CN1216527A

CN1216527A - 清除硫醇的方法

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Publication number: CN1216527A
Application number: CN97193972A
Authority: CN
Inventors: K·卡里米安; T·F·塔姆; D·德西莱茨; S·李; T·坎佩莱托; 李万仁
Original assignee: APTEX Inc
Current assignee: APTEX Inc
Priority date: 1996-02-26
Filing date: 1997-02-26
Publication date: 1999-05-12
Also published as: WO1997031893A1; BR9707745A; TR199801671T2; AU1762997A; US6114537A; EP0883606A1; CA2247899A1; CZ271398A3; IL125931A0; JPH11513994A; NO983913D0; KR19990087409A; NO983913L; PL328629A1; HUP9901789A2

Abstract

吸收硫醇,并使其转化为二硫化物,方法是使其与含有1,2,4－噻二唑环结构的化合物反应,该化合物在噻二唑环的3位具有一个取代基,且在N－2位是未取代的。该方法在药理学领域中用于抑制某些含硫醇的酶,例如H⁺/K⁺－ATP酶(质子泵),在工业领域中用于从气体或液体混合物中选择性除去硫醇化合物。

Description

清除硫醇的方法

发明领域

本发明涉及吸收硫醇、并选择性地将硫醇化合物转化为二硫化物的化学方法。本发明也涉及某些噻二唑化合物作为硫醇吸收剂、在选择性地将硫醇转化为二硫化物的反应中的用途，其中一部分该噻二唑化合物是新颖的。

发明背景和现有技术

硫醇化合物存在于多种化学及生物化学系统中，在多数情况下是不需要的或有害的化合物，需要从该系统中除去或进行化学转化。硫羟基SH(或者称为巯基或硫氢基)经常使含有它的化合物具有恶臭的性质。矿物燃料沉积物(例如石油、天然气和煤)等矿物质经常被恶臭的硫醇化合物所污染。在粗石油的提取与精制、煤的气化和天然气的开采中所产生的废气经常被硫醇污染，需要从中除去硫醇以达到环境标准。

某些药品，例如甲氰咪胍、雷尼替丁和尼唑替丁，其制备涉及含硫试剂的使用，和甲基硫醇副产物的产生。目前处理这些产物的方法是煅烧，该方法所产生的硫酸排放出来成为“酸雨”的成分之一。从这个角度来说也需要对吸收硫醇的方法进行改进。

硫醇吸收剂可用于吸收有机硫醇的检定方法。它们也可用作检定试剂，例如检测蛋白质的硫氢基。

本发明特别关注的是生化硫醇化合物、例如酶的吸收。很多酶含有来源于其半胱氨酸残基的活性硫羟基。在生物系统中，通过反应对其硫羟基进行化学改性，以可逆或不可逆地选择性抑制该酶的活性，从而可以作为治疗的基础。这样的酶实例为组织蛋白酶B、木瓜蛋白酶、H⁺/K⁺-ATP酶、白细胞介素β-1转化酶、蛋白质二硫化物异构酶(HIV)。

有大量疾病都牵涉组织蛋白酶B与L，包括与关节炎有关的渐进性软骨及骨退化。在关节炎的动物模型中，这些组织蛋白酶的抑制剂可减少炎症和关节损伤。涉及钙的蛋白酶钙蛋白酶Ⅰ和Ⅱ与阿尔茨海默氏症有关。白细胞介素β转化酶(M.Mullican等《生物有机化学与医药化学快报》1994,2359)是药物开发的主要目标，这是因为它在炎性蛋白质白细胞介素-1β的释放中起到了关键作用。过量水平的白细胞介素-1β牵涉大量疾病，包括类风湿性关节炎、牛皮癣、肠炎、和胰岛素依赖型糖尿病。正象硫醇蛋白酶一样，它的作用机制涉及活性部位的半胱氨酸残基。

建议的这些酶的可逆的抑制剂包括肽醛、腈、酮羰基化合物。建议的不可逆的抑制剂包括肽卤代甲基酮、重氮甲基酮、酰氧基甲基酮、酮甲基锍盐、环氧化物和乙烯砜。尽管这些化合物是已知的硫醇蛋白酶抑制剂，却没有一种结构类型的化合物发现有作为候选药物的重要应用。

胃H^s+/K⁺-ATP酶已知也是质子泵，它牵涉哺乳动物消化性溃疡的疾病进展。该酶也含有来源于其半胱氨酸残基的活性硫羟基。抑制该酶活性是人消化性溃疡的主要治疗基础之一。硫醇吸收剂也可用于抑制H⁺/K⁺-ATP酶。这样的化合物的一个例子是奥美拉唑。

发明概述

本发明提供了吸收硫醇化合物的新方法，该方法包括使硫醇化合物与某些噻二唑反应。一部分用于本发明的噻二唑是新颖的化合物。其他则是已知的化合物，不过以前没有提出该用途。用于本发明的化合物特征在于3位取代而N-2位未取代的1,2,4-噻二唑环结构。

用于本发明方法的一组化合物是对应于下式Ⅰ的1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑：

或其药学上可接受的盐，其中：R₁、R₂、R₃、R₄独立为氢、低级烷基、卤素、硝基、氨基、羟基、低级烷氧基、低级烷基氨基、低级二烷基氨基、NR’R”、OC(O)R’、OC(O)OR’、OC(O)NR’R”、NR’(COR’)、NHC(O)NR’R”、NHC(O)OR’、CONR’R”；R’、R”独立为氢、低级烷基、芳基或低级芳基烷基，或NR’R”中的R’与R”以及N原子构成一个式

五元或六元杂环，其中n为4或5，Y选自：(1)式

基团，其中R₇代表氢、羟基、低级烷基、低级环烷基、低级烷氧基、低级链烯基、低级炔基、芳基、低级芳基烷基、杂环基、杂环基氧基、杂环基低级亚烷基、一个NR’R”基团，其中R’与R”独立选自氢、低级烷基、芳基和低级芳基烷基，或R’与R”及N原子共同构成一个五元或六元杂环N(CH₂)_n，其中n=4或5；和一个ANR’R”、AOR基团，其中A为一个氨基酸残基或2至3氨基酸残基的肽，R’、R”定义同上；(2)杂环基、低级亚烷基杂环基、低级烷基-低级亚烷基杂环基氨基、低级亚烷基氨基杂环基或氨基杂环基，杂环连接在任意杂原子或碳原子上，从而产生一个稳定结构，该杂环可选被1-3个取代基取代，取代基选自低级烷基；羟基；硝基；氨基；低级烷基氨基；二低级烷基氨基；低级烷氧基；被1-3个取代基取代的低级烷基，取代基选自羟基、低级烷基氨基甲酰基、苯基、卤代苯基、杂环基、羧基和低级烷氧基羰基；低级酰基；低级烷氧基羰基；低级烷基磺酰基；酰氨基；烯丙基；苄基；可选被氨基、卤代羟基、低级烷氧基、低级烷基、低级烷基氨基或二低级烷基氨基取代的苯基；可选被1-3个取代基取代的杂环基，取代基选自硝基、羟基、低级烷氧基、低级烷基、氨基、卤素、低级烷基氨基、二低级烷基氨基；其条件是杂环基Y不是1-咪唑基或取代的1-咪唑基；(3)NR’R”或-CH₂-NR’R”，其中R’、R”定义同上；(4)ANR’R”、AOR，其中A为一个氨基酸残基或2至3氨基酸残基的肽，R’、R”定义同上；(5)低级2-(烷氧基羰基)烷基；(6)卤素；(7)式R₈-CHOH-基团，其中R₈为氢、低级烷基、芳基、低级芳基烷基、低级环烷基、低级链烯基、低级炔基或杂环基，该杂环连接在任意杂原子或碳原子上，从而产生一个稳定结构；(8)式R₉-C(=NOR₁₀)-基团，其中R₁₀为氢、低级烷基或低级芳基烷基，R9为低级烷基、芳基、低级芳基烷基、低级环烷基、低级链烯基、低级炔基或杂环基，该杂环连接在任意碳原子上，从而产生一个稳定结构；(9)低级烷氧基、低级芳基烷氧基、低级环烷氧基、低级杂环基烷氧基或杂环基氧基；(10)低级烷基磺酰基、低级烷基亚磺酰基、芳基磺酰基、芳基亚磺酰基、低级芳基烷基磺酰基、低级芳基烷基亚磺酰基、杂环基磺酰基、杂环基亚磺酰基；可选被1至2个取代基取代，取代基选自低级烷基、卤素、硝基、羟基、低级烷氧基、或式NR’R”、OC(O)R’、OC(O)OR’、OC(O)NR’R”、NR’(COR’)、NHC(O)NR’R”、NHC(O)OR’基团，其中R’与R”定义同上；(11)式-C(=NOH)COOR₁₁基团，其中R₁₁为低级烷基；(12)氢、取代的低级烷基、芳基、低级芳基烷基、低级环烷基，每个基团可选被1至2个取代基取代，取代基选自卤素、硝基、氨基、羟基、低级烷氧基、低级烷基氨基、低级二烷基氨基、NR’R”、OC(O)R’、OC(O)OR’、OC(O)NR’R”、NR’(COR’)、NHC(O)NR’R”、NHC(O)OR’,R’与R”定义同上。

用于本发明方法的第二类化合物是二环化合物，即下式Ⅱ的咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑：其中R₅和R₆可以具有与上式Ⅱ中R₁、R₂、R₃和R₄相同的含义，Y定义同上。

用于本发明的第三类化合物是通式Ⅲ的3-取代的、N-2-未取代的噻二唑：

其中Y定义同上，T代表(a)一个低级烷基、一个低级烷基芳基、一个仲胺或叔胺基、一个氨基酸残基或一个选自吡咯、吡啶、哌啶、哌嗪和吗啉代的杂环基；或(b)一个-M[-AMA-]L基团，其中M为键合在噻二唑核上的化学间隔基，选自

和

L为一个N端肽保护基团或端基-OR’、NR’R”、其中R’与R”定义同上；-AMA-为一个氨基酸或肽残基-[NH-CHA¹-CO]-_n，其中A¹为任一已知的氨基酸α取代基，n为一个1至3的整数；或(c)-NHPh或一个式

的二苯基胍基，其中Ph代表可选被羟基、低级烷氧基或氨基取代的苯基。

用于本发明的新颖的单环化合物是通式Ⅲa的3-取代的、N-2-未取代的噻二唑：

其中Y’代表低级烷基，低级烷氧基，氨基，羧基，低级烷氧基羰基或可选在4-位被低级烷基取代的1-哌嗪基；被1或2个取代基取代的低级烷基，取代基选自羟基、低级烷基氨基甲酰基、苯基、卤代苯基、杂环基、羧基和低级烷氧基羰基；苄基；可选被氨基、卤素、羟基、低级烷氧基、低级烷基、低级烷基氨基、或二(低级烷基)氨基取代的苯基；可选被1-3个取代基取代的杂环基，取代基选自硝基、氨基、卤素、羟基、低级烷氧基、低级烷基、低级烷基氨基、或二(低级烷基)氨基；1,1-二苯甲基，其中两个苯环均可选被卤素、氨基、羟基或低级烷氧基取代；2-吡啶基，其中吡啶环可选被1-3个取代基取代，取代基选自硝基、氨基、卤素、羟基、低级烷氧基、低级烷基、低级烷基氨基、或二(低级烷基)氨基；或一个-CH₂-CO-NH-低级烷基；Q代表一个-T[-AMA-]L基团，其中T为一个键合在噻二唑核上的化学间隔基，选自和

L为一个N端肽保护基团或端基-OR’、NR’R”、

其中R’与R”定义同上；-AMA-为一个氨基酸或肽残基-[NH-CHA¹-CO]-_n，其中A¹为任一已知的氨基酸α取代基，n为一个1至3的整数；其条件是若Q是-NHPh，则Y’不是烷氧基、二烷基氨基、羟基烷基氨基、二(羟基烷基)氨基；若Y’是4-取代的哌嗪基，则Q不是-T-[-AMA-]L基团。

本发明的另一方面是上述通式化合物作为硫醇吸收剂在由硫醇化合物生成二硫化物的反应中的用途。与硫醇化合物的反应在溶液中进行，例如体液等含水介质，反应温度和其他适当的反应条件使反应试剂保持在液体溶液或悬液中。

附图的简要说明

图1说明了硫醇化合物与按照本发明的3-取代的1,2,4-噻二唑化合物之间的相互作用；

图2说明了用于制备本发明方法所用的最优选化合物的合成路线；

图3为下列例41结果的图形表示。

优选实施方案的说明

用于本发明药学方法、即通过巯基的反应抑制质子泵酶的优选化合物对巯基官能团表现出来了特异性，这一点由下列事实得到证明，这些化合物的咪唑并[1,2-d]噻二唑核对体内存在的胺、氢氧化物或碘离子等其他亲核物质表现出有限的反应性或没有表现出反应性。在化学模型系统中，尤其是1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的杂环对这些亲核物质是化学惰性的。

特别优选用于按照本发明方法的式Ⅰ与Ⅱ化合物中，R₅与R₆为氢，Y为R₇CO，其中R₇为低级烷基、芳基、氢、或可选被1至3个选自甲基和甲氧基的取代基取代的2-吡啶基。

按照本发明，一组特别感兴趣和优选的化合物是具有氨基酸或肽残基侧链的化合物。按照本发明，它们可以是单环、二环或三环化合物。该氨基酸或肽残基侧链可以在噻二唑环3-位连接在二环或三环核上(基团Y)。在单环化合物中，该侧链可以连接在位置3或位置5。

用于本发明的单环化合物中作为侧链的氨基酸或肽残基的使用、特别是当它们在位置5连接在核上时，可以实现对将要被化合物抑制的酶具有结合亲和性的适当基团进行选择。而且，通过对侧基进行适当选择，可以调整结合亲和性，使化合物与酶的蛋白质链结合的部位邻近化合物所要攻击的酶的硫羟基。正如下文所述和附图1说明，正是本发明化合物的被一种适当选择的基团Y活化的-S-N=C-基团，作为攻击硫醇化合物并使其生成二硫化物的手段。在化合物远离-S-N=C-基团的位置含有一种适当选择的酶结合或识别基团作为侧链，可以使化合物找到所选择的酶并与之结合，以促进对酶的硫羟基的化学攻击。因此，由于识别侧基的存在，按照本发明具有这种性质的化合物对攻击特异的、选择的酶是高度选择性的，而对其他它们可能遇到的硫醇的反应性是非常低的。

这样一种侧基的一个具体实例含有式：[-CO-亮氨酰-NH-异戊基]的氨基酸残基亮氨酰异戊酰胺。该基团在其邻近-SH基团的位置对组织蛋白酶B和木瓜蛋白酶具有识别序列。因此，诸如3-甲氧基-5-氨基-1,2,4-噻二唑等具有通过其5-氨基结合的该侧基的化合物是一种组织蛋白酶L、组织蛋白酶B和木瓜蛋白酶的良好抑制剂。

对组织蛋白酶B和L的肽识别序列可以定义如下(已表示为连接在本发明1,2,4-噻二唑的5-位上)：

其中Y定义同前；

在每种情况中代表一个氨基酸残基，这样A₁为来自已知氨基酸的任意α基团，PG为一种N保护基团，选自杂环基羰基、苯甲酰基、苄氧羰基(carbobenzyloxy)和叔丁氧基；B₂为氢、可选被氨基、胍基或N,N-二(低级烷基)胍基取代的低级烷基；n为1或2。

可以在按照本发明的二环和三环化合物中使用相同的基团。优选的-NH-CHA₁-CO-基团是亮氨酰。优选的B₂基团是氢、异戊基或4-胍基丁基。优选的PG基团是苄氧羰基。优选的(CO-CHA₁-NH)_n是二肽苯丙氨酰-丙氨酰。

为抑制白细胞介素β-1转化酶，作为本发明化合物的识别侧链优选为一种三肽，例如通式：

的侧基，其中-(CO-CHA₁-NH)-是-缬氨酰-丙氨酰-天冬氨酰-，PG是苄氧羰基，优选连接在本发明单环噻二唑化合物的远离-S-N=C-基团的位置，例如位置5。

因此，本发明另外特别优选的式Ⅲ化合物包括其中T代表一个氨基酸或肽残基的化合物，例如式：

式：

式：

尤其当Y=OCH₃时；式：

其中W为一种式AOR’或ANR’R”的氨基酸或肽残基，例如式：

和式：

所有用于本发明方法的化合物特征在于3-取代的1,2,4-噻二唑环结构，且N-2未取代，能够与硫醇发生化学反应，裂解位置1、2的S-N键。只要保持这些特征，噻二唑核位置4和5上的基团和取代基可以是非常广泛的，而不严重影响化合物的基本化学反应性。

正如本文所用：

例如用在低级烷基中的“低级”一词意为1至8个碳原子。

单用或结合使用的“芳基”一词意为苯基或萘基，其可选具有一个或多个选自烷基、烷氧基、卤素、羟基、氨基及诸如此类的取代基，例如苯基、对甲苯基、4-甲氧基苯基、4-(叔丁氧基)苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-羟基苯基、1-萘基、2-萘基及诸如此类。

单用或结合使用的“芳基烷氧基羰基”一词意为式-C(O)-O-芳基烷基残基，其中“芳基烷基”具有下列含义。芳基烷氧基羰基残基的一个例子是苯甲氧基羰基。

“芳基烷基”一词意为一种烷基残基，其中一个氢原子被一个芳基残基取代，例如苯甲基、苯乙基及诸如此类。

“环烷基羰基”一词意为来源于单环或桥环烷羧酸的酰基，例如环丙烷羰基、环己烷羰基、金刚烷羰基、及诸如此类，或来源于例如可选被烷基氨基取代的苯稠合的单环烷羧酸的酰基，例如1,2,3,4-四氢-2-萘甲酰基、2-乙酰氨基-1,2,3,4-四氢-2-萘甲酰基。

“芳基烷酰基”一词意为来源于芳基取代的链烷羧酸的酰基残基，例如苯乙酰基、3-苯丙酰基、氢化肉桂酰基、4-苯丁酰基、(2-萘基)乙酰基、4-氯氢化肉桂酰基、4-氨基氢化肉桂酰基、4-甲氧基氢化肉桂酰基、及诸如此类。

“芳酰基”一词意为来源于芳族羧酸的酰基残基。该残基实例包括芳族羧酸，被选择性取代的苯甲酸或萘甲酸，例如苯甲酰基、4-氯苯甲酰基、4-羧基苯甲酰基、4-[(苯甲氧基)羰基]苯甲酰基、1-萘甲酰基、2-萘甲酰基、6-羧基-2-萘甲酰基、6-[(苯甲氧基)羰基]-2-萘甲酰基、3-苯甲氧基-2-萘甲酰基、3-羟基-2-萘甲酰基、3-[(苯甲氧基)甲酰氨基]-2-萘甲酰基、及诸如此类。

本文所用“杂环基”除非另有说明，代表一个稳定的5至7元单环或二环，或稳定的7至10元二环杂环，该杂环是饱和或不饱和的，由碳原子和一至三个杂原子组成，杂原子选自由N、O、S组成的组，其中氮和硫杂原子可选为氧化的，氮原子可选为季铵化的，该二环杂环包括任意上述定义的杂环稠合在一个苯环上的任意二环基团。杂环可以连接在任意杂原子或碳原子上，从而产生一个稳定结构。该杂环部分的实例通称为杂环基，包括哌啶基、哌嗪基、2-氧哌嗪基、2-氧哌啶基、2-氧吡咯烷基、2-氧吖庚因基、吖庚因基、吡咯基、4-哌啶酮基、吡咯烷基、吡唑基、吡唑烷基、咪唑基、咪唑啉基、咪唑烷基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、噁唑烷基、异噁唑基、异噁唑烷基、吗啉基、噻唑基、噻唑烷基、异噻唑基、奎宁环基、异噻唑烷基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、噻二唑基、苯并吡喃基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、呋喃基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、噻吩基、苯并噻吩基、四氢喹啉基(例如1,2,3,4-四氢-2-喹啉基等)、1,2,3,4-四氢-异喹啉基(例如1,2,3,4-四氢-1-氧-异喹啉基等)、喹喔啉基、β-咔啉基、2-苯并呋喃羰基、硫代吗啉基、硫代吗啉基亚砜、硫代吗啉基砜、噁二唑基及诸如此类。杂环的取代方式导致一个稳定结构的产生。

“氨基酸残基”一词意为天然来源的α、β-、和γ-氨基羧酸，包括它们的D和L旋光异构体及其外消旋混合物，以及这些氨基酸的N-低级烷基和N-苯基低级烷基衍生物。该氨基酸残基通过氨基酸的氮成键。可以用在本发明中的天然来源的氨基酸包括但不限于丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、鸟氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、甲状腺素、色氨酸、酪氨酸、缬氨酸、β-丙氨酸、和γ-氨基丁酸。优选的氨基酸残基包括脯氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、丙氨酸、γ-氨基丁酸、缬氨酸、甘氨酸、和苯基甘氨酸。

除甘氨酸以外的所有α-氨基酸含有至少一个不对称碳原子。其结果是，它们是旋光活性的，在外消旋混合物中以D或L构型存在。因此，一些本发明化合物可以制得其旋光活性的形式，或要求保护的这些化合物的外消旋混合物。

