CN115715932A - 具有调节α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物及其制备方法和应用 - Google Patents
具有调节α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物及其制备方法和应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了具有调节α‑葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物及其制备方法和应用，属于食品、药品技术领域。本发明取芦笋水提物，经离心过滤、微滤处理后，采用截留不同分子量的超滤膜，将同时含有的促进和抑制α‑葡萄糖苷酶的活性部位分离和制备成对α‑葡萄糖苷酶活性具有不同调节作用的芦笋提取物，其中分子量分别大于3KD、6KD、10KD、30KD的提取物为促进α‑葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，分子量分别小于3KD、6KD、10KD、30KD的提取物为抑制α‑葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物。本发明制备方法产物活性高，节省能源，操作简便易行，适合于工业化生产，本发明将芦笋中天然同时存在的具有促进和抑制α‑葡萄糖苷酶作用的活性部位分离，使得芦笋提取物的作用更为专一和强大。
Description
技术领域
本发明属于食品、药品技术领域。更具体地，涉及一种将芦笋提取物中同时含有的促进和抑制α-葡萄糖苷酶的活性部位分离和制备对α-葡萄糖苷酶活性具有不同调节作用的芦笋提取物及其方法和应用。
背景技术
α-葡萄糖苷酶又称葡萄糖基转移酶，系统命名为α-D-葡萄糖苷葡萄糖水解酶。α-葡萄糖苷酶主要分布小肠粘膜上，能够水解含有α-1，4-糖苷键的碳水化合物，释放α-D-葡萄糖，以调节肠道内葡萄糖浓度。
促进α-葡萄糖苷酶的活性，可使得消化淀粉能力增强，有助于消化能力薄弱的人群改善淀粉的消化，获得更多的葡萄糖营养。
抑制α-葡萄糖苷酶的活性，可使葡萄糖的生成速率降低，降低食物的血糖生成指数(GI)。国际糖尿病联合会以及美国临床内分泌学家协会已将天然α-葡萄糖苷酶抑制剂视为二型糖尿病的一线疗法，从食物或植物中筛选天然α-葡萄糖苷酶抑制剂备受关注。另外，α-葡萄糖苷酶抑制剂还可通过降低血糖，从而抑制血糖在肝脏内转化为脂肪，因此，α-葡萄糖苷酶抑制剂还能用于减肥。
芦笋(Asparagus officinalis L.)，又名石刁柏，百合科天门冬属多年生宿根性草本植物，是一种具有特殊的营养和食疗功效的蔬菜之王。芦笋含有人体不可缺少的氨基酸、矿物质和其它多种营养元素，富含多种活性成分，如芦笋多糖、以天冬酰胺为主体的非蛋白氮物质和天冬氨酸、皂苷类化合物、黄酮类物质等，具有降血脂、防癌抗癌、抗疲劳、抗衰老、免疫调节等多种生物学功能，但目前芦笋对α-葡萄糖苷酶的活性的影响尚缺乏明确统一的认识。
发明人经研究发现，芦笋中同时含有促进和抑制α-葡萄糖苷酶的活性部位，促进α-葡萄糖苷酶的活性部位虽然质量占比较小，但促进活性非常强，故二者之间比例不同，芦笋提取物对α-葡萄糖苷酶的作用趋势和效能就大相径庭，特别利用现有技术制备的鲜榨芦笋汁和芦笋水提取物整体都表现出促进α-葡萄糖苷酶活性的作用趋势，其促进作用随抑制和促进α-葡萄糖苷酶的活性部位比例不同而不同，活性作用不稳定。芦笋水提物通过不同截留分子量的超滤膜组件处理后，得到不同分子量区间的芦笋提取物，这些不同分子量的芦笋提取物对α-葡萄糖苷酶活性调节作用趋势不同。有文献报道采用ZTC1+1澄清剂处理芦笋老茎获得的提取物具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的作用，其半数抑制浓度仅为62.50mg/mL，最大抑制率为53.71±3.05％，相较本发明获得的抑制α-葡萄糖苷酶活性芦笋提取物在抑制α-葡萄糖苷酶活性方面均低一半以上，表明该文献技术获得的提取物中仍可能含有促进和抑制α-葡萄糖苷酶活性的两种活性部位，尽管芦笋老茎属于不作食用的芦笋农业生产废弃物，与本发明所述芦笋为可食用嫩茎在化学成分和活性功能上存在不同，但本发明采用该文献ZTC1+1澄清剂处理方法制备的芦笋水提物也呈较弱的促进α-葡萄糖苷酶活性，与其他榨汁、超声、加热提取等工艺获得的芦笋水提物作用趋势一致。
发明内容
本发明目的是在于提供了一种从芦笋水提物中同时制备分别具有抑制和促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，该制备方法生产流程简单，产物活性高。
本发明的目的在于通过将芦笋中天然同时存在的具有促进和抑制α-葡萄糖苷酶作用的2种活性部位分离开，使得分别具有的促进和抑制作用的芦笋提取物的作用更为专一和强大。
本发明的另一个目的是将所获得的活性更为专一和强大的促进或抑制作用的芦笋提取物，分别应用于食品、保健食品、药品中，其中具有促进α-葡萄糖苷酶的活性的芦笋提取物可以使机体消化淀粉能力增强，有助于消化能力薄弱的人群改善淀粉的消化，获得更多的葡萄糖营养；具有抑制α-葡萄糖苷酶的活性的芦笋提取物可以可使葡萄糖的生成速率降低，有助于控制血糖，帮助减肥。
本发明的目的通过下述技术方案实现：
本发明提供了一种具有调节α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物的制备方法，包括如下步骤：取芦笋水提物，经离心过滤、微滤处理后得到芦笋水提液，分别采用截留不同分子量的超滤膜，制备具有调节α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取液，其中：
(1)所述芦笋水提液经过截留分子量小于3万道尔顿的超滤膜，收集到的分子量大于3万道尔顿的截留液为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取液，小于3万道尔顿的透过液为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取液；
(2)所述芦笋水提液经过截留分子量小于1万道尔顿的超滤膜，收集到的分子量大于1万道尔顿的截留液为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取液，小于1万道尔顿的透过液为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取液；
