CN117092262A - 一种检测贝类中11种咔唑及其卤代衍生物的分析方法 - Google Patents

一种检测贝类中11种咔唑及其卤代衍生物的分析方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种检测贝类中11种咔唑及其卤代衍生物的分析方法，属于化合物检测技术领域；该分析方法包括：将贝类样品、硅藻土和弗洛里硅土混匀，装入萃取池内萃取得萃取液，将萃取液氮吹干，复溶，得待测样品；利用超高效液相色谱串联质谱对贝类中11种咔唑及其卤代衍生物进行分析；其中，11种咔唑及其卤代衍生物包括咔唑、3‑氯咔唑、3‑溴咔唑、3,6‑二氯咔唑、3,6‑二溴咔唑、1,3,6‑三溴咔唑、1‑溴‑3,6‑二氯咔唑、1,8‑二溴‑3,6‑二氯咔唑、1,3,6,8‑四氯咔唑、1,3,6,8‑四溴咔唑或2,3,6,7‑四氯咔唑。该分析方法稳定性好，检测结果具有良好的准确度和精密度。

Description

一种检测贝类中11种咔唑及其卤代衍生物的分析方法
技术领域
本发明属于化合物检测技术领域，具体涉及一种检测贝类中11种咔唑及其卤代衍生物的分析方法。
背景技术
咔唑(9H-carbazole，CZ)是多环含氮杂环有机物，被广泛用于染料、光电材料、农药等领域。卤代咔唑(polyhalogenated carbazoles，PHCZs)是指咔唑环上的氢原子被卤素原子(Cl、Br或I)取代后形成的一类新型有机污染物，其化学结构与多氯二苯并呋喃相类似。目前已在环境中检出20多种PHCZs。PHCZs性质稳定，难以降解，能长时间在环境中残留，且具有潜在持久性、生物积累性和远距离迁移性等特点。海洋贝类属于软体动物，在中国东南沿海有广泛的分布，其体内脂肪和蛋白含量高，具一定的营养和食用价值，因其特殊的风味备受人们喜欢，是重要的水生资源。海洋贝类主要生活在近海域，通常身体埋在沙泥中或吸附在岩石上，移动性较差，属于非选择滤食性生物，主要以水体中的悬浮物以及泥沙腐败物为食。研究表明贝类对重金属具有很强的耐受性和高积累性，因此海水中或沉积物中的咔唑及其卤代衍生物很容易通过贝类的富集进入体中。而咔唑及其卤代衍生物作为一类新型污染物，其环境污染检测、毒理试验等尚处于起步阶段，而且尚未建立系统的检测技术标准，继而影响相关的环境监测和污染物迁移富集的研究。因此，有必要建立贝类中多种卤代咔唑的分析方法，为监测贝类中卤代咔唑的污染现状提供科学基础。
发明内容
本发明的目的在于提供一种萃取效果佳，目标化合物回收率高的检测贝类中咔唑及其卤代衍生物的样品前处理方法。
本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：
一种检测贝类中咔唑及其卤代衍生物的样品前处理方法，将贝类样品、硅藻土和弗洛里硅土混匀，贝类样品、硅藻土和弗洛里硅土的质量比为1:0.5-5:0.5-5，装入萃取池内萃取得萃取液，将萃取液氮吹干，复溶，得待测样品。贝类样品基质复杂，其蕴含的CZ及PHCZs浓度较低，因此选择合适的样品前处理方法是检测方法的关键。本发明样品前处理方法采用特殊比例的硅藻土和弗洛里硅土作为萃取介质，使得目标化合物咔唑及其卤代衍生物具有较高的回收率，有利于提高分析方法的准确定性。
在一个实施方案中，贝类样品、硅藻土和弗洛里硅土的质量比为1:1-2:1-2。
在一个实施方案中，硅藻土为巯基化硅藻土或磺化硅藻土。以该巯基化硅藻土或磺化硅藻土为萃取介质，能够提高萃取效果，提高了萃取效率。
在一个优选的实施方案中，贝类样品、巯基化硅藻土和弗洛里硅土的质量比为1:1-2:1-2。