其中A为氨基酸或2至3氨基酸残基的肽的“A”指氨基酸或肽的双基，A的左手一侧以HN-残基开始，右手一侧以-C(O)残基结束。例如，甘氨酸简写为HAOH，其中A为HN-CH₂-C(O)。

“芳氧基烷酰基”一词意为式芳基-O-烷酰基的酰基残基。

“杂环基氧基羰基”一词意为来源于杂环基-O-CO-的酰基，其中杂环基定义同上。

“杂环基烷酰基”一词意为来源于杂环基取代的链烷羧酸的酰基残基，其中杂环基具有与上文给出相同的含义。

“杂环基烷氧基羰基”一词意为来源于杂环基取代的烷基-O-COOH的酰基残基，其中杂环基具有与上文给出相同的含义。

“氨基烷酰基”一词意为来源于氨基取代的链烷羧酸的酰基残基，其中氨基可以是含有取代基的伯、仲或叔氨基，取代基选自氢、和烷基、芳基、芳基烷基、环烷基、环烷基烷基及诸如此类。

“药学上可接受的无毒性盐”指本发明化合物的药学上可接受的盐，该盐保持了母体化合物的生物活性，不是生物学或非生物学所不需要的(例如该盐是稳定的)。从本发明化合物可以生成两种类型的盐：(1)来自具有一个羧酸官能团的式Ⅰ化合物的无机碱和有机碱的盐。(2)在多数本发明化合物的胺官能团上可生成酸加成盐。

来自无机碱的药学上可接受的盐包括钠、钾、锂、铵、钙、镁、亚铁、锌、铜、锰、铝、铁、锰的盐及诸如此类。尤其优选为铵、钾、钠、钙和镁的盐。来自有机碱的药学上可接受的无毒性盐包括伯、仲和叔胺的盐、取代的胺的盐，取代的胺包括天然来源的取代的胺、环胺和碱离子交换树脂。这样的盐例如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二甲氨基乙醇、缓血酸胺、二环己胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、哈胺(hydrabramine)、胆碱、甜菜碱、1,2-己二胺、葡糖胺、甲基葡糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、聚胺树脂及诸如此类。特别优选的有机无毒性碱为异丙胺、二乙胺、乙醇胺、哌啶、缓血酸胺、二环己胺、胆碱和咖啡因。

药学上可接受的酸加成盐是与无机酸和有机酸生成的，无机酸例如氢氯酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸及诸如此类，有机酸例如乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸及诸如此类。

“动物”一词指人以及所有其他动物物种，特别是哺乳动物(例如狗、猫、马、牛、猪等)、爬行动物、鱼、昆虫和蠕虫。

用于按照本发明方法的一些具体的、最优选的化合物如下：3-(1-氧乙基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，具有下列化学式：3-(1-氧苯基甲基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，具有下列化学式：

3-(2-吡啶基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，具有下列化学式：

3-(4-甲基-1-哌嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，具有下列化学式：3-(4-吗啉基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，具有下列化学式：

3-(1-吡咯烷基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，具有下列化学式：

3-溴-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，具有下列化学式：

3-[(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)氧甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，具有下列化学式：

3-羧基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，具有下列化学式：

7-甲氧基-3-[(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)氧甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，具有下列化学式：3-(4-甲基苯磺酰基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，具有下列化学式：

3-(1-氧乙基)咪唑并[1,2-d]-1,2,4-噻二唑，具有下列化学式：

3-(氧苯基甲基)咪唑并[1,2-d]-1,2,4-噻二唑，具有下列化学式：

3-(4-乙酰基-1-哌嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，具有下列化学式：3-[4-(3-氨基-2-吡啶基)哌嗪基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，具有下列化学式：3-[4-(2-吡啶基)哌嗪基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，具有下列化学式：

3-[4-(3-氨基-2-吡啶基)哌嗪基甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，具有下列化学式：

3-[4-(2-吡啶基)哌嗪基甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，具有下列化学式：

3-{[4-(1-(4-氯苯基)-1-苯基甲基)哌嗪基]甲基}-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，具有下列化学式：

(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基甲酰基-L-亮氨酰异戊酰胺，具有下列化学式：5-[苄氧羰基-L-苯丙氨酰-L-丙氨酰氨基]-3-甲氧基-1,2,4-噻二唑，具有下列化学式：

本发明提供了制备用于本发明化合物的合成方法。某些方法涉及一种化合物转化为另一种、不同的化合物。方法的选择在很大程度上取决于最终化合物中的所需Y基团，即3-位取代基。

在这些方法所述的咪唑并[1,2-d]噻二唑化合物和式Ⅳ化合物中，X与Z为R₅、R₆，或共同代表一个稠合在咪唑磺上、且可选被R₁、R₂、R₃和R₄取代的苯环。

适用于二环或三环化合物的第一种方法中，式Ⅴ(见下)的相应3-氧化合物在位置2具有一个低级烷基或低级芳基烷基，在一种惰性溶剂中使其与YCN反应。该方法适用于这样的化合物，其中Y为低级烷基、芳基、芳基烷基、环烷基、1-卤代烷基、1,1-二卤代烷基、杂环基、低级烷基磺酰基或芳基磺酰基。反应可由下式代表：

适当的腈化合物YCN中，Y为低级烷基、芳基、芳基烷基、环烷基、1-卤代烷基、1,1-二卤代烷基、低级烷基磺酰基、芳基磺酰基或杂环基，该腈化合物大部分是商业上可得到的，例如来自Aldrich化学品公司。或者，它们可以按照本领域已知的方法进行制备(例如参见《有机官能团制备》第Ⅰ卷第17章，Sandler and Karo著，学院出版公司1983)。一些代表性的实例为乙腈、苄腈、2-氰基吡啶、环戊基氰、二溴乙腈、6-氰基嘌呤和对甲苯磺酰氰。反应条件通常为在70至140℃高温下，在甲苯、二甲基甲酰胺等惰性溶剂中进行6至24小时，优选为16小时。在某些情况下，YCN用作溶剂。产物按常规方法分离。

也可以使用其中Y为氨基、低级烷基氨基、低级二烷基氨基或低级硫代烷基的式YCN化合物，制得其中Y为氨基、低级烷基氨基、低级二烷基氨基、硫代烷基的式Ⅰ和Ⅱ化合物，即二环和三环化合物。这种类型的YCN实例为商业上可得到的氨基腈、1-哌啶腈、硫氰酸甲酯。YCN化合物也可按文献方法从溴化氰合成(参见Fieser and Fieser著《有机合成试剂》p.174,John Wiley and Sons出版公司，1967)。按照Martin等《四面体》1983,39,2311的方法，从异氰酸烷基酯和2-巯基苯并咪唑制得式Ⅴ的2-烷基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑-3(2H)-酮。按照Tittlebach等《Prakt化学杂志》1988,330,338-348的方法，从异氰酸烷基酯和2-巯基咪唑制得式Ⅴ的2-烷基咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑-3(2H)-酮。2-巯基苯并咪唑是商业上可得到的，或者可按本领域熟知的方法制备或是文献中易于得到的。商业上可得到的2-巯基苯并咪唑包括5-甲基-2-巯基苯并咪唑、5-甲氧基-2-巯基苯并咪唑、5-氯-2-巯基苯并咪唑。不是商业上可得到的适用的2-巯基苯并咪唑可按已知方法制备。制备方法包括Billeter等《Ber》1887,20,231、《有机合成》Coll.Vol.4,569、Futaki等《日本药学会会志》1954,74,1365、Bucknall等《自然》1967,213,1099。

当最终化合物中的基团Y为R₇-C=O,R₇为低级烷基、芳基、低级芳基烷基、低级环烷基、低级烷氧基、氨基、低级烷基氨基、低级二烷基氨基、杂环基，其中，该杂环连接在任意杂原子或碳原子上，从而产生一个稳定结构，NR’R”、ANR’R”、AOR’,A为氨基酸残基或2至3氨基酸残基的肽，R’、R”定义同上，在适用于制备二环和三环化合物的第二种类似方法中，使通式

化合物与在位置2具有一个低级烷基或低级芳基烷基取代基的相应3-氧代化合物、即上述第一种方法所用的式Ⅴ化合物反应，于是：

反应可以在二氯甲烷、四氢呋喃或二甲基甲酰胺等一种惰性溶剂中进行。反应在室温下进行3至48小时的时间，通常约为6小时。然后按常规方法分离所得固体。

多数式Ⅵ的氰基酮、氰基酯衍生物是商业上可得到的。用于本发明的氰基酮衍生物是商业上可得到的，或者可按本领域已知的方法制备。商业上可得到的氰基酮包括苯甲酰氰、乙酰氰、甲氧基羰基氰。商业上可得到的氰化物衍生物名称表是可得到的(《化学来源》美国第24版，1983,Directories出版公司，Ormont Beach,Fla.)。不是商业上可得到的适当的氰基酮、氰基酯可按照本领域已知的方法易于制备，例如Mathieu等《C-C键的生成》卷Ⅰ,p456-457,Georg Thieme Verlag,1973，斯图加特。其他适用的方法包括Koenig等《四面体快报》1974,2275和Ando等《合成》1983,637。这些方法包括使一种酰基氯与氰化亚铜或氰化钾反应。

另一种方法是，通过水解其中Y为R₇-C(Hal)₂、Hal为卤素、优选为氯、溴或碘的式Ⅰ化合物，可制得其中Y为R₇-C=O、R₇定义同上的式Ⅰ化合物。该水解反应可在一种强酸性介质或在硝酸银水溶液中进行，可由下式代表：

制备具有如上述第二种方法所述的Y基团的咪唑和苯并咪唑产物的第三种方法最后一步涉及在一种惰性溶剂中使式Ⅵ的2-硫醚二唑化合物与间氯过苯甲酸(MCPBA)发生成环反应，生成1,2,4-噻二唑环，可由下式代表：

在碱中，溴杂环基乙腈衍生物(Ⅶ)可与2-巯基苯并咪唑(Ⅷ)反应得到式Ⅵ化合物。这些碱的实例为氢氧化钠或氢氧化钾。反应在水与乙醇的混合物中、在室温下进行大约1至16小时，优选为8小时，产物Ⅵ按常规方法分离。

在二氯甲烷或1,2-二氯乙烷等惰性溶剂中，化合物Ⅵ与间氯过苯甲酸反应得到Y为R₇-C=O的式Ⅰ化合物。反应在室温下进行大约3至8小时，优选为3小时。产物按常规方法分离。

通过在四氯化碳等惰性溶剂中使式Ⅹ化合物与N-溴琥珀酰亚胺反应，依次制得溴杂环基乙腈(Ⅶ)衍生物。

第四种方法使用式ⅠA化合物作为原料，使其衍生为Y为-CHOH-R₇(式ⅠB)或-C=NOH-R₇(式ⅠC)或-COOH(式ⅠD)的式Ⅰ化合物，于是：

在乙醇中用硼氢化钠或氰基硼氢化钠还原Y为R₇-C=O的相应式ⅠA化合物，可制得式ⅠB化合物。式ⅠB化合物按常规方法分离。

使Y为R₇-C=O的式Ⅰ化合物与羟基胺衍生物反应，可制得式ⅠC化合物。羟基胺的实例为羟基胺、甲氧基胺、乙氧基胺、苄氧基胺。本领域大量文献公开了酮向肟的转化(例如参见Sandler and Karo《有机官能团制备》1989，第Ⅲ卷第11章)。

通过Y为R₇-C=O、R₇为低级烷氧基的式Ⅰ化合物的碱水解反应可制得R₇为羟基的式ⅠD化合物。反应在1M氢氧化钠、室温、在水与一种有机溶剂中进行，有机溶剂例如甲醇、乙醇、1,4-二噁烷或乙腈。用稀酸中和碱后，产物按常规方法分离。

第五种适用于制备按照本发明的Y代表卤素的式Ⅰ和Ⅱ化合物的方法使用与第一种方法和第二种方法所用相同的式Ⅴ化合物作为原料，使其与氰卤化物反应，于是：

反应在惰性溶剂中进行。化合物按常规方法分离。

第六种方法使用Y代表卤素的式Ⅰ和式Ⅱ化合物作为原料，例如按照上述第五种方法制得的化合物，使它们与一种伯胺或仲胺、或醇反应，得到其中Y为NR’R”、AOR’、ANR’R”、OR’的式Ⅰ化合物，其中R’、R”定义同上。该方法最好是在原料中Y为溴的情况下进行。反应可由下式代表：

在惰性溶剂中，使亲核物质，如低级烷氧化物、芳氧化物、低级芳基烷氧化物、低级环烷氧化物、氨、低级烷基胺、低级二烷基胺、杂环基胺、HNR’R”、HANR’R”、HAOR’，其中A为一个氨基酸残基或2至3氨基酸残基的肽，与Y=溴的式Ⅰ化合物反应，得到的式Ⅰ化合物中Y为低级烷氧基、芳氧基、低级芳基烷氧基、低级环烷氧基、氨基、低级烷基氨基、低级二烷基氨基、NR’R”、ANRR”、AOR’，其中A为一个氨基酸残基或2至3氨基酸残基的肽。

第七种方法使用按照本发明的Y代表COOH的式Ⅰ和Ⅱ化合物(可由上述第四种方法制得)作为原料，使它们与一种胺反应，得到Y为CO-R₇、其中R₇为NR’R”、AOR’、ANR’R”的式Ⅰ化合物，于是：

在这种方法中，在四氢呋喃、二甲基甲酰胺、二氯甲烷等惰性溶剂中，在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDCI)和羟基苯并三唑等一种脱水剂的存在下，使Y为COOH的式Ⅰ羧酸化合物与一种氨基酸酰胺HANR’R”、或胺HNRR”、或氨基酸酯HAOR’反应，可制得Y为R₇-C=O且R₇为NR’R”、AOR’、ANR’R”的式Ⅰ和Ⅱ化合物。

第八种适用于制备其中Y代表低级烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂环基磺酰基、低级芳基烷基磺酰基、低级烷基亚磺酰基、芳基亚磺酰基、杂环基亚磺酰基或低级芳基烷基亚磺酰基的化合物的方法包括使相应的硫醚化合物与预定化学计算量的氧化剂反应，于是：其中n为1或2。一种优选用于该方法的氧化剂是间氯过苯甲酸mCPBA，不过尚有很多其他适用的氧化剂。

按照本发明的优选方法之一是体外或体内抑制酶的活性，特别是抑制质子泵酶H⁺/K⁺-ATP酶，从而治疗人胃溃疡。随着H⁺/K⁺-ATP酶抑制剂的引入，实现了消化性溃疡治疗的一个重要进展。H⁺/K⁺-ATP酶已知也是质子泵，它位于胃壁细胞膜中，负责从血液向胃腔转运质子，质子的转运导致胃内容物pH降低，进而加重消化性溃疡。本发明方法作用在于通过吸收该酶，提供了一种治疗消化性溃疡的方法，这一点得到了下列具体实施例的证实。不过本发明方法也适用于其他多种硫醇吸收的化学系统，既包括生化(酶)系统也包括工业系统，正如下文所述，这与它们对苯乙基硫醇的反应性有关。

由于噻二唑化合物是通过生成S-S键来吸收含硫醇化合物的，它们可作半胱氨酸SH改性剂。因此硫醇吸收剂可用作酶上半胱氨酸残基化学改性的亲和性标记。因为这些化合物能够起到含半胱氨酸残基酶的亲和性标记的作用，它们可用作多种生理学上的酶的抑制剂，例如组织蛋白酶B、木瓜蛋白酶、白细胞介素β-1转化酶、和蛋白质二硫化物异构酶(HIV)，以及H⁺/K⁺-ATP酶。因为酶作用途径牵涉大量生理学条件和疾病状态，本发明化合物具有多种潜在的治疗应用。

另一种情况是，硫醇吸收剂能够与酶和蛋白质上半胱氨酸残基反应，从而改变酶的生化性质。硫醇吸收剂可用作含半胱氨酸残基的酶的稳定剂和促进剂。这些对治疗具有重要意义的酶的一些实例为PCl转化酶、三呋喃基二氢咪唑(见O’Rabilly S.等《新英格兰医学杂志》1995,23,1386-1390)。PCl是负责将proglucagon转化为GLP-1肽的转化酶。GLP-1调节剂可用于治疗糖尿病和肥胖。本发明化合物是硫醇吸收剂，可用作含半胱氨酸酶的稳定剂和促进剂。

本发明方法中的化合物的反应性可通过它们与苯乙基硫醇的反应进行说明。附图1对此进行了一般说明，硫醇试剂的R代表苯乙基。另外，根据现有技术(Im等《生物化学杂志》1985,260,4591；Sturm等《有机化学杂志》1987,52,4573；Lorentzon等《生物化学与生物物理学报》1985,817,25)，苯乙基硫醇可用作检查化合物对H⁺/K⁺-ATP酶硫羟基的反应性的模型。我们发现，式Ⅰ化合物与苯乙基硫醇(RSH=PhCH₂CH₂SH，图1)在惰性溶剂中反应，得到式Ⅺ化合物。式Ⅺ化合物与另一摩尔的苯乙基硫醇反应，生成式Ⅻ化合物，式Ⅻ化合物分解得到式ⅩⅢ化合物和式ⅩⅣ化合物。

1摩尔底物最少需要两摩尔苯乙基硫醇，完成1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的开环反应，得到式Ⅻ化合物。一般来说，用两摩尔苯乙基硫醇进行开环反应是较为缓慢的。当使用大量过量的苯乙基硫醇(例如25倍)时，反应速率迅速提高。我们发现，按照图1列出的方法，用于本发明的化合物与苯乙基硫醇快速反应。二硫化物是不能被分离的，因为我们发现它快速与第二摩尔硫醇反应，得到苯乙基硫醇的二硫化物和所示中间体。在H⁺/K⁺-ATP酶的化学模型中已经观察到了所吸收的硫醇中间体降解形成二硫化物(Lindberg等《医药化学杂志》1986,29,1329)。值得注意的是，在实际的酶中，涉及对另一个硫羟基的攻击的第二步反应要么不会发生，这是因为立体因素阻止了两种酶的接近，要么在有另一个最接近的硫羟基存在的情况下，生成二硫键。这两种情况都会起到抑制酶的作用。

按照本发明，已发现3-甲氧基-5-氨基-1,2,4-噻二唑等化合物与苄基硫醇在甲醇等有机溶剂中反应，得到3-硫代氨基甲酰基甲氧基异脲：

其他1,2,4-噻二唑，如3-甲基-5-二苄氨基-1,2,4-噻二唑、3-甲基-5-苄氨基-1,2,4-噻二唑和3,5-二(3-吡啶基)-1,2,4-噻二唑，在相似条件下是不与苄基硫醇反应的。单环1,2,4-噻二唑作为硫醇吸收剂的化学反应性取决于环系3位和5位的取代基。

1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑衍生物与硫醇发生类似反应：

若RSH为硫代苯酚，所得Ph-S-S-Ph二聚物能被分离。该反应对各种在杂环3位具有不同取代基的1,2,4-二环和三环1,2,4-噻二唑来说也是普遍适用的。

优选用于本发明方法的化合物是分子量小于440的杂环。这些分子的对数P谱，即，在辛醇与水之间的分布系数从0.5至4.0不等，覆盖了多数已知药物的亲脂性范围。在治疗药物的研制中，这些是重要的因素，它们反映了各种类似物作为治疗药物在疾病的治疗中可具有潜在的应用，其中抑制含硫醇的酶是疾病治疗的可能的解决办法。

事实表明，用于本发明方法的化合物对硫醇官能团具有特异性，这个事实就是，这些化合物对胺、氢氧化物或碘离子等其他体内存在的亲核物质的反应性有限或没有反应性。在化学模型系统中，1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑杂环对这些亲核物质是化学惰性的。

用于按照本发明方法的一个具体、优选的化合物是7-甲氧基-3-[(4-甲氧基3,5-二甲基-2-吡啶基)氧甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。该分子在杂环3位具有一个吸电子基团。它在水中的溶解度有限。它的结构得到了X射线结晶学方法的证实。¹H与¹³C NMR、IR、质谱和元素分析也为化学鉴定该化合物提供了另外的证据。下列具体的实施例给出了其制备、特征化鉴定和性质的进一步具体描述。该化合物有效抑制动物模型胃酸分泌。

为治疗消化性溃疡，本发明化合物可以口服、局部或胃肠外给药，在剂量单位制剂中含有常规、无毒的药学上可接受的载体、助剂和赋形剂。此处所用胃肠外一词包括皮下注射或输注技术。除了治疗小鼠、大鼠、马、牛、羊、狗、猫等温血动物以外，本发明化合物还对人的治疗有效。