(3)所述芦笋水提液经过截留分子量小于6千道尔顿的超滤膜，收集到的分子量大于6千道尔顿的截留液为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取液，小于6千道尔顿的透过液为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取液；
(4)所述芦笋水提液经过截留分子量小于3千道尔顿的超滤膜，收集到的分子量大于3千道尔顿的截留液为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取液，小于3千道尔顿的透过液为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取液；
(5)取所述小于3万道尔顿的透过液，经过截留分子量小于1万道尔顿的超滤膜，收集到的分子量小于3万且大于1万道尔顿的滤液为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取液；
(6)取所述小于1万道尔顿的透过液，经过截留分子量小于6千道尔顿的超滤膜，收集到的分子量小于1万且大于6千道尔顿的滤液为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取液；
(7)取所述小于6千道尔顿的透过液，经过截留分子量小于3千道尔顿的超滤膜，收集到的分子量小于6千且大于3千道尔顿的滤液为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取液；
上述超滤所得芦笋提取液可经浓缩、干燥后获得干物质含量不同的芦笋提取物。
进一步地，所述芦笋水提物为新鲜芦笋经榨汁获得。
进一步地，所述芦笋水提物为芦笋干品经破碎，加10-15倍水，60℃加热提取0.5-2小时获得。
进一步地，所述芦笋水提物为芦笋干品经破碎，加10-15倍水，经中低频超声波提取1h获得。
进一步地，所述超滤所用的有机复合膜材质为芳香聚酰胺、聚哌嗪酰胺类或聚醚砜类，截留分子量范围为3万道尔顿、1万道尔顿、6千道尔顿、3千道尔顿。
进一步地，所述抑制α-葡萄糖苷酶活性芦笋提取物中抑制活性最强的为分子量小于3千道尔顿的芦笋提取物。
进一步地，所述促进α-葡萄糖苷酶活性芦笋提取物中促进活性最强的为分子量大于3万道尔顿的芦笋提取物。
进一步地，所述各种具有调节α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物可采用常规制剂方法与食品、药品领域中可接受的辅料和/或添加剂制成食品、药品领域中包括锭剂、颗粒剂、膏剂、口服液、饮品、粉剂、片剂或胶囊剂在内的公知的剂型。
本发明还提供了一种上述制备方法制备所得的芦笋提取物在制备食品中的应用，该芦笋提取物作为制备食品中的成分。
本发明还提供了一种上述制备方法制备所得的芦笋提取物在制备具有调节α-葡萄糖苷酶药理活性的药品中的应用，该芦笋提取物作为具有调节α-葡萄糖苷酶药理活性药品中的有效成分。
本发明至少包括以下有益效果：
1、本发明提供的一种具有调节α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物的制备方法，可同时制备分别具有抑制和促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，该制备方法产物活性高，节省能源，操作简便易行，适合于工业化生产。
2、本发明提供的一种具有调节α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物的制备方法，可将芦笋中天然同时存在的具有促进和抑制α-葡萄糖苷酶作用的2种活性部位分离开，使得分别具有的促进和抑制作用的芦笋提取物的作用更为专一和强大。
3、本发明提供的一种具有调节α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物的制备方法，将其所获得的活性更为专一和强大的促进或抑制作用的芦笋提取物，分别应用于食品、保健食品、药品中，其中具有促进α-葡萄糖苷酶的活性的芦笋提取物可以使机体消化淀粉能力增强，有助于消化能力薄弱的人群改善淀粉的消化，获得更多的葡萄糖营养；具有抑制α-葡萄糖苷酶的活性的芦笋提取物可以可使葡萄糖的生成速率降低，有助于控制血糖，帮助减肥。
具体实施方式
实施例1
选用5000克新鲜可食用的芦笋，用流动水进行不断清洗，待水沥干，将处理后的芦笋进行破碎榨汁，离心过滤，得到榨汁液，微滤，滤液即为芦笋水提物(得率为鲜芦笋重量的75.3％±0.21)。
取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于3万道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于3万道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，得率为鲜芦笋重量的1.8％)和小于3万道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，得率为鲜芦笋重量的73.5％)；取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于1万道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于1万道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，得率为鲜芦笋重量的2.6％)和小于1万道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，得率为鲜芦笋重量的72.7％)；取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于6千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于6千道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，得率为鲜芦笋重量的2.8％)和小于6千道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，得率为鲜芦笋重量的72.5％)；取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于3千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于3千道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，得率为鲜芦笋重量的