在一个优选的实施方案中，贝类样品、磺化硅藻土和弗洛里硅土的质量比为1:1-2:1-2。
在一个优选的实施方案中，巯基化硅藻土的制备方法为：
将硅藻土经酸处理得到酸化硅藻土；和，
将酸化硅藻土和巯丙基三甲氧基硅烷反应得到巯基化硅藻土。
在一个更优选的实施方案中，酸化硅藻土和巯丙基三甲氧基硅烷的质量比为1:0.5-0.8。
进一步优选地，巯基化硅藻土的制备方法为：
将硅藻土加入1-3M 的盐酸溶液中酸处理0.5-5h，然后用蒸馏水洗涤至中性，干燥，得到酸化硅藻土；和，
将酸化硅藻土和巯丙基三甲氧基硅烷加入甲醇中，酸化硅藻土、巯丙基三甲氧基硅烷和甲醇的质量比为1:0.5-0.8:80-120，搅拌均匀后在60-80℃下搅拌反应6-12h，过滤，依次用无水乙醇和去离子水洗涤，干燥，得到巯基化硅藻土。
在一个优选的实施方案中，磺化硅藻土的制备方法为：
将硅藻土经酸处理得到酸化硅藻土；
将酸化硅藻土和巯丙基三甲氧基硅烷反应得到巯基化硅藻土；和，
将巯基化硅藻土经过氧化氢溶液氧化得到磺化硅藻土。
在一个更优选的实施方案中，酸化硅藻土和巯丙基三甲氧基硅烷的质量比为1:0.5-0.8。
在一个更优选的实施方案中，过氧化氢溶液的浓度为20-50wt%。
在一个更优选的实施方案中，巯基化硅藻土和过氧化氢溶液的用量比为1:20-50mL。
在一个优选的实施方案中，磺化硅藻土的制备方法为：
将硅藻土加入1-3M 的盐酸溶液中酸处理0.5-5h，然后用蒸馏水洗涤至中性，干燥，得到酸化硅藻土；和，
将酸化硅藻土和巯丙基三甲氧基硅烷加入甲醇中，酸化硅藻土、巯丙基三甲氧基硅烷和甲醇的质量比为1:0.5-0.8:80-120，搅拌均匀后在60-80℃下搅拌反应6-12h，过滤，依次用无水乙醇和去离子水洗涤，干燥，得到巯基化硅藻土；
将巯基化硅藻土中加入20-50wt%过氧化氢溶液，巯基化硅藻土和过氧化氢溶液的用量比为1:20-50mL，在40-70℃下搅拌反应12-24h，过滤，依次用无水乙醇和去离子水洗涤，干燥，得到磺化硅藻土。
在一个实施方案中，萃取用萃取溶剂为二氯甲烷。
贝类中11种咔唑及其卤代衍生物的浓度较低，因此选择合适的萃取方法是分析方法的关键。为了提高贝类中11种咔唑及其卤代衍生物的萃取效果，进而提高分析方法的准确定性，在一个优选的实施方案中，萃取用萃取溶剂为二氯甲烷和溴氯甲烷，二氯甲烷和溴氯甲烷的体积比为100:5-15。
在一个实施方案中，萃取条件为80-120℃、1000-2000psi，萃取时间为2-10min，循环1-5次。
在一个优选的实施方案中，萃取条件为100-110℃、1000-2000psi，萃取时间为3-8min，循环2-3次。
在一个实施方案中，将贝类样品、硅藻土和弗洛里硅土混匀，贝类样品、硅藻土和弗洛里硅土的质量比为1:1-2:1-2，装入垫有玻璃纤维滤膜的萃取池内，利用萃取溶剂在80-120℃、1000-2000psi条件下萃取2-10min，循环萃取1-5次得萃取液，将萃取液氮吹干，用体积比为1:0.5-1.5的乙腈-水复溶，贝类样品和乙腈-水的用量比为1g:100-500μL，得待测样品。
在一个实施方案中，将贝类样品、巯基化硅藻土和弗洛里硅土混匀，贝类样品、巯基化硅藻土和弗洛里硅土的质量比为1:1-2:1-2，装入垫有玻璃纤维滤膜的萃取池内，利用萃取溶剂在80-120℃、1000-2000psi条件下萃取2-10min，循环萃取1-5次得萃取液，将萃取液氮吹干，用体积比为1:0.5-1.5的乙腈-水复溶，贝类样品和乙腈-水的用量比为1g:100-500μL，得待测样品。