可用于组合物的常规、无毒的固体载体例如包括制药级的甘露糖醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、滑石、纤维素、葡萄糖、蔗糖、碳酸镁及诸如此类。如上定义的活性化合物可以制成液体可给药的组合物，方法例如通过将如上定义的活性化合物与可选的药物助剂溶解、分散在载体中，例如水、盐水、含水右旋糖、甘油、乙醇、及诸如此类，藉此形成溶液或悬液。如果需要的话，待给药的药物组合物还可含有少量无毒的辅助物质，如润湿剂或乳化剂及诸如此类，例如乙酸钠、山梨聚糖单月桂酸酯、乙酸三乙醇胺钠、油酸三乙醇胺等。实际制备这些剂型的方法是已知的，或者对本领域的普通技术人员来说是显而易见的：例如参见《Remington药物科学》Mack出版公司，Easton,Pa，第15版，1975。无论如何，待给药的制剂组合物含有消除受治疗者症状有效量的活性化合物。含有有效成分的药物组合物可以是适用于口服的形式，例如片剂、锭剂、糖锭、含水或油悬液、可分散的药粉或颗粒、乳剂、硬胶囊及软胶囊、或糖浆或酏剂。打算口服的组合物可以按照药物组合物制备领域已知的任意方法进行制备，这样的组合物含有一或几种药剂，来自由甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂组成的组，目的在于使制剂在药学上精致、可口。片剂含有活性成分与适用于片剂制备的无毒的药学上可接受的赋形剂的混合物。赋形剂例如可以是惰性稀释剂，如磷酸钙或磷酸钠；造粒与崩解剂，如玉米淀粉或藻酸；黏合剂，如淀粉、明胶或阿拉伯胶；和润滑剂，如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。片剂可按已知工艺包衣，以延迟其在胃肠道中的崩解和吸收，藉此提供长时间的缓释作用。可以使用单硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯。

口服制剂也可以以硬胶囊的形式存在，其中有效成分与一种惰性固体稀释剂混合，例如磷酸钙或高岭土，或以软胶囊的形式存在，其中有效成分与水或一种油介质混合，例如花生油、液体石蜡、或橄榄油。

含水悬液含有活性物质与适用于含水悬液制备的赋形剂的混合物。这样的赋形剂是悬浮剂，例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、树胶和阿拉伯胶；分散或润湿剂可以是天然来源的磷酸酯，例如卵磷脂，或烯烃氧化物与脂肪酸的缩合产物，例如硬脂酸聚氧乙烯酯，或环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物，例如十七碳烯氧基鲸蜡醇(heptadecathyl-eneoxycetanol)，或环氧乙烷与来源于脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物，例如聚乙烯山梨聚糖单油酸酯。含水悬液也可含有一或几种防腐剂，例如对羟基苯甲酸乙酯或正丙酯，一或几种着色剂，例如蔗糖或糖精。

将有效成分悬浮在一种植物油或矿物油中，可制得油悬液，植物油例如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油，矿物油例如液体石蜡。油悬液可含有一种增稠剂，例如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。可加入如上所述的甜味剂和矫味剂，制得可口的口服制剂。这些组合物可以通过加入抗坏血酸等抗氧化剂进行防腐。

通过加入水、适用于制备含水悬液的可分散的药粉和颗粒将有效成分与分散或润湿剂、悬浮剂和一或几种防腐剂混合。适用的分散或润湿剂和悬浮剂实例已如上述。也可存在另外的试剂体，例如甜味剂、矫味剂和着色剂。

本发明的药物组合物也可以是水包油乳剂的形式。油相可以是一种植物油，例如橄榄油或花生油，或一种矿物油，例如液体石蜡，或它们的混合物。适用的乳化剂可以是天然来源的磷酸酯，来源于脂肪酸与己糖醇酐的酯，例如山梨聚糖单油酸酯，和所述偏酯与环氧乙烷的缩合产物，例如聚氧乙烯山梨聚糖单油酸酯。乳剂也可含有甜味剂和矫味剂。

糖浆和酏剂可以与甜味剂配制而成，例如甘油、丙二醇、山梨糖醇或蔗糖。这样的制剂也可含有缓和剂、防腐剂和矫味剂与着色剂。使用那些上述适用的分散或润湿剂和悬浮剂，按公知技术可制成药物组合物。无菌注射剂也可以是一种在胃肠外可接受的无毒稀释剂或溶剂中的无菌注射溶液或悬液，例如在1,3-丁二醇中的溶液。在可接受的赋形剂和溶剂中，可以使用水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。另外，固定油是常用的溶剂或分散介质。为此，可以使用任何刺激性少的固定油，包括合成的单或二甘油酯。另外，油酸等脂肪酸也用于制备注射物质。

胃肠外给药一般特征在于注射，皮下、肌内或静脉内。注射物质可以制成常规形式，如液体溶液或注射前的在液体中的悬液，或者是乳液。适用的赋形剂例如水、盐水、葡萄糖、甘油、乙醇或诸如此类。另外如果需要的话，待给药的药物组合物也可含有少量的无毒辅助物质，例如润湿或乳化剂、pH缓冲剂及诸如此类，如乙酸钠、山梨聚糖单月桂酸酯、油酸三乙醇胺等。

与载体原料结合、制备单剂量剂型的有效成分的量将取决于受治疗者和特定的对人给药方式，可含有0.5mg至5mg与适当和惯用量载体原料混合的活性药剂，载体原料可以占到组合物总量的大约5至95％。剂量单位剂型一般含有大约1mg至500mg的有效成分。

不过可以理解的是，对特定患者使用的具体剂量水平取决于多种因素，包括所用具体化合物的活性、年龄、体重、一般的健康状况、性别、饮食、给药时间、药物配伍和所治疗特定疾病的严重性。

下列具体实施例对本发明作进一步描述和说明。

最优选实施方式的具体说明

例1溴(2-吡啶基)乙腈的制备

在室温下，向(2-吡啶基)乙腈(12.0g,0.10mol)在150ml四氯化碳中的溶液中加入18.1g N-溴琥珀酰亚胺(0.10mol)。混合物回流1.5小时。过滤除去所得沉淀，减压除去溶剂，得到粗产物，用己烷重结晶，得到18.6g(94％)目标化合物，为红色晶体：

mp 62-64℃；¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.67(d,1H),

7.97(t,1H),7.70(d,1H),7.51(td,1H)5.60(p,1H)ppm；

IR(KBr):3064,2972,1712,1587,1470,1439,1051,993

cm^-1；MS m/z 196,198(M⁺),117(M⁺-Br)；HRMS计算值

C₇H₅BrN₂ 195.9630，测定值195.9645.

按类似方法制得下列化合物：溴(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)乙腈：

mp 56-57℃；²H NMR(CDCl₃)δ8.31(s,1H),5.67(s,1H),

3.81(s,3H),2.37(s,3H),2.30(s,3H)ppm；¹³C NMR

(CDCl₃)δ164.84,150.19,149.56,128.28,125.29,115.49,

60.135,27.99,13.51,11.05ppm；IR(KBr):3415,2988,2210,1568,1472,1255,997,791cm^-1；MS m/z 255,257(MH⁺),175(M⁺-Br).

例2[(2-苯并咪唑基)硫代](2-吡啶基)乙腈的合成

将2-巯基苯并咪唑(0.30g,3.0mmol)、溴(2-吡啶基)乙腈(0.59g,3.0mmol)和碳酸钾(0.37g,3.0mmol)在50ml无水N,N-二甲基甲酰胺中的混合物在60℃下加热6小时。蒸发溶剂。残余物溶于乙酸乙酯，用水、再用饱和氯化钠溶液洗涤。有机层经硫酸镁干燥，蒸发，得到一固体。粗产物进一步用硅胶柱色谱法精制(100％乙酸乙酯)，得到66mg(10％)目标化合物，为一固体；mp 166-167℃；¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.3(m,1H),8.65(m,2H),8.32(m,1H),7.78(br s,4H),4.81(br s,2H)ppm；IR:2206,1512,1465,1432,1357,1179,740cm^-1.

用2-巯基咪唑代替2-巯基苯并咪唑，按类似方法制得下列化合物：[(2-咪唑基)硫代](2-吡啶基)乙腈：mp 203-204℃(dec)；¹H NMR(CDCl₃)δ8.51(d,1H),7.65(t,1H),7.3 6(d,2H),7.12(d,1H),7.03(dd,1H),6.33(br s,2H)ppm,¹³C NMR(CDCl₃)δ154.08,148.23,145.76,136.84,134.95,134.43,119.15,118.40,109.32,96.15ppm；IR(KBr)3344,3225,2202,1643,1493,1485,1427cm^-1；

例3[(5-甲氧基-2-苯并咪唑基)硫代](4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)乙腈的合成

在室温下，向2-巯基-5-甲氧基苯并咪唑(15.1g,0.14mol)溶于40ml8.4％氢氧化钠的溶液中加入170ml甲醇，再加入溴(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)乙腈(21.4g,0.11mol)。混合物在氮气下加热回流1小时。过滤除去所得沉淀，蒸发甲醇。所得残余物用氯仿萃取，氯仿用水洗涤3次，经硫酸镁干燥。蒸发溶剂后，粗产物用乙醚重结晶，得到22.6g(90％)目标化合物，为黄色晶体： mp 193-197℃；¹H NMR(CDCl₃)δ8.25(s,1H),7.65(dd,1H),7.30(m,1H),6.90(m,1H),6.30(br s,2H),3.95(s,3N),3.75(s,3H),2.50(s,3H),2.20(s,3H)ppm.

例43-[氧(2-吡啶基)甲基]咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑的合成

向[(2-咪唑基)硫代](2-吡啶基)乙腈(30mg,0.14mmol)在5ml氯仿中的溶液中分次加入0.12g 60％间氯过苯甲酸(0.42mmol)。混合物在室温下搅拌10小时。所得混合物用水和饱和碳酸氢钠溶液洗涤。有机相然后用炭处理，过滤，得到粗产物。硅胶色谱法(100％乙酸乙酯)得到22mg(84％)目标化合物，为黄色固体：mp 147-148℃；¹H NMR(CDCl₃)δ8.87(d,1H),8.30(m,2H),7.95(m,1H),7.57(m,1H),7.52(m,1H)ppm；IR(KBr)1700,1660cm^-1；MS m/z 230(M⁺)；HRMS计算值C₁₀H₆N₄OS 230.L262，测定值230.0267.

例57-甲氧基-3-[(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)氧甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑和6-甲氧基-3-[(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)氧甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成

在0-5℃下，向[(5-甲氧基-2-苯并咪唑基)硫代](4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)乙腈(5.31g,15mmol)在400ml氯仿中的溶液中滴加溶于100ml氯仿的60％间氯过苯甲酸(8.62g,30mmol)，滴加过程经过1小时的时间。滴加结束后，反应混合物在室温下搅拌1小时。所得混合物然后用水洗涤，经硫酸镁干燥。蒸发溶剂，得到粗产物。硅胶色谱法(乙酸乙酯：己烷1∶1)得到0.828g(10％)7-甲氧基-3-[(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)氧甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，为一黄色固体，和0.828g(10％)6-甲氧基-3-[(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)氧甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，为一固体。7-甲氧基-3-[(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)氧甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑：mp 170-171℃；¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.34(s,1H),7.86(d,1H),7.29(d,1H),6.93(dd,1H),3.84(s,6H),2.42(s,3H),2.31(s,3H)ppm；IR(KBr):1684,1654 cm^-1；MS m/z369(M⁺+1).6-甲氧基-3-[(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)氧甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑：mp 196-197℃；¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.34(s,1H),7.67(d,1H),7.34(d,1H),7.10(dd,1H),3.84(s,3H),3.74(s,3H),2.44(s,3H),2.31(s,3H)ppm；IR(KBr):1684cm^-1；MSm/z 369(M⁺+1).

例6二溴(2-吡啶基)乙腈的合成

在室温下，向(2-吡啶基)乙腈(6.0g,50.8mmol)在120ml四氯化碳中的溶液中加入N-溴琥珀酰亚胺(18.5g,104mmol)。所得混合物加热回流2小时。冷却后，过滤沉淀。蒸发四氯化碳，得到13.5g(96％)二溴(2-吡啶基)乙腈，为深棕色固体：mp59-61℃；¹H NMR(CDCl₃)δ8.62(d,1H),7.93(d,1H),7.86(dt,1H),7.35(dt,1H)ppm；¹³C NMR(CDCl₃)δ155.23,148.94,138.24,125.38,120.55,115.81,30.81ppm；HRMS计算值C₇H₄N₂Br₂:273.8741，测定值：273.8730.

例72-丁基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑-3(2H)-酮的合成将500ml配有冷凝器的圆底烧瓶中的2-巯基苯并咪唑(29.30g,0.195mol)和异氰酸丁酯(48.3ml,0.33mol)的混合物在130-140℃油浴中加热45分钟。反应混合物冷却至室温后，过滤固体，用己烷洗涤，在真空下干燥，得到43.48g(89％)1-(丁基氨基甲酰基)-1,3-二氢苯并咪唑-2-硫酮，为白色晶体：mp 179-180℃

在0℃下，向1-(丁基氨基甲酰基)-1,3-二氢苯并咪唑-2-硫酮(39.89g,0.16mol)在250ml氯仿中的溶液中加入在110ml氯仿中的25.57g(0.16mol)溴。加入完成后，向反应混合物中滴加在80ml氯仿中的三乙胺(44.6ml,0.32mol)。混合物在0℃下再搅拌4小时，然后在室温下搅拌14小时。所得混合物用水、再用10％硫酸钠溶液洗涤。有机层经硫酸镁干燥，蒸发，得到粗产物。用甲醇重结晶，得到27.10g(69％)2-丁基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑-3(2H)-酮，为无色晶体：mp 153-154℃(文献：156-157℃,Martin等《四面体》1983,39,2311)。

用其他异氰酸烷基酯代替异氰酸正丁酯，按类似方法制得下列化合物：2-乙基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑-3(2H)-酮2-异丙基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑-3(2H)-酮2-甲基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑-3(2H)-酮2-苯基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑-3(2H)-酮2-苄基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑-3(2H)-酮

例83-[二溴(2-吡啶基)甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成

将2-丁基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑-3(2H)-酮(2.0g,8.1mmol)与二溴(2-吡啶基)乙腈(4.91g,17.8mmol)在50ml二氯甲烷中的混合物加热回流16小时。冷却至室温后，过滤沉淀，用二氯甲烷洗涤，干燥，得到2.76g(80％)目标化合物，为一浅棕色固体：

mp 195℃(dec)；¹H NMR(CDCl₃)δ8.25(m,2H),7.96(dt,1H),7.76(d,1H),7.32(m,2H),6.95(t,1H),6.92(s,1H)ppm；¹³C NMR(CDCl₃)δ166.08,157.95,150.34,148.28,147.71,138.31,128.76,124.79,124.58,122.94,121.68,119.49,113.97,54.37ppm；MRMS计算值：C₁₄H₈Br₂N₄S:421.8836，测定值：421.8850.

例93-(氧苯甲基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成

将2-丁基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑-3(2H)-酮(6.0g,24.3mmol)与苯甲酰氰(6.36g,48.5mmol)在80ml二氯甲烷中的混合物在室温下搅拌24小时。过滤沉淀，用二氯甲烷洗涤。粗产物用丙酮重结晶，得到6.48g(96％)3-(氧苯甲基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，为黄色晶体：mp190-191℃；¹H NMR(CDCl₃)δ8.35(d,3H),7.82(d,1H),7.73(t,1H),7.59(t,2H),7.50(t,1H),7.36(t,1H)ppm；¹³C NMR(CDCl₃)δ180.86,163.69,150.82,146.70,134.79,134.34,131.22(2C),129.46(2C),128.74,125.82,122.27,119.49,115.23ppm；IR(KBr):1671cm^-1；HRMS计算值 C₁₅H₉N₃OS:279.0466，测定值：279.0475.计算值 C₁₅H₉N₃OS:C,64.50；H,3.25；N,15.04.测定值：C,63.93；H,3.10；N,14.53.

用丙酮腈代替苯甲酰氰，按类似方法制得下列化合物：3-(1-氧乙基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑： mp180-181℃； ¹H NMR(CDCl₃)δ8.70(d,1H),7.80(d,1H),7.50(t,1H),7.38(t,1H),2.83(s,3H)；¹³C NMR(CDCl₃)δ187.02,164.15,150.69,147.78,129.63,125.82,122.26,119.27,115.94,26.74ppm；IR(KBr):1703cm^-1.HRMS计算值 C₁₀H₇N₃OS:217.0310，测定值：217.0318.

计算值 C₁₀H₇N₃OS:C,55.29；H,3.25；N,19.34.测定值：C,55.31；H.3.29；N,19.46.

用其他氰化物代替苯甲酰氰，按类似方法制得下列化合物：3-(1-氧丙基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑3-(1-氧丁基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑3-(1-氧-2-苯乙基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑3-(环戊基氧甲基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑3-(1-氧-2-邻苯-二甲酰亚胺代乙基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑

例103-甲基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成

将2-丁基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑-3(2H)-酮(1.00g,4.04mmol)在100ml乙腈中回流18小时。然后蒸发溶剂，残余物用甲醇重结晶，得到0.671g(88％)目标化合物：mp 192-193℃；¹HNMR(CDCl₃)δ7.81(dm,2H),7.47(td,1H),7.34(td,1H),2.92(s,3H)ppm；IR(KBr):1564,1481,1453,1430,1304,1208,756,745cm^-1；MS m/z 189(M⁺),148(M⁺-CH₃CN).

用其他烷基腈代替乙腈，按类似方法制得下列化合物：3-乙基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑3-异丙基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑3-(2-甲基丙基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑

例113-[4-(甲氧基羰基)苯基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成

将2-丁基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑-3(2H)-酮(0.3g,1.2mmol)与4-氰基苯甲酸甲酯(0.41g,2.5mmol)在7ml二氯甲烷中的混合物加热回流20小时。过滤沉淀，用二氯甲烷洗涤，得到0.16g(48％)3-[4-(甲氧基羰基)苯基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，为一白色固体：mp204-206℃；¹H NMR(CDCl₃)δ8.33(d,2H),7.98(d,2H),7.83(d,1H),7.49(m,2H),7.20(t,1H),4.02(s,3H)ppm；¹³C NMR(CDCl₃)δ165.96,165.30,151.08,149.10,133.16,132.55,130.24(2C),128.69(3C),125.34,121.58,119.96,112.01,52.56 ppm；IR(KBr)1729,1508,1448,1275,733cm^-1；HRMS计算值：C₁₆H₁₁N₃O₂S,309.0572测定值309.05719.

例123-(4-甲基苯磺酰基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成

将2-丁基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑-3(2H)-酮(10.0g,40.4mmol)与对甲苯磺酰氰(14.7g,81.0mmol)在120ml二氯甲烷中的混合物在室温下搅拌20小时。过滤沉淀，用二氯甲烷洗涤，得到12.2g(91％)3-(4-甲基苯磺酰基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，为一白色粉末：mp 231-234℃；¹H NMR(CDCl₃)δ8.53(d,1H),8.04(d,2H),7.82(d,1H),7.56-7.44(m,4H),2.53(s,3H)ppm；¹³C NMR(CDCl₃)δ163.72,150.38,147.97,147.54,132.48,130.30(2C),129.97(2C),128.49,126.14,123.06,119.70,114.67,21.93ppm；IR(KBr):1592,1525,1444,1337,1151,1081,735 cm^-1；HRMS计算值C₁₅H₁₁N₃O₂S₂:329.0293,测定值329.0300. 计算值C₁₅H₁₁N₃O₂S₂:C,54,70；H,3.37；N,12.76.测定值:C,54.29；H,3.14；N,14.59.

例133-(甲氧基羰基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成

将2-丁基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑-3(2H)-酮(4.0g,16.2mmol)与氰基甲酸甲酯(2.75g,32.4mmol)在30ml二氯甲烷中的混合物在室温下搅拌21小时。过滤沉淀，用二氯甲烷洗涤，得到3.36g(84％)3-(甲氧基羰基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，为一无色固体：mp208-209℃；¹H NMR(CDCl₃)δ8.61(d,1H),7.82(d,1H),7.51(t,1H),7.31(t,1H),4.17(s,3H)ppm；¹³C NMR(CDCl₃)δ164.02,156.51,150.67,140.89,129.34,125.93,122.41,119.48,115.41,54.04ppm；IR(KBr):1733cm^-1；HRMS计算值C₁₀H₇N₃O₂S 233.0259，测定值233.0262：

计算值C₁₀H₇N₃O₂S:C,51.50；H,3.02；N,18.02.测定值：C,51.41；H,2.89；N,18.16.

用其他氰基甲酸酯代替氰基甲酸甲酯，按类似方法制得下列化合物：3-(乙氧基羰基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑3-(丁氧基羰基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑3-(异丙氧基羰基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑3-[(苄氧基)羰基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑3-[(环戊基氧基)羰基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑

例143-(2-吡啶基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成

将2-丁基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑-3(2H)-酮(15.0g,60.7mmol)与2-氰基吡啶(13.3g,0.13mol)在150ml二氯甲烷中的混合物在室温下搅拌72小时。过滤沉淀，用二氯甲烷洗涤，得到10.4g(68％)3-(2-吡啶基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，为一白色固体：mp 173-174℃；¹H NMR(CDCl₃)δ8.90(d,1H),8.70(d,1H),8.30(d,1H),7.99(t,1H),7.80(d,1H),7.57(t,1H),7.47(t,1H),7.37(t,1H)ppm；¹³C NMR(CDCl₃)δ166.10,151.09,150.11,148.74,147.73,137.38,130.50,125.85,125.24,124.52,121.41,119.11,116.33ppm；IR(KBr):3419,3054,1611,1587,1501,1463,1446,727cm^-1.HRMS计算值C₁₃H₈N₄S 252.0470，测定值252.0882.计算值C₁₃H₈N₄S:C,61.89；H,3.20；N,22.21.测定值：C,61.48；H,3.30；N,22.24.