2.8％)和小于3千道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，得率为鲜芦笋重量的72.3％)；取上述小于3万道尔顿的透过液，再经过截留分子量小于1万道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，收集分子量小于3万且大于1万道尔顿的滤液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，得率为鲜芦笋重量的0.75％)；取上述小于1万道尔顿的透过液，再经过截留分子量小于6千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，收集分子量小于1万且大于6千道尔顿的滤液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，得率为鲜芦笋重量的0.26％)；取上述小于6千道尔顿的透过液，再经过截留分子量小于3千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，收集分子量小于6千且大于3千道尔顿的滤液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，得率为鲜芦笋重量的0.15％)。
上述超滤所得芦笋提取物可经浓缩、干燥后获得干物质含量不同的芦笋提取物。
实施例2
选用晒干后的芦笋，除去有虫或变质部位，用打粉机粉碎，过60目筛。
取上述芦笋粉1000克，加入10倍量水，60℃提取0.5h，离心过滤，收集滤液。再将所得滤渣加入10倍量水，60℃提取0.5h，离心过滤，收集滤液，反复提取3次，并将所得滤液合并，再进行微滤，滤液即为芦笋水提物(芦笋干物质计得率为3.64％)。
取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于3万道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于3万道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.081％)和小于3万道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.32％)；取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于1万道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于1万道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.12％)和小于1万道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.21％)；取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于6千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于6千道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.14％)和小于6千道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.21％)；取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于3千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于3千道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.15％)和小于3千道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.18％)；取上述小于3万道尔顿的透过液，再经过截留分子量小于1万道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，收集分子量小于3万且大于1万道尔顿的滤液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.03％)；取上述小于1万道尔顿的透过液，再经过截留分子量小于6千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，收集分子量小于1万且大于6千道尔顿的滤液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.01％)；取上述小于6千道尔顿的透过液，再经过截留分子量小于3千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，收集分子量小于6千且大于3千道尔顿的滤液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.006％)。
上述超滤所得芦笋提取物可经浓缩、干燥后获得干物质含量不同的芦笋提取物。
实施例3
选用晒干后的芦笋，除去有虫或变质部位，用打粉机粉碎，过60目筛。
取上述芦笋粉1000克，加入12倍量水，60℃提取1h，离心过滤，收集滤液。再将所得滤渣加入12倍量水，60℃提取1h，离心过滤，收集滤液，反复提取3次，并将所得滤液合并，再进行微滤，滤液即为芦笋水提物(芦笋干物质计得率为4.3％)。
取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于3万道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于3万道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.08％)和小于3万道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.61％)；取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于1万道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于1万道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.12％)和小于1万道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