 20151004

EXPY Termination of patent right or utility model