例153-氨基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成

向冷却的2-丁基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑-3(2H)-酮(2.00g,8.08mmol)在25ml二氯甲烷中的溶液中一次加入氨基氰(0.782g,16.2mmol)，混合物在室温下搅拌48小时。所得沉淀过滤，在甲醇中悬浮，再用二氯甲烷洗涤，得到1.01g(66％)3-氨基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，为一无色晶体：mp 255-256℃；¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.23(d,1H),7.71(d,1H),7.43(t,1H),7.54(s,2H),7.32(t,1H)ppm；IR(KBr):3302,3151,1661,1577,1487,1473,1251,1207,810cm^-1；HRMS计算值C₈H₆N₄S190.0313，测定值190.0293.分析计算值:C₈H₆N₄S:C,50.51；H,3.18；N,29.45.测定值：C,50.26；H,3.26；N,29.38.

例163-溴-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成

将2-丁基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑-3(2H)-酮(5.0g,20.2mmol)与溴化氰(4.28g,40.4mmol)在100ml二氯甲烷中的混合物在室温下搅拌26小时。过滤沉淀，用二氯甲烷洗涤，得到4.18g(81％)3-溴-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，为一白色粉末：mp 189-190℃；¹H NMR(CDCl₃)δ8.23(d,1H),7.82(d,1H),7.52(t,1H),7.42(d,1H)ppm；¹³C NMR(1∶1 CDCl₃:DMSO-d₆):δ162.78,149.67,129.22,125.53,122.25,119.48,117.25,111.27ppm；IR(KBr):3025,2925,1601,1493,1451,1028,757,701cm^-1；HRMS计算值C₈H₄N₃SBr 252.9309，测定值

252.9307.计算值C₈H₄N₃SBr:C,37.81；H,

1.59；N,16.54.测定值：C,37.44；H,1.33；N,16.57.

用其他卤化氰代替溴化氰，按类似方法制得下列化合物：3-碘-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑3-氯-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑

例173-[氧(2-吡啶基)甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成

向3-[二溴(2-吡啶基)甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑(2.02g,4.76mmol)在75ml四氢呋喃中的溶液中加入硝酸银(0.890g,5.24mmol)在75ml水中的溶液。该悬液搅拌2天，然后用碳酸氢钠水溶液碱化至pH6。加入1ml饱和氯化钠水溶液后，混合物过滤在硅藻土上，硅藻土用乙酸乙酯洗涤。用水萃取后，乙酸乙酯干燥、蒸发，得到粗残余物，用快速色谱法精制，使用氯仿/甲醇10∶0.1的混合物作为洗脱液。得到1.05g(78％)目标化合物，为一黄色固体：mp182-186℃(dec)；¹H NMR(CDCl₃)68.85(m,1H),8.31(dt,1H),8.19(d,1H),8.01(td,1H),7.83(d,1H),7.63(ddd,1H),7.50(ddd,1H),7.35(ddd,1H)ppm；IR(薄层)1673,1511,1444,1235,1057,879,733cm^-1；MS m/z 280(M+),148(M+-(2-吡啶基)C(O)CN).

例183-[二(乙氧基羰基)甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成

将3-溴-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑(0.2g,0.78mmol)、丙二酸二乙酯(0.15g,0.94mmol)和三乙胺(0.13ml,0.94mmol)在8ml THF中的混合物在氮气下回流36小时。所得混合物用乙酸乙酯萃取，用水和10％硫酸钠水溶液洗涤。有机层经硫酸镁干燥，得到粗产物，用快速色谱法精制(35％乙酸乙酯：65％己烷)，得到0.14g(54％)目标化合物，为一黄色油状物：¹H NMR(CDCl₃)δ9.48(s,1H),8.06(d,1H),7.63(d,1H),7.34-7.31(m,2H),4.39(q,4H),1.35(t,6H)ppm；IR(薄层)1748cm^-1.HRMS计算值C₁₅H₁₅N₃O₄S 333.0783,测定值333.0794.

例193-甲氧基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成

向冷却的3-溴-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑(4.55g,17.9mmol)在50ml甲醇中的溶液中一次加入甲醇钠(0.967g,17.9mmol)，在室温下搅拌4小时。反应混合物在真空下蒸发至干，将残余物溶于乙酸乙酯，并用水洗涤。有机层用硫酸钠干燥，过滤并蒸发，得到3.64g(94％)3-甲氧基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，为无色晶体：mp 172-175℃；¹HNMR(CDCl₃)δ7.83(d,1H),7.75(d,1H),7.42(t,1H),7.27(t,1H),4.32(s,3H)ppm；¹³C NMR(CDCl₃)δ163.2,150.3,148.1,128.2,124.9,121.8,119.2,111.7,57.5ppm；IR(KBr):3418,2942,1595,1492,1404,1275,1255,1206,1083,755cm^-1.计算值C₉H₇N₃OS:C,52.67；H,3.44；N,20.49.测定值：C,52.28；H,3.36；N,20.45.

用其他金属醇盐代替甲醇钠，按类似方法制得下列化合物：3-乙氧基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑3-丙氧基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑3-异丙氧基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑3-丁氧基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑3-叔丁氧基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑3-(环戊基氧基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑

例203-(二甲氨基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成

向冷却的3-溴-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑(15.44g,0.0603mol)在100ml二氯甲烷中的混合物中滴加二甲胺(40％水溶液)(5.44g,0.121mol)。反应混合物在室温下搅拌16小时。然后用二氯甲烷稀释，用水洗涤，用硫酸镁干燥，在真空下蒸发，得到10.47g(80％)3-(二甲氨基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，为无色晶体：mp 102-104℃；¹H NMR(CDCl₃)δ7.74(t,2H),7.41(t,1H),7.27(t,1H),3.06(s,6H)ppm.

计算值C₁₀H₁₀N₄S:C,55.03；H,4.62；N,25.69.测定值：C,54.53；H,4.90；N,25.50.

用其他胺类代替二甲胺，按类似方法制得下列化合物：3-(乙氨基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑：mp164.5-165℃(dec)；¹H NMR(CDCl₃)δ7.78(m,2H),7.65(d,1H),7.43(t,1H),7.21(t,1H)3.68(q,2H),1.45(t,3H)ppm.3-(1-吡咯基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑：mp118-119℃；¹H NMR(CDCl₃)δ7.77(t,2H),7.43(t,1H),7.28(t,1H),3.71(m,4H),2.07(m,4H)ppm.3-(4-吗啉基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑：mp 140-142℃；¹H NMR(CDCl₃)δ7.78(d,1H),7.60(d,1H),7.45(t,1H),7.32(t,1H),3.99(m,4H),3.48(m,4H)ppm.3-(1-哌嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑：mp 116-118℃；¹H NMR(CDCl₃)δ7.76(d,1H),7.63(d,1H),7.42(t,1H),7.30(t,1H),3.41(m,4H),3.15(t,4H),2.00(br s,1H)ppm.3-(4-甲基-1-哌嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑：mp 158-158.5℃；¹H NMR(CDCl₃)δ7.77(d,1H),7.64(d,1H),7.42(t,1H),7.32(t,1H),3.49(m,4H),2.70(m,4H),2.43(s,3H)ppm.3-[[2-(甲氧基羰基)甲基]氨基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑：mp 196-197℃. 计算值

C₁₁H₁₀N₄O₂S:C,50.37；H,3.84；N,21.36.测定值：C,50.13；H,3.96；N,21.26.

用其他亲核性的胺类代替二甲胺，按类似方法制得下列化合物：3-(甲氨基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑

例213-[(羟基亚氨基)苯甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成

向0.5g(1.79mmol)3-(氧苯甲基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑在7ml乙醇中的溶液中加入0.5ml(6.46mmol)吡啶和0.5g(7.20mmol)盐酸羟基胺。混合物回流过夜。过滤收集沉淀，用甲醇和二氯甲烷洗涤，得到粗产物，用甲醇重结晶，得到0.47g(89％)目标化合物，为白色晶体。mp247℃；¹H NMR(DMSO-d₆)δ11.89(s,1H),7.81(d,1H),7.73(dd,2H),7.45-7.53(m,5H),7.32(t,1H)ppm；¹³CNMR(CDCl₃)δ168.25,155.24,150.52,147.95,136.94,135.67,134.30(2C),133.03,131.52(2C),130.35,127.26,124.28,116.91ppm；IR(KBr):2731,1549,1475,1450,1251,1194,983,753,736cm^-1.HRMS计算值C₁₅H₁₀N₄OS 294.0575，测定值294.0583.

例223-(1-羟乙基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成

向3-(1-氧乙基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑(729mg,3.36mmol)在200ml甲醇中的悬液中加入硼氢化钠(140mg,3.69mmol)。混合物搅拌30分钟，加入0.1ml水。蒸发甲醇，使残余物在乙酸乙酯和0.1M氢氯酸中分布。含水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并，用盐水洗涤两次，干燥并蒸发。粗残余物用色谱法精制，使用氯仿/甲醇，得到3-(1-羟乙基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。 mp 174-175℃；¹H NMR(CDCl₃)δ8.05(d,1H),7.80(d,1H),7.47(td,1H),7.36(td,1H),5.39(q,1H),2.76(d,1H),1.84(d,3H)ppm；IR(KBr):3136,1544,1494,1478,1451,1374,1250,1200,1123,1103,1093,752,729,711cm^-1；MS m/z 219(M⁺),148(M⁺-CH₃CH(OH)CN).

例233-羧基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成

向6ml 1N NaOH溶液中加入在6ml二噁烷中的3-(甲氧基羰基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑(1.0g,4.3mmol)。反应混合物在室温下搅拌，直至反应完全。所得混合物然后用3N HCl酸化至pH～2.0，再在室温下搅拌0.5小时。固体过滤，用水洗涤，在60℃真空下干燥24小时，得到0.74g(78％)目标化合物，为一无色固体：mp 184-185℃(dec)；¹H NMR(DMSO-d₆)δ13.79(br s,1H),8.59(d,1H),7.78(d,1H),7.51(t,1H),7.40(t,1H)；IR(KBr):3435,1705cm^-1；MS m/z 193(M⁺-OH),175(M⁺-CO₂).

例243-羧酸根-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑钠的合成

向3-羧基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑(10.00g,45.62mmol)在甲醇(150ml)和水(100ml)中的悬液中加入1M NaOH(45.6ml)，加入过程经过1小时的时间。4小时后，溶液变澄清，减压除去甲醇。水溶液用氯仿萃取，含水相冷冻干燥，得到目标化合物(10.4g,95％)，为一白色固体：mp225-227℃；¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.68(d,1H),7.05(d,1H),6.95(t,1H),6.80(t,1H)ppm；¹³C NMR(DMSO-d₆)δ167.20,161.76,149.68,148.84,129.52,126.23,122.74,118.37,116.06ppm；IR(KBr):3395,3243,1663,1641,1522,1443,1334,827,729cm^-1.

例25二盐酸3-(4-甲基-1-哌嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的制备

向3-(4-甲基-1-哌嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑(6.07g,22.21mmol)在100ml二氯甲烷中的澄清溶液中通入氯化氢气泡，历时40分钟。溶液逐渐变得混浊。悬液过滤，在真空下干燥，得到目标化合物，为一精细白色粉末7.60g(99％)。mp 252℃(dec)；¹H NMR(DMSO-d₆&D₂O)δ7.85(d,2H),7.60(t,1H),7.51(t,1H),3.86(m,2H),3.56(m,6H),2.91(s,3H)ppm；¹³C NMR(DMSO-d₆&D₂O)δ164.39,148.80,144.27,126.92,126.12,123.41,117.08,113.20,51.19,45.87,42.32 ppm；IR(KBr):3420,1606,1571,1475,1461,1225,981,761cm^-1.

例262-丁基咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑-3(2H)-酮的制备

将2-巯基咪唑(24.39g,0.244mol)和异氰酸丁酯(48.3g,0.487mol)在圆底烧瓶中混合，在50℃下加热30分钟或直至TLC检验反应完全。然后将反应混合物冷却至室温，固化部分用50ml己烷研制30分钟。浅褐色固体过滤，用少量己烷洗涤，在减压下干燥，得到44.96g(93％)1-(丁基氨基甲酰基)-1,3-二氢咪唑-2-硫酮，为浅褐色晶体：mp 66-68℃。

在氮气下，向冷却至0℃的含有悬浮在15ml二氯甲烷中的1-(丁基氨基甲酰基)-1,3-二氢咪唑-2-硫酮(4.73g,23.7mmol)的溶液中滴加溶于15ml二氯甲烷中的溴(3.79g,23.7mmol)。滴加完成后，加入溶于15ml二氯甲烷的三乙胺(4.81g,47.5mmol)，使反应混合物的温度不超过0℃。反应混合物再在0℃下保持2小时，然后在室温下搅拌16小时。然后用150ml二氯甲烷稀释，用水洗涤两次、饱和氯化钠溶液洗涤一次。有机层然后经硫酸镁干燥，蒸发至干，得到4.30g(92％)2-丁基咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑-3(2H)-酮，为一灰白色粉末：mp 142-143℃；¹H NMR(CDCl₃)δ7.40(d,1H),7.20(d,1H),3.79(t,2H),1.73(m,2H),1.40(m,2H),0.957(t,3H)ppm；IR(KBr):1702cm^-1.

用其他所选择的异氰酸酯代替异氰酸丁酯，按类似方法制得下列化合物：2-甲基咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑-3(2H)-酮2-乙基咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑-3(2H)-酮2-丙基咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑-3(2H)-酮2-异丙基咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑-3(2H)-酮2-戊基咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑-3(2H)-酮2-己基咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑-3(2H)-酮2-环己基咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑-3(2H)-酮2-苄基咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑-3(2H)-酮

例273-(1-氧乙基)咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑-3(2H)-酮的合成

向冷却的2-丁基咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑-3(2H)-酮(2.49g,12.6mmol)在5ml二氯甲烷中的溶液中滴加丙酮腈(1.74g,25.2mmol)，搅拌24小时。然后过滤收集沉淀，用二氯甲烷洗涤，减压蒸发，得到0.662g(31％)3-(1-氧乙基)咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑-3(2H)-酮，为一黄绿色晶体：mp142-144℃；¹H-NMR(CDCl₃)δ8.23(s,1H),7.51(s,1H),2.78(s,3H)ppm；IR(KBr)δ3436,3168,3106,1516,1408,1363,1229,1136,730cm^-1.计算值C₆H₅N₃SO:C,43.11；H,3.01；N,25.13.测定值：C,43.11；H,2.91；N,25.27.

用苯甲酰氰代替丙酮腈，按类似方法制得下列化合物：3-(氧苯甲基)咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑-3(2H)-酮：

mp 166-168℃；¹H NMR(CDCl₃)δ8.44(d,2H),8.40(s,1H),7.70(d,1H),7.58(t,3H)ppm.

用其他所选择的氰化物或腈代替丙酮腈,按类似方法制得下列化合物：3-(1-氧丙基)咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑-3(2H)-酮3-(1-氧丁基)咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑-3(2H)-酮3-(1-氧戊基)咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑-3(2H)-酮3-(1-氧己基)咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑-3(2H)-酮3-(环戊基氧甲基)咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑-3(2H)-酮3-(1-氧-2-苯邻二甲酰亚胺代乙基)咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑-3(2H)-酮

例283-(甲氧基羰基)咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑的合成

向冷却的2-丁基咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑-3(2H)-酮(2.95g,15.0mmol)在25ml二氯甲烷中的溶液中滴加氰基甲酸甲酯(2.54g,30mmol)，混合物在室温下搅拌16小时。过滤沉淀后用二氯甲烷洗涤，得到2.18g(80％)3-(甲氧基羰基)咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑，为无色晶体：mp 164.5-165℃；¹H NMR(CDCl₃)δ8.13(s,1H),7.51(s,1H),4.11(s,3H)ppm；IR(KBr)δ3440,1737,1527,1253,1071cm^-1.计算值C₆H₅N₃O₂S:C,39.34；H,2.75；N,22.94．测定值：C,39.41；H,2.51；N,22.94.

用其他氰基甲酸酯代替氰基甲酸甲酯，按类似方法制得下列化合物：3-(乙氧基羰基)咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑3-(丙氧基羰基)咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑3-(丁氧基羰基)咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑3-(异丙氧基羰基)咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑3-[(戊氧基)羰基]咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑3-[(环戊基氧基)羰基]咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑3-[(苄氧基)羰基]咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑

例293-溴咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑的合成

向冷却的2-丁基咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑-3(2H)-酮(4.78g,0.0242mol)

在25ml二氯甲烷中的溶液中一次加入溴化氰(5.13g,0.0482mmol)，混合物在室温下搅拌16小时。过滤沉淀，在10ml甲醇中悬浮后用二氯甲烷洗涤，得到4.45g(90％)3-溴咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑，为无色粉末：

mp 220℃(dec)；MS m/z 205,203(M⁺).分析计算值：C₄H₂N₃SBr:_H₂O:C,22.55；H,1.42；N,19.72；O,3.75；S,15.02；Br,37.50.测定值：C,22.79；H,1.41；N,19.42；O,2.67；S,14.61；Br,38.20.

用其他卤化氰代替溴化氰，按类似方法制得下列化合物：3-碘咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑3-氯咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑

例303-甲磺酰基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成

向3-甲硫基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑(100mg,0.45mmol)在10ml二氯甲烷中的溶液中加入间氯过苯甲酸(287mg,0.95mmol)。混合物在室温下搅拌，使原料在几小时后转化为亚砜；然后进一步在18小时后氧化为砜。然后蒸发溶剂，残余物用色谱法精制，使用氯仿/甲醇10∶0.1作为洗脱液，得到50mg(44％)3-甲磺酰基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，为白色固体：mp 203-207℃(dec)；¹H NMR(CDCl₃)δ8.31(d,1H),7.84(d,1H),7.54(ddd,1H),7.43(td,1H),3.63(s,3H)ppm；IR(KBr):1530,1487,1444,1324,1315,1193,1147,1141,735cm^-1,Ms m/z 253(M⁺),174(M⁺-CH₃SO₂),148(M⁺-CH₃SO₂CN).

例313-[4-(2-吡啶基)哌嗪基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成

向冷却的3-溴-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑(0.30g,1.17mmol)在10ml二氯甲烷中的溶液中滴加2-吡啶基哌嗪(0.54ml,3.51mmol)，混合物搅拌16小时。反应混合物用100ml二氯甲烷稀释，用水(2×30ml)、再用盐水(1×25ml)洗涤。有机层经硫酸钠干燥，蒸发，得到一黄色油状物，用柱色谱法精制(40％乙酸乙酯；60％己烷)，得到一白色固体(0.27g,68.5％)；¹H-NMR(CDCl₃)δ3.58(m,4H,2CH₂),3.82(m,4H,2CH₂),6.75(m,2H,pyr-H)7.30(d,1H,ArH),7.44(t,1H)ArH),7.55(m,1H,pyr-H),7.68(d,1H,ArH),7.79(d,1H,ArH),8.24(m,1H,pyr-H)m.p.176-177.5℃.