.20％)；取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于6千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于6千道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.13％)和小于6千道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.19％)；取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于3千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于3千道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.14％)和小于3千道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.24％)；取上述小于3万道尔顿的透过液，再经过截留分子量小于1万道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，收集分子量小于3万且大于1万道尔顿的滤液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.04％)；取上述小于1万道尔顿的透过液，再经过截留分子量小于6千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，收集分子量小于1万且大于6千道尔顿的滤液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.02％)；取上述小于6千道尔顿的透过液，再经过截留分子量小于3千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，收集分子量小于6千且大于3千道尔顿的滤液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.01％)。
上述超滤所得芦笋提取物可经浓缩、干燥后获得干物质含量不同的芦笋提取物。
实施例4
选用晒干后的芦笋，除去有虫或变质部位，用打粉机粉碎，过60目筛。
取上述芦笋粉1000克，加入14倍量水，60℃提取1.5h，离心过滤，收集滤液。再将所得滤渣加入14倍量水，60℃提取1.5h，离心过滤，收集滤液，反复提取3次，并将所得滤液合并，再进行微滤，滤液即为芦笋水提物(芦笋干物质计得率为4.1％)。
取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于3万道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于3万道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.09％)和小于3万道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.61％)；取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于1万道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于1万道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.12％)和小于1万道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.21％)；取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于6千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于6千道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.13％)和小于6千道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.17％)；取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于3千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于3千道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.14％)和小于3千道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.23％)；取上述小于3万道尔顿的透过液，再经过截留分子量小于1万道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，收集分子量小于3万且大于1万道尔顿的滤液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.04％)；取上述小于1万道尔顿的透过液，再经过截留分子量小于6千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，收集分子量小于1万且大于6千道尔顿的滤液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.01％)；取上述小于6千道尔顿的透过液，再经过截留分子量小于3千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，收集分子量小于6千且大于3千道尔顿的滤液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.01％)。
上述超滤所得芦笋提取物可经浓缩、干燥后获得干物质含量不同的芦笋提取物。
实施例5
选用晒干后的芦笋，除去有虫或变质部位，用打粉机粉碎，过60目筛。
取上述芦笋粉1000克，加入15倍量水，60℃提取2h，离心过滤，收集滤液。再将所得滤渣加入15倍量水，60℃提取2h，离心过滤，收集滤液，反复提取3次，并将所得滤液合并，再进行微滤，滤液即为芦笋水提物(芦笋干物质计得率为3.86％)。