在一个实施方案中，将贝类样品、磺化硅藻土和弗洛里硅土混匀，贝类样品、磺化硅藻土和弗洛里硅土的质量比为1:1-2:1-2，装入垫有玻璃纤维滤膜的萃取池内，利用萃取溶剂在80-120℃、1000-2000psi条件下萃取2-10min，循环萃取1-5次得萃取液，将萃取液氮吹干，用体积比为1:0.5-1.5的乙腈-水复溶，贝类样品和乙腈-水的用量比为1g:100-500μL，得待测样品。
本发明还公开了上述样品前处理方法在检测贝类中咔唑及其卤代衍生物中的用途。
本发明的目的在于提供一种目标化合物回收率高，稳定性、准确度和精密度好的检测贝类中11种咔唑及其卤代衍生物的分析方法。
本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：
一种检测贝类中11种咔唑及其卤代衍生物的分析方法，利用超高效液相色谱串联质谱对贝类中11种咔唑及其卤代衍生物进行分析；待测样品根据上述的样品前处理方法得到；
其中，11种咔唑及其卤代衍生物包括咔唑（CZ）、3-氯咔唑(3-CCZ)、3-溴咔唑(3-BCZ)、3,6-二氯咔唑(3,6-CCZ)、3,6-二溴咔唑(3,6-BCZ)、1,3,6-三溴咔唑（1,3,6-BCZ）、1-溴-3,6-二氯咔唑(1-B-3,6-CCZ)、1,8-二溴-3,6-二氯咔唑（1,8-B-3,6-CCZ）、1,3,6,8-四氯咔唑（1,3,6,8-CCZ）、1,3,6,8-四溴咔唑（1,3,6,8-BCZ）或2,3,6,7-四氯咔唑（2,3,6,7-CCZ）。
本发明分析方法首先采用上述样品前处理方法将贝类样品进行前处理，使得目标化合物咔唑及其卤代衍生物具有较高的回收率；然后采用超高效液相色谱串联质谱（UPLC-MS/MS）对贝类中咔唑和/或咔唑卤代衍生物进行分析，分析方法稳定性好，检测结果具有良好的准确度和精密度。
在一个实施方案中，液相色谱的流动相为：A为乙腈，B为5mmol/L甲酸铵溶液。
在一个实施方案中，液相色谱的流动相为：A为乙腈，B为5mmol/L甲酸铵溶液。相较于液相色谱的流动相为：A为乙腈，B为5mmol/L甲酸铵溶液，该流动相的分离效果更佳，灵敏度更高。
在一个实施方案中，液相色谱分析过程中，以流动相的总体积为100%计，进行下述洗脱程序：在第0-8min，流动相A与流动相B的体积比为50-90：50-10。
在一个优选的实施方案中，液相色谱分析过程中，以流动相的总体积为100%计，进行下述洗脱程序：
0-1min，流动相A与流动相B的体积比为50:50；
1-3min，流动相A与流动相B的体积比为90:10；
3-6.9min，流动相A与流动相B的体积比为90:10；
6.9-7min，流动相A与流动相B的体积比为50:50；
7-8min，流动相A与流动相B的体积比为50:50。
在一个实施方案中，流速为0.1-0.5mL/min。
在一个优选的实施方案中，流速为0.3mL/min。
在一个实施方案中，进样量为5-10μL。
在一个优选的实施方案中，进样量为10μL。
在一个实施方案中，色谱条件为：色谱柱：ACQUITY UPLC CSH C18，2.1×100mm，1.7μm；柱温：35℃；流速：0.3mL/min；进样量：10μL。液相色谱分析过程中，以流动相的总体积为100%计，进行下述洗脱程序：
0-1min，流动相A与流动相B的体积比为50:50；
1-3min，流动相A与流动相B的体积比为90:10；
3-6.9min，流动相A与流动相B的体积比为90:10；
6.9-7min，流动相A与流动相B的体积比为50:50；
7-8min，流动相A与流动相B的体积比为50:50。
