CN114964958A - 一种利福平样本保存液及其在利福平血液样本或利福平尿液样本保存中的应用 - Google Patents

一种利福平样本保存液及其在利福平血液样本或利福平尿液样本保存中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明属于药物监测技术领域，具体涉及一种利福平样本保存液及其在利福平血液样本或利福平尿液样本保存中的应用。本发明提供一种利福平样本保存液，包括以下浓度的组分：质量百分含量0.01～0.5％的抗氧化剂，质量百分含量0.01～0.5％的利福平酶抑制剂，离子强度为100～500mmol/L的有机酸缓冲剂，0.01～0.3％防腐剂和水。本发明提供的利福平样本保存液能够最大程度的保留利福平在血液或尿液中的稳定性，保证临床测定结果的准确可靠。

Description

一种利福平样本保存液及其在利福平血液样本或利福平尿液 样本保存中的应用
技术领域
本发明属于药物监测技术领域，具体涉及一种利福平样本保存液及其在利福平血液样本或利福平尿液样本保存中的应用。
背景技术
利福平，CAS号：13292-46-1，是利福霉素家族的一种广谱抗生素药物，对结核杆菌有较强抗菌作用，对革兰氏阳性或阴性细菌、病毒等也有疗效。
但利福平有效治疗窗较窄，用药不足时，极易产生耐药性，用药过量时，则存在严重的肝脏毒性，此外利福平药物浓度存在较大的个体间和个体内差异。治疗药物血药浓度监测(TDM)可以在判断利福平疗效、评价治疗效果、规避副反应以及个体化用药方案调整等方面发挥重要作用。采用TDM对利福平用药进行分析时，需要采集利福平血液样本或利福平尿液样本。
但是，血液和尿液样本中的利福平极不稳定，易氧化降解，而且血液样本中的利福平还会受到血液中各种生化酶的降解。利福平血液样本和利福平尿液样本的不稳定性严重影响样本临床的转运和保存，进而导致TDM监测结果的不准确。
发明内容
有鉴于此，本发明提供了一种利福平样本保存液及其在利福平血液样本或利福平尿液样本保存中的应用。本发明提供的保存液能够提高利福平在血液和尿液样本中稳定性，确保临床测定结果的准确可靠。
为了解决上述技术问题，本发明提供了一种利福平样本保存液，包括以下浓度的组分：
质量百分含量0.01～0.5％的抗氧化剂，质量百分含量0.01～0.5％的利福平酶抑制剂，离子强度为100～500mmol/L的有机酸缓冲剂，0.01～0.3％防腐剂和水。
优选的，所述有机酸缓冲剂包括乙酸、2-(N-吗啉代)乙磺酸、柠檬酸、4-羟乙基哌嗪乙磺酸和N-(2-乙酰氨基)-2-氨基乙烷磺酸中的一种或多种。
优选的，所述抗氧化剂包括抗坏血酸、抗坏血酸碱金属盐、亚硫酸碱金属盐、焦亚硫酸碱金属盐、硫代硫酸碱金属盐、叔丁基对羟基茴香醚、乙二胺四乙酸和乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸中的一种或多种。
优选的，所述利福平酶抑制剂包括奥美拉唑、氯霉素、西米替丁和氟伏沙明中的一种或者两种。
优选的，所述防腐剂包括ProClin300防腐剂、叠氮钠和BND-10防腐剂中的一种或多种。
优选的，所述利福平样本保存液的pH值为5.5～6.9。
优选的，所述有机酸缓冲剂为N-(2-乙酰氨基)-2-氨基乙烷磺酸。
优选的，所述抗氧化剂为抗坏血酸或抗坏血酸碱金属盐。
优选的，所述利福平酶抑制剂为奥美拉唑。
本发明提供上述技术方案所述的利福平样本保存液在利福平体外检测血液样本或利福平体外检测尿液样本保存中的应用