取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于3万道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于3万道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.07％)和小于3万道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.61％)；取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于1万道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于1万道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.11％)和小于1万道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.19％)；取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于6千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于6千道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.118％)和小于6千道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.19％)；取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于3千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于3千道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.13％)和小于3千道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.21％)；取上述小于3万道尔顿的透过液，再经过截留分子量小于1万道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，收集分子量小于3万且大于1万道尔顿的滤液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.03％)；取上述小于1万道尔顿的透过液，再经过截留分子量小于6千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，收集分子量小于1万且大于6千道尔顿的滤液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.005％)；取上述小于6千道尔顿的透过液，再经过截留分子量小于3千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，收集分子量小于6千且大于3千道尔顿的滤液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.007％)。
上述超滤所得芦笋提取物可经浓缩、干燥后获得干物质含量不同的芦笋提取物。
实施例6
选用晒干后的芦笋，除去有虫或变质部位，用打粉机粉碎，过60目筛。
取上述芦笋粉1000克，加入10倍量水，经中低频超声波提取1h，离心过滤，收集滤液。再将所得滤渣加入10倍量水，经中低频超声波提取1h，离心过滤，收集滤液，反复提取3次，并将所得滤液合并，再进行微滤，滤液即为芦笋水提物(芦笋干物质计得率为4.43％)。
取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于3万道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于3万道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.081)和小于3万道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.65％)；取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于1万道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于1万道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.12％)和小于1万道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.21％)；取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于6千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于6千道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.119％)和小于6千道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.24％)；取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于3千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于3千道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.15％)和小于3千道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.24％)；取上述小于3万道尔顿的透过液，再经过截留分子量小于1万道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，收集分子量小于3万且大于1万道尔顿的滤液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.05％)；取上述小于1万道尔顿的透过液，再经过截留分子量小于6千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，收集分子量小于1万且大于6千道尔顿的滤液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.007％)；取上述小于6千道尔顿的透过液，再经过截留分子量小于3千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，收集分子量小于6千且大于3千道尔顿的滤液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.01％)。