用其他哌嗪衍生物代替2-吡啶基哌嗪，按类似方法制得下列化合物：3-[4-乙基哌嗪基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H-NMR(CDCl₃)δ1.15(t,3H,CH₃),2.55(q,2H,CH₂),2.70(br.s,4H,2 CH₂),3.49(br.s,4H,2CH₂),7.25(m,1H,ArH),7.40(m,1H,ArH),7.65(d,1H,ArH),7.79(d,1H,ArH)；m.p.153-154.5℃.3-[4-丙基哌嗪基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H-NMR(CDCl₃)δ0.96(t,3H,CH₃),1.58(m,2H,CH₂),2.45(t,2H,CH₂),2.74(br.s,4H,2CH₂),3.49(br.s,4H,2CH₂),7.26(t,1H,ArH),7.30(t,1H,ArH),7.64(d,1H,ArH),7.77(d,1H,ArH)；m.p.137-138℃.3-[4-(2-羟乙基)哌嗪基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H-NMR(CDCl₃)δ2.65(s,1H,OH),2.72(t,2H,CH2)2.84(s,4H,2CH₂),3.51(s,4H,2CH₂)3.70(t,2H,CH₂)7.31(t,1H,ArH),7.45(t,1H,ArH),7.66(d,1H,ArH),7.80(d,1H,ArH)；m.p.160-161.5℃.3-[4-(3-氯苯基)哌嗪基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H-NMR:(CDCl₃)/δ3.37(m,6H,3CH₂),3.54(m,4H,2CH₂),6.88(d,1H,ArH),7.04(dd,1H.ArH),7.10(br.s,1H,ArH),7.29(t,1H,ArH),7.41(t,1H,ArH),7.50(t,1H,ArH),7.78(d,1H,ArH),7.82(d,1H,ArH)；m.p.218.5-219.5℃.3-[4-苄基哌嗪基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H-NMR(CDCl₃)δ2.76(brs,4H,2CH₂),3.49(br.s,4H,2CH₂),3.66(s,2H,CH₂),7.30-7.50(m,8H,ArH),7.64(d,1H,ArH),7.78(d,1H,ArH)；m.p.110-112.5℃.3-[4-肉桂基哌嗪]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H-NMR(CDCl₃)δ2.81(s,4H,2CH₂),3.32(d,2H,CH₂),3.51(s,4H,2CH₂),6.27-6.36(m,1H,CH),6.60(d,1H,CH),7.23-7.46(m,7H,ArH),7.65(d,1 H,ArH),7.79(d,1H,ArH)；m.p.120-121.5℃.3-[4-(3-氨基-2-吡啶基)哌嗪基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H-NMR(CDCl₃)δ3.42(m,4H,2CH₂),3.55(m,4H,2CH₂),3.88(s,2H,NH₂),6.92(dd,J=4.74 HZ,7.69Hz,1H,pyr-H-4),7.02(dd,J=1.57Hz,7.69Hz,1H,pyr-H-3),7.30(d,1H),ArH),7.44(d,1H,ArH),7.76(表现br.t,2H,ArH),7.86(dd,J=1.57Hz,4.78Hz,1H,pyr-H)；m.p.176-177.5℃.3-[4-(1-(4-氯苯基)-1-苯甲基)哌嗪基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H-NMR(CDCl₃)δ2.68(br.s,4H,2CH₂),3.49(br.s,4H,2CH₂),4.35(s,1H,CH),7.2-7.5(m,11H,ArH),7.59(d,1H,ArH),7.79(d,1H,ArH)；m.p.172.5-174℃.

例323-[2-吡啶氨基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成

向冷却的3-溴-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑(0.30g,1.17mmol)在15ml二氯甲烷中的溶液中滴加2-氨基吡啶(0.276g,2.93mmol)，混合物搅拌48小时。反应混合物用100ml二氯甲烷稀释，用水(2×30ml)、再用盐水(1×25ml)洗涤。有机层经硫酸镁干燥，蒸发，得到一黄色固体(0.26g,83％) ¹H-NMR(CDCl₃)δ6.59(表观5,1H,pyr-H),7.12(表观br.d,1H,pyr-H),7.28(t,1H,ArH),7.38(t,1H,ArH),7.51(m,2H,ArH&pyr-H),7.70(d,1H,ArH),8.28(d,1H,pyr-H)；m.p.155.5-157℃.

用其他胺衍生物代替2-氨基吡啶，按类似方法制得下列化合物：3-[3-吡啶氨基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H-NMR(CDCl₃)δ7.41(t,1H,ArH),7.48(t,1H,ArH),7.62(dd,1H,pyr-H),7.75(d,1H,ArH),8.34(d,1H,ArH),8.44(m,2H,pyr-H),9.02(d,1H,pyr-H)；m.p.175-176℃.3-[2-吡啶甲基氨基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H-NMR(CDCl₃)δ2.02(s,1H,NH),4.84(d,2H,CH₂),7.22-7.56(M,4H,2ArH&2Pyr-H),7.75(m,2H,ArH&pyr-H),7.85(d,1H,ArH),8.66(d,1H,pyr-H)；m.p.155.5-157℃.3-[N-甲基-(2-吡啶乙基)氨基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H-NMR(CDCl₃)δ3.11(s,3H,CH₃),3.18(t,2H,CH₂),3.87 9t,2H,CH₂),7.04-7.11(m,2H,pyr-H),7.26(m,1H,Ar-H),7.40(t,1H,ArH),7.52(m,1H,pyr-H),7.63(d,1H,ArH),7.74(1H,d,ArH),8.41(d,1H,pyr-H)；m.p.105-107℃.

例333-溴甲基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成

将2-丁基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑-3(2H)-酮(15g,60.65mmol)和溴乙腈(18.19g,151.6mmol)在二氯甲烷(150ml)中的溶液搅拌48小时。有白色沉淀生成，过滤该不溶性固体，得到12.50g(77％)目标化合物：¹HNMR(CDCl₃)δ4.79(s,2H,CH₂),7.42(t,1H,ArH),7.51

例343-{[4-乙基哌嗪基]甲基}-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成

向3-溴甲基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑(704mg,2.62mmol)在二氯甲烷(20ml)中的悬液中加入1-乙基哌嗪(0.732ml,6.03mmol)。混合物在室温下搅拌26小时。原料用二氯甲烷(150ml)稀释，用水(15ml)和盐水(15ml)洗涤。有机层经硫酸钠干燥，蒸发，得到一固体，用乙腈重结晶(600mg，产率75.9％)。¹H-NMR(CDCl₃)δ1.06(t,3H,CH₃),2.39(q,2H,CH₂)2.44(m,4H,2CH₂),2.70(m,4H,2CH₂),3.90(s,2H,CH₂),7.31(t,1H,ArH),7.43(t,1H,ArH),7.78(d,1H,ArH),7.92(d,1H,ArH)；m.p.140-141.5℃.

用哌嗪衍生物代替1-乙基哌嗪，按类似方法制得下列化合物：3-{[4-丙基哌嗪基]甲基}-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H-NMR(CDCl₃)δ0.89(t,3H,CH₃),1.51(m,2H,CH₂),2.30(t,2H,CH₂),2.50(br.s,4H,2CH₂),2.70(s,4H,2CH₂),3.99(s,2H,CH₂),7.32(t,1H,ArH),7.45(t,1H,ArH),7.80(d,1H,ArH),7.95(d,1H,ArH)；m.p.108-110℃.3-{[4-(2-羟乙基)哌嗪基]甲基}-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H-NMR(CDCl₃)δ2.55(M,6H,2CH₂为哌嗪的，CH₂),2.70(m,4H,2CH₂),3.61(m,2H,CH₂),3.99(s,2H,CH₂),7.32(t,1H,ArH),7.45(t,1H,ArH),7.78(d,1H,ArH),7.91(d,1H,ArH)；m.p.165-166.5℃.3-{[4-苯基哌嗪基]甲基}-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H-NMR(CDCl₃)δ2.80(m,4H,2CH₂),3.20(m,4H,2CH₂),4.00(s,2H,CH₂),6.90(m,3H,ArH),7.25(t,4H,ArH),7.50(t,1H,ArH),7.80(d,1H,ArH),8.00(d,1H,ArH)；m.p.197-197.5℃.3-{[4-(4-氨基)苯基哌嗪基]甲基}-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H-NMR(CDCl₃)δ2.82(m,4H,2CH₂),3.00(m,4H,2CH₂),3.31(s,2H,NH₂),4.01(s,2H,CH₂),6.63(d,2H,ArH),6.78(d,2H,ArH),7.32(t,1H,ArH),7.45(t,1H,ArH),7.80(d,1H,ArH),7.98(d,1H,ArH)；m.p.199.5-200.5℃.3-{[4-苄基哌嗪基]甲基}-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H-NMR(CDCl₃)δ2.50(br.s,4H,2CH₂),2.68(br.s,4H,2CH₂),3.49(s.2H,CH₂),3.98(S,2h,chb2),7.30(t,6H,ArH),7.46(t,1H,ArH),7.79(d,1H,ArH),7.94(d,1H,ArH)；m.p.120.5-122℃.3-{[4-肉桂基哌嗪基]甲基}-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H-NMR(CDCl₃)δ2.71(m,4H,2CH₂2.55(m,4H,2CH₂),3.14(d,2H,CH₂),3.98(s,2H,CH₂),6.27(d,1H,CH),6.49(d,1H,CH),7.30-7.37(m,6H,ArH),7.46(t,1H,ArH),7.77(d,1H,ArH)；7.93(d,1H,ArH)；m.p.162-163℃.3-{[4-(2-吡啶基)哌嗪基]甲基}-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H-NMR(CDCl₃))δ2.80(m,4H,2CH₂),3.60(m,4H,2CH₂),4.00(s,2H,CH₂),6.60(m,2H,pyr-H),7.31(t,1H,ArH),7.45(t,2H,ArH),7.80(d,1H,ArH)；7.98(d,1H,pyr-H),8.18(m,1H,pyr-H)；m.p.214-214.5℃.3-{[4-(3-氨基-2-吡啶基)哌嗪基]甲基}-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H-NMR(CDCl₃)δ2.82(br.s,4H,2CH₂),3.17(br.s,4H,2CH₂),3.79(s,2H,NH₂),4.07(s,1H,CH₂),6.84(m,1H,pyr-H),6.94(m,1H,pyr-H),7.30(m,1H,ArH),7.50(m,1H,ArH),7.79(m,2H,pyr-H,ArH),8.0(d,1H,ArH)；m.p.214-215.5℃.3-{[4-(4-甲氧基苯基)哌嗪基]甲基}-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H-NMR(CDCl₃)δ2.80(m,4H,2CH₂),3.10(m,4H,2CH₂),3.80(s,3H,0CH₃),4.10(s,2H,CH₂),6.80(m,4H,ArH),7.30(t,1H,ArH),7.50(t,1H,ArH),7.80(d,1H,ArH),8.00(d,1H,ArH)；m.p.202-204.5℃.3-{[4-(1-(4-氯苯基)-1-苯甲基)哌嗪基]甲基}-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H-NMR(CDCl₃)δ2.44(br.s,4H,2CH₂),2.68(br.s,4H,2CH₂),3.99(s,2H,CH₂),4.18(s,1H,CH),7.20-7.40(m,1OH,ArH),7.50(T,1H,ArHp),7.79(d,1H,ArH),7.79(d,1H,ArH),7.91(d,1H,ArH)；m.p.82-84℃.

例353-二丙氨基甲基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成

向3-溴甲基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑(0.5g,1.87mmol)在二氯甲烷(40ml)中的悬液中加入二丙胺(0.64ml,4.67mmol)。混合物在室温下搅拌26小时。原料用二氯甲烷(100ml)稀释，用水(3×40ml)和10％硫酸钠溶液(15ml)洗涤。有机层经硫酸镁干燥，蒸发，得到一固体，用乙腈重结晶(370mg，产率69％)。¹H-NMR(CDCl₃)δ0.82(t,6H,2CH₃),1.50{m,4H,2CH₂),2.60(m,4H,2CH₂),4.11(s,2H,CH₂),7.31(t,1H,ArH),7.44(t,1H,ArH),7.78(d,1H,ArH),8.03(d,1H,ArH)；m.p.70-5-72.5℃.

用其他胺衍生物代替二丙胺，按类似方法制得下列化合物：3-二甲氨基甲基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H-NMR(CDCl₃)δ2.41(s,6H,2 CH₃),3.90(s,2H,CH₂),7.32(t,1H,ArH),7.44(t,1H,ArH),7.76(d,1H,ArH),7.99(d,1H,ArH)；m.p.134-135.5℃.3-二乙氨基甲基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H-NMR(CDCl₃)δ1.07(t,6H,2CH₃),2.73(q,4H,2CH₂),4.08(s,2H,CH₂),7.30(m,1H,ArH),7.43(m,1H,ArH),7.77(d,1H,ArH),8.04(d,1H,ArH)；m.p.109-110.5℃.3-二丁氨基甲基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H-NMR(CDCl₃)δ0.85(t,6H,2CH₃),1.26(m,4H,2CH₂),1.43(m,4H,2 CH₂)2.65(m,4H,2CH₂)4.10(S,2H,CH₂),7.27(t,1H,ArH),7.45(t,1H,ArH),7.78(d,1H,ArH),8.02(d,1H,ArH)；m.p.72-72.5℃3-(吗啉代甲基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H-NMR(CDCl₃)δ2.66(m,4H,2CH₂),3.71(m,4H,2CH₂),3.99(s,2H,CH₂)7.33(t,1H,ArH),7.45(t,1H,ArH),7.80(d,1H,ArH),7.91(d,1H,ArH)；m.p:145-147℃.3-(咪唑甲基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H,NMR(CDCl₃)δ6.35(s,2H,CH₂),7.48(t,1H,ArH),7.54(t,1H,ArH),7.72(d,1H,ArH),7.84(m,2H,ArH,Imd-H),8.14(d,1H,ArH),9.12(d,1H,ArH)；m.p.226-227℃.3-(1,2,4-三唑甲基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H-NMR、(CDCl₃)δ6.26(s,2H,CH₂),7.39(t,1H,ArH),7.50(t,1H,,ArH),7.80(d,1H,ArH),8.04(d,1H,ArH),8.10(s,1H,三唑的H),8.83(s,1H，三唑的H)；m.p.204.5-206℃.

例363-(2-吡嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成

将2-丁基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑-3(2H)-酮(300mg,1.213mmol)和吡嗪腈(319mg,3.03mmol)在8ml二氯甲烷中的混合物在室温下搅拌36小时。过滤沉淀，用二氯甲烷洗涤，得到0.28g(91％)3-(2-吡嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑，为一白色固体；¹H NMR(CDCl₃)δ7.32(t,1H,ArH),7.50(t,1H,ArH),7.83(d,1H,ArH),8.67(d,1H,ArH),8.87(br.d,2H,py-H),9.59(s,1H,py-H)；mp 255-256.5℃.

例374-(2-吡啶基)哌嗪基羰基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成

向2-羧基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑(0.3g,1.37mmol)在DMF(10ml)中的溶液中加入1,1-羰基二咪唑(0.355g,2.19mmol)。所得溶液在40℃下搅拌2小时。反应混合物逐渐从白色悬液变成黄色溶液。向反应混合物中加入N-(2-吡啶基)哌嗪(0.268g,1.64mmol)。所得混合物在40℃下搅拌3小时，冷却。原料用二氯甲烷(100ml)稀释并用1N HCl(40ml)然后用5％NaOH(60ml)洗涤。有机层经硫酸镁干燥，蒸发，得到目标化合物，为一固体(0.2g，产率40％)。¹H-NMR(CDCl₃)δ3.69(m,2H,CH₂),3.79(m,2H,CH₂),4.05(m,4H,2CH₂),6.70(m,2H,pyr-H),7.30(t,1H,ArH),7.40-7.60(m,2H,ArH和pyr-H),7.80(d,1H,ArH),8.00(d,1H,ArH),8.23(m,1H,pyr-H)；m.p.222-223.5℃.

用其他胺衍生物代替4-(2-吡啶基)哌嗪，按类似方法制得下列化合物：3-{4-(苄基)哌嗪基羰基}-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H NMR(CDCl₃)δ2.72(m,4H,2CH₂),3.60(s,2H,CH₂),3.92(m,4H,2CH₂),7.31(t,7H,ArH),7.46(t,1H,ArH),7.80(d,1H,ArH),7.98(d,1H,ArH)； m.p.230-5-231.5℃.3-{4-甲基哌嗪基羰基}-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑¹H NMR(CDCl₃)δ2.37(s,3H,CH₃),2.51(t,2H,CH₂),2.60(t,2H,CH₂),3.90(t,2H,CH₂),3.96(t,2H,CH₂),7.33(t,1H,ArH),7.73(t,1H,ArH),7.80(d,1H,ArH),7.98(d,1H,ArH).

例383-(4-丁基哌嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成

将碳酸钾(700mg,5.06mmol)、丁基溴(0.43ml,0.4mmol)、3-哌嗪基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑(798mg,3.07mmol)在THF(15ml)和DMSO(2ml)中的混合物回流16小时。溶液蒸发至干，使残余物在二氯甲烷和水之间分配。有机层用水洗涤五次，经硫酸钠干燥，蒸发，得到一油状物。将该油状物与乙腈混合，所生成的不溶性固体过滤(595mg)。固体用色谱法精制，得到目标化合物，用己烷重结晶(5∶95)(440mg,41％)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ0.95(t,3H,CH₃),1.30(m,2H,CH₂),1.50(m,2H,CH₂),2.40(t,2H,CH₂),2.7(m,4H,2CH₂),3.5(m,4H,2CH₂),7.3(t,1H,ArH),7.4(t,1H,ArH),7.65(d,1H,ArH),7.8(d,1H,ArH)；m.p.121-122.5℃.

例392-巯基-5-(叔丁氧基羰基)氨基苯并咪唑的合成A·将2-巯基-5-硝基苯并咪唑(10.0g,51.23mmol)和铁屑(8.0g,143.24mmol)在乙醇(80ml)和水(10ml)中的混合物回流。然后，在大约12分钟内滴加浓HCl(1.2ml)。所得深棕色混合物再回流1.5小时，然后在冰中冷却，用饱和碳酸氢钠溶液中和至pH7.0。混合物用EtOH(50ml)稀释，用硅藻土(0.82g)使成浆状，并经硅藻土床过滤。滤饼用EtOH洗涤(3×100ml)。滤液合并，在真空中浓缩，得到9.2g浅棕色固体。用热水重结晶，得到2-巯基-5-氨基苯并咪唑(6.74g,80％)，为一浅棕色固体。

¹H-NMR(DMSO)δ:4.98(br.s,2H),6.40-6.43(m,2H,Ar-H),6.81-6.85(d,J=9.0Hz,1H,Ar-H),12.06(br.s,1H).¹³C-NMR(DMSO)δ:165.9(CS),144.9,133.4,123.6,109.8,94.4 IR(KBr,cm^-1):3362,3295,3173,1637,1622,1507.B·在氮的掩蔽下，将2-巯基-5-氨基苯并咪唑(22.0g,133.2mmol)和二叔丁基重碳酸酯(di-tert-butyldicarbonate)(30.52g,139.86mmol)在无水THF(200ml)中的溶液在室温下搅拌16小时。

减压蒸发除去THF，残余物用乙腈重结晶，得到目标化合物(28.7g,80％)，为一浅黄色固体。¹H-NMR(DMSO)δ:1.50(s,9H),7.00(d,J=8.6Hz,1H,Ar-H),7.11(dd,J=8.6 and 1.8Hz1H,Ar-H),7.53(s,1H,Ar-H),9.41(br.s,1H),12.41(br.s,2H).¹³C-NMR(DMSO)δ:167.9(CS),152.9(C=O),134.9,134.9,132.5,127.5,113.3,109.3,99.5,79.0(C-0),28.2IR(KBr,cm^-1):3300,3127,1724,1706,1623,1530.M.p.217.1-217.7℃.元素分析计算值(测定值)％,C 54.32(54.32)；H 5.70(5.71)and N 15.84(15.85).

例405’-(叔丁氧基羰基)氨基-2-丁基-3-氧-2,3-二氢-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑和6’-(叔丁氧基羰基)氨基-2-丁基-3-氧-2,3-二氢-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成A·向预加热至100℃的2-巯基-5-(叔丁氧基羰基)氨基苯并咪唑(11.46g,43.19mmol)在邻二甲苯(50ml)中的悬浮液中通过注射器加入异氰酸正丁酯(7.3ml,64.79mmol)。混合物然后在145-150℃加热1.5小时，然后冷却至室温，用己烷(200ml)稀释。吸滤收集固体，在真空下干燥，得到1-丁基羰基-2-巯基-5-(叔丁氧基羰基)氨基苯并咪唑(14.19g,95％)。¹H-NMR(DMSO)δ:0.94(t,J=7.2Hz,3H),1.20-1.60(m,4H,2CH₂),1.51(s,9H),3.37-3.43(m,2H,CH₂N),7.19-7.23(dd,J=9.0 and 1.9Hz,1H,Ar-H),7.64(s,1H),7.96(d,J=9.0Hz,1H,Ar-H),9.59(s,1H),10.22(t,J=5.4Hz,1H,NHCH₂).元素分析计算值(测定值)％:C 56.0(55.8)； H 6.6(5.7)；N 15.4(15.3).B·将1-丁基氨基甲酰基-2-巯基-5-(叔丁氧基羰基)氨基苯并咪唑(12.90g,34.50mmol)在氯仿(50ml)中的悬浮液冷却至-5℃，一次加入三乙胺(9.9ml,70.79mmol)。所得澄清溶液在大约0℃下搅拌45分钟，然后经过大约1.5小时滴加溴(1.82ml,35.4mmol)的氯仿(40ml)溶液。

进一步在0℃下搅拌15分钟后，使混合物温度升至室温，然后用氯仿(1.25L)稀释。有机相用盐水洗涤(2×100ml)，经硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。残余物在甲醇(100ml)中悬浮，过滤。收集灰白色固体，在真空下干燥，得到目标化合物为一大约85/15比例的混合物(¹H-NMR)。通过加热样本得到的质子NMR谱有助于峰在对应于2种异构体的芳香区域中分配。异构体1；¹H-NMR(DMSO)δ:0.95(t,J=7.2Hz,3H),1.36-1.43(q,J=6.8Hz,2H,CH₂N),1.53(S,3H),1.65-1.73(m,2H,CH₂),3.73-3.78(t,J=6.8Hz,2H,CH₂,N),7.38(d,J=8.7Hz, 1H,Ar-H),7.80(d,J=8.6Hz,1H,Ar-H),7.98(s,1H,Ar-H),9.53(s,1H)异构体2:¹H-NMR(DMSO)δ:0.95(t,J=7.2 Hz,3H),1.36-1.43(q,J=7.4 Hz,2H,CH₂CH₃),1.53(s,9H),1.65-1.73(m,2H,CH₂),3.73-3.78(t,J=6.8Hz,2H,CH₂N),7.38(d.J=8.7Hz,1H,Ar-H),7.63 (d,J=8.6Hz,1H,Ar-H),8.34(s,1H,Ar-H),9.60(s.1H).