本发明提供一种利福平样本保存液，包括以下浓度的组分：质量百分含量0.01～0.5％的抗氧化剂，质量百分含量0.01～0.5％的利福平酶抑制剂，离子强度为100～500mmol/L的有机酸缓冲剂，0.01～0.3％防腐剂和水。本发明提供的利福平样本保存液通过所述抗氧化剂抑制利福平样本的氧化降解；通过所述利福平酶抑制剂抑制利福样本的酶解；通过所述有机酸缓冲剂保持利福平处于稳定的酸环境中，延长利福平的稳定性；通过所述防腐剂抑制样本中细菌滋生，提高利福平样本的保存期。由此，本发明提供的利福平样本保存液通过抗氧化剂、利福平酶抑制剂、防腐剂、有机酸缓冲剂在上述含量条件下形成水溶液，能够最大程度的保留利福平在血液或尿液中的稳定性，确保临床测定结果的准确可靠，进一步能配合对应的利福平检测试剂建立准确监测利福平血液和尿液浓度的方法。
具体实施方式
本发明提供一种利福平样本保存液，包括以下浓度的组分：
质量百分含量0.01～0.5％的抗氧化剂，质量百分含量0.01～0.5％的利福平酶抑制剂，离子强度为100～500mmol/L的有机酸缓冲剂，0.01～0.3％防腐剂和水。
在本发明中，若无特殊说明，所用原料均为本领域技术人员熟知的市售产品。
以质量百分含量计，本发明提供的利福平样本保存液包括0.01～0.5％的抗氧化剂，优选为0.02～0.4％，进一步优选为0.05～0.2％，最优选为0.1％。
在本发明发明中，所述抗氧化剂优选包括抗坏血酸、抗坏血酸碱金属盐、亚硫酸碱金属盐、焦亚硫酸碱金属盐、硫代硫酸碱金属盐、叔丁基对羟基茴香醚、乙二胺四乙酸(EDTA)和乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸(EGTA)中的一种或多种，优选为抗坏血酸或抗坏血酸碱金属盐。
在本发明中，所述抗坏血酸碱金属盐优选为抗坏血酸钠。
以质量百分含量计，本发明提供的利福平样本保存液包括0.01～0.5％的利福平酶抑制剂，优选为0.03～0.4％，进一步优选为0.05～0.25％，最优选为0.1％。
在本发明中，所述利福平酶抑制剂优选包括奥美拉唑、氯霉素、西米替丁和氟伏沙明中的一种或者两种，更优选为奥美拉唑。
以质量百分含量计，本发明提供的利福平样本保存液包括0.01～0.3％的防腐剂，优选为0.02～0.25％，进一步优选为0.05～0.2％，最优选为0.1％。
在本发明中，所述防腐剂优选包括ProClin300防腐剂、叠氮钠和BND-10防腐剂中的一种或多种，更优选为ProClin300防腐剂。
以离子强度计，本发明提供的利福平样本保存液包括离子强度为100～500mmol/L有机酸缓冲剂，优选为150～250mmol/L，进一步优选为200mmol/L。
在本发明中，所述有机酸缓冲剂优选包括乙酸、2-(N-吗啉代)乙磺酸、柠檬酸、4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)和N-(2-乙酰氨基)-2-氨基乙烷磺酸(ACES)中的一种或多种，更优选为ACES。
在本发明中，所述利福平样本保存液的pH值优选为5.5～6.9，更优选为6.5。
本发明提供的利福平样本保存液包括水。
本发明提供了上述技术方案所述的利福平样本保存液的制备方法：包括以下步骤：
将所述有机酸缓冲剂、抗氧化剂、利福平酶抑制剂、防腐剂和水混合，得到所述利福平样本保存液。
在本发明中，所述混合优选包括以下步骤：
将所述有机酸缓冲剂和第一部分水混合，得到有机酸缓冲液；
将所述抗氧化剂和第二部分水混合，得到抗氧化剂溶液；
将所述利福平酶抑制剂和第三部分水混合，得到利福平酶抑制剂溶液；
将所述防腐剂和剩余水混合，得到防腐剂溶液；
将所述有机酸缓冲液、抗氧化剂溶液、利福平酶抑制剂溶液和防腐剂溶液混合，得到所述利福平样本保存液。
本发明提供上述技术方案所述的利福平样本保存液在利福平体外检测血液样本或利福平体外检测尿液样本保存中的应用。
本发明提供的利福平样本保存液具有能够提高利福平在血液和尿液样本中稳定性的能力，保证临床测定结果的可靠。进一步的能够配合对应的利福平检测试剂建立准确监测利福平血液和尿液浓度的方法。