在一个实施方案中，质谱条件为：离子源为电喷雾电离；扫描方式为负离子扫描；采集模式为多反应监测。
在一个实施方案中，取上述11种咔唑及其卤代衍生物标准品，用乙腈溶解并分别配制成10mg/mL的单标准储备液；分别取1.0mL 11种单标标准储备液，用乙腈溶解并配制成1mg/mL的混合标准中间溶液；采用UPLC-MS/MS进行测定分析，以峰面积比值为纵坐标，质量浓度与内标浓度比值为横坐标绘制标准工作曲线。
在一个实施方案中，将待测样品采用UPLC-MS/MS进行测定，得到样品色谱图，将样品色谱图与标准曲线进行比对进行定性检测；再使用UPLC-MS/MS仪器的调谐功能，确定各个物质的母离子、子离子、碰撞电压和毛细电压，使用上述参数对工作溶液中的孕激素进行定量检测。
本发明还提供上述方法在检测贝类中咔唑和/或咔唑卤代衍生物中的用途，所述咔唑和/或咔唑卤代衍生物选自咔唑、3-氯咔唑、3-溴咔唑、3-碘咔唑、4-氯咔唑、4-溴咔唑、3,6-二氯咔唑、3,6-二溴咔唑、2,7-二溴咔唑、1,3,6-三溴咔唑、1-溴-3,6-二氯咔唑、1,8-二溴-3,6-二氯咔唑、1,3,6,8-四氯咔唑、1,3,6,8-四溴咔唑或2,3,6,7-四氯咔唑中的至少一种。
本发明的目的在于提供一种检测贝类中11种咔唑及其卤代衍生物的分析方法。
本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：
一种贝类中咔唑和/或咔唑卤代衍生物的检测方法，包括，
利用超高效液相色谱串联质谱对贝类待测样品中咔唑和/或咔唑卤代衍生物进行检测；贝类待测样品根据上述的样品前处理方法得到；
其中，所述咔唑和/或咔唑卤代衍生物选自咔唑、3-氯咔唑、3-溴咔唑、3-碘咔唑、4-氯咔唑、4-溴咔唑、3,6-二氯咔唑、3,6-二溴咔唑、2,7-二溴咔唑、1,3,6-三溴咔唑、1-溴-3,6-二氯咔唑、1,8-二溴-3,6-二氯咔唑、1,3,6,8-四氯咔唑、1,3,6,8-四溴咔唑或2,3,6,7-四氯咔唑中的至少一种。
本发明分析方法首先将贝类样品与硅藻土和弗洛里硅土混匀后经加速溶剂萃取仪提取，然后利用超高效液相色谱串联质谱（UPLC-MS/MS）对贝类中11种咔唑及其卤代衍生物进行分析；11种咔唑及其卤代衍生物的平均回收率为79.25%~108.66%，相对标准偏差为3.71%~8.34%，该方法稳定、可靠，具有良好的准确度和精密度，能满足在贝类中同时检测11种咔唑及其卤代衍生物的需求。
本发明具有如下有益效果：本发明分析方法首先采用上述样品前处理方法将贝类样品进行前处理，使得目标化合物咔唑及其卤代衍生物具有较高的回收率；然后采用超高效液相色谱串联质谱（UPLC-MS/MS）对贝类中咔唑和/或咔唑卤代衍生物进行分析，11种咔唑及其卤代衍生物的平均回收率为79.25%~108.66%，相对标准偏差为3.71%~8.34%，该方法稳定、可靠、具有良好的准确度和精密度，能满足在贝类中同时检测11种咔唑及其卤代衍生物的需求。
附图说明
图1为CZ离子碎片图；
图2为3-CCZ离子碎片图；
图3为3-BCZ离子碎片图；
图4为1-B-3,6-CCZ离子碎片图；
图5为1,8-B-3,6-CCZ离子碎片图；
图6为1,3,6,8-BCZ离子碎片图；
图7为3,6-CCZ离子碎片图；
图8为2,3,6,7-CCZ离子碎片图；
图9为1,3,6,8-CCZ离子碎片图；
图10为3,6-BCZ离子碎片图；
图11为1,3,6-BCZ离子碎片图；
图12为11种咔唑及其卤代衍生物总离子流图；
图13为硅藻土、实施例6得巯基化硅藻土和实施例7得磺化硅藻土的红外光谱图；