例415’-氨基-[3-(2-吡啶基)]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑和6’-氨基-[3-(2-吡啶基)]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的合成A·向例40、B部分产物(1.0g,2.76mmol)在氯仿(5.0ml)中的悬浮液中一次加入2-氰基吡啶(0.575g,5.52mmol)。所得混合物回流5小时，然后在室温下搅拌16小时。

减压除去氯仿，残余物用乙醚(10ml)悬浮，过滤。收集灰白色固体，在真空下干燥。于是得到0.68g(67％)大约1∶1比例的5’-(叔丁氧羰基)氨基-[3-(2-吡啶基)]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑和6’-(叔丁氧羰基)氨基-[3-(2-吡啶基)]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。¹H-NMR(CDCl₃)δ:1.56(s,9H),6.67(br.s.1H,NH),7.23-7.32(m,1H,py-H),7.54-6.60(m,1H,Ar-H),7.66-7.69(d,J=8.7Hz,0.5H,Ar-H),7.79(d,J=1.9Hz,0.5H,Ar-H),7.93-7.98(t,J=8.0Hz,1H,py-H),8.28-8.32(m,1H,py-H),8.64(d,J=9.0Hz,0.5H,Ar-H),8.86-8.89(dd,J=4.8和0.9(Hz,0.5H,py-H),8.98(br.d,J=4.8Hz,0.5H,py-H)和9.20(br.s,0.5H).B·将例41、部分A所得化合物(1.0g,2.72mmol)在HCl的MeOH(25ml)溶液中的悬浮液在室温下搅拌4.5小时。进一步加入25mlHCl的MeOH溶液，在真空中除去挥发性物质。残余物在乙醚中悬浮，过滤，得到目标化合物，为其大约1∶1异构体混合物的浅黄色HCl盐(0.99g,96.6％)(HPLC:20mM乙酸铵/乙腈80/20；C18柱)。IR(KBr,cm^-1):3419,1611,1551,1527.元素分析计算值(测定值)

％:C 41.5(41.0)；H 3.2(3.5) and N 18.6(18.3).

例421,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑-3-基-L-亮氨酰异戊酰胺的合成

向L-亮氨酰异戊酰胺(0.788g,3.94mmol)和3-溴-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑(1.0g,3.94mmol)在THF(15ml)中的溶液中加入碳酸钾(544mg,3.94mmol)。混合物在室温下搅拌16小时，然后进一步回流8小时。溶剂蒸发至干，使残余物在乙酸乙酯(125ml)和水(15ml)之间分配。有机相用盐水(10ml)洗涤，经硫酸钠干燥，蒸发，得到一固体，进一步用柱色谱法精制(10％MeOH∶CHCl₃)，得到目标化合物(715mg)。¹H-NMR(CDCl₃)δ0.92(d,6H,2CH₃),0.92-1.10(dd,6H,2CH₃),1.40-1.52(m,2H),1.54-1.78(m,2H),1.80-2.00(m,2H,CH₂),3.34-3.45(m,2H,CH₂NH),4.48-4.58(m,1H,α-CH为Leu的),6.56(t,J=5.6Hz,1H,NHCH₂),5.60(d,J=8.3Hz,1H,NHCH),7.15(t,1H,J=7.4Hz,Ar-H),7.34(t,1H,J=8.2Hz,Ar-H),7.64(d,1H,J=8.2Hz,Ar-H),7.77(d,1H,J=8.1Hz,Ar-H),¹³C-NMR(CDCl₃)δ172.5(CO-CH),164.4(c-s),150.4,145.0,127.8,124.5,121.3,119.1,110.2,55.4(CH-CO),41.7,3 8.4,38.2,25.8,24.9,23.0,22.4,22.1.IR(薄层cm^-1):3241(NH),1660(C=0),1574.M.p.105-107℃.元素分析计算值(测定值)％:C 61.10(61.30),H 7.29(7.05),N 18.75(18.43):

例43{1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑-3-基}羰基-L-亮氨酰异戊酰胺的合成

向3-羧基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑(1.10g,5.02mmol)在DMF(30ml)中的悬液中加入1,1-羰基二咪唑(1.30g,8.03mmol)。混合物在45℃下加热2小时，其间混合物转变为黄色溶液。将溶液冷却至0℃，加入亮氨酰异戊酰胺(1.21g,6.02mmol)和DMF(5ml)，所得混合物在室温

下搅拌16小时。混合物用乙醚(400ml)稀释，醚层用0.5M HCl(25ml)、水(3×25ml)、和盐水(925ml)洗涤。醚层经硫酸钠干燥，蒸发，得到一固体(1.77g)，进一步用柱色谱法精制，得到1.33g所需物质。¹H-NMR、(CDCl₃)δ0.90(d,6H,J=6.5Hz,2CH₃),1.05(dd,6H,2CH₃),1.38-1.48(m,2H),1.54-1.68(m,1H),1.72-1.85(m,3H),3.22-3.38(m,2H,CH₂NH),4.62-4.78(m,1H,CHCO),6.30(t,1H,NH),7.32(t,1H,J=7.3Hz,Ar-H),7.45(t,1H,J-7.4Hz,Ar-H),7.75(d,1H,J=8.0Hz,Ar-H),7.93(d,1H,J=8.4Hz,Ar-H),8.73(d,1H,J=8.3Hz,NH).¹³C-NMR(CDCl₃)170.8(COCH),164.4(CS),155.4,150.5,144.1,129.4,125.8,122.2,119.2,126.3,52.6(CHCO),41.4,38.3,38.2,25.8,24.9,22.9,22.4,22.1IR(KBr,cm^-1 ):3295(NF),1651(C=0),1527.M.p.164-167℃.

例445-氨基-3-甲氧基-1,2,4-噻二唑的合成

该物质按照J.Goeredeler等《Chem.Ber.》1955,88,843的方法进行制备。向HCl(5.77g)在甲醇(100ml)中的溶液中缓慢加入氨基氰(5.77g,13.78mmol)。所得混合物在室温下搅拌3天。减压蒸发残余物，得到盐酸甲基异脲(15.16g)。在0℃下，向盐酸甲基异脲(12.63g,0.114mol)在水(75ml)中的溶液中滴加次氯酸钠溶液(0.769M,149ml)，滴加经过30分钟。1.5小时后，溶液用氯化钠饱和，用乙醚萃取(3×700ml)。合并的醚层经硫酸钠干燥，蒸发，得到N-氯甲基异脲(10.26g，产率83％)。向N-氯甲基异脲(10.26g,94.5mmol)在甲醇(200ml)中的溶液中加入KSCN(9.19g,94.5mmol)。16小时后，过滤不溶性残余物，进一步用甲醇洗涤。蒸发合并的滤液，得到一固体，用柱色谱法精制(洗脱梯度：5至7％MeOH∶CHCl₃)。分离的固体用甲苯重结晶，得到目标化合物(3.14g)。

例455-{3-甲氧基-1,2,4-噻二唑基}氨基甲酰基-异亮氨酰异戊酰胺的合成

在15℃下，向三光气(0.837g,2.82mmol)和二丙基乙胺(1.08g,8.35mmol)的溶液中滴加5-氨基-3-甲氧基-1,2,4-噻二唑(1.0g,7.67mmol)在THF(20ml)中的溶液，所得混合物在室温下搅拌1小时。经过15分钟加入亮氨酰异戊酰胺(1.53g,7.62mmol)在二氯甲烷(15ml)中的溶液。2小时后，减压除去溶剂，残余物用EtOAc(500ml)稀释。物料用硫酸铵溶液(10％,50ml)和盐水(50ml)洗涤。有机层经硫酸钠干燥，蒸发，得到一油状物，用柱色谱法精制(1.5％MeOH∶CHCl₃)，得到目标化合物(469mg，产率17％)。¹H-NMR(CDCl₃)0.86(d,J=6.55Hz,6H,2CH₃),0.93(dd.6H,2CH₃),1.34(m,2H),1.53-1.73(m,4H，亮氨酸的CH₂异戊基的CH₂.),3.17-3.33(m,2H,CH₂NH),4.10(s,3H,0CH₃),6.58(t,J=5.4Hz,1H,NHCH₂),6.70(d,J=8.6Hz,1H,NHCH),12.60(br.s,1H,NHCO).¹³C-NMR(CDCl₃δ178.1(C-OCH₃),171.7(CH-C=O),166.0(C-S),153.9(N-CO-N),56.6(CH₃O),52.7(CH-CO),41.9,38.2,38.0,25.8,24.7,22.8,22.4,22.3,22.2.IR(KBr,cm^-1):3359(NH),1701(C=O),1680,1645,1554.M.p.169-172℃.

例465-{苄氧基羰基-L-苯丙氨酰-L-丙氨酰氨基}-3-甲氧基-1,2,4-噻二唑的合成

在0℃下，向HOBt(131mg,0.97mmol)和苄氧羰基-L-苯丙氨酰-L-丙氨酸(300mg,0.81mmol)在DMF(2ml)中的溶液中加入EDCI(300mg,1.62mmol)。25分钟后，加入5-氨基-3-甲氧基-1,2,4-噻二唑(140mg,1.05mmol)，溶液在室温下搅拌2天。物料蒸发至干，用乙酸乙酯萃取。有机层经硫酸钠干燥，蒸发，得到一油状物，用色谱法精制(10％MeOH∶CH₂Cl₂)，得到90mg固体物质。该固体进一步用厚层色谱法精制(5％MeOH∶CH₂Cl₂)，得到30mg目标化合物。¹H-NMR(MeOD)1.42(d,3H,CH₃),2.80-2.95(dd,1H,苯的CH₂),3.08-3.18(dd,1H,苯的CH₂),3.99(s,3H,CH₃O),4.45(dd,1H,苯的α-CH),4.58(q,1H,丙氨酸的-CH),5.05(s,2H.OCH₂),7.10-7.40(m,10H,Ar-H).¹³C-NMR(MeOD)δ177.3(COCH₃),174.4(CO,174.2(CO),169.5(CS),158.3(CO₂),138.2,138.1,130.4,129.4,128.9,128.8,128.7,127.8,127.7,67.7(OCH₂),57.6(CHCH₂),57.1(CH₃O),39.0(CH₂CH,17.2(CH₃CH).

例47N-[3-(4-甲基-哌嗪基)-[1,2,4]噻二唑-5-基]-N-苯基苄脒的合成

按照H.Sonnenschein等《Liebigs Ann.Chem.》1992,287-289的方法制得5-氰基亚氨基-4,5-二氢-3,4-二苯基-1,2,4-噻二唑。向5-氰基亚氨基-4,5-二氢-3,4-二苯基-1,2,4-噻二唑(153mg,0.55mmol)在二噁烷(3ml)中的溶液中加入1-甲基哌嗪(0.152ml,1.375mmol)。混合物在室温下搅拌3天。用TLC(35％EtOAc∶己烷)指示反应完全。生成一白色固体，过滤，然后用二氯甲烷∶己烷(1∶9)重结晶。得到97mg目标化合物，进一步用柱色谱法精制(10％MeOH∶CH₂Cl₂)。H-NMR(CDCl₃):2.3(s,3H,OMe),2.4(m,4H,2CH₂),3.5(m,4H,2CH₂),7.15-7.25(m,10H,ArH),8.51(s,1H,NH).M.p.=152.5-152.7℃.

例487-甲氧基-3-[(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)氧甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的酸稳定性

为了检查标题化合物的酸稳定性，将该化合物溶于小体积的甲醇，将所得溶液加入到6摩尔氢氯酸溶液中。发现该化合物在酸中非常稳定，在室温下搅拌48小时后完全回收。另一方面，奥美拉唑在上述条件下，在几分钟内完全分解。因为1,2,4-噻二唑衍生物是酸稳定的，作为一种酸性介质中直接的硫羟基引诱剂是优于奥美拉唑的。

例493-[(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)氧甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑与3-巯基丙酸的反应

向250mg 3-[(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)氧甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑在125ml甲醇和38ml 0.1M氢氯酸中的溶液中加入161μl3-巯基丙酸。原料降解完全后，混合物用碳酸氢钠水溶液中和至pH6，用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯经无水硫酸镁干燥，蒸发。粗物料用色谱法精制，得到93mg 2-亚氨基-2-(2-巯基-1-苯并咪唑基)-1-(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)乙酮(ethanone)、65mg 2-巯基苯并咪唑和61mg 2-(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)-2-氧乙酸甲酯。2-亚氨基-2-(2-巯基-1-苯并咪唑基)-1-(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)ethanone:¹H NMR(CDCl₃)δ10.55(br s,1H,NH或SH),10.35(br s,1H,NH或SH),8.10(d,1H,J=7Hz,ArH),7.80(s,1H,吡啶基的H₆),7.35-7.20(m,2H,2×ArH),7.10(d,1H,J=7.9(Hz,ArH),3.75(S,3H,OCH₃),2.60(s,3H,ArCH₃),2.15(s,3H,ArCH₃)ppm；IR(KBr):3262,1691,1635,1502,1458,1396,1328,1272,1247,1004,746 cm^-1；MS(电动喷雾)m/z 341(MH⁺),191(MH⁺-2-巯基苯并咪唑)。2-巯基苯并咪唑：该物质经¹H NMR、IR和TLC鉴定，发现与购自Aldrich化学品公司的可信样本是同一种物质。2-(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)-2-氧乙酸甲酯：¹H NMR(CDCl₃)δ8.45(s,1H,ArH),4.1(s,3H,OCH₃),3.85(s,3H,OCH₃),2.65(s,3H,ArCH₃),2.4(s,3H,ArCH₃)ppm；IR(KBr):1747,1703,1468,1394,1310,1242,1206,1120,1004,740cm^-1；MS m/z 224(M⁺+H),164(M⁺-CO₂Me),136(M⁺-CO₂Me-CO).

例503-(二甲氨基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑与苯乙基硫醇的反应

向23mg 3-(二甲氨基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑在10ml甲醇中的溶液中加入360μl苯乙基硫醇。1分钟后，反应完全。蒸发溶剂，粗物料用色谱法精制，得到15mg N¹,N¹-二甲基-2-巯基-1-苯并咪唑基脒：¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.3-7.0(m,4H,4×ArH),3.35(br s,2H,NH,SH),2.88(s,6H,2×NCH₃)ppm；IR(KBr):3210,1641,1475,1452,1407,1319cm^-1；MS m/z 220(M+),150(M⁺-Me₂NC=NH).

例513-溴-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑与苯乙基硫醇的反应向500mg 3-溴-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑在50ml甲醇中的溶液中加入790μl苯乙基硫醇。反应完全后，蒸发溶剂，残余物用色谱法精制，得到296mg 2-巯基-1-苯并咪唑腈：¹H NMR(DMSO-d₆)δ12.85(br s,1H,SH),7.5-7.2(m,4H,4×ArH)ppm；IR(KBr):2259,1509,1459,1303,1189,752cm^-1；MS m/z 175(M⁺),150(M⁺-CN).

例523-甲氧基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑与苯乙基硫醇的反应向23mg 3-甲氧基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑在10ml甲醇中的溶液中加入376μl苯乙基硫醇。1分钟后，反应完全。经鉴定，2-巯基-1-苯并咪唑carboximidate为反应的主要产物：¹H NMR(DMSO-d₆)δ13.45(br s,1H,SH或.NH),9.8(s,1H,NH或SH),7.7(d,1H,J=8Hz,ArH),7.35-7.2(m,3H,3×ArH),3.95(s,3H,OCH₃)ppm；IR(KBr):3437,3095,1679,1450,1440,1376,1193,735cm^-1；MS m/z=207(M⁺),150(M⁺-MeOC=NH).

例533-(氧苯甲基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑与苯乙基硫醇的反应

向26mg 3-(氧苯甲基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑在10ml甲醇中的悬液中加入31μl苯乙基硫醇。通过与购自Aldrich化学品公司的可信的2-巯基苯并咪唑样本比较，发现底物完全转化为2-巯基苯并咪唑。

例543-[羟基(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑与苯乙基硫醇的反应

向25mg 3-[羟基(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑在10ml甲醇中的悬液中加入250μl苯乙基硫醇。通过与购自Aldrich化学品公司的可信的2-巯基苯并咪唑样本比较，发现底物完全转化为2-巯基苯并咪唑。

例553-[(4-甲基苯基)磺酰基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑与苯乙基硫醇的反应

向31mg 3-[(4-甲基苯基)磺酰基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑在10ml甲醇中的悬液中加入313μl苯乙基硫醇。通过与购自Aldrich化学品公司的可信的2-巯基苯并咪唑样本比较，发现底物完全转化为2-巯基苯并咪唑。

例565-氨基-3-甲氧基-1,2,4-噻二唑与苯乙基硫醇的反应

向250mg 5-氨基-3-甲氧基-1,2,4-噻二唑在10ml甲醇中的溶液中加入1.3ml苯乙基硫醇。反应完全后，蒸发溶剂。粗物料用色谱法精制，得到236mg 3-氨基甲酰基异脲。该化合物的结构经X射线结晶法确认如下：¹H NMR(CDCl₃)δ10(br s,1H,NH),6.55(br d,2H,NH₂),5.55(br s,1H,NH),3.75(s,3H,OCH₃)ppm(在溶液中，该化合物以1-硫代氨基甲酰基异脲互变异构体形式存在，NMR谱中得到1个NH₂和2个NH)IR (KBr)3420,3282,3266,3169,1626,1601,1519,1465,1411,1380,1098cm^-1；MS m/z 133(M⁺),117(M⁺-NH₂),100(M⁺-SH).

例573-[(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)氧甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑与苯乙基硫醇的反应

向3-[(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)氧甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑(300mg,0.887mmol)在甲醇(150ml)和0.1M氢氯酸(38ml)中的悬液中加入苯乙基硫醇(120μl,0.90mmol)。混合物在室温下搅拌51小时后，混合物用碳酸氢钠水溶液中和至pH6，用乙醚萃取。醚层经硫酸钠干燥，蒸发。粗物料用色谱法精制(洗脱梯度：10％EtOAc∶己烷至30％EtOAc∶己烷)，得到110mg二苯乙基二硫化物(来自苯乙基硫醇的产率为92％)、63mg 2-氧-2-(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)乙酸的甲基酯(来自所消耗的标题化合物1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的产率为37.6％)、44mg 3-[(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)氧甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑(14.6％回收的原料)和2-巯基苯并咪唑(46mg，来自标题化合物1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的产率为40％)。2-氧-2-(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)乙酸甲酯：¹H NMR(CDCl₃)δ8.45(s,1H,ArH),4.1(s,3H,OCH₃),3.85(s,3H,OCH₃),2.65(s,3H,ArCH₃),2.4(s,3H,ArCH₃)ppm；IR (KBr):1747,1703,1468,1394,1310,1242,1206,1120,1004,740cm^-1；MS m/z 224(M⁺+HO,164(M⁺-CO₂Me),136(M⁺-CO₂Me-CO).2-巯基苯并咪唑：该物质经¹H NMR、IR和TLC鉴定，发现与购自Aldrich化学品公司的可信样本是同一种物质。二苯乙基二硫化物：H-NMR(CDCl₃):3.03(m,8H,2CH₂CH₂),7.27(m,6H,ArH),7.30(m,4H,ArH),C-NMR(CDCl₃:3 5.79,40.27,126,46,128.57,128.67,140.08.

例583-(4-甲基哌嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑与硫代苯酚的反应将二盐酸3-(4-甲基哌嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑(1.494g,4.31mmol)和硫代苯酚(1.43ml,12.94mmol)在甲醇(400ml)和1NHCl(120ml)中的溶液在室温下搅拌3.5天。该物料蒸发，得到一固体残余物，使其在乙醚(3×100ml)和水(20ml)之间分配。醚层经硫酸钠干燥，蒸发，得到753mg二苯基二硫化物(产率53.3％)。含水层通过在0℃下滴加2N NaOH进行中和，然后用二氯甲烷萃取(3×100ml)。二氯甲烷层经硫酸钠干燥，蒸发，得到1-[亚氨基-(5-甲基哌嗪-1-基)甲基-1H-苯并咪唑-2-硫醇，为一固体(1.13g，产率95.1％)。H-NMR(DMSO):2.19(s,3H,N-Me),2.33(br.s,4H,2CH₂CH₂-),3.24(br.s,4H,2CH₂CH₂-),7.14-7.23(m,4H,ArH).C-NMR(DMSO):44.81,45.11,53.59,109.52,110.42,123.09,123.89,131.47,131.57,149-34(C=NH),166.89(CSH).