为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
将ACES和水混合，得到ACES缓冲液；
将抗坏血酸钠和水混合，得到抗坏血酸钠溶液；
将奥美拉唑和水混合，得到奥美拉唑溶液；
将ProClin300防腐剂和水混合，得到ProClin300防腐剂溶液；
将ACES缓冲液、抗坏血酸钠溶液、奥美拉唑溶液和ProClin300防腐剂溶液混合，得到利福平样本保存液；其中ACES的离子强度为200mmol/L，抗坏血酸钠0.1wt％，奥美拉唑0.1wt％，ProClin300防腐剂0.1wt％，利福平样本保存液的pH值为6.5。
实施例2
与实施例1的制备方法基本相同，不同之处在于：采用氯霉素代替奥美拉唑，同时采用叠氮钠代替ProClin300防腐剂，其中ACES的离子强度为200mmol/L，抗坏血酸钠0.1wt％，氯霉素0.1wt％，叠氮钠0.1wt％，利福平样本保存液的pH值为6.5
实施例3
与实施例1的制备方法基本相同，不同之处在于：采用西米替丁替代奥美拉唑，同时采用BND-10代替ProClin300防腐剂，其中ACES的离子强度为200mmol/L，抗坏血酸钠0.1wt％，西米替丁0.1wt％，BND-100.1wt％，利福平样本保存液的pH值为6.5。
对比例1
配置0.9wt％NaCl水溶液作为利福平样本保存液。
对比例2
配置离子强度为200mmol/L的MES水溶液作为利福平样本保存液，pH值为6.5。
对比例3
配置离子强度为200mmol/L的乙酸水溶液作为利福平样本保存液，pH值为6.5。
对比例4
配置离子强度为200mmol/L的ACES水溶液作为利福平样本保存液，pH值为6.5。
对比例5
配置离子强度为200mmol/L的柠檬酸水溶液作为利福平样本保存液，pH值为6.0。
对比例6
配置离子强度为200mmol/L的HEPES水溶液作为利福平样本保存液，pH值为7.0。
对比例7
将ACES和水混合，得到ACES缓冲液；
将抗坏血酸钠和水混合，得到抗坏血酸溶液；
将ACES缓冲液和抗坏血酸溶液混合，得到利福平样本保存液；其中ACES的离子强度为200mmol/L，抗坏血酸钠0.1wt％，，利福平样本保存液的pH值为6.5。
对比例8
与对比例7基本相同，不同之处在于，将抗坏血酸替换为抗坏血酸钠。
对比例9
与对比例7基本相同，不同之处在于，将抗坏血酸替换为亚硫酸钠。
对比例10
与对比例7基本相同，不同之处在于，将抗坏血酸替换为焦亚硫酸钠。
对比例11
与对比例7基本相同，不同之处在于，将抗坏血酸替换为硫代硫酸钠。
对比例12
与对比例7基本相同，不同之处在于，将抗坏血酸替换为叔丁基对羟基茴香醚。
对比例13
与对比例7基本相同，不同之处在于，将抗坏血酸替换为EDTA。
对比例14
与对比例7基本相同，不同之处在于，将抗坏血酸替换为EGTA。
对比例15
将ACES和水混合，得到ACES缓冲液；
将抗坏血酸钠和水混合，得到抗坏血酸钠溶液；
将奥美拉唑和水混合，得到奥美拉唑溶液；
将ACES缓冲液、抗坏血酸钠溶液和奥美拉唑溶液混合，得到利福平样本保存液；其中ACES的离子强度为200mmol/L，抗坏血酸钠0.1wt％，奥美拉唑0.1wt％，利福平样本保存液的pH值为6.5。
对比例16
与对比例15基本相同，不同之处在于，将抗坏血酸替换为氯霉素。
对比例17
与对比例15基本相同，不同之处在于，将抗坏血酸替换为西米替丁。
对比例18
与对比例15基本相同，不同之处在于，将抗坏血酸替换为氟伏沙明。
测试例