图14为前处理用萃取剂对萃取效果的影响；
图15为前处理用硅藻土对萃取效果的影响。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本发明进一步详细说明。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1：一种检测贝类中11种咔唑及其卤代衍生物的分析方法
1、仪器与试剂
Waters Xevo TQ-XS超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱仪（美国沃特世公司）；Dionex ASE 350 加速溶剂萃取仪（美国赛默飞世尔科技公司）；AVANTIJ-E大容量高速冷冻离心机（美国 BEAKMAN 公司）；N-2110 氮吹浓缩仪（日本EYELA公司）；BSA224S-CW 电子天平（精度 0.1mg，德国赛多利斯科学仪器有限公司）；Multi Reax 多孔位旋涡振荡器（德国海道尔夫公司）；Milli-Q 超纯水仪（美国密理博公司）。
丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、乙腈均为色谱纯级别，购自德国Merck公司。
2、一种检测贝类中11种咔唑及其卤代衍生物的分析方法
2.1、标准溶液的配制
准确称取或吸取上述11种咔唑及其卤代衍生物标准品，用乙腈溶解并分别配制成10 mg/mL的单标准储备液。分别准确吸取1.0 mL 11种单标标准储备液于10 mL容量瓶中，用乙腈溶解并配制成1 mg/mL的混合标准中间溶液。于-20℃条件下避光保存，有效期为2个月。
2.2、样品前处理
称取2.00 g样品与3.00 g硅藻土、3.00g弗洛里硅土（精确至0.01g）混匀，并装入底部垫有玻璃纤维滤膜的萃取池内。以二氯甲烷（色谱纯）为萃取溶剂，在100℃、1500 psi条件下进行萃取5 min，循环萃取2次，萃取完成后，将萃取液氮吹浓缩至近干，用200 μL乙腈-水（1:1/V/V）复溶，待测。
2.3、色谱条件
色谱柱：ACQUITY UPLC CSH C18（2.1x100mm，1.7μm）；柱温：35℃流速：0.3mL/min；进样量：10μL；流动相：A为乙腈，B为5mmol/L甲酸铵溶液，具体的梯度洗脱程序见表1。
表1 液相色谱的流动相洗脱程序
时间/min 1 3 6.9 7 8
流动相A比例/％ 50 90 90 50 50
流动相B比例/％ 50 10 10 50 50
2.4、质谱条件
离子源为电喷雾电离（ESI）；扫描方式为负离子扫描；采集模式为多反应监测（MRM）。11种咔唑及其卤代衍生物的具体质谱参数见表2。
表2 11种咔唑及其卤代衍生物的质谱参数
2.5、方法学验证
配制浓度逐级变化的系列混合标准溶液，采用UPLC-MS/MS进行测定分析，以峰面积比值为纵坐标（Y），质量浓度与内标浓度比值为横坐标（X，ng/ml）绘制标准工作曲线，得到11种咔唑及其卤代衍生物的线性范围、线性回归方程、相关系数、检出限、定量限，如表3。
表3 11种咔唑及其卤代衍生物的线性范围、线性回归方程、相关系数
取空白贝类样品，各添加适量11种咔唑及其卤代衍生物混合标准工作溶液，加标水平分别为各PHCZs的1倍定量限、3倍定量限和10倍定量限，各浓度水平平行制备6份待测液，进行分析测定，结果见图1-13和表4。11种咔唑及其卤代衍生物的平均回收率为79.25%~108.66%，相对标准偏差为3.71%~8.34%，该方法稳定、可靠、具有良好的准确度和精密度，能满足在贝类中同时检测11种咔唑及其卤代衍生物的需求。