例593-苯甲酰基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑与硫代苯酚的反应将硫代苯酚(1.08ml,10.47mmol)、3-苯甲酰基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑(975mg,3.49mmol)在甲醇(400ml)和1N HCl(120ml)中的溶液在室温下搅拌16小时。减压蒸发溶液以除去甲醇；含水混合物用固体碳酸氢钠中和至pH7.0，用二氯甲烷萃取。有机层经硫酸钠干燥，蒸发，得到一固体。该物料用柱色谱法精制，得到下列化合物：二苯基二硫化物(700mg固体；R₁=0.69,10％EtOAc∶己烷)与来自Aldrich化学品公司的二苯基二硫化物具有相同的NMR。H-NMR(CDCl₃):7.3-7.35(m,2H,ArH),7.35-7.45(m,4H,ArH)；7.63-7.68(m,4H,ArH),C-NMR(CDCl₃): 127.326,127.703,129.241,137.219.2-巯基苯并咪唑(180mg，产率34.3％；R₁=0.46,20％EtOAc∶己烷)与来自Aldrich化学品公司的2-巯基苯并咪唑具有相同的NMR。苯甲酰甲酸甲酯(120mg，产率21％；R₁=0.57,20％EtOAc∶己烷)与来自Aldrich化学品公司的苯甲酰甲酸甲酯具有相同的NMR。H-NMR(CDCl₃):52.67,128.86,130.03,132.44,134.89,164.01(C=O),185.98(C=O).IR:1740,1687,cm^-1.

例601,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑衍生物与2-巯基乙醇的反应。t_1/2值的测定。

在一个容量瓶中，将计算量的1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑衍生物(最终溶液浓度=5×10^-3M)和苯酚(118mg，最终溶液浓度=5×10^-3M)溶于甲醇(250ml)。将100ml溶液移至一个干净容量瓶中，所得溶液在室温下搅拌。将注射器针头插入溶液中，用注射器在60秒钟之内加入100μl 2-巯基乙醇(最终溶液浓度=1.15×10^-2M)。用配有PE express 3.3cm、C18柱的HPLC(Hewlett Packard 1100型)和波长设为254nm的UV检测仪监视反应过程。柱用70％50mM乙酸铵洗脱；30％乙腈作流动相。

如下计算反应完成的百分率：在0时间点，原料100％未反应。在t时间点，未反应原料的％={t时间点的h_样本/h_内标}/{0时间点的h_样本/h_内标}×100％。未反应原料的％按时间刻度标绘，t_1/2是对应于50％未反应原料的时间点。三环1,2,4-噻二唑与巯基乙醇在pH7.0下的反应

基团Y	pH=7.0下的t_1/2
基团Y	pH=7.0下的t_1/2	MeO	0.31小时
Me₂N	1.5小时	MeO	0.31小时
Me₂N	1.5小时	吗啉代	2.4小时
4-甲基哌嗪基	6.7小时	吗啉代	2.4小时
4-甲基哌嗪基	6.7小时	苯基	45小时
甲基	59小时	苯基	45小时
甲基	59小时	2-吡啶基	134小时
乙酰基	110小时	2-吡啶基	134小时
乙酰基	110小时	吗啉代甲基	98小时
二甲氨基乙基	64小时	吗啉代甲基	98小时

例61式Ⅰ化合物对大鼠胃酸分泌的作用

将禁食的成年(140-240g)雄性Sprague-Dawley大鼠禁止进食24小时，但不禁止饮水，然后在不同的日期按管饲法使其口服总体积为1至1.5ml的式Ⅰ化合物(300μmmol/Kg)。两小时后，大鼠用戊巴比妥联合硫喷妥进行麻醉，打开腹部，结扎幽门，放置气管、胃、和外周静脉插管。30分钟内，每10分钟用10ml 0.9％盐水洗胃，将胃洗液收集在接受器中，测定基础酸分泌。用0.02M NaOH按反滴定法调至pH7.0，藉此测定每个胃洗液样本中的酸分泌量。然后，将5ml 8％蛋白胨餐(pH5.5)滴注入胃中，混合，10分钟后引流，每次2小时。用0.02M NaOH按反滴定法调至pH5.5，藉此测定每份含有蛋白胨餐的胃洗液中的酸分泌量。

在供对照的载体中(n=6)，注意到在1小时后8％蛋白胨餐刺激的酸分泌量为160mmol/30分钟，而服用7-甲氧基-3-[(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)氧甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑的大鼠在1小时后观察到的酸分泌量为20μmmol/30分钟。证明7-甲氧基-3-[(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)氧甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑在300μmol/Kg剂量水平下，显著地抑制了蛋白胨餐刺激的酸分泌(p＜0.05)。

例62式Ⅰ化合物对大鼠胃酸分泌的作用(剂量依赖性研究)

将禁食的成年(140-240g)雄性Sprague-Dawley大鼠禁止进食24小时，但不禁止饮水，然后在不同的日期按管饲法使其口服总体积为1至1.5ml的式Ⅰ化合物，每种化合物为4种剂量(0.3、3、30和300μmmol/Kg)。两小时后，大鼠用戊巴比妥联合硫喷妥进行麻醉，打开腹部，结扎幽门，放置气管、胃、和外周静脉插管。30分钟内，每10分钟用10ml 0.9％盐水洗胃，将胃洗液收集在接受器中。用0.02M NaOH按反滴定法调至pH7.0，藉此测定每个胃洗液样本中的酸分泌量。然后，将5ml 8％蛋白胨餐(pH5.5)滴注入胃中，混合，10分钟后引流，每次2小时。用0.02M NaOH按反滴定法调至pH7.0，藉此测定每个含有蛋白胨餐的胃洗液中的酸分泌量。在测量基础酸分泌量后至少30分钟后，再在组胺静脉输注(5mg/kg)的2小时过程中测量酸分泌量。

图3表示麻醉的大鼠中，载体给药后和4种剂量的7-甲氧基-3-[(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)氧甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑(0.3、3、30和300mmol/Kg)给药后的胃酸分泌量(mmol/分钟)。

证明7-甲氧基-3-[(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)氧甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑在3、30、300μmol/Kg剂量水平下，显著地抑制了组胺餐刺激的酸分泌(p＜0.05)。

例63二盐酸3-(4-甲基-1-哌嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑对胃酸分泌的体外抑制作用

在离体小鼠胃腺中，用弱碱¹⁴C-氨基比林的蓄积间接测量酸分泌。测定是在含有0.5ml重悬浮的小鼠胃腺的聚丙烯eppendorf试管中进行的。此外，管中还含有供试药物、酸促分泌素(例如组胺、二丁酰环AMP(cAMP)、氨甲酰胆碱)和¹⁴C-氨基比林。试管不断旋转地在37℃下恒温60分钟。将胃腺悬液以1500g离心五分钟，藉此终止反应。吸取上清液而沉淀中则含有完整胃腺。充分洗涤沉淀，在1ml二羟丙酮(Amersham)中消化过夜。在用乙酸中和、加入闪烁流体后，在一种β计数器(Beckman)中计数放射性。沉淀中吸收的放射性的数值直接对应于所分泌的酸的量。每个实验点重复三次。在每个实验中，在没有酸刺激剂存在的条件下，用0.1mM二硝基苯酚和基础酸分泌估计独立的能量消耗。从相应结果中减去这些数值，以计算基础酸分泌或促分泌素刺激的酸分泌。

小鼠腺体对多种常用的促分泌素和受体后介质有反应，但是胃泌素除外。用1mM cAMP、0.1mM组胺、0.1mM IBMX、10μM氨甲酰胆碱、10μM弗司扣林、10μM钙离子载体A23187、1μM毒胡萝卜素(thapsigarin)达到酸分泌的最大刺激。每个实验重复若干次，所有结果以最大刺激的％表示。为了比较化合物的相对能力，每个实验包含阳性对照，阳性对照使用奥美拉唑和雷尼替丁，奥美拉唑用于受体后/cAMP为媒介的反应，雷尼替丁可抑制以组胺为媒介的酸分泌。

二盐酸3-(4-甲基-1-哌嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑在100μM下完全抑制了cAMP和组胺刺激的酸分泌。利用上述方法，发现该化合物的ED₅₀值为50μM。

例64

1,2,4-噻二唑和1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑衍生物对组织蛋白酶B、组织蛋白酶L和木瓜蛋白酶的抑制作用：酶测定和动力学测量

该实验条件参考下列文献：Menard R.等《生物化学》1990,29,6706-6713；Fox T.等《生物化学》1992,31,12571-12576；Cannona E.等《生物化学》1996,35,8149-8157。典型的实验组成为选择抑制剂的浓度，使两小时内达到最大抑制作用，监视完整的前进曲线(即荧光-时间曲线)，分析数据。数据分析得到两个参数：一旦达到稳定状态时的抑制％，和速率常数，该速率常数代表达到该稳定状态时的速率。一般来说，酶的活性随时间降低，直至达到最大抑制作用(即稳定状态)时为止，这时酶活性保持恒定。由于在稳定状态下仍可检测到显著水平的活性(即抑制作用不完全)，数据适用于等式(1)，该等式在正常情况下适用于慢速结合的可逆性抑制剂。

[P] = v_{o} t + \frac{(v_{i} - v_{o}) [1 - e^{- k} {obs}^{t}]}{k_{obs}} - - - (1)

抑制％=(1-v_i/v_o)·100 (2)该等式中，[P]代表产物浓度(从荧光读数得到)，K_abs是达到稳定状态的第一级速率常数，v_o是相应于没有抑制剂存在下的速率的原始速率，v_i是稳定状态下被抑制的酶的速率。用等式(2)得到抑制％，其中将在没有抑制剂存在下测量的速率作为v_o。下面给出这样一种方法的简单机理实例：该机理中，用实验方法测定的k_obs值对应于：k_obs=k_on·[抑制剂]+k_offk_abs值因抑制剂浓度而异。通常，k_off大大低于k_on·[抑制剂]，k_obs/[抑制剂]约等于k_on。本研究使用的即是这种方法，结果如下所示：3-[4-甲基哌嗪基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑组织蛋白酶L:200μm[抑制剂]下的抑制作用为98％；k_obs/[抑制剂]=24M^-1s^-1。组织蛋白酶B:200μm[抑制剂]下的抑制作用为68％；k_obs/[抑制剂]=19M^-1s^-1。木瓜蛋白酶：200μm[抑制剂]下的抑制作用为99％；K_obs/[抑制剂]=28M^-1s^-1。1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑-3-基羧酸钠组织蛋白酶L:50μm[抑制剂]下的抑制作用为98％；k_obs/[抑制剂]=184M^-1s^-1。组织蛋白酶B:200μm[抑制剂]下的抑制作用为85％；k_obs/[抑制剂]=34M^-1s^-1。木瓜蛋白酶：200μm[抑制剂]下的抑制作用为99.6％；k_obs/[抑制剂]=131M^-1s^-13-[2-吡啶羰基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑组织蛋白酶L:200μm[抑制剂]下的抑制作用为99％；k_obs/[抑制剂]=68M^-1s^-1。组织蛋白酶B:200μm[抑制剂]下的抑制作用为58％；k_obs/[抑制剂]=15M^-1s^-1。木瓜蛋白酶：1μm[抑制剂]下的抑制作用为79％；k_obs/[抑制剂]=2479M^-1s^-1。3-[N-吗啉代甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑组织蛋白酶L:200μm[抑制剂]下的抑制作用为80％；k_obs/[抑制剂]=7M^-1s^-1。组织蛋白酶B:200μm[抑制剂]下的抑制作用为60％；k_obs/[抑制剂]=8M^-1s^-1。木瓜蛋白酶：200μm[抑制剂]下的抑制作用为92％；K_obs/[抑制剂]=7M^-1s^-1。1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑-3-基-L-脯氨酸甲酯组织蛋白酶L:10μm[抑制剂]下的抑制作用为99％；K_obs/[抑制剂]=1050M^-1s^-1。组织蛋白酶B:10μm[抑制剂]下的抑制作用为88％；k_obs/[抑制剂]=626M^-1s^-1。木瓜蛋白酶：0.26μm[抑制剂]下的抑制作用为97％；k_obs/[抑制剂]=356M^-1s^-1。3-[2-(N-吗啉代)乙氧基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑组织蛋白酶L:25μm[抑制剂]下的抑制作用为99％；K_obs/[抑制剂]=356M^-1s^-1。组织蛋白酶B:50μm[抑制剂]下的抑制作用为91％；k_obs/[抑制剂]=107M^-1s^-1。木瓜蛋白酶：0.66μm[抑制剂]下的抑制作用为99.6％；k_obs/[抑制剂]=5560M^-1s^-1。{1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑-3-基}-羰基-L-亮氨酰异戊酰胺组织蛋白酶L:5μm[抑制剂]下的抑制作用为93％；k_obs/[抑制剂]=307M^-1s^-1。木瓜蛋白酶：5μm[抑制剂]下的抑制作用为95％；k_obs/[抑制剂]=500M^-1s^-1。5-{3-甲氧基-1,2,4-噻二唑基}氨基甲酰基-异亮氨酰异戊酰胺组织蛋白酶L:5μm[抑制剂]下的抑制作用为99％；k_obs/[抑制剂]=3482M^-1s^-1。组织蛋白酶B:5μm[抑制剂]下的抑制作用为56％；k_obs/[抑制剂]=1062M^-1s^-1。木瓜蛋白酶：1μm[抑制剂]下的抑制作用为97％；k_obs/[抑制剂]=3896M^-1s^-1。

例655-{3-甲氧基-1,2,4-噻二唑基}氨基甲酰基-异亮氨酰异戊酰胺(TIIAA)与木瓜蛋白酶和猕猴桃碱的酶抑制剂配合物：TIIAA/木瓜蛋白酶配合物和TIIAA/猕猴桃碱配合物的晶体结构测定

从商业上得到精制的木瓜蛋白酶，将均化处理过的猕猴桃用水提取，然后经硫酸铵分离和DEAE离子交换色谱，得到精制的猕猴桃碱。猕猴桃碱/TIIAA和木瓜蛋白酶TIIAA反应按相同方案进行。用β-巯基乙醇活化的汞-琼脂糖亲和色谱法分离巯基蛋白质。洗脱出来的蛋白质为汞衍生物。0.1％w/v的汞-巯基蛋白质用8倍摩尔量的TIIAA和EDTA在pH7.5下培养。将木瓜蛋白酶/TIIAA再次溶解在67％2∶1甲醇/乙醇、76mMNaCl、和1mM A100-73中，浓度为2.5％w/v。

用垂滴(sitting drop)蒸汽扩散法使木瓜蛋白酶TIIAA晶体生长。在23℃下，将一等分试样的木瓜蛋白酶TIIAA在含有67％2∶1甲醇/乙醇和pH9.3的0.1M乙醇胺缓冲液的储液器中培养。在4至6周中长出大型单晶。

将猕猴桃碱TIIAA再次溶解在pH6.0的20mM MES缓冲液和0.5mMTIIAA中，浓度为0.5％w/v。用悬滴(hanging drop)蒸汽扩散法使猕猴桃碱TIIAA晶体生长在4℃下，将猕猴桃碱TIIAA与含有pH6.0的20mM MES缓冲液和1.4M硫酸铵的储液器溶液的1∶1混合物在储液器中培养。在7至10天中长出大型单晶。

将晶体置于含有母液的蜡封玻璃毛细管中。用安装在Rigaku RU200 X射线发生器上的西门子复线式检测仪收集数据。一种木瓜蛋白酶/TIIAA晶体收集三个数据集，两种猕猴桃碱/TIIAA晶体收集两个数据集。XDS用于数据还原，各个数据集共同进行缩放。蛋白晶体具有下列单位晶胞尺寸：木瓜蛋白酶/TIIAA:a=42.9A,b=49.9A,c=95.7A,=β==90。猕猴桃碱/TIIAA:a=3.9A,b=77.9A,c=81.4A,=β==90。两种晶体具有间隔基P212121。完成木瓜蛋白酶/TIIAA缩放数据集，分辨率达到为2.2A(60％达到2.0A)，其总Rsym=8.8％。完成猕猴桃碱缩放数据集，分辨率达到2.7A，其总Rsym=10％。XPLOR用于结构净化。木瓜蛋白酶TIIAA结构中有65个水分子。木瓜蛋白酶TIIAA的R_结晶=18.4％,R_游离=20.4％。猕猴桃碱TIIAA的R_结晶=20.5％,R_游离=24.4％。

木瓜蛋白酶TIIAA配合物和猕猴桃碱TIIAA配合物的电子密度图表明，连续的电子密度从其各自的催化半胱氨酸残基(Cys25)延伸开来。这一点证明，TIIAA与木瓜蛋白酶和猕猴桃碱发生共价反应，生成蛋白质/抑制剂配合物。在得到TIIAA完全结合在木瓜蛋白酶活性部位的模型的同时，也得到了TIIAA结合在猕猴桃碱活性部位中的部分结合模型。

动力学数据表明，在猕猴桃碱TIIAA制剂和再溶解的猕猴桃碱TIIAA晶体中，酶的活性被完全抑制了。

例66胃ATP酶抑制作用的测定

所用的酶是猪H⁺/K⁺-ATP酶(Sachs等，《生物化学杂志》251:7690-7698,1976)。所用的改进方法见Yoda A.和Hokin,L.E.,《生物化学研究通讯》1970,800-884。所测量的钾刺激的ATP水解作用使用猪胃(GI)微囊，这是一种富含H⁺/K⁺-ATP酶的制剂。

将在Mg⁺⁺的存在下的活性和在Mg⁺⁺与K⁺的存在下的活性之间的差异作为酶活性。在(+)K⁺培养混合物中还含有尼日利亚菌素，这是一种K⁺离子载体，它给微囊内部提供过量的K⁺。通过定量分析磷钼酸盐配合物来测量水解活性。该配合物在320nm下表现出最大的光密度。在该波长下会很多用于抑制H⁺/K⁺-ATP酶的药物的光密度发生干扰。因此，对测定方法进行了改进，即用Fiske and Subbarow还原剂(1-氨基-2-萘酚-4-硫酸加亚硫酸钠)还原磷钼酸盐配合物。这样一来，使氧化的磷钼酸盐配合物的光密度从320nm偏移至600-700nm。这种改进还有一个优点，当对多个样品进行化验时，可提供一种自动测定的手段。该改进方法中，所测定的混合物的光密度在700nm下进行读数。

在pH6.10的2ml MgCl₂、2mM Na₂ATP、40mM Pipes-tris中测量基础Mg⁺⁺浓度。加入20mM KCl和10μg/ml尼日利亚菌素，以测定K⁺刺激作用的程度。然后加入供试化合物或载体。然后加入酶(10μg/ml)，引发反应。最终体积为200μl。这些测定的方案如下所示。

每池体积
每池体积			试剂^a	单用Mg²⁺	K⁺加尼日利亚菌素
pH6.1的100mM PIPES-Tris	80μl	80μl	试剂^a	单用Mg²⁺	K⁺加尼日利亚菌素
pH6.1的100mM PIPES-Tris	80μl	80μl	20mM MgCl₂	20μl	20μl
200mM KCl	(-)	20μl	20mM MgCl₂	20μl	20μl
200mM KCl	(-)	20μl	尼日利亚菌素(200μl/ml)	10μl	10μl
水、载体或含有供试物质的溶液	20μl	(-)	尼日利亚菌素(200μl/ml)	10μl	10μl
水、载体或含有供试物质的溶液	20μl	(-)	20mM ATP^b	20μl	20μl
酶^c	20μl	20μl	20mM ATP^b	20μl	20μl

a为了减少加入的次数，盐溶液和水可以合并起来一次加入。通过使用尼日利亚菌素的酶可以进一步减少加入的次数(加入后酶的最终浓度为10μg/ml)。b必须在加入后快速在冰冷却的蒸馏水中制得ATP。c必须在加入前快速将酶融化和稀释在缓冲液中。

加入适用于测定的零空白(水对照)和磷酸盐标准物(200μl)，使用0.005、0.01、0.025、0.050、0.075、0.1……0.5mM标准物。试剂的加入顺序一般如上所述。不过，如果需要时间用供试化合物预先保温的话，可以更优选地在ATP之前加入酶。最后一次加入试剂的时间作为统一的测定时间。

反应进行30分钟至1小时。用4体积的2.5M硫酸加一体积的1.25％(w/v)Fiske and Subbarow试剂制得一种溶液，通过加入50μl该溶液终止反应。在室温下显色十分钟，测定700nm下的光密度。在形成白色沉淀的情况下，澄清的上清液(在混合和沉淀后)可用于测定酶的活性。3-[4-甲基哌嗪基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑；EC₅₀=2×10^-6M3-[哌嗪基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑；EC₅₀=1×10^-6M3-[N-吗啉代甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑；EC₅₀=2×10^-7M3-[2-(N-吗啉代)乙氨基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑；EC₅₀=2×10^-7M

Claims

1·一种使含有硫羟基化合物的硫羟基转化为二硫基的反应方法，该方法包括使该含有硫羟基化合物与一种包括下式结构基团的1,2,4-噻二唑化合物或其药学上可接受的盐反应：其中R₁、R₂、R₃、R₄独立为氢，低级烷基，卤素，硝基，羟基，低级烷氧基，或式NR’R”、OC(O)R’、OC(O)OR’、OC(O)NR’R”、NR'(COR’)、NHC(O)NR’R”、NHC(O)OR’基团，其中R’和R”独立选自氢、低级烷基、芳基或芳基烷基，或NR’R”代表一个由(CH₂)_n组成的五元或六元环，其中n=4或5；Y选自：(1)式