对实施例1～3和对比例1～18提供的赝本保存液进行性能测试，测试方法为：采集临床新鲜的利福平血浆和尿液样本，分别分成21等份，分别加入1/10体积的利福平利福平样本保存液(实施1～3和对比例1～18)，37℃避光保存3天。分别测定第0天和第3天时候样本中利福平浓度，计算下降率，比较实施1～3和对比例1～18的保存效果。测试结果表1～4所示。
表1实施例～3制备的样本保存液的利福平保存效果
Figure BDA0003644283670000071
表2对比例1～6制备的样本保存液的利福平保存效果
Figure BDA0003644283670000072
表3对比例7～14制备的样本保存液的利福平保存效果
Figure BDA0003644283670000073
Figure BDA0003644283670000081
表4对比例15～18制备的样本保存液的利福平保存效果
Figure BDA0003644283670000082
由表1～4结果可知，本发明提供的利福平样本保存液通过所述抗氧化剂抑制利福平样本的氧化降解；通过所述利福平酶抑制剂抑制利福样本的酶解；通过所述有机酸缓冲剂保持利福平处于稳定的酸环境中，延长利福平的稳定性；通过所述防腐剂抑制样本中细菌滋生，提高利福平样本的保存期。由此，本发明提供的利福平样本保存液通过抗氧化剂、利福平酶抑制剂、防腐剂、有机酸缓冲剂在上述含量条件下形成水溶液，能够最大程度的保留利福平在血液或尿液中的稳定性，确保临床测定结果的准确可靠，进一步能配合对应的利福平检测试剂建立准确监测利福平血液和尿液浓度的方法。
尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但它仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例，人们还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例，这些实施例都属于本发明保护范围。

Claims (10)

1.一种利福平样本保存液，其特征在于，包括以下浓度的组分：
质量百分含量0.01～0.5％的抗氧化剂，质量百分含量0.01～0.5％的利福平酶抑制剂，离子强度为100～500mmol/L的有机酸缓冲剂，0.01～0.3％防腐剂和水。
2.根据权利要求1所述的利福平样本保存液，其特征在于，所述有机酸缓冲剂包括乙酸、2-(N-吗啉代)乙磺酸、柠檬酸、4-羟乙基哌嗪乙磺酸和N-(2-乙酰氨基)-2-氨基乙烷磺酸中的一种或多种。
3.根据权利要求1所述的利福平样本保存液，其特征在于，所述抗氧化剂包括抗坏血酸、抗坏血酸碱金属盐、亚硫酸碱金属盐、焦亚硫酸碱金属盐、硫代硫酸碱金属盐、叔丁基对羟基茴香醚、乙二胺四乙酸和乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸中的一种或多种。
4.根据权利要求1所述的利福平样本保存液，其特征在于，所述利福平酶抑制剂包括奥美拉唑、氯霉素、西米替丁和氟伏沙明中的一种或者两种。
5.根据权利要求1所述的利福平样本保存液，其特征在于，所述防腐剂包括ProClin300防腐剂、叠氮钠和BND-10防腐剂中的一种或多种。
6.根据权利要求1所述的利福平样本保存液，其特征在于，所述利福平样本保存液的pH值为5.5～6.9。
7.根据权利要求1或2所述的利福平样本保存液，其特征在于，所述有机酸缓冲剂为N-(2-乙酰氨基)-2-氨基乙烷磺酸。
8.根据权利要求1或3所述的利福平样本保存液，其特征在于，所述抗氧化剂为抗坏血酸或抗坏血酸碱金属盐。
9.根据权利要求1或4所述的利福平样本保存液，其特征在于，所述利福平酶抑制剂为奥美拉唑。
10.权利要求1～9任一项所述的利福平样本保存液在利福平体外检测血液样本或利福平体外检测尿液样本保存中的应用。
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