上述超滤所得芦笋提取物可经浓缩、干燥后获得干物质含量不同的芦笋提取物。
实施例7
选用晒干后的芦笋，除去有虫或变质部位，用打粉机粉碎，过60目筛。
取上述芦笋粉1000克，加入12倍量水，经中低频超声波提取小1h，离心过滤，收集滤液。再将所得滤渣加入12倍量水，经中低频超声波提取1h，离心过滤，收集滤液，反复提取3次，并将所得滤液合并，再进行微滤，滤液即为芦笋水提物(芦笋干物质计得率为4.67％)。
取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于3万道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于3万道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.09％)和小于3万道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.63％)；取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于1万道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于1万道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.13％)和小于1万道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.23％)；取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于6千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于6千道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.126％)和小于6千道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.24％)；取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于3千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于3千道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.15％)和小于3千道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.25％)；取上述小于3万道尔顿的透过液，再经过截留分子量小于1万道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，收集分子量小于3万且大于1万道尔顿的滤液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.06％)；取上述小于1万道尔顿的透过液，再经过截留分子量小于6千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，收集分子量小于1万且大于6千道尔顿的滤液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.01％)；取上述小于6千道尔顿的透过液，再经过截留分子量小于3千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，收集分子量小于6千且大于3千道尔顿的滤液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.01％)。
上述超滤所得芦笋提取物可经浓缩、干燥后获得干物质含量不同的芦笋提取物。
实施例8
选用晒干后的芦笋，除去有虫或变质部位，用打粉机粉碎，过60目筛。
取上述芦笋粉1000克，加入15倍量水，经中低频超声波提取小1h，离心过滤，收集滤液。再将所得滤渣加入15倍量水，经中低频超声波提取1h，离心过滤，收集滤液，反复提取3次，并将所得滤液合并，再进行微滤，滤液即为芦笋水提物(芦笋干物质计得率为3.97％)。
取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于3万道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于3万道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.07％)和小于3万道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.62％)；取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于1万道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于1万道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.12％)和小于1万道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.21％)；取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于6千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于6千道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.10％)和小于6千道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.20％)；取上述芦笋水提物，再经过截留分子量小于3千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，分别收集分子量大于3千道尔顿的截留液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.14％)和小于3千道尔顿的透过液(为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为3.24％)；取上述小于3万道尔顿的透过液，再经过截留分子量小于1万道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，收集分子量小于3万且大于1万道尔顿的滤液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.05％)；取上述小于1万道尔顿的透过液，再经过截留分子量小于6千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，收集分子量小于1万且大于6千道尔顿的滤液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.006％)；取上述小于6千道尔顿的透过液，再经过截留分子量小于3千道尔顿的超滤膜，滤过压0.12Mpa，收集分子量小于6千且大于3千道尔顿的滤液(为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，芦笋干物质计得率为0.07％)。