表4 贝类样品中11种咔唑及其卤代衍生物的平均回收率及相对标准偏差
实施例2：一种检测贝类中11种咔唑及其卤代衍生物的分析方法
本实施例分析方法与实施例1基本相同，不同之处为：本实施例样品前处理用萃取溶剂为二氯甲烷和溴氯甲烷的混合液，二氯甲烷和溴氯甲烷的体积比为100:5。
实施例3：一种检测贝类中11种咔唑及其卤代衍生物的分析方法
本实施例分析方法与实施例1基本相同，不同之处为：本实施例样品前处理用萃取溶剂为二氯甲烷和溴氯甲烷的混合液，二氯甲烷和溴氯甲烷的体积比为100:10。
实施例4：一种检测贝类中11种咔唑及其卤代衍生物的分析方法
本实施例分析方法与实施例1基本相同，不同之处为：本实施例样品前处理用萃取溶剂为二氯甲烷和甲醇，二氯甲烷和甲醇的体积比为100:15。
实施例5：一种检测贝类中11种咔唑及其卤代衍生物的分析方法
本实施例分析方法与实施例1基本相同，不同之处为：本实施例样品前处理用萃取溶剂为二氯甲烷和正己烷，二氯甲烷和正己烷的体积比为100:20。
实施例6：
一种检测贝类中11种咔唑及其卤代衍生物的分析方法
本实施例分析方法与实施例1基本相同，不同之处为：本实施例样品前处理用硅藻土为巯基化硅藻土。巯基化硅藻土的制备方法为：
将硅藻土加入2M的盐酸溶液中酸处理1h，然后用蒸馏水洗涤至中性，干燥，得到酸化硅藻土；和，
将酸化硅藻土和巯丙基三甲氧基硅烷加入甲醇中，酸化硅藻土、巯丙基三甲氧基硅烷和甲醇的质量比为1:0.8:100，搅拌均匀后在70℃下搅拌反应8h，过滤，依次用无水乙醇和去离子水洗涤，干燥，得到巯基化硅藻土。
实施例7：
一种检测贝类中11种咔唑及其卤代衍生物的分析方法
本实施例分析方法与实施例1基本相同，不同之处为：本实施例样品前处理用硅藻土为巯基化硅藻土。磺化硅藻土的制备方法为：
将硅藻土加入2M的盐酸溶液中酸处理1h，然后用蒸馏水洗涤至中性，干燥，得到酸化硅藻土；和，
将酸化硅藻土和巯丙基三甲氧基硅烷加入甲醇中，酸化硅藻土、巯丙基三甲氧基硅烷和甲醇的质量比为1:0.8:100，搅拌均匀后在70℃下搅拌反应8h，过滤，依次用无水乙醇和去离子水洗涤，干燥，得到巯基化硅藻土；
将巯基化硅藻土中加入30wt%过氧化氢溶液，巯基化硅藻土和过氧化氢溶液的用量比为1:40mL，在55℃下搅拌反应12h，过滤，依次用无水乙醇和去离子水洗涤，干燥，得到磺化硅藻土。
试验例1：
通过傅里叶红外光谱仪对硅藻土、实施例6得巯基化硅藻土和实施例7得磺化硅藻土进行测试，利用KBr压片技术，控制波数范围400-4000cm-1，分辨率为4cm-1，扫描样品32次。如图13(a)、(b)和(c)分别为硅藻土、实施例6得巯基化硅藻土和实施例7得磺化硅藻土的红外光谱图。由图13(a)、(b)和(c)的对比中可以看到，图13(b)中在2925cm-1和2870cm-1附近出现亚甲基特征峰，2550cm-1附近出现巯基特征峰，550-600cm-1范围内出现C-S特征峰，说明成功制得巯基化硅藻土；由于磺酸基团中的S=O的特征峰和Si-O的特征峰重合，导致特征峰不明显，但是图13(b)中在3450cm-1附近处的羟基特征峰加强，且巯基特征峰减弱，说明成功制得磺化硅藻土。
本试验例考察了实施例1-5样品前处理用萃取剂对萃取效果的影响，加标浓度为1.0µg/kg，结果如图14所示，可以看出，实施例2-4的萃取效果优于实施例1和实施例5，这说明萃取用萃取溶剂为体积比为100:5-15的二氯甲烷和溴氯甲烷时，萃取效果更佳。