基团，其中R₇代表氢、羟基、低级烷基、低级环烷基、低级烷氧基、低级链烯基、低级炔基、芳基、低级芳基烷基、杂环基、杂环基氧基、杂环基低级亚烷基、一个NR’R”基团，其中R’与R”定义同上，和一个ANR’R”、AOR基团，其中A为一个氨基酸残基或2至3氨基酸残基的肽，R’、R”具有如上相同定义，任意杂环基均可选被低级烷氧基、低级烷基、氨基、二(低级烷基氨基)或单(低级烷基)氨基取代；(2)杂环基、低级亚烷基杂环基、低级亚烷氨基杂环基、氨基杂环基、氨基低级亚烷基杂环基、低级烷基低级亚烷基杂环基氨基或氧基低级亚烷基杂环基，杂环连接在任意杂原子或碳原子上，从而产生一个稳定结构，该杂环可选被1-3个取代基取代，取代基选自低级烷基，硝基，羟基，烷氧基，氨基，卤素，烷基氨基和二烷基氨基，和可选被1-3个取代基取代的杂环基，取代基独立选自低级烷基、硝基、羟基、烷氧基、氨基、卤素、烷基氨基和二烷基氨基；被1-3个取代基取代的低级烷基，取代基独立选自羟基、低级烷基氨基甲酰基、环烷基；苯基，卤代苯基，杂环基，羧基和低级烷氧基羰基；低级酰基；低级烷氧基羰基；低级烷基磺酰基；酰氨基；烯丙基；苄基；可选被氨基、卤素、羟基、低级烷氧基、低级烷基、低级烷基氨基或二低级烷基氨基取代的苯基；(3)NR’R”，其中R’、R”定义同上；(4)ANR’R”、AOR，其中A为一个氨基酸残基或2至3氨基酸残基的肽，R’、R”定义同上；(5)低级2-(烷氧基羰基)烷基；(6)卤素；(7)式R₈-CHOH-基团，其中R₈为氢、低级烷基、芳基、低级芳基烷基、低级环烷基、低级链烯基、低级炔基或杂环基，该杂环连接在任意杂原子或碳原子上，从而产生一个稳定结构；(8)式R₉-C(=NOR₁₀)-基团，其中R₁₀为氢、低级烷基或低级芳基烷基，R₉为低级烷基、芳基、低级芳基烷基、低级环烷基、低级链烯基、低级炔基或杂环基，该杂环连接在任意碳原子上，从而产生一个稳定结构；(9)可选被二(低级烷基)氨基、吗啉代或4-烷基哌嗪基取代的低级烷氧基；芳基氧基；低级芳基烷氧基；低级环烷氧基；低级杂环基烷氧基；或杂环基氧基；(10)低级烷基磺酰基，低级烷基亚磺酰基，芳基磺酰基，芳基亚磺酰基，低级芳基烷基磺酰基，低级芳基烷基亚磺酰基，杂环基磺酰基，杂环基亚磺酰基，杂环基硫基；低级烷硫基，芳基硫基，低级芳基烷硫基，可选被1至2个取代基取代，取代基选自低级烷基、卤素、硝基、羟基、低级烷氧基、或式NR’R”、OC(O)R’、OC(O)OR’、OC(O)NR’R”、NR’(COR’)、NHC(O)NR’R”、NHC(O)OR’基团，其中R’与R”定义同上；(11)式-C(=NOH)COOR₁₁基团，其中R₁₁为低级烷基；(12)氢、低级烷基、芳基、低级芳基烷基、低级环烷基，每个基团可选被1至2个取代基取代，取代基选自卤素、硝基、氨基、羟基、低级烷氧基、低级烷基氨基、低级二烷基氨基、低级烷基氨基甲酰基、NR’R”、OC(O)R’、OC(O)OR’、OC(O)NR’R”、NR’(COR’)、NHC(O)NR’R”、NHC(O)OR’,R’与R”定义同上。

2·根据权利要求1的方法，其中在所用的噻二唑化合物中R₁、R₂、R₃和R₄均代表氢或烷氧基。

3·根据权利要求2的方法，其中在所用的噻二唑化合物中R₁、R₃和R₄均为氢，R₂为氢或甲氧基。

4·根据权利要求3的方法，其中在所用的噻二唑化合物中Y为如权利要求2定义的式

基团，其中R₇代表低级烷基、低级芳基烷基、可选被取代的苯基或萘基、可选被取代的杂环基、羟基或低级烷氧基。

5·根据权利要求4的方法，其中在所用的噻二唑化合物中R₇代表可选被取代的杂环基。

6·根据权利要求5的方法，其中在所用的噻二唑化合物中R7代表未取代的2-吡啶基或被选自甲基和甲氧基的1至3个取代基取代的2-吡啶基。

7·根据权利要求6的方法，其中在所用的噻二唑化合物中R₇代表3,5-二甲基-4-甲氧基-2-吡啶基。

8·根据权利要求7的方法，其中所用的该噻二唑化合物为7-甲氧基-3-[(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)氧甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

9·根据权利要求7的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-[(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)氧甲基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

10·根据权利要求4的方法，其中在所用的噻二唑化合物中R₇代表可选被取代的哌嗪。

11·根据权利要求1的方法，其中所用的噻二唑化合物的通式为：

其中R₁、R₂、R₃和R₄独立为低级烷基、氢、氨基、低级烷基氨基、二低级烷基氨基、羟基、低级烷氧基或哌嗪基，G为可选被至多三个取代基取代的烷基(C₁-C₆)，取代基选自羟基、低级烷基氨基甲酰基、苯基卤代苯基、杂环基、羧基和低级烷氧基羰基。

12·根据权利要求11的方法，其中在所用的噻二唑化合物中G代表4-甲基哌嗪基。

13·根据权利要求11的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(4-甲基哌嗪基羰基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

14·根据权利要求11的方法，其中在所用的噻二唑化合物中R’代表G代表4-(2-吡啶基)哌嗪基。

15·根据权利要求14的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(4-(2-吡啶基)哌嗪基羰基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

16·根据权利要求4的方法，其中在所用的噻二唑化合物中R₇代表可选被取代的苯基或萘基。

17·根据权利要求16的方法，其中在所用的噻二唑化合物中R₇代表苯基。

18·根据权利要求17的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(氧代苯甲基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

19·根据权利要求11的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(4-(苄基)哌嗪基羰基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

20·根据权利要求4的方法，其中在所用的噻二唑化合物中R₇代表羟基。

21·根据权利要求20的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-羧基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

22·根据权利要求3的方法，其中在所用的噻二唑化合物中Y为一个直接键合在噻二唑环上的可选被取代的杂环基。

23·根据权利要求22的方法，其中在所用的噻二唑化合物中基团Y的杂环部分选自吡啶基、哌嗪基、吗啉基、吡咯烷基和吡嗪基。

24·根据权利要求23的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(2-吡啶基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

25·根据权利要求23的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(4-吗啉基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

26·根据权利要求23的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(1-吡咯烷基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

27·根据权利要求23的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(2-吡嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

28·根据权利要求2的方法，其中该含硫羟基化合物是一种酶。

29·根据权利要求1的方法，其中所用的该噻二唑化合物通式为：其中R₁、R₂、R₃和R₄独立为低级烷基、氢、氨基、低级烷基氨基、二低级烷基氨基、羟基、低级烷氧基卤素或哌嗪基，G为可选被至多三个取代基取代的烷基(C₁-C₆)，取代基选自羟基、低级烷基氨基甲酰基、苯基、卤代苯基、杂环基、羧基和低级烷氧基羰基；烯丙基；乙酰基；苄基；可选被氨基、卤素、羟基、低级烷氧基、低级烷基、低级烷基氨基或二低级烷基氨基取代的苯基；可选被1-3个取代基取代的杂环基，取代基选自硝基、羟基、低级烷氧基、低级烷基、氨基、卤素、低级烷基氨基、和二低级烷基氨基。

30·根据权利要求29的方法，其中在所用的噻二唑化合物中G代表可选被取代的低级烷基。

31·根据权利要求30的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(4-甲基-1-哌嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

32·根据权利要求30的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(4-乙基-1-哌嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

33·根据权利要求30的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(4-丙基-1-哌嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

34·根据权利要求30的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(4-丁基-1-哌嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

35·根据权利要求29的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(4-(2-羟乙基)-1-哌嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

36·根据权利要求29的方法，其中在所用的噻二唑化合物中G代表可选被取代的苯基。

37·根据权利要求36的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(4-苯基哌嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

38·根据权利要求36的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(4-(4-甲氧基苯基)哌嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

39·根据权利要求36的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(4-(3-氯苯基)哌嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

40·根据权利要求29的方法，其中在所用的噻二唑化合物中G代表苄基。

41·根据权利要求40的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(4-苄基哌嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

42·根据权利要求29的方法，其中在所用的噻二唑化合物中G代表肉桂基。

43·根据权利要求42的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(4-肉桂基哌嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

44·根据权利要求29的方法，其中在所用的噻二唑化合物中G代表2-吡啶基。

45·根据权利要求44的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(4-(2-吡啶基)哌嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

46·根据权利要求29的方法，其中在所用的噻二唑化合物中G代表3-氨基-2-吡啶基。

47·根据权利要求46的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(4-(3-氨基-2-吡啶基)哌嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

48·根据权利要求29的方法，其中在所用的噻二唑化合物中G代表2-嘧啶基。

49·根据权利要求48的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(4-(2-嘧啶基)哌嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

50·根据权利要求29的方法，其中在所用的噻二唑化合物中G代表(1-(4-氯苯基)-1-苯甲基)。

51·根据权利要求50的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(4-(1-(4-氯苯基)-1-苯甲基)哌嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

52·根据权利要求29的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(4-乙酰基-1-哌嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

53·根据权利要求1的方法，其中所用的噻二唑化合物具有通式：其中R₁、R₂、R₃和R₄独立为低级烷基、氢、氨基、低级烷基氨基、二低级烷基氨基、羟基、低级烷氧基、卤素或哌嗪基，G为可选被至多三个取代基取代的烷基(C₁-C₆)，取代基选自羟基、低级烷基氨基甲酰基、苯基、卤代苯基、杂环基、羧基和低级烷氧基羰基；烯丙基；苄基；可选被氨基、卤素、羟基、低级烷氧基、低级烷基、低级烷基氨基或二低级烷基氨基取代的苯基；可选被1-3个取代基取代的杂环基，取代基选自硝基、羟基、低级烷氧基、低级烷基、氨基、卤素、低级烷基氨基、和二低级烷基氨基。

54·根据权利要求53的方法，其中在所用的噻二唑化合物中G代表可选被取代的低级烷基。

55·根据权利要求54的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-((4-乙基哌嗪基)甲基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

56·根据权利要求54的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-((4-丙基哌嗪基)甲基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

57·根据权利要求54的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-((4-丁基哌嗪基)甲基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

58·根据权利要求54的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-((4-(2-羟乙基)哌嗪基)甲基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

59·根据权利要求53的方法，其中在所用的噻二唑化合物中G代表可选被取代的苯基。

60·根据权利要求59的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-((4-苯基哌嗪基)甲基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

61·根据权利要求59的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-((4-(4-甲氧基苯基)哌嗪基)甲基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

62·根据权利要求59的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-((4-(4-氨基苯基)哌嗪基)甲基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

63·根据权利要求53的方法，其中在所用的噻二唑化合物中G代表苄基。

64·根据权利要求63的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-((4-苄基哌嗪基)甲基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

65·根据权利要求53的方法，其中在所用的噻二唑化合物中G代表肉桂基。

66·根据权利要求65的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-((4-肉桂基哌嗪基)甲基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

67·根据权利要求53的方法，其中在所用的噻二唑化合物中G代表2-吡啶基。

68·根据权利要求67的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-((4-(2-吡啶基)哌嗪基)甲基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

69·根据权利要求53的方法，其中在所用的噻二唑化合物中G代表3-氨基-2-吡啶基。

70·根据权利要求69的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-((4-(3-氨基-2-吡啶基)哌嗪基)甲基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

71·根据权利要求53的方法，其中在所用的噻二唑化合物中G代表2-嘧啶基。

72·根据权利要求71的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-((4-(2-嘧啶基)哌嗪基)甲基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

73·根据权利要求53的方法，其中在所用的噻二唑化合物中G代表(1-(4-氯苯基)-1-苯甲基)。

74·根据权利要求73的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-((4-(1-(4-氯苯基)-1-苯甲基)哌嗪基)甲基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

75·根据权利要求3的方法，其中在所用的噻二唑化合物中Y为卤素。

76·根据权利要求75的方法，其中在所用的噻二唑化合物中Y为溴。

77·根据权利要求76的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-溴-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

78·根据权利要求3的方法，其中在所用的噻二唑化合物中Y为卤代甲基。

79·根据权利要求78的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-溴甲基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

80·根据权利要求3的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(4-甲基苯磺酰基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

81·根据权利要求1的方法，其中所用的噻二唑化合物通式为：

其中R₁、R₂、R₃和R₄独立为低级烷基、氢、氨基、低级烷基氨基、二低级烷基氨基、羟基、低级烷氧基、卤素或哌嗪基，R’和R”独立选自低级烷基，苄基，苯基，和被羟基、氨基、低级烷基氨基、羧基或低级烷氧基羰基取代的低级烷基，或者R’和R”以及它们所连接的N-基团共同构成可选被取代的、饱和的杂环基，选自吗啉基、哌啶基、吡咯烷基和脯氨酰基，其可选的取代基选自低级烷基、羧基、氨基、苯基、低级烷氧基羰基和二低级烷基氨基。

82·根据权利要求81的方法，其中在所用的噻二唑化合物中R’和R”均为低级烷基。

83·根据权利要求82的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-二甲氨基甲基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

84·根据权利要求82的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-二乙氨基甲基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

85·根据权利要求82的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-二丙氨基甲基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

86·根据权利要求82的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-二丁氨基甲基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

87·根据权利要求81的方法，其中在所用的噻二唑化合物中R’和R”以及它们所连接的N原子构成一个吗啉基环结构。

88·根据权利要求87的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-吗啉代甲基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

89·根据权利要求1的方法，其中在所用的噻二唑化合物中Y代表可选被1-3个取代基取代的苯基，取代基选自低级烷基、羟基、硝基、氨基、低级烷基氨基、二低级烷基氨基和低级烷氧基。

90·根据权利要求89的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-苯基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

91·根据权利要求89的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(2-硝基苯基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

92·根据权利要求89的方法，其中所用的该噻二唑化合物为6-氨基-3-苯基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

93·根据权利要求89的方法，其中所用的该噻二唑化合物为7-氨基-3-苯基-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

94·根据权利要求1的方法，其中在所用的噻二唑化合物中Y代表可选被1-3个取代基取代的2-吡啶基，取代基选自低级烷基、羟基、硝基、氨基、低级烷基氨基、二低级烷基氨基和低级烷氧基。

95·根据权利要求94的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(2-吡啶基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

96·根据权利要求1的方法，其中在所用的噻二唑化合物中Y代表可选被1-3个取代基取代的2-吡嗪基，取代基选自低级烷基、羟基、硝基、氨基、低级烷基氨基、二低级烷基氨基和低级烷氧基。

97·根据权利要求96的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(2-吡嗪基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

98·根据权利要求1的方法，其中在所用的噻二唑化合物中Y代表可选被取代的氨基吡啶基。

99·根据权利要求98的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(2-吡啶氨基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

100·根据权利要求98的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(3-吡啶氨基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

101·根据权利要求1的方法，其中在所用的噻二唑化合物中Y代表可选被取代的低级亚烷基氨基吡啶基。

102·根据权利要求101的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(2-吡啶甲基氨基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

103·根据权利要求101的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-[N-甲基-(2-吡啶乙基)氨基]-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

104·根据权利要求1的方法，其中在所用的噻二唑化合物中Y代表咪唑甲基。

105·根据权利要求104的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(咪唑甲基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

106·根据权利要求1的方法，其中在所用的噻二唑化合物中Y代表1,2,4-三唑甲基。

107·根据权利要求106的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(1,2,4-三唑甲基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

108·根据权利要求3的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-(4-甲基苯磺酰基)-1,2,4-噻二唑并[4,5-a]苯并咪唑。

109·根据权利要求1的方法，其中在所用的噻二唑化合物中基团Y是一种下式基团：其中R₇代表一个-ANR’R”基团，其中A是一种氨基酸残基。

110·根据权利要求109的方法，其中在所用的化合物中A代表一个亮氨酸残基。

111·根据权利要求110的方法，其中在所用的化合物中R’代表H,R”代表低级烷基。

112·根据权利要求111的方法，其中所用的化合物具有下式：

113·一种使含硫羟基化合物的硫羟基转化为二硫基的反应方法，该方法包括使该含硫羟基化合物与一种通式Ⅲ的噻二唑及其药学上可接受的盐反应：

其中R₅和R₆独立选自氢，低级烷基，卤素，硝基，羟基，低级烷氧基，或式NR’R”、OC(O)R’、OC(O)OR’、OC(O)NR’R”、NR’(COR’)、NHC(O)NR’R”、NHC(O)OR基团，其中R’与R”定义同权利要求1中所述，或NR’R”代表一个由N(CH₂)n组成的五元或六元环，其中n=4或5；Y定义同权利要求1。

114·根据权利要求113的方法，其中在所用的噻二唑化合物中R₅与R₆均代表氢。

115·根据权利要求114的方法，其中在所用的噻二唑化合物中Y代表R₇代表低级烷基、低级烷氧基或芳基。

116·根据权利要求114的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-乙酰基咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑。

117·根据权利要求114的方法，其中所用的该噻二唑化合物为3-苯甲酰基咪唑并[1,2-d]1,2,4-噻二唑。

118·3,5-二取代的1,2,4-噻二唑化合物，对应于通式：其中Q代表(a)一个-T[-AMA-]L基团，其中T为键合在噻二唑核上的化学间隔基，选自

和

L为一个N端肽保护基团或端基-OR’、NR’R”、

其中R’与R”定义见下述基团Y中；-AMA-为一个氨基酸或肽残基-[NH-CHA¹-CO]-_n，其中A¹为任一已知的氨基酸α取代基，n为一个1至3的整数；或(b)-NHPh或一个式的二苯基胍基，其中Ph代表可选被羟基、低级烷氧基或氨基取代的苯基；Y’为低级烷基，低级烷氧基，氨基，羧基，低级烷氧基羰基或可选在4-位被低级烷基取代的1-哌嗪基；被1或2个取代基取代的低级烷基，取代基选自羟基、低级烷基氨基甲酰基、苯基、卤代苯基、杂环基、羧基和低级烷氧基羰基；苄基；可选被氨基、卤素、羟基、低级烷氧基、低级烷基、低级烷基氨基、或二(低级烷基)氨基取代的苯基；可选被1-3个取代基取代的杂环基，取代基选自硝基、氨基、卤素、羟基、低级烷氧基、低级烷基、低级烷基氨基、或二(低级烷基)氨基；1,1-二苯甲基，其中两个苯环均可选被卤素、氨基、羟基或低级烷氧基取代；2-吡啶基，其中吡啶环可选被1-3个取代基取代，取代基选自硝基、氨基、卤素、羟基、低级烷氧基、低级烷基、低级烷基氨基、或二(低级烷基)氨基；或一个-CH₂-CO-NH-低级烷基；其条件是，若Q为-NHPh，则Y’不是烷氧基、二烷基氨基、羟基烷基氨基、二(羟基烷基)氨基；若Y’为4-取代的哌嗪基，则Q不是-T[-AMA-]L基团。

119·根据权利要求118的化合物，其中Q代表下式的一种氨基酸残基：

或其中PG是一种N-保护基团，选自杂环基羰基、苯甲酰基、苄氧羰基、和叔丁氧基；A₁为低级烷基；B₂为可选被氨基、胍基或N,N-二(低级烷基)胍基取代的低级烷基；n为1或2。

120·根据权利要求119的化合物，其中基团Y’选自低级烷基、低级烷氧基、氨基、羧基、低级烷氧基羰基。

121·根据权利要求118的化合物，其中基团Y为可选在4-位被低级烷基取代的1-哌嗪基；可选被1或2个取代基取代的低级烷基，取代基选自羟基、低级烷基氨基甲酰基、苯基、卤代苯基、杂环基、羧基和低级烷氧基羰基；苄基；可选被氨基、卤素、羟基、低级烷氧基、低级烷基、低级烷基氨基、或二(低级烷基)氨基取代的苯基；可选被1-3个取代基取代的杂环基，取代基选自硝基、氨基、卤素、羟基、低级烷氧基、低级烷基、低级烷基氨基、或二(低级烷基)氨基；1,1-二苯甲基，其中两个苯环均可选被卤素、氨基、羟基或低级烷氧基取代；2-吡啶基，其中该吡啶环可选被1-3个取代基取代，取代基选自硝基、氨基、卤素、羟基、低级烷氧基、低级烷基、低级烷基氨基、或二(低级烷基)氨基；或一个-CH₂-CO-NH-低级烷基；Q代表NHPh或一个式

122·根据权利要求118的化合物，该化合物是

123·根据权利要求118的化合物，该化合物是

124·根据权利要求118的化合物，该化合物是