上述超滤所得芦笋提取物可经浓缩、干燥后获得干物质含量不同的芦笋提取物。
实施例9
取适量实施例1制备所得分子量小于3千道尔顿的抑制α-葡萄糖苷酶活性芦笋提取物浓缩至相对密度在1.08左右后，喷入沸腾制粒机，以山梨醇为辅料，沸腾制粒得到颗粒状芦笋提取物。
实施例10
取适量实施例1制备所得分子量大于3万道尔顿的促进α-葡萄糖苷酶活性芦笋提取物浓缩至相对密度在1.15～1.20左右，加入0.2％安赛蜜，0.1％柠檬酸调味，混匀后装罐盖封，放入高压灭菌锅于121℃，15min高压灭菌得到芦笋提取物口服液。
实施例11
取适量实施例1制备所得分子量小于6千道尔顿的抑制α-葡萄糖苷酶活性芦笋提取物浓缩至相对密度在1.25～1.35左右，趁热灌装、巴氏杀菌得到芦笋膏。
实施例12
取适量实施例1制备所得分子量小于6千道尔顿的抑制α-葡萄糖苷酶活性芦笋提取物浓缩后，喷雾干燥得芦笋提取物粉，经杀菌、封袋后得到粉末状芦笋提取物。
实施例13
取上述实施例13制备所得粉末状芦笋提取物，加入4倍量的木糖醇充分混匀，压片后得到芦笋片。
实施例14
取上述实施例13制备所得粉末状芦笋提取物，装入胶囊，制成芦笋胶囊。
实施例15
取上述实施例13制备所得粉末状芦笋提取物，加入25倍量的奶粉中，混匀调配后灌装、封袋后得到芦笋提取物奶粉。
实施例16
取上述实施例2制备所得分子量大于1万道尔顿的促进α-葡萄糖苷酶活性芦笋提取物浓缩后喷雾干燥得芦笋提取物粉200克，加入到预先处理的800g巧克力浆等配料中混合均匀，将混合好的浆料倒模成型、冷却得巧克力成品。
实施例17
取上述实施例3制备所得分子量小于6千道尔顿的抑制α-葡萄糖苷酶活性芦笋提取物浓缩液200克，加入到预先加水浸泡好的1％琼脂、1％海藻酸钠、1％卡拉胶中，再加入0.2％阿斯巴甜、0.1％食用香精及0.2％食用酸，加热使完全溶解，灌装入一定规格塑杯中，封口，杀菌，冷却，商业无菌检验，包装，检验合格得到芦笋提取物果冻成品。
实施例18
取上述实施例2制备所得分子量大于1万道尔顿的促进α-葡萄糖苷酶活性芦笋提取物浓缩后喷雾干燥得到的芦笋提取物粉200克，加入适量预先处理的30％麦芽糖、2％柠檬酸、0.05％香精、0.05％色素，0.2％奶油可制成奶油软糖，分装，装箱，检验合格得到芦笋提取物奶油软糖成品。
以上所述仅表达了本发明的优选实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形、改进及替代，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
对比例1
选用5000克新鲜可食用的芦笋，用流动水进行不断清洗，待水沥干，将处理后的芦笋进行破碎榨汁，离心过滤，得到榨汁液，微滤，滤液即为芦笋水提物。(以实施例1相同)
上述所得芦笋水提物可经浓缩、干燥后获得干物质含量不同的芦笋水提物。
对比例2
选用5000克新鲜可食用的芦笋，用流动水进行不断清洗，待水沥干，杀青后置于榨汁机中压榨取汁，在芦笋汁中加入ZTC1+1澄清剂(8％B组分，4％A组分)澄清处理，然后过滤，滤液即为芦笋水提物。(以文献“芦笋提取液体外抗氧化、细胞毒作用及抑制α-葡萄糖苷酶活性研究[J].天然产物研究与开发，2011，23(02)：356-360.”提取方法相同，仅将提取对象由芦笋老茎改为芦笋，芦笋老茎为芦笋废弃部位不可食用)
上述所得芦笋水提物可经浓缩、干燥后获得干物质含量不同的芦笋水提物。
样品对α-葡萄糖苷酶活性影响的实验
取本发明实施例1制备所得的分子量大于3万道尔顿的芦笋提取物；分子量大于1万道尔顿的芦笋提取物；分子量大于6千道尔顿的芦笋提取物；分子量大于3千道尔顿的芦笋提取物；分子量小于3万且大于1万道尔顿的芦笋提取物；分子量小于6千道尔顿且大于3千道尔顿的芦笋提取物和本发明对比例1、2制备所得的芦笋水提物，分别配制成浓度为0.2mg/mL的样品溶液，按以下实验步骤测定各样品对α-葡萄糖苷酶的促进作用并计算促进率；取本发明实施例1制备所得的分子量小于3万道尔顿的芦笋提取物。分子量小于1万道尔顿的芦笋提取物；分子量小于6千道尔顿的芦笋提取物；分子量小于3千道尔顿的芦笋提取物分别配制成浓度为2.5、5、10、20、40mg/mL的样品溶液，按以下实验步骤测定各样品对α-葡萄糖苷酶的抑制作用并计算抑制率，以浓度为横坐标和抑制率为纵坐标作图计算各样品IC50(半数抑制浓度)。
实验方法：
(1)试剂配制：0.2M磷酸缓钠冲液PBS(pH＝6.8)：分别称取十二水合磷酸氢二钠和二水合磷酸二氢钠适量，使用蒸馏水配置成0.2M，并调节pH至6.8；α-葡萄糖苷酶：称取α-葡萄糖苷酶适量(酵母来源，上海源叶，50U/mg)，使用0.2M磷酸钠缓冲液PBS(pH＝6.8)配置成0.048U/mL，放置4℃待用，且现配现用；5mM对硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷(pNPG)：称取对硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖适量，使用0.2M磷酸钠缓冲液PBS(pH＝6.8)配置成5mM；0.2M碳酸钠溶液：称取无水碳酸钠适量，使用蒸馏水配置成0.2M。
(2)实验步骤：将50μL样品或0.2M PBS溶液与50μLα-葡萄糖苷酶混合，并在37℃下孵育10分钟。然后，将50μL对硝基苯基-α-d-吡喃葡萄糖苷溶液添加到混合物中，并在37℃下再孵育20分钟。最后加入100μL碳酸钠溶液终止整个反应，在405nm处测定吸光度。按下式计算α-葡萄糖苷酶抑制率、促进率