本试验例考察了实施例1、实施例6-7样品前处理用硅藻土对萃取效果的影响，加标浓度为1.0µg/kg，结果如图15所示，可以看出，实施例6-7的萃取效果优于实施例1，这说明以巯基化硅藻土或磺化硅藻土为萃取介质，能够提高萃取效果，提高了萃取效率，且磺化硅藻土的效果优于巯基化硅藻土。
本发明的操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知，在此不进行赘述。
以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明，应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等，均应包括在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种检测贝类中咔唑及其卤代衍生物的样品前处理方法，将贝类样品、硅藻土和弗洛里硅土混匀，贝类样品、硅藻土和弗洛里硅土的质量比为1:0.5-5:0.5-5，装入萃取池内萃取得萃取液，将萃取液氮吹干，复溶，得待测样品。
2.根据权利要求1所述的样品前处理方法，其特征在于：所述萃取用萃取溶剂包括二氯甲烷。
3.根据权利要求1所述的样品前处理方法，其特征在于：所述萃取条件为80-120℃、1000-2000psi，萃取时间为2-10min，循环1-5次。
4.权利要求1所述的样品前处理方法在检测贝类中咔唑及其卤代衍生物中的用途。
5.一种检测贝类中11种咔唑及其卤代衍生物的分析方法，利用超高效液相色谱串联质谱对待测样品中11种咔唑及其卤代衍生物进行分析；所述待测样品根据权利要求1-3任一项所述的样品前处理方法得到；
其中，所述11种咔唑及其卤代衍生物包括咔唑、3-氯咔唑、3-溴咔唑、3,6-二氯咔唑、3,6-二溴咔唑、1,3,6-三溴咔唑、1-溴-3,6-二氯咔唑、1,8-二溴-3,6-二氯咔唑、1,3,6,8-四氯咔唑、1,3,6,8-四溴咔唑或2,3,6,7-四氯咔唑。
6.根据权利要求5所述的分析方法，其特征在于：所述液相色谱的流动相为：A为乙腈，B为5mmol/L甲酸铵溶液。
7.根据权利要求5所述的分析方法，其特征在于：所述液相色谱分析过程中，以流动相的总体积为100%计，进行下述洗脱程序：在第0-8min，流动相A与流动相B的体积比为50-90：50-10。
8.根据权利要求5所述的分析方法，其特征在于：所述流动相的流速为0.1-0.5mL/min。
9.权利要求5-8任一项所述方法在检测贝类中咔唑和/或咔唑卤代衍生物中的用途，所述咔唑和/或咔唑卤代衍生物选自咔唑、3-氯咔唑、3-溴咔唑、3-碘咔唑、4-氯咔唑、4-溴咔唑、3,6-二氯咔唑、3,6-二溴咔唑、2,7-二溴咔唑、1,3,6-三溴咔唑、1-溴-3,6-二氯咔唑、1,8-二溴-3,6-二氯咔唑、1,3,6,8-四氯咔唑、1,3,6,8-四溴咔唑或2,3,6,7-四氯咔唑中的至少一种。
10.一种贝类中咔唑和/或咔唑卤代衍生物的检测方法，利用超高效液相色谱串联质谱对贝类待测样品中咔唑和/或咔唑卤代衍生物进行检测；所述贝类待测样品根据权利要求1-3任一项所述的样品前处理方法得到；
其中，所述咔唑和/或咔唑卤代衍生物选自咔唑、3-氯咔唑、3-溴咔唑、3-碘咔唑、4-氯咔唑、4-溴咔唑、3,6-二氯咔唑、3,6-二溴咔唑、2,7-二溴咔唑、1,3,6-三溴咔唑、1-溴-3,6-二氯咔唑、1,8-二溴-3,6-二氯咔唑、1,3,6,8-四氯咔唑、1,3,6,8-四溴咔唑或2,3,6,7-四氯咔唑中的至少一种。
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