实验结果如表1所示，与对比例1、2比较，按本发明方法制备的分子量小于3万、1万、6千、3千道尔顿的芦笋提取物对α-葡萄糖苷酶活性均呈较强的抑制作用，而未经本发明方法处理的对比例1(芦笋水提物)、对比例2(按文献方法采用ZTC1+1澄清剂制备的芦笋水提物)样品均呈较弱的α-葡萄糖苷酶促进作用，表明本发明成功地实现了将芦笋中天然同时存在的具有促进和抑制α-葡萄糖苷酶作用的2种活性部位分离开的发明目的，使得具有抑制α-葡萄糖苷酶作用的芦笋提取物作用更为专一和强大。
表1不同分子量的芦笋提取物对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用
实验结果如表2所示，与对比例1、2比较，按本发明方法制备的分子量大于3万、1万、6千、3千道尔顿的芦笋提取物；分子量大于3千道尔顿的芦笋提取物；分子量小于3万且大于1万道尔顿的芦笋提取物；分子量小于6千道尔顿且大于3千道尔顿的芦笋提取物的芦笋提取物均对α-葡萄糖苷酶活性呈较强的促进作用，与对比例1、2比较，促进活性均呈非常显著的增强(p＜0.01)，而未经本发明方法处理的对比例1(芦笋水提物)、对比例2(按文献方法采用ZTC1+1澄清剂制备的芦笋水提物)样品均呈较弱的α-葡萄糖苷酶促进作用，尽管对比例2与对比例1比较促进率有显著的减小(p＜0.05)，但依然没有将有促进作用和抑制作用的部位分开，使对比例2呈抑制作用。本发明成功地实现了将芦笋中天然同时存在的具有促进和抑制α-葡萄糖苷酶作用的2种活性部位分离开的发明目的，使得具有促进α-葡萄糖苷酶作用的芦笋提取物作用更为专一和强大。
表2不同分子量的芦笋提取物对α-葡萄糖苷酶活性的促进作用
与对比例1比较：*p＜0.05，**p＜0.01，与对比例2比较：#p＜0.05，##p＜0.01。
Claims (8)
1.具有调节α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：取芦笋水提物，经离心过滤、微滤处理后得到芦笋水提液，分别采用截留不同分子量的超滤膜，制备具有调节α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取液，其中：
(1)所述芦笋水提液经过截留分子量小于3万道尔顿的超滤膜，收集到的分子量大于3万道尔顿的截留液为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取液，小于3万道尔顿的透过液为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取液；
(2)所述芦笋水提液经过截留分子量小于1万道尔顿的超滤膜，收集到的分子量大于1万道尔顿的截留液为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取液，小于1万道尔顿的透过液为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取液；
(3)所述芦笋水提液经过截留分子量小于6千道尔顿的超滤膜，收集到的分子量大于6千道尔顿的截留液为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取液，小于6千道尔顿的透过液为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取液；
(4)所述芦笋水提液经过截留分子量小于3千道尔顿的超滤膜，收集到的分子量大于3千道尔顿的截留液为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取液，小于3千道尔顿的透过液为抑制α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取液；
(5)取所述小于3万道尔顿的透过液，经过截留分子量小于1万道尔顿的超滤膜，收集到的分子量小于3万且大于1万道尔顿的滤液为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取液；
(6)取所述小于1万道尔顿的透过液，经过截留分子量小于6千道尔顿的超滤膜，收集到的分子量小于1万且大于6千道尔顿的滤液为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取液；
(7)取所述小于6千道尔顿的透过液，经过截留分子量小于3千道尔顿的超滤膜，收集到的分子量小于6千且大于3千道尔顿的滤液为促进α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取液；
上述超滤所得芦笋提取液分别经浓缩、干燥后获得干物质含量不同的芦笋提取物。
2.根据权利要求1所述的具有调节α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物的制备方法，其特征在于：所述芦笋水提物为新鲜芦笋经榨汁获得。
3.根据权利要求1所述的具有调节α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物的制备方法，其特征在于，所述芦笋水提物为芦笋干品经破碎，加10-15倍水，60℃加热提取0.5-2小时获得。
4.根据权利要求1所述的具有调节α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物的制备方法，其特征在于，所述芦笋水提物为芦笋干品经破碎，加10-15倍水，经中低频超声波提取1h获得。
5.根据权利要求1所述的具有调节α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物的制备方法，其特征在于，所述超滤膜所用的有机复合膜材质为芳香聚酰胺、聚哌嗪酰胺类或聚醚砜类，所述超滤膜截留分子量范围为3万道尔顿、1万道尔顿、6千道尔顿、3千道尔顿。
6.根据权利要求1至5任一所述方法制备的具有调节α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物，其特征在于，所述芦笋提取物可采用常规制剂方法与食品、药品领域中可接受的辅料和/或添加剂制成食品、药品领域中包括锭剂、颗粒剂、膏剂、口服液、饮品、粉剂、片剂或胶囊剂在内的公知的剂型。
7.具有调节α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物的应用，其特征在于：将权利要求1至5中任意一种所述的芦笋提取物作为制备食品中的成分。
8.具有调节α-葡萄糖苷酶活性的芦笋提取物的应用，其特征在于：将权利要求1至5中任意一种所述的芦笋提取物作为具有调节α-葡萄糖苷酶药理活性药品中的有效成分。
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